Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ЧЕРНО-ПЕСТРОГО СКОТА ГОЛШТИНСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ: КОНТРОЛЬ И КОРРЕКЦИЯ
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ЧЕРНО-ПЕСТРОГО СКОТА ГОЛШТИНСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ: КОНТРОЛЬ И КОРРЕКЦИЯ"
На правах рукописи
САМБУРОВ Николай Васильевич
ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ЧЕРНО-ПЕСТРОГО СКОТА ГОЛШТИНСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ: КОНТРОЛЬ И КОРРЕКЦИЯ
03.00.13 - физиология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
Дубровицы - 2004
Работа выполнена и ФГОУ ВПО «Курская государственная ссльскохозяйст сенная академия имени профессора И.П. Иванова»
Научные консультанты:
заслуженный деятель науки РФ, академик РАСХН, доктор биологических наук, профессор Прокофьев Михаил Иванович
заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАСХН, доктор биологических наук, профессор Федоров Юрий Николаевич
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор
Кликский Юрий Дмитриевич
доктор биологических наук, профессор Горшков Григорий Иванович
доктор биологических наук, профессор Ерохни Анатолий Сергеевич
Ведущее у чрежиенне: ФГОУ Российская академия менеджмента в животноводстве
Зашита состоится «р » _ 2004 г. в Ю00 час
на заседании диссертационного совета Д.006.013.01. при Всероссийском государственном научно-исследовательском институте животноводства
Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район, нос. Дубровнцы
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института
Автореферат разослан <<х^Г» 2004
г.
Ученый секретарь д иссерта ционногосовста, кандидат биологических л;
у/ /
^^^^оано&а В.П.
I.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
1.1. Актуальность темы. Важным фактором повышения эффективности молочного скотоводства является ускоренное качественное совершенствование существующих порол, а также создание на их основе новых, более высокопродуктивных линий н типов животных, в большей степени отвечающих современным технологическим требованиям. Решение этой проблемы не может быть единым для всей страны с ее различными природными, климатическими, экономическими и другими условиями. Необходимо ущипывать и тот факт, что в стране 43% разводимых пород крупного рогатого скота представлены породами двойного направления продуктивности, которые не в полной мере отвечают современным требованиям производства молока и по удою заметно уступают животным специализированных молочных пород. Черно-нестрая порода крупного рогатого скота, по сравнению с другими, п большей мере отвечает условиям производства молока на индустриальной основе (Д.В. Карликов, H.H. Коидрашова, 1984; A.C. Всяких, В.П. Федоряка, 1989; Л.И. Бич и лр., 1989). Однако и эта порода нуждается в дальнейшем совершенствовании. В последние годы практически во всех странах Европы, разводящих черно-пестрый скот, в селекционных программах по его улучшению участвуют голштинские производители североамериканской селекции (Н.Г. Дмитриев, 1987; А.И. Прудов, И.М. Дуннн, 1992; Л.К. Эрнст н лр., 1997; Е.И. Сакса, 2000). Эта порода привлекает специалистов крупностью животных, высокой молочной продуктивностью, хорошей приспособленностью к индустриальным технологиям производства молока.
Изменение традиционных условий содержания и кормления животных, гиподинамия, недостаточная инсоляния, характерные для индустриальных технологий производства молока, снижают адаптационные возможности организма, способствуют возникновению стрессовых состояний, которые сопровождаются нарушением обмена веществ, снижением иммунобиологической реактивности, что сказывается на продуктивных показателях и плодовитости животных (Ю.Д. КлннскнЙ, 1973; В.В. Мнлошенко, В.М. Иванов, 1995; А.Г. Нежданов, A.C. Лобо-днн, 1994; F.Tröger et аЦ 1981).
Реализация продуктивных возможностей помесных животных возможна при всестороннем изучении физиологических, биохимических и иммунологических особенностей их организма, что позволит на этой основе целенаправленно управлять функцией воспроизведения и проводить коррекцию иммунного статуса.
В последние голы отечественными и зарубежными учеными лро-иелены экспериментальные исследования но изучению с^пшллгиде-
3 <t*Oi<£ гг^ч.-о') литератур! I
ских механизмов нейроэндокршшой регуляции воспроизводительной функции, системы защити н метаболизма организма крупного рогатого скот (А,Г. Салойскнй к лр-,1975; ВЛ1. Денисенко В.II. и др. 1976; П.Л. Емсльяиеико, 1980; Л.Л. Алиев, 1980; Н.В. Курилов и др., 1978; М.Н. Прокофьев, 1983; ЕО.Н. Федоров, 1988; U.M. Кар путь, 1993; Я.З. ЛеСенгарц, 1994; C.B. Wood, 1977; J.H. Britt, 1981; D. Robinson et al., 1988; R.H.F. Hunter, 1980).
Однако комплексных исследований, характеризующих состояние естественном резистентности, иммунологического статуса и обмена веществ у помесных (ЧПхГ) ремонтник телок и постнатальном онтогенезе и особенностей репродуктивной функции коров проведено недостаточно. Ист данных о состоянии Т-и B-системы иммунитета на нонуляшюн-ном и субпонуля ци онно м уровне. Недостаточно тучен иммунный статус у коров в связи с супрессивным влиянием беременности и лактации на факторы защитных систем организма, сроки возобновления функциональной активности яичников после отела. Не решены проблемы коррекции иммунологического статуса организма животных при нмму-нодефншггах, управления репродуктивной функцией.
1.2. Цель il задачи исследований. Целью работы является комплексное изучение состояния естественной резнете!mioctii, иммунологического статуса, состояния мстаболшма il репродуктивной функции у черно-пестрого скота голштииской популяции.
Поставленная цель определила следующие задачи исследований:
- провести тученне хозяйственных и продуктивных качеств чистопородного черно-пестрого н помесного скота;
- изучить морфологические н биохимические показатели крови, иммунный статусу телок в постнатальном онтогенезе;
- оценить метаболические процессы, состояние естественной резистентности у коров д течение полового цикла, при длительном бесплодии и смене физиологи чес кого состояния;
- установить срокн возобновления функциональной активности яичников у (ЧПхГ) коров после отела;
-выяснить иммунокоррнгарующее действие иммуномодуляторов на факторы неспецифической защиты организма телят, телок, нетелей, коров к их приплода;
-изучить влияние иммуномодуляторов на показатели оплодотворяем ости коров;
-установить взаимосвязи интерьерных показателей с хозяйственными и продуктивными признаками животных;
- разработать математические модели для прогнозирования продуктивных качеств ремонтных телок.
1.3. Научна» нопнзна. IIa основании комплексных исследований впервые дана характеристика состояния гуморальных и клеточных факторов иммунитета у черно-пестрого скота голштинекой популяции, установлены пли уточнены основные показатели гомеостага. Установлено, что иммунный статус ремонтных телок, коров зависит от периода онтогенеза и физиологического состояния. Показано, что развитие им-мунолефишггных состояний происходит на ранних этапах постнаталь-ного онтогенеза: после рождения животных, в 5-15-суточном возрасте н в возрасте одного месяца. Нммунодефнцитные состояния характеризуй ю1ся низким уровнем иммуноглобулинов отдельных классов и снижением функциональной активности иммунокомпстеитных клеток. У коров это проявляется в период беременности и после отела с последующим повышением показателей естественной резистентности н иммунного статуса.
Впервые показано, что им мун о модуляторы тимоген и стимаден отдельно и в сочетании с гонадолнберином сурфзгоном стимулируют репродуктивную функцию коров в направлении повышения о плод о творя емости.
При оценке биохимического статуса у коров установлено, что d стадию возбуждения полового цикла происходит повышение гематологических показателей, уровня общего белка, альбуминов, иммуноглобулинов, глюкозы, общих лнпидов и фосфолипидов, при этом снижаются а- и Р-глобулины и общий холестерал. Отмечено, что у коров с большими сроками бесплодия наблюдается снижение метаболизма общего белка, альбуминов, альфа- и бета- глобулинов, глюкозы, общих липи-дов, фосфолипндов н общего холестерол а.
На основе количественного изучения профилей прогестерона в молоке н ректальной пальпации гонад показано, что возобновление функциональной активности яичников (первая овуляция) у помесных (ЧПхГ) коров после отела происходит в ранние сроки без клинических проявления стадии возбуждения патового цикла.
Показано, что нммунотропные препараты (эраконд, тимоген, стимаден) оказывают корригирующее действие на состояние естественной резистентности и иммунобиологического статуса организма 15-20-суточных телят, телок 3-месячного возраста, нетелей н коров (за 60...45 сут до отела). Установлено, 'tro им му но модуляторы повышают функциональную активность механизмов защиты организма животных с увеличением количества им мун о компетентных клеток и иммуноглобулинов, гематологических и биохимических показателе!! крови.
На основании анализа п моделирования показателей метаболизма у рем oí ггн их телок разработаны математические модели прогнозирования живой массы, молочной продуктивности и выхода молочного жира.
1.4. Практическая значимость к рсалшяцни результатов работы. В работе дана комплексная оценка иммунного статуса, шггерьер-ных показателен, воспроизвод1гтельной функции организма помесных (ЧПхГ) коров и телок. При иммунодефитгшых состояниях, с целью стимуляции физиологических возможностей и повышения функционального состояния иммунной системы организма животных предложены методы коррекции с использованием имму11омодуляторов (стима-ден, тимоген и эраконд).
Определены оптимальные схемы н дозы применения иммуномо-дуляторов для коррекции иммунологического статуса у телят 15-20-суточного возраста, 3-месячных телок, повышения функциональной активности иммунной системы у нетелей и коров.
Разработан способ оценки иммунобиологической полноценности молозива, основанный на определении уровня иммуноглобулинов (патент на изобретение №2166913 от 20.05.01 г. «Способ определения иммуноглобулинов в сыворотке молозива»).
Научные положения диссертационной работы к практические предложения нашли отражение в следующих методических рекомендациях н рационализаторских предложениях, рассмотренных н утвержденных в установленном порядке и используемых в учебном процессе при подготовке ветеринарных врачей и зооинженеров:
- Методические рекомендации по оценке 1Шмунного статуса крупного рогатого скота на основе определения сывороточных иммуноглобулинов и популяций лимфоидных клеток. - Курск, 2003;
- Метод фармакологической коррекции иммунодефицита в телят в ранний постнатальный период через систему мать-плод. Рационализаторское предложение Курской ГСХЛ от 15.04.96 г.;
- Спектрофотометр ич ее кий метод определения лнпопротеинов низкой плотности. Рационализаторское предложение Курской ГСХЛ от 22.12.93 г.;
- Рекомендации по организации целенаправленного регулирования воспроизводительной функции крупного рогатого скота. -Курск, 1994.
Результаты исследований вошли в пособие «Показатели гомео-стаза и иммунологический статус у черно-пестрого скота голиггинской популяции» (Курск, 2004), рекомендованное У ч сб но-методичееким объединением высших учебных заведений Российской Федерации по образованию в области зоотехнии и ветеринарии для студентов высших учебных заведений в качестве учеб ко-методического пособия по специальностям 310700-зоотехния и 310800-ветеринария.
1.5. Основные положении, выносимые на защиту:
- результаты комплексных исследований, характеризуют!« гематологические показатели, иммунологический статус, состояние метаболизма у телок о ностнатальном онтогенезе н коров при разном физиологическом состоянии;
- результаты исследований по количественной характеристике уровней прогестерона в молоке, позволяющие оцепить сроки возобновления циклической активности яичников у коров после отела;
- состояние естественной резистентности и иммунологические показатели животных на фойе применения иммунотронных препаратов;
- биологические свойства молозива после введения глубокостельным коровам нм му н о модул яторов;
- биотехнические приемы повышения оплодотворяем ости у коров;
- математические модели для прогнозирования живой массы, молочной продуктивности и выхода молочного жира.
1.6 Апробация работы. Материалы, пошедшие в днссертзшно, доложены, обсуждены и одобрены на: Всесоюзной конференции "Физиология продуктивных животных - решению Продовольственной программы СССР" (Тарту, 1989); 2-й международной конференции „Актуальные проблемы биологии в животноводстве" (Боровск, 1995); 9,10,15-11 межгосударственных межвузовских научно-практнческнх конференциях „Новые фармакологические средства в ветеринарии" (Санкт-Петербург, 1997; 1998; 2003); Международной научно-практической конференции „Наука и образование - возрождению сельского хозяйства России в XXI веке" (Брянск, 2000); научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Курской ГСХЛ (Курск, 1987-2003); расширенном заседании кафедр: физиологии животных, кормопроизводства к зоогигиены, биологической и органической химии Курской ГСХЛ (2003); научной конференции отдела эндокринологии сельскохозяйственных животных Всероссийского государственного научно-исследовательского института животноводства (Дубровииы, 2004).
1.7. Публикации. Материалы диссертации опубликованы в 28 научных работах, в том числе статьях, 1 патенте на изобретение, 2 научно-практических рекомендациях и отражены в 10 отчетах о научно-исследовательской и хоздоговорной работе объемом 87 машинописных листов.
1.8. Обьем и структура работы. Диссертация изложена на 330 страницах компьютерного текста н состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, их результатов и обсуждения, выводов, практических предложений, списка лите-
ратуры, приложений. Список литературы включает 426 источников, в том числе 126 зарубежных авторов. Материал иллюстрирован 53 таблицами и 56 рисунками.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Экспериментальная часть работы выполнялась по схеме (рис. 1) в Курской государствен ной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, научно-производственном биотехническом про-таодствснном центре «Б потех нентре» Российской академии сельскохозяйственных наук, ГНУ Всероссийский НИИ экспериментальной ветеринарии и на животноводческих комплексах и фермах Курской области.
Изучение хозяйственных, продуктивных и биологических особенностей коров черно-пестро К породы и их помесей с голштннской различной крот (ост н проводили на животных учебно-опытного хозяйства «Зиаменскос» Курс ко ¡1ГСХА.
Опытные и контрольные группы формировали из животных — аналогов с учетом происхождения, породности, продуктивности, возраста и живой массы. Кормление животных осуществлялось по действующим нормам, рационы были сбалансированы но основным показателям (А.П. Калашников и др., 1985), содержание отвечало зоогигненн-ческим требованиям и соответствовало условиям технологии конкретного комплекса или фермы.
При проведении экспериментов постоянно контролировали состояние здоровья животных, поедземость кормов, поведение.
Изучение показателей, харастеризующнх хозяйственно-полезные качества скота (молочная продуктивность, воспроизводительная способность, рост и развитие), проводили но данным зоотехнического и племенного учетов. Молочную продуктивность изучали за 305 дней лактации, зафиксированную в журнале контрольных доек и племенных карточках. Дополнительно изучали характер лактационных кривых у коров разных генотипов. Опенку роста н развития телок проводили по данным ежемесячных взвешиваний.
Феномены стадии возбуждения полового цикла (течки, обшей реакции, охоты) у коров и телок устанавливали наблюдением по степени выраженности «рефлекса неподвижности», дополняя признаки половой охоты рек-тальной пальпацией яичников и с помошью быков-пробников. Искусственное осеменение проводили замороженной в жидком азоте (-196° С) спермой, разбавленной в 20-50 раз (5-100 млн спермнев в дозе), используя в и зо-церв икал ьнмй способ. Отбор образцов молока для определения в них прогестерона проводили в утреннюю дойку, выдаивая
Рис. 1. Общая схема исследований 9
первые порции молока in каждой четверти вымени в полиэтиленовые флаконы объемом 10 см1 с консервантом (10% раствор двухромово к целого калия). Концентрацию прогестерона в сыворотке молока определяли методом РИЛ с использованием набора реактивов «Стерон-П-3Н» института биоор ган ичес ко Й химии (Республика Беларусь).
Ректальную пальпацию яичников у коров проводили еженедельно, начиная с 15 суток после отела.
*flpir 1п>ч1е1т!пппсрьер1(ыхтга^атслей*у помесгшх*(,1ПхГ)'телок1 пробы крови брали после рождения (до поения молозивом), в суточном, 5, 15-суточном возрастах и при достижении возраста 1, 3, б, 9, 12, 18 месяцев. Кровь для исследований получали to ушной или яремной вены. Определение содержания гемоглобина крови проводили гемигдобинциа-пидным методом. Эритроциты н лейкощпы в суспензиях крови определяли кондуктометр! шее к им методом при помощи датчика с микроотверстием гемоццтометра ГЦМК-3 производства Одесского завода «Медла-бортсхника». Дифференциальный подсчет лейкоцитов (лейкограмму) проводили в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе общепринятыми методами.
В сыворотке крови определяли уровень общего белка блурстовым методом с помощью набора «Ьиоконт» МП «Агат» (г. Москва), фракции бслка-нефелометрнческим методом (И.П. Кондрахин и др., 1985), общие иммуноглобулины — методом осаждения сульфатом цинка (М.С. Evan et al„ 1970).
Концентрацию общих линидов определяли по цветной реакции с сульфофосфованклиновым реактивом (по Цёлльнсру), с использованием наборов «Bio-La-Test» фирмы Lacbema (Республика Чехия). Классы линидных метаболитов - общепринятыми методами (В.Г. Колб, B.C. Камышников, 1976; М.П. Кондрахин и др., 1985). Общий холестерол -по модифицированной Ильком реакции Либермана-Бурхарда (И.П. Кондрахин и др.,1985).
Содержание в сыворотке крови лнпопротешюв низкой нлотности (ЛПНП) определяли по М. Burstein, G. Samaille (1955) в нашей модификации (рационалюаторское предложение от 22.12.1998 г. №157/5).
Состояние углеводного обмена оценивали по содержанию в крови глюкозы н пнровнноградиой кислоты. Содержание глюкозы определяли по цветной реакции с орто-толуидином, пнровиноградной кислоты - по модифицированному методу Фридемана и Хаугена (И.П. Кондрахин н др., 1985).
Активность ферментов аспаргатамннотрансферазы (АсАТ), ала-нннаминотрансфе.разы, (АлАТ) ц гамма- глутамил трансферазы определяли с помощью наборов «Bio-La-Test» фирмы «Lac he та» (Республика Чехия).
Концентрацию о си воротке крови общих иммуноглобулинов, общего холестерола, активность ферментов рассчитывали по калибровочным графикам и уравнениям регрессии, построенным с помощью пакета прикладных программ «Анализ экстремального эксперимента».
Измерение с вето про пускания (экстшшию) анализируемых растворов проводили на спектрофотометре «Spekol-ll» фирмы «Carl Zeiss Jena» (Гермзпня).
Количество Т-лимфошггов определяли в реакциях спонтанного розсткообразовання с эритроцитами барана (Е-РОК, %), а В-лнмфошпов - метолом комплементарного розсткообразовання (ЕАС-РОК, %) с эритроцитами мыши (U.M. Кар путь, 1993). Абсолютные количества клеток рассчитывали на основе данных об абсолютном количестве н проценте розсткообразующих лнмфошггов. Содержание Т-хелперов определяли нагрузочной пробой с теофиллином (Р.В. Петров и др., 1989).
Лизошшную активность сыворотки крови определяли нефело-мстричсским методом с культурой клеток М. lysodeicticus (В.Г. Доро-фейчук, 1968), описанному И.М. Карпуть(1993).
Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по культуре клеток Е. coli по методике предложенной О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), описанной П.А. Емельяненко (1980).
Содержание иммуноглобулинов изотипов G, М и А в сыворотке крови и молозива определяли в лаборатории иммунологии и биотехнологии ГНУ ВНИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (г. Москва) методом радиальной иммуноднффузии (G. Manchini et al., 1965).
Для устранения иммунодефишггных состояний у животных применяли иммуномодуляторы: тимогеи-сшгтетический пелтид тимуса гл ю там I триптофан (Cj6H*<>I4)Oj); стнмаде и-с ш ггетич ее к и ft препарат нуклеотидной природы; эраконд-препарат, полученный из растительного сырья путем экстрагирования природных соединений неорганического и органического состава. С целью повышения оплодотворяемости коров, преодоления асинхронности проявления овуляции ко времени половой охоты использовали онгтетичсский аналог гоналолиберипа сурфагон-декапснтид (CwH7gN|b012).
В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенных в литературе (Е.А. Васильева, 1974; A.A. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева, 1974; П.А. Емельяненко и др., 1980; И.М. Карпуть, 1986; В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988; D.E. Чумаченко и др., 1990).
Полученный экспериментальный цифровой материал обрабатывали на программируемом микрокалькуляторе МК-56 <10.К. Баюн,
1988), ПЭВМ IBM PC/AT. При обработке данных на ПЭВМ использовали многофакторный регрессионный и корреляционный а нал ты в стандартных пакетах программ «Анализ данных» в системе MICROSOFT EXCEL 7.0 FOR WINDOWS 98; STATGRAPH1CS PLUS FOR WINDOWS.
Значение критерия достоверности оценивали по таблице вероятностей Стьюдента-Фишера. Вероятность различий считали значимой при Р<0,05.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Показатели гомеостазаутелокн коров
3.1.1. Гематологические показатели и формирование иммунного статуса у телок
Изучение естественной резистентности н иммунного статуса организма телок в постнаталыюм онтогенезе проводили на клинически здоровых животных УОХ «3 нам е не кое». Установлено, что количество эритроцитов в крови телок после рождения составляет в среднем 6,810,09* 1011/л, к месячному возрасту повышается до 6,8510,06* 10и/л, с 3 до 6-месячного возраста находится в пределах 6,4710,12-6,0910,09*10"/л. В 9-12-месячном возрасте стабилизируется на уровне 6,44±0,11-6,42±0,09*101г/л, а к 18-месячному возрасту возрастает до 6,5110,10*1012/л.
Уровень гемоглобина в крови подопытных животных изменялся аналоппшо нолшеству эритроцитов и в первые три месяца жшни телок колебался от 126,01± 0,95 до 111,84±0,84 г/л. В возрасте 6-12 месяцев его количество составляло 111,7210,74-110,85 г/л, а к 18 месяцам повышалось до 118,7 г/л. Количество лейкоцитов в крови животных при становлении основных физиологических функций находилось в пределах 7,110,09— 7,1710,1*10^, затем несколько повышалось при половом созревании.
Результаты исследований концентрации иммуноглобулинов в сыворотке крови, представленные на рисунке 2, свидетельствуют о том, что до приема молозива в крови обнаруживаются следы защитных иммунных белков. Анх1 из данных о количественном содержании обшнх иммуноглобулинов и отдельных их классов указывает на наличие пню-гаммаглобулинемни. После приема молозива повышается концентрация как общих, так и отдельных классов-IgG и IgM. Так, содержание общих иммуноглобулинов увеличилось в 17,8 раза, a IgG и IgM соответственно в21 и 19 раз(Р<0,001).
13
гв» T»vt
is.i»
i,« о.м
гыи
и.»»
гг.я
EL
ÍMS
1s.s1
1Г.8
i.»
lí.M
J.B
ÜL
»и
El
íi.M
EL
it.Tl
tcy* 3 сут Uvm t<m Iim V«*« Uw Цы
'""*"_tkwct_
I ООСч>Ч ПИммумогшетпомОдп ОИм^пШ^п»^ М.нл~
Рис. 2. Динамика иммуноглобулинов в с и вороте с крови телок
Начиная с 5-суточного возраста, наблюдается снижение уровня пассивно приобретенных иммуноглобулинов в крови. Концентрация общих иммуноглобулинов у телок в возрасте одного месяца составила лишь 64,3% от их уровня в суточном возрасте. Содержание I&G к месячному возрасту достоверно снизилось в 2,1 раза (Р < 0,001). Аналогичным образом изменялась конце1Праш!я IgM, которая о возрасте 15 сут составляла 50% от их уровня в возрасте S суток.
Оценка клеточного звена иммунитета, которому принадлежит важная роль в поддержании иммунологического гомеостаза н становлении защитных систем организма, выявила определенные его изменения в процессе роста телок. У новорожденных животных до выпоПки молозива в крови отмечается низкое количество лимфоцитов (табл.1). После поения молозивом повышается в 1,4 раза. На 5 сут ностнаталъной жшни телят содержание лимфошгтов составляет в среднем 4,6810,06* 10*/л, оставаясь практически на уровне показателей, характерных для животных суточного возраста. В 15-суточном возрасте телок содержание в периферической крови лимфошгтов повысилось на 6% за счет увеличения популяций Т- и В- клеток.
Выявлены достоверные различия (Р<0,001) между количеством лимфошгтов у телят до поения молозивом и в суточном возрасте по сравнению с животными 15-суточного и более старшего возраста (2,9210,01 против 4,9б±0,09 н5,51:1.0,11М0'/л), атакже утелят
Таблица I
Клеточные показатели иммунитета в постнаталъном онтогенезе телок ____(п= 10) _.___
Возраст (сут) Лимфоциты, 10% Т-лимфоциты, 10% В-лнмфошпы, 10%
При рождении 2,92±0,01 1,3410.02 0,29±0.01
1 4,17*0.02 2,03±0,03 0,49±0.01
5 4,68±0.06 2,16*0.05 0.49*0,02
15 4,96±0,09 2.57±0,04 0,52*0,02
30 5.51±0,11 2.96±0,06 0,84 ±0.03
90 4.86±0.02 2,29±0,05 0.55*0.03
180 4,48 ±0,04 2,17±0,05 0,54*0,03
270 4,3б±0.05 2.15±0,06 0.55*0.02
360 4,44 ±0,04 2,22±0,07 0.58*0.03
540 4,61 ±0,03 2.29*0.06 0.57*0.02
1-5-суточного возраста по сравнению с животными месячного возраста, в абсолютном содержании Т- н В-клеток (1,344.0,02*10 /л к 0,29±0,01*10%). Снижение функциональноП активности лимфошггов наблюдается в 3-6-месячном возрасте. В этот период абсолютное количество лимфошггов, Т- и В-клеток в сравнении с их уровнем в возрасте одного месяца составляет соответственно лишь 88,2 и 81,3%, 77,4 н 73,3%, 65,5-64,3%. Разница характеризуется высокой степенью достоверности (Р <0,001).
При достижении половозрелого возраста (9-12 месяцев) отмечается стабилизация количества лимфоцитов и их популяций. Характерно то, что эти показатели существенно не отличались от данных в период новорожденности. Полученные данные подтверждают положение о важности системы Т-лимфошгтов, выполняющих функцию надзора и регуляции иммунологического гомсостаза организма. Поэтому телята рождаются с достаточно зрелой о количественном отношении Т-системой иммунитета.
Среди субпопуляций Т- лимфоцитов относительная величина и абсолютное количество как Т-хеллеров, так и Т-сунрсссоров были наименьшими в первые пять суток жизни телят. В этот возрастпоП период абсолютное количество Т-хелнеров колебалось от 0,81 ±0,01* 10% до 1,31±0,03*10%, Т-сунрсссоров от 0,53+0,01*10% до 0,8510,02*10%.
В 30-суточном возрасте количество Т-хслперов уже составляет в среднем 1,8010,04*10%, а Т-супрессоров 1,1610,02*10%. Увеличение но сравнению с показателями при рождении составило соответственно 0,991(0,63*10% (Р<0,001).
В возрасте 90-180 сут при общем снижении в крови лимфоцитов и Т-клсток отмечали снижение н их субпопулящШ. Абсолютное число Т-хсллсров в возрасте 90 сут составляло в среднем 1,3810,03* !0'/л, что на 0,42*Ю*/л меньше но сравнению с показателем в 30-суточном возрасте (Р<0,001). Количество Т-хелперов продолжало снижаться и в возрасте 180 сут находилось на уровне 1,2910,03 *10'/л.
Аналогичное изменение происходит и в динамике Т-сунрсссоров. Их количество в возрасте 90 сут било равным 0,9010,02*107л или на 0,26* 104/л меньше чем в возрасте 30 сут (Р<0,001). К 180-суточному возрасту числоТ-супрессоровв крови еще понизилось на 0,08* Ю'/л.
Стабилтания показателей субпоиуляцнй Т-клсток наблюдается 1фн достижении телками годовалого возраста. Число Т-хелперов в этом возрасте было на уровне 1,3510,04* 109/л, а Т-сулрсссоров- 0,8710,02* 109/л.
Показатели иммунного статуса организма телок использовали для расчета индексов: Т/В-отношение количества Т-клеток к В клеткам; лей ко-Т-клеточного (ЛТИ)-отношсние количества лейкошпов к числу Т-лимфоцитов в 1 мкл крови; лсйко-В-кл сточного (ЛВИ)-отноше1шс количества лейкоцитов к В-лимфошпам; Т-хелперы / Т-супрессори-нммунорсгуляторныЙ. Оптимальным он считается 1,5-2,0. Увеличение этого индекса является хорошим прогностическим признаком, свидетельствующим об активаш!н иммунной системы.
Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам в период наблюдений варьировало от 1,5310,02 (при рождении) до 1,5910,06 в возрасте 180 суток.
Индекс Т-лимфоштш/В-лимфошпы в первые 15 сут жизни телят вырос с 4,7310,17 до 5,0010,15. В следующие 15 сут он ноIпоился до 3,5710,13. При достижении телками 3-6-месячного возраста индекс Т/В был равен 4,2610,22-4,1710,26, затем понижался до 4,0010,19 (9 месяцев) и 3,9610,25 (12 месяцев), а к концу наблюдений повышался до 4,1110,23.
При рождении телята имели самые высокие значения индексов ЛТИ и ЛВИ, соответственно 3,6410,06 и 17,2510,69. Снижение индекса ЛТИ до 2,4510,04-2^010,05 отмечали в период с 15 до 30-суточного возраста. Индекс ЛВИ также был ниже в этот период: у 15-суточных 1 ел яг—12,2410,4, 30-суточных-8,8810,26. В другие изучаемые возрастные периоды ЛТИ находился в пределах 3,13-3,39, а ЛВИ-12,81-13,99.
3.1.2. Некоторые биохимические показатели крови у телок
Общий белок и его фракции. Белки крови принимают активное участие в белковом обмене всего организма и функционально рассматриваются как иластическии материал для образования специфических белков различных тканей.
Результат проверенных исследований позволили выявить ряд закономерностей в обмене белков крови. Для новорожденных животных характерен низкий уровень общего белка в сыворотке крови, к З-суточн^у возрасту он увеличивается на 22,7 %. Подъем ^вязан с приемом молозива, содержащего большое количество иммунных белков (рис.3).
«1
МО*
! и 1 1 Ш * > - > 1 а • 2 >
и
- <
£ > 1
<«■ »Я» 4 МС «мс |<ис ЦП <•«
Рис. 3, Содержание общего белка в сыворотке крови телок
Для первых дней постнатальной жизни в период приспособления организма к новым условиям, когда пищеварение у телят происходит как у моногастричных животных, характерны определенные особенности в фракционном составе сывороточных белков крови. Так, у новорожденных телок (до приема мол со ива) в крови содержится 23,5410,47 г/л альбуминов, что составляет 52,8 % от уровня общего белка, альфа-глобулинов соответственно 13,0010,55 г/л и 21,9 %, бета-глобулинов-5,4310,14 и 122 "о, гамма-глобулины присутствуют в следовых количествах.
Функциональная активность белков крови и интенсивность транспортных, защитных и иммуносупрессорных процессов в организме телок изменяются в связи с периодом онтогенеза. В период, когда питание телят квалифицируется как молочко-растительное, повышается уровень обмена транспортных белков крови-альбуминов, о чем свидетельствует достоверное увеличение абсолютных количеств на 3,44 г/л к месячному возрасту (Р<0,001).
До кормления телят молозивом Л/Г коэффициент составляет в среднем 1,0б±0,03, а уже через сутки достоверно снижается до 0,5б±0,03 (Р<0,001). По мерс становления белкового обмена изменяется соотношение альбуминов к глобулинам. К 5-суточному возрасту Л/Г коэффи-
Ш1С1гг повысился на 28,6 % (Р<0,001) и был равен 0,7210,02, некоторое его снижение отмечается на 15 сут жшии телок 0,7010,01. В возрасте 1-6 месяцев Л/Г коэффициент был на уровне 0,7410,10-0,7010,05 н продолжал снижаться с ростом животных.
Общие липиды и их классовый состав. До выпойки новорожденным телятам молозива уровень общих лишшов в сыворотке крови был наименьшим по сравнению с другими периодами онтогенеза (рнс.4). Концентрация общих ли пило в и их классовый состав в крови животных изменяется с возрастом и условиями кормления, на 10 сут жизни телочек уровень общих лишшов повысился в 2 раза по сравнению с концентрацией при рождении. Для телок 1-3-месячного возраста характерен относительно высокий уровень метаболитов липидного обмена в сыворотке крови, '(то связано с получением кормов, содержащих жир (молозиво, молоко, обрат). При переходе от молочного питания к смешанному и смене монэгастрнчного типа пищеварения на преджелудочно-сычужно-кншсчный концентрация общих липидов в крови достоверно снижалась: в 3-месячном возрасте до 4,3710,11 г/л, 4-месячном -до 3,5910,05 (Р<0,001). В последующие возрастные периоды с совершенствованием пищевар1ггельных процессов, когда животные полно используют питательные вещества кормов, содержание общих липидов в крови увеличивается.
4.73
1,6'
4.41
$.27
4.37
ЭАЭ
ае 5ва 575 5.7а
- ]
При 10 сут 1 ик 2 мое 3 мае 4 нс 6 им 9м«с 12 мае 1£мес »
Водост
Рис. 4. Динамика содержания обших липидов в крови телок
Начиная с 6-9-месячного возраста, липндный обмен станов1гтся более интенсивным и принимает характер, присущий взрослым животным.
17
Возрастные различия получены и но классовому составу липид-пых метаболитов сыворотки крови. Эти различия зависели от периодов онтогенеза, активизации рубцового пищеварения и структурной перестройки обмена веществ.
У животных с развитыми преджелудками (6-9 месяцев) в сыворотке крови увеличивается содержание фосфолипидов на 26,5% и 10,9% по сравнению с их уровнем в 3-месячном возрасте.
Для' новорожденных телят характерно i покос содержание обшего холестерола в сыворотке крови (0,5510,02 г/л), через 30 суток его концен-трания выросла в 3 раза (Р<0,001). Наступление половой цикличности у телок сопровождалось гкншженным содержанием фракций холестерола.
Конце1праш1я триаинлглицеролов в возрасте 1-9 месяцев регистрировалась на уровне 0,4210,01-0,5610,01 ммоль/л и стабилизировалась после 15-месячного возраста.
Наиболее низкое содержание НЭЖК в крови подопытных животных отмечалось до месячного возраста (0,0710,01-0,1010,01 г/л), в возрасте 4 месяцев их концентрата повысилась до 0,38 г/л.
3.1.3, Гематологические показатели и иммунный статус коров с разным физиологическим состоянием
Для оценки состояния некоторых показателей гомеостаза у полновозрастных коров в связи со сменой физиологического состояния и разные периоды лактации были исследованы клинические здоровые животные, содержащие в условиях маточной фермы УОХ «Знаменское».
Результаты гематологических исследований свидетельствуют о том, что в сухостойный период количество эритроцитов и содержание в них гемоглобина находится в пределах соответственно 5,8810,09 *10n/ii и 110,3411,12 г/л. После отела количество эритроцитов составляет в среднем 5,8410,11*10|2/л, а содержание в них гемоглобина -110,18±1,34 г/л. В течение всей лактации количество эритроцитов в крови находилось в грашшах 6,01 ±0,15-6,17*0,16*10"/л, а гемоглобина-116,8±0,85-118,26Ы,14г/л. Причем следует отметить, *гго на 2 месяце лакташш содержание гемоглобина по сравнению с сухостойным периодом было выше на 6,82 г/л, на 5-на 6,46 г/л, на 9-на 7,92 г/л (Р<0,01).
После отела наблюдали снижение в крови общего количества лейкоцитов на 3,4%, эозинофнлоо-на 8,7%, моношпов-на 8,6%. Л количество палочкоядерных и ссгмыпоядерных нейтрофилов незначительно возрастало соответственно с 5,4±1,03 до 5,8Ю,51% и с 19,812,65 до 20,4±2,25%. В течение первых двух суток после отела коров относительное количество лимфоцитов повышается с 62,613,5% до 67,8*3,56%.
\
В течение лактационного периода обшее количество лейкоцитов в крови было относительно стабильным и находилось в границах 6,00*0,11-6,1*0,16*10%. Среди отдельных клеток лейкошгтов наиболее заметно изменялось количество моношпов и лимфошпов. Так, процент моноцитов в крови на 2 месяце лактации снизился до 5,6*0,6, что на 0,8 ниже по сравнению с послеотельным периодом, в дальнейшем стабилизировался на уровне 6,4±0,81,..6,2±0,86. На 2 месяце лактации в крови коров количество лимфоцитов понизилось (с 67,8*3,56 до 60,8ЬЗ,01%), на 5 оно оставалось практически без изменения, а на 9 отмечали снижение до 59,4*1,21.
Переход сывороточных иммуноглобулинов из крови в молочную железу приводит к снижению после отела: общих Ig с 36,5±0,39 до 30,96i0,42 г/л, IgG с 30,32¿0,42 до 21,76*0,75 г/л, IgM с 3,79*0,22 до l,96i0,lö г/л, IgA с 1,58i0,09 до 1,05*0,13 г/л, что обеспечивало колост-ральный иммунитет новорожденным телятам. На втором, пятом месяцах лактации наблюдается относительная стабилизация содержания иммуноглобулинов в крови, а в заключительный период лактации происходи повышение их уровня.
Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) в сухостойный период составляет в среднем 69,12^1,11 %, после отела она повысилась до 69,38*1,14 %, на втором и пятом месяцах лакташш находилась в пределах 68,86*1,17 - 68,8410,92 % и повышалась до 69,00*1,01 в заключительный период лакташш.
В динамике л изо Hilm н ой активности сыворотки крови (ЛАСК) коров наблюдали аналогичную картину: наибольшие показатели регистрировали в последний период беременности и после отела, в начале и середине лактации они несколько снижались, а на девятом месяце лакташш вновь возрастали до 35,881=1,75 %.
Абсолютное количество лимфоцитов, Т-и B-клеток в сухостойный период регистрировали на уровне соответственно 3,87*0,26; 1,91*0,09 и 0,57¿0,07*10%. Родовой процесс протекал на фоне повышенного количества лим^юшпов и цммунокомпетентных клеток (4,02*0,31; 2,01*0,14; 0,61*0,06*10%).
Индекс Т/В лимфоцитов в течение периода исследований был в пределах 3,23-3,40.
Следовательно, особенностью гуморального иммунитета у коров при смене фнз1 юлогнчсского состояния является достоверное снижение в сыворотке крови после отела иммуноглобулинов как общих, так н классов IgG, IgM и Ig А. Показатели же БАСК и ЛАСК в этот период возрастали. Клеточные факторы иммунитета после отела повышались менее значительно.
3.1.4. Метаболические процессы у коров при ратном ф и i пологи ческом состоянии
Молочная продуктивность коров о основном обусловлена шгтен-сноностью и направленностью обменных процессов. Установлено, что за две недели до отела концентрация общего белка в сыворотке крови составляет в среднем 78,56^2,06 г/л, Максимальный уровень (S6,38±3,S9 г/л) общего белка в сыворотке крови наблюдали на пятом месяце лактации, что вероятно, связано с активизацией структурных преобразований в молочной железе и усилением белкового обмена в период молокообразования. Известно, что в процессе лактогенеза увеличивается аминокислотная потребность (JI.C. Соминич и др., 1975). lía заключ1гтелыюм этапе лакташш количество общего белка в сыворотке крови понижается до 81,33^3,75 г/л. Увеличение или уменьшение кон-центрашш общего белка происходило за счет изменения содержания в крови одной или нескольких его фракций. Фракции белка выполняют важную транспортную функцию, доставляя в молочную железу предшественники составных компонентов молока.
Содержание альбуминов изменялось от 27,02±2,87 г/л до 29,87±2,13 г/л. Концентрация альбуминов в крови отражает динамику происходящих в организме процессов синтеза и обновления белков и чем выше их уровень, тем активнее он идет, поскольку, степень дисперсности у альбуминов выше к суммарная энергия внутренней и наружной поверхностей на единицу массы преобладает над тзковой у глобулинов (BJ1. Владимиров и др., 2000). Поэтому и альбумин-глобулиновый коэффициент (Л/Г) был выше в середине лакташш (0,S8±0,Q5).
Гамма-глобулиновая фракция включает специфические иммунные белки, осуществляющие защиту органшма. За две недели до тела уровень у-глобул и нов был наибольшим (26,97±1,55 г/л), что обеспечивает нх накопление в молочной железе и поступление в молозиво.
Концентрация общих липидов в сыворотке крови коров на 2-м месяце лакташш по сравнению с периодом беременности была выше на 7,4% (табл.2). Во второй половине лактации концентрация лшщдов понижалась до 7,43±0,16-7,33±0,24 г/л.
У стельных коров в сыворотке крови регистрировали наименьшие коннентрзшш фосфолнпндов н общего холестсрола соответственно 3,22i0,25 ммоль/л и 2,2410,05 г/л. 11а втором месяце лакташш содержание фосфолнпндов в крови по сравнению с периодом беременности повысилось на 0,85 ммоль/ л (Р<0,05). Следует отметить, что н в середине лактации уровень обшего холестсрола оставался достоверно выше. В заключительный период лактации концентрация данных метаболитов
понижалась соответственно до 3,63*0,29 ммоль/л и 2,37±0,16 г/л. В динамике ЛПМП наблюдается два периода снижения концентрации: первое после отела на 4,7%, второе -в заключительный период лактаиии -5,2 %. На пятом месяце лактации в сыворотке крови коров уровень ЛПНП был максимальным. Повышение концентрации общих линидов, общего холестерола в сыворотке крови коров обусловлено тем, что эти метаболиты необходимы для синтеза молочного жира, но не в качестве предшественников.
Таблица 2
Липидные метаболиты в сыворотке крови коров с разным _физиологическим состоянием (п=5)_
Сроки исследований Показатели
общие липиды, г/л фосфо-липнлы, ммоль/л общий холесте-рол, г/л ЛПНП, г/л
Сухостойный период 7,01 ±0.08 3.22±0.25 2.24±0.05 4,89±0,11
После отела 7,14±0,15 3,43±0.09 2.38±0.07 4,66±0,09
Начало лактации 7.53*0.25 4,07±0,24* 2,90±0,04* 5,06±0.17
Середина лактаиии 7,43±0,16 3,75 ±0.59 2,68*0.05 5.20*0.17
Заключ! ггел ы еы й период лакташш 7,33*0.24 3.63±ОЛ9 2^7±0.1б 4,93±0,09
•Р<0,05 - достоверность различии по отношению к периоду беременности
Уровень глюкозы в крови бил наименьшим в период стельности (сухостойный и заключительный период лактации) коров, составляя в среднем соответственно 3,07А0,07 н 2,8310,08 ммоль/л. В периоды интенсивного молокообразования концентрация глюкозы в крови повышалась на 4,2...3,9 % по сравнению с сухостойным периодом.
Конпешрация пнровиноградной кислоты в крови сухостойных коров била на уровне 182,86^1,41 мкмоль/л, после отела понизилась на 9,03 мкмоль/л. Второй месяц лактаиии сопровождался высоким содержанием пирувата в крови (191,19±1,15 мкмоль/л). В дальнейшем по мере затухания лаюации уровень пирувата понижался до 186,93 £1,43 мкмоль/л.
В процессах обмена веществ у животных важную роль выполняют ферменты переаминирования-аспартатамннотрансфераза (АсАт) алаиннамкнотрансфераза (ЛлАт), катализирующие биосинтез аминокислот. Аминотрансферазы занимают центральное место в белковом обмене. Тестирование активности ферментов показало, что у стельных
коров в сухостойный период она составляла: ЛсЛт-1255,0816,49, АлАт - 858,6216,53 нкат/л. После отела активность АсАт практически осталась такой же (1259,94*22,16 нкат/л), а АлАТ возросла на 110,3 нкат/л <Р<0,001). В течение всей лактации активность АсАт по сравнению с сухостойным периодом была достоверно выше (Р<0,01) и колебалась от 1314,23*16,06 до 1308,26*10,81 нкат/л.
Высокую активность АлАт отмечали на 2 и 5 месяцах лактации. В эти периоды • ""активность -фермента составляла соответственно 989,42*8,88 и 983,55±5,57 нкат/л, что на 130,8 и 124,93 нкат/л выше чем во время беременности (Р<0,001). Заканчивалась лактация при активности фермента 608,50*10,67 нкат/л.
Динамика активности фермента Г-ГТФ характеризуется тем, что наибольший ее показатель был в период стельности (352,17±3,31 нкат/л). В последующие сроки исследований активность фермента снижалась на 30,25. ..62,28 нкат/л (Р<0,001).
3.1.5. Концентрация прогестерона в молоке и функциональная активность янчннков у коров после отела
В качестве одного из диагностических критериев оценки сроков проявления первой овуляции и половой охоты у коров после отела использовали профили прогестерона. Для проведения исследований па животноводческой ферме УОХ «Зиаменское» была сформирована опытная группа из 30 животных.
Изучение профилей прогестерона в молоке коров после отела показало, что на 10-12 сут его концентрация в среднем составляет 0,96±0,09 нмоль/л, причем у 20 животных (66,7%) она была ниже этого уровня. Это свидетельствует о том, что желтое тело беременности уже регрессировало и начинается рост фолликулов. В дальнейшем падение конце 1гтрацин прогестерона до миннмума-0,6810,05 нмоль/л наблюдается иа 17,30±1,11 сут после отела и это время считали началом первого полового цикла. Продолжительность его в среднем составила 18,13±0,95 сут (табл. 3), у 46,7 % коров она была от 10 до 16 сут, а у 53,3%-17 сут и более. После овуляции уровень прогестерона возрастал до 2,6910,27 нмоль/л и происходило это через 22,1±1,21 сут после отела. У 20,2% из числа обследованных коров возобновление лютеальной активности яичников происходило к 27 сут и позднее после отела. В эти же сроки у большинства животных ректальной пальпацией устанавливали наличие желтых тел в яичниках. Концентрация прогестерона во втором-половом цикле была равной 1,9710,17 нмоль/л, что на 0,51 нмоль/л выше чем в первом (Р<0,05).
У 22 корок желтое тело первого астрального цикла функционировало в течение 6-8 сут (рис.5).! ]знвысшую концентрацию (2,46 нмоль/л) регистрировали на 6 сут цикла. Доя абсолютного большинства (39,0%) из числа обследованних коров било характерным сохранение высокой лю-теальной активности в течение 10-14 суток. Максимальный средний уровень гормона в этот период равный 2,41 нмоль/л наблюдали на 14 сут полового цикла.
Рис.5. Продолжительность первого подъема прогестерона (сут)
Между продолжительностью первых двух половых циклов и кон-ие!гтрацией прогестерона наблюдается слабо выраженная обращая связь (г = -0,12±0,22 и 0,1210,24).
Первую половую охоту у коров наблюдали через Зб,бЗ±1,75 сут после отела при концентрации прогестерона в молоке 0,79±0,09 нмоль/л (табл.3). Подопытные животные были плодотворно осеменены в среднем через 59,19±3,57 сут после отела. Уровень прогестерона при плодотворном осеменен ни составил 0,6310,06 нмоль/л.
Таким образом, наблюдения за подопытными живощыми, исследование профилей прогестерона и ректальная пальпация гонад у помесных (ЧПхГ) коров после отела позволили выявить сроки возобновления функциональной активности яичников.
Типичный образец профиля прогестерона в молоке у коровы с регулярной половой цикличностью показан на рисунке 6. Установлено, что первое непродолжительное повышение уровня гормона наблюдается на 1Всут после отела. При этом клинических признаков половой охоты
Таблица 3
Проявление функциональной активности яичников у коров в послеотельный период (п=30)
Показатели Количество суток после отела
Х±т, Нт
Первая овуляция 17,3±1,11 9-29
Лютеальная активность 22.1±1.21 14-34
Первая половая охота Зб,бЗ±1,75 19-56
Про должнтел ьность полового цикла: первого второго третьего 18,13+0,95 21,35±0,96 22.27±1.08 10-30 14-30 19-31
Осеменение: первое плодотворное 44,93±2,94 59,17±3,57 19-78 26-108
в период, предшествующий подъему прогестерона, не отмечается. Все последующие овуляции у коровы сопровождались четким проявлением всех феноменов стадии возбуждения полового цикла.
Рис.6. Типичный профиль прогестерона в молоке 24
Продолжительность половых циклоп составила 20 суток. Концентрация прогестерона у коровы №136 на 16 сут третьего полового цикла поднималась до 3,31 нмоль/л. Пальпация яичников на 30 сут после отела показала наличие желтого тела и "растущего" фолликула. Обследование яичников во второй половой цикл (43 сут после отела) позволило установить наличие большого фолликула и маленького желтого тела. На 58 сут пальпировались два желтых тела и один фолликул, на 63 - два фолликула и одно желтое тело.
V коровы № 453 профиль прогестерона характеризовался относительной нерегулярностью (рис.7). При обследовании яичников на 36 сут после отела было установлено наличие небольшого желтого тела, что свидетельствовало о произошедшей овуляции без клинических признаков половой охоты. Изучение профиля прогестерона у этого животного показало, что желтое тело не развилось в циклическое и функционировало непродолжительное время.
Падение концентрации прогестерона до минимального значения (0,45 нмоль/л) на 46 сут после отела также не сопровождалось половой охотой, но уровень гормона стал подниматься и через 8 сут повысится до 2,10 нмоль/л.
Ректальная пальпация яичников на 50 сут после отела выявила наличие двух небольших фолликулов и крупного желтого тела. Уровень прогестерона после непродолжительного снижения «а 58 сут вновь стал повышаться и к 62 сут достиг значения в 2,87 нмоль/л.
число суток после отела
Рис.7. Нерегулярный профиль прогестерона 25
Обследованием яичников па 66 сут установлено наличие небольшого желтого тела и крупного' фолликула. Концентрация прогестерона к 68 сут понизилась до минимального значения, у животного четко проявились все феномены стадии возбуждения полового цикла и оно было плодотворно осеменено.
Гипофуикцнональное состояние яичников у коровы №2096 сопровождалось низкой лютеальной активностью и длительным аюстру-сом (рис.8). Это было подтверждено клиническими наблюдениями и ректальной пальпацией яичников у животного в течение исследуемого периода. Половая охота у этой коровы была выявлена лишь на 78 сут после отела. Концентрация прогестерона в течение этого периода была предельно низкой и лишь на 38 сут поднималась до уровня 1,37 нмоль/л.
1,5
1,35
_ 1.2
| 1,05
0,9
| 0,75 и
I 0.6
о.
= 0,45 0,3 0,15 0
10 14 18 22 26 30 34 38 42 46 50 54 58 62 66 70 74 78 82 число суток после отела
Рис.8. Профиль прогестерона при гипофункции яичников
Наблюдения за подопытными животными и ректальная пальпация гонад у коров №№ 756 и 571 позволили установить наличие фолликулярных кист. У коровы №756 данная патология сопровождалась частым проявлением патовой охога, т.е. нимфоманией и низкой лютеаль-ной активностью (рис.9). Концентрация прогестерона до гормональной обработки колебалась в пределах от 0,35 до 1,91 тюль/л. После введения 5,0 тыс НЕ ХГ у коровы была выявлена патовая охота и она была плод отворно осеменена.
Корма №2096
/\ охота ♦ не осеней.
/ \
/ \ *
/ \
/ \
♦ . / \ А-Ч. V
\ / V V
¥
число сую* после отела
Рис.9. Профиль прогестерона при фолликулярной кисте яичника
Нетипичный профиль прогестерона, обусловленный кистой яичника, у коровы №571 показан на рисунке 10. До проявления половой охош концентрация прогестерона была на базалыюм уровне. Ректальная пальпашм яичников на 37 сут выявила наличие кисты в одном из них. Данный диагноз подтверждался и при повторных обследованиях на 51 и 65 сут после отела. Уровень прогестерона в этот период не превышал значения в 0,63 нмоль/л. На 64 сут жнволюму была проведена гормональная коррекция (10+10 мкг сурфагона) н через 18 сут после обработки у коровы выявили половую охоту.
число суток после отела Рис. 10. Нерегулярный профиль прогестерона при кисте янчннка
27
Циклическое желтое тело у коровы Кг 302 функционировало 30 сут (рис.11). Концентрация прогестерона в этот период сохранялась стабильно высокой. При пальпации яичников четко подтверждалось наличие перснстентного желтого тела. После обработки простагланди-ном (ПГФза) уровень прогестерона резко понизился и через 6 сут после введения эстрофана у коровы была выявлена половая охота.
число суток после отела
Рис. 11. Профиль прогестерона при персисте!ггном желтом теле яичника
Изучение р1гтмичности половых циклов у коров с 3-5 безрезультатными осеменениями (при отсутствии воспалительных процессов в органах размножения, кист яичников) показало, что они, как правило, укороченные вследствие нарушения пшофизарно-овариапьных связеП. Ректальной пальпацией яичников у таких животных на 8*10 сут после проявления стадии возбуждения полового цикла устанавливалось наличие небольших желтых тел, а определение концентрации прогестерона в молоке в этот период подтвердило предположение о том, что их гормональная активность недостаточна. Уровень гормона в молоке у коров с укороченными половыми 1щкпами был на 1,94 нмоль/л ниже (Р<0,05), чем у самок с физиологически нормальной половой цикличностью (рис.12).
Рис.12. Концентрация прогестерона и молоке при разной продолжительности поповых циклов
Таким образом, используемая в опыте комплексная оценка состояния яичников у коров после отела позволяет выяшгть нарушения в функции размножения и на этой основе намстщь профилактические н лечебные процедуры.
3.2. Применение иммуночодуляторов для коррекции иммунологического статуса организма животных
3.2.1. Шшянне введения стлмадсна и эраконда на показатели иммунитета организма телят
Для изучения влияния иммуномодуляторов и схем их применения на уровень естественной резистентности и иммунный статус организма телят в кр1гтический период онтогенеза (возраст 15-20 сут) нами совместно с Л.Л. Булатовым (1997) в СПК им. Черняховского были сформированы три группы животных. Телятам первой опытной группы внутримышечно вводили иммуномодуляюр епшаден в дозе 1 мл 0,1% раствора в течение 4 дней. Животным второй опытной группы внутримышечно вводили иммуномодуляюр эра ко ид в дозе 2 мл 10% раствора в течение 4 дней, третьей (контрольная) - равное количество изотонического раствора хлорида натрия.
Результаты исследований фракционного состава сывороточных белков крови показали, что уже через 15 сут после применения им-муномодулятороп у телят опытных групп наблюдается тенденция к увеличению гамма-глобул и нов с 12,46Ю.27., ,12,25±0,4 3 г/л до 15,94*0,63... 16,3810,42 г/л, тогда как показатели контроля повысились с 11,9110,42 до 13,35 г/л. На 30-60 сут опыта разница по сравнению с контролем достигла достоверных различий.
Фоновый уровень в крови общих IgG.it ^М был в границах соответственно 23,09±0,78-23,6610,83 г/л, 15,0910,93-15,3810,69 г/л и 1,31±0,09-1,9010,15 г/л. Через 15 сут после введения препаратов концентрация общих в крови телят опытных групп по сравнению с к01гтролем была выше на 2,69-3,05 г/л, ДО-на 3,54-3,61 г/л (Р«0,05), ^М-на 0,61 г/л (Р<0,01). Достоверная разница сохранялась паЗО и 60 сут опыта.
На фоне повышения активности иммуноглобулинов возрастала БАСК, представляющая комплекс биохимических процессов, связанных с концентрацией опсонизнруюших факторов в сыворотке крови. Характер изменения уровня БАСК в ответ на введение стималсна и эраконда зависел от фоновых показателей организма животных. У телят 1 группы, имевших фоновый показатель в 29,2510,25%, прирост через 15 сут составил 4,2%. Более выраженное влияние иммуномодуляторов было во 2 группе: прн фоне 28,5010,25% прирост составил 8,6% На 30 и 60 сут опыта разница между показателями опытных и контрольных животных достигала соответственно 14,63-16,29% и 13,42-20,25%(Р<0,001).
Увеличение ЛАСК у телят 1 опытной группы в первые 15 сут эксперимента составило 13,5% (с 21,5010,09 ДО 24,4110,10 %), 2 группы - 20,1% (с 21,4010,02 до 25,7010,05°/»), тогда как в контроле л ишь! 0,6% (с 19,8110,01 до 21,9010,04%). Разница в показателях опытных и контрольных животных составила 2^0-3,80% (Р<0,00]). 11а 30 сут опыта ЛАСК у животных опытных групп превышала показатели контроля в 1,19-1,24 раза, а на 60 сут соответственно в 1,11-1,07 раза (Р<0,001).
Иммуномодуляторы оказали стимулирующее влияние и па клеточные факторы иммунной системы организма телят. Установлено, что относительное количество Т-лимфошгтов и крови телят до начала опыта находилось в пределах 27,75Ю,78...28,5 НО,59% (рнс.13). Введение стимадсна н эраконда у телят 1 и 2 групп повысило содержание в крови Т-клетак в первые 15 сут опыта соответственно до 30,0 и 29,36%. 11а 30 сут опыта количество Т- лимфошгтов в крови телят опытных групп в сравнении с контролем уже было достоверно выше: 1 группы на 10,4%, 11-11,5% (Р<0,05), а на 60 сут разница составила 13,5% (Р<0,01) и 22,0% (Р<0,001). Прн этом отмечено увеличение содержания в крови субпопуляции Т-лимфошгтов — Т-хелперов у опытных животных в течение всего периода наблюдений. Так, абсолютное количество Т-хслперов в крови телят 1 и 2 групп по сравнению с контролем было выше после введения через: 15 сут на 0,21 и 019*10*/л (Р<0,05), 30 суг - на 0,53н 0,58*10'/л (Р<0,001), 60 сут -на 0,46 и 0,67» 10*/л (Р<0,001).
□фон Пна 15 сут Она 30 сут □наБОсут
Рнс.13, Иммуностимулирующее действие стимадена и эракопда па Т*лимфошггы
Введение животным стимадена и эраконда способствовало повышению в крови популяции В-лимфоцитов уже через 15 сут после инъекции (рнс.14). У телят опытных групп количество В-лимфоцитов повысилось соответственно до 8,78% и 9,35%, тогда как в группе контроля
Рис.14. Иммунокорригнрующее действие стимадена и эраконда на В-лимфониты 31
снизилось до 7,02%. Иммуно корри пфуюшее действие препаратов проявилось в том, что за 15 сут опыта количество лимфоцитов увеличилось на 30,0...28,4%. При оценке результатов между группами установлено, чтО(Ь I группе превышение над контролем составило 1,76% (Р<0,05), а во 11-2,33?о (Р<0,01). Такая тенденция сохранялась в течение всего опыта: на 30 н 60 сут после инъекции препаратов относительное количество В-лимфоцитов у опытных животных превышало показатели контрольных соответственно на 12,5...25,55% (Р<0,05) и 15,3...31,7%(Р< 0,01).
Из приведенных данных следует, что стимаден и эраконд, введенные внутримышечно 4-х кратно, активировали функциональное состояние компонентов иммунной системы организма, а повышение содержания иммуноглобулинов в крови телят, как основного фактора обеспечивающего сопротивляемость организма к различным патогенам, свидетельствует об усилении процессов иммуногенеза.
3.2.2. Коррекция естественной резистентности и иммунного статуса у телок 3-месячного возраста стимаденом
Для изучения влияния нммуномодулятора стнмадека на состояние защитных систем организма у тёлок 3-месячного возраста (с признаками иммунодефицита) в УОХ «Знаменское» сформировали две группы помесных (ЧПхГ) животных (1 группа - опытная, 2*контрольная). Животным опытной труппы в течение 3 дней внутримышечно вводили стимаден в дозе 2 мл 0,1% раствора, контрольной -равное количество юотонического раствора хлорида натрия. Кровь для гематологических, биохимических и иммунологических исследований у телок отбирали до введения препарата, в течение опыта через 15 и 30 сут после инъекции.
Результаты гематологических исследований показали, что стимаден активировал гемопоэз, о чем свидетельствует повышение в крови количества эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, улучшал показатели белкового обмена: общий белок, бета- и гамма- глобулины (табл.4). Количество лейкошггов в крови у опытных телок уже через 15 сут после введения препарата было на 2,7% выше, а через 30 сут • на 20,4% показателя ко1гтроля. В лей ко грамм с установлено изменение количественного и качественного состава клеток. На 30 сут опыта у живошых 1 группы по сравнению с котрольной было выше относительное количество палочкоядерных нейтрофилов, сегмектоядерных нейтрофилов н лимфоцитов соответственно на 21,2%, 10,5% н 1,9%, уровень сывороточных у-глобулннов - на 4,93 г/л (Р<0,001).
Таблица 4
Влияние епшалена на показатели естественноП _ резистентности телок__
Показатели Фон Сроки исследовании через (сут)
15 30
Эритроциты, 10|г/д 5.10*0,05 5.23Ю.07 5,95*0.09
5.04*0.02 5,21*0,06 5.88*0.06
Гемоглобин, г/л 99,10±0.50 124.40*0.33 127.10*0.89
99.07*0.75 124.60±0,31 126ЛЫШ
ЛеПкощпы, Ю'/л 4.50*019 5,72*0.41 635*0.46
4.80*0.22 537*0.32 5,44*0.64
Эозинофилы, % 2,40*0.28 2,80*0,67 3.70*0.37
230*0.33 2.60±037 2.90*039
П ал оч коядер-ные нейтр., % 2,00*0.33 1.90*0.35 4.00*0.33
1.80*0.21 230*0.40 330*0.45
Сегментоядер-ные нейтр., % 25.10*1,24 25.90*1.22 26,40*137
24.00tl.61 2430*1.25 23.90*1.49
Лимфоциты, % 60.60*1,66 64,70*1,09 65.90*1.47
60,90*1.25 6530*131 64,70*1.24
Моноциты, % 4,70*0.70 5.90*131 7.00*0.95
4,90*0.69 4.90*0.81 5,60*1.11
Общий белок, г/л 63,81*0.71 66.93*0.60 69,11*039
65,16*0,59 66.86ctO.64 68,21*0,60
Альбумины, г/л 28.96*1.72 27.11*132 28.19*1.37
29.09*131 28,14*1.13 28.93*0.87
о-глобулнны, г/л 936*1,42 8.85*0.75 8,97*0.66
9,89*1.25 8,94*0,97 9,01*0,83
Р"глобулины, г/л 5.19*031 11.63*0.58 12.23*0.62
5.26*031 10.43*0,73 1139*0.60
7"глобулины, г/л 10.71*0,74 12.72*0.52 23.35*0.77*
11,07*0.58 1239*0,60 18.42*0.65
Примечание: числитсль-опитная группа (п=10)
знаменатель-контрольная груииа(п=10) * Р<0,001 (достовср! гость разницы по сравнению с контролем)
Введение стимадена стимулировало функциональную активность тимуса, что выразилось в повышении абсолютного количества в крови Т-лимфоцитов на 73,1%, Т-хелперов на 80,5?», оптимизации иммуноре-гуляторного индекса 2,12 (табя.5). •
Таблица 5
Содержание лимфошгтов н их субпопуляций в периферической _крови телок при введении стимадена_
Показатели Фон Сроки исследований через (сут)
15 30
Лимфошгпл, Ю'/л 2,85±0,07 3.66±020 4Л1±ОД9
ЗЛ5±0.17 3,65±0.23 3.4 8 ±0,41
Т-лимфощггы Е-РОК, % 48.80ttl.59 49.801:139 53,60±1,96
46Д0±1,83 49,00±1,7б 49,80±0.86
Т-лимфошгги, Ю'/л 1.34 ±0,05 1.83±0,12 2,32±0,18*
1,45±0,07 1,79±0ЛЗ 1,73-0.21
Т-хелперы, % 30,4±1,42 34,2±0.80 36,4 ±0.82
30.2*1,89 29,8±0,65 30,3±0.59
Т-хелперы, 10*/л 0,87*0,06 1,25 ±0.08 1.57-0,12*
0,94±0,07 1,09±0.08 1,06±0.13
Т-супрессоры, % 1б,4±1,7 15,6±0,45 17Д±0.84
16,0±1.87 19.2±0.48 19,5 ±0.52
Т-сунрсссоры, Ю'/л 0,43±0,05 0,58±0,04 0,74 ±0,07
0.51 ±0,06 0,70±0,05 0.б6±0.08
Т-х/Г-с 2,02 2,16 2.12
1.84 1.56 1,61
В-лимфоцити ЕЛС-РОК, % 1К40±0,87 12.8040.80 13,60±0.93
11.00*0.84 11.60±0.81 12,00±0.32
В-лимфошпи, Ю'/л 0,33±0,02 0.4740,03 0.59±0.06*
0,35±0.03 0,42±0,03 0,42±0,05
Индекс Т/В 4,06 3,89 3.93
4,14 4.26 4Л1
Примечание: числитель—опытная группа (п=10)
знаменатель-контрольная группа (п=10) * Р<0,05 (достоверность рззишш по сравнению с контролем)
V животных опытной группы отмечено увеличение абсолютного количества Т-лнмфоцитов на 34,1%, Т-хелперов на 20,1%, В-лнмфо-цицитов на 40,5% (Р<0,05) против показателей контрольной группы.
Стимаден активировал н гуморальное звено иммунитета. Это выразилось увеличением в сыворотке крови концентрации иммуноглобулинов классов ^О, (рис.15). Установлено через 15 сут после введения препарата повышение уровня 1£0 на 8,3%(24,27 г/л против 22,40 г/л у телок ко1гтроля), а через 30 сут концентрация в крови 1&<3 у животных
Рис. 15. Динамика концентрации иммуноглобулинов после инъекции спшадена
опытной группы по сравнению с контрольной была выше на 5,33 г/л (Р<Ю,001). На 15 сут после введения ст им аде на уровень IgM в крови телок 1 группы по сравнению со 2 повысился на 21% (3,69 г/л против 3,05 г/л). Разница статистически достоверна (Р<0,001). В следующие 15 сут опытного периода увеличение концентрация IgM у опытных животных составило 24,8%.
Таким образом, введение стнмадена телкам с начальными при- * знаками иммунодефицита способствовхю оптимизации гомсостаза, активизации гемопоэза и других факторов естественной резистентности организма, что выразилось в повышении клеточных и гуморальных показателей иммунитета.
3.2.3. Влияние введении стимадсгш н тнмогена на состояние исспецифической резистентности организма стельных коров и получаемого от ннх приплода
С целью изучения действия нммуномодуляторов на иммунную систему организма стельных коров, нренатальные потери в УОХ «Зна-менское» сформировали 3 группы животных по 10 голов в каждой (1 и
2-опытные, 3-контрольная). Исследования про во лил и совместно с А.Л. Булатовым (1998) на голштннизированных черно-пестрых коровах
3-5 лактаций и живой массой 500-550 кг.
35
Иммупомодуляторы вводили за 60....45 сут до отела внутримышечно трехкратно с интервалом в 24 часа: стимаден (1 группа) в дозе 4 мл 0,1% раствора, тнмоген (2 груш1а)-500 мкг на жнволше. Коровам 3 группы (контроль) и1гъеш1роваян равное количество изотонического раствора натрия хлорида. Кровь у коров отбирали до введения нммуно-модуляторов н через 30 сут после применения препаратов, у полученного от них приплода в возрасте: 1-х, 3-х, 15 н 25 суток. Оценивали гема-. тологические показатели, иротеин о грамму, состояние гуморального и клеточного иммунитета.
В результате гематологических исследований установлено, что у коров опытных групп фоновый уровень концентрации гемоглобина, количества эритрошггов и лейкошпов колебался соответственно от 106,0312,50 до 105,9312,45 г/л, 5,0810,18 до 5,1110,19*10'%, 5,6110,27 до 5,6010.22*10%. У контрольных животных эти показатели соответствовали следующим значениям: концентрация гемоглобина — 105,7612,41 г/л, кол1псство эритроцитов н лейкоцитов 5,0610,15*10'% к 5,5810,28 * 10%.
В течение опыта (за 5-7 суток до отела) содержание гемоглобина в эритроцитах у коров первой опытной группы повысилось до 106,30*2,42 г/л, второй -до 106,11±2Д9г/л, контрольных-до 105,9812,37 г/л. Количество эритроцитов возрастало до 5,1110,16* 10п/л и 5,14Ю,18*10'% (опытные группы). У контрольных животных количество эритроцитов оставалось на том же уровне (5,0610,14*10'%). Количество лейкошггов у коров опытных групп было выше в сравнении с контролем на 2,16„Л,44% (5,6810,27 н 5,641020*10% против 5,5610.25*10%).
У полученного приплода от коров опытных групп в течение опытного периода отмечен высокий фон естественной резистентности и иммунного статуса организма. Это состояние характеризует соответствие физиологическим значениям показателей гемограммы, уровня в сыворотке крови общего белка и его фракций, концентрации иммупо- глобулинов, количества в крови Т-и В-лимфоцитов, БЛСК, ЛЛСК. Установлено, что в суточном возрасте концентрация гемоглобина в крови у телят, полученных от обработанных иммуиомодуляторамн коров, составила 132,513,39 и 129,613,27 г/л, контрольных -128,613,Ог/л. Количество эр!Прош(тов соответственно 6,0910,16*10'% и 5,9810,18*10'%, в кон-троле-5,8810,12*10'%. Количество лейкоцитов у приплода первой группы составляло в среднем 6,5110,22*10% (5,5-7,6), второй-6.45Ю.18* 10% (5,6 - 6,9).
В 3-суточном возрасте выявлено более высокое количество эриг-роцитов в крови и содержание в них гемоглобина у телят опытных групп по сравнению с контролем соответственно на 10,68 и 6,85 г/л, на
0,43*10'% (Р<0,05) н 0,39*10'%. При этом количество лейкоцитов в крови у телят опытных труни составляло в среднем 7,3910,25*10% и 7,3010,21*10%, коктрольной-6,8210,16*10%.
В 15-суточном возрасте не выявлено достоверных различий в концентрации гемоглобина у животных опытных и контрольных групп (116,8212,99 и 113,9613,13 г/л против 113,1212,56 г/л). Отмечено, что количество эритроцитов было выше у телят опытных групп (5,78+0,13*10'% и 5,7110,14* 10'%), чем в контроле - 5,3610,08* 1011л (Р<0,05). Сохранились заметные различия н в количестве лейкоцитов у животных опытных трупп н контроля (7,2010,25*10% и 7,11±0,19 • 10% против 6,6410,15*10%).
Установлено, что в 25-суточном возрасте у телят 1 опытной группы по сравнению с контролем содержание гемоглобина в крови было на 7,72 г/л выше (123,0111,86 г/л против 115,2911,95 г/л). Разница статистически достоверна (Р<0,05). В количестве эритроцитов у опытных и контрольных телят также наб л ю лается достоверная разница (5,5710,12*10'% и 5,5410,11*10'% против 5,1910,06*10'%) (Р<0,05). Количество лейкоцитов у животных 1 и 2 групп составляло в среднем соответственно 8,2310,25*10% н 8,1810,23*10%, что на 0,81 и 0,76*10% выше, чем в контрольной (7,4210,17* 10%) (Р<0,05).
Исследование протеинограммы сыворотки крови коров показало, что фоновое содержание общего белка было в пределах 84,6110,6387,6011,26 г/л. С приближением родов концентрация общего белка понижалась: в опытных группах соответственно на 6,14% и 5,78%, а в контроле более значительно (9,55%). Фоновый уровень фракции альбуминов у подопытных животных колебался в пределах от 28,7210,66 г/л до 32,7911,13 г/л. Через 30 сут после введения препаратов наибольшее снижение альбуминов отмечено у коров 1 опытной группы (12,7%). Для животных опытных групп было характерным менее резкое снижение фракции альфа-глобулинов: соответственно на 13,4% и 15,1%, тогда как у контрольных-па 15,8%.
Анализ данных по формированию гуморального иммунитета у телят, полученных от коров, подвергшихся иммуностнмуляшш, показывает, что в суточном возрасте БАСК у животных опытных групп со* ставила в среднем соответственно 34,2210,52% и 34,08±0,51% или на 5,2754 и 5,13% выше, чем в контроле (Р<0,001). У телят 1 группы установлена более высокая ЛАСК (0,76*0,01% против 0,7110,02 % показателя контрольной группы) (Р<0,001). Конце1гтрация в сыворотке крови опытных животных составила в среднем 19,7610,41 г/л и 19,75*0,39 г/л, что выше чем в контроле на 2,23 н 2,22 г/л (Р<0,01). Отмечено повышенное содержание н Г^М у телят 1 н 2 групп по сравне-
37
ни» с контрольной группой (3,3310,10 г/л и 3,2110,13 г/л против 2,5910,20 г/л) (Р<0,05). Животные опытных групп имели более высокие показатели и клеточного иммунитета. Так, абсолютное количество Т-лимфошггов в крови телят опытных групп составило в среднем 2,37Ю,08 и 2,2810,08*10%, а в контрольной группе 1,73 ±0,04* 10% (Р<0,001). Количество Т-хелперов по сравнению с контролем было выше у опытных животных !,79±0»07 н 1,72±0,08 против 1,15*0,05*10% (Р<0,001). Иммунорегуляторный индекс (Т-х/Т-с) был выше у телят опытных групп (3,48Ю,48 и 3,3710,40), а в контроле 2,31. У телят опытных групп наблюдается повышенное количество в крови В-лнмфоцнтов: 0,3710,01 и 0,3510,02*10%, а в контроле ииже соответственно на 0,12 и 0,10*10% (Р<0,001).
Установлено, что в 3-суточном возрасте БАСК у телят 1 и 2 групп возросла соответственно до 39,6210,61 % и 39,3910,62 %, что на 8,61 и 8,38% выше, чем в контроле (Р<0,001). ЛАСК опытных животных была в пределах 1,2410,01 и 1,2410,02%, а в ко1гтролс ниже на 0,23% (Р<0,001). Концентрация IgG в сыворотке крови опытных телят достигла показателей 24,3910,40 г/л и 24,6510,42 г/л и была достоверно (Р<0,001) выше, чем в контрольной труппе (18,9510,36 г/л). Уровень IgM увеличился до 3,60Ю,08 т/л и 3,8410,11 г/л, что выше показателя ко)гтроля на 0,78 г/л и 1,02 г/л (Р<0,01). Количество Т-лимфоцитов в крови телят опытных групп было в границах 2,69Ю,08*10%... 2,58±0,07*10%, что выше чем у контрольных на 0,75 и 0,64*10% (Р<0,001). Количество Т-хелперов в крови опытных животных было в пределах 1,93Ю,06...1,8410,08*10%, тогда как в контроле -1,21*0,04*10% (Р<0,001). Индекс Т-х/Т-с был выше у опытных телят (2,29), контроль (1,60). Сохраняются высокие показатели и в количестве В-лнмфошггов в крови телят опытных групп по сравнению с контроле м:0,62 л 0,03 и 0,66*10% против 0,3110,01*10% (Р<0,001).
В 15-суточном возрасте у животных опытных групп БАСК в среднем повысилась до 45,9611,12% и 46,8454 и была выше показателя контрольной группы на 6,7594 и 7,6394 (Р<0,001). ЛАСК увеличилась до 2,5510,0394 и на 0,49% была выше, чем в контроле (Р<0,001). Отмечено увеличение содержания в сыворотке крови опытных телят IgG до 22,7510,41 г/л и 22,67Ю,39 г/л, что выше чем в кошролыюй группе на 3,99 г/л н 3,91 г/л (Р<0,001). Концентрация IgM была достоверно выше (Р<0,001) в опытных группах (2,97Ю,08 г/л и 3,ООЮ,Об г/л прошв 2,07Ю,12 г/л). Опытные телята имели более высокие показатели и клеточного иммунитета. Так, количество Т-лнмфошггов в крови у них было в пределах 2,6310,11*10% и 2,48*10% или больше, чем в контроле на 0,76 и 0,61*10% (Р<0,001). Отмечена достоверная разница н в количестве Т-хелперов: 1,88Ю,09 и 1,77±0,06*10/л (опыт), контроль -
1,16±0,04*10%. Сохраняются высокие показатели индекса Т-х/Т-с у опытных телят по сравнению с контрольными (2,55-10,11 и 2,59*0,12 прошв 1,6910,14). В крови животных опытных групп регистрируется повышенное количество В-лнмфошггов 0,6910,03 *10% и 0,73±0,G2* 10%, а в контроле ниже соответственно на 0,4040% и 0,44*10% (Р<0,001).
При опенке защитных систем организма телят 25-суточного воз--раста установлена закономерность в сохранении более высоких показателей у опытных животных. Так, БАСК опытных телят достигла значений 50,9810,47% и 52,41Ю,48%, а в ко1гтрольной группе - 46,19*0,88% или на 4,79% и 6,22% ниже (Р<0,001). ЛАСК состав!Lía в среднем 2,8610,04% и 2,9610,03Í6, что на 0,60% и 0,70% выше, чем у кмгтролъ-ных телят (Р<0,001). Уровень IgG в сыворотке крови телят 1 и 2 групп колебался в границах 24,5Н0,36...24,96Ю,42 г/л, что выше по сравнению с контрольной группой на 1,28 г/л и 1,7 г/л (Р<0,05). Конце tripa цця IgM составит а в среднем 3,2910,08 г/л н 3,3810,07 г/л (опыт), а в контроле ниже соответственно на 1,0 г/л и 1,09 г/л (Р<0,001). Установлены более высокие показатели клеточного иммунитета у опытных телят по сравнению с контролем. Так, количество Т-л1ь\|фошггов в крови у животных опытных групп было в границах 3,01*0,11*10% ...2,84±0,00*10%, что выше чем в контроле на 0,97*10% и 0,80*10% (Р<0,001). Из cyGпопуляций Т-лимфошпов в крови опытных телят отмечено повышенное количество Т-хслперов соответственно 2,1б±0,09*10% и 2,06Ю,08*10%), а в контроле лишь 1,30*0,06*10% (Р<0,001). Животные опытных групп сохраняют оптимальный индекс Т-х/Т-с 2,55 и 2,74 тогда как в контрольной группе-! ,82. Отмечено, что количество В-лимфоцнтов в крови животных опытных групп выше (Р<0,001), чем у контрольных на 0,45*10% и 0,49*10% (0,79±0,02*10% и 0,8310,02* 10% прогив 0,34*0,01 * 10%).
Имму! гости мул я цня глубок остсльных коров оказала существенное влияние на 1ьтотность молозива и содержание в нем иммуноглобулинов. Показатели, характеризующие некоторые биологические свойства молозива, представлены в таблице 6.
Установлено, что введение нммуномодуляторов животным опытных групп способствовало повышению плотности молозива но сравнению с контролем на 1,43% и 1,33% (1,062±0,02 г/см3 и 1,061±0,03 г/см1 против 1,047±0,01 г/см1). Результаты определения в сыворотке молозива концентрации иммуноглобулинов показали, что как содержание обшнх !g, так н Ig отдельных классов было выше у коров, которым вводили нммун о модуляторы. При этом уровень об тих иммуноглобулинов у обработанных животных по сравнению с контрольными был выше на 39,96 г/л и 40,4 г/л (Г<0,001). В молозиве коров опытных групп выше
Таблица б
Характеристика молозива подопытных коров_
Группа
Показатели 1 опытная 2 опытная 3 кон-
(п=10) (п=10) трольная (п=10)
Плотность, г/см'1 1.062*0.02 1.061*0.03 1,047*0.01
11м му и о гл обул ины:
обшне. г/л 90.45*5,96 90.89*7.24 50.49*3.23
1рО, г/л 31,57*0,39 31,46*0,39 28,75*0.43
1рМ, г/л 4,42*0.28 436*0.14 4.03*0.26
содержание на 9,8% и 9,4% по сравнению с ко1гтрольнымн животными ([><0,001). Отмечен н более высокий уровень 1дМ, хотя разница в 0,39 г/л и 0,53 г/л не была достоверной.
Из результатов опыта следует, что введение стельным коровам стимадсна и тимогена корригировало их иммунный статус в сторону оптимизации, способствовало повышенному накоплению в молозиве иммуноглобулинов. Потребление новорожденными телятами такого молозива обеспечивхто напряженный колостральный иммунитет и превышение над сверстниками показателей неспецифической резистентности организма в течение 25-суточного возраста.
3.2.4. Влияние разных схем применения биологически активных препаратов на показатели оплодотооряемости коров
Для изучения влияния розных схем применения тимогена и етнмаде-на на показатели оплодотворяемостн коров как при раздельном, так и совместном введении с гонадолнберином сурфагоном в КСХП «Прогресс» была проведена серия опытов. В первом опыте иммуномодуляторы вводили за 45-30 сут до отела внутримышечно трехкратно с интервалом в 24 часа: тимоген (1 группа) в дозе 5 мкгУкг массы тела, стимадеи (2 группа) -0,5 мл 0,1% раствора на 10 кг массы тела, 3 группе (контроль) инъецировали равное количество юотожпеского раствора натрия хлорида.
Проведенными исследованиями установлено, что введение коровам иммуномодуляторов способствовало после отела плодотворному осеменению в оптимальные сроки (в течение 90 сут) 93,3-100,054 животных, а в контроле за этот период стельными стало только 60,0%.
Во втором опыте коровам 1 и 2 групп вводили соответственно тимоген и стимаден (в прежних дозах и кратности) З-сурфагон (в дозе 50 мкг /животное, однократно), 4 и 5 -иммуномодуляторы совместно с
roi юлол ибер ином, б группа служила контролем. Нммуномодуляторы иачпнали вводить с 10 сут после отела, в этот же срок делали инъекцию и гоналолнберипа.
Результаты опыта свидетельствуют о том, что коррекция иммунного статуса коров в после отел u mil период на показателях их ошюдо-творяемосги сказалась одинаково: в группе, где применяли тимоген, стали стельными после двух оссмснсннП 30,0% особе 1!, а при введении сп 1м аде на-5 6,3%. Отмечено, что выше результативность была при совместном применении иммуномодуляторов и гонадолиберина: в эшх группах 81,3% и 87,5? о коров были осеменены плодотворно после двух осеменении. При раздельном применении сурфагона стельность наступала у 75,0% животных.
В третьем опыте коровам 1 и 2 групп на 8,9 10 суг после осеменения вводили соответственно тимоген и стимален (в прежних дозах), 3-одно кралю на S сут инъецировали cyptjtaron (в дозе 10 мкг на жипагное), 4-тимоген+сурфагон, 5-стимаден*сурфагон, б группа служба контролем.
Установлено, что раздельное применение тимогена, стималена и сурфагона после осеменения коров не оказывало существенного влияния на их оплодотворяемость: стали стельными после двух осеменений соответственно 70,6%; 68,2% н 73,3% обработанных животных, что выше, чем в контроле (65,2%). Сочетанное использование иммуномодуляторов и гонадолиберина повышало показатель стельности до 81,3% и 80,0%, что обусловлено нормализацией иммунологического статуса организма и физиологически нормального течения репродуктивной функции.
Таким образом, показано, что введение иммуномодуляторов улучшало или же стабилизировало иммунный craiyc стельных коров, снижало нммунносулресснвное влияние лактации. На таком фоне роды у самок протекали без осложнений, быстрее закапчивалась инволюция родополовых путей, восстанавливалась циклическая активность яичников, в результате оплодотворяемость коров во вторую половую охоту повышалась. Совместное применение иммуномодуляторов и гонадолиберина позволяло устранить возможный иммунодефицит, возникший после родов и начала лактации, способствуя повышению выживаемости эмбрионов на фоне введения сурфагона.
4. ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ПРОДУКТИВНЫХ КАЧЕСТВ РЕМОНТНЫХ ТЕЛОК НА ОСНОВЕ МАТЕМАТИЧЕСКОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ
Регрессионный анализ прогнозирования хозяйственно-полезных признаков т£лок проводили на следующие зависимые переменные: жи-
41
вую массу, удой за лактацию и пи ход молочного жира. Были определены коэффициенты множественной корреляции (I*) при разном количестве и сочетании независимых переменных.
Получена математическая модель прогнозирования живой массы рсмоггтих телок в возрасте 1-3 месяца, включающая 4 показателя: у-139,29+0,76x2-8,67x4-27,42X7 +51»27хп; 112=0,89, где: у - прогнозируемая живая масса;
альбумины; - глобулины; х< - глюкоза; х«_общне лишиш; — фосфалнпиды;хц — триацилпншеролы. Точность прогноза живой массы по предлагаемому уравнению множественной регрессии составляет (-0,73% ).
Математическая модель прогнозирования живой массы ремо!гт-ных телок в возрасте 4-6 месяцев, включающая 4 показателя: у= -72,86*0,73*3+12,1 5,68x^-14,7217; 1^=0,93 Точность пропюза живой массы по данному уравнению составляет (-1142^).
Разработана математическая модель для прогнозирования молочной продуктивности животных по первой лактации. Модель включает 6 показателей:
у»»30,35х 1-81,18x1-51,861з+1233,51х(+1872,43хю+2095,42 *и; 1^=0,90,
где: у - прогнозируемый удой; XI - общий белок; х^ _ альбумины; х^-глобулины; х«-общий хатеетерол; -этерифищ1ровацкый холесте-рол; Х|2 - триацилгпицеролы.
Точность пропюза молочной продуктивности по данному уравнению составляет (-3,38%).
Разработана математическая модель для прогнозирования выхода молочного жира по первой лактации, где:
у - протезируемый выход молочного жира. Модель включает 6 показателей:
у=1,22х,-2,83x2-2,17х3+52х$+67,64хи+75,441,2; П2=0,88 Точность прошоза выхода маточного жира по данному уравнению составляет (-6,98%).
Следовательно, выявленные регрессионные взаимосвязи подчеркивают важность этих биохимических компонентов в формировании продуктивных признаков животных. Показатели продуктивности особей во многом обусловлены течением к интенсивностью белкового обмена в организме. Взаимосвязь общего белка с молочной продуктивностью и выходом молочного жира во всех случаях оставалась положительной.
выводы
1. Комплексными исследованиями естественной резнете )ггностн иммунологического статуса, черно-пестрого скота голипннекой популяции показано, что па разных этапах постнаталыюго онтогенеза, характеризующихся различными физиологическими н патологическими состояниями, с целью эффективной реализации генетического потенциала животных необходимы методы контроля функционального состояния отдельных систем организма п их коррекция.
2. При оценке иммунного статуса у новорожденных телят установлено, что до выпойки молозива в крови отмечаете!, низкое количество лейкоцитов и лимфоцитов. После приема молозива количество лейкоцитов и лимфоцитов повышается в 1,4 раза, концентрат!» 1£С в 21 раз, а 1&М в 19Д раза. Состояние клеточного звена иммунной системы в ранний постнатальный период (5 сут) характеризуется низким уровнем Т-лнмфоцитов на популяцконном и субпопуляшюнном уровне. С возрастом происходит становление клеточных и гуморальных факторов иммунитета, достигающие значений взрослых животных к 3-5-месячному возрасту.
3. Иммунный статус у коров зависит от физиологического состояния. Показано, <гто концентрация иммуноглобулинов С, М и Л классов снижается к концу беременности и после отела, а в течение лактации возрастает. БЛСК, ЛАСК, количество лимфоцитов, Т- и В-клеток находятся на высоком уровне во время беременности н после отела, без существенных колебаний в период лзкташш.
4. Четырехкратное внутримышечное введение епшадена и эраконда повышает (через 15 сут) функциональную активность иммунной системы у телят 15-20-суточного возраста. При этом достоверно повышаются гуморальные показатели иммунитета (общие 1£М, БАСК, ЛАСК), возрастает относительное содержание Т- и В-лимфошггов.
5. Применение стимздена внутримышечно в течение 3 дней в дозе 2 мл 0,154 раствора вызывает у телок 3-месячного возраста (с признаками иммунодефицита) повышение показателей естественной резистентности, коннс1ттра1шн в сыворотке крови 1£в и соответственно на 24,554 и 40,354, а также активирует Т-клеточное звено иммунитета, о чем свидетельствует увеличение на 143,754 в крови количества Т-хелперов.
6. Стимаден и тнмоген стимулируют функциональную активность гуморального эвена иммунитета у глубокостельных коров, способствуя увеличению синтеза и накоплению в молозиве отдельных классов иммуноглобулинов: и 1дМ соответственно в 1,09; 1,11 раза. Потребление такового молозива телятами достоверно повышает показатели их гуморального и клеточного иммунитета в раннем поел[атальном онтогенезе (30 сут). Для оценки иммунобиологической полноценности молозива разработан метод, основанный на цинк-сульфатном тесте (патент
из изобретение №2166913 от 20.05.2001 г. «Способ определения иммуноглобулинов в сыворотке молозива»).
7. При оненкс биохимического статуса у телок установлено, чго направленность и интенсивность обменных процессов изменяется в связи с возрастом. В постнаталыюм 01гтогснсзе телок выделяются три основных периода, отличающиеся характером течения метаболических процессов:
-первый от рождения до 4-6-месячного возраста. В этот период растущими тканями организма интенсивно используются структурные, пластические и энергетические вещества;
-второй с 7 до 15-месячного возраста, когда обмен вешссш направлен на становление половой функции;
-третий с 16 до 18-месячного возраста. Он характеризуется стабилизацией большинства показателей и снижением концентрации общего холестерола в сыворотке крови. Отмечено, что с возрастом происходит увеличение содержания в крови общего белка, альбуминов, у-глобулинов, общих липидов, фосфолипидов. При этом снижается уровень р-глобул и нов, глюкозы и пиро виноградной кислоты.
8. Установлено, что гематологические показатели, белок и его фракции, уровень глюкозы и липидных метаболитов в крови коров изменяются в течение полового цикла. Стадия возбуждения полового цикла характеризуется высокими показателями в крови эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, общего белка, альбуминов, иммуноглобулинов, глюкозы, общих липидов к фосфолипидов, при этом отмечен низкий уровень а- и р-глобулинов, общего холестерола.
9. У длительно бесплодных коров (121-211 сут) установлено достоверное снижение в крови общего белка на 15,5%, альбуминов на 21,7%, глюкозы на 10,7°/о, общих липидов на 5,9%, фосфолипидов на 21,8%, общего холестерола на 36,9%, кальция на 9,1% и неорганического фосфора на 21,1%.
10. Установлено, что в сухостойный и лактационный периоды у коров наблюдается максимальный уровень в сыворотке крови общего белка (78,56±2,06 и 86,38*3,89 г/л) и лнпопротсинов низкой плотности (4,8910,11 и 5,20*0,17 г/л). Низкий уровень общих липидов, фосфолипидов, общего холестерола и глюкозы зарегистрирован в заключительный период беременности с повышением при иютнеивном молокообразовании.
11. Максимальная активность ферментов переаминирования АсАТ и ЛпАТ регистрируется у коров на 5 месяце лактации (1321,05 и 989,42 нкат/л), а Г-ГТФ во время беременности в сухостойный период (352,17 нкат/л). Заключ1ггельный период стельности у коров сопровождается повышением уровня о сыворотке крови макроэлементов кальция (2,52±0,02 ммоль/л), неорганического фосфора (1,58±0,01 ммоль/л) и магния (1,1010,0-1 ммоль/л).
12 Оценка функциональной активности яичннков у коров после отела, с использованием комплексных исследований (линамнкн прогестерона в молоке, ректальной пальпации и клинических наблюдений), показала проявление первой овуляции через 17,3ti,И суток при концентрации прогестерона 0,68i0,05 имоль/л. Средняя продолж1гтсль-ность первого полового никла составляет 18,l3i0,95, а у 47% коров-10-16 сут при максимальном уровне прогестерона (2,69¿0,27 нмоль/л) на 22,1±1,21 сут после отела. Клинически выраженная половая охота у коров наблюдается через 36,631=1,75 (19-56) сут после отела. При этом первое осеменение животных проводится на 44,93 i2,94, а нлолотворное -на 59,17*3,57 сут после родов. Концетрацня прогестерона при плодотворном осеменении составляет 0,63±0,06 нмоль/л.
13. Сочстаннос применение в послеотельный период нммуномо-дуляторов тнмогена, стимадсна и гонадолибершеа сурфагона способствует шюлотворному осеменению в оптимальные сроки 81,3-87,594 коров при индексе осеменения 1,9. Совместное использование препаратов после оссмснсния в целях повышения выживаемости эмбрионов увеличивает стельность коров на 16,2%... 14,894.
14.11а основе количественных показателей метаболитов белкового, углеводного и липидпого обменов у ремонтных телок, нх анализа и моделирования разработаны математические модели прогнозирования живой массы, молочной продуктивности и выхода молочного жира.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ
1. При проведении биотехнической коррекции функции размножения у самок крупного рогатого скота применять „Рекомендации по организации целенаправленного регулирования воспроизводительной функции крупного рогатого скота" (Самбуров Н.В. и др., 1994 г., утверждены управлением сельского хозяйства к продовольствия Курской области 27.04.95 г., Jft21).
2. С целью повышения естественной резистентности и иммунного статуса организма животных рекомендуется:
-для коррекции иммунодефицитных состояний у телят 15-20-суточного возраста применение им му по модуляторов стимадсна в дозе 1 мл 0,194 раствора или эрзконда в дозе 2 мл 10 94 раствора внутримышечно 4-х кратно, у телок 3-месячного возраста — стимадена в дозе 2 мл 0,194 раствора внутримышечно 3-х кратно. Препараты активируют клеточные и гуморальные факторы зашиты организма;
-для повышения иммунобиологических свойств молозива вводить стельным коровам (за 60-45 сут до отела) стимаден в дозе 4 мл 0,194 раствора или тимоген в дозе 500 мкг на животное внутримышечно 3-х кратно (рационализаторское предложение от 15.04.96 г.).
3. Для прогноза продуктивных признаков ремонтных телок в се-лскционно-плсменной работе использовать математические модели, позволяющие по метаболитам крови прогнозировать:
■ живую массу ремонтных телок в возрасте 4-6 месяцев у51-72,9640,73 х}+12,1x5+15,68x6+14,72x7,
где у - прогнозируемая живая масса (кг); Хз -глобулины; х5 - пируват; х6 - общие лнпиды; Х7- фосфолншщы.
■ молочную продуктивность по показателям 4-месячных телок у= 30,35 х,-81,18х1-51,86х1+1233,51х8 +1872,43x10+2095,42x12,
где у — иропюзируемая продуктивность (кг); Х]— общий белок; х2- альбумины; Хз- глобулины; х»- общий холестерол; Х|0- этернфицированный холестерол; х12- трнацилглицеролы.
■ выход молочного жира по показателям 4-месячных телок у= 1,22х,-2,83х1 -2,17х3 + 52х8 +67,64х10 + 75,44х12.
где у - протезируемый молочный жир (кг); Х1- обший белок; хг- альбумины; хз- глобулины; х«- общий холестерол; хщ- этернфицированный холестерол; Х12- трнацилглицеролы.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Самб)ров Н.В. Возрастные изменения показателей ли полного обмена у телок // Физиология продуктивных животных - решению Продовольственной программы СССР: Маг-лы Всес. конф.-Тарту, 1989.-Ч.1.-С.48-49.
2. Самбуров 11.11. ПрогестероновыП тест в оценке состояния яичников у коров // Болезни с.-х. живог. и меры борьбы с ними: Межвуз. сб.- Белгород, 1992.-С36-Ы.
3. Самбуров 11.11.. Б штоков И.Н., Богач ева р.Г. Изменение основных мета-болкгав крови в период становления функции размножения жвачнич животных // Регуляция физиолог. функций продукт, животных: Межвуз. сб.-М., 1993.-С.96-102.
4. Сам буров [!.!}., Бипоков И.П., Прокофьев М.И. Рекомендации по организации целенаправленного регулирования воспроизводительной ф>икш1И (трупного рогатою скотаК\рск, 1994.-27 с.
5. Самбуров ПЛ., Ьитюков ПЛ., Богачева Р.Г. Физиолога-биохимический статус черно-пестрых и голштииских коров // Повышение эффект, функкмопир. АПК: Мат-лы науч.-прает. коиф.-Кчрск, 1995.-С.58-60.
6. Самбуров Н.В., Бипоков 11.11. Некоторые особенности обмена липонро-тсниов и холсстерола у помесных телок // Повышение аффект, функнионир. АПК: Мат-лы науч.-нрзкт. конф.-Курск, 1995.-С.52-53.
7. Самбуров 11.11., Бипоков 11.11, Взаимосвязь линцаиых мета бол шов крови у голшпшизированных телок с их хозяйствен по. полезным и признаками //Актуальные проблемы биологии в животноводстве: Тез. докл. 2-Й межлуизр. конф.-Боровск, 1995.-C.88S9.
8. Сачбуров II.В. Уровень холестерола в крови н его связь с хозяйственно-полезными качествами помесного скота // Повышение продукт., воспронзвод, способи.. нгюфилакт. и лечение с.-х. живош.: Мат-лы науч.-и ра кт. ко иф.-Курск, 1997.-С.95-98
9. Самбуров II.В. Обмен липплов у голштишгзироваиных телок черио-нестрой породы // Повышение продукт., воспроизвел., способи., профи лакт. и лечение с.-х. живош.: Маг-лы нэуч.-практ. конф.-Курск, 1997.-С.98-102.
10. Сачбуров H.H., Булаюв A.A., Бвглевекая П.П. Коррекция им му пологи -ческого craiyca телят // Новые фарчлкол. средства в ветеринарии: Мат-лы 9-И меж гос. межвуз. науч.-практ. конф,-О16., 1997.-C.107-10S.
11. СачОуров П.В., Булатов A.A., Мине и ков H.A. Иммунобиологический статус не!елей после применения стимадепа // Новые фзпмакол. средства в кегери-царии: Мат-лы 9-й межгос. межвуз. науч.-пракг. коиф.-С11б„ 1997.-С124-125.
12. Самбуров U.U., Булатов A.A. Повышение иммунобиологической реактивности телгг через коров- матерей // Новые фарчакол. средства в ветеринарии: Мат-лы 10-й межгое. межвуз. науч-практ. конф.-СМб., 1998.-С.79-Ё0.
13. Самбуров Н.В, Белковый обмен и естественная рсзистапность у телок при имчунокоррекцин // Проблема межклеточ. обмена электролитов, бел ново- минер, питания и резистент. жигатн.: Мат-лы науч.-нракт. конф.-Курск, 1998.-С. 13-14.
14. Сачбуров Н.В. Иммунобиологические показатели естественной резистентности у голштинизированных телок // Проблема межклеточ. обмена элек-тролшов, бел ко во-минер, питания н резнстенг. животн.: Мат-лы науч.-нракт. конф.-Курск, 1998.-C.14-I5.
15. Самбуров Н.В., Прокофьев М.И. Нрогестагенная активность желтого тела при фор ч про ванин беременности у коров //Зоотехния,-1999,- №2.-С.26-28.
16. Сачбуров Н.В. Воспроизводительная способность черно-пестрых и юлштиннэированных коров //Зоотехния.-2000.- № 5.-С.27-28.
17. Самбуров Н.В. Особенности роста и развития помесных и черно-пестрых телок U Молочное и мясное скотоводство.-2000,- Üt 4.-С.30-31.
18. Самбуров Н.В. Иммунокорремшя естественной резистентности телок стимааеном // Вопросы обшей биологин в ветеринарии: Сб. науч. тр. МГАВ-МиБ,-М„ 2000.-C.2u 1-208.
19. Самбуров Н.В. Состояние метаболизма в организме бесплодных коров // Наука и образование -возрождению сельского хозяйства России в XXI веке: Маг-лы междунар. науч.-нракт. конф.-Брянск, 2ООО,-С.З51-353.
20. Самбуров Н.В. О формировании иммунобиологического статуса черно-пестрых телок голнпннской нопу.1я1ши// С.-х. биологня.-2000.- № 6.-С.95-99.
21. Самбуров Н.В. Контроль функции яичников и индукция половых циклов у коров после отела // Пути повыш. продукт., воспроизвел, способа профилакт. и ле--чения с.-х. живот. Маг-л и науч.-нракт. конф.- Курск, 2001.-Ч.1.-С.55-56.
22. Наг. 2166913 Россия, МПК' А61В 10/10, G01 N 33/50. Способ определения иммуноглобулинов в сыворотке молозива /Самбуров Н.В. Опубл. 20.05.01. Бюл. Si 14.
23. Самбуров Н.В, Метаболические процессы у коров в течение лактации // Пути ловыш. продукт., воспроизвел, способ., профилакт. и лечения с.-х. живот, Мат-лы науч.-практ. конф.- Курск, 2001.-Ч.2.-С.17-18.
24. Самбуров Н.В. Биотехническая стимуляция функции воспроизведения у коров//Пути новыш. продукт., воспроизвел. способ., профилакт. и лечения с.-х. живот. Мат-лы науч.-нракт, конф.- Курск, 2001.-Ч.2.-С.23-25.
25. Самбуров Н.В. Взаимосвязь между продуктивными качествами скота и уровнем метаболитов крови // Молочное и мясное скотоводство.-2001.- А» 5,26. Самбуров Н.В. Гуморальные факторы иммунитета у коров при смене
физиологического состояния // Улучшение продукт, качеств, профилакт. и лечение болезней с.-х. живот. Мат-лы науч.-практ. конф.-Курск, 2003.-C.33-35.
27. Сачбуров Н.В. Сочепшное применение иммунопронных и гоиадотронного препарата в целях улучшения онлолотворяемости коров // Новые фарчакол, ерелства в ветеринарии. Мэт-лы 15-й междунар. науч-нракг. конф.-СИб, 2003,-С.107-108.
28, Оценка иммунного статуса крупного рогатого скота на основе количественного определения сывороточных иммуноглобулинов и понуляний личфо-клных клеток / Самбуров Н.В., Стебловская С.Ю., Евглевская E.1I. н др.-Курск, 2003.-16 с.
фрриэт 60хВ4 1/16. Бумага in мно*нкл,них тллрзюв Печать на копироигьноч апгиоатс КГСХЛ.
-
Самбуров, Николай Васильевич
-
доктора биологических наук
-
Дубровицы, 2004
-
ВАК 03.00.13
- Совершенствование черно-пестрого скота Западной Сибири
- Воспроизводительная функция и продолжительность продуктивного использования помесей черно-пестрой породы с голштинской
- Физиологические механизмы совершенствования продуктивных качеств голштинизированного скота черно-пестрой породы в условиях Центрального Предкавказья
- Хозяйственно-полезные признаки молочного скота предгорной зоны Северного Кавказа в зависимости от генетических и паратипических факторов
- Продуктивные и хозяйственные особенности коров черно-пестрой породы при использовании голштинских быков-производителей
