Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние тиреоидных гормонов на активность ферментов пуринового и энергетического обмена при стрессе

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние тиреоидных гормонов на активность ферментов пуринового и энергетического обмена при стрессе"

им

V министерство здравоохранения " республики казахстан

семипалатинский государственный медицинским институт

На правах рукописи удк 612.018-015.1-44,-616.45-001.1/3

СУЛЕЙМЕНОВА Айнаш Елеуеизовна

ВЛИЯНИЕ ТИРЕОИДНЫХ ГОРМОНОВ

НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ ПУРИНОВОГО И ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА ПРИ СТРЕССЕ

03. 00. 13 - Физиология человека я животных

автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1

Семипалатинск - 1994

Работа выполнена в Семипалатинском государственном медицинском институте на кафедре биохимии.

НЙУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ:

доктор медицинских наук, профессор С.О. Тапбергенов

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор медицинских наук, профессор * В,И, Кравцов 'доктор биологических наук, профессор Н.К. Гайнанова

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ:

йлматинский государственный медицинский институт имени С,Д. йсфендиярова

Защита диссертации состоится ___"_________ 1994г. в __ час.

на заседании специализированного совета при

Семипалатинском государственном медицинском институте. 1.430019,-г. Семипалатинск, ул. нбая, 103)

Автореферат разослан м___"_______________ 1994 г,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Семипалатинского государственного медицинского института.

ученый секретарь специализированного Совета, кандидат биологических наук

Й.Р. Мынжанов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В течение последнего столетия структура заболеваемости и смертности в развитых странах прин-хишально изменилась. Инфекционные заболевания, за исключением некоторых вирусных болезней, отодвинулись на второй шган, а \тавное место заняли рак, шемическая болезнь сердца, гипертония, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, психические болезни, диабет и другие.

При всем разнообразии этих, так называемых, эндогенных :ли неинфекционных болезней в их этиологии и патогенезе имеются общие черты. Как свидетельствуют эпидемиологические и экспе-иментальные исследования, в возникновении всех этих заболева-лй важную, а иногда и решающую роль играет /чрезмерно интенсивен и длительная стресс-реакция, вызванная определенными факго-ами окружающей среды. Это означает, что изучение принципов рофилактики стрессорных повреждений составляет необходимый т'ап в решении ключевой проблемы современной медицины - поныше-ии резистентности здорового организма и профилактики основных еинфекционных заболеваний (Меерсон Ф.З., 1988).

Создание атомной промышленности, атомной энергетики, меди-анской и бытовой радиационной аппаратуры внесло в среду обита-ш непрерывно нарастающее количество искусственных радаоактив-и веществ, поэтому одним из "злободневных" стрессорных воз-зйствий на животный и человеческий организм сегодня является зздействие ионизирующей радиации.

Ранее проведенными исследованиями выявлены характерные зобенности влияния ионизирующего излучения на кроветворные

органы, некоторые железы внутренней секреции, состояние различных физиологических систем (Кендал И.Н., 1974). Накоплен достаточно обширный материал о влиянии ионизирующего излучения на различные виды обмена: жировой, углеводный, энергетический (Мороз Б.Б., Кендыш И.Н., 1975; Шкуматов Л.М., 1991; Орлова Л.Г 1991; Абрамян А.К., 1989), а также о нарушении гормональной регуляции этих процессов при радиационных поражениях (Докши-на Г.А., 1984; Мизина Т.Ю., 1991; Короткешч А.О., 1987).

Однако, остается малоизученным вопрос о возможности коррекции функциональной активности органов и тканей, равно как и сами.метаболические нарушения, в частности, нарушения энергетического и пуринового обмена.

Б настоящее время не вызывает сомнения важная роль адрено-тиреоидной системы, ее гормонов и медиаторов в обеспечении постоянства внутренней среды организма. Влияние на центральные и периферические отделы нервной системы, на эмоциональную деятельность и гормональную активность, усиление обменных процесс« - вот далеко не полная характеристика роли адрено-тиреоидной системы в целостном организме.

Исследование адрено-тиреоидной системы и ее гормонов приобретает наибольшую значимость в связи с ростом эмоциональных, физических и других нагрузок на человека в современном обществ! и возникновением ряда заболеваний,-в патогенезе которых лежит состояние перенапряжения организма, то есть "болезней адаптации" Многочисленные экспериментальные и клинические исследова ния убедительно показали непосредственное участие адрено-тирео идной системы, в эмоциях и эмоциональных нарушениях как у здоро вого человека, так и при "болезнях адаптации", в частности,

при неврозах и невротических состояниях.

Ке вызывает сомнения патогенетическая роль изменений активности адрено-тиреоидной системы, в которых, согласно концепции С.О. Талбергенсвй'' об адрено-тиреоидной системе (19ЬЗ) <Золь-шую роль играют"гормоны щитовидкой железы, нарушение метаболизма которых наблюдается при постстрессорных кейрогекккх состояниях и сопровождается развитием динамической энергетической недостаточности -.{Тапбергенов С.О., 1963). Установлено также, что различные неспе-цг.фкчёскке стрессовые нагрузи! выводят энергетический метаболизм ка Гранину физиологического уровне (Дынкик В.А., Селькова 3.2'«-; 1978), переводя его в газкоэнергезирован-ное состояние.

Б связи с С'Тигл, в настоящем исследовании ставится цель изучить механизмы участия ферментов трикового и энергетического обмена в формировании адаягашоннвх яропессев при нейроген-но1л к .радиашокном-'.стрессах и обосновать их керрекшгвз компонентами адрено-тиреоидной системы.

Цель исследования - изучить влияние тиреоидных гормонов ка активность ^оркектозг пурпневоге и энергетического обмена в органах и тканях животных при кейрогекногл и радиационном стрессах. ' '• ■

Задачи исследования:

1. Выяснить некоторые, механизмы участия ферментов пуриново-го и энергетического- обмена в защитных функциях организма при стрессернок воздействии

2. Сравнить механизмы участия ферментов пуринового и энергетического обмена в формировании адапташонных процессов при нейрогенном и радиационном"стрессах.

3. Изучить влияние тиреоидных гормонов на функциональную-активность органов и тканей яри стрессе.

4. Обосновать возможность использования тиреоидных гормо-

• нов для коррекции нарушений, вызванных нейрогенным и радиационным воздействием.

Научная новизна. Впервые изучено состояние ферментных систем, в частности, изменение активности ферментов энергетического и-пуринового обмена в лимфоцитах и гомогенате селезенки мы-" шей линии СБА при стрессорном воздействии.

Установлено, что в результате изменений активности ферментов обмена пуриновых нуклеотидов при нейрогенном стрессе в лимфоцитах селезенки происходит накопление аденозина, который, согласно литературным данным, оказывает угнетающее действие на их функции.

т

Радиационный стресс вызывал снижение активности 5 - нукяео-тидазы и аденозиндезаминазы и повышение активности л/а+, К4"-АТФ-азы и АМФ-дезаминазы на первые и третьи сутки после стрес-сорного воздействия.

Обнаружено повышение активности ферментов энергетического обмена в лшфоттах селезенки в ранний постстресссрный период ■при радиационном стрессе и во все сроки исследования - при нейрогенном.

Выявлено, что при нейрогенном стрессе з селезенке экспериментальных животных активность всех исследуемых ферментов пури-кового и энергетического обмена повышается на первые и вторые сутки после стрессорного воздействия.

Установлено корригирующее влияние тиреоидных гормонов на функциональную активность лимфоштов при стрессе.

■хДрактическая значимость. , ■

I. Предложен метод оценки иммунного статуса организма с помощыгопределения активности аденозиндезаминазы-.и 5^- нуклео-тидазьин. лимфоцитах селезенки яри радиационном стрессе, -»¿г 2«„-Рекомендован энзимный тест определения активности АМФ-дезаминазы для характеристики глубины повреждений в ранние сроки нейрогенного и ■•'радиационного воздействия..

• 3;,. Предложен1 ферментативный тест адаптированное™, .что позволяет оценивать приспособляемость организма к экстремальным воздействиям с помощью определения активности ферментов обмена дуриновых нуклеотидов'.

4. Тироксин в 'физиологических дозах может корригировать активность ферментов пуринового и энергетического обмена при стрессе, что позволяет рекомендовать его применение в ранний постстрессорный период при нейрогенном и в поздний - при радиационном, воздействии для усиления адаптационных механизмов.

Основные-положения, выносимые на защиту.

1. При нейрогенном стрессе вследствие изменения активности ферментов обмена дуриновых нуклеотидов угнетаются функции имму-нокомпетентных клеток.

2. Ферменты пуринового'и энергетического обмена, отражающие функциональную активность лимфоцитов, могут служить для оценки олмунного статуса при любом виде стресса. Изменения активности здеяозиндезаминазы и 5*- нуклеотидазы могут быть использованы <ак .показатели:состояния иммунного статуса организма -при радиа-шонном стрессе.

3. Тироксин в физиологических дозах может корригировать жтивность ферментов пуринового и энергетического обмена яри

стрессорных состояниях любого происхождения. . ,

4. Определение активности ферментов обмена луриковых нук-леотидов позволяет оценивать приспособляемость организма к экстремальным воздействиям. Предложен ферментативный тест адапти-рованности.

Апробация работы состоялась на заседании проблемной комиссии медико-биологического цикла Семипалатинского государственного медицинского института (протокол & 3 от 17 июня 1994 г.).

Основные положения работы доложены и обсуждеры на-Международной научной конференции "Экология. Радиация. Здоровье" (Семипалатинск, 1993); на заседании проблемной комиссии медико-биологического' цикла Семипалатинского медицинского института (протокол № 3 от 17 июня 1994 г.).

Пути реализации работы и внедрение. Оформлено рационализаторское предложение "Способ оценки иммунного статуса активность аденозиндезаминазы" № 1770 от 3.06.94 г. . , V

Работа является частью республиканской программы "Состоянк здоровья населения в регионах, прилегающих к Семипалатинскому • полигону", Госрегистрации СШ900066П7.

Самостоятельно автором выполнены следующие разделы: отбор исследуемого биологического материала, постановка и наладка всех методов исследования, статистическая обработка полученных результатов, обобщение и группировка показателей активности ^ ферментов пуринового и энергетического обмена. '

Публикации. По теме диссертации ¿публиковано 10 научных работ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на стрг ницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы,

описания,материалов и методов, собственных исследований, обсуждения идаводов, содержит 36 таблиц, II рисунков. Указатель ли-

V ( " •

тературы включает 235 источников (128 отечественных и 107 зарубежных работ).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛ И МЕТ 0,Ш ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальные исследования были проведены на 820 единиц мышей линии СБА весом 18-20 г (1ШК "Столбовая", Москва), содержащихся на обычном пищевом рационе вивария.

В работе радиационный стресс вызывали общим гамма-облучением кобальтовой пушкой "АГАТ-60" в дозе 6 Гр с мощностью дозы 0,6 Гр/мин при открытом коллиматоре и кожно-фокусном расстоянии 70 см на прямоугольных плексигласовых контейнерах и тканеэкви-валентной подстилке.

Нейрогенный стресс вызывали плаванием в воде при 36°С в течение 60 минут.

С целью изучения влияния компонентов адрено-тиреоидной системы на функциональную активность органов и тканей животным вводили I-тироксин ("Цепг-сс ", Венгрия) внутрибршинно в дозе 5,2.мкг/г массы тела животного в течение 6 дней до стрессорного воздействия.

Приготовление гомогенатов тканей органов подопытных животных. После декашташи животных их органы измельчали и помещали в охлажденный до 0°С раствор 0,25 М сахарозы в чашке Петри. После охлаждения ткани тщательно промывали в охлажденном 0,25 М растворе сахарозы до удаления следов крови. Затем тщательно измельченную и промытую ткань гомогенизировали на холоде в стек-

лянном гомогенизаторе Поттера с тефлоновым пестиком в 0,25 М сахарозе, добавленной из расчета 8 мл на I г, ткани. Бремя гомогенизации при вращении пестика 600 обр/мин для печени и селезенки - 25 секунд, а для мозга - 20 секунд. Гшогенаты тканей фильтровали через слой стерильной марли и центрифугировали 3000 обр/мин в течение 30 минут при температуре 0°С- +2°С для удаления обрывков ткани. В эксперименте использовали надосадоч-ную жидкость. Пробирки с гомогенатами находились во льду на всей протяжении исследования активности ферментов.

Выделение клеток из селезенки проводили инкубированием измельченной ткани средой 199 с феноловым красным с последующим процеживанием через капроновый фильтр и центрифугированием при 1500 обр/мин в течение 10 минут. Затем осадок промывался и центрифугировался дважды средой 199. Эритроциты удаляли в растворе 0,083$ Н^СИ с трилоном В I г/л. Подсчитывали лимфоциты в камере Горяева и доводили до конечной концентрации клеток в I мл среды 199. Лизис взвеси клеток проводили методом трехкратной оттайки-заморозки.

Активность ферментов обмена пуриновых нуклеотидов { К+- АТФ-азы, Б^-нуклеотидазы Сб^-НД), АМФ-дезаминазы, аденозин-дезаминазы (АДА) и энергетического обмена (общей АТФ-азы, сук-иинатдегидрогеназы (СДГ), питохромоксидазы (ЦХО) определяли по следующим методикам: определение активности //а+, К1"- АТФ-азы - методом Фиске-Суббороу (1925) в модификации Т.И. Толстухиной (1983), 5^-нуклеотидазы (5*-КД) - по методу Н. Диксона и А. Пур дома (1954) в модификации И.Д. Мансурова, Р.З. Стосмана (1973), аденозиндезаминазы (АДА) - по методу Н.$1гаи8 (1966), АМФ-деза миназы - В.З. Горкина и др. (1968) в модификации С.О. Тапберге-

нова (1962), общей АТФ-азы - методом .Фиске-Суббороу (1925) в модификации А.Е. Кучинского (1985), сукцинатдегидрогеназы (СДГ) - по методу Слейтер в модификации С.О. Тапбергенова (1971), питохромоксидазы (ЦХО) - по P.C. Кривченковой (1974).

Количественное определение белка проводили по методу О.Н. Лоури и соавт. (1951).

Активность ферментов исследовали в гомогенатах (головной мозг, печень, селезенка), лимфоцитах селезенки и в плазме крови для нейрогенного стресса через 3, 24, 48, 72 часа, для радиационного - через 3, 24, 72 часа и 30 суток после воздействия.

Активность ферментов вйражали'^для АТФ-аз в мкмолях неорга- -нического фосфора на мг белка в час, для 5^-нуклеотидазы в нмолях неорганического фосфора (Рн) на мг белка в час: для АМФ и аденозиндезаминаз - в нмолях аммиака на мг белка в час: для сукцинатдегидрогеназы - в нмолях восстановленного тетразолия на мг белка в час: для питохромоксидазы в условных единицах на.--мг белка в час.

Статистическую обработку проводили, используя коэффициент Стыодента (I ) при помощи Ж 61 (Кокунин В.А., 1975) и на IBM PC, используя статистические и графические пакеты программ: D tee ш 1-, Qi-aphaU ¿С , Stai^raph ХЬ, Z^mnpiU З./О ,

с.лай^.ч i.C, Stryb^ord / СС

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ СБСУВДЕНИЕ

Полученные результаты показали, что в лимфоцитах селезенки при нейрогенном стрессе угнетались функции лимфоцитов за счет накопления'аденозина, который, в свсю очередь накапливался в результате повышения активности 5^-нуклеотидазы и снижения

л - 12 -

активности.аденозин и АМФ-дезамиказ на 1-е и 2-е сутки стрес-1 ■ сорного воздействия.

При радиационном стрессе в лимфоцитах селезенки снижалась через 3 часа активность V а+, АТФ-азы до 0,79±0,16 мкмоль/ч на мг. белка (р ¿ 0,05) с последующим повышением через 24 и 72 часа (р <0,01 - р< 0,001). Аденозиндезашназная активность

Н».,К»-АТ»-«3. S'-НД

24 48 72 ЭОо

АДА

24 4« 72 ЗОо

AK*-f«]«<tUHiL]á

Рис. I. Изменение активности ферментов обмена пуриновых нуклео-тидов в лимфоиитах селезенки при нейрогенном и радиационном стрессах (1-нейрогенный стресс; 2-радиаиионный стресс; 3-контроль).

существенно угнеталась во все сроки исследования (р<0,05 -р <0,001) (рис. I).

Обнаружена взаимосвязь мевду снижением активности АДА и 5^-нуклеотидазы в лимфоцитах селезенки при радиационном воздействии и снижением иммунного статуса, полученного в аналогичных

'словиях A.A. Ярилиным (1982), что может служить достаточно ин-юрмативным тестом для определения иммунного статуса организма

помощью энзимологического теста. Активность ферментов энерге-ического обмена в лимфоштах селезенки повышалась при радиаци-нном стрессе на 1-е сутки, при нейрогенном - на 1-е и 2-е сутки трессорного воздействия.

3 2« 4«

2« 4«

з'-нд

Í—

430 300 130

24 46

АДА

3 24 4» 72 АМ*-д*з*м(1и*за

с. 2. Влияние тироксина на активность ферментов обмена пури-новых нуклеотидов в лимфоцитах селезенки при нейрогенном стрессе (1-стресс; 2-Т^+стресс; 3-контроль).

Введение тироксина при нейрогенном стрессе снижало актив-зть 5^-нуклеотидазы и повышало активность аденозин и АШ-деза-яаз, что ведет в совокупности к восстановлению уровня аденози-в клетке и, тем самым, вероятно, тироксин оказывал кормали-хций эффект на функции лимфоштов (рис. 2).

При радиационном стрессе введение тироксина снижало активность //а+, К*"- АТФ-азы и АМФ-дезаминазы и повышало активность 5*-нуклеотидазы. и аденозиндезаминазы, активность которых к 30 суткам нормализовалась. Активность-ферментов энергетического обмена, в частности, общей АТФ-азы "и ЦХО нормализовалась при введении гормона в лимфоцитах селезенки через 3-24 часа и 30 суток после стресс-воздействия;

В селезенке при радиационном воздействии активность всех исследуемых ферментов пуринового обмена снижалась во все сроки исследования.

Ферменты энергетического обмена в гомогенате селезенки на облучение в дозе 6 Гр реагировали разнонаправленно.

Так, активность общей АТФ-азы существенно повышалась в первые 3 часа (р < 0,05), СДГ-назная активность во все сроки исследования (р<0,01 - р< 0,0(3.), ЦХОная активность снижалась через 24 часа и 30 суток (р<0,05).

При нейрогенном стрессе в селезенке активность ферментов пуринового и энергетического обмена повышалась почти во все сро ки исследования, кроме 5*- НД, активность которой снижалась через 3 и 72 часа (р<0,05 - р<0,01).

Введение гормона при нейрогенном стрессе в селезенке вызывало снижение активности общей АТФ-азы и СДГ во все сроки исследования и нормализовало активность ЦХО на 1-е и 3-й сутки.

Тироксин при радиационном стрессе в селезенке животных вызывал активацию всех изучаемых ферментов энергетического и пуринового обмена. К 30-м суткам после радиационного воздействия активность ферментов пуринового обмена, кроме Уа+, К*- АТФ-азы нормализовалась (рис. 3).

В головном мозге' при радиационном стрессе повышалась активность .Уа+, К*- АТФ-азы во все исследованные сроки (р< 0,05 -р«с 0,001), активность 5*-нуклеотидазы снижалась к 30 суткам до 61,26^6,35 нмолъ/ч на мг белка (р< 0,0С1). АМФ-дезаминазная активность в гомогенате головного мозга при радиационном воздействии значительно снижалась через 24 часа до 53,13±3,90 мкмоль/ч

Рис. 3. Влияние тироксина на активность ферментов энергетического обмена в селезенке яивотных при радиационном стрессе (1-стресс; 2-Т^+стресс; З-контроль").

на мг белка (р <0,001). При изучении активности аденозиндезами-назы не наблюдалось отклонений от нормы'.

При радиационном стрессе в гомогенате головного мозга активность СДГ не изменялась на протяжении всего эксперимента, активность ЦХО снижалась в первые 3 и 24 часа (р < О, СИ - р<0,001), затем нормализовалась к 72 часам и к 30 суткам вновь снижалась (р .с 0,001).

При нейрогенном стрессе в гомогенате головного мозга животных повышалась активность К1"- АТФ-азы через 24-48 часов после воздействия (р^0,05 - р<0,001). По мнению авторов, активация К4"- АТФ-азы в ранний постстрессовый период может происходить вследствие разрыхления липидного микроокрукения

белка при появлении там полярных продуктов ПОЯ (прежде всего гидроперекисей) (Сазонтова Т.Г., 1984). Активность 5*- нуклео-тидазы повышалась в ранний постстрессорный период (р< 0,001), активность АМФ-дезаминазы и аденозиндезаминазы снижалась через 3 и 24 часа и в последующие сроки исследования повышалась (рис. 4).

■ •♦,К*-АТ»-«з. З'-НД

Э 24 48 72 ЭОо

Рис. 4. Изменение активности ферментов обмена пуриновых нуклео-тидов в головном мозге при нейрогенном и радиационном стрессах (1-нейрогенный стресс; 2-радиашонный стресс; 3-контроль).

При нейрогенном стрессе активность ферментов энергетического обмена снижалась в головном мозге и печена, кроме СДГ. В печени СДГ активировалась во все сроки исследования (р <0,001). По мнению И.В. Виноградова и соавт. (1967), прирост активности СДГ в гомогенате печени при стрессе обусловлен не индукцией

синтеза, а вследствие вытеснения сукпинатом ингибитора из пред-1 шествующей формы неактивного фермента.

В печени мышей при нейрогенном воздействии активность ферментов обмена дуриновых нуклеотидов угнеталась, кроме Va+, К1"-АТФ-азы и Б*- нуклеотидазы, в изменении активности которых не выявлено отклонений от нормы, что, видимо, является особенностью обмена ферментов в этой ткани.

При радиашонном стрессе в гомогенате печени активность всех исследуемых ферментов пуринового обмена повышалась.

Введение тироксина в головном мозге и печени нормализовало активность всех исследуемых ферментов через 30 суток после радиационного воздействия. При нейрогенном стрессе введение гормона нормализовало активность Nа+, КГ1"- АТФ-азы на 1-е сутки в головном мозге и активность обеих дезаминаз на 1-е и 2-е сутки в печени.

Тироксин в головном мозге и печени при радиационном стрессе нормализовал активность всех исследуемых ферментов энергетического обмена к 30 суткам, при нейрогенном стрессе ферменты энергетического обмена активировались во все сроки исследования, кроме 1Д0, активность которой все еще оставалась сниженной.

При изучении активности ферментов пуринового обмена в плазме крови при радиационном воздействии обнаружено снижение активности /Va+, К4"- АТФ-азы и -нуклеотидазы и незначительное повышение активности АМФ-дезаминазы.

При нейрогенном стрессе в плазме крови активность Уа+, К4"-АТФ-азы снижалась через 3 часа (р^О, 05), активность аденозиндезаминазы повышалась до 3,61±0,49 нмоль/ч на мг белка (p-s. 0,001) и в последующие 72 часа активность обоих ферментов нормализова-

лась. Активность -нуклеотидазы и АМФ-дезаминазы повышалась во все сроки исследования (р^О,05 - р< 0,001)...

При введении тироксина в плазме крови при радиационном 5 стрессе активность аденозин и АМФ-дезаминаэ к 30 суткам нормализовалась, при нейрогенном стрессе активность //а+, К?"- АТФ-азы и нуклеотидазы повышалась, активность обеих дезаминаз сни-

3Г

I

3 24 4В 72 И»*.К»-АТ»-«3»

I '

К

3 24 4В 72

АЛА

3 24 48 72

Рис. 5. Влияние тироксина на активность ферментов обмена пури-новых нуклеотидов в плазме крови животных при нейрогенном стрессе (1-стресс; 2-Т^+стресс ;з-контроль).

жалась во все сроки исследования, что в совокупности вызывало накопление аденозина (рис. 5).

Таким образом, тироксин в физиологических дозах нормализовал в поздний пострадиационный период, что в нашем эксперименте составляет 30 суток, активность 5*- нуклеотидазы, аденозиндеза-

1.3

минаэн, ЦХО и АМф-деЗиминазы в лимфоцитах селезенки и печени, /Va+, К4"- АТФ-азы и дезашназ в головном мозге, АМФ-дезаминазы и 5*- нуклеотидазы в селезенке и в плазме крови, общей АТФ-азы, СДГ и ЦХО в печени.

При нейрогенном стрессе тироксин нормализовал в.селезенке активность 5*- нуклеотидазы, дезаминаз, ЦХО и СДГ на 3 сутки, общей АТФ-азы на 1-е и 2-е сутки в лимфоцитах селезенки, общей АТФ-азы и ЦХО на 1-е и 2-е сутки стрессорного воздействия.

На основе полученных результатов предложен показатель адап-тированности, отражающий приспособляемость организма к экстремальным воздействиям с помощь® определения активности ферментов обмена пуриновых нуклеотидов.

Активность -нуклеотидазы/Активность аденозиндезаминазы

Таким образом, если же отношение активности 5^-нуклеотида-зы в процентах от нормы к активности аденозиндезаминазы больше единицы в лимфоцитах и меньше единицы в плазме крови, то можно говорить о включении адаптационно-приспособительных механизмов организма, то есть о переходе организма в адаптированное состояние .

Сделанная наш попытка изучить некоторые стороны пуринового и энергетического обмена в лимфоште отражает функциональную . активность лимфоцитов и дает возможность определения биохимических основ иммунных реакций и выявления хсорреляционных связей мезду обменом веществ в лимфоште и его функциями при экстре-' мальных воздействиях.

Полученные результаты показывают, что тироксин корригирует функциональную активность органов и тканей при стрессе и, тем самым, может служить обоснованием для терапевтического введения

тиреовдных гормонов при нейрогенном и радиационном воздействии, особенно в поздние сроки стрессорного эффекта.

вывода

1. Активность ферментов энергетического обмена (общая АТФ-аза, СДГ, ЦХО) повышается при нейрогенном стрессе в печени, в гомогенате и лимфоцитах селезенки, снижается в головном мозге.

2. При нейрогенном стрессе активность 5*- нуклеотидазы и л/а+, К*"- АТФ-азы повышается в лимфоцитах селезенки, головном

мозге и не изменяется в печени, активность аденозин и АМФ-деза-миназ повышается в плазме крови и селезенке, снижается в печени и лимфоцитах селезенки, изменения активности ферментов в головном мозге носят волнообразный характер.

При нейрогенном стрессе вследствие изменения активности ферментов обмена пуриновых нуклеотидов угнетаются функции имму-нокомпетентных клеток.

3. При радиационном стрессе активность общей АТФ-азы повышается во" всех исследуемых органах, активность СДГ повышается

в селезенке и печени, не изменяется в головном мозге и лимфоцитах селезенки, активность ЦХО повышается в печени и лимфоцитах селезенки, снижается в селезенке и головном мозге.

4. Активность 5^- нуклеотидазы и аденозиндезаминазы при радиационном стрессе снижается, активность АМФ-дезаминазы повышается в лимфоцитах селезенки и в плазме крови, активность Л7а+, К4- АТФ-азы повышается в лимфоцитах селезенки и головном мозге, изменения активности фермента в плазме крови носят волнообразный характер. Активность всех исследуемых ферментов пуринового

обмена повышается в печени и снижается в селезенке.

5. В поздний лострадиашонный период угнетается активность АМФ-дезаминазы и СДГ в печени и лимфоцитах селезенки, аденозин-дезаминазы в селезенке и печени, ЦХО в селезенке, головном мозге и печени, //а+, К*"- АТФ-азы в плазме крови и 5*- нуклеотида-зы во всех исследуемых органах.

6. Ферменты пуринового и энергетического обмена, отражающие функциональную активность лимфоцитов, могут служить для оценки иммунного статуса при любом виде стресса. Изменения активности аденозицдезаминазы и 5*- нуклеотидазы могут быть использованы как показатели состояния иммунного статуса организма при радиационном стрессе.

7. Тироксин в физиологических дозах может корригировать активность ферментов пуринового и энергетического обмена при стрессорных состояниях любого происхождения.

8. Определение активности ферментов обмена, пуриновых нук-леотидов позволяет оценивать приспособляемость организма к экстремальным воздействиям. Предложен ферментативный тест адапти-рованности.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. С.О. Тапбергенов, А.Е. Сулейменова. Стресс и активность ферментов дыхательной цепи в иммунокомпетентных клетках мышей линии СБА.//Материалы Международной научной конференции "Экология. Радиация. Здоровье".- Семипалатинск, 1993.- С. 112113.

2. С.О. Тапбергенов, А.Е. Сулейменова. Активность ферментов

цикла пуриновых нуклеотщсов.в.шмунокомлетентных клетках при стрессе.//Там же, С. 113. • ' 'Л

3. А.Е. Сулейменова. Активность адёнозиндезаминазы в;печениопри радиационном стрессе .//Аннотированная программа юбилейной'^г конференции молодых-ученых,...посвященной 40-летикг->ийститута.-Семипалатинск, 1993,- С. 46.

4. А.Е. Сулейменова. Изменение активности 5^-нукпеотидазы-в головном мозге и печени у облученных мышей линии СБА.//Там

\ лее.- С. 47. .

5. А.Е. Сулейменова, Св0. Тапбергенов. Влияние облучения на изменение активности /i/a+, К*- АТФ-азы в различных по радио- ' чувствительности.органах мышей при введении L-тироксина.// Сборник научных работ "Медико-бйологические последствия-

„^ядерных испытаний на Семипалатинском полигоне".- Семипалатинск, 1994.-В. 5.«? С. II0-II6. i

6. А.Е. Сулейменова, С.О. Тапбергенов. Тире оидная:-.регуляция 5^"- нуклеотидазной активности иглмунокомпетентньй!.тканей и клеток у облученных мышей линии СБА .//Там жеу- -С .Л 16-122.

7. А.Е. Сулейменова, С.О. Тапбергенов, 'Тиреоидные гормоны и изменение активности сукшнатдегидрогеназы и питохромоксидазы в иммуноцитах облученных мышей линии СБА.//Там же.- С. 122129.

В. А.Е. Сулейменова. Возможность оценки иммунного ,статуса с помощью определения активности аденозиндезаминазьг в:иммуноком-петентных клетках мышей линии СВА.//Сборник научных: работ< Семипалатинск, 1994,- Т. -С.

9. А.Е. Сулейменова. Тиреоидная регуляция активности ферментов энергетического обмена в головном мозге % печени при нейро-

генном стрессе.//Там же.- С.

0. А.Е. Сулейменова. Экзогенный тироксин и активность ферментов обмена пуриновых нуклеотидов и л/а+, 1С1"- АТФ-азы в печени при радиационном стрессе.//Там же.- С.

Список рацпредложений

I. А.Е. Сулейменова, С.О. Тапбергенов. Способ оценки иммунного статуса активностью аденозивдезаминазы. Удостоверение № 1770 от 03.06.94 г.

Сулейменова Айнаш Елеустз крэк

Тиреоидт1 'гормондардыц пуринд1 жане энергетика лук; алма-су фешенттершщ активтхл1Г1не цатты эсер кезхндег1 ь'к;-палк

ТУЖЫРШ

Аталган жушста нейрогенд1К жене радиациалъч*; к^тты есер ке-зхндег1 СБА жтаесI тышк;андарынь'Ц бас миь!, баукр,кок бауь'р гомо-генаттарь'ндагь1 жене лимфоцит,кр.н плаэмаснндагь' пуринд! алмасу /Л^К^АТ^-аза: 5-нуклеотидаза: аденозиндезаминаза: АМ?-дезамина-за/ жене энергетика лкн; алмасу /жалпы АТЯ-аза: су кцинатдеги дроге-наза: цитохромокс!'даза/ ферменттергащ активт1лхгтне титюксиннш кк;паль' зепттелген.

Сонь'мен.жумь'стагк нэтижелер.зеоттелхп оть'пган путзинд1 лене эн-етэгетикадак; алмасукнкц йермеиттерг лимЬоциттелд^ кь'Этастттк белсенд1Л1Г1н агкп керсете алать'ндьть'н делелдеп, бул ферменттеп-дг.;, стганузмн щ иммундхк жауабын багалау уппн крлдакуга бола-тгндкгкн кет)сетед1. Ал тироксинд1 лимфоциттер жэне баск;а да оп— гандардкн крзшетттк белсендтл1гга радиациалкц жэне неирогендш к^гтть! эсртэ кезхнде щлпкна келт трупа ретшде крдцануга боладк.

. Suleimenova Ainash Bleusizovna

The Influence of Thyroid Hormones on Activity of Enzymes of Purine and Snergetic Exchange

in Stress

SUMMARY

In this work we studied the influence of thyroxine on the activity of enzymes of purine $ Na* .K^-ATP-ase; 5-nucleotidase; adenosine deaminase; AKF-deaminase ) ar.d energetic exchange ( cosaon ATP-ase ; succinate i dehydrogenase ; cytochron oxidase ) in homngenate of the brain , liver , spleen , in lymphocytes and in plasna of mice an the line of 3BA in neurogenic and radiation stresses.

Ihys , obtained findings show that studied enzymes of pnrine and energetic exchange demonstrate the functional activity of lymphocytes and can be used for estimation of immune status in stressor's effect , and thyroxine has correcting effect on the functional activity of immune responsible organs and tissues in stressor's effect of neurodenic and radiation origin.

ECfl OyC r.CeM-cra 3aKa3 № oW^Tupaac 3K3. I994r.