Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние фиторегуляторов на генеративную сферу растений

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Влияние фиторегуляторов на генеративную сферу растений"

" Па правах рукописи

БОЙЦЕНЮК Леонид Иосифович

ВЛИЯНИЕ ФИТОРЕГУЛЯТОРОВ НА ГЕНЕРАТИВНУЮ СФЕРУ РАСТЕНИЙ

03.00.12 — Физиология растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА 1997

Работа выполнена в лаборатории регуляторов роста и развития сельскохозяйственных растений Московской сельскохозяйственной академии имени К. А. Тимирязева.

Научный руководитель — доктор биологических наук, профессор, академик РАСХН В. С. Шевелуха.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор кафедры физиологии растений М. Н. Кондратьев; доктор биологических наук Л. В. Ковалева.

Ведущее учреждение — Всесоюзный научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур.

Защита состоится . . . . . 1997 г

в . < г . . . час. на заседании диссертационного совет; Д.120.35.07 в Московской сельскохозяйственной академш им. К. А. Тимирязева.

Адрес: 127550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 49 Ученый совет ТСХА.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА.

Ученый секретарь диссертационного совета —

кандидат биологических наук

Влияние Фиторегуляторов на репродуктивную сферу растений ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темп. Одним из важнейших факторов, определяющих Формирование урожая ряда сельскохозяйственных растении является успешное оплодотворение.

Литературние данные указывают на участие регуляторцнх веществ в оплодотворении растений ( Бритиков, 1957¡ Nagar, Raja Rao, 1989¡ Кинье, Сакс, Бернье, 1991), однако в целом гормональная регуляция процессов оплодотворения остается недостаточно изученной.

Одним из основних Факторов, лимитирующих оплодотворение, является прорастание пыльцевых зерен на рыльце пестика и рост пыльцевой трубки. Согласно литературным данным на эти показатели оказывает большое влияние комплекс химических, Физических и особенно, гормональных Факторов (Nagar, Raja Rao, 1989¡ Jahns Tonas, Jolliff, 1990; Asakava Sclichi, Abe Hiroshi 1991). Действие Фитогормонов может быть обусловлено как влиянием на активность синтетических Ферментативных процессов, так и изменением проницаемости мембран и поступления воды в пыльцевое зерно, и также изменением кислотности среды в области клеточной стенки.

Известные Факты участия фитогормонов в оплодотворении: их наличие в пыльце (Saha, Ganguli, Ganguli 1986: Yanagucyi Isoaura, Kurogoschi Shin, et al., 1990s и др.), а также зависимость оплодотворения от количества пыльцы, попавшей на рыльце пестика, указывают на вероятно существующую связь между количеством фитогормонов, полученных материнским растением с пыльцой, и эффективностью оплодотворения. Таким образом, гормональная регуляция этих процессов может быть сведена к стимуляции прорастания пыльцы в тканях рыльца пестика и обеспечении необходимой . аттрагирующей способности, начавшей развитие семяпочк-u.

В настоящее время в связи с широким применением средств химической защиты растений резко сократилось количество естественных опылителей и ухудшились условия оплодотворения энтомоФильных культур. Разработка приемов, стимулирукдих процесс завязывания плодов, способна нивелировать недостаточное опыление.

Исследование вопросов гормональной регуляции оплодотворения и Формирования плодов открывает новые возможности повышения урожайности энтомоФильных растений.

Цель и задачи исследований. Цель» настоящей работы являлось изучение влияния регуляторных Факторов на оплодотворение и

формирование плодов некоторых перекрестноопыляемых культур (вишня, ■гречиха) .

Задачи исследований включали:

- изучение влияния рострегулирующих соединения на жизнеспособность пыльцевых зерен:

- изучение первоначальных этапов регуляции роста пыльцевых трубок в зависимости от ряда химических н физических Факторов;

- определение уровня эндогенных Фитогормонов в пильце и завязи;

определение нектаропрпдуктивности растений под влиянием обработки Фнторегуляторами;

- установление роли обогащения пылыш или завязи фитогормонами на процессы формирования плодов при полном и недостаточном опылении:

- изучение возможности повышения урожая за счет обработки растения аналогами фитогормонов во время цветения.

Научная новизна. Установлено, что завязывание и Формирование плода находятся в зависимости от количества Фитогормонов, полученных с пыльцой или экзогенно. При этом показано, что введение дополнительного количества гормонов с пыльцой или обработка завязи практически не различайте« по эффективности.

• Наиболее активно стимулируюет оплодотворение Н(1 изучаемых культурах гиббереллин ГК^ (2.8*10"'* М) и ауксин ПУК (2.П*10-'' Г Обработка данными препаратами в фазу бутонизации-начала цветения устраняла негативный эффект недостаточного опыления.

Изучен гормональный состав пыльцы и завязи гречихи и настурции.

Показано влияние ряда Фиторегуляторов на

нектаропродуктивность растений.

Дано математическое описание начальных этапйв роста пыльцевых трубок.

Практическая значимость работы. Результаты исследований дополняют современные представления о гормональной регуляции онтогенеза растений. Выявленная роль Фитогормонов в Формировании плодов открывает новые возможности для повышения урожайности растений. •

Применение Фиторегуляторов во время цветения снимает негативные результаты недостаточного опыления, повышая завязывание и среднюю массу плода.

Наш! исследования показали целесообразность использования пыльцы в качестве тест. - объекта при скрининге рострегулирующих соеденений, а так же ее использования при анализе загрязнения Объектов природной среди.

Публикации"? По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.

Апробации. Основные результаты диссертационной работы докладывались на III Международной конференции "Регуляторы роста п разшггия растений" (Москва, 1995 гг.). научных конференциях ТСХА ( 1994-1995 ГГ.) .

Объем работы. Диссертация изложена на 100 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, заключения. выводов, списка использованной литературы включающей 186 источников, в тон числе 116 работ иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИИ

Экспериментальная работа проводилась с 1992 г: на модельном растении (настурции) в лабораторных к вегетационных опытах ь лаборатории регуляторов роста ТСХА; на вишне - на пасеке ТСХА; на гречихе - полевые и производственные испытания п 1993-95 гг ь Тверской области и Краснодарском крае.

Влияния Физических, химических и гормональных Факторов на рост пыльцевой трубки :гзучали в условиях (in vitro) на искусственной питательной среде с добавлением в нее физиологически активных веществ. Проращивали пыльцу в камере Ван-Тингема по методике З.П.Паушевой (1980).

Содержание гормонов в пыльце и завязи определяли!! по методике лаборатории регуляторов роста с помощью иммуноферментного анализа и биотестов.

Обработку растений проводили путем опрыскивания водными растворами Фиторегуляторов в Фазу конец бутонизации - начала цветения.

Нектаропродуктивность изучали капиллярным методом по методике Остаиенко -Кудрявцева (1937).Содержание Сахаров в нектаре определяли Феноловым методом (Плешков, 1968).

В опытах учитывали; жизнеспособность пыльцепых зерен, я прорастания и длину пыльцевых трубок в динамике, завязывание плодов IX). массу плода, урожай, а также нектаропродуктивность и посещаемость растений пчелами.

Изучалась роль Фитогормонов на двух важных ятапах

Формирования урожая: 1)прорастание пыльцы и роста пыльцевой трувкн (преоплодотворение), 2)завязывание и Формирование плодов (постоплодотворение).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ ■Влияние Физико-химических Факторов на рост пыльцевой трубки

настурции

В предварительных опытах проводили оптимизацию условий выращивания пыльцы. Оптимальным оказалось содержание в питательной среде: сахарозы - 20%, агар-агара - 1%, pH - 4-5 (рис.1) и температура от 20 до 26°С.

На основании предварительных экспериментов мы предположили, что рост пыльцевой трубки на начальном этапе в первую очередь определяется поступлением волы, а не Ферментативными процессами. Для проверки этого предположения был проведен опыт, где дистиллированная пола в питательной среде была заменена на тяжелую ' ш2о>.

Тяжелая вода. как известно, резко замедляет биологические процессы и токсично действует на живые организмы, ингибируя многие ферменты. При замене обычной воды на тяжелую мы наблюдали снижение скорости роста пыльцевой трубки примерно и 1.8 раза, что несколько больше теоретического изотопного эффекта для тяжелой воды, равного 1.4 (рис.2). Вероятно, несколько большее снижение скорости роста пыльцевой трубки связано с негативным действие тяжелой воды на Ферментативные системы и (или) на поступлние воды в клетки. Однако тот Факт, что рост растяжением все же происходил, свидетельствует о том, что рост пыльцевой трубки обусловлен главным образом • пассивным транспортом волы через поверхность пыльцевого зерна, хотя Ферментативные процессы также имеют место, но играют второстепенную роль.

Добавки мембранотропного агента диметилсульФоксида (ДМСО) стимулировали рост пыльцевой трубки как. в обычной, так и в тяжелой воде примерно одинаково (рис. 2). Это подтверждает предположение о том, что на начальных этапах рост пыльцевой трубки определяется в первую очередь скоростью поглощения воды, а не нарастанием вещества клеточной стенки.

Влияние Фитогормонов на рост пыльцевых трубок настурции

Из изученных Фитогормонов наибольшее влияние на рост

пыльцевой трубки оказала обработка гиббереллином (рис.3).

Стимуляторное действие гиббереллина отмечается при 1.4*10-6 И и

-5

плавно возрастает до концентрации 2.8*10 И. В пределах от -5 -4

2.8*10 - 2.9*10 М дальнейшего увеличения стимуляторного

__.А

действия не отмечено. При концентрациях 7.2*10 М рост пыльцевых трубок занедлялся, а с дальнейшим увеличением дозы до 1.4*10~3 И

Рис.1. Влияние рН и« рост пыльцевой трубки настурции

Врмм (мин.)

Рис.2. Влияние тяжелой воды и ДМСО на рост пыльце! трубки настурции

0,0 0 0 57 «а о 1 0,0 5 ? • ■ о 1

Время (мин).

Рис.3. Влияние ГК на рост пыльцевой трубки настурции

Рис.4. Слияние ИУК на рост пыльцевой трубки настурции

Рис.5, Влияние цитокинииа не рост пыльцевой трубки настурции

Рис.6. Слияние смесей фятогормоисвна рост пьдлыдооЯ трубки I настурции

полностью прекращался.

Стимуляторное действие ауксина наблюдали лишь при невысоком

-7 -5

его содержании в питательной среде - 5.7*10 - 2.8*10 И (рис.А). Различий в стимуляторном эффекте концентраций 2.8*10 и

_ Г-

5.7*10 М не установлено. При содержании ауксина 1.4*10 И,

-4 -3

отмечено его ингибирутцее действие, а при 5.7*10 и 1.4*10 И -наблюдалось полное ингнбкропание роста пыльцевой трубки.

При изучении действия нитокинина (кинетин) было установлено,

—8 —7

что в интервале концентраций 2.3*10 - 4.6*10 М гормон не оказывает действия, а в дозах 4.6*10 4.6*10 5 М- достоверно тормозит рост пыльцевых трубок (рис.5).

Япибрассинолид окапывал слабое стимулирующее действие на жизнеспособность пыльцевых зерен. Абсциэовая кислота во всех изученных нами концентрациях полностью ингибировала рост.

Добавление в питательную среду 2-ХЭФК (продуцента этилена) вызывало торможение роста пыльцевой трубки уже при при 6.8*10 0 М. при более высоком ее содержании рост полностью ингибировался. Спустя 40 мин после посева пыльцы происходило разрушение апекса пыльцевой трубки, начинающееся с образования буФФа с последующим его" разрывом. Аналогичный эффект наблюдали и при высокой концентрации ауксина, нитокинина и повышенной температуре.

По - видимому, торможение роста пыльцевой трубки высокими концентрациями ауксина действительно может быть связано с увеличением уровня эндогенного этилена.

В париантах совместного действия гиббереллинп и ауксина было выявлено, что только при их содержании в интап-льноп гредр соответственно 1.4*10 6 и и.Н*.1. 7 м. скорость роста пыльцевой трубки была выше, чем в контроле (риг.6). При более низких и высоких концентрациях компонентов данной композиции наблюдали уменьшение скорости роста пыльцевой трубки.

При совместном введении в питательную среду нитокинина и ПУК скорость роста пыльцевой трубки во всех вариантах при различных концентрациях компонентов была ниже чем в контроле. Остается неясным вопрос о том, каким образом действие указанных Фитогормонов подавляет друг друга.

Статистическая обработка результатов экспериментов позволила построить кинетическую кривую скорости роста пыльцевой трубки. Наиболее адекватно этот процесс описывается Формулой:

5

1 -------------

п + М

1 ♦ 10

б

где 1 - длина пыльцевой трубки, у.е; 1 - время в мин; а и Ъ - эмпирические коэффициенты.

Рост пыльцевой трубки во всех изученных нами случаях отображается единой Функционально;! зависимость», и повнднмому происходит по одному и тому же механизму,о чем свидетельствует высокие величины коэффицнэнтов корреляции (г > 0.95).

Использование характеристик жизнеспособности пыльцы в качестве

теста для экспресс-оценки эффективности Фиторегуляторов

В результате проведения серии опытов по изучению влияния Фиторегулятороп на жизнеспособность пыльцы была показана возможность использования этого показателя в качестве экспресс-оценки Физиологического воздействия различных химических и физических Факторов.

Нами проведено более двухсот лабораторных экспериментов по изучению действия различных фиторегуляторов и электромагнитных излучений на рост пыльцевых трубок настурции.

На примере препаратов эмистим и экост показана концентрационная зависмость их эффективности, соответствующая с результатам полевых экспериментов разработчиков данных препаратов. На ряде применяемых п практике Фиторегулятороп получена аналогичные данные.

Указанный метод может б1ггь использован для скрининга препаратов с рострегулирующей активностью и предварительной оценки эффективности концентраций. Ограничением метода является недостаточная чувствительность к препаратам цнтокининового действия.

Возможно применение этого метода в качестве теста на загрязнение окружающей среды.

Взаимовлияние пыльцепых зерен при прорастании

Известен Факт, что прорастание пыльцевых зерен и длина пыльцевых трубок возрастают с увеличением густоты посева пыльцы. На основании этого нами было сделано предположение о том, что стимуляция прорастания пыльцевых зерен при увеличении густоты посева обусловлена повышением кошюнтрации Фитогормонов. выделяемых п среду из пыльцы.

Для подтверждения этого предположения мы провели анализ содержания гормонов в пыльце гречихи и настурции. В ней обнаружены в высокой концентрации гиббереллин и ПУК, цитоктшны и абсцизовая кислот.а - в следовых количествах (табл.1).

Содержание Фитогормоноп в пильце гречихи и настурции (нг на 1 г сухой масси)

Наименование объекта исследований ИУК Цитокинин АБК ГК

пыльца гречихи 39.33 следы следы 1900

Пыльца настурции 30.66 1.2 следы 2080

На безгормональноп ср€>ле при одиночном посеве пыльцевых зорен их прорастание составило 11%, при совместном посеве 3-х пыльцевых зерен - 28*, 5-ти пыльцевых зерен - 32%. 10-ти - 57%, а при стандартном посеве (примерно юо пыльцевых зерен) - 59%. Таким образом наши ' данные полностью подтверждают ранее полученные результаты о взаимостнмуляцин пыльцевых зерен при прорастании.

ео

.м 40

» _|—I ij з, Ollis

30 . • D3n'

OSn«. В tO п.»

ионтропь

35 0.0053 mmol

ИУК 0,28 mmol ГК 0.21 mmol

BapwwfT

Рис.7. Взаимовлияния пыльцевых зерен при прорастании

-4 - л

Добавление фитогормонов (ГК. 2.8»10 М. ИУК 2.8»10 М и —6

эпибрассинолида 5.2*10 М) приводило к резкому увеличению прорастания пыльцевых зерен, что особенно наглядно проявлялось в вариантах с 1, 3 и 5 пыльцепыми зернами (рис.7).

Результаты проведенных экспериментов указывает на то, что процесс • прорастания пыльцы контролируется Фитогормонами, содержащимися как в ней, так и в тканях пестика.

Влияние размеров пыльцевого зерна на завязывание и массу семян настурции

В целях выяснения влияние размеров пыльцы на завязывание и массу семян пыльцу сепарировали в восходящем потоке воздуха,

разделяя на три Фракции. П каждой Фракции измеряли диаметр пыльцевых зерен и процент прорастания пильни.

Процент проросших ни.тьцепых зерен пернои Фракции (мин.лначетр) был крайне мм.ин;. они 1.41111 • 1. мыпш :-*гоП Фракции не нрнн> ч I. запя.змпанпн) полноценных семян. Достоверных различий между второй (средний диаметр) и третьей (максимальный диаметр) Фракциями по проценту проросших пыльцевых зерен. проценту выполненных семян. массе семян не наблюдалось (табл.2).

Таблица 2.

Влияние размеров пыльцы на завязывание и массу семени настурции

Помер Фрак. Диаметр пыльцы Прорасгание пылы юных зерен, % Ниполненных семян, \ Пасса выполнен. семян г.

1 0.91+0.072 3.6+0.62 0 0

2 1.04+0.036 52.4+5.2Я 21.4+3.6 0.129+0.03

3 1.12+0.062 57.6+7.32 26.7+5.5 0.136+0.06

Таким образом показано, что прорастание пильцених зерен, а также завязывание и масса семян в значительной степени зависят от размеров пыльцевого зерна.

Влияние Фитогормоноп на завязывание и массу плодов

Эксперименты проведенные с пыльцой показали' участие Фитогормоноп в регуляции проростания пыльцевых зерен и роста пыльцевых трубок, а следовательно значение этих веществ для факта оплодотворения.

По нашему. мнению роль фитогормонов заключается и в увеличении ат^агирующей способности семяпочки на ранней стадии развития (т„е на стлш... —гетег.ло,,^ 1 ,.ирения) . Это особенно важно потому, что мернстематическая активность. а следовательно и наработка собственных фитогормонов на этой стадии недостаточна. Для дальнейшего изучения роли Фитогормонов и Формировании плода был проведен ряд опытов, направленных на подтверждение Факта их участия в этом процессе, в том числе и Фитогормонов. привносимых с пыльцой при опылении.

При изучении влияния фитогормонов на процессы формирования семян настурции в предварительных опытах 1993-94 гг. было показано, что оптимальное плияние на жизнеспособнось пыльцевых зерен и массу плода оказал гиббереллин (табл.3).

Таблица 3.

Влияние Фитогормонов на жизнеспособность пыльцы и заоязивание плодов настурции, 1993 г.

Прорастание Длина Средня

Вариант пыльцевых пыльцевой масса

зерен,% трубки,у е. семени.г

Контроль -4 38 1 1 .52 0.267

гк3 1 4*10 М 48 9* 3.14* 0.327*

Кинетин 4 6*10АМ 44 1* 2.10* 0.248

Кинетин 2 3«10АМ 32 5-* 1 .96 0.296

ЭБ 5 2*1 49 6» 2.46* 0.297

ПУК 2 а« 1о''м 35 Ч 2.42« 0. 348*

НСР0.05 6 1 0.45 0.67

» - различия существенны при 45'* уровне значимости.

В опытах 1994-95 гг. настурцию обрабатывали раствором ГК_ в -4 -4 -4

концентрациях 1.4*10 , 2.9*10 и 4.3*10 М. После обработки в

цветках растений удалялись тычинки. Пыльцой необработанного

растения опыляли одно обработаное и одно необработаное растение,

пыльцой обработанного растения также опыляли одно необработанное и

одно обработаное растение (табл.4).

Обработка гиббереллином существенно влияла на завязывание семян настурции. Наибольший процент завязывания отмечали у растений обработанных гиббереллином в концентрации и 2.9*10 М. В варианте с обработкой препаратом в концентрации в 4.3*10 М отмечено уменьшение завязывания, хотя оно еще и выше контроля.

При опыление необработанных растений пыльцой1 обработанных

-4 -4

гиббереллином в концентрациях 2.9*10 и 4.3*10 М завязывание было значительно выше чем в контроле. Сходные результаты получены пр1. опылении обработанных растений пыльцой растений не получивших обработки.

У всех обработанных растений существенно увеличивалась средняя масса выполненого семени, кроме случаев с опылением не обработанных растений пыльцой растения обработанного гиббереллином в концентрации 1.4*10~'*М. Во всех остальных вариантах с увеличением концентрации гормона увеличивалась масса семени, кроме последнего, но и в этом случг-? данный показатель был выше контрольного (табл.4).

И

Влияние Фитогормонов на выполненность среднюю массу семян настурции (1995 г.)

Вариант Выполненных семян, % Средняя масса 1 семени, г.

Контроль 23.3 0. 1 34

^сШЯЗЬ конт. ♦обраб.пыльца ГК3 1 .4*10"* М 27.3 0. 136

Завязь конт. ♦обраб.пыльна •ГК3 2.9«10"'* М 37. 1 * 0. 158 *

Нанннь конг. обраб. пыльца ГКЭ 4.3*1О-4 м 36.6 * 0.164 *

ибраоог.завязь, ГК3 1.4*10 М ♦не образ, пыльца 38.6 * 0.152 *

Ооработ.завязь, ГКЗ 2.9*10 М ♦не обраб.пыльца 34.7 * 0.166 *

осработ.завязь, ГКЗ 4.3*10 М ♦не обраб. пыльна 40.3 * 0.189 *

Обработ. завязь+ обраб. пыльца ГК3 1.4*10 * 50.3 0.175 *

Обработ. завяэь+ обраб. пыльцы ГКЭ 2.9*10~4 * 46.2 0.246*

Очр.и.о! . . мня и.+ обраб. пыльца ГК3 4.3*10-4 я 36.7 * 0.188

МСР0.05 9.7 0.019

* - различия существенны при 954; уровне значимости.

Таким образом обогащение гиббереллннсм как отцовского, так и материнского растения настурции п фазе предшествующей цветения одинаково эффективно стимулирует завяэываг че и увеличивает среднюю мйсеу плода.

При изучении влияния Фитогормоноо на Формирование плодов вняни было отмеченно положительное влияние гиббереллина и ПУК (табл.5).

Влияние фитогормоноп на жизнеспособность пьшьци и завязывание плодом вишни (1993 г.)

Вариант Проростание пыльцсныч зерен.% Длина Завязыва пыльценой ние, % трубки.у.о. Средня масса плода,г

Контроль 36.7 6.7 21.1 3.04

гк3 1 4*10 М 47.1* 15.3* 44.1* 3.45*

Э Б 5 2*10~Jm 45 .9* 8.4* 26.3* 3.38*

ПУК 2 8*10 М 7.3-* 0.27-* 38.6* 3.25*

НСР0 05 8.1 2.1 20.9 0.224

* - различия существенны при 95% уровне значимости. В 1994 году растения обрабатывали водным раствором ГК3 в концентрации 2.8*ю"5, 1.4*10-4 и 2.9*10~А М и ПУК в концентрации 5.7*10~ , 1.4*10"'* и 2.8*ю"А и. Недостаточное опыление, моделировали изоляторами.

Наибольшая разница в завязывании плодов отмечалась в вариантах недостаточного опыления. Максимальное стимулирование

завязывании плодов отмечалось у растений обработанных

-4 -5

гиббереллипом 1.4*10 М и ПУК 5.7*10 М и находящихся один день

без изолятора. У растений, находившихся пять дней без изолятора -

при обработках гиббереллипом 2.9*)0~АН и ПУК 2.11* ю'^ (табл.6). В

условиях нормального опыления существенное увеличение завязывания

сохранялось также при этих обработках (табл.6).

Таблица 6.

Влияние Фитогормоноп на завязывание плодов вишни ( % к контролю 1994 г).

Вариант 1 день без изолятора 5 дней без изолятора без изолятора »

I к3 2.8*10"^ М 184. 70.3 ' 21.9

Г|ч _А 1.4*10 4 М 236.5 107.3 24.2

1 к3 2.9*10-4 М 210.6 130.3 35.5

ИУК 5.7*10~ М 249.3 52.6 -3.6

ПУК 1.4*10"* М 187 .5 93.00 20.7

ПУК 2.8*10 М 237.9 150.1 35.4

НСР0.05 32.6 53.7 34.2

* - различии существенны при уровне значимости.

С увеличением дозы препарата увеличивалась и масса плодов во

всех вариантах. Наиболее это различие заметно у растений, которые находились 1 и 5 дней без изоляторов, то есть не получивших достаточного количества пыльцы, необходимой для Формирования плода. Менее явно выражена эта тенденция в вариантах с достаточным опылением (табл.7).

Таблица 7.

Влияние Фиторегулятороп на среднюю массу плода вишни при полном и недостаточном опылении (1994 г.)

условия опыления 'Ъ -5 2.8*10 М 1К3 -4 1 .4*10 М 'Ъ -4 2.9*10 М пук: _ -5 5.7*10 М ПУК' . -4 1 .4*10 И ИУК . -4 2.8*10 И

I день без изолят. 51 .2 + 8.3 +67.3 -6.3 .67 .6 - 4.7 + 35.4 - 5.3 + 54.1 6.7 + 53.1 6.3

5 дней без изолят 46 . 1 Í 7.2 + 62.6 "ю.з + 68.7 6.5 +52.1 4.8 + 51.3 6.4 + 74 .8 9.2

Вез изолят. + 7.1 "2.1 - 2.2 + 16.7 9.6 + 8.1 3.2 + 11.6 "7.6 + 10.2 2.9

Проведенные полевые эксперименты на культуре гречихи потверлили стимулирующее действие фиторегулятороп на процессы Формирования урожая. При этом следует указать, что в оба года проведения экспериментов на гречихе имела место ситуация недостаточного опыления, из-за отсутствия пасеки в радиусе 3 км.

Также как и на вишне, на гречихе наиболее сильное стимуляторное действие на жизнеспособность пыльцевых зерен и на Формирование урожая оказали гиббереллин и ПУК (табл.8).

Таблица 8.

Влияние фитогормоноп на жизнеспособность пыльцы и урожай гречихи. (1993 г.)

"........... Прорастание Масса 1000 Урожайность, и.з, семян, ц/га % г.

Контроль , ГК 1.4*10,М ЭГ. * 5. 2*1 0"'м ИУК 1.4*ю";н ИУК 2.8*10 М 39.3 23.4 9.1 42.1 24.1 11.6* 39.3 24.0 12.5* 36.8 24.8, 11.2* 33.0 26.4 12.5*

ПСР0.05 1.4 1.9

* - различия существенны при 951 уровне значимости. В 1995 г. обработку гречихи проводили раствором гиббереллина

— А _ Д

в концентрациях 1.4*10 и 2.9*10 Пи ПУК в концентрации -4

2.8*10 М. Как и в 1993 году урожайность повысилась во всех вариантах, а пес 1000 семян только п варианте с обработкой ИУК

2.8*10~4 М.

Опыты с вишней и гречихой показали, что как и и случае с настурцией обработка растений гормонами приводила к увеличению завязывании и средней массы плода. При атом завязывание плодов в максимальной степени стимулировали гиббереллины, а увеличение средней массы - ауксины.

Обращает на себя внимание тот Факт, что наибольшие эффекты от обработки .-»i и"») гормонами отмеч.тпен ним пе.и» i,ihh,»i опылении, что ук.1 шпа.-1 на шип' Фнтогорминон недополученных с пыльцой. Таким образом в условиях недостаточного опыления целесообразно проведение приемов, направленных на увеличение уровня Фитогормонов (ауксина и гиГшерсллина) в завязи.

Влияние Фиторегуляторов на процессы нектаровыделения

При проведенный опытов на вишне было отмечено некоторое * увеличение по<ещенин цветков пчелами. Для объяснения этого Факта было проведено изучение нектаровиделения.

Показано, что обработка гиббереллпном существенно увеличивает нектаропыделеине, а ИУК уменьшает этот показатель.

I! полевых опытах на культуре гречихи подтверждено влияние Фиторегуляторов на процессы нектаровыделения. Так. гиббереллины. г пибрассинолид и олигосахарины достоверно повышали нетаровыделение на 7 сутки после обработки.

Таблица 9.

Влияние Фиторегуляторов на некторовмделение гречихи.

7 сут.после обр. 14 сут.после обр.

Вариант

Нектарови Посеща Нектарови Посеиа

деление. емость деление емость

мм мм

Kol ггроль 15 .48 28 19.80 36

ГКЗ 20.78+ 36+ 22.28+ 44

ЭБ 17.08+ 321 21 .50 40+

Олигосахар. 19.95+ 37 26.75+ 41

ИУК 2.8MÛ 7 13.10- 19 17.70- 29

ИУК 1.4*10 14.35- 18 18.67 26

i!LV05 0. 74 1 2 1 .UX3 4

* - различия существенны при 95%. уровне значимости.

Спустя 14 суток стимулирующее действие сохранялось в вариантах обработки гнббереллинами и олигосахаринами. Ауксины в концентрациях 1.4*10_/' и 2.С*Ю_/' И существенно снижали количество нектара выделяемых растениями, как на 7-е так и на 14-е

сутки после обработки Стабл.9).

Следовательно, одним из косвенных Факторов увеличение урожая при обработке гиббереллинами может бить повышение нектаровыде.пения, что приподнт к увеличению посещаемости цветков пчелами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результат исследований подтверждают высказанное нами предположение об участии гормонов, получаемых материнским растением с пыльцой, I» процессах оплодотворения I! формирования плода, как на стадии достижения пыльцевой трубкой семяпочки, гак; к на стадии погтоп.чодотворения. Увеличение концентрации Фитогормоноп приводит к повышению павяпывании и массы плодов, что можно об71Чснить повышением аттрагирудачей способности начаш.'ей развитие семяпочки.

П наших экспериментах гиббереллины п наибольшей степени стимулировали прорастание пыльцевых перем и рост пыльцевых трубок, достоверно увеличивая завязывание плод!.). Ауксины, в концентрациях. снижающих жизнеспособность пыльцевых зерен, тем не менее в большей степени, чем гиббереллины, увеличивали среднюю массу плодов.

Другие фитогормоны - цитокинины и орассиностероилы также стимулировали завязывание и массу плодов.

Псе више указанные факты создают предпосылки для разработки приемов повышения урожайности растений, что становится особенно актуальным при сокращении эитомофауны, а следовательно, и снижению потенциального урожая при недоопылении.

г,.„,„ стимуляции нектаропыделения под действием

обработки гибберелпином, олпгосахаринами и эпибрассинолидпм также может найти применение п технологиях возделывания некоторых культур для привлечения насекомых-опылителей.

выводы

1. Фитогормони играют важную роль в процессах оплодотворения и Формирования плода растений, регулируя прорастание пыльцы, рост пыльцевой трубки, плияя на завязывание и массу плодов.

2. Гиббереллины стимулируют прорастание пыльцевых зерен и

-6 -4

рост пыльцевых трубок в концентрациях от 1.4*10 до 4.3*10 М,

7 -5

ауксины в концентрациях от 5.7*10 до 5.7*10 М; более высокие концентрации этих гормонов ингибируют указанные процессы.

3. При увеличении числа высеянных пыльцевых зерен (от 1 до 10) увеличивается процент прорастания пыльцы (от 11 до 57* соответственно).Подобный эффект достигается при выращивании одиночно посеянных пыльцевых зерен и введении в питательную среду Фитогормонов (гнббереллина. ауксина и эпибрассннолида).

4. Показано, что с увеличением размера пыльцевых зерен увеличивается процент прорастания пыльцы. При опылении пыльцой большего размера увеличивается завязывание и средняя масса плодов.

5. Обработка растений гиббереллином и ауксином в фазу конец бутонизации - начало цветения стимулирует процессы плодообразования, причем завязывание плодов в большей степени стимулируется гиббереллином, а масса плода - ауксином.

6. Опылении пыльцой обработанных гиббереллином растений приводит к увеличению как завязывания, так и массы семян; равнозначный эффект достигается при опылении обработанных гиббереллином растений пыльцой необработанных растений. Эффект обработки возрастает с увеличением концентрации препарата ( от 1.«*10~А до 4.3*10-S).

7. Обработка растений гречихи и вишни гиббереллином (ГК, -4 -4 -4 -4

1.4*10 - 2.9*10 М) и ауксином (ИУК 1.4*10 - 2.8*10 И ) в

Фазу бутонизации-начала цветения повышает урожай за счет увеличения завязывания и средней массы плода. особенно заметно стчмулируещее действие указанных обработок в условиях недостаточного опыления.

8. Обработка растений в Фазу бутонизации-цветения гиббереллинами приводит к увеличению нектаровыделения, в то время как ауксины снижают этот показатель.

9. Выявлена возможность использования параметров жизнеспособности пыльцы в качеств • метода для экспресс - оценки Физиологического воздействия Физических и химических Факторов, а также для мониторинга загрязнения объектов природной среды.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Бойценюк Л. И., Калашников Д. В., Хор.хе Рикельме Диас, Курапов П. Б. Гормональная регуляция процессов оплодотворения.// Тез. док. третьей конференции «Регуляторы роста н развития растений». (Москва, 27—29 июня 1995 г.) ТСХА—М., 1995. С. 9—10.

2. Бойценюк Л. И. Влияние фиторегуляторов на нектаро-продуктивность и урожай растений. // Тез. док. третьей конференции «Регуляторы роста и развития растений». (Москва, 27—29 июня 1995 г.) ТСХА—М„ 1995. С. 74—75.

3. Бойценюк Л. И., Калашников Д. В., Курапов П. Б. Влияние фитогормонов на формирование плодов у перекрестно-опыляемых растений.//Тез. докл. второй межвузовской конф., Орехово-Зуево, 1996. С. 7—8.

4. Бойценюк Л. И., Калашников Д. В., Хорхе Рикельме Диас, Курапов П. Б. Влияние физических, химических и гормональных факторов на рост пыльцевых трубок настурции in vitro. // Доклады ТСХА, 1996, вып. 267. С. 26—40.

5. Бойценюк Л. И., Калашников Д. В., Ковалев В. М. Антистрессовое действие эпибргссинолида на физиологические показатели и продуктивность гречихи в условиях загрязнения почвы свинцом.//Тез. конф. РАСХН. Актуальные проблемы биотехн. в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии. Москва, 1996. С. 13.

6. Бойценюк Л. И., Калашников Д. В., Хорхе Рикельме Диас. Влияние фиторегуляторов на нектаровыделение и урожай вишни и гречихи. // Пчеловодство, 1996, № 4.

Объем 1 п. л.

Заказ 195.

Типография Издательства МСХА 127550, Москиа, Тимирязевская ул., 44

Тираж 100

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бойценюк, Леонид Иосифович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Обзор литературы: Регуляция роста пыльцевых трубок и Формирования плодов и роль Физиологически активных веществ в этих процессах

1.1. Физиологически активные веществе пыльцы и их роль. в регуляции роста пыльцевой трубки.

1.1.1. Состав пыльцы.

1.1.2. Формирование и рост пыльцевых трубок. 9.

1.1.3. Факторы, влияющие на рост пыльцевых трубок.

1.1.3.1. Влияние факторов внешней среды.1 ^

1.1.3.2. Влияние размеров пыльцевых зерен на рост пыльцевых трубок.

1.1.3.3. Взаимовлияние пыльцевых зерен при прорастании.

1.1.4. Роль регуляторных веществ в процессах роста пыльцевой трубки.

1.2. Опыление и оплодотворение как Факторы формирования плодов.

1.2.1. Роль опыления в Формировании плодов.

1.2.1.2. Влияние количества пыльцы на Формирование плодов.

1.2.2. Процесс оплодотворения.

1.2.3. Гормональное стимулирование завязывания плодов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние фиторегуляторов на генеративную сферу растений"

Одним из важнейших Факторов, определяющих Формирование урожая ряда сельскохозяйственных растений, является успешное оплодотворение.

Литературные данные указывают на участие регуляторных веществ в оплодотворении растений (Nagar, Raja Rao, 1989; Кинье, Сакс, Бернье, 1991), однако в целом гормональная регуляция процессов оплодотворения остается не достаточно изученной.

Свидетельствами участия Фитогормонов в оплодотворении являются установленные Факты присутствия Фитогормонов - ауксинов, гиббереллинов, цитокининов и брассиностероидов - в пыльце, а также зависимость завязывания и размера плода от количества пыльцы, попавшей на рыльце пестика (Saha, Ganguli, Ganguli 1986; Yamagucyi Isoraura, Kurogoschi Shin, et al., 1990; Jahns Tomas, Jolliff, 1990; Asakawa Sclichi, Abe Hiroshi 1991).

Одним из основных Факторов, лимитирующих оплодотворение, является прорастание пыльцевых зерен на рыльце пестика и рост пыльцевой трубки. Согласно литературным данным на эти показатели оказывает большое влияние комплекс химических, Физических и особенно,гормональных Факторов [Nagar, Raja Rao, 1989; Jahns Tomas, Jolliff, 1990; Asakawa Sclichi, Abe Hiroshi 1991; Аллее, 1968; Кинье, Сакс, Бернье, 1991; Ермакова, Шевченко, 1992,).Действие Фитогормонов может быть обусловлено как влиянием на активность синтетических Ферментативных процессов, так и изменением проницаемости мембран и поступления воды в пыльцевое зерно, а также изменением кислотности среды в области клеточной стенки.

Указанные факты участия Фитогормонов в оплодотворении, их наличие в пыльце, а также зависимость оплодотворения от количества пыльцы, попавшей на рыльце пестика, указывают на вероятно существующую связь между количеством Фитогормонов, полученных материнским растением с пыльцой, и эффективностью оплодотворения. Таким образом, гормональная регуляция этих процессов может быть сведена к стимуляции прорастания пыльцы в тканях рыльца пестика, а следовательно, собственно к регуляции оплодотворения, и обеспечении необходимой аттрагирующей способности начавшей развитие семяпочки.

В настоящее время, в связи с широким применением средств химической защиты растений, резко сократилось количество естественных опылителей, а следовательно ухудшились условия оплодотворения энтомофильных культур. Разработка приемов, стимулирующих процесс завязывания плодов, в какой-то степени способна нивелировать недостаточное опыление.

Исследование вопросов гормональной регуляции оплодотворения и Формирования плодов открывает новые возможности повышения урожайности энтомофильных растений.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

В работе показано, что завязывание и Формирование плода находятся в зависимости от количества фитогормонов полученных с пыльцой или введенных искусственно. При этом показано, что введение дополнительного количества гормонов с пыльцой или обработка ими завязи практически не отличаются по эффективности.

Установленно, что наибольшей активностью,стимулирующей завязывание на изучаемых культурах обладали гиббереллины (ГК3 100 мг/л), и ауксин (ИУК 50 мг/л). Обработка данными Фитогормонами в Фазу конец бутонизации - начало цветения, устраняла негативный эффект недостаточного опыления.

Изучен гормональный состав пыльцы и завязи гречихи Показано влияние Фмторегудяторов на иетггарпвыделение. Изучены начальные этапы роста пыльцевых , уг, и показано гзлияиие ¡¡и; I спектра химических, Физических и гормональных Факторов на жизнеспособность пыльцевых зерен. Разработана математическая модель начальных этапов роста роста пыльцевых трубок.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Результаты исследований дополняют современные представления о гормональной регуляции онтогенеза растений. Показано участие Фитогормонов в Формировании плодов открывают новую возможность для разработки технологий с целью повышения урожайности растений.

Применение Фиторегуляторов во время цветения не только снимает негативные результаты недостаточного опыления и повышают завязывание и среднюю массу плодов

Проведенные нами исследования показывают целесообразность использования пыльцы в качестве тестрбъекта при скрининге рост-регулирующих соединений, а также возможность ее использования при анализе загрязнения объектов окружающей среды.

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Бойценюк, Леонид Иосифович

выводы

1. Фитогормоны играют важную роль в процессах оплодотворения и Формирования плода растений, регулируя прорастание пыльцы и рост пыльцевой трубки и влияя на завязывание и массу плодов.

2. Гиббереллины стимулируют прорастание пыльцевых зерен и 6 -4 рост пыльцевых трубок в концентрациях от 1.4*10 до 4.3*10 М,

7 —5 ауксины в концентрациях от 5.7*10 до 5.7*10 М; более высокие концентрации этих гормонов ингибируют указанные процессы.

3. При увеличении числа высеянных пыльцевых зерен (от 1 до 10 пыльцевых зерен) увеличивается процент прорастания пыльцы (от 11 до 51%) .Подобный эффект достигается при выращивании одиночно посеянных пыльцевых зерен введением в питательную среду Фитогормонов (гиббереллина, ауксина и эпибрассинолида).

4. Показано, что с увеличением размера пыльцевых зерен увеличивается процент прорастания пыльцы. При опылениии пыльцой большего размера увеличивается завязывание и средняя масса плодов.

5. Обработка растений гиббереллином и ауксином растений в Фазу конец бутонизации - начало цветения стимулирует процессы плодообразования, причем завязывание плодов в большей степени стимулируется гиббереллинами, а масса плода - ауксином.

6.Опыление пыльцой обработанных гиббереллином растений приводит к увеличению как завязывания, так и массы семян; равнозначный эффект достигается при опылении обработанных гиббереллином растений пыльцой необработанных растений. Эффект обработки возрастает с увеличением концентрации препарата ( от 1.4*10~4 до 4.3*10~4М).

7. Обработка растений гречихи и вишни гиббереллином (ГК3 1.4*10~4 - 2.9*10~4М) и ауксином (ИУК 1.4*10~4 - 2.8*10-4 М ) в Фазу бутонизации-начала цветения повышает урожай гречихи и вишни за счет увеличения завязывания и средней массы плода. Особенно заметно стимулируещее действие указанных обработок в условиях недостаточного опыления.

8. Обработка растений в Фазу бутонизации-цветения гиббереллинами приводит к увеличению нектаровыделения, в то время как ауксины снижают этот показатель.

9. Выявлена возможность использования параметров жизнеспособности пыльцы в качестве метода для экспресс - оценки Физиологического воздействия физических и химических Факторов, а также для мониторинга загрязнения объектов природной среды.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты исследований подтверждают высказанное нами предположение об участии гормонов, получаемых материнским растением с пыльцой, в процессах оплодотворения и Формирования плода, как на стадии достижения пыльцевой трубкой семяпочки, так и на стадии постоплодотворения. Увеличение концентрации Фитогормонов приводит к повышению завязывания и массы плодов, что можно объяснить повышением аттрагирующей способности начавшей развитие семяпочки.

В наших экспериментах гиббереллины в наибольшей степени стимулировали прорастание пыльцевых зерен и рост пыльцевых трубок, достоверно увеличивая завязывание плодов. Ауксины в концентрациях, снижающих жизнеспособность пыльцевых зерен, тем не менее в большей степени, чем гиббереллины увеличивали среднюю массу плодов.

Другие Фитогормоны - цитокинины и брассиностероиды также стимулировали завязывание и массу плодов.

Все выше указанные Факты создают предпосылки для разработки приемов повышения урожайности растений, что становится особенно актуальным при сокращении энтомофауны, а следовательно, и снижении потенциального урожая при недоопылении.

Показанный эффект стимуляции нектаровыделения под действием обработки гиббереллином, олигосахаринами и эпибрассинолидом также может найти применение в технологиях возделывания некоторых культур для привлечения насекомых-опылителей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бойценюк, Леонид Иосифович, Москва

1. Абдурашидов H. Влияние гиббереллина на семенную продуктивность капусты белокочанной.// М. , 1989, Депонированная рукопись.

2. Агафонов Н.В., Смирнов С.К., Саленков С. H. Особенности роста и плодоношения винограда Кишмиш черный при обработке растений гибберелловой кислотой и тидиазуроном// Изв.ТСХА., 1989, в.2, с.109-118.

3. Аллее И.Т., " Влияние биологически активных веществ на процесс оплодотворения и эмбриогенез семян красного клевера Т.pratense.", Материалы Всесоюзного симпозиума по эмбриологии растений. Киев 1968, с.13.

4. Андреев В.H. Пыльца растений собираемая пчелами.// Харьков, 1925, стр.15-17

5. Бабаджанян Г. А. Чужеродное доопыление растений.// Ереван, Из. АН. Арм.ССР, 1962.

6. Базавлук В.Ю. Влияние ограниченного и избыточного количества пыльцы и развитие потомства у Mirabilis jalapa.// Тр.ин.ген. АН. СССР, 1953 N.20, стр.94.

7. Балашова H.H. Строение и биологическая активность стероидных гликозидов ряда спиростана и Фуростана.// Кишинев 1987,стр.106-119.

8. Банникова В. А. О прорастании и жизнеспособности пыльцы ржи.// Уч.зап. Перм. ун-та., 1966, в.130. с.71.

9. Борковская В.А. К физиологии пыльцы томата.//Тр. Каменно-степной сел.стан. 1937, т.1, с.49.

10. Бритиков Е. А. Физиология опыления и оплодотворения у растений.// М."Знание", 1957 г

11. Бритиков Е.А., Петропавловская Р.H. Влияние Ферментов, витаминов и стимуляторов типа ауксинов на завязывание семян при инцухте ржи.// ДАН СССР, 1954, N.97(2), стр.31.

12. Бритиков Е.А., Лащеникова Р.Н., Виссарионова В. Я. О механизме действия чужеродной пыльцы на самооплодотворение перекрестноопылителей.// Физиолог.раст., 1955, N.2(5)6 стр.432.

13. Голубинский И.H. Взаимостимуляция пыльцевых зерен при прорастании.// ДАН СССР, 1945, N.48(1)6 стр.64.

14. Голубинский И.H. О взаимовлиянии пыльцевых зерен различных видов при совместном проращивании на искусственных средах.// ДАН СССР, 1946, N.53(1). СТр.74.

15. Голубинский И. H. Влияние примеси пыльцы окружающих растений на прорастание пыльцы.//ДАН СССР, 1951, т.7(3), с.38.

16. Голубинский И. H. Биология прорастания пыльцы.//Киев, Наукова Думка, 1974, стр.88-93.

17. Гребинский С.О. Рост растений.//Изд.львов.ун., 1961 г

18. Губин А.Ф., Халифман И. А. Пчелы и урожай.//Москва. Знание, 1956, серия V, N6, 1 квартал, стр15-17.

19. Гукова М.М., Фаустова В.В. О стимуляционном действии гиббереллина.// Изв.ТСХА., 1961 N2, с.64.

20. Дарвин Ч. Действие перекрестного опыления и самоопыления в растительном мире.// Сельхозгиз, М.,1939.

21. Дарова А. Т. Роль чужой пыльцы в процессе оплодотворения винограда и меры борьбы с осыпанием цвета.// АвтореФ.дисс., Одесса 1960 г.

22. Девятое А.И. Применение гормонов для повышение урожайности у вишни// Межд.с/х журнал, 1992, N.4, стр.57-60.

23. Димча Г.Г. использование медоносных пчел для опыления подсолнечника, нектаропродуктивность гетерозисных гибридов.// К. , Укр.СХИ., Автор.дисс., 1989.

24. Ермакова Т.е., Шевченко C.B., "Физиологические особенности зрелой пыльцы некоторых цветковых растений",Госуд.Никитский Ботан.Сад., Ялта, 1992, с.31

25. Жолкевич В.Н. Водный обмен растений.//В сб.ст., М. ,1. Наука, 1989„ с.256-258.

26. Жуков О.С., Луткова E.H., Кравцов П.В. Влияние стимуляторов роста и чужеродного опыления на образование апомиктических плодов косточковых растений.//Докл.кон.Влияние Физико-химических Факторов на растительные организмы. Пермь 1984. с.121-124.

27. Казахмедов Р.Э., Раджабов А.К. Влияние регулятов роста на Формирование бессемянных ягод у семенных сортов винограда.//Виноград и вино России, 1994, N.6.

28. Калинин Ф.Л. , Мережинский Ю.Г. Регуляторы роста растений.// К., "Наукова думка", 1965 г.

29. Кинье ЖМ., Сакс Р., Бернье Ж., "Физиология цветения",Москва, Агропромиздат, 1991.

30. Коварский А.Е. Чужеопыление как новый прием селекции.// Кишинев, "Картя Молдаванеску", 1965 г

31. Кокарева В.А. Влияние Физиологически активных вешеств и типа материнских растений на завязывание семян при межвидовых скрещиваниях лука.//Докл.ТСХА. 1980, N.226, с.82-86.

32. Кудинова И.М. Перспективы использования карпатских пчел на опылении клевера красного в условиях нечерноземной зоны РСФСР.//М., АвтореФ.дисс., 1984 г.

33. Кузнецов C.B. Жизнеспособность пыльцы кукурузы в условиях засухи и полива// Сб.тр.асп. и молодых н. с. Всес. н. и. ин.раст., 1966, в.7(11), с.139.

34. Лаквилл Л. Партенокарпия, развитие плодов и зависимость этих растений от регуляторов роста.//Регуляторы роста растений в с/х. М., 1958, с.130-156.

35. Литвин H.Л. Подкормка семенников сахарной свеклы микроэлементами и стимуляторами роста в период цветения.// Основные выводы н.и. работы по сахарной свекле, 1968,К., стр.64-67.А

36. Мананков И.К. Физиология действия гиббереллина на рост и генеративное развитие винограда.// АвтореФ.ди.док.биол.наук.б Киев. ИФР АН УССР 1981.

37. Михайлова П.В. Избирательность оплодотворения у цветковых растений.// АвтореФ.диее., Харьков, 1962 г.

38. Никифорова И.У. Эффективность опыления томатов закрытого грунта.// Экология опыления цветковых, Пермь, 1989, стр.119-122.

39. Овчинников H.H. Характер изменения среднего размера пыльцы в соцветиях люпина белого, подсолнечника и ржи.// Учен.зап. Кишин.ун., 1952, в. 46.

40. Овчинников H.H. Изменение свойст пыльцы и яйцеклеток в зависимости от их образования в пределах соцветия.// Наследственность и изменчивость растений, животных и м.о. М. АН. СССР, 1959, с.463.

41. Острейко С. А. Влияние хлорогеновой кислоты на проростание пыльцевых трубок смородины черной.// Агрот.селек. и мех. в ягодоводстве Нечерноземья, М. , 1987, с.47-52.

42. Пашкевич В.В. Общяя помология или учение о сортах плодовых деревьев// М.-Л.ГОС с/х издат., 1930, стр 27-32.

43. Паушева З.П. Биологическая неоднородность пыльцевых зерен гречихи.// ИЗВ. ТСХА., 1960, В.2(33) стр.207.

44. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений.// Москва. Колос, 1980, 211-214

45. Пачев. А.Г. Жизнедеятельность мандарина уншиу// Сов.Суб тропики, 1938, в.6, с.31.

46. Поддубная-Арнольди В.А. К исследованию пыльцевых трубок у покрытосемянных растений.// ДАН СССР, 1965, N.162(3), стр.705.

47. Полевой В.В.,"Физиология растений", Москва, Высшая школа, 1989, с.379-381.

48. Поляков И.М. Роль пыльцевых трубок в различных частях пестика и избирательность оплодотворения.// Изв.АН СССР, 1951, сербиолог. , N.1, с.31.

49. Поляков И.М., Колосова К.С., Михайлова П.В. Исследования избирательности оплодотворения у табака, махорки и кукурузы.// Тр.Укр.ин-та. растениеводства, селекции и генетики. 1959, N.4, стр.179,

50. О.Попа Д.П., Криммер М.З., Кучкова К. И. Применение регуляторов роста в растениеводстве.// Справ.Кишинев-Штинница, 1981, с.158.

51. Ракитин Ю.В., Бритиков Е. А. О формирующихся семенах как источниках ауксина.// Физиология растений, 1973, Т.20, В.6, с.1101-1108.

52. Рябов И.Н. Вопросы опыления и плодоношения плодовых деревьев.// Гос.Никит.Бот.сад, 1930, N.14.

53. Сазыкин 10. В. Роль пчел в опылении ягодных кустарников.//М., ТСХА, АвтореФ.дисс., 1959 г.

54. Самородов В.М., Голубинский И.Н.,"Стыбулювання проростання пылку груш пид выплывом Физиологично-активных рэчовин", Укр.бот.журнал.1978, Т.35, N.4, с.401-404

55. Самохвалов Г.Н. Влияние летучих выделений цветка на процесс оплодотворения у плодовых деревьев.// АвтореФ дисс., Мичуринск, 1964 г.

56. Сехпосян Е.П. Морфологические особенности пыльцы у некоторых сортов вишень.//, Изв.М-ва. с/х Арм.ССР, 1966, В.6, с.29.

57. Скребцова. Н.Ф. Роль медоносных пчел в избирательном оплодотворении главнейших энтомофильных культур.// Харьков, АвтореФ.дисс., 1989 г.

58. Тер-Аванесян Д.В. Оплодотворение растений ограниченным количеством пыльцы.// Агробиология, 1947, N.36 стр.71.

59. Тер-Аванесян Д.В. Роль количества пыльцевых зерен цветка в оплодотворении растений.// Тр.по прикл.ботанике, генетике и селекции, 1949, N.28(2), стр.119.

60. Турбин н.В. О биологической роли чужеродного доопыления.// "Вопросы биологии оплодотворения" Изд. ЛГУ., 1954, с.141.

61. Томас Д. Влияние количества привнесенной пыльцы на завязывание семян.//Crop.sei., 1990, N4, p.850-853.

62. Уголик H.A. Действие ростовых вешеств на плодоношение сливы.// Бюл.Гл.Бот.сада, 1966, N.61, с.122-124.

63. Уоринг Ф. Филипс И. Рост растений и дифференцировка// Москва. Мир., 1984, стр.198-201.

64. Чайлахян М.Х. Гиббереллины растений.// М. , Изд.АН СССР, 1961 г.

65. Чайлахян М.Х. Гиббереллины растений.// М. , Изд.АН СССР, 1963 г.бб.Чекуров В.М., Сычев И.П., Друганов А.Г. Полигиббереллиновые препараты и их биологическая активность.// Тез.докл.2.конФ. Per.роста раст., М., 1993, с.13.

66. Черненко С.Ф., Черненко Е.С. Пути получения гибридов между грушей и яблоней.// Изв.АН СССР, 1955, т.4, с.14.

67. Чувашина Н.П. Преодоление нескрещиваемости при отдаленной гибридизации плодовых и ягодных культур с помощю гиббереллина.// Вкн.: Гиббереллины растений.// М., Изд.АН СССР, 1963 г. с.202.

68. Якушкина Н.И. О ростовых веществах пыльцы растений.// ДАН СССР, 1947, Т.56:5, с.549.

69. Adams J. On the germination of the pollenn grains of applr and öfter fruit trees.// Bot.Gaz., 1916, v.761, p.131.

70. Asakawa Sclichi, Abe Hiroshi, "Endogenous Gibberellins in mature pollen of Lilium longiflorum", "Agr. and Biol.Chem"., 1991, N1, s.277-278.

71. Avramov L. Klijavost polens nekiu sorti vinove lose.// Arhiv.poloprivrende nauke, 1956, v.9.l, p22.

72. Baker H.G., Baker I. Starch in angiosperm pollen grains and its evolutionary significance.//Am.J.Bot. N:66. P.591-600

73. Bar-Shalom D. , Mattsson 0., //Bot.Tiddskr. 1977 v. 71.p251 .

74. Bartz M. , Stosser R. Qvantitative Auswertung der Pollenslauche im Griffel von Sauerkirschen (Prunus caerasus) in Bezeihung zum Fruchtan satz.// Gartenbauwissenschaft., Bd., 1989, N.(3), s.132-137.

75. Branschneid P. Die Befruchtungsverchaltnisse beim Obst und bei der Rebe.// Gartenbauwissenschaft, 1929, N.2, p.2.

76. Branschneid P. Zur Phisiologie der Pollenkeimung und ihrer experementellen Beeinflussung .// Planta, 1930, v2.2, p.368.

77. Brink Studies on pollen tube development in partialle sterile hybrids between Linaria vulgaris and L.purpurea.// Z.Ind.Abst.Vererb., 1929, N.44, p.129.

78. Brink N.A. Preliminary study of role of saltts in pollen tube growth.// Bot.Gaz., 1924, N.78, p.361.

79. Cass D.D., Jensen W.A. Fertilization in barley.// Am.J.Bot., 1974, v.57, p.62-70.

80. Cass D.D. Development of spermcells in barley.// Can.J.Bot., v.53, pp.1051-1053, 1975.

81. Chandler W.H. Fruit Growiing.//Boston . Honnghton-Miffflin 1925, Co., p.74.

82. Chang R.L.Y., Trevithick J.P. How important is secretion of exoensiraes througy apical cell walls of fungi//Arch.Microbiol. 1974, v.101. p.281-293.

83. Child R.D. Pollination studies in fruit trees, 5. Tube growth in relation to temperature and ovule longetive in the cider apple Michelin.// Hortic.res.stat.Ann.Rept.1967, p.117.

84. Coccuci A.E., Orchid embryologi: The membrane systemsand the pollen tube growth.//Caryologia. 1973, V.25. p.201-206.

85. Crane J.C. Furher studies on growth regulator induced hfrtenocarpy in Bing cherri.// Proc.Amer.Soc.Hort.Sci., 1968, p.83.

86. Crane J.C. Partenocarpy peach development as influenced by time of gibberellic api icat ion.//Proc.Amer.Soc.Hort.Sci., 1963, p. 92.

87. Crang R.E., Hein N.B. "Ennzime degradation of Lichinis alba pollen tube walls.//Cytologia. N:36. P.449-454. 1971.

88. Crang R.E.MilesG.B. An electron microscope study of germinating Lychinis alba pollen.// Am.J.Bot. 1969, v. 56. p.398-405.

89. Cresti M., Went J.L. "Callóse deposition and plug formation in Petunia pollen tubes in situ.// Planta, 1976,N:133. p.35-40.

90. Cresti M, Ciampolini F, Sarfatti G., Pacini E. Germination and early tube development in vitro of Lycopersicon peruvianum pollen: Ultrastructural features.// Planta, 1977,v.136. p.239-247.

91. Cresti M, Ciampolini F, Sarfatti G. ,Pacini E. "Germination and pollen tube development in situ of Lycopersicon peruvianum pollen: Ultrastructural features.// Planta, 1977, N : 136, p.239-247.

92. Cresti M, Ciampolini F, Sarfatti G., Ultrastructuralfeatures of Prunus avium pollen tube in vivo. The compatible pollen tube.//Caryologia, 1979, v.32. p.433-440.

93. Crest i M, Ciampolini F, Sarfatti G, "Ultrastructural investigations in Lycopersicon peruvianum pollen activation and pollen tube organization after self-and cross-poleination." Planta, 1980, 150: p.211-217.

94. Deurenberg J.J.M. In vitro protein synthesis with polysomes from unpoleinated cross- and self-poleinated Petunia ovaries.// Planta, 1976, v.128. p 29-33.

95. Deurenberg J.J.M. Differentiated protein synthesis with polisomes from petunia ovaries before fertilization.// Planta, 1977, V.130, p.201-206.

96. Dickinson H.G., Heslop-Harrison J. The mode of growth of the inner layer of the pollen grain exine in Lilium.// Cytobios. 1971, N:4. p.233-243.

97. Ql.i'n^els F.M. Function of goldi vesicles in relation to cell wall synthesis in germinating Petunia pollen. 11.Chemical composition of goldgi vesicles and pollen tube wall.//Acta Bot.Neerl. 1974, v.23., p.81-89.

98. Ewert R. Blumen und Frukten der insektblutigen garden und feldfruchte unter dem Einfluss der Bienenzucht.//Neudamm Neumann.1929.

99. Fitting H. Entwiclungs physiologische Probleme der fruchtbildung.// Zeit.Bot., 1910, N.2, s.225.

100. Franke W.W., Woude J.W.,Morre J.D. "Tabular and filamentous structures in pollen tubes: Possible role as guide elements in protoplasmic streaming and vectorial migration of secretory vesicles.// Planta, 1972, N:105. p.317-341.

101. Gerasimova-Navasina H. A contrybution to the cytology of fertilization in flowering plants.// Nucleus, 1973, v.3, p.111-120.

102. Goodwin P.W. Phitohormones and fruits growth.// In Phytohorraones and related compounds. Amsterdam-Oxford-New-York: Biomedical press, 1978, v.11, p.174-214.

103. Gustafson F.G. Parthenocarpi natural and artifical.// Bot.Rev., 1942.

104. Helsper J.P.F.G., Veerkamp J.H., Sassen M.D.A. "b-Glucan synthetase activity in goldgi vesicles of Petunia hybrida".//Plana, 1977, N133: p.303-308.

105. Herrero M. , Dickinson H.G. Pollen tube growth following compatible and incompatible intraspecific pollination in Petunia hybrida.//Planta, 1980, N.-148. p.217-221.

106. Heslop-Harrison J. Aspects of the structure, cytochemistry, and germination of the pollen of rye (Secale sereale).//Ann.Bot.supl1. N:l. P.1-47. 1979.

107. Heslop-Harrison J.,// Inter.Rev.Cit. 1987., v.107., p.l.

108. Hewitt F.R., Neill P.O. Effects of brassinolide and ofter growth regulators on the germinations and growth of pollen tubs of Prunus avium using a multiple hanging drop assay.// Austral.J.Plant Phisiol., 1985, v.12, N.2, p.201-211.

109. Hoefert L.L. Fine structure of sperm cells in pollengrains of Beta.// Protoplasma, 1973, v.68, pp.237-240.

110. Hoekstra F.A.Mitochondrial development and activity of binucleate and trynucleate pollen duringermination in vitro.// Planta, 1976, N:145. p.25-36.

111. Hu S.Y. The fuzion of male and female nuclei in fertilization of higher plants.// Acta.Bot.Sin, 1983, v.21, p.1-15,

112. Jacobsen S.E., Olszewski N.E., Characterization of the arrest in anther development associated with gibberellin defficiency of the gib-1 mutant of tomato. //Plant-Phisiologi 1991, v.97;1., p.409-414.

113. Jacson D.J. Gibberellin and growth in stone fruits: induction parthenocarpy in plum.// Austral.J.Doot., 1968, v.21(6), p.1103.

114. Jahns Thomas R., Jolliff Gary D., "Pollen deposition rate effects on set in meadowfoam Limanthes alba.", Crop Sei., 1990, 30, с.850-853

115. Jensen W.A. Cell development during plant embriogenesys. In Meristems and ddeferentiation.// Brookhaven Symp.Biol., 1969, v.16, p.179-202.

116. Jensen W.A. Cotton embriogenesis: The zigote.// Planta, 1968, v.79, p.346-366.

117. Jensen W.A. Cotton embriogenesis: Polysome formations in the zigote.// J.Cell.Biol., 1968, v.36, p.403-407.

118. Jensen W.A., Fisher D.B. Cotton embriogenesis: "The sperm". Protoplasma, 1968, v.65, p.277-286.

119. Jensen W.A., Fisher D.B.Cotton embriogenesis: "The pollen Otubein the stigma and style". Protoplasma, 69, p.215-235, 1970

120. Kessler E. Der Pollen von Solanum tuberosum seine Keimfigkeit und das Wachstum der Pollenschlauchen .//Angew. bot., 1930, V.12, s.362.

121. Knox R.B. Heslop-Harrison J. Pollen-wall proteins: Localisation and enzim activity.//J.Cell.Sci. 1970, v.6. pl-27.

122. Kroh M. , Knuiman B. "Ultrastructure of cell wall and plugs of tobacco pollen tubes after chemical extraction of polysa ccharides.// Planta, 1982, N.154, p.241-250.

123. Kumar V., Sing Abhai, "Growth of pollen tube in Dianhus coryophyllus", J.Indian Bot.Soc., 1985, 64, N1., s.93-97.

124. Martinoni A,.Canevascini Vm, Grandes A.,Hurtes J.Fruit set induction and yilld increase in egg-plant by use of 4-chlorophenoxyacetic acid (4CPA).-Rev.Suisse de viticult.,d"arbori cult.,et d'horticult.,1981,v.13,N 2,p.109-112.

125. Mascarenhas J.P. The biochemistry of angiosperm pollen development.//Bot.Rev., 1975, v.41. p.260-314.

126. Molibowska J. Bimodality of crowted pollen tubes in Primula obconica.//J.Hered., 1993, N.33(5).137 .Muller-Stoll W.R. Uber das Verchalten der Exine Nonaperturater Angiosperm-pollen bei Quellung und Keimung.//Grana Palynol., 1956, v.l. p.38-46.

127. Nagar P.K. , Raja Rao, " Early changes in growth regulate content of pollinated guawa fruits", Sci.Hort., 1986, 29, N1-2,s,139-146.

128. Nakamoto M. Yasudo N. О прорастании пыльцы coH.//Natur Sci, 1957, v.2.1., p.63.

129. Nakamura N., Iwanami Y. Miki-Hirosige H. The mechanismof callóse wall and callóse plug forraationin germinating pollen.// Jap.J.Palynol. 1989, N.24. p.33-44.

130. Neeraja., Khanna V.K. Studies on pollen germination, pollen tube growth and seed set in reciprocal wheat-barley crosses .// Wheat-Germination-Servise. 1992, N.74., p.28-32.

131. Pankow H. Uber den Pollenkitt be i Galanthus nivalis.//Flora, 1957, N.146. p.240-253.

132. Pett itt J.M., McConchie C.A., Knox R.B. Unique adaptations for submarine pollination in seagrasses.// Nature, 1980, v.286. PP.487-489.

133. Prassad A., Gibberellic acid induced parthenocarpy in the peach.// Agra Univ.J.Res., 1963, N.12(3), p.63-67.

134. Rao S.N., Subba Rao Ch. Effects of gibberellic acid of Eriobotria japónica.// Hortic.Sci., 1963, v.7(2), p.127.

135. Rao Maraatha, "Effect of morfactins 3233 and IT 3456 on pollei germination and tube growth in Asclepias curossavica L.",

136. Curr.Sc i. , 1987, 56, N.13, s.675-676.

137. Ratiu Flavia. Observâtii aspura germinarii polenului la plante de cultura.//Babes-bolvai Biol., 1958, v.3, p.93.

138. Rebeitz C.A. Growth regulator induced parthenocarpy in the Bing cherri.// Proc.Amer.Soc.Hort.Sci., 1961, p71.

139. Reiss H.D., Herth W. "Calcium ionofore A23187 affects localized wall secretion in the tip region of pollen tubes of Lilium longiflorum.// Planta, 1979, N.145. p.225-232.

140. Rosen W.G., Gawlick S.R. Relation of lily pollen tube structure to pistil incompatiblity and mode of nutrition.// In Proc.VI Intl. Congr.Electron Microscopy, Kyoto. Mazuren, Tokyo, 1966, p.313-314.

141. Rosen W.G., Gawlick S.R., et all. Fine structure and cytochemystry of Lilium pollen tubes. //Am.J.Bot., 1964, N.51. p.61-71.

142. Rosen W.G. Pollen tube growth and fine structure. In Heslop-Harrison (ed) Pollen: Development and physiology.// Butterworth, London., 1969, p.177-189.

143. Rowley J.R. Pollen development in Artemisia vulgaris with special reference to glycocalyx material.//Pollen Spores,1.77,v.19. p.169-184.

144. Russell S.D. "Fertilization in Plumbago zeylanica: Entry and discharge of the pollen tube in the embryo sac.//Can.J.Bot. 1982, v.60. p.2219-2230.

145. Russell S.D. "Fertilization in Plumbago zeylanica: Gametic fuzion and fate of the male cytoplasm.//Am. J .Bot. , 1983, v.70, p.416-434.

146. Russell S.D., Cass D.D. "Ultrastructure of the sperms of Plumbago zeylanica.I.Cytology and association with the vegetative nucleus.//Protoplasma, 1981, N. 107.p.85-107.

147. Russell S.D., Cass D.D. "infrastructure and fert i 1 izal: ion in Plumbago zeylantca.\\Acta Bot.Soc,Pol., 1981, N.50. p.185-189.

148. Saha P.K., Ganguli T, Ganguli S.N., "Gibberellins from anther of Cassia tora.", Trans Bose.Res.Inst., 1986, 49, N1-2, s.29-32.

149. Sassen M.M. "Fine structure of Petunia pollen grain and pollen hube.//Acta Bot.Neerl., 1964, N.13. p.175-181.

150. Sastri D.S., Moss J.P., "Effect of growth regulators on incompatible crosses in the genus Arachis.L.", I.Exp.Bot., 1982, 33, N37, p.293-31.

151. Savelli R., Caruso. Stimulation mutuelle dans la germinstion des grains de pollen de Nicotians.// C.r. Acad.sci., 1940, N.210, p.546.

152. Savinova N., Lobl D. , Balan T., Imbunatatirea fructificarii la tomate prin folosirea stimulentilor.// Gradina, via si livada., 1963, v.12(5), p.25.

153. Sen S.K. Studi on the rate of pollen tube growth of Sesbania aculeata Pers. under infra red radiation in culture medium.// Ossterr. Bot. Z., 1960, v.107.1, p.80.

154. Soczek Z., Lazniewska i. Wplyv gibberscol i krzvotoxy na zawiazywanie wisni admiral Podbielslci i Ostheimska.//Pracetnt.Sadown. w Skierniexicachi; XI, 1967.

155. Shivanna K.R., Johri B.M., Sastri D.C., Development and physiology angoisperm pollen.//Today and Tomorrow's, New Dehli. 1979.

156. Stanley R.G., Pollen chemmistry and tube growth. In Heslop-Harrison J. ( e d) Pollen: Development andphysiology.//Butterworth, London, 1971, p.131-155.

157. Stanley R.G., Linskens H.F. Pollen: Biology, biochemistry, management.//Springer, Berlin-Heidelberg-New York.,1974.

158. Stefen K. Fertilization. In: Maheswari p (eel) Recent advances in the embryology of angiosperms.// Int.Soc.Plant. Morphologists, Univ Dehli., 1969, p.105-133.

159. Swnmy A.V., Klianna V.K., Effect of some growth regulators on in vitro pollen germination and tube growth in cicer.// Inter.Chickrea-Newslet., 1991, V.13, p.32-34.

160. Thompson P.A. Promotion of strawberry fruit development by treatment with growth regulating subtances.// Hort.Res., 1967, v. 1 , p.13.

161. Vasi1 I.K. The new biology of pollen.// Naturwissenschaft, 1973, v.60. p.247-253.

162. Vasil I.K.The histology and physiology of pollen germination and pollen tube growth on the stigma and in the style. In: Linskens H.F. Fertilization in higher plants.//North-Holland, Amsterdam, 1974, p.105-118.

163. Vithanage H.I.M.V., Knox R.B. Development and cytochemistry of stigma surface and response to self- and foreign-pollination in Helliantus annus.// Phytomorphology, 1977, v.27. p.168-179.

164. Vitagliano C., Viti R. Effects of some growth substances on pollen germination and tube growth in different stone fruits.// Acta.Hort., 1989, N.239, p.379-382.

165. Viti R., Vitagliano C. , Bartolini S. Effects of various treatments with growth regulator activity on the germinating and fertilizing abilities of pollen.// Rev.Del.Ortof.Italiana. 1986, v.70:6, p.53-73

166. Vries H. Het leven der blomen. // Willink, Haarlem, 1900, p.142.

167. Went J.L. van, The ultrastructure of the fertilizedembryo sac of Petunia.//Acta Bot.Neerl, 1970, v.19, p.468-480.

168. Went J.L. van, The ultrastructure of impatiens pollen. In Linskens H.F. (ed) Fertilization in higher plants.// North-Holland, Amsterdam. 1974, p.81-88.

169. Werszilowski J., Mozezynski W. , et.al. Патент ПНР, кл.45, N51400, Caoik N.63158. 1967.

170. Wilms H.J. Ultrastructure of the developing embryo sac of spinach.//Acta.Bot.Neerl., 1980, N.29, p.243-260.

171. Wittver S.H. Phitohormones and chemical regulators in agriculture.//Biomedical press, 1978, v.2, p.599-615.

172. Woude W.J.van der, Morre D.J., Bracker C.E. "Isolation and chacterization of secretory vesicles in germinated pollen of Lilium longiflorum."// J.Cell.Sci., 1971, N.8, p.331-351.

173. Zatyko J.M. The parthenocarpy fruit set of the sour cherry induced by treatment with gibberellic acid, auxin and CCC.//Acta.Ag.Acad.Sei. 1969. N.l, p.18-21.

174. Yamaguchi Isomara, Kurogoschi Shin, et al, "Identefication of gibberellins from the pollen and anthers of Zea mais by immunoassay and GC/MS.". Plant and Cell Phiziol., 1990, 31, N.8, s.1063-1069.