Антимикробная активность некоторых комплексов цинка и кобальта, содержащих метронидазол и фурацилин, и их влияние на течение инфекционного процесса

Каштанова, Елена Валерьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Антимикробная активность некоторых комплексов цинка и кобальта, содержащих метронидазол и фурацилин, и их влияние на течение инфекционного процесса
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Антимикробная активность некоторых комплексов цинка и кобальта, содержащих метронидазол и фурацилин, и их влияние на течение инфекционного процесса"

На правах рукописи

Каштанова Елена Валерьевна

АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ КОМПЛЕКСОВ ЦИНКА И КОБАЛЬТА, СОДЕРЖАЩИХ МЕТРОНИДАЗОЛ И ФУРАЦИЛИН, И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ТЕЧЕНИЕ ИНФЕКЦИОННОГО ПРОЦЕССА

03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург - 2006

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации».

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Лазурина Людмила Петровна

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Калуцкий Павел Вячеславович Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Заикина Надежда Александровна доктор медицинских наук, профессор Бойцов Алексей Геннадьевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского

Защита диссертации состоится «с£/ » ИЛЬ^бЛ 2006 г. в/У^часов на заседании диссертационного совета К 208.088.01 по присуждению ученой степени кандидата биологических наук при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия» по адресу: 197376, г. Санкт-Петербург, ул. профессора Попова, 14.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия»

Автореферат разослан «/т^ у>£(£Ь^_2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, ст. научный сотрудн]

Караваева А.В.

-f*5Tl4

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы

Лечение и профилактика инфекционных заболеваний продолжают оставаться сложной и трудноразрешимой проблемой в связи с распространением резистентности различных видов микроорганизмов к имеющимся антимикробным средствам. Поэтому актуальной задачей является дальнейшее расширение номенклатуры лекарственных препаратов и поиск биологически активных веществ, которые надежно и в короткие сроки подавляют рост гноеродной инфекции, купируют болевой синдром, то есть обладают разнонаправленным действием.

Одним из перспективных направлений поиска новых биологически активных соединений является получение комплексных соединений солей металлов с уже известными лекарственными средствами, так как это может позволить расширить спектр действия и снизить токсичность лекарственных средств.

Данная работа посвящена изучению биологической активности новых координационных соединений цинка (И) и кобальта (II) in vitro и на модели инфицированной раны, разработке и исследованию антимикробной активности гелей и мазей на их основе.

Учитывая прогрессирующее снижение эффективности антибиотикотера-пии на фоне растущей аллергизации населения, большой интерес в качестве лекарственных средств антимикробного действия представляют широко известные и хорошо зарекомендовавшие себя в практической медицине, доступные и относительно дешевые производные нитроимидазола и нитрофурана, которые и были выбраны нами в качестве лигандов для комплексообразования. В качестве металлов-комплексообразователей были выбраны цинк и кобальт, учитывая их положительную биологическую роль в жизнедеятельности организма.

Работа выполнена в соответствии с одним из научных направлений Курского государственного медицинского университета и кафедры биологической и химической технологии по проблеме «Медико-экологические информационные технологии».

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось изучение биологической активности новых комплексных соединений цинка и кобальта с производными нитроимидазола и нитрофурана, а также оценка возможности их использования в многокомпонентных антимикробных гелях, ма-

РОЧ;. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА 3

С.-Петербург оэ

зях и полимерных пленках для лечения экспериментальной инфицированной раны.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить биологическую активность новых комплексных соединений (антимикробная и фунгицидная активность, влияние на иммунный статус организма) и установить среди них наиболее эффективные для дальнейшего использования в составе лекарственных антимикробных препаратов;

- изучить влияние новых комплексных соединений на течение экспериментальной стафилококковой инфекции;

- теоретически обосновать и экспериментально разработать состав и технологию гидрофильных гелей и мазей, содержащих комплексные соединения, которые предназначены для лечения инфицированных ран;

- изучить на модели инфицированной раны биологическую активность разработанных лекарственных средств разнонаправленного терапевтического действия;

- исследовать возможность использования лигандов и их биокомплексов в полимерных пленках и трансдермальных терапевтических системах для лечения воспалительных процессов.

Научная новизна. Впервые изучена биологическая активность комплексных соединений цинка и кобальта с производными нитроимидазола и нитрофу-рана; выявлено их антимикробное, фунгицидное и иммуномодулирующее действие, а также возможность применения в дерматологии и косметологии.

Установлена высокая терапевтическая активность новых комплексов в отношении стафилококковой инфекции в эксперименте.

Для лечения гнойной инфекции обоснованы и экспериментально разработаны состав и технология гидрофильных гелей и мазей, содержащих синтезированные биокомплексы и обладающих антимикробной активностью и разнонаправленным терапевтическим действием.

Выявлено влияние эфирных масел на антимикробную активность компонентов полифункциональных гелей.

В эксперименте на животных установлена высокая ранозаживляющая активность разработанного гидрофильного средства и изучены реактивные изменения в тканях при лечении инфицированной раны.

Показана возможность использования биокомплексов в полимерных пленках и трансдермальных терапевтических системах для лечения кожных воспалительных процессов.

Практическая значимость работы.

Комплексообразование солей металлов с метронидазолом и фурацилином позволяет повысить антимикробную и фунгицидную активность, а также расширить спектр действия новых биокомплексов и рекомендовать их дня дальнейшего изучения в качестве препаратов выбора при лечении инфекций, вызванных различными видами облигатно и факультативно анаэробных микроорганизмов.

Рекомендованы составы полифункциональных гелей и мазей на гидрофильной основе для профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний, обеспечивающие длительное выраженное антимикробное, дегидратирующее, обезболивающее и ранозаживляющее действие и сокращающие сроки лечения на 3-5 суток в сравнении с официнальными гелями и мазями, содержащими метронидазол и фурацилин.

Предложены составы полимерных пленок и трансдермальных терапевтических систем для чрескожного введения синтезированных биокомплексов.

Проведенные исследования позволяют предложить пути повышения биологической активности известных лекарственных средств и биологически активных соединений с целью получения высокоэффективных нетоксичных антимикробных препаратов.

По материалам диссертации опубликованы: «Методические рекомендации по изготовлению, контролю качества и использованию мазей на полимерных основах, содержащих метронидазол и биокомплекс цинка (II) с метронидазолом» (утверждены ректором Курского государственного медицинского университета 5 января 2004 г.); «Методические рекомендации по изготовлению, контролю качества и использованию гелей на гидрофильных основах, содержащих фурацилин и биокомплекс цинка (II) с фурацилином» (утверждены утверждены ректором Курского государственного медицинского университета 9 января 2006 г.).

Материалы диссертации используются в учебных курсах и научно-исследовательской работе Курского государственного медицинского университета, Курского государственного технического университета, ООО «Техно-фарм».

Положения, выносимые на защиту.

Результаты микробиологических, биологических, физико-химических, гистологических и математических методов исследований биокомплексов цинка (II) и кобальта (И) с метронидазолом и фурацилином.

Новые биокомплексы цинка (II) и кобальта (II) с производными нитро-имидазола и нитрофурана проявляют выраженную антимикробную активность и относятся к классу малотоксичных веществ. Комплексообразование лекарственных средств с металлами способствует увеличению иммуномодулирующего действия исходных лигандов.

Биокомплексы цинка (И) и кобальта (II) с производными нитроимидазола и нитрофурана характеризуются высокой терапевтической активностью на модели стафилококковой инфекции.

Состав и технология гидрофильных гелей и мазей, содержащих биокомплексы цинка (II) и кобальта (II) с производными нитроимидазола и нитрофурана, обладающих антимикробной активностью и разнонаправленным терапевтическим действием.

Состав и технология получения полимерных пленок и трансдермальных терапевтических систем для чрескожного введения синтезированных биокомплексов.

Апробация результатов работы.

Основные положения работы представлены на научных конференциях Курского государственного медицинского университета (2000-2004 гг.), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы хирургии» (Курск, 2005 г.), научной конференции Российской академии естествознания «Современные проблемы науки и образования», посвященной 10-летию РАЕ (Москва, 2006 г.), межкафедральной научной конференции Курского государственного медицинского университета (Курск, 2006 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 5 глав экспериментальных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов и списка литературы. Содержит 134 страницы машинописного текста, 42 таблицы и 5 рисунков. Библиографический указатель включает 202 источника литературы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Для решения поставленных задач применен комплекс современных микробиологических, иммунологических, физико-химических, гистологических и I математических методов. В качестве объектов исследования использованы об-

разцы цельной крови, некоторые органы и биологические ткани эксперимен-t тальных животных. Объем исследования составил 518 проб биологических

объектов (кровь, ткани и органы животных), 125 объектов для гистологического и 428 проб для микробиологического исследования синтезированных комплексов, гелей, мазей и пленок, то есть всего 1071 биопроба.

Сложность лечения инфекционных заболеваний различной этиологии традиционными лекарственными средствами обусловила необходимость синтеза комплексных соединений металлов с антимикробными препаратами. В качестве биологически активных лигандов были выбраны следующие лекарственные вещества: метронидазол (1-(/3-оксиэтил)-2-метил-5-нитроимидазол), фура-цилин (5-нитрофурфурола семикарбазон), которые в последние годы часто применяются для лечения и профилактики различных инфекционных осложнений. В качестве металлов-комплексообразователей для синтеза были выбраны кобальт (II) и цинк (II), доказана индивидуальность полученных комплексов, установлен их состав.

Определение антимикробной активности в отношении облигатных анаэробных микроорганизмов проводили методом двухслойной агаровой культуры. Для исследования антимикробного действия в отношении анаэробных микроорганизмов были использованы как спорообразующие, так и неспорообра-зующие тест-культуры микроорганизмов из коллекции ГИСК им. JT.A. Тарасевича (г. Москва): Clostridium perfringens 271, Bacteroides fragilis 323, Bacteroides melaninogenicus 1011, Fusobacterium necrophorum VPJ 2523, Peptococcus magnus 336, Peptostreptococcus HC.

Антибактериальную активность метронидазола и фурацилина, а также их комплексных соединений с металлами и мазей, приготовленных на их основе, в отношении факультативно анаэробных микроорганизмов определяли in vitro методом диффузии в агар (Государственная Фармакопея XI изд-е, 1990 - ГФ-XI). В соответствии с рекомендациями ВОЗ и ГФ-Х для оценки активности новых биокомплексов в качестве тест-культур использовали штаммы факультативно-анаэробных бактерий и грибов из коллекции ГИСК им. JI.A. Тарасевича

(Москва): Staphylococcus aureus АТСС 25923, Staphylococcus aureus 209-P, Bacillus subtilis ATCC 6633, Bacillus cereus ATCC 10702, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida albicans NCTC 2625.

Активность биокомплексов in vivo изучали на белых мышах (весом 1820 г) при моделировании стафилококковой инфекции. Для этого мышей внут-рибрюшинно заражали суточной агаровой культурой Staphylococcus aureus № 554 в дозе, вызывающей гибель 50% мышей (1x107 микробных тел/мл), и через сутки после заражения в течение 7 дней ежедневно вводили внутримышечно исследуемые препараты. Терапевтическую эффективность биокомплексов оценивали по выживаемости животных. Определение токсичности биокомплексов проводили на мышах при внутрибрюшинном способе введения (Арзамасцев Е.И., 1988; Беленький M.JL, 1963).

Местноанестезирующую активность разрабатываемых мазей изучали в опытах in vivo методом Ренье-Валета, в основе которого лежит изменение чувствительности роговицы глаза кролика при нанесении на нее исследуемого образца, выражающееся в ответной реакции на раздражитель в виде смыкания века.

Изучение влияния биокомплексов на показатели иммунологической реактивности организма проведено на крысах-самцах линии Вистар массой 100120 г. Препараты вводили внутримышечно один раз в сутки в течение 11 дней. По истечении определенного времени животных усыпляли эфиром, вскрывали грудную полость и производили забор крови из нисходящей части грудной аорты. Из факторов неспецифической защиты определяли фагоцитарную активность лейкоцитов, активность бактерицидных систем фагоцитов (кислородза-висимых и кислороднезависимых), резервную функцию системы фагоцитоза, уровень сывороточного лизоцима и бактерицидную активность сыворотки крови (БАС).

Фагоцитарную реакцию оценивали в отношении S. aureus 209-Р с определением процента активных фагоцитов (фагоцитарный индекс) и числа поглощенных частиц в пересчете на 1 фагоцитирующую клетку (фагоцитарное число). Завершенность фагоцитоза определяли как процент микробных клеток, подвергшихся разрушению фагоцитами при двухчасовом инкубировании.

Состояние кислородзависимых бактерицидных систем фагоцитов оценивали in vitro с помощью НСТ-теста, отражающего способность супероксида-ниона восстанавливать нитросиний тетразолий в диформазан. НСТ-тест оцени-

вали по степени восстановления нитросинего тетразолия в спонтанной и проди-гиозан-стимулированной реакциях при учете внутриклеточных отложений ди-формазана. В работе использовали HCT фирмы «Lachema» (Чехия). Резервную функцию системы фагоцитоза оценивали как разницу между показателями стимулированного и спонтанного теста (Виксман М.Е.; Маянский А.Н., 1979).

Для определения активности кислороднезависимой бактерицидной системы использовали лизосомально-катионный тест, основанный на определении лизосомальных катионных белков в гранулах лейкоцитов периферической крови в мазках, окрашенных бромфеноловым синим (Шубин М.Г., 1974; Пигарев-ский В.Е., 1979).

Уровень лизоцима определяли по методу О.В. Бухарина (1997), бактерицидную активность сыворотки - по F.D. Schoenknercht (1985).

Для изучения действия новых биокомплексов на клеточный и гуморальный иммунный ответ крысам-самцам линии Вистар исследуемые препараты вводили внутримышечно в твине и физиологическом растворе в течение 5 дней с последующей иммунизацией животных эритроцитами барана и определением уровня развития гуморального иммунного ответа путем определения в селезенке количества антителообразующих клеток.

Для изучения терапевтической эффективности мазей, содержащих новые биокомплексы, на крысах-самцах линии Вистар моделировали инфицированную гнойную рану. Под наркозом в асептических условиях наносилась рана на предварительно выбритой спине крысы по паравертебральной линии 2x2 см2 (глубиной 15 мм), которую инфицировали 0,2 мл взвеси суточной агаровой культуры S. aureus № 552, содержащей 1х109 микробных тел/мл. На третьи сутки от момента инфицирования развивалось острое гнойное воспаление, формировался выраженный воспалительный процесс с отеком и гиперемией кожи. Начиная с третьих суток проводилось лечение раны мазями, содержащими биокомплексы металлов с метронидазолом. Морфологические исследования тканей раны, изучение обсемененности и показателей иммунореактивности производили после декалитации животных на 3, 5, 7, 9,14 и 21 сутки. Динамику репаративных процессов в ране оценивали с учетом наличия и характера воспалительной реакции, состояния краев и дна раны, сроков очищения ран от некротических тканей и появления грануляций, сроков эпителизации раны. Скорость заживления ран определяли в динамике заживления путем измерения площади раны, зарисованной перманентным маркером на прозрачной диапо-

зитивной пленке. Гистоструктурные изменения в раневых биоптатах изучали при исследовании препаратов, окрашенных гематоксилин-эозином. Изучение иммунореактивности производилось по изложенным выше методикам.

Все полученные данные подвергнуты статистической обработке с определением критерия Стьюдента при помощи программы «Biostat» на IBM PC компьютере.

Результаты исследования и их обсуждение

Разработка новых лекарственных средств для лечения гнойной инфекции продолжает оставаться одной из самых сложных и актуальных проблем здравоохранения, так как имеющийся арсенал лекарственных препаратов не может решить этой проблемы.

Особый интерес в этом отношении вызывает комплексообразование лекарственных средств с биометаллами, что может способствовать увеличению фармакологической активности лиганда, а также расширению спектра действия.

Для указанных целей нами был синтезирован ряд биокомплексов кобальта и цинка с производными нитроимидазола и нитрофурана и изучена их биологическая активность, что может служить теоретической основой для целенаправленного синтеза соединений с заданными свойствами.

С помощью компьютерной программы PASS нами была спрогнозирована биологическая активность новых биокомплексов. Так, например, установлено, что при введении металла (цинк и кобальт) в структуру лекарственного средства (метронидазола) прогнозируется увеличение антибактериальной активности в 2 раза по сравнению с лигандом, а также увеличение в 2-3 раза противовоспалительной, дерматологической, противоаллергической и противоязвенной активности. Кроме того, проявляются новые активности, не имеющие место у исходного лиганда, например, анальгезирующая, противовирусная, антисептическая и др.

Сравнительное исследование антимикробного действия новых биокомплексов по отношению к факультативно-анаэробным микроорганизмам показало (табл. 1), что биокомплексы обладают антимикробной активностью, но в разной степени.

Таблица 1

Антимикробная активность лигандов и их биокомплексов в отношении факультативно анаэробных микроорганизмов

Тесг-культура Диаметр зоны задержки роста бактерий препаратами в мм (М±т)

MN MNCo MNZn F FCo FZn

S aureus АТСС 25923 9,2±0,2 20,3±0,4 24,6±0,5 11,2±0,2 23,7±0,5 29,7±0,5

S. aureus 209-Р 8,2±0,2 23,1±0,5 23,3±0,4 12,1±0,2 24,1±0,5 30,2±0,4

В subtilis АТСС 6633 9,8±0,2 29,3±0,6 27,0±0,5 10,3±0,3 27,5±0,4 25,9±0,5

В. cereus АТСС 10702 6,8±0,3 27,0±0,5 24,3±0,5 9,8±0,2 25,5±0,4 29,3±0,5

E.coli АТСС 25922 8,2±0,3 23,0±0,4 25,0±0,5 12,2±0,1 25,8±0,3 31,8±0,б

P. aeruginosa АТСС 27853 7,0±0,2 32,3±0,6 19,0±0,5 12,3+0,2 24,4±0,2 24,7±0,4

С albicans NCTC 2625 8,0± 0,2 14,0±0,3 16,0±0,3 7,7±0,2 20,3±0Д 20,3±0,2

Примечание. MN - метронидазол, MNCo - комплекс кобальта о метронидазолом, MNZn - комплекс цинка с метронидазолом, различия данных по отношению к метронидазо-лу достоверны (Р<0,05); F - фурацилин, FCo - комплекс кобальта с фуранилином, FZn -комплекс цинка с фурацилином; различия данных по отношению к фурацилину достоверны (Р<0,05)

Установлено, что биокомплексы кобальта и цинка как с метронидазолом, так и с фурацилином в отношении всех исследованных тест-микробов проявляли антимикробную активность. По сравнению с лигандами, то есть метронидазолом и фурацилином, зона задержки роста в отношении изученных штаммов значительно увеличивалась.

Дальнейшие исследования антимикробной активности комплексных соединений метронидазола и фурацилина с металлами показали, что комплекс метронидазол-кобальт оказывает минимальное подавляющее действие на все тест-культуры в дозе 0,63 мг/мл. Минимальные подавляющие концентрации комплексов метронидазол-цинк и фурацилин-кобальт изменялись в диапазоне от 0,63 до 1,25 мг/мл, а для комплекса фурацилин-цинк от 0,31 мг/мл до 1,25 мг/мл в отношении исследованных штаммов. Таким образом, было установлено, что комплексообразование цинка и кобальта с метронидазолом и фурацилином повышают активность лиганда in vitro.

Поскольку далеко не всегда антимикробное действие препарата, установленное in vitro, может совпадать с его активностью в живом организме, была исследована эффективность биокомплексов кобальта и цинка на мышах при внутрибрюшинном заражении их культурой S. aureus. Следует отметить увели-

чение биологической активности биокомплексов in vivo по сравнению с исходными лигандами. Выживаемость животных при лечении комплексными соединениями кобальта с метронидазолом и фурацилином составила 80% и 85% соответственно. В случае использования для лечения комплексных соединений цинка с метронидазолом и фурацилином практически все животные были живы.

Поскольку известно, что микроэлементы принимают активное участие в процессах иммуногенеза, нами было изучено влияние биокомплексов метрони-дазола и фурацилина с металлами на показатели иммунного ответа (табл. 2).

Таблица 2

Иммунномодулирующие свойства биокомплексов

№ гр Условия опьгга Сроки иммунизации, сутки Число животных Селезенка АОК тыс/орган (М±т)

1 Введение физиологического раствора и иммунизация ЭБ 5 8 2,91±0,34

2 Введение метронидазола и иммунизация ЭБ 5 8 2,89±0,34

3 Введение биокомплекса цинка с метронидазолом и иммунизация ЭБ 5 8 4,09±0,481,2

4 Введение биокомплекса кобальта с метронидазолом и иммунизация ЭБ 5 8 5,66±0,661,2

5 Введение фурацилина и иммунизация ЭБ 5 8 3,94±1,02

6 Введение биокомплекса цинка с фурацилином и иммунизация ЭБ 5 8 5,5410,84''5

7 Введение биокомплекса кобальта с фурацилином и иммунизация ЭБ 5 8 6,42±0,91 5

Примечание 1 - достоверность различий средних относительно 1-й группы

(Р<0,05); 2 - достоверность различий средних относительно 2-й группы (Р<0,05), 5 - достоверность различий средних относительно 5-й группы (Р<0,05).

Установлено, что введение лигандов метронидазола и фурацилина существенно не влияло на формирование гуморального иммунного ответа, индуцированного эритроцитами барана. Об этом свидетельствовал тот факт, что количество антителообразующих клеток в селезенке крыс, получавших физиологический раствор, метронидазол и фурацилин, существенно не различалось. Введение биокомплексов цинка и кобальта с метронидазолом и фурацилином активизировало иммуномодулирующее действие лиганда на формирование гуморального иммунного ответа на эритроциты барана, о чем свидетельствовало увеличение количества антителообразующих клеток в 1,5-2 раза.

Важным фактором антиинфекционной защиты, определяющим дальнейшее развитие инфекционного процесса, является ее неспецифическое звено. Результаты исследования влияния биокомплексов на фагоцитарную активность лейкоцитов показали (табл. 3), что более высокие значения фагоцитоза отмечены в группах животных, которым вводили биокомплексы цинка и кобальта с метронидазолом и фурацилином.

Таблица 3

Влияние биокомплексов на показатели антиинфекционной защиты

Исследованные показатели Физ. р-р МЫ мыгп МЫСо V РСо

1 2 3 4 5 6 7

Фагоцитарный индекс, % 39,4±2,8 43,2±2,5 49,4±1,9и Л,3±2,212 45,1±1,9 52,4±2,0'5 55,6±1,9М

Фагоцитарное число 1,8±0,3 1,7±0,2 2,0±0,3 2,1 ±0,4 1,9±0,4 2,5±0,5 2,7+0,5

Завершенность фагоцитоза, % 61,2±2,3 65,1±1,9 67,3±2,2 68,1±1,8 66,2±1,8 68,4±2,0 69,1±1,9

НСТ-спонтанный 27,2±3,8 28,4±3,5 30,3 ±2,9 29,2±3,2 29,1 ±2,0 31,5±2,2 30,8+2,1

НСТ-стиыулироваиный 55,2±3,2 57,4±2,9 61,1±3,5 64,3±2,8и 58,9±2,3 62,2±2,9" 64,5±2,5и

Функциональный резерв фагоцитов, % 28,0±2,4 29,0±2,1 30,8±1,9 35,1±2,012 30,1±1,9 31,5±1,915 36,0±2,0"

Уровень ЛКБ 0,10±0,01 0,11±0,03 0,13±0,02 0,18±0,031,2 0,12±0,01 0,14±0,02 0,19±0,0215

Бактерицидная активность сыворотки крови (БАС) 68,В±5,3 71,5±4,9 81,7±4,3" 79,8±3,512 73,4±3,0 84,4±3,2'5 82,513,0''

Лизоцим сыворотки крови 14,2±4,8 15,3±4,5 17,1±3,9 16,4±4,5 16,4±3,| 18,1±3,0 17,5±3,3

Примечание Цифрами обозначены группы, по отношению к которым различия достоверны.

Так, у этих животных фагоцитарный индекс значительно превышал показатели как контрольной группы, которой вводили физ.раствор, так и групп, которым вводили метронидазол и фурацилин, то есть лиганды.

Изучение активности кислородзависимых бактерицидных систем ней-трофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолия также свидетельствует о стимулирующем влиянии исследованных биокомплексов. При этом наиболее высокие показатели по НСТ-стимулирующему тесту отмечались в группе животных, получавших комплексы цинка с метронидазолом и цинка и кобальта с фурацилином. Использование комплексов кобальта с метронидозолом и фурацилином оказывало выраженный стимулирующий эффект на кислороднеза-

висимые бактерицидные системы нейтрофилов, определяемые в тесте на лизо-сомальные катионные белки.

Изменения бактерицидной активности сыворотки крови характеризовались статистически более высокими значениями в группах опытных животных по сравнению с группой контроля.

Таким образом, показано, что биокомплексы цинка и кобальта с метрони-дазолом и фурацилином обладают выраженной антимикробной активностью и проявляют иммуномодулирующие свойства.

При разработке гелей и мазей нами учитывалась природа носителя. Выбор мазевой основы осуществляли с учетом ее способности к высвобождению действующих веществ. Мазь готовили на общеизвестных основах липофильной и гидрофильной природы. Установлено, что мази на гидрофильных основах в отношении всех изученных тест-штаммов обладают более выраженной антимикробной активностью, так как зона задержки роста микроорганизмов была значительно больше, чем у мазей, приготовленных на липофильных основах. Использование гидрофильных основ в виде 5% глицерогелей Ыа-КМЦ и сплава полиэтиленоксидов способствует более полному проявлению антимикробной активности лигандов и их биокомплексов.

Введение изучаемых биокомплексов в состав мазей усиливает их антимикробное действие (табл. 4) в отношении всех изученных тест-штаммов.

Установлено, что гидрофильные основы не препятствуют высвобождению активного компонента, в отличии от мазей, изготовленных на вазелиновой, вазелин-ланолиновой и эмульсионной основах. Наиболее полное и быстрое высвобождение метронидазола и фурацилина из мазей обеспечивает ПЭО-основа. Так, к двум часам эксперимента в диализате из мази на этой основе обнаружено 95,41±0,71% метронидазола и 94,56=0,69% фурацилина, а из мази на 5% глице-рогеле ЫаКМЦ к этому же времени в диализате было 85,50±0,94% и 85,70±0,86% соответственно.

Таблица 4

Сравнительная оценка антимикробного действия мазей*, приготовленных на основе полиэтиленоксида

№ гр Антимик- Диаметр зоны задержки роста тест-штаммов, мм (М±т)

робный Я ачгеия Е соМ В гоЫШз В сегеш Р аегидтоБа С а1Ь1сап5

компонент АТСС 209-Р АТСС АТСС 6633 АТСС 10702 АТСС ЫСТС 2625

мази* 25922 27853

1 МЫ 14,6±0,3 10,8±0,3 13,8±0,3 13,5±0,3 13,3±0,3 12,7±0,3

2 ШИй 20,4±0,4' 15,3±0,2' 20,0±0,4' 17,5+0,3' 15,2±0,3' 14,5±0,3'

3 МЫСо 19Д±0,41 16,5±0,2' 19,3±0,4' 19,8±0,4* 14,8±0,21 16,2±0,3'

4 Р 16,2±0,3 16,0+0,3 17,1 ±0,3 16,5+0,2 16,0±0,3 16,6+0,4

5 22,3±0,34 23,1±0,24 23,9±0,24 21,3±0,24 19,4±0,24 19,0±0,34

6 24,4±0,24 25,7±0,34 26,7±0,24 25,9±0,34 20,1±0,24 19,7±0,24

Примечание - метронидазол, МЖп - комплекс цинка с метронидазолом, \iNCo - комплекс кобальта с метронидазолом; 1 - достоверность различий средних относительно 1 -й группы (р<0,05); Р - фурацилин, FZn - комплекс цинка с фурацилином, РСо - комплекс кобальта с фурацилином; 4 - достоверность различий средних относительно 4-й группы (р<0,05); ♦концентрация антимикробного компонента в мазях 0,5%

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что достаточной антимикробной активностью обладают 0,5-1% гели и мази как метронидазола, так и его комплексных соединений и 0,2-0,5% гели и мази фу-рацилина и его биокомплексов, а основами, наиболее полно и быстро высвобождающими действующее вещество, - сплав полиэтиленоксидов с молекулярной массой 400 и 1500 в соотношении 8:2 соответственно и 5% глицерогель ЫаКМЦ.

Поскольку одной из основных задач местного лечения инфицированных ран и ожогов является проблема устранения болевого синдрома, то для местной анестезии в составе мазей нами использовался тримекаин, который в 3-5 раз ( превосходит новокаин, сохраняет активность в кислой среде, которая характер-

на для гнойной раны, и усиливает активность лекарственных средств при сочетании с ним. Введение тримекаина в состав сложных мазей, содержащих метронидазол или фурацилин и их биокомплексы, обеспечивает им ценные качества, необходимые в терапии местных гнойно-воспалительных процессов. Установлено, что наибольшие показатели силы (индекс Ренье в среднем 1300 усл. ед.) и продолжительности анестезии имеют место при одновременном сочета-

нии в мази тримекаина, метронидазола или фурацилина или их биокомплексов, а время ее наступления одинаково во всех анализируемых образцах.

Проведенные исследования in vitro и in vivo позволили сделать вывод, что предлагаемые сочетания тримекаина и метронидазола, а также тримекаина и фурацилина или их комплексных соединений в мазях на гидрофильных основах (ПЭО и 5% глицерогеле Na-КМЦ) является фармакологически оправданными.

При разработке многокомпонентной мази учитывались данные об иммуностимулирующем действии спирулины платенсис и аскорбиновой кислоты и сделано предположение о том, что введение их в состав мазей для лечения инфицированных кожных поражений не снизит антибактериальную активность мази, но может активизировать её ранозаживляющие свойства.

На основании результатов эксперимента установлено, что введение гвоздичного масла способствует в большей степени активизации местноанестези-рующего и антимикробного действия многокомпонентной мази, направленной на лечение местных гнойных ран.

Таким образом, в результате проведения комплексного исследования по разработке оптимальных составов гелей и мазей для лечения раневого процесса разработан состав лекарственного средства, способного обеспечить разнонаправленное действие в терапии местных гнойно-воспалительных процессов кожи и слизистых оболочек.

Эффективность разработанных составов гелей и мазей основана на сочетании антимикробного вещества, местного анестетика, эфирного масла, растворов спирулины платенсис и аскорбиновой кислоты, оказывающих влияние на регенерацию тканей, гидрофильной основы.

Введение в состав мазей тримекаина, эфирного масла, спирулины платенсис и аскорбиновой кислоты увеличивает их антибактериальную активность (табл. 5) по сравнению с мазями, содержащими как только один лиганд, так и биокомплексы (табл. 4).

Антимикробная активность многокомпонентных мазей, содержащих _биокомплексы_ _

Тест-культура Диаметр зоны задержки роста тест-штаммов, мм (М±т)

MN MNCo MNZn F FCo FZn

S aureus АТСС 25923 17,1±0,4 31,3±0,1 30,6±0,3 17,1±0,4 31,3±0,1 30,6±0,3

S aureus 209-Р 16,6±0,3 30,3±0,1 31,0±0,2 25,4±0,3 28,1±0,2 27,9±0,3

Е coli АТСС 25922 14,7±0,3 33,3±0,2 39,0±0,2 28,4±0,3 30,2±0,3 29,8±0,2

В. subtilis АТСС 6633 16,2±0,3 31,3±0,3 39,0±0,4 34,9±0,3 37,4±0,3 37,8±0,2

С. albicans NCTC 2625 12,5±0,3 31,Ш,2 29,6±0,2 34,7±0,2 39,0±0,2 39,0±0,3

Примечание. - метронидазол; \lNCo - комплекс кобальта с метронидазолом; \lNZn - комплекс цинка с метронидазолом; Р - фурацилин, РСо - комплекс кобальта с фу-рацилином; ¥Хп - комплекс цинка с фурацилином.

Изучение терапевтической эффективности разработанной многокомпонентной мази на модели полнослойной гнойной раны показало, что её применение быстро купировало воспалительный процесс, оказывало стимулирующее влияние на процессы восстановления поврежденной ткани. Это проявлялось активизацией образования демаркационной линии очага септического воспаления, более быстрым развитием грануляционной соединительной ткани по сравнению с контролем. Подтверждением усиления процессов репаративной регенерации при использовании биокомплексов являются достоверно более ранние сроки образования струпа по сравнению как с контрольной группой, так и с группами, где использовалась мазь, содержащая метронидазол, или применялась стандартная мазь «Левомеколь» (табл. 6).

Это сопровождалось уменьшением размеров кожной раны, более быстрым очищением ее от гноя и сокращением сроков начала образования грануляций. Причем мази, в состав которых кроме биокомплексов были добавлены тримекаин, гвоздичное масло, спирулина платенсис и аскорбиновая кислота, в большей степени стимулировали репаративные процессы по сравнению с аналогами.

Сроки заживления инфицированной раны у крыс при различных способах лечения

X» Наименование группы Сроки образова-

гр. ния струпа, сутки

1 Контроль раны 14,2±0,2

2 Лечение мазью, содержащей метронидазол 13,5±0,2'

3 Лечение мазью «Левомеколь» 13,5±0,2и

4 Лечение мазью, содержащей \lNZn 12,0±0,21,2,3

5 Лечение мазью, содержащей МЫСо 12,0±0,21,2'3

6 Лечение мазью, содержащей МЖп, тримекаин, гвоздичное масло, спирулину, аскорбиновую кислоту 10,0±0,21'2'3'4

7 Лечение мазью, содержащей МКСо, тримекаин, гвоздичное масло, спирулину, аскорбиновую кислоту 10,5±0,11А3'6

Примечание Цифры надстрочного индекса обозначают номера групп, по сравнению с которыми наблюдается достоверные различия (р<0,05).

Положительная динамика морфологических изменений в ране сопровождалась стимуляцией факторов антиинфекционной защиты. Начиная с 5 суток раневого процесса отмечались более высокие, чем в контроле, значения фагоцитарного числа, фагоцитарного индекса и завершенности фагоцитоза при использовании исследованных мазей. Это сопровождалось к концу опыта более высокими, чем в контроле, показателями стимулированного НСТ-теста при отсутствии разницы по спонтанному НСТ-тесту. Вследствие данного факта в опытных группах отмечались более высокие показатели функционального резерва фагоцитов. Различия по остальным исследованным параметрам антиинфекционной защиты были недостоверны. Однако следует отметить, что наибольшие значения указанных показателей отмечались при использовании мазей, содержащих кроме биокомплексов тримекаин, гвоздичное масло, спирули-ну платенсис и аскорбиновую кислоту. Кроме того, наиболее выраженным иммуностимулирующим действием обладали мази, содержащие биокомплексы цинка.

Таким образом, применение мазей, содержащих биокомплексы цинка и кобальта с производным 5-нитроимидазола, позволяет получить хороший эффект при лечении гнойных раневых процессов стафилококковой этиологии. Введение в состав мазей дополнительно тримекаина, спирулины платенсис, ас-

корбиновой кислоты и гвоздичного масла усиливает их антимикробную активность и ранозаживляющее действие, вызывает быстрое купирование воспалительного процесса, что позволяет сократить сроки лечения.

До сих пор остается актуальной проблема разработки новых путей и средств доставки лекарственных субстанций в заданный орган-мишень. Транс-дермальный путь введения в последние годы получил широкое развитие в виде трансдермальных терапевтических систем (TTC), нанесение которых предполагается как на кожу, так и на слизистые оболочки С точки зрения пролонгированного действия и регулирования концентрации высвобождаемого вещества именно современные полимерные TTC отвечают в полной мере этим требованиям.

Проведенные исследования позволили обосновать, разработать состав и технологию полимерных композиций на гидрофильной основе типа «лекарственное вещество в адгезиве» - наиболее простой и распространенной трансдермальной терапевтической системе. В состав полимерной композиции вводили: производное 5-ншроимидазола (или биокомплекс цинка (II); или биокомплекс кобальта (II)); поливинилпирролидон и поливиниловый спирт; пластификатор; анестетик; воду очищенную. Проведенные исследования in vitro позволили сделать вывод о биологической доступности высвобождающихся лекарственных веществ и биокомплексов из полимерных композиций.

Гистологические исследования полимерных композиций in vivo, проведенные на лабораторных животных (крысы), позволили установить их биологическую переносимость при длительном подкожном нахождении (до 14 суток). Разработанные TTC обеспечивают пролонгированное антимикробное действие лекарственного препарата.

Конструктивная простота и надежность TTC позволяет рекомендовать их для дальнейшего исследования с целью использования для оказания необходимой медицинской помощи в виде индивидуальных средств, а также в косметологии и дерматологии.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны новые комплексные соединения цинка и кобальта с мет-ронидазолом и фурацилином, обладающие более выраженным антимикробным действием в отношении тест-штаммов микроорганизмов по сравнению с исходными лигандами.

2. На модели экспериментальной стафилококковой инфекции установле-

на высокая терапевтическая эффективность исследованных биокомплексов, заключающаяся в снижении смертности зараженных животных. Установлены низкая токсичность и отсутствие раздражающего эффекта изучаемых биокомплексов.

3. Комплексообразование цинка (И) и кобальта (II) с метронидазолом и фурацилином приводит к усилению стимулирующего действия на факторы неспецифической резистентности (фагоцитоз, бактерицидная активность сыворотки крови) и гуморального иммунного ответа.

4. В опытах in vitro и in vivo установлено активизирующее действие мет-ронидазола, фурацилина и их биокомплексов с цинком и кобальтом в присутствии тримекаина в отношении исследованных тест-штаммов микроорганизмов. Установлено активизирующее действие эфирных масел (гвоздичного, розового и масла туи) на местноанестезирующий эффект тримекаина и антимикробную активность метронидазола и фурацилина и их биокомплексов.

5. Обоснован состав и разработана технология получения гидрофильных гелей и мазей на основе сплава полиэтиленоксидов с молекулярными массами 400 и 1500 в соотношении 8:2 соответственно и 5% глицерогеля Na-КМЦ, содержащих биокомплексы металлов (цинк и кобальт) с метронидазолом (0,5-1%) и фурацилином (0,2-0,5%), местный анестетик тримекаин (3%), гвоздичное масло (0,3%), спирулину платенсис (1%), аскорбиновую кислоту (5%), для лечения местных гнойно-воспалительных процессов.

6. На модели полнослойной гнойной раны доказано, что разработанные многокомпонентные мази обладают более выраженным антимикробным и ра-нозаживляющим действием по сравнению с официнальной мазью «Левоме-коль».

7. Установлена возможность использования синтезированных биокомплексов в матричных трансдермальных терапевтических системах на полимерной основе, которые обеспечивают пролонгированное действие и проявляют антимикробный, противовоспалительный и обезболивающий эффект.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Каштанова, Е.В. К вопросу диагностики микроэлементного статуса организма / Е.В. Каштанова, М.И. Самохвалов, Л.П. Лазурина, H.A. Кореневский // Сб. науч. тр. «Актуальные проблемы медицинской науки и фармации», по-свящ. 65-летию КГМУ. - Курск: КГМУ, 2000. - С. 154-155.

2. Каштанова, Е.В. Разработка многокомпонентной мази для лечения гнойных ран / Е.В. Каштанова, Л.П. Лазурина, Т.А. Панкрушева // Матер, пауч,-практ. конф. «Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики», посвященной 35-летию фарм. ф-та. - Курск: КГМУ, 2001. - С. 76-77.

3. Каштанова, Е.В. Разработка многокомпонентной мази для лечения гнойных ран, содержащей новый биокомплекс с кобальтом (II) / Е.В. Каштанова, К.В. Пыхтин // Сб. матер, итог. науч. конф. «Актуальные проблемы медицины и фармации». - Курск: КГМУ, 2002. - С. 48-49.

4. Каштанова, Е.В. Разработка многокомпонентной мази для лечения гнойных ран, содержащей координационное соединение цинка (II) с производным 5-нитроимидазола. / Е.В. Каштанова, А.Н. Литвинов // Сб. матер, итог, науч. конф. «Актуальные проблемы медицины и фармации». - Курск: КГМУ, 2002.-С. 50-51.

5. Каштанова, Е.В. К вопросу лечения местных гнойных ран /Е.В. Каштанова, И.В. Самохвалова, В.М. Соломка, Л.П. Лазурина // Труды 67-й науч. сес. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра PAMII. -Курск: КГМУ, 2002. - С. 24-25.

6. Каштанова, Е.В. Методические рекомендации по изготовлению, контролю качества и использованию мазей на полимерных основах, содержащих метронидазол и биокомплекс цинка с метронидазолом / Е.В. Каштанова, С.И. Московцев, Л.П. Лазурина, И.В. Самохвалова, В.М. Соломка. - Курск: КГМУ, 2004. - 8 с.

7. Каштанова, Е.В. Изучение антимикробной активности спирулина нла-тенсис и аскорбиновой кислоты / Е.В. Каштанова, И.В. Самохвалова, В.М. Соломка, Л.П. Лазурина // Сб. матер. Межрегион, науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы хирургии». - Курск, 2005. - С. 165.

8. Каштанова, Е.В. Изучение антимикробной активности мазей, содержащих биокомплексы с производным 5-нитроимидазола / Е.В. Каштанова, И.В. Самохвалова, A.A. Краснов, В.М. Соломка, Д.А. Хапчаева// Сб. матер. Межре-

гион. науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы хирургии». - Курск, 2005. -С. 173.

9. Каштанова, Е.В. К вопросу неинвазивной диагностики состояния кожного покрова / Е.В. Каштанова, С.Ф. Яцун, A.A. Краснов, В.М. Соломка, И.В. Самохвалова// Сб. матер. Межрегион, науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы хирургии». - Курск, 2005. - С. 320-323.

10. Каштанова, Е.В. Синтез и антибактериальная активность некоторых комплексов, содержащих производные нитрофурана / Е.В. Каштанова, A.A. Краснов, И.В. Самохвалова, Д.А. Хапчаева, Л.П. Лазурина // Современные наукоемкие технодагии.-Москва, 2006.-№2.-С. 93.

11. Каштанова, Е.В. Влияние новых биокомплексов производного 5-нитроимидазола на антимикробную активность гелей / Е.В. Каштанова, И.В. Самохвалова, A.A. Краснов, Л.П. Лазурина, В.М. Соломка, Д.А. Хапчаева // Сб. матер, науч.-метод, конф. Курского медицинского института. - Курск, 2006. - С. 86-89.

12. Каштанова, Е.В. Методические рекомендации по изготовлению, контролю качества и использованию мазей на полимерных основах, содержащих фурацилин и биокомплекс цинка с фурацилином / Е.В. Каштанова, Л.П. Лазурина, И.В. Самохвалова, A.A. Краснов, В.М. Соломка, Д.А. Хапчаева, П.В. Ка-луцкий. - Курск: КГМУ, 2006. - 10 с.

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 03.05.2006 г. Подписано в печать 04.05.2006 г. Формат 30х42'/8 Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 124А. Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Лас ¿A -fSf/Y

»11514

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Каштанова, Елена Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Сравнительная характеристика лекарственных препаратов, 12 используемых для лечения гнойных ран.

1.2. Некоторые аспекты повышения биологической активности 25 известных лекарственных средств.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы исследования

2.2. Исследование антимикробной активности препаратов in vitro 39 и in vivo

2.3. Исследование местноанестизирующей активности.

2.4. Моделирование раневого процесса и исследование 42 антимикробной активности препаратов в эксперименте.

2.5. Оценка динамики репаративных процессов в экспериментальной инфицированной ране.

2.6. Оценка факторов антиинфекционной защиты организма 44 животных.

2.7. Индукция и оценка выраженности иммунного ответа.

2.8. Определение токсичности препаратов.

2.9. Методика получения трансдермальных терапевтических систем

2.10. Статистическая обработка полученных данных.

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 48 ИЗУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ

НИТРОПРОИЗВОДНЫХ ИМИДАЗОЛА И ФУРАНА

3.1. Исследование антимикробной активности новых биокомплексов in vitro и in vivo. ф 3.2. Исследование иммуномодулирующей активности и токсичности координационных соединений металлов с метронидазолом и фурацилином.

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ

МАЗЕЙ, СОДЕРЖАЩИХ БИОКОМПЛЕКСЫ ЦИНКА И КОБАЛЬТА С МЕТРОНИДАЗОЛОМ И ФУРАЦИЛИНОМ

4.1. Исследование влияния на антимикробную активность мазевой 69 основы и состава многокомпонентной мази, содержащей изучаемые биокомплексы.

4.2. Изучение совместимости и биофармацевтической доступности 85 метронидазола, фурацилина и тримекаина при разработке многокомпонентных мазей.

4.3. Изучение влияния спирулины платенсис и аскорбиновой кислоты 88 на биологическую активность лекарственных веществ в разарабатываемых мазях.

4.4. Изучение влияния эфирных масел на биологическую активность 90 лекарственных веществ в разрабатываемых мазях.

ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИХ СВОЙСТВ

МНОГОКОМПОНЕНТНЫХ МАЗЕЙ.

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

БИОКОМПЛЕКСОВ ЦИНКА И КОБАЛЬТА В ПОЛИМЕРНЫХ ПЛЕНКАХ И ТРАНСДЕРМАЛЬНЫХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Антимикробная активность некоторых комплексов цинка и кобальта, содержащих метронидазол и фурацилин, и их влияние на течение инфекционного процесса"

Лечение ран относится к числу наиболее древних, но не стареющих проблем медицины. Во многих случаях лечение и профилактика инфекционных заболеваний продолжают оставаться сложной и трудноразрешимой проблемой в связи с распространением резистентности различных видов микроорганизмов к имеющимся антимикробным средствам. Поэтому актуально дальнейшее расширение номенклатуры лекарственных препаратов и поиск биологически активных веществ, которые надежно и в короткие сроки подавляют рост гноеродной инфекции, купируют болевой синдром и адсорбируют гнойный экссудат, то есть, обладают выраженным многонаправленным действием.

Вместе с тем повысился интерес к использованию лекарственных средств, которые учитывали бы индивидуальные особенности организма больного (и в первую очередь состояние иммунной системы), специфику гнойно-воспалительного процесса и стадии его развития.

Получение комплексных соединений уже известных лекарственных средств с солями металлов является одним из эффективных направлений поиска новых биологически активных соединений, так как оно позволяет сочетать в одном веществе различные виды активности, которые к тому же могут взаимно усиливать друг друга, расширять спектр действия, снижать токсичность лекарственных средств.

Настоящая работа посвящена изучению антимикробной активности синтезированных новых комплексных соединений in vitro и на модели инфицированной раны, а также исследованию их влияния на течение инфекционного процесса.

Учитывая прогрессирующее снижение эффективности антибиотикотерапии на фоне растущей аллергизации населения, большой интерес, в качестве лекарственных средств антимикробного действия, представляют широко известные и хорошо зарекомендовавшие себя в практической медицине, доступные и относительно дешевые нитропроизводные имидазола (метронидазол) и фурана (фурацилин), которые и были выбраны нами в качестве лигандов для комплексообразования.

В качестве металлов-комплексообразователей были выбраны цинк и кобальт, учитывая их положительную биологическую роль в жизнедеятельности организма.

Интерес к цинку в последние 15 лет связан с открытием его роли в нуклеиновом обмене, процессах транскрипции, стабилизации нуклеиновых кислот и особенно компонентов биологических мембран, а также в обмене витамина А. В настоящее время цинк найден более чем в 200 металлоферментах, участвующих в самых различных метаболических процессах, включая синтез и распад углеродов, жиров, белков и нуклеиновых кислот. Необходимо отметить многообразную роль цинка в реализации иммунного ответа.

Все вышеперечисленное позволяет выделить цинк как незаменимый микроэлемент в различных процессах, в частности, в процессах регенерации тканей и отнести его к эссенциальным, т.е. к жизненнонеобходимым элементам.

Имеющиеся в настоящее время данные свидетельствуют, что основной биологической функцией кобальта в организме является его присутствие в молекуле витамина В12, необходимого для процессов кроветворения, функционирования нервной системы, процессов регенерации и т.д. Кроме того кобальт способствует усвоению железа и оказывает благоприятное влияние на иммунологическую активность, что также позволяет отнести его к незаменимым элементам.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить влияние новых комплексных соединений на течение экспериментальной стафилококковой инфекции;

Научная новизна. Впервые изучена биологическая активность комплексных соединений цинка и кобальта с производными нитроимидазола и нитрофурана; выявлено их антимикробное, фунгицидное и иммуномодулирующее действие, а также возможность применения в дерматологии и косметологии.

Выявлено влияние эфирных масел на антимикробную активность компонентов полифункциональных гелей.

Практическая значимость работы.

Комплексообразование солей металлов с метронидазолом и фурацилином позволяет повысить антимикробную и фунгицидную активность, а также расширить спектр действия новых биокомплексов, и позволяет рекомендовать их для дальнейшего изучения в качестве препаратов выбора при лечении инфекций, вызванных различными видами облигатно и факультативно анаэробных микроорганизмов.

Рекомендованы составы полифункциональных гелей и мазей на гидрофильной основе для профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний, обеспечивающих длительное выраженное антимикробное, дегидратирующее, обезболивающее и ранозаживляющее действие и сокращающие сроки лечения на 3-5 суток в сравнении с официнальными гелями и мазями, содержащими метронидазол и фурацилин.

Предложены составы полимерных пленок и трансдермальных терапевтических систем для чрезкожного введения синтезированных биокомплексов.

По материалам диссертации опубликованы: «Методические рекомендации по изготовлению, контролю качества и использованию мазей на полимерных основах, содержащих метронидазол и биокомплекс цинка (II) с метронидазолом» (утверждены ректором Курского государственного медицинского университета 5 января 2004 г.); «Методические рекомендации по изготовлению контролю качества и использованию гелей на гидрофильных основах, содержащих фурацилин и биокомплекс цинка (II) с фурацилином» (утверждены утверждены ректором Курского государственного медицинского университета 9 января 2006 г.).

Положения, выносимые на защиту.

Результаты микробиологических, биологических, физико-химических, гистологических и математических методов исследований биокомплексов цинка (II) и кобальта (II) с метронидазолом и фурацилином.

Новые биокомплексы цинка (II) и кобальта (II) с производными нитроимидазола и нитрофурана проявляют выраженную антимикробную активность и относятся к классу малотоксичных веществ. Комплексообразование лекарственных средств с металлами способствует увеличению иммуномодулирующего действия исходных лигандов.

Биокомплексы цинка (II) и кобальта (II) с производными нитроимидазола и нитрофурана характеризуются высокой терапевтической активностью на модели стафилоккоковой инфекции.

Состав и технология получения полимерных пленок и трансдермальных терапевтических систем для чрезкожного введения синтезированных биокомплексов.

Апробация результатов работы.

Основные положения работы представлены на научных конференциях Курского государственного медицинского университета (2000 — 2004 г.г), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы хирургии» (Курск, 2005 г.), научной конференции Российской академии естествознания «Современные проблемы науки и образования», посвященной 10-летию РАЕ (Москва, 2006 г.), межкафедральной научной конференции Курского государственного медицинского университета (Курск, 2006 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 5-и глав экспериментальных исследований, выводов и списка литературы. Содержит 134 страницы машинописного текста, 42 таблицы и 5 рисунков. Библиографический указатель включает 202 источника литературы.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Каштанова, Елена Валерьевна

112 ВЫВОДЫ

1. Разработаны новые комплексные соединения цинка и кобальта с метронидазолом и фурацилином обладающие более выраженным антимикробным действием в отношении тест-штаммов микроорганизмов по сравнению с исходными лигандами.

2. На модели экспериментальной стафилококковой инфекции установлена высокая терапевтическая эффективность исследованных биокомплексов, заключающаяся в снижении смертности зараженных животных. Установлена низкая токсичность и отсутствие раздражающего эффекта изучаемых биокомплексов.

3. Комплексообразование цинка (II) и кобальта (II) с метронидазолом и фурацилином приводит к усилению стимулирующего действия на факторы неспецифической резистентности (фагоцитоз, бактерицидная активность сыворотки крови) и гуморального иммунного ответа.

4. В опытах in vitro и in vivo установлено активизирующее действие метронидазола, фурацилина и их биокомплексов с цинком и кобальтом в присутствии тримекаина в отношении исследованных тест-штаммов микроорганизмов. Установлено активизирующее действие эфирных масел (гвоздичного, розового и масла туи) на местноанестезирующий эффект тримекаина и антимикробную активность метронидазола и фурацилина и их биокомплексов.

5. Обоснован состав и разработана технология получения гидрофильных гелей и мазей на основе сплава полиэтиленоксидов с молекулярными массами 400 и 1500 в соотношении 8:2 соответственно и 5%-ый глицерогель Na-КМЦ, содержащих биокомплексы металлов (цинк и кобальт) с метронидазолом (0,51%) и фурацилином (0,2-0,5%), местный анестетик тримекаин (3%), гвоздичное масло (0,3%), спирулину платенсис (1%), аскорбиновую кислоту (5%), для лечения местных гнойно-воспалительных процессов.

6. На модели полнослойной гнойной раны доказано, что разработанные многокомпонентные мази обладают более выраженным антимикробным и ранозаживляющим действием по сравнению с официнальной мазью «Левомеколь».

114

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Каштанова, Елена Валерьевна, Курган

1. Адарченко А.А., Красильников А.П., Собещук О.П. Сравнительное исследование антибиотиков и антисептиков в отношении S. aureus // Антибиотики и химиотерапия. 1991. - № 2. - С. 21-24.

2. Акбаров, А. Б. Бионеорганическая химия металлов, аминокислот и биокомплексов/А. Б.Акбаров, Ю. Я.Харитонов. -Ташкент: Фан, 1994.-324с.

3. Акбаров, А. Б. Синтез и исследование координационных соединений галогенидов некоторых Зс1-элементов с метилметионинсульфония хлоридом / А.Б.Акбаров // Узбекский хим. журн.-Ташкент, 1983.-Деп.в ВИНИТИ 19.04.93.-N2034-83

4. Акбаров, А.Б. К некоторым аспектам направленном синтеза биокомплексов с заданной специфической активностью/ А.Б.Акбаров, Ю.Я.Харитонов // ДАМ СССР.-1990.-т.310.-Вып.1.-С.103-106.

5. Актуальные вопросы медицины и фармации: Материалы итоговой науч. конференции студентов и молодых ученых. Курск, КГМУ, 1994.-С. 52-54.

6. Алексеев К.В. Теоретическое и экспериментальное обоснование применения редкосшитых акриловых полимеров в технологии мягких лекарственных форм (мазей и гелей) и биопрепаратов: Дис. . докт. фармац. наук. М., -59с.

7. Арсагова, Н.С. Содержание некоторых МЭ в крови и мышцахматки у больных раком матки и их динамика в процессе лечения: Автореф. дис. канд. биол. наук/ Н.С.Арсагова; Л.- 1972.19 с.

8. Асадуллаев, С. X. Содержание МЭ в цельной крови у больных гипертонической болезнью и атеросклерозом и влияние терапии (комплексной сосудорасширяющей и витаминной) на динамику МЭ: Автореф. дис. .канд. мед.наук/ С. Х.Асадуллаев; Душанбе.-1971.-23 с.

9. Ю.Аспераза энзиматический препарат для очищения ран / В.Т. Чернобой П.И. Кабачный, В.Ф. Рудюк и др. // Хим.-фарм. журн. -1991.-т. 25,№ 1.- С.86-87.

10. Астожников, Ю. В. Бактероидная инфекция в хирургии / Ю. В.Астожников, Н. С.Богомолова, Г. В.Еремина // Хирургия.-1983.-N12.-C.ll 1-116.

11. Афзалетдинова, Н.Г. Получение, ранозаживляющее и противоязвенное действие комплекса хитозина с родием (Ш)/Н.Г.Афзалетдинова, Ю.И.Муринов, И.Р.Муллагалиев // Хим-фарм журнал.-2000.-Т34.-№5.-С.26-27.

12. О.Афиногенов Г.Е., Блинов Н.П. Антисептики в хирургии. Л.: Меди-1987.-143 с.

13. И.Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. СПб.: крат, 1993.-264 с.

14. Бабенко, Г. А. Микроэлементы в экспериментальной и клинической медицине/ Г. А.Бабенко.- Киев: Здоровье, 1965.-183 с.

15. Бабенко, Г.А. Применение микроэлементов в медицине/ Г.А.Бабенко, Л. П.Решеткина.- Киев: Здоровье, 1971.- 166 с.

16. Баженов, Л. Г. Бактероидные инфекции в хирургии/ Л. Г. Баженов, X. М.Исхакова//- 1983.-N3.-C. 120-122.

17. Бала, Ю. И. О некоторых компенсаторных механизмах нарушения обмена микроэлементов в условиях патологии/ Ю.И.Бала, Г. И.Аксенов //Терапевт, арх. -1970. N4,- С.81-84.

18. Бала, Ю. М. Микроэлементы в клинике внутренних болезней/

19. Ю.М.Бала, В. М.Лифшиц.-Воронеж, 1973.-139 с.

20. Балебанова, Е.В. Влияние металлокомплексов 1-замещенных 3,4-дигидроизохинолинов на систему гомеостаза/ Е.В.Балебанова, В.В.Давыдов, А.Н.Зорин// Хим.-фарм.журнал.- 1996.-№8.-С.17-19.

21. Балтрашевич, А. К. Микробы семейства Ва^егснёеэ в патологии человека и животных/ А. К.Балтрашевич // Журн.микробиол.-1979.-N10.-C.H-20.

22. Бахина, Т. С. Содержание микроэлементов (цинк, медь, марганец, никель, свинец) в эритроцитах, плазме и цельной кровибольных хроническим панкреатитом: Автореф. дис. .канд.мед.наук /Т.С.Бахина; Омск, -1972.-17 с.

23. Башура Г.С., Драник Л.И. Роль вспомогательных веществ в создании аэрозолей и мягких лекарственных форм // Тез. докл. Всосоюз. науч.- техн. конференции. -Харьков, 1990. С. 51-52.

24. Беленький, М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта/ М. Л.Беленький.- М.: Наука, 1963.177 с.

25. Березовская, С.Е. Дмитрук, Г.И. Калинкина, Е.А. Серых // Фармация. 1996. -№1.- 37-40.

26. Бикулова, А.Т. /А.Т.Бикулова, В.М. Иванов, Е.А.Медведева// Хим.-фарм.журнал.- 1986.-Т.20.-№2.-С. 162-164.

27. Биокомплексы микроэлементов как новая генерация лекарственных средств //Н.И. Калетина, В.Ф. Захарова, Н.В. Козлова, О.Ф. Кокорникова // Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств: Тез. докл. Всероссийской науч. конф. СПб., 1996.-С. 49.

28. Биологические аспекты координационной химии /Под ред. К. Б. Яцимирского.-Киев: Наукова думка, 1974.- 205 с.

29. Бисимидазол- (1,10)- фенантролин меди (2) дихлорид, проявляющий антибактериальную и антибластическуюактивность, способ его получения/ В.В.Власов, С.А.Казаков,

30. В.М.Плотников и др.// Патент РФ №200110315/04 от 02.02.2001.

31. Блатун, JT.A. Комбинированная антибактериальная терапия раневойинфекции / Л.А. Блатун // Науч. тр. / ВНИХФИ. 1987. - С. 112117.

32. Блатун, Л.А. Флегмоны и абсцессы современные возможности лечения Л А.Блатун //Лечащий врач. - 2002. - №1-2. - С.30-40.

33. Бондаренко, В. М. Микроэлементы и инфекция/ В.М.Бондаренко, В. Ф.Чубуков, В.М.Бондаренко // Журн. микробиол., эпидемия., иммунобиол. -1987.-N 11 .-С. 118-126.

34. Бородулин, В.Б. Химия для медицины и ветеринарии /В.Б.Бородулин,А.Д.Шебалдова, Т.К.Корниенко. Саратов: Изд-во Саратов, ун-та, 1998.-28с.

35. Боцюрко, В. И. Обмен железа, меди и цинка у больных ревматизмом/ В. И. Боцюрко // Врачебное дело.-1977.-N2.-C.50-52.

36. Быстринина, В. И. Синтез и биологическая активность комплексов родия (3+) азот, кислород и серосодержащими лигандами/ В.И.Быстринина, А.Д.Щебалдова, Л.К.Куликова // Хим. фармац. журн.-1986.-N9.-C. 1074-1077.

37. Венчиков, А.И. Основные приемы статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии / А.И.Венчиков, В.А.Венчиков. М.: Медицина, 1974. - 152 с.

38. Воронков, М.Г. Антибактериальные и гемостатические свойства серебряных солей полиакриловой кислоты/М.Г.Воронков, Л.М. Антоник, A.C. Коган// Хим.-фарм.журнал.-2002.-Т.36.-№2.-С.27

39. Гаркави, A.B. Раны и раневая инфекция. Ч. П. Раневая инфекция,ее профилактика и лечение. / A.B. Гаркави, Е.Т. Елисеев // Мед. помощь. -2000.-№5.-С. 3-7.

40. Гидроколлоидные покрытия новое поколение средств для лечения ожогов / Г.Я. Кивман, Ю.В. Ляшенко, Э.З. Рабинович, Л.И. Флейдерман //Хим-фарм. журн. - 1994. - т. 28, № 9. - С. 21-27.

41. Гипохлорит натрия в лечении гнойных ран / Петросян Э.А., Сергиенко В.И, Кулаев Г.К. и др. // Вест, хирургии им. Грекова. -1991.-№ 1.-С. 40-43.

42. Гирева, Р.Н. /Р.Н.Гирева, Г.А. Алешина, Л.А.Резниченко//Хим.-фарм.журнал.-1974.-№ 10.-С.25-29.

43. Глянцев, С.П. Современные подходы к разработке эффективных перевязочных средств, шовных материалов иполимерных имплантантов, М., 1995.- С.28-29

44. Гостищев В.М., Толстых П.И., Сажин В.П. Проточный ферментативный некролиз в лечении гнойных заболеваний мягких тканей //Хирургия. -1980.-№11.-С. 12-17.

45. Государственная фармакопея СССР. X изд. - М.: Медицина, 1968. -1076 с.

46. Гусейнов, А. 3. Влияние иммунотерапии на пато- и морфогенез гнойного воспаления мягких тканей: Автореф. дис. канд/ А.З. Гусейнов;-М., 1990.-24 с.

47. Дарьина, А. Н. Обмен микроэлементов при перетоните у детей / А.Н.Дарьина, В. Б.Красовская // Хирургия.-1983.-N5.-C. 70-73.

48. Даценко, Б.М. Гнойная рана. / Б.М.Даценко, С.Г.Белов, Т.И.Тамм.- Кшв.Здоров'я, 1985. 123 с.

49. Дашевекая Б.И., Бодня В.М., Глузман М.Х. Использование ПЭО в производстве мазей // Фармация. 1990. - № 6. - С. 31-34.

50. Дашевская, Б.И. Использование РЭО в производстве мазей / Б.И.Дашевская, В.М.Бодня, М.Х.Глузман // Фармация.-1990.-№6.-С.31-34.

51. Джусупова Д.Д. Технология и исследование пленок, мазей ранозаживляющего, противовоспалительного и антисептического действия: Автореф. дис. канд. фармац. наук. М.,1985. - 21 с.

52. Диланян, Э.Р. Синтез и противоопухолевая активность новых бистиосемикарбазонов метилглиоксаля, глюказона и их медных комплексов /Э.Р.Диланян, Т.Р.Овсепян, Г.М.Степанян //Хим-фарм. журнал 2000.- Т.34.-№8. -С. 16-17.

53. Динамика некоторых показателей иммунитета у больных гнойно-септическими заболеваниями/ О. В. Смирнова, Г. К. Вандяева, И. Б. Исиченко и др.// Хирургия.-1980.-Ы11.-С.30-36.

54. Довглялло, Г. X. Некоторые цинкосодержащие дегидрогеназы при остром инфаркте миокарда/ Г. Х.Довглялло, В. Г. Тишковский // Терапевт, архив.-1970.-Т.42.-Ы4.-С.84-86.

55. Дорофейчук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом / В.Г.Дорофейчук // Лаб.дело. 1968.- №1. С.28-30.

56. Дэвени, Т.И. Аминокислоты, пептиды, белки/ Т.И.Дэвени, Я.М. Гергий.-М.:Мир, 1986.-364 с.

57. Егорова, В.И. /В.И.Егорова, Л.Н.Нескладнова, Ю.А.Харитонов// Координационная химия.-1985.-Т. 11 .-№5.-С.672-674.

58. Ежова, Л. А. Комплексные соединения никеля и меди с биологически активными производными тиосалициловой кислоты/ Л.А.Ежова, В. Н. Михайлова // Проблемы современнойбионеорганической химии.- Новосибирск: Наука, 1986.-С.223-228.

59. Елецкий, Ю. К. Роль парасимпатической нервной системы в регуляции обмена некоторых макро- и микроэлементов/ Ю. К. Елецкий, А.Ю. Цибульский // Микроэлементозы человека.-М., 1989.-С. 90-91.

60. Ершов, Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений/ Ю.А. Ершов, Т.В.Плетенева,- М.: Медицина, 1989.272 с.

61. Земцов Р.Н. Изучение возможности использования продуктов переработки эфирномасличных растений как консервантов лекарственных средств // Тез. докл. 4-го Всесоюз. съезда фармац. -Казань, 1986.-С. 254-255.

62. Ивченко, В.Н. Применение метронидазола и его аналогов в хирургии. / В.Н. Ивченко, В.М. Мельник /Клиническая хирургия, №1, 1983. -С.45-48

63. Изучение фунгицидной активности некоторых эфирных масел / Н.И. Ткачева, И.А. Муравьев, H.H. Николаевский, H.H. Синченко // Фармация. -1989.-№3.-С. 72-73.

64. Иманалиев, А. Б. Комплексное лечение длительно не заживающих ран: Автореферат дис. . канд. мед. наук/А. Б.Иманалиев. Фрунзе, 1990- 23 с.

65. Ирадян, М.А. Производные имидазола.Х1Х. Синтез и биологическая активность производных 4-нитро-5-тио-имидазола/М.А.Ирадян, А.Х.Айвазян, В.С.Мирзоян// Хим.-фарм.журнал.-1987.-№6.-С.667-672.

66. Исмаилова, Г.М. Получение комплексных соединений Mg(II) с никотиновой кислотой и никодином / Г.М. Исмаилова, И.М. Иминова, A.A. Тулаганов// Хим-фарм. журнал.- №36.- №6.- 2002.-С. 42- 43.

67. Использование неионогенных ПАВ в качестве носителей йода вбактерицидных йодофорных препаратах / А.Н.Сукнасян. А И Копылова, Н.Ф.Соколова и др. // Хим-фармацевт. журн. 1989. -Т.23, №5.- С.596-600.

68. Казаченко, A.C. Синтез и антимикробная активность комплексных соединений золота с глицином, гистидином и триптофаном /А.С.Казаченко, Е.В.Леглер, О.В.Перьянова //Хим-фарм. журнал 1999.-Т.З .-№9-С. 11-13.

69. Казаченко, A.C. Синтез и Антимикробная активность комплексных соединений серебра с гистидином и триптофаном/ A.C. Казаченко, Е.В.Леглер, О.В.Перьянова// Хим.-фарм.журн.-2000.-Т.34.-№5,-С.34-35.

70. Каримова, С. К. К обмену меди в сопоставлении с некоторыми биохимическими показателями у больных затяжной формой инфекционного и хронического гепатитов: Канд. дис.-Ташкент, 1968

71. Катацел и катацел А новые лекарственные формы антисептиков / Т.М. Таратина, Г.П. Иванова, Б.В. Москвичев и др. // III Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. - М.: РЦ "Фармединфо", -С. 51.

72. Ковальчук Т.В. Разработка состава мази "Фулевид" // Фармац. журн. -1990.- №5.-С. 68-69.

73. Коллагеновая губка "Цитотимакол" стимулятор заживления ран /

74. A.B. Малинин, М.А. Буракова, Н.Д. Сидорова и др. // Хим.-фарм. журн.-1998. №11.-С. 54-56.

75. Кондратьева Т.С., Михайлова Г.В., Кассин В.Ю. Целосорб и возможности его применения для лечения гнойных ран // Синтетические и биологические полимеры в фармации: Сб. науч. тр. ВНИИ фармации. М., 1990. - т. С.63-66.

76. Корниенко, Т.К. /Т.К.Корниенко, А.Д.Шебалдова,

77. B.И.Марьин//Хим.-фарм. журнал.- 1984.-Т.18.-№11.-СЛ339-1344.

78. Косырева, Н.С. Исследование влияния мазевых основ на скорость всасывания и специфическую активность мазей с фосфорноуксусной кислотой / Н.С.Косырева, И.А.Елагина, Н.Д.Львов//МРЖ.-раздел 22.-1991 .-№4-6.-С. 15.

79. Красильников А.П. Справочник по антисептике. Мн.: Высш. шк., 1995.-367 с.

80. Красильников, А.П. Современные проблемы антисептики // А.П. Красильников, A.A. Адарченко, Ю.К. Абаев // Здравоохранение Белоруссии. 1990. - № 11.- С. 52-58.

81. Криворучко, В.И. Экология пестицидов и репаративная регенерация тканей / В.И.Криворучко, Р.Ю.Омиров. Ташкент: Изд-во Ибн Сины, 1993.- 120 с.

82. Кример, М.З., Кальян, Ю.В., Спектор, В.И. Изв. АНСССР. Сер. биол.хим.наук, 1983, №5, С.63-65

83. Крисс, Е.Е. Координационные соединения металлов в медицине / Е.Е.Крисс, И.И.Волченкова, А.С.Григорьева //.- Киев: Наук.думка, 1986.-216с.

84. Кузин, М.И. Новый анестетик тримекаин/ М.И.Кузин, Н.Г.ПрянишниковаУ/Эксперим. хирургия и анестезиология.-1989.-№5.-С.93-96.

85. Кузнецова В.А., Сорокин А.Я., Розенберг М.Э. Сорбирующие полимерные материалы для лечения гнойных ран // Тез. докл. всесоюз. НТК. -Харьков, 1990. С. 110-111.

86. Курбангалеев СМ. Гнойная инфекция в хирургии. М.: Медицина, 1985.-272 с.

87. Кутузова, И.В. Сравнительная оценка высвобождения препарата полиненасыщенных жирных кислот из мазей в опытах in vitro и in vivo/ И.В. Кутузова, Н.К.Бабанова, А.И.Тенцова и др.//Фармация,-1990.-№1.-С.18-22.

88. Кэбот, Е., Мейер М. Экспериментальная иммунохимия: Пер. сангл. М., 1968.-684с.

89. Лабинская, А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований/А. С.Лабинская. -М.: Медицина, 1978.-391 с.

90. Лазурина, Л.П. Комплексные соединения. Применение в медицине и фармации / Л.П. Лазурина, А.А.Хабаров, Д.А.Новиков // Курск: "Флэш", 1999, 171с.

91. Лазурина, Л.П. Роль комплексных соединений металлов в становлении металло-лигандного гомеостаза и донозологический диагностике: Автореф. дис.д.б.н./ Л.П.Лазурина; М,1995. - 43с.

92. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф.Лакин. М., 1980. - 293 с.

93. Леглер, Е.В. Синтез и антимикробная активность комплексных соединений серебра с аргинином и глутаминовой кислотой /Е.В.Леглер, А.С.Казаченко, В.И.Казбанов //Хим-фарм.журнал-2001 Т.35.-№9.-С.35-36.

94. Лившиц B.C. Полимерные покрытия на раны и ожоги: (обзор) //Хим.-фарм. журн. 1988. - т. 22, № 7. с. 790-798.

95. Мальберг, К. Метод локального гемолиза / К.Мальберг, Э.Зигль // Иммунологические методы: Пер. с нем. / Под ред. Г.Фримеля. М.: Медицина, 1987. - С.57-72.

96. Матусис, З.Е. К методике определения индекса завершенности фагоцитоза / З.Е.Матусис, С.И.Пылаева // Лаб.дело. 1972. - N4. - С.237-240.

97. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Харьков: Торсинг, .т. 1.-592 с; т. 2.-560 с.

98. Мелехов П.А., Мирошин СИ., Мелехов СП. Сравнительная характеристика микробоцидной активности некоторых традиционных и современных антисептиков, применяемых в хирургии // Хирургия. 1990. - № 6. - С.39-41

99. Методические рекомендации по экспериментальному изучению местноанестезирующих средств / Ю.Д. Игнатов, Ю.Н. Васильев,

100. В.Н. Жуков и др.//М., 1990. 49 с.

101. Механизм бактерицидного действия йода и его соединений /А.П. Маслюков, Ю А Рахманин. Г А Матюшин, К М Дюмаев // Докл Академии Наук 1992 - Т 323. №4 С. 782-785

102. Микробиологическая активность йод метилатов некоторых аминов / А. И. Сафаев, И.Т. Турдимхамедова, А.Г. Махсумов, Д.И. Ибрагимов // Хим фармацевт, журн - 1971 -7 5 -С 21-22.

103. Морозова, И. А. Всасывание и секреция в тонкой кишке/ И. А. Морозова, Ю. А. Лысиков., Б. В. Питран., С. И. Хвыля.-М.: Медицина, 1988.-С.194-195.

104. Мохнач, В.О. Иод и проблема жизни. Теория биологической активности йода и проблемы практического применения соединений йода с полимерами / В.О.Мохнач,- М.: Наука, 1974.253 с.

105. Мохнач, В.О. Теоретические основы биологического действия галоидных соединений / В.О.Мохнач. Л., Наука, 1968. - 223 с.

106. Мохнач, И.В. Йодвысокополимеры и биологические возможности организма / И.В.Мохнач. М.: Наука, 1979. - 78 с.

107. Набухающие системы с контролируемым высвобождением, современные разработки и области применения // Хим.-фарм. производство за рубежом. Экспресс-информация. 1989. - № 7. - С. 19-23.

108. Назаренко, Г.И. Рана. Повязка. Больной. Руководство для врачей и медсестер // Г.И. Назаренко, И.Ю. Сугурова, С.П. Глянцев. М.: Медицина, 2002. - 472 с.

109. Николаенко Л.В., Заугольников B.C. Изменение содержания некоторых эссенциальных элементов при различных формах перитонита // Вятский медицинский вестник, 1999. №4. - с. 19-21.

110. О заживлении ран / В.Г.Петров, С.Е.Козлов, Г.А.Чиженков, А.И.Горин //Клинич. хирургия. 1986. -№ 1. - С.61.

111. Обработка полости эхинококковой кисты легкого коллоидальным йодом / О.К.Кулакеев, Д.С.Сенсенбаев,

112. A.Н.Карпов, А.НЛи II Здравоохранение Казахстана.- 1991. -№ 6.-С.59-60.

113. Овсепян, Т.Р. Синтез и противоопухолевая активность медных комплексов 4 алкоксибензилзамещенных тиосемикарбазонов ароматических альдегидов /Т.Р.Овсепян, Г.Е.Габрилян, Т.К.Симонян и др. //Хим-фарм. журнал. 2000.- Т.34.-№5.-С.21- 23.

114. Опыт лечения гнойных ран с использованием стабилизированного в димексиде нитрата серебра / П.Р. Пульняшенко, Н.Б. Безлюда, Г.М. Ларионов и др. // Клинич. хирургия. 1990. - № 1. - С. 35-36.

115. Павлов, П.А. Синтез и антимикробная активность некоторых нитрофурансодержащих имидазотриазолов /П.А.Павлов, Н.Ю.Басова, П.П.Павлов //Хим.-фарм. журнал. 1998. №7.-С.ЗЗ-34.

116. ИЗ. Павлов, П.А. Синтез и антимикробная активность некоторых нитрофурансодержащих азометинов / П.А.Павлов, Н.Ю.Басова, П.П.Павлов// Хим. журнал. -2000.-Т34.-№6.-С.24-25.

117. Панкрушева Т.А. Экспериментально-теоретическое обоснование создания мягких лекарственных форм на полимерных основах -производных целлюлозы: Автореф. дис. докт. фармац. наук. -М., 1995.-32 с.

118. Персидская, К.Г. Справочник для работников лабораторий эфирномасличных предприятий. / К.Г. Персидская, А.П. Чипига. -М., 1981, 150 с.

119. Пигаревский, В.Е. Лизосомально-катионный тест. Метод, рек. /

120. B.Е.Пигаревский // НИИЭМ АМН СССР. М., 1979. - 57 с.

121. Плохинский, H.A. Математические методы в биологии / Н.А.Плохинский. М., 1978. - 342 с.

122. Полимеры в фармации / Под ред. А.И. Тенцовой, М.Т. Алюшина. -М.: Медицина, 1985. 256 с.

123. Попков, А.П. Галенко-Ярошевский // VII Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. М.: РЦ "Фармединфо", 2000. - С. 517.

124. Протеолитические ферменты в гнойной хирургии / В.И. Стручков, Д.В. Григорян, В.К. Гостищев и др. М.: Медицина, 1970.-408 с.

125. Пуоджанене, Г.А. Разработка полимерных пленок, содержащих иммобилизованную протеазу и диоксидин/ Г.А. Пуоджанене, В.А. Вайчювенас, В.И. Янулис, Ю.Е. Степонавичюс// Хим.-фарм журнал. -2005.- Т.39.- №1.-С.34-36.

126. Раны и раневая инфекция: Руководство для врачей. / Под ред. М.И. Кузина, Б.М. Костюченок: 2 изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1990.-592 с.

127. Растительные азулены перспективное сырье для мягких лекарственных форм / Ю.Н. Кирюхин, Р.Г. Заславский, Л.И. Драник и др. // Тез. докл. Всесоюз. НТК. - Харьков, 1990. - С. 105106.

128. Регистр лекарственных средств России. Изд. 6-е, перераб. и дополн. / Гл. ред. Ю.Ф. Крылов. М.: "РЛС-2000", 1998. - 1072 с.

129. Решетов, И.В. Пленочное покрытие, содержащие хлоргекседин и лизоцим, для лечения ран/ И.В. Решетов, Т.Н. Юданова, О.В. Маторин, Д.С. Морозов//Хим.-фарм журнал. -2004.- Т.38.- №7.-С.41-43.

130. Роголенкова М.Н. К вопросу создания мазей с антибактериальным действием // Хирургия-98: Тез. студ. науч. конф., посвящ. 90-летию акад. Б.В. Петровского. М., 1998. - С. 107-108.

131. Романченко И.М. Комбинированное применение методов биологической, физической и химической некроэктомии в лечениигнойных ран: Дис. канд. мед. наук. -М., 1994. 105 с.

132. Рудько А.П., Кривошеий Ю.С., Акимов A.B. Мирамистин -высокоэффективный антисептик с иммуноадъювантным действием // III Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. М.: РЦ "Фармединфо", 1996.-С. 195.

133. Самусь, Н.М. Синтез и противомикробная активность координационных соединений Зс1-элементов с некоторыми гидразонами, полученными на основе 5-нитро-2-фуральдегида /Н.М. Самусь, В.И.Цапков, С.А. Бурачева и др.//Хим.-фарм. журнал.-1999.-№ 10.С.41 -44.

134. Сафронова, JI.A. Синтез и антибактериальная активность комплексов палладия и кобальта с замещенными фуранами/Л.А.Сафронова, Т.К.Корниенко, Т.М.Шуб, А.Д.Шебалдова// Хим.-фарм журнал. -2000.- Т.34.- №9.-С.22-23.

135. Светлов, A.B. Доступные отечественные местные анестетики для повседневной практики. Лидокаин и тримекаин в практике эпидуральной анестезии /А.В.Светлов, С.П.Козлов, А.В.Гнездилов и др. //Новые лекарственные препараты.-1991.-№7-9.С.9-14.

136. Сигал В.Л., Мысак O.A. О возможных физико-химических критериях клинического выбора аппликационного материала для лечения ран и ожогов // Хим.-фарм. журн. 1992. - т. 26, № 4. - С. 85-88.

137. Сидоренко А.Ф., Кедров СИ. Ароматерапия: механизмы действия некоторых эфирных масел II VII Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. М.: РЦ

138. Фармединфо", 2000. С. 430.

139. Сильва Джозев (младший) Инфекции хирургических ран и ихпрофилактика (США): Пер. с англ. // Хирургия. 1994. - № 9. - С. 10-13.

140. Скифская, A.A. Хлористый йод как средство профилактики илечения хронического тонзиллита / А А Сквирская //Жур. ушных, носовых горловых болезней,- 1972.- № 2. С 32-34

141. Сливкин, А.И. Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств/ А.И. Сливкин, В.Ф. Семенев, Е.А.Суховерхова. -Воронеж.: Изд-во Воронежского государственного университета, 1999.-366с.

142. Современные йодофоры в лечение и профилан.ике гнойно-воспалительных процессов в ранах / Л.Блатун, А. Светухин, В. Митки и др ,// Врач.-2000.-№ 11 .-С 22-25.

143. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия. -Метод, рек. / Сост. М.Е.Виксман, А.Н.Маянский. Казань, 1979. -14 с.

144. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России / Справочник. М.: АстраФармСервис, 1997. - 1504 с.

145. Справочник лекарственных средств / Под ред. М.А. Клюева, 1993.-511с.

146. Сравнительная оценка эффективности современных антисептических препаратов, применяемых в хирургии / В.М. Буянов, Г.В. Родаман, К.Ю. Данилов и др. // Сов. медицина. 1991. - № 8. - С. 48-50.

147. Стручков, В.И. Гнойная инфекция в хирургии /

148. B.И.Стручков//Сб.науки.тр.ХХХ съезда хирургов.- Мн., 1983.1. C.14-19.

149. Стручков, Ю.В. Профилактика нагноений и лечение гнойных ран. (Клинико-экспериментальные исследования)/ Ю.В. Стручков //: Автореферат, дис. . д-ра.мед.наук. Ю.В.Строчков;.-М.,1982.-41с.

150. Сульфат ди-1- (-оксиэтил) -2-метил-5-нитроимидазол. кобальта (II) дигидрат, проявляющий бактериостатическую активность/Л. П.

151. Лазурина, Н. И. Калетина, Н. Ю. Якушева и др. Патент РФЫ 491972/04 (014380) от 4.02.92.

152. Сурина Л.В. Разработка и исследование многокомпонентных мазей на полимерной основе антимикробного, анестезирующего действия: Дис. канд. фармац. наук. Курск, 1995. - 128 с.

153. Танасиенко Ф.С. Эфирные масла. Содержание и состав в растениях. Киев: Наук, думка, 1985. - 264 с.

154. Тенцова, А.И. Биологическая доступность и методы ее определения / А.И.Тенцова, Т.С.Киселева// Фармация.-1980.-С. 1014

155. Теория и практика местного лечения гнойных ран / Н.П.Безуглая. С.Г.Белов, В.Г.Гунько и др.; Под ред. Б.М.Даценко. Киев. Здоров'я. 1995. - 384 с.

156. Теплова, С.Н. Оценка факторов неспецифической защиты организма от инфекции в клинической практике (Метод, рек.) / С.Н.Теплова. Челябинск, 1978. - 57 с.

157. Терехов, В.И. Антимикробная активность и токсичность нового нитрофурана /В.И.Терехов, П.А.Павлов // Антибиотики и химиотерапия. -1995.- №4.С.34-36.

158. Терехов, В.И. Эффективность терапевтического действия фуразолидона и дифурацила (БАП-49) при экспериментальной стафилококовой и ишерихиоозной септецемии /В.И.Терехов, А.П.Павлов// Антибиотики и химиотерапия.-1995. №4.С.37-39.

159. Трапков, В.А. Синтез и противоязвенная активность медь- и цинксодержащих кумариновых антиоксидантов/ В.А. Трапков, Э.А. Парфенов, Л.Д. Смирнов// Хим.-фарм.журнал.- 1996.-Ж7.-С.20-21.

160. Ушаков, Р.В. Местное антимикробное лечение в стоматологии. /Р.В. Ушаков, В.Н. Царев. Медицинское информационное агенство, М., 2004.- 134 с.

161. Фармакотерапевтические алгоритмы и формуляры лекарственных средств в лечении заболеваний. Практическое руководство для врачей, провизоров и студентов медицинских и фармацевтических вузов / Под ред. Н.Г.Филиппенко. Курск, КГМУ, 2001.-701 с.

162. Федоров, В.Д. Биологически активные перевязочные средства в комплексном лечении гнойно-некротических ран/ МЗ РФ, М., 2000,- С. 911

163. Федоров, П.И. Синтез, изучение свойств, химического строения и превращений о-ментадиентов: Дис. канд. мед. наук. -M., 1984.

164. Франклин Т., Сноу Дж. Биохимия антимикробного действия. Пер. с англ. М.: Мир, 1984. - 240 с.

165. Хакимов, Х.Х. Периодическая система и биологическая роль элементов / Х.Х.Хакимов, А.З.Татарская// Медицина, Ташкент. 1978, с 484.

166. Ходжаев, Ш.Н. Особенности заживления ран у больных, имевших контакт с бутифосом: Автореф. дис. . канд. мед. наук / Ш.Н.Ходжаев. М., 1981. - 22 с.

167. Чащина, C.B. Фармакологическая эффективность мазей с новым анестетиком аналокаином: Автореферат дис. .канд. биол. наук.-Томск, 1991.-23с.

168. Черкасова, Т.С. Лечение папилломатоза гортани у детей препаратами А-19 йодбензотефа / Т.С.Черкасова // Журн. ушных, носовых, горловых болезней. 1971. -№3. - С.67-68.

169. Черномордик, А.Б. Применение антибиотиков и других химио-терапевтических препаратов /А.Б.Черномордик.-Киев: Здоровье, 1988.-320с.

170. Шихман, Ш.М. Применение йодинола в хирургической практике / Ш.М.Шихман//Вестн. хирургии. 1966. -Т. 97, № 8. -С.81-94.

171. Шляпников, В.А. Обзор информ. ЦНИИ и техн.-эконом. исслед. пищ.пром-ти, 1983, №7, с.24

172. Шраер, Т.И., Шапошников Ю.Г., Крейнес В.М. Применение липосом в раннем лечении экспериментальных ран // Хирургия. -1994.-№ 12. -С.35-38.

173. Шубич, М.Г. Выявление катионных белков в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфенолового синего / М.Г.Шубич // Цитология. 1974. - Т.16, N10. - С.13-21.

174. Юданова, Т.Н. Фармакокинетические свойства поливинилспиртовых пленок с комбинированным биологическим действием/ Т.Н. Юданова, Е.Ю. Алешина, Л.С.Гальбрайх// Хим.-фарм журнал. -2003.- Т.37.-№11.-С.26-28.

175. Юсупов, Ф.И. Применение тримекаина и пиромекаина для местной анестезии в оториноларингологии/ Ф.И.Юсупов, Н.П.Мешкова, А.А.Алимова//Журн. ушных, носовых и горловых болезней.-1991 .-№4.-С.54-55.

176. Ясницкий Б.Г. Современные тенденции создания и применения вспомогательных веществ лекарственных препаратов // Тез. докл. Всесоюз. на-уч.-технич. конф. Харьков, 1990. - С. 65.

177. Ali, В.Н. Pharmacological, therapeutic and toxicological properties of furazolidone : some recent research / B.H.Ali// Vit Res Commun. -1999.-№ 23.-C.343-360.

178. American society of regional anesthesia/ Meeting.-1990.-0rlando, Fla//Scietific abstracts American society of regional anesthesia: Annu.meet., Orlando, Fla., March. 25-28, 1990.- Philadelphia: Lippincoti, 1990.-92p.

179. Antiseptic composition: Пат. 5308611 США, МКИ A.61 К 31/00 / Thompson Cedric B.H.; Stanley Pharmaceuticals Ltd. N 864124; Заявл. 06.09.92; Опубл. 03.05.94; НКИ 424/78.07.

180. Arzamastsev, E.V. Combined method for the determination of1.5()/E.V.Arzamastsev, M.I.Mironova, O.A.Terehova //Zent. Bl. Pharm., pharmakother.,lab.Diagn. Berlin, 1988, 127,5, P310-311

181. Asim F., Selmeczi В., Regdon G., Shayoub M., Ismail Abel Hadi Bioac-tivity of some chemotherapeutic agents in selected polyethylene glycol ointment bases // Acta pharm. hung. 1989. - V. 59, № 2. - P. 87-94.

182. Beaian, V., Caraman, C., Filipovici, C. et al. Пат. 75555 (CPP) - РЖ Химия, 1983, №80222П

183. Bialik, W. Application of the simple mathematical function for the quantitative description of in vitro release of drug agents from the ointment bases // Die Pharmazie.-1984.-V.39, №11.-P.763-764.

184. Coudron, P.E. In vitro evaluation as an alternative agent for metronidazole in combination antimicrobal therapy against Helicobacter pylori /P.E.Condron, C.W.Stratton //J. Antimicrob Chemother -1998.-№42. -C.657-660.

185. Dani, R. Omeprasole, clarithromycin and furazolidone for the eradication of Helicobacter pilori in patients with duodenal ulcer / R.Dani, D.M.Queiroz, M.G.Dias // Aliment Pharmacol Ther. -1999.-№13.-C. 1647-1652.

186. Dimick A.R. Experience with the use of proteolytic enzyme (travaser) in burn patients // J. Trauma. 1977. - V. 17, № 12. - P. 948-955.

187. Dodd, M. The in vitro bacteriostatic action of some simple furan derivatives /М. Dodd, W.Stillman // J. Pharm Exper Ther.-1944.-82.-c.11-13.

188. El.-Fallam Т.Н., Shnoky S., Abdel-Meduid E. Determination on the release and the efficacy of the two new antibacterial agents from the different ointment bases // Die Pharmazie.-1989.-V.44, №3.-P.211.

189. File, T.M. Treatment of skin and soft tissue infection. / T.M. File, J.S. Tan // Am J Surg. 1995, - Vol. 169, 5A Suppl. - P. 27-33.

190. Gadomska-Nowar M., Wojdar H., Godlewska J. Badania dostepnoscifarmaceutycznej chlorowodorku chlorotetracycliny w wybranych podlozach masciowych //Acta pol.pham/-1989/-t.46, №1 .-S.70-73.

191. Handbuch der Antiseptik. Bd.2. T. Antiseptika / Hrsg. Von A.Kramer. -Berlin, 1987.-212 s.

192. Huand, X. Economic assessment of three antimicrobial therapies for uncomplicated urinary tract infection in women /X.Huand, A.G.Hartzema, R.H.Raasch // Clin Ther.- 1999.-№21. C. 1578-1588.

193. Jondal, M. Surface markers on human T- and B-lymphocytes. 1. A large population of lymphocytes forming nonimmune rosettes with sheep red blood cells / M.Jondal, G.Holm, H.Wigzell // J.Exp.Med. -1972. V. 136, №11. - P.207-209.

194. Kagan Benjamin M. Antimicrobial therapy: 3-rd ed. Philadelphia etc. // Saunders. - 1980. - XVII. - 542 p.

195. Kircher W. Rezepturarzneimitted zur kutanen Anwendung // Med. Mschr. Pharm. 1990. - Pd. 13, № 5. - S. 149-151.

196. Kramer A., Groschel D., Heeg P. u. Mitarb. Bergiffsbestimmung der Antiseptik und Zielstellung der Klinischen Anwendung von Antiseptika // Klinische Antiseptik, Berlin, 1993. S. 1-22.

197. Kramer A., WallhauBer K.H. Wirkungsspektrum und Anwendungsei-genschdtten häufig aus prophylaktischer Indikation angewandter Antiseptika// Klinische Antiseptik, Berlin, 1993. S. 23-66.

198. Krasilnikow, A P. Klinische Be-deutung der Empfindlichkeit nosoko mailer bacterieller Krankheitserre-ger gegen Antiseptika / A.P Krasilnikow. A.A.Adartschenko, E.l.Gudkowa // Klinische Antiseptik. Berlin. 1993. - S.401- 404.

199. Lamora, J.Z. Povidone iodine & wound infection / J.Z.Lamora // Surgery. - 1984. - V.95, №1. -P. 121-122.

200. Narcisi, E.M. In vitro effect of tinidazole and furazolidone on metronidazole resistant Thricomonas vaginalis /E.M.Narcisi, W.E.Secor // Antimicrob Agents Chemother.-1996.-№40.C.1121-1125.

201. Nastro, L.I., Finegold, S.M. Bactericidal actinity of fine antimicrobial agents against bacteroides fragilis. -J. Infect. Dis. 1972, vol.126, p. 104107

202. Pegg S.P. The role of drugs in management of burns// Drugs.-1982.-V.24, №3.-P.256-260

203. Pekarek, R. S. The effect of leucocytic endogenous mediator (LEM) on the tissue distribution of zinc and iron / R. S. Pekarek, R. W.Wannermacker, W. R. Beisel // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.-1972.-V.140.-P.685-688.

204. Russel A.D. Chlorhexidine: antibacterial action and bacterial resistance // Infection. 1986. - № 5. - P. 212-215.

205. Sieman, D.W. Cytotoxicity of duad function nitrofiirans in rodent and human tumor cells/ D.W. Sieman, //Int J.Rad Oncol Biol Phys.-1992.-№22.-C.97-700.

206. Sindelar, W.F. Irrigation of subcutaneous tissue with polidone -iodine solution for prevention of surgical wound infections / W.F.Sindelar. G.R.Mason // Surg. Cynec. Obstet. 1979. - V.I49, №2. -P. 227-231.

207. Sur, B. Studies on the antineoplasticity of Schiff bases containing 5-nitrofuran and pyrimiadine/ B.Sur, S.P.Chatterjee, P.Sur//Oncology.-1990.- №47.-C.433-438.

208. Szust, L. and Kubis A. Studies on the release of solubiliztd drugs from ointment bases. Part.9: Modelling of drug release process of active substance from emulsive (w/o) The Mathematical Model // Die Pharmazie.-1985.-V.40, №2.-P.l 15-117.

209. Zamora J.L. Chemical and microbiologic characteristics and toxicity of Povidone-Jodine solutions // Amer. J. Sung. 1986. - V. 151, № 3. -P. 400-406.

Информация о работе

Каштанова, Елена Валерьевна
кандидата биологических наук
Курган, 2006
ВАК 03.00.07

Диссертация

Антимикробная активность некоторых комплексов цинка и кобальта, содержащих метронидазол и фурацилин, и их влияние на течение инфекционного процесса - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы