Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Анализ полиморфных вариантов кандидатных генов полиметаболического синдрома и инсулин независимого сахарного диабета

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Милосердова, Ольга Валерьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1 Основные методы изучения мультифакториальных патологий.

2.2 Инсулин независимый сахарный диабет.

2.3 Характеристика кандидатных генов ИНСД и ПМС.

2.3.1 Гены ренин-ангиотензиновой системы.

2.3.2 Гены белков липидного обмена.

2.3.3 Гены белков обмена глюкозы и инсулина.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1 Материалы.

3.2 Выделение ДНК из клеток крови человека.

3.3 Фракционирование ДНК в ПААГ.

3.4 Введение радиоактивной метки в-олигбнуклеотиды.

3.5 Амплификация и определение аллельных вариантов полиморфных участков ДНК.

3.6 Статистическая обработка.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

4.1 Анализ инсерционно-делеционного полиморфизма гена АПФ

4.2 Анализ полиморфизмов гена ангиотензиноген.

4.3 Анализ полиморфизмов генов белков липидного обмена.

4.4 Анализ полиморфизмов генов белков обмена глюкозы и инсулина.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Анализ полиморфных вариантов кандидатных генов полиметаболического синдрома и инсулин независимого сахарного диабета"

Достижения современной молекулярной генетики по расшифровке генома человека дали толчок к дальнейшему изучению механизмов возникновения заболеваний человека, к рождению новой науки — медицинской геномики. На данном этапе её развития достигнуты большие успехи в понимании молекулярных основ многих наследственных заболеваний человека, имеющих простой менделевский характер наследования. Эти знания являются основой для следующего шага в медицинской геномике, а именно, изучения молекулярно-генетических механизмов формирования сложных признаков, в том числе полигенных и мультифакториальных заболеваний. К таким заболеваниям относятся атеросклероз, гипертония, сахарный диабет, полиметаболический синдром и др. Для этих болезней характерен сложный механизм формирования фенотипа, в основе которого лежит взаимодействие генетических факторов с факторами внешней среды. Кроме того, сложный характер наследования таких заболеваний обусловлен большим количеством генов, непосредственно вовлеченных в патогенез, и выраженным влиянием на ход патологического процесса эпигенетических факторов. Необходимо отметить, что генетические особенности конкретного индивидуума могут быть либо факторами, увеличивающими риск развития болезни, либо факторами, снижающими восприимчивость к заболеванию.

В связи с этим проблема изучения генетических основ развития мультифакториальных заболеваний является весьма сложной и связана с разработкой адекватных подходов и методов исследования, что отмечается многими авторами (Ghosh et al., 1996; Summers et al., 1996; Wolf et al, 1995). Один из возможных подходов к изучению роли молекулярно-генетических факторов в развитии сложных признаков связан с выделением группы генов с потенциально наибольшим вкладом в патогенез. Такие, так называемые кандидатные гены, отбирают на основании имеющихся представлений о механизме заболевания. Так, для сахарного диабета и полиметаболического синдрома в число кандидатных генов могут быть в первую очередь включены гены белков, регулирующих кровяное давление и сосудистый гомеостаз, гены белков углеводного обмена и обмена инсулина, гены липидного обмена. цели и задачи работы

Целью данной работы являлось изучение распределения аллель-ных вариантов генов ренин-ангиотензиновой системы, генов белков липидного обмена и обмена глюкозы в популяциях с различным уровнем заболеваемости, ассоциации данных генов с возникновением инсулин независимого сахарного диабета (ИНСД) и полиметаболического синдрома (ПМС), а так же развитием сосудистых осложнений при этих заболеваниях. На основе этого, возможно определение генетических факторов риска развития ИНСД и ПМС в изучаемых популяциях.

Для достижения этой цели были сформулированы следующие задачи исследования:

Анализ инсерционно-делеционного полиморфизма гена ангиотензи-ноген превращающего фермента (АПФ) в различных популяциях и для групп больных ПМС и ИНСД с разной степенью клинической тяжести заболевания.

Анализ двух полиморфных сайтов (М235Т и микросателлитного повтора в 3' нетранслируемом экзоне) гена ангиотензиногена в московской популяции для больных ИНСД и ПМС.

Анализ полиморфных вариантов генов аполипопротеина CIII, белка-транспортера эфиров холестерина, липазы липопротеинов, глюкокиназы, первого субстрата рецептора инсулина у больных ПМС и ИНСД из московской популяции.

Научная новизна и значимость работы

Проведен сравнительный анализ полиморфизма генов ряда белков, имеющих отношение к развитию ПМС и ИНСД, у больных данными заболеваниями из разных регионов России (Москва, Чувашия). Показано, что гены ангиотензин превращающего фермента и ангиотензи-ногена вовлечены в формирование клинической картины указанных заболеваний. Не выявлено какой-либо ассоциации между развитием указанных заболеваний и полиморфизмом генов глюкокиназы, первого субстрата рецептора инсулина, рецептора липопротеинов низкой плотности, аполипопротеина CIII, липазы липопротеинов, белка-транспортера эфиров холестерина.

В случае гена АПФ показана ассоциация между повышенным риском развития ИНСД и ПМС и инерционно-делеционным (I/D) полиморфизмом этого гена. Риск развития этих заболеваний минимален у гомозигот по делеционному (D) аллелю этого гена.

Данный полиморфизм гена АПФ влияет также на риск развития сосудистых осложнений у больных ИНСД — риск развития ангиопатий нижних конечностей достоверно выше у больных, гомозиготных по делеционному аллелю (DD), чем у больных с генотипами ID и II. Таким образом, влияние гена АПФ на развитие клинической картины ИНСД является двояким. С одной стороны, у гомозигот по аллелю D гена АПФ риск развития заболевания снижен по сравнению с лицами с генотипами II и ID. С другой стороны, у больных ИНСД лиц риск развития сосудистых осложнений (с поражением крупных сосудов нижних конечностей) максимален у гомозигот по аллелю D.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Милосердова, Ольга Валерьевна

6. ВЫВОДЫ

1. Проведен анализ полиморфизма ДНК в генах, белки которых имеют отношение к развитию полиметаболического синдрома или инсулин-независимого сахарного диабета. Показано, что два из восьми исследованных гена обнаруживают ассоциации с данными заболеваниями для больных из разных регионов России.

2. Выявлена ассоциация инсерционно-делеционного полиморфизма гена ангиотензин-превращающего фермента с повышенным риском развития как инсулин-независимого сахарного диабета, так и полиметаболического синдрома. Риск развития этих заболеваний минимален у гомозигот по делеционному аллелю этого гена.

3. Показано влияние инсерционно-делеционного полиморфизма гена АПФ на риск развития сосудистых осложнений у больных инсулин-независимым сахарным диабетом. Риск развития ангиопатий нижних конечностей достоверно выше у больных, гомозиготных по делеционному аллелю (DD), по сравнению с больными, имеющими генотипы ID и II. При этом обнаружено, что I/D полиморфизм гена АПФ не влияет на уровень кровяного давления, как у здоровых лиц, так и у больных сахарным диабетом и полиметаболическим синдромом.

4. Выявлены зависимые от возраста изменения частоты встречаемости I и аллелей D в московской популяции, частота лиц с генотипом DD в группе пожилых (возраст более 80 лет) достоверно выше, чем у детей (возраст менее 3 лет). Этот факт необходимо учитывать при формировании выборок для проведения ассоциативных исследований.

75

5. В гене ангнотензнногена проведенно изучение двух типов полиморфизма. Анализ СА-микросаттелитного полиморфизма выявил ассоциацию с повышенным риском развития инсулин-незавсимого сахарного диабета и полиметаболического синдрома. Варианты гена ангио-тензиногена с числом (СА)п-повторов 16 и менее могут рассматриваться как аллели повышенного риска развития сахарного диабета и полиметаболического синдрома. Второй тип полиморфизма — замена М235Т в кодирующей области гена ангиотензиногена не оказывает существенного влияния на риск развития данных заболеваний.

6. Показано отсутствие какой-либо ассоциации между развитием полиметаболического синдрома и инсулин-независимого сахарного диабета и полиморфизмом изученных микросателлитов в генах глю-кокиназы, первого субстрата рецептора инсулина, рецептора липопротеинов низкой плотности, аполипопротеина СЗ, липазы липопротеинов, белка-транспортера эфиров холестерина.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенный сравнительный анализ полиморфизма генов ряда белков, имеющих отношение к развитию полиметаболического синдрома или инсулин-независимого сахарного диабета, у больных данными заболеваниями из разных регионов России (Москва, Чувашия, Якутия) показал, что гены ангиотензин превращающего фермента и ан-гиотензиногена вовлечены в формирование клинической картины указанных заболеваний. Не выявлено какой-либо ассоциации между развитием указанных заболеваний и полиморфизмом генов рецептора липопротеинов низкой плотности, апоСЗ, липазы липопротеинов, белка-транспортера эфиров холестерина.

Проведенная работа открывает перспективы для продолжения изучения мультифакториальных патологий. Можно обозначить три пути дальнейших исследований.

Во-первых, расширение спектра исследуемых генов. В ряде последних работ (и данная работа подтверждает это) показано, что с заболеванием могут быть ассоциированы гены, связь которых с патогенезом заболевания не представляется очевидной. Для ИНСД такими генами могут являться гены фратаксина, кальпаина-10, эндотелиальной NO-синтетазы и др.

Очень показательным является именно пример гена кальпаина-10, так как этот ген, как возможный ген инсулин независимого диабета NIDDM1, был обнаружен на основании ассоциативных исследований в относительно гомогенной генетической группе населения — у мексиканцев испанского происхождения. При этом ген кальпаина-10 кодирует нелизосомальную цистеиновую протеазу, экспрессирующуюся во многих типах клеток и тканей и напрямую не связанную ни с обменом инсулина, ни с обменом глюкозы. Таким образом, существуют еще неизвестные исследователям взаимосвязи в регуляции гомеостаза организма, и анализ даже очень отдаленно связанных с изучаемым мультифактори-альным признаком генов может дать новые, неожиданные результаты.

Во-вторых, ассоциативные изучения можно проводить на менее крупных, но более гомогенных фенотипически группах. Поиск гена NIDDM1 привел к успеху именно потому, что при проведении исследования была использована относительно гомогенная группа. Анализ европейских популяций не позволил сделать столь однозначного вывода о роли гена кальпаина-10 в патогенезе диабета.

В-третьих, необходимо все более широко использовать для изучения мультифакториальной патологии анализ семей с данным фенотипом или пар сибсов. Это, несомненно, резко усложнит формирование выборок, что особенно справедливо для семейных исследований. Но с другой стороны это повысит эффективность анализа ассоциаций и позволит в меньшей степени учитывать этнические особенности изучаемых лиц.

Необходимо также подчеркнуть значение более точного определения фенотипа заболевания с клинической и биохимической точки зрения. При этом будет возможно формирование максимально однородных подгрупп больных, отличающихся между собой только по какому-то одному фенотипу, например, две группы больных ИНСД, отличающихся только по степени поражения сосудов определенных органов и тканей. Сопоставление таких подгрупп даст возможность подойти к выявлению генов, ответственных за отдельные клинико-биохимические составляющие фенотипа мультифакториального заболевания. Дальнейший синтез информации о таких генах позволит сформировать целостный взгляд на все этапы развития заболевания - от первичных механизмов формирования патологии до развития самых поздних осложнений.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Милосердова, Ольга Валерьевна, Москва

1. Асеев М.В., Скакун В.Н., Баранов B.C. Анализ аллельного полиморфизма четырех коротких тандемных повторов в популяции северозападного региона России.//Генетика, 1995, Т.31 (6), 839-845.

2. Бедный М.С. Медико-демографическое изучение населения // М., Медицина, 1978.

3. Дедов И.И., Клиноко-иммунологические аспекты сахарного диабета.// Терапевтический архив, 1999, Т.71 (10), 78-80.

4. Животовский Л.А. Популяционная биометрия. // М., Наука, 1984.

5. Краснопольская К.Д., Миренбург Т.В. Биохимическая диагностика наследственных болезней под редакцией Козловой.// М.ВОНЦ, 1986 с 53-75

6. Моляка Ю.К, Петрук С.В., Кирьянов С.А., Джибладзе Д.Н., Чечет-кин О.А., Щербатых Т.В., Рогаев И.Е. Анализ ассоциаций полиморфизма в гене ангиотензинпревращающего фермента при ишемиче-ском инсульте.// Журнал неврологии и психиатрии, 1998, Т. 6, 35-37

7. Оганов Р.Г., Перова Н.В., Мамедов М.Н., Метельская В.А.// Терапевтический Архив, 1998, Т. 70, 19-23

8. Погода Т.В., Никонова А.Л., Колосова Т.В., Людвигова Е.К., Перова Н.В., Лимборская С.А. Аллельные варианты генов апо В и апо C-II у больных ишемической болезнью сердца и у здоровых лиц в московской популяции // Генетика, 1995, Т. 31, 1007-1012.

9. Ю.Райков А.Н., Халфен Э.Ш., Кошечкин В.А., Соколова М.А. Липиды крови как фактор реализации наслественной предрасположенности к ИБС //Кардиология, 1989. Т. 6, 14-19.

10. Шадрина М.И., Сломинский П.А., Жидко Н.И., Перова Н.В., Лим-борская С.А., Анализ полиморфизма ангиотензиногена у больных ишемимической болезнью сердца и в случайной выборке в московской популяции.// Генетика, 1998, Т. 33, 290-294.

11. Шадрина М.И., Сломинский П.А., Перова Н.В., Лимборская С.А., Анализ полиморфизма 5'концевой области аполипопротена В у больных ишемической болезнью сердца.// Генетика, 1996, Т. 32, 187193.

12. Aglio, E., Delsignore, R., Reaven, G.M. Hyperinsulinemia in a normal population as a predictor of non-insulin-dependent diabetes mellitus, hypertension, and coronary heart disease: The Barilla factory revisited.// Metabolism, 1999, V. 48, 989-994.

13. Almind K., Inoue G., Pedersen O., Kahn C. R., A common amino acid polymorphism in insulin receptor substrate-1 causes impaired insulin signaling: evidence from transfection studies.// J. Clin. Invest., 1996, V. 97, 2569-2575.

14. Asamoach A., Yanamandra K., Thurmon T.F., Richter R., Green R., Lakin Т., Martin С., 11 deletion in angiotensin converting enzyme (ACE) gene is common among African Americans with essential hypertension.// Clin. Chim. Acta, 1996, V.254, 41-46.

15. Barley J., Blackwood A., Carter N.D., Angiotensin converting enzyme deletion/insertion polymorphism, association with ethnic origin.// J. Hypertens, 1994, V.12, 995-997.

16. Berge K.E., Berg К., Polymorphisms at the angiotensinogen (AGT) and angiotensin II type 1 receptor (AT1R) loci and normal blood pressure. // Clin. Genet., 1998, V.53(3), 214-219.

17. Berge, К. E., Berg, K., No effect of insertion/deletion polymorphism at the ACE locus on normal blood pressure level or variability.// Clin. Genet. 1994, V. 45, 169-174.

18. Bladbjerg E.M., Andersen-Ranberg K., de Maat M.P., Kristensen S.R., Jeune В., Gram J., Jespersen J., Longevity is independent of common variations in genes associated with cardiovascular risk.// Thromb. Hae-most.,1999, V.82(3), 1100-1105.

19. Bohlender J, Menard J, Ganten D, Luft FC Angiotensinogen concentrations and renin clearance : implications for blood pressure regulation.// Hypertension 2000, V.35(3),P.780-786

20. Bohlender J, Menard J, Ganten D, Luft FC Angiotensinogen concentrations and renin clearance: implications for blood pressure regulation.// Hypertension 2000, V.35(3),P.780-786

21. Cambien F., Alhenc-Gelas F., Herbeth В., Andre J. L., Rakotovao R., Gonzales M. F., Allegrini J., Bloch C. , Familial resemblance of plasma angiotensin-converting enzyme level, the Nancy study.// Am. J. Hum. Genet.,1988, V.43, 774-780.

22. Chen, Y.D.-I., Insulin resistance and atherosclerosis.// Diabetes Reviews, 1997, V. 5,331-342.

23. Cleland J.G., Health economic consequences of the pharmacological treatment of heart failure.// Eur. Heart J., 1998, V.19, 32-39.

24. Corvol P., Soubrier F., Jeunemaitre X. Molecular genetics of the renin-angiotensin-aldesterone system in human hypertension // Patologie biologie. 1997.45.P.229-23

25. Corvol P., Soubrier F., Jeunemaitre X. Molecular genetics of the renin-angiotensin-aldesterone system in human hypertension // Patologie biologie,1997.45.P.229-23

26. Deeb S. S.; Peng R., Structure of the human lipoprotein lipase gene.// Biochemistry, 1989, V.28, 4131-4135.

27. Devlin R. H., Deeb S., Brunzell J., Hayden M. R., Partial gene duplication involving exon-Alu interchange results in lipoprotein lipase deficiency.// Am. J. Hum. Genet., 1990, V. 46, 112-119.

28. Doria A., Warram J.H., Krolewski A.S., Genetic predisposition to diabetic nephropathy, evidence for a role of the angiotensin I-converting enzyme gene.//Diabetes, 1994, V.43, 690-695.

29. Drayna D., Lawn R. M., Multiple RFLPs at the human cholesteryl ester transfer protein (CETP) locus.//Nucleic Acids Res., 1987, Y. 15, 4698.

30. Dudley C, Keavney B, Casadei B, Conway J, Bird R, Ratcliffe P., Prediction of patient responses to antihypertensive drugs using genetic polymorphisms: investigation of renin-angiotensin system genes.// J. Hypertens., 1996, V.14, 259-262.

31. Dzimiri N., Basco C., Moorji A., Meyer B.F., Angiotensin-converting enzyme polymorphism and the risk of coronary heart disease in the saudi male population.// Arch. Pathol. Lab. Med, 2000, V.124,531-534.

32. Emi M., Wilson D. E., Iverius P.-H., Wu L., Hata A., Hegele R., Williams R. R., Lalouel J.-M., Missense mutation (gly-to-glul88) of human lipoprotein lipase imparting functional deficiency.// J. Biol. Chem., 1990, V. 265,5910-5916.

33. Evans A. E., Poirier O., Kee F., Lecerf L., McCrum E., Falconer Т., Crane J., O'Rourke D. F., Cambien F., Polymorphisms of the angiotensin-converting-enzyme gene in subjects who die from coronary heart disease.//Quart. J. Med., 1994, V.87,211-214.

34. Faure-Delanef L., Baudin В., Beneteau-Burnat В., Beaudoin J.C., Giboudeau J., Cohen D., Plasma concentration, kinetic constants, andgene polymorphism of angiotensin I-converting enzyme in centenarians.// Clin. Chem., 1998, V.44(10), 2083-2087.

35. Fernandez-Llama P., Poch E., Oriola J., Botey A., Rivera F., Revert L., Angiotensinogen gene M235T and T174M polymorphisms in essential hypertension, relation with target organ damage// Am. J. Hypertens., 1998, V.l 1(4 Pt 1),439-444.

36. Ferns G. A. A., Stocks J., Ritchie C., Galton D. J., Genetic polymorphisms of apolipoprotein C-III and insulin in survivors of myocardial infarction.// Lancet II, 1985, V.3, 300-303.

37. Furuta H., Guo D.-F., Inagami Т., Molecular cloning and sequencing of the gene encoding human angiotensin II type 1 receptor// Biochem. Biophys. Res. Commun,1992, V.l83, 8-13.

38. Fu-Tien Chiang, Kwan-Lih Hsu, Wie-Ming Chen, Chuen-den Tseng, Yung-Zu Tseng, Determination of angiotensin-converting enzyme gene polymorphism, stepdown PCR increases detection of geterozygotes // Clinical Chemistry, 1998,V.44 (6), 1353-1356.

39. Gaillard I., Clauser E., Corvol P., Structure of human angiotensinogen gene// DNA, 1989,V.8, 87-99.

40. Ghosh S., Collins F.S., The geneticist's approach to complex disease // Annu. Rev. Med.,1996, V. 47, 333-353.

41. Giner V., Poch E., Bragulat E., Oriola J., Gonzalez D., Coca A., De La Sierra A., Renin-angiotensin system genetic polymorphisms and salt sensitivity in essential hypertension.// Hypertension, 2000, V.35(l Pt 2), 512-517

42. Goetz R.M., Morano I., Calovini Т., Studer R., Holtz J., Increased expression of endothelial constitutive nitric oxide synthase in rat aorta during pregnancy.// Biochem. Biophys. Res. Commun., 1994, V. 205(1), 905-910.

43. Grzeszczak W., Zychma M.J., Lacka В., Zukowska-Szczechowska E., Angiotensin I- converting enzyme gene polymorphisms, relationship tonephropathy in patients with non-insulin dependent diabetes mellitus.// J. Am. Soc. Nephrol., 1998, V.9, 1664-1669.

44. Guo X., Rotimi C., Cooper R., Luke A., Elston R. C., Ogunbiyi O., Ward, R., Evidence of a major gene effect for angiotensinogen among// Nigerians. Ann. Hum. Genet, 1999, V. 63, 293-300.

45. Hegele R.A., Brunt H., Connelly Ph.W., Genetic and biochemical factors associated with variation in blood pressure in genetic isolate // Hypertension, 1996, V. 27, 308-312

46. Hibberd M.L., Millward B.A., Demaine A.G., The angiotensin I-converting enzyme (ACE) locus is strongly associated with age and duration of diabetes in patients with type I diabetes.// J. Diabetes Complications, 1997, V.ll(l), 2-8.

47. Hingorany A.D., Sharma P.,Jia H.,Hopper R.,Brown M., Blood pressure and the M235T polymorphism of the angiotensinogen gene// Hypertension. 1996;V28; P.907-911

48. Hingorany A.D., Sharma P.,Jia H.,Hopper R.,Brown M., Blood pressure and the M235T polymorphism of the angiotensinogen gene// Hypertension. 1996;V28; P.907-911

49. Hixson J.E., Powers P.K. Detection and characterization of new mutations in the human angiotensinogen gen (AGT) // Human Genetics. 1995. V. 96. P. 110-112.

50. Hixson J.E., Powers P.K. Detection and characterization of new mutations in the human angiotensinogen gen (AGT) // Human Genetics. 1995. V. 96. P. 110-112.

51. Hixson J.E., Powers P.K, Detection and characterization of new mutations in the human angiotensinogen gen (AGT) // Human Genetics., 1995, V. 96, 110-112.

52. Hobart P. M., Fogliano M., O'Connor B. A., Schaefer I. M. Chirgwin J. M., Human renin gene, structure and sequence analysis// Proc. Nat. Acad. Sci.,1984, V.81, 5026-5030.

53. Hsieh M.C., Lin S.R., Hsieh T.J, Hsu C.H., Chen H.C., Shin S.J., Tsai J.H, Increased frequency of angiotensin-converting enzyme DD genotype in patients with type 2 diabetes in Taiwan.// Nephrol. Dial. Transplant, 2000, V.15(7),1008-1013.

54. Hubert C, Houot A.M., Corol P., Soubrier F., Structure of the angiotensin I-converting enzyme gene//J. Biol. Chem.,1991, V.266, 15377-15383

55. Hunley Т.Е., Julian B.A, Phillips III J.A., Angiotensin converting enzyme gene polymorphism, Potential silencer motif and impact on progression in IgA nephropathy// Kidney Int., 1996, V.49, 571-577.

56. Hunt S.C, Geleijnse J.M, Wu L.L, Witteman J.C, Williams R.R, Grob-bee D.E, Enhanced blood pressure response to mild sodium reduction in subjects with the 235T variant of the angiotensinogen gene.// Am. J. Hy-pertens, 1999, V.12(5), 460-466.

57. Hunt SC, Geleijnse JM, Wu LL, Witteman JC, Williams RR, Grobbee DE, Enhanced blood pressure response to mild sodium reduction in subjects with the 235T variant of the angiotensinogen gene.// Am J Hyper-tens, 1999, V. 12(5),P.460-466

58. Iwai-N., Shimoike H., Ohmichi N., Kinoshita M. Angiotensinogen gene and blood pressure in the Japanese population // Hypertension, 1995, V. 25, 688-693.

59. Jeffers B.W., Estacio R.O., Raynolds M.V., Schrier R.W., Angiotensin-converting enzyme gene polymorphism in non-insulin dependent diabetes mellitus and its relationship with diabetic nephropathy.//Kidney Int., 1997, V.52(2), 473-477.

60. Jeunemaitre X., Lifton R. P., Hunt S.C., Williams R.R., Lalouel J.M., Absence of linkage between the angiotensin converting enzyme locus and human essential hypertension // Nature genetics, 1992, V.l, 72-75.

61. Jeunemaitre X., Soubrier F., Kotelevtsev Yuri V. et. al., Molecular basis of human hypertension , role of angiotensinogen // Cell, 1992, V. 71, 169-180.

62. Karathanasis S., Lusis A.J., Rotter J.I., Sparkes R.S., Lipoprotein metabolism: high density lipoproteins: molecular genetics of coronary heart artery disease : candidate genes and processes in atherosclerosis // 1992, 140-171

63. Kevin J., McLaughlin, Paul N. Harden, Shinichiro Ueda et al., The role of genetic polymorfisms of angiotensin-converting ensyme in the progression of renal disease // Hypertension, 1996, V.28, 912-915.

64. Kido Y., Burks, D. J. Withers, D. Bruning, J. C., Kahn C. R., White M. F., Accili D., Tissue-specific insulin resistance in mice with mutations in the insulin receptor, IRS-1, and IRS-2.// J. Clin. Invest., 2000, V. 105, 199-205.

65. Kimura S., Mullins J.J., Bunnemmann B. et al. High blood pressure in transgenic mice carrying the rat angiotensinogen gene // E.M.B.O., 1992, V. 11, 821-827.

66. Knapp M., Seuchter S.A., Bauer M.P., Linkage analysis in nuclear families, optimality criteria for affected sib-pair tests // Hum. Hered., 1994, V.44,37-43.

67. Kotelevtsev Yu.V, Clauser E, Corvol P, Soubrier F. Dinucleotide repeat polymorphism in human angiotensinogen gen // Nucl Acids Res. 1991. V. 19. P. 6978

68. Kotelevtsev Yu.V, Clauser E, Corvol P, Soubrier F. Dinucleotide repeat polymorphism in human angiotensinogen gen // Nucl Acids Res. 1991. V. 19. P. 6978

69. Kunapuli S. P., Prasad G. L., Kumar A., Expression of human angiotensinogen cDNA in Escherichia coli// J. Biol. Chem.,1987, V.262, 7672-7675.

70. Laakso M., Malkki M., Kekalainen P., Kuusisto J., Deeb S. S., Insulin receptor substrate-1 variants in non-insulin-dependent diabetes.// J. Clin. Invest., 1994, V. 94, 1141-1146.

71. Luft F.C., Bad genes, good people, association, linkage, longevity and the prevention of cardiovascular disease.// Clin.Exp. Pharmacol. Physiol., 1999, V. 26(7), 576-579.

72. Mailly F., Palmen J., Muller D. P. R., Gibbs Т., Lloyd J., Brunzell J., Durrington P., Mitropoulos K., Betteridge J., Watts G., Lithell H., Angelico F., Humphries S. E., Talmud P.J., Familial lipoprotein lipase

73. L) deficiency: a catalogue of LPL gene mutations identified in 20 patients from the UK, Sweden, and Italy.// Hum. Mutat., 1997, V. 10, 465-473.

74. Matsutani A., Janssen R., Donis-Keller H., Permutt M. A., A polymorphic (CA)n repeat element maps the human glucokinase gene (GCK) to chromosome 7p.//. Genomics, 1992, V. 12, 319-325.

75. Mattei M.-G., Hubert C., Alhenc-Gelas F., Roeckel N., Corvol P., Soubrier F., Angiotensin-I converting enzyme gene is on chromosome 17. (Abstract)// Cytogenet. Cell Genet., 1989, V.51, 1041.

76. McCarthy M., Weighing in on diabetes risk.// Nature Genet., 1998, V. 19: 209-210.

77. Menard J., El Amrani A.-I., Savoie F and Bouhnik J. Angiotensinogen: an attractive and underrated participant in hypertension and inflammation//Hypertension. 1991. V. 18. P. 705-706

78. Miruiri S., Hemmi H., Kumanomidou H., Decreased renal ACE mRNA levels in healthy subjects with II ACE genotype and diabetic nefropathy (abstract)// J. Am. Soc. Nephrology, 1997,V.5, 115A.

79. Mishra S. К, Helms С, Dorsey D., Permutt M. A, Donis-Keller H, A 2-cM genetic linkage map of human chromosome 7p that includes 47 loci.// Genomics, 1992, V. 12, 326-334.

80. Morris B.J, Zee R.Y.L, Schrader A.P, Different frequencies of angiotensin-converting enzyme genotypes in older hypertensive individulas //J. Clin. Invest, 1994, V.94, 1085-1089.

81. Murphy T. J, Alexander R. W, Griendling К. K, Runge M. S, Bernstein К. E, Isolation of a cDNA encoding the vascular type-1 angiotensin II receptor//Nature, 1991, V.351, 233-236.

82. Nagi D.K, Mansfield M.W, Stickland M.H, Grant P.J, Angiotensin converting enzyme (ACE) insertion/deletion (I/D) polymorphism, and diabetic retinopathy in subjects with IDDM and NIDDM.// Diabet. Med, 1995. V.12, 997-1001.

83. Niu T, Chen C, Yang J, Wang B, Wang Z, Schork N, Fang Z, Xu X, Blood pressure and the T174M and M235T polymorphisms of the angiotensinogen gene.// Ann. Epidemiol, 1999, V.9(4), 245-253.

84. Ohno T, Kawazu S, Tomono S., Association analyses of the polymorphisms of angiotensin-converting enzyme and angiotensinogen genes with diabetic nephropathy in Japanese non-insulin-dependent diabetics.//Metabolism, 1996, V.45, 218-222

85. Pakendorf В., Spitsyn V.A.,Padewald A., Genetitic structure of a Sauha population from Sibiria and etnic affinities.// Human Biology 1999, V.71 (2), P. 231-244.

86. Pratt, R. E., Flynn, J. A., Hobart, P. M., Paul, M., Dzau, V. J. Different secretory pathways of renin from mouse cells transfected with the human renin gene. J. Biol. Chem. 263,1988, 3137-3141

87. Raynolds M.V., Bristow M.R., Bush E.V., Abraham W.T., Lowes B.D., Zisman L.S., Taft C.S., Perryman M.B. Angiotensinconverting DD genotype in patients with ischaemicor idiopathic dilated cardiomyopatgy//. Lancet, 1993, 342, 1073-1075.

88. Reaven, G.M., Do high carbohydrate diets prevent the development or attenuate the manifestations (or both) of Syndrome X?// Current Opinion in Lipidology, 1997, V. 8, 23-27.

89. Rigat В., Hubert C., Corvol P., Soubrier FPCR detection of the insertion/deletion polymorphism of the human angiotensin convertingenzyme gene (DCPl)(dipeptidyl carboxypeptidase 1) //Nucl. Acids Res., 1992,V. 20, 1433

90. Ringel J, Beige J, Kunz R, Distler A, Sharma AM Genetic variants of the renin-angiotensin system, diabetic nephropathy and hypertension// Diabetologia, 1997, V.40,193-199

91. Rotimi C, Puras A, Cooper R, McFarlane-Anderson N, Forrester T, Ogunbiyi O, Morrison L, Ward R, Polymorphisms of renin-angiotensin genes among Nigerians, Jamaicans, and African Americans.// Hypertension 1996 Mar,27(3 Pt 2),558-563.

92. Russell D. W., Schneider W. J., Yamamoto Т., Luskey K. L., Brown M. S., Goldstein J. L., Domain map of the LDL receptor, sequence homology with the epidermal growth factor precursor.// Cell, 1984, V. 37, 577-585.

93. Rutledge D.R., Browe C.S., Kubilis P.S., Ross E.A., Analysis of two variants of the angiotensinogen gene in essential hypertensive African-Americans // Am. J. Hypertens, 1994. V. 7, 651-654.

94. SadoshimaJ, Isumo S Molecular characterization of angiotensin II— induced hypertrophy of cardiac myocytes and hyperplasia of cardiac fibroblasts. Critical role of the ATI receptor subtype.//Circ Res. 1993 Sep,73(3),413-423

95. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Habor Laboratory press, 1989. 479 p.

96. Schachter F, Faure-Delanef L, Guenot F, Rouger H, Froguel P, Lesueur-Ginot L, Cohen D Genetic associations with human longevity at the APOE and ACE loci.// Nat Genet, 1994, V.6, 29-32.

97. Schmidt S. Ritz E Angiotensin I converting enzyme gene polymorphism and diabetic nephropathy in type II diabetes// Nephrol Dial Transplant 1997,12 Suppl 2, 37-41.

98. Schunkert H, Hense H.W, Holmer S.P, Stender M, Pers Z, Keil U, Lorell B.H, Riegger G.A. Association between a deletion polymorpism of the angiotensin-converting enzyme gene and left ventricular hypertrophy//N. Engl. J. Med, 1994, 330, 1634-1638

99. Sigusch HH, Vogt S, Gruber U, Reinhardt D, Lang K, Surber R, Farker K, Muller S, Hoffmann Angiotensin-I-converting enzyme DD genotype is a risk factor of coronary artery disease//Scand J Clin Lab Invest, 1997,V.57, P. 127-132.

100. Sparkes R. S, Drayna D, Mohandas T, Klisak I, Heinzmann C, Lawn R, Lusis A. J, Assignment of cholesterol ester transfer protein (CETP) gene to human 16q21. Cytogenet.// Cell Genet, 1987, V. 46, 696.

101. Sudhof Т. C., Goldstein J. L., Brown M. S., Russell D. W., The LDL receptor gene, a mosaic of exons shared with different proteins.// Science, 1985, V. 228,815-822.

102. Summers K.M. Relationship between genotype and phenotype in monogenic diseases , revelance to polygenic diseases // Human mutation. 1996. V.7. P.283-293.

103. Sun X. J., Rothenberg P., Kahn C. R., Backer J. M., Araki E., Wilden P. A., Cahill D. A., Goldstein B. J., White M. F., Structure of the insulin receptor substrate IRS-1 defines a unique signal transduction protein.// Nature, 1991, V. 352, 73-77.

104. Tarnow L, Cambien F, Rossing P, Nielsen FS, Hansen BV, Ricard S, Poirier O, Parving HH Angiotensinogen gene polymorphisms in IDDM patients with diabetic nephropathy.// Diabetes, 1996, V. 45, 367-369.

105. Walker W.G., Whelton P.K., Saito H., and Hermann J. Relation between blood pressure and renin, renin substrate, angiotensin II, aldesterone and urinary sodium and potassium in 574 ambulatory subjects.//Hypertension, 1979,V.l, 287-291.

106. Walsh P., Metzger D.,Higuchi R. Chelex 100 as a medium for simple extraction of DNA for PCR-based typing from forensic material //Bio Techniques, 1991, V.10, 506-513.

107. Wang J, Zhu X, Yang L, Zhou W, Li H, Fu H, Zhu L, Yuan S., Relationships of angiotensinogen gene M235T variant with diabetic nephropathy in Chinese type 2 diabetes mellitus// Chung Hua I Hsueh I Chuan Hsueh Tsa Chih, 1999, V.165, 299-302.

108. Wilson J. M., Grossman M., Raper S. E., Baker J. R., Jr., Newton R. S., Thoene J. G., Clinical protocol, ex vivo gene therapy of familial hypercholesterolemia.//Hum. Gene Therapy, 1992, V. 3, 179-222.

109. Wolf U., The genetic contribution to phenotype // Human Genet., 1995, 976-985.

110. Yang Y., Merrill D.C., Thompson M.W., Robillard J.E., Sigmund C.D., Functional expression of human angiontensinogen gene in transgenic mice // J. Biol. Chem., 1994, V. 269, 32497-32502.

111. Yip, J., Facchini, F.S., Reaven, G.M. Resistance to insulin-mediated glucose disposal as a predictor of cardiovascular disease.// Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 1988, V. 83, 2773-2776.

112. Young R.P., Chan J.C., Critchley J.A., Poon E., Nicholls G., Cockram C.S., Angiotensinogen T235 and ACE insertion/deletion polymorphisms associated with albuminuria in Chinese type 2 diabetic patients // Diabetes Care, 1998, V.213, 431-437.

113. Youssoufian H., Chance P., Tuck-Muller С. M., Jabs E. W., Association of a new chromosomal deletion del(l)(q32q42). with diaphragmatic hernia, assignment of a human ferritin gene// Hum. Genet., 1998, V. 78,267-270.