Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВЛИЯНИЕ МИКРОБНОГО КАРОТИНА И МИКРОВИТА А НА ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ ФУНКЦИИ КОРОВ В СВЯЗИ С АКТИВНОСТЬЮ ИММУННЫХ РЕАКЦИЙ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ВЛИЯНИЕ МИКРОБНОГО КАРОТИНА И МИКРОВИТА А НА ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ ФУНКЦИИ КОРОВ В СВЯЗИ С АКТИВНОСТЬЮ ИММУННЫХ РЕАКЦИЙ"

л-28552

всесоюзный ордена трудового красного знамени научно-исоедователъашй институт животноводства (вию ,

На правах рукописи

СКОПЕЦ Борис Гйршевич

УДК 636.2.088.45.007.76

ВЛИЯНИЕ МИКРОБНОГО КАРОТОНА И ШКРОВИТА А

на воотоизводитшше функции норов

В СВЯЗИ С АКТИВНОСТЬЮ ИМНУНгШ РЕАКЦИЯ

03.00.13 - физиология человека и животных (физиология сельскохозяйственных животных)

а в то реферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

л. Дубровицк, Московск. обл.. 1907 г.

yc&t -

Работе выполнена в Латвийском научно-исследовательском институте животноводства и ветеринарии.

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор И.И.Соколовская

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор И.Г.ПИВНЯК; кандидат биологических наук . Н. М .РЫИЕТЮЩОВА.

Ведущее учреждение - Северный научно-исследовательский • институт животноводства.

Защита диссертации состоится Ltißf(,d) jggy г.

в час. на заседании специализированного совета

Д 020.16.02 при Всесоюзном ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательском институте животноводства,- :

- Адрес: I420I2 Московская обл., Подольский р-н, пос. Дубровицы.

С диссертацией можно ознакомиться в' библиотеке института

Автореферат разослан " 1987 г.

Ученый секретарь талиэированного совята

И.И.Шиггин

i. общая характеристика работы

1.1. Актуальное1» пробле*^. Для выполнения задачи резкого увеличения производства продуктов питания на основе интенсификации животноводства, поставленной ХХУН съездом НПОС н Продовольственной программой СССР, настоятельно требуется повышение эффективности воспроизводства в крупных механизированных хозяйствах. ,

Причинами недостаточной эффективности воспроизведения,могут быть иммунодефкцитное состояние животных, ранняя эмбриональная смертность, которые, как правило, бывают следствием неадекватных условий кормления и содержания коров и телок, особенно в предотельный и лослеотельный периоды, а также несвоевременное осеменение по отношению х овуляции.

Значение А-витаминной обеспеченности организма животных доказано. Вместе с тем, в свете данных о новых источниках этого важного элемента питания (в частности каротина микробного синтеза), а также в связи с особенностями содержания высокопродуктивных коров в мех а киэиро в анних комплексах без выгула проблема воспроизводства в связи с обеспеченность» организма коров витамином А и каротином-вцдвигается на первый план.

Исследования последних лет показали также важное значение для воспроизведения стад состояния имцунной систем« самок во -всех звеньях процесса воспроизведения (Братанов К.Ц.» 19671986, Соколовская Л1.И., 1938-1906).'

1.2. Цель исследований - найти новые пути улучгчкия воспроизведения на базе иммунологических и физико-биологических исследований отдельных звеньев процесса в связи с А-витаминной обеспеченностью организма, коров. Для достижения этой цели были

Цгктрйльаая ]

Регчаш 1нед»оте«а I Мосе.ог. о-.^аа I л л _

«"^Уда«« |Я№2

. ' . ■ " ' - 4 - ■

' поставлены следующие задачи:

1. Научить действие добавок к основному рациону сухостойгак ' и лактирувдих хоров каротина микробного синтеза или мияровита А на эффективность воспроизведения, активность иммунного ответа, естественную резистентность н физико-биологические свойства танковой цервикальной слизи. >

2. Выяснить зависимость эффективности воспроизведения от активности иммунной системы организма хоров и от физико-биологических свойств цервикальной слизи перед осеменением.

3. Разработать ноше' тесты для определения оптимального срока осеменения В:период течки и для выявления активности иммунного ответа организма коров.

1,3. Научная новизна. В сравнительном аспекте изучено действие на воспроизведение и иммунобиологическое состояние животных восполнения дефицита витамина А в организме добавлением к рациону коров в сухостойный и поелеотельный периоды кормового препарата микробиологического каротина или микровита А*

Впервые изучено действие A-витаминной обеспеченности орта- . низка коров на активность клеточного звена иммунной систеш и физико-биологического свойства цервикальной слизи в период теч-. ки.. ■ ■■ , ■

Доказано отрицательное влияние на воспроизведение значительных отклонений от норш активности иммунного ответа в реакции спонтанного роэеткообразования (&-РОК) через месяц после отела в сторону как повышения (выше 15%), так и снижения (менее &%). "

Впервые доказана положительная прямая связь между проницаемостью цервикальной слизи для «ивчиков и результативностью осеменений.

■ 1.4* Практическая пенность пяЛптч заключается в достоверном улучшении воспротоводства и иммунобиологического состояния коров высокопродуктивного стада при стойловом безвыгульном содержаний посредство« восполнениярациона каротином микробиологического синтеза или.микровитом А, а также в разработка тестов определения оптимального срока осеменения коров в период течки по физико-биологическим свойствам цервикалъной слизи и состояния иммунной системы в реакции гиперчувствительности замедлен-. ного типа (ГЧЗТ) с фктогемагглюткнином (ФГА).

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседании научного коллоквиума Отдела биологии воспроизведения и искусственного осеменения ЕИЖа в 1986 году» на заседаниях на-уч»к конференций отдела биологии:воспроизведения и искусствен-

J

ного осеменения &Ма и лаборатории трансплантации зигот и фи-' экологии рзэшожения Латвийского НИИЖиВ в 1986 году, а также на Межреспубликанской конференции "Профилактика и лечение бо- • леэней в промшленном животноводстве" г.Сигулда» 1986 г,

1.6. Объем габотн. Диссертация изложена на 145 страницах

, машинописного текста и содержит 17 таблиц, 5 фотографий» 9 рисунков» 8 приложений. Она состоит из введения» обзора литературы, описания цели, и зада-г исследований; изложения реэульта-' тов собственных' исследований,,выводов и практическик предложений. Список литературы - 162 наименования» из них .72 на иностранных языках.. . . .

2. ЛЭТЕРИАШ И МЕТОДИКА ИООПЕДОВАНИЙ•

: Исследования глмведенн в лаборатории трансплантации зигот й £и&иологии размножения» а также в научно-опытном хозяйстве "Кртулда "ив колхозе "Аллажи" Рижского района Латвий-

CKOft ССР.

Всего в опытах.былоиспользовано 115 хоров бурой латвийской породы и семя быков-лроизводителея, закрепленных за данными коровами.

Основной опыт проводили на молочной ферме "Пулкас" научно-опытного хозяйства "Криьулда" в эикнестойловый период 1984 - ' 1985 годов в условиях безвыгульного содержания. Средний надой от коровы в 1965 году составил 5135 хг при жирности 4,39$.

Рацион сухостойных коров (последний месяц стельности) ;.. включал 2 кг сена, I кг яровой солош, £ кг травяных гранул, , 8 кг кормовой свеклы, I кг картофеля, 4,5 кг комбикорма, . 65 г дикальций фосфата и 60 г поверенной соли.

В первые месяцы после отела суточный удой большинства коров превышал 30 кг. Рацион таких коров состоял из £ кг сена, I ter яровой солош, 3 хг травяных гранул, 25 кг травяного силоса, 18 кг кормовой свеклы, 4 кг картофеля, 6,5 кг комбикорма; 80 г дикальций фосфата и 110 г поваренной соли. ,

Исследование питательной ценности рационов проведено исходя из результатов химического анализа кормов (по общепринятым методикам) с частичным использованием табличных данных ( £*t-*i*-ti« j,, 1977). Питательная ценность л .структура рационов были сравнены с нормами ВИЖа (Калашников А.П., Клейменов Н.И., 1965)«

В основном опыте (88 коров) по принципу аналогов (порода, возраст, продуктивность) были сформированы 3 группы коров: 2 опытные и I контрольная с ожидаешм отелом в январе - марте 1985 года.

Коровам первой опытной группы (30 животных) в дополнение к основному рацио]iy скармливали биомассу кормового препарата микробного каротина из расчета 300 мг чистого вещества кароти-

на на животное в сутки. Коровам второй опытной группы (29 животных) скармливали по 150 тыс. ИЕ микровита А..Препараты скармливали в смеси с"комбикормом в течение одного месяца до отела и двух месяцев после него. НЬровы контрольной групгы (£9 животных) добавочных-витаминов не получали..

У 8 коров I опытной группы,,7 - второй опытной группы и у 5 контрольных перед началом и в'конце опыта определяли содержание в крови каротина и витамина А (Антонов В.Я.• БлиновП.Н., 1974).

Перед началом опыта (за месяц до ожидаемого отела)t за 2-10 дней до ожидаемого отела, через 2-10 и 25-35 дней: после отела у .12-22 коров каждой группы брзли кровь длят-исследования клеточного ишунного ответа, а также для определения некоторых показателей естественной резистентности.

Непосредственно перед осеменением у коров- опытных и контрольной групп исследовали физико-биологические свойства церви-кальной слиа« и ректально исследовали размеры фолликулов в якиниках, ,

В дополнительном опыте на ферме "Душ" колхоза "Аялажи" использовали 27 коров. Из них 9-ти коровам скармливали дополнительно к рациону корковой препарат »неровного каротина, 7-iat -микровит А в тех же дозах «в те же сроки» что и в основном опыте; II-коров служили контролем. Средний удой по ферме в 1985 г. состасил 4235 кг.

Эффективность действи.1 витаминизации на воспроизводитель!»» функции коров оценивали по результативности первого и последую-цих осеменений»- по продолкггельностй сервис-периода», индексу cceKCiUCMMfi, а также по блaгoпoлyчiIЮ отелов.

Актнснссть Т-ЗЕона клеточного ммм/нного ответа была изучена В реакциях O-POiC и ГЧЗТ с СГА.

' " ■ -в--.'

Постановку Э-РОК проводили по ог*«а1'1.д« *t «1. (1976) в модификации Радченкова B.D., Соколовской И.И. (1983). В S-POK было исследовано '43 коровы* Всего было просмотрено 215 мазков и подсчитано 43000 лимфоцитов.

При постановке реакции ПЙТ после экспериментального определения оптимальной концентрации раствора идозы ФГА» на которую животные реагировали достаточно ярко (концентрация 0,03&), 62 коровам на 2-4 месяцах лактации вводили внутрикожно по 66,7 мкг чистого вещества ФРА в объеме 0,2 см3. Из них 22 коровы получали добавки микробного каротина, 19 - микровита А и 21 корова была в контроле. Толщину кожной складки измеряли перед инъекцией и через сутки после нее. Одновременно у всех этих коров определяли число &-Р0К в периферической крови. В работе в обоих опытах был использован ФГЛ производства завода химических реактивов г* ОлаЯне, Латвийской СО*. . '

Для изучения естественной резистентности у 62 коров определяли активность лизоцима сыворотки крови (Ермольева З.В., 1965). Всего было ьсследовано 215 образцов сыворотки крови.

Слизь для исследования после тщательного туалета наружных половых органов коров брали рукой (в полиэтиленовой перчатке одноразового пользования) из устья шейки, матки непосредственно перед осеменением животных. Исследование слизи проводили не позже 2-3 часов после ее извлечения. .

Были исследованы плотность слизи ; по отношению к раствору сернокислой меди с удельным весом 1,008 (Соколовская И.И. и др., 1959), а также ее эластичность (растяжимость) и проницаемость для живчиков в,наших модификациях.

Всего было исследовано 73 образца слизи, взятой у витаминизированных и контрольных коров.

Слиэьиселедоваяи только у здоровых животных, опираясь на датою модифицированного теста Уайтеайда (фаллах Х.А., 1984).

Статистическую обработку полученных результатов проводили по Рокицкоцу П.ф. (1967).

; ' / . ' . ■ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИОСЛЗДОВАИКЙ

3.1. Действие.витаминизации на показатели воспроизведения у коров

В основном опыте анализ выявив дефицит каротина в рационе коров в размере 349 .мг (52^) в сухостойном периоде и 283 мг . (23%) -в послеотельном периоде..

Вследствие этого содержание каротина и витамина А в крови животных перед началом ошта в декабре 1984 года было на нижней границе норш* Добавки к рациону ■каротина микробного синтеза или микровита А дали следующие результаты (таблица I). ■;.■."'/. . ' .' Таблица I"

Содержание в крови коров каротина и витамина А .в зависимости отскармливания каротина микробного , синтеза или микровита А ■ *, .

Группы }Все-{" • : 1 Содержание в крови '

(добавки Iго | .каротина ■ |' ■- витамина А : .

к рациону) (род | до опитаШ конце* Иэш-1 До опыта? В конце Шэш-■ '-'■! - I • ^ ■ (опыта: Iнекие( (ошта* 1нгние

} ! мгЙ ! мг% Г % I - мг$ ■- ! мг% ) %

Без добавок , 5 0,49± 0,31+к -36,7. 38± ЗХ^*** -18,4 (контроль) ' 0,020 0,017 • • 1,7 2,4

Кяротйн .. ' 8 0,47+' 0,64±х +26,6 . 39+ 50+** +22,0 . ; -0,025 0,037 1,9 . 2,6 .

Микровит А 7 0,46+ '0,56+жх+17,9 37+ 62+х +40,3 0,027. 0,012 .2,5 3,8

х Р<0,С01 • хх Р<0,01 ххх Р<0,06

■'■' - ю - . ; .

Из таблицы I видно закономерное снижение к концу/опыта (март-. 1985 года) содержания каротина и витамина А в крови контрольных, коров и, напротив) их возрастание в крови витаминизированных ко-* ров. Следовательно, восполнение дефицита каротина в рационо ко_-ров в обеих группах способствовало восстановлении нормального: содержания этих веществ в крови.

В таблице 2 дан анализ общих результатов осеменения коров. ,

•• :'■ Таблица 2

Действие витаминизации на результативность осеменения коров . ' * ',.'■'

(Осеме-1 Из них.стали стельными

) нено 1---------- ■ и..—

Группа 1 коров | от^пе^двух { , в конечном итоге

I ) коров { % ,. ■ | коров } % :

Контроль 27 12 44,4±9,56 21 77,8^.00

Витаминизация 55 35 ! 63,6+6,49 49 . 89,Т±4,20 (всего)

-каротин 30' 21 70,0*8,37* 27 90,0^5,48

- микровит А 25 14 56,0+9,29 22 83,0+6,50

х Р<0,С6

Из таблицы видно, что витаминизация ощутимо повысила результативность осеменений коров. Этот эффект в основном объясняется -положительным влиянием витамина А на структуры и функции слизистых оболочек половых путей самка, от которых зависит шграция живчиков в половых путях и эмбриогенез (Миловапов В.К., Соколовская И.И. , 1984; Кингаэов Т.Д., 1978)., При этом витаминизация коровМикробным каротином оказалась несколько эффективнее по сравнению с микровитом А.

Вместе с тем, общая результативность осеменений коров была

ниже ожидаемой» несмотря на восполнение дефицита каротина в рационе. Это означает, что в изучаемом стаде кроме,дефицита про-тина в рационе и витамина А в организме были и другие факторы, отрицательно - влияющие на воспроизведение,

, Предположительно к ним относятся несбалансированность рациона не только по каротину, но и дефицит, грубых кормов и сахара,^ также,полное отсутствие- моциона, что - всегда отрицательно отражается на обмене веществ, особенно при высокой продуктивно' сти коров, .; \ ,.'.''■■.

• *. В таблице 3 прослежена связь эффективности1 воспроизведения со степенью недостатка каротина в рационе коров*. :..;..

: ■ Таблица 3

Влияние витаминизации на воспроизводительные функции коров : в связи со:степенью необеспеченности рациона каротином

Число? Длительмость^сервис-j Кндекс 0семвнени*

коро 3!--»—;——■ ■ ,--=-

¡ дней; j - } ос/ст } %

Группа животных

. * Основной опыт. Дефицит каротина в рационе 23Й

Контроль ; 21 V' 111,5 100 V 2,8 . 100 ■

Витаминизация ,'49'- ■ 91,8 82,3+5,45хх 2,1 75,0±6,19ххх (всего) " "■

.*■'... Дополнительный опыт. Дефицит каротина в рационе 47%

Контроль 9 113,7 100 • 2,2 100

Витаминизация 15 79,2 69,7¿II,87X 1,8 81,8+9,96 "(всего) ■, ' '*. ■„■■'-■ -'■''.■. ■*'■■:■■-'

х Р<0,05 хх Р<0,01 ххх Р<0,001

Данные'таблицы.3 подчеркивают еще в большей степени важное значение для воспроизведения обеспеченности рациона коров каротином, Чем больше был дэфицит каротина, тем вьпае: быд оффект ви-

- I2-'

таминиэации. Так, при недостаче каротина в пределах ¡^ потребности витаминизация сократила сервис-период на 19,7 суток (17,7?), а при увеличении дефицита вдвое, восполнение его витаминизацией сократило сервис-период на 34,5 суток (на 30,3^).

При практически сходной эффективности влияния обоих использованных препаратов пути их включения в улупоение процесса вое- , произведения не тождественны.

Микробный каротин может- служить на только источником синтеза в организме витамина А, но, включаясь в структур желтого tfo-ла,.может оказывать положительное влияние на его функционирование (Пивняк И,Г. и др., 1983; Bofitemblent* Ы. et el#t 1983; Jaokeoa p.e. et »1., 1981; Lottbsmaer Ж.Н. , 1979; Sil*» D. , ,1983). Возмолз» также еще не выявленные пути связи его с воспроизведением.

3.2. Действие витаминизации на активность - -

клеточных имцунных реакций

Нормальное воспроизведение на всех его этапах находится под. контролем и"цунной систем*. Известно, что иммунодефицитное состояние, нередко наблюдаемое у коров и свиней, пагубно влияет на воспроизводительные функции, особенно на эмбриональную выживаемость. Поэтому важное значение, имеет исследование связей между воспроизводительной и иммунной системами, а также выяснение зависимости выраженности активности именного ответа от обеспеченности организма витамином А.

3.2.1. Связь активности спонтанного роэеткообразовон;,я. (Э-РОК) с воспроизведением и обеспеченностью организма каротином и витамином А

Данные о влиянии обеспеченности организма коров витамином А

в сухостойная период на состояние имцунной с исте ш, характеризуемы активность» спонтанного розеткообразования, показали» что до начала опыта численность Э-РОК была почти одинакова у контрольных и подлежащих витаминизации коров (11,4+0,53 против 11,7^0,43%). Однако через 3 недели," к концу сухостойного периода,за недело до отела', между опытом и контролем выявились существенные различия {13,1+0,635 против 9,5±0,39^). В то время, как в контроле процент Э-РОК остался на прежнем уровне, под влиянием витаминизации произошло его снижение на статистически достоверную величину.

Разницу между группами за неделю до отела предположительно объясняем нормализующим иммунный ртвет действием витаминизации, что способствовало своевременному развитию имм;-нологической толерантности и обеспечило нормальную беременность, отел и после-отельный период.

. * *

Анализ связи разницы в числе Э-РОК за месяц до отела г. их1

благополучием показал, что значительное увеличение численности Э-РОК в последний месяц сухостойного периода - неблагоприятный признак. Он был обнаружен еще за месяц до отела у коров с после-душкш послеродовыми ослотаскиями.

Изменение численности розеткообризу*Сих клеток в крови витаминизированных и контрольных коров проанализировано в после-отельный период. Было выяснено, что у витаминизированных здоровых коров процент Э-РОК в периферической крови через неделю после отела повысился (Р^О,001) с: 10,5^0,45 до 15,2+0,66, в то * время как в контроле - почтине изменился - 11,1+0,79 против 10,5+0,45. Эту разницу мы предположительно объясняем активацией восстановительных процессов у здоровых, коров после отела в уело-

виях обеспеченности витамином А. В контроле реакции восстановления проходили меное активно и численность Э-РОК сравнялась в -обеих группах лишь' через месяц. . '

• Следовательно, иммуностимулирующее действие витаминизации в ранний послеродовой период, выраженное в увеличении численности Э-РОК, отражает нормальный ход восстановительных процессов после родов.

Анализ численности Э-РОК у разных животных, показал значительные вариации (от 1,0$ до 30,0%) при средней величине 11,6$,

Исходя из данных об отрицательном влиянии на жизненные процессы как резкого повышения активности тленного ответа, так и его значительного снижения, что известно под названием иммунодефицита, численность Э-РОК, исследованная через месяц после отела в период, предшествующий осеменении, была сопоставлена с длительностью сервис-периода.

Выяснено,'что как пониженная (менев.5%, что мы обозначили как иммунорефицитное состояние), так и повышенная (более 15,5%) численность Э-РОК в крови коров через месяц после отела совпали : со значительным удлинением сервис-периода (121 и 104 суток соответственно). В то же времяпри нормальном содержании Э-РОК (10,5 - 15,0%) сервис-период был значительно короче (89 суток).

Из данного сравнения можно, сделать вывод, что эффективность воспроизведения коров в значительной степени связана с состоянием клеточного эвена иммунной систеш, характеризуемой реакцией спонтанного розеткообразования в период, предшествующий осеменению.

При этом у коров численность Э-РОК в норме значительно ниже, чем описано для свиней и человека, то есть у крупного рогатого скота эта реакция выявляет, ло-вцдимоьу, не всю популяции

Т-лимфоцитов. V ' ■■.■'.

3.2.2. Реакция гиперчувогвительности замедленного типа . (ГЧЗТ) с фитогемагглютинином (ФГА) в связи с

витаминизацией . ,

Имьцунная система обусловливает не-только генетическое единство внутренней среды организма, но и, чутко реагируя на функциональные сдвиги, предохраняет организм от неблагоприятного воздействия многих факторов внешней среды. Поэтому поиск нетрудоемких, легкопримекимых в условиях.ферш объективных методов исследования и оценки состояния иммунной системы имеет ваяыоа науодо-практическое значение. В ©том плане представляет интерес мало исследованная в применении к к^гпноку рогатому скоту реакция ГЧЭТ с ФГА, который» как известно, активирует деление Т-лимфоцитов.

. . Исходя из предположения, что по реакции ГЧЗТ с ФГА можно косвенно определить влияние А-витаминной обеспеченности организма на состояние Т-клеточной систеш, активность реакции ГЧЗТ была исследована в опыте и в контроле.

Экспериментально выяснено» что измерите данные можно подучить применяя 0,033{6 раствор ФГА. ..-'..'

Действие витаминизации на реакцию ГЧЗТ с 0,033% раствором ФГА показано в таблице 4.

Из таблицы 4 видно,.что у витаминизированных коров иштун-ный ответ на-введение 0,033$ раствора ФГА был выражен ярче по 'сравнению с контролем.

При этом в группе коров, получавших микровит А, иммунный ответ был активнее, чем в контроле при статистически достоверных различиях, как по числу животных с болев' активным имьфгнным

Таблица 4 '

Действие витаминизации на реакцию ГШ в ответ на 5ГА

|Всс-(Из них с утол-f Размеры кожной складки, мм

______!го (шепнем складки!"~ ■~г '1 !',„„„„„„~

Группа !к0- |2-мм и более 'gm^A *ДослГ"' g

■ 'S- • ' ■ ' jwttSSm- |

Контроль 21 8 38,l_10,60 6,2+0,16 7,9+0,21 1,7+0,15

^итами^иэация 41 ,26 63,4£7,52 6,2+0,15 8,2+0,19 2,0^0,13

- каротин 22 10 45,5+10,62 6,3+0,23 8,1+0,22 <.'l&p,16

- микровит А 19 16 84,2+8,37* 6,I±0,I9 8,3^.0,30 2,2^0,19**

х Р<0,01 xx P<0,05

ответом, так и по утолщению кожной складки. Эти данные совпадают, с данными Плецитого К.Д, <1984) о.действии витамина А на клеточное звено иммунной систем.

Была изучена свя^ь активности иммунного ответа в реакции ГЧЗТ с активностью Э-РОК (таблица 5).

Таблица 5 .

Распределение коров по активности реакции З-РОК в связи'с реакцией ГЧЗТ на ФГА

■ " .......■ ри—II — I—■ . . I ——— II

Утолщение кожной » Исследовано ¡Активность розеткообразования

складки, ми . ! коров ''■iподсчитано | из^нах' ' f ¡клеток г Э-PCh. %

0,5 - 1,0 13 2600 10;4+0,60

1,5 - 2,0 ^ .31 . СчЮО • • 12,3^0,42

' 2,5 и более 18 .3500 12,5+0,55

'..' .. : . Р<0.05

Из таблицы 5 nivwo, что у коров с пониженной реакцией на введение ФГА реакция Э-РСК была достоверно менео активна по ' сравнению с животными, у которых гиперчувствительно сть замедлен-.

ного типа была выражена ярче. Этот параллелизм изменения активности обеих реакций'показал возможность выявления коров с различной активностью иммунной систеШ по неспецифическому ответу на ыитогеи ($ГА), что практически легчо и быстрее осуществимо по сравнению с методом спонтанного розеткообразования.

Особенно большое значение моуод ответа на ОГА в реакции ЛОГ может иметь для выявления коров с врожденными или вызванными специфическими условиями г л^нодефициткыми состояниями.

. 3.3. Активность лизоцима сыворотки крови в'связи с витаминизацией

Лизоцим является важным фактором нвспецг-фической естественной резистентности организма; Активность лизоцима в крови коров контрольной и опытных групп была исследована до отела, через неделю и через месяц после него (таблица 6).

- Таблица 6

Влияние витаминизации на активность лизоцима сыворотки■

. '. , 1 " - ' Крови

|__ Сроки исследования ;

»До витаминиза-t . После отела _,

^УППа 1КГ I g-IO суток- | 25-35 суток

1 число!титр ЛИ-!числоJ■ ТИТР 1 число t титр

tкоров!зоцима \коров; лизоцимз ] коров ; лизоцима

Контроль .21 44,2^5,83 20 36,0±6,10 17 18,1+2,43 Витаминизация 41 45,7+3,94 ЭТ 30,2+3,01 33 30,1+3,32х

х Р<0,01

Из таблицы 6 видно заметное снижение лизоцишой активности сыворотки крови после отела у животных всех групп, особенно через месяц после отела при статистически достоверных различиях.

Из той но таблицы вцдна существенная статистически досго-

. .. . • . - le - ■.■■:■.. ■

серная разница (Р<0,01) в активности лизоцима между витамкнизи рованными и контрольными коровами через месяц после отела.. '

Учитывая,-что у большинства коров исследование крови через месяц после отела совпало с концом зимнестойдового периода (карт - апрель I9S5 года), когда содержание каротинами витамина А вкрови.било минимальным, можно с уверенностью сделать:вывод о благоприятном действии витаминизации на естественную резистентность коров. Этот вывод совпадает с данными других исследователей (Варяыгкн В.В., Вертянкииа Н.И.f 1936; Цишанин С.Ф., Ко валь М.П., 1905;Л1лецктый'К.Д., Лидак М.Ю., 1984;"Тарасова И.Н. 19б4).; . ' ' " ; ■ ' ..•":"■■'■' \ ¿" ... "■■"''■■'V.

3.4. Оизико-биол&гкческие свойства цервикального секрета' во epei/д течки у коров, их связь с обеспеченностью организма кпрсткнол «'витамином А и воспроизведением

Одна из возможных причин низкой результативности осеменений - несвоевременное Еведсние семени 'по: отношению.к овуляции. Поэтов больвое значение имеет лецекание биологически обоснован ных, эффективных и технологически приемлемых методов определения оптимального времени осеменения коров в' период течки.

С этой целью, а также для выяснешл путей действия микробного каротина и кикровита А на воспроизведение;было предпринято исследование фиэико-биологических свойств цервикальной .слизи, . вз/ггой во время течки. ' у

Эластичность слизи ранее определяли, при погащи точноi.:cpa, (ДенисоваС.В., I9OT). С целью усовершенствования исходного образца прибора m.его кодифицировали » присоединив к растягиваю-тему рычагу миниатюрный элактрокюторчик•с редактором глрки ДСМ-I/300-H-220' и китевую передач!' • что обеспечило, не только; более *

высокуюточностъ исследования вследствие равномерного растяжения образца слизи со скорость» 2,5 им/сек, но и большущ техиологич-

■ ' НОСТЬ. ' •.

Проникновение живчиков в цервикалъную слизь изучали, используя капилляры, заполненные слизь». В отличие от исходного метода (Братанов К., ТЬрньов А., 1974), несовершенство которого состояло в применении круглых капилляров, изготовленных вручную из пастеровских пипеток, ш разработали модификацию. Она состояла . в использовании параллельных пятиканальнцх капилляров промышленного изготовления длиной 6,0 см с внутренним сечением капилляра 0,3 х 0,4 мм, что сделало метод не только значительно более точ-' ним, но и обеспечило его высокую технологичность. Слизь насасы-'вали в капилляры при помощи шприца, соединенного с'ними тонкой ' резиновой трубочкой.

В микроскопе оценивали расстояние, на которое живчики поднялись за 20 минут (по самому дальне^ живчику), а также массовость проникновения живчиков в слизь, оцененную нами условно по 4-балльной системе: X балл - в каждом поле зрения верхней части капилляра не более одного поступательного подвижного живчика, 2 балла - кв более 2-3 живчиков, 3 балла - редкая стайка, 4 балла - густая плотная стайка живчиков.

Описанные методы исследования слизи были названы соответственно, эдастометрическим и пекетрометрическим.

. Результаты исследования связи ыахрусвосполнением дефицита витамина А в организма коров путем добавок к их рациону микробиологического каротина.или мнкровита А и физико-биологическими свойствами течковой цервшсальной слизи показаны в таблице ?*

Из таблицы 7 видно,-что витаминизация существенно повысила эластичность.и проницаемость слизи для живчиков, а также увели-

- ¡ы - ■■

чила число животных с оптимальной ее плотностьи^ причем действие микробного каротина на эти свойства было несколько более эффективным по сравнение с микровитом А.

' Таблица ?

Действие добавок к рациону коров каротина и микровита А на физико-биологические свойства цервикальной слизи в период течки ' . ■

Иссле-(Зластич-1Проницаемость 1 Плотность слизи довано|кость, {для живчиков > менее 1Г008

Группа

коров {СЛИЗИ ! см

I ■

! )

дальностЫкассо-!коров1коров с плотом . !вость !всего!ностью менее . * {баллы Г Г 1-006 ■ ! . ' • I !все-1 <г. ! Г ■ 1го ? *

Контроль 29 в,3+0,07 3,1+0,52 1,0 19 7 36,%

?итакинизация 44 7,9+0,54 4,7+0,35 2,3 ' 36 20 55,6+ всего); ■ 8,28 '

- каротин 23 8,7+0,68* 5,4+0,43** 2,8 20 12 60,■

■ ' 10,95

- ыикровит А 21.7,0^6,05 3,9+0,54 1,8 16 8 50,0^

: . „ ■ "" ~ •• • •• 12,50 ..." х Р<0,05 хх Р<0,01

Сходные данные об улучшении* выживаемости живчиков в теплее-., вой слизи коров, поучавших с кормом добавки бета-каротина, были получены также Е1»бко »1. (1984).

.' В таблице 8 показаны результаты изучения связи эластичности течковой:цервикальной слизи с ёопроницае^юстьп для живчиков;

Из таблицы 8 ясно, что все 3 соПостевляёные свойства течковой цервикальной слизи тесно связаны.'между'собой: с увеличением эластичности'возрастает проницаемость;слизи для живчиков,.сыра-, жениая в расстоянии,, преодоленном живчккгп'-ивкапиллгтрак* а также в массовости проникновения. ; ■

Значительная розница в свойствах церв»хальноЛ слизи била обнаружена* ме^ру коровами;.которые.стали после осеменения стель-

Таблица 8

Связь эластичности и проницаемости цэрвикальной слизи для живчиков в капилляры

Эластичность j Число • | Проницаемость слизи для живчиков слизи, см ^ • коров } Расстояние, см ; Массовость, баллы

0,1 - 3,0. 15 2,0±0,с0 . 1,0+0,21

3,1 - 6,0 19 2,9±0,53 1,6*0,31

6,1 - 9,0 21 5,0jtp,«7 2,8±0,2?

9,1 и более ; 18 5,,51х 2,9*0,29*

; х Р<0,001

ными и которые остались нестельными. ■ '

Известно, что фолликулогенез зависит от регулирующей функ-. ции гипофиза и в то же время влияет на половые пути самок, регулируя секрецию яйцевода, матки, шейки матки и влагалища эстрогенами, соотношение и количество которых меняется в зависимости от зрелости фолликулов.

: В связи с этим возможны й пути выявления степени зрелости -фолликула без вскрытия животных. Один из них - прощупывание яичника через стенку прямой кишки для определения размеров и состояния фолликула, а второй - исследование изменений свойств выделений половых путей коров. Обе эти возможности были исследованы в сравнительном аспекте в поисках выбора оптимального времени осеменения (таблица.9?.; ' , 'Из таблицы 9 видно эначитбльное увеличение результативности осеменения коров по мере повышения эластичности (растяжимости) цервикальной слизи и ее проницаемости для живчиков. .

Положительная связь между эластичность» цервикальной слизи и результатами осеменения была показана' и/ранез (Денисова C.B., 1967; Жаркин В.В., 1967).

/ Таблица 9

Зависимость результатов осеменения от физико-биояогиче-ских свойств цервикальной течковой слизи

Критерии 1 Границы- | Число }Из них стали стельными у I ¡ коров гвесгог . %

Эластичность * 0 - 3;0 15 0 0 ■

слизи, сы 3,1 - 6,0 19 2 ..'..- 10,5+7,03

6,1 - 9,0 21 Ю . 47,6^10,90

9,1 и более 10 12 66,7^11,11*

Проницаемость . О - 1,5 16 0. О

слизи для 1,6 - 3,0 .9.1 11,1+10,47

живчиков, см 3,1 - 4,5 . 14 3 ; 21,4+10,96:

4,6 - 6,0 16 9. 56,^12,40

6,1 и более 10 II ^ 61,1^11,49*

Плотность более 1,000 . 7 ' 0 0 .

слизи равна 1,006 • 21 7 ' ЗЗ.З^ХО'.гв

менее 1,0С8 27 1С 59,3+9,46

. .. х РС0.001

Ношй критерий оценки физико-биологических езейетв церви- ■ кальноЯ слизи, представяенчыЯ в данной работе - протщаемость' слизи для живчиков.в пдоскопараллелыаи пяткканальньге капиллярах оказался высокоэ^фектигныг/.

Сравнение результатов изменил'свойств цервикальной слизи, для выбора оптимального времени осеменения в период точки с данными ректального определения степени зрелости фолликула показало более высокую эффективность предлагаем« ь-стодов.;

Так, при эластичности слизи,' прердазшэй 9,1 см, проницяе-. кости слизи для живчиков, прорывамией 6,1 см, рлзультйтирпость осе)№нения составляла 61-С7#. В-то. ж^ времл из коров, у которых в яичнике ректально ■прошупкБЯлея крупник 'флгжту^уюскп (¿олл:1кул, етсльшми стали лить яа'сотяыг.

- 23 -

Эти сопоставления дали основание предложить метод определения эластичности цервикальной слизи или ее проницаемости для жив^ чиков как эффективные и технологически рациональные в условиях современного культурного животноводства способы определения оптимального времени осеменения. Особенно эффективно может быть их • ^ использование в стадах, где животные не пользуются моционом, и где невозможно определить оптимальное время для осеменения по * рефлексу неподвижности.

Экономическая эффективность применения микробного каротина для улучшения воспроизведения у коров составила 77,90 руб., а микровита А - 61,Й> руб. на животное в год. Следовательно, оба препарата оказались экономически высокоэффективными.

ВЫВОДИ ■ ■

1. Восполнение дефицита каротина и витамина А в организме коров в течение сухостойного и посяеотельного периодов путем добавок каротина микробного синтеза или микровита. А значительно повышает эффективность воспроизведения, укорачивая сервис-период, снижая ицпекс осеменения, обеспечивая благополучие отелов*

2. Действие восполнения дефицита каротина реализуется путем нормализации специфического именного состояния организма, выявляемого в реакциях Э-РОК и ГЧЗТ с ФГА, а также положительного влияния на естественну» резистентность и физико-биологические свойства течковой цервикальной слизи.

3. Отклонения активности иммунного ответа организма коров от средней норш через месяц после отела как в сторону повышения, так и понижения (выраженные в численности Э-РОК), совпадают со значительным удлинением сервис-периода.

4. Эластичность цервккальной слизи и ее проницаемость для живчикоб - надежные тесты определения оптимального времени осо-

менония высокопродуктивных коров в период течки при беэвыгульном их содержании. ■ * -::

5. Реакция ГЧЗТ в ФГА, результаты которой совпадают с активностью спонтакнагорозеткообряэования, отражает состояние иммунной систеш у коров.

: ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДДОЙЕНИЯ

1. Для сокращения сервис-периода, снижения индекса осемене- . ния и обеспечения благополучия отелов гфи дефиците в организме коров каротина и витамина А восполнять этот недостаток добавлением

к рациону каротина микробиологического синтеза или микровита Л,

2. Оптимальный период течки.и охоты для осеменения высокопродуктивных коров при безвыгульном.их содержании выявлять путем использования пенетрометрического или эдастометрического тестов.

3. Для выявления животнесс с отклонениями от норш активности иммунного ответа организма использовать реакцию ГЧЗГ с ФГА.

Основные положения диссертации опубликовании. следующих ра- '. ботах: :'.'*'':.'' :.'. "■ ' -■'-..'-..'

1. Скопец Б.Г. Влияние витамина А и бета-каротина на активность иммунного ответа и благополучие отелов // Животноводство. -. 1986. I. - С. 49-50.

2. Соколовская И.И., Скопец Б.Г.*, Скопец А.Г., Векслер Х.Ц.' Реакция гиперчувствителькости замедленноготипа с 4отргемаггл1ь ... тинином у коров при введении в рацион вита кина А // Доклады;' ВАСХЛИЛ. - 1996. - # 6. - С. 31-33. л ''-'^

" 3. Соколовская ИЛ., Скопец Б.Г. Загпсикость эЭДективности • осеменения коров от флэико-биологических С1'6г*стЕ;церв1асальноГ..слизи в период течки // Сельскокозяйствешпя биология. -1006. .-* 12. - С. 60-72. .

Скопец Борис Гирвевич . Влияние микробного каротина и микровиса А па воспроизводительные функции норов г л связи о активностью ныиунных реакций

Подписано з печать 30.ОЗ.87..ЯТ 05090 Объем 1,0 уол.пвч.л.» 0,9 уч.-иад.л. . Форма! £0x84/16. Бумага пвочая. Тирах 100 акв. Заказ ft 905. Бесплатно.

Издатель: Ввеоовзный ордена Трудового Краового Внанэни научно-иооледовательснкй институт животноводства, X420I2,.Московская обл., Подольский р-н, п.Дуброввцы.

Отпечатано на ротапринта Управления научно-техничеоной информации Госагролроыа Латвийской ССР, 226168, ЛССР, г.Рига, пл.Peonyблики, 2.