Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Воздействие карнитина с андрогенами на ферментный аппарат лизосом мужских добавочных половых желез при экспериментальном сахарном диабете

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Воздействие карнитина с андрогенами на ферментный аппарат лизосом мужских добавочных половых желез при экспериментальном сахарном диабете"

V i »

t 7 Otf

шистеротво здравоохранения и медицинской

ПРСШШЕБШОСТИ РФ РЯЗАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ШЕНИ АКАДШКА И.П.ШБЖВЛ

На правах рукописи УДК 612.015.1:S77.1S2:С612.616.31

екеоядев валерий eîkî0pcsm4 вовдзйствие карштж4 с дндрсгоши на (ьерк2ншй аппарат лизосоы уушзк добавочных пояоздх kfjie3 при екоерямеятальнш сахарксу " 5г

D3.00.04. - Ексхимия

Дето

диссертации кз соискание ученой степекг канд:тд?иа м-эдиют'.сдаг К-ук

Р?,г*ачъ - 1SS0

Работа выполнена в Рязанском государственном медицинском "ниворсдаате- шани академика Й.П.Шшлааа

Научный руководитель - доктор кедицинскшс нзук,

академик РАН Е. А. Строга 'Лаучнии консультант - доктор «э^кщшгккх кзук,

профессор В.Г.Макзроаа С^ициалгныг сппокенти: доктор шдицннсякх наук, профессор Е.Г.Чеиин кандидат медкциксюа: кзук А.Б.Дкктр;гэн

йэдус-з? учредд энхе - Московская игддщинсгагз стоматологический институт

Занята диссертация . состоится "_" '.., ........, ., -1536 г.

з_часов на заседании ®1сеертацжж»гэ ^Ссо^ка

Д 004.57.С2

. при Рязанском государственна«,; медицинском университет® 1Ж~ т: академика И.П.Павлова ( 231000, Ра, г.Рязань,уд.Високо-вольтяак, д.9 )

О диссертацией глохло ознакомимся в библиотеке Ряегкского государственного -медицинского университета им. акад. И.П.Пакюва ( ул. Шэвченка, 34 )

Автореферат разослан " _ " ___' 1698 г.

Ученый секретарь соаета

кэддидат Е.А.Рязаноаа

биологических наук

СВДЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ТВШ

Сахйршй диабет - одна ив ведущих проблем внутренней медицины. В настоящее время по мэдико-социальной значимости он занимает место непосредственно после сердечно-сосудистых и онкологичесгап заболеваний.

Варувзвке подовой Дующий у мужчин является одним из наиболее частых, но мало изученным осложнением сахарного диабета. Быстрота раэгатйя п тяжесть крушений саговой функции у- мутжщ определяется Еогрзстш больных и длительностью диабета, а тгкжэ состоянием ксатеясации обменных нарушений.

Укогообразное и кепсиредстаешгоз участие в адаптив-яо-зссстааагительяых реакциях организма, а такме при обмев-елх нарушениях . прйяшздт лизосск.йг. 'Лнзсссмальнке фермэиты осутчэствднзот катаболизм биополимеров, участвует в обновлении макромолекул и, в зяачителыгой поре, определяют состояние ¿Езпзиологгмесклх процессов в тканях и развитие патологж ( Р.И.Сакганик 1080, 1S31, Л. Е.Панин 1083, А. J.E.-rrei

1577 ).

Яэаестно, что лнзоссмальш;е гликоалдагы участку»? г. гздролизе биополимеров, а частности, скаюсодержащих г линз;:-рстеадов. Количество последних на ыекбранах сзяэаио с.гге-:-цессом созревания сперматозоидов и их оплодотворяющей сп-.-сабностыз ( Г. А.Кочетков. 1380 ).

Андрогесы определит структурную фуя::цио1гальвую ncj;~ нсцэвкостъ мужских дсЗоьочгш пологих келсз. Ф/юздюкальнг* зкти2яссть данных желез имеет существенное значение для на-::*;:;лег.кл е::ермч зг сохранения ее спладстзоращг'и способности, еддояемие желе?.*»:/!:. я.~и::ют кз' характеристики

менной жидкости, обеспечивают соловые клетки энергетическими субстратами, влинпт ва подвижность сперматозоидов, содержат биологически активные соединения, облегчающие передвижение сперматозоидов в пазовых путях женщины ( Г. А, Кочетков 1980, К.ОосЪегЪу ег а1., 1379 ).

Одним из путей регуагйщга клеточного метаболизма является влияние гормонов на £.№асаш. Воздействие уровня андроге-нов и инсулина на активность лизосаиадьных ферыэнтов в мужских добавочных половых хелегзх изучено ша.

2 медицинской практике для компенсации обменных нарушений, в последнее время, стала широко примениться витамина и зитаыииоподооные вещества. Одним из них является карниткн. По литературным данным имеются сведения о инсулиногенном и гипоглвкагшеыическом действии { Е. К. Ким и др., 1932 '*) анаболическом эффекте каршлина ( В.М. Авакумов и Др. , 1988 Как активный метаболит, карнитин, участвуя -з ."Ярбфесах трансметитрования, стимулирует синтез белка. -.В2$ййк на метаболизм жирных кислот во многом определяет ЗЛ) основную роль. в различных физиологических процессах ( Л .'П. Гринио 1988;А.Л» Караев, и.А. Ковлер 1988 ).Также'Известно, что карнитин принимает участие в процесах созревания сперматозоидов и акте оплодотворения (Л.Й. Гринио 1588 ).

В связи с этим представляет несомненный интерес изучение роли лизосомалъшх ферментов добавочных мужских половых желез в нарушении обмена веществ в семенных пузырьках и предстательной железе при экспериментальном сахарном диабете , и разработка некоторых способов коррекции этих нарушений.

- 3 -

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ

Цель работы состояла в.выявлении изменений, ферментного аппарата лигесом семенных пурырькоЕ и предстательной железы при экспериментальном сахарном диабете и их регуляции инсулином, андрогеками н карнитинш.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Выявить особенности кгменешш активности ряда лкэо-с.омалъннх ферментов ( в-газактозидзгы и катепсинов В и Д ) б семенных пугырьках и предстательной жел??е яри аллоксаноЕом сахарном диабете.

2. Оценить структурно-функциональное состояние лиеосо-мзиаксго аппарата семэнкых пузырьков и предстательной жзлегм при аллоксаиозом сахарясм диабете.

3. Показать гначенке инсулина и карнитина' в регуляции, активности лизосомальных ферментов в семенных пузырьках и предстательной железе при недостаточности инсулина и андро-ге»'ов в организм?.

4. Выявить особенности действия андрогеноз к карнитикз на лизосомальные ферменты мужских добавочных половых ж?лег при экспериментальном сахарном диабете.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ

В данной работе Епервые изучено изменение активности лкзссомалыгкх фермент-ав в семенных пузырьках и предстательной железе крыс при экспериментальном сахарком Выявлено влияние андрогеноЕ, инсулина и карнитнна на фун-си*? лизосом иулскях добавочных пгловых органов при эдлэкськ.'-.-ои сахарнсм диабете, дан? сгат-н«;га зейстагя карлштпиа я экдро-гекэв на ж«?оссчаль?пгп пя^г/ат см-г.^ннмк ny31vb.eeа :•. пгодо::»-тедм'ой к?;дгч- Г п•• •

организме.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ Полученные данные важны для понимания роли лизосомадь-1шх ферме ¡¡таз в рагвигки патологических процессов в предстательной железе к семенных пузырьках, их следует учитывать при разработке принципов комплексной^терапии нарушений половой функции у мужчин при сахарном диабете. Определение зк-тквиости дизоссмзлькш: ферментов у бальных может оказаться информативным показателем при оценке степени тяжести сахарного диабета, постановке дифференциального диагноза различных форм мужского бесплодия при сахарном диабете, контроле эффективности проводимого лечения и определения прогноза тетания дбяян;. заболеваний.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ Основные результаты исследования были доложены на заседании Рязанского отделения Всероссийского биохимического об-фства С 1956 ), объединенной межкафедразшной конференции Рязанского государственного мзднцкнекого ухшаерсйтвга шиж академика /I. П. Павлова ( 1996 ).

швлиищии

• По ыахеркааам диссертации опубликок&ко 4. к,чзаяа« работы.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА дЩССЕРТАЩШ . Диссертация изложена на •сграааадй ьздакотизсго текста и состоит из введения, сб£юра литературы, описания материалов и методов исследования и их обсуждения, выводов и практических рекомендаций, библиографического указателя, вклгт:ающего 127 источников. Иллюстрированный материал представлен 7 рисунками и 11 таблицами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа £йпсл:!екз на 533 беспородных белых крысах самцах массой 160 - £00 г. Сахарнгй диабет у крас моделировали подкожным введением 5 X водного раствора аллоксвнгидрата в доге i 25 мг на кг массы животного. Развитие сахарного диабета контролировали по содержанию гдокогы и инсулина в сыворотке крови.' Забей осуществляли на 14 день после введения адлок-сангидрита. Оргндэктомию проводили по методу, описанному К.Д.Нирпенблатои ( 1953 ). Забой после кастрации осуществляли ка 14 сутки. Сахарный диабет на фене двусторонней орхи-дзктомии вызывали введением аллонсангздрата чзреа день после грхздэктомии, животных забивали на 14 день после кастрации.

Проведегы следующие серж: In vivo: 1) интактиые; 2) ал-лсксановыи сахарный дпзбет; 3) адлсксашвый диабет + введение инсулина з течение. 7 дно::; 4) агдоксансзнй диабет + введение кврнитина в течение 7 дней; Б) двусторонняя орхидзкто-иия; 6) двусторонняя орхидзктоккя + гггачнпе тестостерона * течение 7 дней; 7) двусторонняя ергэднктоггл + ззедспж кл;:-нитияа в течение 7 дней; S) аалоксановки диабет кз фоне двусторонней орхидэктошш; 9) шисксаксзнй диабет из фоке двусторонней орхидз:ггс).я:и + введение тестостерона в течение ? дней; 10) аллоксанрвый диабет ка фоне двусторонней ерх;--д-ктомзж т введение инсулина к течение 7 дней; 11) адлокеа--ношя дичбет на фоне двусторкн?;:: срхвдэктсмии + введение кэрнитнка в течение 7днеа. Инсулин. вводили подкожно в дог?^ 0,1 ед. на кг массы гшвотного. мзелякий раствор тестэете-рок- арсяиокзга - впутржадгечг.Ь в до«?е 1 мг/кг масси животного. аодякй раствор карантина - per es в доге 50 мг/кг массы ,чг-;вот«гг>-. Длр ср?кдэктшировзвша животных контролем явля-

лпсь лсшгаоперированкые улшотныа, в других контрольных сериях зшвотньм в то же сроки вводили соответствующий растворитель.

В опыт брали 7-8 животных. Крыс забивали под легким эфирным наркоэом.Забор крови осуществляли из брюаной аорты, сыворотку' получали центрифугирование^ крови при 1500? в течение 15 минут. Органы: семенные пузырьки и предетательнув жэлегу, ' - извлекали, измельчали и гомогенизировали в 0,25 11 растворе сахарозы содержащем 1 Ш ЗДТА и 50 мМ трис-HCL, рН 7,4. тркс-KCL, рН 7,4. Все процедуры проводили при температуре +<1° С.После центрифугирования гомогената при 1000 g в течение 10 шшут над осадок. сливали и. центрифугировали при 200CQ g 30 )..лнут. В полученном супернатанте измеряли неседи-ментироваинув активность, а в ресуспендированном в присутствии неионного детергента тритона Х-100 осадке определяли седиментированнув активность лизосоыальных ферментов. Сумма неседиментированной и седиментированной активности принималась за общую активность. - Активность дизосомалъных ферментов У г&лактоаидазы, катепсина В и катепскяа Д в тканевых гомоге-натах определяли спектрофотометрическими методами по скорости гидролиза п-нитрофенил-Д-галакташрансзиД£1> бензоил Д-аргикил п-нитроанклина и гемоглобина(в присутствии пепс-татина)соответственно. (В'.С. Асатиани 1969, АХ. Tappel 1969,' 6. Чз&з 1973 ).

Концентрацию тестостерона и инсулина в сыворШке крови определяли радиошыуняши методами с использованием стандартна: RIA-набороз. Содержание глюкозы в сыворотке крови определяли о-толлуидиновым методом,белок определяли микроби-уретоБым методом ( В. С. Асатиани 1969 ). Гистологическое

исследсвакие (выполняю в ЦН№ РягПС ): для светооптичес-кого исследования срезы скрашивались гематоксилином и эозином, для злектронномикроскоппческого исследования полутонкие срезы окршзивали метияеновьи сишш и кислым фуксином, уль-тратонкке срезы контрастировали уранилацетоном и цитратом свинца и исследовали в електоронном микроскопе ЗМ - 125К.

Результаты экспериментов обрабатывались методом вариационной статистики с использованием критериев г Стьюдента.

ССЯОЕШЕ РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ -1. Изменение функционального состояния лигосомального глпдрагя предстательной жэлепы и семенньпг пузырьков при ал-диабете.

■ У интактнвх животных уровень глюкозы в сыворотке крови составил 5,24 1,85 ммоль/л, концентрация инсулина и тестостерона соответственно 3,34 ± 0,45 мкэд/цл и 2,55 ± 0,55 нг/мл. Масса семенных пузырьков и предстательной железы составляла 320 + 18 мг и 290 + 16 мг соответственно. Активное т; кзучаемых лкзосомальных ферментов представлена в таблиц? 1.

При ■?коп:-рнтальном аллоксааовом диабете наблюдалось скижени? кассы муксгах: добавочных пслс-ивс же лог з дна рага. Уровень глгокога а сысороткг крови у зкеде римепгальпых »шатиях по^и-гагок н& 502,8 2 (р ^ 0.05 а кевцевтгг.ция кясули-на 'г->стссторена н=- оГ

!П ч< . С '." ' ОГ ;.Ч'ОВ

Г.?и »сросхспг к»ском яегдедрй« предстательисй жгдез» лздоткых с :>• диабетом обнаруживаются изменения. гатрагяЕг^етте сосудистую сеть, строму и с<гкр*тсрннй гпятеляа. Сбргл^гт па с~бя ?ш:мз-• ум»яь2ояг$ секг>?тор.чсго содержимого в п.'.^ср^т-э семенная

им-гктальк^! сажтолыи

Таблица. 1

Активность ферментов лиэосом в мужских добавочных половых делезах интактннх животных

Эрманты и формы активностей

ё> -гадактозидаэа I

общая 1

чзседишнтированная |

н/об % 1

семенные пузырьки | предстательцая I

о

( И ± м ) I железа ( Ы ± м ) [.

40,713 + 3,143 0,850 + 0,158 2,1

35,143+2,989 ! 0,845 ± 0.016 1 2,5 !

чатепсин В общая кеседиментированная я/об 7.

0,404 ± 0,072 0,045 ± 0,012 11,6

0,272 + 0,016 0,017 + 0,002 4,6

катепсин Д

кеседиментированная н/об г

5,470 ± 1,413 0,225 ± 0,036 4,1

1,011 ± 0,008 0,068 + 0,008 6,7

Примечание: активность ^-галактозидааы выражена в нмоль п-нитрофенола х мг белка-1 х ч -1, катэпсина В мкмааь п-китроанилина х мг белка-1 х ч-1, катеп-сина Д мкиаль тирозина х мг белка-1 х ч-1 н/об X - соотношение неседкмевтированной активности к общей активности в %. п - 7

пузырькгв и просвете желез предстательной железы, а такие сглаженность рельефа секреторной поверхности эпителия исследуемых органов. Изменения со стороны внутриорганной сосудистой сети заключаются в расширении и застойном полнокровии артерии и вен в слизистой оболочке, мьлечном слое и вдвенти-цки семенных пузырьков и предстательной железы, обнаруживается набухание клеток эндотелия капилляров, дистрофические изменения цитопдззмк этих клеточные элементов. Усиливается пкнацитсзкая активность эндотелия, о чем свидетельствую? . многочисленные пиноцитозныэ пуеырьга! в цитоплазме эндотелия капилляров. Базальяал мембрана капилляров разрыхлена, по периферии кровеносных сосудов обнаруживаются зоны отека. Цилиндрически® секреторные клетки эпителия семенных пузырьков и предстательной железы приобретают форму близкую к кубичее-ксй. Количество секреторных гранул в цитоплазме г тих клеточных элементов умелыпается. Количество лизосом в цитоплазма секреторных клеток данных органов визуально не меняется. Однако, обращает на себя внимание появление довольно крупных лигоссм с гетерогенным содершгккм, которые могут быть зден-тифицированны как зутофятолизоссмы, а та® появление остаточных телец. 3 отдельных полях зрения среди клеток эпителия слизистой семенных пувирьков и эпителия секреторных отделов предстательной желевч сбнаруживаятя' клеточные элементы г тин;!*«: пикнотичными ядрами и скетлои цитоплазмой. Прг зле.'страпгсяикросютпическом исследовании подобных клеток обнаруживается сильная конденсация ядерного хроматина, локает-?7»п;еге--я преимущественно под кариолеммсй, и выраженная лресветзл^кгссть, разреженность цитоплазмы, свидетельствуются о лпгисе ¡^•гзплззиаэтггеских структур.

При исследовании активности лкгос'дашьшх фгрментса при экспериментальном сахарном диабете в .семенных пузырьках и предстательной железе выявлено снижение сбщей активности изучаемых ферментов: ./-гадактозидззи на 75,'6 7. (р ч< 0,05 ) и 53,2 % ( р 4 0,05 ) , катепеика В на 61,4 7. ( р ^ 0,05 ) и 37,6 Т. ( р i 0,05 ) и катепсина Д на„ 62,3 7, ( р i 0,05 ) и 23,8 7. ( р < 0,05 ) соответственно. Выявленное з нашем эксперименте падение общей активности всех изучаемых дизосо-шлышх ферментов макет быть связано с изменением проницаемости лизссомальных мембран. Известно, что при сахарном диабете помимо инсулинопении наблюдается изменение к в механизме действия гормона: снижение на 1/3 инсулин-связывающих сайтов, тиризинкиназной активности инсулиновогс рецептора, нарушение метаболизма миоинозитола и фосфолипидных производных в печени и почках кроликов ( И.М.Кендш . 1983, А.Г.Уин-ченко 1988), что может отразиться на предполагаемой сложной цэпи последовательных реакций фосфсрилирования. Повышение концентрации свободных жирных кислот в крови вследствие усиленного липслиза, наблюдаемое при сахарном диабете, приводит к ускорении диффузия их в ткани- В организме животных с сахарным диабетом также наблюдается снижение pH, активация пе~ рекисного окисления липидов. Все перечисленные факторы могут вызывать лабилизацио лизосомальных мэмбран, что ведет к повышению их проницаемости для лизосомальных ферментов. Наряду с этим при сахарном диабете наблюдается снижение синтеза белка в организме,. что может привести к уменьшению образования лизссомальных ферментов ( A.J.Ashord, V.M.Paln 1986 ).

2.Изменение функционального состояния лизосомального аппарата предстательной железа и семенных пузырьков при ал-

- и -

локсановом диабете в условиях коррекции его инсулином.

При заместительном введение животным с экспериментальным сахарным диабетом цинк-иисул!Ш суспензии в дозе 0,1 ед/кг изменения, возникшие в семенных пузырьках и предстательной железе в целом редуцируются. В сыворотке крови наб-лидается снижение содержания глюкозы в 2,9 раза, но ее концентрату ;я остается выше чем у контрольных животных на 72 X, инсулина повышалась в 4,4 раза по сравнению с дкабетными животными и составила 149 7. от концентрации инсулина у контроль нкх животных, концентрация тестостерона повивалась в 3,3 ргза и приближалась к уровню тестостерона у контрольных аи-зотнкх. Кз?яду с гткы отмечалось ув&яичениэ массы мужских добавочных половых желез, данные показателя быля близки к нормальным. ( р $ 0,05 для все определений )

При морфологическом исследовании отмечается сглаженность изменении, обнаруживавемых при экспериментальном сахарном диабете. Явления атрофии менее.выражение, среди атро-Фичных неточных элементов встречаются клетки яо своей морфологи;; -лпзкг.е к нормальным, вплоть до наличия в апикальной цитоплазме признаков секреция, в вида типичных Еакуоаей с эксцентричными электренноялотными гранулами.

' При курсовом введении инсулйкз общая акманость лиэосо-мальных ферментов г сешпйых пузырьках и предстательной железе возрастает, приближаясь к уровню контрольных животных I' составляет соответственно ддяр-гзлактоэидазы 39,873 + 8,593 :: 25.181 * 2.479. для катепсиса В 0,381 ± 0,058 и 0,355 + С07. для катепс::на Д -¿,954 £ 0,132 и 1,025 > 0,01?.

Язленкя редукции игмэяеиш«, аозникеадих при экспериментальном сахарном дпзбетэ, обгясигются коррвк^йй Инсулином

- 12 -

сянсвныг звеньев патогенеза сахарного диабета.

3.Влияние карнКтина на активность лизосоаальных ферментов в предстательной железе и семенных пузырьках при аллок-саневок диабете.

При »урсовоы введении карнитина животным с экспериментальным сахарным диабетом в сыворотке крови на&яздается пэ-высгениэ концентрации инсулина в 1,6 раза ( р ,£ 0,05 ), что сострадает 50,8 X от уровня инсулина у контрольных животных. Концентрация гяэкоэы в сыворотке крови меняется незначительно. Уровень тестостерона возрастает в 1,4 раза ( р ч< 0,05 ) и составляет 56,8 X от концентрации тестостерона у контрольных жиаотшх. Влияние карнитина на массу добавочных мужских половых звгяез не было выявлено.

При морфологическом исследовании семенных пувырьков и - предстательной желош у данных нивстных обнаруживаются лэт- ■ ъ&еев, аденткчЕькз изденешшя, выявленный у яивстных с зкспе-ршентальЕШ диабете».

В emsssuz пузырьках и предстательной желе ге у крыс шедэ Еведашш карнит:т наблюдается повышение обгдех актив* костон лизсеоиагъню: с-рментов: f> -галвктогидавы в 3,2 и 1,7 ' разе, 4SO составляет 78,3 X и 64,6 X ст активности фермента у кштроганых животных, катепсина В в 2,4. и 1,8 раза, что составляет 84,1 X и S3,3 X и катепсина Д 2,6 и 1,3 рага, что составляет 99,5 X и 38,6 % от активности фермента у инта«-.-шх животных (рис. 1 ).

Полученжк в нзззд экепэркиенте изменения можно объяснить влиянием квршгашз. Известно, что карниткн обладает ин-еулйлогеняым действием., имеются литературные данные et ана-башчестем еффекте карнитина. Как активный метаболит k-'püm-

- я-

Ркс.1 Изменение активности лизоссмалызых ферментов в сензнных пузырьках и предстательной железе у животных с аялоксано-зым диабетом, .получавших инсулин и карнитин.

СЕШЕШ ПУЗЫРЬКИ

24,4 I*"

400,7

XXX XXX XXX XXX XXX XXX

XXX —р—

320,7

244,2 243,6

33,6

-и

ххх ***

5ЕХХ 37,7

XXX ***

XXX *** 1

264,1

242,2

XXX ***

XXX ***

XXX

XXX ***

-1 ■ ■■— 2-

ПРЕДСТАТЕЛЬНДЯ ЖЕЛЕЗА

194,8

36,8

I

179,6

129,5

XXX ***

XXX

Л!«!

XXX ***

XXX

о <52.

с

Примечание: А -.р-галактогидага; Б - катепсин В; С - катеп-син Д; 1 - сахарный диабет, 2 - животные, получавшие инсулин, 3 - животные, получавши карнитин. За 100 7> взяты животные контрольных групп.

т.*-., участвуя е процессах трансметилирсваЕКП, стимулирует сизггса белка. Влияние на кехабошиш жирных кислот ьо многом определяет его основную роль в различных физиологичееикх прааэсса- С Е,Ь£. Авакумов и др ., 1988, Л.П.Гринко 1386, Л.Карцев и др., 1991, Е.К.Ким -,{ др., 1662.).

4.Сравнительная характеристика действия тестостерона у, карактинз на активность лкгоеомалъзглс ферментов в предстательной железе к семенных пугирьках прл двусторонней орхи-дькгоша!.

Нвиболее вокааатеаьнша в отношении действия недостать аздрогеноЕ являются аффекты, вызываемые кастрацией. В наше« вкспоримэнте после двусторонней орхидэкгомип наблюдалось, резкое падение уровня тестостерона. Концентрация тестостеро--гг?. снизилась практически до нуля и не воспринималась радк-лшвдовш методом. Отмзчалось резкое уменьшение массы еемен-шз пузырьков к предстатель кой хел^гы. При морфологическом йссхэдованш: изучаемых органов обнаружены явления атро&П" В некоторых наблюдениях обращает ка себя внимание увеличу« кшичества ьастоцитов ( тучных клеток ) по перлфэрзж крове-тасвых сосудов ьэкг ■."¡."•лр.чуляторяого русла етром!# как семе-квых иузырьксЕ, так и предстательной дедезы.

При исслодованви акпшкссти. едгссонзлг.кых фзрмэатог в с ненова пувырькэх и предг.тателъкой жсдоаг орлУ.ззктомирсван-

ШХ ЯКВОТНЫХ было ВЬШ£_! к но укен>.

$> -галЕкто-Н5даи;ы в г,Б ( : у ;!'.£.?( и О.Со 1 --а-

за, к&тепскка Ь х. 1,5 ( р : 0.05 ) . > £,0 ( р »< 0,05 ; рас;, я

катепсина. Л б 2.8 ( р 0, ,02 ) к 1,1 . ( р 0,05 ) ра;-а, что

еоетавлдло со отношению к г^шюоперированюа! мееотнкм для р -гадиктигкдаэи 40,7 X и 31,7 Х.катеясииа в 67,1 и 43,Б 7.

- 15 -

и катепсина Д 36,0 7. и 55,0 '7. соответственно.

При заместительном в&едсжш тестостерона орхидзктс-жро-ВШШЫМ ЖИВОТНЫМ НабЛЮДаеТСЯ редукцзш ПОСТКаСТраЩ'СШШХ Ш.ЗЛ2" нененкй. Пасса предстательной з&олегы и семенных пуэыргков достигает уровня штакткых • животных, "при морфологическом исследовании отмечается.сглаяедаость, -Еогникших после кастрации, изменений, вплоть до участят по сгоей морфолопш близких к нормальным. Уровень тееткстз^зка ."в снгсрвя® крозя резко возрастает и превышает урогеяа "у ."ложносаерирояаянаг хивотных в 6,1 рага.

Акгиикхгть изучаемых лиг ос скальных ферментов возрастает как в семенных пукгршга, тш: и предстательной жэдове и достигает урСЕКЛ активистки контрольных животных. Общая вхтт-нссть по отношению к -контрольный животным соответственна з семенных пузырьках и предстательной железе составляет для >-галактозидзгы 103 7. (р < 0,03) и 87 % (р 0,05), для ка-гепсина В 93 % ( р 0,05.) ¡i S.i t ( р _< 0,05 ) и для кзтеа-сина Д 93 % ( р ч< 0,03 ) И 59,7 X ( р „< 0,05 ).

Установлено, что стероидные.гормоны проявляет выражен- ® ное ме^бранотропное действие. Благодаря своим физико-химическим свойствам тестостерон связывается с липидными компонента}.® й гидрофобными группами белков лизосомальных кгмб-ран. При низком содержании мужских полевых гормонов, еызызз-емом орхидзктомкей, выявляется эффект стабилизации мембран ( Н.А.Плохинский 1380, Н.Н. Мушкакбзров 1983 ).Согласно многочисленным исследованиям мужские половые гормоны авдяшея ткзаеЕс.спвцвф!ивсиага индукторами азгтоаа белка и ферментов и зто создает возмоалость для реализации других, ке м-мбрая-них путей регуляции лизосомзльннх фэрмейтов з репрадуктпгньз

Ььедевйэ орхвдэкгийфованвш яввопшм глрхглг&ь. ре г оз н; очагываяо влияния :ча изучаемые м:-1>,и параметры.

5. Сравнительная харал-хлр#хт^ча дек-г^йй гаирзпяивь, ¡г тестостерона ка фуги-циснальг-ое ссстсиние «ксаок-мьвсго -аппарата седлиякх гугыръков и вредстагед&вой изгадакк-ьзфсванкшс крыс с алгоксзиозкм диабетом.

При исследовании функционального состоянии гкгоссм шша. пуацрьков в предстатель кол железы ыяютаах с зкзпп-к-»вентадьзшм сзхаркьм дкабетсм ка фоне двусторонней срхндзкто-мии обнаруживается изменения характерные для раздельного влияния кастрации и аллсксангаого диабета, степень выраженности которая не ысжет быть оценена как более высокая.

Введение карнитина данным животным не меняло изучаем«® парашэтрн. При заместительном введении тестостерона нвбдода-ется псвшэкне оба^а активности изучаемых лизогсмаягных формантов, . но выраженность этих изменений кже. чем при введении тестостерона животным без экспериментального диабот^. . Аналогичная картинг ¡-ч^адается при заместительном введении инсулина ( рис. 2 ).

Таким образом, проведенные исследования касаоали, "тс применение карнитика при экспериментальном сахарком дяабс-те сюзкает патологические изменения ь .-емекных гггрярькзх к предстательной железе, но не ьхияет на изучаемые показатели при орхЕДЭКТошзи. На основании этого г цзшыо улучшения репродуктивной фунхцй:: у мужчин,' страдаюдкх ¿ахэрным диабетом, мсзеэт оказаться целесообразным использование ка^чгяна е комплексной терапии данною заболевания.

- -1С- |

Ркс.2 Кгменение активности дкзосомальиых ферментов в еементг: пузырьках и предстательной железе у орхидэктомированпых животных с аллоксановым диабетом, получавших карнкткн. тестостерон или инсулин.

спгшыг пузырьки

83,7 90,3 91,0

*** ш -А** 67,4

56,7 54,1 52,7 54,7 *** 88« ***

- —- 888 888

30,7 *** 888 XXX *** 888 А-АА 888

«8« XXX *** 888 36,8 58,8 *** 888

25,9 XXX А** #88 XXX *** 888 -- *** 888

- XXX **г* 888 XXX *** 8-88 1 ¡XXX 8881

1 XXX «88 XXX *** 888 | ¡XXX «А* 888|

-й- —3-—4- —1- —2— —я- —4- -—£— -3— —4-

-а-ъ-а.--о--*-1--

две

ПРЕДСТАТЕЛЬНАЯ ШШЕЗА

42,0

49,9

58,4 57,4

XXX XXX XXX -2-

А-

8«8 888 #3«

т

-4-

55.9 58.1 *** 888

ЛЛЛ 888

XXX ллл 888

XXX *** 888

XXX *** 888

XXX *** 888

-1- 9 -4-

В

162,9

88,7 88,2

66,0

69,5

XXX XXX XXX XXX XXX

-а

с

.114,:

«»41 888 в«« 888

«88 «8* «88

-4-

Пртаечакие: А -¡> -галактойидаэа-1 В - катепсин В; С - катеп-син Д. 1 - сахарный диабет + орхидзктомия; 2 -животные, получавшие карнитин; 3 - животные, получавшие тестостерон; 4 - животные, получавшие инсулин. За 100 7. взяты яавотяые контрольных групп.

- 18 - — ВЫВОДЫ:

1. При авдоксановок диабете наблюдается снижение активности р- галакгозидазы, катепсина Е и катепсина Д в семенных л?гкгсь;лах и предстательной железе половозрелых крыс-самцов. Зга пгмейенг-г. активности дигосомалышх ферментов сходны с таковимп ари двусторонней орхкдэктомии.

2. ¿хгэнсааоеый диабет приводят к снижению концентрации тестостерона з сыворотке крови половозрелых кркс-сшцов.

3. Заместительное введение инсулина животным с зкспери-V сохаонш диабетом восстанавливает обсею активность £-гадзктсаидазы, катепсина В. и катепсина й. в. семеннък кузнракаг и предстательной иелеае и нормализует, уровень тестостерона в сыворотке крови у половозрелых крыс-самцов.

4. Введение животным с экспериментальным сахарным диабетом каркитина восстанавливает общую активность -галакто-ездагы, катепсина В и катепсина- Д в семенных пузырьках и предстательной железе и вораалнэует уровень тестостерона в екзоротке крови у половозрелых крыс-самцов. .

5. Введение орхидэктсмирозавнш ха&пньш карнитина не огааьеваэт влияния п-з ггтаквкость изученных лигоссмальных фер-кезтов в семенных пугыр^яах и предстательной шлеге. Заместительное введение тестостерона животным с двусторонней ор-хндзктомаей нормализует изучаемые показатели в мужевгре дсба--вочеых половых «элеаах и сыворотке крогт крыс-саицгв.

6. &ллоксщюеый сахарный диабет в сешнщах пузырьку к предстательной шлеге вызывает ивмокенаг., затрагивающие сосудистую сеть, сх-ро^.д- и секреторный эдятелий, которые заключаются £ уънаъЕонпя ш-л-гржишто и сгдажэнности рельефа секр?торнс-?о ^гямс.-йл, т раскирении и застойном аоя-нохрег;з: с-.с-удгг.. ¡-чсыг.гья?. г.глп*?ство сокретор:кх гранул в

«ecaejsyeuux органах.

,7. .Двусторонняя орзодзктомия у животных с алдоксаноЕыи .'дггабетом из усугубляет мсрфа-энзимолсгкческие изкененшз a лизосомах семенных пузырьков и предстательной железё поло' Еазрелых крые-самцов.

8. Заместительное введениа тясулика или тестостерона орхидэгасыирсианнш жквзтнш с экспериментальны* сахара® диабетом повышает актизкостъ летссомальншс ферментов» на не до уровня шпактнас жшзтпых. -Введение карнатина данным тавотным не 0!гаэыввет-ютягаа шшэучаеше параметры в мужских добавочных 'пшюгах аиаззах -крш-сшцоа.

список тот, СШ'ВЖШШШШХ ЛО ТЕМЕ ДИССЕРТАЩМ.

1. Николаев В.Б., Строев S.A., Дстраханцев А.З. Биохимические ¡^следования спориоялагш при «ужеком беспгодш // Урология и нефрология. - 1293. - N 3. - С. 33- 28.

2. Николаев В.Б., Астраханцев А,©. Изменение фующво-нального состояния лизосомального аппарата предстате.-ънсй железы при сахарном диабете // Актуальные вопросы медицина а здравоохранения: Сб. науч.трудов. - Рязань, 1935. - С. 101 -105. .

3. Николаев В.В. Влияние инсулинового статуса на биохимические процессы в придаточных половых же .тезах. // Вопросы диагностики и коррекции физического состояния организма: С5. науч. трудов. - Рязань,' 1SSB. - С. 95 - 98.

4. Николаев В.В. Влияние тестостерона на активностьJr галантозидазы з андрогенчувстзителъных тканях. // Гормональная регуляция метаболтамз в норме и при патологии: сб. науч. трудов - Рязань, 1996.- С. 14 - 15.

ШкоЪМ 08(03)

Рюиеддн статут. Ротаврмт. Зыta» Ib^iífQSfárJWb^&ú***- f