Влияние тимофера на биохимические показатели организма животных при некоторых патологических состояниях

Зубайдов, Тохир Убайдович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние тимофера на биохимические показатели организма животных при некоторых патологических состояниях
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние тимофера на биохимические показатели организма животных при некоторых патологических состояниях"

На правах рукописи

ЗУБАЙДОВ ТОХИР УБАЙДОВИЧ

I [

ВЛИЯНИЕ ТИМОФЕРА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ ПРИ НЕКОТОРЫХ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ

Специальность 03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Душанбе - 2004

Работа выполнена в лаборатории фармакологии Института химии им. В.И.Никитина АН Республики Таджикистан, ООО «Занд» и Таджикском научно-исследовательском ветеринарном институте.

Научные руководители:

академик АН РТ, доктор медицинских наук, профессор

кандидат химических наук

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Халиков Ширинбек Халикович

кандидат биологических

наук Гиёсов Асомуддин Шамсуддинович

Ведущая организация - Институт гастроэнтерологии

Академии наук Республики Таджикистан.

Защита состоится «22» декабря 2004 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета К 737.004.01 при Таджикском государственном национальном университете (734025, г.Душанбе, пр.Рудаки, 17).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Таджикского государственного национального университета.

Автореферат разослан« » _ 2004 г.

ХАЙДАРОВ Карим Хайдарович

ШАХМАТОВ Александр Николаевич

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Х.Ю.Юлдашев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Современные исследования фундаментальной и клинической иммунологии показали, что иммунная система человека функционирует в тесной связи с эндокринной и вегетативной нервной системами, с окружающими органами и тканями (Малашенкова И.К., 2002). При нарушении функционирования иммунной системы страдают различные внутренние органы и системы и, наоборот, расстройства или патология в нервной, эндокринной и других системах могут привести к нарушению функционального состояния иммунной системы. Это еще раз свидетельствует о целостности живой системы и высокой регулятор-ности жизненно важных функций на уровне различных звеньев метаболизма. В связи с этим изучение биохимических процессов, происходящих при коррекции нарушенной деятельности иммунной системы является одной из важнейших задач современной биохимии и медицины.

При изучении биологических свойств новых лекарственных препаратов большое значение имеет познание механизмов биохимических реакций, происходящих в организме при введении таких препаратов (Бе-седнова H.H., 1999). Регулягорные пептиды иммунной системы способны влиять на функциональные параметры соматосенсорных клеток, и наоборот. Поэтому различные патологические процессы одновременно могут обуславливать расстройства всех трех систем. В то же время коррекция нарушений одной из них, например иммунной, влечет за собой изменения организмеяного характера, что выражается в изменении эндокринного статуса, функционирования нервной системы, отдельных звеньев метаболических путей и т.д., которые можно определить наблюдая за биохимическими показателями организма. Поскольку при разработке иммунокор-ригирующих препаратов в первую очередь велись наблюдения за показателями иммунологического статуса организма, изменения биохимических показателей остались практически не изученными. В связи с этим изучение динамики изменений биохимических показателей состояния организма при применении иммунотропных средств является актуальным и кроме фундаментального значения, заключающегося в изучении взаимосвязи иммунной, нервной и эндокринной систем имеет и непосредственное прикладное значение.

В Республике Таджикистан были разработаны новые иммуномо-дулирующие препараты тимогар и тимофер, представляющие собой, соответственно, водный раствор дипептида изолейцил-триптофан, обладающего активностью тимусного гормона тимозина о.\ и биокоординационное соединение дипептида изолейцил-триптофан с ионом железа (П) и показана их высокая иммуностимулирующая активность при совместном применении с вакцинирующими препаратами и положительное влияние

2004-4 29801

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА , С.Петербург 200уРК

на эффективность лечения некоторых заболеваний животных. Однако остались практически неизученными биохимические аспекты действия этих препаратов, изучение которых позволит выявить механизм их действия и более оперативно оценивать эффективность их применения в практической деятельности.

В связи с вышеизложенным изучение влияния тимофера и тимога-ра на биохимические процессы при патологических состояниях организма является актуальным и имеет не только теоретическое, но и практическое значение.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось изучение биохимических аспектов действия тимофера при наиболее распространенных патологических состояниях животных.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- изучить влияние температуры на токсические свойства и специфическую иммуностимулирующую активность тимофера;

- изучить влияние тимофера на эритро- и лейкопоэз, содержание гемоглобина и сывороточного железа при железодефицитной анемии;

- изучить влияние тимофера на биохимические показатели гемопо-эза и факторы неспецифической резистентности организма животных при бронхопневмонии;

- изучить влияние тимогара в сравнении с тимогеном на биохимические показатели организма крупного рогатого скота при тейлериозе (содержание общего белка, белковых фракций сыворотки крови, содержание гемоглобина, содержание лейкоцитов и эритроцитов);

- изучить влияние тимофера на биохимические показатели (содержание общего белка, белковых фракций сыворотки крови и сывороточного железа) крови животных, изменяющиеся при анемичных состояниях;

Научная новизна. Впервые показано, что выдерживание тимофера, являющегося биокоординационным соединением низкомолекулярного пептида, обладающего активностью тимусного гормона и иона железа (II) при 35° не оказывает существенного влияния на стабильность препарата и не снижает его иммуностимулирующую активность. Впервые показано, что: при железодефицитной анемии тимофер способствует нормализации процесса кроветворения, выражающейся в увеличении количества эритроцитов, гемоглобина и сывороточного железа; применение тимофера при бронхопневмонии способствует нормализации содержания креатинина, увеличению бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови; применение иммуностимулирующих препаратов тимогара и тимогена при лечении тейлсриоза крупного рогатого скота приводит к нормализации биохимических показателей крови, свидетельствующих о

стимуляции процесса эритропоэза, выражающейся в увеличении количества эритроцитов и гемоглобина; применение тимофера способствует нормализации содержания (3- и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови, что свидетельствует о нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки

Практическая значимость. Полученные результаты позволили установить срок хранения тимофера и рекомендовать его для применеиия в ветеринарной практике при лечении железодефицитной анемии, анемичных состояний, бронхопневмонии и тейлсриозе крупного рогатого скота.

Публикации. По материалам работы опубликовано 6 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, обсуждения и результатов, заключения, выводов и списка литературы, включающего 195 источников. 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Содержание общего белка сыворотки крови определяли спектрофо-тометрическим методом по биуретовой реакции, определение белковых фракций, билирубина, креатинина в сыворотке крови проводили по общепринятым методикам, определение железа проводили по реакции с р-фенантролином спектрофотометрическим методом, определение гемоглобина проводили цианметгемоглобиновым методом. Определение содержания в крови лейкоцитов и эритроцитов проводили на автоматическом счетчике Рюовсак.

Токсические свойства тимофера изучали как на лабораторных (белые мыши, кролики), так и на сельскохозяйственных животных (овцы, телята) в соответствии с Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве, утвержденными Министерством здравоохранения СССР, ВАСХНИЛ и ГУВ Госагропрома СССР в 1987 году.

Изучение терапевтической эффективности тимофера при лечении железодефицитной анемии

Исследование проводили на 12 головах молодняка крупного рогатого скота с ярко выраженными клиническими признаками железодефицитной анемии, которых отбирали в животноводческих хозяйствах республики. По способу лечения животные были разделены на 3 группы. Животных первой группы лечили только тимофером, который вводили в дозе 0,05 мл/кг внутримышечно один раз в день в течение 10 дней. Животным второй группы с введением препарата проводили традиционное лечение (улучшали качественный и количественный состав рациона, вводили биологические добавки в виде различных премиксов, витаминов,

препаратов железа), животных третьей группы лечили только традиционными средствами. До опыта и в процессе лечения в крови животных определяли цветной показатель, содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и железа в сыворотке крови. О степени выздоровления животных судили как по клиническим признакам, так и по данным исследования крови.

Изучение влияния тимофера на биохимические показатели крови при анемии.

Для опытов был выбран молодняк крупного рогатого скота, находящийся в конце зимовки в ослабленном состоянии. До начала опыта в крови животных определяли содержание сывороточного железа, общего белка и белковых фракций сыворотки крови. Тимофер опытным животным вводили в виде 0,04%-ного водного раствора в дозе 100 мкг на 100 кг живого веса однократно внутримышечно. Повторно кровь на исследование брали через 7 дней.

Изучение влияния тимофера на биохимические показатели крови при бронхопневмонии.

Для опыта было отобрано 20 голов крупного рогатого скота, больного бронхопневмонией, которые были разделены на 2 группы. В крови у животных определяли содержание лейкоцитов, эритроцитов, билирубина, креатинина, гемоглобина, а также бактерицидную и лизоцим-нуго активность сыворотки крови.

Больных животных лечили традиционными препаратами - изо-ниазидом и окситетрациклином, животным второй группы дополнительно внутримышечно вводили тимофер в дозе 400 мкг на 100 кг живого веса больного животного. Окончание лечения определяли по клиническим признакам.

Изучение влияния тимогена и тимогара на биохимические показатели крови при тейлериозе

Опыт был проведен на 12 больных тейлериозом бычках и телках, разбитых на 3 группы по 4 головы в каждой. Животных первой группы лечили примахином и тимогаром, второй - примахином и тимогеном, третьей (контроль) - только примахином. Тимоген и тимогар применяли в виде 0,01%-ного водного раствора в дозе 5-6 мл на одно животное однократно подкожно. Примахин применяли из расчета 1,0-1,5 г на 100 кг массы больного животного внутрь ежедневно до выздоровления животного. У всех животных ежедневно проводили клиническое и гематологическое исследования. При клиническом исследовании учитывали общее состояние, жвачку, аппетит, перистальтику преджелудков, температуру тела, частоту дыхания и пульса, при гематологическом — количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, общего белка и белковых фрак-

ций сыворотки крови. Наблюдение за животными вели до их выздоровления.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Влияние внешних факторов на специфическую активность тимофера.

В связи с вышеизложенным, нашей первой задачей являлось изучение влияния температуры на токсические свойства и специфическую активность тимофера.

Поскольку тимофер является координационным соединением дипептида изолейцил-триптофан с ионом Бе + в его составе возможно протекание следующих нежелательных процессов:

1. окисление индольной группы триптофана,

2. окисление иона Ре2+ в ион Ре3+,

3. распад биокоординационного соединения на дипептид изолейцил-триптофан и ион Ре2+.

Протекание процесса окисления индольной группы триптофана можно обнаружить по изменению УФ-спектра препарата. Ион железа (II) можно обнаружить по реакции с феррицианидом калия Кз|Тс(СК)й]; окисленную форму иона — ион Бе можно обнаружить по появлению красного окрашивания при добавлении к препарату роданида аммония.

Для проведения количественных исследований было определено местоположение максимумов поглощения окрашенных соединений, образованных ионом Те2+ с гексацианоферратом калия и иона Ре3+ с роданидом аммония. В первом случае максимум поглощения наблюдается при длине волны 692±2 нм, во втором - при 455±2 нм (рис. 1).

В свежеприготовленном препарате ион Бе2+ полностью входил в состав биокоординационного соединения и не был окислен до иона

Ре3+,

о чем свидетельствовало отсутствие максимумов поглощения при 692±2 нм и 455+2 нм после добавления к препарату аналитических реагентов (рис.1).

Для изучения влияния температуры на токсические свойства и специфическую активность препарата его образцы хранили при 4°С и 35°С в течение 2 лет и в течение 10 дней при 80°С. Каждые три месяца проводили качественные пробы препарата на присутствие ионов Ре2+ и Ре3+, спектрофотометрически определяли концентрацию

Г еС 1з

Ре + N Н ,вС N

\ К е(С N )<|

Тнмофер + К э|К е(С N Ы

Г е" + К з|Р е(С N ).|

340 3,0 440 4,0 540 590 440 650 Д,1«и> Щи» ни

Рис. 1 .Спектры реагентов, используемых при изучении влияния температуры на физико-химические параметры тимофера и смеси свежеприготовленного тимофера с аналитическими реагентами

•Г » <1

Таблица 1.

Результаты изучения влияния температуры на количественные показатели тимофера.

Время, мес. Концентрация препарата, %• 10~2 Концентрация Бе^ в препарате, %-Ю"2 В % к исходному при 35 °С Концентрация Ре3+ в препарате, %-Ю"2 В % к исходному при 35°С Концентрация дипептида, %-Ю" 2 Снижение в % к исходному при 35°С

4°С 35°С 4°С 35°С 4°С 35°С 4°С 35°С

0 4,26 4,26 0 0 0 0 0 0 3,62 3,62 0

3 4,26 4,26 0 0 0 0 0 0 3,62 3,62 0

6 4,26 4,26 0 0 0 0 0 0 3,62 3,62 0

9 4,26 4,25 0 0 0 0 0,001 0,13 3,62 3,61 0,28

12 4,25 4,24 0 0,001 0,13 0 0,002 0,27 3,61 1 3.« 0,28

15 4,25 4,22 0,001 0,001 0,13 0,001 0,003 0,4 3,61 3,60 0,55

18 4,25 4,21 0,001 0,002 0,27 0,001 0,004 0,53 3,61 3,59 0,83

21 4,24 4,19 0,001 0,002 0.27 0,002 0,005 0,67 3,60 3,59 0.83

24 4,24 4,15 0,001 0,003 0,5 0,002 0,007 0,94 3,60 3,58 1,1

препарата и содержание в нем дипептида изолейцил-триптофан. При положительных качественных реакциях определяли содержание ионов Ре2+ и в препарате по заранее построенным калибровочным графикам.

Полученные результаты приведены в таблице 1.Как видно из полученных результатов, после хранения в течение 2 лет при 35°С суммарное снижение концентрации препарата за этот период при хранении при 35°С составило 2,54% от его исходного количества. Характер УФ-спектра препарата, хранившегося при 35°С не отличался от характера спектра дипептида изолейцил-триптофан, что свидетельствовало о стабильности дипептида, входящего в состав препарата (рис.2). В препарате, хранившемся при 80°С произошло разрушение остатка триптофана, о чем свидетельствует отсутствие на его УФ-спектре максимума поглощения при 278 нм, характерного для дипептида изолейцил-триптофан.

1,9 -1 в

1,0 н 1,7 -

1 ,6 -

1 ,5 -

1,4 -

и ё 1,3 -

§ 1 ,2

г с 1 .1

я 1 -

к г 0,9 -

т 0,8 1

О 0,7 ,

0,6 -

0,5 -

0,4 -

0,3

0,2 -

0,1 -

0 -

220 230 240 250 260 270 280 290 300 310

320 330 340 350 Длина волны, нм

Рис.2. УФ-спектры дипептида изолейцил-триптофан и тимофера после хранения при температурах 35°С и 80°С: 1 - дипептид изолейцил-триптофан, 2 - тимофер после хранения при 35°С, 3 - тимофер после хранения при 80°С.

Подобное снижение концентрации препарата находится в пределах, допускаемых Государственной фармакопеей для препаратов такой концентрации. Однако в данном случае необходимо изучить токсические свойства и специфическую активность препарата, так как в научной лите-

ратуре не имеется данных о токсических свойствах не только окисленных форм дипептида изолейцил-триптофан, но и триптофансодержащих пептидов и самого триптофана. Необходимость изучения специфической активности препарата связана с тем, что в случае дипептида не исключена возможность изменения биологически активной конформации пептида, что может привести к полной потере биологической активности, но при этом все физико-химические параметры могут остаться неизменными.

Схема постановки опытов по изучению токсических свойств ти-мофера и полученные результаты приведены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2.

Схема постановки опыта и результаты изучения острой токсич-

ности тимофера

Живот- Группа Кол-во Препарат Кол-во Наличие Пало, Выжи-

ные раз. доз интоксикации гол ло, гол

Белые 1 10 Тимофер 1500 Отс. 0 10

мыши 2 10 —//— 5000 Отс. 0 10

3 10 _„//_- 10000 Отс. 0 10

4 10 Физ.р-р 50 Отс. 0 10

Кролики 1 4 Тимофер 500 Отс. 0 4

2 4 1000 Отс. 0 4

3 4 _//_ 1000 Отс 0 4

4 4 Физ.р-р 20 Отс. 0 4

Овцы 1 4 Тимофер 500 Отс. 0 4

2 4 1000 Отс. 0 4

3 4 1500 Отс. 0 4

4 4 Физ.р-р 15 Отс. 0 4

Телята 1 4 Тимофер 500 Отс. 0 4

2 4 _//_ 1000 Отс. 0 4

3 4 1500 Ore. 0 4

4 4 Физ.р-р 15 Отс. 0 4

Таблица 3.

Схема постановки опыта и результаты изучения хронической

Животные Группа Кол-во Препарат Кол-во раз. доз Наличие интоксикации Пало, гол Выжило, гол

Белые 1 10 Тимофер 500 Отс. 0 10

мыши 2 10 1500 Ore. 0 10

3 10 2500 Отс. 0 10

4 10 Физ.р-р 15 Отс. 0 10

Кролики 1 4 Тимофер 500 Отс. 0 4

2 4 ...//— 700 Отс. 0 4

3 4 _//— 1000 Отс. 0 4

4 4 Физ.р-р 10 Отс. 0 4

Результаты изучения токсических свойств тимофера после 2 лет хранения при 35°С показали, что снижение его концентрации на 2,54%, происшедшее в процессе хранения за счет разложения координационного соединения, окисления индольной группы остатка триптофана и иона Бе2+ в ион Ре3+ не привело к возникновению у препарата токсических свойств.

Специфическую иммуностимулирующую активность тимофера проверяли в сравнении со свежеприготовленным препаратом на 15 телятах 5-6-месячного возраста, иммунизированных противотейлериозной вакциной в дозе 1 мл на голову. Через 3-5 дней после начала поствакцинальной реакции на введение вакцины (через 15-17 дней после иммунизации) 5 иммунизированным животным вводили свежеприготовленный препарат и 5 животным вводили препарат, хранившийся в течение 2 лет при 35°С в дозе 1 мл на 100 кг живого веса животного. Контролем служили 5 иммунизированных телят, которым тимофер не вводили. Наличие и уровень противотейлерийных антител определяли реакцией длительного связывания комплемента (РДСК) и иммуноферментным анализом (ИФА) через 35 дней после иммунизации. Полученные результаты приведены в таблице 4.

Таблица 4.

Результаты изучения специфической активности тимофера

Вводимый препарат Титр противотейлерийных антител

РДСК ИФА

Свежеприготовленный 1:5-1:20 1:200-1:1600

Препарат после хранения 1:5-1:20 1:200-1:1600

Контроль 1:5-1:10 1:50-1:800

Из полученных результатов видно, что хранение препарата при 35°С в течение 2 лет не оказало существенного влияния на его специфическую активность.

Таким образом, полученные результаты показывают, что повышение температуры до 35°С не оказывает существенного влияния на физико-химические параметры и иммуностимулирующую активность тимофера, а также не приводит к возникновению у препарата токсических свойств.

3.2. Применение тимофера при лечении железодефицитной анемии.

Железодефицитные состояния являются одними из широко распространенных заболеваний (Козинец Г.И. и др., 2003; Кудрин A.B. и др., 2000)

Имеющиеся в научной литературе данные о связи между содержанием железа в крови и клетках, трансферрина и нормальным функционированием клеток иммунной системы, а также о том, что железодефицитные состояния ведут к нарушению Т-звена иммунной системы, приводящих к повышению чувствительности к различным вирусным инфекциям (Симонян Г.А., Хисамутдинов A.B., 1995; Djeha А. et al., 1995; Ross J., 1995), позволили нам предположить, что применение тимофера, содержащего как дипептид, обладающий иммуномодулирующим действием, так и железо, будет оказывать при железодефицитной анемии ярко выраженное положшельное влияние на организм.

Для проверки этого предположения была выбрана модель железо-дефицитной анемии молодняка крупного рогатого скота.

До лечения у животных всех групп в крови отмечались изменения, характерные для железодефицитных состояний - снижение цветного показателя, содержания гемоглобина, сывороточного железа, а также незначительное снижение содержания эритроцитов (таблица 5).

Таблица 5.

Данные анализов крови опытных животных до и после лечения

Показатели крови Группа животных Норма

I П Ш

До лечения После лечения До лечения После лечения До лечения После лечения

Эритроциты, 106/мл 4,5± 0,15 5,1±0,1 4,6± 0,17 5Д± 0,08 4,8+ 0,2 5,2+ 0,12 5,0-7,5

Лейкоциты, 103/мл 4,8± 0,43 6,3± 0,22 5Д± 0,52 6,8± 0,18 4,9± 0,39 6,4± 0,21 4,5-12

Гемоглобшт, г% 7,3± 0,5 12,1± 0,35 7,1± 0,43 12,7± 0,17 7,4± 0,38 11,9± 0,12 9-12

Сывороточное железо, мкг/мл 56±5,7 97±6,9 49±4,8 106± 6,4 51+6,1 1Ç0± 7,1 90-110

Цветной показатель 0,45+ 0,15 0,71± 0,05 0,44± 0,09 0,74± 0,04 0,45± 0,11 0,69± 0,06 0,7-1,1

Некоторое уменьшение количества эритроцитов можно объяснить рассмотрев процесс эритропоэза. В регуляции пролиферации и дифференцировки клеток-предшественниц эритропоэза участвуют цито-кипы, вырабатываемые клетками иммунной системы (ИЛ-3, фактор роста стволовой клетки и др.), но основным регулятором эритропоэза является эритропоэтин, вырабатываемый эпоцитами - интерсцитиальными фиб-робластами в корковом слое почек непосредственно примыкающими к проксимальному эпителию канальцев (Ермоленко В.М., Николаев А.Ю., 1990; Spivak J.L, 1995; Bauer С., 1995). Эритропоэтин способствует увеличению количества клеток-предшественниц эритропоэза, воздействует на рецепторы полипотентпых клеток-предшественниц (КОЕ), что приводит к стимуляции синтеза в этих клетках РНК и ДНК (Сенников C.B. и др., 2002) и пролиферации клеток эритроидного ряда и образованию гемоглобина Наблюдаемое снижение количества гемоглобина в крови свидетельствует о снижении синтеза эритропоэтина.

Усиливают синтез эритропоэтина ИЛ-1, ИЛ-2, вырабатываемый Т-хелпериыми клетками. Стимуляторами роста и дифференцировки эритроидных клеток-предшественниц являются ИЛ-3, вырабатываемый Т-хелперными клетками I и П типов и ИЛ-9, вырабатываемый Т-хелперными клетками II типа.

Установлено, что при железодефицитной анемии снижается активность клеток иммунной системы, вырабатывающих цитокины. Например, дефицит железа вызывает подавление продукции ИЛ-1 (Кудрин А.В. и др., 2000), стимулирующего пролиферацию стволовых клеток костного мозга, Т- и В-лимфоцитов, кератиноцитов, фибробластов и являющегося индуктором большого количества цитокинов - ИЛ-2, 3,4,6, 8, 9, ФНО-(Х, КСФ-ГМ и целого ряда других, в том числе и являющихся стимуляторами эритропоэза (ИЛ-2, 3, 9). Также сообщалось о том, что при ЖДА происходит изменение количества ЭПО-рецепторов на поверхности клетки и снижение их связывающей способности (Boussios Т et al., 1994).

Исходя из этого, снижение количества эритроцитов и гемоглобина является следствием недостатка железа в организме, приводящего к ослаблению функций иммунной системы.

Как видно из таблицы 5, после лечения у животных всех групп отмечалась нормализация изученных показателей крови. Однако, положительная динамика была наиболее ярко выражена во второй группе животных, которых лечили комбинированным способом с применением тимофера и традиционных методов. Изученные показатели крови в первой группе животных, которых лечили только тимофером и в третьей группе животных, получавших только традиционное лечение, были приблизительно на одном уровне.

Увеличение количества эритроцитов после применения только тимофера (I группа), по всей вероятности, связано с воздействием дипепти-да изолейцил-триптофан, входящего в состав тимофера, на иммуноком-пететггные клетки, продуцирующие цитокины, повышающие экспрессию эритропоэтина. Дипептид, воздействуя на дважды положительную Т-клетку способствует усилению выработки Т-хелперных клеток, дифференцирующих на Т-хелперные клетки I и П типов, продуцирующих ИЛ-3 и ИЛ-9, которые попадая с током крови в околоканальцевые комплексы почек стимулируют выработку эпоцитами эритропоэтина, увеличивающего количество эритроцитов и экспрессию гемоглобина, а также снижающего выработку КОЕ клетками ИНФ-у, который оказывает ингиби-рующее действие на пролиферативную активногсть эритроидных клеток (Сенников C.B. и др., 2002). Это предположение подтверждают многочисленные данные о связи эритропоэтина с выработкой гемоглобина (Шехтман М.М., 1999; Шёхтман М.М., Бурдули Г.М., 1997; Besarab А., 1990; Breymann С. et al., 1995; Huch A. et al., 1992; Cheng I.K., et al., 1991; McMahon L.P., Dawborn J.K., 1990; Amoedo M.L. et al., 1995). ЭПО воздействует на эритроидные предшественники - бурст-образующую эрит-роидную единицу (КОЕ-е) в костном мозге, увеличивая скорость терми-

налыюй дифференциации КОЕ-е в проэритробласты и превращение их в зрелые эритроциты (Cavill I., 1995; Breymann С. et al., 1995).

Положительный результат, полученный в первой группе животных, позволяет предположить, что тимофер оказал нормализующее влияние на деятельность иммунной системы организма животных, что, в конечном итоге, привело к нормализации процесса кроветворения.

Таким образом, применение тимофера как в отдельности, так и совместно с традиционными методами лечения способствует нормализации клинических и биохимических показателей крови животных при железо-дефицитных состояниях.

3.3. Применение тимофера при лечении бронхопневмонии

Еще одним широко распространенным заболеванием молодняка сельскохозяйственных животных является бронхопневмония (Мустаки-мов Р.Г., Холов С.Х., 1994; Холов С.Х., 1995), которую относят также к неспецифическим воспалительным заболеваниям (Караулов, A.B., 1999) при которых обнаруживаются признаки нарушения иммунного гомеоста-за. Иммунодефицитные состояния создают ситуацию, при которой организм не может ответить полноценной реакцией на антигены, в результате чего может возникнуть дополнительное инфицирование слабопатогенными микроорганизмами, аутобактериями или грибами, как в случае ка-тарально-гнойной бронхопневмонии, которую также относят к респираторным бактериальным заболеваниям и лечение которой не всегда бывает успешным (Мустакимов Р.Г., Холов С.Х., 1994; Холов С.Х., 1995).

Применение иммуномодулирующих препаратов тимогара и тимоге-на при лечении катарально-гнойной бронхопневмонии (Бобиев Г.М., 1998; Бобиев Г.М, Бобиев Х.А., 1998; Бобиев Г.М., Мустакимов Р.Г., 1999) способствовало увеличению факторов неспецифической резистентности организма - бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, а также нормализации содержания общего белка и белковых фракций сыворотки крови. Повышение бактерицидной и лизоцимной активности объясняется действием иммуномодуляторов на медуллярные тимоциты с увеличением количества ТхО-клеток, дифференцирующих на Txl- и Тх2-клетки, выделяющие факторы, активирующие макрофаги (Ш1-2, -4, Инф-у, ФНО-а, -ß), которые участвуют в воспалительных процессах, что приводит к увеличению бактерицидной активности сыворотки крови.

Влияние тимофера, являющегося координационным соединением дипептида изолейцил-триптофан с ионом железа (П) на биохимические показатели организма животных при воспалительных заболеваниях до настоящего времени изучено не было. В связи с этим, была поставлена

задача изучить влияние тимофера биохимические показатели организма животных при бронхопневмонии крупного рогатого скота.

Из полученных результатов (таблица 6) видно, что в крови больных животных до лечения отмечалось пониженное содержание эритроцитов, гемоглобина и повышенное содержание креатинина и билирубина.

Таблица 6

Биохимические показатели больных бронхопневмонией животных до

лечения

Показатель Значение Норма

Содержание общего белка, г/л 72,8 60-85

Содержание альбуминов, % 26,99 30-50

Содержание а-глобулинов, % 4,81 12-20

Содержание 3-глобулинов, % 18,07 10-16

Содержание у-глобулинов, % 46,8 25-40

Бактерицидная активность,% 32,2 —

Лизоцимная активность,% 12,39 —

Лейкоциты, 10У/л 4,95 4,5-12,0

Эритроциты, 1012/л 3,98 5,0-7,5

Билирубин, мкмоль/л 8,29 0,17-5

Креатинин, мг% 0,87 0,45-0,65

Гемоглобин, г/л 60,88 90-120

Пониженное содержание эритроцитов и гемоглобина свидетельствует о наличии у животных кроме пневмонии гипорегенеративной анемии (Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф., 1995), возникающей при некоторых инфекционных заболеваниях, дефиците железа и голодании. Повышение содержания билирубина и креатинина может быть вызвано различными причинами, одной из которых может быть нарушение работы печени вследствие нарушения транспорта железа.

Опытные животные были разделены на 2 группы. Больных животных обеих групп лечили традиционными препаратами - изониазидом и окситетрациклином, животным второй группы дополнительно внутримышечно вводили тимофер в дозе 400 мкг на 100 кг живого веса больного животного. Окончание лечения определяли как по клиническим признакам, так и по данным лабораторных методов исследования. Полученные результаты приведены в таблице 7.

Применение тимофера способствовало нормализации содержания креатинина, что может являться следствием нормализации работы печени после нормализации депонирования

Таблица 7.

Показатели крови и иммунологического статуса животных после лечения _бронхопневмонии_

Показатель Группа животных Норма

1 2

Содержание общего белка, г/л 75,9 79,7 60-85

Содержание альбуминов, % 25,85 49,54 30-50

Содержание а-глобулинов, % 8,92 16,38 12-20

Содержание 3-глобулинов, % 43,04 21,3 10-16

Содержание у-глобулинов, % 22,19 39,36 25-40

Бактерицидная активность,% 38,2 43,5 —

Лизоцимная активность,% 12,96 15,46 —

Лейкоциты, 10у/л 4,84 4,8 4,5-12,0

Эритроциты, 10й/л 3,97 4,02 5,0-7,5

Билирубин, мкмоль/л 8,17 7,3 0,17-5

Креатинин, мг% 0,73 0,48 0,45-0,65

Гемоглобин, г/л 60,83 59,75 90-120

железа в ее клетках. Достоверных отличий в содержании эритроцитов, билирубина и гемоглобина до и после лечения отмечено не было. Достоверно увеличились бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, что свидетельствует о некоторой нормализации деятельности иммунной системы организма животных.

Объяснить этот факт можно тем, что при воспалительных заболеваниях в крови циркулируют цитокины, например, фактор некроза опухолей-а (ФНО-а), вызывающие распад трансферрина, осуществляющего транспорт железа, в результате чего возникает избыток железа во внеклеточном пространстве и недостаток его внутри клеток. Избыточное количество Бе2 подавляет фагоцитарную активность макрофагов и Т-киллерных клеток, угнетает Т-хелперные клетки. Тимофер стимулирует образование Т-хелперными клетками у-интерферона, интерлейкинов-1 и -6, способствующих синтезу трансферрина в лимфоцитах, в результате чего происходит снижение дисбаланса вне- и внутриклеточного содержания железа, нормализация деятельности иммунной системы организма и, как результат этого - увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови.

3.4. Влияние иммуностимулирующих препаратов на измененные биохимические показатели крови крупного рогатого скота при тейлериозе

Одним из заболеваний, наносящих значительный урон животноводству Таджикистана, является тейлериоз КРС (Нораев Р.Х., 1998). Тей-

лериоз относится к протозойным заболеваниям, вызываемым Theileria annulata, отличается от малярии тем, что внутриклеточная стадия возбудителя проходит не в печени, а в лимфоцитах. Для возбудителей прото-зойных инфекций в целом характерно чрезвычайное разнообразие антигенного состава. К тому же возбудители протозойных заболеваний имеют довольно сложный механизм жизненного цикла, что еще более затрудняет иммунную защиту. Кроме того, сами возбудители наделены иммуно-супрессорным действием, при данных заболеваниях также реализуется выраженный поликлональный митогенный эффект, истощающий защитные возможности иммунной системы, не формируя резистентности (Караулов A.B., 1999).

О ведущей роли в процессах иммуногенеза при данном заболевании клеточных и гуморальных факторов иммунитета сообщали многие авторы (Бурба Г.Л., 1983; Ананьев О.П. и Зуев В.В., 1983; Манилова Е.А., 1986; Небиеридзе Ш.К., 1991; Хван М. и Ананьев О.П., 1981; Morrison W.J., Goddeeris В.М., 1989; Singh D.K.et al„ 1977; Widle J.K.H., 1967). В настоящее время лечение данного заболевания осуществляется применением специфических препаратов на основе производных природных и синтетических алкалоидов, которые действуют только против возбудителя заболевания и не оказывают влияния на нарушенные звенья иммунной системы (Выппсовский Г.Л., 2002). С применением этих препаратов лечение не всегда приводит к желаемому результату. Повышения эффективности лечения можно достичь увеличением количества цитотоксических Т-клеток путем применения препаратов, воздействующих на дважды положительные Т-клетки. Такими препаратами являются тимусные гормоны и пептиды, в частности, известный иммуномодулирующий препарат тимоген и новый препарат тимогар, разработанный в Таджикистане и являющийся пептидным аналогом тимогена.

В связи с этим была поставлена задача изучения влияния тимогена и тимогара на измененные биохимические показатели крови крупного рогатого скота при тейлериозе и эффективность лечения данного заболевания.

Как видно из этих данных до лечения в крови животных отмечалось пониженное содержание гемоглобина, общего белка, альбуминов и (Х-глобулинов, повышенное содержание ß- и у-глобулипов. Снижение содержания эритроцитов и гемоглобина свидетельствует о нарушении

процесса эритропоэза, а изменения в составе белковых фракций сыворотки крови свидетельствуют о переключении биосинтеза белков с альбуминовой и а-глобулиновой фракций на синтез белков (}- и у-глобулиновых фракций.

В результате разрушения эритроцитов в сыворотке крови может повыситься содержание сывороточного железа, для связывания которого может требоваться большое количество трансферрина, относящегося к Р-глобулинам. О возможном протекании этого процесса свидетельствует повышение содержания Р-глобулинов. Повышение содержания у-глобулинов свидетельствует об усилении синтеза противотейлерийных антител.

Таблица 8.

Показатели состояния больных тейлериозом животных до лечения

Показатель Значение

Больные животные Клинически здоровые животные

Температура тела, °С 41,0±0,25 38,5±0,5

Частота дыхания в минуту 37,2±2,2 26,0±2,0

Пульс (число ударов в минуту) 86,5±5,5 64,6±3,0

Эритроциты, млн/мм3 4,45±0,15 5,3±0,5

Лейкоциты, тыс/мм3 9,3±0,2 7,99±0,5

Гемоглобин, г% 8,3±0Д 9,44±0,3

Общий белок, г% 6,1±0,25 8,1±0,4

Альбумины, % 27,2±3,1 46,2+5,1

а-глобулины, % 8,2±0,32 12,3±0,8

Р-глобулины, % 12,1±0,32 10,0±0,3

у-глобулины, % 55,7±3,1 31,5±6,8

Больные животные были разделены на 3 группы по 4 головы в каждой. Животных первой группы лечили примахином и тимогаром, второй - примахином и тимогеном, третьей (контроль) - только примахином. Тимоген и тимогар применяли подкожно один раз в сутки в виде 0,01% водного раствора в дозе 5-6 мл на одно животное.

Примахин применяли в дозе 1,0-1,5 г на 100 кг массы больного животного. Результаты анализов, полученные после лечения, приведены в таблице 9.

Как видно из таблицы 9, в процессе лечения у животных всех групп нормализовалось содержание общего белка сыворотки крови, у животных первой и второй групп нормализовалось содержание Р-глобулинов, остальные показатели имели положительную тенденцию к

нормализации. Наибольшая степень нормализации была достигнута в первой группе, в которой применяли тимогар.

Таблица 9

Показатели состояния больных тейлериозом животных после лечения

Показатель г руппа животных

I П Ш

Температура тела, °С 38,7±0,2 38,95±0,25 39,15±0,35

Частота дыхания в минуту 16,5±4,5 18,5±2,5 19,5±4,5

Пульс (число ударов в минуту) 63,0±2,0 68,0±5,0 65,5±4,5

Эритроциты, млн/мм3 5,9±0,2 5,65±ОЛ5 5,5±0,1

Лейкоциты, тас/мм3 8,45±0,05 8,6±0,1 8,59±0,24 .

Гемоглобин, г% .9,25^0,05 8,85±0,05 8,75±0,15

Общий белок, г% 8,3+0,25 8,02+0,3 7,6±0,15

Альбумины, % 40,0±0,7 38,1±0,9 36,0±0,7

а-глобулины, % 11,0±0,15 9,2±0,2 9,0±0,21

3-глобулины, % 10,2±0,1 9,9±0,15 12,0±0,3

у-глобулины, % 38,8±1,9 41,0±1,7 42,8±3,7

Тот факт, что применение иммуномодулирующих препаратов способствовало большей нормализации биохимических показателей крови позволяет предположить, что за счет нормализации деятельности иммунной системы организма животных происходит более активное уничтожение возбудителей заболевания цитотоксическими Т-клстками, что приводит к увеличению количества эритроцитов, происходит нормализация процесса эритропоэза. О чем свидетельствует увеличение количества эритроцитов и гемоглобина.

3.5. Терапевтическая эффективность тимофера при лечении анемии.

Первоначально было изучено влияние тимофера на показатели крови животных в ослабленном состоянии, вызванном различными причинами, одной из которых является недостаточное кормление или несбалансированность рациона.

До введения препарата, у животных отмечалось повышенное содержание сывороточного железа и Р-глобулинов, пониженное содержание а- и у-глобулинов (таблица 10).

Повышенное содержание Р-глобулинов может свидетельствовать о наличии у животных железодефицитной анемии, а пониженное содержание а- и у-глобулинов свидетельствует о недостаточном кормлении животных (Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., 1999). Содержание альбуминов, хотя и находится в норме, но почти равняется верхнему пределу, что

может свидетельствовать о возможном наличии воспалительных состояний. О наличии воспалительных состояний может также свидетельствовать повышенное содержание сывороточного железа, которое можно объяснить тем, что при воспалительных процессах циркулирующие ци-токины (например, фактор некроза опухолей-а) вызывают

Таблица 10

Содержание железа, общего белка и белковых фракций в сыворотке крови животных при анемии до и после введения тимофера _

Показатели крови До введения препарата После введения препарата Норма

Сывороточное железо, мкг/л 1786 1376 900-1100

Общий белок, г/л 67,5 55 60-85

Альбумины,% 49,9 48,8 30-50

а-Глобулины,% 9,55 9,5 12-20

(3-Глобулины,% 19,3 15,95 10-16

у-Глобулины,% 21,35 25,73 25-40

деградацию трансферрина и индуцируют гипоферремию (Кудрин A.B. и др., 2000). Одновременно с этим возникающий в сыворотке крови при воспалительных заболеваниях избыточный интерлейкин-2 ингибирует синтез ферритина в макрофагах, но стимулирует синтез трансферрина, что увеличивает содержание железа в крови, но не в тканях. Возникает тканевый дефицит железа.

Исходя из этого, было предположено, что применение тимофера должно способствовать нормализации содержания сывороточного железа вследствие установления баланса в содержании вне- и внутриклеточного железа и возможной нормализации деятельности иммунной системы.

Полученные результаты показали, что применение тимофера способствовало нормализации содержания ß- и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови.

Исходя из вышеизложенного можно предположить, что нормализация содержания ß-глобулинов произошла за счет снижения содержания трансферрина, а снижение содержания сывороточного железа - за счет нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные результаты позволяют преложить следующую схему влияния тимофера на организм животных при различных патологических состояниях (рис. 3).

При железодефицитчой анемии и анемических состояниях тимо-фер, воздействуя на дважды положительную Т-клетку способствует усилению выработки Т-хелперных клеток, дифференцирующих на Т-

Про-Т-клетка

трижды негативная

Пре-Т-клетка трижды негативная

Незрелая Т-к летка трижды негативная

Дважды положительная Т-кяетка

""ИЙ-'^З— "" •ИЙфгамма

-з,-Л''"" _____/.

^ / ^ктивация ма рогатое

АГ-слецифмес- / N ^МфЛ /тТЛ «иеклетки,

■ I

-—•* т •г

Клеточный иммунитет. Образование активация мжрофагов, цитотоксических

иммунное воспаление Т /пмфэцитое

Рис.3. Ь.тиян^е тимофера на^клетк^ иммунной системы и процесс кроветворен!

^ ГТьюральиыи 1 иммунный ответ

..... Взаимодействие клеток! иммунной системы

■ - кгетгмиые медиаторы ' 1

1 - клетка-предшественник миелопоэза

2 - эритропоэти^вствитвльные клетки

3 * эритробласты, 4 - гронормоциты 5 - оке поильный нормоцит

..6-реЛ#сулочит,;7 - эритродкг

хелперные клетки I и П типов, продуцирующих ИЛ-3 и ИЛ-9, которые стимулируют выработку эпоцитами эритропоэтина, увеличивающего количество эритроцитов и экспрессию гемоглобина. При этом нормализуется деятельность иммунной системы и происходит, как в случае анемических состояний, снижение синтеза трансферрина (об этом свидетельствует нормализация содержания Р-глобулинов) нормализуется транспорт железа из сыворотки в клетки (об этом свидетельствует снижете содержания сывороточного железа).

При лечении бронхопневмонии в результате влияния тимофера нормализуется деятельность иммунной системы о чем свидетельствует увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. В этом случае тимофер воздействует на дважды положительную Т-клетку, стимулируя образование Т-хелперных клеток, которые вырабатывают у-интерферон, интерлейкины-1 и -6, способствующие синтезу трансферрина в лимфоцитах, в результате чего происходит снижение дисбаланса вне- и внутриклеточного содержания железа, нормализация деятельности иммунной системы организма и, как результат этого - увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови.

При тейлериозе крупного рогатого скота воздействие тимофера на предшественник Т- и В-лимфоцитов способствует нормализации деятельности иммунной системы организма животных, в результате чего происходит более активное уничтожение возбудителей заболевания ци-тотоксическими Т-клетками, что приводит к увеличению количества эритроцитов, нормализации процесса эритропоэза, о чем свидетельствует увеличение количества эритроцитов и гемоглобина и нормализации остальных биохимических показателей.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что выдерживание тимофера при 35° не оказывает существенного влияния на стабильность препарата и не снижает его иммуностимулирующей активности.

2. Показано, что при железодефицитной анемии тимофер способствует нормализации процесса кроветворения, выражающейся в увеличении количества эритроцитов, гемоглобина и сывороточного железа вследствие воздействия тимофера на иммунокомпетентные клетки, усиливающие выработку эритропоэтина.

3. Показано, что применение тимофера при бронхопневмонии способствует нормализации содержания креатинина, увеличению бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови в результате нормализации деятельности иммунной системы организма.

4. Показано, что применение иммуностимулирующих препаратов ти-могара и тимогена при лечении тейлериоза крупного рогатого скота приводит к нормализации биохимических показателей крови, свидетельствующих о стимуляции процесса эритроиоэза, выражающейся в увеличении количества эритроцитов и гемоглобина вследствие нормализации деятельности иммунной системы организма под действием иммуностимулирующих препаратов.

5. Показано, что применение тимофера способствовало нормализации содержания (3- и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови, что свидетельствует о нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки.

Основные результаты диссертации изложены в следующих работах:

1. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х.Изучение стабильности нового железосодержащего иммуномо-дулирующего препарата тимофер//Природные ресурсы Таджикистана: рациональное использование и охрана окружающей среды. Мат.респ.конф.-Душанбе, 2001..-С 63-64

2. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х.Влияние иммуностимуляторов на измененные биохимические показатели крови крупного рогатого скота при тейлериозе//Мат. науч. симп. «Актуальные проблемы спектроскопии водородной связи»,-Душанбе, 2001 .-С.78-81

3. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х.Влияние тимофера на содержание сывороточного железа при анемии//Материалы Международной научно-практической конференции, посвященная 60-летию ТаджНИВИ «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях».-Душанбе, 2003-С. 121122

4. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х.Фармакологические свойства и терапевтическая эффективность тимофера при лечении железодефицитной анемии//Известия АН Республики Таджикистан.-2003.-№ 2(149).-С.79-82

5. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х. Токсические свойства и эффективность применения тимофера при железодефицитной анемии//Доклады АН Республики Таджикистан.-2003,-T.XLVL-№ 5-6.-С.98-103.

6. Зубайдов Т.У., Шахматов А.Н., Бобиев Г.М., Хайдаров К.Х. Влияние тимофера на содержание сывороточного железа при ане-мии//Вклад биохимиков Таджикистана в развитие биологической науки: Труды Третьей республиканской научной конференции биохимиков Республики Таджикистан.-Душанбе, 2003.-С.91-92.

Подписано в печать 18.11.2004г. Заказ № 173. Формат 60x84 '/16. Тираж 100 экз. 1,5 усл. печ.

Издательство «Хумо», г. Душанбе, ул. Бохтар, 3

РНБ Русский фонд

2004-4 29801

i ia"jii я с ' ■ : глс;оО ' ' • ! .С ». <•

/ '/'П

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Зубайдов, Тохир Убайдович

Список использованных сокращений Введение I Обзор литературы

1.1 Биологические свойства тимусных пептидов

3-4 5

1.2 Иммуномодулирующие препараты на основе тимусных 13-20 пептидов

1.3 Роль железа в функционировании иммунной системы 20

1.4 Биокоординационные соединения аминокислот и 26-31 низкомолекулярных пептидов с биометаллами

II Материалы и методы 32

2.1 Методы лабораторных исследований 32

2.2 Исследования на животных 43

III Результаты и обсуждение 47

3.1 Влияние внешних факторов на специфическую 47-55 активность тимофера

3.2 Применение тимофера при лечении железодефицитной 55-60 анемии

3.3 Применение тимофера при лечении бронхопневмонии 60

3.4 Влияние иммуностимулирующих препаратов на измененные биохимические показатели крови крупного 64-70 рогатого скота при тейлериозе

3.5 Терапевтическая эффективность тимофера при лечении 70-72 анемии

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние тимофера на биохимические показатели организма животных при некоторых патологических состояниях"

Актуальность проблемы. Современные исследования фундаментальной и клинической иммунологии показали, что иммунная система человека - сложно организованная многоуровневая структура, постоянно и одновременно реагирующая на многочисленные экзогенные и эндогенные агенты, раздражения, сигналы и функционирующая в тесной связи с нервной, эндокринной и вегетативной нервной системами, с окружающими органами и тканями (Малашенкова И.К., 2002). При нарушении функционирования иммунной системы страдают другие внутренние органы и системы и, наоборот, расстройства или патология в нервной, эндокринной и других системах и органах приведут к нарушению функционирования иммунной системы. В связи с этим коррекция нарушенной деятельности иммунной системы и изучение происходящих при этом биохимических процессов и создание на этой основе высокоэффективных нммунокорригирующих препаратов являются одними из важнейших задач современной медицины и биохимии.

При изучении биологических свойств новых лекарственных препаратов большое значение имеет познание механизмов биохимических реакций, происходящих в организме при введении таких препаратов (Беседнова Н.Н., 1999). Регуляторные пептиды иммунной системы способны влиять на функциональные параметры соматосенсорных клеток, и наоборот. Поэтому различные патологические процессы одновременно могут обуславливать расстройства всех трех систем. В то же время коррекция нарушений одной из них, например иммунной, влечет за собой изменения организменного характера, что выражается в изменении эндокринного статуса, функционирования нервной системы, метаболических расстройств и т.д., которые можно определить наблюдая за биохимическими показателями организма. Поскольку при разработке иммунокорригирующих препаратов в первую очередь велись наблюдения за показателями иммунологического статуса организма, изменения биохимических показателей остались практически не изученными. В связи с этим изучение изменений биохимических показателей статуса организма при применении иммунотронных средств является актуальным и кроме фундаментального значения, заключающегося в изучении взаимосвязи иммунной, нервной и эндокринной систем имеет и практическое значение.

В Республике Таджикистан были разработаны новые иммуномодулирующие препараты тимогар и тимофер, представляющие собой, соответственно, водный раствор дипептида изолейцил-триптофан, обладающего активностью тимусного гормона тимозина cti и биокоординационное соединение дипептида изолейцил-триптофан с ионом железа (II) и показана их высокая иммуностимулирующая активность при совместном применении с вакцинирующими препаратами и положительное влияние на эффективность лечения некоторых заболеваний животных. Однако остались практически неизученными биохимические аспекты действия этих препаратов, изучение которых позволит более оперативно оценивать эффективность их применения в практической деятельности.

В связи с вышеизложенным изучение влияния тимофера и тимогара на биохимические процессы при патологических состояниях организма является актуальным и имеет не только теоретическое, но и практическое значение.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи: изучить влияние температуры на токсические свойства и специфическую иммуностимулирующую активность тимофера; изучить влияние тимофера на эритро- и лейкопоэз, содержание гемоглобина и сывороточного железа при железодефицитной анемии; изучить влияние тимофера на биохимические показатели гемопоэза и факторы неспецифической резистентности организма животных при бронхопневмонии; изучить влияние тимогара в сравнении с тимогеном на биохимические показатели организма крупного рогатого скота при тейлериозе; изучить влияние тимофера на биохимические показатели (содержание общего белка, белковых фракций сыворотки крови и сывороточного железа) крови животных, изменяющиеся при анемичных состояниях;

Научная новизна. Впервые показано, что выдерживание тимофера, являющегося биокоординационным соединением низкомолекулярного пептида, обладающего активностью тимусного гормона и иона железа (II) при 35° не оказывает существенного влияния на стабильность препарата и не снижает его иммуностимулирующей активности. Впервые показано, что: при железодефицитной анемии тимофер способствует нормализации процесса кроветворения, выражающейся в увеличении количества эритроцитов, гемоглобина и сывороточного железа; применение тимофера при бронхопневмонии способствует нормализации содержания креатинина, увеличению бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови; применение иммуностимулирующих препаратов тимогара и тимогена при лечении тейлериоза крупного рогатого скота приводит к нормализации биохимических показателей крови, свидетельствующих о стимуляции процесса эритропоэза, выражающейся в увеличении количества эритроцитов и гемоглобина; применение тимофера способствует нормализации содержания и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови, что свидетельствует о нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки.

Практическая значимость. Полученные результаты позволили установить срок хранения тимофера и рекомендовать его для применения в ветеринарной практике при лечении железодефицитной анемии, анемичных состояний, бронхопневмонии и тейлериозе крупного рогатого скота.

Публикации. По материалам работы опубликовано 6 работ.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Зубайдов, Тохир Убайдович

ВЫВОДЫ

4. Показано, что применение иммуностимулирующих препаратов тимогара и тимогена при лечении тейлериоза крупного рогатого скота приводит к нормализации биохимических показателей крови, свидетельствующих о стимуляции процесса эритропоэза, выражающейся в увеличении количества эритроцитов и гемоглобина вследствие нормализации деятельности иммунной системы организма под действием иммуностимулирующих препаратов.

5. Показано, что применение тимофера способствовало нормализации содержания р- и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови, что свидетельствует о нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В процессе практического использования любой лекарственный препарат подвергается воздействию многочисленных внешних факторов, способных оказать как положительное, так и отрицательное влияние на специфическую активность препарата. Как указывалось в литературном обзоре, исследования в области координационных соединений аминокислот и низкомолекулярных пептидов ведутся в основном в направлении изучения их физико-химических параметров и в случае использования биологически активных лигандов -изучается только изменение активности после комплексообразования. Данные, касающиеся изучения влияния внешних факторов, например температуры, на специфическую активность препаратов весьма немногочисленны и носят отрывочный характер.

Результаты проведенных физико-химических и биологических исследований показали, что повышение температуры до 35°С и хранение его при этой температуре в течение 2 лет не оказывают существенного влияния на физико-химические параметры и иммуностимулирующую активность тимофера, а также не приводит к возникновению у препарата токсических свойств.

Железодефицитные состояния являются одними из широко распространенных заболеваний (Козинец Г.И. и др., 2003). Железодефицитные анемии различной этиологии, приводящие к нарушению образования гемоглобина, возникновению гипохромных анемий и трофических изменений в тканях вследствие гипоксии, приводящей к нарушению окислительно-восстановительных процессов (Кудрин А.В. и др., 2000)

Имеющиеся в научной литературе данные о связи между содержанием железа в крови и клетках, трансферрина и нормальным функционированием клеток иммунной системы, а также о том, что железодефицитные состояния ведут к нарушению Т-звена иммунной системы (Симонян Г.А., Хисамутдинов А.В., 1995; Djeha A. et al., 1995; Ross J., 1995), позволили нам предположить, что применение тимофера, содержащего как дипептид, обладающий иммуномодулирующим действием, так и железо, будет оказывать при железодефицитной анемии ярко выраженное положительное влияние на организм.

Данное предположение было проверено на молодняке КРС с выраженными клиническими признаками железодефицитной анемии. Изучение некоторых показателей крови показало, что до лечения у животных всех групп в крови отмечались изменения, характерные для железодефицитных состояний - снижение цветного показателя до 0,44-0,45 (норма 0,7-1,1), содержания гемоглобина до 7,1-7,4 г% (норма 9-12 г%), сывороточного железа до 49-56 мкг/мл (норма 90-11-мкг/мл), а также незначительное снижение содержания эритроцитов до 43,5-4,8 106/мл (норма 5,0-7,5 106/мл).

Биохимические показатели показывают конечный итог целого ряда последовательных биохимических процессов, происходящих в организме, зная которую по конечному результату можно сделать заключение о протекании всех промежуточных стадий. По данным научной литературы в регуляции пролиферации и дифференцировки клеток-предшественниц эритропоэза участвуют цитокины, вырабатываемые клетками иммунной системы (ИЛ-3, фактор роста стволовой клетки и др.), но основным регулятором эритроиоэза является эритропоэтин, вырабатываемый эпоцитами в корковом слое почек (Ермоленко В.М., Николаев А.Ю., 1990; Spivak J.L., 1995; Bauer С., 1995). Эритропоэтин воздействует на рецепторы полипотентных клеток-предшественниц (КОЕ), что приводит к стимуляции синтеза в этих клетках РНК и ДНК (Сенников С.В. и др., 2002), пролиферации клеток эритроидного ряда и образованию гемоглобина. Наблюдаемое снижение количества гемоглобина в крови свидетельствует о снижении синтеза эритропоэтина.

При железодефицитной анемии снижается активность клеток иммунной системы, вырабатывающих цитокины, в частности происходит подавление продукции HJI-1 (Кудрин А.В. и др., 2000), стимулирующего пролиферацию стволовых клеток костного мозга, Ти В-лимфоцитов, кератиноцитов, фибробластов и являющегося индуктором большого количества цитокинов - ИЛ-2, 3, 4, 6, 8, 9, ФНО-а, КСФ-ГМ и целого ряда других, в том числе и являющихся стимуляторами эритропоэза (ИЛ-2, 3, 9), а также при Ж ДА происходит изменение количества ЭПО-рецепторов на поверхности клетки и снижение их связывающей способности (Boussios Т. et al., 1994). Поэтому снижение количества эритроцитов и гемоглобина можно объяснить дефицитом железа в организме, приводящего к ослаблению функций иммунной системы.

После лечения у животных всех групп отмечалась нормализация изученных показателей крови. Однако, положительная динамика была наиболее ярко выражена во второй группе животных, которых лечили комбинированным способом с применением тимофера и традиционных методов. Изученные показатели крови в первой группе животных, которых лечили только тимофером и в третьей группе животных, получавших только традиционное лечение, были приблизительно на одном уровне.

Синтез эритропоэтина усиливают ИЛ-1, ИЛ-2, вырабатываемые Т-хелперными клетками. Стимуляторами роста и дифференцировки эритроидных клеток-предшественниц являются ИЛ-3, вырабатываемый Т-хелперными клетками I и II типов и ИЛ-9, вырабатываемый Т-хелперными клетками II типа.

Увеличение количества эритроцитов до 5,1±0,1 106/мл после применения только тимофера (I ipynna), по всей вероятности, связано с воздействием дипептида изолейцил-триптофан, входящего в состав тимофера, на иммунокомпетентные клетки, продуцирующие цитокины, повышающие экспрессию эритропоэтина. Дипептид, входящий в состав тимофера, воздействуя на дважды положительную Т-клетку способствует усилению выработки Т-хелперных клеток, дифференцирующих на Т-хелперные клетки I и II типов, продуцирующих ИЛ-3 и ИЛ-9, которые стимулируют выработку эпоцитами эритропоэтина, увеличивающего количество эритроцитов и экспрессию гемоглобина, а также снижающего выработку КОЕ клетками ИНФ-у, который оказывает ингибирующее действие на пролиферативную активность эритроидных клеток (Сенников С.В. и др., 2002), что подтверждается многочисленными данными о связи эритропоэтина с выработкой гемоглобина (Спивак Дж.Л., 1995; Шехтман М.М., 1999; Шехтман М.М., Бурдули Г.М., 1997; Besarab Л., 1990; Breymann С. et al., 1995; Huch A. et al., 1992; Cheng I.K., et al., 1991; McMahon L.P., Dawborn J.K., 1990; Amoedo M.L. et al., 1995). Действие ЭПО начинается на уровне эритроидных предшественников - бурст-образующей эритроидной единицы (КОЕ-е) в костном мозге, увеличивая скорость выработки эритроцитов. Основным действием эритропоэтина является терминальная дифференциация КОЕ-е в проэритробласты, последующий выход ретикулоцитов костного мозга в кровь и превращение их в зрелые эритроциты (Cavill I., 1995). ЭПО стимулирует увеличение кровяных островков (Breymann С. et al., 1995), а также активизирует пролиферацию эритроидных предшественников.

Еще одним широко распространенным заболеванием молодняка сельскохозяйственных животных является бронхопневмония (Мустакимов Р.Г., Холов С.Х., 1994; Холов С.Х., 1995), которую относят к неспецифическим воспалительным заболеваниям (Караулов, А.В., 1999) при которых обнаруживаются признаки нарушения иммунного гомеостаза: подавление РБТЛ лимфоцитов периферической крови на ФГА; количество общих Т-клеток, Т-хелперов и Т-супрессоров, факторы неспецифической антиинфекционной резистентности - лизоцим, комплемент, фагоцитарная активность лимфоцитов меняются разнонаправленно. Иммунодефицитные состояния создают ситуацию, при которой организм не может ответить полноценной реакцией на антигены, в результате чего может возникнуть дополнительное инфицирование слабопатогенными микроорганизмами, аутобактериями или грибами, как в случае катарально-гнойной бронхопневмонии, которую также относят к респираторным бактериальным заболеваниям и лечение которой не всегда бывает успешным (Мустакимов Р.Г., Холов С.Х., 1994; Холов С.Х., 1995).

Данные (Бобиев Г.М., 1998; Бобиев Г.М., Бобнев Х.А., 1998; Бобиев Г.М., Мустакимов Р.Г., 1999) об успешном применении при лечении катарально-гнойной бронхопневмонии молодняка крупного рогатого скота известного иммуномодулирующего препарата тимоген и нового иммуномодулирующего препарата тимогар показали, что их применение способствовало увеличению факторов несиецифической резистентности организма - бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, а также нормализации содержания общего белка и белковых фракций сыворотки крови - увеличению содержания общего белка, альбуминов и а-глобулинов и снижению содержания (3-и у-глобулинов. Повышение бактерицидной и лизоцимной активности объясняется действием иммуномодуляторов на медуллярные тимоциты с увеличением количества ТхО-клеток, дифференцирующих на Txl- и Тх2-клетки, выделяющие факторы, активирующие макрофаги (ИЛ-2, -4, Инф-у, ФНО-а, -Р), которые участвуют в воспалительных процессах, что приводит к увеличению бактерицидной активности сыворотки крови.

Влияние тимофера, являющегося координационным соединением дипептида изолейцил-триптофан с ионом железа (II) на биохимические показатели организма животных при воспалительных заболеваниях до настоящего времени изучено не было. В связи с этим, была поставлена задача изучить влияние тимофера биохимические показатели организма животных при бронхопневмонии крупного рогатого скота.

Было установлено, что в крови больных животных отмечалось пониженное содержание альбуминов - 26,99% (норма 30-50%), сх-глобулинов-4,81% (норма 12-20%), эритроцитов-3,98 1012/л (норма

5,0-7,5 1012/л), гемоглобина - 60,88 г/л (норма 90-120 г/л) и повышенное содержание у-глобулинов - 46,8% (норма 25-40%), креатинина - 0,87 мг% (норма 0,45-0,65 мх%) и билирубина - 8,29 мкмоль/л (норма 0,17-5,0 мкмоль/л).

Полученные результаты показали, что применение тимофера способствовало нормализации содержания креатинина, которая может являться следствием нормализации работы печени после нормализации депонирования железа в ее клетках. Достоверных отличий в содержании эритроцитов, билирубина и гемоглобина до и после лечения отмечено не было. Отмечалось увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, свидетельствующее о некоторой нормализации деятельности иммунной системы организма животных.

Объяснить этот факт можно тем, что при воспалительных заболеваниях в крови циркулируют цитокины, например, фактор некроза опухолей-а (ФНО-а), вызывающие распад трансферрина, осуществляющего транспорт железа, в результате чего возникает избыток железа во внеклеточном пространстве и недостаток его внутри клеток. Избыточное количество Fe2* подавляет фагоцитарную активность макрофагов и Т-киллерных клеток, угнетает Т-хелперные клетки. Тимофер стимулирует образование Т-хелперными клетками у-интерферона, интерлейкинов-1 и -6, способствующих синтезу трансферрина в лимфоцитах, в результате чего происходит снижение дисбаланса вне- и внутриклеточного содержания железа, нормализация деятельности иммунной системы организма и, как результат этого — увеличение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови.

Одним из заболеваний, наносящих значительный урон животноводству Таджикистана, является тейлериоз КРС, относящийся к протозойным заболеваниям, вызываемым Theileria annulata и сходный с малярией, но внутриклеточная стадия возбудителя проходит не в печени, а в лимфоцитах. (Нораев Р.Х., 1998).

Для возбудителей протозойных инфекций в целом характерно чрезвычайное разнообразие антигенного состава. К тому же возбудители протозойных заболеваний имеют довольно сложный механизм жизненного цикла и наделены иммуносупрессорным действием, при данных заболеваниях также реализуется выраженный поликлональный митогенный эффект, истощающий защитные возможности иммунной системы, не формируя резистентное ги (Караулов А.В., 1999), что еще более затрудняет иммунную защиту. Многочисленные данные (Widle J.K.H., 1967; Singh D.K.et al., 1977; О.П.Ананьева и В.В.Зуева, 1983; М.Хвана и Ананьева О.П., 1981; Бурба Г.Л., 1983; Манилова Е.А., 1986; Hall F.R., 1988; Morrison W.J., Goddeeris В.М., 1989; Ш.К.Небиеридзе, 1991) свидетельствуют о значении иммунологических факторов в этиологии и патогенезе данного заболевания. В последние годы (Наглядная иммунология, 1999) установлено, что возбудитель тейлериоза разрушается цитотоксическими Т-клетками. В настоящее время лечение данного аболевания осуществляется применением специфических препаратов ряда производных природных и синтетических алкалоидов, которые действуют только против возбудителя заболевания и не оказывают влияния на нарушенные звенья иммунной системы (Вышковский Г.Л., 2002). Применение этих препаратов не всегда приводит к желаемому результату. Повышения эффективности лечения можно достичь увеличением количества цитотоксических Т-клеток путем применения препаратов, воздействующих на дважды положительные Т-клетки. Такими препаратами являются тимусные гормоны и пептиды, в частности, известный иммуномодулирующий препарат тимоген и новый препарат тимогар, разработанный в Таджикистане и являющийся пептидным аналогом тимогена.

У всех больных животных отмечалось вялое общее состояние, редкая и слабая жвачка, пониженный аппетит, повышенная температура тела, учащенные перистальтика рубца (1-2 в минуту), дыхательные движения и частота ударов пульса, в мазках крови отмечалось поражение эритроцитов тейлериями, пониженное содержание гемоглобина (8,3±0,1 г%, у здоровых животных 9,44±0,3), общего белка (6,1±0,25 г%, у здоровых животных 8,1 ±0,4 г%), альбуминов (27,2+3,1%, у здоровых животных 46,2±5,1%) и ос-глобулинов (8,2±0,32%, у здоровых животных 12,3±0,8%), повышенное содержание р-глобулинов (12,1 ±0,32%, у здоровых животных 10,0+0,3%) и у-глобулинов (55,7±3,1%, у здоровых животных 31,5±6,8). Снижение содержания эритроцитов до 4,45±0,15 млн/мм3 (у здоровых животных 5,3±0,5 млн/мм3) и гемоглобина свидетельствует о нарушении процесса эритропоэза, а изменения в составе белковых фракций сыворотки крови свидетельствуют о переключении биосинтеза белков с альбуминовой и а-глобулииовой фракций на синтез белков (3- и у-глобулиновых фракций.

В результате разрушения эритроцитов в сыворотке крови может повыситься содержание сывороточного железа, для связывания которого может требоваться большое количество трансферрина, относящегося к Р-глобулинам. О возможном протекании этого процесса свидетельствует повышение содержания белков Р-глобулиновой фракции. Повышение содержания белков у-глобулиновой фракции может свидетельствовать об усилении синтеза противотейлерийных антител, относящихся к этой белковой фракции.

Больных животных лечили как традиционным препаратом примахином, так и примахином в сочетании с иммуномодулирующими препаратами тимогеном и тимогаром.

В процессе лечения у животных всех групп нормализовалось содержание общего белка сыворотки крови, у животных, которых лечили примахином в сочетании с тимогаром и тимогеном нормализовалось содержание Р-глобулинов, остальные показатели имели положительную тенденцию к нормализации. Наибольшая степень нормализации была достигнута в первой группе, в которой применяли тимогар.

Тот факт, что применение иммуномодулирующих препаратов способствовало большей нормализации биохимических показателей крови позволяет предположить, что за счет нормализации деятельности иммунной системы организма животных происходит более активное уничтожение возбудителей заболевания цитотоксическими Т-клетками, что приводит к увеличению количества эритроцитов, происходит нормализация процесса эритропоэза. О чем свидетельствует увеличение количества эритроцитов и гемоглобина.

Анемии различной этиологии также являются достаточно распространенными заболеваниями как среди людей, так и среди животных. Первоначально было изучено влияние тимофера на показатели крови животных в ослабленном состоянии, вызванном различными причинами, одной из которых является недостаточное кормление или несбалансированность рациона.

До введения препарата, у животных отмечалось повышенное содержание сывороточного железа (1786 мкг/л, норма 900-1100 мкг/л) и р-глобулинов (19,3%, норма 10-16%), пониженное содержание а-глобулинов (9,55%, норма 12-20%) и у-глобулинов (21,35%, норма 2540%). Повышенное содержание Р-глобулинов может свидетельствовать о наличии у животных железодефицитной анемии, а пониженное содержание а- и у-глобулинов свидетельствует о недостаточном кормлении животных (Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., 1999). Содержание альбуминов, хотя и находится в норме, но почти равняется верхнему пределу, что может свидетельствовать о возможном наличии воспалительных состояний. О наличии воспалительных состояний может также свидетельствовать повышенное содержание сывороточного железа, которое можно объяснить тем, что при воспалительных процессах циркулирующие цитокины (например, фактор некроза опухолей-ос) вызывают деградацию трансферрина и индуцируют гипоферремию (Кудрин А.В. и др., 2000). Одновременно с этим возникающий в сыворотке крови при воспалительных заболеваниях избыточный интерлейкин-2 ингибирует синтез ферритина в макрофагах, но стимулирует синтез трансферрина, что увеличивает содержание железа в крови, но не в тканях. Возникает тканевый дефицит железа.

Полученные результаты показали, что применение тимофера способствовало нормализации содержания р- и у-глобулинов и снижению содержания сывороточного железа и общего белка сыворотки крови.

Исходя из вышеизложенного можно предположить, что нормализация содержания р-глобулинов произошла за счет снижения содержания трансферрина, а снижение содержания сывороточного железа - за счет нормализации транспорта железа из сыворотки крови в клетки.

При железодефицитной анемии и анемических состояниях тимофер, воздействуя на дважды положительную Т-клетку способствует усилению выработки Т-хелперных клеток, дифференцирующих на Т-хелперные клетки I и II типов, продуцирующих ИЛ-3 и ИЛ-9, которые стимулируют выработку эпоцитами эритропоэтина, увеличивающего количество эритроцитов и экспрессию гемоглобина. При этом нормализуется деятельность иммунной системы и происходит, как в случае анемических состояний, снижение синтеза трансферрина (об этом свидетельствует нормализация содержания Р-глобулинов) нормализуется транспорт железа из сыворотки в клетки (об этом свидетельствует снижение содержания сывороточного железа).

Про-Т-кпетка триады негатив>

Пре-Т-клетка триады негагтмвн

Незрелая Т-клет триады негатавн

Дваады положи тельная Т-клетк

ИЛ-12, Инф-гамма почки

ИЛ-3, -9

АГ-специфичес-кие клетки О ктивацця мфоф мф) (тк)

Гуморальный Клеточный иммунитет, Образование иммунный ответ активация макрофагов, цититоксиче< иммунное воспаление Т-лимфоцип

Рис.3. Влияние тимофера на клетки иммунной системы и процесс кроветворен^

Л— Развитие Т- и В-лимфоцитов, эритроцитов

4. Взаимодействие клеток иммунной системы

•4 • - Клеточные медиаторы

1 - клетка-предшесгвенник миелопоэза

2 - эритропоэтинчувствительные клетки

3 - эритробласты, 4 - пронормоциты

5 - оксифильный нормоциг

6 - ретакулоцит, 7 - эритроцит

При тейлериозе крупного рогатого скота воздействие тимофера на предшественник Т- и В-лимфоцитов способствует нормализации деятельности иммунной системы организма животных, в результате чего происходит более активное уничтожение возбудителей заболевания цитотоксическими Т-клетками, что приводит к увеличению количества эритроцитов, нормализации процесса эритропоэза, о чем свидетельствует увеличение количества эритроцитов и гемоглобина и нормализации остальных биохимических показателей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Зубайдов, Тохир Убайдович, Душанбе

1. Ананьев О.П., Зуев В.В. Гуморальные факторы иммунитета при тейлериозе крупного рогатого скота//Паразиты сельскохозяйственных животных Казахстана и меры их предупреждения,-Алма-Ата, 1983.-С.112-117.

2. Анисимов В.Н., Мирецкий Г.И., Морозова В.Г. идр. Влияние синтетического иммуномодулятора тимогена на радиационный канцерогенез у крыс.//Вопр. Онкологии.-1992.-t.38.-JVy4-c.451 -458

3. Арион В. Я. Иммунологически активные факторы тимуса // Иммунология / ВНИТИ. хМ., 1981. т. 9. - с. 10-50.

4. Барабой В.А., Ялкут С.И., Савцова З.Д. и др. Противолучевое действие низкомолекулярных препаратов вилочковой железы// Рациационная биология. Радиоэкология.-1994.-т.34.-вып. 4-5,-с. 663670.

5. Белова А. А. Биохимия процессов воспаления и поражения сосудов. Роль нейтрофилов // Биохимия 1997 Т. 62. Вып. 6. - с. 659668.

6. Беседнова Н.Н. Регуляция иммунных процессов пептидами природного происхождения//Антибиотики и химиотерапия- 1999.-Л*у 1.-С. 31-35.

7. Бобиев Г.М., Бобиев Х.А. Лечение бронхопневмонии телят с помощью иммуностимулирующих препаратов//Информ. листок НПИЦентра Республики Таджикистан.-Душанбе, 1998.-№ 34-98.-4 с.

8. И.Бойко В.Н., Жалус Р.Б., Лечеза В.И. Исследование влияния радиопротекторов различных классов на выживаемость мышей, облученных в широком диапазоне доз//Радиационная биология. Радиоэкология. 1995.-т.35.-вып.4.-с.522-527.

9. Владимирская Е.Б., Осипова Е.Ю., Иванова А.А., Дейгин В.И. Влияние тимодепрессина на пролиферацию кроветворных клеток-предшественников человека.// X российский конгресс "Человек и лекарство" (10 апреля 2003).

10. Гершкович А.А. Кибирев В.К. Синтез пептидов. Реагент и методы. Киев.-Наукова думка. 1987-264-стр

11. Гользанд И.В., Горячева Л.Г., Вояков В.О. и др. Показания к применению тималина в терапии детей, больных хроническим вирусным гепатитом В// Воен.-мед.журн.-1986.-№3-с.27-28.

12. Гречко А.Г. Нейротропная активность пептидных иммуномодуляторов// Эксперим. и клин, фармакология.-1998.-t.61-№4-с.14-16

13. Григорьев Е. И., Хавинсон В. X., Малинин В. В., Григорьев А. Е., Кудрявцева Т. А. О роли водной среды в механизмах действия иммуноактивных пептидов в сверхмалых дозах//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. - Т. 138, N 8. - С. 173-178

14. Григорьева А. С., Канахович Н. Ф., Крисс Е., Милетин Ю. А. Взаимодействие между трифенилвердазильными радикалам и комплексами меди, железа, алюминия и цинка с N 3-три-фторметилфенилантропиловой кислотой // Коорд. химия 1986. Т. 11 -№12-с 1620.

15. Гринштейн Дж., Виниц М. Химия аминокислот и пептидов.-М.: Мир, 1965.-821 с.

16. Даренская С.Д. Острый абсцесс легкого: этиология. Патогенез, лечение: Автореф. дис.доктора мед. наук.-М.,1993.-43с.

17. Демидов С.В. Молекулярно-генетические и клеточные механизмы фармакологического действия препаратов из тимуса (тималина, тимогена, вилозена): Автореф. дис д-ра мед. наук. Киев, 1991.-45с.

18. Добрынина Н.А. Биокоординационная химия. Метод рН-метрического титрования в изучении комплексообразования биометаллов с биолингандами // Коорд. химия 1992.- Т.18.- Вып. 7.-с. 760-767.

19. Долгов Г.В. Закономерности изменений иммунных биохимических адаптационных реакций женского организма после хирургического стресса: Автореф. дис.д-ра мед. наук. СПб., 1998.-43с.

20. Ермоленко В.М., Николаев А.Ю. Эритропоэтин: биологические свойства и применение в клинике // Тер. арх. 1990. - Т.62. - №.11. - С. 141-145.

21. Жербин Е.А.,Чухловин А.Б. Радиационная гематология. М. Медицина, 1989.-175с.

22. Жук Е.А., Галенок В.А. Тимоген в лечении сахарного диабета 1 типа // Тер.архив.-1996.-№ 10.-с .12-14.

23. Жуков В. В. Биохимические механизмы иммунорегулирующего действия пептидов тимуса: Автореф. дис. д-ра мед. наук. Киев, 1991.-45 с.

24. Кассиль Г. Н. Наука о боли М., Наука, 1975 - 398 с.

25. Ким К.Ф., Климова С., В., Дьяконова В.А., Никонова М.Ф., Григорьева Т.Ю., Дейгин В.И., Пинегин Б.В., Ярилин А.А. Влияние тимических пептидов на синтез и внутриклеточное содержание некоторых цитокинов//Иммунология.- 2002.-№5

26. Киреева А.Ю., Бихман Б.И., Дятлова М.Н. О применении комплексонатов железа // Тез. Докл. I Всес. Совещ. по химии и применению комплексонатов металлов. М 1978 с. 1130.

27. Киселева Е. П., Огурцов Р.П., Попова О .Я. и др. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов //Иммунология.-1999.-№2.-с. 21-26.

28. Клёсов А. А. Химическая металлоизимология // Биологические аспекты координационной химии. Киев: Наукова думка, 1977. - с. 66-86.

29. Клёсов А.А. Велли B.JI. Магнитной круговой дихроизм Со2" -карбоксипентидозы: множественный характер взаимодействия эффектов с активным центром фермента// Биорган. химия.-1977.-t.3-с.958-963.

30. Клиническая иммунология/Под ред. А.В.Караулова.-М.: Медицинское информационное агентство, 1999.-604 С.

31. Козинец Г.И., Левина А.А., Шмаров Д.А., Дягилева О.Л., Левина Т.Н., Наумова И.Н., Попова О.В., Сгеклов Н.И., Шумилова Л.Л., Орлова Г.К., Погорелов В.М. Желеюдефицит реальная опасное и, //Российский медицинский журнал.- 2003.-Том 11 .-Л!1 8.

32. Козлов В.А., Котов Г.А., Цимбалистов А.В. и др. Иммунологические и биохимические показатели крови при травматическом остеомиелите нижней челюсти//Вест.хирургии.~ 1981 .-т. 126.-№4.-с.99-101.

33. Крисс Е., Волченскова И.И., Бударин Л.И. Координационные соединения металлов с лекарствами новые эффективные терапевтические агенты // Коорд. Химия. - 1990. - Т. 16. - Вып. 1.-е. 11-21.

34. Крылова Л.Ф. Диканская Л.Д., Федотов М.А. Моноциклические комплексы платины (II) и палладия (II) с аминокислотами ряда глицина// Коорд. химия -1994.-Т.20.-№1. С.57-59.

35. Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонков А.А., Скальная М.Г., Громова О.А. Иммунофармакология микроэлементов. Москва: издательство КМК.-2000. 537 с.

36. Кузник Б.И., Будажабон Г.Б., Будажабон Н.Г. и др. Тималин как модулятор иммуногенеза и гомеостаза//Фармакология и токсикология.-1984.-т.47.-№ 1 .-с.67-71.

37. Кузник Б.И., Гаймоленко И.Н., Цыбенова Б.Ц. Влияние вилона на иммунитет у детей с хроническими заболеваниями легких // Цитокины и воспаление, 2003, Т. 2, № 4, с. 21-26

38. Лебедев В. В., Тутельян А. В., Степанов О. Г. и др. Имунофан-пептидный препарат нового поколения для иммунопрофилактики и лечения зоонозов // Тез. докл. Международн. симпоз. «Пищевые зоонозы» М., 1995. с. 29 - 30.

39. Любимов Д.С. Дифференциальный подход к использованию Т-клеточных иммунокорректоров при осложненных формах респираторной вирусной инфекции у детей раннего возраста: Автореф. дис. канд. мед наук. Ростов на Дону, 1997,21с.

40. Максимов С. А. Применение иммунокорригирующих препаратов в комплексном лечении больных хроническим вирусным гепатитом В: Автореф. Дис. канд. мед. наук. М., 1992. 24 с.

41. Малашенкова И.К. Принципы иммунокорригирующей терапии вторичных иммунодефицитов, ассоциированных с хронической вирусно-бактериальной инфекцией//Российский медицинский журнал.-2002.-Том 10.-№ 21.

42. Манилова Е.А. Динамика М и G-классов глобулинов и их роль в иммунитете при тейлериозе крупного рогатого скота (Theileria annulata)//Pecn. науч. теор. конф. молодых ученых и специалистов. Тез.докл. секции «Биология».-Душанбе, 1986.-c.28.

43. Мансуров.М.М. Юсупов.З.Н. Якубов.Х.М. Новое железосодержащее микроудобрение "Хосиловар"// Информ. листок Тадж.НИИНТИ-Душанбе, 1988-Зс.

44. Мелехин В.Д., Синяченко В.В., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Иммуномодуляторы в терапии ревматоидного артрита. I. Применение тималина//Ревматология.-1985.-№3 .-с.43-46.

45. Морозов В.Г. Роль пептидных биорегуляторов тимуса в патогенезе иммунодефицитов: Автореф. Дис. д-р мед.наук JL, 1990-74. с.

46. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Характеристика и изучение механизма действия фактора тимуса (тимарина)//Докл. АН ССР.-1978.-т.240.-№4.-с. 1004-1007.

47. Морозов В. Г., Хавинсон В. X., Малинин В. В. Пептидные тимомиметики. СПб.: Наука, 2000. - 158 с.

48. Небиеридзе Ш.К. Патоморфология, паю- и иммуноморфогенез у телят, экспериментально зараженных Theileria annulata и вакцинированных противотейлериозной вакциной: Автореф. дис.канд. вет. наук.-М., 1991.-25 с.

49. Невидимова Т.И., Суслов Н.И. Психотропные эффекты тимогена /Бюл. эксперим. биологии и медицины.-1995,-т. 119-Ж2-с. 199-200

50. Новиков B.C., Смирнов B.C. Иммунофизиология экстремальных состояний. СПб.: Наука, 1995,-172с.

51. Новиков B.C., Яковлев Г. М., Смирнов B.C., Хавинсон В.Х. Биорегуляция в медицине катастроф. СПб.:Наука, 1992.- 47с.

52. Нораев Р.Х. Эпизоотическая ситуация в Республике Таджикистан по тейлериозу крупного рогатого скота//Диагностика, лечение и профилактика болезней сельскохозяйственных животных. Сб.науч.тр.( 1997-1998)/ТаджНИВИ.-Душанбе, 1998.-е .10-20.

53. Паладе Д.М. Ожерельев И.Д., Беляева И.В. Комплексообразование кобальта (II) с гистидином в инертной атмосфере// Коорд. химия-1994. Т.20.-С.462-465.

54. Пигарева Н.В., Калинина Н.М., Симбирцев А.С. Характеристика иммуностимулирующего действия синтетического дипептида «бестим»//Мед. иммунология.-1999.-Т.1. -ЖЗ-4.-с.127.

55. Писарев В.М., Тутельян А.В., Данилина А.В. и др. Механизмы ингибиции продукции фактора некроза опухоли а синтетическим гексапептидом имунофаном//Вопр. мед. химиии. - 1995.-т.41.-№2.-с.11-15.

56. Поверенный А. М., Семина О. В., Семенец Т. Н., Замулаева И. А., Селиванова Е. И., Дейгин В. И. Тимодепрессин, ингибирующий развитие реакции трансплантат против хозяина// Иммунология.-2002.-№2.

57. Покровский В. И., Сулейманов А. К., Лебедев В. В. и др. Иммунореабилитирующее действие тимогексина при лечении больных хроническим бруцеллёзом // Тер. Архив. 1992. — т. 64. - N П.-с. 22-26.

58. Полевиченко Е.В. Клинико-иммунологический статус детей в программном лечении различных иммунофенотипических вариантов острого лимфобластного лейкоза и его коррекция: Автореф. дис. канд. мед. наук. Ростов на Дону, 1995.-20 с.

59. Порошин К.Т., Салохутдинов У.И., Турсунов Н.М., Шукуров С. Ш. Изучение комплексных соединений меди с некоторыми дипептидами //Докл. АН Тадж ССР- 1971. -Т. 14.-№1.- стр 37-40.

60. Практическая химия белка /Под ред. А.Дарбре.-М., Мир, 1989-стр-621

61. Пятириченко И.А. Клинико-иммунологический статус больных с пороками сердца ревматической этиологии после операции наоткрытом сердце и возможности иммунокоррекции тимогеном: Автореф.дис. канд.мед наук.СПб., 1991. 22с.

62. Раджабов У., Юсупов 3. Н., Оффенгенден Е. Я. Координационные соединения железа с гистидином в водно-перхлоратных растворах// Координационные соединения и аспекты их применения. Сб. Науч. Тр. Душанбе, 1991. -С 140-145.

63. Романенко Э. Д., Бударин JI. И., Яцимирский К. Б. рН потен-циометрическое определение констант устойчивости комплексов Си (II), Mn (II), Fe (И) с изадрином // Теор. и эксперим химии 1978 Т 14. №1. с. 79.

64. Рушковский С.Р., Чегринец С.Е., Безруков В., Храпунов С.Н. Влияние модификации структуры интерлейкина-1 (3 на его физиологическую активность//Российский физиолог. Журнал. 1999.-т.85.-№11.-с.1420-1427.

65. Рябинина И. Д., Мирошниченко И. В., Ярилин А. А., Азьмуко А. А. Действие гормонов тимуса и их пептидных фрагментов на миграцию претимоцитов в тимус и его заселение // Иммунология. 1991. - N 6. -с. 20.

66. Салохутдинов У. И., Борисов А. П., Сович И. А. Исследование устойчивости и католитическиой активности медных комплексов некоторых дипептидов // Докл. АН Тадж. ССР 1968 - Т. 11. №11. с 34-36.

67. Севрюгина Ю.Ю., Добрынина Н.А., Николаева Л.С., Евсеев A.M. Глутаминаты цинка// Коорд. химия. -1994.-№ 3.-С.175-177.

68. Семина О.В., Семенец Т.Н., Дейгин В.И. и др. Радиозащитное действие синтетических иммуномодуляторов на кроветворение КОЕс//Радиационная биология. Радиоэкология.-1993.-t.33.- вып.З(б),-с.808,-811.

69. Сенников С.В., Инжелевская Т.В., Крысов С.В., Козлов В.А. Эритропоэтин как модулятор цитокин-синтезирующей активности клеток эритроидного ряда/ЯДитокины и воспаление.-2002.I

70. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции// Цитокины и воспаление.-2004.-Т.З.-№ 2.-С.16-22.

71. Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология. М.: Колос, 1995. 256 с.

72. Слюдкин О.П., Желонкина А.Г., Иваненко В.А. О различном взаимодействии хиральных L-фенилаланиновыхкомплексов Pt(II) с фенилаланин-транспортной РНК синтазой // Коорд. химия -1996. -Т. 22.-№6-стр 497-498.

73. Смирнов B.C. Вторичные иммунодефицитные состояния и их коррекция при промышленных катастрофах и стихийных бедствиях: Автореф. дис. д-ра мед. наук.СПб., 1992-3 8с.

74. Смирнов B.C., Селиванов А. А. Биорегуляторы в профилактике и лечении гриппа. СПб.:Наука, 1996. 69 с.

75. Собиров В.Х., Кебец Н.М., Порай-Кошиц. М.А., Стручков Ю.Г. Кристалическая структура биядерного комплекса хлорида меди (II) с у-аминомасляной кислотой//Коорд. химия -1994. Т. 20- №26. стр. 466477

76. Сухимина Т.Д. Биохимическая и иммунологическая характеристика экспериментального иммунодефицита птиц и его коррекция пептидными препаратами: Автореф. дис. канд. биол. наук. СПб., 1992.-18с.

77. Толмачева Н.А. Иммунокоррекция в комплексном лечении лимфогранулематоза: Автореф. дис. канд. мед. наук.СПб, 1992.-25с.

78. Турсунов М. М., Салохутдинов У. И., Шукуров С. Ш., Порошин К.Т. Некоторые свойства комплексов образованных медыо с трипептидами // Докл. АН Тадж. ССР 1971.- T.-XIV.- №2.- с 40-43.

79. Тутельян А. В. Клеточные и молекулярные механизмы действия синтетического гексапептида тимогексина: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1993, - 18 с.

80. Тутельян А.В., Клебанов Г.И., Ильина С.Е., Любицкий О.Б. Сравнительная оценка антиоксидантных свойств иммунорегуляторных препаратов//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. - Т. 138, N 8. - С. 179-183

81. Филатова Н.А. Естественная киллерная активность спленоцитов мышей линии СЗНА в ранние сроки после трансплантации клеток гепатомы 22А: Автореф. дис. канд. биол. наук.-СПб., 1991-20с.

82. Хавинсон В.Х. Иммунокорригирующая терапия при заболеваниях и травмах. Дис. д-ра мед. наук в форме науч. докл. Л., 1987.-50с.

83. Хавинсон В.Х., Жуков В.В., Дейгин В.И., Коротков A.M. Влияние тималина и синтетического пептида тимуса на активность ферментов метаболизма пуриновых нуклеотидов в тимоцитах// Тез. докл. науч. конф. «Биохимия-медицина». Л., 1988.-е. 198-199.

84. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Малинин В.В., Серый С.В. Средство, стимулирующее репаративные процессы, и способ его применения /Патент РФ №2139085, 1999.

85. Хавинсон В.Х., Серый С.В., Малинин В.В. Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью / Патент РФ №2080120, 1997.

86. Хван М., Ананьев О.П. Динамика IgG и IgM антител при тейлериозе крупного рогатого скота// Иммунопрофилактика, патогенез и эпизоотология паразитов сельскохозяйственных животных.-Алма- Ата, 1981 .-С. 142-144.

87. Холов С.Х. Аэрозольное применение ПВЭНТИ при бронхопневмонии телят// Диагностика, лечение и профилактика инфекционных, инвазионных и незаразных болезнейсельскохозяйственных животных. Сб. науч. тр. ТаджНИВИ.-Душанбе, 1995.-С.25-28.

88. Худойбердиев Э.Х., Алявия М.К. Координационные соединения железа (II), (III), меди (II) с пиридоксином, аспарагиновой и п-аминосалициловой кислотами// Коорд. химия.-1984.-Т. 10.- № 8.-с.1072-1075.

89. Шемякина Е.В. Исследование взаимодействия смешанных аммиачных комплексов меди с аргинином или лизином в растворе и коллагеном нативных фибрилл. //Коорд.химия 1991-Т.17.-вып. 6. стр 836-835.

90. Шехтман М.М. Руководство по экстрагенитальной патологии у беременных. М.: "Триада-Х", 1999. - 375 с.

91. Шехтман М.М., Бурдули Г.М. Болезни органов пищеварения и крови у беременных. М.: "Триада-Х", 1997. - 304 с.

92. Шимченко П.Я., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Орлов B.C. Комплексное лечение гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области с использованием тималина//Вестн. Хирургии.-1981.-т. 127.-№ 10.-С.94-97.

93. Щербакова В.И., Панкратова О.Б. Комплексные соединения железа (III) в водных растворах ди и трипептидов с донорным атомом в боковых цепях // Коорд. химия - 1991.- Т. 17.- Вып. 3.- с. 344-349.

94. Энциклопедия лекарств. Регистр лекарственных средств России/Под ред. Г.Л.Вышковского-ООО «РЛС-2002», 2002.-Вып.9.-1504 с.

95. Юнусходжаев А.Н., Мукарамова У.А., Хакимов Х.Х. Смешаные комплексы Со(П), Ni(II), Cu(II) с пиридоксином, глутаминовой, аспарагиновой кислотами// Коорд. химия -1993 Т. 19. 4-стр 315321.

96. Юсупов З.Н., Виниченко Г.М. Состояние комплексных частиц образующихся в системе Ре(П)-Ге(1Н)-глицин-вода// Вопросы физико-химических свойств веществ-Душанбе, Шамъ, 1995.-Вып 2.- стр 7590.

97. Юсупов З.Н., Виниченко Г.М. Состояние комплексных частиц, образующихся в системе Ре(П)-Ре(Ш)-ОГ-норвалин-вода// Межчастичные взаимодействия в растворах. -Душанбе, 1997-с.

98. Юсупов З.Н., Нурматов Т.М., Рахимова М.М. Цинксодержащие координационные соединения и аспекты их применения // Координационные соединения и аспекты их применения Душанбе. ТГНУ, 1991. -Ч 1.- с. 73-78.

99. Юшманов Г.И.Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Семенов А.Н. Применение тималина для лечения гнойных заболеваний конечностей//Вестн. хирургии. 1982.-т.129.-№9.с.93-96.

100. Яковлев Г.М., Новиков B.C., Хавинсон В.Х. Резистентность, стресс, регуляция. JL: Наука, 1990.-238с.

101. Яковлев Г.М., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. и др. Сравнительное изучение биологической активности тималина и синтетического пептида тимуса//Тез. докл. Научн. Конф. «Биохимия -медицине»., Л., 1988.-С.217-218.

102. Якубке Х.-Д., Ешкайт X. Аминокислоты. Пептиды. Белки.-М., Мир, 1985.-С.ЗЗ.

103. Якубов Х.М., Юсупов З.Н., Рахимова М.М., Нурматов М.М. Биологически активные координационные соединения // Проспект Душанбе, 1986 стр.2

104. Яцимирский К. Б. Моделирование в бионеорганической химии // ЖХВО им. Д. И. Менделеева. 1976. - т. 21. - С. 605-611.

105. Яцимирский К. Б., Волченскова И. И., Майданович Н. Я. Исследование методом ЭПР влияние цисдихлоридаминолатины (II) наактивность железосодежащих центров мембран митохондрий // Докл. АН СССР. 1985. Т. 283- №2 - с. 391.

106. Abiko T.,Sekino Н. Effects of two synthetic serum thymic factor analogues and four thymic factor fragments on the low E-rosette forming cells in patients with chronic renal failure//Chem.Pharm.Bull.-1982.-v.30.-№12.-p.4448-4456.

107. Aiuti F., Fiorelli M.,Quinti I. et al. Timopoietin pentapeptide treatment of primary immunodeficiencies//Lancet.-1983 .-v. 1 .-Кч 8324.-p.551-554.

108. Aiuti F., Sirianni M.C.,Paganelli R. et al A placebontrolled trial of thymic hormone treatment of recurrent herpes simplex labialis infection in immunodeficient hosts//Intern J. Clin. Pharmacol.Ther.Toxicol.-1983.-v.21.- №2.-p.81-86.

109. Amoedo M.L., Fernandez E., Borras M. et al. Successful pregnancy in a hemodialysis patient treated with erythropoietin (letter) // Nephron. -1995. Vol. 70. - № 2 - P. 262-263

110. Audhua Т., Scheid M.P., Goldstein G. Contrasting biological activities of thymopoetin and splenin, two closely related popypeptide products of thymus and spleen//Proc. Acad.sci.USA.-1984-V.81 ,-Л1>9.-p.2847-2849.

111. Auld D.S., Holmquist B. Carboxypeptidase A. Differences in the mechanisms of ester and peptide hydrolysis// Biochemistry. 1974. V7-p.4355-4361.

112. Bach J.-F., Bach M.-A., Blanot D., Bricas E., Charriere J., Dardenne M., Fournier G., Pleau J.M. Thymic serum factor (FTS)//Bull. Institute Pasteur.- 1978.-v.76.- №4.-p.325-398.

113. Basch R. S., Goldstein G. Induction of T cell differentiation in vitro by thymin, a purified polypeptide hormone of the thymus // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1974. - v. 71. - p. 1474 - 1478.

114. Bauer С. Erythropoietin from gene structure to therapeutic applications //J. Perinat. Med. - 1995. - Vol. 23. - P. 77-81.

115. Besarab A. Recombinant human erythropoetin: physiology, pathophysiology of anemia in renal failure, and economic aspects related to dosing // Am. J. Nephrol. 1990. - №. 10. - P. 2.

116. Biswas S.,Singh V.K., Rastogi A. et al.Stimulation of IL-2 production and CD aR expression by splenopentin analogs//Int. J. Immunopharmacol.- 1997.-vl9-№6.-p.341-345.

117. Bolla K., Djawari D., Kokoschka E.M. et al.Prevention of recurrences in frequently relapsing herpes labialis with thymopentin. A randomized double-blind placebo- controlled multicenter study//Surv. Immunol.Res. -1985.-v.4.-№ I (Suppl.)-p.37-47.

118. Boussios Т., Bertles J.F., Goldwasser E. Erythropoietin receptor characteristics during the ontogeny of hamster yolk sack erythroid cells // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 16. - № 1. - P. 17.

119. Breymann C., Major A., Richter C. et al. Recombinant human erythropoietin and parenteral iron in the treatment of pregnancy anemia: a pilot study // J. Perinat. Med. 1995. - Vol.23. - P. 89-98.

120. Burnet F. M. Role of the thymus and related organs in immunity // Brit. Med. J. 1962. - v. 2. - N 5308. - p. 807 - 811.

121. Castells A.,Terencio J.Ramirez A. et al .Thymopentin treatment in patients with chemotherapy-resistant lepromatous leprosy//Surv. Immonol.Res.-1985.-v.4.-№ 1 (Suppl.).-p.63-69.

122. Cavill I. Iron and erythropoiesis in normal subjects and in pregnancy //J. Perinat. Med. 1995. - Vol. 23. - P. 47-50.

123. Cheng I.K., Су C., Chan M.K., Yu L., et al. Correction of anemia in patients on continuous ambulatory peritoneal dialysis with subcutaneous recombinant erythropoietin twice a week: a long-term study // Clin. Nephrol. 1991. - Vol. 35. - P. 207.

124. De Maubeuge J., Haneke E., Djawari D. et al.Thymopentin treatment of herpes simplex infection. An open, monitored, multicenter study//Surv. Immunnol. Res.-1985.-v.4-№ l(Suppl.)-p.30-36.

125. Denes L., Szende В., Ember J., Hajos G., Szporny L., Rill A., Nyeki O., Schon J., Kisfaludy L. Иммуномодулирующие эффекты фрагментов тимопоэтина // Иммунология. 1986. - N 3. - с. 13-19.

126. Diezel W., Waschke S.R., Forner К. Induction and augmentation of mitogen-induced immune interferon production in human lymphocytes by a synthetic thymopoietin pentapeptide//Biomed. Biochim. Acta.-1984,-v.43.- №6.-p.9-12.

127. Djeha A., Perez-Arellano J.L., Hayes S.L. Cytokine-mediated regulation of transferrin synthesis in mouse macrophages and human T-lymphocytes//Blood.-1995.-Vol.85.-j\'o 4.-p. 1036-1042.

128. Edecer B.L., Rasmussen G.T., Britigan B.E. Bicarbonate and phosphate ions protect transferrin from myeloperoxidase-mediated damage//J. Leukos. Biol.-1995.-V.58.-jV2 l.-p.59-64.

129. Falchetti R., Bergesi G., Eshkol A. et al. Pharmacological and biological properties of a calf thymus extract (TP-1) // Drugs Exp. Clin. Res. 1977. - v. 3. - p. 39 - 47.

130. Fiorilli M., Sirianni M. C., Sorrentino V. et al. In vitro enhancement of one marrow natural killer cells after incubation with thymopoietin32.36 (TP 5) // Thymus. - 1983. - v. 5. - N 5 - 6. - p. 375 - 382.

131. Fravckimont P., Bolla K. Rationale for thymopeptin as therapeutic agent in rheumatoid arthritis// Surv. Immunol.Res.-1985.-v.4.-№ 1 (Suppl.).-p.70-75.

132. Gershwin M. E., Ahmed A., Steinberg A. D. et al. Correction of T cell function by thymosin in New Zealand mice // J. Immunol. 1974. - v. 113.-p. 1068-1071.

133. Goldstein A. L., Cohen G. H., Rossio J. L. et. al. Use of thymosin in the treatment of primary immunodeficiency disease and cancer // Med. Clin. North. Amer. 1976. - v. 60. - N 3. - p. 591 - 606.

134. Goldstein A. L., Low T. L. K., McAdoo M. et al. Thymosin сц: isolation and sequence analysis of an immunologically active thymic polypeptide // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - v. 74. - N 2. - p. 725 -729.

135. Goldstein A.L., Wara D.W., Ammann A.J. et al. First clinical trial with thymosin: reconstitution of T-cell in patients with cellular immunodeficience disease//Transplant. Proc.-1975 .-v.7-№ 1 (suppl.).-p.681 -686.

136. Goldstein G. Isolation of bovine thymin: a polypeptide hormone of the thymus // Nature. 1974. - v. 247. - N 435. - p. 11 - 14.

137. Goldstein G., Scheid P., Boyse E. A. et al. A synthetic pentapeptide with biological activity characteristic of the thymic hormone thymopoietin //Science. 1979. - v. 204.-N 4399. - p. 1309- 1310.

138. Good R. A., Dalmasso A. P., Martinez C. et al. The role of the thymus in development of immunological capacity in rabbits and mice // J. Exp. Med. 1962. - vol. 116. - p. 773 - 795.

139. Hadden J.W.,Specter S.,Galy et al.Thymic hormones, interleukines, endotoxin and thymomimetic drugs in T lymphocyte ontogeny//Advances in Immunopharmacology/Ed. L.Chedid, J.W.Hadden, F.Soreafico et al.Oxford: Pergamon Press, 1986.-p. 487-497.

140. Hall F.R.Antigens and immunity in Theileria annulata//Parasitol. Today.-1988.-v.4.-№ 2.-p.36-40.

141. Handzel Z.T.,DolfinZ.,Klevin S. et al.Effect of thymic humoral factor on cellular immune functions of normal children and of pediatric patients with ataxia telangiectasia and Down's syndrome//Pediatr.Res.-1979.-v.13.- №7.-p.803-806.

142. Huch A., Eichhom K.H., Danko J., Lauener P.A., Huch R. Recombinant human erythropoetin (rh-EPO) in the treatment of post partum anemia // Obstet. Gynecol. 1992. - Vol.80. - P. 127.

143. Johansen J.T., Klyosov A.A., Vallee B.L. Circular dichroism inhibitor titration of arsanylazotyrosine 248 carboxypeptidase A// Biochemistry.-1976,-v. 15-p.296-303.

144. Kitt W.S., Rode B.M. Complex formation of nickel ion with aliphatic dipeptides // Linor. Chim Acta 1982. v. 66 N 3 - p 105 - 112.

145. Klein J.J., Goldstein A.L., White A. Enhancement of in vivo incorporation of labeled precursors into DNA and total protein of mouse lymph nodes after administration of thymic extracts // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1965.-V. 53.-N4.-p. 812-817.

146. Lash A., Saleem A. Iron metabolism and its regulation//Ann. Clin. Lab. Sci.-1995.-Vol.25.-№ l.-p.20-30.

147. Le Borgne F., Beacount J.P. Cobalt-carbonyl complexes of some peptides as infrared markers//Tetrahedron Lett.-1988.-v.29.-№ 44.-p.5649-5652.

148. Low T. L. K., Goldstein A. L. Chemical characterization of thymosin p4 n // J. Biol. Chem. 1982. - v. 257. - N 2. - p. 1000 - 1006.

149. Martelli M. F. Velardi A., Rambotti P. et al. The in vivo effect of a thymic factor (thymostimulin) on immunologic parameters of patients with untreated Hodgkin's disease // Cancer Res. 1982. - v. 50. - N 3. - p. 490 -497.

150. McGarley M. E. Tulpule F., Cai J. et al. Emerging treatments for epidemic (AIDS-related) Kaposi" s sarcoma// Curr.Opin. Oncol.- 1998. V.10.№5.p. 413-421.

151. McMahon L.P., Dawborn J.K. Experience with low dose intravenous and subcutaneous administratoin of recombinant human erythropoietin // Am. J. Nephrol. 1990. - Vol. 10. - P.404.

152. Miller J. F. Immulogic function of the thymus // Lancet. 1961. - v. 2.-p. 748-749.

153. Miller J. F. Role of the thymus in transplantation immunity // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1962. - v. 99. - p. 340 - 354.

154. Molin L., Schmid F., Bolla K. Some observations on various dose regimens of thymopentin treatment in rheumatoid arthritis//Surv. Immunol.Res.-l985.-v4.-№ I (Suppl.)-p.76-80.

155. Morozov V.G.,Khavinson V. Kh. Natural and synthetic peptides as therapeutic for immune dysfunction // Int. J.Immunopharmacology. 1997.-v. 19,-9/10-p. 501-505.

156. Morozov V.G., Khavinson V.Kh. Pharmaceutical preparation for the therapy of immune deficiency conditions. United States Patent Лг> 5.538.951. 1996.

157. Morosov V.G.,Khavinson V.Kh. Thymus-gland preparation and method for producting same. United States Patent jYo5.070.076, 1991.

158. Morrison W.J., Goddeeris B.M. The role of the MHC in immunity of cattle to the protozoan theileria parva//Ann. Rech. Veter.-1989.-v.20.-jNk 3.-p.385-388.

159. Mrabet В., Jouini M., Huet J., Lapluye G. Potentiometric, colorimetric and spectroscopic study of copper (II) complex of leucine -enkephalin and tripeptides, containing tyrosine // J. Clin, et phys chim. Biol - 1992.- v 89.- №11-12. p. 2187-2205.

160. Nash L., Good R. A., Hatzfeld A. et al. In vitro differentiation of two surface markers for immature T cells by the synthetic pentapeptide, thymopoietin32-36 // J. Immunol. - 1981. - v. 126. - N I. - p. 150- 153.

161. Oria R., Sanchez L., Houston T. Effect of nitric oxide on cellular iron metabolism in К 562 human erytroleukemia cells//Blood/-l995/-Vol.85.-№ 10.-p.2962-2966.

162. Pleau J.M., Gastinel L.N.,Bach J.F., F. Thymulin//Methods inenzymology/Ed.S.P.Colowick.,N.O.Kaplan.Orlando e.a.:Acad Press.,Inc.-1985.-V. 116.-p.269-279.

163. Ross J. mRNA stability in mammalian cells//Microbiol. Rev.-1995.-Vol.59.-Xa 3.-p.423-450.

164. Schafer L. A., Goldstein A. L., Gutterman J. U., Hersh E. M. In vitro and in vivo studies with thymosin in cancer patients // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1976. - v. 277. - p. 609 - 620.

165. Schulof R. S., Lloyd M. S., Cleary P. A. et. al. A randomized trial to evaluate the immunorestarative properties of synthetic thymosin alpha 1 in patients with lung cancer // J. Biol. Response Mod. 1985. - v. 4. - N 2. -p. 147- 158.

166. Selligman P.A., Kovar J., Gelfand E.W. Lymphocyte proliferation is controlled by both iron availability and regulation of iron uptake pathways//Pathobiol.-1992.-Vol.60.-X« I .-p. 19-26.

167. Semina О. V., Semenets T. N., Deigin V. I. ct al. Effect of the peptide of thymus origin (synthetic thymohexine RKNVYR) on hemopoietic cell progenitors in intact and irradiated animals // Immunol. Lett. - 1996. - v. 51. - N 3. - p. 137 - 140.

168. Serrate S. A. Schulof R. S., Leondaridis L. et. al. Modulation of human natural killer cell cytotoxic activity, lymphokine production and interleukin 2 receptor expression by thymic hormones // J. Immunol. -1987. - v. 139. - N 7. - p. 2338 - 2343.

169. Simon M., Djavari D., Hornstein O.P., Bolla K. Thymopentin treatment in a patient with pluriorifical pyoderma vegetans//Surv.Immunol. Res.-1985.-v.4.-Xo 1 (Suppl).-p.l25-128.

170. Singh D.K., Jagdish S., Gautam D.P. Cell mediated immunity in tropical theileriosis (Theileria annulata)//Res. Vet. Sci.-1977.-v.23.-jM» 3,-p.391-392.

171. Skotnicki A. B. Biologiczna aktywnosc I wlasciwoscifizykochemiczne wyciagu grasiczego TFX // Polski Tygodnik lekarski. -1978. T. 33. - N 28. - p. 1119 - 1122.

172. Sosa M.,Saha A.R.,Hadden E.M.,Hadden J.W. Immunological profile of methyl inosine monophospate//Immunotherapy of infections/Ed K.N.Masihi. New York: Marcel Dekker, 1994, p.107-113.

173. Spangello B. L., Hall N. R., Goldsei A. L. Biology and chemistry of thymosin peptides. Modulators of immunity end neuroendicrine circuits // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1987. - v. 496. - p. 196 - 204.

174. Spivak J.L. Serum immunoreactive erythropoietin in heals and disease // J. Perinat. Med. 1995. - Vol. 23. - № 1-2. - P. 13-17.

175. Trainin N., Bejerano A., Strahilevitch M. et al. A thymic factor preventing wasting and influencing lymphopoiesis // J. Med. Sci. 1966. -v. 2. -N5. - p. 549-559.

176. Tlainin N.,Rotter V.,Yakir J. et al. Biochemical and biological properties of THF in animal and human models//Ann.N.Y.Acad.Sci.-1979.-v.332.-p.9-14.

177. Umiel Т., Pecht M., Trainin N. THF, a thymic hormone promotes interleukline-2 production in infact and thymus-deprived mice // J. Biol. Response Molif- 1984. v. 3. - №4 - p.423-434.

178. Varsano J.,Schonfeld T.M.,Matoth J. et al. Severe disseminated adenovirus infection successfully treated with a thymic humoral factor THF//Acta Paediatr. Scand.-1977.-v.66.- №3.-р.329-334.

179. Veys E.M., Mielants H., Vergruggen G. Thymic hormones and interferons in the treatment of rheumatoid arthritis//Scand.J.Rheurnatol.-1988.-v.76 (Suppl.).-p.297-304.

180. Wara W.M., Amman A.J., Wara D.W. Effect of thymosin and irradiation on immine modulation in head and neck esophageal cancer patiens//Cancer Treat Rep.-1978.-v.62.- №1 l-p.1775-1778.

181. Ward D.W.,Goldstein A.L.,Doyle N.E.,Ammann A.J. Thymosin activity in patients with cellular immunodeficiency//New Engl.J.Med.-1975.-v.292.- №2.-p.70-74.

182. Widle J.K.H. East coast fever//Adv. Vet. Sci.-1967.-v.ll.-№ 1.-p.207-259.

183. Zatz M.M., Goldstein A.L. Enhancement of murine thymocyte cytotoxic T cell responses by thymosin // Immunopharmacology. 1983. -v. 6.-Nl.-p. 65-74.

184. Zatz M. M., Goldstein A. L. Mechanism of action of thymosin. I. Thymosin fraction 5 increases lymphokine production by nature murine T cell responding in a mixed lymphocyte reaction // J. Immunol. 1985. - v. 134.-N2.-p. 1032- 1038.

Информация о работе

Зубайдов, Тохир Убайдович
кандидата биологических наук
Душанбе, 2004
ВАК 03.00.04

Диссертация

Влияние тимофера на биохимические показатели организма животных при некоторых патологических состояниях - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы