Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных

Максименко, Светлана Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных
ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных"

На правах рукописи

МАКСИМЕНКО СВЕТЛАНА НИКОЛАЕВНА

ВЛИЯНИЕ НЕМАТОДОЗНОЙ ИНВАЗИИ НА МИТОЗ, АНТИМИТОТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ И БИОТРАНСФОРМАЦИЮ АЛБЕНДАЗОЛА У ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

03 00.19 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

□□3171511

Москва 2008

003171511

Работа выполнена в ГНУ Всероссийском научно-исследовательском институте гельминтологии им К И. Скрябина Россельхозакадемии (ГНУ ВИГИС Россельхозакадемии)

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Новик Тамара Самуиловна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Малахова Екатерина Ивановна; кандидат биологических наук Русаков Сергей Вячеславович

Ведущая организация: Центр паразитологии Института проблем экологии и эвалюцииим А.Н СеверцеваРАН

¡цОО

« /7 » ча(

Защита диссертации состоится «19» июня 2008 г в « / 7 » часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.011 01 при ГНУ Всероссийском научно-исследовательском институте гельминтологии им. К.И. Скрябина Россельхозакадемии (ГНУ ВИГИС Россельхозакадемии). Адресе. 117218, г Москва, Б. Черемушкинская ул., д. 28

Автореферат размещен на официальном сайте ГНУ ВИГИС www gnuvigis nxt ru 19 мая 2008 г.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИГИС Автореферат разослан «_ 11 » IАЛйлРъу 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук „-— Бережно В.К.

Общая характеристика работы Актуальность проблемы. Токсические свойства химиотерапевтических средств, в том числе антгельминтиков, оцениваются в эксперименте на здоровых животных. Правильность такой постановки исследований традиционна и по существу не вызывает сомнений.

В то же время возбудители практически всех паразитарных заболеваний индуцируют различные морфологические и функциональные изменения во многих органах и системах организма хозяина В результате токсические эффекты противопаразитарных препаратов и их поведение в организме зараженных животных могут подвергаться значительной модификации по сравнению со здоровыми Особое значение в данном случае приобретает ситуация, когда токсические свойства препарата на фоне инвазии усиливаются. Получение подобных сведений не только расширит имеющуюся информацию о том или ином лекарственном средстве, но и позволит прогнозировать или продуцировать возможные отрицательные эффекты при лечении человека и животных.

Среди токсикологических характеристик препаратов и различных факторов биологической природы особое значение придается их влиянию на клеточное деление и генетический аппарат Хорошо известно, что антгельминтики, производные бензимидазолкарбаматов, в частности, албендазол (Р Delatour, J .Richard, 1976; JIА Лаптева, 1988, СИЛукина, 1990, ТС Новик, 1992), обладают выраженным антимитотическим действием, т.е. нарушают митоз. Продукты обменных процессов гельминтов, помимо всего прочего, способны вызывать нарушения генома у хозяина (Вл Я Бекиш, О -Я.Л Бекиш, 2004). В подобной ситуации вполне логично задаться вопросом об общем эффекте антгельминтика и инвазии на митотическое деление клеток у зараженных животных и вытекающих отсюда последствиях,

В отношении албендазола такой вопрос приобретает особую остроту с учетом его интенсивной биотрансформации в организме человека и животных с образованием целого ряда метаболитов. Среди них продукт сульфоокисления албендазола, т е. его сульфоксид, имеет особое значение, именно он ответственен за антгельминтное действие и токсические эффекты препарата. В этой связи интересно оценить реальное влияние инвазии на метаболизм албендазола и, в частности, его превращение в сульфоксид; изменение этих процессов может привести к модификации токсических свойств и терапевтической эффективности препарата.

Выяснить и исследовать поставленные вопросы можно при использовании адекватных лабораторных моделей нематодозов, например, мышей, зараженных Aspiculuris tetraptera, Trichinella spiralis и T pseudospiralis

Применение албендазола в качестве основного препарата для экспериментов побудило нас провести также исследования несколько иного рода. Этот препарат является действующим веществом перспективной микрокапсулиро-ванной формы, разработанной в ВИГИСе. Установлена ее высокая терапевтическая эффективность при альвеолярном и цистном гидатидозе, а также трихинеллезе на лабораторных животных (Ф П Коваленко, 1998; 2000) Исходя из этого, в задачи наших исследований входила оценка некоторых токсических

свойств препарата и выявление особенностей биодоступности и метаболизма действующего вещества.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы была оценка влияния инвазии (на примере A, tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis) на проявление антимитотического действия албендазола и его биодоступность, а также оценка некоторых токсических свойств микрокапсулированного албендазола.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решение следующих подчиненных задач:

1. Оценка воздействия экспериментального заражения A tetraptera, Т. spiralis и Т pseudospiralis на митоз клеток костного мозга у хозяина.

2 Оценка воздействия различных доз албендазола на митоз клеток костного мозга у мышей.

3. Оценка антимитотического действия албендазола на фоне заражения А tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis

4. Изучение особенностей биодоступности и метаболизма албендазола в органах мышей, зараженных A tetraptera, Т. spiralis и Т pseudospiralis.

5. Оценка острой токсичности микрокапсулированного албендазола.

6. Изучение подострой токсичности микрокапсулированного албендазола.

7. Оценка антимитотического действия албендазола в микрокапсулах

8 Изучение динамики содержания и метаболизма албендазола в печени мышей после введения микрокапсулированного препарата.

Научная новизна.

• Впервые оценено влияние A tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis на митоз клеток костного мозга и проявление антимитотического действия албендазола у зараженных животных

• Изучены особенности содержания и метаболизма албендазола в органах у животных на фоне инвазий A tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis.

• Проведена токсикологическая оценка микрокапсулированного албендазола

Практическая значимость.

Подготовлены «Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения методом жидкостной хроматографии высокого давления» (утверждены на секции «Инвазионные болезни животных» РАСХН 01.03.2007 г.).

Результаты токсикологической оценки микрокапсулированного албендазола позволяют рекомендовать его к применению в лечении гельминтозов человека и животных и составляют основу материалов для регистрации препарата

Апробация работы. Результаты исследований были неоднократно представлены на отчетных научных конференциях ВИГИС и научных конференциях «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями животных» (2006; 2007 гг.).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом трехлетних научных исследований автора Исследования по изучению влияния A tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis на митоз у хозяина, особенностей всасывания, распределения и метаболизма албендазола, а также проявление его антимитотического действия у зараженных мышей и оценка

токсических свойств микрокапсулированного албендазола выполнены аспиранткой лично.

Работы выполнялись под научным руководством доктора биологических наук, профессора Т С.Новик, которая оказывала научно-методическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов Основные положения, выносимые на защиту.

• Влияние возбудителей аспикулуроза и трихинеллеза на деление соматических клеток костного мозга у хозяина

• Антимитотическое действие албендазола у незараженных и зараженных аспикулурисами и трихинеллами мышей.

• Особенности накопления и биотрансформации албендазола в органах у мышей, больных аспикулурозом и трихинеллезом

• Изучение токсических свойств микрокапсулированного албендазола. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных статей,

в которых изложены основные положения и выводы по изучаемой проблеме, в том числе, две статьи в издании, рекомендованном ВАК РФ

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах компьютерного текста Список использованной литературы включает 232 источника, в том числе 122 отечественных и 110 иностранных Работа иллюстрирована 27 таблицами и 35 рисунками

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В обзоре литературы представлен подробный анализ данных отечественных и зарубежных авторов по токсическим свойствам, фармакокинетике и метаболизму производных бензимидазолкарбаматов, а также некоторым аспектам влияния паразитов на организм хозяина, в том числе на геном у хозяина.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы

Работа выполнена в 2003-2006 гг. в лаборатории биохимии и биотехнологии; виварии Всероссийского института гельминтологии имени К.И Скрябина

Белых мышей и крыс для всех исследований получали из питомника «Филиал Андреевка ГУ НЦ биомедицинских технологий РАМН». Животных содержали в виварии согласно санитарным правилам и на стандартном рационе в соответствии с приказами МЗ СССР № 1045-7 от 06.04.73 г. и № 1179 от 10.10.83 г. с использованием сухого брикетированного корма (ООО «Лабора-торснаб», г Москва). Работу с животными проводили в соответствии с приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.77 г.

2.1.1. Опыты по оиенке влияния заражения мышей культурами A. tetraptera. Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз и проявление антимитотического действия албендазола у хозяина 2.1.1.1. Схема опытов на мышах, зараженных A. tetraptera Изучение влияния инвазии A. tetraptera на митоз клеток костного мозга и проявление антимитотического действия албендазола на фоне инвазии проводили на 144 белых беспородных мышах с исходной массой тела 18-20 г. Для выделения культуры A tetraptera использовали спонтанно зараженных мышей. Культивирование личинок и заражение мышей A tetraptera проводили известным методом (А.И Кротов, 1984).

Далее в зависимости от цели конкретного опыта зараженных мышей разделяли на соответствующие подгруппы по 6 животных в каждой

В первом опыте исследовали влияние самой инвазии на митоз у хозяина. В зависимости от интенсивности заражения (определяли при убое и вскрытии кишечника) мышей разделяли на подгруппы по 6 животных в каждой.

Выделение и исследование костного мозга проводили следующим образом. Мышей умерщвляли дислокацией шейных позвонков Из бедренной кости каждой мыши извлекали костный мозг. Митотическую активность в популяции костного мозга мышей оценивали анафазным методом (С.Е Ford, J.L.Hamerton, 1956) В каждом препарате костного мозга от каждого животного анализировали по 100 полей зрения Определяли митотический индекс, который выражали в процентах. Регистрировали все стадии митоза и также выражали в процентах.

В нескольких последующих опытах оценивали влияние инвазии A tetrap-tera на проявление антимитотического действия албендазола (образец с активностью 98,8% (Китай)).

С этой целью сформировали 8 групп мышей, инвазированных A tetraptera Зараженным мышам на 14 сутки вводили албендазол в виде водной суспензии на твине-80 в дозах 5 и 10 мг/кг; через 3; 6 и 24 часа после введения препарата по 6 животных убивали на каждый срок. Выделение и исследование препаратов костного мозга проводили, как описано выше. В каждом опыте не-зараженных животных использовали в качестве контроля. 2.1.1.2. Схема опытов на мышах, зараженных Т. spiralis Изучение влияния инвазии Т spiralis на митоз клеток костного мозга и проявление антимитотического действия албендазола на фоне инвазии проводили в опыте на 78 белых беспородных мышах с исходной массой тела 18-20 г. Для заражения животных использовали крысиный штамм Т spiralis (любезно предоставлен к.б,н Ф К.Скворцовой) Животных заражали при пероральном введении личинок с помощью желудочного зонда из расчета 10 личинок на 1 г массы тела; в одном варианте опыта — из расчета 60 личинок на 1 г массы тела.

Далее в зависимости от цели конкретного опыта зараженных мышей разделяли на соответствующие подгруппы

Основные этапы исследований заключались в следующем Животных, зараженных Т spiralis, разделяли на 3 подгруппы по 18 голов в каждой. Первая подгруппа мышей получала албендазол в дозе 30 мг/кг перо-рально однократно на 5 сутки после заражения (соответствует кишечной стадии развития личинок) Второй подгруппе животных албендазол вводили в этой же дозе через 14 суток после заражения (миграционная стадия развития), а животным третьей подгруппы — на 40 сутки (мышечная стадия).

Оценку антимитотической активности албендазола проводили через 3; 6 и 24 часа после введения препарата. Параллельно в указанные периоды времени оценивали влияние самих трихинелл, находящихся на различных стадиях развития, на митоз соматических клеток у хозяина. В каждую такую подгруппу входило по 6 животных. Контролем служили незараженные мыши аналогичной массы и пола.

Интенсивность экспериментального заражения мышей определяли через 40 суток у части животных из каждой группы Мышей убивали, пробы жева-

тельных мышц (массетеров) переваривали в искусственном желудочном соке по методу ФК. Скворцовой (2006) Подсчитывали общее число выделенных личинок (от каждой мыши отдельно) и проводили пересчет количества личинок на 1 г мышц.

2.1.1.3. Схема опытов на мышах, зараженных Т. pseudospiralis

Заражение и изучение влияния инвазии Т pseudospiralis на митоз клеток костного мозга и проявление антимитотического действия албендазола проводили аналогично описанному в подразделе 2.1 12. для Т spiralis

2.1.2. Опыты по оценке влияния заражения A. tetraptera, Т. spiralis и

Т. pseudospiralis на биодоступность и метаболизм албендазола

С целью выявления особенностей биодоступности и метаболизма албендазола при заражении гельминтами определяли содержание албендазола и его основного метаболита сульфоксида в печени и почках мышей, инвазированных А tetraptera, Т spiralis и Т pseudospiralis, в сравнении с незараженными мышами аналогичной массы тела и пола

Заражение мышей гельминтами проводили, как описано в подразделах 2 1 1 1.-2.1 1.3.

Албендазол в форме водной суспензии на твине-80 вводили через рот мышам, зараженным A tetraptera, на 14 сутки после заражения в дозе 10 мг/кг массы тела; мышам, зараженным Т. spiralis и Т pseudospiralis, на кишечной, миграционной и мышечной стадиях — в дозе 30 мг/кг. В каждом случае по 3 животных убивали через 3; 6 и 24 часа после введения препарата. Для анализа на содержание албендазола сульфоксида отбирали пробы печени и почек. До анализа пробы хранили при -20°С

Подготовку и анализ проб проводили согласно подготовленным «Методическим указаниям по определению остаточных количеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения методом жидкостной хроматографии высокого давления»

2.1.3. Оиенка токсических свойств микрокапсулированного албендазола

Образец микрокапсулированного албендазола для исследований был приготовлен д б.н Т.С.Новик с использованием ранее отработанного метода мик-рокапсулирования. Препарат содержал албендазол-ацетилцеллюлозу-сернокис-лую медь в соотношении 1 '0,5-1

2.1.3.1. Острая токсичность

Исследование проводили в соответствии с «Методическими указаниями по гигиенической оценке новых пестицидов» (Киев, 1988) и методическими рекомендациями Фармакологического государственного комитета («Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», Москва, 2005).

Препарат в форме суспензии, приготовленной на оливковом масле, вводили мышам в желудок однократно в дозах 150; 300; 600, 900 и 1200 мг/кг Каждую дозу вводили 10 мышам.

В течение 14 суток проводили наблюдение за животными, проявлением у них симптомов интоксикации; отмечали особенности поведения; оценивали прием корма и воды, а также состояние шерстного покрова и т.д.

В целом в данных исследованиях использовали 50 мышей.

2.1.3.2. Подострая токсичность

Опыты по оценке подострой токсичности микрокапсулированного албенда-зола проводили на белых мышах-самцах с исходной массой тела 20-24 г.

Из 40 мышей сформировали 4 группы по 10 животных в каждой. Мышам 1, 2 и 3 групп препарат вводили в виде суспензии на оливковом масле соответственно в дозах 1/10, 1/100 и 1/1000 otLD5o (точнее от максимально возможной дозы для перорального введения, установленной в остром опыте). Контрольная 4 группа мышей аналогичной массы и пола получала оливковое масло в соответствующем объеме.

Продолжительность введения составила 10 суток.

В течение всего периода введения препарата наблюдали за общим состоянием и поведением животных, приемом корма и воды, видимыми физиологическими функциями и т п

Ежедневно у мышей регистрировали массу тела.

В конце опыта через 1 сутки после последнего введения препарата мышей убивали дислокацией шейных позвонков и отбирали пробы крови (с и без антикоагулянта) для определения гематологических и биохимических показателей

Основные показатели периферической крови крыс определяли на гематологическом анализаторе «ACT-Diff» (США); лейкоцитарную формулу крови — общепринятым методом

На биохимическом анализаторе «Clima-15» (Испания) проводили определение биохимических показателей

2.1.3.3. Антимитотическое действие

Влияние микрокапсулированного албендазола на митотическую активность в популяции костного мозга мышей оценивали методом C.EFord, JL.Hamerton (1956). Препарат в форме суспензии, приготовленной на оливковом масле, вводили беспородным мышам-самцам массой 18-20 г перорально однократно в дозе 30 мг/кг (по ДВ) Через 3; 6; 24; 48 и 72 часа после введения препарата убивали по 6 мышей с последующим извлечением костного мозга Выделение костного мозга и обработку материала проводили как описано выше Определяли мито-тический индекс, который выражали в процентах. Регистрировали все стадии митоза и также выражали в процентах. Контролем служили мыши, не получавшие препарат.

Параллельно в сравнительных целях оценивали влияние албендазола (без микрокапсулирования) на оливковом масле на митоз клеток костного мозга мышей. Препарат в форме суспензии на оливковом масле вводили животным также в дозе 30 мг/кг по вышеописанной схеме.

2.1.3.4. Особенности биодоступности и метаболизма албендазола

в печени при введении в виде микрокапсул

Для выявления возможных особенностей содержания и метаболизма албендазола у мышей при его введении в виде микрокапсул сформировали две группы по 9 животных в каждой массой 20-23 г Мышам 1 группы вводили микрокапсулированный албендазол на оливковом масле в дозе 30 мг/кг по действующему веществу; животные 2 группы получали албендазол в виде суспензии на оливковом масле также в дозе 30 мг/кг.

По 3 мыши из каждой группы убивали через 3; 6 и 24 часа после введения препаратов. Отбирали пробы печени, в которых определяли содержание албен-дазола и албендазола сульфоксида методом жидкостной хроматографии высокого давления (подраздел 2.1 2.).

До анализа пробы печени хранили при -20°С. 2.1.4. Статистическая обработка результатов

Во всех случаях статистическую обработку полученных данных проводили с использованием метода Стьюдента-Фишера с ^критерием.

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Влияние А.ШгаМега на митоз клеток костного мозга у мышей и проявление антимитотического действия албендазола 2.2.1.1. Влияние А. Шгар1ега на митоз клеток костного мозга у хозяина В таблице 2 2.1 1 приведены результаты опыта по исследованию влияния инвазии А. (е(гар(ега различной интенсивности на митоз клеток костного мозга у мышей.

Таблица 2.2.1.1.

Влияние А. 1е1гар1ега при различной интенсивности инвазии на митоз

клеток костного мозга у мышей

Колич. экземпл. А. 1е/гар1ега на животное Митотич. индекс, % М±ш Количество отдельных стадий митоза, %

профазы метафазы анафазы телофазы

2 1,32±0,20 19,05±6,19 64,29±7,48 9,5214,58 7,1414,02

10 1,23±0,20 15,79±5,99 60,5318,04 7,8914,43 15,7915,99

16 1,14«,18 15,44±6,49 63,0918,67 7,3814,70 14,0916,25

30 1,0010,18 10,00±5,57 56,6719,20 13,3316,31 20,0017,43

50 1,32±0,19 2,17+2,17* 69,5716,86 8,7014,20 19,5615,91

90 1,7210,24* 3,3912,16* 76,9314,44* 7,5912,62 12,0913,44

210 1,54±0,17* 3,2312,26* 77,4215,35* 6,4513,15 12,9014,29

контроль 1,02±0,12 17,9515,23 56,4118,04 5,1313,58 20,5116,55

* р £ 0,05 (различие по данному показателю статистически достоверно между опытной и контрольной группами)

При оценке влияния инвазии А !е1гар!ега на митоз у хозяина можно отметить, что при относительно низкой интенсивности значения (2-50 экземпляров на мышь) митотический индекс (основной показатель митоза) не претерпевал достоверных изменений по сравнению с контрольным значением (р > 0,05) Однако при увеличении интенсивности инвазии (90 и 210 экземпляров на мышь) имело место повышение митотического индекса до 1,72±0,24% и 1,54+0,20% и по сравнению с контролем (1,02±0,12%) (р < 0,05).

Повышение митотического индекса сопровождалось увеличением процентного содержания метафаз (таблица 2 2 1.1 ) Подобные изменения характерны для остановки клеточного деления на стадии метафазы.

Таким образом, нематоды А хеПар1ега при низкой интенсивности заражения не оказывают влияния на деление соматических клеток, при увеличении этого показателя проявляется антимитотическое действие.

2.2.1.2. Влияние инвазии А. Шгар(ега и албендазола в дозе 5 мг/кг на митотическую активность клеток костного мозга мышей Данные раздела 2.2.1.1. свидетельствуют о том, что А ¡е1гар(ега (при высокой интенсивности инвазии) оказывют антимитотическое действие на клетки костного мозга у хозяина. Кроме того, хорошо известно, что албендазол также нарушает клеточное деление, останавливая его на стадии метафазы с сопутствующим увеличением митотического индекса. Далее нам предстояло выяснить, как ведет себя комбинация двух этих факторов Результаты приведены в таблице 2.2.1.2

Таблица 2.2.1.2.

Влияние А. 1е1гар1ега, албендазола в дозе 5 мг/кг и препарата на фоне инвазии

на митоз клеток костного мозга мышей (п = 6, р к 0,05)

Вариант опыта Митотич. индекс, % Количество отдельных стадий митоза, %

профазы метафазы анафазы телофазы

зараженные мыши

А 1е!гар1ега + алб Зч 0,60±0,09 10,87±3,25 79,35±4,22* 4,35±2,13 5,43±2,3б*

А 1е1гар1ега + алб бч 0,86±0,10* 6,84±2,33 80,34±3,67* 3,42±1,68 9,40±2,69

А ¡е1гар1ега + алб 24 ч 0,74±0,08 9,40±2,70 70,94±4,20 5,98±2,19 13,68±3,68

А (е&ар1ега 0,79+0,08* 8,33±2,30 73,61±3,69 9,03±2,39 9,03±2,39

незараженные мыши

албендазол 3 ч 0,67±0,09 14,29±4,41 79,37±5,10* 1,59±1,58 4,75±2,68*

албендазол 6 ч 0,73±0,09 5,5б±2,72 81,94±4,57* 6,94±3,01 5,56±2,72*

албендазол 24 ч 0,58±0,08 12,28±4,68 77,5б±5,96 6,16±3,42 4,00±2,83*

Контроль (без заражения и введения албендазола) 0,51±0,08 10,6414,55 61,70±5,07 6,38±3,60 21,28±б,03

* р< 0,05 (различие по данному показателю статистически достоверно между опытной и контрольной группами)

После введения албендазола в дозе 5 мг/кг мышам, зараженным А 1е&ар-¡ега, митотический индекс достигал значений 0,60±0,09 (р £ 0,05); 0,86±0,10 (р £ 0,05) и 0,74±0,08 (р £ 0,05) соответственно через 3; 6 и 24 часа после введения препарата.

По сравнению с результатами оценки албендазола в дозе 5 мг/кг у здоровых мышей (эффект не достигал статистически значимого уровня) антимитотическое действие после заражения явно усиливалось (таблица 2.2.1.2.) Однако действие препарата не усиливалось по сравнению с инвазией Как следует, через 6 часов после введения албендазола мышам, зараженным аспикулурозом, можно было отметить максимальное значение митотического индекса: 0,86+0,10 против 0,79±0,08% у зараженных мышей (те. при воздействии одной инвазии) и 0,51±0,08% - у незараженных животных

Таким образом, мы можем говорить об усилении антимитотического действия албендазола на фоне заражения А ¡е&ар1ега, вероятно за счет самой инвазии, по сравнению с неинвазированными мышами.

2.2.1.3. Влияние инвазии А. /еШр1ега и албендазола в дозе 10 мг/кг на митотическую активность клеток костного мозга мышей На следующем этапе работы нам предстояло выяснить, как ведет себя ал-бендазол в дозе 10 мг/кг у зараженных А 1е&ар1ега мышей Результаты этого опыта приведены в таблице 2.2 1.3.

Таблица 2.2.1.3.

Влияние А. ¡е!гар1ега и албендазола в дозе 10 мг/кг и препарата на фоне инвазии на митотическую активность клеток костного мозга мышей (п = 6,р£ 0,05)

Вариант опыта Мнтотнч. индекс, % Количество отдельных стадий митоза, %

профазы метафазы анафазы телофазы

зараженные мыши

A tetraptera + алб 3 ч 0,8210,08* 5,56±3,12 87,0414,57* 3,70±2,57 3,70±2,57

A tetraptera + алб 6 ч 1,0910,10* 10,38±3,70 75,1215,24* 7,2513,14 7,25±3,14

A tetraptera + алб 24 ч 0,9610,09* 9,28±2,96 70,0114,68 7,31±2,66 13,4013,48

A tetraptera 0,8510,08* 6,49±3,01 79,2214,96* 3,90±2,37 10,3913,73

незараженные мыши

албендазол 3 ч 1,0110,12* 8,75±3,16 82,5014,25* 3,75±2,12 5,0012,44

албендазол 6 ч 1,2310,15* 4,2б±2,95 82,9815,48* 4,26±2,95 8,5014,07

албендазол 24 ч 0,94±0,12 9,43±4,01 79,2515,57* 1,89±1,87 9,4314,01

Контроль(без заражения и введения албендазола) 0,55±0,08 16,67+6,30 55,5616,04 11,10±5,31 16,6716,30

* 0,05 (различие по данному показателю статистически достоверно между опытной и контрольной группами)

После введения албендазола в дозе 10 мг/кг мышам, зараженным A tetrap-tera, можно отметить, что значения митотического индекса по отношению к аналогичным показателям у зараженных животных оставались без достоверных изменений (максимально 1,09±0,10% против 0,85±0,08%) Действие препарата не усиливалось и по сравнению с мышами, не подвергшимися заражению (максимальное значение митотического индекса 1,09±0,10% против 1,23±0,15%).

Таким образом, при введении албендазола в дозе 10 мг/кг мышам, зараженным A tetraptera, его антимитотическое действие оставалось без существенных изменений.

2.2.2. Влияние инвазии Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга у мышей и проявление антимитотического действия албендазола

2.2.2.1. Влияние инвазии Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга у мышей

При заражении мышей трихинеллами в дозе 10 личинок/г и последующем переваривании в искусственном желудочном соке проб жевательных мышц от животных из каждой группы в среднем была получена следующая интенсивность инвазии 25757,33±5328,60 и 30475,00+2357,30 личинок/г массетера соответственно для Т spiralis и Т pseudospiralis. При заражении мышей Т. spiralis в дозе 60 личинок/г интенсивность инвазии составила 75145±8421,40 личинок/г массетера

Как следует из данных таблицы 2.2.2.1,, через 5 суток после экспериментального заражения Т spiralis, т.е на кишечной стадии развития личинок, имело место достоверное повышение митотического индекса (0,87±0,09 против 0,47±0,08% в контро-

ле, р < 0,05) Аналогичную ситуацию наблюдали и для личинок Т pseudospiralis, причем, в данном случае имело место более высокое значение митотического индекса (1,04±0,11 против 0,47±0,08% в контроле, р < 0,05)

На 14 сутки (миграционная стадия) заражение Т spiralis и Т. pseudospiralis привело к различным результатам. Не наблюдали достоверных изменений митотического индекса при заражении Т spiralis (0,69±0,09 против 0,47±0,08% в контроле); в то же время Т pseudospiralis вызывали достоверное повышение митотического индекса (1,13±0,12 против 0,47±0,08% в контроле, р < 0,05)

Аналогичное исследование на мышечной стадии развития двух видов трихинелл дало следующие результаты Значение митотического индекса в популяции клеток костного мозга мышей, зараженных Т spiralis из расчета 10 личинок/г массы тела, осталось без каких-либо изменений по сравнению с животными, не подвергшимися заражению (0,41 ±0,09 против 0,47±0,08% в контроле). Однако при увеличении дозы инвазионных личинок при экспериментальном заражении до 60 экземпляров/г массы тела имело место статистически достоверное увеличение митотического индекса по сравнению с незараженными животными. На мышечной стадии развития личинок Т. pseudospiralis значение митотического индекса претерпело достоверное повышение по сравнению с контролем (1,05±0,11 по сравнению с 0,47±0,08% в контроле) (таблица 2.2 2.1).

При анализе влияния Т spiralis и Т pseudospiralis (при одинаковой дозе заражения) на митоз клеток костного мозга у хозяина, можно сделать вывод, что у мышей, зараженных Т. pseudospiralis, наблюдали более выраженный эффект в отношении делящихся клеток костного мозга по сравнению с Т spiralis Однако на примере Т spiralis становится совершенно очевидным, что действие трихинелл зависело от дозы заражения (таблица 2 2.2.1.).

Кроме того, необходимо отметить, что влияние личинок Т spiralis на митоз клеток костного мозга хозяина снижалось по мере развития личинок от кишечной до мышечной стадии. Напротив, действие личинок Т. pseudospiralis по мере их развития изменялось не существенно и проявлялось на всех стадиях при достоверном различии не только с незараженным контролем, но и с эффектом Т spiralis на мышечной стадии развития.

Подобные различия (во всяком случае, на мышечной стадии) мы связываем с морфологическими особенностями личинок Т pseudospiralis, то есть отсутствием капсулы Кроме того, не исключено, что продукты метаболизма бес-капсульных личинок обладают более патогенными свойствами в отношении митоза клеток костного мозга хозяина

Данные таблицы 2 2 2.1. свидетельствуют о том, что в тех случаях, когда нами отмечалось повышение митотического индекса, одновременно имело место увеличение процентного содержания метафаз, вероятно, за счет остановки клеточного деления на этой стадии митоза. Повышение митотического индекса было результатом указанных нарушений.

Таким образом, трихинеллы оказывают антимитотическое действие на клетки костного мозга хозяина, вызывая накопление метафаз и увеличение митотического индекса. Указанный эффект имеет свои особенности проявления в зависимости от вида и стадии развития трихинелл.

Таблица 2.2.2.1.

Влияние инвазии Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митотическую активность _ клеток костного мозга у мышей (п = 6; p'i. 0,05)_

Вариант опыта Митотический индекс, % Количество отдельных стадий митоза, %

профазы | метафазы i анафазы | телофазы

Кишечная стадия, 5 сутки

Т spiralis 0,87±0,09* 17,81±14,41 73,97±5,17 4,11 ±2,34 4,11 ±2,34

Т pseudospiralis 1,04±0,11* 5,67±2,48 85,23±3,80* 4,55+2,23 4,55±2,23

Миграционнав стадия, 14 сутки

Т spiralis 0,69±0,09 1,75±1,75* 91,23±3,79* 1,75±1,75 5,27±2,99

Т pseudospiralis 1,13±0,12* 6,4б±2,47 76,34±4,43 8,60±2,92 8,60±2,92

Мышечная стадия, 40 сутки

Т spiralis (заражение 10 личинок/г массы тела) 0,41 ±0,09 17,39±8,08 69,70±9,36 4,12±2,37 8,79±6,04

Т spiralis (заражение 60 личинок/г массы тела) 1,19±0,10* 4,24±1,86 87,29±3,08* 3,39±1,67 5,08±2,03

Т pseudospiralis 1,05±0,11» 5,15±2,26 88,6б±3,23* 2,07±1,45 4,12±2,03

контроль 0,47±0,08 16,67±6,22 55,56±8,40 10,24+3,05 17,53±6,57

* р £ 0,05 (различие по данному показателю статистически достоверно между опытной и контрольной группами)

2.2.2.2. Влияние инвазии Т. spiralis и Т. pseudospiralis на проявление

антимитотического действия албендазола

Еще одним интересным вопросом наших исследований была оценка антимитотического действия албендазола на фоне инвазии, вызванной различными видами трихинелл и на различных стадиях развития личинок.

На 5 сутки после заражения мышей личинками Т spiralis (кишечная стадия развития личинок) введение албендазола (30 мг/кг) привело к достоверному повышению митотического индекса по сравнению с интактным контролем (0,47±0,08%). Значения данного показателя составили 0,86±0,11; 1,01 ±0,11 и 0,88±0Д0% соответственно, через 3; 6 и 24 часа после введения албендазола. У мышей, зараженных Т pseudospiralis (кишечная стадия), митотические индексы достигали величин 0,82±0,09; 0,85±0,09, 1,10±0,11% соответственно на 3; 6 и 24 часа после введения препарата.

Сопоставление предельных значений показателя митотической активности клеток у мьпней при заражении и заражении + введении албендазола позволяет придти к выводу, что они практически не различались между собой (соответственно 0,87±0,09 для Т spiralis и 1,04±0,11 для Т pseudospiralis против 0,86±0,11-5-1,01±0,11 и 0,82±0,09-1,10±0,11%).

При сравнении результатов введения албендазола зараженным и незара-женным мышам можно отметить следующее. Во всех случаях можно было детектировать повышение данного показателя, но у инвазированных животных оно было выражено в меньшей степени. Кроме того, если у мышей, не подвергшихся заражению и зараженных Т spiralis, максимальный эффект имел место через 6 часов после введения препарата, то при инвазии Т pseudospiralis он проявлялся только через 24 часа

При введении албендазола мышам на миграционной стадии развития трихинелл следует отметить увеличение показателя митоза по сравнению с ин-тактным контролем, особенно через 24 часа после введения препарата Так, значения митотического индекса на этот период времени достигали 1,01±0,11% при заражении мышей Т. spiralis и 1,50±0,13% при заражении Т pseudospiralis (р < 0,05). Однако трихинеллезная инвазия, как это можно было ожидать, не усиливала отрицательное действие албендазола на митоз, поскольку суммарный эффект не превышал таковой для одной инвазии

Кроме того, проявление антимитотического действия албендазола у мышей, зараженных обоими видами трихинелл, не усиливалось по сравнению с незараженными животными, которым вводили препарат Единственным отличием было то, что у первых максимальный эффект проявлялся через 24 часа, в то время, как у здоровых мышей — через 6 часов

Наконец, приводим данные по особенностям проявления антимитотического действия албендазола у мышей на мышечной стадии развития Т spiralis и Т pseudospiralis (40 суток после заражения)

В случае Т. spiralis достоверное повышение митотического индекса отмечено только через 6 часов после введения албендазола (0,81 ±0,11%) против ин-тактного контроля - 0,47±0,08% и показателя митоза у мышей, зараженных Т spiralis - 0,41 ±0,09%, которым не вводили препарат

У мышей, зараженных Т pseudospiralis, значения митотического индекса через 3, 6 и 24 ч после введения албендазола составили соответственно 0,87±0,10; 0,97±0,10 и 0,71±0,09% (во всех случаях р < 0,05 относительно ин-тактного контроля, но р > 0,05 по сравнению с инвазией).

Таким образом, установлено, что в целом антимитотическое действие албендазола не усиливалось под действием трихинелл, за исключением проявления этого эффекта на мышечной стадии развития Т spiralis Выявлены особенности антимитотического действия препарата у животных, инвазированных двумя видами трихинелл, и на разных стадиях развития личинок.

2.2.3. Особенности биодоступности и метаболизма албендазола у мышей, зараженных A. tetraptera. Т. spiralis и Т. pseudospiralis 2.2.3.1. Динамика содержания албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках у мышей, зараженных A. tetraptera

Задачей наших исследований было изучение динамики содержания албендазола и албендазола сульфоксида (активного метаболита) в печени и почках мышей, зараженных Л tetraptera, по сравнению с неинвазированными животными. Обобщенные результаты приведены в таблице 2.2.3.1. При введении водной суспензии албендазола в дозе 10 мг/кг максимальное накопление неизмененного соединения в обоих органах можно было отметить уже через 3 часа после введения препарата. На данный период времени концентрация албендазола в печени и почках составила. 983,21±47,64 и 2337,88±158,46 нг/г. Однако в данном случае наиболее примечательной является низкая концентрация в печени метаболита албендазола, равная всего 34,58±7,62 нг/г В почках уровень албендазола сульфоксида был несколько выше 102,95±15,72.

Содержание албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках мышей,

зараженных А. (е&ар1ега, и без заражения после введения водной суспензии _ препарата в дозе 10 мг/кг (п = 3)_

Орган Концентрация албендазола и албендазола сульфоксида (нг/г)

Время отбора проб (часы)

3 | 6 | 24

Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид заражение A. tetraptera

983,21±47,64 34,58+7,62 2337,88±158,4б 102,95±15,72 655,93±58,72 1995,25±137,46 211,01±7,51 186,21±18,47 192,38±27,30

Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид без заражения

332,69±28,74 180,25±23,55 937,84±57,4б 1672,38±128,42 949,98+87,37 3572,48±256,4б 317,98117, 82,35112,38 942,53136,52 5673,301273,52

* не обнаружено

Спустя 6 часов после введения препарата зараженным мышам в печени и почках имело место снижение уровня неизмененного албендазола соответственно до 655,93±58,72 и 1995,25±137,4б нг/г Кроме того, в обоих органах не обнаружен албендазол сульфоксид.

На третий срок отбора проб, т е через 24 часа, концентрация албендазола снизилась и составила в печени 211,01±7,51, в почках - 192,38±27,30 нг/г Содержание албендазола сульфоксида в печени равнялось 186,21118,47 нг/г, в почках в этот период времени метаболит не был детектирован.

При сравнении описанных данных с незараженным контролем можно заключить, что у мышей, инвазированных A tetraptera, максимальный уровень албендазола в обоих органах был ниже, однако, он детектировался раньше, т е через 3 часа после введения, в отличие от 6 часов в контроле Кроме того, у зараженных животных имело место явное угнетение сульфоокисления и превращения албендазола в его основной метаболит.

2.2.3.2. Динамика накопления, распределения и метаболизм албендазола у мышей, зараженных Т. spiralis и Т. pseudospiralis, по сравнению с незараженными животными.

Результаты изучения биодоступности албендазола и продукта его биотрансформации в органах мышей, зараженных Т spiralis, по сравнению с незараженными животными приведены в таблице 2.2 3 2 1.

При введении албендазола мышам на 5 сутки после заражения Т spiralis, т е на кишечной стадии развития паразита, концентрация самого албендазола в печени мало отличалась от таковой у здоровых мышей: на 3; 6 и 24 часа она составила соответственно 2439,38±53,24; 1807,89±142,11 и 227,63±38,70 нг/г против аналогичных значений у здоровых мышей 2100,77±675,41; 1562,90±163,51 и 469,73±93,40 нг/г В печени зараженных и незараженных мышей максималь-

ный уровень неизмененного албендазола был обнаружен через 3 часа после введения препарата с последующим снижением

Таблица 2.2.3.2.1.

Содержание албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках мышей на различных стадиях развития ТлрЬаШ по сравнению с незараженными животными при введении водной суспензии албендазола в дозе ЗОмг/кг

Стадия развития личинок; орган Концентрация албендазола и албендазола сульфоксида (нг/г)

Время отбора проб (часы)

3 | 6 | 24

заражение Т. spiralis

Кишечная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 2439,38153,24 8б,90±15,42 6581,41±358,43 1807,891142,11 230,07127,87 5305,841403,62 2429,591258,73 227,63138,70 550,20174,78 1301,331134,06 1924,271630,35

Миграционная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 1744,58±538,45 920,15±32,72 2081,87±1016,11 2085,59±348,79 590,681104,72 117,65116,72 733,58156,72 215,06127,48 205,53135,70 241,51127,86 195,61125,48

Мышечная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 1394,95±283,15 641,96172,12 2480,52±406,57 3141,521406,57 878,33160,43 298,65182,46 1127,55197,13 264,37148,5 140,87172,69 193,82132,30 861,97193,51 164,96140,55

без заражения

Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 2100,771675,41 2616,691380,95 7678,321254,78 1562,901163,51 2015,761156,70 5710,121934,90 1761,501215,46 469,73193,40 976,161246,82 791,35157,46 1205,351107,85

* не обнаружено

Обращает на себя внимание существенно более низкий уровень албендазола сульфоксида в печени мышей, зараженных трихинеллами, соответственно 86,90±15,42, 230,07±27,87 и 550,20±74,78 нг/г против соответствующих значений 2616,69±380,95, 2015,73±156,70 и 976,16±246,82 нг/г в контроле. Данный установленный факт, скорее всего, свидетельствует об определенном угнетении метаболизма албендазола у мышей после заражения трихинеллами данного вида

В отношении содержания албендазола в почках можно отметить следующее. Максимальный уровень препарата обнаружен через 3 часа после введения как у мышей после экспериментального заражения, так и у здоровых животных, причем, с учетом арифметических ошибок различия не носили статистически значимый характер: 6581,41±358,43 и 7678,321254,78 нг/г. В последующие сро-

ки исследований концентрация препарата снижалась, но в целом была выше по сравнению с печенью.

На миграционной стадии развития Т spiralis у зараженных животных максимальный уровень албендазола в печени и почках имел место через 3 часа после введения с последующим снижением к 24 часам Аналогичная динамика характерна и для контрольных мышей Кроме того, концентрация албендазола на этот экспериментальный период (3 часа) была ниже по сравнению с мышами без заражения Подобная тенденция проявлялась еще в большей степени в последующие периоды времени, т.е. через 6 и 24 часа после введения препарата

Не менее интересны данные, касающиеся содержания албендазола сульфок-сида в печени На все интервалы отбора проб этого органа для анализа уровень основного метаболита был существенно ниже по сравнению с мышами, которые не подверглись заражению Конкретно, его концентрация составила соответственно 920,15±32,72, 117,65116,72 и 241,51±27,86 нг/г, аналогичные данные у незара-женных мышей - 2616,69±380,95,2015,761156,70 и 976,161246,82 нг/г.

Результаты определения албендазола и его метаболита в почках в целом (за некоторым исключением) также свидетельствуют о более низких концентрациях в сравнении со здоровыми мышами

У мышей, зараженных Т spiralis, на мышечной стадии развития паразитов динамика содержания неизмененного препарата в печени в целом соответствует таковой на других стадиях развития трихинелл То есть, максимальный уровень албендазола в печени отмечен через 3 часа после введения (1394,951283,15 нг/г) с последующим снижением к 6 и 24 часам (878,33160,43 и 140,87172,69 нг/г) При сравнении с аналогичными значениями у контрольных мышей (таблица 2 2.3 2 1.) можно заключить, что концентрация албендазола у инвазиро-ванных животных была ниже по сравнению со здоровыми

Концентрация албендазола сульфоксида в печени через 3; 6 и 24 часа после введения препарата равнялась соответственно 641,96172,12, 298,65182,46 и 193,82132,30 нг/г. Аналогичные показатели у неинвазированных трихинеллами мышей были значительно выше

При рассмотрении данных по динамике концентрации обоих продуктов в почках в целом можно отметить их более высокий уровень по сравнению с печенью Однако отмеченная нами тенденция к снижению концентрации как албендазола, так и его метаболита у зараженных мышей по сравнению с незара-женными в целом имела место и в данном случае

В таблице 2 2 3 2.2. приведены данные по содержанию албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках мышей на трех стадиях развития Т pseudospiralis

Через 3 часа после введения албендазола в период времени, соответствующий кишечной стадии развития трихинелл этого вида, была установлена максимальная концентрация неизмененного албендазола, и она составила в печени 1171,49157,16 нг/г; в последующие интервалы времени, т е. через 6 и 24 часа, уровень албендазола равнялся соответственно 769,691174,92 и 511,20149,10 нг/г. При сравнении этих показателей с контрольными значениями, т.е. у незаражен-ных мышей, можно заключить, что на все периоды исследований в первом случае в основном они были ниже (таблица 2 2.3 2 2.)

Содержание албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках мышей на различных стадиях развития Т. рзеийозрЬаНя по сравнению с незараженными животными при введении водной суспензии албендазола в дозе ЗОмг/кг

Стадия развития личинок;орган Концентрация албендазола и албендазола сульфоксида (нг/г)

Время отбора проб (часы)

3 | 6 | 24

заражение Т. рве^озрЬаШ

Кишечная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 1171,49±57,1б 200,76±36,19 5341,91±916,87 769,691174,92 790,73+149,92 2957,07±366,55 2275,22±36,30 511,20±49,10 144,07127,35 3068,021158,73 1873,75+38,76

Миграционная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 858,69+209,35 373,29+43,78 1057,54+37,48 568,72+53,63 1165,62+215,73 2779,86+40,84 2038,94+46,86 122,18115,46 466,02±214,39 1087,б8±57,42 1556,661287,32

Мышечная стадия Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 1802,791549,44 6679,741472,82 691,48137,86 519,77±26,52 3327,761358,72 449,48±165,64 386,02+37,82 1071,0б±247,87 1784,791128,56

без заражения

Печень албендазол албендазол сульфоксид Почки албендазол албендазол сульфоксид 2100,771675,41 261б,69±380,95 7678,321254,78 1562,90±163,51 2015,76±156,70 5710,12±934,90 1761,501215,46 469,73193,40 976,361246,82 791,35157,46 1205,351107,85

* не обнаружено

Обратимся к результатам определения концентрации албендазола сульфоксида в печени мышей этой группы Во все периоды отбора проб для анализа уровень продукта был ниже по сравнению с животными в контроле 200,76136,19; 790,73±149,92 и 144,07±27,35 нг/г в сравнении с соответствующими контрольными значениями 2616,69±380,95; 2015,761156,70 и 976,1б±246,82

На миграционной стадии развития Т р$еи<1о$р1гаи5 концентрация албендазола в печени мышей равнялась через 3; 6 и 24 часа соответственно 858,691209,35; 568,72±53,63 и 122,18115,46 нг/г против 2100,771675,41; 1562,901163,51 и 469,73193,40 нг/г в контроле Сопоставление приведенных данных вновь свидетельствует о более низких концентрациях неизмененного препарата у зараженных мышей. Аналогичным образом можно отметить и более низкие концентрации албендазола сульфоксида в печени мышей, которые были экспериментально заражены Т /меис/о5ртга/и. Через 3; 6 и 24 часа эти

значения достигали 373,29±43,78; 1165,62±215,73 и 466,02+214,39 нг/г соответственно против контрольных значений 2616,69±380,95; 2015,761156,70 и 976,16±246,82 нг/г Максимальный уровень продукта отмечали через 6 часов после введения препарата в отличие от 3 часов у контрольных мышей.

На миграционной стадии развития Т pseudospiralis у зараженных мышей можно отметить более низкие значения уровня самого албендазола в почках по сравнению с условно здоровыми мышами Иначе складывается ситуация в отношении албендазола сульфоксида Уровень этого продукта был сравним с таковым у незараженных мышей (2038,94146,86; 1556,661287,32 и 1761,501215,46, 1205,351107,85 нг/г).

Наконец, проанализируем данные по динамике содержания албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках мышей на мышечной стадии развития Т pseudospiralis. Концентрация неизмененного албендазола в целом была ниже в обоих органах, подвергшихся анализу, по сравнению с контрольными мышами Но, пожалуй, наиболее примечательным в данном случае является то, что через 3 часа после введения препарата албендазол сульфоксид не обнаруживали в печени. Спустя 6 часов в печени инвазированных мышей продукт детектировали (519,77126,52 нг/г), в почках, как и через 3 часа, он не был обнаружен, в то время как у контрольных животных его содержание было на уровне 1761,501215,46 нг/г.

Таким образом, основываясь на более низкой концентрации албендазола в печени и почках у зараженных Т spiralis и Т pseudospiralis мышей, можно сделать вывод о более низкой биодоступности препарата по сравнению с незара-женными мышами Оба вида трихинелл оказывали ингибирующее действие на сульфоокисление албендазола, т.е. его превращение в сульфоксид Данные эффекты проявлялись на всех стадиях развития личинок, но были сильнее выражены на миграционной и мышечной. В целом Т pseudospiralis оказывали более сильное воздействие на указанные процессы по сравнению с Т spiralis.

Отсутствие существенного потенцирования антимитотического действия албендазола у зараженных трихинеллами мышей (раздел 2 2 2.2.) мы связываем со снижением биодоступности препарата и его превращения в активный метаболит, те сульфоксид

2.2.4. Токсические свойства микрокапсулированного албендазола

Продолжением работы было исследование токсических свойств перспективной лекарственной формы албендазола в микрокапсулах. Ранее изучение токсических свойств микрокапсулированного албендазола носило более ограниченный характер (В А.Рябова, 2000; неопубликованные данные) по сравнению с постановкой наших опытов.

2.2.4.1. Острая токсичность

Для оценки опасности микрокапсулированного албендазола провели опыт по установлению параметров острого токсического препарата при введении в желудок

Все тестированные дозы, включая и самую высокую, т.е. 1200 мг/кг, не приводили к гибели животных. Более того, у мышей не проявлялись какие-либо признаки интоксикации

Между тем, дальнейшее увеличение доз было не выполнимым, поскольку верхняя доза 1200 мг/кг была максимально возможной для перорального введения мышам Значение 1ЛЭ5о будет превышать 1200 мг/кг

Исходя из этого, микрокапсулированный албендазол можно отнести к умеренно опасным веществам (3 класс опасности, ГОСТ 12.1 2007-76). 2.2.4.2. Подострая токсичность

Препарат вводили ежедневно в течение 10 суток в трех дозах, составляющих 1/10,1/100 и 1/1000 от максимально возможной для перорального введения дозы, т.е. 1200 мг/кг (соответственно 120; 12 и 1,2 мг/кг)

Введение препарата на протяжении всего опытного периода не привело к появлению каких-либо признаков интоксикации.

При введении микрокапсулированного албендазола в двух самых верхних дозах динамика прироста массы тела несколько замедлялась по сравнению с контрольными мышами. Так, в конце опытного периода прирост массы тела у мышей, получавших препарат в дозах 120; 12 и 1,2 мг/кг, соответственно составил 111,96,113,59 и 124,91% против контрольного значения 120,87%.

Многократное воздействие микрокапсулированного албендазола оценивалось по гематологическим показателям

В результате было установлено, что введение микрокапсулированного албендазола в трех тестированных дозах, включая и самую верхнюю дозу, а именно 120 мг/кг не привело к статистически значимому изменению ряда информативных показателей периферической крови мышей.

Анализ лейкоцитарной формулы показал, что достоверное влияние на показатели лейкограммы микрокапсулированный албендазол оказывал в дозах 120 и 12 мг/кг. Так, было зарегистрировано увеличение (р < 0,05) относительного количества сегментоядерных нейтрофилов для доз 120 и 12 мг/кг соответственно - 62,40±4,22 и 62,40+5,18%, против 40,80±8,25% в контроле. Кроме того, уменьшилась доля лимфоцитов - 27,80±6,14 (120 мг/кг) и 29,60±5,38 (12 мг/кг) против контрольного значения 47,4±6,53% (р < 0,05)

Кроме того, при введении албендазола в микрокапсулах в дозах 120 и 12 мг/кг увеличилось процентное содержание моноцитов в лейкоцитарной формуле; количество данных клеток составило 4,80±1,15 (р < 0,05) и 3,40±0,77 (р 5 0,05) для доз 120 и 12 мг/кг против 1,20±0,19% в контроле,

Микрокапсулированный албендазол в дозе 1,2 мг/кг не оказал влияния на лейкоцитарную формулу крови.

Наконец, действие микрокапсулированного албендазола в различных дозах при многократном введении оценивали по ряду биохимических показателей сыворотки крови мышей.

При анализе полученных данных можно сделать очевидный вывод о том, что достоверные изменения, причем, всех тестированных показателей, имели место только при введении микрокапсул в самой верхней дозе, те 120 мг/кг

Так, например, активность аланинамино- и аспартаминотрансферазы повысилась до 44,19±0,60 и 46,37±1,10 Е/л против соответствующих значений 37,53±1,14 и 39,80±0,94 Е/л в контроле (р < 0,05), Если к этому добавить достоверное увеличение уровня билирубина в сыворотке крови (3,55±0,41 против

1,0810,61 ммоль/л в контроле), то можно придти к справедливому заключению о том, что албендазол в исследуемой лекарственной форме в дозе 120 мг/кг оказывает отрицательное влияние на функцию печени.

Кроме того, повышение концентрации креатинина и мочевины в сыворотке крови соответственно до 102,7011,13 и 5,2010,03 в сравнении с контрольными значениями соответственно 87,4712,43 мкмоль/л и 4,5910,15 моль/л (в обоих случаях р < 0,05) позволяет сделать вывод о нарушении функции почек

Албендазол в двух нижних дозах, т.е. 12 и 1,2 мг/кг, не привел к изменению биохимических показателей

Суммируя полученные результаты по оценке подострой токсичности микрокапсул с албендазолом, считаем возможным сделать следующие выводы

- доза препарата 120 мг/кг при введении мышам в течение 10 суток является токсической (снижение прироста массы тела, изменение лейкоцитарной формулы, изменение биохимических показателей, свидетельствующих о нарушении функции печени и почек),

- доза препарата 12 мг/кг при введении мышам в течение 10 суток является пороговой (снижение прироста массы тела и изменение лейкоцитарной формулы);

- доза 1,2 мг/кг является недействующей (отсутствие статистически значимых изменений в динамике прироста массы тела, гематологических и биохимических показателей)

2.2.4.3. Антимшпотическое действие микрокапсулированного албендазола Еще одним фрагментом работы по оценке токсических свойств микрокапсулированного албендазола было исследование действия препарата в данной лекарственной форме на митоз клеток.

Микрокапсулированный албендазол вводили на оливковом масле, исходя из этого, в качестве контроля использовали албендазол, суспендированный в оливковом масле. Доза албендазола в микрокапсулах и в виде масляной суспензии составила 30 мг/кг (по ДВ)

Результаты опыта по оценке влияния албендазола в микрокапсулах на митоз соматических клеток приведены в таблице 2 2 4 3.

При анализе данных, приведенных в таблице 2 2.4 3 , можно сделать следующие интересные заключения. При введении микрокапсулированного препарата повышение митотического индекса наблюдали практически на все тестируемые интервалы времени Так, значения данного показателя через 3, 6,24 и 48 часов после введения препарата составили соответственно 1,1410,11, 1,0810,09; 0,9710,10 и 1,2110,11 против 0,6710,09% в контроле Одновременно в эти же периоды времени достоверно повышалось процентное содержание ме-тафаз (соответственно 79,7815,24, 85,5913,33, 81,9314,22 и 80,0013,65%) со снижением других стадий митоза

При введении масляной суспензии албендазола достоверное изменение митотического индекса имело место только через 3 часа после введения препарата На данный интервал времени значение митотического индекса повысилось до 0,9810,10 против 0,6610,09% в контрольной популяции клеток костного мозга (р < 0,05). В остальные периоды исследований, т е. спустя 6, 24; 48 и 72 часа после воздействия препарата данный показатель не претерпевал достоверных изменений по сравнению с контролем

Влияние микрокапсулированного албендазола и суспензии албендазола на оливковом масле (в дозе 30 мг/кг по ДВ) на митоз клеток костного мозга мышей __ (п = 6;р ¿0,05)_

Интервал времени после введения (часы) Митотический индекс (%) Количество отдельных стадий митоза (%)

профазы метафазы анафазы телофазы

Микрокапсулированный албендазол

3 1,14±0,11* 10,1113,96 79,7815,24* 3,1712,21 6,9413,41

6 1,0810,09* 9,9112,84 85,5913,33* 0,90Ю,89* 3,6011,77*

24 0,97±0,10* 12,0513,57 81,9314,22* 2,4111,68 3,6112,05*

48 1,2110,11* 11,6712,93 80,0013,65* 3,3311,64 5,0011,99*

72 0,8510,09 5,7113,92 85,7215,91* 5,7113,92 2,8612,82*

контроль 0,6710,09 15,4413,04 63,0914,09 7,3812,20 14,0912,93

Масляная суспензия албендазола

3 0,9810,10* 8,7513,16 82,5014,25* 3,7512,12 5,0012,44

6 0,7910,10 14,0614,35 79,6915,03 1,5611,55 4,6912,64

24 0,8410,10 9,09112,52 69,7015,66 3,0312,11 18,1814,75

48 0,8910,10 3,9512,23 72,3715,13 2,6311,84 21,0514,68

72 0,6910,11 2,0812,06* 75,0016,25 4,1712,89 18,7515,63

контроль 0,6610,09 12,1613,80 66,2215,50 8,1113,17 13,5113,97

'р й 0,05 (различие по данному показателю статистически достоверно между опытной и контрольной группами)

При сопоставлении данных по влиянию албендазола в микрокапсулах и в виде масляной суспензии на клеточное деление можно с очевидностью констатировать следующее Микрокапсулированный албендазол приводил к стойкому изменению митотического индекса в популяции клеток костного мозга в течение довольно продолжительного периода времени По сути дела, из пяти выбранных интервалов времени в четырех случаях (3; 6; 24; и 48 часов) можно было отметить достоверное повышение митотического индекса с одновременным увеличением процентного содержания метафаз (таблица 2.2.4.3.). В отличие от этого введение албендазола в форме масляной суспензии приводило к достоверному увеличению митотического индекса только на период 3 часа Отмеченное позволяет заключить, что при формуляции албендазола в виде микрокапсул он проявляет существенно более выраженное антимитотическое действие по сравнению с масляной суспензией препарата

2.2.4.4. Особенности биодоступности и метаболизма албендазола в печени при его введении в виде микрокапсул

Для более полной характеристики препарата мы исследовали особенности биодоступности и метаболизма албендазола при его включении в микрокапсулы

Результаты определения албендазола и его метаболита в печени мышей после введения микрокапсулированного препарата и суспензии на оливковом масле приведены в таблице 2 2.4 4

Содержание албендазола и албендазола сульфоксида в печени мышей после введения

микрокапсулированного албендазола и суспензии на оливковом масле _в дозе 30 мг/кг (п = 3)_

Орган Концентрация албендазола и албендазола сульфоксида (нг/г)

Время отбора проб (часы)

3 I 6 | 24 | 48

микрокапсулы

Печень албендазол албендазол сульфок-сид 2108,бЗ±61,86 1508,19±36,47 133б,44±105,82 1970,60±256,13 393,40±17,27 804,95136,72 137,47±18,48 597,24142,44

суспензия на оливковом масле

Печень албендазол албендазол сульфок-сид 1908,94±136,85 1234,40±30,76 1176,381367,11 762,48±57,46 252,11±1,53 35,46±8,76 -

Приводим комментарий к полученным данным

После введения микрокапсул во все выбранные интервалы времени мы обнаружили в печени довольно высокую концентрацию албендазола в пределах от 2108,63±61,86 до 137,47±18,48 нг/г. Максимальный уровень был детектирован через 3 часа после применения препарата; однако албендазол сохранялся в печени и через 48 часов. В отличие от неизмененного албендазола уровень его метаболита, албендазола сульфоксида, увеличивался к 6 часам с последующим уменьшением к 48 часам после введения микрокапсул.

Обратимся к аналогичным данным по динамике изменения содержания албендазола и его основного метаболита после введения в виде суспензии на оливковом масле.

Через 3 часа после введения масляной суспензии препарата можно было отметить максимальное содержание албендазола; в последующие периоды проведения анализа, т.е на 6 и 24 часа, его уровень составил соответственно 1176,38±367,11 и 252,11±1,53; в то время как спустя 48 часов албендазол не был обнаружен. Максимальная концентрация продукта сульфоокисления албендазола отмечалась через 3 часа после введения препарата и, по сути дела, совпадала с таковой для неизмененного албендазола; затем его уровень уменьшался и через 48 часов результаты определения албендазола сульфоксида были отрицательными.

При сравнении данных по содержанию албендазола и его метаболита в печени мышей после введения препарата в виде микрокапсул и масляной суспензии можно сделать очевидный вывод о более длительном сохранении в первом случае указанных продуктов. Также можно выявить корреляцию этих данных с результатами оценки двух препаративных форм на антимитотическое действие (раздел 2 2 4 3.). Действие албендазола на митоз в случае микрокапсул также проявлялось в течение большего периода времени по сравнению с введением препарата в виде масляной суспензии

Возможно, выявленное и объясняет необычно высокую эффективность микрокапсулированного албендазола при альвеококкозе и эхинококкозе в отличие от традиционных лекарственных форм на его основе

Выводы

1 Влияние A tetraptera на митоз соматических клеток у хозяина зависело от интенсивности заражения При высокой интенсивности инвазии (90 и 210 экземпляров/животное) аспикулурисы оказывали антимитотическое действие на клетки костного мозга у мышей.

2. При введении албендазола мышам, зараженным A. tetraptera, в дозе 5 мг/кг антимитотическое действие препарата усиливалось, в дозе 10 мг/кг оставалось без существенных изменений

3. Т spiralis и Т pseudospiralis при экспериментальном заражении мышей приводили к нарушению клеточного деления у хозяина, останавливая его на стадии метафазы, с сопутствующим увеличением митотического индекса. Личинки Т pseudospiralis проявляли более выраженное действие по сравнению с Т spiralis

4. Антимитотическое действие Т spiralis проявлялось на кишечной стадии развития личинок (митотический индекс 0,87±0,09% против 0,47±0,08% в контроле) Т. pseudospiralis проявляли данный эффект на всех стадиях развития (митотический индекс 1,04±0,11; 1,13±0,12 и 1,19±0,10 соответственно на кишечной, миграционной и мышечной стадиях против 0,47±0,08% в контроле)

5 Действие Т spiralis на митоз у мышей зависело от дозы заражения. При дозе заражения 10 и 60 личинок/животное митотический индекс равнялся соответственно 0,4110,09 и 1,19±0,10 против 0,47±0,08% в контроле.

6 Введение албендазола зараженным Т spiralis и Т pseudospiralis мышам в целом не приводило к усилению антимитотического действия препарата, за исключением мышечной стадии развития Т spiralis. Выявлены особенности данного эффекта препарата в зависимости от вида и стадии развития трихинелл

7. Установлены более низкие концентрации албендазола и его метаболита в печени и почках мышей, зараженных A tetraptera, по сравнению с животными, не подвергшимися инвазии

8 Биодоступность албендазола в печени и почках мышей, инвазированных Т spiralis и Т pseudospiralis, была ниже по сравнению с незараженными животными Оба вида трихинелл оказывали ингибирующее влияние на превращение албендазола в его сульфоксид. Данные эффекты проявлялись на всех стадиях развития личинок, но были сильнее выражены на миграционной и мышечной

9 LD50 микрокапсулированного албендазола для белых мышей превышает 1200 мг/кг (3 класс опасности по ГОСТ 12 1.2007-76).

10. С учетом оценки общего состояния и поведения животных, динамики прироста массы тела, а также определения гематологических и биохимических показателей доза микрокапсулированного албендазола 120 мг/кг определена как токсическая, доза 12 мг/кг — как пороговая и доза 1,2 мг/кг — как недействующая при пероральном введении мышам в течение 10 суток.

11. Микрокапсулированный албендазол в дозе 30 мг/кг проявлял более выраженное антимитотическое действие, и его биодоступность в печени мышей была выше по сравнению с введением препарата в виде масляной суспензии в аналогичной дозе

Практические предложения

• «Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и его метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения жидкостной хроматографией высокого давления» можно использовать для определения микроколичеств албендазола, изучения фармакокинетики препарата и других научных и практических целей

• Данные по оценке токсических свойств микрокапсулированного албендазола рекомендуется использовать в материалах для регистрации препарата в качестве антгельминтика

• Установленные данные по влиянию трихинелл на митоз у хозяина, биодоступность и метаболизм албендазола следует учитывать при оценке клинических последствий трихинеллеза и установлении рациональных схем лечения.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Хромова С.Н Изучение острой токсичности микрокапсулированного албендазола //Материалы докладов науч. конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» М., 2006,-вып 7 -С 431-432

2. Хромова С.Н. Влияние инвазии Aspiculuns tetraptera на митоз клеток костного мозга мышей и проявление антимитотического действия албендазола //Материалы докладов науч. конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М, 2006, - вып 7 - С. 432-433

3. Хромова С Н. Влияние Trichmella spiralis на митоз у мышей //Материалы докладов науч конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» М.,2006,-вып 7 - С 433-435.

4. Максименко С.Н Влияние инвазии Trichmella spiralis и Trichmella pseu-dospiralis на митоз клеток костного мозга у мышей и проявление антимитотического действия албендазола //Труды Всерос ин-та гельминтологии им К И.Скрябина, т. 43. - 2007. - С. 186-175

5 Максименко С.Н Изучение подострой токсичности микрокапсулированного албендазола //Материалы докладов науч конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2007, - вып. 8 - С. 190-192.

6 Максименко С.Н. Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения методом жидкостной хроматографии высокого давления //Труды Всерос ин-та гельминтологии им К И.Скрябина, т. 45. - 2007. - С. 311-318.

Отпечатано в ООО «Компания Спутник+» ПД № 1-00007 от 25.09.2000 г. Подписано в печать 19.05.08. Тираж 80 экз. Уел п.л 1,56 Печать авторефератов (495) 730-47-74,778-45-60

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Максименко, Светлана Николаевна

1. Обзор литературы.

1.1. Токсические свойства производных бензимидазолкарбаматов.

1.2. Фармакокинетика и метаболизм препаратов, производных бензимидазолкарбаматов.

1.3. Некоторые аспекты влияния паразитов на организм хозяина.

1.3.1. Краткая характеристика биологии развития Trichinella spiralis и Т. pseudospiralis и реакций у хозяина.

1.3.2. Цитогенетическое действие паразитов на геном у хозяина.

2. Собственные исследования.

2.1. Материалы и методы.

2.1.1. Опыты по оценке влияния заражения мышей культурами A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз и проявление антимитотического действия албендазола у хозяина.

2.1.1.1. Схема опытов на мышах, зараженных A tetraptera.

2.1.1.2. Схема опытов на мышах, зараженных Т. spiralis.

2.1.1.3. Схема опытов на мышах, зараженных Т. pseudospiralis

2.1.2. Опыты по оценке влияния заражения A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis на биодоступность и метаболизм албендазола.

2.1.3. Оценка токсических свойств микрокапсулированного албендазола.

2.1.3.1. Острая токсичность.

2.1.3.2. Подострая тосичность.

2.1.3.3. Антимитотическое действие.

2.1.3.4. Особенности биодоступности и метаболизма албендазола в печени при введении в виде микрокапсул.

2.1.4. Статистическая обработка.

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Влияние инвазии A.tetraptera на митоз клеток костного мозга у мышей и проявление антимитотического действия албендазола.

2.2.1.1. Влияние инвазии A. tetraptera на митоз клеток костного мозга у хозяина.

2.2.1.2. Влияние албендазола в дозе 5 мг/кг на митоти-ческую активность клеток костного мозга у незараженных мышей.

2.2.1.3. Влияние инвазии A. tetraptera и албендазола в дозе

5 мг/кг на митотическую активность клеток костного мозга мышей.

2.2.1.4. Влияние албендазола в дозе 10 мг/кг на митотическую активность клеток костного мозга у незараженных мышей.

2.2.1.5. Влияние инвазии A tetraptera и албендазола в дозе 10 мг/кг на митотическую активность клеток костного мозга мышей.

2.2.2. Влияние инвазии Trichinella spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга у мышей и проявление антимитотического действия албендазола.

2.2.2.1. Влияние инвазии Trichinella spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга у мышей.

2.2.2.2. Влияние инвазии Т. spiralis и Т. pseudospiralis на проявление антимитотического действия албендазола.

2.2.3. Особенности биодоступности и метаболизма албендазола у мышей, зараженных A. tetraptera, Т. spiralis и

Т. pseudospiralis.

2.2.3.1. Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения методом ЖХВД.

2.2.3.2. Динамика содержания албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках у незараженных мышей.

2.2.3.3. Динамика содержания албендазола и албендазола сульфоксида в печени и почках у мышей, зараженных Л. tetraptera

2.2.3.4. Динамика накопления, распределения и метаболизма албендазола у мышей, зараженных Т. spiralis и Т. pseudospiralis, по сравнению с незараженными животными.

2.2.4. Токсические свойства микрокапсулированного албендазола.

2.2.4.1. Острая токсичность.

2.2.4.2. Подострая токсичность.

2.2.4.3. Антимитотическое действие микрокапсулированного албендазола.

2.2.4.4. Особенности накопления и метаболизма албендазола в печени при его введении в виде микрокапсул.

Обсуждение.

Выводы.

Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных"

Актуальность проблемы. Токсические свойства химиотерапевтических средств, в том числе антгельминтиков, оцениваются в эксперименте на здоровых животных. Правильность такой постановки исследований традицион-на и по существу не вызывает сомнений.

В то же время возбудители практически всех паразитарных заболеваний индуцируют различные морфологические и функциональные изменения во многих органах и системах организма хозяина. В результате токсические эффекты противопаразитарных препаратов и их поведение в организме зараг женных животных могут подвергаться значительной модификации по сравнению со здоровыми. Особое значение в данном случае приобретает ситуация, когда токсические свойства препарата на фоне инвазии усиливаются. Получение подобных сведений не только расширит имеющуюся информацию о том или ином лекарственном средстве, но и позволит прогнозировать и предупреждать возможные отрицательные эффекты при лечении человека и животных.

Среди токсикологических характеристик препаратов и различных факторов биологической природы особое значение придается их влиянию на клеточное деление и генетический аппарат. Хорошо известно, что антгель-минтики, производные бензимидазолкарбаматов, в частности, албендазол (Р. Delatour, J. Richard, 1976; Л.А. Лаптева, 1988; С.И. Чукина, 1990; Т.С. Новик, 1992), обладают выраженным антимитотическим действием, т.е. нарушают митоз. Продукты обменных процессов гельминтов, помимо всего прочего, способны вызывать нарушения генома у хозяина (Вл.Я. Бекиш, О.-Я.Л. Бе-киш, 2004). В подобной ситуации вполне логично задаться вопросом об общем эффекте антгельминтика и инвазии на митотическое деление клеток у зараженных животных и вытекающих отсюда последствиях.

В отношении албендазола такой вопрос приобретает особую остроту с учетом его интенсивной биотрансформации в организме человека и животных с образованием целого ряда метаболитов. Среди них продукт сульфоокисления албендазола, т.е. его сульфоксид, имеет особое значение, именно он ответственен за антгельминтное действие и токсические эффекты препарата. В этой связи интересно оценить реальное влияние инвазии на метаболизм албендазола и, в частности, его превращение в сульфоксид; изменение этих процессов может привести к модификации токсических свойств и терапевтической эффективности препарата.

Применение албендазола в качестве основного препарата для экспериментов побудило нас провести также исследования несколько иного рода. Этот препарат является действующим веществом перспективной микрокап-сулированной формы, разработанной в ВИГИСе. Установлена его высокая терапевтическая эффективность при альвеолярном и цистном гидатидозе, а также трихинеллезе на лабораторных животных (Ф.П. Коваленко, 1998; 2000). Исходя из этого, в задачи наших исследований входила оценка некоторых токсических свойств препарата и выявление особенностей биодоступности и метаболизма действующего вещества.

Цель исследований и задачи. Целью настоящей работы была оценка влияния инвазии (на примере A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis) на проявление антимитотического действия албендазола и его биодоступность, а также оценка некоторых токсических свойств микрокапсулированного албендазола.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решение следующих подчиненных задач:

1. Оценка воздействия экспериментального заражения A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга хозяина.

2. Оценка воздействия различных доз албендазола на митоз клеток костного мозга у мышей.

3. Оценка антимитотического действия албендазола на фоне заражения A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis.

4. Изучение особенностей биодоступности и метаболизма албендазола в органах мышей, зараженных^, tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis.

5. Оценка острой токсичности микрокапсулированного албендазола.

6. Изучение подострой токсичности микрокапсулированного албендазола.

7. Оценка антимитотического действия албендазола в микрокапсулах.

8. Изучение динамики содержания и метаболизма албендазола после введения микрокапсулированного препарата.

Научная новизна.

• Впервые оценено влияние инвазий A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз клеток костного мозга и проявление антимитотического действия албендазола у зараженных животных.

• Изучены особенности содержания и метаболизма албендазола у животных на фоне инвазий A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis.

• Проведена токсикологическая оценка микрокапсулированного албендазола.

Практическая значимость.

Подготовлены «Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения методом жидкостной хроматографии высокого давления» (одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» РАСХН 01.03.2007 г.).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом трехлетних научных исследований автора. Исследования по изучению влияния A. tetraptera, Т. spiralis и Т. pseudospiralis на митоз у хозяина, особенностей всасывания, распределения и метаболизма албендазола, а также проявление его антимитотического действия у зараженных мышей и оценка токсических свойств микрокапсулированного албендазола выполнены аспиранткой лично.

Работы выполнялись под научным руководством доктора биологических наук, профессора Т.С. Новик, которая оказывала научно-методическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Влияние возбудителей аспикулуроза и трихинеллеза на деление соматических клеток костного мозга у хозяина.

• Антимитотическое действие албендазола у незараженных и зараженных аспикулурисами и трихинеллами мышей.

• Особенности накопления и биотрансформации албендазола в органах у мышей, больных аспикулурозом и трихинеллезом.

• Изучение токсических свойств микрокапсулированного албендазола.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных статей, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемой проблеме, в том числе, две статьи в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах компьютерного текста. Список использованной литературы включает 232 источника, в том числе 122 отечественных и 110 иностранных. Работа иллюстрирована 27 таблицами и 35 рисунками.

1. Обзор литературы

Приводим анализ литературных данных, имеющих непосредственное отношение к вопросам наших собственных исследований. Среди них можно выделить информацию, касающуюся токсикологии и фармакокинетики препаратов из группы бензимидазолкарбаматов, поскольку наши основные усилия были связаны с ярким представителем данных биологически активных соединений — албендазолом.

Кроме того, оценивалось влияние экспериментальной инвазии на проявление антимитотического действия албендазола, при этом в наших исследованиях выделился очень интересный фрагмент работы, касающийся воздействия самих гельминтов на клеточное деление. Исходя из этого, нам представлялось необходимым по возможности обобщить литературные данные по цитогенетическому действию различных патогенных организмов и паразитов у хозяина.

Заключение Диссертация по теме "Паразитология", Максименко, Светлана Николаевна

выводы

1. Влияние A. tetraptera на митоз соматических клеток у хозяина зависело от интенсивности заражения. При высокой интенсивности инвазии (90 и 210 экземпляров/животное) аспикулурисы оказывали антимитотическое действие на клетки костного мозга у мышей.

3. Т. spiralis и Т. pseudospiralis при экспериментальном заражении мышей приводили к нарушению клеточного деления у хозяина, останавливая его на стадии метафазы, с сопутствующим увеличением митотического индекса. Личинки Т. pseudospiralis оказывали более выраженное действие по сравнению с Т. spiralis.

4. Антимитотическое действие Т. spiralis проявлялось на кишечной стадии развития личинок (митотический индекс 0,87±0,09% против 0,47±0,08% в контроле). Т. pseudospiralis проявляли данный эффект на всех стадиях развития (митотический индекс 1,04±0,11; 1,13±0,12 и 1,05±0,11 против 0,47±0,08% в контроле).

5. Действие Т. spiralis на митоз у мышей зависело от дозы заражения. При дозе заражения 10 и 60 личинок/животное митотический индекс равнялся соответственно 0,41 ±0,09 и 1,19±0,10 против 0,47±0,08% в контроле.

6. Введение албендазола зараженным Т. spiralis и Т. pseudospiralis мышам в целом не приводило к усилению антимитотического действия препарата, за исключением мышечной стадии развития Т. spiralis. Выявлены особенности данного эффекта препарата в зависимости от вида и стадии развития трихинелл.

7. Установлены более низкие концентрации албендазола и его метаболита в печени и почках мышей, зараженных A. tetraptera, по сравнению с животными, не подвергшимися инвазии.

8. Биодоступность албендазола в печени и почках мышей, инвазирован-ных Т. spiralis и Т. pseudospiralis, была ниже по сравнению с незараженными животными. Оба вида трихинелл оказывали ингибирующее влияние на превращение албендазола в его сульфоксид. Данные эффекты проявлялись на всех стадиях развития личинок, но были сильнее выражены на миграционной и мышечной.

9. LD50 микрокапсулированного албендазола для белых мышей превышает 1200 мг/кг (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.2007-76).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

• Разработанные «Методические указания по определению остаточных количеств албендазола и его метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения жидкостной хроматографией высокого давления» можно использовать для определения остаточных количеств албендазола, изучения фармакокинетики препарата и других научных и практических целей.

• Данные по оценке токсических свойств микрокапсулированного албендазола рекомендуется использовать в материалах для регистрации препарата в качестве антгельминтика.

Благодарности. Автор выражает глубокую и искреннюю благодарность сотрудникам ФГОУ ВПО Московского государственного университета им. М.В.Ломоносова науч. сотр. А.А.Бендрышеву и ст. науч. сотр., к.б.н. Н.А.Смоленкову за помощь в подготовке методических указаний и проведении исследований по определению микроколичеств албендазола и метаболита албендазола сульфоксида в пробах животного происхождения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата ветеринарных наук, Максименко, Светлана Николаевна, Москва

1. Алов И.А. Патология митоза (Формы патологии, классификация, количественная характеристика) //Вестник Академии мед. наук СССР. — 1965.-№ 11. С.58-65.

2. Баринский И.Ф., Дементьев И.В., Вашкова В.В. Повреждения хромосом при некоторых вирусных инфекциях //Вопросы вирусологии. 1968.- № 2. С. 131-141.

3. Бекиш Вл.Я. Изменение активности сперматогенеза у мышей линии СВА при экспериментальных гельминтозах //Фунд. науки и достижения клин, медицины и фармации (Тез. докл. 57-ой науч. сессии ВГМУ).- Витебск, 2002. С. 5-6.

4. Бекиш Вл.Я. Мигрирующие личинки аскарид и их метаболиты как мутагены //Сб. науч. тр. IV съезда врачей-инфекционистов РБ. Витебск, 1997. - С.21-22.

5. Бекиш Вл.Я. Мутагенное воздействие мигрирующих личинок аскарид на геном хозяина //Мат. Конф. «Вирусные инфекции на пороге XXI века; эпидемиология и профилактика». — СПБ, 1999. С. 276.

6. Бекиш Вл.Я. Нарушения в геноме хозяина при экспериментальном трихинеллезе //Эпидемиол., диагностика, лечение и профилактика паразит, забол. человека (Тр. III Международ, науч.-практич. конф.). — Витебск,2002. С. 68-75.

7. Бекиш Вл.Я. Нарушения в геноме хозяина при экспериментальном трихинеллезе и способы их коррекции //Фунд. науки и достижения клин, медицины фармации (Тез. докл. 58-ой науч. сессии ВГМУ). Витебск,2003.-С. 3-4.

8. Бекиш Вл.Я. Повреждения ДНК клеток костного мозга и семенников при экспериментальном гименолепидозе //Вестник ВГМУ. Том 3, № 3.- 2004. С. 22-26.

9. Бекиш Вл.Я. Характеристика хромосомного аппарата соматических клеток больных кишечным аскаридозом до и после дегельминтизации //Вопросы медицины и фармации (Тез. докл. 51-ой науч. конф. студентов и мол. ученых ВГМУ). Витебск, 1999. - С. 6-7.

10. Бекиш Вл.Я., Баньковский А.А. Влияние миграционного аскаридоза на микроядерный тест //Теоретич. и практ. аспекты медицины. (Сб. науч. трудов). Витебск, 1998. - С. 146-150.

11. Бекиш Вл.Я., Дурнев А.Д. Повреждения ДНК клеток костного мозга и семенников мышей при экспериментальном трихинеллезе //Бюллетень эксп. биологии и медицины. 2004. - Т. 138, № 9. - С. 320-323.

12. Бекиш Вл.Я., Колмлгоров В.И., Побряжин В.В. Микроядерный тест в клетках костного мозга и семенников мышей линии СВА при гельмин-тозах //Вестник ВГМУ. Том.2, №2. - 2003. - С.67-72.

13. Бекиш Вл.Я., Колмогоров В.И., Бекиш Л.Э. Влияние комбинированной терапии экспериментального токсокароза на состояние генома хозяина и свободнорадикальные процессы в семенниках //Вестник фармации. — 2003.-№3.-С. 45-51.

14. Бекиш Вл.Я., Колмогоров В.И., Побряжин В.В. Микроядерный тест в клетках костного мозга и семенников мышей линии СВА при гельмин-тозах //Вестник ВГМУ. Том. 2, № 2. - 2003. - С. 67-72.

15. Бекиш О.-Я.Л. Влияние трихинеллезной инвазии на обмен аскорбиновой кислоты //Здравоохранение Белоруссии. 1972. - № 3. - С. 81-82.

16. Бекиш О.-Я.Л., Бекиш Вл.Я. Аскариды и их метаболиты как мутагены //Достижения медицинской науки Беларуси (Ежегодник). 1999. - Мн.: БелЦНМИ. - Вып. IV. - С. 94-95.

17. Бекиш О.-Я.Л., Бекиш Вл.Я. Эндокринный гомеостаз при трихинеллезе //8-я Всерос. конф. по трихинеллезу: тез. докл. М., 2000. — С. 22-32.

18. Бекиш О.-Я.Л., Калинин Л.В. Действие трихинелл езной инвазии и метаболитов трихинелл на хромосомный аппарат соматических клеток человека //«Гельминтозоонозы — меры борьбы и профилактика» (Матер, докл. науч. конф.). -М.: 1994.-С. 14-16.

19. Бекиш О.-Я.Л., Калинин Л.В., Степанов А.В. Мутагенное влияние нематод //Проблемы изучения, сохранения и использования биологического разнообразия животного мира. (Тез. Докл. VII Зоол. Конф.). Мн.: 1994. -С. 194.

20. Бекиш О.-Я.Л., Степанов А.В. Цитогенетическое исследование клеток красного костного мозга белых мышей, инвазированных Trichocephalus muris //Сб. Роль наследств, факторов в патогенезе забол. Человека. Витебск, 1992. - С. 95-93.

21. Бекиш О.-Я.Л., Федосов В.Н. Роль простагландинов в системе паразит-хозяин при трихинеллезе //Физиол. и биохим. аспекты патол. процессов (матер, науч.конф.). Смоленск, 1990. - С.97-100.

22. Белоусова М.А. Влияние бенацила на организм овец //Бюлл. Всесоюз. ин-та гельминтологии. — 1981. Вып. 28. - С. 9-14.

23. Березанцев Ю.А. Тканевые реакции организма хозяина на паразити-рование в нем трихинелл на всех стадиях развития //Тр. 1 Ленингр. сан.-гиг. мед. ин-та и Ленингр. науч. общ-ва патологоанатомов. — 1963. — Т. 83.-С. 93-97.

24. Березанцев Ю.А. Трихинеллез. Л.: Медицина, 1974. — С. 160.

25. Березанцев Ю.А., Борщуков Д.В., Оксов И.В., Чеснокова М.В. Инкапсуляция личинок паразитических нематод и цестод в тканях позвоночных как форма взаимоотношений паразита и хозяина //Паразитол. сб.,Т. 36. -Л.: Наука, 1989.-С. 131-160.

26. Березанцев Ю.А., Борщуков Д.В., Чеснокова М.В. Экологические особенности взаимоотношений паразита и хозяина при тканевом паразитизме //Паразитоценология. Киев, 1985а. С. 56-64.

27. Березкина С.В. Изучение действия бенацила и БМК на качество яиц кур, их оплодотворяемость, выводимость цыплят и их жизнеспособность //Бюлл. ВИГИС., 1981. Вып. 30. - С. 5-9.

28. Березкина С.В. Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия бенацила и БМК у кур //Тез. докл. Всесоюзная учредительная конференция по токсикологии. — М.: 1980. — С. 119.

29. Блюмкин В.Н. Качественные изменения митотического режима клеточных культур, зараженных различными вирусами //Матер. XV всесоюзн. съезда эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов (Тез. докл.). — 1970.-Ч. 2.-С. 275-276.

30. Блюмкин В.Н., Жданов В.М., Шубладзе А.К., Петерсон О.П., Маевская Т.М., Козлова И.А., Мельникова JI.A., Кябуру А.Д., Хакимов А.А. Влияние некоторых вирусов на митотический режим клеточных культур //Матер, конф. по патологии клетки. 1967.

31. Блюмкин В.Н., Лебедева Г.А., Германов А.Б. Изменения митотического режима различных клеточных культур, зараженных штаммом УС sm ± вируса обычного герпеса //Вопр. мед. вирусологии. Общ. вирусология. М.: 1971.-Вып. 12.-С. 93-101.

32. Бритов В.А. Репродуктивная способность различных вариететов трихинелл //Профилактика заразных и незаразных заболеваний животных в Сибири. Омск, 1973. - С. 173-174.

33. Бурак И.И., Бекиш О.-Я.Л. Аллергические аспекты патогенеза трихинеллеза в зависимости от степени тяжести инвазии //Тезисы докл. 1-ой Белорусской иммунол. конф. — Витебск, 1982. — С. 62-63.

34. Вашкова В.В. Вирус как фактор, вызывающий перестройки хромосом в клетках культуры ткани эмбрионов человека //Генетика. — 1965. № 4. -С. 100-103.

35. Веселова Т.П. К токсикологии бенацила //Бюлл. ВИГИС. М., 1981, вып. 28.-С. 28-32.

36. Вишняускас А.Ю., Пакатурене Д.А., Бараускас К.Ю., Подопригора А. Ершов В.Е., Паршин В.А., Кессер B.C., Вишняускас А.А. Эффективность фазинекса при фасциолезе овец и крупного рогатого скота //Бюлл. ВИГИС.-М., 1986.-Вып. 46.-С. 8-12.

37. Гаджиев И.М. Влияние антгельминтиков ивермектина, албендазола и фенотиазина на эмбриогенез и генетические структуры животных //Автореф. канд. дисс. на соискание ученой степени канд. вет. наук, 1985.

38. Гаркави Б.Л. Биология Trichinella pseudospiralis Garkavi, 1972 //Восьмая Всероссийская конференция по трихинеллезу: тез. докл. М., 2000. - С. 22-32.

39. Гаркави Б.Л. Трихинелла от енота-полоскуна //Всесоюзн. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных: тез. докл. — Вильнюс, 1972. -С. 53-54.

40. Гаркави Б.Л. Трихинеллез, взываемый Trichinella pseudospiralis (Морфология и биология возбудителя, эпизоотология и эпидемиология, диагностика, меры борьбы и профилактика) //Росс, паразитол. Журнал. 2007. - № 2. — С. 35-116.

41. Гиновкер А.Г., Ильинских Н.Н., Шкурко И.И. Хромосомные нарушения и иммунореактивность золотистых хомячков, инвазированных Opisthor-his felineus //Паразитология. 1981. -№ 1. - С. 62-68.

42. Голубчик И.С., Якименко JI.H., Лазовская A.JI. Влияние туберкулина на митотический режим культуры клеток //Бюлл. Экспериментальной биологии и медицины. -М. 1972. Вып. 4. Т. LXXIII. - С. 105-107.

43. Гружинскас В.А. Влияние бенацила и тетрамизола на пре- и постна-тальное развитие организма //Ветеринария, 1984. № 11. - С. 61-62.

44. Гружинскас В.А. Влияние бенацила на течение суягности овец //Бюлл. Всес. ин-та гельминтол., 1983. — Вып. 33. С. 74.

45. Гружинскас В.А. Методика изучения эмбриотоксического и тератогенного действия антгельминтиков на овцах //Бюлл. Всес. ин-та гельминтол., 1981.-Вып. 29.-С. 85.

46. Дементьев И.В., Баринский И.Ф. Цитологическое исследование лимфоцитов крови при хронических формах вирусного гепатита //Генетика. — 1972.-Т. VIII, №5.

47. Демидов Н.В. Гельминтозы животных: Справочник. — М.: «Агропром-издат», 1987. С. 335.

48. Дорошина М.В. Первичная токсичность БМК //Бюллетень Всесоюз. ордена Труд. Красного Знамени института гельминтологии им. К.И.Скрябина. М., 1982, вып. 32. - С. 24-28.

49. Енгашев С.В. Разработка и внедрение новых лекарственных форм ветеринарных препаратов для борьбы с паразитарными болезнями //Авто-реф. докт. дисс. Саратов. - 2002.

50. Ильинских Н.Н. Влияние иммунизации живой вакциной против бруцеллеза на хромосомный аппарат лейкоцитов крови здоровых доноров //Цитология и генетика. 1974. - Т. VIII. - № 5. - С. 387-390.

51. Ильинских Н.Н. Популяционные исследования цитогенетической патологии в очагах описторхоза в условиях Обь-Иртышского бассейна //Комплекс, гигиен, исследования в практ. здравоохранения. — Новокузнецк, 1981.-С. 481-484.

52. Ильинских Н.Н. Проблема описторхоза на севере Тюменской области в связи с его влиянием на генетические структуры организма //Особенности патологии коренного и пришлого населения в условиях Крайнего Севера. Красноярск, 1981. - Т. 2. - С. 198.

53. Ильинских Н.Н. Хромосомные нарушения в лейкоцитах периферической крови больных скарлатиной //Цитология и генетика. 1973. - Т. VII. - № 4.

54. Ильинских Н.Н. Хромосомные нарушения и изменение митотического режима в клетках человека и животных под влиянием вакцинного штамма вируса кори (JI-16) //Цитология. 1975. - Т. XVII., № 2. - С. 131-136.

55. Ильинских Н.Н. Цитогенетические исследования лимфоцитов человека при кори и гриппе //Вопросы вирусологии. 1982. - № 2. - С. 81-86.

56. Ильинских Н.Н., Бочаров Е.Ф., Пятунина Н.В., Шашель Н.С. Хромосомные нарушения в лейкоцитах периферической крови больных гриппом //Генетика, 1972. Т. VIII, № 9. - С. 162.

57. Ильинских Н.Н., Ильинских И.Н. Хромосомные нарушения в лейкоцитах крови детей, больных корью и скарлатиной //Вопросы материнства и детства, 1973. № 11. - С. 85-86.

58. Ильинских Н.Н., Ильинских И.Н. Цитогенетические нарушения в лим-фоидных клетках и иммунореактивность организма человека и макак при воздействии вирусов //Журнал общей биологии, 1981. — Т. XLII, № 5.-С. 732-742.

59. Ильинских Н.Н., Ильинских И.Н., Шустров А.К. К вопросу о роли Toxoplasma Gondii в хромосомной патологии человека и животных //Паразитология. 1979. - Вып. 13, № 3. - С. 235-239.

60. Калинин JI.B. Влияние трихинеллезной инвазии и метаболитов трихинелл на хромосомный аппарат соматических клеток хозяина //Дисс. .канд. мед. наук: 03.00.19. Витебск, 1995.-С. 151.

61. Калинин JI.B. Характеристика кариотипа клеток костного мозга белых крыс при экспериментальном трихинеллезе //VI Науч. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных (Матер, докл.). — М.: 1992. — С. 86-87.

62. Калинин JI.B., Бекиш О.-Я.Л. Оценка мутагенной активности трихинеллезной инвазии с помощью цитогенетических тестов //Актуал. пробл. медицинской и ветеринарной паразитологии (Тез. докл. международной науч. конф.). Витебск, 1993. - С. 11-12.

63. Керкис Ю.Я., Ильинских Н.Н., Казначеев В.П., Пятунина Н.В., Баяндина Т.А., Бочаров Е.Ф. Влияние стрептолизина-0 на возникновение хромосомных аберраций в культуре эмбриональных фибробластов человека //Генетика. 1970. - Т. VI. - № 8. - С. 170-174.

64. Колдаева А.П., Ильинских Н.Н., Бочаров Е.Ф. Влияние вакцинации на хромосомный аппарат клеток костного мозга кроликов //Матер. XV Всесоюзн. съезда эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов (Тез. докл.) . Тбилиси, 1970. - Ч. II. - С. 162-163.

65. Колмогоров В.И. Микроядерный тест во время миграции личинок Тохо-cara canis у мышей линии СВА //Тканевые гельминтозы (Тр. науч.-практ. конф.). Витебск, 2000. - С. 148-152.

66. Колмогоров В.И., Бекиш Вл. Я. Влияние метаболитов личинок токсокар на показатели микроядерного теста в клетках семенников мышей линии СВА //Фунд. науки и достижения клин, медицины и фармации (Тез. докл. 57 Науч. сессии ВГМУ). Витебск, 2002. - С. 6-7.

67. Кротов А.И. Методы моделирования и экспериментальной терапии гельминтозов //Тр. Гельминтологической лаборатории — АН СССР, 1984, Т. 32, С. 48-68.

68. Крылов В.И., Кащуба Э.А., Орлов М.Д., Мананников В.П. Влияние опи-сторхозной инвазии на процессы свободнорадикального окисления, фосфолипазную и антиоксидантную активность крови у детей //Мед. па-разитол. и паразитар. болезни, 1983. — № 2. С. 29-32.

69. Кузьмин А.А. Антгельминтики в ветеринарной медицине //М.: «Аквариум ЛТД», К.: ФГУИППВ, 2004. С. 144.

70. Кукайн Р.А., Нагаева Л.И., Жилевич А.В., Нитавская С.Д., Трусле Э.А. Сравнительное исследование влияния некоторых вирусов на митоти-ческую активность клеток культур тканей //Матер, конф. по патологии клетки, 1967.-С. 169-171.

71. Лаптева Л.А. Влияние производных бензимидазола на митотическую активность и изгиб хромосом клеток печени эмбрионов крыс //Бюллетень Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамени института гельминтологии имени К.И.Скрябина, 1989, вып. 52. С. 26-28.

72. Леутская З.К., Герасимова Н.Т. Стероиды нематод //Тр. ТЕЛАН СССР. -1977.-С.28.

73. Магомедов О.А. Фенбендазол и камбендазол при нематодирозе и цесто-дозах овец //Сб. научн. трудов Даг. НИВИ, Махачкала, 1984. Вып. 15. - С. 73-75.

74. Магомедов О.А. Эффективность фенбендазола при буностомозе и нема-тодирозе овец //Бюлл. ВИГИС, М., 1984. Вып. 38. - С. 19-23.

75. Магомедов О.А., Кузнецов М.И., Шамхалов В.М., Насухов P.M. Ант-гельминтная эффективность систамекса при буностомозе и других стронгилятозах овец пищеварительного тракта //Бюлл. ВИГИС, М., 1986.-Вып. 43.-С. 40-42.

76. Макарова В.М., Бекиш О.-Я.Л. Реакция пейеровых бляшек крыс на три-хинеллезную инвазию //Материалы докл. IV Всес. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных. — Вильнюс, 1981. — С. 114-117.

77. Медведева М.П., Бекиш О.-Я.Л. Морфофункциональные изменения в лимфатических узлах при экспериментальном трихинеллезе //Материалы докл. Труды научн. конф. «Современные проблемы паразитарных болезней». Витебск, 1984. - С. 78-93.

78. Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов //Киев, 1988.

79. Митникова О.А., Сапунов А.Я., Пшеничный А.А. Морфологические изменения крови у собак при экспериментальном трихинеллезе //Матер. 8-й Всерос. науч. конференци по трихинеллезу. — М., 2000. — С. 117-120.

80. Нисенбаум И.А. Патоморфологические изменения в органах кур после применения бенацила и БМК //Бюллетень Всесоюз. ордена Труд. Красного Знамени института гельминтологии им. К.И.Скрябина. М., 1981, вып. 28.-С. 41-44.

81. Новик Т.С. Механизм биологического действия антгельминтиков-бензимидазолов на примере эмбриотропной и митотической активности //Дисс. .д-рабиол. наук.-М., 1992.

82. Пенькова Р.А. Морфологические, биологические и серологические особенности трихинелл и их значение в эпизоотологии трихинеллеза //Ав-тореф. дисс. . .канд. вет. наук. М., 1975. - С. 20.

83. Переверзева Э.В., Дьяченко Г.Н., Веретенникова H.JI. //Матер, докл. к 4-й Всес. конф. по пробл. трихинеллеза человека и животных. — Ереван, 1985.-С. 110-112 .

84. Плохинский Н.А. Руководство по биометрии для зоотехников //М., 1969.

85. Побряжин В.В., Бекиш Вл.Я. Дозозависимые повреждения генома хозяина при экспериментальном гименолепидозе //Теор. и практ. борьбы с паразитар. заболеваниями (Матер, докл. науч. конф.). М., 2004. - Вып. 5.-С. 314-316.

86. Побряжин В.В., Бекиш Вл.Я. Изменения микроядерного теста при экспериментальном гименолепидозе //Совр. паразитол.: пробл. и перспективы (Тр. конф., поев. 65-летию мед. биологии и общ. генетики ВГМУ). -Витебск, 1999. С. 99-104.

87. Побряжин В.В., Бекиш Вл.Я. Нарушения в геноме хозяина при экспериментальном гименолепидозе в зависимости от дозы введенного инвазионного материала при заражении //Вестник ВГМУ. Т. 2, № 4. - 2003. - С. 84-89.

88. Приказ МЗ СССЗ № 1179 от 10.10.83 г. «Об утверждении нормативов затрат кормов для лабораторных животных в учреждениях здравоохранения».

89. Приказ МЗ СССР № 1045-73 от 06.04.73 г. «Санитарные правила проведения работ с использованием экспериментальных животных».

90. Приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.77 г. «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных».

91. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ //Москва, 2005.

92. Рябова В.А., Веселова Т.П. Эмбриотоксическое и тератогенное действие бенацила //Ветеринария. 1984. -№ 1. — С. 68-69.

93. Рябова В.А., Лаптева Л.А. Эмбриотоксическое и тератогенное действие БМК на зародышей крыс //Бюлл. ВИГИС. М., 1981, вып. 28. - С. 56-60.

94. Семенов В.М., Бекиш Вл.Я., Бекиш Л.Э. Новые подходы к лечению висцерального токсокароза //Совр. пробл. общ. мед. и вет. паразитологии (Тр. 4 Международной науч.-практич. конф.). Витебск, 2004. - С. 236241.

95. Сигачева Ю.П., Нечиненный А.Д., Нисенбаум И.А. Эффективность па-накура при диктиокаулезе овец //Бюлл. ВИГИС. М., 1983. - Вып. 35. -С. 43-45.

96. Скворцова Ф.К. Методика получения инвазионного материала для наработки антигена трихинелл //Труды ВИГИС. Т. 42. - 2006. - С. 599-608.

97. Скворцова Ф.К. Репродуктивная способность самок трихинелл у белых мышей //Матер. 8-й Всерос. науч. конф. по трихинеллезу. М., 2000. -С. 146-150.

98. Скира В.Н. Изыскание средств, предотвращающих эмбриотоксическое и тератогенное действие антгельминтиков-бензимидазолкарбаматов (на примере БМК) //Дисс. .канд. вет. наук. —М., 1986. С. 36-171.

99. Степанов А.В. Влияние трихоцефалезной инвазии на кариотип соматических клеток хозяина //Актуал. вопросы мед. (Тез. докл.), — Витебск, 1994.-С. 19.

100. Степанов А.В. Микроядерный тест при экспериментальном трихоце-фалезе //Роль наслед. факторов в патогенезе забол. человека (Сб. науч. тр.). Витебск, 1992. - С. 79-84.

101. Степанов А.В. Характеристика хромосомного аппарата хозяина при трихоцефалезной инвазии /IXI Конф. Украинского общества паразитологов (Тез. докл.). Киев, 1993. - С. 156.

102. Степанов А.В., Бекиш О.-Я.Л. Влияние трихоцефалезной инвазии на кариотип соматических клеток хозяина //Актуал. пробл. медицин, и ветеринар. паразитологии (Тез. докл. межунар. науч. конф.). — Витебск, 1993. С. 73-74.г

103. Стибель B.B. Изменения в наследственном аппарате свиней при акари-дозной инвазии //Совр. пробл. общей, мед. и ветерин. паразитологии (Тр. IV Международ, науч.-практич. конф.). Витебск, 2004. - С. 73-75.

104. Схиртладзе С.Н. Поиск новых антгельминтиков при аскаридиозе и влияние бенацила на организм, потомство и продуктивность кур //Автореф. дисс. канд. вет. наук. М., 1980. - С. 17.

105. Твердохлебов П.Т., Аюпов Х.В., Самигулин Р.Н., Абдульманов Ф.А., Васлев А.Б. Эффективность панакура (фенбендазола) при дикроцелиозе овец //Бюлл. ВИГИС, М. 1984. - Вып. 37. - С. 35-37.

106. Федосов В.Н., Бекиш О.-Я.Л. Биосинтез эйкозаноидов личинками трихинелл как фактор адаптации к среде обитания //Матер, докл. VI науч. конф. по пробл. трихинеллеза человека и животных. М.: 1992. — С.207-209.

107. Фрольцова А.Е., Лычко Н.Д., Лебедева М.Н. Исследование специфической токсичности отечественного антгельминтного препарата ме-дамина //Мед. паразитол. и паразитарн. болезни, 1983. — № 3. — С. 72-74.

108. Храмцова Л.А. Морфологическая характеристика печени крыс при экспериментальном трихинеллезе //Материалы докл. IV Всес. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных. — Ереван, 1985. — С. 128-130.

109. Храмцова Л.А., Бекиш О.-Я.Л. Морфофункциональное состояние поджелудочной железы при экспериментальном трихинеллезе //Материалы докл. III Всес. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных. — Вильнюс, 1981.-С. 124-129.

110. Чукина С.И. Особенности биологического действия (эмбриотропного, цитогенетического и противоопухолевого) некоторых антгельминтиков, производных бензимидазола //Дисс. .канд. биол. наук. — М., 1990.

111. Штенберг А.И., Орлова Н.В., Торчинский A.M. О действии пестицидов различной химической структуры на гонады и эмбриогенез экспериментальных животных //Гигиена и санитария. 1973. — № 8. — С. 1624.

112. Щербонос И.А. и др. Альвет-суспензия: изучение влияния новой отечественной суспензии албендазола на организм жвачных животных // Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2005. - Вып. 6. - С. 409-411.

113. Эвранова В.Г., Эвранова Г.Б. Гистохимические исследования органов белых мышей при экспериментальном трихинеллезе //Ученые записки Казанского гос. вет. института. Т. 123. Казань, 1976. - С. 113-116.

114. Abatan М.О., Akindoade О. Screening of the commercial formulation of two benzimidazoles and rafoxanide for their larvicidal properties in Hemonchus and Trichostrongylus colubriformis // Anim. Technol. 1986. — V. 37, № I. — P. 61-66.

115. Aboul-Ela E.I. Cytogenetic studies on Nigella sativa seeds extract and thymo-quinone on mouse cells infected with schistosomiasis using karyotyping //Mutat. Res. Gen. Toxic, and Envir. Mutagen, 2002. Vol. 516. - P. 11-17.

116. Al Karmi Т.О., Faubert G.M. Comparative analisis of mobility and ultrastruc-ture of intramuscular larve of Trichinella spiralis and Trichinella pseudospiralis //J. Parasitol. 1981. -V. 67, № 5. - P. 685-691.

117. Allan R.J., Watson T.R. Identification of biliary metabolites of mebendazole in the rat //Eur. J. Drug Metab. Pharmacocinet. 1982. - V.7, № 2. - P. 131136.

118. Atassi G., Tagnon H.J. R 17934 -N Sc 238259: a new antitumour drug-I. Effect on experimental tumors and factors influencing effectiveness //Eur. J. Cancer. 1975. - V. 11, № 9. - P. 599-607.

119. Baeder C., Bahs H., Christ J., Duwel D., Kellner H.M., Kirsch R., Loewe H., Schultes E., Schetz E., Westen H. Fenbendazole: a new highly effective anthelmintic //Experientic. 1974. - V.30, № 7. - P. 753-754.

120. Barus V., Tenora F., Wiger R., Genov T. Morphological differentiation of Trichinella pseudospiralis (Nematoda) //Vest. Cs. Spolec. Zool. — 1981. — V. 45, № 1-3.-P. 1-3.

121. Becker W. Die anwendung von Panacur bei trachtigen tieren //Proc. Eur.Multicolog. 2 nd. Trogir (Yugoslavia). 1975. - P. 431-438.

122. Bekish VI. J. Metabolites of migrative Ascaris suum larvas as mutagens of generative cells of host //Abstr. of 9th Intern. Congress on Infectious Diseases. — Buenos-Aires (Argentina), 2000. P. 272.

123. Bekish VI J. Mutagenesis in experimental ascariasis //Abstr. of 8th Intern. Congress on Infectious Diseases. Boston (USA), 1998. — P. 58.

124. Bekish Vl.J. The alterations in genetic apparatus of somatic and generative cells of the host caused by helminthes metabolites //Wiad. Parazytol. 2001, -T. 47, Z.4.-P. 891-896.

125. Bekish Vl.J. The influence of larvas metabolites of Ascaris suum on genom of host in reinvasion //Acta Parasitologica. 2000b. - V. 45, № 3. - P. 243.

126. Bekish Vl.J. The spermatogenesis activity at experimental helminthiasis //Abstr. of 10th Intern. Congress on Infectious Diseases. Singapore, 2002. -P. 347.

127. Bekish Vl.J. The state of DNA in spermatozoons at experimental nematodi-asis //Abstr. of 18th Intern. Conf. of World Association for the Advancement of Veter. Parasitol. Stresa (Italy), 2001. - P. 342.

128. Bogan J., Marriner S.E. The analisys of benzimidazoles in body fluids by high-perforance liquid chromatography //J. Pharm. Sci. 1980. - 69. - P. 422-423.

129. Boray J.C., Crowfood P. D., String M.B. Treatmant of immature and mature F. hepatica infections in cheep with triclabendazole //Veter. Rec. 1983. - V. 113, № 14.-P. 315-317.

130. Braithwaite P.A., Roberts M.C., Allan R.Y., Watson T.R. clinical pharmacokinetics of high dose mebendazole in patients treated for cystic hydatid disease//Eur. J. Clin. Pharmacol. 1982.-V. 22, № 11. - p. 161-169.

131. Burgat-Sacaze V., Delatour P., Rico A. Bound residues of veterinary drugs: bionvai lability and toxicological implications //Am. Rec. Vet., 1981. V.13, № 3. - P. 277-289.

132. Chaton-Schaffiier M., Fremont V. L'albendazole: resultants des essays pratiques en France //Bull. Soc. Veter. Prat. France, 1981. V. 65, № 2. - P. 117124.

133. Christ O., Kellner H.M., Kloepffer G. Stadies on pharmacokinetics and metabolism with fenbendazole. A new anthelmintic //Proc. Third Int. Cong. Parasitology, Munchen, 1974. Section E8 (8), 1448149.

134. Coles G.C., Briscol M.G. Benzimidazoles and fluk eggs //Vet. Rec., 1978. -V 103, № 16.-P. 360-361.

135. De Brabander M.J., Van de Veire R.M.L., Aerts F.E.M., Genens G., De-splentez L., De Cree J., Borgers M., Janssen P.A. R 17934: a new synthetic anticancer drug interfering with microtubules //Chemotherapy. 1976. - V. 8. Cancer Chemoterapy II.

136. Delatour P. Evaluation of drug residues in animal tissnes //Veterinary Pharmacology and Toxicology. 1983. - P. 659-670.

137. Delatour P., Debroye J., Lorgue G., Courtot D. Embriotoxicite experimentale d' oxfendazole chez la rat et le mouton //Res. Med. Vet. 1977. - V. 153, № 10.-P. 639-645.

138. Delatour P., Lorgue G., Courtot D., Lapras M. Embriotoxicite experimentale du cambendazole (M 905) ches le mouton //Bull. Soc. Sci. Vet. Med. Сотр. Lyon. 1975. - V. 77, № 3. - P. 197-203.

139. Delatour P., Lorgue G., Courtot D., Lapras M. Tolerance embryounaire de l'oxibendazole chese le rat et le mouton //Rec. Med. Vet. 1976. - V. 152, N 7-8.-P. 467-470.

140. Delatour P., Lorgue G., Lapras W., Deschanel J.P. Proprietes embryotoxiques (rat) et residus (ovins, bovins) de trios anthelmintigyes deriveg du benzimida-zole //Bull. Soc. Sci. Vet. Med. Сотр. Lyon. 1974. - V. 76, № 2. - P. 147154.

141. Delatour P., Parish R. Benzimidazole anthelmintics and related compounds: toxisity and evaluation of residues //Drug. Resideus in animals /Academic Press.-1986.-P. 175-204.

142. Delatour P., Parish R.C., Gyurik RJ. Albendazole: a comparison of relay em-bryotoxicity with embryotoxicity individual metabolites //Ann. Rech. Vet. — 1981. V.12, N 2. - P. 159-167.

143. Delatour P., Richard J. Proprietes embryotoxiques et antimitotique en serie benzimidazole //Therapie. 1976. - V. 31, № 4. - P. 505-515.

144. Di Cuollo C.J., Miller J.A., Mendelson W.L., Pagano J.F. Metabolic and tissue residue studies on parbendazole in sheep //J. Agr. Food Chem. 1974. — V. 3,№2.-P. 401-407.

145. Douch P.G.C., Buchanan L.L. Some properties of the sulfoxidases and sulfoxide reductases of the cestode Moniezia expansa, the nematode Ascaris suum and mouse liver //Xenobiotica, 1979. V. 9, № 11. - P. 675-679.

146. Drudge J.H., Lyons E.T., Swerczek T.W., Tolliver S.C. Cambendazole for strongyle control in a pony band: selection of a drug resistant population of small strongyles and teratologic implications //Am. J. Vet. Res. - 1983. - V. 44, № I. - P. 110-114.

147. Duncan W.A., Lemon P.G. The effects of metyul-5(6)-butyl-2-benzimi-dazolecarbamate (parbendazole) on reproduction in sheep and other animals VIII Teratogenicity in the rat //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № 4. - P. 97104.

148. Duvel D. Zur oviziden und larviziden Wirksamkeit von Panacur //Blauen Hefte Tierarzt, 1979. Vol. 59. - P. 441-451.

149. Fallon P.G., Smith P., Dunne D.W. Type 1 type 2 cytokine producing mouse CD4+ and CD8+ cells in acute Schistosoma mansoni infection //Eur. J. Immunol. 1998. - Vol. 28. - P. 1408-1416.

150. Fargetton X., Galtier P., Delatour P. Sulfoxidation of albendazole by a cytochrome P-450 independent monooxygenase from rat liver microsomes //Vet. Res. Commun. - 1986. -V. 10, № 4. - P. 144-154.

151. Fave A., Maillet M. Teratogenic effect of subcutaneous cambendazole in the rat //Prac. Eur. Soc. Toxicol. 1974. -№ 3. - P. 144-154.

152. Fetterer R., Rew R.S., Knight R. Comparative efficacy of albendazole against Fasciola hepatica in sheep and calves: relationship to serum drug metabolite levels //Vet. Parasitol. 1982. - V. II, № 4. - P. 309-316.

153. Flisser A., Gonzales D., Plancarte A., Ostrosky P., Montero R., Stephano A., Correa D. Praziquantel treatment of brain and muscle porcine Taenia solium cysticercosis //Parasitol. Res. 1990. - Vol. 76. - P. 640-642.

154. Fogh J., Fogh H. Chromosome changes in PPLO-Infected FL human amnion cells //Proceedings of the Society of experimental biology and medicine, 1965.-V. 119, № l.-P. 233-238.

155. Ford C.E., Hammerton J.L. A colchicine, hypotonic citrate squach for mammalian chromosomes //Stain Technol. 1956. - V. 31, N 6. - P. 247-251.

156. Friedman P.A., Platzer E.G. Interaction of anthelmintic benzimidazoles and benzimidazole derivatives with bovine brain tubuline //Biochim. Biophys. Acta. 1978. - V. 544, N 3. - P. 605-614.

157. Galtier P., Alvinerie M., Delatour P. In vitro sulfoxidation of albendazole by ovine liver microsome: assay and frequency of varions xenobiotics //Am. J. Vet. Res. 1986. - V. 47, № 2. - P. 447-450.

158. Gardiner J.A., Brantley R.K., Sherman H. Isolation and indification of methyl l-(butilcarbamoyl)-2-benzimidazole carbamate in rat urine //J. Agric. and Food Chem. 1968. -V. 16, №6. -P. 1050-1052.

159. Gardiner J.A., Kirkland I.I., Klopping H.L., Sherman H. Fate of benomil in animals //J. Agric. and Food Chem. 1975. - V. 22, № 3. - P. 419-427.

160. Guilhon I., Barnabe R.Action anthelminthique d'un nouveu derive du ben-zimidazole (Cambendazole) et sa toxicite pour le mouton //Bull. Acad. Vet. France. 1973.-V. 46, № 8.-P. 311-320.

161. Hamada F.M.A., Abdel-Aziz, Badr F., Moustafa A., Rashad A. The mutagenic effect of praziquantel in S. mansoni — infected mice //Arab. J. Lab. -1992.-Vol. 18.-P. 301-311.

162. Hancock N.A., Poulter D.A.L. The effects of metyl-5(6)-butyl-2-benzimi-dazole carbamate (parbendazole) on reproduction in sheep and other animals. VIII. Eggect of administration to pregnant sows //Cornell Vet. 1974. - V. 64, №4.-P. 92-96.

163. Henry W. Trichinella pseudospiralis in Tasmanian native fauna //Aust. Vet. J. 1989. - V. 66, № 10. - P. 336.

164. Herd R.P., Heider L.S. Control of nematodes in dairy heifers by prophylactic treatments with albendazole in the spring //J. Amer. Vet. Med. Assn. — 1985. -V. 186, № 10.-P. 1071-1074.

165. Hoebeke J., Van Nijeu G., De Brabander M. Interaction of oncodazole (R 17934) a new antitumoral drug with rat brain tubulin //Biochem. Biohpys. Res. Commun. 1976. -V. 69, N 2. - P. 319-324.

166. Huff B.B. Ed. Physicians' Desk Reference. 41st Ed. //Medical Economics Co.- Oradell.-NJ.- 1987.-V. 417.-P. 1321-1322.

167. Ireland C.M., Gull K., Gutteridge W.E., Pogson C.I. The interaction of ben-zimidazole carbamates with mammalian microtubule protein //Biochem. Pharmacol. 1979. - V. 28, N 17. - P. 2680-2682.

168. Jenson J.S., O'Connor R., Osborne J., Devaney E. Infection with Brugia microfilariae induced apoptosis of CD4+ T-lymphocytes: a mechanism of immune unresponsiveness in filariasis //Eur. J. Immunol. 2002. - Vol. 32. - P. 858-863.

169. Johns D.J., Philip J.R. Albendazole: safety in sheep //Proc. Int. Conf. World. Assoc. Adv. Vet. Parasitol., 8-th, Sydney, 1977. P. 72.

170. Katiyar S.K., Gordon V.R., McLaughlin G.L., Edlind T.D. Antiprotozoal activities of benzimidasoles and correlations with betatubulin sequence //Antimicrob. Agents Chemother. 1994. - Vol.38, № 9. - P. 2086-2090.

171. Knox J.W., Williams J.C. Kimball M.D. Marbury K.S. Efficacy of fenbenda-zole against inhibited larvae of O. Ostertagi //Proceedings. 1983. — V. 24. -P. 4-12.

172. Kociecka W.; Van Knapen F.; Ruitenberg E.J.; Geleijnse M.E.; Terlingen J.B. Trichinella pseudospiralis and T. spiralis infections in monkeys. II Clinical aspects //Vet. Parasitol. 1981. - V. 5. - P. 205-208.

173. Laclette J.P., Guerra G., Zetina C. Inchibition of tubulin polymerization by mebendazole //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - V.92, N 2. -P.417-423.

174. Lapras M., Delatour P., Deschanel J.P., Lorgue G., Camps S., Regnier B. Etude experimental de l'activite teratogene du parbendazole (S.K.F. 29044) ches la souris et le lapin //Bull. Soc. Sci. Vet. Med. Сотр. Lyon. 1973. - V. 75, №5.-P. 309-323.

175. Lapras M., Delatour P., Lade J., Panarin M.J., Richard J. Etude experimentale des proprieties anticanerenses potentiells du parbendazole (S.K.F. 29044) //Bull. Soc. Sci. Vet. Med. Сотр. Lyon. 1975. - V. 77, № 6. - P. 379-396.

176. Lapras M., Deschanel J.P., Delatour P., Gustella J., Jombard M. Accidents te-ratologiques ches le monto u apres administration de parbendazole //Bull. Soc. Sci. Vet. Med. Сотр. Lyon. 1973. -V. 75, № I. - P. 53-61.

177. Lopez-Briones S., Sciutto E., Ventura J.L., Zentella A., Fragoso G. CD4+ and CD 19+ splenocytes undergo apoptosis during an experimental murine infection with Taenia crassiceps //Parasitol. Res. 2003. - Vol. 90, № 2. — P. 157163.

178. Marriner S.E., Bogan J.A. Plasma concentration of fenbendazole and oxfen-dazole in the horse //Equine Vet. J. 1985. - V. 17, № 1. - P. 58-61.

179. Marriner S.E., Evans E.S., Bogan J.A. Effect of parasitism with Ostertagia circumcincta on pharmacokinetics of fenbendazole in sheep //Vet. Parasitol. -1985. V.17, N 3. -P.239-249.

180. Marsboom R. Eventuels effects embryotoxiques et teratogenes chez le mou-ton par administration orale quotidiennede I g de R-17635 (Mebendazole) du septieme an trente cinquieme jour de gestation //Document confidentul. -1971.

181. Marsboom R. Toxicologic studies on mebendazole //Toxicol. Appl. Pharmacol. 1973. - V. 24, № 3. - P. 371-377.

182. Mayo B.C., Brodie R.R., Chasseand L.F., Hawkins D.R. biotransformation of metyl 5-cyclopropylcarbonyl-2 benzimidazolcarbamate (ciclobendazole) in rats and dogs //Drug Metab.Dispos. 1978. - V. 6, № 5. - P. 518-527.

183. Mc Douall J., Cameron B.D. Lichtenwalker D. //In: Delatour P., Parish R. Benzimidazole anthelmintics and related compounds: toxicity and evaluation of residues . 1986. - Drug Res. in Animals. - P. 190.

184. Mercier-Parrot L. A propos de Paction teratogene du parbendazole //Terapic.- 1976.-V. 31, №4.-P. 491-503.

185. Middleton H.D., Plant J.W.,Walker C.E., Dixon R.T., Johus D.R. Ill Tera-tological study in ewes in Australia //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № I. -P. 56-57.

186. Miller C.R., Szabo K.T., Scott G.C. VI. Effect in the pregnant cow //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № 4. - P. 85-91.

187. Minta M., Biernacki B. Embriotoxicity of carbendazim in hamsters, rats and rabbits //Bull. Vet. Inst. Palawy. 1982. -V. 25, №№ 1-4. - P. 42-52.

188. Mochida K., Goto M., Saito K. Effects of diphenyl, o-phenylphenol and 2-(4'-thiazolyl) benzimidazol on growth of cultured mammalian cells //Bull. Environ Contamin. Toxicol. 1983. - V. 31, № 4. - P. 428-431.

189. Montero R., Flisser A., Madrazo I., Cuevas C., Ostrovsky P. Mutation at the HPRT locus in patients with neurocysticercosis treated with praziquantel //Mutat. Res. 1994. - Vol. 305. - P. 181-188.

190. Montero R., Ostrovsky P. Genotoxic activity of Praziquantel //Rev. in Mutat. Res.-1997.-Vol. 387.-P. 123-139.

191. Motorna O.O., Martyn H., Gentile G.J., Gentile J.M. Analysis of lacl mutation in Big Blue® transgenic mice subjected to parasite-induced inflammation //Mutat. Res. Fund. And Mol. Mech. of Mutagen. 2001. - Vol. 484. - P. 6976.

192. Munst G.J., Karlaganis G., Bircher J. Plasma concentration of mebendazole during treatment of echinococcosis. Preliminary results //Eur. J. Clin. Pharm.- 1980. V. 17, № 2. - P. 375-378.

193. Ngomuo A.J., Marriner S.E. Bogan J.A. The pharmacokinetics of fenbenda-zole and oxfendazole in cattle //Vet. Res. Commun. 1984. - V. 8, № 3. - P. 187-193.

194. O'Brien J.J. Toxicological aspects of some modern anthelmintice //Aust. Vet. J. 1970. - V. 46, № 7. - P. 297-300.

195. Obendorf D.L.; Clarke K.P. Trichinella pseudospiralis infections in free-living Tasmanian birds //J. of the Helminth. Soc. of Washington. 1992. - V. 59.-P. 144-147.

196. Ogata A., Audo H., Kubo J., Higara K. Teratogenicity of thiabendazole in ICR mice //Food. Chem. Toxicology. 1984. - V. 22. - P. 509-520.

197. Pieroy D.V., Reynolds J., Brown P.R.M. Reproductive safety studies of oxfendazole in sheep fiid cattle //Br. Vet. J. 1979. - V. 135, № 5. - P. 405410.

198. Renwick A.G., Strong H.A., George C.F. The role of the gut flora in the reduction of sulfoxide containing drugs //Biochem. Pharmacol. 1986. - V. 35, № l.-p. 64.

199. Reynolds, James E.F., Ed. Martindale the Extra Pharmacopoeia. 28th Ed. //Pharmaceutical Press. London. - 1982. - P. 98-100.

200. Rosa W.A.J., Niec R., Lukoich R. Accion anthelmintica у ovicida del fenben-dazol en ovinos //Gaceta Vet. 1978. - V. 40, № 329. - P. 203-214.

201. Rumbley C.A., Zekavat S.A., Sugaya H., Perrin P.J., Ramadan M.A., Phillips S.M. The schistosome granulema: characterization of lymphocyte migration and cytokine production //J. Immunol. 1998. - Vol. 161. - P. 4129-4137.

202. Saunders L.Z., Shone D.K., Fhilip J.R., Briknead H.A. Malformations in newborn lambs //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № 4. - P. 7-40.

203. Seiler J.P. The mutagenicity of benzimidazole and benzimidazole derivatives VI Cytogenetic effects of benzimidazole derivatives in the bone marrow of the mouse and the Chinese hamster //Mutat. Res. 1976. - V. 40, N 1. - P. 339-348.

204. Serrano-Garcia L., Montero-Montoya R. Micronuclei and chromatid buds are the result of related genotoxic events //Mutat. Res. Envir. And Mol. Mutagen. -2001.-Vol. 38.-P. 38-45.

205. Shone D.K., Philip J.R., Fricker J.M. Teratological study in ewes in Republic of South Africa //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № 4. - P. 69-76.

206. Shubber E.K., Salin H. Cytogenic studies on blood lymphocytes from patients with Shistosoma mansoni //Jap. J.Med. Sci. and Biol. 1987. - Vol. 40, № 4. -P. 137-145.

207. Steel J.W., Hennessy D.R., Lacey E. //In: Delatour P., Parish R. Benzimida-zole anthelmintics and related compounds: toxicity and evaluation of residues.- 1986.-Drug Res. in Animals. P. 178.

208. Stewart G.L. Biological and immunological characteristics of Trichinella pseudospiralis //Parasitology Today. 1989. - V. 5. - P. 344-349.

209. Stewart G.L.; Larsen E. Infection of the Chinese hamster with Trichinella pseudospiralis //J. Parasitol. 1989. - V. 75. - P. 1006-1007.

210. Styles J.A., Garner R. Benzimidazolcarbamate methylester-evaluation its effects in vivo and in vitro //Mutat. Res. 1974. - V. 26, № 3. - P. 177-167.

211. Szabo K.T., Miller C.R., Scott G.C. Teratological study in ewes in the United States //Cornell. Vet. 1974. - V. 64, № 4. - P. 41-55.

212. Teodorides V. J., Daly I.M. Toxicologic and Teratologic studies of oxibenda-zole in ruminants and laboratory animals //Am. J. Vet. Res. 1977. — V. 38, №6. -P. 809-814.

213. Tocco D.J., Rossenblum C., Martin C.M., Robinson HJ. Absirption, metabolism and excretion of thiabendazole in man and laboratory animals //Toxicol. Appl. Pharmacol. 1966. - V. 9, № 1. - P. 31-39.

214. Vagra I., Janisch M. Anthelmintic activity of mebendazole ageinst naturally equired gastrointestinal nematodes in sheep //Acta Vet. Acad. Sci. Hun-garicae. 1975. - V. 25, № I. - P. 105-111.

215. Van den Bossche et al. Mebendazole and related anthelmintics //Adv. Pharmacol. Chemoter. 1982. - V.19. - P. 67-128.

216. Wakelin D; Goyal PK; Dehlawi MS; Hermanek J. Immune responses to Trichinella spiralis and T. pseudospiralis in mice //Immunologi. — 1994. — V. 81, №3.-P. 475-479.

217. Wetzel H. 25063-B Reihe В Applikation von Albendazole an trachtige Kuhe //Zentralbl. Vet. Med. 1985. - V. 32, № 3. - P. 375-394.

Информация о работе

Максименко, Светлана Николаевна
кандидата ветеринарных наук
Москва, 2008
ВАК 03.00.19

Диссертация

Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Влияние нематодозной инвазии на митоз, антимитотическое действие и биотрансформацию албендазола у лабораторных животных - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы