Влияние предварительного гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения свободно-радикального окисления во внутренних органах

Романов, Дмитрий Александрович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние предварительного гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения свободно-радикального окисления во внутренних органах
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние предварительного гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения свободно-радикального окисления во внутренних органах"

На правах рукописи

Романов Дмитрий Александрович

ВЛИЯНИЕ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОГО ГИПОКИНЕТИЧЕСКОГО СТРЕССА НА АЛЛОКСАН - ИНДУЦИРОВАННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СВОБОДНО - РАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ВО ВНУТРЕННИХ ОРГАНАХ

03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 3 ноя 2011

Челябинск-2011

4858317

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: Доктор биологических наук, профессор

Цейликман Вадим Эдуардович

Официальные оппоненты: Доктор медицинских наук, профессор

Никоноров Александр Александрович

доктор медицинских наук, профессор Львовская Елена Ивановна

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет им. Н. И. Пирогова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

¡у

Защита состоится </7 » в часов на заседании

диссертационного совета Д 2^08.117.02 при ГБОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64).

}

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинской государственной медицинской академии

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Н.В. Тишевская

Актуальность

Ограничение мышечной активности неблагоприятно отражается на здоровье населения промышленноразвитых стран. Негативные последствия гипокинезии испытывают на себе как представители профессий, вынужденных в течение длительного времени вести малоподвижный образ жизни, так и отдельные категории больных, находящиеся на строгом постельном режиме (Коваленко Е.А., Гуровский H.H., 1980; Тигранян P.A., 1987; Фёдоров И.В., 1984). Гипокинезия, постоянно сопутствующая современному человеку, существенно влияет на реактивность организма, что часто сопровождается изменением устойчивости к различным факторам окружающей среды (Чёрный A.B., 1984). Во многом это связано с напряжением механизмов нейро-эидокринной регуляции (Тигранян P.A., 1987), способствующих развитию хронического стресса.

В свою очередь, предварительные стрессорные воздействия, связанные с ограничением двигательной активности (повторные иммобилизации), характеризуются изменением чувствительности к действию химического диабетогена - аллоксана (Волчегорский И.А. и соавт., 1995-2005; Колесников О.Л., 1998; Цейликман В.Э., 1999; Синицкий А.И., 2008). Ранее было установлено, что стрессорная регуляция гиперглнкемизнрующего действия аллоксана непосредственно затрагивает свободно-радикальное окисление во внутренних органах и активность в них моноаминоксидазы-Б (МАО-Б), являющейся одним из ферментов, вовлечённых в развитие окислительного стресса (Волчегорский И.А. и соавт., 2002; Синицкий А.И., 2008). Кроме того, МАО-Б является одним из маркёров десенситизацни органов-мишеней к глюкокортикоидам (Волчегорский И.А. и соавт., 2002; Цейликман В.Э. и соавт., 2009). Известно, что гипокинетический стресс в результате повышенной чувствительности к глюкокортикоидам характеризуется противовоспалительным действием (Цейликман В.Э. и соавт., 2011). Между тем, гипергликемизирующее действие аллоксана реализуется по механизму индукции инсулита (Балаболкин М.И., 1994; Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П.,

2000). Кроме того, предварительный стресс может усилить аллоксан-индуцированпую гипергликемшо за счёт провоспалительных изменений в печени (Волчегорский И.А., 2005).

К сожалению, остаётся неизвестным характер модифицирующего действия гипокинетического стресса по отношению к аллоксан-индуцированной гипергликемии. Так же непонятно, каким образом предварительное воздействие гипокинетического стресса отразится на аллоксан-индуцированных изменениях интенсивности свободно-радикального окисления. Цель исследования

Определить характер влияния предшествующего гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения гликемии и соотношение между липопероксидацией и окислением белков во внутренних органах.

Задачи исследования

1. Изучить модифицирующее влияние 30-суточной гипокинезии на выраженность гипергликемии и показатели липидограммы при введении аллоксана.

2. Исследовать воздействие 30-суточной гипокинезии на аллоксан-индуцированные изменения содержания церулоплазмина и продуктов ПОЛ в плазме крови.

3. Определить уровень свободно-радикального окисления, активность МАО-Б и выраженность лейкоцитарной инфильтрации в печени при введении аллоксана и 30-суточиой гипокинезии.

4. Изучить изменения показателей свободно-радикального окисления и лейкоцитарной инфильтрации в почках при введении аллоксана и 30-суточной гипокинезии.

5. Оценить действие аллоксана и 30-суточной гипокинезии на изменения поведенческой активности и уровень свободно-радикального окисления в головном мозге.

Научная новизна

Впервые продемонстрирован протекторный эффект 30-суточной гипокинезии по отношению к гипергликемизирующему действию аллоксана. Показано, что способность гипокинезии ограничивать действие химического диабетогена связана с её панкреатопротекторным действием, проявляющимся в ограничении аллоксан-зависимого снижения количества островков Лангерганса и экзокринных ацинусов. Установлено, что способность 30-суточной гипокинезии ограничивать аллоксан-индуцированную гипергликемию сопряжена с усугублением аллоксан-зависимого снижения уровня холестерина в альфа-лппопротеинах и увеличением уровня изопропанол-растворимых диеновых конъюгатов в плазме крови. Обнаружено, что предварительная гипокинезия предупреждает аллоксан-зависимую активацию свободно-радикального окисления в головном мозге и усугубляет угнетение поведенческой активности, вызванное химическим диабетогеном. Показано, что способность предварительной гипокинезии ограничивать аллоксан-зависимую активацию свободно-радикального окисления в печени сопряжена со снижением активности МАО-Б в органе. В почках ограничение аллоксан-зависимой активации свободно-радикального окисления ассоциируется с уменьшением уровня мононуклеарной инфильтрации и некротического поражения паренхимы органа.

Теоретическая и практическая значимость

результатов исследований возможен поиск путей коррекции сахарного диабета с использованием антиоксидантных препаратов. Полученные данные указывают на перспективность дальнейших исследований анксиолитических препаратов в качестве гепатопротекторов при сахарном диабете.

Положения, выносимые на защиту

1. Соотношение между перекисным окислением липидов и окислением белков при введении химического диабетогена аллоксана в печени, почках и головном мозге имеет органоспецифичный характер.

2. Способность предварительной гипокинезии ограничивать гипергликемизирующее и панкреатодеструктивное действие аллоксана сопряжена со снижением уровня липопероксидации во внутренних органах.

3. Предварительная гипокинезия обуславливает ограничение аллоксан-зависимой лейкоцитарной инфильтрации паренхимы печени и почек, что сопряжено с ограничением липопероксидации и карбонилирования белков.

Апробация работы

Основные положения работы изложены и представлены на международном молодёжном медицинском конгрессе (Санкт-Петербург, 2005), научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2006), 61 межинститутской научной студенческой конференции Челябинской государственной медицинской академии «Молодые исследователи в медицине и биологии» (Челябинск, 2007), всероссийском научном форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2007), а также на российской конференции, посвященной 80-

летаю со дня рождения Р.И. Лифшица «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии» (Челябинск, 2009).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 3 - в рецензируемых журналах по перечню ВАК Минобразования РФ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, главы собственных исследований, обсуждения результатов, выводов. Библиографический указатель включает 214 источников: 105 - на русском языке и 109 - иностранных. Работа содержит 13 таблиц, 5 рисунков.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование выполнено на 250 лабораторных крысах обоего пола массой 150 - 250 г. Использовались беспородные животные. Животных содержали в стандартных пластмассовых клетках при комнатной температуре на стандартной диете. За 24 часа до опыта животным прекращали подачу пищи при неограниченном доступе к воде. Эксперименты с лабораторными животными проведены в соответствии с этическими нормами и рекомендациями (Кополадзе P.A., 1998), отражёнными в «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных или иных научных целях» (Страсбург, 1986). Эвтаназию грызунов осуществляли цервикальной дислокацией.

Моделирование гипокинетического стресса

Гипокинетический стресс моделировали путём помещения крыс в специальные клетки-пеналы, ограничивающие подвижность животных, при

свободном доступе к пнще и воде. Применялась 30-суточная модель гипокинетического стресса.

Моделирование сахарного диабета

Сахарный диабет первого типа вызывали путём внутрибрюшинного введения 4% раствора аллоксана тригидрата (La Chema, Чехия) в дозе 200 мг/кг животным, лишённым пищи за сутки до постановки эксперимента. Контрольным животным вводили эквиобъёмное количество 0,9% раствора хлорида натрия. Умерщвление животных проводили через 72 часа после инъекции аллоксана, когда уровень гликемии в 5-6 раз превышал контрольные значения.

Биохимические методы

Содержание глюкозы в сыворотке крови определяли глюкозооксидазным методом с использованием тест-систем компании "Вектор Бэст", церулоплазмина - методом Равина (Камышников B.C., 2000), а-токоферола - колориметрически с использованием реактива Эмери-Энгель. Активность СОД оценивали по методике Чевари С. и соавт. (1985), миелопероксидазы - Симакова П.В. (Попов Т., 1971), ксантиноксидазы -Hashimoto (1974), моноамнноксидазы (МАО-Б) - методом Волчегорского И .А. и др. (1991), каталазы - по методу Королюк М.А. и соавт. (1988).

Содержание общего холестерина, холестерина ЛПВП (а-холестерин), триглицеридов в сыворотке крови определяли с помощью тест-систем компании "Вектор-Бэст".

Уровень окислительной модификации белков в исследуемых тканях оценивали по образованию динитрофенилгидразонов (метод Дубининой Е.Е., 1995).

Содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ)

оценивали спектрофотометрически в липидном экстракте исследуемых

тканей по методике Волчегорского И.А. и др. (1989). Определение конечных

продуктов перекисного окисления липидов (Шиффовы основания) проводилось спектрофотометрическим методом по Львовской Eil с соавт.

Фармакологическое моделирование стрессорнои активации ГГАС

Для фармакологического моделирования стрессорпой активации ГГАС применялся глюкокортикоидный препарат пролонгированного действия -триамцинолона ацетонид (кеналог, Berline Chemie). Суспензию кеналога готовили на 0,9% NaCl до концентрации 0,8 мг/мл и вводили животным подкожно в объёме 2,5 мл/кг (доза - 2 мг/кг) через 24 часа после окончания гипокинетического стресса. Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество 0,9% NaCl. Глюкокортикоид-зависимые изменения во внутренних органах оценивали через 96 часов после введения триамцинолона ацегонида.

Морфологические методы

Гистологические препараты внутренних органов готовили по стандартным методикам (кусочки фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина с последующей проводкой через спирты, заключали в парафин, изготавливали серийные срезы 5 - 7 мкм, которые после депарафшшрования окрашивали гематоксилином и эозином). Морфометрическое определение абсолютного количества клеток проводили на 1 мм2 среза. Объёмное содержание некоторых исследуемых объектов выполнено с применением планиметрического метода точечного счета (Автандилов Г.Г., 1980).

Статистический анализ результатов

Результаты обрабатывались общепринятыми методами вариационной

статистики (Лакин Г.Ф., 1990) и выражались в виде среднеарифметической

(М) и её стандартной ошибки (m). О достоверности различий судили по

критериям непараметрнческой статистики: Манна-Уитни (U) и Вальда-

Вольфовица (WW). Различия считали значимыми при Р<0,05.

Статистические взаимосвязи изучали при помощи непараметрического корреляционного анализа, выполняя расчёт коэффициентов корреляции рангов по Спирмену (г3) и Кенделлу (гк).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние 30-суточной гипокинезии на чувствительность к гипергликемизируюшему действию аллоксана, морфологические характеристики поджелудочной железы и показатели липидограммы

Через 72 часа после инъекции аллоксана наблюдалось развитие выраженной гипергликемии, что проявилось почти в четырёхкратном увеличении концентрации глюкозы (рисунок 1).

Рисунок 1

Влияние аллоксана на уровень глюкозы в плазме крови

Примечание:

ГКЗО Гипокинезия 30 суток ГКЗО+Аллоксан - Гипокинезия 30 суток + аплоксан

* - статистически значимые различия между группами «Контроль» и «Аллокссм», Р<0,051/

** - статистически значимые различия между группами «Аллоксаи» и «Гипокинезия 30 суток + аллоксаи», Р<),05Ш

Предварительная 30-суточная гипокинезия ограничивала выраженность гипергликемии, вызванной введением аллоксана (рисунок 1).

Согласно данным гистологического анализа через 72 часа после завершения гипокинезии в поджелудочной железе одновременно возрастало количество островков Лангерганса и снижалось число клеток экзокринных ацинусов и протоков (таблица 1).

тМ/я

Таблица 1

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на морфологические

показатели в поджелудочной железе

Показатель 1 Контроль (п=15) 2 Гипокинезия 30 суток (п=14) 3 Аллоксан (п=7) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=16)

Клетки островков Лангерганса (кл/мм2) 29,44±5,12 53,57±15,43 ри=о,озтг 9,73±7,51 Р 1.3=0,01 и 50,74±8,30 р3,4=о,оози

Клетки экзокринных ацинусов и протоков (кл/мм2) 819,95±73,45 621,21 ±74,32 Ри=0.05и 463,93±2 3,10 />м 0,0021/ 956,58±123,71 р2.4=о,ози Рц=0,00би

-_I_|___'

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Маниа-Уитни (II), Валъда-Волъфовица (\Ш).

Введение аллоксана животным приводило к поражению поджелудочной железы, что проявилось уменьшением количества экзокринных ацинусов и островков Лангерганса. Предварительная 30-суточная гипокинезия купировала панкреатодеструктивное действие аллоксана. Отмечалось восстановление числа островков Лангерганса и экзокринных ацииусов в группе «Гипокинезия 30 суток + аллоксан» по сравнению с группой «Аллоксан» (таблица 1).

Таким образом, способность предварительной гипокинезии смягчать гипергликемизирующий эффект аллоксана ассоциируется с ее панкреатопротекторным действием.

Через 72 часа после введения аллоксана наблюдалось повышение содержания триглицеридов в сыворотке крови. Введение аллоксана после завершения 30-суточной гипокинезии сопровождалось снижением содержания холестерина ЛПВП (рисунок 2).

Рисунок 2

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на показатели

Примечание:

ГКЗО+Аллоксан

Гипокинезия 30 суток + аллоксан

* - статистически значимые различия между группами «Контроль» и «Аллоксан», Р<0,05и

** - статистически значимые различия между группами «Аллоксан» и «Гипокинезия 30 суток + аллоксан», Р<0,0511 Данные представлены в процентах от соответствующих показателей контрольной группы

Влияние аллоксана и 30-суточиой гипокинезии на изменения уровня церулоплазмина и циркулирующих продуктов ПОЛ в крови

Через 72 часа после введения аллоксана наблюдалось снижение содержания церулоилазмина в сыворотке крови (контроль 26,37±1,05 ммоль/л (п=8), аллоксан 23,77±0,06 ммоль/л (п=8), Р<0,05\¥\У). При введении аллоксана животным, предварительно подвергшимся гипокинетическому стрессу, не выявлено статистически значимых различий по содержанию церулоилазмина от соответствующего показателя групп «Контроль» и «Гипокинезия 30 суток».

При введении аллоксана после завершения 30-суточной гипокинезии наблюдалось увеличение содержания изопропанол-растворимых диеновых конъюгатов по сравнению с группой «Аллоксан» (таблица 2).

липидограммы

Я Контроль В Аллоксан ВГК30*Аллокеан

Таблица 2

Влияние 30-суточиой гипокинезии и аллоксана на содержание пекулярных продуктов ПОЛ и активность миелопероксидазы в крови

Показатель 1 Конгроль (п-8) 2 Аллоксан (п=8) 3 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (л—12)

Диеновые коныогаты (изопропанолъная фаза) 0,19±0,01 0,18±0,02 0,23±0,01 Р2.3=0,011}

Кетодиены и сопряжённые триеиы (изопропанольная фаза) 0,60±0,02 0,66±0,01 Р и=0.02и 0,67±0,02

Диеновые конъюгаты (гептановая фа за) 0,77±0.02 0,75±0,04 0,78±0,02

Кетодиены и сопряжённые триены (гептановая фаза) 0,17±0,12 0,10±0,01 0,Ю±0,01

Миелопероксидаза (фМ/мин/кя) 20,38±1,75 26,37±1,16 Р, 2=0,014и 30,38±1,23 Р? з=0,021)

Л I I ----------л

группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни (V).

Кроме того, в группе «Гипокинезия 30 сут + аллоксан» по сравнению с группой «Аллоксан» наблюдалось увеличение активности миелопероксидазы (таблица 2). Согласно данным литературы, активация миелопероксидазы приводит к образованию перекисно-модифицированных лшопротеинов, для которых характерно проатерогенное действие (Панасенко О.М., 2006).

Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободно-радикального окисления, активность МАО-Б и морфологические

показатели в печени

Через 72 часа после введения аллоксана наблюдалось увеличение содержания гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов, а также карбонилированных белков в печени (таблица 3). Предшествующая введению аллоксана 30-суточиая гипокинезия способствовала снижению карбонилирования белков, а также ограничивала липопероксидацию, что

проявлялось в снижении содержания гептан-растворимых кетодиенов сопряжённых триенов (таблица 3).

Таблица 3

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на состояние свободно-радикального окисления в печени

Показатель 1 Контроль (п=7) 2 Гипокинезия 30 суток (п=8) 3 Аллоксан (11=8) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=9)

Диеновые коньюгаты (гептановая фаза) 0,70±0,03 0,72±0,04 0,85±0,05 0,72±0,04 р!4=о.02тг

Кетодиеиы и сопряжённые триены (гептановая фаза) 0,23±0,01 0,22±0,01 0,31±0,02 Р 1,з-0,03 и 0,23±0,01 Рз.4~0,021/

Карбонилироваиные белки (тюль/г ткани) 1,36±0,28 1,80±0,45 2,27±0,19 Р, 3=0.041/ 2,09±0,58 Рз 4=0,021/

Карбонилироваиные белки индукция Ге2+/Н202 (ммоль/г ткани) 23,25±4,50 21,95+2,87 Ри=0,04тг 26,92±3,64 18,57+2,10

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни (V), Вальда-Вольфовица (т¥)

Предварительная 30-суточная гипокинезия способствовала снижению активности моноаминоксидазы (МАО-Б) в печени (рисунок 3),

Рисунок 3

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на активность моноаминоксидазы-Б в печени

Примечание:

ГКЗО - Гипокинезия 30 суток ГКЗО+Аллоксан - Гипокинезия 30 суток + аллоксан

*- статистически значимые различия между группами «Контроль» и «Гипокинезия 30 суток», Р<0.051/

*- статистически значимые различия между группами «Аллоксан» и «Гипокинезия 30 суток + аллоксан», Р<0,05и

Введению аллоксана на фоне предварительной гипокинезии сопутствовало ограничение активности МАО-Б в печени животных группы «Гипокинезия 30 суток + аллоксан» по сравнению с группой «Аллоксан».

Введение аллоксана сопровождалось снижением количества гепатоцитов при одновременном возрастании уровня некротического поражения. Также отмечалось увеличение макрофагалыю-лимфоцитарной инфильтрации (таблица 4).

Таблица 4

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на морфологические показатели в печени

Показатель 1 Контроль (п=12) 2 Гипокинезия 30 суток (п=6) 3 Аллоксан (11=10) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=12)

Некроз (%) 0,33±0,33 0,67±0,67 2,67±0,44 ри=о,ози 0,33±0,33 р3,4=о,озтг

Соединительная ткань (%) 3,67±0,33 3,33±0,67 4,00±0,03 3,33±0,66 р, 4=0.0¡ут

Гепатоциты (кл/мм2) 753,79±38,46 890,80±71,90 Р, 2=0,0411 418,67±167,31 Ри=0,0411 748,38±51,29 Р^=0,02и

Макрофаги (кл/мм2) 3,02±0,87 5,10±1,30 6,33±2,53 Р,з=0.04\У\У 6,65±1,16 Рг,4=0,03}т

Лимфоциты (кл/мм2) 34,40±5,20 18,95±5,90 50,60±3,67 Р; 3 = 0,0151! 25,51±6,01 Рз4=0.03и

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни (V), Вальда-Вольфовица (}ПУ).

Предварительная 30-суточная гипокинезия способствовала пролиферации гепатоцитов. При введении аллоксана после 30-суточной гипокинезии обнаружено увеличение количества гепатоцитов, уменьшение выраженности некротического поражения и лимфоцитарной инфильтрации, снижение объёмной плотности соединительной ткани (таблица 4).

Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободно-радикального окисления и морфологические показатели в почках

Установлено, что введение аллоксана сопровождалось повышением содержания гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов, а также двухкратным увеличением уровня карбоншшрованных белков в почках (таблица 5).

Предварительная гипокинезия отменяла аллоксан-зависимый прирост продуктов ПОЛ и карбонилирования белков. Кроме того, в группе «Гипокинезия 30 сут + аллоксан» по сравнению с группой «Аллоксан» снижалось содержание изопропаиол-растворимых Шиффовых оснований (таблица 5).

Таблица 5

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на состояние свободно-

радикального окисления в почках

Показатель 1 Контроль (п=7) 2 Гипокинезия 30 суток (п=8) 3 Аллоксан (п=8) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=9)

Кетодиены и сопряжённые триепы (гептановая фаза) 0,18±0,01 0,18±0,01 0,21 ±0,01 р 1,з=о,015ту 0,16±0,02 Рз.4=0,04и

Шиффовы основания (гептановая фаза) 0,19±0,02 0,26±0,05 0,20±0,02 0Д5±0,01 Рз 4=0,041]

Карбоннлированиые белки (ммоль/г ткани) 0,46±0,07 0,43±0,09 Ро=0,04ГПГ 1,01±0,25 Ри=0.04и 0,54±0,12 Р 3.4=0,015 и

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни (11), Вальда-Волъфовица (ЩУ).

Установлено, что введение аллоксана сопровождалось возрастанием объёмной плотности некрозов в почках при одновременном увеличении макрофагальной инфильтрации. Введение аллоксана после завершения 30-суточной гипокинезии не повлекло усиления некротического поражения

органа, а также привело к достоверному снижению макрофагальной инфильтрации (таблица 6).

Таблица 6

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на морфологические показатели в почках

Показатель 1 Контроль Сп=Щ 2 Гипокинезия 30 суток (п=7) 3 Аллоксан (п=9) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=12)

Некроз (%) 3,64±0,21 4,33±0,36 8,21±0,94 Ри=0,04тУ 6,54±0,52

Макрофаги (кл/мм2) 3,80±1,14 1,90±0,85 5,80±1,21 Р, ;=0,003и 4,13±0,55 Р3.4=0,002тг

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни (V), Вальда-Вольфовица

Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободно-радикального окисления в головном мозге и характер поведенческой активности

Установлено, что через 72 часа после введения аллоксана в головном мозге наблюдалось снижение окислительной модификации белка на базальтом уровне и в ответ на индукцию Ре+:/Н202 (таблица 7). Одновременно отмечалось увеличение содержания гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов.

Введение аллоксана на фоне предварительной 30-суточной гипокинезии привело к восстановлению уровня окислительной модификации белка до контрольных значений (таблица 7). Кроме того, купировалось вызванное инъекцией аллоксана усиление ПОЛ в головном мозге.

Таблица 7

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на состояние свободно-радикального окисления в головном мозге

Показатель 1 Контроль (п=7) 2 Гипокинезия 30 суток (п=8) 3 Аллоксан (п=8) 4 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=13)

Диеновые конъюгаты (гептановая фаза) 0,70±0,03 0,72±0,04 0,85±0,05 0,72±0,03 Р34^0,02\У\У

Кетодиены н сопряжённые триены (гептановая фаза) 0,23±0,01 0,22±0,01 0,31 ±0,02 ри=о,ози 0,23±0,01 Рз,4=0,02и

Карбонилированиые белки (ммоль/г ткани) 5,34±0,87 6,08±1,23 2,64±0,67 Ри=0,04и 5,00±0,71 Рзд=0,05и

Карбонилированиые белки индукция Ре27Н2СЬ (ммоль/г ткани) 3,16±0,67 3,15±0,64 1,20±0,27 Р1,з=0,02и 2,67±0,36 Рз.4=0,0Ш

Примечание: Р - статистически значимые различия между указанными в индексах группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни (II), Вапьда-Волъфовица (ЮУ).

В условиях 30-суточной гипокинезии наблюдалась стимуляция поведенческой активности, проявлявшаяся в увеличении количества локомоций через 24 часа после завершения хронического стрессорного воздействия (контроль 30,54±1,73 (п=17), гипокинезия 30 суток 41,06±4,37 (п=22), Р<0,05Ц). Введение животным аллоксана привело к уменьшению ориентировочной и исследовательской реакции по сравнению с показателями контроля. Введение аллоксана животным, предварительно перенёсшим 30-суточную гипокинезию, усугубило снижение исследовательского поведения и ориентировочной реакции (таблица 8).

Полученные результаты свидетельствуют о способности предварительного гипокинетического стресса оказывать диабет-протекторное действие. Важно отметить, что рассматриваемый режим хронического стресса обладал способностью повышать чувствительность органов и тканей к глюкокортикоидам.

Таблица 8

Влияние 30-суточной гипокинезии и аллоксана на поведенческую

активность

Показатель Серия 1 Контроль (п=8) 2 Аллоксан (nl=9, nll=8) 3 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (nl-13, пП=12)

Локомоция (пересечения квадратов открытого поля) I 33,25±6,26 38,55±8,45 41,15±6,1б

11 20,37±6',13 22,00^5,30 18,08±4,42 Р1,11=0,0 IV

Ориентировочная реакция (вертикальные стойки) I 6,75±1,37 10,44±3,42 9,31±1,36

IF 5,75±1,42 7,50±3,17 PI,11=0,14WW 3,50±0,80 PI,11=0,01 и

Познавательные рефлексы (выглядывания через отверстия) I 6,00±1,75 6,22±0,86 12.23±1,95 P23=0,02U

II 3,50±1,19 3,00±1,51 PIM=0,03U 1,25±0,37 PI,II=0,02U

Груминг I 6,00±1.00 4,00±1,22 3,92±0,70

II ЗД2±0,58 3,87±0,23 PIU=0,03U 3,17±0,47

Примечание: серия I - тестирование крыс в открытом поле до введения аллоксана, серия

II - тестирование крыс в открытом поле через 72 часа после введения аъюксана.

Р2.з - достоверные различия между группами «Аллоксан» и «Гипокинезия 30 суток +

агчоксан»

pjjf..... достоверные различия между первой и второй сериями тестирования внутри

группы, п! и nil - количество животных внутри группы в первой и второй серии тестирования соответственно. Статистическая обработка данных произведена с использование.ч непараметрических критериев Манна-Уитни (U), Вапьда-Вольфовица

(mv).

В качестве критерия, по которому оценивалась чувствительность к глюкокортикоидам, была выбрана устойчивость иммунных органов к препарату кеналогу (триамшшолона ацетонид) (Волчегорский И.А. и соавт., 2000). Ранее с помощью «аналогового теста» В.Э. Цейликманом и соавторами (2003) продемонстрирована повышенная чувствительность к экзогенному глюкокортикоиду при гипокинетическом стрессе.

В наших исследованиях установлено, что 30-суточная гипокинезия потенцировала гипоплазию вилочковой железы в ответ на введение аллоксана (таблица 9).

Таблица 9

Влияние гипокинетического стресса, триамцинолона ацетонида и аллоксана на количество ядросодержащих клеток в тимусе

Группа Ядросодержащие клетки тимуса ( хЮ6 клеток)

1 Контроль (п=13) 340,65±29,72

2 Гипокинезия 30 суток (п=11) 233,37±49,5

3 Триамцинолона ацетонид (п=16) 199,8±19,4 Р, ,=0.0Ш

4 Аллоксан (п=9) 276,13±0,53

5 Гипокинезия 30 суток + ТА (п=13) 121,14±11,36 Рз.,=0,0Ш

6 Гипокинезия 30 суток + аллоксан (п=11) 154,16±1,27 Р4.б=0,02и

<-------------- - ти-••снгхс уизличия мелсиу указанными в иноексах

группами. Статистическая обработка данных произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни(Ц).

При этом в исследованных органах наблюдалось снижение уровня липопероксидации и карбонилирования белков. Вероятно, животные, подвергнутые гипокинезии, получали химический диабетоген, будучи уже сенситизированными к глюкокортикоидам. Это могло ограничивать развитие аллоксан-индуцнрованного инсулита, а также вызванные химическим диабетогеном провоспалительные изменения в печени.

Предшествующая гипокинезия значительно ограничила аллоксан-индуцированное усиление свободно-радикального окисления. В печени и почках введение аллоксана привело к усилению ПОЛ и окисления белков. Но в головном мозге в ответ на введение аллоксана помимо усиления ПОЛ наблюдалось снижение содержания карбонилирования белков. Ранее наличие реципрокных отношений между липопероксидацией и окислением белков неоднократно указывалось и другими авторами (Волчегорский И.А. и соавт., 2007; Цейликман В.Э. и соавт., 2009). В печени, почках и головном мозге в ответ на введение аллоксана наблюдалось увеличение содержания только одной категории молекулярных продуктов ПОЛ, а именно: гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов. В связи с этим интересно

отметить, что прирост гептанофильных кетодиенов и сопряжённых трненов также наблюдался и в ответ на введение глюкокортикоидного препарата -кеналога (Волчегорский И.А. и соавт., 2003; Бубнов Н.В., 2009; Борисенков A.B., 2009). Этот факт является дополнительным аргументом в пользу гипотезы о глюкокортнкоид-зависимом характере изменения показателей свободно-радикального окисления в ответ на введение аллоксана.

ВЫВОДЫ

1. Предварительная 30-суточная гипокинезия в результате панкреатопротекторного действия ограничивает выраженность гипергликемии, а также усугубляет аллоксан-зависимое снижение содержания а-холестерина.

2. Введение аллоксана после завершения 30-суточной гипокинезии приводит к увеличению содержания изопропанол-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов на фоне снижения содержания в сыворотке крови церулоплазмина.

3. Гипергликемизирующее действие аллоксана сопряжено с увеличением содержания гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов в печени, почках и головном мозге. Окисление белков при введении аллоксана имеет органоспецифичный характер. В печени и почках отмечено увеличение содержания карбонилированных белков, а в головном мозге - снижение их уровня.

4. В печени предварительная 30-суточная гипокинезия после дополнительного введения аллоксана снижает уровень липопероксидации и окислительной деструкции белков при одновременном угнетении активности прооксидантного фермента МАО-Б. Снижение свободно-радикального окисления у животных группы «Гипокинезия 30 суток + аллоксан» ассоциируется с гепатопротекторным действием, проявлявшимся в уменьшении уровня некротического поражения паренхимы органа и фиброзирования.

5. В почках предварительная 30-суточная гипокинезия снижает содержание гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов, а также карбонилированных белков. Ограничение свободно-радикального окисления у животных группы «Гипокинезия 30 суток + аллоксан» ассоциируется с уменьшением мононуклеарной инфильтрации и уровня некротического поражения паренхимы органа.

6. Предварительная 30-суточная гипокинезия снижает содержание гептан-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов в головном мозге в ответ на дополнительное введение аллоксана и усугубляет развитие аллоксан-зависимых нарушений поведенческой активности.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Романов, Д. А. Днабетпротекторное действие семидневной гипокинезии / Д.А. Романов // Международный молодёжный медицинский конгресс: Санкт-Петербургские научные чтения - тезисы. СПб. - 2005. - С. 118-119.

2. Цейликман, В.Э. Адаптивные и дезадаптивные последствия резистентной и толерантной биохимических стратегий адаптации / В.Э. Цейликман, О.Б. Цейликман, А.И. Синицкий, Д.А. Романов, Е.А. Лавин, И.И. Григорьев, А.Б. Горностаева // Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины: материалы научно-практической конференции с международным участием. Астрахань. -2006. - С. 25-28.

3. Романов, Д.А. Влияние гипокинетического стресса на действие химического диабетогениого фактора / Д.А. Романов, М.И. Нестеров, B.C. Абашкин // Молодые исследователи в медицине и биологии 2007. -материалы 61 межинститутской научной студенческой конференции. Челябинск. - 2007. - С. 79-80.

4. Цейликман, В.Э. Биохимические стратегии адаптации в условиях хронического стресса / В.Э. Цейликман, О.Б. Цейликман, Е.А. Лавин, М.И. Нусратов, И.А. Лаптева, Д.А. Романов // Вестник ЮУРГУ образования, здоровья и физической культуры. - 2008. - №14 - С. 5657.

5. Лаптева, И.А. Состояние свободнорадикального окисления в эритроцитах при гипокинетическом и иммобилизационном стрессе / И.А. Лаптева, А.Б. Горностаева, Д.А. Козочкин, Д.А. Романов, C.B. Попов // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. Российская конференция, посвященная 80-летию со дня рождения Р.И. Лифшица. Челябинск. - 2009. - С. 57.

6. Козочкин, Д.А. Повышение чувствительности вилочковой железы к глюкокортикоидам и панкреопротекторное действие предварительной тридцатисуточной гипокинезии в условиях продиабетогенного действия аллоксана / Д.А. Козочкин, Д.А. Романов, Л.А. Стрельникова, И.В. Стрельников, Т.А. Филимонова, Л.Ф. Чарная, К.В. Маляр // Вестник Уральской медицинской

академической науки 2011 №2/1 (35) Тематический выпуск по аллергологии и иммунологии. - С. 37-38.

7. Синицкий, А.И. Свободно-радикальное окисление в тимусе, селезенке и костном мозге при гипокинетическом стрессе / А.И. Синицкий, Т.Г. Тимофеева, Т.А. Филимонова, Д.А. Романов, Л.А. Стрельникова // Вестник Уральской медицинской академической науки 2011 №2/1 (35) Тематический выпуск по аллергологии и иммунологии С. 67-68.

Список использованных сокращений:

ГГАС - гипоталамо-гипофизарно-адреналовая система ГК - гипокинезия ЛП - липопротеины

ЛПНП - липопротеины низкой плотности ЛГТОНП - липопротеины очень низкой плотности

ЛПВП - липопротеины высокой плотности

МАО - моноаминоксидаза (КФ 1.4.3.4.) ПОЛ - перекисное окисление липндов ТА - триамцинолона ацетонид ТГ - триглицериды Хс - холестерин и - критерий Манна-Уитнп

- критерий Вальда-Вольфовица

Подписано в печать 12.10.2011 Формат бумаги 60x841 /16. Заказ 1110121029. Объем 1,5 усл. п. л. Тираж 100 экз. Отпечатано: ООО «Прессто» Свердловский пр., 32, оф. 08. Тел.: (351) 239-11-08, www.pressto74.ru

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Романов, Дмитрий Александрович

Список использованных сокращений.

Введение.

Актуальность.

Цель исследования.

Задачи исследования.

Научная новизна.

Теоретическая и практическая значимость.>.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Публикации.

Структура и объём диссертации.

Глава 1 Обзор литературы.

Этиопатогенез сахарного диабета.

Современные представления о процессах свободно—радикального окисления.

Оксидативный стресс и антиоксидантная защита при сахарном диабете.

Осложнения при сахарном диабет и их патогенез.

Глава 2 Материалы и методы исследования.

1 Моделирование изучаемых состояний.

Моделирование гипокинетического стресса.

Моделирование сахарного диабета.

Фармакологическое моделирование стрессорной активации ГГАС.

2 Методы анализа изучаемых явлений.

Нейроэтологические методы.

Биохимические методы.

Гематологические и иммунологические методы.

Морфологические методы.

Статистический анализ результатов.

Глава 3 Результаты и обсуждение.

1 Влияние 30-суточной гипокинезии на чувствительность к гипергликемизирующему действию аллоксана, морфологические 45 характеристики поджелудочной железы и показатели липидограммы.

2 Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободно-радикального окисления в головном мозге и характер поведенческой 54 активности.

3 Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободно-радикального окисления, активность МАО-Б и морфологические показатели в печени.

4 Влияние аллоксана и 30-суточной гипокинезии на уровень свободнорадикального окисления и морфологические показатели в почках.

Обсуждение.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние предварительного гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения свободно-радикального окисления во внутренних органах"

Актуальность

Ограничение мышечной активности неблагоприятно отражается на здоровье населения промышленноразвитых стран. Негативные последствия гипокинезии испытывают на себе как представители профессий, вынужденных в течение длительного времени вести малоподвижный образ жизни, так и отдельные категории больных, находящиеся на строгом постельном режиме (Коваленко Е.А., Туровский H.H., 1980; Тигранян P.A., 1988; Фёдоров И.В., 1984). Гипокинезия, постоянно сопутствующая современному человеку, существенно влияет на реактивность организма, что часто сопровождается изменением устойчивости к различным факторам окружающей среды (Чёрный A.B., 1975). Во многом это связано с напряжением механизмов нейро-эндокринной регуляции (Тигранян P.A., 1988), способствующих развитию хронического стресса.

В свою очередь, предварительные стрессорные воздействия, связанные с ограничением двигательной активности (повторные иммобилизации), характеризуются изменением чувствительности к действию химического диабетогена - аллоксана (Волчегорский И.А. и соавт., 1995-2005; Цейликман В.Э., 1999; Синицкий А.И., 2008). Ранее было установлено, что стрессорная регуляция гипергликемизирующего действия аллоксана непосредственно затрагивает свободно-радикальное окисление во внутренних органах и активность в них моноаминоксидазы-Б (МАО-Б), являющейся одним из ферментов, вовлечённых в развитие окислительного стресса (Волчегорский И.А. и соавт., 2002; Синицкий А.И., 2008). Кроме того, МАО-Б является одним из маркёров десенситизации органов-мишеней к глюкокортикоидам (Волчегорский И.А. и соавт., 2002; Цейликман В.Э. и соавт., 2009). Известно, что гипокинетический стресс в результате повышенной чувствительности к глюкокортикоидам характеризуется противовоспалительным действием (Цейликман В.Э. и соавт., 2011). Между тем, гипергликемизирующее действие аллоксана реализуется по механизму индукции инсулита

Балаболкин М.И., 1994; Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П., 2000). Кроме того, предварительный стресс может усилить аллоксан-индуцированную гипергликемию за счёт провоспалительных изменений в печени (Волчегорский И.А., 2005).

Цель исследования

Задачи исследования

3. Определить уровень свободно-радикального окисления, активность МАО-Б и выраженность лейкоцитарной инфильтрации в печени при введении аллоксана и 30-суточной гипокинезии.

5. Оценит!» действие аллоксана и 30-суточной гипокинезии на изменения поведенческой активности и уровень свободно-радикального окисления в головном мозге.

Научная новизна

Впервые продемонстрирован протекторный эффект 30-суточной гипокинезии по отношению к гипергликемизирующему действию аллоксана. Показано, что способность гипокинезии ограничивать действие химического диабетогена связана с её панкреатопротекторным действием, проявляющимся в ограничении аллоксан-зависимого снижения количества островков Лангерганса и экзокринных ацинусов. Установлено, что способность 30-суточной гипокинезии ограничивать аллоксан-индуцированную гипергликемию сопряжена с усугублением аллоксан-зависимого снижения уровня холестерина в альфа-липопротеинах и увеличением уровня изопропанол-растворимых диеновых конъюгатов в плазме крови. Обнаружено, что предварительная гипокинезия предупреждает аллоксан-зависимую активацию свободно-радикального окисления в головном мозге и усугубляет угнетение поведенческой активности, вызванное химическим диабетогеном. Показано, что способность предварительной гипокинезии ограничивать аллоксан-зависимую активацию свободно-радикального окисления в печени сопряжена со снижением активности МАО-Б в органе. В почках ограничение аллоксан-зависимой активации свободно-радикального окисления ассоциируется с уменьшением уровня мононуклеарной инфильтрации и некротического поражения паренхимы органа.

Теоретическая и практическая значимость

Выявлены адаптивные последствия гипокинезии, связанные с устойчивостью к окислительному стрессу, вызванному химическим диабетогеном. Продемонстрировано, что противовоспалительное действие гипокинезии проявляется в снижении деструктивного действия аллоксана по отношению к печени и почкам. Показано, что позитивные эффекты гипокинезии в условиях аллоксанового диабета ассоциированы с увеличением чувствительности к глюкокортикоидам. На основании результатов исследований возможен поиск путей коррекции сахарного диабета с использованием антиоксидантных препаратов. Полученные данные указывают на перспективность дальнейших исследований анксиолитических препаратов в качестве гепатопротекторов при сахарном диабете.

Положения, выносимые на защиту

Апробация работы:

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 3 - в рецензируемых журналах по перечню ВАК Минобразования РФ (Вестник ЮУРГУ образования, здоровья и физической культуры. - 2008. - №14; Вестник Уральской медицинской академической науки "Тематический выпуск по аллергологии и иммунологии". - 2011. - №2/1 (35)).

Объем и структура диссертации.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Романов, Дмитрий Александрович

ВЫВОДЫ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Дезадаптивные последствия гипокинезии, как состояния с низкой двигательной активностью очевидны. Накоплен значительный фактический материал, свидетельствующий о нарушении процесса окисления и фосфорилирования в митохондриях, снижении активности ключевых ферментов цикла трикарбоновых кислот, изменении белкового, углеводного и липидного обмена (Ваупез 1.\У., е1 а1., 2000, Сепе11о А., 2003, Казимирко В.К. и др., 2004). Эти негативные последствия вызваны ограничением двигательной активности, а также хронического стресса. Вышеуказанные факторы тесно взаимосвязаны друг с другом, и весьма затруднительно вычленить действие каждого в отдельности. Тем не менее, гипокинетический стресс характеризуется продолжительной активацией оси гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников (ГГАС) и повышенной продолжительностью катаболических процессов, что приводит к активации дистрофических явлений. С современных позиций такие сдвиги соответствуют состоянию аллостатической нагрузки. К сожалению, на сегодняшний день отсутствуют данные об особенностях аллостатической перегрузки при гипокинезии. Однако полученные данные, касающиеся иммобилизационного стресса, можно экстраполировать на ситуации, связанные с гипокинезией, так как в этих исследованиях для иммобилизации использовались те же самые клетки-пеналы. Поэтому декларируемый исследователями иммобилизационный стресс на самом деле является гипокинетическим стрессом с весьма ограниченной длительностью.

В недавно сформированном представлении об аллостазе основной акцент сфокусирован на переходе гомеостаза с одного уровня на другой вследствие изменений содержания «медиаторов аллостаза» (МсЕуеп В., 1998). Под ними автор подразумевает классические «стрессорные гормоны», т.е. глюкокортикоиды и катехоламины, а также как провоспалительные так и антивоспалительные цитокины. Кроме того, важная роль в формировании аллостаза отводится парасимпатическим влияниям. Особенно важно, что действию всех без исключения факторов аллостаза присущ нелинейный характер. Следует отметить, что аналогичные представления (переход гомеостаза с одного уровня на другой через стресс-реакцию) ещё в 70-х годах прошлого века высказывал П.Д.Горизонтов (1976). К сожалению, тогда они остались почти незамеченными. Интерес к представлениям McEvan во многом связан с удачно выбранным термином. Он образован из греческих слов «alio», которое переводится как «переменный», и «stasis», переводимое как «стабильность». Не случайно этот термин расшифровывается как «достижение стабильности через изменения» (McEven В., 1998). Если подобные сдвиги кратковременны, то «аллостатическая нагрузка» представляется оптимальной. Поэтому регуляция стресс-реализующих систем по механизму отрицательной обратной связи представляется первостепенной защитой от аллостатической перегрузки.

В регуляции ГГАС сигналом обратной связи служит содержание АКТГ или кортикостероидов. Обратную связь по уровню АКТГ называют короткой, а по уровню кортикостероидов длинной (Филаретов А.А.,1987). Одной из наиболее широко распространённых моделей для изучения обратной связи в ГГАС является введение экзогенных кортикостероидов. Увеличение содержания экзогенных глюкокортикоидов имитирует усиление сигнала обратной связи и приводит к торможению продукции и секреции собственных гормонов. Другой широко используемой моделью обратной связи является адреналэктомия, при которой компенсаторная гиперфункция одного надпочечника проявляется после удаления другого. Следует отметить, что в пределах ГГАС выделяют три вида обратной связи: на уровне надпочечников, гипофиза и гипоталамуса. Первый вид отрицательной обратной связи подразумевает торможение кортикостероидами функции надпочечников, второй - гипофиза и ,наконец, третий - гипоталамуса. Среди гипоталамических ядер именно паравентрикулярное ядро играет ключевую роль в активации ГГАС (Alarcon Р. et al., 2001, Beato М. Et al., 1996, Paskitti M.E. et al., 2000).

В пользу этого свидетельствуют следующие факты:

-паравентрикулярное ядро обеспечивает максимальную величину ответа ГГАС на стрессор.

-это ядро определяет минимальный порог реакции системы на действие стрессорного раздражителя.

-это ядро участвует в торможении ГГАС по механизму отрицательной обратной связи. 1

В условиях хронического стресса в результате нарушения механизмов отрицательной обратной связи может развиваться аллостатическая нагрузка органов, под которой В. McEwen (1998) понимает нагрузку «медиаторами» стресса, производимыми в избыточном количестве. Помимо глюкокортикоидов существенный вклад в формировании аллостатической нагрузки вносят катехоламины. Известно, что экстрагипоталамический КРФ стимулирует нейроны locus coeruleus (LC), являющегося высшим нервным центром симпато-адреналовой системы (САС). При самых разнообразных стрессорных воздействиях наблюдается усиление биосинтеза норадреналина в LC. В настоящее время детализирована последовательность событий, связанных с активацией нейронов LC. Прежде всего, усиливается экспрессия гена c-fos, продуцирующего ранний транскрипционный фактор. При хронических стрессах также происходит активация митоген-зависимых протеинкиназ. Это приводит к усилению фосфорилирования митоген-зависимых протеинкиназ JNK1/2/3 и ERK 1/2. В дальнейшем следует активация CREB, что предопределяет усиление транскрипции генов, кодирующих ключевые ферменты биосинтеза катехоламинов, а именно тирозингидроксилазы и b-дофамингидроксилазы (Sabban Е et al., 2004). Помимо КРФ активацию САС может вызывать и кортикотропин. Установлено, что АКТГ способен усиливать биосинтез катехоламинов в симпатических ганглиях (Sabban Е.,2007). Интересно отметить, что подобная закономерность не наблюдалась в мозговом слое надпочечников.

Важно отметить, что аллостатическая нагрузка развивается не только в условиях гипокинетического стресса, но и в условиях сахарного диабета 1 типа, когда на фоне развития гипоинсулинемии усиливается деструктивное действие различных контроинсулярных гормонов, в том числе и глюкокортикоидов.

Известно множество ситуаций, когда глюкокортикоиды выступают в роли антагонистов инсулина. Разнонаправленное влияние этих гормонов не ограничивается содержанием глюкозы крови, но и распространяется на глюконеогенез, транспорт глюкозы, синтез белков, аппетит, липолиз и.т.д. (Sapolski R. et al., 2000). Кроме того, глюкокортикоиды эффективно блокируют развитие инсулин-зависимой гипогликемии. Кортикостероиды могут вызывать инсулинорезистентность за счёт уменьшения количества Glut 4 в инсулинзависимых тканях. Кроме того, инсулино-резистентность может быть вызвана и опосредовано за счёт увеличения уровня циркулирующего глюкагона или СЖК (Flier J.S. et al.,1989). На модели стрептозотоцин-индуцированного сахарного диабета продемонстрирована фатальная роль глюкокортикоидов, связанная с чрезмерным потенцированием глюконеогенеза, липолиза, протеолиза (Can O.D. et al., 2011).

Недавно было установлено, что дексаметазон способен вызывать апоптоз В-клеток островков Лангерганса. При этом, у трансгенных мышей по пролактину наблюдалась повышенная устойчивость В-клеток к проапоптогенному эффекту дексаметазона. Установлено, что протективный эффект пролактина реализуется через активацию 1АК2/5ТАТ5-сигнального пути (FujinakaYu et al., 2007). Но вместе с тем, следует отметить, что при определённых условиях глюкокортикоиды могут оказывать и позитивное влияние на течение ИЗСД. После того как была обнаружена аутоиммунная природа ИЗСД и обоснована роль инсулита в развитии недостаточности островковых В-клеток, стала очевидным позитивная роль этих гормонов на ранних фазах развития ИЗСД. Прежде всего, активацию гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы можно рассматривать как один из механизмов сдерживания аутоиммунной эндокринопатии. Это может быть частным случаем противовоспалительных эффектов глюкокортикоидов. В свою очередь, противовоспалительное действие кортикостероидов реализуется по нескольким механизмам. Во-первых, глюкокортикоиды являются ингибиторами продукции и секреции цитокинов (БаЫЫ Р е1 а1.,1995). Кроме того, глюкокортикоиды ограничивают продукцию комплемента и гистамина. За счёт ингибирования активности фосфолипазы А2 происходит глюкокортикоид-зависимое снижение содержания простагландинов и лейкотриенов (Карса1а Ь.Р е1.а1.,1995). В связи с этим заслуживают внимания данные об улучшении функции поджелудочной железы при назначении короткого курса преднизолона в дозе 1мг/кг в сутки в течении 10 дней или 0,3 мг/кг в сутки в течении 50 дней (Кураева Т.Л.,1991). Существенным элементом в инсулит-ограничивающем действии глюкокортикоидов являются их проапоптогенное действие на ряд иммунокомпетентных клеток и подавление цитокиновой секреции. Иммуносупрессивное действие кортикостероидов может реализоваться благодаря глюкокортикоид-зависимой супрессии транскрипционного фактора КБ-кВ. Известно, что КБ-кВ является фактором, одновременно усиливающим пролиферацию в грануло-моноцитарном и лимфоидном ряду гемопоэза, в ответ на цитокиновую стимуляцию. №-кВ влияет на различные гены, задействованные в иммунном, острофазовом и воспалительном ответах ( СЬтошов в-Р. & а1., 1995). Сюда относятся гены 1Ь-1р, Т№чх, 1Ь-2,1Ь-6,1Ь-12, 1Ь-8 и других хемокинов, индуцибельных ферментов (ШОБ, Сох-2), молекул адгезивных контактов (1САМ-1, УСАМ-1, Е-селектин), главного комплекса гистосовместимости (МНС-1, МНС-П), белков комплемента (В, СЗ, С4), факторов, контролирующих клеточный цикл (р53, циклин 01 и др.), ингибиторов и активаторов апоптоза (с-1АР1, С-1АР2, БазЬ, Вс1-2, ТЯАР-1, ТКАР-2 и др.) Глюкокортикоиды ограничивают эффекты КБ-кВ за счёт индукции гена 1кВ, обладающего способностью связываться с ИГ-кВ с образованием неактивного гетеродимерного комплекса (БЬеттап Я.1 ., е1 а11

1995., Auphan N. et all 1995). Через обозначенный механизм кортикостероиды могут реализовать иммуносупрессивное действие по отношению к лимфоидным и моноцитарным клеткам.

Существует гипотеза о глюкокортикоид-зависимом ограничении чрезмерных катаболических эффектов, вызванных активацией иммунной системы. Известно, что провоспалительные цитокины могут активировать протеолитические и липолитические процессы и угнетать глюконеогенез. В случае IL-6 это проявляется в угнетении активности ключевого фермента глюконеогенеза фосфоенолпируваткарбоксикиназы. Поэтому в условиях ИЗСД на фоне ограничения транспорта глюкозы в инсулинзависимые ткани ограничение глюконеогенеза может усугубить негативные последствия дефицита инсулина. Как уже ранее упоминалось, цитокины усиливают процессы свободно-радикального окисления, и при ИЗСД они могут дополнительно потенцировать оксидативный стресс не только в островках Лангерганса. Способность цитокинов оказывать гипогликемическое действие не способствует компенсации ИЗСД, поскольку транспорт глюкозы идёт в инсулино-независимые ткани с последующим усилением образования гликозилированных белков.

Эффективно компенсируя гиперцитокинемию на начальных этапах развития ИЗСД, адаптивный характер действия глюкокортикоидных гормонов утрачивается по мере развития инсулинового дефицита. Следует отметить, что циркулирующие цитокины могут сами по себе усиливать секрецию ГГАС (Dinarello С. А., 1997). Так, секретируемые лейкоцитарными клетками IL-1, IL-6, IL-2, ФИО проникают из циркулирующей крови в ЦНС вследствие увеличения проницаемости гематоэнцефалического барьера. Кроме того, поступление цитокинов в головной мозг может проходить через фенестрированный эндотелий organicum vasculosus и lamina terminalis (Katsnura J., e. a., 1989; Strober W. e. a., 1988; Sternberg E. e. a., 1995; Kapkala L. e. a., 1995; De Souza E., 1993; Lightman A. e. a., 1993).

Известно, что начальные этапы гипокинезии сопровождаются приростом содержания циркулирующих цитокинов (Сысаков Д.А.,2009). В первую декаду гипокинетического стресса в сыворотке крови наблюдалось увеличение содержания IL-1, IL-6 и TNFa. К 30 суткам гипокинезии содержание этих цитокинов снизилось до контрольного уровня. Однако, в этот период снижается до контрольного уровня содержание катехоламинов и глюкокортикоидов. Тем не менее, на 30 сутки наблюдается иммуносупрессия, проявляющаяся в снижении как Th-1, так и Th-2 имунного ответа. Это является косвенным свидетельством сниженной чувствительности к провоспалительным цитокинам при гипокинетическом стрессе. Вероятно, в результате повышенной чувствительности к глюкокортикоидам происходит снижение экспрессии транскрипционного фактора NF-kB. Скорее всего, это имеет непосредственное отношение не только к реализации панкреатопротекторного действия гипокинетического стресса. Показано, что IL-1 способен оказывать цитотоксическое действие на В-клетки за счёт усиления ПОЛ и увеличения концентрации Са в цитозоле. Кроме того, IL-1 снижает секрецию инсулина В-клетками, уменьшает их чувствительность к глюкозе и неглюкозным стимулам. Действие IL-1 в основном опосредовано липидными модуляторами. При ИЗСД в островках накапливаются простагландины, подавляющие острую фазу инсулинового ответа на глюкозу. Антагонисты простагландинов, например, аспирин, облегчают течение ИЗСД. Вместе с тем, IL-1 реализует цитотоксические эффекты на В-клетки через NO-зависимые механизмы вследствие индукции iNOS. В результате последующего образования пероксинитрита отмечено повреждение ДНК в В-эндокриноцитах. Другим механизмом проапоптогенного действия IL-1 является усиление экспрессии белка Вах, потенцирующего развитие апоптоза. Следует отметить, что пролактин ограничивал проапоптогенное действие IL-1 за счёт усиления экспрессии транскрипционного фактора STAT5. В свою очередь, STAT5 ограничивал цитокин-зависимую продукцию транскрипционного фактора NF-kB, а также экспрессию ¿КОЗ. Одновременно 8ТАТ5 в В-клетках потенцировал экспрессию антиапоптогенного белка Вс1-Хь Цитотоксическое действие 1Ь-1 потенцируется туморнекротическим фактором (ТМ7) через усиление продукции свободных радикалов. уЮТ индуцирует экспрессию молекул НЬА II класса на эндотелии, а совместно с 1Ь-1 действует на поверхностные рецепторы эндотелиальных клеток, способствуя лейкоцитарной адгезии и повышению проницаемости капилляров (Дедов И.И., 1995). Интересен тот факт, что в поражённых островковых клетках, несмотря на большое количество медиаторов пролиферации, практически полностью отсутствуют митозы. Нисколько не умаляя значимость цитокин-опосредованных аутоиммунных механизмов, обуславливающих развитие аутоиммунной патологии, уместно обратить внимание на способности некоторых цитокинов вызывать инсулинорезистентность мышечной ткани. Мышечная ткань является одним из наиболее значимых потребителей глюкозы, и ограничение цитокин-зависимой инсулинорезистентности может внести определённый вклад в протекторное действие гипокинетического стресса.

Протекторное действие гипокинезии связано также с ограничением свободно-радикального окисления во внутренних органах. Согласно литературным данным, гипокинетический стресс характеризуется фазными изменениями липопероксидации (Белоусова Н.А.,1999). В первую декаду в крови наблюдалось снижение липопероксидации на фоне усиления антиокислительной активности плазмы крови. На 30-е сутки наблюдалось усиление ПОЛ, однако уровень антиокислительной активности оставался повышенным. В наших исследованиях гипокинетический стресс ограничивал как усиление липопероксидации, так и окисления белков во внутренних органах. Возникает вопрос: в какой мере вызванные гипокинезией изменения свободно-радикального окисления являются глюкокортикоид-зависимыми? В связи с этим уместно обратить внимание на данные Н.В.Бояриновой (2010) о том, что введение экзогенного глюкокортикоидного препарата триамцинолона ацетонида и гипокинетический стресс вызывают стереотипные изменения во внутренних органах. Эти исследования показали, что угнетение свободно-радикального окисления при гипокинезии не ограничивается липопероксидацией, а распространяется ещё и на окисление белков. В связи с этим уместно отметить, что глюкокортикоиды обладают способностью снижать уровень окисления белков. Поэтому наблюдаемое снижение содержания окислительно-модифицированных белков во внутренних органах, может вполне иметь глюкокортикоид-зависимый характер. Наблюдаемое в ответ на снижение глюкокортикоидных гормонов уменьшение содержания окислительно-модифицированных белков, может выступать в качестве фактора, препятствующего десенситизации различных отделов головного мозга и ЦНС к глюкокортикоидам. Это предположение основано на представлении о роли карбонилирования белков в онтогенетическом становлении систем нейро-эндокринной регуляции (Волчегорский И.А. и соавт., 2007). Считается, что процесс созревания этих систем связан со свободно-радикальной модификацией рецепторов гипоталамуса и гиппокампа и снижением их чувствительности к эндокринным сигналам отрицательной обратной связи. Глюкокортикоид-зависимое снижение окислительной деструкции белков может способствовать сохранности рецепторного аппарата глюкокортикоидов, что способствует поддержанию механизмов резистентной стратегии адаптации при гипокинетическом стрессе.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Романов, Дмитрий Александрович, Челябинск

1. Автандилов, Г.Г. Введение в количественную патологическую морфометрию / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 1980. - 216 с.

2. Александров, Е.А. Изменение биохимического состава мембран тромбоцитов у больных диабетической нефропатией и его коррекция сулодексидом / Е.А. Александров, Ю.В. Нелаева, A.A. Нелаева, М.В. Шестакова // Сахарный диабет. 2001. - №3. - С. 12-16.

3. Алиев, М.А. Изменение перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы миокарда при адреналиновом повреждении сердца / М.А. Алиев, А.К. Бекболотова, J1.C. Костюченко // Кардиология. 1989. - № 9. - С. 77-81.

4. Антоненков, В.Д. Ферменты цитозоля печени крыс, ингибирующие хемилюминисценцию при неферментном перекисном окислении липидов / В.Д. Антоненков // Биохимия. 1991. - Т. 56, №9. - С. 15911598.

5. Асфандиярова, Н.С. Сравнительная иммунопатология сахарного диабета / Н. С. Асфандиярова, Н. Г. Колчева, И.В. Шатрова // Пробл. эндокрилол. 1998. - № 6. - С. 3-5.

6. Ахрем, A.A. Жирные кислоты инициаторы гемоглобинзависимого перекисного окисления липидов / A.A. Ахрем, Г.М. Андреюк, М.А. Кисель и др. // Доклады АН СССР. - 1988. - Т. 298, № 2. - С. 498-502.

7. Балаболкин, М.И. Сахарный диабет / М.И. Балаболкин. М.: Медицина, 1994. - 383 с.

8. Балаболкин, М.И. Патогенез ангиопатий при сахарном диабете / М.И.

9. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Сахарный диабет.1999.-№ 1.- С. 4-6.

10. Ю.Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балаболкин. М.: Медицина,2000. 672 с.

11. Барабой, В.А. Роль перекисного окисления в механизме стресса / В.А. Барабой // Физиол. журн. 1989. - Т. 35, № 5. - С. 85- 97.

12. Белоусова, H.A. Влияние длительной гипокинезии на уровень циркулирующих продуктов перекисного окисления липидов: автореф. дис. канд. мед. наук / H.A. Белоусова. Челябинск, 1999. - 27 с.

13. Биленко, М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов / М.В. Биленко. М.: Медицина, 1989. - 156 с.

14. Бортников, В.Т. Влияние липидов на агрегацию тромбоцитов в крови больных ишемической болезнью сердца / В.Т. Бортников, Б.Р. Зайнутдинов, Т.М. Ишанходжаев и др. // Кардиология. 1989. - № 6. -С. 22-24.

15. Бояринова, Н.В. Психосоматическая патология и свободнорадикальное окисление при синдроме посттравматического стрессового расстройства: автореф. дис. канд. мед. наук / Н.В. Бояринова. Уфа, 2010.-27 с.

16. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты /Е.Б. Бурлакова, Н.П. Храпова // Успехи медицинской химии. 1985. - Т. 54, № 9. - С. 1540-1558.

17. Валеева, Ф.В. Экскреция фосфолипидов с мочой у больных диабетической нефропатией / Ф.В. Валеева, И.Г. Салихов, Э.Н. Хасанов и др. // Сахарный диабет. 2001. - № 3. - С. 6-8.

18. Верёвкина, Т.И. Перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита и их коррекция при хроническом панкреатите: дис. канд. мед. наук / Т.И. Верёвкина. М, 2005. - 23 с.

19. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252 с.

20. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестн. РАМН. 1998. - № 7. - С. 43-51.

21. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Сорос, образоват. журн. 2000. - № 12. - С. 13 - 19.

22. Волчегорский, И.А. Модифицированный метод спектрофотометрического определения активности моноаминоксидазы с бензиламином в качестве субстрата / И.А. Волчегорский,

23. H.А.Скобелева, Р.И. Лифшиц // Вопр. мед. химии. 1991. - Т. 37, Вып.1.-С. 86-89.

24. Волчегорский, И.А. Неспецифическая регуляция адаптивных процессов при термических ожогах и некоторых других экстремальных состояниях: дис. д-ра мед. наук / И.А. Волчегорский. Челябинск, 1993.-609 с.

25. Волчегорский, И.А. Гипогликемизирующий эффект стрессорных воздействий и их использование для профилактики сахарного диабета в эксперименте / И.А. Волчегорский, В.Э. Цейликман, О.Л. Колесников и др. // Пробл. эндокринологии. -1995. № 6. - С. 38-42.

26. Волчегорский, И.А. Исследование устойчивости к физической нагрузке и острой гипоксии у крыс с аллоксановым диабетом / И.А.

27. Волчегорский, О.Jl. Колесников, В.Э Цейликман, A.A. Колесникова // Пробл. эндокринологии. 1998. - № 5. - С. 42-44.

28. Волчегорский, И.А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптационных реакций организма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников, В.Э. Цейликман. -Челябинск, 2000. 167 с.

29. Волчегорский, И.А. Влияние анксиогенного стресса на поражение поджелудочной железы и печени при аллоксановом сахарном диабете / И.А. Волчегорский, В.Э. Цейликман, О.Б. Цейликман и др. // Вестн. РАМН. 2005. - №8. - С. 21-25.

30. Гонский, Я.И. Роль антиоксидантной системы в патогенезе токсического гепатита / Я.И. Гонский, М.М. Корда, И.Н. Клиц, J1.C. Фира // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1996. - № 2. - С. 4345.

31. Горизонтов, П.Д. Стресс. Система крови в механизме гомеостаза. Стресс и болезни / П.Д. Горизонтов // Гомеостаз / под ред. П.Д. Горизонтова. М.: Медицина, 1976. - С. 428-458.

32. Горохова, Г.И. Течение катехоламинового кардионекроза у собак-«аборигенов» среднегорья: автореф. дис. . канд. мед. наук / Г.И. Горохова. Бишкек, 1993. - 20 с.

33. Гублер, Е.В. Применение критериев непараметрической статистики для оценки различий двух групп наблюдений в медико-биологических исследованиях / Е.В. Гублер, A.A. Генкин. М.: Медицина, 1969. - 31 с.

34. Гуткин, Д.В. Активность антиоксидантных ферментов миокарда при его ишемии / Д.В. Гуткин, Ю.А.Петрович // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1982. - № 4. - С. 451-453.

35. Дедов, И.И. Сахарный диабет: патогенез, классификация, диагностика и лечение / И.И. Дедов, М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова и др. М., 2003. - 171 с.

36. Дедов, И.И. Свободно радикальное окисление и антиоксидантная защита при сахарном диабете: пособие для врачей / И.И. Дедов.- М., 2003,- 40 с.

37. Демидова, И.Ю. Сахарный диабет типа 2 (патогенез и лечение) / И.Ю. Демидова, И.В. Глинкина, А.Н. Перфилова // CONSILIUM-MEDICUM. 2000. - Т.2, № 5. - С.211-215.

38. Дзугкоев, С.Г. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита мембраны клеток при сахарном диабете / С.Г. Дзугкоев, З.О. Краснова, А.Е. Турина // Диабетология. 2008. - № 4. - С. 64-66.

39. Дубинина, Е.Е. Характеристика внеклеточной супероксиддисмутазы / Е.Е.Дубинина//Вопр. мед. химии. 1995.- Т. 41, № 6. - С.8-11.

40. Дубинина, Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е.Е. Дубиниа // Вопр. мед. химии. 2001. -Т.47, № 6. - С. 561-581.

41. Европейская конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных или в иных научных целях. (ETS №3). Страсбург, 1986. - 13с.

42. Ефимов, A.C. Диабетические ангиопатии / A.C. Ефимов. М.: Медицина, 1989. - 287 с.

43. Жуков, A.A. Механизм оксигеназных реакций: основные, промежуточные и побочные продукты оксигеназного цикла / A.A. Жуков, Г.Ф. Жирнов // Вестн. АМН СССР. 1988. - № 1. - С.33-43.

44. Захаров, Г.А. Гормонально-индуцированный стресс и инфаркт миокарда у горных собак / Г.А. Захаров. Бишкек: Илим, 1991. - 250 с.

45. Казимирко, В.К. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия / В.К. Казимирко, В.И. Мальцев, В.Ю. Бутылин и др. Киев:1. Морион, 2004. 160 с.

46. Камышников, B.C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т. / B.C. Камышников. 5-е изд. -Минск, 2000.

47. Кения, М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном" стрессе / М.В. Кения, А. И.Лукаш, Е.П: Гуськов // Успехи совр. биологии. 1993. - № 4. - С.456 - 470.

48. Коваленко, Е.А. Гипокинезия / Е.А. Коваленко, H.H. Гуровский. М.: Медицина, 1980. - 320 с.

49. Коган, А.Х. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии / А.Х.Коган, А.Н. Кудрин, С.М. Николаев // Наука. 1976. -№ 11.-С. 71-74.

50. Кожевников, Ю.Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии / Ю.Н. Кожевников // Вопр. мед. химии. 1985. - Т.31, № 5. -С. 2-7.

51. Колиснеченко, Л.С. Изменение активности ферментов метаболизма глутатиона при иммобилизационном стрессе и их возможное значение / Л.С. Колиснеченко, Н.С. Мантарова, Л.А. Шапиро и др. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1990. - № 4. - С. 9-10.

52. Колосова, Н.Г. Микрометод УФ-спектрофотометрии диеновых коньюгатов / Н.Г. Колосова, Л.Е. Ким, В.Ю. Куликов // Лаб. дело. -1988.-№9.- С. 73-74.

53. Кополадзе, P.A. Регламентация экспериментов на животных этика, законодательство, альтернативы / P.A. Кополадзе // Успехи физиол. наук. - 1998.- № 4. - С. 74-93.

54. Королюк, М.А. Метод определения активности каталазы / М.А Королюк, Л.И.Иванова, И.Г. Майорова // Лаб. дело. 1988. - № 1. - С. 16-19.

55. Косицкий, Г.И. Креаторная связь и её значение в организации многоклеточных систем / Г.И. Косицкий, Г.Г. Ревич. М.: Наука, 1975.- 123 с.

56. Крекова, Ю.В. Изменение функционального состояния иммунной системы у больных различными типами сахарного диабета / Ю.В. Крекова . СПб., 2002. - 24 с.

57. Кудрякова, C.B. Распространенность осложнений сахарного диабета по данным регистра / C.B. Кудрякова, Ю.И. Сунцов, С.Г. Рыжкова// Пробл. эндокринологии. 1995. - Т. 41, №.4. - С. 8-11.

58. Кулинский, В.И. Структура, свойства, биологическая роль в регуляции глутатионпероксидазы / В.И. Кулинский, JI.C. Колиснеченко // Успехи совр. биологии. 1993.-T. 113,№ 1.-С. 107-122.

59. Кураева, T.JI. Иммунопатогенез и иммунотерапия сахарного диабета типа 1 / Т.Л. Кураева // Пробл. эндокринологии. 1991. -Т. 37, № 1. -С. 63-67.

60. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. M., 1990. - 352 с.

61. Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях / В.З. Ланкин, А.К. Тихадзе, Ю.Н. Беленков. M.: РКНПК МЗ РФ, 2001. - 78с.

62. Логинов, A.C. Хронические гепатиты и циррозы печени / А.С Логинов, Ю.Е. Блок. М.: Медицина, 1987. - 269 с.

63. Луговая, A.B. Апоптоз мононуклеаров периферической крови у больных сахарным диабетом 1-ого типа / A.B. Луговая. СПб., 2004. -23 с.

64. Львовская, Е.И. Спектрофотометрическое определена конечных продуктов перекисного окисления липидов / Е.И. Льровская, И.А. Волчегорский, С.Е. Шемяков, Р.И. Лифшиц // Вопр. мед. химии. 1991.- №4. С.92-94.

65. Матюшин, Б.Н. Активность антиоксидантов крови при хроническом поражении печени / Б.Н. Матюшин, A.C. Логинов, Г.Н. Якимчук и др. // Вопр. мед. химии. 1995. - Т. 41, № 4. - С. 54-56.

66. Меерсон, Ф.З. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическимнагрузкам / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшендин. М., 1988. - 233 с.

67. Мумладзе, Р.Б. Антиоксидантная терапия острого панкреатита / Р.Б. Мумладзе, С.М. Чудных, И.Т. Васильев // Анналы хирургии. 1997. -№ 1. - С. 67-70.

68. Науменко, В.Г. Жирнолипидный спектр и показатели перекисного окисления липидов" в "эритроцитах больных сахарным диабетом" с диабетическими ангиопатиями: дис. . канд. мед. наук /В.Г. Науменко. Киев, 1986. - 18 с.

69. Петрович, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю.А. Петрович, Д.В. Гуткин // Патол. Физиолог, и эксперим. терапия. 1982. - № 5. - С. 8592.

70. Плацер, 3. Процессы переокисления липидов при повреждении и ожирении печени / 3. Плацер, М. Видлакова, JI. Кужела // Чехосл. мед. обозрение. 1970. - Т. 16, № 1. - С. 30- 41.

71. Попов, Т.Метод определения пероксидазной активности крови / Т. Попов, JI. Никовска // Санитария и гигиена. 1971. - № 10. - С. 89-91.

72. Прайор, У.В. Свободные радикалы в биологии / У.В. Прайор. М.: Мир, 1979.- 318 с.

73. Рябов, Г.А. Активированные формы кислорода и их роль в некоторых патологических состояниях / Г.А. Рябов, И.Н. Палечник, Ю.М. Азизов // Анестезиология и реанимация. 1991. - № 1. - С. 63-69.

74. Северина, A.C. Новое о механизмах развития, диагностике и лечении диабетической нефропатии / A.C. Северина, М.В. Шестакова // Сахарный диабет. 2001. - № 3. - С. 59-60.

75. Серов, P.A. Содержание простагландинов и циклических нуклеотидов в миокарде желудочков при норадреналиновом повреждении сердца / P.A. Серов, Т.В. Терехова, Л.Д. Макарова и др. // Кардиология. 1985.- № 2. С. 86-90.

76. Синицкий, А.И. Влияние анксиогенного стресса на аллоксанзависимые изменения гликемии и интенсивность перекисного окисления липидов во внутренних органах: автореф. дис. канд. мед. наук / Д.И. Синицкий.- Челябинск, 2008. 22 с.

77. Сокрут, В.Н. О целесообразности оптимизации перекисного окисления липидов в лечении осложненных форм заживления инфаркта миокарда / В.Н. Сокрут, Н.И. Яблучанский, Ю.И. Жданюк, Т.Я. Либман // Врачеб. дело. 1990. - № 12 - С. 16-19.

78. Сысаков, Д.А. Цитохром Р450-зависимые монооксигеназы при иммобилизационном и гипокинетическом стрессе: автореф. дис. канд. мед. наук / Д.А. Сысвков. Челябинск, 2009. - 22 с.

79. Теселкин, Ю.О. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода / Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова, О.Б. Любицкий, Г.И. Клебанов // Вопр. мед. химии. 1997. - Т. 43, № 2. - С. 87-93.

80. Тигранян, P.A. Стресс и его значение для организма / P.A. Тигранян. -М.: Наука, 1988. 176 с.

81. Убашева, Ч.А. Изменение процессов свободно-радикального окисления и гемокоагуляции при катехоламиновом кардионекрозе у крыс в условиях низко — и высокогорья: автореф. дис. канд. мед. наук

82. Ч.А. Убашева. Бишкек, 2006. - 26 с.

83. Устинова, Е.Е. Влияние кратковременного и длительного стресса на сердце и предупреждение стрессорных повреждений: автореф. дис. канд. мед. наук / Е.Е. Устинова. М., 1983. - 24 с.

84. Федоров, И.В. Обмен веществ при гиподинамии / И.В. Федоров. М., 1982.-203 с.

85. Филаретов, A.A. Принципы и механизмы регуляции гипофизарно-адренокортикальной системы / A.A. Филаретов. Л.: Наука, 1987. -164 с.

86. Фролова, Т.М. Влияние высокогорья на процессы перекисного окисления липидов и гемокоагуляцию при катехоламиновом кардионекрозе: автореф. дис. канд. мед. наук / Т.М. Фролова. Бишкек, 2006. - 23 с.

87. Храпова, Н.Г. Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo / под ред. Е.Б. Бурлаковой. М.: Наука, 1992. - С. 8—1б|

88. Цейликман, В.Э. Стресс и неспецифический реактивный гепатит / В.Э. Цейликман, О.Б. Цейликман. Челябинск: Изд-во ЮУрГУ, 2009. -120 с.

89. Цериелло, А. Патофизиологические механизмы сосудистых осложнений при сахарном диабете: роль окислительного стресса / А. Цериелло // Медикография. 1999. - Т. 21, №.4. - С. 25-28.

90. Чевари, С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / С.Чевари, И. Чаба, Й. Секей // Лаб. дело. 1985. - № 11. - С. 678-681.

91. Черный, А.В. Показатели гликемии у животных в различные сроки гипокинезии при введении глюкозы, адреналина и инсулина / А.В. Черный // Космическая биология и авиакосмическая медицина. -1975. № 9. - С. 23-27.

92. Шаталина, JI.B. Состояние мембран и особенности перекисного окйсленйя липидов "тромбоцитов у- "больных с нестабильной стенокардией / J1.B. Шаталина, Н.О. Быкова, JI.B. Борисенко и др. //Кардиология. 1989. - № 2. - С. 45-49.

93. Шестакова, М.В. Диабетическая нефропатия: состояние проблемы в мире и в России / М.В. Шестакова, Ю.И. Сунцов, Н.И. Дедов // Сахарный диабет. 2001. - № 3. - С. 2-6.

94. Шувалова, Е.П. Роль процессов перекисного окисления липидов в патогенезе полиорганной недостаточности / Е.П. Шувалова // Хирургия. 1997. - № 7. - С. 47-51.

95. Alarcon, P. Direct actions of adrenergic agents on rat anterior pituitary cells / P. Alarcon, L. Nunez, J. Garcia-Sancho // Pflugers Arch. 2001. -Vol.442, № 6. - P. 834-841.

96. Amos, A.F. The rising global burden of diabetes and its complications: estimates and projections to the year 2010 / A.F. Amos, D.J. McCarty, P.Z. Zimmet // Diabet Med. 1997. - Vol. 14, № 5. - P. 1-85.

97. Arai, K. Cytokines: coordinators of immune and inflammatory responses / K. Arai, F. Lee, S. Miyajim et al. // Ann. Rev. Biochem. 2010.-Vol. 59.- P.783-836.

98. Archer, J. Tests for emotionality in rats and mice:a review / J. Archer // Animal behaviour. 1973. - Vol. 21. - P. 205-235.

99. Aufan, N. Immunosupreession by glucucorticoids activity trouth induction of IkB synthesis / N. ^ufan, J.A. Di Donato, C. Rossette // Science. -1995. Vol. 270. - P. 286-290.

100. Bannister, J.V. The generation of hydroxyl radicals following superoxide production by neutrophil NADPH oxidase / J.V. Bannister, P. Bellavite, A. Davoli // FEBS Lett. 1982. - Vol. 150, № 2. - P. 300-302.

101. Bateman, A. The immuno-hypothalamic-pituitary-adrenal axis / A. Bateman, A. Singh, R.Krai et al. // Endocrine Rev. 1989. - Vol.10, №1. -P.92-112.

102. Baynes, J.W. Oxidative stress in diabetes / J.W. Baynes, S.R. Thorpe // Antioxidants in diabetes management / ed. by L.Packer. New York: M.Dekker Inc, 2000. - P.77 - 92.

103. Beato, M. Interaction of steroid hormone receptors with the transcription initiation complex / M. Beato, A. Sanchez-Pacheco // Endocr Rev. 1996. - Vol. 17, № 6. - P.587-609.

104. Bedard, S. Insulin inhibits inducible nitric oxide synthase in skeletal muscle cells / S. Bedard, B. Marcotte, A. Marette // Diabetologia. 1998. -Vol. 41, № 12.-P. 1523-1527.

105. Benveniste, E.N. TNF-alpha- and IFNgamma-mediated signal transduction pathways: effects on glial cell gene expression and function / E.N. Benveniste, D. J. Benos // FASEB J. 1995. - Vol. 9, № 5. - P. 15771584.

106. Bissell, D.M. Hepatic fibrosis as wound repair: a progress report / D. M. Bissell // J. Gastroenterol. 1998. - Vol.33, №2. - P.295-302.

107. Bottazzo, G.F. In situ characterization of autoimmune phenomena and expression of HLA molecules in the pancreas in diabetic insulitis / G.F. Bottazzo, B.M. Dean, J.M. McNally et al. // N Engl J Med. 1985. - Vol. 353, №6.-P. 353-360.

108. Brown, M.D. Myocardial chronotropic and inotropic responsiveness in vitro after chronic alpha 1-adrenoreceptor blockade in the rat / M.D. Brown // J Auton Pharmacol. 1989. - Vol. 9, № 6. - P. 387-395.

109. Burkart, V. Suppression of nitric oxide toxicity in islet cells by a-tocopherol / V. Burkart, A.Gross-Eick, K.Bellmann et al. // FEBS Lett. -1995. Vol.364, №3. - P.259 - 263.

110. Can, O.D. Effects of Insulin locomotory activity, depression, and active learning parameters of streptozotocin-diabetic rats / O.D. Can, Y. Ozttirk, U.D. Ozkay // Planta Med. 2011. - Aug 19. - Epub ahead of print.

111. Carlo, P. Influence of culture conditions on monoamine oxidase A and B activity in rat astrocytes / P.Carlo, M. Del Rio, E. Violani et al. // Cell Biochem. Funct. 1996. - Vol. 14, № 1. - P. 19-25.

112. Carlo, P. Monoamine oxidase B expression is selectively regulated by dexamethasone in cultured rat astrocytes / P. Carlo, E. Violani, M. De-Rio et al. // Brain Res. 1996. - Vol. 711. - P. 175-183.

113. Castells, I. Ishemic heart disease by thallium scintigaphy in type 2 diabetes mellitus and control asymptomatic subjects/ I. Castells, F. Rius, L. Rubio et al.// Diabetologia.- 1998.- Vol. 41.- P. 343. Suppl. 1.

114. Ceriello, A. Hyperglycaemia: the bridge between non-enzymatic glycation and oxidative stress in the pathogenesis of diabetic complications / A. Ceriello // Diabetes Nutr. Metab. 1999. - Vol. 12, № 1. - P.42 -46.

115. Ceriello, A. New insights on oxidative stress and diabetic complications may lead to a "causal" antioxidant therapy / A. Ceriello // Diabetes Care. 2003. - Vol.26. - P. 1589-1596.

116. Chilian, W.M. Adrenergic vasomotion in the coronary microcirculation / W.M. Chilian // Basic Res Cardiol. 1990. - Vol. 85, №1.-P. 111-120.

117. Chrousos, G. P. Stress. Basic Mechanisms and Clinical Implications / G.P. Chrousos, P. W. Gold. New York, 1995. - P. 15-18.

118. Cohen, R.A. Dysfunction of vascular endothelium in diabetes mellitus / R.A. Cohen // Circulation 1993. - Vol.87. - P. 67-76.

119. Contreras, P.C. Stereotyped behavior correlates better than ataxia with phenicyclydine-receptor interaction / P.C. Contreras, K.S. Rice, A.E Jacobson et al. // Eur. J. Pharmacol. 1986. - Vol. 121. - P. 9-18.

120. Coppack, S.W. Postprandial lipoproteins in non-insulin-dependent diabetes mellitus / S.W. Coppack // Diabet Med. 1997. - Vol. 14, № 3. - P. 67-74.

121. Cunningham, A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibody-forming cells / A.J. Cunningham // J. Nature. 1965. -Vol. 207.-P. 110-117.

122. Dallman, M.F. Modulation of stress responses: how we cope with excess glucocorticoids / M.F. Dallman // Exp. Neurol. 2007. -Vol. 206. -P. 179-182.

123. Dahlquist, G.G. Maternal enteroviral infection during pregnancy as a risk factor for childhood IDDM. A population-based case-control study /

124. G.G. Dahlquist, S. Ivarsson, B. Lindberg et al. // Diabetes. 1995. - Vol. 44, №4.-P. 408-413.

125. Darville, M.I. Regulation by cytokines of the inducible nitric oxide synthase promoter in insulin-producing cells / M.I. Darville, D.L. Eizirik // J. Diabetologia. 1998. - Vol. 41, № 9. - P. 1101-1108.

126. Davi, G. Lipid peroxidation in diabetes mellitus / G. Davi, A. Falco, C. Patrono // Antioxid. Redox. Signal. 2005. - Vol.7, № 1-2. - P.256-268.

127. Del Rey, A. Interleukin-1 affects glucose homeostasis / A. Del Rey,

128. H. Bese-dovsky // Amer. J. Physiol. 1987. - Vol.253, №5 (Pt 2). - P.794-798.

129. De Souza, E. Corticotropin-releasing factor and interleukin-1receptors in the brain-endocrine-immune axis / E. De Souza; ed. by C. River. New York: New York Academy of Sciences, 1993. - P. 28- 35.

130. Dilvetro, E.J. Mechanism of dofamine-hydroxylation, semidehydroascorbate as the ensimic exidation product of ascorbat / E.J. Dilvetro, P.L. Aten // J. Biol. Chem. 1981. - Vol. 256, № 7. - P. 33853387.

131. Dimitriadis, E. Oxidation of low-density lipoprotein in NIDDM: its relationship to fatty acid composition / E. Dimitriadis, M. Griffin, D. Owens D. et al. // Diabetologia. 1995. - Vol. 38, № 11. - P. 1300-1306.

132. Dinarello, C.A. Induction of interleukin-1 and interleukin-1 receptor antagonist / C.A. Dinarello // Seminars in Oncology. 1997. - Vol.24 (3 Suppl 9). - P.83-93.

133. Droge, W. Free radicals in the physiological control of cell function / W. Droge // Physiological Reviews. 2002. - Vol.82. - P.47-95.

134. Eisenbarth, G.S. Type I diabetes mellitus. A chronic autoimmune diseas / G.S. Eisenbarth // N. Engl. J. Med. 1986. - Vol. 314, № 21. - P. 1360-1368.

135. Eizirik, D.L. Differential sensitivity to beta-cell secretagogues in cultured rat pancreatic islets exposed to human interleukin-1 beta / D.L. Eizirik, S. Sandler, A. Hallberg et al. // Endocrinology. 1989. - Vol. 125.-P.752-759.

136. Esposito, K. Inflammatory cytokine concentrations are acutely increased by hyperglycemia in humans: role of oxidative stress / K. Esposito, F.Nappo, R.Marfella et al. // Circulation. 2002. - Vol.106. - P. 2067-2072.

137. Flier, J.S. Adipsin: regulation and dysregulation in obesity and other metabolic states / J.S. Flier, B. Lowell, A. Napolitano et al. // Recent. Prog.

138. Horm. Res. 1989. - Vol. 45. - P. 567-580.i

139. Fujinaka, Y. Lactogens Promote Beta Cell Survival through JAK2/STAT5 Activation and Bcl-XL Upregulation / Y. Fujinaka, K. Takane, H. Yamashita et al. // J. Biol. Chem. 2007. - Vol. 282. - P. 42.

140. Grace, P.A. Ischemia reperfusion injury / P.A. Grace // Br. J Surgery - 1994. - Vol. 81. - P. 637-647.

141. Ginsberg, H.N. Lipoprotein physiology in nondiabetic and diabetic states. Relationship to atherogenesis / H.N. Ginsberg // Diabetes Care. -1991. Vol. 14, № 9. - P. 839-855.

142. Gopaul, N.K. Plasma 8-epi-PGF2 alpha levels are elevated in individuals with insulin dependent diabetes mellitus / N.K. Gopaul, E.E. Anggärd, A.I. Mallet et al. // FEBS Lett. 1995. - Vol. 368, № 2. - P. 225229.

143. Gray, P. Effect of prestimulation on avoidance responding in rats, and hormonal dependence of the effect / P.Gray // J. of comparative and physiological psychology. 1976. - Vol. 90, № 1. - P. 1-17.

144. Hashimoto, S. A new spectrophotometric assay method of xanthine oxidase in crude tissue homogenate / S. Hashimoto // Annalitical Biochemistry. 1974. - Vol. 62. - P. 426-435.

145. Haller, Y. Defeat is a major stressor in males while social instability is stressful mainly in females: towards the development of social stress model in female rats / Y. Haller, E. Fuchs // Brain Res. Bull. 2008. - Vol. 50, № l.-P. 33-39.

146. Halliwell, B. Free radicals, reactiv oxygen species and humandiseases: a critical evacuation with special reference to atherosclerosis / B. Halliwell // Br. J. Experim Pathology. 1989. - Vol. 70, № 3. - P. 737-757.

147. Halliwell, B. Oxydants and human diseases: some new concepts / B. Halliwell // Faseb J. 1987. - № 1. - P. 358-364.

148. Kajanachumpol, S. Plasma lipid peroxide and antioxidant levels in diabetic patients / S. Kajanachumpol, S. Komindr, A. Mahaisiriyodom // J. Med. Assoc. Thai. 1997. - Vol.80. - P.372-377.

149. Karsten, V. Reduction of macrophage activation after antioxidant enzymes gene transfer to rat insulinoma INS-1 cells / V. Karsten, S. Sigrist, C. Moriscot et al. // Immunobiology. 2002. Jul. - Vol. 205, № 3. - P. 193203.

150. Katsnura, G. Interleukin-1 beta increases prostaglandin E2 in rat astrocyte cultures: modulatory effect of neuropeptides / G. Katsnura, P.E. Gottschall, R.R Dahl // Endocrinology. 1989. - Vol. 124, № 6. - P. 31253128.

151. Klein, R. Relation of glycemic control to diabetic microvascular complications in diabetes mellitus / B.E. Klein, S.E. Moss // Ann. Intern.

152. Med. 1996. - Vol. 124, № 1. - P. 124.

153. Knudsen, P. Changes of lipolytic enzymes cluster with insulin resistance syndrome / P. Knudsen, J. Eriksson, S. Lahdenperä et al. // Diabetologia. 1995. - Vol. 38, № 3. - P. 344-350.

154. Kolb, H. Type 1 (insulin-dependent) diabetes mellitus and nitric oxide / H. Kolb, V. Kolb-Bachofen // Diabetologie 1992. - Vol. 35. - P. 796797.

155. Krölewski, A.S. Mortality from cardiovascular diseases among diabetics / A.S. Krölewski, A. Czyzyk, D. Janeczko // Diabetologia. 1977. -Vol. 13, №4. -P. 345-350.

156. Lightman, A. CRF mRNA in normal and stress conditions / A. Lightman, M. Harbuz, R. Knigt et al. New York: New York Academy of Sciences, 1993. - P. 421^25.

157. Lippert, G. The rising tide of end-stage renal failure from diabetic nephropathy type II -an epidemiological analysis / G. Lippert, E. Ritz, A. Schwarzbeck, P. Schneider // Nephrol. Dial. Transplant. 1995. - Vol. 10. -P. 462-467.

158. Mandrup-Poulsen, T. What are the types and cellular sources of free radicals in the pathogenesis of type 1 (insulin-dependent) diabetes mellitus? / T. Mandrup-Poulsen, J.A. Corbett, M.L. McDaniel // Diabetologia. 1993. - Vol. 36. - P. 470-473.

159. Mandrup-Poulsen, T. The role of interleukin-1 in pathogenesis of IDDM / T. Mandrup-Poulsen // Diabetologia. 1996. - Vol. 39. - P. 1005 -1029.

160. Marfella, R. Glutathione reverses systemic hemodynamic changes induced by acute hyperglycemia in healthy subjects / R. Marfella,

161. G.Verrazzo, R.Acampora et al. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 1995. -Vol.268, №6. -P. 1167- 1173.

162. Marigo, S. Study of the peripheral leukocyte picture in the diabetic subject / S. Marigo, F. Melani // Diabete. 1962. - Vol.10. - P. 219-229.

163. McEwen, B.S. Protective and damaging effects of stress mediators / B.S. McEwen // N. Engl. J. Med. 1998. - Vol. 338, № 3. - P. 171-179.

164. Mc Garry, J.D. Fatty acids, lipotoxicity and insulin secretion / J.D. McGarry, R.L. Dobbins // Diabetologia. 1999. - Vol. 42. - P. 128-138.

165. Mead, J.F. Free radicals mechanisms in lipid peroxidation and prostaglandins / J.F. Mead //Free radicals in molecular biology, aging and desease. New York, 1984. - P. 355-379.

166. Mehrotra, S. Lipid hydroperoxide and markers of renal disease susceptibility in African and Caucasian subjects with type 2 diabetes / S. Mehrotra // Diabet Med. 2001. - Vol. 18. - P. 109-115.

167. Mercuri, F. Oxidative stress evaluation in diabetes / F. Mercuri, L. Quagliaro, A. Ceriello // Diabetes Technol Ther. 2000. - Vol. 10, № 2-3. -P. 157-167.

168. Mukherjee, S.P. Endogenous hydrogen peroxide and peroxidative metabolism in adipocytes in response to insulin and sulfhydryl reagents / S.P. Mukherjee, R.H. Lane, W.S. Lynn // Biochem. Pharmacol. 1978. -Vol.27. - P. 2589-2594.

169. Orrenius, S. Mechanisms of oxidant-induced cell damage / S. Orrenius, D.J. McConkey, P. Nicoreta // Oxy-Radicals in Molecular Biology and Pathology. -New York: Liss, 1988. P.327-339.

170. Paolisso, G. Glutathione infusion potentiates glucose-induced insulin secretion in aged patients with impaired glucose tolerance / G. Paolisso, D.Giugliano, G.Pizza et al. // Diabetes Care. 1992. - Vol. 15, №1. - P. 1-7.

171. Pennathur, S. Response: acute hyperglycemia induces an oxidative stress in healthy subjects / S. Pennathur, J.W. Heinecke // J. Clin. Invest. -2001. Vol. 108, № 4. - P. 635-636.

172. Poston, L. Endothelium-mediated vascular function in insulin-dependent diabetes mellitus / L. Poston, P.D. Taylor // Clinical Scince (London). -1995. Vol.88, № 3. - P. 245-255.

173. Poston, L. Endothelial control of vascular tone in diabetes mellitus / L. Poston // Diabetologia. 1997. - Vol. 40, № 2. - P. 113-114.

174. Prescott, S.M. Inflammation in the vascular wall as an early event in atherosclerosis / S.M. Prescott, G.A. Zimmerman, D.M. Mclntyre // Diabetologia. 1997. - Vol. 40, № 2. - P. 111-112.

175. Reed, D.J. Cellular defence mechanisms against reactive metabolites / D.J. Reed // Bioactivation of foreing compaunds. Heademic Press. 1985. -№8. -P. 71-108.

176. Rona, G. Catecholamine cardiotoxicity / G. Rona // J Mol Cell Cardiol. 1985. - Vol.17, № 4. - P. 291-306.

177. Sabban, E. Differential effects of stress on gene transcription factors in cathecholaminergic systems / E. Sabban, M.A. Hebert, X. Liu et al. // Annals New York Academia of Scince. 2004. - Vol. 1032. - P. 130-140.

178. Sabban, E. Catecholamines in stress: molecular mechanisms of gene expression / E. Sabban // Endocrine Regulations. 2007. - № 41. - P. 61-73.

179. Sai, P. Spontaneous animal models for insulin-dependent diabetes (type 1 diabetes) / P. Sai", G. Gouin // Vet Res. 1997. - Vol. 28, № 3. - P. 223-229.

180. Salman, S. Diastolic disfunction of left ventricular on diabetic patients with normal sistolic function / S. Salman, F. Salman, M. Davutoglu et al. // Diabetologia. 1997. - Vol. 40.- P. 457. - Suppl. 1.

181. Sapolsky, R. How do glucocorticoids influence stress responses? Integrating permissive, suppressive,stimulatory, and preparative actions / R. Sapolsky, M. Romero, A. Munck // Endocrine Revies .- 2000. № 1. - P. 55-82.

182. Szaleczky, E. Adequate antioxidant defence in type 1 diabetics / E. Szaleczky, K. Farkas, B. Sarman et al. // Diabetologia. 1998. - Vol. 41. - P. 321.-Suppl. 1.

183. Sheinman, R.I. Role of transcriptional activation of IkB in mediation of immunosupression of glucocorticoids / R.I. Sheinman, P.C. Cogswell, A.K. Lofquist et al. // Science. 1995. - Vol. 270. - P. 283-286.

184. Sies, H. Oxidative Stress II: Oxidants and Antioxidants / H. Sies. -London: Academic. Press, 1991. 126 p.

185. Simon, K. Questions in diabetology to be elucidated / K. Simon, E. Dobô, A. Szépvolgyi et al. // Orv Hetil. 2011. - Vol. 21, № 152. - P. 13531361.

186. Singal, P.K. Role of free radicals in catecholamine-induced cardiomyopathy / P.K. Singal, N. Kapur, K.S. Dhillon et al. // Can J Physiol Pharmacol. 1982. - Vol. 60, № 11. - P. 1390-1397.

187. Sloand, J.A. Effects of circulating norepinehprine on platelet, leukocyte and red blood ceel counts by alpha-adrenergic stimulation / J.A. Sloand, M. Hooper, I. Josoph et al. // Amer. J. Cardiol. 1989. - Vol. 63. -№ 15.-P. 1140-1142.

188. Sohal, R.S. Role of oxidative stress and protein oxidation in the aging process / R.S. Sohal // Free Radie. Biol. Med. 2010. - Vol. 33, № 1. - P. 37-44.

189. Stadtman, E.R. Protein modification in aging / E.R. Stadtman, R.E. Starke-Reed, C.N. Oliver et al. // Free radicals and aging / ed. by I. Emerit,

190. B. Chance. Basel; Boston; Berlin: Birkhauser, 2009. - P. 64-72.

191. Sternberg," E: MrStress. Basic mechanisms and clinicaLimplications/ E.M. Sternberg, J. Licinio // New York Academy of Sciens. 2009. -Vol.41.-P.364-371.

192. Strober, W. The interleukins / W. Strober, S.P. James // Pediatric Research. 1988. - Vol. 24, № 5. - P. 549-556.

193. Syvanne, M. Lipids and lipoproteins as coronary risk factors in non-insulin-dependent diabetes mellitus / M. Syvanne, M.R. Taskinen // The lancet. 1997. - Vol. 350, №1.-P. 120-123.

194. Takamura, T. Transgenic mice overexpressing type 2 nitric-oxide synthase in pancreatic beta cells develop insulin-dependent diabetes without insulitis / T. Takamura, I Kato, N. Kimura et al. // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273, № 5. - P. 2493-2496.

195. Vessby, J. Oxidative stress and antioxidant status in type 1 diabetes mellitus / J. Vessby // J. Int. Med. 2002. - Vol. 251, № 1. - P.69-76.

196. West, I.C. Radicals and oxidative stress in diabetes / I.C. West // Diabet Med. 2000. - Vol. 17, № 3. - P. 171-180.

197. Winiarska, K. Glutathione in therapy Article in Polish / K. Winiarska, J. Drozak // Postery Hig Med Dosw. 2002. - Vol. 56, № 4. p. 521-536.

198. Yana^ K. Protein and DNA Oxidation in Different Anatomic Regions of Rat Brain in a Mimetic Ageing Model / K. Yanar, S. Aydin, U. Cakatay et al. // Basic Clin Pharmacol Toxicol. 2011. - Jul 6. - Epub ahead of print.

199. Ziegler, D. Oxidative stress and antioxidant defense in relation to the severity of diabetic polyneuropathy and cardiovascular autonomic neuropathy / D. Ziegler, C.G.H. Sohr, J. Nourooz-Zadeh // Diabetes Care. -2004. Vol. 27, № 9. - P.2178-2183.

Информация о работе

Романов, Дмитрий Александрович
кандидата медицинских наук
Челябинск, 2011
ВАК 03.01.04

Диссертация

Влияние предварительного гипокинетического стресса на аллоксан-индуцированные изменения свободно-радикального окисления во внутренних органах - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы