Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВЛИЯНИЕ ГРАНУЛИРОВАННОГО ВМЕСТЕ С ПОЛИМИНЕРАЛЬНОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ «ЭКОС» КОМБИ­ КОРМА НА ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС, ГИСТОСТРУКТУРУ И МОРФО-ФУ НАЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "ВЛИЯНИЕ ГРАНУЛИРОВАННОГО ВМЕСТЕ С ПОЛИМИНЕРАЛЬНОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ «ЭКОС» КОМБИ­ КОРМА НА ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС, ГИСТОСТРУКТУРУ И МОРФО-ФУ НАЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ"

Я-ШЯ

На правах рукописи

ЗАКИРОВА Людмила Робертовна

ВЛИЯНИЕ ГРАНУЛИРОВАННОГО ВМЕСТЕ С ПОЛИ МИНЕРАЛЬНОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ «ЭКОС» КОМБИКОРМА НА ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС, ГИСТОСТРУКТУРУ и МОРФО-ФУ НКЦИОНАЛ ЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ

03.00.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Дубровицы-2003

Рабата выполнена в Белгородской государственной сельскохозяйственной академии

Научный руководитель

доктор биологических наук, профессор ШАПОШНИКОВ Андрей Александрович

Научный консультант

кандидат биологических наук, доцент МУСИЕНКО Николай Алексеевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор НАУМЕНКО Павел Андреевич;

кандидат биологических наук КОЗУБОВА Лариса Алексеевна

Ведущее учреждение

Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии биохимии н питания сельскохозяйственных животных (г. Боровск)

Защита состоится « X » и№ь(Л - г- часов на засе-

дании диссертационного совета Д 00о.015.У> . ■■■■■ :<г**1ском государственном научно-исследовательском 1;-, . -• ->водс5 1 по адресу: 142132, п. Дубровицы Подольского района Московской о*, ласти.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан » „С¿/У С_2003 г.

Ученый секретарь диссертационного со:

'/ '. - ■ чтва

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРСТИКА РАБОТЫ

ТСМЫ* Промыиу,енное «™ВДВДство является одной из интенсивных и динамичных отраслей сельски хомйсгва. Его развитие во все»,«р, определяется прежде всего высокой шгга^ьностьюТГ^ скими качествами получаемой продукции. Более того, мясо птиц сгшос^с^ наиболее экономичным источникам белка животного лроисх^еГ

Однако из-за внедрения промышленной технологии ведения епши «№« целый ряд проблем в животноводческих комплексахСо^е^ л е^Г Жяитик Н3 ученных площадях, круглого« «~ 2аКРЬ!ТЬ,Х """»к™» « спико.«, или клеточным содержанием, использование кормов промышленного производства и другие факторы Сказались на оотвгопт здоровья и конституция птицы, гл^оком нару-

"¿Тол^Гй ° ' ^^ Н3 СШ1ЖеНЙ" 1плсн„По-

усло8ИЯХ °°Н0ВКЬ!М связующим звеном организма животных с

^ Г1адтому тчсст&У ^рма и его полноценности необходимо уделять особое внимание.

Физически сгрукгура корма имеет немаловажное значение, как и сбалансирование его по питательным и биологически активным вешеепши

Я 5ффсКТИЙКООТ1; «-ЭДЬЗМЙКИ, Репных КСибйКСрМУЗ

гел о™^;. имеют рад преимуществ ие-

} иск71к>чается сморм.чедкя«.« киппият» м врак ^ГГ™ Р°ВКИ/ Рад,аЧИ; 2) Птаца нс имеет возможности выбора отдельных частц комбикорма; 3) не нар^аегся сбалансированность кормления-4) уменьшается потери корма в виде россыпи и пыли В гт^лпх —Л-храняются биологически шегшные вещества, в процессе Аннулирования за

с^ни^орГ"0^ а№1ШтТеЛЬНЫе Вещества " санитарное

В настоящее время для придания гранулам комбикорма прочности пре-дс^рагцеиия слежизаемости комбикормов, а также для борьбы с поражением зерновых кормов микотоксинами начинают применять вяжущие вещества.

Ет'Т* МТГ 6ЫТЬ !1Са0ЛЬ30СХ1а пояимнкерашш кормовая лобавш (ПМКД) «Экое». Она получена на основе глинистого сырья месторождений Белгородской ооласти и содержит в моем сопгше в средам до 50% диоксида кремния. Добавка обладает выраженными адсорбционными, ионообменными и каталитическими свойствами и не является токсичной для животных Предыдущими исследованиями добавки на лабораторных и сеяьскохозяйст-

тг^Г^ ес ПОЛОЖГГГелшое в'™е «а живой организм

д л1РУ ^.Шапошников, 1998; АА.Присный, И.Н.Байцур, 1999-

А.А. Беляева, 2000; А.В.Посохов, 2001; ОД Чернявских, 2002).

«яиГ ' ШКД <<ЭК°С>> 6 гРанУл ированиого комбикорма на ср-ганизм цыплят не дччгнеиа^___^ ^

ЦНБ МСХА

Цель и задачи исследования. Цель исследования - разработка состава гранулирование го с ПМКД «Экое» комбикорма с оптимальными физико-химическими свойствами и изучение его влияния на физиолого-биохимкческий статус, гисто структуру тканей и органов, продуктивность и качество получаемой продукции цыплят-бройлеров б условиях их промышленного содержания.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

- установить оптимальную дозу препарата «Экое» при гранулировании комбикорма с необходимыми физико-химическими свойствами;

- испытать опытные партии комбикорма в рационе цыплят-бройлеров;

- исследовал, биохимические показатели крови, характеризующие естественную резистентность организма цыплят, белковый, лнпидный и минеральный обмен;

- определить действие модифицированного комбикорма на содержание витаминов в крови, печени и мясе цыплят,

- определить концентрацию тяжелых металлов в тканях и органах цыплят,

- изучить морфо-функциональиые характеристики клоакальной сумкн, селезенки, печени, кишечника, щитовидной железы и мышц;

- учесть основные хозяйственно-экономические показатели:

а) сохранность цыплят, %;

б) прирост живой массы цыплят еженедельно, г;

в) расход комбикорма на 1 кг прироста живой массы цыпленка, кг;

г) расход комбикорма на 1 голову в сутки, кг.

Научная новизна. Впервые дано научное обоснование применения ПМКД «Экое» как дополнительного компонента при гранулировании комбикорма для промышленного птицеводства, обеспечивающего повышение его биологической ценности и продуктивного действия; а также неучено влияние модифицированного комбикорма на физиолого-биохимический статус и гис-тоструктуру органов и тканей цыплят-бройлеров.

Практическая значимость работы. Разработан состав гранулированного комбикорма с оптимальным размером гранул, устойчивого к механическим воздействиям, слеживанию и развитию в нем патогенных грибов. Установлено положительное влияние модифицированного комбикорма на сохранность н продуктивность цьишят-бройлероа и повышение биологической ценности мяса. Использование модифицированного комбикорма ведет к снижению затрат комбикорма на единицу продукции.

Положения, выносимые на защиту,

1. Скармливание цыплятам-бройлерам гранулированного с полиминеральной кормовой добавкой «Экое» комбикорма повышает живую массу птицы и уровень иммунной защиты ее организма.

2. Положительное влияние модифицированного комбикорма заключается в снижении концентрации кадмия н свинца в крови птиц.

3. Под действием модифицированного комбикорма улучшается структурно-функциональное состояние гепатоцитов н клеток лимфондной ткани птицы.

4. Практические рекомендаций по использованию гранулированного с ПМКД «Экое» комбикорма в птицеводстве.

Апробация работы.

Основной материал н результаты исследований работы доложены и получили положительную оценку:

-на VII Международной научно-производственной конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, март 2003);

- на ежегодной научной конференции преподавателей, аспирантов и студентов Белгородского госуннвсрсигега (Белгород, апрель 2003);

• на совместном заседают кафедр физиологии и фармакологии Белгородской государственной сельхозакадемии и кафедры биохимии и фармакологии Белгородского госунивереитета (Белгород, май 2003);

- на заседании лаборатории биохимии ВГНИИ животноводства (п.Дубровицы, Московская обл., май 2003).

Структура 11 объем диссертации. Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литература по теме исследования, описания тзтеркмла и мст^дод исследован««, рс.чультмтсв и их обсуждения, выводов, предложений производству, библиографического списка. Библиографический список включает источников, в том числе 81 - иностранный. Работа содержит таблицы и рисунки.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для достижения цели и решения поставленных задач в условиях ЗАО «Шебекинский завод кормоиых концентратов» н ЗАО птицефабрика «Агрин» Шебекинского района Белгородской области был выполнен производственный опыт.

На первом этапе экспериментальных работ определяли оптимальную дозу «Экоса» при гранулировании комбикорма. При этом учитывали механическую прочность гранул при транспортировке и хряненим. Затем приготовили одну партию гранулированного комбикорма по традиционной технологии, а вторую - с использованием «Экоса» в дозе 2% от общей массы корма.

На втором этапе экспериментальных работ было сформировано две группы кондиционных суто'шых цыплят-бройлеров кросса "Смена™ по 900 голов в каждой. Продолжительность опыта составила 49 суток. Схема опыта представлена в табл. 1.

В течение опыта учитывали по общепринятым методам следующие показатели: ежесуточно - поедаемость комбикорма, сохранность, расход комбикорма на 1 кг прироста массы тела цыплят и расход комбикорма на 1 голову в сутки; еженедельно - живую массу и ее приросты.

Материал для лабораторных исследований отбирали при убое цыплят-бройлеров в 49-суточном возрасте по 4 головы из каждой группы. При этом определяли живую массу каждой ншиы, массу потрошенных тушек и внутренних органов.

Таблица 1

Схема опыта

Группа животных Jfc группы Количество ЖНВОТВЫ1, ЦГГ Продолжительность опыта, СУТКИ Рацион

Адавтапвовяый период

Подопытные цьшлята-бройлеры I-1I 1800 13 комбикорм ПК-5

Основной период опыта

Контроль I 900 23 комбикорм ПК-5

- 13 комбикорм ПК-6

Опыт II 900 23 комбикорм ПК-5+«Экос»

_ 13 комбикорм

В пробах комбИЕопмя определяли: сухое вещестьо — гран неметрическим методом; золу - методом сухого озеленяя по А .И.Ефремову; сырой жир - по C.BJPyтаковскому; сырой протеин — расчетным методом; сырую клетчатку -по Ганнебергу-Штоману; без азотистые экстрактивные вещества (БЭВ) - расчетным методом; кальций - титрометрическим методом по де Ваарду; фосфор - колориметрически с ванадат-молнбденовым реактивом.

Энергетическую питательность кормов рассчитывали на основании данных их химического состава, руководствуясь общепринятыми методиками (АЛ .Калашников, Н.И.Клейменов, В.В.Щеглов, 1993).

В сыворотке и цельной крови определяли: общий белок - колориметрически по реакции с биуретовым реактивом; белковые фракции - методом электрофореза на бумаге; глюкозу - методом цветной реакции с ортотолуи-дином; триацилглн церолы — колориметрически; холестерол - методом, основанным на реакции Либермана-Бурхарда (метод Илька); общие липиды, фос-фолипиды, кальций - титрометрическим методом по Ваарду; фосфор - колориметрически с вапздат-молнбденовым реактивом; витамин А - снекхрофо-тометрическн; витамин Е - по модифицированному методу Биери; витамин С — методом, основанным на восстановлении аскорбиновой кислотой йоднова-тистого калия; количество эритроцитов, лейкоцитов и лейкоцитарной формулы - с помощью ГЦМК-3; гемоглобин - калориметрически; цветной показатель, содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ) - расчетным методом; лизоцимную активность сыворотки - по ВГДорофейчуку (1968); бактерицидную активность сыворотки крови - с помощью тест-культуры Micrococcus Lysodcikticus (использовалась суточная культура); концентрацию иммунного глобулина в сыворотке - нефелометр ическл.

В печени определяли: сухое вещество - гравиометрическим методом; золу - методом сухого озоления по А.И.Ефремову; сырой жир - по С.В.Ру таковскому; сырой протеин - расчетным методом; кальций - титро-метрическим методом по де Ваарду; фосфор - колориметрически с ванадат-молибденовым реактивом; нитраты - колориметрическим методом с использованием реактива Гисса; витамины А и Е - методом спектрального анализа; витамин Вз - флюорометрическим методом.

В грудной мышце определяли: сухое вещество - гравиометрическим методом; золу - методом сухого озоления по А.ИЛфремову; сырой жир - по С.В. Ру таковскому; сырой протеин - расчетным методом; общий белок - по метод)' Къельдаля; кальций - пггрометрическнм методом по де Ваарду; фосфор - колориметрически с ванадат-молибденовым реактивом; оксипролин -по Ньюмену и Логану с применением методики кислотного гидролиза по Вербицкому; триптофан - по методу Спайза и Темйерза в модификации Г&з-лера (1958); белково-качественный показатель (БКП) - расчетным методом по отношению триптофана к оксипролину; нитраты - колориметрическим методом с использованием реактива Грисса.

В бедренирй kqc-ги определяли: сухое вещество - гравиометрическим методом; золу - методом сухого озоления по А.И.Ефремову; кальций — три-лоном етрическнм методом; фосфор - колориметрическим методом с образованием фосфорно-молибденовой КнСЛОТЫ.

Железо, марганец, цинх, медь, кадмий и свинец во всех изучаемых объектах определяли мегодом пламенной атомно-абсорбционной спектроскопии.

Для гистологического изучения от трех убитых цыплят из каждой группы отбирали кусочки печени (левая малая доля), мышцы голени, тонкого кишечника, щитовидной железы; селезенку, клоакальную сумку; весь материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина с последующим изготовлением препаратов согласно методам классической гистотехники (Д.С.Саркисов, Ю.Л.Перов, 1946). Парафиновые срезы толщиной 5-10 мш окрашивали гематоксилином и эозином, по Маллора, альциановым синим и азуром II.

Микроскопические исследования, микрометрию, ф ото до кументирован не материала проводили на микроскопе LOMO Микмед-2 при помощи современной компьютерной программы «ВндсоТесТ - Масгср-Морфологая».

Полученный цифровой материал был обработан статистически с использованием современной компьютерной программы Excei. При определении достоверности разницы между показателями контрольной и опьггной группами был использован аргумент Стьюдента и таблицы Фишера-Снедока по вычислению критерия достоверности. Результаты рассматривались как достоверные, начиная со значения р0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Химический состав и потребление комбикормов цышипгамн-Фройлерама

По результатам фактического потребления комбикормов и их химического анализа был произведен расчет питательных, минеральных и биологически активных веществ, поступающих в организм птиц контрольной и опытной групп (табл. 2).

Таблица 1

Потребление комбикорма я вмдяшш в его состав компонентов

(г на I голову в сутки)

"Воадяст (недели) Показателям^. I г 3 4 5 6 7

Количество корма I 22,1 39,9 75,6 И,4 123,0 148,0 174,0

II 22,1 38,8 72,0 94,4 121,0 144,0 174,0

Обменная □пергая, Дж I 0,300 0,542 1,026 1,335 ¡,670 2,001 2,362

11 0,304 0,533 0,989 1,297 1,667 1,980 2,384

Протеин I 4,58 8,2« 15,7 20,4 25,5 30,5 36,1

II 5,56 9,75 18,1 23,7 30,5 36,2 43,6

Жир I 0,74 1,33 2,52 3,28 4,10 4.91 5,80

II 1.25 2,20 5,35 6, «,17 0Я4

Клетчатка I 1,02 1,85 3,50 4,56 5,70 б",83 8,06

II 0.64 1,13 2,10 2,75 3.53 4,19 5,05

БЭВ 1 12,5 22,7 42,9 55,8 69,8 83,6 ЧХ,7

II пл 19,6 36.4 47,8 61,4 72.9 87,8

Кальций I 0,25 0,45 0,85 1.11 1,39 1,67 1,97

II 021, 0,45 0.84 1.10 1,42 1,69 2,03

Фосфор 1 0,19 0,34 0,64 0,83 1,04 1Д4 1,47

II 0,20 0,35 0,64 0,84 1,08 1,29 1,55

Натрий I 0,05 0,09 0,17 ОДЗ 0,28 0,34 0,40

Л 0,05 0,09 0,17 0,22 0,28 0,33 0,40

Лизин I 0,28 0,50 0,95 1,23 1,54 1,85 2,18

!1 0,28 0,49 0,90 1,18 1,52 1,81 2,18

Метионян + цистип I 0,19 0,34 0,64 0,83 1,04 из 3,47

11 0,19 0,33 061 0,Х0 1,22 1.47

Железо I 0,002 о,т 0,008 0,010 0,012 0,015 0,017

II 0,002 0,004 0,007 0,009 0,012 0,014 0,017

Марганец I 0,022 0,040 0,076 0,098 0,123 0,148 0,174

II 0,022 0,039 0,072 0,094 0,121 0,144 0,174

Цинк I 0,011 0,020 0,033 0,049 0,062 0,074 0,087

I! 0,011 . 0,020 0,036 0,047 0,061 0,072 0,087

Меда. I 0,0006 0,0010 0,0019 0,0025 0,0031 0,0037 0,0044

II 0,0006 0,0010 0,0018 0,0024 0,0030 0,0036 0,0044

Представленные данные позволяют заключить, что рацион цыплят-бройлеров обеспечивал поступление в их организм необходимое количество белка н незаменимых аминокислот, липидов, макро- и микроэлементов. Поступление кадмия и свинца не выходило за рамки ПДК.

Динамика живой массы теля н сохранность цылл ет-вройлеров при скармливании препарата «Экое» в составе гранулированного комбикорма

Введение в рацион цыплят-бройлеров модифициро ванного комбикорма способствовало повышению приростов массы тела и сохранности птиц. Установлено, что у птиц обеих групп наблюдалось постоянное наращивание живой массы тела и до 4-х недельного возраста оно происходило практически без заметной разницы; далее и до конца опыта напряженность роста цыплят опытной группы была выше (рис.1). Среднесуточный прирост за весь период опыта составил в контрольной группе - 33,37 г, в опытной - 35,37 г, что на 5,99% больше. В конце опыта живая масса птиц опытной группы была достоверно выше, чем в контроле, на 5,4% (р<0,05).

МШ1, г

Рис. 1. ДкнамикаживоП массы цыплят-бройлеров.

Из представленного на рис. 2 графика видно, что сохранность птиц опытом группы на протяжении всего опыта была выше, чем в контрольной. В конце опыта сохранность птиц в контрольной и опытной группах составила 85,13 и 91,89% соответственно.

Р и с. 2, Динамика сохранности дьтлят-бройлеров.

Влияние модифицированного комбикорма на морфологический, фшнолого-биохнмняескнй н иммунный статуе цьшлат-бройлеров

Исследуемый комбикорм не оказал существенного влияния на показатели морфологического, биохимического состава и содержание гемоглобина крови цьшлят-бройлеров 49-суточного возраста. Как в контрольной, так и в опытной группах данные показатели находились в пределах физиологической нормы (И.АХолотников, Ю.В.Соловьев, 1980; Г.П.Мелехин, НЛ. Грн-дин, 1977) и не имели достоверно значимых различий (табл.3).

Таблица 3

Бнмямичгскнй состав крови к покижтелн общей резистентности _цыплут-бройлеров 49-<утотяого воц»ста_

Показатели, (Я. измер. Группы опыте Ы

I и

Общий белок 39,4014,75 41,8811,88 0,49

Фракдии бедка, %: альбумины 42,5315,13 45,8212,84 0,56

а-глобулнны 14,9Ш,88 9,5411,46 1,68

(^-глобулины 15,5510,50 11,1811,94 2.18

7-глобучвны 26.9645Д4 33.46il.68 1,18

Альйумино-глобулнновыа индекс, ед. 0,7 0,э -

Иммуноглобулины, ея. 7,0211,39 7,82±0,69 0,52

Лизоаимная ысгивиостъ сыворотки крови, % 19,9610,54 20,0110.66 0,05

БДСК, % 44,7815,10 72,211,38* 4,48

Обшис липиди, 7,12±0,15 7,21*0,16 0,39

Фосфолшшды. г* л"1 1.49М.09 2,27*0,28 2,70

Холсстсрол, г* л"1 ],5510,17 1,69Ю,11 0,69

Тряаияяшшеролы, г* л"1 1,07 ±0,10 1,3740,22 1,21

Глюкоза, мыоль'л"1 9,80±0,80 12,6811,12 2,01

Витамин А, икмоль*л'' 66,09+8,97 64,2315,75 0,17

Витамин Е, мкмоль*л"' 236,80421,28 397,01±78,18 1,42

Витамин С, ммогп>*л*1 129,45119,46 157,27+20,04 2,52

Здесь и далее: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - £¿0,001.

Достоверно изменялась лишь бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) в 1,6 раза (р<0,05) в пользу птиц опытной группы. Поскольку установлено, что БАСК является отражением финальных процессов, вызванных комплексом входящих в состав сыворотки крови гуморальных факторен естественной резистентности (А.И,Болотников, Ю.И.Конопатов, 1993), то данное обстоятельство свидетельствует о повышении защитных свойств организма птиц опытной труппы.

Скармливание цыгшятам-бройлерам модифицированного комбикорма не оказало отрицательного влияния на минеральный состав крови цьшлят-бройлеров опытной группы (табл. 4). Существенных и достоверно значимых межгрупповых различий в концентрации таких важных макро- и микроэлементов, как кальций, фосфор, железо, марганец, цинк н медь не наблюдалось.

Особый интерес представляет действие модифицированного комбикорма иа концентрацию в крови кадмия и свинца как наиболее токсичных элементов, поскольку именно эти элементы, попадая в организм человека с продуктами питания, в частности, с мясом и печенью птицы, могут вызывать глубокие нарушения обмена веществ и необратимые поражения тканей и органов.

В наших исследованиях в крови цыплят-бройлеров опытной группы произошло достоверное снижение концентрации кадмия на 20,0% (р<0,05) и свинца на 18,8% (р<0,01) по сравнению с контрольной группой.

Таблица 4

Минеральный состав в крови 49-сугочпых цыплят-бройлеров, ммйль1л*1

Покаителн, пл. тигр. Группы опыта td

1 И

Калышй 5,36±0,06 5.01 ±0,21 1,57

Фосфор 1,65±0,08 1,50±0,09 1,25

Железо 5,72±0,Ю 5,95±0,10 1,63

Марганец 0,00310,0001 О,ООЗ±0,ООО2 0

Цинк 0,074±0,002 0,076±0,009 0.22

Меда ОД13±0:0005 0,033±0.0003 0

Кадмий 0,0005±0,00001 0,000410,00002* 4,47

Свинец 0,0016±0,00003 0,0013i0,00001" 9,49

Возможная причина вышесказанного в том, что ПМКД «Экое», входящая в состав модифицированного комбикорма, имеет размеры частиц от 0,03 до 1000 мкм и может частично задерживаться между ворсинками кишечного эпителия, сорбируя токсичные молекулы и ионы (Лаврова О.Б., 1998). Аналогичные данные по снижению концентрации кадмия и свинца в крови телят в результате применения сорбентов получены А.В.Посоховым с соавторстве (2000), у кур-несушек - С.Д.Чернявских (2002). Также в опытах in vitro доказана селективная сорбционная активность кремнийсодержащих соединений, в том числе и «Экоса», по отношению к катионам свинца (В.А.Кокорев, А.С.Федин, С.Д.Маркпн, 1995; Н.Г.Габрук, 1999; А.А.Шапошников, А.Ю.Хорошевский, 2002).

Биохимические изменения в печени цыплят-бройлеров

В табл. 5. представлены результаты биохимического анализа образцов печени цыплят-бройлеров 49-суточного возраста контрольной и опытной групп.

Установлено, что содержание сырого протеина в печени птиц опытной группы достоверно повысилось по сравнению с контрольной группой на 8,9% (р<0,05). Это свидетельствует о положительном влиянии модифицированного комбикорма на обеспеченность птиц опытной группы пластическим материалом, особенно в период их наиболее интенсивного роста и развития.

Химически! состав печени цыплят-бройлеров

Показатели, ад. ммер. Группы опыта М

I II

Сухое вещество, г*кг"' 273,6318.89 293.6ftt0.40 2,24

Сырой протеин, Г*кт"1 238,3314,64 259.50+2,20* 4,12

Нитрат-даны, мг*кг"' 25,4811,38 21,45±0^9 2,82

Витамин А, мкг*кг"' 93,7415 ДЗ 118,63111,28 2,00

Витамкл Е, мг'ет"1 72,6310,33 90,8(№0,ВЗ 2,04

Витамин Вг, мкг'кг*1 30,71 ±1.82 32^11.02 0,78

Кальций, г* кг*1 3.0210,02 3,3410,07* 4,28

Фосфор, г* кг"1 1,4010,09 1,5610, И 1,08

Железо ыг*кг1 70,7313,55 85.70tt2.88* 3,27

Марганец, мг*кг"1 0.48+0,02 0,47±0,01 0.57

Цинк, мг*кг"' 24,98±0,80 27,2910,35 2,65

Медь, мг*кг'' 1,94±0,05 2,2110,11** 38,4

Кадмий, мг*кг"' 0,05610,005 0,05610,005 0

Свнвед, мг*кг1 03310,02 0,ЗЗЮ,04 0,31

Достоверное увеличение кальция в 1,3 раза(р<0,05) в печени птиц опытной группы по сравнению с контролем существенно не изменяло кальций-фосфорного отношения: эти элементы находились в нормальных, с точки зрения физиологии и биохимии, пределах -1:3.

Минеральный состав печени птиц контрольной н опытней групп существенно не отличался, однако произошло достоверное увеличение концентрации железа и меди на 21Д (р<0,05) и 13,9 (р<0,01)% соответственно, по сравнению с контролем. Поскольку содержанке этих элементов в печени является одним из критериев обеспеченности ими организма птиц, то данное обстоятельство рассматривается нами как положительный момент применения модифицированного комбикорма в рационе цыплят-бройлеров.

Биохимические изменения в грудной мышце цыплят-бройлеров

Результаты химического анализа образцов грудных мышц птиц контрольной и опытной групп представлены в табл.6.

Скармливание модифицированного комбикорма привело к статистически достоверному повышению количества триптофана на 10,9% (р<0,05) и снижению уровня оксипролина на 13,0% в белке грудных мышц цыплят-бройлеров опытной группы, по отношению к контролю. Поскольку триптофан характеризует отложение в мышечной ткани хорошо усвояемых сарко-плазматнческих белков, а оксипролин обусловливает отложение труднопере-вариваемых и неполноценных коллагеноподобных белков стромы (ИТ. Григорьев, БД.Кальницкий и др., 1970), то мы можем говорил, о повышении питательной и биологической ценности мяса птиц опытной группы, что подтверждается достоверным увеличением уровня белкового показателя качества мяса (соотношение триптофана к оксипролину) на 26,3% (р<0,05) в пользу цыплят-бройлеров опытной группы.

Химический состав грудной мышцы цыплнт-бройлсров 49-суточного возраста

Показателя, ед. тмер. Группы опыта 1(1

1 и

Сухое вещество, г* кг"1 274,33± 1,76 268ДЗ±4,82 0,87

Сырой жир, г*кг1 20,70±3,47 16,67±2,03 0,46

Сырой протеин, г*кг"1 241,бЗ±1,92 239,33±3,16 0,62

Нитрат-ионы, % 14,30±0.69 12,74±0,69 1,60

Оксиироиин, % 0,23;Н>,01 одао,о! 2,35

Триптофан, % и?±0,01 1.52+0,02* 4,77

Беяково-качественный показатель (БКП), ед. 6,0140,41 7,б2±0,12* 3,30

Железо, мг'кг*1 19,57Н),47 19,22±0.20 0,68

Марганец, мт* кг"1 0,14810,003 0,15040,05* 3,78

Цинк, мг*кг1 9,04Ю,03 9.541:0,12* 3,76

Медь, кг'кг"' 0,48±0,06 0,59±0.04 1,68

Кадмий, мт*кг1 0,039+0,001 0,039+0,001 0

Свинеа. мг*кг"' 0.274±0.017 0,270+0-004 0,39

Значительных изменений в минеральном составе мяса птиц опытной и контрольной групп иами не установлено. Достоверно различались лишь концентрация марганца и цинка- в мясе птиц опытной группы их было на 1,35 и на 5,53% соответственно больше, чем в контроле.

Биохимические изменения в костной ткани цыплят-бройлеров

Состав костной ткани служит достаточно надежным критерием обеспеченности организма минеральными веществами (БД.КальницкиЙ, 1985). Ввиду этого по окончании эксперимента был проведен химический анализ бедренной кости цыплят-бройлеров (табл.7).

Таблица 1

Енох ими чески* показатели бедренной кости цыплят-бройлеров 49-суточного возраста__

Показатели, ед. нзмер. Группы опыта и

Е Л

Сухое вещество, г*кг"' 471,23±4,01 480,80± 16,68 0,56

Сырая зола, г*кг"' 204,47+14,9 203,93±21,6 0,02

Кальцгй. г*кг"' 7I.C7t2.31S < • 1 1,61

Фосфор, г*кг"' 31.90И.44 36,48±3,46 0,94

Железо, мг*кг"' 82,09±3.13 81,99±6,03 0,01

Марганец, мг'кг1 0,76±0,03 0,69±0,02 1,92

Цинк, мг*кг"' 58^0±1,31 62,17± 1.97 1.68

Мель, нг*кг'' 0,85±0,03 1,03±0,06 2,64

Кашмвй, мг*кг*' 0,139±£>,001 0,142+0,001 0,47

Свинец, иг*кг"' 1,97+0,03 2,18±0,12 1,72

Скармливание модифицированного комбикорма, содержащего в своем составе ПМКД «Экое», не оказало отрицательного влияния на содержание сухого вещества, зальных элементов кальция и фосфора в костной ткани опытных цыплят-бройлеров.

Концентрация биологически важных микроэлементов находилась в пределах физиологической корми, в достоверных мгжгрупшвых различий в содержании железа, марганца и цинка в бедренной кости птиц обнаружено не было. По мнению некоторых авторов (А.Хеннинг, 1976; Р.Е.Андрушайте, 1987), кадмий и свинец способствуют повышению доли зольных элементов в костной ткани и, 8 частности, кальция. В результате проведенного эксперимента произошло некоторое увеличение содержания этих элементов в бедренной кости, хотя эти данные недостоверны.

Гнстоструктурная характеристика внутренних органов и тканей цыплят-бройлеров

Пеять

Функциональная активность печени непосредственно зависит от ее гис-тоструктуры, поэтому нам» был проведен микрометрический анализ срезов печени цыплят-бройлсров контрольной и опытной групп (табл. 8).

Табя-ица 8

Морфомггрнчгские показателя печени аьтдитнЗройлсрив 49-сугочнйт ьда растя

Параметры, Группы опыта

сд, нзмер. I п

Средний дяамир печеночной трубочки, мкм 29,72±0.33 30,5Ч±0,33** 2,65

Кол-во ядер гегтатоиитсв ыа единице площади среза (0.75 мм2), шг. 4711 3123 ■

Диамегр ядра гепатоцита, мкм. 6,05±0,06 6,67±0,06*** 7,31

Форма круга ядра, относит, един. 0,993±0,0<В 0,997±0.003*** 1,65

Площадь ядер на ед. среза, миг1. 0,045±0.0006 0.037±0.007"» 1,10

Ядерно-цитоплазматический коэффициент 0,05 0,06 -

Из табл. 3 видно, что скармливание ПМКД «Экое» в составе модифицированного комбикорма привело к изменениям морфологических показателей гепатоцитов цыплят-бройлеров опытной группы. Прежде всего, следует обратить вшшзпне на изменение ядерно-цктоплазматического коэффициента гепатоцитов печени цыплят контрольной и опытной групп: увеличение данного показателя у цыплят опытной группы говорит о повышении объема ядра в гепатоците, что связано с повышением функциональной активности клеток печени. Это подтверждается и показателями диаметра, среднего габарита и количества ядер гепатоцитов на определенной площади среза. Статистически достоверное увеличение диаметра ядер гепатоцитов у птиц опытной группы на 10,25% (р<0,001), а также уменьшение количества ядер гепатоцитов на единице площади среза (0,75мм2) в печени цыплят-бройлеров опытной груп-

пы на 33,71% объясняется тем, что ядра гепатошгтов печени у опытных цыплят были крупнее, чем в контрольной группе, н на одинаковой площади среза количество их оказалось меньше. Увеличение размеров печеночных трубочек на 4,1% (р<0,01), по сравнению с контрольной группой, и количества, входящих в их структуру гепатоцитов до 7 (с 3-х в контроле), у птиц опытной группы свидетельствует о более развитой структурной и функциональной организации печени цьтлят-броблеров, потреблявших модифицированный комбикорм.

Кишечник

Модифицированный комбикорм оказал положительное влияние на структуры тонкого кишечника птиц опытной группы (табл. 9). Так значительно и статистически достоверно увеличились толщина ворсинок и средний диаметр крипт кишечника птиц опытной группы по сравнению с контролем на 26,67% (р<0,01) и 38,%% (р<0,001). Ни в опытной, ни в контрольной группах значительных изменений в клеточном составе слизистой тонкого кишечника не обнаружено. С помощью гистохимической техники обработки гистологических срезов было выявлено, что у контрольных цыплят в бокаловидных клетках выявлялись преимущественно кислые мукополисахариды, а у опытных цыплят на первом плане были нейтральные полисахариды, в основном в периферическом слое бокала клетки.

Тааыща 9

Морфометрия тонкой кишки цьништ-Оройжрив очного ыиршла

Показатели, ед. измер. Группы опита М

I И

Толщина версмиок, мкм 131,25±8,15 230,11±12,98**

Средний диаметр крипт, мкм 48,Н±1,10 б6,89±1,47*" 10,2

Средний диаметр бокаловидные клеток, мкм 12,3910,20 9,14±0,12*** 13,8

Учитывая, что слизь бокаловидных клеток участвует в формировании непрерывного гцаратированного пристеночного слоя кишки, можно говорить об изменении его защитных и сорбциенннх свойств у опыте Ь!Х цыплят. Эти различия связаны, по-видимому, не только с увеличением объема пищеварения у этих цыплят, но также и с протекторными свойствами используемого комбикорма по отношению к слизистой оболочке кишки.

Селезенка

Включение в рацион цыплят-бройлеров модифицированного комбикорма положительно сказалось на гистологическом строении и морфо-функ-циоиальной характеристике селезенки птиц опытной группы в отличие от контроля. Цитологические особенности паренхимы селезенки птиц контрольной группы заметно отличают её от типичного строения, так как селезеночные тельца представлены в основном бластными формами клеток с не-

редко встречающимися фигурами митоза и сильно обеднены зрелыми лимфоцитами. Зональность селезеночных телец не выражена. Такое состояние селезенки контрольных цыплят-бройлеров определяется как иммунодефн-циткое Ш степени согласно классификации Н.Г.Колоусовой (1983). Напротив, селезенка цыплят-бройлеров опытной группы характеризовал ас ь типичным строением с четко контурирующими селезеночными тельцами, обра* зующимн обширные поля, муфтами с меньшим количеством незрелых бла-стных форм и умеренно развитой ретикулярной стромой органа.

Результаты микрометрии селезенки цыплят-бройлеров контрольной и опытной групп представлены в табл. 10.

Таблица 10

Морфометрна селезенки цыплят-бройлеров 49-суточвоговозраета

Параметры, ед. тмер. Группы опыта и

I II

Плошапь селезеночвых телец, мм1 С,027±0,003 0,513*0,0085*** 53,9

Средние габарит селезеночных телец, МКМ 179,98±9,903 220,б±ЮЗ* 2,31

Форма круга селезеночных телец, относительные ад. 0,917±0,008 0,905±0,003 1,06

Площадь, занимаемая селезеночными тельная и, % 4,13 12,11

Количество сслсзсеочных телец на единице площади среза (34 мм2), шг. 52 81

Увеличение площади (в 19 раз), среднего габарита (на 22,57%) и количества селезеночных телец на единице площади среза (на 55,77%) у цыплят-бройлеров опытной группы по отношению к контролю свидетельствует о сохранности функциональной активности данного органа на нормальном физиологическом уровне для данного возраста и продуктивной направленности птии. Данное обстоятельство согласуется с результатами ранее проведенных работ Г.И.Горшкова и др. (1992).

Клпакальная сумка

Введение в рацион цыплят-бройлеров модифицированного комбикорма привело к различиям в микроструктуре бурсы контрольных и опытных птиц: зональность фолликулов клоакальной сумки птиц контрольной группы сглажена, е корковом веществе обнаруживается относительно мало зрелых лимфоцитов, в мозговом веществе 113 первом плане выявляются властные фермы, среди которых в незначительном количестве встречаются зрелые лимфоциты и оксифнльные гранулоциты; напротив, клоакальная сумка цыплят-бройлеров опытной группы представлена хорошо развитыми фолликулами с четко контурирующими корковым и мозговым веществом со значительно большим количеством зрелых лимфоцитов и меньшим числом окенфнльных гранулоцитов в мозговом веществе.

Из табл. 11 видно, что равное количество исследованных фолликулов бурсы (250шт) занимают различный объём площади. Так, совокупная площадь 250 фолликулов бурсы опытных цыплят-бройлеров достоверно превышает таковую в контрольных препарат в 4,5 раза (р<0,001), и, следовательно, они занимают на 41,47% больше площади всего исследованного среза. Естественно, что средний габарит одного фолликула бурсы цыплят контрольной группы был значительно ниже - в 2,3 раза или на 134%(р<0,001).

Таблица II

Морфомстрна фолликулов клоакальная сумки цывлит-вроймров 49-сутояиого одрястя

Показатели, Группы опыта «1

ел. нзмер. 1 и

Площадь, юг* 0,038+0,003 0?168±0,006*** 18,8

Средний габарит, юм 21б,3±7,09 503,0± 10,73*** 22,3

Форма круга, отн. ед. 0,79±0,008 <Х69±0,007*** 9,76

кол-во фоллшгуловов 250 250

Применение модифицированного комбикорма в рационе цыплят-бройлеров привело к тому, что структурная организация клоакальной сумки птиц соответствовала более молодому возрасту. Учитывая, что закономерная инволюция бурсы сопряжена с угнетением синтеза иммуноглобулинов в ней (И.А.Болотников, Ю.В.Конопатов, 1993), а поскольку в нашем эксперименте концентрация таковых в сыворотке крови цыплят-бройлеров опытной группы повысилась так же, как и фракция гамма-глобулинов, основу которых составляют иммуноглобулины (А.В.Чечеткин, 1982) (табл. 3), то мы с уверенностью можем говорить, что применение ПМКД «Экое» в составе гранулированною корма приводит к замедлению акциденталькой инволюции органа и поддерживает иммунологическую реактивность организма цыплят-бройлеров опытной группы на нормальном уровне.

Щитовидная железа

При скармливании модифицированного комбикорма цьшлятам-бройлерам в гистологической картине строения структур щитовидной железы птиц контрольной и опытной групп наблюдались различия (табл. 12).

Так, площадь фолликулов щитовидной железы у опытных цыплят на 16,32% (4,42мм2) превышает таковую в контрольной группе. Наоборот, площадь фолликулярного эпителия и межфолликулярной эпителиальной ткани щитовидкой железы опытной группы уменьшается по сравнению с контролем на 28,57 (1,10мм2) и 41,86% (0,50мм1) соответственно. Вероятно, уменьшение последних показателей произошло за счет увеличения площади фолликулов.

Из табл. 12 видно, что под воздействием ПМКД «Экое», в составе гранулированного комбикорма происходит уменьшение высоты фолликулярного эпителия щитовидной железы у птиц опытной группы на 9,89%, а следовательно, общая площадь исследованных фолликулов и их средний диаметр увеличиваются по отношению к контролю в 1,9 (р<0,01) и 2,1 (р<0,Ш1) раза соответственно.

Морфочетрии мй^ешнчы щитовидной желт Нмплат-Лронлеров 49-гуточного возраста

Показателя, Грчшы опыта М 1

ед. шмер. I II

Высота фолликулярного эпителия, мкм 10.41+0,44 9,3810,41 1,7!

Площадь фолликулов, мкм* 3799,51476 7120,511102,8" 2,76

Средний диаметр фолликулов мкм 64,8914.12 134,1517,07*** 8.46 1

Форма круга фолликулов, относит, ед. 0,81 ±0,01 0,76±0,01*** 3,54 |

На рис. 3 видно, что при скармливании модифицированного комбикорма в щитовидной железе птиц опытной группы увеличивается количество и усиливается активность фолликулов среднего класса, а количество малых и крупных фолликулов уменьшается. Таким образом, мы можем говорить об интенсификации процессов дифференцировкн и морфо-функционального становления органа у цыплят-бройлеров под действием ПМКД «Экое» в со* ставе гранулированного комбикорма.

Мигам флликухы Сладкие фолликула Крупные фотащии

р а с. 3. Соотношение фолликулов щитовидных желез цыплят-бройлеров 49-сугочного возраста.

Мышцы

Введение ПМКД «Экое» в состав гранулированного комбикорма поло* жительно влияет на морфофункциональное состояние мышц цыплят-бройлеров. Более мелкие в диаметре мышечные волокна голени цыплят-бройлеров опытной группы (27,59 против 31,02 мкм в контроле) придают мясу птицы нежную консистенцию (табл.13). А более высокий белково-качественный показатель мяса и снижение в нем концентрации кадмия и свинца свидетельствуют о повышении диетических качеств мяса птицы, получавших модифицированный комбикорм (табл. б).

Таблица 13

Морфомстрия мышцы голени выплят-бройлеров 49-суточяого возраста

Шрамезры, ед. нзм*р. Группы опыта 1(1

1 ! и

Поперечно-срезана ые мыиичяые волокпа

Средняя цдоталь сеченая, пнем1 678,047,61 560Л±6,37*** 11,9

Средний диаметр, нкм з1,«г±о,18 27,59±0,18*** 13.5

Вторичные мытаечкме пучки

Средам площадь, ыы' 0,012±0,001 0,066±0,009*** 5,9

Средний габарит, мкм 151.6±7,25 326,5±23,34*** 6,8

Число мышечных волокон, шт. 29,7112,57 62,5319,16** 3,5

Экономическая эффективность применения ПМКД «Экое» в составе гранулированного комбикорма в рационе цыплят-бройлеров

Испытание модифицированного комбикорма проведено на птицефабрике ЗАО «Агрин» Шебекинского района Белгородской области. Первая группа цыплят-бройлеров получала стандартный гранулированный комбикорм. В рацион второй группы цыплят к стандартному гранулированному комбикорму было добавлено 2% полиминеральной кормовой добавки «Экое». Установлено, что цыиляга-бройлеры опытной группы превосходили птиц контрольной группы по сохранности поголовья на 7,85, среднесуточному приросту за весь период опыта - на 5,99, средней живой массе одной птицы - на 5,33%. При этом удалось снизить расход корма на один кг прироста на 2,32 и на одно животное в сутки-на2,19%. Валовый выход мяса возрос на 16,35%; выход мяса первой категории - на 25,34, второй категории - на 17,39%. В целом экономическая эффективность применения модифицированного комбикорма составила 5,54 рубля на 1 рубль затрат (в ценах начала 2002 года).

ВЫВОДЫ

1. Комбикорм гранулированный с использованием полиминеральной кормовой добавки «Экое» в дозе 2% при скармливании цыплятам-бройлерам от трех- до семинедельного возраста оказывал положительное действие на интенсивность роста птицы, гнета структур кые характеристики тканей и органов, белковый и минеральный обмен,

2. Под влиянием гранулированного с добавкой «Экое» комбикорма б крови цыплят-бройлеров отмечены тенденции:

• к повышению содержания гемоглобина на 13,1%, сывороточного общего белка и его альбуминовой фракции на 6,3% и 7,7% соответственно;

• увеличению концентрации витамина Е и С в 1,7 и 1,2 раза соответственно;

• снижению концентрации кадмия и свинца на 20,0 и 18,$% соответственно.

3. Использование модифицированного комбикорма способствует:

• улучшению биологической ценности и экологической чистоты продукции за счет: повышения белково-качественного показателя (соотношение триптофана к окснпролину) на 26,8%, снижения средних габаритов мышечных волокон на 11,1% и увеличения количества волокон во вторичных мышечных пучках в 22 раза; повышения содержания б печени сырого протеина, кальция и фосфора на 8,9,31,4 и 4,7% соответственно, а также железа и меди на 21,2,13,95,

4. Положительные изменения в физиолого-биохимнческом стзтусс цыплят бройлеров при скармливании модифицированного комбикорма находят свое подтверждение в характеристиках морфо-функционального состояния их тканей и органов:

•увеличивается диаметр печеночных трубочек и ядер гепэтоцитов на 4,10 и 10,25% соответственно;

• повышается площадь всасывающей поверхности кишки за счет увеличения толщины ворсинок и высоты каемчатых энтероцитов в 1,3 н 1,7 раза соответственно;

• уменьшается диаметр бокаловидных клеток кишки цыплят-бройлеров на 26,2% и изменяется качественный состав их слизи: интенсивность реакции на кислые полисахариды снижается;

• увеличивается количество селезеночных телец и их площадь в 1,55 и 2,96 раза соответственно;

• увеличивается диаметр и площадь фолликулов клоакальной сумки цыплят-бройлеров в 2,2 и 4,2 раза соответственно, а также изменяется их качественный состав: значительно увеличивается количество зрелых лимфоцитов и уменьшается число оксифилькых гранулоцитов;

• снижается количество малых фолликулов щитовидной железы на 18,13%, площадь фолликулярного эпителия и кнтерфолликулярней эпителиальной ткани на 28,57 и 41,86% соответственно.

5. Применение гранулированного с ПМКД «Экое» в рационе цыплят-бройлеров:

• способствует повышению продуктивности птицы - увеличению среднесуточного прироста и живой массы цьшш£-брййЛсров на 5,9 и 5,4% соответственно;

• повышает сохранность поголовья на 7,9%;

• снижает затраты кормов на производство единицы продукции на 8,3%;

• повышает валовый выход мяса на 16,4%.

6. Экономическая эффективность применения модифицированного комбикорма (гранулированного вместе с и или минеральной кормовой добавкой «Экое») составила 5,54 рубля на 1 рубль дополнительных затрат (в ценах 2002 года).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для оптимизации биохимических процессов в организме, повышения общей резистентности и сохранности птицы, увеличения качества н экологической чистоты получаемой продукции рекомендуем использовать гранулированный с добавлением ПМКД «Экое» в дозе 2% (20 кг на одну тонну) комбикорм в рационе цыплят-бройлсров, выращиваемых па мясо.

Основные положения диссертации отражены в следующих публикациях:

1. Использование природного гидроалюмосили ката в животноводстве и ветеринарии: Метод, реком. /А.А.Шапошников, И.А.Бойко, Н.А.Мусиенко, ...Л.Р.Закирова и др. - Белгород, 2000. -18 с.

2. Закирова Л .Р. Влияние модифицированного комбикорма иа биохимические показатели и гисто структурное строение печени цыплят-бройлеров: Бюл. науч. работ ФГОУ ВПО. - Белгород: Белгородская ГСХА, 2003. - С42-48.

3. Использование природного гшгроалюмосиликата в животноводстве и ветеринарии: Метод, реком. /А.А.Шапошников, Н.А.Мусиенко, А.И. Везен-цев,...Л.Р.Закироваи др. Изд. 2-е, перераб. и доп. — Белгород, 2003.-20 с.

ЛР№ 040327

Подписано в печать 21.05.2003. Формат 60*84/16. Гарнитура Times. Усл. п, я. 1,25. Заказ № 80. Тираж 120 экз. Оригинал-макет подготовлен и тиражировал в издательстве Белгородского государственного университета 308015 г. Белгород, ул. Победы, 85