Влияние дофаминергической и опиоидной систем на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс

Стоволосов, Игорь Сергеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние дофаминергической и опиоидной систем на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние дофаминергической и опиоидной систем на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс"

Стоволосов Игорь Сергеевич

ВЛИЯНИЕ ДОФАМИНЕРГИЧЕСКОЙ И ОПИОИДНОЙ СИСТЕМ НА ЗАВИСИМОЕ ОТ МАТЕРИ ПОВЕДЕНИЕ ДЕТЕНЫШЕЙ БЕЛЫХ КРЫС

Специальность 03.03.01 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

- 8 ДЕК 2011

МОСКВА-2011

005005577

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных Биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова (заведующий кафедрой - доктор биологических наук, профессор A.A. Каменский).

Научный руководитель: доктор биологических наук Дубынин Вячеслав Альбертович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук Иноземцев Анатолий Николаевич

кандидат биологических наук Константинопольский Марк Александрович

Ведущая организация:

Учреждение Российской Академии Наук Институт Высшей Нервной Деятельности и Нейрофизиологии РАН

Защита диссертации состоится 26 декабря 2011 г. в 1530 часов на заседании Диссертационного совета Д 501.001.93 при Биологическом факультете МГУ им. М.В. Ломоносова по адресу: 119991, г. Москва, Ленинские горы, дом 1, строение 12, Биологический факультет МГУ, аудитория М-1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан 25 ноября 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета, доктор биологических наук

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Важнейшей составляющей поведенческой активности новорожденных млекопитающих являются зависимые от самки реакции (детская привязанность, «infant-mother attachment», «maternal bonding»). Такие реакции возникают исключительно в раннем постнатальном периоде в связи с незрелостью большинства структур мозга, в том числе сенсорных систем. Формирование привязанности к матери у крыс завершается к 10-му дню жизни (Moriceau, Sullivan, 2005). Согласно существующим представлениям, зависимое от матери поведение является результатом взаимодействия центров, ответственных, с одной стороны, за обучение; с другой стороны, за подкрепление (Крэйн, 2002). Взаимодействие с матерью имеет собственное подкрепляющее значение, которое не связано с тем, что самка служит для детеныша источником пищи и тепла. Степень привязанности новорожденного зависит от многих факторов, в том числе генетических, эндокринных, нейроанатомических, нейрофизиологических, а также выраженности материнской заботы (Menard et al., 2007).

Несмотря на высокую биологическую значимость зависимых от матери реакций, большинство авторов изучает лишь отдельные компоненты «детского» поведения (Branchi et al., 2001; Muller et al., 2005; McNamara et al., 2008). Практически отсутствуют работы, в которых анализируется выраженность стремления новорожденных экспериментальных животных находиться в контакте с самкой. В предыдущих исследованиях нашей лаборатории предложена новая методика комплексной оценки зависимого от матери поведения (Ивлева, 2004; Дубынин, Каменский, 2010). Благодаря ее применению показано, что введение опиоидных пептидов пищевого происхождения p-казоморфинов приводит к росту стремления детенышей крыс находиться в контакте с самкой (Ивлева, 2004). Продолжение работ с использованием этой методики, а также ее совершенствование, является актуальным, поскольку изменения поведения детенышей, спровоцированные применением фармакологических агентов, могут представлять собой модели патологий, связанных с нарушением привязанности ребенка к матери. В частности, снижение стремления детенышей находиться в контакте с самкой рассматривается как одно из проявлений аутизма (McNamara et al., 2008).

Среди медиаторов, составляющих основу зависимого от матери поведения, одно из первых мест занимают катехоламины, в том числе, дофамин. Введение антагонистов рецепторов дофамина ослабляет проявление зависимых от матери реакций (Cagiano et al., 1988; Shair et al., 2009). Вместе с тем, многие аспекты онтогенеза дофаминергической системы мозга новорожденных остаются малоизученными. Так, в литературе почти не имеется данных о вкладе D1- и D2-подсистем в «детское» поведение, а также о последствиях хронического неонатального введения антагонистов соответствующих рецепторов.

Особый интерес представляет изучение взаимодействия дофаминергической и опиоидной систем мозга в ранний постнатальный период. По общему мнению, Р-казоморфины, поступающие в организм новорожденного с молоком матери, играют роль своеобразных «экзогормонов», оказывающих адаптогенное действие (Teschemacher, 2003). Подкрепляющее влияние опиоидов в значительной мере опосредуется именно через дофаминергическую систему (Hirose, 2005). Следовательно, можно ожидать, что (З-казоморфины вызовут компенсацию нарушений зависимого от матери поведения детенышей, спровоцированных предварительным введением антагонистов рецепторов дофамина. Помимо этого, представляется важным исследовать влияние на поведение детенышей экзорфинов немолочного происхождения, которые отличаются от производных казеина по первичной структуре и специфичности связывания с ц- и 6- типами опиоидных рецепторов (Yang et al., 2003). Одним из наиболее интересных представителей этой группы является фрагмент белка зеленых листьев РУБИСКО рубисколии-5 (YPLDL) (Yang et al., 2001).

Исследование нейротропной активности экзорфинов актуально не только с фундаментальной, но и с практической точки зрения, поскольку позволяет оценить влияние рациона на поведение и онтогенез медиаторных систем мозга новорожденных, в том числе в условиях патологии.

Цель и задачи исследования. Основной целью выполненной работы является нейрофармакологический анализ зависимого от матери поведения детенышей белых крыс, изучение последствий введения лигандов рецепторов дофамина и опиоидных рецепторов. Часть работы посвящена анализу влияния Р-казоморфина-7 (наиболее исследованного представителя группы Р-казоморфинов) на поведение детенышей на

фоне предварительной инъекции 02-антагониста клебоприда. В работе были поставлены следующие конкретные задачи:

■ подобрать дозы 02-антагониста клебоприда, Б1-антагониста 8СН23390, а также рубисколина-5, пороговые для проявления влияния на двигательную активность детенышей беспородных белых крыс в возрасте 10 и 15 дней;

■ исследовать влияние блокаторов рецепторов дофамина (клебоприд, 8СН23390) на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 10 и 15 дней; сравнить эффекты препаратов;

■ оценить характер влияния р-казоморфина-7 на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 10 и 15 дней на фоне предварительного введения клебоприда;

■ определить направленность и выраженность влияния рубисколина-5 на зависимое от матери поведение детенышей крыс; сравнить эффекты рубисколина-5 и (З-казоморфина-7;

■ оценить изменения зависимого от матери поведения и двигательной активности 10- и 15-дневных детенышей крыс при хроническом введении клебоприда в период с 1 по 7 дни жизни.

Каждому из разделов работы предшествовал анализ литературы, выбор и отработка соответствующих методических подходов. Исследование влияния препаратов на двигательную активность детенышей крыс проводилось с целью подбора дозы, которая могла бы оказывать воздействие на структуры мозга, ответственные специфически за формирование зависимого от матери поведения, без изменений двигательной активности.

Введение 02-антагониста клебоприда приводит к ослаблению зависимых от матери реакций, а -антагонист, напротив, способен усиливать стремление детенышей находиться в контакте с самкой. Впервые показано, что введение опиоидного пептида молочного происхождения (З-казоморфина-7 компенсирует ослабление зависимого от матери поведения, вызванное предварительным применением клебоприда. Впервые показано, что введение детенышам крыс рубисколина-5 приводит к снижению выраженности зависимых от самки реакций. Впервые показано, что хроническое введение клебоприда в ранний постнатальный период приводит к отставленному увеличению двигательной активности, а также к изменению стремления детеныша находиться в контакте с матерью.

Положения, выносимые на защиту. Показано, что 02-антагонист клебоприд в дозе 0,5 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, приводит к ослаблению зависимых от матери реакций крысят как в 10, так и в 15 дней жизни. Последующее применение опиоидного пептида Р-казоморфина-7 компенсирует негативное влияние клебоприда с обращением эффектов в 15-дневном возрасте. Показано, что инъекция детенышам крыс -антагониста 8СН23390 приводит к активации зависимого от матери поведения у детенышей как в 10-, так и в 15-дневном возрасте. Эффект препарата более выражен в 10 дней, а также зависит от пола животных. Изучены последствия однократного введения новорожденным опиоидного пептида рубисколина-5, заключающиеся в ослаблении зависимого от матери поведения в 10-дневном возрасте. Анализ отставленных эффектов хронического применения клебоприда в первые дни жизни детенышей крыс позволил сделать вывод об увеличении двигательной активности, которое проявлялось только в 10-дневном возрасте. Одновременно с этим наблюдалось усиление зависимого от матери поведения (преимущественно у самок), не связанное с ростом подвижности.

отношении гипотез, прежде всего о различном вкладе D1- и 02-подсистем, а также о разнонаправленном влиянии экзорфинов молочного и растительного происхождения. Часть обнаруженных эффектов имеют существенное значение для понимания отставленного воздействия нейролептиков на онтогенез поведения и медиаторных систем мозга. С практической точки зрения данное исследование создает базу для разработки методов коррекции уровня детской привязанности в условиях различных врожденных и приобретенных патологий.

Апробация работы. Работа была представлена и апробирована на 5-м Европейском Форуме по нейронаукам (Вена, 2006); XX (Москва, 2007) и XXI (Калуга, 2010) съездах Физиологического общества им. И.П. Павлова, 20-м (Вена, 2007) и 23-м (Амстердам, 2010) Конгрессах Европейской нейрофармакологической ассоциации (ECNP), 1-й Всероссийской научно-практической конференции «Физиология адаптации» (Волгоград, 2008), 5-й Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва-Клязьма, 2010), Научной конференции «Физиологическая активность регуляторных пептидов» (Москва, 2010), а также ряде конференций молодых ученых и заседаниях кафедры физиологии человека и животных Биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова.

Структура н объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследования, их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 157 страницах, содержит 25 рисунков и 45 таблиц. Список литературы включает 195 источников, из них 14 отечественных.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

Исследование зависимого от матери поведения проводилось на детенышах беспородных белых крыс, выращенных в виварии кафедры физиологии человека и животных Биологического факультета МГУ. День родов принимали за нулевой день их жизни. Препараты вводили внутрибрюшинно в водном растворе из расчета 0,1 мл/животное.

Определение двигательной активности детенышей крыс.

Двигательная активность оценивалась у крысят в возрасте 10 и 15 дней. Общее число использованных в основных сериях экспериментов животных - 642 особь.

В возрасте 10 дней детеныши после депривации от самки длительностью 1 час помещались на поверхность с t=28HC. Для оценки двигательной активности регистрировали латентный период выползания из круга диаметром 10 см последовательно одной, двумя, тремя и четырьмя конечностями. При обработке полученных результатов сопоставлялись данные, полученные до и после инъекции, а затем проводили сравнение опытных и контрольных групп.

В возрасте 15 дней определение двигательной активности проводилось в тесте «открытое поле». При тестировании животное помещали в центр круглой арены и поминутно визуально регистрировали горизонтальную двигательную активность (пробег - количество пройденных сегментов). Над ареной на высоте 80 см находилась красная лампа (15 Вт). Процедура тестирования проводилась в течение 2-х минут дважды - до и после инъекции препарата.

Основной целью исследования двигательной активности детенышей крыс являлся подбор подпороговых для воздействия на локомоцию доз. В дальнейшем эти дозы использовались при исследовании зависимого от матери поведения.

Во всех сериях препараты вводились детенышам внутрибрюшинно за 20 минут до тестирования. В качестве фармакологических агентов использовали антагонист D2 рецепторов клебоприд (Sigma, США), антагонист D1 рецепторов SCH23390 (Sigma, США), опиоидный пептид пищевого происхождения рубисколин-5 (НПЦ Кардиоцентр).

Клебоприд применялся для инъекций в возрасте 10 дней (0,2 мг/кг, п=19; 0,5 мг/кг, п=19; 1,0 мг/кг, п=24), 15 дней (0,1 мг/кг, п=31; 0,5 мг/кг, п=12) и 34 дня (0,05 мг/кг, п=10; 0,1 мг/кг, n=10). SCH23390 применялся в возрасте 10 дней (0,01 мг/кг, п=46; 0,03 мг/кг, п=32; 0,05 мг/кг, п=11) и 15 дней (0,01 мг/кг, п=21; 0,03 мг/кг, п=34). Исследование рубисколина-5 проходило в возрасте 10 дней (5 мг/кг, п=19; 10 мг/кг, п=19; 20 мг/кг, п=20) и 15 дней (5 мг/кг, п=33; 10 мг/кг, п=21; 20 мг/кг, п=19).

Детское (зависимое от матери') поведение.

Для данного теста использовалась квадратная арена, в центр которой помещалась самка, наркотизированная с помощью натрий-тиопентала (доза 50 мг/кг).

Оценка поведения детенышей проводилось при комнатном освещении. Общее число использованных в основных сериях экспериментов животных - 500 особей.

Зависимое от матери поведение крысят тестировалось дважды: вначале до инъекции, затем через 20 минут после введения препарата (в контроле -растворителя). При тестировании детеныша помещали на 1 минуту к спине лежащей на боку самки на равном расстоянии от ее хвоста и головы и визуально оценивали: латентный период (ЛП) полуобхода (доползания до уха или хвоста самки); ЛП присасывания к соску самки; груминг; количество подталкиваний самки детенышем, клайминг (число попыток влезания на тело матери). Если влезание завершалось успехом, то детеныш мог некоторое время находиться сверху на теле матери («длительность контакта с матерью»).

Эксперименты (в разных сериях) производились на 10 и 15 дни жизни детенышей. При обработке данных оценивались отличия между контрольной и опытной группами до инъекции, после инъекции, а также отличия измепеиий между контрольной и опытной группами по дельте [до инъекции]-[после инъекции].

Клебоприд применялся для инъекций в возрасте 10 дней (0,5 мг/кг, п=68) и 15 дней (0,1 мг/кг, п=66). 8СН23390 применялся в дозировке 0,01 мг/кг как в 10 дней (п=51), так и в 15 дней (п=73). Рубисколин-5 вводился детенышам в дозировке 5 мг/кг как в 10 дней (п=30), так и в 15 дней (п=24).

В одной из серий экспериментов было проведено изучение влияния совместного введения клебоприда и опиоидного пептида пищевого происхождения |3-казоморфина-7 (ИМГ РАН). При этом (З-казоморфин-7 инъецировался за 10 минут, а клебоприд - за 20 минут до второго тестирования. Детенышам контрольной группы производилось двукратное (за 10 и за 20 минут до второго тестирования) введение эквивалентных объемов растворителя (дистиллированной воды). При этом клебоприд вводился детенышам в возрасте 10 дней в дозировке 0,5 мг/кг (п=53), а в 15 дней в дозировке 0,1 мг/кг (п=40). Доза (З-казоморфина-7 в обоих случаях была неизменной и составляла 5 мг/кг.

В особой серии опытов исследовалось влияние хронического введения клебоприда на поведение детенышей крыс. Препарат инъецировался новорожденным внутрибрюшинно в период с 1 по 7 дни жизни (0,5 мг/кг в объеме 0,05 мл). Детенышам контрольной группы вводилось эквивалентное количество растворителя.

В возрасте 10 дней (п=95) и 15 дней (п=83) проводилось изучение отставленных эффектов клебоприда. Для этого сначала проводилось тестирование двигательной активности, а через 1 час - оценка зависимого от матери поведения. Последовательность экспериментальных процедур для 10 и для 15-дневных детенышей аналогична таковой при остром введении препаратов, с учетом того, что в данном случае тестирование проводилось однократно.

Исходя из анализа форм распределений показателей, а также степени значимости каждого из них, нами предложен интегральный балльный критерий оценки выраженности зависимого от матери поведения (ВЗМП), который учитывает его наиболее характерные параметры. В их число вошли латентный период полуобхода, суммарное время отхода, время контакта, подталкивания и клайминг. Разным интервалам значений каждого параметра был присвоен определенный балл. Баллы по всем параметрам суммировались. Оценивали изменение балла ВЗМП при первом и втором (после инъекции) тестировании, а также в разных группах животных.

Статистическая обработка данных.

При обработке результатов использовали стандартный пакет статистических программ STAT1STICA 8.0. Вычисляли средние (AM), ошибки средних (SEM), дисперсии и стандартные отклонения (SD) массивов данных. При сравнении средних и формы распределений применялись параметрический критерий Стьюдента; непараметрические критерии Манна-Уитни, хи-квадрат, точный критерий Фишера. Использовались также приемы корреляционного анализа (параметрического и непараметрического). Использование ANOVA-методов было не всегда возможно в связи с ненормальностью распределения некоторых параметров в исходных массивах данных.

Результаты и обсуждение

Влияние клебоприда на двигательную активность и зависимое от матери поведение

детенышей крыс.

Введение 10-дневным детенышам клебоприда в дозах 0,2 и 0,5 мг/кг не вызвало значимых изменений подвижности. Увеличение дозы вводимого препарата до 1,0 мг/кг привело к снижению двигательной активности у детенышей. Так, латентный

период выхода двумя лапами за границу круга снизился в контроле на 35,1% (с 40,7±8,0 до 26,3±6,7 сек), в опыте - вырос на 13,6% (с 38,3±8,8 до 43,4±7,1 сек). Отличие изменений между группами является достоверным (р=0,03 по критерию %2) (рис. 1). В дальнейшем для тестирования влияния на двигательную активность использовалась дозировка 0,5 мг/кг. Введение 15-дневным детенышам клебоприда в дозе 0,5 мг/кг привело к падению горизонтальной двигательной активности в 7 раз -на 27,2+9,2 секторов в опытной группе, в то время как в контроле после инъекции наблюдался рост на 13,8±9,7 секторов. Отличие изменений является значимым (р=0,001 по критерию Стьюдента). При исследовании «детского» поведения в дальнейшем использовалась доза 0,1 мг/кг, не оказавшая значимого влияния на подвижность детенышей (рис. 2).

Рис. 1. Изменение двигательной активности (ЛП выхода из круга диаметром 10 см) у детенышей в возрасте 10 дней под влиянием введения клебоприда в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 мг/кг. По вертикали - изменение значения ЛП [после инъекции] - [до инъекции]. Обозначения линий: 1 - контроль; 2 - опыт. Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

Рис. 2. Изменение двигательной активности (пробег в тесте "открытое поле") у детенышей в возрасте 15 дней под влиянием введения клебоприда в дозах 0,1 и 0,5 мг/кг. По вертикали - изменение значения пробега [до инъекции] - [после инъекции].Обозначения линий: 1 -контроль; 2 - опыт. Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

При исследовании влияния клебоприда на зависимое от матери поведение 10-дневных детенышей (в/б инъекция в дозе 0,5 мг/кг) было обнаружено, что препарат вызывает ослабление зависимых от матери реакций. После инъекции балл ВЗМП вырос в контрольной группе на 17% по сравнению с исходным значением (с 9,6±0,7

—< 1 2

0,2]мг/кг 0,5 иг/кг4* ^0 1 мг/кг > „.....- ..

до 11,7±0,5). В опытной группе, напротив, наблюдалось незначительное снижение балла ВЗМП на 5,6% (с 8,9±0,6 до 8,4±0,7). Достоверным является как отличие значений параметра после инъекции (р<0,01), так и отличие изменений [до инъекции]-[после инъекции] (р=0,047 по критерию Стьюдента) (рис. 3). В 15-дневном возрасте было обнаружено, что введение клебоприда (в/б инъекция в дозе 0,1 мг/кг), также как и в 10 дней, произошло снижение балла ВЗМП. После инъекции в обеих группах произошло увеличение балла ВЗМП. В контрольной группе его значение выросло на 21,1% (с 12,8±0,9 до 15,5±1,1). В опытной группе значение балла ВЗМП увеличилось на 8,6% (с 11,6±0,6 до 12,6±1,0). Отличия контрольной и опытной групп в данном возрасте были достоверны при сравнении значений параметра после инъекции (р=0,03 по точному критерию Фишера) (рис. 3). Таким образом, клебоприд приводит к снижению стремления детенышей находиться в контакте с самкой в 10 и в 15 дней жизни.

15 -10 -5 0 -5

10 дней

□ контроль * ■ клебоприд

15 дней

m п

до инъекции после инъекции [после

инъекции] -[до инъекции]

* □контроль клебоприд

до инъекции после инъекции [после

инъекции] -[до инъекции]

Рис. 3. Изменение ВЗМП (в баллах) у детенышей под влиянием введения клебоприда в возрасте 10 дней (0,5 мг/кг) и 15 дней (0,1 мг/кг). По вертикали - величина балла. Достоверные отличия опытной группы от контрольной обозначены * (р<0,05).

Влияние совместного введения клебоприда и д-казоморфина-7 на зависимое от самки

поведение детенышей крыс.

В предыдущих исследованиях показано, что [З-казморфин-7 усиливает зависимое от матери поведение детенышей крыс. В данном разделе проводился анализ возможной компенсации бета-казоморфином-7 (5 мг/кг) негативного влияния клебоприда. При введении (З-казоморфина-7 10-дневным детенышам на фоне предварительной инъекции клебоприда сохраняется общая направленность изменений балла ВЗМП в сторону снижения. После инъекции в контрольной группе

значение балла ВЗМП выросло на 42,2% (с 6,4±0,8 до 9,1±1,0). В опытной группе значение параметра выросло лишь на 10,7% (с 7,5±0,9 до 8,3±1,0). Отличие изменений между группами является достоверным (р=0,01 по точному критерию Фишера) (рис. 4). Тем не менее, при сравнении групп 10-дневных детенышей, получавших клебоприд или совместно клеболрид и (З-казоморфин-7, было обнаружено, что в группе с совместным введением препаратов достоверно выше количество подталкиваний (р<0,01) и ниже латентный период перелезапия через тело самки (р<0,01) (рис. 5).

Следовательно, введение 10-дневным детенышам (З-казоморфина-7 на фоне клебоприда приводит к частичной компенсации влияния 02-антагониста без изменения общей направленности зависимого от матери поведения.

Рис. 4. Изменение ВЗМП (в баллах) у детенышей в возрасте 10 дней под влиянием совместного введения клебоприда (0,5 мг/кг) и (5-казоморфина-7 (5 мг/кг). По вертикали -величина балла. Достоверные отличия опытной группы от контрольной обозначены * (р<0,05).

Рис. 5. Влияние на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 10 дней клебоприда (0,5 мг/кг) и совместно клебоприда (0,5 мг/кг) и бета-казоморфина-7 (5 мг/кг). Обозначения по горизонтали: 1 - ЛП полуобхода самки (сек); 2 - подталкивания; 3 -ЛП перелезания через тело самки (сек). По вертикали: отличие изменений величины параметров в опытных группах от изменений в соответствующих контрольных группах (дельта контроль-дельта опыт). Отличия групп обозначены * (р<0,01).

Введение (З-казоморфина-7 на фоне клебоприда 15-дневным детенышам привело к более значительным изменениям. Межгрупповые отличия балла ВЗМП и его изменений отсутствовали (рис. 6). При сравнении групп животных, получавших клебоприд или совместно клебоприд и (З-казоморфин-7, обнаружено, что введение

10 -5 0

и контроль клебоприд + р-к-7

до инъекции после

[после

инъекции инъекции]-

[до инъекции]

13 8 3 -2 ^ -7

| клебоприд I клебоприд + (З-к-7

пептида привело к противоположно направленным по сравнению с клебопридом изменениям в опытной группе по некоторым параметрам, среди которых можно выделить суммарную длительность отходов (р=0,03 по критерию Стьюдента) и латентный период перелезания через тело самки (р=0,03 по критерию Стьюдента). Таким образом, р-казоморфин-7 не только устранил (компенсировал) действие клебоприда в 15 дней, но и проявил собственную активность, усилив ряд параметров детского поведения.

о контроль

Рис. б. Изменение ВЗМП (в баллах) у детенышей в возрасте 15 дней под влиянием совместного введения клебоприда (0,5 мг/кг) и (З-казоморфина-7 (5 мг/кг). По вертикали - величина балла.

Рис. 7. Влияние на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 15 дней клебоприда (0,1 мг/кг) и совместно клебоприда (0,1 мг/кг) и бета-казоморфина-7 (5 мг/кг). Обозначения по горизонтали: 1 -суммарное время отходов (сек); 2 - ЛП перелезания через тело самки (сек); 3 -суммарное время контакта (сек). По вертикали; отличие изменений величины параметров в опытных группах от изменений в соответствующих контрольных группах (дельта контроль-дельта опыт). Отличия групп обозначены * (р<0,05). Отличия от соответствующего контроля обозначены # (р<0,05).

Влияние рудисколина-5 на двигательную активность и зависимое от самки («детское») поведение детенышей крыс.

При исследовании влияния рубисколина-5 на двигательную активность 10-дневных детенышей было обнаружено отсутствие изменений после введения пептида в дозе 5 мг/кг. Увеличение дозы рубисколина-5 до 20 мг/кг привело к выраженным

т . I т и клебоприд + (З-к-7

до инъекции после [после

инъекции инъекции] -[до инъекции]

■ клебоприд @ клебоприд + (З-к-7 4*

1 I 2 I |! #

изменениям двигательной активности животных. При повторном тестировании после инъекции значение латентного периода выхода из круга снизилось в контроле на 24,6% (с 40,3±11,4 до 30,4±10,6 сек), а в опытной группе увеличилось в 2 раза (с 20,9±6,1 до 42,9±12,0 сек). Отличие изменений латентного периода между группами является достоверным (р=0,04 по критерию Стьюдента) (рис. 8). В возрасте 15 дней отсутствовали изменения двигательной активности детенышей при введении пептида как в дозе 5 мг/кг, так и при увеличении дозы до 20 мг/кг. В дальнейшем при тестировании «детского» поведения рубисколин-5 использовался в дозе 5 мг/кг как в 10, так и в 15 дней жизни.

15 0 -15 -30

5 мг/кг 20 мг/кг

¥ " ——< • 1

Рис. 8. Изменение двигательной активности (ЛП выхода из круга диаметром 10 см) у детенышей в возрасте I0 дней под влиянием введения рубисколина-5 в дозах 5 и 20 мг/кг. По вертикали - изменение значения ЛП [после инъекции]-[до инъекции]. Обозначения линий: I - контроль; 2 - опыт. Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

При исследовании зависимого от матери поведения было обнаружено, что рубисколин-5 не приводит к изменениям балла ВЗМП как в Ю, так и в 15 дней жизни. Тем не менее, у 10-дневных детенышей наблюдалось незначительное ослабление зависимого от матери поведения, выражавшееся в увеличении латентного периода полуобхода. После инъекции значение параметра в контрольной группе снизилось на 19,7% (с 36,5±4,0 до 29,3±3,3 сек); в опытной группе латентный период снизился на 12,8% (с 35,2±3,8 до 30,7±3,3 сек). Отличие опытной группы от контрольной по абсолютным значениям оказалось недостверным (р=0,76). Тем не менее, анализ формы распределения дельты [(до инъекции)-(после инъекции)] показал, что в контрольной группе после введения рубисколина-5 у 9 животных из 28 латентный период полуобхода снизился более чем на 20 сек., в то время как в опытной группе таких животных оказалось лишь 3 из 29. Этот эффект является достоверным: р=0,04 по критерию х (рис. 9). Введение рубисколина-5 детенышам в возрасте 15 дней не оказало значимого влияния как на балл ВЗМП, так и на отдельные параметры

поведения. В целом можно заключить, что рубисколин-5 оказал крайне слабое влияние на поведение детенышей. Об этом говорит отсутствие достоверных изменений балла ВЗМП как в 10, так и в 15-дневном возрасте.

Относительно небольшое (по сравнению с контролем) уменьшение латентного периода полуобхода самки, наблюдавшееся после введения пептида 10-дневным детенышам, может быть охарактеризовано как тенденция к снижению их стремления находиться в контакте с матерью.

Рис. 9. Гистограммы распределения изменения латентного периода! полуобхода самки у детенышей в возрасте 10 дней под влиянием введения рубисколина-5 (5 мг/кг). По горизонтали - значения дельты [до инъекции]-[после| инъекции]. По вертикали - К0личеств0| животных,

рубисколин-5

Ш 1

■ \

щ \

Щ \

шшт ш 1 ,

■40 -30 -20 -10 0 10 20 30 40 50 60 -40 -30 -20 -10 0 10 20 30 40 50 60

Влияние ЗСН23390 на двигательную активность и зависимое от самки («детское»)

поведение детенышей крыс.

В следующей серии экспериментов исследовалось влияние на поведение детенышей крыс дофаминергического 01-антагониста 8СН23390. Анализ двигательной активности 10-дневных детенышей показал, что введение препарата в дозе 0,01 мг/кг не вызывает достоверных изменений двигательной активности. Увеличение дозировки до 0,03 мг/кг вызвало незначительное увеличение латентного периода выхода из круга. Дальнейшее увеличение дозировки 8СН23390 до 0,05 мг/кг привело к явному снижению двигательной активности: у детенышей контрольной группы наблюдалось снижение латентного периода выхода из круга на 27,9% (с 38,0±12,7 до 27,4±9,2 сек), в то время как в опытной группе значение параметра выросло в 2,5 раза (с 26,3110,0 до 67,2117,2 сек). Отличие изменений между контрольной и опытной группами является достоверным (р=0,02 по критерию х~) (рис. 10). При введении 8СН23390 15-дневным детенышам в дозе 0,01 мг/кг

отсутствовали изменения двигательной активности. Увеличение дозировки 8СН23390 до 0,03 мг/кг привело к существенному снижению пробега в «открытом поле». В контрольной группе после инъекции значение пробега выросло в 4 раза (с 7,7±1,6 до 30,1 ±7,2 секторов), а в опытной группе почти не изменилось (10,4±2,3 секторов до инъекции; 11,7±3,2 - после) (рис. 11). Отличие изменений между группами является достоверным: р=0,005 по критерию Стьюдента. В дальнейшем для изучения «детского» поведения 5СН23390 использовался в дозе 0,01 мг/кг как у 10, так и у 15-дневных детенышей.

Рис. 10. Изменение двигательной активности (ЛП выхода из круга диаметром 10 см) у детенышей в возрасте 10 дней под влиянием введения БСН23390 в дозах 0,01; 0,03 и 0,05 мг/кг. По вертикали - изменение значения ЛП [после инъекции]-[до инъекции]. Обозначения линий: 1 - контроль; 2 - опыт. Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

Рис. 11. Изменение двигательной активности (пробег в тесте "открытое поле") у детенышей в возрасте 15 дней под влиянием введения 8СН23390 в дозах 0,01 и 0,03 мг/кг. По вертикали - изменение значения пробега [после инъекции]-[до инъекции]. Обозначения линий: 1 - контроль; 2 - опыт. Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

При исследовании влияния 8СН23390 на зависимое от матери поведение 10-дневных детенышей было обнаружено, что введение препарата привело к достоверному росту балла ВЗМП в опытной группе. При первом тестировании до инъекции значения показателя в контрольной и опытной группах практически не отличались. На этом фоне при повторном тестировании в контрольной группе значение балла ВЗМП увеличилось на 12,7% (с 15,0±1,2 до 16,9±],0). В опытной группе наблюдалось увеличение балла ВЗМП на 28,2% (с 14,2±1,1 до 18,2±1,1). Отличие изменений параметра между контрольной и опытной группами является

достоверным: р=0,02 по критерию (рис. 12). В случае введения Э1-антагониста 15-дневным детенышам наблюдались существенно менее выраженные эффекты препарата. Так, отсутствовали отличия балла ВЗМП между контрольной и опытной группами. Тем не менее, под влиянием 8СН23390 у детенышей опытной группы произошел небольшой рост времени контакта с самкой. После инъекции значение параметра выросло в контрольной группе на 91,2% (с 24,9±4,3 до 47,6±6,2 сек). У детенышей опытной группы увеличение было еще более выраженным и составило 140,1% (с 27,4±4,4 до 65,8±7,2 сек). Анализ формы распределения дельты [(до инъекции)-(после инъекции)] показал, что у 15 детенышей опытной группы из 37 значение суммарного времени контакта выросло на 60 сек и более, в то время как в контроле таких животных было 7 из 36. Этот эффект является достоверным: р=0,049 по критерию х2 (рис. 13).

Рис. 12. Изменение ВЗМП (в баллах) у детенышей под влиянием введения 8СН23390 в возрасте 10 дней (0,01 мг/кг). По вертикали - величина балла. Достоверные отличия опытной группы от контрольной обозначены * (р<0,05).

Рис. 13. Гистограммы распределения изменения длительности контакта с самкой у детенышей в возрасте 15 дней под влиянием введения 8СН23390 (0,01 мг/кг). По горизонтали - значения дельты [до инъекции]-[после инъекции]. По вертикали - количество животных.

Таким образом, однократное введение Э1-антагониста 8СН23390 приводит к усилению зависимого от матери поведения как в 10-, так и, слабее, в 15-дневном возрасте. Следует особо отметить, что влияние препарата на отдельные компоненты поведения детенышей зависит от их пола, причем влияние на самок является более значимым, чем на самцов.

контроль

ЭСН23390

Влияние клебоприда на двигательную активность и зависимое от матери поведение детенышей при хроническом введении.

На заключительном этапе работы нами были исследованы последствия хронического введения 02-антагониста клебоприда. При исследовании двигательной активности детенышей в возрасте 10 дней было обнаружено, что у крысят опытной группы латентные периоды выхода из круга оказались несколько ниже по сравнению с контролем. Самое большое различие наблюдалось в случае латентного периода выхода из круга всеми четырьмя конечностями: значение в опытной группе (66,4±5,7 сек) было на 11,7% меньше по сравнению с контрольной (75,2+6,5 сек). Анализ формы распределения параметра показал, что в контрольной группе у 20 животных из 46 ЛП выхода из круга всеми лапами составил 110 сек и более. В группе, получавшей инъекции клебоприда, таких животных оказалось 12 из 50. Этот эффект является достоверным: р=0,04 по точному критерию Фишера (рис. 14). В 15-дневном возрасте двигательная активность животных, получавших инъекции клебоприда, не отличается от контрольной группы: значения пробега в «открытом поле» близки и составляют в среднем 15,4 секторов в контроле, 14,8 секторов - в опытной группе. При анализе зависимого от матери поведения в 10 дней жизни показано, что у детенышей опытной группы балл ВЗМП (14,9±0,9) оказался выше по сравнению с контролем (13,7±0,8) на 8,8%. Анализ формы распределения показал, что в опытной группе у 9 животных из 50 значение балла превысило 22, в то время как в контрольной группе такого значения балл ВЗМП достиг лишь у 2 крыс из 45. Это отличие является достоверным: р=0,04 по критерию у?. Детальное рассмотрение отличий отдельных параметров показало, что влияние клебоприда на зависимое от матери поведение связано по большей части с воздействием на самок. В 15-дневном возрасте эффект клебоприда не сохраняется, и отличия балла ВЗМП между опытной и контрольной группами отсутствуют (рис. 15).

Рис. 14. Изменение двигательной активности (ЛП выхода последовательно одной, двумя, тремя и четырьмя лапами из круга диаметром 20 см) у детнышей в возрасте 10 дней под влиянием клебоприда(хроническое введение с 1 по 7 дни жизни в дозировке 0,5 мг/кг). По вертикали - латентный период (сек). Достоверные отличия изменений в опытной группе от изменений в контроле отмечены * (р<0,05).

Рис. 15. Изменение ВЗМП (в баллах) у детенышей в возрасте 10 и 15 дней под влиянием клебоприда (0,5 мг/кг, хроническое введение с 1 по 7 дни жизни). По вертикали - величина балла.

Представляется очевидным, что некоторые компоненты зависимого от матери поведения могут быть непосредственно связанными с подвижностью детенышей. В связи с тем, что у 10-дневных детенышей параллельно с увеличением балла ВЗМП наблюдалось увеличение двигательной активности, было важно проверить гипотезу о том, что активация детского поведения может быть следствием именно высокой подвижности детенышей. Действительно, анализ поведения 10-дневных детенышей контрольной группы показал, что коэффициент корреляции Пирсона между баллом ВЗМП и латентным периодом выхода из круга диаметром 10 см одной лапой составляет -0,35 (р=0,02). Однако у детенышей, получавших клебоприд, значение коэффициента составляет -0,22, а сама корреляция является недостоверной (р=0,12). При применении непараметрических показателей корреляции (коэффициент Спирмена) были получены похожие результаты. Таким образом, увеличение балла ВЗМП под действием хронического введения клебоприда не связано с повышенной двигательной активностью и является результатом влияния препарата на плотность Э2-рецепторов в структурах, формирующих именно зависимое от матери поведение. В 15-дневном возрасте коэффициент корреляции Спирмена между значениями

90 -1

1 лапа 2 лапы 3 лапы 4 лапы

□ контроль -10 ( «клебоприд

16 14 12 10

10 дней 15 дней

пробега в «открытом поле» и балла ВЗМП составил для контрольной группы -0,23 (р=0,15) и 0,08 (р=0,61) для опытной. Отсутствие корреляции в данном случае показывает, что исследование зависимого от матери поведения позволяет отслеживать именно «детские» реакции новорожденных, а не показатели их общей активности.

Из полученных данных можно заключить, что хроническое введение клебоприда в период с 1 по 7 дни жизни привело к отставленному усилению зависимого от матери поведения в 10-дневном возрасте. Этот эффект не сохраняется к 15 дням жизни.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Зависимые от матери («детские») реакции являются особым и чрезвычайно важным проявлением активности нервной системы новорожденных млекопитающих. Специфика заключается в том, что они представляют собой поведенческо-нейрохимический комплекс, существующий исключительно в ранний постнатальный период и призванный обеспечить привязанность к матери в условиях недостаточно развитого состояния большинства анализаторов и медиаторных систем мозга (Hofer, Sullivan, 2001). Быстрота формирования и степень выраженности такой привязанности влияют на выживание, а также на своевременное и правильное развитие мозга и становление других поведенческих реакций. Развитие и поддержание детской привязанности находится в зависимости от систем обучения и подкрепления, и связано с активностью таких структур головного мозга как обонятельная луковица, голубое пятно, VTA, nucleus accumbens (Monceau, Sullivan, 2005). Среди нейрохимических систем, участвующих в реализации зависимого от матери поведения, важную роль играют дофаминергическая и опиоидная системы мозга (Agmo et al., 1997; Muller et al., 2008).

анализа полученных данных. Вычисление балла ВЗМП позволяет снизить высокий уровень индивидуальных разбросов параметров поведения, характерный для детенышей в раннем постнатальном периоде, а также оценить общую направленность отличий при сравнении нескольких экспериментальных групп.

На первом этапе работы нами было изучено влияние клебоприда, SCH23390, рубисколина-5 на двигательную активность новорожденных. Целью такого исследования являлось определение дозы, пороговой в отношении воздействия на двигательную активность животных. Полученные данные согласуются с имеющейся в литературе информацией о сроках и динамике созревания дофаминергических и опиоидных рецепторов в мозге крыс.

Вслед за этим было изучено влияние на зависимое от матери поведение 10- и 15-дневных детенышей 02-антагониста клебоприда. Показано, что в обоих случаях клебоприд вызывал ослабление «детских» реакций. Полученные результаты имеют важное научно-практическое значение, поскольку снижение стремления находиться в контакте с матерью рассматривается как одна из возможных моделей детского аутизма (McNamara et al., 2008), а нарушения работы дофаминергической системы мозга рассматриваются как проявления аутизма и шизофрении (Trottier et al., 1999).

В следующем разделе работы нами проанализировано влияние на зависимые от матери реакции рубисколина-5 - 8-селективного опиоидного пептида, являющегося фрагментом белка зеленых листьев (РУБИСКО). Показано, что однократное введение рубисколина-5 приводит к незначительному снижению выраженности зависимого от матери поведения. Полученные данные свидетельствуют в пользу гипотезы о том, что ряд экзорфинов представляет собой аллелопатические факторы, возникшие для защиты растений от поедания животными (Yang et al., 2001).

В отличие от рубисколинов, ß-казоморфины в раннем постнатальном периоде выполняют роль своеобразных «экзогормонов», и онтогенез мозга многих млекопитающих (в том числе, человека) предполагает их поступление в организм в

первые недели и месяцы жизни (ТезсЬешасЬег, 2003). Из полученных нами результатов следует, что включение естественных молочных компонентов в питание новорожденных может положительно влиять на процессы формирования поведенческих функций и созревания центральной нервной системы в процессе онтогенеза, а также корректировать нарушения работы некоторых нейромедиаторных систем. С другой стороны, раннее введение в рацион растительной пищи, содержащей рубисколины, может негативно сказываться на формировании поведения новорожденных.

Особый раздел нашего исследования посвящен изучению эффектов 01-антагониста 8СН23390. Показано, что однократно вводимый препарат вызывает усиление зависимых от матери реакций как у 10-, так и, слабее, у 15-дневных детенышей. Полученные результаты подтверждают сведения о противоположном по знаку вкладе в формирование поведения детенышей 01- и 02-подсистем (БЬа1г й а\., 2009).

В заключительном разделе работы нами изучены отставленные изменения поведения детенышей при хроническом введении клебоприда в ранний постнатальный период. Актуальность такого исследования определяется тем, что около 35% беременных и/или кормящих женщин применяют лекарственные психотропные препараты, которые могут проникать в мозг ребенка, воздействуя на дофаминергическую систему. Показано, что поведение детенышей, получавших инъекции клебоприда, характеризуется повышенной двигательной активностью в 10 дней, а также усилением «детских» реакций в 10-дневном возрасте (преимущественно у самок).

Таким образом, наше исследование позволило получить новые, оригинальные данные, характеризующие вклад дофаминергической и опиоидной систем мозга в регуляцию зависимого от матери поведения. Было проанализировано большое количество эффектов, вызванных введением агонистов и антагонистов соответствующих рецепторов. Знание о возможных последствиях таких воздействий расширяет представления о созревании нейромедиаторных систем и регуляции поведения человека и животных в ранний постнатальный период, а также открывает перспективы практического применения фармакологической коррекции нарушений «детского» поведения.

выводы

В экспериментах на 602 детенышах белых крыс в возрасте 10 дней и 540 детенышах в возрасте 15 дней изучено влияние лигандов дофаминовых и опиоидных рецепторов на выраженность зависимого от матери поведения и двигательную активность, в результате чего можно заключить:

1. 02-антагонист клебоприд в дозах 0,5 мг/кг для 10-дневных детенышей и 0,1 мг/кг для 15-дневных детенышей, не влияющих на двигательную активность, способен ослаблять выраженность зависимого от матери поведения. Увеличение дозы вводимого препарата вызывает снижение подвижности новорожденных.

2. Введение ц-селективного опиоидного пептида Р-казоморфина-7 в дозе 5 мг/кг после инъекции клебоприда частично снимает влияние 02-антагониста у 10-дневных детенышей; у 15-дневных детенышей введение Р-казоморфина-7 на фоне клебоприда приводит к значимой активации зависимого от матери поведения.

3. 01-антагонист 8СН23390 в дозе 0,01 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, способен усиливать зависимое от матери поведение у 10-дневных и, в меньшей степени, 15-дневных детенышей; выраженность эффекта препарата зависит от пола животных. Увеличение дозы 5СН23390 вызывает снижение подвижности новорожденных.

4. Фрагмент РУБИСКО б-селективный опиоидный пептид рубисколин-5 в дозе 5 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, незначительно ослабляет выраженность зависимого от матери поведения детенышей в возрасте 10 (но не 15) дней. Увеличение дозы препарата вызывает снижение подвижности новорожденных.

5. Хроническое введение клебоприда (0,5 мг/кг, 1-7 дни жизни новорожденных) вызывает отставленное увеличение двигательной активности в возрасте 10 дней, а также - рост выраженности зависимого от матери поведения (преимущественно у самок); в 15 дней последствия инъекции препарата становятся незначимыми.

6. Полученные результаты доказывают важную роль дофаминергической и опиоидной систем мозга в регуляции зависимых от матери реакций, свидетельствуют о необходимости учета нейротропной активности опиоидных фрагментов белков, входящих в питание новорожденных, а также позволяют наметить пути моделирования и фармакологической коррекции некоторых нарушений зависимого от матери поведения.

СПИСОК ПЕЧАТНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи:

1. Стоволосов И.С., Дубынин В.А., Каменский A.A. Участие дофаминергической и опиоидной систем мозга в регуляции зависимого от матери поведения новорожденных белых крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2010 Т. 150. №9. С. 248-252.

2. Стоволосов И.С., Дубынин В.А., Каменский A.A. Новый метод изучения "детского" (зависимого от матери) поведения новорожденных крыс // Журнал высшей нервной деятельности им. И.П. Павлова. 2010. Т. 60. № 2. С. 247-254.

3. Беляева Ю.А., Дубынин В.А., Стоволосов И.С., Каменский A.A. Нейротропная активность экзорфинов, обладающих различным сродством к опиоидным рецепторам ц- и 8-типов // Нейрохимия. 2008. Т. 25. № 1. С. 57-63.

4. Дубынин В.А., Ивлева Ю.А., Стоволосов И.С., Беляева Ю.А., Добрякова Ю.В., Андреева Л.А., Алфеева Л.Ю., Каменский A.A., Мясоедов Н.Ф. Влияние ß-казоморфинов на зависимое от матери ("детское") поведение белых крыс // Доклады Академии наук. 2007. Т. 412. № 2. С. 279-282.

5. Стоволосов И.С., Дубынин В.А. Влияние лигандов дофаминовых и опиоидных рецепторов на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс // Труды науч. конференции, посвященной 85-летию кафедры органич. и биол. химии МПГУ, М., 2009, с. 32-36.

6. Дубынин В.А., Добрякова Ю.В., Стоволосов И.С., Каменский A.A. Роль опиоидной системы в регуляции родительского поведения и зависимых от матери реакций новорожденных // «Физиология адаптации», Материалы 1-й Всерос. научно-практической конференции, Волгоград, 2008, с. 137-141.

Тезисы докладов на конференциях:

1. Дубынин В.А., Стоволосов И.С., Каменский А.А. Метод оценки зависимых от матери реакций новорожденных крыс (на примере эффектов SCH23390 и клебоприда) // «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам», 5-я междунар. конф, М., 2010.

2. Stovolosov I. S., Dubynin V. A., Kamensky A. A. Influence of D1 and D2 antagonists on mother-dependent behavior of 10 and 15 days old albino rat pups // 23th ECNP Congress, Eur. Neuropharmacology, 2010,20, Suppl. 3.

3. Стоволосов И.С., Алфеева Л.Ю., Андреева Л.А., Дубынин В.А. Бета-казоморфин-7 компенсирует негативное влияние клебоприда на зависимое от матери поведение новорожденных крыс // «Физиологич. активность регуляторных пептидов», Научная конф., М., 2010.

4. Дубынин В.А., Стоволосов И.С., Крушинская Я.В., Захаров A.M., Каменский А.А. Ориентированное на мать поведение детенышей: методы экспериментального исследования и пути фармакологической коррекции // Тезисы докл. XXI съезда физиол. общ-ва имени И.П.Павлова, Москва, 2010, Калуга.

5. Стоволосов И.С., Дубынин В.А., Каменский А.А. Влияние 02-антагониста клебоприда на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс // Тезисы докл. XX съезда физиол. общества имени И.П. Павлова, Москва, 2007.

6. Stovolosov I. S., Dubynin V. A., Kamensky A. A. Interaction between dopaminergic and food derived opioid regulation of mother dependent behaviour of albino rat pups // 20th ECNP Congress, Eur. Neuropharmacology, 2007, 17, Suppl. 4.

7. Stovolosov I. S., Dubynin V. A., Kamensky A. A. Influence of clebopride acute administration on mother dependent behavior of 10 days aged albino rat pups // 5th Forum of European Neuroscience. Abstract book, Vienna, 2006.

Заказ № 107-p/l 1/2011 Подписано в печать 21.11.2011 Тираж 100 экз. Усл. п.л. 1,2

4- : ;>, ООО "Цифровичок", тел. (495) 649-83-30

www.cfr.ru; e-mail:info@cfr.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Стоволосов, Игорь Сергеевич

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1 Общие особенности поведения и физиологии детенышей грызунов.

2.2 Привязанность к матери: психологические и физиологические данные.

2.3 Нервные структуры, участвующие в формировании «детских» реакций.

2.4 Методы исследования зависимых от матери реакций.

2.5 Фармакология зависимого от матери поведения.

2.6 Нарушения детского поведения.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1 Влияние клебоприда на двигательную активность детенышей крыс в возрасте 10-34 дней после рождения.

4.2 Влияние 8СН23390 на двигательную активность детенышей крыс в возрасте 10-15 дней после рождения.

4.3 Влияние рубисколина-5 на двигательную активность детенышей крыс в возрасте 10-15 дней после рождения.

4.4 Влияние клебоприда на зависимое от самки («детское») поведение детенышей крыс.

4.5 Влияние совместного введения клебоприда и |3-казоморфинана зависимое от самки поведение детенышей крыс.

4.6 Влияние рубисколина-5 на зависимое от самки («детское») поведение детенышей крыс.:.

4.7 Влияние БСН23390 на зависимое от самки («детское») поведение детенышей крыс.

4.8 Влияние клебоприда на двигательную активность и зависимое от матери поведение детенышей при хроническом введении.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5.1 Влияние клебоприда на двигательную активность детенышей крыс.

5.2 Влияние клебоприда на зависимое от матери поведение детенышей крыс.

5.3 Влияние совместного введения клебоприда и Р-казоморфинана зависимое от матери поведение детенышей крыс.

5.4 Влияние рубисколина-5 на двигательную активность и зависимое от матери поведение детенышей крыс.

5.5 Влияние 8СН23390 на двигательную активность детенышей крыс.

5.6 Влияние 8СН23390 на зависимое от матери поведение детенышей крыс.

5.7 Влияние клебоприда на двигательную активность и зависимое от матери поведение детенышей крыс при хроническом введении.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние дофаминергической и опиоидной систем на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс"

Актуальность проблемы. Важнейшей составляющей поведенческой активности новорожденных млекопитающих являются зависимые от самки реакции (детская привязанность, «infant-mother attachment», «maternal bonding»). Такие реакции возникают исключительно в раннем постнатальном периоде в связи с незрелостью большинства структур мозга, в том числе сенсорных систем. Формирование привязанности к матери у крыс завершается к 10-му дню жизни (Moriceau, Sullivan, 2005). Согласно существующим представлениям, зависимое от матери поведение является результатом взаимодействия центров, ответственных, с одной стороны, за обучение; с другой стороны, за подкрепление (Крэйн, 2002). Взаимодействие с матерью имеет собственное подкрепляющее значение, которое не связано с тем, что самка служит для детеныша источником пищи и тепла. Различие в степени привязанности новорожденного зависит от многих факторов, в том числе генетических, эндокринных, нейроанатомических, нейрофизиологических, а также выраженности материнской заботы (Menard et al., 2007).

Несмотря на высокую биологическую значимость зависимых от матери реакций, большинство авторов изучают лишь отдельные компоненты «детского» поведения (Branchi et al., 2001; Muller et al., 2005; McNamara et al., 2008). Практически отсутствуют работы, в которых анализируется выраженность стремления новорожденных экспериментальных животных находиться в контакте с самкой. В предыдущих исследованиях нашей лаборатории предложена новая методика комплексной оценки зависимого от матери поведения (Ивлева, 2004; Дубынин, Каменский, 2010). Благодаря ее применению показано, что введение опиоидных пептидов пищевого происхождения Р-казоморфинов приводит к росту стремления детенышей крыс находиться в контакте с самкой (Ивлева, 2004). Продолжение работ с использованием этой методики, а также ее совершенствование, является актуальным, поскольку изменения поведения детенышей, спровоцированные применением фармакологических агентов, могут представлять собой модели патологий, связанных с нарушением привязанности ребенка к матери. В частности, снижение стремления детенышей находиться в 4 контакте с самкой рассматривается как одно из проявлений аутизма (McNamara et al., 2008).

Среди медиаторов, составляющих основу зависимого от матери поведения, одно из первых мест занимают катехоламины, в том числе, дофамин. Введение антагонистов рецепторов дофамина ослабляет проявление зависимых от матери реакций (Cagiano et al., 1988; Shair et al., 2009). Вместе с тем, многие аспекты онтогенеза дофаминергической системы мозга новорожденных остаются малоизученными. Так, в литературе почти не имеется данных о вкладе D1- и D2-подсистем в «детское» поведение, а также о последствиях хронического введения антагонистов соответствующих рецепторов.

Особый интерес представляет изучение взаимодействия дофаминергической и опиоидной систем мозга в ранний постнатальный период. По общему мнению, ß-казоморфины, поступающие в организм новорожденного с молоком матери, играют роль своеобразных «экзогормонов», оказывающих адаптогенное действие (Teschemacher, 2003). Подкрепляющее влияние опиоидов в значительной мере опосредуется именно через дофаминергическую систему (Hirose, 2005). Следовательно, можно ожидать, что ß-казоморфины вызовут компенсацию нарушений зависимого от матери поведения детенышей, вызванных предварительным введением антагонистов рецепторов дофамина. Помимо этого, представляется важным исследовать влияние на поведение детенышей экзорфинов немолочного происхождения, которые отличаются от производных казеина по первичной структуре и специфичности связывания с ц- и 5- типами опиоидных рецепторов (Yang et al., 2003). Одним из наиболее интересных представителей этой группы является фрагмент белка зеленых листьев РУБИСКО рубисколин-5 (YPLDL) (Yang et al., 2001).

Цель и задачи исследования. Основной целью выполненной работы стал нейрофармакологический анализ зависимого от матери поведения детенышей белых крыс, изучение последствий введения лигандов рецепторов дофамина и опиоидных рецепторов. Часть работы посвящена анализу влияния (З-казоморфина-7 (наиболее исследованного представителя группы Р-казоморфинов) на поведение детенышей в условиях предварительной инъекции 02-антагониста клебоприда. В работе были поставлены следующие конкретные задачи: подобрать дозы клебоприда, В1-антагониста 8СН23390, а также рубисколина-5, пороговые для проявления влияния на двигательную активность детенышей беспородных белых крыс в возрасте 10 и 15 дней; исследовать влияние блокаторов рецепторов дофамина (клебоприд, 8СН23390) на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 10 и 15 дней; сравнить эффекты препаратов; оценить характер влияния Р-казоморфина-7 на зависимое от матери поведение детенышей крыс в возрасте 10 и 15 дней на фоне предварительного введения клебоприда; определить направленность и выраженность влияний рубисколина-5 на зависимое от матери поведение детенышей крыс; сравнить эффекты рубисколина-5 и Р-казоморфина-7; оценить изменения зависимого от матери поведения и двигательной активности 10- и 15-дневных детенышей крыс при хроническом введении клебоприда в период с 1 по 7 дни жизни.

Научная новизна. В рамках настоящей работы впервые исследовано влияние ряда фармакологических препаратов на «детское» поведение детенышей белых крыс с использованием оригинального метода комплексной экспресс-оценки выраженности зависимых от матери реакций. Ориентированное на мать (родителя) поведение является мало изученной областью физиологии. В связи с этим практически все полученные нами результаты обладают высоким уровнем новизны и не имеют аналогов в литературе. Показано, что все исследованные препараты в зависимости от дозы могут снижать подвижность детенышей крыс, а также влияют на зависимое от матери поведение в дозах, не изменяющих двигательную активность. Введение 02-антагониста клебоприда приводит к ослаблению зависимых от матери реакций, а Б1-антагонист, напротив, способен усиливать стремление детенышей находиться в контакте с самкой. Впервые показано, что введение опиоидного пептида молочного происхождения р-казоморфина-7 компенсирует ослабление зависимого от матери поведения, вызванное предварительным введением клебоприда. Впервые показано, что введение детенышам крыс рубисколина-5 приводит к снижению выраженности зависимых от самки реакций. Впервые показано, что хроническое введение клебоприда в ранний постнатальный период приводит к отставленному увеличению двигательной активности, а также к изменениям стремления детеныша находиться в контакте с матерью.

Положения, выносимые на защиту. Показано, что В2-антагонист клебоприд в дозе 0,5 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, приводит к ослаблению зависимых от матери реакций крысят как в 10, так и в 15 дней жизни. Последующее применение опиоидного пептида (З-казоморфина-7 компенсирует негативное влияние клебоприда с обращением эффектов в 15-дневном возрасте. Показано, что инъекция детенышам крыс Б1-антагониста 8СН23390 в дозе, не влияющей на двигательную активность, приводит к активации зависимого от матери поведения у детенышей как в 10-, так и в 15-дневном возрасте. Эффект препарата более выражен в 10 дней, а также зависит от пола животных. Изучены последствия однократного введения новорожденным опиоидного пептида рубисколина-5, заключающиеся в ослаблении зависимого от матери поведения в 10-дневном возрасте. Анализ отставленных эффектов хронического применения клебоприда в первые дни жизни детенышей крыс позволил сделать вывод об увеличении двигательной активности, которое проявлялось только в 10-дневном возрасте. Одновременно с этим наблюдалось усиление зависимого от матери поведения (преимущественно у самок), не связанное с ростом подвижности.

Теоретическая и практическая значимость работы. Использована оригинальная методика экспресс-оценки выраженности зависимых от матери реакций. Метод дает возможность изучать не только отдельные компоненты детского» поведения, но и оценивать направленность изменений такого поведения в целом. Полученные результаты позволяют значительно расширить представления об участии дофаминергической и опиоидной систем мозга в управлении привязанностью новорожденного к матери, подтвердить и конкретизировать ряд имевшихся в этом отношении гипотез, прежде всего о различном вкладе Б1- и Б2-подсистем, а также о разнонаправленном влиянии экзорфинов молочного и растительного происхождения. Часть обнаруженных эффектов имеют существенное значение для понимания отставленного воздействия нейролептиков на онтогенез поведения и медиаторных систем мозга. С практической точки зрения данное исследование создает базу для разработки методов коррекции уровня детской привязанности в условиях различных врожденных и приобретенных патологий.

Апробация работы. Работа была представлена и апробирована на 5-м Европейском Форуме по нейронаукам (Вена, 2006); XX (Москва, 2007) и XXI (Калуга, 2010) съездах Физиологического общества им. И.П. Павлова, 20-м (Вена, 2007) и 23-м (Амстердам, 2010) Конгрессах Европейской нейрофармакологической ассоциации (ЕСМР), 1-й Всероссийской научно-практической конференции «Физиология адаптации» (Волгоград, 2008), 5-й Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва-Клязьма, 2010), Научной конференции «Физиологическая активность регуляторных пептидов» (Москва, 2010), а также ряде конференций молодых ученых и заседаниях кафедры физиологии человека и животных.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследования, их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 157 страницах, содержит 25 рисунков и 45 таблиц. Список литературы включает 195 источников, из них 14 отечественных.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Стоволосов, Игорь Сергеевич

выводы

1. Б2-антагонист клебоприд в дозах 0,5 мг/кг для 10-дневных детенышей и 0,1 мг/кг для 15-дневных детенышей, не влияющих на двигательную активность, способен ослаблять выраженность зависимого от матери поведения. Увеличение дозы вводимого препарата вызывает снижение подвижности новорожденных.

2. Введение ц-селективного опиоидного пептида р-казоморфина-7 в дозе 5 мг/кг после инъекции клебопрйда частично снимает влияние 02-антагониста у 10-дневных детенышей; у 15-дневных детенышей введение Р-казоморфина-7 на фоне клебопрйда приводит к значимой активации зависимого от матери поведения.

3. БЬантагонист 8СН23390 в дозе 0,01 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, способен усиливать зависимое от матери поведение у 10-дневных и, в меньшей степени, 15-дневных детенышей; выраженность эффекта препарата зависит от пола животных. Увеличение дозы 8СН23390 вызывает снижение подвижности новорожденных.

4. Фрагмент РУБИСКО 5-селективный опиоидный пептид рубисколин-5 в дозе 5 мг/кг, не влияющей на двигательную активность, незначительно ослабляет выраженность зависимого от матери поведения детенышей в возрасте 10 (но не 15) дней. Увеличение дозы препарата вызывает снижение подвижности новорожденных.

5. Хроническое введение клебопрйда (0,5 мг/кг, 1-7 дни жизни новорожденных) вызывает отставленное увеличение двигательной активности в возрасте 10 дней, а также - рост выраженности зависимого от матери поведения (преимущественно у самок); в 15 дней последствия инъекции препарата становятся незначимыми.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Зависимые от матери («детские») реакции являются особым и чрезвычайно важным проявлением активности нервной системы новорожденных млекопитающих. Специфика заключается в том, что они представляют собой поведенческо-нейрохимический комплекс, существующий исключительно в ранний постнатальный период и призванный обеспечить привязанность к матери в условиях недостаточно развитого состояния большинства анализаторов и медиаторных систем мозга. Быстрота формирования и степень выраженности такой привязанности непосредственным образом влияют на выживание, а также на своевременное и правильное развитие мозга и становление других поведенческих реакций. Развитие и поддержание детской привязанности находится в зависимости от систем обучения и подкрепления, и связано с активностью таких структур головного мозга как обонятельная луковица, голубое пятно, VTA, nucleus accumbens. Среди нейрохимических систем, участвующих в реализации зависимого от матери поведения, важную роль играют дофаминергическая и опиоидная системы мозга.

В нашей работе проведен нейрофармакологический анализ вклада дофаминергической и опиоидной систем в регуляцию двигательной активности, а также зависимого от матери поведения новорожденных крыс в возрасте 10 и 15 дней. Для проведения такого исследования нами была разработана методика оценки выраженности детских реакций, а также интегральный критерий (балл ВЗМП) для анализа полученных данных. Вычисление балла ВЗМП позволяет снизить высокий уровень индивидуальных разбросов, характерный для детенышей в раннем постнатальном периоде, а также оценить общую направленность отличий при сравнении нескольких экспериментальных групп.

Вслед за этим было изучено влияние на зависимое от матери поведение 10- и 15-дневных детенышей 02-антагониста клебоприда. Показано, что в обоих случаях клебоприд вызывал ослабление «детских» реакций. Полученные результаты представляют важное научно-практическое значение, поскольку снижение стремления находиться в контакте с матерью рассматривается как одна из возможных моделей детского аутизма (McNamara et al., 2008), а нарушения работы дофаминергической системы мозга являются гипотезами формирования аутизма и шизофрении (Trottier et al., 1999).

Также нами изучена возможность коррекции смоделированных нарушений при помощи ц-селективного опиоидного пептида пищевого происхождения ß-казморфина-7. Впервые доказано, что негативное влияние клебоприда частично или полностью (в зависимости от возраста) компенсируется однократным введением пептида. В следующем разделе работы нами проанализировано влияние на зависимые от матери реакции рубисколина-5 - 5-селективного опиоидного пептида, являющегося фрагментом белка зеленых листьев (РУБИСКО). Показано, что однократное введение рубисколина-5 приводит к незначительному снижению выраженности зависимого от матери поведения. Полученные данные свидетельствуют в пользу гипотезы о том, что ряд экзорфинов представляет собой аллелопатические факторы, возникшие для защиты растений от поедания животными (Yang et al., 2001).

В отличие от этого, ß-казоморфины в раннем постнатальном периоде выполняют роль своеобразных «экзогормонов», и онтогенез мозга многих млекопитающих (в том числе, человека) предполагает их поступление в организм в первые недели и месяцы жизни (Teschemacher, 2003). Из полученных нами результатов следует, что включение естественных молочных компонентов в питание новорожденных может положительным образом влиять на процессы формирования поведенческих функций и центральной нервной системы в процессе онтогенеза, а также корректировать нарушения работы некоторых нейромедиаторных систем. С другой стороны, раннее введение в рацион растительной пищи, содержащей рубисколины, может негативно сказываться на формировании поведения новорожденных.

Таким образом, наше исследование позволило получить новые, оригинальные данные, характеризующие вклад дофаминергической и опиоидной систем мозга в регуляцию зависимого от матери поведения. Было проанализировано большое количество эффектов, вызванных введением агонистов и антагонистов соответствующих рецепторов. Знание о возможных последствиях таких ситуаций расширяет объем представлений о созревании нейромедиаторных систем и регуляции поведения человека и животных в ранний постнатальный период, а также открывает перспективы практического применения фармакологической коррекции нарушений «детского» поведения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Стоволосов, Игорь Сергеевич, Москва

1. Анохин К.В. «Молекулярные сценарии консолидации долговременной памяти». // 1-ая Всероссийская научная школа "В будущее наук о мозге и интеллекте", 2009-11-06.

2. Беспалов А.Ю., Звартау Э.Э. Нейропсихофармакология антагонистов NMDA-рецепторов. // Спб., Невский диалект. 2000. - 297 с.

3. Грицай О.Б., Пилипенко В.Э., Беспалова Ж.Д., Дубынин В.А. Роль опиоидных пептидов пищевого происхождения в регуляции термочувствительности таракана Periplaneta americana. // Вестник Московского университета, Сер. 16. Биология 2008.-N 4.-С. 13-18.

4. Добрякова Ю. В. Роль дофаминовой и опиоидной систем в регуляции материнской мотивации и поведения потомства // диссертация . кандидата биологических наук : 03.00.13 Москва, 2009.- 165 е.: ил. РГБ ОД, 61 10-3/181

5. Дубынин В.А., Асмакова Л.С., Соханенкова Н.Ю., Беспалова Ж.Д., Незавибатько В.Н., Каменский А.А. Сравнительный анализ нейротропной активности экзорфинов производных пищевых белков. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. — 1998. — т. 125.-№2.-с. 153-157.

6. Дубынин В.А., Ивлева Ю.А., Стоволосов И.С. и др. Влияние Р-казоморфинов на зависимое от матери («детское») поведение белых крыс. // Доклады академии наук, 2007, том 412, №2, с.279-282

7. Дубынин В.А., Каменский А.А., Бета-казоморфины и их роль в регуляции поведения // КМК ISBN 978-5-87317-651-9; 2010 г.

8. Дубынин В.А., Малиновская И.В., Беляева Ю.А., Стоволосов И.С., Беспалова Ж.Д., Андреева Л.А., Каменский А.А., Мясоедов Н.Ф. Отставленное влияние экзорфинов на обучение детенышей белых крыс // Известия РАН, серия Биологическая, 2007, № 6, стр 1-8

9. Ивлева Ю.А. Влияние p-казоморфинов на материнско-детское взаимодействие белых крыс : Дис. . канд. биол. наук : 03.00.13 : Москва, 2004 182 с. РГБ ОД, 61:04-3/1373

10. Крэйн У. Теория развития // СПб.: прайм-ЕВРОЗНАК, 2002

11. Маклакова А.С. Нейротропные эффекты фрагмента (3-казеина молока -гептапептнда Р-казоморфина-7. // Диее. на соискание ученой степени канд. биол. наук. М., 1996. - 188 с.

12. Пошивалов В.П., Косенкова Н.С. Этологическое исследование последствий пренатального введения психотропных препаратов. // Фармакол. токсикол. 1989. -т. 52.-№5.-с. 99-107.

13. Agmo A, Barreau S, Lemaire V. Social motivation in recently weaned rats is modified by opiates. // DevNeurosci. 1997; 19(6):505-20.

14. Ainsworth MD, Bell SM. Attachment, exploration, and separation: illustrated by the behavior of one-year-olds in a strange situation. // Child Dev. 1970 Mar;41(l):49-67.

15. Altman J, Bayer SA. Development of the brain stem in the rat. // J Comp Neurol, 1980, 184: 1-35 37-56,905-929.

16. Altman J, Sudarshan K. Postnatal development of locomotionin the laboratory rats. // Anim Behav, 1975; 23: 896-920.

17. Andersen, S. L., Rutstein, M., Benzo, J. M., Hostetter, J. C. and Teicher, M. H., Sex differences in dopamine receptor overproduction and elimination. // NeuroReport, 1990a, 8, 1495-1498.

18. Andersen, S. L., Rutstein, M., Benzo, J. M., Hostetter, J. C. and Teicher, M. H., Sex differences in dopamine receptor overproduction and elimination. // NeuroReport, 1990b, 8, 1495-1498.

19. Bacher L.F., Smotherman W.P., Robertson S.S. Effects of warmth on newborn rats' motor activity and oral responsiveness to an artificial nipple. // Behav. Neurosci. 2001. 115: 675-682.

20. Bals-Kubik R, Ableitner A, Herz A, Shippenberg TS. Neuroanatomical sites mediating the motivational effects of opioids as mapped by the conditioned place preference paradigm in rats. // J Pharmacol Exp Ther. 1993 Jan; 264(l):489-95.

21. Barr, G. A. Ontogeny of nociception and antinociception. // NIDA Research Monograph, 1995, 158, 172-201.

22. Berdel, В., & Morys, J. Expression of calbindin-D28k and parvalbumin during development of rat's basolateral amygdaloid complex. // International Journal of Developmental Neuroscience, 2000, 18, 501-513.

23. Bescoby Chambers N, Forster P, Bates G. Fetal valproate syndrome and autism: additional evidence of an association. // Dev Med Child Neurol, 2001, 43: 847.

24. Binkerd PE, Rowland JM, Nan H, Hendricks AG. Evaluation of valproic acid (VPA). Developmental toxicity and pharmatokinetics in Spraque-Dawley rats. // Fund Appl Toxicol, 1988, 11: 485^193.

25. Blozovski, D., & Cudennec, A. Passive avoidance learning in the young rat. // Developmental Psychobiology, 1980, 13, 513-518.

26. Bowlby J. Attachment and loss: retrospect and prospect. // Am J Orthopsychiatry.1 noi /1\.££/l HQ170Z. wvu, / 5.

27. Bowlby, J. (1965). Attachment. New York: Basic Books.

28. Branchi I, Capone F, Alleva E, Costa LG. Polybrominated diphenyl ethers: neurobehavioral effects following developmental exposure. // Neurotoxicology. 2003 Jun; 24(3):449-62.

29. Branchi I, Santucci D, Alleva E. Ultrasonic vocalisation emitted by infant rodents: a tool for assessment of neurobehavioural development. // Behav Brain Res. 2001 Nov 1; 125(l-2):49-56.

30. Brennen, P. A., & Keverne, E. B. Neural mechanisms of mammalian olfactory learning. // Progress in Neurobiology, 1997, 51, 457-481.

31. Broaddus, W. C. and Bennett, J. P., Postnatal development of striatal dopamine function: an examination of D1 and D2 receptors, adenylate cyclase regulation and presynaptic dopamine markers. // Dev. Brain Res., 1990, 52, 265-271.

32. Bryson SE, Smith IM Epidemiology of autism: prevalence, associated characteristics, and implications for research and service delivery. // Ment Retard Dev Dis Res Rev, 1998, 4: 97-103.

33. Byrnes EM, Ughrin Y, Bruno JP. Developmental plasticity in the Dl- and D2-mediation of motor behavior in rats depleted of dopamine as neonates. // Dev Psychobiol. 1996 Dec; 29(8):653-66.

34. Cagiano R, Barfield RJ, White NR, Pleim ET, Weinstein M, Cuomo V. Subtle behavioural changes produced in rat pups by in utero exposure to haloperidol. // Eur J Pharmacol. 1988 Nov 15; 157(l):45-50.

35. Cahill, L., McGaugh, J. L., & Weinberger, N. M. The neurobiology of learning and memory: Some reminders to remember. // Trends in Neurosciences, 2001, 24, 578-581.

36. Caldji C, Francis D, Sharma S, Plotsky PM, Meaney MJ. The effects of early rearing environment on the development of GABAA and central benzodiazepine receptor levels and noveltyinduced fearfulness in the rat. // Neuropsychopharmacology 2000;22: 219-29.

37. Campbell M, Friedman E, DeVito E, Greenspan L, Collins PJ. Blood serotonin in psychotic and brain damaged children. // J Autism Child Schizophr. 1974 Jan-Mar;4(l):33-41.

38. Carew, T. J., & Sutton, M. A. Molecular stepping stones in memory consolidation. // Nature Neuroscience, 2001, 4, 769-771.

39. Christianson AL, Chesler N, Kromberg JGR. Fetal valproate syndrome: clinical and neurodevelopmental features in two sibling pairs. // Dev Med Child Neurol, 1994, 36: 357-369.

40. Dent, G. W., Smith, M. A., & Levine, S. Stress-induced alterations in locus coeruleus gene expression during ontogeny. // Developmental Brain Research, 2001, 127, 23-30.

41. Dichter GS, Brunelli SA, Hofer MA. Elevated plus-maze behavior in adult offspring of selectively bredrats. // Physiol Behav 1996; 60:299-304.

42. Dziedzicka-Wasylewska M, Faron-Gorecka A, Andrecka J, Polit A, Kuoemider M, Wasylewski Z: Fluorescence studies reveal heterodimerization of dopamine D1 and D2 receptors in the plasma membrane. // Biochemistry, 2006, 45, 8751— 8759.

43. Dziedzicka-Wasylewska M, Faron-Gorecka A, Gorecki A, Kusemider M. Mechanism of action of clozapine in the context of dopamine D1-D2 receptor hetero-dimerization—a working hypothesis. // Pharmacol Rep. 2008 Sep-Oct; 60(5):581-7.

44. Elwood RW, Keeling F. Temporal organization of ultrasonic vocalizations in infant mice.// Dev Psychobiol 1982; 15:221-227.

45. Fanselow, M. S., & Gale, G. D. The amygdala, fear, and memory. // Annals of the New York Academy of Sciences, 2003, 985, 125-134

46. Fanselow, M. S., & LeDoux, J. E. Why we think plasticity underlying Pavlovian fear conditioning occurs in the basolateral amygdala. // Neuron, 1999, 23, 229232.

47. Feeney BC, Cassidy J, Ramos-Marcuse F. The generalization of attachment representations to new social situations: predicting behavior during initial interactions with strangers. // J Pers Soc Psychol. 2008 Dec; 95(6): 1481-98.

48. Fleming, A. S., O'Day, D. H., & Kraemer, G. W. Neurobiology of mother-infant interactions: Experience and central nervous system plasticity across development and generations. // Neuroscience and Biobehavioral Reviews, 1999, 23, 673-685.147

49. Florijn, W. J., Tarazi, F. I. and Creese, I., Dopamine receptor subtypes: Differential regulation following 8 months treatment with antipsychotic drugs. J. // Pharmacol. Exp. Ther., 1997, 280, 561-569.

50. Folstein SE, Rosen-Sheidley B Genetics of autism: complex aetiology for a heterogeneous disorder. //Nat Rev Genet, 2001, 2: 943-955.

51. Francis DD, Meaney MJ. Maternal care and the development of stress responses. // Curr Opin Neurobiol 1999; 9:128-34.

52. Frohna, P. A., Neal-Beliveau, B. S. and Joyce, J. N., Neonatal 6-OHDA lesions lead to opposing changes in levels of dopamine receptors and their mRNAs. // Neuroscience, 1995, 68, 505-518.

53. Gelbard, H. A., Teicher, M. H., Baldessarini, R. J., Gallitano, A., Marsh, E. R., Zorc, J. and Faedda, G., Dopamine D1 receptor development depends on endogenous dopamine. //Dev. Brain Res., 1990, 56, 137-140.

54. Gelbard, H. A., Teicher, M. H., Faedda, G. and Baldessarini, R. J., Postnatal development of dopamine D1 and D2 receptor sites in rat striatum. // Dev. Brain Res., 1989,49, 123-130.

55. Georges F, Normand E, Bloch B, Le Moine C. Opioid receptor gene expression in the rat brain during ontogeny, with special reference to the mesostriatal system: an in situ hybridization study. // Brain Res Dev Brain Res. 1998 Aug 8; 109(2):187-99.

56. Gerlach M, Double K, Arzberger T, Leblhuber F, Tatschner T, Riederer P. Dopamine receptor agonists in current clinical use: comparative dopamine receptor binding profiles defined in the human striatum. // J Neural Transm. 2003; 110:1119-1127.

57. Giorgi, O., DeMontis, G., Porceddu, M. U., Mele, S., Calderini, G., To ano, G. and Biggio, G., Developmental and age-related changes in Dl-dopamine receptors and dopamine content in rat striatum. // Dev. Brain Res., 1987, 35, 283-290.

58. Goerendt IK, Messa C, Lawrence AD, Grasby MP, Piccini P, Brooks DJ. Dopamine release during sequential finger movements in health and Parkinson's disease: a PET study. // Brain. 2003; 126:312-325.

59. Gregory EH, Pfaff DW. Development of olfactory-guided behavior in infant rats. //Physiol Behav, 1971; 6: 573-576.

60. Guthrie, K. M., & Gall, C. Anatomic mapping of neuronal odor responses in the developing rat olfactory bulb. // Journal of Comparative Neurology, 2003, 455, 56-71.

61. Hall WG, Rosenblatt JS. Developmental changes in the suckling behavior of hamster pups: a comparison with rat pups. // Dev Psychobiol. 1979 Nov;12(6):553-60.

62. Henning S.J. Maternal factors as determinants of food intake during the suckling period. // Int. J. Obes. 1980. - v. 4(4). - p. 329-332.

63. Hess, U. S., Gall, C. M., Granger, R., & Lynch, G. Differential patterns of c-fos mRNA expression in amygdala during successive stages of odor discrimination learning. // Learning and Memory, 1997, 4, 262-283.

64. Hofer, M. A. Multiple regulators of ultrasonic vocalization in the infant rat. Psychoneuroendocrinology, 1996, 21, 203-217.

65. Hofer, M. A., & Sullivan, R. M. Toward a neurobiology of attachment. In: C. A. Nelson & M. Luciana(Eds.), Handbook of developmental cognitive neuroscience, 2001 (pp. 599-616). Cambridge, MA: MIT Press.

66. Jacobson LH, Bettler B, Kaupmann K, Cryan JF. GABAB1 receptor subunit isoforms exert a differential influence on baseline but not GABAB receptor agonist-induced changes in mice. // J Pharmacol Exp Ther 2006; 319:1317-1326.

67. Knable MB, Heinz A, Raedler T, Weinberger DR. Extrapyramidal side effects with risperidone and haloperidol at comparable D2 receptor occupancy levels. // Psychiatry Res. 1997; 75:91-101.

68. Koffman D.J., Petrov E.S., Varlinskaya E.I., Smotherman W.P. Thermal, olfactory, and tactile stimuli increase oral grasping of an artificial nipple by the newborn rat. // Dev. Psychobiol. 1998. 33: 317-326.

69. Korchounov A, Meyer MF, Krasnianski M. Postsynaptic nigrostriatal dopamine receptors and their role in movement regulation. // J Neural Transm. 2010 Dec; 117(12): 1359-69. Epub 2010 Nov 16.

70. Kostrzewa, R. M. and Saleh, M. I., Impaired ontogeny of striatal dopamine D1 and D2 binding sites after postnatal treatment of rats with SCH23390 and spiroperidol. //Dev. Brain Res., 1989, 45, 95-101.

71. Kozlov A.P., Petrov E.S., Kashinsky W., Nizhnikov M.E., Spear N.E. Oral compression activity on a surrogate nipple in the newborn rat: nutritive and nonnutritive sucking. // Devel. Psychobiol. 2003. 43: 290-303.

72. Kiihhorn J, Hiibner H, Gmeiner P. Bivalent dopamine D2 receptor ligands: synthesis and binding properties. // J Med Chem. 2011 Jul 14; 54(13):4896-903. Epub 2011 Jun3.

73. Langdon, P. E., Harley, C. W., & McLean, J. H. Increased (3-adrenoceptor activation overcomes conditioned olfactory learning induced by serotonin depletion. //Developmental Brain Research, 1997, 114, 261-264.

74. Leon M. Neuroethology of olfactory preference development. // J Neurobiol. 1992 Dec; 23(10):1557-73.

75. Levine, S. Plasma-free corticosterone response to electric shock in rats stimulated in infancy. // Science, 1962, 135, 795-796.

76. Levine, S. Primary social relationships influence the development of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the rat. // Physiology and Behavior, 2001, 73, 255-260.

77. Li YC, Kellendonk C, Simpson EH, Kandel ER, Gao WJ. D2 receptor overexpression in the striatum leads to a deficit in inhibitory transmission and dopamine sensitivity in mouse prefrontal cortex. // Proc Natl Acad Sci USA. 2011 Jul 19; 108(29): 12107-12.

78. Makara GB, Domokos A, Mergl Z, Csabai K, Barna I, Zelena D. Gender-specific regulation of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis and the role of vasopressin during the neonatal period. // Ann N Y Acad Sci. 2008 Dec; 1148:439-45.

79. Maldonado R, Saiardi A, Valverde O, Samad TA, Roques BP, Borrelli E. Absence of opiate rewarding effects in mice lacking dopamine D2 receptors. // Nature. 1997 Aug 7; 388(6642):586-9.

80. Maren, S. The amygdala, synaptic plasticity, and fear memory. // Annals of the New York Academy of Sciences, 2003, 985:106-113.

81. Marshall, K. C., Christi, M. M., Finlayson, P. G., &Williams, J. T. Developmental aspects of the locus coeruleus noradrenaline system. // Progress in Brain Research, 1991, 88, 173-185.

82. McDowell J, Kitchen I. Ontogenesis of delta-opioid receptors in rat brain using 3H.[D-Pen2,D-Pen5]enkephalin as a binding ligand. // Eur J Pharmacol. 1986 Sep 9; 128(3):287-9.

83. McLean, J. H., & Shipley, M. T. Postnatal development of the noradrenergic projection from the locus coeruleus to the olfactory bulb in the rat. // Journal of Comparative Neurology, 1991, 304, 469-477.

84. McLean, J. H., Harley, C. W., Darby-King, A., & Yuan, Q. pCREB in the neonate rat olfactory bulb is selectively and transiently increased by odor preferenceconditioned training. // Learning and Memory, 1999, 6, 608-618.

85. McNamara I.M., Borella A.W., Bialovvas L.A., Whitaker-Azmitia P.M. Further studies in the developmental hyperserotonemia model (DHS) of autism: social, behavioral and peptide changes. // Brain Res. 2008. 1189: 203-214.

86. Meaney MJ, Aitken DH, Sharma S, Viau V, Sarrieau A. Neonatal handling alters adrenocortical negative feedback sensitivity and hippocampal type II glucocorticoid receptor binding in the rat. // Neuroendocrinology 1989; 50:597604.

87. Meaney MJ, Tannenbaum B, Francis D, Bhatnagar S, Shanks N, Viau V, O'Donnell D, Plotsky P. Early environmental programming hypothalamic-pituitary-adrenal responses to stress. // Semin Neurosci 1994; 6:247-59.

88. Meintzschel F, Ziemann U. Modification of practice-dependent plasticity in human motor cortex by neuromodulators. // Cereb Cortex. 2006; 16(8):1106— 1115.

89. Meisel H. Biochemical properties of regulatory peptides derived from milk proteins. //Biopolymers. 1997. - v. 43(2). - p. 119-128.

90. Menard JL, Hakvoort RM. Variations of maternal care alter offspring levels of behavioural defensiveness in adulthood: evidence for a threshold model. Behav Brain Res. 2007 Jan 25; 176(2):302-13.

91. Miller S.S., Spear N.E. Olfactory learning in the rat neonate soon after birth. //Dev. Psychobiol. 2008. 50: 554-565.

92. Moncada D, Viola H. Phosphorylation state of CREB in the rat hippocampus: a molecular switch between spatial novelty and spatial familiarity? // Neurobiol Learn Mem, 2006, 86:9-18.

93. Moriceau S, Sullivan RM. Neurobiology of infant attachment. // Dev Psychobiol. 2005 Nov;47(3):230-42.

94. Moriceau, S., & Sullivan, R. M. Unique neural circuit for neonatal olfactory learning. // Journal of Neuroscience, 2004a, 24, 1182-1189.

95. Moriceau, S., & Sullivan, R. M. Corticosterone influences on mammalian neonatal sensitive period learning. // Behavioral Neuroscience, 2004b 118, 274281.

96. Morys, J., Berdel, B., Jagalska-Majewska, H., & Luczynska, A. The basolateral amygdaloid complex—Its development, morphology and functions. Folia Morphology, 1999, 58, 29-46.

97. Moy SS, Nadler JJ. Advances in behavioral genetics: mouse models of autism. // Mol Psychiatry 2008; 13:4-26.

98. Muller JM, Moore H; Myers MM.; Shair, H N. Ventral striatum dopamine D2 receptor activity inhibits rat pups' vocalization response to loss of maternal contact. // Behavioral Neuroscience. Vol 122(1), Feb 2008, 119-128.

99. Nair, H. P., & Gonzalez-Lima, F. Extinction of behavior in infant rats: Development of functional coupling between septal, hippocampal, and ventral tegmental regions. // Journal of Neuroscience 1999, 19, 8646-8655.

100. Nakamura, S. T., & Sakaguchi, T. Development and plasticity of the locus coeruleus. A review of recent physiological and pharmacological experimentation. // Progress in Neurobiology, 1990, 34, 505-526.

101. Nanson JL Autism in fetal alcohol syndrome: a report of six cases. // Alcohol Clin Exp Res, 1992, 16: 558-565.

102. Nelson EE, Panksepp J. Brain substrates of infant-mother attachment: contributions of opioids, oxytocin, and norepinephrine. // Neurosci Biobehav Rev. 1998 May; 22(3):437-52.

103. Neve, K. A. and Neve, R. L., The Dopamine Receptors. // Humana Press, TotowaNJ, 1997.

104. Niznik HB, Otsuka NY, Dumbrille-Ross A, Grigoriadis D, Tirpak A, Seeman P. Dopamine Dl receptors characterized with r3H.SCH 23390. // J Biol Chem. 1986;261:8397-8406.

105. Noirot E. Ultra-sounds in young rodents. I. Changes with age in albino mice. // Anim Behav 1966; 14:459-462.

106. Obeso JA, Rodriguez-Oroz MC, Benitez-Temino B, Blesa FJ, Guridi J, Marin C, Rodriguez M. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson's disease. // Mov Disord. 2008; 23(Suppl 3):548-559.

107. Okere, C. O., & Kaba, H. Increased expression of neuronal nitric oxide synthase mRNA in the accessory olfactory bulb during the formation of olfactory recognition memory in mice. // European Journal of Neuroscience, 2000, 12, 4552-4556.

108. Panksepp J, Nelson E, Siviy S. Brain opioids and mother-infant social motivation. // Acta Paediatr Suppl. 1994 Jun; 397:40-6.

109. Papaioannou A, Dafni U, Alikaridis F, Bolaris S, Stylianopoulou F. Effects of neonatal handling on basal and stress-induced monoamine levels in the male and female rat brain. // Neuroscience. 2002; 114(1): 195-206.

110. Petrov E.S., Varlinskaya E.I., Smotherman W.P.The newborn rat ingests fluids through a surrogate nipple: a new technique for the study of early suckling behavior. //Physiol. Behav. 1997. 62: 1155-1158.

111. Polan HJ, Hofer MA. Olfactory preference for mother over home nest shavings by newborn rats. // Dev Psychobiol. 1998 Jul; 33(l):5-20.

112. Pryce CR, Feldon J. Long-term neurobehavioural impact of the postnatal environment in rats: manipulations, effects and mediating mechanisms. // Neurosci BiobehavRev. 2003 Jan-Mar; 27(l-2):57-71.

113. Ramus, S. J., & Eichenbaum, H. Neural correlates of olfactory recognition memory in the rat orbitofrontal cortex. // Journal of Neuroscience, 2000, 20, 8199-8208.

114. Rangel, S., & Leon, M. Early odor preference training increases olfactory bulb norepinephrine. // Developmental Brain Research, 1995, 85, 187-191.

115. Rao, P. A., Molino , P. B. and Joyce, J. N., Ontogeny of dopamine D1 and D2 receptor subtypes in rat basal ganglia: quantitative autoradiographic study. // Dev. Brain Res., 1991, 60, 161-177.

116. Richardson, R., Paxinos, G., & Lee, J. The ontogeny of conditioned odor potentiation of startle. // Behavioral Neuroscience, 2002, 114, 1167-1173.

117. Ristine LA, Spear LP. Effects of serotonergic and cholinergic antagonists on suckling behavior of neonatal, infant, and weanling rat pups. // Behav Neural Biol. 1984 Jul; 41(2):99-126.

118. Roth TL, Sullivan RM. Consolidation and expression of a shock-induced odor preference in rat pups is facilitated by opioids. Physiol Behav. 2003 Jan; 78(1): 135-42.

119. Roubertoux PL, Martin B, Le Roy I, Beau J, Marchaland C, Perez-Diaz F, Cohen-Salmon C, Carlier M. Vocalizations in newborn mice: genetic analysis. // Behav Genet 1996; 26:427-437.

120. Roullet, F., Datiche, F., Lienard, F., & Cattarelli, M. Cue valence representation studied by Fos immunocytochemistry after acquisition of a discrimination learning task. // Brain Research Bulletin, 2004, 64, 31-38.

121. Rudy, J. W., & Morledge, P. The ontogeny of contextual fear conditioning: Implications for consolidation, infantile amnesia, and hippocampal system function. //Behavioral Neuroscience 1994, 108, 227-234.

122. Sananes, C. B., & Campbell, B. A. Role of the central nucleus of the amygdala in olfactory heart rate conditioning. // Behavioral Neuroscience 1989, 103, 519-525.

123. Scattoni ML, Crawley J, Ricceri L. Ultrasonic vocalizations: a tool for behavioural phenotyping of mouse models of neurodevelopmental disorders. // Neurosci Biobehav Rev. 2009 Apr; 33(4):508-15. Epub 2008 Aug 13.

124. Schambra, U. B., Duncan, G. E., Breese, G. R., Fornaretto, M. G., Caron, M. G. and Fremeau, R. T. Jr, Ontogeny of D1A and D2 dopamine receptor subtypes in rat brain using in situ hybridization and receptor binding. // Neuroscience, 1994, 62, 65-85.

125. Schapiro S, Salas M, Vinkovich K. Hormonal effects on ontogeny of swimming ability in rats: Assesment of central nervous system development. // Science, 1970; 168: 147-151.

126. Schettino, L. F., & Otto, T. Patterns of Fos expression in the amygdala and ventral perirhinal cortex induced by training in an olfactory fear-conditioning paradigm. // Behavioral Neuroscience, 2001, 115, 1257-1272.

127. Schneider T, Przewlocki R. Behavioral alterations in rats prenatally exposed to valproic acid: animal model of autism. // Neuropsychopharmacology. 2005 Jan; 30(l):80-9.

128. Schneider T, Przewlocki R. Behavioral alterations in rats prenatally exposed to valproic acid: animal model of autism. // Neuropsychopharmacology. 2005 Jan; 30(l):80-9.

129. Schoenbaum, G., Chiba, A. A., & Gallagher, M. Neural encoding in orbitofrontal cortex and basolateral amygdala during olfactory discrimination learning. // Journal of Neuroscience, 1999, 19, 1876-1884.

130. Schumacher HJ, Terapane J, Jordan RL, Wilson JG. The teratogenic activity of a thalidomide analogue, EM 12, in rabbits, rats, and monkeys. // Teratology, 1968, 5: 233-240.

131. Sevelinges, Y., Gervais, R., Messaoudi, B., Granjon, L., & Mouly, A. M. Olfactory fear conditioning induces field potential potentiation in rat olfactory cortex and amygdala. // Learning and Memory, 2004, 11, 761-769.

132. Shair HN, Muller JM, Moore H. Dopamine's role in social modulation of infant isolation-induced vocalization: I. Reunion responses to the dam, but not littermates, are dopamine dependent. // Dev Psychobiol. 2009 Mar; 51(2):131-46.

133. Shalaby IA, Spear LP. Psychopharmacological effects of low and high doses of apomorphine during ontogeny. // Eur J Pharmacol. 1980 Oct 31; 67(4):451-9.

134. Shipley, M. T., Halloran, F. J., & De la Torre, J. Surprisingly rich projection from locus coeruleus to the olfactory bulb in the rat. // Brain Research, 1985, 239, 294-299.

135. Smotherman W.P., Petrov E.S., Varlinskaya E.I. Experimental study of the first suckling episode: rat pups ingest fluids through a surrogate nipple. // Behav. Neurosci. 1997. Ill: 1383-1394.

136. Spain JW, Roth BL, Coscia CJ. Differential ontogeny of multiple opioid receptors (mu, delta, and kappa). // J Neurosci. 1985 Mar; 5(3):584-8.

137. Spanagel R, Herz A, Shippenberg TS. Opposing tonically active endogenous opioid systems modulate the mesolimbic dopaminergic pathway. // Proc Natl Acad Sci USA. 1992 Mar 15; 89(6):2046-50.

138. Stanton, M. E. Multiple memory systems, development and conditioning. Behavioural Brain Research 2000, 110, 25-37.

139. Stern G. The effects of lesions in the substantia nigra. // Brain. 1966; 89: 449-478. doi: 10.1093/brain/89.3.449.

140. Stovolosov I.S., Dubynin V.A., Kamensky A.A. A new method of investigation of "child's" behavior (infant-mother attachment) of newborn rats. // Zh Vyssh Nerv Deiat Im I P Pavlova. 2010 Mar-Apr; 60(2):247-54.

141. Stromland K, Nordin V, Miller MT, Akerstrom B, Gi'lberg C. Autism in thalidomide embryopathy: a population study. // Dev Med Child Neurol, 1994, 36: 351-356.

142. Sullivan, R. M. Unique characteristics of neonatal classical conditioning: The role of the amygdala and locus coeruleus. // Integrative Physiological and Behavioral Science, 2001, 36, 293-307.

143. Sullivan, R. M., & Wilson, D. A. Role of the amygdala complex in early olfactory associative learning. // Behavioral Neuroscience, 1993, 107, 254-263.

144. Sullivan, R. M., Landers, M., Yeaman, B., & Wilson, D. A. Good memories of bad events in infancy: Ontogeny of conditioned fear and the amygdala. // Nature, 2000a, 407, 38-39.

145. Sullivan, R. M., Wilson, D. A., Lemon, C., & Gerhardt, G. A. Bilateral 6-OHDA lesions of the locus coeruleus impair associative olfactory learning in newborn rats. // Brain Research, 1994, 643, 306-309.

146. Swiergiel, A. H., Takahashi, L. K., & Kalin, N. H. Attenuation of stress-induced behavior by antagonism of corticotropin-releasing factor receptors in the central amygdala of the rat. // Brain Research, 1993, 2, 229-234.

147. Takahashi, L. K. Organizing action of corticosterone on the development of behavioral inhibition in the preweanling rat. // Developmental Brain Research, 1994, 81, 121-127.

148. Tarazi FI, Baldessarini RJ. Comparative postnatal development of dopamine D(l), D(2) and D(4) receptors in rat forebrain. // Int J Dev Neurosci. 2000 Feb; 18(l):29-37.

149. Teicher, M. H., Andersen, S. L. and Hostetter, J. C., Evidence for dopamine receptor pruning between adolescence and adulthood in striatum but not nucleus accumbens. //Dev. Brain Res., 1995, 89, 167-172.

150. Teschemacher H. Opioid receptor ligands derived from food proteins. // CurrPharmDes. 2003; 9(16): 1331-44.

151. Thiels E., Alberts J.R., Cramer C.P., Weaning in rats: II. Pup behavior patterns. // Dev. Psychobiol. 1990. - v. 23(6). - p. 495-510.

152. Thomas, W. S., Neal-Beliveau, B. S. and Joyce, J. N., There is a limited critical period for dopamine's e ects on D1 receptor expression in the developing rat neostriatum. // Dev. Brain Res., 1998, 111, 99-106.

153. Trottier G., Srivastava L., Walker C.D. Etiology of infantile autism: a review of recent advances in genetic and neurobiological research. // J. Psychiat. Neurosci. 1999. - v. 24(2). - p. 103-115.

154. Veenema AH. Early life stress, the development of aggression and neuroendocrine and neurobiological correlates: what can we learn from animal models? // Front Neuroendocrinol. 2009 Oct; 30(4):497-518. Epub 2009 Mar 31.

155. Verwer, R. W., Van Vulpen, E. H., & Van Uum, J. F. Prefrontal development of amygdaloid projections to the prefrontal cortex in the rat studied with retrograde and anterograde tracers. Journal of Comparative Neurology 1996, 376, 75-96.

156. Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Tomasi D, Telang F. Addiction: beyond dopamine reward circuitry. // Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 Sep 13; 108(37):15037-42. Epub 2011 Mar 14.

157. Volterra A, Brunello N, Restani P, Galli CL, Racagni G. Ontogenetic studies on mu, delta and kappa opioid receptors in rat brain. // Pharmacol Res Commun. 1986 Oct; 18(10):979-90.

158. Walsh J. Definitions matter: if maternal-fetal relationships are not attachment, what are they? // Arch Womens Ment Health. 2010 Mar 9. Epub ahead of print.

159. Wang H, Hu Y, Tsien JZ. Molecular and systems mechanisms of memory consolidation and storage. // Prog Neurobiol, 2006, 79:123-135.

160. Wardas J, Konieczny J, Lorenc-Koci E. The role of striatal adenosine A2A receptors in regulation of the muscle tone in rats. // Neurosci Lett. 1999; 276:7982.

161. Weller A, Leguisamo AC, Towns L, Ramboz S, Bagiella E, Hofer M, Hen R, Brunner D. Maternal effects in infant and adult phenotypes of 5HT1A and 5HT1B receptor knockout mice. // Dev Psychobiol 2003; 42:194-205.

162. Wiedenmayer, C. P., & Barr, G. A. Developmental changes in c-fos expression to an age-specific social stressor in infant rats. // Behavioural Brain Research, 2001, 126, 147-157.

163. Williams G, King J, Cunningham M, Steohan M, Kerr B, Hersh JH. Fetal valproate syndrome and autism: additional evidence of an association. // Dev Med Child Neurol, 2001, 43: 202-206.

164. Wilson C, Kaspar A. Changes in immobility responses in rat pups with maternal stimuli.//J Gen Psychol. 1994 Apr; 121(2): 111-20.

165. Wilson DA, Sullivan RM. Neurobiology of associative learning in the neonate: early olfactory learning. // Behav Neural Biol. 1994 Jan; 61(1): 1-18.

166. Wilson, D. A., & Sullivan, R. M. Olfactory associative conditioning in infant rats with brain stimulation as reward. II. Norepinephrine mediates a specific156component of the bulb response to reward. 11 Behavioral Neuroscience, 1991, 105, 843-849.

167. Winslow JT, Hearn EF, Ferguson J, Young LJ, Matzuk MM, Insel TR. Infant vocalization, adult aggression, and fear behavior of an oxytocin null mutant mouse. //Horm Behav 2000; 37:145-155.

168. Winzer-Serhan, U. H., & Leslie, F. M. Expression of a2A adrenoceptors during rat neocortical development. // Journal of Neurobiology, 1999, 38, 259269.

169. Wohltmann M, Roth BL, Coscia CJ. Differential postnatal development of mu and delta opiate receptors. // Brain Res. 1982 Apr; 255(4):679-84.

170. Woo, C. C., & Leon, M. Sensitive period for neural and behavioral responses to learned odors. // Developmental Brain Research, 1988, 36, 309-313.

171. Yang S, Sonoda S, Chen L, Yoshikawa M. Structure-activity relationship of rubiscolins as delta opioid peptides. // Peptides. 2003 Apr; 24(4):503-8.

172. Yang S, Yunden J, Sonoda S, Doyama N, Lipkowski AW, Kawamura Y, Yoshikawa M. Rubiscolin, a delta selective opioid peptide derived from plant Rubisco. // FEBS Lett. 2001 Dec 7; 509(2):213-7.

173. Yuan, Q., Harley, C. W„ McLean, J. H„ & Knopfel, T. Optical imaging of odor preference memory in the rat olfactory bulb. // Journal of Neurophysiology, 2003a, 87, 3156-3159.

174. Yuan, Q., Harley, C. W., & McLean, J. H. Mitral cell 131 and 5-HT2A receptor co-localization and cAMP co-regulation: A new model of norepinephrine-induced learning in the olfactory bulb. // Learning and Memory, 2003b, 10, 5-15.

175. Zeng, W., Hyttel, J. and Murrin, L. C., Ontogeny of dopamine D1 receptors in rat striatum. J. // Neurochem., 1988, 50, 862-867.

176. Zippelius HM, Schleidt WM. Ultraschall-laute bej jungen mausen (Ultrasonic vocalization in infantmice). // Naturwissenschaften 1956; 43:502-503.

Информация о работе

Стоволосов, Игорь Сергеевич
кандидата биологических наук
Москва, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Влияние дофаминергической и опиоидной систем на зависимое от матери поведение детенышей белых крыс - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы