Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние сочетанного воздействия 137Cs и ионов свинца на некоторые показатели клеточного и гуморального иммунитета, и факторы неспецифической резистентности животных

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние сочетанного воздействия 137Cs и ионов свинца на некоторые показатели клеточного и гуморального иммунитета, и факторы неспецифической резистентности животных"

На правахрукописи

СПИРИДОНОВ Михаил Борисович

ВЛИЯНИЕ СОЧЕТАННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ И ИОНОВ СВИНЦА НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА, И ФАКТОРЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЖИВОТНЫХ

03.00.01 - радиобиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2004

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина»

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Пак Василий Васильевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, заслуженный деятель науки РФ, профессор Журавлев Александр Иванович

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник Осипов Андреян Николаевич

Ведущая организация:

Государственное научное учреждение «Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии»

Защита диссертации состоится « 10 » марта 2004 года в 1230 часов на заседании диссертационного совета Д220.042.04 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина».

Автореферат разослан

февраля 2004 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доцент

В. Д. Фомина

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Радиоактивное загрязнение внешней среды приобрело глобальный характер. В производственных и иных ситуациях люди и животные подвергаются внешнему и внутреннему облучению. Источником внутреннего облучения могут быть радионуклиды различной тропности. По данным литературы, эффект инкорпорированных радионуклидов значительно выше, чем внешнего облучения. Он связан как с радиоактивным излучением распадающихся элементов, так и с их воздействием на метаболические процессы в тканях и жизненно важные клеточные структуры.

Среди огромного разнообразия загрязняющих внешнюю среду радиоактивных элементов основное место занимает радиоактивный цезий. Площадь территории Беларуси, России и Украины с плотностью загрязнения данным радионуклидом более 1480 кБк /м2 составляла 3,1 тыс. км2, с плотностью загрязнения 555 - 1480 кБк /м2 - 7,1 тыс. км2, 185 - 555 кБк /м2 около 17,9 тыс. км2, 37 - 185 кБк /м2 - 76,1 тыс. км2. Длительное поступление радиоцезия животным приводит к развитию хронического радиационного поражения с проявлением таких последствий, как злокачественные новообразования, эндокринные нарушения, снижение плодовитости, преждевременное наступление смерти. Причиной гибели животных часто являются инфекционные заболевания в результате снижения иммунологической реактивности.

Однако в реальных ситуациях, в условиях ухудшения экологической обстановки, на человека и животных радионуклиды все чаще действуют не изолировано, но в сочетании с различного рода факторами нелучевой природы. Проводимые на территории Чернобыльского "радиоактивного следа" радиоэкологические исследования поставили проблему изучения сочетанного воздействия ионизирующего излучения и часто встречающихся факторов нерадиационной природы (пестициды, тяжелые металлы, нитраты, др.), в частности свинца, способного модифицировать эффекты радиации.

Такое модифицирующее влияние химических факторов на лучевые повреждения иммунитета изучено недостаточно. Кроме того, нет достаточной ясности в вопросах коррекции иммунологических нарушений при сочетанном действии на организм радиационных и химических факторов, и препаратов дающих хороший эффект при таких воздействиях.

Следовательно, имеется реальная необходимость в дальнейшем изучении раздельного и сочетанного влияния радиационных и химических факторов на иммунную систему и изучении эффектов, вызванных воздействием таких факторов. Это позволит яснее понять механизмы происходящих нарушений и разработать методы и препараты, которые помогут снизить неблагоприятное влияние

му, а значит и на организм в целом.

химических и радиационных загрязнителей внешней

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ. БИБЛИОТЕКА ]

СПетер^рг

Цели и задачи исследования. Целью данной работы явилось изучение состояния клеточных и гуморальных факторов системы иммунитета, а также некоторых факторов неспецифической резистентности у животных при раздельном и сочетанном действии инкорпорированного и ионов свинца, а также коррекции функционального состояния данной системы при помощи ряда препаратов.

Исходя из этого, были определены задачи исследования:

1. Определить содержание Cs-137 и свинца в органах и тканях исследуемых животных при ежедневном поступлении в организм.

2. На основании иммунологических, биохимических, цитохимических и гематологических исследований оценить состояние иммунной системы мышей в зависимости от вида оказываемого воздействия.

3. Изучить влияние иммуностимулирующего препарата Миксоферон и антиокси-данта Амбиол на иммунную систему при сочетанном воздействии цезия-137 и соли свинца.

4. Оценить эффективность коррекции иммунного статуса вышеназванными препаратами.

Научная новизна:

1. Впервые проведено комплексное исследование влияния длительного сочетанного воздействия инкорпорированного I37Cs и ионов свинца на клеточные и гуморальные факторы системы иммунитета, а также показатели неспецифической резистентности мышей.

2. Установлены общие закономерности накопления и содержания 137Cs и ионов свинца в органах и тканях животных при длительном поступлении в организм.

3. Определена реактивность кровеносной и иммунной системы мышей на введение иммуностимулятора и антиоксиданта в условиях сочетанного воздействия радиационного и химического факторов.

Научно - практическое значение работы:

1. В результате проведенных исследований дана сравнительная оценка влияния радиационного и химического факторов на иммунную систему животных при раздельном и сочетанном их воздействии.

2. Впервые показана возможность коррекции иммунного статуса животных препаратами Амбиол и Миксоферон при длительном сочетанном радиаци-онно-химическом воздействии.

3. Материалы диссертации вошли во временное наставление по применению препарата Амбиол для повышения резистентности при стрессах и воздействии на организм радиационно-химических факторов внешней среды.

4. Выпущен информационный листок: Применение теста люминолзави-симой хемилюминесценции нейтрофилов периферической крови для оценки их функциональной активности при радиационно-химическом воздействии: Информационный листок № 129-99/ МособлЦНТИ, 1999,- 3 с.

5. Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре радиобиологии, рентгенологии и гражданской обороны при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами ветеринарного и ветеринарно-биологического факультетов, а также при. выполнении научно-исследовательских, дипломных и курсовых работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 123 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав: материалы и методы исследования, результаты исследований, обсуждение результатов, выводов, списка литературы и приложения. В работе имеются 24 таблицы и 10 рисунков. Список литературы включает 167 отечественных и 14 иностранных источников.

Публикация работ. По материалам диссертации опубликовано 4 печатных работы.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Данные о накоплении и содержании '"Се и ионов свинца в органах и тканях исследуемых животных при длительном их поступлении в организм.

2. Результаты и выводы, полученные при изучении состояния иммунной системы и факторов неспецифической защиты животных, содержащихся в условиях раздельного и сочетанного влияния инкорпорированного шСв и ионов свинца.

3. Эффективность коррекции иммунного статуса препаратами Амбиол и Миксоферон при длительном сочетанном радиационно-химическом воздействии.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась на кафедре радиобиологии, рентгенологии и гражданской обороны ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина». Данная работа - часть комплексных исследований, проводимых на кафедре по изучению влияния радионуклидов и солей тяжелых металлов на клинико-физиологическое состояние животных, длительное время пребывающих в экологически неблагоприятных условиях, сложившихся после аварии на Чернобыльской АЭС.

Объект исследования — белые беспородные мыши-самцы, разведения питомника лабораторных животных РАМН «Крюково». Несмотря на значительную вариабельность биологических показателей, обычно наблюдаемую в экспериментах на беспородных животных, именно на беспородных животных можно получить наиболее реальную оценку степени риска неблагоприятного воздействия на популяцию данного вида.

Животные были разделены на 9 групп (8 экспериментальных и 1 контрольная), в зависимости от вида воздействия и применяемого биопрепаратал по 11 голов в каждой группе.

1 группа - животные этой группы использовались в качестве контроля.

2 группа - животные этой группы получали в течение 30 суток питьевую воду, содержащую ионы РЬ2+ в концентрации 10 ПДК (I мг/л) по ГОСТу воды хозяйственно-технического назначения.

3 группа - эта группа животных получала с кормом изотоп С8 с активностью, формирующей в организме мыши поглощенную дозу 0,3 Гр за 30 суток.

4 группа - животные этой группы находились под сочетанным воздействием ионов свинца и изотопа '"Се. Ионы РЬ2+ в количестве 10 ПДК (по ГОСТу воды хозяйственно-технического назначения) поступали с питьевой водой, а изотоп '37С8 с активностью, формирующей в организме мыши поглощенную дозу 0,3 Гр за 30 суток поступал с кормом.

5 группа - сочетанное воздействие на мышей ионов свинца и изотопа '"Се в тех же количествах, что и для 4 группы. Проводилась ежедневная обработка животных иммуностимулирующим препаратом Миксоферон по 0,03 дозы/гол в последнюю неделю воздействия свинца и Се-137.

6 группа - воздействие аналогичное таковому в группах 4 и 5. Ежедневное введение животным препарата Амбиол в дозе 3,8 х 10*3 мг/гол в сутки, в последнюю неделю эксперимента.

7 группа - воздействие как в группах 4,5 и 6. В качестве иммуностимулирующего препарата животным ежедневно вводили смесь Миксоферона и Амбио-

ла в дозах: Миксоферон - 0,03 дозы/гол в сутки, Амбиол - 3,8 х 10 мг/гол в сутки.

8 группа - то же воздействие, что и в предыдущих четырех группах. Животным этой группы вводился Миксоферон в течение 7 дней перед началом воздействия изучаемых факторов. Количество вводимого препарата - 0,03 дозы/гол в сутки.

9 группа - Животным данной группы вводили Амбиол в течение 7 дней перед началом воздействия изучаемых факторов. Доза препарата 3,8 х 10"3 мг/гол в сутки.

Таблица 2

Схема экспериментального воздействия на животных

Номер группы Кол-во голов Вид воздействия Вводимый препарат, дозы

1. 11 Контроль Нет

2. Питьевая вода, содержащая ионы РЬ2* в количестве 10ПДК. Her

3. 11 Корм, содержащий изотоп ''"Сз с активностью, формирующей за 30 суток поглощенную дозу 0,3 Гр\гол. Нет

4. U Сочетанное воздействие ионов РЬ2* и "'С® в количествах аналогичных группам 2 и 3. Hen

5. 11 То же, что и группа 4, Миксоферон 0.03 дозы на голову в сутки

6. 11 Тоже Амбнол в дозе 3,8 х 10 3 мг на голову в сутки

• 7. 11 Тоже Миксоферон и Амбиол в указанных выше дозах

8. 11 То же Миксоферон до начала РХ воздействия

9. 11 Тоже Амбиол до начала РХ воздействия

Исследования можно условно разделить на две серии экспериментов (см. табл. 1). С одной стороны изучалось раздельное и сочетанное влияние инкорпорированного и ионов свинца на иммунологические показатели и факторы неспецифической резистентности организма животных (группы 2 - 4), с другой — влияние иммуностимулятора Миксоферон и нового антиоксиданта Амбиол на указанные показатели при сочетанном действии на организм животных свинца и цезия (группы 5 - 9). Применялись различные схемы введения препаратов.

В качестве источника ионов свинца использовали ацетат свинца, который поступал в организм мышей в течение 30 дней с питьевой водой в концентрации 1 мг/л.

Цезий-137 в виде соли СвС1 животные получали с кормом (10,06 х 103 Бк/кг) в течение 30 дней. Поглощенная доза в организме мыши к концу опыта составила 0,3 Гр.

Для определения активности шСв, содержащегося в организме экспериментальных животных, каждые 5 дней проводилась прижизненная спектрометрия животных в специальных контейнерах на гамма-спектрометре производства НПП «Доза» с использованием пакета прикладных программ «Прогресс 3.2». По результатам спектрометрии определялась динамика накопления 137 Се в организме мышей.

Через 30 суток с начала эксперимента исследованиям были подвергнуты клеточное и гуморальное звенья иммунной системы, а также факторы неспецифической резистентности экспериментальных животных.

Для оценки общего клинического состояния животных учитывали их подвижность, реакцию на внешние раздражители, прием корма и воды, массу тела. Количество эритроцитов и лейкоцитов в крови животных определяли на приборе «Рюовсак» фирмы «МеШсог» (Венгрия) по стандартной методике. Для оценки состояния факторов клеточного и гуморального иммунитета экспериментальных животных определяли количество ядросодержащих клеток в селезенке и костном мозге мышей методом Дж. Клауса; относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов в крови, селезенке и костном мозге животных определяли в одном препарате методом розеткообразования с эритроцитами барана и зимозаном, оп-сонизированным комплементом; концентрацию иммунных белков в плазме крови животных по реакции помутнения с сульфатом цинка. Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли по интенсивности биохемолюминесценции клеток при их стимуляции зимозаном, учитывались также процент фагоцитоза и фагоцитарный индекс. Для определения бактерицидной активности и энергетического баланса нейтрофилов крови исследуемых животных изучалась активность миелопероксидазы и содержание неферментных катионных белков в этих клетках спектрофотометрически, а также содержание в них гликогена цитохимическим методом. В качестве показателей неспецифической резистентности использовались концентрация лизоцима и СЗ фрагмента комплемента в плазме крови исследуемых животных. Выделение этих фракций проводили методом электрофореза в градиентном ПААГе. Идентификацию фракций проводили по молекулярной массе, в качестве стандарта молекулярной массы использовали маркер, содержащий в своем составе СЗ фрагмент комплемента и лизоцим. Содержание общего белка в плазме крови определяли по биуретовой реакции. Определялось состояние клеточных мембран при воздействии изучаемых факторов на примере мембран эритроцитов. В качестве теста использовали метод кислотного гемолиза эритроцитов. Кроме того, проводилось определение содержания шСв и ионов свинца в отдельных органах и тканях животных для изучения распределения и накопления этих

элементов. Определение концентрации свинца проводили методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии на приборе «8РЕКТЯ АА». Подготовку проб к анализу осуществляли методом мокрого озоления. Гамма-спектрометрию органов и тканей животных проводили на спектрометре НПП «Доза» при помощи пакета программ «Прогресс 3.2». Весь полученный экспериментальный материал был обработан методом вариационной статистики по Стьюденту.

2. 2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Результаты дозиметрических и токсикологических исследований

Анализ результатов показывает, что наибольшее содержание цезия наблюдается в мышечной ткани (см. рис. 1). Содержание цезия в костной ткани почти в два раза ниже. Тем не менее, можно предположить, что костный мозг подвергается значительному воздействию, что обусловлено как высоким содержанием "'Се в костной ткани, так и воздействием излучения со стороны мышечной ткани. Удельная активность селезенки, почек и печени практически одинакова и незначительно отличается от таковой в мышечной ткани. Самая низкая удельная активность зарегистрирована в коже и плазме крови.

Было также изучено содержание свинца в организме животных. За время эксперимента в организм мыши поступило в среднем 200 мкг свинца на 1 голову. При используемой концентрации в питьевой воде животные не проявляли признаков свинцовой интоксикации. Наиболее интенсивно свинец накапливается в почках (см. рис. 2). Концентрация свинца в печени и селезенке практически одинакова и почти в два раза ниже таковой в почках. Содержание свинца в костной ткани на 77% ниже чем в почках. Хотя по данным литературы свинец считают ос-теотропным элементом можно заключить, что при введении животным ионов свинца в течение месяца в концентрации 10 ПДК не происходит его существенного накопления в скелете. Кожа и плазма крови показали наименьшее содержание свинца.

2.2.2. Влияние раздельного и сочетанного поступления 137Сэ

и ионов свинца на физиологические н иммунологические показатели экспериментальных животных

Для оценки общефизиологического статуса экспериментальных животных определялись гематологические показатели и лейкоцитарная формула крови. Отсутствуют достоверные изменения количества эритроцитов и гемоглобина во всех исследованных группах. При этом наблюдается достоверное снижение количества лейкоцитов во всех группах животных. Степень снижения не зависела от вида воздействия и составила около 50% от показателей контроля. Абсолютные значения находились на нижней границе физиологической нормы. Лейкоформулы экспериментальных животных четко указывают, что такое понижение происходит за счет достоверного уменьшения количества сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов. Кроме того наблюдается моноцитопения не доходящая до достоверных значений, в группах получавших изотоп наблюдается увеличение процента эозинофилов.

Полученные данные полностью соответствуют результатам исследований, проведенных сотрудниками нашей кафедры в Брянской области. Так в частности Саулиным В. И., в экспериментах на КРС при поглощенной дозе в организме коров 0,1 - 0,2 Гр, в лейкограмме отмечалась эозинофилия (14,5%) и нейтропения (13,9% - за счет сегментоядерных нейтрофилов). Можно заключить, что данная реакция вызвана только воздействием инкорпорированного цезия, т. к. наблюдается она только в тех группах, которые получали указанный изотоп. У животных, получавших с питьевой водой только ионы свинца процентное содержание эози-нофилов и сегментоядерных нейтрофилов не имеет отличий от контрольного уровня.

Для оценки неспецифических факторов защиты организма и гуморальных факторов иммунитета были определены содержание СЗ фрагмента комплемента и лизоцима, а также иммунных белков в плазме крови исследуемых животных (см. табл. 2). При воздействии ионов свинца снижается концентрация лизоцима на 31 % по сравнению с контролем. При сочетанном воздействии свинца и цезия, кроме еще большего снижения содержания лизоцима до 56 % от контрольного, понижается количество иммунных белков на 27% от контрольных показателей.

Для оценки активности фагоцитов у экспериментальных животных использовался новый комплекс методов. Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли по их способности к генерации активных форм кислорода (АФК), которая оценивалась по уровню люминесценции нейтрофилов, при их стимуляции экзогенными факторами. Данная методика позволяет проводить анализ в микрообъеме цельной крови и не требует выделения чистой фракции нейтрофилов. Кроме того после проведения реакции легко определяется процент фагоцитоза и

фагоцитарный индекс. Помимо этого, оценивался уровень бактерицидных ферментов нейтрофилов спектрофотометрическим методом, и энергетический баланс клеток по содержанию в них гликогена.

Таблица 2

Концентрация лизоцима, комплемента и иммунных белков в плазме крови мышей при раздельном и сочетанием поступлении в организм цезия и ионов свинца

Контроль. МПДКРЬ2* 0,3 Гр "7С$ Сочетанное РЬ + Св

Концентрация лн-зопима, мг/мл 1,49 ± 0,24 1,02 + 0,10* 1,47 ±0,19 0,84 ±0,11"

Концентрация СЗ фрагмента комплемента, мг/мл 1,50 ±0,21 1,95 ±0,32 1,79 ±0,23 1,54 + 0,25

Концентрация иммунных белков, мг/мл 4,14 ±0,39 4,14 ±0,41 4,16 ±0,32 3,02 ±0,35"

достоверное отличие от контроля (р < 0,05)

Время, с

-♦-Контроль -я-РЬ -*-Св + РЬ

Рис. 3. Динамика биохемолюминесценции нейтрофилов периферической крови мышеб при раздельном и сочетанном введении цезия и ионов свинца

Показано достоверное угнетение способности нейтрофилов к генерации АФК, которое в максимальной степени проявляется в группе, получавшей свинец (см. рис. 3). Так интенсивность люминесценции для пика на 3-й минуте у этих животных снижена на 77 % по отношению к контролю. При сочетанном воздей-

ствии свинца и цезия люминесцентный ответ нейтрофилов снижен на 63 % от контрольного. При воздействии инкорпорированного цезия снижение люминесценции происходило на 46 % по сравнению с контрольными показателями.

Эти данные полностью коррелируют с показателями процента фагоцитоза, фагоцитарного индекса и активностью бактерицидных ферментов у исследуемых животных. При поступлении в организм животных ионов свинца происходит достоверное уменьшение процента фагоцитоза, фагоцитарного индекса, активности миелопероксидазы (МП) и уровня гликогена в клетках. Инкорпорирование цезия оказывает достоверное влияние только на фагоцитарный индекс нейтрофилов. При сочетанном воздействии наблюдается нормализация исследуемых показателей. Наблюдается тенденция только к понижению уровня гликогена.

Для оценки влияния исследуемых факторов на показатели клеточного иммунитета было определено количество ядросодержащих клеток в селезенке и костном мозге животных, а также содержание Т- и В лимфоцитов в крови и указанных органах. Зарегистрировано достоверное снижение клеточности исследуемых органов при всех видах оказываемого воздействия. Так при изолированном воздействии ионов свинца клеточность селезенки и костного мозга падает на 22 % и 15 % соответственно. При поступлении в организм цезия происходит падение клеточности на 31 % и 24 % соответственно. При сочетанном воздействии кле-точность селезенки уменьшается на 16 % от контроля, а костного мозга - на 38 %.

Отмечено достоверное снижение процента В-клеток в исследуемых органах при воздействии инкорпорированного цезия па 28,33 и 36 % соответственно. Со-четанное воздействие характеризуется снижением процента Т-лимфоцитов в крови и селезенке исследуемых животных на 24 % и 25 % соответственно, а также снижается процент В-клеток в селезенке и костном мозге на 46 и 53 % соответственно. Изолированное поступление ионов свинца не оказывало существенного влияния на эти показатели, наблюдалась лишь тенденция к их снижению (р > 0,05).

Таким образом, как раздельное , так и сочетанное воздействие изучаемых факторов приводит к возникновению в организме животных иммунодефицитного состояния. Под влиянием свинца угнетаются фагоцитарные реакции организма и факторы неспецифической резистентности. Инкорпорирование цезия приводит к угнетению фагоцитарных реакций и В-клеточного звена иммунной системы. Со-четанное поступление ионов свинца и радиоцезия приводит к ослаблению фагоцитоза, факторов неспецифической защиты а также клеточного и гуморального иммунитета.

Таблица 3

Процентное содержание Т- и В-лимфоцитов в крови и лимфоидных органах мышей при раздельном и сочетанием введении 137С$ и ионов свинца

ч Номер группы . Вид воздействия Кровь Селезенка * Костный мозг

Т-клетки | В-клетки - Т-клепем В-клетки ' В-клетки

1. Контроль 36,1 ± 1,7 15,511,2 38,7 ±2,7 23,5 ±2,6 25,0 ±2,9

2. 10ПДК РЬ1+ 34,3 ± 1,2 12,9 ±1,8 35,3 ±4-,8 19,1 ±2,6 21,0 ±1,6

3. 03 Гр ,57С* 37,8 + 2,8 11,1 ±1,4' 39,9 ±2,8 15,7 + 2,1" 15,9 + 3,3*

4. Сочетанное РЬ + С$ 27,4 + 2,4' 13,1 ± 1,7 28,9 ±4,4* 12,6 ±1,9* 11,7 ±2,2*

* - достоверное отличие от контроля (р < 0,05)

2.2.3. Влияние Амбиола и Миксоферона на физиологические

и иммунологические показатели животных при сочетанном воздействии Сэ и ионов свинца

Второй главной задачей нашего исследования являлась задача коррекции нарушений в иммунной системе экспериментальных животных. Для этого нами использовались иммуностимулятор Миксоферон и новый антиоксидант Амбиол. Препараты вводились как по отдельности, так и в сочетании.

Ведение изучаемых препаратов в различных комбинациях не оказывает существенного влияния на содержание гемоглобина и эритроцитов в крови животных исследуемых групп.

Количество лейкоцитов претерпевает существенные изменения. При введении Миксоферона или Амбиола в последнюю неделю радиационно-химического воздействия количество лейкоцитов достоверно превышало контрольный уровень на 27% и 74% соответственно (р < 0,05). Если сравнивать эти данные с группой не получавшей препараты, то наблюдается подъем количества лейкоцитов в 2,5 и 3,5 раза соответственно и выход данного показателя за рамки физиологической нормы. Это свидетельствует о повышении пролиферативной активности клеток костного мозга и возникновении напряженного состояния в органах кроветворения.

Рассматривая абсолютные показатели лейкоформулы необходимо отметить сильную эозинофилию, особенно при воздействии Амбиола, а также увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов и лимфоцитов превышающее контрольные показатели. В группе получавшей Амбиол зарегистрирован моноци-тоз. В остальных группах количество лейкоцитов снижено по сравнению с кон-

тролем в среднем на 58%, и не отличается от такового у животных, которым препараты не вводились.

Введение Миксоферона как до, так и на фоне радиационно-химического воздействия достоверно увеличивает концентрацию иммунных белков в крови животных до значений контрольной группы. Оба препарата при введении до начала неблагоприятного воздействия увеличивают концентрацию лизоцима, также до показателей контроля. Концентрация СЗ фрагмента комплемента достоверно снижается при введении Амбиола и, не имеет достоверных отличий от контрольной у животных остальных групп (см. табл. 4).

Таблица4

Содержание неспецифических и гуморальных факторов иммунитета у экспериментальных животных при введении исследуемых препаратов •

Контроль РЬ + С« РЬ + С* Миксоферон РЬ + С$ Амбиол 7 РЬ + Сз Ми кс. + Амб Миксоферон РЬ + С» Амбиол РЬ + С8

Кона, лизоцима, мг/мл 1,49 ±0,24 0,84±0,11* 0,91 ±0,25 0,82±0,13* 0,71±0,10* 1,06±0,26 1,69±0,20* *

Конц.СЗ фрагмента комплемента, мг/мл 1,50 ±0,21 1,54± 0,25 1,75 ±0Д1 0,65±0,12* 1,71 ±0,17 1,62±0Дб 0,94 ±0,22

Конц. иммунных белков, мг/мл 4,14 ±0,49 3,02±0,35* 4,17± 0,11** 3,91± 0,22 3,66±0,17 5,28±0,43* * 3,67 ±0,10

* - достоверное отличие от контроля (р < 0,05)

** - достоверное отличие от показателей группы №4(р< 0,05)

Можно сказать о значимом повышении фагоцитарной активности нейтро-филов периферической крови исследуемых животных при введении им в последнюю неделю воздействия Амбиола, а также смеси Миксоферона с Амбиолом. Интенсивность хемолюминесценции стимулированных клеток при этом значительно превышала контрольные показатели (см. рис. 4). Возможно, это связано с усилением ферментативной активности и энергетического баланса нейтрофилов крови животных этих групп. Полученные данные указывают на достоверное увеличение количества миелопероксидазы и гликогена, а также увеличение процента фагоцитоза и фагоцитарного индекса при введении животным Амбиола в последнюю неделю воздействия. При введении смеси препаратов происходит достоверное повышение процента фагоцитоза, содержания катионных белков и гликогена. При этом наблюдается превышение

О 10 20

Контроль -*-С5 + РЬ -Ж-Мф -»-Амб — Мф ♦ Анб

Рис. 4. Динамика хемолюминесцентного ответа кейтрофилов крови при воздействии препаратов Миксоферон и Амбиол в последнюю неделю неблагопрюггаого воздействия.

контрольных показателей. Согласно данным литературы, увеличение содержания гликогена является результатом неспецифического усиления метаболической и пролиферативной активности лимфоидной ткани.

Позитивное действие Амбиола на фагоцитарные реакции нейтрофилов крови, видимо, главным образом, объясняется тем, что обладая антиоксидантны-ми свойствами он защищает от деградации витамины (А, Б, Е, Б, К), гормоны (эс-традиол, тестостерон, прогестерон) и ферменты (супероксиддисмутаза, глутати-онпероксидаза, пероксидаза, глутатионредуктаза, каталаза, цитохром Р450)и предотвращает накопление в тканях токсичных продуктов лерекисного окисления липидов. Тем самым Амбиол защищает мембранные системы фагоцитов, а также энергетические и бактерицидные ферменты этих клеток, способные повреждаться при неблагоприятном радиационно-химическом воздействии. Действительно, обнаружено, что применение Амбиола в последнюю неделю воздействия приводит к усилению стойкости клеточных мембран. Стойкость мембран эритроцитов к действию гемолитика, сниженная в 2 раза при радиационно-химическом воздействии, значительно превышала контрольные показатели в группе, получавшей инъекции Амбиола.

В отношении факторов клеточного иммунитета отмечено восстановление клеточных популяций в селезенке и костном мозге животных во всех группах, которым препараты вводились в последнюю неделю воздействия. Как показывают данные, клеточность органов в этих группах повысилась до контрольных значений.

Введение используемых препаратов и их смеси в последнюю неделю воздействия приводило к нормализации процентного содержания Т- и В-лимфоцитов в крови, селезенке и костном мозге исследуемых животных (см. табл. 5). Полученные показатели не имеют достоверных отличий от контрольных и достоверно превышают аналогичные значения у животных, которым препараты не вводились.

Таблица 5

Процентное содержание Т- и В-лимфоцитов в крови и лимфоидных органах при введении Миксоферона и Амбиола

Номер группы Вед воздействия . Кровь Селезенка Костный мозг

Т-*летки В-клетки Т-клетки В-клетки В-клетки

1. Контроль 36,1 ± 1,7 15,5 ± и 38,7 ±2,7 23,5 ±2,6 25,0 ± 2,9

4. Сочетанное РЬ + Сз 27,4 ±2,4' 13,1 ± 1,7 28,9 ±4,4" 12,6±1,9" 11,7 + 2,2*

5. РЬ + Се Миксоферон 36,5 ± и" 18,2 ± 1,9" 42,8 ±2,8" 29,1 ±4,8" 28,7 ±2,3"

6. РЬ + Сз Амбиол 38,1 ± 1,8" 15,5 ±0,9 38,7 ±2,9" 23,4 ± 2.5" >243 ±2,6"

7. РЬ + Се Мнкс. + Амб. 353 ±2,8" 15,8 ± 1,5 41,5 ±2,4" 26,1 ±2,9" 23,8 + 3,0"

8. Миксоферон РЬ + Сз 30,2 ±3,6 12,0 ± 1,9 35,2 ±2,2 19,3 ±2,3 17,2 ±2,5

9. Амбиол РЬ + С.'я 30,9 ±3,3 11,6 ±0,6" 34.6 ±1.8 18.5 ±2.5 20,1 ± 3.0

* - достоверное отличие от контроля (р < 0,05)

** - достоверное отличие от показателей группы № 4 (р < 0,05)

Абсолютные показатели содержания Т- и В-лимфоцитов в крови животных при введении им Миксоферона и Амбиола достоверно превышают контрольные значения. Так при введении Миксоферона содержание Т-субпопуляции увеличилось в 3,2 раза, а В-субпопуляции - в 3,3 раза по отношению к 4-й группе, и превысило контрольные показатели на 33% и 54% соответственно. Еще более выраженный эффект наблюдался при использовании Амбиола. При введении его животным выявлено увеличение абсолютного содержания Т-лимфоцитов в 4,7 раза по сравнению с животными не получавшими препарат, а В-лимфоцитов — в 4 раза. Превышение контрольных показателей составило 95% для Т-клеток и 85% для клеток В-ряда. Более слабое действие на животных оказывала смесь этих препаратов.

Введение указанных препаратов до начала неблагоприятного воздействия оказалось малоэффективным в отношении этих показателей. Более того, наблюдалось еще большее угнетение таких показателей как концентрация СЗ фрагмента комплемента, процент фагоцитоза и фагоцитарный индекс, активность миелопе-роксидазы и концентрация катионных белков в нейтрофилах крови. Снижалось абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов в крови животных. Значения перечисленных показателей были ниже чем в группе, где препараты не применялись.

Таким образом, Миксоферон и Амбиол показали выраженный иммуностимулирующий эффект при их введении в последнюю неделю сочетанного радиа-

ционно-химического воздействия и могут быть рекомендованы для применения в

сельском хозяйстве в экологически неблагоприятных регионах.

3. ВЫВОДЫ

1. Суммарная поглощенная доза при ежедневном поступлении в организм животных '"Се с кормом в количестве 10,06 х 103 кБк/кг корма составила 0,3 Гр за 30 суток при кратности накопления изотопа 9,0 ± 0,3 и коэффициенте депонирования изотопа — 0,3. Наибольшая удельная активность цезия, равная 13,3 кБк/г, зарегистрирована в мышечной ткани животных.

2. Изолированное поступление шСв с активностью, формирующей в организме животных поглощенную дозу 0,3 Гр за 30 суток приводит к снижению содержания лейкоцитов, относительной эозинофилии, угнетению фагоцитарной активности нейтрофилов и В-клеточного звена иммунной системы.

3. Свинец неравномерно распределяется в органах и тканях. Его наибольшая концентрация через 30 дней от начала поступления в организм наблюдается в почках. Значительного депонирования свинца в костной ткани за этот период не наблюдается. Поступление свинца в организм животных с питьевой водой, содержащей 10 ПДК ионов свинца, приводит к выраженному угнетению факторов неспецифической защиты организма: снижается концентрация лизоцима в плазме крови, фагоцитарная активность нейтрофилов.

4. Сочетанное поступление '"Се и ионов свинца в указанных выше дозах вызывает у животных иммунодефицитные состояния, проявляющиеся угнетением факторов неспецифической защиты и ингибированием клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Наблюдается усиление итогового повреждающего эффекта в отношении содержания лизоцима в плазме крови, ка-тионных белков в нейтрофилах крови, специфических факторов иммунологической защиты. Снижение итогового повреждающего эффекта наблюдается в отношении фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

5. Введение экспериментальным животным Миксоферона по 0,03 дозы/гол в сутки, на фоне сочетанного воздействия "Ся и ионов свинца, вызывает выраженный иммуностимулирующий эффект в отношении факторов специфической защиты организма. Неспецифические факторы защиты при этом остаются в состоянии депрессии.

6. Введение Амбиола экспериментальным животным в дозе 3,8 х 10"3 мг\гол в сутки усиливает фагоцитарную активность нейтрофилов крови и повышает в них содержание бактерицидных ферментов, оказывает стимулирующее действие на иммунокомпетентные органы и показатели специфической иммунологической защиты организма.

7. Миксоферон и Амбиол при их введении животным в условиях сочетанного воздействия инкорпорированного цезия и свинца являются эффективными иммуностимулирующими препаратами. При этом, Миксоферон в большей степени активен в отношении специфических факторов иммунитета, а Амбиол оказывает положительный эффект на оба звена иммунной системы животных.

Рекомендации по использованию научных выводов

1. Рекомендуем иммуностимулирующий препарат Миксоферон и антиоксидант Амбиол для осуществления коррекции иммунологического статуса животных, находящихся в экологически неблагоприятных условиях на загрязненных радионуклидами территориях

2. Результаты исследований рекомендуем включить в учебный процесс биологических и ветеринарных вузов и факультетов

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Спиридонов М. Б. Влияние длительного сочетанного поступления ионов свинца и '"Се на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови мышей/ Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии: Сб. науч. тр./ Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехн. им. К. И. Скрябина, 2000.- С. 133 -137.

2. Спиридонов М. Б., Содбоев Ц. Ц. Гематологические показатели мышей в условиях раздельного и сочетанного действия малых доз инкорпорированного '37С8 и ионов свинца/ Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии: Сб. науч. тр./ Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехн. им. К. И. Скрябина, 2000.- С. 123 - 131.

3. Спиридонов М. Б., Содбоев Ц. Ц. Изменения кислотной резистентности эритроцитов при длительном раздельном и сочетанном воздействии на организм малых доз инкорпорированного '"Се и ионов свинца/ Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии: Сб. науч. тр./ Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехн. им. К.И.Скрябина, 2000.- С. 119 - 123.

4. Спиридонов М. Б., Григорьев М. В. Применение теста люминолзависимой хе-милюминесценции нейтрофилов периферической крови для оценки их функциональной активности при радиационно-химическом воздействии: Информационный листок № 129-99/ МособлЦНТИ;1999.- 3 с.

Лицензия ЛР № 021238 от 22.08.97. Подписано в печать 11.02.2003 г. Бумага офсетная. Печать офсетная. Бумага 60x84 1/16 Усл.печл. 1,25 Тираж 100 экз. Заказ № 18-2

111621, г. Москва, ул. Оренбургская, 15 Отдел оперативной полиграфии ФГУП «ВО Минсельхоза России»

Р-3134

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Спиридонов, Михаил Борисович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2. 1. Современные представления о структурно-функциональной организации иммунной системы и ее роль в функционировании организма.

2. 2. влияние инкорпорированного цезия на иммунологические. показатели организма.

2.3. Влияние свинца на иммунологические показатели.

2. 4. СОЧЕТАННОЕ ДЕЙСТВИЕ РАДИАЦИОННЫХ И ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ.

НА ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЗАЩИТЫ ОРГАНИЗМА.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. материалы исследований.

3.2. Методы исследований.

3. 2. 1. Клинико-гематологические методы.

3. 2. 2. Методы иммунологических исследований.

3. 2. 3. Цитохимические методы.

3. 2. 4. Биохимические методы.

3. 2. 5. Определение кислотной стойкости мембран эритроцитов.

3. 2. 6. Определение концентрации свинца в органах и тканях животных методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. 1. результаты дозиметрических и токсикологических исследований.

4. 2. ВЛИЯНИЕ РАЗДЕЛЬНОГО И СОЧЕТАННОГО ПОСТУПЛЕНИЯ '"Св И ИОНОВ СВИНЦА НА физиологические и иммунологические показатели.

4. 2. 1. Клинико-гематологические показатели.

4. 2. 2. Состояние факторов неспецифической резистентности животных.

4. 2. 3. Иммунологический статус организма животных при раздельном и сочетанном воздействии ,37Ся и свинца.

4. 2. 4. Воздействие радиационно-хгшических факторов на состояние биомембран клеток крови.

4.3. Влияние Амбиола и миксоферона на физиологические и иммунологические показатели животных при сочетанном воздействии 137С8 и ионов свинца.

4. 3. 1. Результаты клинико-гематологических исследований.

4. 3. 2. Изменения показателей неспецифической защиты животных.

4. 3. 3. Изменения иммунологического статуса организма животных, подвергшихся сочетанному воздействию /37Су и ионов свинца при использовании иммуностимулятора

Миксоферон и антиоксиданта Амбиол.

4. 3. 4. Влияние Миксоферона и Амбиола на состояние биомембран клеток крови при сочетанном действии /37Су и ионов свинца.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

6. ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние сочетанного воздействия 137Cs и ионов свинца на некоторые показатели клеточного и гуморального иммунитета, и факторы неспецифической резистентности животных"

Актуальность темы

Радиоактивное загрязнение внешней среды приобрело глобальный характер. В производственных и иных ситуациях люди и животные подвергаются внешнему и внутреннему облучению [5, 22, 28, 95, 115, 143]. Источником внутреннего облучения могут быть радионуклиды различной тропности (равномерно распределяющиеся, остеотропные, накапливающиеся в ретикулоэндотелиальных органах, а также радионуклиды с выраженной органотропностью). В литературе имеются материалы обширных экспериментальных исследований кинетики обмена и биологического действия радионуклидов в условиях однократного и длительного поступления их в организм [16, 48, 90, 95, 25, 116]. Накапливаются данные клинических наблюдений о поступлении радионуклидов в организм людей. По данным литературы, эффект инкорпорированных радионуклидов значительно выше, чем внешнего облучения. Он связан как с радиоактивным излучением распадающихся элементов, так и с их воздействием на метаболические процессы в тканях и жизненно важные клеточные структуры [17, 25,26, 33,42, 86, 140].

Среди огромного разнообразия загрязняющих внешнюю среду радиоактивных элементов основное место занимает радиоактивный цезий.

Площадь территории Беларуси, России и Украины с плотностью загрязнения

2 2 данным радионуклидом более 1480 кБк /м составляла 3,1 тыс. км , с

2 2 2 плотностью загрязнения 555 - 1480 кБк /м - 7,1 тыс. км , 185 - 555 кБк /м около 17,9 тыс. км , 37 - 185 кБк /м2 - 76,1 тыс. км . Результаты радиологических исследований показали, что в организме людей и животных, находящихся на загрязненных цезием территориях, содержание последнего достигает 2,2 кБк /кг, что естественно создает значительную лучевую нагрузку на организм, равную 10,38 мЗв /год [10, 17, 71, 86, 116,

126].

Длительное поступление радиоцезия животным приводит к развитию хронического радиационного поражения с проявлением таких последствий, как злокачественные новообразования, эндокринные нарушения, снижение плодовитости, преждевременное наступление смерти. Причиной гибели животных часто являются инфекционные заболевания в результате снижения иммунологической реактивности [10, 20, 25, 35, 42,48, 57, 58, 95].

Иммунная система, как известно, является одной из наиболее радиочувствительных систем [1, 54, 57, 58, 61, 80, 92, 96, 110, 132, 163, 165, 167]. Согласно современным представлениям [2, 7, 59, 63, 104] система иммунитета выполняет важную гомеостатическую функцию, защищая организм от живых тел и веществ, несущих на себе признаки генетической чужеродности. Она одной из первых реагирует на воздействие самых разных элементов внешней и внутренней среды. В силу этого иммунологические показатели часто используют в качестве тестов для определения влияния на организм факторов различной природы, в том числе и лучевых.

Однако в реальных ситуациях на человека и животных радионуклиды все чаще действуют не изолировано, но в сочетании с различного рода факторами нелучевой природы и, в частности, с токсичными химическими веществами[37, 43, 55, 71, 129, 160, 162, 171]. В условиях ухудшения экологической обстановки актуальность приобретают исследования воздействия комплекса факторов, имеющих место в реальных условиях. Поэтому, данные о сравнительной характеристике иммунологической реактивности при действии на организм радионуклидов и тяжелых металлов [29, 56, 100, 109, 119, 136, 161] представляют существенный интерес.

Проводимые на территории Чернобыльского "радиоактивного следа" радиоэкологические исследования поставили проблему изучения сочетанного воздействия ионизирующего излучения и часто встречающихся факторов нерадиационной природы (пестициды, тяжелые металлы, нитраты, др.), способных модифицировать эффекты радиации [10, 113, 126, 127, 141, 1621

Существует обширная литература - отечественная и зарубежная по изучению раздельного влияния радиационного [1, 6, 11, 15, 22, 26, 35, 42, 44, 66, 80, 105, 110, 114, 140, 149] и химического [37, 41, 56, 97, 109, 123, 141, 168, 176] факторов на организм человека и животных. Приведенные в этих работах данные свидетельствуют о поражающем действии и лучевого и химического факторов даже в малых дозах на различные иммунологические показатели организма.

Литературные данные, касающиеся сочетанного действия факторов радиационной и химической природы на систему иммунитета, не таж многочисленны [43, 55, 64, 93, 100, 136, 153, 162]. Их авторы указывают на возможность модифицирующего влияния тяжелых металлов на лучевые повреждения иммунитета и, в частности, на возможность суммации и потенцирования эффектов, вызванных факторами лучевой и химической природы. Однако, модифицирующее влияние химических факторов на лучевые повреждения иммунитета изучено недостаточно. Многие авторы получают противоречивые результаты. Остается не выясненным, какие дозы радиации и химических токсикантов приводят к нарушениям в функционировании иммунной системы, к потенцированию или суммации эффектов [29, 55, 71, 93, 112, 113, 129, 136, 152]. Кроме того, нет достаточной Ясности в вопросах коррекции иммунологических нарушений при сочетанном действии на организм радиационных и химических факторов, Я препаратов дающих хороший эффект при таких воздействиях [54, 126],

Следовательно, имеется реальная необходимость в дальнейшем изучении раздельного и сочетанного влияния радиационных и химических факторов на иммунную систему и изучении эффектов, вызванных воздействием таких факторов. Это позволит яснее понять механизмы происходящих нарушений и разработать методы и препараты, которые помогут снизить неблагоприятное влияние химических и радиационных загрязнителей внешней среды на иммунную систему, а значит и на организм в целом.

Целью данной работы явилось изучение состояния клеточных и гуморальных факторов системы иммунитета, а также некоторых факторов неспецифической резистентности у животных при раздельном и сочетанном действии инкорпорированного |37Сз и ионов свинца, а также коррекции функционального состояния данной системы при помощи ряда препаратов.

Исходя из этого, были определены конкретные задачи:

1. Определить содержание Се-137 и ионов свинца в органах и тканях исследуемых животных.

2. На основании иммунологических, биохимических, цитохимических и гематологических исследований оценить состояние иммунной системы мышей в зависимости от вида оказываемого воздействия.

3= Изучить влияние иммуностимулирующего препарата Миксоферон и антиоксиданта Амбиол на иммунную систему при сочетанном воздействии цезия-137 и соли свинца. 4. Оценить эффективность коррекции иммунного статуса вышеназванными Препаратами при сочетанном радиационно-химическом воздействии.

Научная новизна:

1. Впервые проведено комплексное исследование влияния длительного сочетанного воздействия инкорпорированного 137Сз и ионов свинца на клеточные и гуморальные факторы системы иммунитета, а также показатели неспецифической резистентности мышей.

2. Установлены общие закономерности накопления и содержания 137С8 и ионов свинца в органах и тканях животных при длительном поступлении в организм.

3. Определена реактивность кровеносной и иммунной системы мышей на введение иммуностимулятора и антиоксиданта в условиях сочетанного воздействия радиационного и химического факторов.

Научно - практическое значение работы:

1. В результате проведенных исследований дана сравнительная оценка влияния радиационного и химического факторов на иммунную систему животных при раздельном и сочетанном их воздействии.

2. Впервые показана возможность коррекции иммунного статуса животных препаратами Амбиол и Миксоферон при длительном сочетанном радиационно-химическом воздействии.

3. Материалы диссертации вошли во временное наставление по применению препарата Амбиол для повышения резистентности при стрессах и воздействии на организм радиационно-химических факторов внешней среды.

4. Выпущен информационный листок: Применение теста люминолзависимой хемилюминесценции нейтрофилов периферической крови для оценки их функциональной активности при радиационно-химическом воздействии: Информационный листок № 129-99/ МособлЦНТИ, 1999.- 3 с.

5. Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре радиобиологии, рентгенологии и гражданской обороны при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами ветеринарного и ветеринарно-биологического факультетов, а также при выполнении научно-исследовательских, дипломных и курсовых рабет.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав: материалы и методы исследования, результаты исследований, обсуждение результатов, выводов, списка литературы и приложения. В работе имеются 24 таблицы и 10 рисунков. Список литературы включает 167 отечественных и 14 иностранных источников.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Спиридонов, Михаил Борисович

6. ВЫВОДЫ.

1. Суммарная поглощенная доза при ежедневном поступлении в организм

137 3 животных Се с кормом в количестве 10,06 х 10 кБк/кг корма составила 0,3 Гр за 30 суток при кратности накопления изотопа 9,0 ± 0,3 и коэффициенте депонирования изотопа - 0,3. Наибольшая удельная активность цезия, равная 13,3 кБк/г, зарегистрирована в мышечной ткани животных.

1 47

2. Изолированное поступление Се с активностью, формирующей в организме животных поглощенную дозу 0,3 Гр за 30 суток приводит к снижению содержания лейкоцитов, относительной эозинофилии, угнетению фагоцитарной активности нейтрофилов и В-клеточного звена иммунной системы,

3. Свинец неравномерно распределяется в органах и тканях. Его наибольшая концентрация через 30 дней от начала поступления в организм наблюдается в почках. Значительного депонирования свинца в костной ткани за этот период не наблюдается. Поступление свинца в организм животных с питьевой водой, содержащей 10 ПДК ионов свинца, приводит к выраженному угнетению факторов неспецифической защиты организма: снижается концентрация лизоцима в плазме крови, фагоцитарная активность нейтрофилов,

1 47

4. Сочетанное поступление Се и ионов свинца в указанных выше дозах вызывает у животных иммунодефицитные состояния, проявляющиеся угнетением факторов неспецифической защиты и ингибированием клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Наблюдается усиление итогового повреждающего эффекта в отношении содержания лизоцима в плазме крови, катионных белков в нейтрофилах крови, специфических факторов иммунологической защиты. Снижение итогового повреждающего эффекта наблюдается в отношении фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

5. Введение экспериментальным животным Миксоферона по 0,03 дозы/гол в сутки, на фоне сочетанного воздействия 137С.ч и ионов свинца, вызывает выраженный иммуностимулирующий эффект в отношении факторов специфической защиты организма. Неспецифические факторы защиты при этом остаются в состоянии депрессия,

6. Введение Амбиола экспериментальным животным в дозе 3,8 х 10"3 мг\гол в сутки усиливает фагоцитарную активность нейтрофилов крови и повышает в них содержание бактерицидных ферментов, оказывает стимулирующее действие на иммунокомпетентные органы и показатели специфической иммунологической защиты организма.

7. Миксоферон и Амбиол при их введении животным в условиях сочетанного воздействия инкорпорированного цезия и свинца являются эффективными иммуностимулирующими препаратами. При этом, Миксоферон в большей степени активен в отношении специфических факторов иммунитета, а Амбиол оказывает положительный эффект на оба звена иммунной системы животных.

Рекомендации по использованию научных выводов:

1. Рекомендуем иммуностимулирующий препарат Миксоферон и антиоксидант Амбиол для осуществления коррекции иммунологического статуса животных, находящихся в экологически неблагоприятных условиях на загрязненных радионуклидами территориях

2. Результаты исследований могут быть использованы в учебном процессе ветеринарных вузов и факультетов при чтении лекций, проведении лабораторно-практических занятий по радиобиологии, а также при выполнении научно-исследовательских и дипломных работ, написании учебников и учебных пособий.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Спиридонов, Михаил Борисович, Москва

1. Аклиев А. Б., Косенко М. М. Обобщение результатов многолетнего изучения иммунитета у населения, подвергшегося облучению// Иммунология. 1991. - № 6. - С. 4 - 7,

2. Актуальные вопросы иммунологии и иммунопатологии: Сб. науч. тр./ Ростов, мед. ин-т. Ростов-н-Д, 1985. - 115 с.

3. Алиев В. А. Нормы энзимоцитохимических показателей лейкоцитов крови как критерии оценки состояния здоровья: Методические рекомендации. Баку, 1979.

4. Антитела. Методы: В 2 т. М.: Мир, 1991.

5. Барабой В. А. Ионизирующая радиация в нашей жизни. М.: Наука, 1991.- 217 с,

6. Барабой В. А., Орел В. Э., Карнаух И. М. Перекисное окисление и радиация. Киев: Наукова думка, 1991. - 256 с.

7. Беклемишев Н. Д. Иммунопатология и иммунорегуляция (при инфекциях, инвазиях и аллергиях). М.: Медицина, 1986. - 256 с,

8. Белановский А. С., Ботян Н. И., Баюн Ю. К. Обработка результатов измерений: Методические указания. М.: МВА, 1990. - 72 с.

9. Белки иммунной системы/ Отв. ред. В. Т. Иванов,- М.: ИБХ им. М. М. Шемякина, 1997,

10. Белов А. Д., Лысенко Н. П., Фомичева Н. А. Оценка биологических последствий для крупного рогатого скота в зоне Чернобыльской катастрофы//Радиационная биология и экология. 1997. - Т. 37. - Вып. 4.- С. 629 639,

11. Белоусова О. И., Горизонтов П. Д., Федотова М. И. Радиация и система крови. М.: Атомиздат, 1979.

12. Береснев В. Л., Жильцов И. Ф. Изменения кислотной резистентности эритроцитов при хроническом воздействии быстрых нейтронов на организм// Радиобиология. 1975. - Т. 15, № 2. - С. 281 - 283.

13. Бернет Ф. Клеточная иммунология. Пер. с англ. М.: Мир, 1971.

14. Бернет Ф. Целостность организма и иммунитет. Пер. с англ.- М.: Мир, 1964.

15. Биологические эффекты малых доз радиации: Сб. науч. тр./ Ин-т биофизики: Под ред. Ю. И. Москалева.- М., 1983.- 190 с.

16. Биологические эффекты при длительном поступлении радионуклидов/ В. В. Борисова, Т. М. Воеводина, А. В. Федорова, Н. Г. Яковлева. М.: Энергоатомиздат, 1988. - 168 с.

17. Ближайшие и отдаленные последствия радиационной аварии на Чернобыльской АЭС/ Под ред. Л. А. Ильина, Л. А. Булдакова. М., 1987.

18. Брондз Б. Д. Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом распознавании.- М.: Наука, 1987.

19. Вавилова Л. М., Голосова Т. В. Система комплемента. Механизмы активации и регуляции, значение в биологии и медицине// Итоги науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Иммунология. 1990. - Т. 24. - 164 с.

20. Василенко И. Я. Состояние и перспектива исследований биологического действия малых доз радионуклидов// Биологические эффекты малых доз радиации: Сб. науч. тр./ Ин-т Биофизики; Под ред. Ю. И. Москалева. -М., 1983. С. 49 - 55.

21. Взаимосвязь между уровнем циркулирующих иммунных комплексов и функциональным состоянием фагоцитирующей системы/ Виноградова Т. В., Капелько М. А., Вельтинцев Ю. Е., Стефани Д. В.// Иммунология. 1986. - № 5. - С. 63 - 65.

22. Виленчик М. М. Радиобиологические эффекты и окружающая среда.-М.: Энергоатомиздат, 1983.

23. Владимиров Ю. А., Шерстнев М. П. Хемилюминесценция клеток животных// Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. М.: ВИНИТИ, 1989. - Т. 24. - 176 с.

24. Владимиров Ю. А., Шерстнев М. П., Пирязев А. П. Стимулированная кристаллами сульфата бария хемолюминесценция лейкоцитов цельной крови// Биофизика. 1989. - № 6. - С. 1051 - 1054.

25. Влияние малых доз ионизирующих излучений на иммунную систему человека/ Морозова В. Г. и др.// Воен. мед. Журнал.-1993.-№ 10.1. С.49- 51.

26. Воднев В. Т., Наумович А. Ф., Наумович Н. Ф. Основные математические формулы: Справочник/ Под ред. Ю. С. Богданова. Изд. 2-е перераб. и доп. - Минск: Высшая школа, 1988. - 270 с.

27. Генетические последствия действия ионизирующих излучений на популяции/ Дубинин Н. П., Шевченко В. А., Кальченко В. А. и др. М.: Госатом СССР, НКРЗ при МЗ СССР, 1980,

28. Гигиеническая оценка факторов радиационной и нерадиационной природы и их комбинаций/ Под ред. А. Н. Либермана. Л.: ЛИРГ, 1976.

29. Гительзон И. И., Терсков И. А. Эритрограммы как метод клинического исследования крови. Красноярск: Изд-во сибирского отд. АН СССР, 1959.

30. Глузман Д. Ф., Сидоренко С. П., Надгорная В. А. Цитохимия и иммуноцитология злокачественных лимфопролиферативных заболеваний. Киев: Наукова думка, 1982. - 240 с,

31. Голосова Т. В., Вавилова Л. М., Турищев С. Н. Методы исследования системы комплемента в клинике// Система комплемента. М., 1988. - С. 56 - 59.

32. Гомеостаз при радиационном повреждении организма: Мат. раб. совещ./ Инф. бюллетень АН СССР. Научн. совет по проблемам радиобиологии, июль, 1987,- Вып. 16.- Пущино, 1987.- 61 с.

33. Городецкая Н. С. Свинец. М.: Центр международных проектов ГНКТ, 1983.

34. Даштаянц Г. А. Клиническая гематология: краткое руководство для врачей.- Киев: Здоровье, 1965.- 232 с.

35. Доклад о свинцовом загрязнении окружающей среды Российской Федерации и его влиянии на здоровье населения/ Гос. ком. РФ по охране окружающей среды; Отв. ред. Снакин В. В. М., 1997. - 232 с,

36. Долгушин И. И. Взаимодействие нейтрофилов с иммунокомпетентными клетками// Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций/ Под ред. А. Н. Маянского. Горький, 1989. - С. 74 - 81.

37. Дуглас С. Д., Куи П. Г. Исследование фагоцитоза в клинической практике. М.: Медицина, 1983. - 108 с.

38. Емельяненко П. А. Методические принципы тестирования гуморальных факторов иммунитета// Иммунитет с-х. животных. М.: Колос, 1973.

39. Ершов Ю. А., Плетенева Т. В. Механизмы токсического действия неорганических соединений. М.: Медицина, 1989. - 272 с.

40. Жербин Е. А., Новоселов Г. С., Комар В. Е. Комбинированное действие излучения и химических факторов. М., 1982. - 20 с.

41. Жеребин Е. А., Чухловин А. Б. Радиационная гематология. М.: Медицина, 1989. - 176 с.

42. Иваненко Г. Ф., Граевская Б. М. Связь содержания гликогена в лейкоцитах периферической крови мышей разных линий с их радиочувствительностью//Радиобиология. 1977. - Т. 17, № 5.1. С. 780 782.

43. Изучение иммуномодулирующих свойств нового препарата под шифром БИО-40; Отчет о НИР/ НИИ трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ; Руководитель д. м. н. В. С. Сускова.- М., 1993.- 5 с.

44. Изучение механизма формирования иммунитета у животных/ Ю. Н. Федоров, В. А. Горбатов, В. С. Гуткин и др.: Тр. ВИЭВ. М.: ВИЭВ, 1982.-Т. 55.-С. 102- 108.

45. Ильин Б. Н., Борисова В. В., Ветух В. А. Отдаленные биологические эффекты комбинированного действия радионуклидов различной тропности. М.: Энергоатомиздат, 1991. - 160 с.

46. Иммуноглобулины/ Р. Поляк, Р. Кату, Ф. Керуш и др.; Под ред. Г. Литмена и Р. Гуда. М.: Мир, 1981. - 495 с.

47. Иммунодефицитные состояния/ В. С. Смирнов, И. С. Фрейддин СПб: Фолиант, 2000.- 568 с.

48. Иммунологические методы/ Под ред. Г. Фримеля; Пер. с нем. А. П. Тарасова. М.: Медицина, 1987. - 412 с.

49. Иммунология: Методы исследований/ Турко М., де Петрис С., Такач Б. и др. М.: Мир, 1983.

50. Иммунология: практикум/ Е. У. Пастер, В. В. Овод и др. Киев: Высшая школа, 1989.

51. Калистратова В. С. Современные проблемы сочетанного действия факторов радиационной и нерадиационной природы// Биологические эффекты малых доз радиации: Сб. науч. тр./ Ин-т Биофизики; Под ред. Ю. И. Москалева. М., 1983. - С. 92 - 97.

52. Касохов А. Б. Нарушение иммунобиологической реактивности в условиях загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами// Российский вестник перинатологии и педиатрии.- № 5.-1999.- С. 37-41.

53. Касьянов А. Д., Морозов В. Г. Иммунный статус человека и радиация: Тез. докл. Всесоюзн. науч. конф., Гомель, сентябрь 1991. С. 120 - 121.

54. Кириллова Е. Н., Муксинова К. Н. Иммунные реакции у мышей после длительного радиационного воздействия//Радиобиология. 1981. - Т. 21, № 1.-С. 91 -96.

55. Клиническая иммунология: В 3 т./ Под ред. X. Йегера. М.: Медицина, 1986.

56. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание/ И. П. Кондрахин, Н. В. Курилов, А. Г. Малахов и др. М.: Агропромиздат, 1985. - 287 с.

57. Коггл Дж. Биологические эффекты радиации. М.: Энергоатомиздат, 1986.

58. Колла В. Э., Сыропятов Б. Я. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных. М.: Медицина, 1998. - 263 с.

59. Коляков Я. Е. Ветеринарная иммунология.- М.: Агропромиздат, 1986.272 с.

60. Комбинированное действие ионизирующих излучений и других физических факторов среды/ В. В. Антипов, Б. И. Давыдов, И. Б. Ушаков, В. П. Федоров// Радиация и организм. Обнинск: НИИ МР, 1984.-С. 13-14.

61. Контроль и регуляция иммунного ответа/ Петров Р. В., Хаитов Р. М., Манько В. М., Михайлова А. А. Л.: Медицина, 1981.

62. Кооперативные иммунные реакции у различных поколений мышей: авария на ЧАЭС/ Савцова 3. Д., Ковбасюк С. А., Юдина О. Ю. и др.// Радиобиология. 1991. - Т. 31. -Вып. 5, С. 687 - 693.

63. Котеров А. Н., Филиппович И. В. Радиобиология металлотионеинов// Радиационная биология. Радиоэкология.- 1995.- Т. 35,- Вып. 2.- С. 162 -180.

64. Кузнецов Ю. В. Амбиол в профилактике и лечении,- М., 1996,- 28 с.

65. Кузник Б. И., Васильев Н. В., Цыбиков Н. Н. Иммуногенез, гомеостаз и неспецифическая резистентность организма,- М.: Медицина, 1989.-325 с.

66. Кульберг А. Я. Регуляция иммунного ответа.-М.: Медицина, 1986.-224 с.

67. Кутлахмедов Ю. А., Поликарпов Г. Г. Современные проблемы количественной радиоэкологии. В кн.: Актуальные проблемы радиационной биологии и радиационной генетики: Мат. всесоюзн. конф. - Обнинск: НИИМР, 1990. - 143 с.

68. Лецкий В. Б. Цитохимическое исследование лейкоцитов: методические рекомендации. Л., 1973. - С. 18 - 20, 24 - 26.

69. Лимфоциты. Методы/ Под ред. Дж. Клауса; Пер. с англ. Маца А. Н. М.: Мир, 1990. - 392 с.

70. Лимфоциты: выделение, фракционирование, характеристика/ Под ред. Дж. Б. Натвига, П. Перлмана, X. Визгеля; Пер. с англ. Ариона В. Я. М.: Медицина, 1980. - 280 с.

71. Лозовой В., Шеринг. Структурно-функциональная организация иммунной системы.- Новосибирск, Наука, 1981.- 226 с.

72. Лойда 3., Гроссрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов: Лабораторные методы/ Пер. с англ. М., 1982.

73. Луппа X. Основы гистохимии/ Под ред. Н. Т. Райхлина; Пер. с нем. И. Б. Бухвалова, Е. Д. Вальтер. М.: Мир, 1980. - 343 с.

74. Ляшенко В. А., Дрояокеников В. А., Молотковская И. М. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток.- М.: Медицина, 1988,

75. Макаров В. В. Основы инфекционной иммунологии.- М., 1999.- 212 с.

76. Мальцев В. Н. Количественные закономерности радиационной иммунологии. М.: Энергоатомиздат. - 1983.

77. Материй Л. Д., Маслова К. И. Влияние повышенного уровня естественной радиоактивности на содержание гликогена в лейкоцитах периферической крови полевок-экономок (Microtus oeconomus pall.)// Радиобиология. 1984. - Т. 24, № 6. - С. 828 - 831.

78. Маянский А. Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге,-Новосибирск: Наука, 1983.

79. Маянский А. Н., Невмятуллин А. Л., Чеботарь И. В. Реактивная хемилюминесценция в системе фагоцитоза// Журн. Микробиол.- 1987.-№ 1.- С. 109-115.

80. Маянский А. Н.} Пикуза О. И. Клинические аспекты фагоцитоза. -Казань: Магариф, 1993.

81. Медуницин Н. В., Литвинов В. И., Мороз А. М. Медиаторы клеточного иммунитета и межклеточного взаимодействия.- М.: Медицина, 1980.

82. Международный чернобыльский проект. Оценка радиологических последствий и защитных мер. Доклад Международного консультативного комитета. М.: ИздАТ, 1991. - 96 с.

83. Методические рекомендации по количественному определению и функциональной оценке Т- и B-лимфоцитов в периферической крови КРС,- Харьков, 1983,- 18 е.- В надзаг.: Укр. НИИЭВ.

84. Методология, организация и итоги массовых иммунологических обследований/ Под ред. Р. В. Петрова. М., 1987.

85. Моделирование поведения и токсического действия радионуклидов: Сб. статей/ Отв. ред. Е. И. Сухачева. Свердловск, 1978. - 104 с.

86. Молекулярно-биологические и цитологические аспекты лимфолейкоза/ Н. В. Николаева, Ю. М. Азизов, А. В. Алещенко, Л. П. Семенова. М.: Наука, 1981.

87. Морфофункциональные показатели некоторых иммунокомпетентных органов мышей: последствия аварии на ЧАЭС/ Савцова 3. Д., Ковбасюк С. А., Юдина О. Ю. и др.// Радиобиология. 1991. - Т. 31. -Вып. 5, С. 679 -686.

88. Москалева Е. Ю. Молекулярно-биохимические механизмы развития вторичных иммунодефицитных состояний при действии различных экологических факторов: дисс. доктор, биол. наук/ М.: 1998 г.

89. Мотавкина Н. С., Шаронов А. С., Ковалев Б. М. Микрометоды в иммунологии. Владивосток: Изд-во Дальневосточного ун-та, 1987.

90. Мусиенко П. И. Действие радиоактивных изотопов на живой организм. -Киев: Выща школа, 1991. 99 с.

91. Невструева М. А., Шубик В. М., Токин И. Б. Влияние инкорпорированных радиоизотопов на иммунологические процессы. -М.: Атомиздат, 1972.

92. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов/ Под ред. X. Зигель, А. Зигель. М.: Мир, 1993. - 368 с.

93. Никитин В. М. Справочник методов иммунологии/ Отв. ред. М. В. Бочкарев. Кишинев: Штиинца, 1982. - 303 с.

94. Основные принципы организации биомедицинских экспериментов на животных: Тез. докл. междунар. семинара, 27 29 ноября, 1979/ Гл. ред. В. А. Душкин. - М., 1979. - 107 с.

95. Основные физиологические показатели состава, свойств крови, костного мозга, лимфы, ликвора, температуры, пульса и дыхания животных: Методические рекомендации/ А. А. Кудрявцев, JI. А. Кудрявцева; ВИЭВ,- М., 1973,- 24 с.

96. Оценка иммунного статуса человека: Методические рекомендации/ Петров Р. В., Лопухин Ю. М., Чередеев А. Н. и др. М., 1984.

97. Петров Р. В. Иммунология: 2 изд. М.: Медицина, 1987. - 416 с.

98. Петров Р. В., Ковальский Л. В., Чародеев А. Н. Количественные аспекты современной радиационной иммунологии и проблема действия радиации на межклеточные кооперативные процессы// Радиобиология. 1971.-Т. 11, №4.-С. 438.

99. Петров Р. В., Хаитов Р. М. Иммунологические механизмы клеточного гомеостаза. В кн.: Гомеостаз/ Под ред. П. Д. Горизонтова. - М.: Медицина, 1976. - 191 с.

100. Петрухин И. В., Петрухин Н. П. Кормление домашних и декоративных животных: справочная книга. М.: Нива России, 1992.

101. Плейфэр Дж. Наглядная иммунология: Пер. с англ.- М.: ГЭОТАР Медицина, 1999.- 96 с.

102. Подколизин А. А., Донцов В. И. Иммунитет и микроэлементы.- М.: Аламанда, 1994.- 144 с.

103. Последствия Чернобыльской катастрофы: Здоровье человека/ Под ред. Е. Б. Бурлаковой. М., 1996. - 290 с.

104. Постников В. С. Исследования крови у животных и их клиническое толкование: Методические указания к лекции для врачей ФПК по курсу «Клиническая диагностика»/ Моск. ветеринарная академия. -М.,1979.- 50 с.

105. Принципы сравнительной оценки радиационного и химического факторов/ Под ред. П. В. Рамзаева. М.: Энергоатомиздат, 1984.

106. Проблемы нормирования ионизирующих излучений в условиях воздействия модифицирующих факторов: Сб. науч. тр./ Ин-т биофизики; Под ред. JI. А. Булдакова, В. С. Калистратовой. М., 1991. -331 с.

107. Радиация и гемостаз/ В. П. Балуда, Р. А. Бродский, В. М. Володин и др.; Под ред. В. П. Балуды. М.: Энергоатомиздат, 1986. - 160 с.

108. Радиация и организм: Сб. науч. тр./ АМН СССР; НИИ мед. радиологии. -Обнинск, 1980,- 120 с.

109. Рахимова М. Т. Некоторые иммунологические показатели рабочих свинцово-плавильного цеха// Гиг. труда и профзабол.-1968,- №4.- С. 39.

110. Реакция биологических систем на воздействие химических и физических факторов: Доклады МОИП, Общая биология/ МОИП. М., 1989. - 128 с.

111. Регуляторные клетки иммунной системы/ Под ред. Р. В. Петрова// Итоги науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Иммунология. 1978. - Т. 7. - 248 с.

112. Родионова Л. Ф. Качественно-структурные изменения клеток крови у крыс, мышей, кроликов при радиационном и химическом загрязнении питьевой воды: Тез. докл. всесоюзн. конф. «Отдаленные последствия и оценка риска воздействий радиации». М., 1978. - 135 с.

113. Ройт. И. Основы иммунологии. Пер. с англ.- М.: Мир, 1991.

114. Роль тяжелых металлов в жизненных процессах/ Под ред. Яно С., Сайто К. Токио: Хирототося, 1988. - 348 с.

115. Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях/ В. П. Федосеева, Г. В. Порядин, Л. В. Ковальчук и др. М.: Промедэк, 1993. - С. 13 - 93.

116. Рылова М. Л. Методы исследования хронического действия вредных факторов в эксперименте. Л.: Медицина, 1964.

117. Саулин В. И. Влияние ряда биологических препаратов на иммунную систему крупного рогатого скота и потомства в условиях радионуклидного загрязнения местности: Автореф. дисс. канд. биол. наук/ Моск. гос. акад. вет. мед. и биотехнологии. М., 1999. - 16 с.

118. Свинец в окружающей среде/ В. В. Добровольский, А. И. Обухов, Е. А, Лобанова и др.; Отв. ред. В. В. Добровольский. -М.: Наука, 1987.- 181 с.

119. Симонян Г. А., Хисамутдинов Ф. Ф. Ветеринарная гематология. М.: Колос, 1995.

120. Синергизм действия ионизирующей радиации и других физических и химических факторов на биологические системы: Тез. докл. всесоюзн. конф., 18-20 октября 1988. Пущино, 1988. - 74 с.

121. Снедекор Дж. У. Статистические методы в применении к исследованиям в сельском хозяйстве и биологии/ Пер. с англ. В. Н. Перегудова. М.: Изд. с-х. литературы, журналов и плакатов, 1961,

122. Состояние иммунной системы у людей через 2 года после воздействия радиационной аварии/ Смирнов В. С. и др.// Иммунология,- 1990,- №6.-С. 63- 65.

123. Состояние клеточного иммунитета у разных поколений крыс/ Мельников О. Ф., Самбур М. Б., Индык В. М. и др.// Радиобиология. -1991. Т. 31. -Вып. 5, С. 673 - 678.

124. Справочник ветеринарного лаборанта/ Андросов Ф. 3., Беляев И. Я., Клочко Р. Т., и др.; Под ред. В. Я. Антонова. М.: Колос, 1981. - 284 с.

125. Справочник предельно допустимых концентраций вредных веществ в пищевых продуктах и среде обитания/ Сост. Беляев М. П., Глотов Я. К.-М., 1993.

126. Справочник специалиста ветеринарной лаборатории/ Под ред. Ю. П. Смияна. Киев: Урожай, 1987. - 368 с.

127. Тернов В. И. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови белых крыс при хроническом воздействии радиоактивного кальция 45// Радиобиология. - 1965. - Т. 5, № 3. - С. 470 - 473.

128. Тимус и его роль в поддержании иммунологического гомеостаза: учебное пособие/ М. Ф. Бондаренко и др. М.: ЦОЛИУВ, 1984.

129. Ткачук В. А. Введение в молекулярную эндокринологию. М., 1983. -256 с.

130. Топурия Г. М. Гематологические показатели КРС, содержащегося в экологически неблагоприятных условиях/ Проблемы совр. экологии и экологического образования: Межвед. сб. науч. тр.- М.: МВА, 1994,- С. 123- 128.

131. Трахтенберг И. М., Колесников В. С., Луховенко В. П. Тяжелые металлы во внешней среде: Современные гигиенические и токсикологические аспекты. Минск: Навука i тэхшка, 1994. - 288 с.

132. Федоров Ю. Н., Верховский О. А. Иммунодефицита домашних животных. М., 1996. - 96 с.

133. Францевич Л. И., Гайченко В. А., Крыжановский В. И. Животные в радиоактивной зоне. Киев: Наукова думка, 1991. - 128 с.

134. Фрейдлин И. С. Система мононуклеарных фагоцитов.- М., 1984,- 272 с.

135. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса// Иммунология. 1995. - № 4. - С. 3 - 8.

136. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В., Истамов X. И. Экологическая иммунология. М.: ВНИРО, 1995.

137. Хейхоу Ф. Г. Дж., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия/ Под ред. Н. С. Кисляк; Пер. с англ. Е. В. Самочатовой. М.: Медицина, 1983.

138. Холод В. М., Ермолаев Г. Ф. Справочник по ветеринарной биохимии. -Минск: Урожай, 1988.

139. Цитокинетика и морфология кроветворения при хроническом облучении/ А. В. Илюхин, В. С. Шашков, Т. Е. Бурковская, Э. С. Зубенкова. М.: Энергоатомиздат, 1982.

140. Чередеев А. Н., Ковальчук Л. В. Клеточные и молекулярные аспекты иммунных процессов// Итоги науки и техники, ВИНИТИ. Сер. Иммунология,- 1989.- Т. 19,- 240 с.

141. Шабалин В. Н., Серова Л. Д. Клиническая иммуногематология. Л.: Медицина, 1988.-311 с.

142. Шерстнев М. П. Кальцийзависимый и кальцийнезависимый пути генерации хемолюминесценции клеток// Вопр. хемолюминесценции .1991,- №2.- С. 1-4.

143. Шерстнев М. П. Методика регистрации люминолзависимой хемолюминесценции цельной крови стимулированной кристаллами сульфата бария// Вопр. хемолюминесценции . 1991. - № 2. - С. 20 - 22.

144. Шимайтис Р. С., Цюнене Э. П. К вопросу о влиянии небольших доз свинца на организм работающих// Гиг. труда и профзабол,- 1977.-№12.-С. 50-53.

145. Шубик В. М. Иммунологические исследования в радиационной гигиене. -М.: Энергоатомиздат, 1987. 144 с.

146. Шубик В. М. Ионизирующие излучения и иммунитет. М.: Атомиздат, 1977.

147. Шубик В. М. Проблемы экологической иммунологии.- Л.: Медицина, 1976,- 240 с.

148. Ярилин А. А. Иммунологические нарушения у пострадавших от последствий Чернобыльской аварии и анализ их природы/ В кн.: Последствия Чернобыльской катастрофы: здоровье человека; Под ред. Е. Б. Бурлаковой.- М., 1996.- С. 68 95.

149. Ярилин А. А. Основы иммунологии,- М.: Медицина, 1999,- 608 с.

150. Ярилин А. А. Радиация и иммунитет. Современный взгляд на старые проблемы//Радиационная биология и экология. 1997. - Т. 37. - Вып. 4.- С. 597 603.

151. Ярилин А. А., Полушкина Э. Ф., Филатов П. П. Действие ионизирующей радиации на состояние лимфоидных клеток у мышей// Радиобиология. 1976. - Т. 16, № 3. - С. 451.

152. Ярмоненко С. П. Проблемы радиобиологии в конце XX столетия// Радиационная биология и экология. 1997. - Т. 37. - Вып. 4. - С. 488 -493.

153. Aungst В. J., Fung Н. Toxicol. Appl. Pharmacol.-1981,- V. 61.- P. 39.

154. Barry P. S. I., Mossman D. В., Br. J. Ind. Med.- 1970.- V. 27., p. 339.

155. Bendich A., Belise E. H., Strasser H. R. Immune responses of rats chronically fed subclinical doses of lead// Clin. exp. Immunol.- 1981.- V. 43.-№1.- P. 189- 194.

156. Biological effects of radiation in combination with other physical, chemical or biological agents/ 31 Session of UNSCEAR, Vienna, 15 26 March, 1982. - Vienna, 1982.

157. Blakley B. R., Archer D. L. Toxicol, and Appl. Pharmacol.- 1981,- V. 61.-P. 18.

158. Bowen H. J. M. Environmental Chemistry of the Elements. Academic Press, London, 1979.

159. Buchmuller Rouller Y., Ransijn A., Mauel J. Lead inhibits oxidative metabolism of macrophages exposed to macrophage-activating factor// Biochem. J.- 1989.- V. 260.- №2.- P. 325 - 332.

160. Changes in natural killer cell subpopulations in lead workers/ Sata F., Araki S., Tonigawa T., Morita Y., Sakurai S., Katsuno N.// Int. Arch. Occup. Environ. Health.- 1997.- V. 69.- №5.- P. 306 310.

161. Changing Metal Cycles and Human Health/ ed. by J. O. Nriagu. SpringerVerlag, Berlin, 1984. - p. 359.

162. Gross S. B., Pfitzer E. A., Yeager D. W., Kehoe R. A. Toxicol. Appl. Pharmacol.- V. 32.- p. 638,- 1975.

163. Lowrence D. A. Toxicol, and Appl. Pharmacol.-1981.- V. 72,- P. 48.

164. Oehme F. W. Toxicity of Heavy Metals in Environment: Parts 1 and 2. -Marcel Dekker, New York, 1978.

165. Wagner V., Wagnerova M. Ecoimmunologie.- Praha: Avicenum, 1988. -227 p.