Активность, состав лектинов клеточной стенки и модификация цитоскелета при действии антистрессовых регуляторов роста и закаливании к холоду озимой пшеницы

Гараева, Лилиана Дамировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Активность, состав лектинов клеточной стенки и модификация цитоскелета при действии антистрессовых регуляторов роста и закаливании к холоду озимой пшеницы
ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Активность, состав лектинов клеточной стенки и модификация цитоскелета при действии антистрессовых регуляторов роста и закаливании к холоду озимой пшеницы"

(г

Гараева Лилиана Дамировна

АКТИВНОСТЬ, СОСТАВ ЛЕКТИНОВ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ И МОДИФИКАЦИЯ ЦИТОСКЕЛЕТА ПРИ ДЕЙСТВИИ АНТИСТРЕССОВЫХ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА И ЗАКАЛИВАНИИ К ХОЛОДУ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ

03.00.12 - физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Гараева Лилиана Дамировна

03.00.12 - физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена на кафедре физиологии и биотехнологии растений Казанского государственного университета им. В.И Ульянова-Ленина Министерства образования и науки РФ.

Научный руководитель:

кандидат биологических наук, доцент

Ольга Арнольдовна Тимофеева

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор

Людмила Петровна Хохлова

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Фарида Миннихановна Шакирова

доктор биологических наук Татьяна Анатольевна Горшкова

Ведущая организация: Мордовский государственный

университет (г.Саранск)

Зашита состоится г (ЮгУЛ 2005 I, в часов на заседании

диссертационного совета К 002.005.01 по присуждению ученой степени кандидата биологических наук при Казанском институте биохимии и биофизики КазНЦ РАН (420111, Казань, а/я 30, ул. Лобачевского, 2/31).

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной библиотеке Казанского научного центра РАН

Автореферат разослан «Ж» и\/ /у у_2005 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета, „

кандидат биологически нау ^ ^Ш^^4^ А.Б Иванова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Решение проблемы продуктивности, интродукции и акклиматизации растений тесно связано с изучением вопросов устойчивости растений к неблагоприятным условиям окружающей среды

Как известно, абсцизовая кислота является медиатором при ответах растений на низкие температуры, индуцирующим развитие морозоустойчивости через изменение экспрессии генов и синтез новых белков (Hughes and Dunn, 1996; Четверикова, 1999; Tomashow, 1999) Принимая во внимание высокую лабильность и чувствительность цитоскелета к различным физико-химическим факторам среды, предполагается, что цитоскелет может быть системой, воспринимающей как гормональные, так и низкотемпературные сигналы (Хохлова и др., 1999). Благодаря интегральной роли в структурной архитектуре клеток, цитоскелет контролирует пространственно-временную организацию и координацию клеточного метаболизма в норме и при стрессе и, в конечном итоге, сохранение структурно-функциональной целостности клеток В последнее время выдвигается гипотеза, согласно которой цитоскелетные белки и образуемые ими структуры - актиновые и тубулиновые филаменты -дифференцированно вовлекаются в развитие процессов холодовой адаптации: под влиянием АБК - на начальных этапах закаливания (сигнальная функция), а под действием низких температур - на более поздних его стадиях (Олиневич и Хохлова, 2003).

Новый этап в исследовании ответных реакций растительных клеток на воздействия окружающей среды связан с развитием представлений о том, что взаимодействия между цитоскелетом, плазмалеммой и клеточной стенкой играют ключевую роль в восприятии и проведении внешнего сигнала путем создания динамической механической связи го компонентов цитоскелета (Nick, 1999; Туркина, Соколов, 2001). Несмотря на имеющиеся сведения о присутствии лектинов в клеточных стенках (Комарова и др., 1993) и их зависимости от структурной целостности цитоскелета (Тимофеева и др , 1999), практически ничего неизвестно о механизмах регуляции их активности и изменении состава при воздействии неблагоприятных условий внешней среды, в частности низких температур. Изучению этих вопросов должно способствовать также использование антистрессового регулятора роста цитокииинового типа действия картолина (Баскаков, 1988), повышающего устойчивость растений к различным неблагоприятным факторам среды (Бочарова и др., 1983; Сарват и др., 1993; Шакирова и др.,1985), в том числе и к морозу (Трунова и др., 1988; Хохлова и др., 1990; Абдрахимова и др., 1998).

Цель и задачи исследования. Цель работы состояла в изучении зависимости между лектинами клеточной стенки и структурным состоянием цитоскелета при действии регуляторов роста в связи с низкотемпературным закаливанием растений озимой пшеницы

Исходя из указанной цели, были поставлены следующие задачи'

• исследовать влияние АБК на вызванные антицитоскелетными агентами (оризалин, цитохалазин Б) изменения активности пектинов клеточной стенки;

• изучить действие картолина на активность растворимых и связанных с клеточной стенкой пектинов в норме и при реорганизации тубулинового цитоскелета;

• сопоставить эффекты АБК и картолина на цитоскелет-индуцированные изменения активности лектинов у различающихся по морозоустойчивости сортов озимой пшеницы;

• выявить оризалин-индуциро ванные изменения митотической активности и длительности фаз митоза в корневых меристемах растений, обработанных АБК и картолином;

• выделить лектины клеточной стенки, определить их молекулярную массу и полипептидный состав;

• исследовать полипептидный состав и функциональную активность лектинов клеточной стенки в процессе низкотемпературного закаливания растений.

Научная новизна работы. Впервые показано, что АБК оказывает генотипически-обусловленное влияние на цитоскелет-опосредованное повышение активности лектинов клеточной стенки, наиболее выраженное на фоне закаливания у маломорозоустойчивого сорта Безостая 1. По-видимому, экзогенная АБК необходима в качестве дополнительного к действию низких температур фактора, повышающего устойчивость растений к холоду через увеличение стабильности цитоскелета, лишь в тканях маломорозоустойчивого сорта.

Впервые обнаружено, что активность растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов соргоспецифически увеличивается при обработке картолином. Снижение эффекта оризалина на активность лектинов под влиянием картолина свидетельствует о его важной роли в регуляции стабильности микротрубочек.

Впервые охарактеризован полипептидный состав лектинов клеточной стенки. Показано, что через 0.5 ч гипотермии исчезали лектины с мол м. 42.5 и 78 кДа и появлялись - с мол.м. 34.5, 37, 72 и 69 кДа, а также увеличивалось

содержание арабиногалактановых белков Появление лектина 69 кД, являющегося арабиногалакгановым белком, в первые часы действия гипотермии и исчезновение его к концу холодового закаливания позволяет предположить участие этого белка в пусковых механизмах формирования защитных реакций клеток через повышение динамической нестабильности кортикального цитоскелета.

Практическая значимость работы. Выявление субклеточных и молекулярных механизмов адаптации и устойчивости растений к абиотическим стрессовым факторам среды представляет интерес при решении задач по созданию и скринингу новых сортов и форм растений, более приспособленных к нестабильным условиям среды. Установление коррелятивных зависимостей между активностью лектинов и физико-химической реорганизацией цитоскелета при низкотемпературном закаливании позволяет использовать лекганы в качестве высокочувствительных цитоскелет-зависимых биодиагностикумов, характеризующих термоадаптивный потенциал и морозоустойчивость растений разных генотипов озимой пшеницы

Полученные данные могут быть использованы в учебном процессе при чтении курсов по физиологии и биохимии растений, фитострессологии и цитофизиологии растений.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на международном симпозиуме «Plant cytoskeleton: molecular keys for biotechnology» (Ялта, 1998), на V международной конференции «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1999), на VII молодежной конференции ботаников (Санкт-Петербург, 2000), на международной конференции «Актуальные вопросы экологической физиологии растений в 21 веке» (Сыктывкар, 2001), на Ш съезде биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), на международном симпозиуме «Plant cytoskeleton- functional diversity and biotechnology implications» (Киев, 2002), на V съезде общества физиологов растений (Пенза, 2003), на международной научной конференции «Новая геометрия природы» (Казань, 2003), на всероссийской конференции «Актуальные вопросы ботаники и физиологии растений» (Саранск, 2004), на всероссийской конференции «Стрессовые белки растений» (Иркутск, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 работ

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения и выводов В работе представлено 17 рисунков и 2 таблицы. Список литературы включает 326 наименований, из которых 228 иностранных

1. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследований служили корни и листья проростков озимой пшеницы (Triticum aesttvum L.) трех отличающихся по морозоустойчивости сортов: Безостая 1 - маломорозоустойчивый, Мироновская 808 -среднеморозоустойчивый, Альбидум 114 - высокоморозоустойчивый сорт.

Растения выращивали в лабораторных условиях в кюветах на водопроводной воде при освещенности ЮОВт/м2 и 12-часовом фотопериоде. Закаливание проводили в термокамере в течение 7 суток при 3° С. Структурную модификацию цитоскелета осуществляли in situ путем введения в интактные ткани растений ингибиторов полимеризации тубулиновых и актиновых белков - оризалина и цитохалазина Б, соответственно. Растворы оризалина (корни -ЮмкМ, листья - 15мкМ) и цитохалазина Б (корни - ЮмкМ, листья - 15мкМ) вводили в ткани листьев путем вакуум-инфильтрации в течение 20 минут, а в ткани корней - путем инкубации в течение 3 часов В контрольном варианте навеску тканей инфильтрировали (листья), либо инкубировали (корни) в бидистиллированной воде.

Растворимые лектины экстрагировали 5 мл 0.05М HCl (Шакирова и др, 1983), лектины клеточных стенок - 0.05% раствором тритона Х-100 и 0 9% раствором NaCl (Комарова, 1995). Дальнейшая очистка лектинов клеточной стенки включала высаливание сульфатом аммония (30% насыщения) и дифференциальное денатурирование ацетоном

Для анализа состава лектинов клеточной стенки использовали хроматографическую систему с колонкой (55см х 0 8см, Sephadex G75) Элюцию проводили буферной смесью (0 9% NaCl, 50мМ K-фосфатный буфер, pH 7.4) со скоростью 0 5 мл/мин. Адсорбированные на колонке лектины элю иро вали 0.1М раствором D-глюкозы в буферной смеси Объем отбираемых фракций составлял 0.5 мл.

Активность лектинов определяли по минимальной концентрации белка, вызывающей агглютинацию трипсинизированных эритроцитов I группы крови (Луцик и др., 1981). Содержание белка в выделенных экстрактах определяли по методу (Bradford, 1976). Арабиногалакгановые белки идентифицировали по реакции с реагентом Ярива (Yariv, 1962).

Митотическую активность клеток корневых меристем анализировали микроскопически методом давленых препаратов по величине митотического индекса (отношение делящихся клеток к общему числу клеток, выраженное в %).

Исследования включали две схемы опытов. В первой серии опытов незакалеиные растения трех сортов озимой пшеницы без АБК и картолина выращивали при 23° С 9 суток. К половине 6-суточных проростков добавляли раствор АБК (30 мкМ) или картолина (0.001%), затем они росли с регуляторами роста в течение 3-х суток (возраст незакаленных проростков с АБК или картолином - 9 суток). Закаливание 7-суточных растений проводили в термокамере при 3° С в течение 7 суток. Общий возраст закаленных растений, выращенных как с АБК и картолином, так и без них составлял 14 дней Антицитоскелетные агенты оризалин и цитохалазин Б вводили в ткани корней и листьев вышеописанными методами.

В экспериментах по исследованию митоза незакаленные растения имели возраст 5 суток. Закаливание 4-х суточных проростков проводили в течение 7 суток (общий возраст закаленных растений -11 суток). Регуляторы роста АБК (30 мкМ) и картолин (0.001%) вносили в среду выращивания за сутки до закаливания (общий возраст растений, выращенных на среде с добавлением АБК и картолина, составил 5 суток). Корни инкубировали в растворе оризалина (10 мкМ) 3 ч.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.1. Влияние АБК на оризалин-индуцированные изменения активности лектинов

На рис. 1 представлены результаты опытов по влиянию АБК на оризалин-индуцированные изменения активности лектинов В наших экспериментах наблюдали гормон - индуцированное снижение чувствительности активности лектинов к действию оризалина в листьях и особенно в корнях незакаленных растений по сравнению с вариантом без АБК. Причем реакция активности лектинов на действие гормона прямо коррелировала со степенью морозоустойчивости сорта. Уменьшение влияния оризалина на активность лектинов под действием АБК, вероятно, связано с тем, что абсцизовая кислота может принимать участие в стабилизации цигоскелетных структур, что согласуется с данными иммуноцитохимических анализов (Хохлова, Олиневич, 2003). Тонким механизмом, который участвует в изменении стабильности питоскелета под действием АБК, может быть индуцируемое гормоном изменение содержания свободного Са2+ (Sheen, 1998). Принимая во внимание, что мембранно - цитоскелетный комплекс является динамичной системой, чувствительной к уровню ионов Са2+ (Марков, Медведева, 1998), и связывание

Безостая!

корни

12 12 12 -АБК +АБК -АБК

корни

12 12 12 -АБК +АБК -АБК

Мироновская 808

12 12 12 -АБК +АВК -АБК

корни

12 12 +АБК -АБК

Альбидум 114

12 12 12 -АБК +АВК -АБК

Рис.1 Оризалин-нндуцированные изменения активности лектинов клеточной стенки в обработанных АБК корнях и листьях незакаленных (А) и закаленных (Б) проростков трех сортов озимой пшеницы: 1- контроль, 2-оризалин.

с филаментами цитоскелета ассоциированных с плазмалеммой белков регулируется наличием этих катионов (Aderem, 1997), можно предположить, что эффект АБК опосредован изменением концентрации кальция

Совместная обработка АБК и низкими температурами корней и листьев растений Безостая 1 и Мироновская 808 приводила к уменьшению влияния оризалина на активность лектинов, наиболее выраженному у маломорозоустойчивого сорта (рис.1). Обработка растений Альбидум114 холодом и АБК усиливала чувствительность лектинов клеточной стенки к действию ингибитора полимеризации микротрубочек. Вероятно, экзогенная АБК является дополнительным к действию низких температур фактором, повышающим устойчивость растений к холоду через увеличение стабильности тубулинового цитоскелета, лишь в растениях маломорозоустойчивого сорта

2.2.АБК-зависимые изменения активности лектинов у обработанных цитохалазином Б растений

Как известно, реорганизация актинового цитоскелета является необходимым условием развития морозоустойчивости растений (Quellet et al., 2001; Хохлова, Олиневич, 2002). Однако механизмы, при помощи которых микрофиламенты принимают участие в трансдукции низкотемпературного сигнала и холодовой акклиматизации, окончательно не выяснены. Вероятно, определенную роль в этих процессах играет абсцизовая кислота.

Обработка АБК незакаленных растений усиливала влияние цитохалазина Б на активность лектинов клеточных стенок в корнях и листьях Безостой 1 и корнях Мироновской 808, тогда как в корнях и листьях Альбидум 114 и листьях Мироновской 808 АБК подавляла вызванные цитохалазином изменения активности лектинов (рис.2). Увеличение эффекта цитохалазина на активность лектинов клеточной стенки может быть связано с деструктирующим действием гормона на актиновый цитоскелет (Era, Lee, 2001; Хохлова, Олиневич, 2003). Вероятно, АБК, оказывая влияние на процесс фосфорилирования актансвязывающих белков, изменяет степень полимеризации микрофиламентов и, как следствие, взаимодействие лектинов клеточной стенки с плазматической мембраной.

Совместная обработка АБК и низкими температурами приводила к снижению эффекта цитохалазина на активность лектинов клеточной стенки в листьях растений Безостая 1 и не изменяла его у Мироновской 808 и Альбидум 114 по сравнению с действием одних низких температур. В корнях закаленных растений гормон снижал чувствительность лектинов к действию

Безостая 1

мэрии

12 12 -АБК +АБК

Мироновская 808

12 12 12 12 -АБК +АБК -АБК +АБК

300| 250

200-И"

■ 150-К 100 50

корни _ А Б

Альбидум!14

листья А Б

1111 1111

12 12 12 12 -АБК +АБК -АБК +АБК

Рис.2 Цитохалазин-индудированные изменения активности лектинов клеточной стенки в обработанных АБК корнях и листьях незакаленных (А) и закаленных (Б) проростков трех сортов озимой пшеницы: 1- контроль, 2-цитохалазин Б.

цитохалазина Б у Безостой 1 и Мироновской 808, но повышал у Альбидум 114 (рис.2) по сравнению с вариантом без АБК. Одной из причин различной сортовой реакции активности лектинов на модификацию актинового цитоскелета в условиях низкотемпературного закаливания и обработки АБК может быть неодинаковая степень взаимодействия актиновых и тубулиновых структур. Показано, что взаимосвязь микрофиламентов с плазматической мембраной зависит от структурной целостности и организации кортикальных микротрубочек (Tominaga et al., 1997) Л.П. Хохловой с сотр. (2003) обнаружено, что низкие температуры значительно уменьшали стабилизирующий эффект АБК на микротрубочки в клетках Альбидум 114 Возможно, снижение стабильности тубулинового цитоскелета высокоморозоустойчивого сорта в этих условиях способствует деполимеризации актиновых филаментов и, как следствие, высвобождению лектинов клеточной стенки.

2.3. Действие картолина на активность лектинов

Цитокинины и их структурные аналоги, а также соединения цитокининового типа действия проявляют защитный эффект по отношению к неблагоприятным факторам окружающей среды, в том числе и к низким температурам (Кулаева, 1973; 1982).

Картолин сортоспецифично повышал активность растворимых лектинов, в большей степени после 7-суточного закаливания (рис.3) Вероятно, картолин поддерживает активное состояние белоксинтезирующего аппарата, способствуя сборке полисом и индуцируя увеличение общего количества рибосом (Кулаева, 1983; Шаренкова и др, 1983), что отражается на активности растворимых лектинов В то же время защитный эффект картолина может проявляться и через изменение гормонального баланса растений Так, Ф М Шакировой с сотр. (2001) обнаружено, что предобработка проростков озимой пшеницы картолином индуцировала накопление АБК. По-видимому, картолин, включаясь в механизм регуляции синтеза стрессовых белков через повышение уровня эндогенной АБК, вызывает накопление растворимых лектинов и повышение их активности.

Выращивание растений на среде с картолином приводило к усилению активности лектинов клеточной стенки в корнях незакаленных растений трех сортов озимой пшеницы по сравнению с контролем (рис.3). При этом наибольший эффект картолина наблюдали у маломорозоустойчивого сорта Безостая 1, что может быть следствием повышенной отзывчивости этого

Кечпг.тяя 1

1234 1234 1234 1234

Митюновская 808

1234 1234 1234 1234

Альбитпгм 114

12 3 4 12 3 4

Рис 3 Влияние картолина на оризалин-индуцированные изменения активности растворимых лектинов (РЛ) и лектинов клеточных стенок (ИКС) в корнях незакаленных (А) и закаленных (Б) проростков трех сортов озимой пшеницы' 1-контроль, 2- оризалин, 3-картолин, 4-картолин +оризалин

copra на данный препарат. Вероятно, эффект регулятора роста может быть опосредован АБК, которая приводит к деполимеризации актиновых филаментов (Lemichez et al, 2001; Хохлова и др., 2002). В связи с этим повышение активности лектинов клеточной стенки в этих условиях может быть результатом разборки элементов цитоскелета под влиянием эндогенной АБК, увеличение содержания которой может вызвать картолин. После 7-суточного закаливания картолин практически не оказывал влияния на лектины клеточной стенки (рис.3). По-видимому, стимулирующее действие картолина на активность лектинов клеточной стенки является недолговременным и необходимо для последующего усиления адаптационных процессов в клетке.

2.4. Влияние картолина на активность лектинов оризалин-обработанных растений

В траясдукции гормонального сигнала ключевая роль принадлежит цитоскелету (Клячко, 2003).

В следующей серии экспериментов изучали влияние картолина на оризалин-индуциро ванные изменения активности лектинов в корнях отличающихся по морозоустойчивости сортов озимой пшеницы.

Картолин уменьшал эффект оризалина на активность лектинов клеточной стенки в растениях всех трех сортов, и особенно у Безостой 1. Принимая во внимание способность АБК оказывать стабилизирующее влияние на цитоскелетные структуры (Хохлова, Олиневич, 2003), можно предположить, что реакция лектинов на оризалин при добавлении картолина также является АБК-опосредованной.

Картолин, добавленный в среду выращивания незакаленных растений, уменьшал эффект оризалина на активность растворимых лектинов у всех исследуемых сортов озимой пшеницы Вероятно, способность картолина вызывать сборку полисом и активировать работу РНК-полимеразы I (Кулаева, 1983) может оказывать защитное действие на состояние трансляционного аппарата при разборке микротрубочек, что проявляется в снижении влияния оризалина на активность растворимых лектинов.

При добавлении картолина в среду выращивания закаленных растений наблюдали уменьшение влияния оризалина на активность лектинов клеточной стенки у сорта Безостая 1, тогда как у Мироновской 808 и Альбидум 114 эффект ингибитора полимеризации микротрубочек на фоне картолина изменялся на противоположный По-видимому, это связано с

положительным влиянием картолина на поверхностный аппарат растительной клетки, включающий клеточную стенку, плазмалемму и цитоскелет

Картолин уменьшал оризалин - индуцированное снижение активности растворимых лектинов в закаленных растениях сорта Безостая 1 и Мироновская 808, тогда как у Альбидум 114 эффект оризалина на фоне картолина усиливался.

Известно, что картолин принимает участие в регуляции кальциевого гомеостаза, предотвращая значительные колебания его концентрации в цитозоле (Хохлова и др., 1993) Это также может быть одной из причин стабилизирующего влияния картолина на микротрубочки, что и нашло отражение в уменьшении эффекта оризалина на активность лектинов

2.5. Оризалин-индуцированные изменения митотического индекса и относительной длительности фаз митоза при действии картолина и АБК

Рост растений осуществляется за счет деления и растяжения клеток. Согласно современным представлениям, в регуляции ростовых процессов растительного организма в норме и при стрессе большое значение отводится фитогормонам (Полевой, Полевой, 1992) Наряду с гормонами тубулиновые и актиновые филаменты, а также образующие их белки играют ключевую роль в процессах роста и развития растений, определяя форму клеток и органов, деление и дифференцировку органов и тканей (Lloyd et al., 1996; Barlow et al, 2000).

Добавление в среду выращивания незакаленных растений АБК приводило к снижению митотического индекса (МИ) всех исследуемых сортов и увеличению количества телофаз по сравнению с контролем (табл.1) Закаливание растений усиливало влияние АБК на митотическую активность корней озимой пшеницы Торможение клеточного деления, по- видимому, играет решающую роль в развитии адаптивных реакций растений.

По данным литературы, АБК и низкие температуры индуцируют экспрессию регулятора клеточного деления ICK1, который, взаимодействуя с циклин-зависимой протеинкиназой (CDK А) и цюслиновым белком D3, ингибирует CDK комплекс (Wang et al, 1998; Stalls et al., 2000)

Выращивание как незакаленных, так и закаленных растений на среде с картолином приводило к увеличению митотического индекса, особенно у сорта Альбидум 114 (табл.1). Причем в адаптированных к холоду растениях происходило увеличение числа телофаз. Вероятно, картолин, являясь

Таблица 1

Влияние АБК и картолина на оризалин-индуцированные изменения митотического индекса в корнях незакаленных и закаленных проростков трех сортов озимой пшеницы

Варианта Безостая 1 Мироновская 808 Альбидум 114

МИ, % I % от 1 контроля ми,% %от контроля МИ,% % от контроля

Незакаленные

Контроль 4,57*0,20 100 5,15±0,17 100 3,75±0,2 100

АБК 3,86±0,18 80,5 2,06±0,14 40,0 2,85±0,08 76,0

Картолин 5,17±0,24 113,1 6,09±0,1 118,3 6,96±0,13 185,6

Оризалин 7,97±0,90 174,4 7,13±0,21 138,4 9,11 ±0,56 242,9

АБК+ оризалин 5,29±0,36 115,8 3,04±0,35 59,0 5,2±0,17 138,7

Картолин+ оризалин 5,68±0,15 124,3 5,48±0,23 106,4 8,8±0,22 234,7

Закаленные (3°С, 7 с уток)

Контроль 4,25±0,11 100 4,56±0,15 100 3,62±0,1 100

АБК 3,30±0,44 77,6 1,43±0,13 31,2 1,93±0,1 53,3

Картолин 4,63±0,27 108,9 5,11±0,19 112,1 5,38±0,15 148,6

Оризалин 7,79±0,13 183,3 6,89±0,36 151,8 8,45±0,1 233,1

АБК+ оризалин 4,4±0,31 103,5 2,29±0,24 50,2 3,93±0,11 108,6

Картолин+ оризалин 5,14±0,18 120,9 5,22±0,15 114,5 7,91 ±0,20 218,5

цитокининового типа действия, индуцирует клеточное деление, приводя к сокращению продолжительности клеточного цикла меристемы корней озимой пшеницы. В то же время, принимая во внимание данные об увеличении активности растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов под влиянием картолина (рис.3), можно предположить, что простимулированное им повышение уровня лектинов оказывает влияние на митотическую активность меристематических клеток.

Процессы деления и растяжения клеток контролируются растительным цитоскелетом и, прежде всего, микротрубочками (Nick, 1998) В наших экспериментах наблюдали увеличение МИ и исчезновение телофаз в корнях

проростков, инкубированных в течение 3 ч в оризалине (рис 4), что, вероятно, связано с образованием метафазно-анафазного блока Обработка картолином и АБК незакаленных растений приводила к уменьшению влияния оризалина на митотическую активность и сопровождалась появлением телофаз (табл 1). Эти результаты согласуются с данными, приведенными в разделах 2 1 и 2.4, что может быть следствием стабилизации цитоскелетных структур под действием данных регуляторов роста.

В закаленных растениях оризалин также повышал МИ у всех исследуемых сортов, но у Мироновской 808 и Альбидум 114 в меньшей степени, чем в незакаленных растениях (табл.1); при этом наблюдали появление телофаз, что обусловлено преодолением метафазно-анафазного блока. В этих условиях картолин и АБК снижали чувствительность митотической активности к действию оризалина в корнях закаленных проростков всех исследуемых сортов; причем в большей степени, чем в незакаленных растениях (табл.1). Принимая во внимание, что обработка картолином повышала содержание АБК в клетках растений (Шакирова, 2001), можно предположить, что эффект регулятора роста на оризалин-индуцированные изменения митотического индекса опосредован накоплением гормона. Полученные результаты согласуются с данными иммунофлуоресцентного анализа (Олиневич, Хохлова, 2003), согласно которым совместная обработка проростков озимой пшеницы низкими температурами и АБК приводила к усилению флуоресценции тубулиновых структур в клетках зоны меристемы в большей степени, чем действие данных факторов по отдельности.

Вероятно, закаливание и регуляторы роста оказывают влияние на клеточный цикл и ростовые процессы растений в стрессовых условиях через динамическую реорганизацию тубулинового цитоскелета.

2.6 Изменение состава лектинов клеточной стенки в процессе низкотемпературного закаливания растений

Показано, что клеточная стенка растений, являясь метаболически активным и динамичным компартментом (Горшкова и др. 1998), вовлекается в реакцию формирования морозоустойчивого состояния озимых растений (Rajashekar, Laña, 1996; Заботина и др , 2003). В клеточных стенках растений проростков озимой пшеницы при закаливании возрастает уровень лектиновой активности (Комарова и да, 1993; Тимофеева и др., 1999). В то же время, для проявления растением морозоустойчивости имеет значение не только

количественный, но и качественный состав белков, а также их функциональная активность.

При гель-фильтрации белков клеточной стенки лектиновая активность обнаруживалась во фракциях, содержащих белки с молекулярной массой 17 5, 42 5, 54 и 78 кДа (рис 4). Большая часть фракций, элюированных 0.1 М раствором D-глюкозы, не агглютинировала эритроциты Среди них возможно присутствие моновалентных лектинов с одним лишь центром связывания углеводов, специфичным к глюкозе; это могут быть арабиногалактановые белки (АГБ) (Nothnagel, 1997). Из четырех лектиновых белков, полученных после гель-фильтрации, только один (17.5 кД) преципитировал с реагентом Ярива, т.е. являлся АГБ.

Низкотемпературное закаливание в течение 30 мин существенно повышало общее содержание белков клеточной стенки; при этом происходили значительные изменения общего профиля элюции белков. Так, исчезали лектины с мол. м. 42.5 и 78 кДа, и появлялись новые с мол. м 34.5,37,69 и 72 кДа (рис.4).

Что касается обнаружения лектиновой активности во фракции 14.5 кДа вместо 17.5 кДа в контроле, мы склонны считать, что это один и тот же белок Известно, что модификация АГБ может происходить без участия механизмов транскрипции и трансляции за счет изменений в гликозилировании этих белков (Kapteyn et al., 1999). По всей вероятности, при действии низких температур происходит отщепление какого-то фрагмента этого белка.

Лектин 37 кДа предположительно может быть классическим лектином пшеницы - агглютинином зародыша пшеницы (АЗП). Вероятно АЗП, резкое накопление которого происходит при разных неблагоприятных ситуациях, относится к экскретаруемы м белкам, выделение которого в наружную среду может иметь значение для предохранения ослабленных в этих условиях растений от возможной почвенной инфекции (Шакирова, 2001). В этих условиях наблюдали повышение содержания белка и количества пиков (10 против 7 в контроле) во фракции, элюированной глюкозой. В этой фракции преимущественно выявлялись АГБ. Вновь появившийся лектин 69 кДа также давал окраску с реагентом Ярива, т.е., по-видимому, был АГБ. По данным Baluska et al. (2003), в растительных клетках в качестве молекул, связывающих цитоскелет и клеточную стенку растений, могут выступать арабиногалактановые белки. Так, деполимеризация актиновых филаментов под

Номер фракции

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47

Номер фракции

51 кДа

34,5 кДа 17.5 кДа! IкГI иЧч^н

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47

Номер фракции

Рис 4 Профиль элюирования при гель-проникающей хроматографии белков клеточных стенок корней незакаленных (А), закаленных в течение 0 5ч (Б) и 7 сут (В) проростков озимой пшеницы.

воздействием цитохалазина Д приводила к изменению конформации АГБ и как следствие - к нарушению контактов между клеточной стенкой и плазмалеммой (Загёаг е1 а1., 2003).

После 7 сут низкотемпературного закаливания содержание белка значительно уменьшалось, что согласуется с данными литературы о некотором снижении уровня метаболических процессов после завершения фазы адаптации (Браун, Моженок, 1987) Следует отметить исчезновение из спектра белков лектинов с мол м. 37 и 69 кДа (рис 4) По-видимому, в связи с повышенной устойчивостью закаленных растений уменьшается секреция АЗП в окружающую среду, чем можно объяснить его исчезновение из спектра белков клеточной стенки Особый интерес может представлять лектин 69 кДа, появление которого отмечено после 0,5 ч гипотермии Поскольку он относится к АГБ, которые могут быть как адгезивными, так и сигнальными молекулами, возможно, его появление можно быть связано с пусковыми механизмами формирования защитных реакций клеток

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проблема адаптации является одной из центральных в биологии и прежде всего в физиологии растений и растениеводстве. В связи с этим большое внимание уделяется изучению общих неспецифических физиолого-биохимических защитных реакций, к числу которых можно отнести сдвиги в гормональном балансе, вносящие свой вклад в изменение структуры и функции клеток и способствующие переключению функциональной активности клеток в нормальных условиях на так называемые стрессовые подпрограммы. Кроме того, не вызывает сомнения роль абсцизовой кислоты в повышении стресс -устойчивости растений АБК - фитогормон комплексного действия является медиатором при ответах растений на различные факторы окружающей среды, в том числе и на низкие температуры Известно, что индукция процессов холодовой адаптации связана с накоплением эндогенной АБК (Четверикова, 1999) и изменением экспрессии генов (Тотаз1ю\¥, 1999) и зависит от состояния тубулинового и актинового цитоскелета (Хохлова, Олиневич, 2003) Обнаруженное нами сортоспецифичное влияние АБК на цитоскелет-индуцированные изменения активности лектинов клеточной стенки в процессе низкотемпературного закаливания растений озимой пшеницы позволяет предположить участие поверхностного аппарата растительной клетки в трансдукции гормонального и низкотемпературного сигналов.

Кроме АБК, важное место в формировании устойчивости растений к действию неблагоприятных факторов отводится цитокининам (Кулаева, 1991) В наших экспериментах под действием антистрессового препарата цитокининового типа действия картолина отмечено изменение активности растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов. Вероятно, картолин, включаясь в механизм регуляции синтеза стрессовых белков через изменение гормонального баланса растительной клетки и поддержание активного состояния белоксинтезирующего аппарата (Шакирова, 2001), вызывает накопление лектинов, способствуя, таким образом, повышению неспецифической устойчивости растений. Учитывая полученные данные по уменьшению влияния оризалина на активность лектинов под действием картолина, можно предположить, что защитный эффект картолина осуществляется через стабилизацию цитоскелетных структур в условиях их деполимеризации.

Клеточная стенка растений, являясь метаболически активным и динамичным компартментом, вовлекается в реакцию формирования морозоустойчивого состояния озимых растений (1Ц)'а8Ьекаг, Ьайа, 1996; Заботина и др., 2003). В ходе холодового закаливания во внеклеточном матриксе растений увеличивается содержание экстенсина, активируется ряд ферментов, изменяется белковый состав (ВогаП е! а1., 1987; Weisner et а!., 1990) Наблюдаемые нами количественные и качественные изменения лектинов клеточной стенки при начальном воздействии гипотермии позволяют предположить их важную роль в трансдукции сигнала Обнаруженные в спектре лектинов клеточных стенок арабиногалактановые белки являются одновременно адгезивными и сигнальными молекулами (БЬиИг й а!., 1998; Ма]е\узка-8а\ука, Nothaлgel, 2000) Предполагается, что они могут выступать в качестве молекул, связывающих цитоскелет и клеточную стенку растений (Ва1шка е1 а1. 2003; 5аг(1аг е! а!., 2003) Известно, что цитоскелет является одной из первичных «мишеней» действия низких температур. Так, кратковременная разборка тубулиновых (АЬбгасЬтапоуа е! а!., 2003) и акгиновых (Оп/аг et а1., 2000) филаментов необходима для развития адаптации и повышения терморезистентности растений.

Вероятно, появление и/или модификация лектинов клеточных стенок, в т ч и арабиногалактановых белков, под влиянием низких температур приводит к изменению трансмембранных взаимодействий в системе клеточная стенка -плазмалемма - цитоскелет В результате повышается динамическая нестабильность микротрубочек и микрофиламентов, что запускает каскад ответных реакций, обеспечивающих скоординированное функционирование

защитно-приспособительных систем в ктетках и формирование морозоустойчивости растений. На основании полученных результатов предполагается схема участия лектинов клеточной стенки в индукции процессов низкотемпературной адаптации растений (рис.5).

Первые часы воздействия низких положительных температур

Появление новых и / или модификация

лектинов клеточных стенок, в т ч и арабиногалакгановых белков

Реорганизация транс мембранных взаимодействий в системе клеточная стенка - плазмалемма - цитоскелет

I "

Повышение динамической нестабильности микротрубочек и микрофиламентов

--—.----,---,

Индукция морозоустойчивости растений

Рис.5 Схема участия лектинов клеточной стенки в индукции процессов низкотемпературной адаптации.

ВЫВОДЫ

микротрубочек оризалину в большей степени у маломорозоустойчивого сорта. Полученные данные указывают на участие АБК в регуляции взаимодействий между цитоскелетом и лектинами клеточной стенки.

2 Обработка растений антистрессовым препаратом картолином вызывала увеличение митотического индекса корневых меристем, активности растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов, что может быть связано с механизмами защитного действия этого препарата на растения озимой пшеницы.

3. Снижение чувствительности лектинов и митотической активности к оризалину под влиянием картолина может быть следствием стабилизирующего действия регулятора роста на цитоскелетные структуры в условиях их деполимеризации.

4 Показано, что через 0 5ч гипотермии происходят значительные изменения общего профиля элюции белков, заключающиеся в исчезновении лектинов с мол м 42.5 и 78 кДа, появлении новых - с мол.м 34.5, 37, 69 и 72 кДа и увеличении содержания арабиногалактановых белков

5. Установлено, что после низкотемпературной адаптации снижалось содержание белков клеточной стенки и исчезали лектины с мол м 37 и 69 кДа, что соответствует уменьшению лектиновой активности в конце закаливания

6. Обнаружено, что лектины 17.5 и 69 кДа, а также большинство лектинов, элюированных глюкозой, являются арабиногалактановыми белками, что позволяет предположить их участие в образование контактов между клеточной стенкой и цитоскелетом.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Lectin activity connected with cytoskeleton stability / Timofeeva O., Khokhlova L., Trifonova T et al. // Cell Biology International.-1997 -V.21, №12 -P 898-899.

2. Активность лектинов при модификации структуры цитоскелета и действии абсцизовой кислоты в процессе низкотемпературного закаливания растений / О.А.Тимофеева, JIП. Хохлова, ТВ Трифонова и др //Сб Грани сотрудничества (к 10-летию Соглашения о сотрудничестве между Казанским и Гиссенским Университетами) - Казань- УНИПРЕСС, 1999 -С.339-349.

3 Cytoskeleton induced alterations of the lectin activity in winter wheat under cold hardening and ABA / Timofeeva O., Khokhlova L., Belayeva N. et al // Cell Biology Interaational.-2000.-V.24, №6 -P. 375-381.

4. Роль кальция в регуляции стабильности микротрубочек / OA Тимофеева, Л.П. Хохлова, Ю.Ю. Чулкова и др // Вестник Башкирского Университета.-2001 .-№2(Ш).-С. 124-126.

5. Активность лектинов при изменении кальциевого статуса клеток / Н.Е. Беляева, Л.Д. Гараева, О.А.Тимофеева и др. // Цитология.-2002.-Т.44г№5 -С. 124-126.

6. Microtubules regulate activity of cell wall lectins in cells of Triticum aestivum L. plants during cold hardening / Timofeeva O., Khokhlova L., Chulkova Y., Garaeva L. // Cell Biology International.-2002.-V.26, №10 -P. 921-922

7. Cytoskeleton induced alterations of the lectin activity at modification of calcium signaling system / Timofeeva O., Khokhlova L., Chulkova Y., Garaeva L // Bulgarian Journal of Plant Physiology.-2003.-V.XXIX, №3.-P. 150-156.

8. Лектиновая и митотическая активность корневых меристем озимой пшеницы в связи с действием оризалина / Ю.Ю. Чулкова, Л.Д. Гараева, О.А. Тимофеева, Л.П. Хохлова / Цитология,-2005.-Т.247, №2.-С.163-171.

9. Активность лектинов в связи со структурной целостностью цитоскелета / О.А. Тимофеева, Л.П. Хохлова, Н.Е. Беляева и др. // Физиология растений - наука Ш тысячелетия: Тез.докл,- Москва, 1999.-Т.1.-С.138-139.

10. Влияние абсцизовой кислоты на активность лектинов при модификации цитоскелета / О.А. Тимофеева, Л.П. Хохлова, Т.В. Трифонова и др. // Регуляторы роста и развития растений: Тез.докл. V международной конференции- Москва, 1999.-С. 68-69.

11 Гараева, Л.Д. Изменение активности лектинов при модификации актин-тубулиновых взаимодействий в условиях низкотемпературного закаливания растений озимой пшеницы / Л.Д. Гараева, Ю.Ю Чулкова // Студент и научно-технический прогресс: Мат. XXXVIII международной студенческой конференции. - Новосибирск, 2000.-С. 105-106.

12. Чулкова Ю.Ю Оризалин-индуцированные изменения активности лектинов у разных сортов генотипов озимой пшеницы / Ю.Ю. Чулкова, Л.Д. Гараева // Ломоносов: Материалы международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам,- Москва, 2000 -С.80-81.

13. Взаимосвязь между цитоскелетом и лектинами клеточной стенки/ Л.Д. Гараева, Ю.Ю. Чулкова, Н.Е. Беляева, О.А. Тимофеева // Тез.докл молодежной конференции ботаников.-Санкт-Петербург, 2000.-С. 169-170.

14 Роль лектинов в ответной реакции растений на абиотический и биотический стресс / О.А. Тимофеева, Л.П. Хохлова, Ю.Ю. Чулкова и др.// Актуальные вопросы экологической физиологии растений в 21 веке: Сб.тез / Сыкг. гос. ун-т,-Сыктывкар, 2001.-С. 345.

15. Гараева, JI.Д. Механизмы регуляции активности лектинов / Л.Д. Гараева, О.А.Тимофеева, Ю.Ю. Чулкова // Тез.докл. Ш съезда биохимического общества. - Санкт-Петербург, 2002.-С.434

16. Механизмы регуляции активности лектинов в процессе низкотемпературной адаптации растений / Л.Д. Гараева, Ю.Ю. Чулкова, С.А.Поздеева, O.A. Тимофеева // Новая геометрия природы: Труды объединенной межд. науч. конф./ Изд-во КГУ.-Казань, 2003.-С.76-79.

17. Гараева, Л.Д. Состав лектинов клеточных стенок в условиях низкотемпературного закаливания / Л.Д. Гараева, С.А. Поздеева, O.A. Тимофеева // Физиология растений - основа фитобиотехнологи: Тез. докл./Пенз.гос.ун-т.-Пенза, 2003.- С 262-263.

18. Роль цитоскелета и сигнальных систем в регуляции активности лектинов при неблагоприятных воздействиях / O.A. Тимофеева, Ю.Ю. Чулкова, Л.Д. Гараева, Н.Е.Гараева // Актуальные вопросы ботаники и физиологии растений Мат-лы конф./ Изд-во Мордовского ун-та. - Саранск, 2004.-С.253-255.

19 Изменение лектинов клеточной стенки в процессе низкотемпературного закаливания проростков озимой пшеницы / O.A. Тимофеева, Л.Д. Гараева, Ю.Ю. Чулкова, С.А. Поздеева // Стрессовые белки растений: Мат-лы Всеросс. науч. конф./ Изд-во Института географии СО РАН.-Иркугек, 2004-С.116-120.

»12920

РНБ Русский фонд

2006-4 13519

Отпечатано в ООО «Печатный двор» г Казань, ул Журналистов, 1/16, оф 207 Тел 72-74-59, 41-76-41, 41-76-51 Лицензия ПД№7-0215 от 01 11 01 Выдана Поволжским межрегиональным территориальным управлением МПТР РФ Подписано в печать 21 05 2005 г Уел пл 1, 5 Заказ № К-2937 Тираж 100 жз Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная Печать - ризография

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Гараева, Лилиана Дамировна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Лектины растений

1.1.1. Общие сведения о лектинах

1.1.2. Физиологическая роль лектинов в растениях

1.1.3. Гормональная регуляция содержания лектинов в растениях

1.2. Общие сведения о цитоскелете растений

1.2.1. Микротрубочки

1.2.2. Микрофиламенты

1.2.3. Промежуточные филаменты

1.3. Кортикальный цитоскелет, плазмалемма и клеточная стенка как 33 единый структурный поверхностный аппарат клетки

1.4. Фитогормоны и цитоскелет растений

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Схема опытов

2.3. Выделение лектинов

2.4. Определение активности лектинов

2.5. Определение митотического индекса

2.6. Приготовление реагента Ярива

2.7. Регуляторы роста

2.8. Модификация компонентов цитоскелета в клетках растений

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Влияние АБК на оризалин-индуцированные изменения 59 активности лектинов

3.2. АБК-зависимые изменения активности лектинов у обработанных 65 цитохалазином Б растений

3.3. Действие картолина на активность лектинов

3.4. Влияние картолина на активность лектинов оризалин- 77 обработанных растений

3.5. Влияние картолина и АБК на митотический индекс и 81 относительную длительность фаз митоза

3.6. Действие регуляторов роста на изменения митотической 87 активности на фоне оризалина

3.7. Фракционный состав лектинов клеточной стенки

3.8. Изменения состава лектинов клеточной стенки в процессе 96 низкотемпературного закаливания растений

Введение Диссертация по биологии, на тему "Активность, состав лектинов клеточной стенки и модификация цитоскелета при действии антистрессовых регуляторов роста и закаливании к холоду озимой пшеницы"

Решение проблемы продуктивности, интродукции и акклиматизации растений тесно связано с изучением вопросов устойчивости растений к неблагоприятным условиям окружающей среды.

Как известно, абсцизовая кислота является медиатором при ответах растений на низкие температуры, индуцирующим развитие морозоустойчивости через изменение экспрессии генов и синтез новых белков [1,2,3]. Принимая во внимание высокую лабильность и чувствительность цитоскелета к различным физико-химическим факторам среды, предполагается, что цитоскелет может быть системой, воспринимающей как гормональные, так и низкотемпературные сигналы [4]. Благодаря интегральной роли в структурной архитектуре клеток, цитоскелет контролирует пространственно-временную организацию и координацию клеточного метаболизма в норме и при стрессе и, в конечном итоге, сохранение структурно-функциональной целостности клеток. В последнее время выдвигается гипотеза, согласно которой цитоскелетные белки и образуемые ими структуры - актиновые и тубулиновые филаменты - дифференцированно вовлекаются в развитие процессов холодовой адаптации: под влиянием АБК - на начальных этапах закаливания (сигнальная функция), а под действием низких температур - на более поздних его стадиях [5,6].

Новый этап в исследовании ответных реакций растительных клеток на воздействия окружающей среды связан с развитием представлений о том, что взаимодействия между цитоскелетом, плазмалеммой и клеточной стенкой играют ключевую роль в восприятии и проведении внешнего сигнала путем создания динамической механической связи из компонентов цитоскелета [7,8]. Несмотря на имеющиеся сведения о присутствии лектинов в клеточных стенках [9] и их зависимости от структурной целостности цитоскелета [10], практически ничего не известно о механизмах регуляции их активности и изменении состава при воздействии неблагоприятных условий внешней среды, в частности низких температур. Изучению этих вопросов также должно способствовать использование антистрессового регулятора роста цитокининового типа действия картолина [11], повышающего устойчивость растений к различным неблагоприятным факторам [12,13,14], в том числе и к морозу [15,16,17].

Исходя из указанной цели, были поставлены следующие задачи:

• исследовать влияние АБК на вызванные антицитоскелетными агентами (оризалин, цитохалазин Б) изменения активности лектинов клеточной стенки;

• изучить действие картолина на активность растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов в норме и при реорганизации тубулинового цитоскелета;

• выявить оризалин-индуцированные изменения митотической активности и длительности фаз митоза в корневых меристемах растений, обработанных АБК и картолином;

• выделить лектины клеточной стенки, определить их молекулярную массу и полипептидный состав;

Впервые обнаружено, что активность растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов сортоспецифически увеличивается при обработке картолином. Снижение эффекта оризалина на активность лектинов под влиянием картолина свидетельствует о его важной роли в регуляции стабильности микротрубочек.

Впервые охарактеризован полипептидный состав лектинов клеточной стенки. Показано, что через 0.5 ч гипотермии исчезали лектины с мол.м. 42.5 и 78 кДа и появлялись - с мол.м. 34.5, 37, 72 и 69 кДа, а также увеличивалось содержание арабиногалактановых белков. Появление лектина 69 кД, являющегося арабиногалактановым белком, в первые часы действия гипотермии и исчезновение его к концу холодового закаливания позволяет предположить участие этого белка в пусковых механизмах формирования защитных реакций клеток через повышение динамической нестабильности кортикального цитоскелета.

Практическая значимость работы. Выявление субклеточных и молекулярных механизмов адаптации и устойчивости растений к абиотическим стрессовым факторам среды представляет интерес при решении задач по созданию и скринингу новых сортов и форм растений, более приспособленных к нестабильным условиям среды. Установление коррелятивных зависимостей между изменениями физико-химической организации цитоскелета и лектиновой активности при низкотемпературном воздействии позволяет использовать лектины в качестве высокочувствительных цитоскелетзависимых биодиагностикумов, характеризующих термоадаптивный потенциал и морозоустойчивость растений разных генотипов озимой пшеницы.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на международном симпозиуме «Plant cytoskeleton: molecular keys for biotechnology» (Ялта, 1998), на пятой международной конференции «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1999), на VII молодежной конференции ботаников (Санкт-Петербург, 2000), на международной конференции «Актуальные вопросы экологической физиологии растений в 21 веке» (Сыктывкар, 2001), на П1 съезде биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), на международном симпозиуме «Plant cytoskeleton: functional diversity and biotechnology implications» (Киев, 2002), на V съезде общества физиологов растений (Пенза, 2003), на международной научной конференции «Новая геометрия природы» (Казань, 2003), на всероссийской конференции «Актуальные вопросы ботаники и физиологии растений» (Саранск, 2004), на всероссийской конференции «Стрессовые белки растений» (Иркутск, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения и выводов. В работе представлено 17 рисунков и 2 таблицы. Список литературы включает 326 наименований, из которых 228 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Гараева, Лилиана Дамировна

выводы

1. Установлено сортоспецифическое влияние абсцизовой кислоты на цитоскелет-индуцированные изменения активности лектинов клеточной стенки при адаптации растений к холоду. АБК на фоне закаливания снижала чувствительность лектинов клеточной стенки к ингибитору полимеризации микротрубочек оризалину в большей степени у маломорозоустойчивого сорта. Полученные данные указывают на участие АБК в регуляции взаимодействий между цитоскелетом и лектинами клеточной стенки.

2. Обработка растений антистрессовым препаратом картолином вызывала увеличение митотического индекса корневых меристем, активности растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов, что может быть связано с механизмами защитного действия этого препарата на растения озимой пшеницы.

4. Показано, что через 0.5 ч гипотермии происходят значительные изменения общего профиля элюции белков, заключающиеся в исчезновении лектинов с мол.м. 42.5 и 78 кДа, появлении новых - с мол.м. 34.5, 37, 69 и 72 кДа и увеличении содержания арабиногалактановых белков.

5. Установлено, что после низкотемпературной адаптации снижалось содержание белков клеточной стенки и исчезали лектины с мол.м. 37 и 69 кДа, что соответствует уменьшению лектиновой активности в конце закаливания.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проблема адаптации является одной из центральных в биологии, прежде всего в физиологии растений и растениеводстве. В связи с этим большое внимание уделяется изучению общих неспецифических физиолого-биохимических защитных реакций, к числу которых можно отнести сдвиги в гормональном балансе, вносящие свой вклад в изменение структуры и функции клеток и способствующие переключению функциональной активности клеток в нормальных условиях на так называемые стрессовые подпрограммы. Кроме того, не вызывает сомнения роль абсцизовой кислоты в повышении стресс -устойчивости растений.

АБК - фитогормон комплексного действия является медиатором при ответах растений на различные факторы окружающей среды, в том числе и на низкие температуры [1,2]. Известно, что индукция процессов холодовой адаптации связана с накоплением эндогенной АБК и изменением экспрессии генов и зависит от состояния тубулинового и актинового цитоскелета [4]. Обнаруженное нами сортоспецифичное влияние АБК на цитоскелет-индуцированные изменения активности лектинов клеточной стенки в процессе низкотемпературного закаливания растений озимой пшеницы, позволяет предположить участие поверхностного аппарата растительной клетки, включающего клеточную стенку, плазмалемму и цитоскелет, в трансдукции гормонального и низкотемпературного сигнала.

Помимо АБК важное место в формировании устойчивости растений к действию неблагоприятных факторов отводится цитокининам [280]. В наших экспериментах под действием антистрессового препарата цитокининового типа картолина отмечено изменение активности растворимых и связанных с клеточной стенкой лектинов. Вероятно, картолин, включаясь в механизм регуляции синтеза стрессовых белков через изменение гормонального баланса растительной клетки и поддержание активного состояния белоксинтезирующего аппарата, вызывает накопление лектинов, способствуя, таким образом, повышению неспецифической устойчивости растений. Учитывая факт уменьшения влияния оризалина на активность лектинов под действием картолина, можно предположить, что защитный эффект картолина осуществляется через стабилизацию цитоскелетных структур в условиях их деполимеризации.

Клеточная стенка растений, являясь метаболически активным и динамичным компартментом, вовлекается в реакцию формирования морозоустойчивого состояния озимых растений [304]. В ходе холодового закаливания во внеклеточном матриксе растений увеличивается содержание экстенсина, активируется ряд ферментов, изменяется ее белковый состав [305,306]. Наблюдаемые нами количественные и качественные изменения лектинов клеточной стенки при начальном воздействии гипотермии позволяют предположить их важную роль в трансдукции сигнала. Обнаруженные в спектре лектинов клеточных стенок арабиногалактановые белки являются одновременно адгезивными и сигнальными молекулами [307,175]. Предполагается, что они могут выступать в качестве молекул, связывающих цитоскелет и клеточную стенку растений [175,196]. Известно, что цитоскелет является одной из первичных «мишеней» действия низких температур. Так, кратковременная разборка тубулиновых [325] и актиновых филаментов [265] необходима для развития адаптации и повышения терморезистентности растений.

Вероятно, появление и/или модификация лектинов клеточных стенок, в т.ч. и арабиногалактановых белков под влиянием низких температур приводит к нарушению трансмембранных взаимодействий в системе клеточная стенка -плазмалемма - цитоскелет. В результате повышается динамическая нестабильность микротрубочек и микрофиламентов, что запускает каскад ответных реакций, обеспечивающих скоординированное функционирование защитно-приспособительных систем в клетках и формирование морозоустойчивости. На основании полученных результатов предполагается схема участия лектинов клеточной стенки в индукции процессов низкотемпературной адаптации растений (рис.18).

Рис.18 Схема участия лектинов клеточной стенки в индукции процессов низкотемпературной адаптации.

Ill

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Гараева, Лилиана Дамировна, Казань

1. Hughes, М.А. The molecular biology of plant acclimation to low temperature / Hughes M.A., Dunn M.A. // J. Exp Bot.-1996.-V.47.-P.291-305.

2. Четверикова, Е.П. Роль абсцизовой кислоты в морозоустойчивости растений и криоконсервации культур in vitro / Е.П. Четверикова // Физиология растений.-1999.-Т.46,№5 .-С.823-829.

3. Thomashow, M.F. Plant cold acclimation: Freezing tolerance genes and regulatory mechanisms / Thomashow M.F. // Annu. Rev. Plant. Physiol. Plant. Mol.Biol.-1999.-V.50.-P.571-599.

4. Олиневич, О.В. Влияние абсцизовой кислоты, низких температур и возраста растений на цитоскелетные и фосфорилированные белки / О.В. Олиневич, Л.П. Хохлова // Биохимия.-2003.-Т.68, вып.б.-С.828-839.

5. Хохлова, Л.П. Реорганизация цитоскелета в клетках Triticum aestivum при закаливании растений к холоду и действии абсцизовой кислоты / Л.П. Хохлова, О.В. Олиневич // Физиология растений.-2003.-Т.50,№4.-С.528-540.

6. Nick, P. Signals, motors, morphogenesis the cytoskeleton in plant development / Nick P. // Plant. Biol.-1999.-V.l.-P.169-179.

7. Туркина, M. В. Миозины моторы актомиозиновой системы подвижности; связь с мембранами и сигнальными системами / М. В. Туркина, О. И. Соколов // Физиология растений.-2001.-Т. 48,№5.-С.788-800.

8. Индуцированные модификаторами цитоскелета изменения активности лектинов при адаптации растений к низким температурам и обработке АБК / О.А. Тимофеева, Л.П. Хохлова, Т.В. Трифонова и др. // Физиология растений.-1999.-Т.46.-С. 181 -186.

9. Комарова, Э.Н. Динамика лектиновой активности клеточных стенок апексов озимой пшеницы в процессе закаливания к морозу / Э.Н. Комарова, Э.И.Выскребенцева, Т.И. Трунова // ДАН.-1993.-Т.329,№5.-С.680-682.

10. Баскаков, Ю.А. Новый антистрессовый препарат цитокининового типа действия / Ю.А. Баскаков // Агрохимия.-1988.-№4.-С.103-105.

11. Влияние картолина на морозостойкость озимой пшеницы / М.А. Бочарова, Т.И. Трунова, А.А. Шаповалов, Ю.А.Баскаков // Физиология растений.-1983.-Т.30.-С.360-364.

12. Сарват, М. Повышение устойчивости проростков пшеницы под влиянием картолина-2 к тепловому шоку / М. Сарват, В.В. Кузнецов, О.Н. Кулаева// Докл. РАСХН.-1993.-№1.-С.9-12.

13. Влияние картолина на белоксинтезирующий аппарат растений пшеницы в связи с устойчивостью к мучнистой росе / Ф.М. Шакирова, Г.Р. Кудоярова, A.M. Ямалеев, М.И. Еркеев // Физиология растений.-1985.-Т.32,-С.396-400.

14. Трунова, Т.И. Рост и морозостойкость растений / Т.И. Трунова, Г.В. Кузина, М.А. Бочарова // Рост и устойчивость растений / Новосибирск: Наука, 1988.-С.133-144.

15. Изменения мембран и энергетических функций митохондрий озимой пшеницы при закаливании и действии картолина / Л.П. Хохлова, О.А. Тимофеева, А.И. Заботин и др. // Физиология растений.-1990.-Т.37,вып.2.-С.308-316.

16. Абдрахимова, Й.Р. Особенности дыхания и морфологии митохондрий узлов озимой пшеницы при действии низких температур икартолина / Й.Р. Абдрахимова, Л.П. Хохлова, Ф.А. Абдрахимов // Физиология растений.-1998.-Т.45, №2.-С.253-261.

17. Boyd, W. Hemagglutinating substances in various plants / Boyd W., RegueraR. // Immunol.-1958.-V.81.-P.333-339.

18. Галайко, P. А. Установление наличия фитогемагглютининов (лектинов) в семенах растений Прикарпатья и их судебно-медицинское значение / Р.А. Галайко // Суд.-мед. экспертиза на службе следствия.-Вып.б.-1971.-С. 162-166.

19. Игнатов, В.В. Углеводузнающие белки лектины / В.В.Игнатов // Соросовский образовательный журнал.-1997.-№2.-С. 14-20.

20. Lis, Н. The biochemistry of plant lectins / Lis H., Sharon H. // Biochemistry ofplants.-1981.-V.6.-P.371-384.

21. Kijne J.W. Root Lectins and Rhizobia / Kijne J.W., Bauchrowitz M.A., Diaz C.I. // Plant Physiol.-1997.-V.l 15.-P.869-873.

22. Марков, Е.Ю. Лектины растений: предполагаемые функции / Е.Ю. Марков, Э.В. Хавкин // Физиология растений.-1983.-Т.30,№5.-С.852-867.

23. Луцик, М.Д. Лектины / М.Д. Луцик, Е.Н. Панасюк, А.Д. Луцик.-Львов: Изд-во при Львов. Ун-те, 1981.-256 с.

24. Peumans, W.J. Lectins as plant defense proteins / Peumans W.J., Van Damme J.M. //Plant Phisiol.-1995.-V.97.- P.175-181.

25. Structure-Function relationship of monocot mannose-binding lectins / Barre A., Van Damme J. M., Peumans W. J., Roug E. // Plant Physiol.-1996.-V.l 12.-P.1531-1540.

26. Barbieri, L. Ribosome-inactivating proteins from plants / Barbieri L., Batelli G.B., Stirpe F. //Biochem.Biophis.Acta.-1993.-V.1154.-P.237-282.

27. Plant chitinases / Collinge D.B., Kragh K.M., Mikkelsen J.D. et al. // Plant J.-1993.-V.3.-P.31-40.

28. Wright, H.T. Evolution of a family of N-acetylglucosamine binding proteins containing the disulfide-rich domain of wheat germ agglutinin / Wright H.T., Sandrasegham G., Wright C.S. // J. Mol. Evol.-1991.-V.33.- P.283-294.

29. Isolation and partial characterization of a new lectin from seeds of the greater celandine (Chelidonium majus) I Pewmans W.J., De Ley M., Stinissen H.M., Broekart W.F. // Plant Physiol.-1985.-V.78.-P.379-383.

30. Waxdal, M.J. Isolation, characterization, and biological activity of five mitogens from pokeweed / Waxdal M.J. // Biochem.J.-1974.-V.13.-P.3671-3676.

31. Chrispeels, M. Lectins, lectin genes, and their role in plant defense / Chrispeels M.J., Raikhel N.V. // The Plant Cell.-1991 .-V.3.-P.1-9.

32. Raikhel, N.V. Characterization of a wheat germ agglutinin-like lectin from adult wheat plants / Raikhel N.V., Mishkind M.L., Palevitz B.A. // Planta.-1984.-V.162.-P.55-61.

33. Raikhel, N.V. Abscisic acid control of lectin accumulation in wheat seedlings and callus cultures / Raikhel N.V., Palevitz B.A., Haigler C.H. // Plant. Physiol1986V.80-P. 161-171.

34. Cammue, B.P.A. Stress-induced accumulation and abscisic acid in roots of wheat seedlings / Cammue B.P.A., Broccaert W.F., Kellens Y.T.S. // Plant PhysioI.-1989.-V.91.-P. 1432-1435.

35. Cammue, B.P.A. Lectin in vegetative tissues of adult barley plants grown under field conditions / Cammue B.P.A., Stinissen H.M., Peumans W.J. // Plant Physiol.-1985.-V.78.-P.384-387.

36. The 22 bp W1 element in the pea lectin promoter is necessary and, as a multimer, sufficient for high gene expression in tobacco seeds / De Pater S., Pham K., Klitsie I., Kijne J.W. // Plant Mol. Biol.-1996.-V.32.-P.515-523.

37. Deglycosylation is necessary but not sufficient for activation of proconcanavalin A / Ramis C., Gomord V., Lerouge P., Faye L. // J. Exp. Bot.-2001.-V.52, №.358.-P.911-917.

38. Mansfield, M.A. Wheat-germ agglutinin is synthesized as a glycosylated precursor / Mansfield M.A., Peumans W.J., Raikhel N.V. // Planta.-1988.-V.173.-P.482-489.

39. A carboxyl-terminal propeptide in necesser for proper sorting of barley lectin to vacuoles of tobacco / Bednarek S.Y., Wilkins T.A., Dombrowsky J.E., Raikhel N.V. // Plant Cell.-1990.-V.2.-P.l 145-1155.

40. Isolation and characterization of new GalNAc/Gal-specific lectin from the sea mussel Crenomytilus Grayanus / Belogortseva N., Molchanova V., Kurika A. et al. // Comp.Biochem.Physiol.-l998.-V. 119, №l.-P.45-50.

41. Лахтин, M.B. Биотехнология лектинов / M.B. Лахтин // Биотехнология.-1989.-Т.5.-С.676-691.

42. Королев, Н.П. Функции лектинов в клетках / Н.П. Королев // Итоги науки и техники: общие проблемы физико-химической биологии.- М.: ВИНИТИ, 1984.-Т. 1 .-С.351-355.

43. Борисова, Н.Н. Адгезивные белки лектины в митохондриях растений и их возможная функция / Н.Н. Борисова, Э.И. Выскребенцева // VII молодежная конференция ботаников: Тез. докл.- Санкт-Петербург,2000.-С.101.

44. Авальбаев, A.M. Множественная гормональная регуляция содержания лектина в корнях проростков пшеницы / A.M. Авальбаев, М.В. Безрукова, Ф.М. Шакирова// Физиология растений.-2001.-Т.48,№5.-С.718-722.

45. Martinez, P. Interaction of Canavalia ensiformis lectins with the vicilins of the seed / Martinez P., Perez G. // International lectin meeting-INTERLEC 20: Mat. 20th Conf.-P.643.

46. Алексидзе, Г.Я. Субклеточная локализация лектинов в корнеплоде сахарной свеклы разного возраста / Г.Я. Алексидзе, Э.И. Выскребенцева // Физиология растений.-1986.-Т.ЗЗ, №2.-С.213-216.

47. Голынская, Е.Л. Фитогемагглютинины генеративных органов растений и их возможное участие в реакции распознавания при взаимодействии пыльцы и пестика / Е.Л. Голынская // Молекулярная биология.-1979.-№2.-С.34-41.

48. Ковалева, Л.В. Спорофитно гаметофитные взаимодействия в системе пыльца-пестик. 1. Лектины клеточных стенок / Л.В. Ковалева, Э.Н. Комарова, Э.И. Выскребенцева // Физиология растений.-1999.-Т.46,№1.- С.98-101.

49. Fowler, J.E. Plant cell morphogenesis. Plasma membrane interactions with the cytoskeleton and cell wall / Fowler J.E., Quatrano R.S. // Annu.Rev.Cell.Dev.Biol.-l 997.-V. 13 .-P.697-743.

50. Комарова, Э.Н. Лектины стеблевых апексов рудбеккии и периллы в процессе перехода к цветению под воздействием фотопериодической индукции / Э.Н. Комарова // Прикладная биохимия и микробиология.-1998.-Т.34,№1.-С.109-114.

51. Casas, I.X. Specificity in the legum -Rhisobium simbiosis / Casas I.X. // Biol, nitrog. fixat. ecol., technol. and physiol.-N.Y.L.-1983.-P.526-529.

52. Линевич, Л.И. Лектины и углевод- белковое узнавание на разных уровнях организации живого / Л.И. Линевич // Успехи биол. химии.-1979.-Т.20.-С.71.

53. Sugar-binding activity of pea lectin enhances heterologous infection of transgenic alfalfa plants by Rhizobium leguminosarum biovar viciae / Van Rhijn P., FujishigeN. A., Lim P. O., Hirsch A. M. //Plant Physiol.-200l.-V. 126.-P. 133-144.

54. Steps toward defining the role of lectins in nodule development in legumes / Hirsch A.M., Brill L.M., Lim P.O. et al. // Symbiosis.-1995.-V.19.-P.155-173.

55. Выделение лектинов из семян и корней люпина (Lupinus luteus L.) и изучение их свойств / С.М. Маличенко, Н.И. Назаренко, Е.В. Кириченко, В.Н.Заец //Физиол. и биохимия культ. раст.-1994.-Т.26,№3.-С.252-256.

56. Антонюк, Л.П. О роли агглютинина зародышей пшеницы в растительно-бактериальном взаимодействии: гипотеза и экспериментальные данные в ее поддержку / Л.П. Антонюк, В.В. Игнатов // Физиология растений.2001.-Т.48,№ 3.-С.427-433.

57. Антонюк, Л.П. Влияние лектина пшеницы на метаболизм Azospirillum brasilense: индукция биосинтеза белков / Л.П. Антонюк, О.Р. Фомина, В .В. Игнатов // Микробиология.-1997.-Т.66, №2.-С.172-178.

58. Соболева, Е.Ф. Гемагглютинин бактерии Azospirillum brasilense Sp 245: очистка и изучение некоторых свойств / Е.Ф. Соболева, А.В. Тугарова, Л.П. Антонюк // VIII Пущинская конференция молодых ученых: Мат.конф.-Пущино, 2001.-С. 161.

59. Лектин-углеводные взаимодействия в системе картофель-возбудитель фитофтороза на уровне растительной плазмалеммы / И.А. Любимова, В.П. Лахтин, Е.П. Шувалова, В.Д. Щербухин // Физиология растений.-1988.-Т.35, №5.-С.595-606.

60. Agglutination of Erwinia stewartii strains with corn agglutinin: correlation with extracellular polysaccharide production and pathogenecity / Bradshaw-Rouse J.J., Whatley M.N., Coplin D.L. et al. // Appl. Enviromental Microbiol.-1981.-V.42.-P.334-350.

61. Segueira, L. Agglutination of avirulent strains of Pseudomonas solanacearum by potato lectin / Segueira L., Graham T.L // Physiol. Plant. Pathol.-1979.-V.11 .-P.43-54.

62. Plant lectins induce the production of a phytoalexin in Pisum sativum / Toyodo K., Miki K., Ichinose Y. et al. // Plant Cell Physiol.-1995.-V.36.-P.799-807.

63. Inhibition of fungal growth by wheat germ agglutinin / Mirelman D., Galun E., Sharon N., Lotan R. //Nature.-1975.-V.256.-P.414-416.

64. О влиянии септариоза колоса на динамику накопления лектина и содержание фитогормонов в развивающихся зерновках пшеницы / Ф.М.Шакирова, И.В. Максимов, P.M. Хайруллин и др. // Физиол. и биохимия культ. растений.-1990.-Т.26.-С.40-45.

65. Шакирова, Ф.М. Участие фитогормонов и лектина пшеницы в ответе растений на стрессовые воздействия: Автореф. дис. д-ра биол. наук: 03.00.12 / Ф.М. Шакирова; СпбГУ.-Л.,1999.- 44с.

66. Hevein: an antifungal protein from rubber tree (Hevea Brasilensis) latex / Van Parijs J., Broekaert W.F., Goldstein I.J., Peumans W.J. //Planta.-1991.-V.183.-P.258-262.

67. Kocourec, I. Lectins / Kocourec I., Horejsi V. // Biol., biochem. and Chin Biochem.-1983.-V.3.-P.3-6.

68. Bramble, R. Plant seed lectin disrupt growth of germinating fungal spores / Bramble R., Gade W. // Physiol. Plant.-1985.-V.64.-P.402-408.

69. A chitin-binding lectin from stinging nettle rhizomes with antifungal properties / Broecaert W.F., Van Parijs J., Leyns F. et al. // Science.-1989.- V.245.-P.l 100-1102.

70. Extensin from suspension-cultured potato cells: a hydroxyproline-rich glycoprotein, devoid of agglutinin activity / Dey P.M., Brownleader M.D., Pantelides A.T. et al. // Planta.-1997.-V.202.-P. 179-187.

71. Комарова, Э.Н. Влияние циклогексимида на активность и углеводную специфичность лектинов клеточных стенок проростков озимой пшеницы при низкотемпературном закаливании / Э.Н. Комарова, Т.Н. Трунова, Э.И. Выскребенцева // ДАН.-1996.-Т.351,№5.-С.692-694.

72. Комарова, Э.Н. Динамика лектиновой активности клеточных стенок апексов озимой пшеницы на протяжении первых суток закаливания / Э.Н. Комарова, Э.И.Выскребенцева, Т.И. Трунова // Физиология растений,-1999.-Т.46,№4.-С.159-163.

73. Шакирова, Ф.М. Неспецифическая устойчивость растений к стрессовым факторам и ее регуляция / Ф.М. Шакирова.- Уфа: Гилем, 2001.-160с.

74. Шакирова, Ф.М. Влияние теплового стресса на динамику накопления АБК и лектина в клетках каллуса пшеницы / Ф.М. Шакирова, М.В. Безрукова, И.Ф. Шаяхметова // Физиология растений.-1995.-Т.42, №5.- С.700-702.

75. Spadoro-Tank, J.P. Heat shock enhances the synthesis of lectin-related protein in Dolichos bijlorus cell suspension cultures / Spadoro-TankJ.P., Etzler M.E. // Plant physiol.-1988.-V.88.-P.l 131-1135.

76. Красавина, M.C. Научная школа A.B. Курсанова и развитие физиологии растений / М.С. Красавина, С.В. Соколова // Физиология растений.-1997.-Т.44, №1.-С.808-818.

77. Possible involvement of leaf gibberellins in the clock-controlled expression of XSP30, a gene encoding a xylem sap lectin, in cucumber rootsl / Oda A., Sakuta C., Masuda S. et al. // Plant Physiol.-2003.-V.133.-P.1779-1790.

78. Edelman, G.M. Binding and functional properties of concanavalin A and its derivates. Ill Interactions with indoleacetic acid and other hydrophobic ligands / Edelman G.M., Wang J.L. // J.Biol.Chem.-1978-V.253.- P.3016-3022.

79. Crystallization and preliminary X-ray analysis of peanut agglutinin-N6-benzylaminopurine complex / Zaluzec E.J., Zaluzec M.M., Olsen K.W., Pavkovic S.F. //J. Mol. Biol.-l 991 .-V.219.-P. 151-153.

80. Rudiger, H. Structure and function plant lectins. Glycosciences. Status and perspectives / Rudiger H. London: Chapman and Hall IT, 1997.- P.415-438.

81. Carbohydrate binding, quaternary structure and a novel hydrophobic binding site in two legume lectin oligomers from Dolichos biflorus / Hamerlyck T.W., Loris R., Bouckeart J., Dao-Thi M.N. // J.Mol.Biol.-1999.-V.5.-P.l 161-1177.

82. Interaction of Tora-mama (Phaseolus vulgaris) lectin with indolederivatives / Umekawa H., Kondon K., Ffujihara M et al. // Agric.Biol.Chem.-1990.-V.4.- P.3295-3299.

83. Участие агглютинина зародыша пшеницы в регуляции деления клеток апикальной меристемы / М. В. Безрукова, А. Р. Кильдибекова, А. М. Авальбаев, Ф. М. Шакирова // Цитология.-2004.-Т.46,№1 .-С.35-38.

84. Occurrence of osmiophilic particles is correlated to elongation growth of higher plants / Samayova O., Samaj J., Volkmann D., Edelmann H.G. // Protoplasma.-1998.-V.202.-P. 185-191.

85. Mansfield, M.A. Abscisic acid enhances the transcription of wheat-germ agglutinin mRNA without altering its tissue specific expression / Mansfield M.A., Raikhel N.V. // Planta.-1990.-V.180.-P.548-554.

86. Skriver, K. Gene expression in response to abscisic acid and osmotic stress / Skriver K., Mundy J. // Plant Cell.-1990.-V.2.-P.503-512.

87. Шакирова, Ф.М. Изменение уровня АБК и лектина в корнях проростков пшеницы под влиянием 24-эпибрассинолида и засоления / Ф.М. Шакирова, М.В.Безрукова // Физиология растений.-2003.-Т.45,№3.-С.451-455.

88. Shakirova, F.M. Effect of temperature shock on the dynamics of ABA and WGA accumulation in wheat cell culture / Shakirova F.M., Bezrukova M.V., Shayakhmetov I.F. //Plant Growth Reg.-1996.-V.19.-P.85-87.

89. Singh, P.S. Wheat germ agglutinin (WGA) gene expression and ABA accumulation in the developing embryos of wheat (Triticum aestivum) in response to drought / Singh P.S., Bhagal P., Bhullar S.S. // Plant Growth Reg.-2001.-V.30.-P.145-150.

90. Васильев, A.E. Сравнительная структурно-функциональная характеристика цитоскелета животных и высших растений / А.Е. Васильев // Журнал общей биологии.-1996.-Т.57, №3.-С.293-324.

91. Schliwa, М. The cytoskeleton / Schliwa M.-Wien, New York.: Springer. Verlag, 1986.-326p.

92. Volkmann, D. Actin cytoskeleton in plants: from transport network to signaling networks / Volkmann D., Baluska F. // Microscopy research and technique.-1999.-V.47.-P. 135-154.

93. Mandelkow, E. Microtubules and microtubule-associated proteins / Mandelkow E., Mandelkow E.-M. // Curr. Opin. Cell. Biol.-1995.-V.7.-P.72-81.

94. Pollard, T.D. Interaction of actin filaments with microtubules / Pollard T.D., Selden S.C., Moupin P. // Cell. Biol.-1984.-V.99.-P.335-375.

95. Isenberg, G. Interaction of cytoskeleton proteins with membrane lipids / Isenberg G., Niggli V. // Int. Rev. Cytol.-1998.-V.178.-P.73-125.

96. Traas, J.A. The plasma membrane associated cytoskeleton. - In book The Plant Plasma Membrane / Traas J.A.- Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1990.-P.270-292.

97. Ingber, D.E. Cellular tensegrity: defining new rules of biological design that govern the cytoskeleton / Ingber D.E. // J. Cell. Sci.-1993.-V.104.- P.613-627.

98. Cellular tensegrity: exploring how mechanical changes in the cytoskeleton regulate cell growth, migration, and tissue pattern during morphogenesis / Ingber D.E., Dike L., Hansen L. et al. // Int. Rev. Cytol.-1994.-V.150.- P.173-224.

99. Медведев, C.C. Цитоскелет и полярность растений / С.С. Медведев, И.В. Маркова // Физиология растений.-1998.-Т. 45, №2.-С. 185-197.

100. Полевой, В.В. Физиология растений / В.В. Полевой. М.: Высшая школа, 1989.- 463с.

101. Hardham, A.R. Structure of cortical microtubule arrays in plant / Hardham A.R, Gunning B.E. // J. Cell Biol.-1978.-V.77.- P.14-34.

102. Quader, H. The cytoskeleton of plant cells: structural and functional aspects/ Quader H., Schnepf E. //Ber. Dtsch. Bot. Ges.-1988.-V.99,№3.-P.297-306.

103. Hogetsu, T. The arrangement of microtubules in leaves of monocotyledonous and dicotyledonous plants / Hogetsu T. // Canad. J. Bot.-1989.-V.67,№12.-P.3506-3512.

104. Abe, H. A scanning electron microscopic study of changes in microtubule distributions during secondary wall formation on tracheids / Abe H., Ohtani J., Fukazawa K. //JAWAJ.-1994.-V.15, №2.-P. 185-189.

105. Hepler, P.K. Microtubules and microfilaments / Hepler P.K., Palevitz B.A. //Ann. Rev. PlantPhysiol.-1974.-V.25.-P.309-362.

106. Васильев, A.E. Строение и образование микрофибрилл клеточной оболочки / А.Е. Васильев // Ботан. журн.-1984.-Т.69,№9.-С.1145-1158.

107. Galatis, B. Microtubules and their organizing center in differentiating guard cells of Adiantum capillus-veneris / Galatis В., Apostolakos P., Katsaros C. // Protoplasma.-1983.-V.l 15, № 2-3.-P. 176-192.

108. Microtubules, protoplasts and plant cell shape / Lloyd C.W., Slabas A.R., Powell A.J., Lowe S.B. //Planta.-1980.-V.147.-P.500-506.

109. Melan, M.A. Taxol maintains organized microtubule patterns in protoplasts which lead to the resynthesis of organized cell wall microfibrils / Melan M.A. // Protoplasma.-l 990.-V. 153P.169-177.

110. Zhang, D. Microtubule dynamics in living dividing plant cells: confocal imaging of microinjected fluorescent brain tubulin / Zhang D., Wadsworth P., Hepler P.K. // Proc. Natl Acad. Sci. USA.-1990.-V.81.-P.8820-8824.

111. Hensel, W. A role of microtubules in the polarity of statocytes from roots оiLepidium sativum / Hensel W. // Planta.-1984.-V.162, №5.-P.404-414.

112. Shibaoka, N. The plant cytoskeleton / Shibaoka N., Nagai R. // Curr. Opin. Cell Biol.-1994.-V.6-P.10-15.

113. Interaction of tobacco virus movement proteins with the plant cytoskeleton / Heinlein M., Epel B.L., Padgett H.S., Beachy R.N. // Science.-1995.-V.270.- P.1983-1985.

114. Williamson, R.E. Orientation of cortical microtubules in interphase plant cells / Williamson R.E. // Internat. Rev. Cytol.-l 991.-V.129.-P. 135-206.

115. Microtubule components of the plant cell cytoskeleton / Goddard R.M., Wick S.M., Silflow C.D., Snustad D.P. // Plant Phisiol.-1994.-V.104.- P.l-6.

116. Fosket, D.E. Structural and functional organization of tubulin / Fosket D.E., Morejohn L.C. // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol.-1992.-V.43.-P.201-240.

117. Hart, J.W. Microtubules / Hart J.W., Sabnis D.D. // Bot. Monographs-Los Angeles: Molec. biol. plant cells.-1977.-P.160-180.

118. Derksen, J. The plant cytoskeleton: its significance in plant development / Derksen J., Wilnis F.H.A., Pierson E.S. // Acta Bot. Neerl.-1990.-V.39,№ 1.-P.1-18.

119. The isolation, characterization and sequence of two divergent beta-tubulin genes from soybean (Glicine max L.) / Guiltinan M.J., Ma D.P., Barker R.F. et al. // Plant Mol. Biol.-1987.-V.10.-P.171-184.

120. Marks, D.M. The relatively large beta-tubulin gene family of Arabidopsis contains a member with an unusual transcribed 5' noncoding sequence / Marks D.M., West J., Weeks D.P. // Plant Mol. Biol.-1987.-V.10.-P.91-104.

121. Ludwig, S.R. Arabidopsis thaliana: primary structure and preterential expression in flowers / Ludwig S.R., Oppenheimer P. G., Silflow C.D. // Plant Mol. Biol.-1988.-V .10.-P.311 -321.

122. The small genome of Arabidopsis contains at least six expressed a -tubulin genes / Korczak S.D., Haas N.A., Hussey P.J. et al. // Plant Cell.-1992.-V.4.-P.539-547.

123. Wasteneys, G.O. Microinjection of fluorescent brain tubulin reveals dynamic oropertis of cortical microtubules in living plant cells / Wasteneys G.O., Gunnings B.E.S., Hepler P.K. // Cell. Motil. Cytoskeleton.-1993.-V.24.-P.205-213.

124. Erickson, H.P. Microtubule dynamic instability and GTP hydrolysis / Erickson H.P., O'Briem E.T. // Ann. Rev. Biophys.-1992.-V.21.-P.145-166.

125. Mitchison, T.J. Compare and contrast actin filaments and microtubules / Mitchison T.J. // Molec. Biol. Cell.-1992.-V.3,№12.-P.1309-1315.

126. Каппучинелли, П. Подвижность живых клеток / П. Каппучинелли. -М.: Мир, 1982.-125с.

127. Liu, В. A kinesin-like protein KatAp, in the cells of Arabidopsis and other plants / Liu В., Cyr R.J., Palevitz B.A. // Plant Cell.-1996.-V.8.-P.l 19-132.

128. Laporte, K. Interaction of tubulin with the plasma membrane tubulin is present in purified plasmalemma and behaves as an integral membrane protein / Laporte K., Rossignol M., Traas J.A. //Planta.-1993.-V.191.- P.413-416.

129. Cleveland, D.W. Autoregulated instability of tubulin m-RNAs: a novel eukaryotic regulatory mechanism / Cleveland D.W. // TIBS.-1988.-V.13.- P.339-343.

130. Drugs affecting microtubule dynamics increase a-tubulin mRNA accumulation via transcription in Tetrahymena thermophila / Stargell L.A., Heruth D.P., Gaertig J., Grovshy M.A. //Mol. Cell. Biol.-1992.-V.12.-P.1443-1450.

131. In rice oryzalin and abscisic acid differentially affect tubulin mRNA and protein levels / Giani S., Qin X., Faoro F., Breviario D. // Planta.-1998.- V.205.-P.334-341.

132. Фултон, А. Цитоскелет. Архитектура и хореография клетки / А.Фултон.- М.: Мир, 1987. 115с.

133. Jiang, C.-J. Identification and preliminary characterization of a 65 kDa higher-plant microtubule-associated protein / Jiang C.-J., Sonobe S. // J. Cell Sci.-1993.-V. 105.-P.891-901.

134. Nick, P. A microtubule associated protein in maize is induced during phytochrome - dependent cell elongation / Nick P., Lambert A.M., Vantard M. // Plant. J.-1995.-V.8.-P.835-844.

135. Durso, N.A. In situ immunocytochemical evidence that a homolog of protein translation factor EF-la is associated with microtubules in carrot cells / Durso N.A., Leslie J.D., Cyr R.J. // Protoplasma.-1996.-V.190.-P.141-150.

136. A novel kinesin-like protein with a calmodulin binding domain/ Wang W., Takezawa D., Narasimhulu S.B. et al.//Plant. Mol. Biol.-1996.-V.31.- P.87-100.

137. Seagull, R.W. The plant cytoskeleton / Seagull R.W. // CRC Crit. Rev. Plant. Sci.-1989.-V.8.-P. 131-167.

138. Dove, S.K. Identification of a phosphatidylinositol 3-kinase in plant cells: association with the cytoskeleton / Dove S.K., Lloyd C.W., Drobak B.K. // Biochem.J.-1994.-V.303.-P.347-350.

139. Actin filaments modulate both stomatal opening and inward К -channel activities in guard cells of Vicia faba / Hwang J.-U., Suh S., Yi H. et al. // Plant Physiol.-1997.-V. 115.-P.335-342.

140. Kuroda, K. Cytoplasmic streaming in plant cells / Kuroda K. // Internat. Rev. Cytol.-l 990.-V. 121 .-P.267-307.

141. Liebe, S. Actomiosin-based motility of endoplasmic reticulum and chloroplasts in Vallisneria mesophyll cells / Liebe S., Menzel D. // Biol. Cell.- 1995.-V.85.- P.207-222.

142. Cox, D.N. NPA binding activity is peripheral to the plasma membrane and is associated with the cytoskeleton / Cox D.N., Muday G.K. // Plant. Cell.-1994.-V.6.-P.1941-1953.

143. In vitro and in vivo evidence for actin association of the naphthylphtalamic acid-binding protein from Zucchini hypocotyls / Butler J.H., Hu S.Q., Brady S.R. et al. // Plant J.-1998.-V.13.-P.291-301.

144. Actin filaments in mature guard cells are radially distributed and involved in stomatal movement / Kim M., Hepler P.K., Eun S.-O. et al. // Plant. Phisiol.-1995.-V.109.-P.1077-1084.

145. Wang, Q.Y. The auxin response of actin is altered in the rice mutant Yin-Yang / Wang Q.Y., Nick P. // Protoplasma.-1998.-V.204.-P.22-23.

146. Lee, J.C. In vitro reconstruction of cell brain microtubules of solution variables/ Lee J.C., Timasheff Z. // Biochem.-1971.-V.16.-P.1754-1764.

147. Гамалей, Ю.В. Эндоплазматическая сеть растений. Происхождение, структура и функции / Ю.В. Гамалей // 53-е Тимирязевское чтение.-Санкт-Петербург, 1994.- 80с.

148. Снигиревская, Е.С. Изменения ультраструктуры клеток вазопрессин-чувствительных эпителиев при стимуляции транспорта воды / Е.С. Снигиревская // Цитология.-1990.-Т.32, №8.-С.766-794.

149. Аршавский, И.А. К анализу роли цитоскелета зародышей растительных организмов в реализации процессов роста и развития / И.А. Аршавский, А.Е. Калевич, В.Е. Кефели // Биофизика.-1992.-Т.37,№ 5.-С.983-992.

150. Исаева, В.В. Клетки в морфогенезе / В.В. Исаева.-М.: Наука, 1994.224с.

151. Kropf, D.L. Cytosceletal control of polar growth in plant cells / Kropf D.L., Bisgrove S.R., Hable W.E. // Cuit. Opin. Cell. Biol.-1998.-V.10.-P.l 17-122.

152. Miller, D.D. From signal to form: aspects of the cytoskeleton-plasma membrane-cell wall continuum in root hair tips / Miller D.D., Ruifter N.C.A., Emons A.M.C. //J. Exp.Bot.-l997.-V.48.-P. 1881 -1896.

153. Foissker, I. Actin based vesicle dynamics and exocytosis during wound wall formation in Characean interonodal cells / Foissker I., Lichtscheidl I.K., Wasteneys G.O. //Cell. Motil. Citoskel.-1996.-V.35.-P.35-48.

154. Lipochito-oligosaccharides re-initiate root hair tip growth in Vicia sativa high calcium and spectrin-like antigen at the tip / Ruifter N.C.A., Rook M.B., Bisseling Т., Emons A. M. C. // Plant. J.-1998.-V.13.-P.341-350.

155. Kobayachi, I. Dynamic reorganization of microtubules and microfilaments in flax cells during the resistance response to flax rust infection / Kobayachi I., Kobayachi Y., Hardham A.R. //Planta.-1994.-V.195.-P.237-247.

156. Вебер, К. Молекулы клеточного матрикса / К. Вебер, М.Осборн//В мире науки.-1985.-№12.-С.62-74.

157. Браун, А.Д. Неспецифический адаптационный синдром клеточной системы/А.Д. Браун, Т.П. Моженок. Ленинград: Наука, 1987.-230с.

158. Албертс, Б. Молекулярная биология клетки / Б. Албертс, Д. Брей -М.: Мир, 1987.-Т.З.-296с.

159. Kabsch, W. Structure and function of actin / Kabsch W., Vandekerckhove J. // Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct.-1992.-V.21.- P.49-76.

160. Structure and evolution of the actin gene family in Arabidopsis thaliana / McDowell J.M., Huang S., McKinney A.C. et al. // Genetics.-1996.-V.142.- P.587-602.

161. Актин и термостабильные актинсвязывающие белки в культуре клеток пшеницы / М.В.Туркина, А.Л. Куликова, Л.А. Коппель и др. // Физиология растений.-1995.-Т.42, №3.-С.348-355.

162. Identification of chitinase and osmotin-like protein as actin-binding proteins in suspension-cultured potato cells / Takemoto D., Furuse K., Doke N., Kawakita K. // Plant Cell. Physiol.-1997.-V.38.-P.441-448.

163. Winter, H. Identification of sucusynthast as an actin-binding protein / Winter H., Huber J.L., Huber SC. // FEBS Lett.-1998.-V.430.-P.205-208.

164. Cytoskeleton-plasma membrane-cell wall continuum in plants. Emerging links revisited / Baluska F., Samaj J., Wojtaszek P. et al. // Plant. Physiol.-2003.-V.133.-P.482-491.

165. Goodbody, K.C. On the distribution of microtubule-associated intermediate filament antigens in plant suspension cells / Goodbody K.C., Hargreaves A.J., Lloyd C.W. //J.Cell Sci.-1989.-V.93.- P.427-438.

166. The intermediate filament-treated system of higher plant cells shares an epitope with cytokeratin / Ross J.H.E., Hutchings A., Butcher G.W. et al. // J. Cell Sci.-1991-V.99.-P.91-98.

167. Monoclonal antibodies to plant nuclear matrix reveal intermediate filament-related components within the nucleus / Beven A., Guan Y., Peart J. et al. // J. Cell Sci.-1991.-V.98.-P.293-302.

168. McNulty, A.K. Purification and immunological detection of pea nuclear intermediate filaments: evidence for plant nuclear lamins / McNulty A.K., Saunders M.J. //J. Cell Sci.-1992.-V.103.- P.407-414.

169. Monoclonal antibodies against plant proteins recognize animal intermediate filaments / Parke J.M., Miller C.J., Cowell I. et al. // Cell Mobil Cytoskeleton.-1987.-V.8.-P.312-323.

170. Robinson, D.G. The microtubule-microfibril syndrome / Robinson D.G., Quader H. // The cytoskeleton in plant growth and development.-London: Academic Press. 1982.-P. 109-126.

171. Kobayashi, H. Reorganization of actin filaments associated with the differentiation of tracheary elements in Zinnia mesophyll cells / Kobayashi H., FukudaH., Shibaoka H. // Protoplasma.-1987.-V. 138.-P.69-71.

172. Kobayashi, H. Interrelation between the spatial disposition of actin filaments and microtubules during the differentiation of tracheary elements in cultured Zinnia cells / Kobayashi H., Fukuda H., Shibaoka H. // Protoplasma.-1988.-V.143.-P.29-37.

173. Quader, H. The cytosskeleton of Cobaea seed hairs / Quader H., Deichgraber G., Schenepf E. // Planta.-1986.-V.168,№ 1.-P.1-10.

174. Ding, A. Microfilament organization and distribution in freeze-substituted tobacco plant tissues / Ding A., Turgeon R., Parthasarathy M.V. // Protoplasma.- 1991.-V.165.-P.96-105.

175. Jung, J.-L. Sunflower (Helianthus annuus L.) pathogenesis-related proteins. Induction by aspirin (acetylsalicylic acid) and characterization / Jung J.-L., Friting В., Hahne G. // Plant Physiol.-1993.-V.101.-P.873-880.

176. Akashi, T. Stabilization of cortical microtubules by the cell wall in cultured tobacco cells: effects of extensin on the cold- stability of cortical microtubules / Akashi Т., Kawasaki S., Shibaoka H. // Planta.-1990.-V.182.- P.363-369.

177. Wagner, T.A. Wall-associated kinases are expressed throughout plant development and are required for cell expansion / Wagner T.A., Kohorn B.D. // Plant Cell.-2001 .-V. 13-P.303-318.

178. Antisense expression of a cell wall-associated protein kinase, WAK4, inhibits cell elongation and alters morphology / Lally D., Ingmire P., Tong H.-Y., He Z.-H. // Plant Cell.-2001.- V. 13.-P. 1317-1332

179. Cosgrove, D.J. Assembly and enlargement of the primary cell wall in plants / Cosgrove D.J. //Annu. Rev. Cell Dev. Biol.-1997.-V.13-P. 171-201.

180. Short-term boron deprivation inhibits endocytosis of cell wall pectins in meristematic cells of maize and wheat root apices / Yu Q., Hlavacka A., Matoh T. et al. // Plant Physiol.-2002.-V. 130-P.415-421.

181. Majewska-Sawka, A. The multiple roles of arabinogalactan proteins in plant development / Majewska-Sawka A., Nothnagel. E.A. // Plant Physiol.-2000.-V.122.-P.3-9.

182. Nothnagel, E.A. Proteoglycans and related components in plant cells / Nothnagel E.A. // Int. Rev. Cytol.-1997.-V.174.-P. 195-291.

183. Gens, J.S. Arabinogalactan protein and wall-associated kinase in a plasmalemmal reticulum with specialized vertices / Gens J.S., Fujiki M., Pickard B.G. // Protoplasma.-2000.-V.212 .-P. 115-134.

184. The Arabidopsis actin gene ACT7 plays an essential role in germination and root growth / Gilliland L.U., Pawloski L., Kandasamy M.K., Meagher R.B. // Plant J.-2003.-V.33.-P.319-328.

185. Latrunculin В induced plant dwarfism: plant cell elongation is F-actin dependent / Baluska F., Jasik J., Edelmann H.G. et al. // Dev Biol.-2001.-V.231.-P.l 13-124.

186. Deeks, M.J. Formins: intermediates in signal-transduction cascades that affect cytoskeletal reorganization / Deeks M.J., Hussey P.J., Davies B. // Trends Plant Sci.- 2002.-V.7.-P.492-498

187. Cvrckova, F. Are plant formins integral membrane proteins? / Cvrckova F. // Genome Biol.-2000.-V.l.-P.001.1-001.7

188. An actin nucleation mechanism mediated by Bnil and profiling / Sagot I., Rodal A.A., Moseley J. et al. // Nat Cell Biol.-2002.-V.4.-P.626-631.

189. Severson, A.F. A formin homology protein and a profilin are required for cytokinesis and Arp2/3-independent assembly of cortical microfilaments in C. elegans / Severson A.F., Baillie D.L., Bowerman B. // Curr Biol.-2002.-V.12.-P.2066-2075.

190. An Arabidopsis callose synthase / Ostergaard L., Petersen M., Mattsson O., Mundy J. // Plant Mol Biol.-2003.-V.49.-P.559-566.

191. Verma, D.P.S. Plant callose synthase complexes / Verma D.P.S., Hong Z. // Plant Mol Biol.-2001.-V.47.-P.693-701.

192. Heyn, A.N. Intra- and extracytoplasmic microtubules in coleoptiles of Avena / Heyn A.N. // J. Ultrastruct. Res.-1972.-V.40.-P.433-457.

193. Лобакова, E.C. Морфология распределения актина в клетках морфогенного каллуса пшеницы / Лобакова Е.С., Плетюшкина О.Ю., Бутенко Р.Г. // Докл. РАН.-1997.-Т. 352.-С.284-286.

194. Lancelle, S.A. Ultrastructure of the citoskeieton in freeze-substituted pollen tubes of Nicoliana alata / Lancelle S.A., Cresti M., Hepler P.K. // Protoplasma.-1987.-V.140.-P. 141-150.

195. Yasuhara, H. Effect of taxol on the development of the cell plate and of the phragmoplast in tobacco BY-2 cells / Yasuhara H., Sonobe S., Shibaoka H. // Plant Cell Physiol.-1993.-V.34,№ 34.-P.21-29.

196. An immunoreactive homolog of mammalian kinesin in Nikotiana tabacum pollen tubus / Tiezzi A., Moscatelli A., Bartalesi A., Cresti M. // Cell Motil Cytoskel.-1992.-V.21 .-P. 132-137.

197. Wang, X.C. Spektrin-like protein in guard cells of Vicia Faba / Wang X.C., Zhang X.Q. // 10th International workshop on plant membrane biology. Regensburg, August 1995.- Regensburg,1995.- P. 35.

198. McCurdy, D.W. Molecular cloning of a novel fimbrin-like cDNA from Arabidopsis thaliana / McCurdy D.W., Kim M. // Plant Mol. Biol.-1998.-V.36.-P.23-31.

199. McCurdy, D.W. Molecular cloning of a novel fimbrin-like cDNA from Arabidopsis thaliana / McCurdy D.W., Kim M. // Plant Mol. Biol.-1998.-V.36.-P.23-31.

200. Yokota, E. Isolation and Characterization of Plant Myosin from Pollen Tubes of Lily / Yokota E., Shimmen T. // Protoplasma.-1994.-V.177.-P.153-162.

201. Inhibition of Contractile Vacuole Function in vivo by Antibodies Against Myosin I / Doberstein S.K., Baines I.C., Weigand G. et al. // Nature.-1993.-V.365.-P.841-843.

202. Muguruma, M. Direct Interaction between Talin and Actin Muguruma M., Mutsumura S., Fukazuma T. // Biochem. Biophys. Res. Commun.-1990.-V.171.-P. 1217-1223.

203. A Novel Plant Calmodulin-Binding Protein With a Kinesin Heavy Chain Motor Domain / Reddy A.S.N., Safadi F., Narasimhulu S.B. et al.// J. Biol.Chem.-1996.-V.94.-P.322-327.

204. Connection: The Hard Wiring of the Plant Cell for Perception, Signaling and Response / Miller D., Hable W., Gotwald J. et al. // Plant Cel1.-1997.-V.9.-P.2105-2117.

205. Lancelle, S.A. Ultrastructure of the citoskeieton in freeze-substituted pollen tubes of Nicotiana alata / Lancelle S.A., Cresti M., Hepler P.K. // Protoplasma.-1987.-V. 140.-P. 141 -150.

206. Lipids trigger changes in the elasticity of the cytoskeleton in plants: a cell optical displacement assay for live cell measurements / Grabski S., Xie X. G., Holland J.F., Schindler M. //J. Cell Biol.-1994.-V.126.- P.713-726.

207. Shibaoka, N. Plant hormone-induced changes in the orientation of cortical microtubules: alterations in the cross-linking between microtubules and the plasma membrane / Shibaoka H. // Anna. Rev. Plant. Physiol. Plant. Mol. Biol.-1994.-V.45.-P.527-544.

208. From hormone signal, via cytoskeleton, to cell growth in single cells of tobacco / Vissenberg K., Quello A.H., van Gestel K. et al. // Cell Biol.Int.-2000.-V.24.-P.343-349.

209. Inada, S. Regulation of elongation growth by gibberellin in root segments of Lemna minor / Inada S., Shimmen T. I I Plant Cell Physiol.-2000.-V.41.-P.932-939.

210. Brassinosteroids, microtubules and cell elongation in Arabidopsis thaliana: 2. Effects of brassinosteroids on microtubules and cell elongation in the bull mutant / Catterou M., Dubois F., Schaller H. et al. // Planta.-2001.-V.212.-P. 813-822.

211. Baluska, F. Role for gibberellic acid in orienting microtubules and cell growth polarity in the maize root cortex / Baluska F., Parker J.S., Barlow P.W. // Planta.-1993.-V. 191.-P. 149-157.

212. Duckett, C.M. Gibberellic acid-induced microtubule reorientation in Dwarf peas is accompanied by rapid modification of an a-tubulin isotype / Duckett C.M., Lloyd C.W. // Planta.-2001 .-V. 191 .-P. 149-157.

213. Takesue, K. The cyclic reorientation of cortical microtubules in epidermal cells of Azuki bean epicotyls: The role of actin filaments in the progression of the cycle / Takesue K., Shibaoka H. // Cell.Biol.Int.-2000.-V.24.-P.932-939.

214. Rikin, A. Quantitation of chill-induced release of a tubulin like factor its prevention by abscisic acid in Gossipium hirsutum L. / Rikin A., Atsmon D., Gitler C. // Plant Physiol.-1983.-V.712.- P.747-748.

215. Sakiyama, M. Effects of abscisic acid on the orientation and cold stability of cortical microtubules in epicotyl cells of the dwarf pea / Sakiyama M., Shibaoka H. // Protoplasma.-l 990.-V. 157.-P. 165-171.

216. Chu, B. Alternation of p-tubulin gene expression during low-temperature exposure in leavis of Arabidopsis thaliana / Chu В., Snustad P., Carter J. // Plant Physiol.-l 993 .-V. 103 .-P.371 -377.

217. Eun, S.O. Actin filaments of guard cells are reorganized in response to light and abscisic acid / Eun S.O., Lee Y. // Plant Physiol.-1997.-V.115.-P.1491-1498.

218. Eun, S.O. Stomatal opening by fusicoccin is accompanied by depolymerization of actin filaments in guard cells / Eun S.O., Lee Y. // Planta.-2000.-V.210.-P.965-970.

219. Grabski, S. Auxins and cytokinins as antipodal modulators of elasticity within the actin network of plant cells / Grabski S., Schindler M. // Plant Physiol.-1996.-V.110.-P.965-970.

220. Qin, X. Molecular cloning of tree rice alpha-tubulin isotypes: differential expression in tissues and during flower development / Qin X., Giano A.S., Breviario D. //Biochim. Biophys. Acta.-1997.-V.1354.-P.19-23.

221. Munoz, F.J. Brassinolides promote the expression of a new Cicer arietinum beta-tubulin gene involved in the epicotyl elongation / Munoz F.J., Labrador E., Dopico B. // Plant Mol. Biol.-1998.-V.37.-P.807-817.

222. Down regulation of phytochrome mRNA abundance by red light and benzyladenine in etiolated cucumber cotyledons / Cotton J.L., Ross C.W., Byrne D.H., Colbert J.T. // Plant Mol. Biol.-1990.-V.14.-P.707-714.

223. One plant actin isovariant, ACT7, is induced by auxin in and required for normal callus formation / Kandasamy M.K., Gilland L.U., McKinney E.C., Meagher R.B. // Plant Cell.-2001.-V.13.-P.1541-1554.

224. Зависимость доли цитоскелет-связанных полисом от физиологического состояния растений / A.JI. Куликова, А.Ю. Куликов, М.А. Ерохина, H.JI. Клячко // Физиология растений.-2001.-Т.48.-С.705-711.

225. The Araidopsis thaliana AGRAVITROPIC 1 gene encodes a component of the polar auxin transport by AtPINl in Arabidopsis vascular tissue / Chen R., Hilson P., Sedbrook J. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998.-V.95- P.15112-15117.

226. Coordinated polar localization of auxin efflux carrier PIN1 by HNOM ARF GEF / Steinmann Т., Geldner N., Grebe M. et al. // Science.-1999.-V.286.-P.425-428.

227. Auxin transport inhibitors block PIN1 cycling and vesicle trafficking / Geldner N, Frimle J., Stierhof Y.D. et al. //Nature.-2001.-V.413.-P.425-428.

228. Lateral relocation of auxin efflux regulator PIN3 mediates tropism in Arabidopsis / Friml J., Wisniewska J., Benkova E. et al. // Nature.-2002.-V.415.-P.806-809.

229. Cytoskeletal drugs and gravity-induced lateral auxin transport in rice coleoptiles / Goldbole R., Michalke W., Nick P., Hertel R. // Plant Biol.-2000.- V.2.-P.176-181.

230. Клячко, H.JI. Фитогормоны и цитоскелет / H.JI. Клячко // Физиология растений.-2003.-Т.50, №3.-С.475-479.

231. Прудков, Ф.М. Озимая пшеница / Ф.М. Пруцков.- М.: Колос, 1976.350с.

232. Ремесло, В.Н. Селекция мироновских сортов озимой пшеницы и первичное семеноводство. В кн.: Мироновские пшеницы./ В.Н.Ремесло, JI.A. Животков.- М.: Колос, 1976.-С. 19-98.

233. Полтарев, Е.М. Зимостойкость полиплоидных форм озимой пшеницы.- В кн.: Зимостойкость озимых хлебов и многолетних трав./ Е.М. Полтарев. Киев: Наукова думка, 1976.-С.18-24.

234. Войников, В.К. Синтез стрессовых белков в проростках озимой пшеницы при закаливании растений к холоду / В.К.Войников, М.В. Корытов // Физиология растений.-1991.-Т.38, вып.5.-С.960-969.

235. Oryzalin, a dinitroaniline herbicide, binds to plant tubulin and inhibits microtubule polymerization in vitro / Morejohn L.C., Bureau Т.Е., Mole-Bajer J. et al. // Planta.-1987.-V.172.-P.252-264.

236. Увеличение активности лектинов в проростках пшеницы при закаливании к морозу / Ф.М. Шакирова, М.В. Безрукова, P.M. Хайруллин, A.M. Ямалеев // Физиология растений.-1993.-Т.40,№3.-С.612-615.

237. Комарова, Э.Н. Изменение лектиновой активности меристемы узла кущения озимой пшеницы при закаливании к морозу / Э.Н. Комарова, Э.И.Выскребенцева, Т.И. Трунова // Физиология растений.-1995.-Т.42,№4.-С.612-615.

238. Bradford, М.А. Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding / Bradford M.A. // Biochem.-1976.-V.72.-P.248-254.

239. Паушева, З.П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева. -М.:Колос, 1980.-271с.

240. Yariv, J. The interaction of glycosides and saccharides with antibody to the corresponding phenylazo glycoside/ Yariv J., Rapport M.M., Graf L.// Biochem.-1962.-V.85.-P.383-388.

241. Баскаков, Ю.А. Новые гербициды и регуляторы роста / Ю.А. Баскаков //Ж. сес. Хим. Об-ва им. Д.И. Менделеева.-1984.-Т.29.-С.22-39.

242. Chen, Т.Н. Involvement of abscisic acid in potato cold acclimation / Chen Т.Н., Li P.H., Brenner M.L. II Plant PhysioI.-1983.-V.71.-P.362-365.

243. ABA and low temperature induce freezing tolerance via distinct regulatory pathways in wheat / Dallaire S., Houde M., Gagne Y. et al. // Plant Cell PhysioI.-1994.-V.35.-P.l-9.

244. Sheen, J. Mutational analysis of a protein phosphatase 2C involved in abscisic acid signal transduction in higher plants / Sheen J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998.-V.95.-P.975-980.

245. Cramer, G.R. Osmotic stress and abscisic acid reduce cytosolic calcium activities in roots of Arabidopsis thaliana / Cramer G.R., Jones R.L. // Plant Cell and Envir.-1996.-V.19.-P.1291-1298.

246. Cyr, R.J. Calcium/calmodulin affects microtubule stability in lysed protoplasts / Cyr R.J. //J. of Cell Sci.-1991.-V.100.-P.311-317.

247. Veisz, O. Effect of abscisic acid on the cold hardiness of wheat seedlings / Veisz O., Galiba G., Sutka J. / J. Plant Physiol.-1996.-V.149.-P.439-443.

248. Astrom, H. Acetylated a-tubulin in the pollen tube microtubules / Astrom H. // Cell Biology Inter. Reports.-1992.-V.16-P.871-881.

249. Quellet, F. Regulation of a wheat actin-depolymerizing factor during cold acclimation / Quellet F., Carpentier E., Jamie M. // Plant Physiol.-2001.-V. 125.-P.360-368.

250. Lalk, I. Hardening, abscisic acid, proline and freezing resistance in two winter wheat varieties / Lalk I., Dorffling K. // Physiol. Plant.-1985.-V.63.-P.287-292.

251. Lang, V. The expression of a raZ>-related gene, rah IS, is induced by abscisic acid during the cold acclimation process of Arabidopsis thaliana (L.). / Lang V., Palva Е.Т./ Plant Mol. Biol.-1992.-V.20.-P.951-962.

252. Chandler, P.M. ABA-regulated genes and cold tolerance / Chandler P.M., Robertson M. // Ann. Rev. Plant Physiol. And Plant Mol. Biol.-1994.-V.45.-P.113-114.

253. Early steps in cold sensing by plant cells: the role of actin cytoskeleton and membrane fluidity / Orvar B. L., Sangwan V., Omann F., Dhindsa R. S. // The Plant Journal.- 2000.- V.23,№6.- P.785-792.

254. Morphology and microtubule organization in Arabidopsis roots exposed to oryzalin or taxol / Baskin T.I., Wilson J.E., Cork A., Williamson R.E. // Plant Cell Physiol.-l 994.-V.35, №6.-P.935-942.

255. Hong, B. Cloning and characterization of a cDNA encoding a mRNA rapidly induced by ABA in barley aleurone layers / Hong В., Uknes S.J., Ho T.-H.D. // Plant Mol Biol.-1988.-V.l l-P.495-506.

256. Тихая, Н.И. Действие фитогормонов на протеинкиназную активность плазматических мембран корневых клеток ячменя / Н.И.Тихая // Физиология растений.-1989.-Т.36, Вып.5.-С.1013-1011.

257. Романко, Е.Г. Влияние фитогормонов in vitro на активность протеинкиназы, связанной с тилакоидными мембранами / Е.Г. Романко, С.Ю. Селиванкина, Воскресенская Н.П. // Докл. АН.-1990.-Т.313.,№4.-С.1021-1023.

258. Hwang, J.-U. Abscisic Acid-Induced Actin Reorganization in Guard Cells of Dayflower Is Mediated by Cytosolic Calcium Levels and by Protein Kinase and Protein Phosphatase Activities / Hwang J.-U., Lee Y. // Plant Physiol.-2001.-V. 125.-P.2120-2128.

259. Tanaka, I. Organization of the actin and microtubule cytoskeleton preceding pollen germination / Tanaka I., Wakabayashi T. // Planta.-1992.-V.186.-P.473-482.

260. Eleftheriou, E.P. The effect of cytochalasin D on preprophase band organization in root tip cells of Allium / Eleftheriou E.P., Palevitz B.A. // J. Cell Sci.-1992.-V.103, № 4.-P.989-998.

261. Microtubules regulate the organization of actin filaments at the cortical region in root hair cells of Hydrocharis / Tominaga M., Morita K., Sonobe S. et al. // Protoplasma.-l 997.-V. 199.-P.83-92.

262. Menzel, D. Motility in the siphonous green alga Bryopsis. II. Chloroplast movement requires organized arrays of both microtubules and actin filaments / Menzel D., Schliwa M. // Eur. J. Cell. Biol.-1986.-V.40.-P.286-295.

263. Кулаева, O.H. Цитокинины, их структура и функции / О.Н. Кулаева М: Наука, 1973.-253 с.

264. Effect of cytokinin on the accumulation of pathogenesis related proteins (PR la protein) in vitro propagated Nicotiana tabacum shoots / Poupet A., Cardin L., Bettachini В., Beck D. // Physiol. Veget.-1990.-V.311 .-P.239-246.

265. Зауралов, О.А. Влияние цитокининовых препаратов и охлаждения на ростовые реакции растений кукурузы / О.А. Зауралов, Е.А. Курова, А.С. Лукаткин // Агрохимия.-1997.-№3.-С.55-59.

266. Использование трансгенных растений для выяснения роли цитокининов в устойчивости к засухе / Т.Н. Пустовойтова, Т.В. Баврина, В.Н. Ложникова, Н.Е. Жданова// Докл. РАН.-1997.-Т.354.-С.702-704.

267. Бутенко Р.Г. Влияние картолина на морозостойкость культуры каллусной ткани озимой пшеницы / Р.Г. Бутенко, Ю.А. Баскаков, И.В. Оголевец // Докл. АН СССР.-1982.-Т.267.-С.253-255.

268. Шевелуха, B.C. Влияние картолина на белоксинтезирующий аппарат листьев ячменя в условиях засухи // B.C. Шевелуха, О.Н. Кулаева, Ф.М. Шакирова // Докл. АН СССР.-1983.-Т.271.-С. 1022-1024.

269. Ковалев, В.М. О характере физиологических реакций при воздействии на растения экзогенных регуляторов роста химической и физической природы / В.М. Ковалев // С.-х. биология.-1998.-№1.-С.91-100.

270. Влияние антимикротрубочковых агентов на дыхание и ультраструктурную организацию клеток листьев пшеницы / И.Р. Абдрахимова, Ф.А. Абдрахимов, А.Ф. Абдрахманова, Л.П. Хохлова // Физиология растений.-2003 .-Т.50,№5 .-С.653-661.

271. Akashi, Т. Stabilization of cortical microtubules by the cell wall in cultured tobacco cells / Akashi Т., Kawasaki S., Shibaoka H. // Planta.-1990.-V.182.-P.363-369.

272. Белогуб, O.B. Прямое и опосредованное влияние картолина на физико-химические свойства мембран / О.В. Белогуб, Л.П. Хохлова, А.Ф. Кожакару // Сб. Водообмен и устойчивость растений. Казань: Изд-во КГУ, 1993.-С.60-66.2+

273. Аккумуляция ионов митохондриями озимых злаков: влияние низких температур и антистрессового препарата картолина / Л.П. Хохлова, О.В. Белогуб, Н.С. Елисеева и др./ Сб.: Водообмен и устойчивость растений.-Казань: Изд-во КГУ, 1993-С.6-24.

274. Developmental responses to drought and abscisic acid in sunflower roots.2. Mitotic activity / Robertson J.M., Hubick K.T., Yeung E.C., Reid D.M. // J Exp Bot.-1990.-V.41.-P.339-350.

275. Sacks, M.M. Effect of water stress on cortical cell division rates within theapical meristem of primary roots of maize / Sacks M.M., Silk W.K., Burman P. // Plant Physiol.-1997.-V.114-P.519-527.

276. Arabidopsis ABA Response gene ABI1: features of a calcium-modulated protein phosphatase / Leung J., Bouvier-Durand M., Morris P.-C. et al. // Science.-1994 .-V.264.-P. 1448-1452.

277. ICK1, a cyclin-dependent protein kinase inhibitor from Arabidopsis thaliana interacts with both Cdc2a and CycD3, and its expression is induced by abscisic acid / Wang H., Qi Q., Schorr P. et al. // Plant J.-1998.-V.15.-P.501-510.

278. Stress messengers jasmonic acid and abscisic acid negatively regulate plant cell cycle / Swiatek A., Azmi A., Witters E., Van Onckelen H. // Bulg. J. Plant Physiol.-2003 .-Special issue.-P. 172-178.

279. Zhang, K. Cytokinin controls the cell cycle at mitosis by stimulating the tyrosine dephosphorylation and activation of p34cdc2-like HI histone kinase / Zhang K„ Letham D.S., John P.C.L. // Planta.-1996.-V.200.-P. 12-20.

280. Barlow, P.W. Cytoskeletal perspectives on root growth and morphogenesis / Barlow P.W., Baluska F. // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant. Mol. Biol.-2000.-V.51 .-P.289-322.

281. A GFP-MAP4 reporter gene for visualizing cortical microtubule rearrangements in living epidermal cell / Marc J., Grander C., Brincant J. et al. // Plant Cell.-1998.-V. 10.-P. 1927-1939.

282. Showalter, A.M. Structure and function of plant cell wall proteins / Showalter A.M. // Plant Cell.-1993.-V.5.-P.9-23.

283. Тарчевский, И.А. Метаболизм растений при стрессе / И.А. Тарчевский.-Казань: ФЭН, 2001.-448с.

284. Галактономичный компонент клеточной стенки растений льна / Т.А. Горшкова, Н.С. Карпита, А.А. Кожевников, В.А. Лозовая // Физиология растений.-1998.-Т.45.-С.275-282.

285. Клеточная стенка растений и формирование гипотермического синдрома / Ф.И. Заботин, Т.С. Барышева, О.А. Заботина и др. // Докл. РАН.-1995.-Т.343.-С.567-570.

286. Bozart, С.Е. Protein water potentials / Bozart C.E., Mullet J.E., Bouyer J.S. // Plant PhysioI.-1987.-V.85.-P.258-267.

287. Weisner, R.L. Cell extensins mRNA changes during cold acclimation pea seedlings / Weisner R.L, Wallner S.J., Waddel J.M. // Plant Physiol.-1990.-V.93.-P. 1026-1031.

288. Kohorn, B.D. Plasma membrane-cell wall contacts / Kohorn B.D. // Plant. Phisiol.-2000.-V. 124.-P.31-38.

289. Gao, M. Yariv reagent treatment induces programmed cell death in Arabidopsis cell cultures and implicates arabinogalactan protein involvement / Gao M., Showalter A.W. // Plant J.-1999.-V.19-P.321-331.

290. Willats, W.G.T. A role for arabinogalactan-proteins in plant cell expansion: evidence from studies on the interaction of P-glucosyl Yariv reagent with seedlings of Arabidopsis thaliana / Willats W.G.T., Knox J.P. // Plant J.- 1996.-V.9-P.-919-925.

291. Youl, J.J. Arabinogalactan-proteins from Nicotiana alata and Pyrus communis contain glycosylphosphatidylinositol membrane anchors / Youl J.J., Bacic A., Oxley D. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998.-V.95.-P.7921-7926.

292. The Arabidopsis SOS5 locus encodes a putative cell surface adhesion protein and is required for normal cell expansion / Shi H., Kim Y.S., Guo Y. et al. // Plant Cell.-2003.-V. 15 .-P. 19-32.

293. Activation of Phospholipases С and D Is an Early Response to a Cold Exposure in Arabidopsis Suspension Cells / Ruelland E., Cantrel C., Gawer M. et al. // Plant Physiol.-2002.-V. 130.-P.999-1007.

294. Sherrier, D.J. Glycosylphosphatidylinositol-anchored cell surface proteins from Arabidopsis / Sherrier D.J., Prime T.A., Dupree P. // Electrophoresis.-1999.-V.20.-P.2027-2035.

295. Kawaguchi, K. A novel tetrasaccharide, with a structure similar to the terminal sequence of arabinogalactan-protein, accumulates in rice anthers in a stage-specific manner / Kawaguchi K., Shibua N., Ishii T. // Plant J.-1996.-V.9.-P. 777785.

296. Immunocytochemical localization of wheat germ agglutinin in wheat / Mishkind D., Raikhel N.V., Palevits B.A., Keegstra K. / J. Cell Biol.-1982.-V.92.• P.753-764.

297. Oxley, D. Structure of the glycosylphosphatidylinositol anchor of an arabinogalactan protein from Pyrus communis suspension-cultured cells / Oxley D., Bacic A. //Proc Natl Acad Sci USA.-1999.-V.25.-P.14246-14251.

298. ADF proteins are involved in the control of flowering and regulate F-actin organization, cell expansion, and organ growth in Arabidopsis / Dong C.-H., Xia G.-X., Hong Y. Et al. //Plant Cell.-2001.-V.13.-P.1333-1346.

299. Profilin plays a role in cell elongation, cell shape maintenance, and flowering in Arabidopsis / Ramachandran S., Christensen H.E.M., Ishimaru Y. et al. // Plant Physiol.-2000.-V. 124-P. 1637-1647.

300. Characterization of an Arabidopsis thaliana gene that defines a new• class of putative plant receptor kinases with an extracellular lectin-like domain / Herve C., Dabos P., Galaud J.-P. et al. // J. Mol. Biol.-1996.-V.258.-P.778-788.

301. Structure of mannose-specific snowdrop (Galanthus nivalis) lectin in representative of a new plant lectin family / Hester G., Kaku H. G., Goldstein I. J., Wright C. S. //Nature Struct. Biol.-1995.-V.2.- P.472-479.

302. Weis, W.I. Structural basis of lectin-carbohydrate recognition / Weis W.I., Drickamer K. // Annu. Rev. Biochem.-1996.- V.65.- P.441-473.

303. Post, G. Effects of local anesthetics on membrane properties. П. Enhasement of the susceptibility of mammalian cells to agglutination by plant lectins

304. Post G., Papahandjopoulos D., Jacobson K. // Biochem. Biophys.-1975.-V.394.-P.520-539.

305. Is microtubule disassembly a trigger for cold acclimation? / Abdrakhmanova A., Wang O., Khokhlova L., Nick P. // Plant Cell Physiol.-2003.-V.44.-P.676-686.

306. Колесниченко, A.B. Белки низкотемпературного стресса растений / А.В.Колесниченко, В.К. Войников. Иркутск: Арт-Пресс, 2003.-196с.

Информация о работе

Гараева, Лилиана Дамировна
кандидата биологических наук
Казань, 2005
ВАК 03.00.12

Диссертация

Активность, состав лектинов клеточной стенки и модификация цитоскелета при действии антистрессовых регуляторов роста и закаливании к холоду озимой пшеницы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы