Влияние буфотина и убихинона-10 на функции ЦНС крыс в норме и при гипобарической гипоксии

Тихобразова, Ольга Павловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние буфотина и убихинона-10 на функции ЦНС крыс в норме и при гипобарической гипоксии
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние буфотина и убихинона-10 на функции ЦНС крыс в норме и при гипобарической гипоксии"

На правах рукописи

ТИХОБРАЗОВА Ольга Павловна

ВЛИЯНИЕ

БУФОТИНА И УБИХИНОНА-10 НА ФУНКЦИИ ЦНС КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ГИПОБАРИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ

03 00 13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2007

003175859

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им Н И Лобачевского

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки РФ,

Доктор биологических наук, профессор Крылов Василий Николаевич

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор Мухина Ирина Васильевна Доктор медицинских наук, профессор Бояринов Геннадий Андреевич

Ведущая организация:

Российский университет дружбы народов

на заседании диссертационного совета д 212 ! 66 11 Нижегородского государственного университета им Н.И Лобачевского по адресу 603950, Нижнии Новгород, пр Гагарина, 23

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ННГУ

Защита состоится

2007 г в /3

часов

Автореферат разослан «_£_»

2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

Корягин А С

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Гипоксия - широко распространенное явление, возникающее как в условиях дефицита кислорода во внешней среде, так и в результате самых разных патологий, связанных с нарушением функции дыхательной сердечнососудистой систем, а также транспортной функции крови (Лукьянова, 2000) Во всех случаях в итоге происходит снижение доставки кислорода к тканям до уровня, недостаточного для поддержания функции, метаболизма и структуры клетки Это определяет актуальность проблемы и ее значимость для практической и теоретической медицины (Рябов, 2001)

Среди различных методов коррекции гипоксических состояний наибольший интерес вызывает фармакологическая защита с использованием препаратов метаболического действия, направленная на поддержание энергетического обмена (усиление синтеза макроэргов, расширение их резервного пула, более эффективное использование) В этой связи представляется актуальным поиск новых средств и их сочетаний, обладающих антигипоксиче-ским действием, применение которых позволило бы повысить степень резистентности клеток жизненно важных органов к гипоксии и тем самым снизить процент развития постгипоксических энцефалопатий

Одним из препаратов направленного метаболического действия является разработанный в ННГУ и разрешенный ФК МЗ РФ для клинического изучения кардиотонический препарат на основе яда жаб - Буфотин, который содержит в качестве основных компонентов следующие низкомолекулярные продукты группа буфотенинов - производные 5- гидрокситриптамина и бу-фогенины - стероидные производные Ранее проведенные исследования выявили у препарата не только кардиотропные (Крылов и др , 1994), но также антиоксидангные (Конторщикова, Крылов, Мухина, 1990), ангигипоксиче-ские и нейротропные свойства (Миронов, 2002)

В последнее время экспериментально и клинически обоснована перспектива использования в качестве антигипоксического средства компонента дыхательной цепи митохондрий - убихинона (Донченко, 1988, Лукьянова, 1991, Крылова, 2002) Более чем 20 летний опыт экспериментальных и клинических исследований применения убихинона убедительно доказывают его эффективность при восстановлении функций сердечно-сосудистой системы Защитная роль убихинона-10 обусловлена его участием в процессах энергетического метаболизма и антиоксидантиыми свойствами Менее известно использование убихинона-10 в неврологии Остается практически не изученным его действие на ЦНС и высшие интегративные функции при применении препарата, как в норме, так и при гипоксических состояниях

Цель и задачи исследования

Целью исследования явилось изучение влияния Буфотина и убихинона-10 на функциональное состояние ЦНС крыс в норме и при моделировании острой гипобарической гипоксии В задачи работы входило

1 Изучить влияние Буфотина и убихинона-10 на процессы обучения и памяти интактных крыс при формировании условного рефлекса активного избегания

2 Исследовать влияние убихинона-10 на высшие интегративные функции ЦНС интактных животных поведение, обучение, память (при выработке и воспроизведении условного рефлекса пассивного избегания)

3 Сравнить механизмы действия Буфотина и убихинона-10 на процессы обучения и памяти крыс при формировании и воспроизведении условного рефлекса пассивного избегания в норме

4 Изучить влияние превентивного введения убихинона-10 на выживаемость крыс в условиях острой гипобарической гипоксии

5 Оценить нейропротекторное действие убихинона-10 на восстановление функционального состояния высших отделов ЦНС в постгипоксическом периоде

6 Оценить возможность совместного введения с Буфотина и убихино-на-10 для повышения резистентности к острой гипобарической гипоксии исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных

Научная новизна

Впервые показано положительное действие Буфотина на процессы обучения и памяти интактных крыс при формировании условного рефлекса активного избегания (УРАИ), не уступающее по эффективности Пирацетаму Применение СоСИО не влияет на динамику формирования процесса обучения крыс УРАИ Влияние препарата на воспроизведение навыка сопоставимо с действием Буфотина и Пирацетама Выявлена разница в реализации мнемо-тропного действия препаратов при выработке у крыс условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) одним из возможных механизмов положительного действия СоС>10, в отличие от Буфотина, является активация норад-ренергической системы

Введение убихинона интактным крысам не оказывает влияния на показатели общей двигательной активности и уровня тревожности Впервые показано, что превентивное введение убихинона-10 не повышает резистентность организма крыс к острой гипоксии Установлено положительное влияние убихинона-10 на восстановление мнестических функций, нарушенных воздействием острой гипоксии

Для восстановления исходной поведенческой активности в постгипоксическом периоде наиболее эффективным является однократное введение убихинона (100 мг/кг), поскольку, в отличие от курсового применения Со<210 (10 мг/кг), предупреждает повышение уровня тревожности крыс в ответ на ги-поксический стресс, способствует восстановлению ориентировочно-исследовательской активности животных Однократное введение СоСНО в постгипоксическом периоде, в отличие от курсового применения, снижает уровень тканевой гипоксии При этом реализуются оба свойства препарата восстановление дыхательной цепи с соответствующей защитой энергетиче-

ской функции клетки и сохранение активности системы антиоксидантной зашиты

Впервые установлено, что совместное превентивное применение препаратов, также как и введение Со(¿10, в отличие от Буфотина не повышает резистентность к острой гипобарической гипоксии (ОГБГ) исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных

Научно-практическая значимость

Работа обосновывает возможность использования экзогенного Буфотина и убихинона-10 в медицинской практике как антигипоксических и антиокси-дантных средств при терапии заболеваний, связанных со снижением кисло-родобеспечивающей функции головного мозга организма человека и животных Полученные данные открывают возможность расширения спектра применения Буфотина и СоС>10 как нейропротекторных средств с целью повышения резистентности головного мозга и организма в целом к экстремальным воздействиям различной этиологии

Основные положения, выносимые на защиту:

Буфотин оказывает ноотропное действие, аналогичное Пирацетаму Убихинон-10, не влияя на скорость выработки У РАИ у крыс, проявляет оптимизирующее действие на воспроизведение условного рефлекса В основе мнемотропного действия препаратов лежат разные механизмы одним из способов реализации положительного эффекта Со<310 при формировании УРПИ, в отличие от Буфотина, является активация норадренергической системы

Превентивное введение убихинона-10 не повышает устойчивость животных к острой гипобарической гипоксии Введение Со(210 после гипокси-ческого воздействия оказывает нейропротекторное действие, восстанавливая нарушенные процессы фиксации и сохранения временных связей при формировании УРПИ у крыс

Наиболее эффективным для восстановления исходной поведенческой активности в постгипоксическом периоде является однократное введение Убихинона (100 мг/кг), поскольку, в отличие от курсового применения СоСНО (10 мг/кг), предупреждает повышение уровня тревожности крыс в ответ на гипоксический стресс, обеспечивает восстановление обшей двигательной активности животных Указанные процессы сопровождаются снижением уровня тканевой гипоксии

Совместное превентивное применение Буфотина и убихинона-10, не оказывает антигипоксического действия

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 7 работ Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» (Санкт- Петербург, 2005), четвер-

той городской межвузовской конференции (Н Новгород, 2005), 10-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века», посвященной 50-летию Пущинского научного центра РАН (Пущине, 2006), десятой Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2007), XX съезде физиологического общества им ИП Павлова (Москва, 2007), расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ (Н Новгород, 2007)

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав результатов исследования, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, содержащего ¿^йсточника. из которых //^иностранных, приложения Общий объем работы ¿^страницы, в том числе^рисунка и -/^таблиц

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты были проведены на 604 белых лабораторных нелинейных крысах-самцах, массой 200-250 г Распределение по сериям исследований представлено в таблице 1

В опытах использовали Буфотин (0,1мг/кг), убихинон-10 (10 мг/кг и 100 мг/кг), растворенный в растительном масле, Пирацетам (400 мг/кг), пропра-нолол (Обзидан) (1 мг/кг") и Дельтаран (0,2 мг/кг) Буфотин, Пирацетам, про-пранолол и 0,9% раствор ЫаС1 (контроль) вводили внутрибрюшинно объемом 0,5мл Убихинон и масло в контроле вводили перорально объемом 0,5мл, за исключением серии формировании УРАИ (внутрибрюшинно)

Исследование влияния препаратов на процессы обучения и памяти животных проводилось с использованием методов формирования условного рефлекса пассивного избегания (Буреш и др , 1991) и активного избегания

Обучение животных условному рефлексу активного избегания (Козловский, Данчев, 2004) проводили в челночной камере Безусловное электрокожное аверсивное раздражение (50 Гц, 0 4-08 мА (в зависимости от индивидуальной чувствительности, определяемой по выраженности ответа)) подавалось на лапы животного после предварительного изолированного действия условного сигнала (звук 4с) УРАИ вырабатывали в течение 5 дней по 30 сочетаний раздражителей ежедневно Крысы, которые в конце 5 дня тестирующего обучения имели более 15 невыполненных реакций, классифицировались как плохо обучаемые, в дальнейшем эксперименте не использовались Обучение остальных животных возобновляли через 15 дней на фоне ежедневного введения препаратов в течение 4 последующих дней Определение сохранности навыка проводили через 5 дней после последнего сеанса обучения При оценке результатов исследований регистрировали количество избеганий и латентный период избегания (ЛВИ)

Таблица 1

Общее количество объектов исследования и их распределение по сериям

Серии опытов Экспериментальные методы Количество крыс

Исследование влияния Бу-фотина и СоС^Ш на процессы обучения и памяти Условный рефлекс активного избегания (УРАИ), условный рефлекс пассивного избегания (УРПИ) 241

Изучение влияния Со(310 на поведение животных Тест «открытое поле», оценка гре-вожно-фобического состояния 35

Изучение влияния Со(210 на устойчивость крыс к ОГБГ и восстановление функционального состояния ЦНС животных в постгипоксиче-ском периоде Моделирование ОГБГ, УРПИ, тест «открытое поле», оценка тревожно-фобического состояния, определение содержания лактата и пиру ват а в крови, активности СОД и катала-зы в эритроцитах 280

Изучение влияния совместного применения препаратов на резистентность к ОГБГ исходно неустойчивых на «высоте» 12000 м животных Моделирование ОГБГ у исходно неустойчивых животных 48

Поведение животных исследовалось в тесте «открытое поле» с помощью многопараметрового метода комплексной оценки тревожно-фобических состояний (Родина и др , 1993) Для определения ориентировочно- исследовательской активности животных в тесте «открытое поле» регистрировались следующие показатели горизонтальная двигательная активность (число пересеченных центральных и периферических квадратов), вертикальная двигательная активность (число стоек - подъемов на задние лапы) В основу метода комплексной оценки тревожно-фобических состояний положены две ситуации связанные с проявлением тревоги и страха у животных 1) столкновение с незнакомым неживым объектом или незнакомой ситуацией (тесты I -V) и 2) действие руки экспериментатора (тесты VI - IX)

Для моделирования острой гипобарической гипоксии использовалась проточная вакуумная барокамера Крыс помещали в условия, соответствующие "подъему" на высоту 11500 - 12000 метров со скоростью 183 м/с О степени резистентности к гипоксии судили по времени выживания на «высоте» (Тж, мин) до наступления летального исхода, либо появления второго атонального вдоха, после чего животное "спускалось" на исходную высоту Низкоустойчивыми (НУ) к гипоксии считали животных со значением Тж не выше 3 минут Высокоустойчивыми (ВУ) считали крыс с Тж выше 10 минут,

среднеустойчивыми (СУ) считали животных с промежуточным значением Тж Эффективность антигипоксических свойств испытываемого вещества оценивали по изменению времени жизни опытных животных на «смертельной площадке» относительно времени жизни контрольных животных (Методические рекомендации, 1990)

Уровень тканевой гипоксии оценивали по содержанию лактата и пиру-вата в крови крыс (Асатиани, 1965) Состояние антиоксидантных ферментов определяли по измерению активности супероксиддисмутазы (СОД) (М181нк.1гт, 1972) и каталазы (АеЫ, 1970) в эритроцитах

Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакета программ ВЮ5ТАТ и Я!а1Шгеа 6 0 Нормальность распределения данных проверяли с использованием критерия Шапиро-Уилка Для статистической оценки межгрупповых и внутригрупповых различий средних применяли однофакторный дисперсионный анализ, критерий Крускала-Уолиса, дисперсионный анализ повторных измерений и критерий Фридмана с последующим применением поправки Бонферрони и критерия Даннета Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние Буфотина и убихинона-10 на динамику формирования и воспроизведение УРАИ у крыс

При исследовании влияния Буфотина на обучение у крыс было показано, что препарат оказывает положительное влияние на формирование УР А.И, не уступающее по эффективности действию Пирацетама На протяжении всего периода обучения между этими группами животных не наблюдалось статистически значимых различий по таким основным показателям, характеризующим процесс обучения, как количество реакций избегания (рис 1) и ЛВИ (рис 2), в то же время уже с 1 дня наблюдалось достоверное отличие этих показателей от контроля (р<0,05)

Анализ результатов позволил выявить следующую особенность влияния Буфотина на динамику формирования УРАИ у крыс оптимизирующее действие Буфотина максимально проявлялось на 3-4 день введения препарата, ю есть на стадии формирующейся консолидации В то время как Пирацетам начинал оказывать положительное действие на более ранних этапах обучения

При изучении влияния Со(310 на процессы обучения было показано, что введение препарата не оказывает выраженного эффекта, поскольку, при отсутствии статистически значимых различий по основным показателям с контролем, на протяжении всего периода формирования УРАИ у крыс наблюдались достоверные отличия показателей по отношению к группе с введением Пирацетама (р<0,05) (рис 1,2)

3 Пирацетам □ Буфотин □ Контроль (0,9% р-р №С1) 53 Убихинон ЕЗ Контроль (масло)

Рис. I. Влияние Буфотина и убихинона -10 на динамику формирования УРАИ у крыс (количество реакций избегания в % от исходного значения) * - р<0,05 отличие по отношению к контролю; ** - р<0,05 отличие по отношению к группе с введением Пирацетама; # - р<0,05 отличие по отношению к 1 дню.

250 •* ^ ^т **#

200 4150 -;- 4 *

100 -I-\

50 |

о 41

ЦЗЗЯ Пирацетам Убихинон

I' 1 Буфотин

Котроль (масло)

, дни 4

СИЗ Контроль (0,9^ р-р .МаС1] "—"исходный уровень

Рис. 2. Влияние Буфотина и убихинона -10 на динамику латентного времени избегания при формировании формирования УРАИ у крыс *-р<0,05 отличие по отношению к контролю: **-р<0.05 отличие по отношению к группе с введением Пирацетама; #-р<0,05 отличие по отношению к исходному уровню.

Проверка сохранения выработанного навыка условнорефлекторного избегания, проведенная через 5 дней после последнего сеанса обучения, показала достоверно высокий уровень сохранности УРАИ в опытных группах с введением изучаемых препаратов (рис.3).

Таким образом, в проведенном исследовании применение Буфотина оказывало положительное влияние на процессы обучения и память крыс при

формировании УРАИ аналогичное Пирацетаму. Введение убихинона не облегчало выработку условного рефлекса. Действие Сор 10 на прочность закрепления навыка по эффективности сопоставимо с влиянием Буфотина I! Пирацетама.

I. с

Рис. 3. Влияние Буфотина и убихинона на воспроизведение УРАИ у крыс. А - количество реакций избегания; Б - латентное время избегания. !-Пирацегам, 2-Буфотин, 3-контроль (0,9% р-р МаС1), 4-убихинон, 5-контроль (масло).

*-р<0,05 отличие по отношению к контролю.

Влияние Буфотина и убихинона-10 на формирование УРПИ у крыс на фоне блокады р- адренорецеиторов головного мозга

Результаты исследования показали, что участие р-адренорецелторов ЦНС обязательно на стадии научения, но не является необходимым при воспроизведении рефлексов, что согласуется с данными литературы (Вегтап, Би<1ш, 2001).

Применение Буфотина нормализовало выработку УРПИ, нарушенную введением пропранолола (табл.2). В серии с совместным введением Буфотина и пропранолола, также как и в серии с введением Буфотина, время входа в темную камеру при воспроизведении УРПИ достоверно увеличивалось по отношению ко времени при обучении (в 4,4 раза в группах с введением препаратов перед обучением и 3,6 раза - перед воспроизведением УРПИ) (р<0,05).

В серии с введением убихинона животные опытной группы через 24 часа после обучения, в отличие от контрольных, предпочитали находиться в светлом отсеке, что позволяет говорить о положительном влиянии Со(}10 на мнестические функции крыс.

Введение убихинона не устраняло нарушение способности животных к обучению, вызванное введением пропранолола, так как латентное время перехода крыс в темный отсек камеры при воспроизведении УРПИ, статистически значимо не отличаясь от времени при обучении (р>0,05), было достоверно меньше, чем в интактной группе животных (р<0,05).

В группе с совместным применением убихинона и пропранолола перед воспроизведением условного рефлекса, в отличие от контрольной, латентное время перехода в темный отсек камеры через сутки после обучения досто-

верно не увеличивалось (р>0,05) Отсутствие сохранности рефлекса в данной группе животных, вероятно, вызвано отрицательным влиянием блокады (3-адренорецепторов головного мозга на адаптивное поведение крыс (Калюжный и др , 2005, Рг/уЬуя^швкл е1 а1, 1999), что привело к развитию пассивно-оборонительной тактики поведения

Таблица 2

Влияние Буфотина и убихинона на формирование УРПИ на фоне блокады (3-адренорецепторов

Группы Препараты перед обучением Препараты перед воспроизведением

Обучение ЛВП, с М±ш Воспроизведение ЛВП, с М±ш Обучение ЛВП, с М+ш Воспроизведение ЛВП, с М±ш

Интактные Обучение Воспроизведение

51,50±7,48 163,20±16,80*

Пропранолол 52,00±11,19 125,00±34,79 56,00+10,18 151,00±18,43*

Буфотин 41Д7±13,94 180,00+0.00* 37,50±10,91 132,50±24,25

Буфотин + Пропранолол 40,33± 13,94 180,(Ю±0,00- 41,00+12,74 150,83±29,17+

Контроль (0,9% р-р НаСЛ) 32,83±12,46 109,00+33,84 17,83±5,73 98,67±30,96А-,!

Убихинон 29,60±8,87 119,60±36,99'к 29,50+3,99 137,17+27,12-^

Контроль (масло) 27,17+5,52 81,83±34,68ц-* 22,67+7,58 69,33±32,54**

Убихинон + Пропранолол 24,50±6,83 93,17±29,97*-* 45,83+8,23 96,67+37,28

Контроль (масло+0.9% р-р ЫаС1) 17,00+5,13 104,20+31,44* 21,33+5,71 133,83±29,21*

Примечание ; -р<0,05 отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению ко времени входа при обучении, **-р<0,05 отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению к интактной группе

Таким образом, введение Буфотина, также как и Сор 10, улучшало мне-стические функции высших отделов ЦНС В основе положительного действия препаратов лежат различные механизмы Одним из механизмов реализации мнемотропного действия убихинона, в отличие от Буфотина, является активация норадренергической системы

Влияние убихинона-10 на устойчивость крыс к острой гипобаричеекой гипоксии

При моделировании острой гипобаричеекой гипоксии в группе с курсовым превентивным применением убихинона (10 мг/кг 10 дней ежедневно), также как и в контрольной группе, процент высокоустойчивых животных к острой гипоксии равнялся нулю (Методические рекомендации, 1990) (рис. 4).

Рис. 4. Распределение крыс по устойчивости к острой гипобаричеекой гипоксии в серии с курсовым введением убихинона (10 мг/кг) (в %); в рамке указан процент смертности в каждой группе,

В группе с однократным превентивным введением убихинона (100 мг/кг) в условиях острой гипоксии, в отличие от контрольной группы, процент высокоустойчивых животных также равнялся нулю (рис. 5).

ВУ СУ НУ

□ убихинон В контроль

Рис. 5. Распределение крыс по устойчивости к острой гипобаричеекой гипоксии в серии с однократным введением убихинона (100 мг/кг) (в %); в рамке указан процент смертности в каждой группе.

Вышеизложенное позволяет заключить, что превентивное введение убихинона в исследуемых дозах не оказывало антигипоксического эффекта.

Обсуждая полученные результаты, следует указать на высокий процент смертности крыс в условиях ОГБГ, что объясняется низкой лабильностью

ферментных систем у средне- и низкоустойчивых к острой гипоксии животных, не успевающих в короткие сроки перестраиваться на более экономичный путь использования кислорода (Березовский. 1978)

Также следует отметить, что гибель всех животных в группах с применением убихинона, в отличие от контрольных животных, на «высоте» 12000 метров происходила без атональных реакций Время потери позы животных в обеих опытных группах в 1,5 раза превышало показатели в контрольных группах, что свидетельствует об увеличении порога реакции на гипоксиче-ское воздействие Время восстановления функций у выживших животных после острой гипобарической гипоксии также было больше, чем в контроле То есть, в опытных группах повышение резистентности животных к гипоксии шло за счет более полного использования резервных возможностей организма, однако, и практически полного их истощения (Чернобаева, Лукьянова, 1989)

Влияние убихинона-10 на мнестические функции высших отделов ЦНС крыс после острой гипобарической гипоксии

В группе с курсовым применением убихинона (10 мг/кг), также как и в группе с однократным введением (100 мг/кг), после воздействия острой гипоксии, латентное время перехода крыс в темный отсек камеры при воспроизведении УРПИ достоверно (в 3,4 и 4,7 раза, соответственно) превосходило соответствующие показатели при обучении и, не отличаясь от аналогичного показателя интактной группы (р>0,05), существенно превышало контрольные значения (р<0,05), что позволяет говорить о выраженном нейропротек-торном антигипоксическом действии препарата (табл 3)

Таблица 3

Влияние убихинона-10 на основные показатели УРПИ у крыс после воздействия ОГБГ

Группы Этапы эксперимента

Обучение ЛВП, с М±ш Воспроизведение ЛВП, с М±га

Интактные 46,67±9.89 166,00+14,00*

Убихинон (10 мг/кг) 40,33+14,09 135,17+28;79*#

Контроль 31,00±14,72 61,00±30,96*1'

Убихинон (100 мг/кг) 32,80+7,59 155,17+24,83*#

Контроль 44,83±694 66,17+25,74**

Примечание -"-рсО.ОЗ отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению ко времени входа при обучении, **-р<0,05 отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению к интактной группе, # -р<0,05 отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению к контролю

При введении Со(210 после моделирования ОГБГ" за 24 часа до воспроизведения УРПИ также сохранялся, в несколько раз достоверно превышая исходную и контрольную величины (р<0,05) (рис.6).

интактные контроль убнхинон

|_□Обучение_ ¡Я Воспроизведение ■

Рис.6. Влияние введения убихинона (100 мг/кг) на воспроизведение УРПИ после воздействия ОГБГ.

*-р<0,05 отличие времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению ко времени входа при обучении крыс; # -р<0,05 времени входа в темную камеру при воспроизведении по отношению к контролю.

Отсутствие воспроизведения рефлекса после гипоксии в контрольных группах связано с нарушением функционального состояния нейронов ЦНС вследствие высокой чувствительности головного мозга к недостатку кислорода.

Таким образом, введение убихинона не только улучшало мнестические функции высших отделов ЦНС интактных крыс, но и оказывало нейропро-текторное антигипоксическое действие, восстанавливая нарушенные воздействием ОГБГ процессы фиксации и сохранения временных связей.

Влияние убихинона-10 на восстановление поведения крыс в постгипоксическом периоде

Введение Буфотина, не оказывая влияния на показатели общей двигательной активности и уровня тревожности интактных крыс, обеспечивает восстановление данных показателей поведенческой активности животных в постгипоксическом периоде (Миронов, 2002). В проведенных нами экспериментах показано, что введение убихинона также не оказывает действия на общую двигательную активность и тревожно-фобическое состояние интактных крыс. На данном этапе исследования было изучено влияние препарата, вводимого после моделирования ОГБГ, на восстановление поведения животных в постгипоксическом периоде.

Анализ полученных результатов показал, что в серии с курсовым применением СоСНО (10 мг/кг) у животных развивалась пассивно- оборонительная тактика поведения, которая оказывает тормозное влияние на другие

формы проявления поведенческой активности, в частности исследовательскую (рис.7).

I сутки 10 сутки 20 сутки 30 сутки

Ш интактные ■ контроль Оубихинон

Рис. 7. Динамика изменения вертикальной двигательной активности крыс в постгипоксическом периоде в серии с курсовым введением убихинона (10 мг/кг) (% отклонения от исходного значения).

*-р<0,05 отличие по отношению к от интактной группе; **-р<0,05 отличие по отношению к исходному уровню.

Следует отметить разницу во времени развития пассивно- оборонительной мотивации в опытной и контрольной группах: снижение двигательной активности (рис. 8) и повышение уровня тревожности (рис. 9) в контроле достоверно проявлялось лишь к 30 суткам (р<0,05), в то время как в группе с применением СоС>10 достоверное снижение данных показателей происходило уже на 1 день (р<0,05>, что является более выгодной адаптивной реакцией организма на гипоксический стресс.

I сутки 10 сутки 20 сутки 30 сутки

□ интактные Иконтроль Оубихинон

Рис. 8. Динамика изменения горизонтальной двигательной активности крыс в постгипоксическом периоде в серии с курсовым введением убихинона (10 мг/кг) (% отклонения от исходного значения).

*-р<0,05 отличие по отношению к интактной группе; **-р<0,05 по отношению к исходному уровню; # -р<0,05 отличие по отношению к контролю.

1 сутки

20 сутки

30 сутки

интактные в контроль □уоихинон

Рис. 9. Динамика изменения трефожно-фобического состояния крыс в постгипоксическом периоде в серии с курсовым введением убихинона (10 мг/кг) (% отклонения от исходного значения).

*-р<0,05 отличие по отношению к интактной группе: **-р<0,05 отличие по отношению к исходному уровню: # -р<0,05 отличие по отношению к контролю.

О интактные Ш Kompo.it, Оубихинок

В серии с однократным введением Со<310 (100 мг/кг) в контрольной группе в ответ на воздействие острой гипоксии также происходило развитие пассивно-оборонительного типа поведения, выражающееся в снижении двигательной активности (рис. 10) и медленном увеличении уровня тревожности (рис.11).

I сутки

10 сутки

30 сутки

Рис. 10. Динамика изменения горизонтальной двигательной активности крыс в постгипоксическом периоде в серии с однократным введением убихинона (100 мг/кг) (% отклонения от исходного значения). *-р<0,05 отличие по отношению к интактной группе; **-р<0,05 отличие по отношению к исходному уровню; # -р<0,05 отличие по отношению к контролю.

1 сутки 10 сутки 20 сутки 30 сутки

Ш ннтактные ■ контроль □ убнхинон ]

Рис, 11. Динамика изменения трефожно-фобического состояния крыс в постгипоксическом периоде в серии с однократным введением убихннона (100 мг/кг) (% отклонения от исходного значения).

*-р<0,05 отличие по отношению к интактной группе; **-р<0,05 отличие по отношению к исходному уровню.

Введение Сор 10 предупреждало повышение уровня тревожности животных, также не было достоверных изменений и в динамике вертикальной двигательной активности (рис. 12). В то же время уже на 1 сутки нами наблюдалось существенное снижение горизонтальной двигательной активности (р<0.05).

Наблюдаемый дисбаланс между исследовательским поведением с одной стороны и двигательной активностью с другой можно объяснить наступившими в результате гипоксического стресса функциональными нарушениями ЦНС.

I сутки 10 сутки 20 сутки 30 сутки

Винтактные ■ контроль □уоичинон

Рис. 12. Динамика изменения вертикальной двигательной активности крыс в постгипоксическом периоде в серии с однократным введением убихннона (100 мг/кг) (% отклонения от исходного значения). *-р<0,05 отличие по отношенню к интактной группе.

К 30 суткам постгипоксического периода в опытной группе животных горизонтальная двигательная активность полностью восстанавливалась, в отличие от контроля, где уровень тревожности достигал исходного, а двигательная активность оставалась достоверно сниженной по отношению к ин-тактной и опытной группам

Таким образом, однократное введение СоСМО, в отличие от курсового применения, способствовало восстановлению двигательной активности животных и предотвращало повышение уровня тревожное!» животных в по-стгипоксическом периоде

Влияние убихинона на показатели тканевой гипоксии

В условиях гипоксии глубина повреждения ткани мозга и способность к восстановлению во многом определяются степенью развития лакта гацидоза (Хазанов 1993, Ке1мсгопа е1 а1, 1981)

В работах А А Миронова (2002, 2003) показано, что введение Буфотина снижает уровень тканевой гипоксии, приводя к уменьшению накопления лактата в ткани мозга и сохраняя структуру сенсомоторной коры головного мозга в условиях ОГБГ В связи с изложенным нами было изучено влияние Со<310 на основные показатели тканевой гипоксии

Проведенные исследования показали, что эффективность экзогенного убихинона-10, вводимого после моделирования острой гипобарической гипоксии, зависит от дозы препарата

В группе с курсовым применением убихинона (10 мг/кг) содержание лактата достоверно повышалось по отношению интактной группе (р<0,05) (табл 4), а, кроме того, в 1,3 раза превосходило контрольное значение (р>0 05), что свидетельствует о развитии тканевой гипоксии у животных данной серии

Таблица 4

Влияние убихинона-10 на содержание пиру вата и лактата при

Группы Пируват, мкмоль/мл М+т Лактат, мкмоль/мл М±ш

Интактные 0,29+0,02 1,53±0,11

Убихинон (10 мг/кг) 0.39±0,03 3,70±0,58*

Контроль 0,29+0,01 2,90+0,10*

Убихинон (100 мг/кг) 0 27±0.01 1,86±0,221-"

Контроль 0,39+0,06 2,82*0,31*

Примечание и-р<0.05 отличие по отношению к интактными животными, **-р<0,05 отличие по отношению к контролю

Однократное введение СоО 1О (100 мг/кг), напротив, приводило к усилению аэробных процессов, о чем свидетельствует достоверное снижение содержания лактата по отношению к контрольной группе (р<0,05)

Обсуждая реализацию свойств экзогенного убихинона-10, нужно сказать, что курсовое введение в организм СоО 10 приводило к уменьшению активности эндогенных антиоксидантов (табл 5) Последнее, в свою очередь, ведет к нарушению нормального протекания мембранозависимых процессов, одним из которых является окислительное фосфорилирование

При однократном введении препарата в условиях острой гипоксии проявлялись оба свойства СоО 10 восстановление дыхательной цепи с соответствующей защитой энергетической функции клетки и сохранение активности каталазы, что свидетельствует о включении экзогенного СоО 10 в работу АОС, направленную на ингибирование процессов липопероксидации

Таблица 5

Влияние убихинона-10 на активность ферментов антиоксидантной

системы к рыс при острой гипобарической гипоксии

Группы СОД (уел ед /г НЬ >:' мин) М±ш Каталаза (уел ед /г НЬ * с) М±т

Интактные 614,33±15,16 110,83±11,21

Убихинон (10 мг/кг) 451,67±43,30* 78,33±6,05*

Контроль 277,33+108,40* 75,00±8,24*

Убихинон (100 мг/кг) 263,83±64,17* 102,50±6,66**

Контроль 327,50±50,83* 218,50±44,16*

Примечание *-р<0,05 отличие по отношению к интактными животными, "к*-р<0,05 отличие по отношению к контролю

Из вышеприведенных экспериментов следует, что применение убихинона-10 как антигипоксического средства в условиях острой гипоксии эффективно при однократном введении в дозе 100 мг/кг, при этом механизмы его действия основаны на энергообразующей и антиоксидантной функциях Курсовое применение СоО (Ю мг/кг) напротив способствовало развитию тканевой гипоксии, выражающемуся в развитии лактатацидоза и подавлении активности ферментов антиоксидантной защиты

Влияние совместного применения Буфотина и убихинона-10 на резистентность животных к острой гипобарической гипоксии

Проведенный анализ влияния Буфотина и СоО 10 на высшие интегратив-ные функции головного мозга, как в норме, так и при гипоксических состояниях позволил предположить возможность совместного введения препаратов с целью повышения резистентности к ОГБГ исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных

Однако, полученные результаты показали, что совместное введение препаратов, также как и однократное введение СоО 10, не повышает рези-

стентность к ОГБГ исходно неустойчивых на «высоте» 12000 м животных (рис.13, 14).

Коэффициенты защиты (Методические рекомендации, ¡990) в обеих сериях не высоки и составляют 0,81 в серии с совместным применением препаратов и 0,75 в серии с применением убихинона.

ВУ ГУ НУ

□ Убихннон В Контроль

Рис. 13. Распределение животных по устойчивости к гипоксии в серии с введением убихинона (100 мг/кг) (в %); в рамке указан процент смертности в каждой группе.

0^--------■-------•----------

ВУ СУ НУ

□ Убнхинон+Буфотин Ш Контроль

Рис, 14. Распределение животных по устойчивости к гипоксии в серии с совместным применением убихинона и Буфотина (в %); в рамке указан процент смертности в каждой группе.

Однократное превентивное введение Буфотина повышло резистентность к ОГБГ исходно неустойчивых животных (рис.15), что подтверждает ранее полученные данные об антигипоксических свойствах Буфотина (Миронов, 2002).

Следует сказать, что коэффициент зашиты Буфотина достаточно высок и составляет 1,61. что в 2,15 и 2 раза выше коэффициентов защиты убихинона и совместного применения убихинона и Буфотнна соответственно.

ВУ СУ НУ

□ Буфотнн Я Контроль

Рис. 15. Распределение животных по устойчивости к гипоксии в серии с введением Буфотина ('в %); в рамке указан процент смертности в каждой группе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В проведенных исследованиях установлено коотропное действие кар-диотонического средства Буфотина. Убнхинон-10, не влияя на скорость формирования УРАН, также оказывает оптимизирующее действие на прочность закрепления следов памяти. В основе мнемотропного действия изучаемых препаратов лежат разные механизмы: одним из способов реализации положительного эффекта Сор 10 при формировании УРПИ, в отличие от Буфотина. является активация норадренергической системы.

Полученные данные свидетельствуют, что превентивное введение уби-хинона-!0 в исследуемых дозах не оказывает антигипоксического действия при моделировании острой гипобарической гипоксии. Введение Сорю после гипоксического воздействия оказывает нейропротекторное действие, восстанавливая такие высшие интегративные функции головного мозга как обучение и память.

Наиболее эффективным для восстановления исходной поведенческой активности в постгипоксическом периоде является однократное введение убихинона (100 мг/кг), поскольку, в отличие от курсового применения СоР 10 (10 мг/кг), предупреждает повышение уровня тревожности крыс в ответ на гипоксический стресс, оказывает положительное воздействие на восстановление ориентировочно-исследовательской активности животных. Указанные процессы сопровождаются снижением уровня тканевой гипоксии. При этом реализуются оба свойства СоСМО: восстановление дыхательной цепи с соответствующей защитой энергетической функции клетки и включение экзогенного Сор 10 в работу АОС, направленную на ингибирование процессов лнпопероксидации.

Совместное превентивное применение Буфотина и убихинона-10, также как и введение Сор 10, в отличие от Буфотина, не оказывает антигипоксического действия, поскольку не повышает резистентность к острой гипоксии исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных.

выводы

1 Буфотин оказывает положитечьное действие на процессы обучения и память крыс при формировании и воспроизведении у крыс условного рефлекса активного избегания (УРАИ), не уступающее по эффективности Пир-ацетаму Убихинон-10 не оказывает влияния на обучение крыс при формировании УРАИ но так же как Буфотин и Пирацетам, эффективен при его воспроизведении

2 Введение Буфотина, также как и убихинона-10, оказывает положительное действие на мнестические функции ЦНС крыс при выработке условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) В основе эффектов лежат различные механизмы Буфотин нормализует выработку УРПИ, нарушенную блокадой бета-адренорецепторов, CoQiO не устраняет выраженность нарушений формирования УРПИ, вызванных действием бета-блокатора

3 Превентивное введение CoQlO не повышает устойчивость крыс к острой гипобарической гипоксии и не предотвращает вызванные острой гипоксией нарушения процессов сохранение следов памяти

4 Применение Убихинона-10 (10 мг/кг 10 дней, ежедневно и 100мг/кг однократно) после воздействия острой гипобарической гипоксии оказывает нейропротекторное действие, восстанавливая нарушенные процессы фиксации и сохранения временных связей при формировании УРПИ у крыс

5 Однократное введение убихинона-10 в дозе 100 мг/кг предупреждает повышение уровня тревожности в ответ на гипоксический стресс, обеспечивает более быстрое, чем в контроле восстановление общей двигательной активности в постгипоксическом периоде Курсовое применение CoQlO в дозе 10 мг/кг для восстановления поведенческой активности крыс в постгипоксическом периоде менее эффективно

6 Однократное введение убихинона в дозе 100 мг/кг снижает уровень тканевой гипоксии, приводя к достоверному по отношению к контрольным животным уменьшению накопления лактата в крови крыс при острой гипоксии, сохраняя активность каталазы в эритроцитах на уровне интактных животных Курсовое введение CoQlü, напротив, способствует развитию тканевой гипоксии, выражающемуся в значительном накоплении лактата и снижении активности СОД и каталазы по отношению к их уровню у интактных животных

7 Совместное введение Буфотина и CoQlO не повышает резистентность к острой гипобарической гипоксии исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Тихобразова, О.П. Ноотропные эффекты Буфотина и Гутимина/ О П Тихобразова П Вестник молодых ученых Серия науки о жизни, Сборник материалов Всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» Сана- Петербург -2005 - С 120

2 Крылов, В Н Ноотропное действие препарата жабьего яда Буфотина/ В Н Крылов, О.П. Тихобразова, А А Миронов // Актуальные проблемы

герпетологии и токсинологии Сб науч тр - Вып 8 - Тольятти - 20()5 С 9398

3 Тихобразова, О.П. Влияние Убихинона-! О на условнорефлекторные реакции крыс / О П Тихобразова, Е В Крылова // Вестник Нижегородского университета им НИ Лобачевского Серия биология -2006 - Вып 1(11) -С 176-181

4 Тихобразова, О. П. Влияние Убихинона-10 на выработку и воспроизведение условного рефлекса активного избегания у крыс / О П Тихобразо-ва, А А Миронов // Сборник тезисов Ш-й Международной Пущинской школы- конференции молодых ученых "Биология - наука XXI века" Пущине -2006 - С 166

5 Тихобразова, О. П. Влияние Дельтарана на изменение поведения при моделировании ишемии головного мозга у крыс линии Вистар / О П Тихо-бразова, А А Миронов // Фундаментальная наука и клиническая медицина Материалы 10-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» Санкт-Петербург - 2007 - С 447-448

6 Тихобразова, О.П Влияние Буфотина на динамику формирования и воспроизведение УРАИ у крыс / О П Тихобразова, А А Миронов // Тез докл XX съезда физиологического общества им И П Павлова М - Издательский дом «Русский врач>> - 2007 - С 444

7 Тихобразова, О.П Действие Дельтарана на состояние ЦНС крыс при моделировании ишемии головного мозга / О П Тихобразова, А А Миронов // Сборник тезисов 11-й Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых' Биология - наука XXI века" Пущино - 2007 (в печати)

Список сокращений

АОС - антиоксидантная система

ВУ - высокоустойчивые к гипоксии животные

ЛВИ - латентное время избегания

ЛВП - латентное время перехода

НУ - низкоустойчивые к гипоксии животные

ОГБГ - острая гипобарическая гипоксия

СОД - супероксиддисмутаза

Тж - время выживания на «высоте»

СУ - среднеустойчивые к гипоксии живоные

УРАИ - условный рефлекс активного избе; ания

УРПИ - условный рефлекс пассивного избегания

ЦНС - центральная нервная система

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Тихобразова, Ольга Павловна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Характеристика препарата на основе жабьего яда Буфотин.

1.2. Внутриклеточные функции убихинонов.

1.3. Применение экзогенных убихинонов в биологии и медицине.

1.3.1. Применение экзогенного убихинона при миопатиях.

1.3.2. Кардиопротекторные свойства убихинона.

1.3.3. Радиопротекторные свойства убихинонов.

1.3.4. Применение экзогенного убихинона-10 в неврологии.

1.4. Функциональное состояние ЦНС при гипоксии.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Результаты исследования и обсуждение.

3.1. Влияние Буфотина и убихинона-10 на динамику формирования и воспроизведение УРАИ у крыс.

3.2. Влияние убихинона-10 на формирование и воспроизведение

УРПИ у крыс.

3.3. Исследование влияния убихинона-10 на общую двигательную активность и уровень тревожности крыс.

3.4. Влияние Буфотина и убихинона-10 на формирование УРПИ у крыс на фоне блокады адренорецепторов головного мозга.

3.5. Влияние убихинона-10 на выживаемость крыс в условиях острой гипобарической гипоксии.

3.6. Влияние убихинона-10 на мнестические функции высших отделов ЦНС крыс после острой гипобарической гипоксии.

3.7. Влияние убихинона-10 на восстановление поведения крыс в постгипоксическом периоде.

3.8. Исследование влияния убихинона-10 на показатели тканевой гипоксии.

3.9. Влияние совместного применения Буфотина и убихинонана резистентность животных к острой гипобарической гипоксии.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние буфотина и убихинона-10 на функции ЦНС крыс в норме и при гипобарической гипоксии"

Актуальность проблемы

Гипоксия - широко распространенное явление, возникающее как в условиях дефицита кислорода во внешней среде, так и в результате самых разных патологий, связанных с нарушением функции дыхательной, сердечнососудистой систем, а также транспортной функции крови [79]. Во всех случаях в итоге происходит снижение доставки кислорода к тканям до уровня, недостаточного для поддержания функции, метаболизма и структуры клетки. Это определяет актуальность проблемы и ее значимость для практической и теоретической медицины [115].

Среди различных методов коррекции гипоксических состояний наибольший интерес вызывает фармакологическая защита с использованием препаратов метаболического действия, направленная на поддержание энергетического обмена (усиление синтеза макроэргов, расширение их резервного пула, более эффективное использование). В этой связи представляется актуальным поиск новых средств и их сочетаний, обладающих антигипоксическим действием, применение которых позволило бы повысить степень резистентности клеток жизненно важных органов к гипоксии и тем самым снизить процент развития постгипоксических энцефалопатий.

Одним из препаратов направленного метаболического действия является разработанный в ННГУ и разрешенный ФК МЗ РФ для клинического изучения кардиотонический препарат на основе яда жаб - Буфотин, который содержит в качестве основных компонентов следующие низкомолекулярные продукты: группа буфотенинов - производные 5- гидрокситриптамина и буфогенины -стероидные производные. Ранее проведенные исследования выявили у препарата не только кардиотропные [67], но также антиоксидантные [59], антигипоксические и нейротропные свойства [87].

В последнее время экспериментально и клинически обоснована перспектива использования в качестве антигипоксического средства компонента дыхательной цепи митохондрий - убихинона [43, 70, 77]. Более чем 20 летний опыт экспериментальных и клинических исследований применения убихинона убедительно доказывают его эффективность при восстановлении функций сердечно-сосудистой системы. Защитная роль убихинона-10 обусловлена его участием в процессах энергетического метаболизма и антиоксидантными свойствами. Менее известно использование убихинона-10 в неврологии. Остается практически не изученным его действие на ЦНС и высшие интегративные функции при применении препарата, как в норме, так и при гипоксических состояниях.

Цель и задачи исследования

Целью исследования явилось изучение влияния Буфотина и убихинона-10 на функциональное состояние ЦНС крыс в норме и при моделировании острой гипобарической гипоксии.

В задачи работы входило:

1. Изучить влияние Буфотина и убихинона-10 на процессы обучения и памяти интактных крыс при формировании условного рефлекса активного избегания.

2. Исследовать влияние убихинона-10 на высшие интегративные функции ЦНС интактных животных: поведение, обучение, память (при выработке и воспроизведении условного рефлекса пассивного избегания).

3. Сравнить механизмы действия Буфотина и убихинона-10 на процессы обучения и памяти крыс при формировании и воспроизведении условного рефлекса пассивного избегания в норме.

4. Изучить влияние превентивного введения убихинона-10 на выживаемость крыс в условиях острой гипобарической гипоксии.

5. Оценить нейропротекторное действие убихинона-10 на восстановление функционального состояния высших отделов ЦНС в постгипоксическом периоде.

6. Оценить возможность совместного введения с Буфотина и убихинона-10 для повышения резистентности к острой гипобарической гипоксии исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных.

Научная новизна

Впервые показано положительное действие Буфотина на процессы обучения и памяти интактных крыс при формировании условного рефлекса активного избегания (УРАИ), не уступающее по эффективности действию Пирацетама. Применение CoQIO не влияет на скорость обучения крыс УРАИ. Влияние препарата на воспроизведение навыка сопоставимо с действием Буфотина и Пирацетама. Выявлена разница в реализации мнемотропного действия препаратов при выработке у крыс условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ): одним из возможных механизмов положительного действия CoQIO, в отличие от Буфотина, является активация норадренергической системы.

Введение убихинона интактным крысам не оказывает влияния на показатели общей двигательной активности и уровня тревожности. Впервые показано, что превентивное введение убихинона-10 не повышает резистентность организма крыс к острой гипоксии. Установлено положительное влияние убихинона-10 на восстановление мнестических функций, нарушенных воздействием острой гипоксии.

Для восстановления исходной поведенческой активности в постгипоксическом периоде наиболее эффективным является однократное введение убихинона (100 мг/кг), поскольку, в отличие от курсового применения CoQIO (10 мг/кг), предупреждает повышение уровня тревожности крыс в ответ на гипоксический стресс, способствует восстановлению ориентировочно-исследовательской активности животных. Однократное введение CoQIO в постгипоксическом периоде, в отличие от курсового применения, снижает уровень тканевой гипоксии. При этом реализуются оба свойства препарата: восстановление дыхательной цепи с соответствующей защитой энергетической функции клетки и сохранение активности системы антиоксидантной защиты.

Впервые установлено, что совместное превентивное применение препаратов, также как и введение CoQIO, в отличие от Буфотина не повышает резистентность к острой гипобарической гипоксии (ОГБГ) исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных.

Научно-практическая значимость

Работа обосновывает возможность использования экзогенного Буфотина и убихинона-10 в медицинской практике как антигипоксических и антиоксидантных средств при терапии заболеваний, связанных со снижением кислородобеспечивающей функции головного мозга организма человека и животных. Полученные данные открывают возможность расширения спектра применения Буфотина и CoQIO как нейропротекторных средств с целью повышения резистентности головного мозга и организма в целом к экстремальным воздействиям различной этиологии.

Основные положения, выносимые на защиту

Буфотин оказывает ноотропное действие аналогичное Пирацетаму. Убихинон-10, не влияя на обучение крыс при формировании УРАИ, проявляет оптимизирующее действие на воспроизведение условного рефлекса. В основе мнемотропного действия препаратов лежат разные механизмы: одним из способов реализации положительного эффекта CoQIO при формировании УРПИ, в отличие от Буфотина, является активация норадренергической системы.

Превентивное введение убихинона-10 не повышает устойчивость животных к острой гипобарической гипоксии. Введение CoQIO после гипоксического воздействия оказывает нейропротекторное действие, восстанавливая нарушенные процессы фиксации и сохранения временных связей при формировании УРПИ у крыс

Наиболее эффективным для восстановления исходной поведенческой активности в постгипоксическом периоде является однократное введение Убихинона (100 мг/кг), поскольку, в отличие от курсового применения CoQIO (10 мг/кг), предупреждает повышение уровня тревожности крыс в ответ на гипоксический стресс, обеспечивает восстановление общей двигательной активности животных. Указанные процессы сопровождаются снижением уровня тканевой гипоксии.

Совместное превентивное применение Буфотина и убихинона-10, не оказывает антигипоксического действия.

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 7 работ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» (Санкт- Петербург, 2005), четвертой городской межвузовской конференции (Н.Новгород, 2005), 10-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология -наука XXI века», посвященной 50-летию Пущинского научного центра РАН (Пущино, 2006), 10-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2007), XX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Москва, 2007), расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ (Н. Новгород, 2007).

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав результатов исследования, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 277 источников, из которых 140 иностранных, приложения. Общий объем работы 147 страниц, в том числе 27 рисунков и 11 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Тихобразова, Ольга Павловна

выводы

1. Буфотин оказывает положительное действие на процессы обучения и память крыс при формировании и воспроизведении у крыс условного рефлекса активного избегания (УРАИ), не уступающее по эффективности Пирацетаму. Убихинон-10 не оказывает влияния на обучение крыс при формировании УРАИ, но так же как Буфотин и Пирацетам, эффективен при его воспроизведении.

2. Введение Буфотина, также как и убихинона-10, оказывает положительное действие на мнестические функции ЦНС крыс при выработке условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ). В основе эффектов лежат различные механизмы: Буфотин нормализует выработку УРПИ, нарушенную блокадой бета-адренорецепторов; CoQIO не устраняет выраженность нарушений формирования УРПИ, вызванных действием бета-блокатора.

3. Превентивное введение CoQIO не повышает устойчивость крыс к острой гипобарической гипоксии и не предотвращает вызванные острой гипоксией нарушения процессов сохранение следов памяти.

4. Применение Убихинона-10 (10 мг/кг 10 дней, ежедневно и 100мг/кг однократно) после воздействия острой гипобарической гипоксии оказывает нейропротекторное действие, восстанавливая нарушенные процессы фиксации и сохранения временных связей при формировании УРПИ у крыс.

5. Однократное введение убихинона-10 в дозе 100 мг/кг предупреждает повышение уровня тревожности в ответ на гипоксический стресс, обеспечивает более быстрое, чем в контроле восстановление общей двигательной активности в постгипоксическом периоде. Курсовое применение CoQIO в дозе 10 мг/кг для восстановления поведенческой активности крыс в постгипоксическом периоде менее эффективно.

6. Однократное введение убихинона в дозе 100 мг/кг снижает уровень тканевой гипоксии, приводя к достоверному по отношению к контрольным животным уменьшению накопления лактата в крови крыс при острой гипоксии, сохраняя активность каталазы в эритроцитах на уровне интактных животных. Курсовое введение CoQIO, напротив, способствует развитию тканевой гипоксии, выражающемуся в значительном накоплении лактата и снижении активности СОД и каталазы по отношению к их уровню у интактных животных.

7. Совместное введение Буфотина и CoQIO не повышает резистентность к острой гипобарической гипоксии исходно неустойчивых на «высоте» 12000 метров животных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Широкая распространенность гипоксических состояний диктует необходимость всестороннего изучения их механизмов, а также поиск путей их коррекции. Среди различных методов на сегодняшний день наибольший интерес вызывает фармакологическая защита с использованием препаратов направленного метаболического действия.

Известно, что адаптационные возможности организма определяются, прежде всего, состоянием ЦНС. Головной мозг среди других органов организма отличается высоким уровнем энергетического обмена. Метаболизм нервной ткани целиком зависит от завершенности энергетических реакций в митохондриях и возможности их регуляции в измененных условиях жизнедеятельности. В этой связи представляется актуальным поиск новых средств и их сочетаний, оказывающих оптимизирующее действие на функции ЦНС.

Одним из препаратов направленного метаболического действия является Буфотин - новое кардиотоническое средство срочного действия в кардиологии и реаниматологии [105] животного происхождения, сочетающее эффекты сердечных гликозодов и катехоламинов.

Применение в опытах убихинона-10 обусловлено его непосредственным участием в процессах аэробного синтеза энергии, поскольку он является необходимым компонентом ферментативных систем, обеспечивающих транспорт электронов в процессе клеточного дыхания и окислительного фосфорилирования в митохондриях.

В проведенных исследованиях установлено оптимизирующее действие Буфотина на скорость формирования условного рефлекса активного избегания (УРАИ) у крыс.

При анализе характера действия Буфотина на динамику формирования УРАИ у крыс нами выявлена следующая особенность влияния препарата: наибольшая эффективность при его введении нормальным по обучаемости крысам проявлялась на третий день обучения, то есть на стадии начавшейся и формирующейся консолидации, что проявлялось в достоверном увеличении количества реакций избегания по отношению к показателю первого дня и существенном уменьшении латентного времени избегания по отношению к исходному уровню. Пирацетам оказывал положительное действие на УРАИ на более ранних этапах обучения, однако его эффективность уменьшалась к максимуму эффективности Буфотина.

Убихинон-10 не оказывал влияния на скорость формирования условного рефлекса, поскольку на протяжении всего периода обучения количество реакций избегания и ЛВИ существенно не изменялись. Кроме того, выявлены достоверные отличия регистрируемых показателей по отношению к группе препарата сравнения.

При проверке сохранности памятного следа, проведенной нами через 5 дней после последнего сеанса обучения, нами установлено, что и Буфотин, и CoQIO оказывают оптимизирующее действие на прочность закрепления выработанного УРАИ. При отсутствии достоверных различий с Пирацетамом, наблюдались статистически значимые отличия количества реакций избегания и латентного времени избегания по отношению к контрольным группам.

Таким образом, Буфотин оказывает ноотропное действие, не уступающее по эффективности Пирацетаму. Убихинон-10, не влияя на скорость формирования УРАИ, также оказывает положительное действие на прочность закрепления следов памяти, сопоставимое с действием препарата класса ноотропов.

Большинство ноотропных препаратов действуют на память опосредованно через динамическую составляющую мнестической деятельности: когнитивный процессинг в оперативной памяти [49]. По-видимому, обучение на фоне введения препаратов обеспечивает повышение устойчивости сложившейся в период обучения системы межнейрональных связей. Последнее, по мнению ряда авторов, улучшает такое свойство памяти, как консолидация и "вспоминание" или, в случае условнорефлекторного поведения, воспроизведения поведенческого акта [137, 223], в наших экспериментах направленного на избежание аверсивного воздействия.

В экспериментах по формированию условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) через 24 часа после обучения время пребывания крыс в светлом отсеке камеры в опытных группах, как с введением Буфотина, так и убихинона, достоверно увеличивалось, в отличие от контрольных животных.

На основании полученных результатов можно сделать заключение о положительном действии Буфотина и CoQIO на мнестические функции ЦНС крыс.

Известно, что в основе долговременной памяти лежат сложные структурно-химические преобразования, как на системном, синаптическом, так и на клеточном уровнях головного мозга [21, 122]. Большая роль в этих процессах принадлежит нейромедиаторным системам [7,38].

В процессе обучения на электроболевом подкреплении преимущественную роль играет взаимодействие серотонин - и норадренергической системы. Обе моноаминергические системы находятся в реципрокных отношениях. В функциональном балансе моноаминергических систем в процессах обучения и памяти ведущая и определяющая роль принадлежит норадренергической системе [64].

Активирующее действие норадреналина на мнестические процессы осуществляется через постсинаптические Р-адренорецепторы [219, 266]. Имеются многочисленные данные о необходимости функционирования адренорецепторов головного мозга в становлении и сохранении условных рефлексов [152, 254, 267]. В связи с выше изложенным нами было изучено влияние Буфотина и убихинона на формирование и воспроизведение УРПИ у крыс на фоне действия неселективного блокатора Р-адренорецепторов -пропранолола.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Тихобразова, Ольга Павловна, Нижний Новгород

1. Антибиотические свойства секрета надлопаточных желез жаб / В.И. Захаров и др.. Кишинев, 1973.-142 с.

2. Антиоксидантная защита сердца коэнзимом Q10 при стабильной стенокардии напряжения / А.Х. Коган и др. // Патол. физиол. и экспер. терапия. 1999. - № 4. - С. 16-19.

3. Апчел, В.Я. К вопросу о роли цитохрома С в нормализации гипоксических состояний / В.Я. Апчел, Л.А. Ионова, С.Е. Манойлов // Антиоксиданты и актопротекторы: итоги и перспективы: Тез. Росс, научн. конф. -СПб, 1994.-вып. 1.-С. 13.

4. Аронов, Д.М. Применение коэнзима Q10 в кардиологической практике / Д.М. Аронов // Русский медицинский журнал. 2004. - Т. 12, № 12. — С. 721-725.

5. Асатиани, B.C. новые методы биохимической фотометрии / B.C. Асатиани М.: Наука, 1965.-541 с.

6. Ашмарин, И.П. Нейрохимия / И.П. Ашмарин. М.: изд-во института Биомедицинской Химии РАМН, 1996.-450 с. ISBN 5-900760-02-2.

7. Ашмарин, И.П. Нейропептиды в синаптической передаче / И.П. Ашмарин, И.П. Каменская // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. 1988. - Т. 34.-С. 112-115.

8. Барбашова, З.И. Акклиматизация к гипоксии и её физиологические механизмы / З.И. Барбашова. М. - Л. Изд-во АН СССР, 1960. - 216 с.

9. Батуев А.С. Физиология высшей нервной деятельности и сенсорных систем / А.С. Батуев. СПб.: Изд-во «ПИТЕР» - 3-е изд., испр. и доп., 2005. -317с.-ISBN: 5-94723-367-3.

10. Березовский, В.А. Гипоксия и индивидуальные особенности / В.А. Березовский. Киев: Наук, думка, 1978. - 215 с.

11. Биогенные регуляторы нейрогуморальных процессов при гипоксии / С.А. Хорева и др. // Биохимическая экология. Экспериментальная и клиническая биохимия. Свердловск, 1985. - С. 158-161.

12. Биологические основы действия яда жабы на организм / Б.Н. Орлов и др. // Усп. совр. биол. 1980. - Т. 80, вып. 2. - С. 302-315.

13. Биохимия человека / Р. Мари и др. пер. с англ. М., 2004. - С. 127-139.-ISBN 5-03-003601-6.

14. Болдырев, А.А. Окислительный стресс и мозг / А.А. Болдырев // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 47, - № 4. - С. 21-28.

15. Бояринов, Г.А. Результаты применения Цитохрома С в интенсивной терапии инфаркта миокарда в остром периоде / Г.А. Бояринов, О.В. Военнов // Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы: Тез. Росс, научн. конф.-СПб, 1994.-С. 117-118.

16. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д.П. Хьюстон. М.: Высшая школа, 1991. — 400 с.

17. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. -1985.-Т. 54.-С. 1540-1558.

18. Буфотин и налорфин в экспериментальной терапии геморрагического шока / В.Н. Крылов и др. // Тез. XX Всеросс. пленума правл. анестез. и реаниматол. Н.Новгород, 1995. -С. 95.

19. Вальдман, А.В.Психофармакология эмоций / А.В. Вальдман, Э.Э. Зварту, М.М. Козловская. М.: Медицина, 1976. - 328 с.

20. Вартанян, Г.А. Механизмы памяти ЦНС / Г.А. Вартанян, А.А. Пирогов. Л.: Наука, 1988. - 182 с.

21. Владимиров, Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1987. - Т. 32, вып. 5. - С. 830-844.

22. Влияние кортикостерона на пул макроэргов и состояние мембранной проницаемости в срезах гиппокампа крыс при гипоксии / A.M. Дудченко и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1993. - Т. 116, № 12. - С.604-607.

23. Влияние локального введения 5,7-ДОТ и 6-ОДА в неокортекс на обучение и исследовательское поведение белых крыс в открытом поле / Х.Ю. Исмайлова и др. // Журн. высш. нервн. деят. 1989. - Т .39, № 3. - С. 548-555.

24. Влияние превентивного введения буфотина на устойчивость центральной нервной системы крыс к острой гипобарической гипоксии / А.А. Миронов и др. // Нижегородский медицинский журнал. 2003. - № 1. - С. 2633.

25. Влияние Убихинона-10 на энергетический обмен и ПОЛ в миокарде крыс при ишемии / В.Н. Крылов и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2000. - Т. 130,№7.-С. 35-38.

26. Влияние убихинона Qio и витаминов антиоксидантов на свободнорадикальное окисление фосфолипидов биомембран печени крыс / А.К. Тихазе и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2005. - Т. 140, № 8. - С. 146-149.

27. Влияние Р-оксидофамина на поведение крыс с различной устойчивостью к стрессовым воздействиям / Е.А. Громова и др. // Журн. высш. нервн. деят. 1990. - Т. 40, № 2. - С.301-309.

28. Возможности эффективного использования антиоксидантов и антигипоксантов в экспериментальной и клинической медицине / Н.П. Чеснокова и др. // Успехи совр. естествозн. 2006. - № 8. - С. 18-25.

29. Воронина, Т. А. Современные ноотропные средства с противогипоксическим и нейропротективным эффектом / Т.А. Воронина // Тез. докл. XX съезда физиологического общества им. И.П. Павлова. М.: -Издательский дом «Русский врач». 2007. - С. 26.

30. Воронина, Т.А. Ноотропные препараты, достижения и новые проблемы/ Т.А. Воронина, С.Б. Середенин // Экспер. и клин, фармак. 1998. - Т. 61,№4.-С. 3-9.

31. Галеева, А.Ю. Влияние эмоционального стресса на поведенческие и эндокринные показатели крыс, селектированных по различной способности к активному избеганию / А.Ю. Галеева, Д.А. Жуков // Журн. высш. нервн. деят. -1996. Т. 46, вып. 5. - С. 929-937.

32. Гелашвили, Д.Б. К нейрофизиологической характеристике судорожного действия яда саламандры / Д.Б. Гелашвили, А.А. Силкин, Б.Н. Сиднев // Механизмы действия зоотоксинов: межвуз. сб. Горький: Изд-во ГГУ, 1986.-С. 16-29.

33. Георгиев, В.Н. Антимутагенные свойства убихинона-10 (Q-10) / В.Н. Георгиев, А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1994. - № 9. - С. 270-273.

34. Голанов Е.Б. Современное состояние проблемы эндогенных морфиноподобных веществ / Е.Б. Голанов. М.: Наука, 1986. - 91 с.

35. Память и следовые процессы сб. ст. / под. ред. Е.А. Громовой. -Пущино, 1970.-С.46-49.

36. Действие пчелиного и жабьего ядов на экспериментальные аритмии сердца / В.Н. Крылов и др. // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1981.-С. 40-46.

37. Долгих, В.Т. Механизмы метаболических нарушений мозга при острой смертельной кровопотере / В.Т. Долгих // Бюлл. сиб. мед. 2002. - № 4. -С. 13-23.

38. Долгосрочное влияние однократной острой гипоксии на поведение крыс с различными типологическими особенностями / JI.M. Ливанова и др. // Журн. высш. нервн. деят. 1993.- Т. 43, № 1. - С. 157-163.

39. Донченко, Г.В. Биохимия убихинона (Q) / Г.В Донченко. Киев: Наук, думка, 1988. - 240 с.

40. Дыгало, Н.Н. Генетические различия синтеза и рецепции норадреналина в головном мозгу мышей и поведения животных в незнакомой обстановке / Н.Н. Дыгало, Г.Т. Шишкина // Росс, физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1999. - Т. 85, № 1. - С. 105-109.

41. Жуков, Д.А. Различная тревожность у крыс, селектированных по способности к выработке условного рефлекса активного избегания / Д.А. Жуков, Е.П. Виноградова// Журн. высш. нервн. деят. 1994. - Т. 44, вып. 3. - С. 591-595.

42. Забродин, О.Н. Роль симпатикоадреналовой системы в патогенезе травматической болезни / О.Н. Забродин // Патол. физиол. и экспер. терапия. -1994. № 3. - С.59-61.

43. Зайцев, С.В. Наркомания. Нейропептид-морфиновые рецепторы / С.В. Зайцев, К.Н. Ярыгин, С.Д. Варфоломеев. М.: Изд-во МГУ, 1993. - 256 с.

44. Зарубина, И.В. Роль гликолиза в реализации защитных эффектов амтизола при острой гипоксии / И.В. Зарубина, А.В. Смирнов, Б.И. Криворучко // Рос. физиол. журн. Им. И.М. Сеченова. 2000. - Т. 86, № 4. - С. 440-446.

45. Захаров, В.В. Нарушения памяти / В.В. Захаров // Русский Медицинский Журнал. 2000. - Т. 8, № 10. - С. 402^106.

46. Захаров, В.И. Жабий яд / В.И. Захаров. Кишинев. 1960. 134с.

47. Изучение локализации хинонного кольца убихинона Q10 в липосомах из дипальмитоилфосфатидилхолина методом триплетных зондов / В.М. Меклер и др. // Биофизика. 1984. - Т. 29, № 5. - С. 779 - 782.

48. Иноземцев, А.Н. Сравнительный анализ влияния ноотропных препаратов различной химической структуры на сбой реакции избегания у крыс / А.Н. Иноземцев, JI.JI. Прагина, Ф.А. Фирова // Экспер. и клин, фармакол. -1995. Т. 58, №3.- С. 15-16.

49. Использование активной и пассивной стратегий поведения животных в условиях постреанимационного состояния организма / Ю.В. Заржецкий и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2004. - Т. 137, № 9. - С. 149-152.

50. Исследования эмоциональности у крыс линий Вистар и Крушинского-Молодкиной методом открытого поля / Д.А. Кулагин, В.Н. Федоров: в кн.: Генетика поведения. Л.: Наука, 1969. - С. 35-42

51. Капелько, В.И. Исследования действия Кудесана при повреждении сердечной мышцы, вызванной стрессом. Применение антиоксидантного препарата кудесан (коэнзим Q10 с витамином Е) в кардиологии. / В.И. Капелько, Э.К. Руге. М., 2002. - С. 15-22.

52. Коган, Л.М. Убихиноны: перспективы применения в медицине / Л.М. Коган, Е.А. Обольникова, Г.И. Самохвалов // Хим.-фармакол. журнал. -1983.-Т. 17,№4.-С.410-420.

53. Козловский, И.И. Оптимизирующее действие синтетического пептида селанка на условный рефлекс активного избегания у крыс / И.И. Козловский, Н.Д. Данчев // Журн. высш. нервн. деят. 2002. - Т. 52, № 5. - С. 579-580.

54. Кондрашова, М.Н. Трансаминазный цикл окисления субстратов в клетке как механизм адаптации к гипоксии / М.Н. Кондрашова // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сб. научн. тр. М., 1989.-С. 51-66.

55. Конторщикова, К.Н. Сравнительное изучение действия гутимина и буфотина на перекисное окисление липидов и сократительную функциюизолированного сердца крысы / К.Н. Конторщикова, В.Н. Крылов, И.В. Мухина // Экспер. и клин. мед. 1990. - № 3. - С. 271-274.

56. Корягин, А.С. Влияние убихинона-10 на систему крови при радиационном облучении крыс/ А.С Корягин, Л.Д. Лукьянова, Е.В. Крылова // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2002. - Т. 133, № 6. - С. 650-652.

57. Костюченко, А.П. Применение современных антигипоксантов в практике неотложной кардиологии / А.П. Костюченко // Aqua Vitae. 1998. -№1.-С. 42-43.

58. Костюченко, А.Л. Современные реальности клинического применения антигипоксантов / А.Л. Костюченко, Н.Ю. Семиголовский // Реаниматология. 2002. - Вып. 3. - С. 32-35.

59. Кравков, Н.П. О ядовитом секрете кожных желез жаб / Н.П. Кравков // Русский врач. 1904. - № 21. - С. 761-766.

60. Кругликов Р.И. Нейрохимические механизмы обучения и памяти / Р.И. Кругликов. М.: Наука, 1981. - 211 с.

61. Крылов, В.Н. Исследование кардиотонического действия яда зеленой жабы Bufo viridis / В.Н. Крылов // Журн. эвол. биохимии и физиологии. -2002.-Т. 38,№2. -С. 121-127.

62. Крылов, В.Н. Кардиопротекторное действие Буфотина оригинального препарата из яда жаб / В.Н. Крылов, Г.А. Бояринов, И.А. Вальцева //Антиоксиданты и актопротекторы: итоги и перспективы: тез. Росс, научн. конф. СПб, 1994. - вып. 4. - С.27.

63. Крылов, В.Н. К анализу кардиотропных свойств жабьего яда и некоторых его фракций / В.Н. Крылов, Л.В. Юнина, И.И. Лысова // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1977. -С. 150-154.

64. Крылов, В.Н. Разработка технологии фармакологического препарата «Буфотин» и обоснование его применения в медицинской практике / В.Н. Крылов // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1983. - С. 24-31.

65. Крылов, В.Н. Сравнительный анализ кардиотонического действия жабьего яда и его очищенного препарата / В.Н. Крылов, Л.В. Ошевенский, А.Б. Колесникова// Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1980. - С. 143-147.

66. Крылова, Е.В. Исследование антигипоксического действия экзогенного коэнзима Q10 (убихинона-10) при альтерации функций у крыс: автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.13 / Крылова Елена Валерьевна. -Н.Новгород, 2002.-21 с.

67. Кулагин, Д. А. Нейрохимические аспекты эмоциональной реактивности и двигательной активности крыс в новой обстановке / Д.А. Кулагин, В.К. Болондинский // Успехи физиол. наук. 1986. - Т. 17, №11. -С.92-109.

68. Ливанова, Л.М. Влияние длительной адаптации к гипоксии на поведенческие реакции в открытом поле крыс с разным типом поведения / Л.М. Ливанова, Л.Д. Лукьянова, В.И. Торшин // Журн. высш. нервн. деят. 1993. - Т. 43, вып. 4.-С. 808-816.

69. Лукьянова, Л.Д. Биоэнергетическая гипоксия: понятие, механизмы и способы коррекции / Л.Д. Лукьянова // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1997. - Т. 124,№9.-С. 244-254.

70. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетические механизмы формирования гипоксических состояний и подходы к их фармакологической коррекции / Л.Д. Лукьянова // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: сб. научн. тр. -М., 1989.-С. 11-14.

71. Лукьянова, Л.Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Л.Д. Лукьянова, Б.С. Балмуханов, А.В. Уголев. -М.: Наука, 1982. С. 90 - 101.

72. Лукьянова, Л.Д. Клеточные механизмы резистентности организма к гипоксии / Л.Д. Лукьянова // Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция: матер. Всероссийской конференции. М.: БЭБиМ, 1997. - С.74-75.

73. Лукьянова, Л.Д. Некоторые физиологические и метаболические характеристики индивидуальной чувствительности животных к гипоксии в норме и при адаптации / Л.Д. Лукьянова, А.В. Коробков. М., 1981. - С. 73-76.

74. Лукьянова, Л.Д. Новое о патофизиологических и патобиохимических механизмах гипоксии / Л.Д. Лукьянова // Тез. докладов II Всерос. конгр. по патофизиол. М., 2000. - С. 123.

75. Лукьянова, Л.Д. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / Л.Д. Лукьянова // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. Фармакология. Химиотерапевтические средства. М., 1991. Т. 27. - С. 11-44.

76. Маркель, А.Л. Факторный анализ поведения крыс в тесте открытого поля / А.Л. Маркель, Ю.К. Галактионов, В.М. Ефимов // Журн. высш. нервн. деят. 1988. - Т. 38, вып. 5. - С. 855-863.

77. Медведев, О.С. Применение коэнзима Q10 для замедления процессов старения / О.С. Медведев, Д.В. Преображенский, А.В.Павлова // Кардиология. 2005. - Т. 4, №4. - С.65-72.

78. Меерсон, Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика / Ф.З. Меерсон, -М.: Наука, 1981,-278 с.

79. Метелица Д.Н. Активация кислорода ферментными системами / Д.Н. Метелица. М.: Наука, 1983, -256 с.

80. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств. М., 1990. - 18 с.

81. Механизмы цитопротекторного действия Цитохрома С1 и актовегина в "постреанимационном периоде" / И.В. Мухина и др. // Теоретические и клинические проблемы современной реаниматологии: матер. Междунар. симпозиума. Москва, 1999. - С. 64.

82. Миронов, А.А. Влияние Буфотина на устойчивость ЦНС крыс к острой гипобарической гипоксии: автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.13. / Миронов Андрей Александрович. Н.Новгород, 2002. - 22 с.

83. Молекулярные механизмы гипоксического повреждения хроматина ядер нейронов мозга при гиповолемическом шоке / В.Л. Кожура и др. //

84. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: матер. 2-ой всесоюзн. конф., Гродно: Гродненский медицинский институт, 1991. С. 295-296.

85. Молекулярные механизмы нейрологической памяти. Механизмы памяти. Руководство по физиологии / под ред. И.П. Ашмарина. JL: Наука, 1987.- С. 57-75.

86. Мухина, И.В. Влияние препаратов с антигипоксическими свойствами на функциональное состояние сердца и мозга: автореф. дис. докт. биол. наук: 03.00.13. / Мухина Ирина Васильевна. М.: Изд-во НИИ общей реаниматологии РАМН, 2000. - 44 с.

87. Нагнибеда, Н.Н. Активность симпатоадреналовой системы / Н.Н. Нагнибеда // Механизмы развития и компенсации гемической гипоксии / под ред. А.З. Колчинской. Киев: Наук, думка, 1987. - С. 59 - 75.

88. Нагнибеда, Н.Н. Роль катехоламинов в компенсации гипоксических состояний и предупреждения развития вторичной тканевой гипоксии / Н.Н. Нагнибеда // Вторичная тканевая гипоксия / под ред. А.З. Колчинской. Киев: Наук, думка, 1983. - С. 161 - 184.

89. Нарушение реакций трансаминирования при гипоксии / Л.И. Захарова и др. // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: матер. 2-ой Всесоюзн. конф., Гродно: Гродненский медицинский институт, 1991.-С. 14-15.

90. Новый метод оценки тревожно-фобических состояний у крыс / В.И. Родина и др. // Журн. высш. нервн. деят. 1993. - Т. 43, вып. 5. - С. 1006-10017.

91. Номенклатура ферментов: Рекомендации 1972 г. МБС по номенклатуре ферментов и символам кинетики ферментативных реакций (с дополнением по 1975 г.) // Пер. под ред. А. Е. Браунштейна. М., 1979. - 167 с.

92. Оковитый, С.В. Антигипоксанты / С.В. Оковитый, А.В. Смирнов // Экспер. и клин, фармакол. 2001.-Т. 64, № 3. - С. 76-80.

93. Олескин, А. В. Хиноны и их взаимодействие с ферментными комплексами энергообразующих мембран / А. В. Олескин, В.Д. Самуилов // Биохимия. 1988. - Т. 53. - С. 1619-1627.

94. Оригинальный ноотропный и нейропротективный препарат / Р.У. Островская и др. // Экспер. и клин, фармакол. -2002. Т. 65, № 5. - С. 66-72.

95. Орлов, Б.Н. Исследование кардиотропных свойств жабьего яда / Б.Н. Орлов, В.Н. Крылов // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1974. -С. 76-84.

96. Особенности обучения крыс разных генетических линий на электроболевом подкреплении; роль нейромедиаторных систем мозга / A.J1. Калюжный и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2005. - Т.139, № 1. - С. 15-18

97. Ошевенский, Л.В. Физиологический анализ кардиотонического действия препарата жабьего яда " Буфотин": автореф. дис.канд. биол. наук: 03.00.13: /Ошевенский Леонид Владимирович. Н. Новгород, 1997 - 18 с.

98. Парин, С.Б. Изменение состояния эндогенной опиоидной системы в условиях воздействия на организм животных ядов / С.Б. Парин // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1986. - С. 82-87.

99. Парин, С.Б. К оценке опиоидных механизмов действия некоторых зоотоксинов / С.Б. Парин // Механизмы действия зоотоксинов. Горький, 1984. -С. 71-79.

100. Парин, С.Б. Роль эндогенной опиоидной системы в физиологических и повреждающих эффектах зоотоксинов: дис. канд. биол. наук / Парин Сергей Борисович. Горький, 1985.-218 с.

101. Пат. 2068697 Средство, обладающее кардиостимулирующим действием / В.Н. Крылов и др. № 4919361; заявлено 22.01.1991; опубликовано 10.11.1996, Бюлл. № 31. -5 с.

102. Петров, И.Р. Воспроизведение у животных кислородного голодания // воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований: сб. ст. / под ред. И.В. Лазарева. Л.: Медгиз, 1959.-С. 129-142.

103. Петрович, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю.А. Петрович, Д.В. Гуткин // Патол. физиол. и экспер. терапия. 1986. - № 5. - С. 85-92.

104. Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и медицинские аспекты: сб. ст. / под ред. Л.Д. Лукьяновой, И.Б. Ушакова. М.; Воронеж: Изд-во «Истоки», 2004. С. 268-296.

105. Роль гипоксического фактора в формировании реперфузионных повреждений органов в постреанимационном периоде / И.В. Мухина и др. // тезисы докл. II Всерос. конгр. по патофизиол. М. 2000. - С. 301.

106. Романова, Г.А. Дизрегуляция когнитивных функций при локальной ишемии префронтальной коры головного мозга крыс / Г.А. Романова, Ф.М Шакова. // Нейронауки. 2006. - №3. - С. 10-16.

107. Рубанова, Н.А. Роль биогенных аминов мозга в срочной адаптации к гипоксии / Н.А. Рубанова, Р.С. Риман // Дегидрогеназы в норме и патологии. -Горький, 1980.-С. 57-62.

108. Рябов, Г.А. Гипоксия критических состояний / Г.А. Рябов. М.: Медицина, 1988. - 315 с.

109. Самойлов, М.О. Реакции нейронов мозга на гипоксию / М.О. Самойлов. JI.: Наука, 1985. - 192 с.

110. Самуилов, В. Д. Технологическая биоэнергетика: Учебн. Пособие для вузов / В. Д. Самуилов, А.В. Олескин. М.: изд-во МГУ, 1994. - 192 с.

111. Саушев, С.В. Буфотин новое кардиотоническое средство срочного действия / С.В. Саушев, Г.А. Бояринов, В.Н. Крылов // Сердечно-сосудистая хирургия на рубеже веков: матер конгр. - Н.Новгород, 2000. - С. 142-143.

112. Семченко, В.В. Патогенетические принципы реабилитации при острых гипоксических повреждениях головного мозга / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Реаниматология на рубеже XXI века: матер. Междунар. симпоз. М., 1996.-С. 164-166.

113. Скулачев, В.П. Биоэнергетика. Мембранные преобразователи энергии. / В.П. Скулачев. М., 1989. - 271 с.

114. Смирнов, А.В. Гипоксия и ее фармакологическая коррекция одна из ключевых проблем анестезиологии и интенсивной терапии / А.В. Смирнов, Б.И. Криворучко // Анестезиология и Реаниматология. - 1997. - вып. 3. - С. 9798.

115. Смирнов, В.М. Физиология сенсорных систем и высшая нервная деятельность / В.М. Смирнов, С.М. Будылина. М.: Изд. центр "Академия", 2003. - 304 с. - ISBN 5-7695-0786-1

116. Снижение энергообразования миокарда при введении крысам ингибитора HMG-CoA-редуктазы / О.И. Писаренко и др. // Бюлл. экпер. биол. и мед. 2001. - № 10. - С. 401-403.

117. Сравнительный анализ действия некоторых зоотоксинов на изолированное сердце / И.А. Вальцева и др. // Биологические науки. 1991. № 4.-С. 47-53.

118. Суворов, А.В. Клиническая электрокардиография / А.В. Суворов. -Н.Новгород: изд-во НМИ, 1993. 124 с. - ISBN 5-7032-0029-6.

119. Судаков, К.В. Нормальная физиология / К.В. Судаков. М.: 000 «Медицинское информационное агентство», 2006. - 920 с. - ISBN 5-89481-294-1.

120. Талызин, Ф.Ф. Кардиотропное действие яда зеленой жабы / Ф.Ф. Талызин, И.А. Вальцева, В.В. Васильченко // тр. I Всесоюзн. конф. ЦНИЛ мед. вузов СССР. М., 1967. - Ч. 3. - С. 198-199.

121. Терапевтическое действие растительных масел и убихинона-9 при лучевом поражении / И.К. Коломийцева и др. // Радиобиология 1985. - Т. 25, вып. 1.-С. 53 -57.

122. Убихинон-9: Влияние на липидный обмен и радиационную гибель / И.К. Коломийцева и др.. Пущино, 1984. - 29 с.

123. Физер, Л. Стероиды / Л. Физер, М. Физер. М.: Мир, 1964. - 982 с.

124. Хазанов, В.А. Роль системы окисления янтарной кислоты в энергетическом обмене головного мозга: автореф. дис. докт. биол. наук: 03.00.13 / Хазанов Вениамин Абрамович. Томск, 1993. - 38 с.

125. Чекман, И.С. Принципы, методы и критерии оценки эффективности потенциально кардиотонических соединений на этапе доклинического изучения / И.С. Чекман, В.В. Ткачук // Фармакол. и токсикол. 1984. - №6. - С. 5-15.

126. Чеснокова, Н.П. Молекулярно-клеточные механизмы цитотоксического действия гипоксии. Патогенез гипоксического некробиоза /

127. H.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина, М.Н. Бизенкова // Современные наукоемкие технологии. 2006. - №7. - С. 31-38.

128. Экспериментальное исследование и перспективы клинического применения гептапептида селанка / И.И. Козловский и др. // Интегративная деятельность мозга. М.: изд-во НИИ норм, физиол. им. П.К. Анохина РАМН. -2000. -Т. 9. С. 246.

129. A case of mitochondrial encephalomyopathy associated with a muscle coenzyme Q10 deficiency / E. Boitier et al. // J. Neurol. Sci. 1998. - Vol. 156, №1.-P. 41-46.

130. Aebi, H. Methoden der erymatiechen analyses / H. Aebi // Biochemestry. 1970. - Vol.2. - P. 636-647.

131. Andreassen, O.A. Coenzyme Q10 does not prevent oral dyskinesias induced by long-term Haloperidol treatment of rats / O.A. Andreassen, C. Weber, H.A. Jorgensen // Pharmacol. Biochem. and Behavior. 1999. - Vol. 64, № 3. - P.637-642.

132. Antioxidant content in low density lipoprotein and lipoprotein oxidation in vivo and in vitro / V.V. Tertov et al. // Free Radic. Res. 1998. - Vol. 29, № 2. - P. 165-173.

133. Assessment of coenzyme Q10 tolerability in Huntington's disease / A. Feigin et al. // Mov. Disord. 1996. - Vol. 11, № 3. - P. 321-323.

134. Barbiroli, B. Aspects of human bioenergetics as studied in vivo by magnetic resonance spectroscopy / B. Barbiroli, S. Iotti, R. Lodi // Biochimie. 1998. -Vol. 10, № 80. - P. 847-853.

135. Behavioral and histological changes after repeated brief cerebral ischemia by carotid artery occlusion in gerbils / M. Yamamoto et al. // Brain Res. 1993. -Vol. 608, № l.-P. 16-20.

136. Behavioral and neurochemical effects of dopaminergic drugs in models of brain injury / M. Mediko et al. // Eur. Neuropsychopharmacol. 2002. - Vol. 12, № 3.-P. 187-194.

137. Benign infantile mitochondrial myopathy caused by reversible cytochrome с oxidase deficiency/ H. Wada et al. // No.To. Hattatsu. 1996. - Vol. 28, № 5. - P. 443-447.

138. Berman, D.E. Memory extinction, learning anew, and learning the new: dissociations in the molecular machinery of learning in cortex / D.E. Berman, Y. Dudai // Science. 2001. - Vol. 291, № 5512. - P. 2417-2419.

139. Bliznakov, E.G. Supression of immunological responsiveness in aged mice and its relationship with coenzyme Q deficiency / E.G. Bliznakov // Macrophages and Lymphocytes. Nature. Funct. and Interaction. London, 1980. - P. 361-369.

140. Block, F. Global ischemia and behavioral deficits / F. Block // Progr. Neurobiol. 1999. Vol. 58, № 3. - P. 279-295.

141. Brain and skeletal muscle bioenergetic failure in familial hypobetalipoproteinaemia / R. Lodi et al. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1997. Vol.63.-P. 574-580.

142. Briggs, M.N. The chemistry of animal venoms / M.N. Briggs // Sci. progr. 1960. - Vol.48, № 6. - P. 456-562.152. (3 adrenergic activation and memory for emotional events / L. Cahill et al. //Nature. 1994. - Vol. 371. - P. 701-704.

143. Car, H. 2 R, 4 R APDC influence on hypoxia - induced impairment of learning and memory processes in passive avoidance test / H. Car, RJ. Wisniewska, K. Wisniewski // Pol. J. Pharmacol. - 2004. - Vol. 56. - P. 527-537.

144. Cardiac outputs of control individuals and cancer patients and evidence of deficiencies of coenzyme Qi0 and vitamin Вб / К. Folkers et al. // Res. Commun. Chem. Pathol, and Pharmacol. 1980.-Vol. 28, № l.-P. 145-152.

145. Chen, K.K. Notes of poisons secretious of twelier species of toades / K.K. Chen, A.L. Chen // J. Pharmacol. Exper. Terap.- 1933.-Vol. 47.-P. 281-293.

146. Chen, K.K. Pharmacology and toxicology of toad venom / K.K. Chen, A. Kovarikova// J. Pharmik. Sci. 1967,-Vol. 56, №12.-P. 1535-1541.

147. Chronic cerebral hypoperfusion disrupts discriminative behavior in acquired-learning rats / K. Tanaka et al. // J. Neurosci. Methods. 1998. - Vol. 84, № 1-2. P. - 63-68.

148. Coenzyme QIO and alpha-tocopherol in patients after heart transplantation / J. Kucharska et al. // Bratisl. Lek. Listy. 1996. - Vol. 27. - P. 603-606.

149. Coenzyme QIO attenuates the l-methyl-4-phenyl-l, 2, 3, tetrahydropyridine (MPTP) induced loss of striatal dopamine and dopaminergic axons in aged mice / M.F. Beal et al. // Brain Res. 1998. - Vol. 783. - P. 109-114.

150. CoQIO: could it have a role in cancer management? / S. Hodges et al. // Biofactors- 1990. Vol. 9. - P. 365—370.

151. Coenzyme Q10 fetal plasma levels / G. Noia et al. // Fetal. Diagn. Ther. -1998.-Vol. 13, №2.-P. 127-130.

152. Coenzyme Q induces Nigral mitochondrial uncoupling and prevents Dopamine cell loss in a Primate model of Parkinson's disease / T.L. Horvath et al. // Endocrinology. 2003. - Vol. 144, № 7. - P. 2757-2760.

153. Coenzyme Q 10 modulates cognitive impairment aganist intracerebroventricular injection of streptozotocin in rats / T. Ishart et al. // Behav. Brain Ress. 2006. - Vol. 171, № 1. - P. 9-16.

154. Coenzyme Q. New data on the distribution of Coenzyme Q in nature / P. Gafe etal. //Arch. Biochem. Biophys. 1964. - Vol.104.-P. 169-172.

155. Contrasting effects of fetal CA1 and С A3 hippocampal grafts on deficits in spatial learning and working memory induced by global cerebral ischemia in rats / H. Hodges et al. // Neurosci. 1996. - Vol. 72, N 4. - P. 959-988.

156. Could coenzyme Q10 affect hemostasis by inhibiting platelet vitronectin (CD51/CD61) receptor? / V.L. Serebruany et al. // Mol. Aspects Med. 1997. - № 18.-P. 189-194.

157. Crestanello, J. A. Effect of coenzyme Q10 supplementationon mitochondrial function after myocardial ischemia reperfusion / J.A. Crestanello, N.M. Doliba // J. Surg. .Res. 2002. - Vol. 102, № 2. - P 221-228.

158. Davi, I.N. The effect of hypoxia on monoamine synthesis, levels and metabolism in rat brain / I.N. Davis, F. Carlsson // J. Neurochem. 1973. - Vol. 21, № 6.-P. 753-761.

159. Denescu-Romalo, G. Aspecte moleculare ale mitochodrilor tumorale / G. Denescu-Romalo // Oncol, si radiol. 1974. - Vol. 13, № 3. - P. 193 - 203.

160. De-Pinieux, G. Lipid-lowering drugs and mitochondrial function: effects of HMG-CoA reductase inhibitors on serum ubiquinone and blood lactate / pyruvate ratio / G. De-Pinieux //Br. J. Clin. Pharmacol. 1996. Vol. 42, № 3. - P. 333-337.

161. Diabetes mellitus associated with 3243 mitochondrial tRNA (Leu (UUR)) mutation: clinical features and coenzyme Q10 treatment / Y. Suzuki et al. // Mol. Aspects Med. 1997. - № 18. - P. 181-188.

162. Dietary coenzyme Q10 supplementation alters platelet size and inhibits human vitronectin (CD51/CD61) receptor expression / V.L. Serebruany et al. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1997. - Vol. 29, № 1. - P. 16-22.

163. Dietary coenzyme Q10 supplement renders swine hearts resistant to ischemia-reperfusion injury / N. Maulik et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2000. - Vol. 278. - P. 1084-1090.

164. Dietary cosupplemention with vitamin E and coenzyme Q10 inhibits atherosclerosis in apolipoprotein E gene knockout mice / R.T. Shane et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2001. - Vol. 21. - P. 585-593.

165. Ebadi, M. Coenzyme Q10 inhibits mitochondrial complex-1 down-regulation and nuclear factor-kappa В activation / M. Ebadi et al. // J. Cell. Mol. Med. 2004. - Vol. 8, №2, - P. 213-222.

166. Ebadi, M. Ubiquinone (Coenzyme СЫ) and mitochondria in oxidative stress in Parkinson's disease / M. Ebadi et al. // Biol, signals & Receptors. 2001. -Vol. 10.-P.224-253.

167. Effects of coenzyme Q10 administration on its tissue concentrations, mitochondrial oxidant generation, and oxidative stress in the rat / L.K. Kwong et al. // Free Radic. Biol. Med. 2002. - Vol. 33, № 5. - P. 627-638.

168. Effects of coenzyme Q10 in early Parkinson disease: evidence of slowing of the functional decline / C.W. Shults et al. // Arch Neurol. 2002. - Vol. 59. - P. 1541-1550.

169. Effect of coenzyme Q10 in patients with mitochondrial myopathy, encephalopathy, lactic acidosis, and stroke-like episodes (MELAS): evaluation by noninvasive tissue oximetry / K. Abe et al. // J. Neurol. Sci. 1999. Vol. 1, № 162. -P. 65-68.

170. Effect of ezetimibe and/or simvastatin on coenzyme Q10 levels in plasma: a randomized trial / H.K. Berthold et al. // Drug Saf. 2006. - Vol.29, № 8. - P. 703-712.

171. Effects of fetal hippocampal field grafts on ischemic-induced deficits in spatial navigation in the water maze / C.A. Netto et al. // Neurosci. 1993. - Vol. 54, № 1.-P. 69-92.

172. Effect of hypoxia on the activities of noradrenergic and dopaminergic neurons in the rat brain. / S. Miwa et al. // J. Neurochem. 1986. - Vol. 47. - P. 6369.

173. Effects of oral supplementation of coenzyme Q10 on 31P-NMR detected skeletal muscle energy metabolism in middle-aged post-polio subjects and normal volunteers / M. Mizuno et al. // Mol. Aspects. Med. 1997. - P. 291-298.

174. Effects of short-term supplementation with coenzyme Q10 on myocardial protection during cardiac operations/ D.P. Taggart et al. // Ann. Thorac. Surg. -1996. Vol. 61, № 3. - P. 829-833.

175. Effect of (S) 3,5 - DHPG on learning, exploratory activity and anxiety in rats with experimental hypoxia / A. Nadlewska et al. // Pol. J. Pharmacol. - 2002. -Vol. 54.-P. 11-18.

176. Elucidation of a tripartite mechanism underlying the improvement in cardiac tolerance to ischemia by coenzyme Q10 pretreatment / J.A. Crestanello et al. // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 1996. - Vol. 111, № 2. - P. 443-450.

177. Energy metabolism defects in Huntington's disease and effects of coenzyme Q10 / W.J. Koroshetz et al. // Ann. Neurol. 1997. Vol. 41. - P. 160-165.

178. Eluidizing effect of endogenous ubiquinone in bovine heart mitochondrial membranes / R. Fato et al. // FEBS Lett. 1984. - Vol. 172, № 1. - P. 6 - 10.

179. Evaluation of the possible role of coenzyme Q10 and vitamin E in juvenile neuronal ceroid-lipofuscinosis (JNCL) / T. Westermarck et al. // Mol. Aspects Med. 1997. -№ 18.-P.259-262.

180. Ernster, L. Biochemical, physiological and medical aspects of ubiquinone function / L. Ernster, G. Dallner // Biochem. Biophys. Acta. 1995. - Vol. 1271. - P. 195-204.

181. Familial occurrence of intestinal obstruction in children with the syndrome of mitochondrial encephalomyopathy, lactic acidosis, and stroke-like episodes (MELAS) / T. Shimotake et al. // J. Pediatr. Surg. 1998. - Vol. 33, № 12. -P. 1837-1839.

182. Ferrante, R.J. Therapeutic effects of coenzyme Q10 and remacemide in transgenic mouse models of Huntington's disease / RJ. Ferrante, O.A. Andreassen, A. Dedeoglu //Neurosci. 2002. - Vol. 22, № 5. - P. 1592-1599.

183. Foetal grafts from hippocampal region superior alleviate ischemic-induced behavioral deficits / C.A. Netto et al. // Behav. Brain Res. 1993. - Vol. 58, № 1-2. -P. 107-112.

184. Folkers, K. A one year bioavailability study of coenzyme Q10 with 3 months withdrawal period / K. Folkers, S. Moesgaard, M. Morita // Mol. Aspects. Med. 1994. - Vol. 15. - P. 281-285.

185. Folkers, K. Critique of coenzyme Q in biochemical and biomedical research and in ten years of clinical research on cardiovascular disease / K. Folkers, T. Watanabe, M. Kaji //J. Mol. Med. 1977. - Vol. 2, № 2. - P. 431-460.

186. Fridovich, I. The Biology of oxygen radicals. The superoxide radical is an agent toxicity; superoxide dismutase an important defense /1. Fridovich // Science. -1978.-№4359.-P. 875-880.

187. Frei, B. Ubiquinol-lOis an effective lipid-soluble antioxidant at physiological concentrations / B. Frei, M.C. Kim, B.N. Ames // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol. 87. - P. 4879-4883.

188. Frerejacque, M. Venins de crapauds/ M. Frerejacque // Rev. gen. sci. pures et appl. 1958. - Vol. 65, № 5-6. - P. 145-149.

189. Gebicki, J.M. Comparison of the capacities of the perhydroxyl and the superoxide radicals to initiate chain oxidation of linoleic acid / J.M. Gebicki, B.H.J. Bielski. // J. Am. Chem. SOC. -1981.-Vol. 103.-P.7020-7022.

190. Gorman, A. Beta- adrenergic receptors are involved in stress-related behavioral changes / A. Gorman, A.J. Dunn // Pharmacol. Biochem. Behav. 1993. -Vol. 45.-P. 1-7.

191. Hemming, F.W. Ubiquinone in the lysosomal membrane fraction of rat liver/ F.W. Hemming, W. Stoffel // Hoppe-Seyler, Z. Physiol. Chem. 1972. - № 1. -P. 75-78.

192. Hippocampal injury and neurobehavioral deficits following hyperglycemic cerebral ischemia: effect of theophylline and ZM 241385 / H. Higashi et al. //J. Neurosurg. 2002. - Vol. 96, № 1. - P. 117-126.

193. Horiger, N. Cardenolide aus dem chinishen Krotengifit Chan Su. Uber Krotengift / N. Horiger, H. Linde, K. Meyer // Helv. Chim. Acta. 1970. - Vol. 53, № 6.-P. 1503-1511.

194. Hypobaric hypoxia impairs spatial memory in an elevation depended fashion / B. Shukitt-Hale et al. // Behav. Neural, biol. - 1994. - Vol. 62, № 3. - P. 244-252.

195. Ineffectiveness of oral coenzyme Q10 supplementation in 3-methylglutaconic aciduria, type 3 / H. Costeff et al. // Brain Dev. 1998. - Vol. 20, № 1.-P. 33-35.

196. Influence of AIDA on certain behaviors in rats subjected to experimental hypoxia / A. Nadlewska et al. // Pol. J. Pharmacol. 2003. - Vol. 55. - P. 171-180.

197. Inhibition of ubiquinone synthesis in isolated rat heart under an ischemic condition / H. Sugawara et al. // J. Biochem. 1990. - Vol. 22, № 5. - P. 477 - 480.

198. Interaction between ubiquinone and ATP-ase in mitochondrial membranes / E.M. Degli et al. // J. Bioenerg. and Biomembr. 1981. - Vol. 13, № 1-2. - P. 3750.

199. Interactions between ubiquinones and phospholipid bilayers: A spin-label study / A. Spisni et al. // Arch. Biochem. and Biophys. 1978. - Vol. 663, № 3. - P. 613-620.

200. Kalen, A. Age-related changes in the lipid compositions of rat and human tissues / A. Kalen, E.L. Appelkvist, G. Dallner // Lipids. 1989. - Vol. 24. - P. 579584.

201. Karasava, Y. Changes in locomotor activity and passive avoidance task performance induced by cerebral ischemia in Mongolian gerbils / Y. Karasava, H. Araki, S. Otomo // Stroke. 1994. - Vol. 25, № 3. - P. 645-650.

202. Kidd, P.M. Neurodegeneration from mitochondrial insufficiency: nutrients, stem cells, growth factors, and prospects for brain rebuilding using integrative management / P.M. Kidd // Alter. Med. Rev. 2005. - Vol. 10, № 4. -P.268-293.

203. Konishi, T. Accentuated negative inotropism of verapamil after ischemic intervention in isolated working rat heart / T. Konishi, Y. Nakamura, C. Kawai // Cardiovasc. Res. 1984. - Vol. 19. - P. 38-43.

204. Knowles, R. The poison toad and the canine / R. Knowles // Veterin. Med. 1964.-Vol. 59, № 1.-P. 39-42.

205. Linnane, A.W. The universality of bioenergetic disease. Age-associated cellular bioenergetic degradation and amelioration therapy / A.W. Linnane, S. Kovalenko, E.B. Gingold // Ann. N-Y. Acad. Sci. 1998. - P. 202-213.

206. Lipid peroxidation and chanches in the ubiquinone content and the respiratory chain enzymes of submitochondrial particles / P. Forsmark-Andree et al. // Free Radic. Biol. Med. 1997. - Vol. 22. - P. 391-400.

207. Low brain intracellular free magnesium in mitochondrial cytopathies / B. Barbioli et al. // J. Cereb. Blood-Flow Metab. 1999. - Vol.5, № 19. - P. 528-532.

208. Ma, A. Effect of protection and repair of injury of mitochondrial membrane-phospholipid on prognosis in patients with dilated cardiomyopathy / A. Ma, W. Zhang, Z. Liu // Blood. Press. Suppl. 1996. - P. 53-55.

209. McGaugh, L. Memory a century of consolidation / L. McGaugh // Science. 2000. - Vol. 287. - P. 248 - 251.

210. Means, A.R. Physiological implications of the presence distribution and regulation of calmodulin in eukaryotic cells / A.R. Means, J.S. Tash, J.G. Chafouleas //Physiol. Rev. 1982. Vol. 62. № 1. - P. 1—39.

211. Metabolic changes in patients with mitochondrial myopathies and effects of coenzyme Q10 therapy / A. Chan et al. //J.Neurol. 1998. - № 10. - P. 681-685.

212. Meyerson, B.G. Comprasion of the effects of P-endorphin and noronin on exbioratore and socio-sexual behavior in the male rat / B.G. Meyerson // Eur. J. Pharmacol. 1981. - Vol.69, №4. - P. 453-463.

213. Mishkin, M. What is recognition memory and what neural circuits are involved? / M. Mishkin // Abstr. 32th Congr. of JUPS. Glasgow, 1993. - P. 42.

214. Mitchell, P. Keilin's respiratory chain concept and its chemiosmotic consequences / P. Mitchell // Science. 1979. - V. 206, № 4423. - P. 119-126.

215. Mitochondrial bioenergetics in aging / G. Lenaz et al. // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - Vol. 1459, № 2-3. - P. 3997-404.

216. Mitochondrial encephalomyopathy with coenzyme Q10 deficiency / C. Sobreira et al. // Neurology. 1997. - Vol. 48, № 5. - P. 1238-1243.

217. Mitochondrial encephalomyopathy with 15915 mutation: clinical report / A. Seki et al. // Pediatr. Neurol. 1997. Vol. 17, № 2. - P. 161-164.

218. Morton, R.A. Ubiquinones, plastoquinones and vitamin К / R.A. Morton // Biol. Revs. Cambridge Phill. Soc. - 1971. - V. 46, №1. - P. 47-96.

219. Myers, K.M. Behavioral and Neural Analysis of Extinction / K.M. Myers, M. Davis // Neuron. 2002. - Vol. 36, № 3.P. - 567-584.

220. Nagakura, A. Impairment of cerebral cAMP-mediated signal transduction system and of spatial memory function after microsphere embolism in rats / A Nagakura, N. Takagi, S. Takeo // Neurosci. 2002. - Vol. 113, № 3. - P. 519-528.

221. Neurological and behavioral outcomes of focal cerebral ischemia in rats / F. Wahl et al. // Stroke. 1992. - Vol. 23. - P. 267-272.

222. Neuroprotective effect of tiagabine in transient forebrain global ischemia: an in vivo microdialysis, behavioral, and histological study / S. Iqbal et al. // Brain Res. 2002. - Vol. 946, № 2. - P. 162-170.

223. Niaz, M.A. Serum concentration of lipoprotein(a) decreases on treatment with hydrosoluble coenzyme QIO in patients with coronary artery disease: discovery of a new role / M.A. Niaz, R.B. Singh // J. Cardiol. 1999. - Vol. 68, № 1. - P. 23-29.

224. Nishicimi, M. The occurrence of superoxide anion in reactions of reduced phenaxi-nemetasulfate and molecular oxygen. / M. Nishicimi, A. Roo, K. Xagi. // Biochem. Biophys. res. commun. 1972. Vol. 146. - №2. - P. 849-854.

225. Noack, H. Relations between tocopherol depletion and coenzyme Q during lipid peroxidation in rat liver mitochondria / H. Noack, U. Kube, W. Augustin // Free Radic. Res. 1994. - Vol. 20. - P. 399-403.

226. Nuquist, S.E. Ubiquinone from rat liver Golgi apparatus fractions / S.E. Nuquist, R. Barr, D.J. Morre // Biochem. et biophys. Acta. 1970. - Vol. 208, № 3.-P. 532-534.

227. Oda, T. Recovery of the systolic time intervals by coenzyme Q10 in patients with a load-induced cardiac dysfunction / T. Oda // Mol. Aspects Med. -1997.-№ 18.-P. 153-158.

228. Ohara, H. Protective effect of coenzyme Q-10 on the adriamycin-induced cardiotoxicity in the isolated perfused rat heart / H. Ohara, H. Kanaide, M.A. Nakamura// J. Mol. Cell. Cardiol. -1981. Vol. 13, № 8. - P. 741-753.

229. On the sidedness of the ubiquinone redox cycle. Kinetic studies in mitochondrial membranes / G. Lenaz et al. // Biochem. and Biophys. Res. Communs. 1978. - Vol. 85, № 3. - P. 1047-1053.

230. Palomaki, A. Ubiquinone supplementation during lovastatin treatment: effect on LDL oxidation ex vivo / A. Palomaki, K. Malminiemi, T. Solakivi // Lipid Res. 1998. - Vol. 39. - P. 1430-1437.

231. Plasma ubiquinol-10 is decreased in patients with hyperlipidaemia / A. Kontush etal.//Atherosclerosis. 1997.-Vol. 129, № l.-P. 119-126.

232. Primary CA1 and conditionally immortal MHP36 cell grafts restore conditional discrimination learning and recall in marmosets after excitotoxic lesions of the hippocampal CA1 field / D. Virley et al. // Brain. 1999. - Vol. 122, №. 12. -P. 2321-2335.

233. Progressive cognitive impairment following chronic cerebral hypoperfusion induced by permanent occlusion of bilateral carotid arteries in rats / J. Ni et al. // Brain Res. 1994. - Vol. 653, № 1-2. - P. 231-236.

234. Protection against free radical injury in the heart and cardiac performance. In: Exercise and Oxygen Toxicity, edited by C.K. Sen, L. Packer, O. Ha'nninen. -Amsterdam, The Netherlands: Elsevier Science, 1995, P. 359-388.

235. Protection by coenzyme Q10 of tissue reperfusion injury during abdominal aortic cross-clamping / M. Chello et al. // J. Cardiovasc. Surg. Torino. -1996. Vol. 37, № 3. - P. 229-235.

236. Protection of ischemic myocardium with coenzyme Q10 / Y. Nakamura et al. // Cardiov. Res. 1982. - V. 16, № 3. - P. 132-137.

237. Przybyslawski, J. Attenuation of emotional and nonemotional memories after their reactivation: role of P adrenergic receptors / J. Przybyslawski, P. Roullet, S.J. Sara// J. Neurosci. 1999. - Vol. 19. - P. 6623-6628.

238. Purshottam, T. Plasma electrolytes in relation to altitude tolerans in rats / T. Purshottam // Aviat. Spase and Environm. 1979. - Vol. 50, № 4. - P. 343-345.

239. Q10 levels correlate with the activities of complexes I and II/III in mitochondria from parkinsonian and nonparkinsonian subjects / C.W. Shults et al. // Ann. Neurol. 1997. - Vol. 42, № 2. - P. 261-264.

240. Ramasarma, T. Lipid quinones / T. Ramasarma // Adv. Lipid. Res. 1968. -Vol. 6.-P. 108-170.

241. Rastogi, S.S. Randomized, double-blind trial of coenzyme Q10 in hypertensives with oxidative stress and coronary artery disease / S.S. Rastogi, R.B. Singh, P.K. Shukla // Amer. J. of Hypertension. 1998. - Vol. 11,№ 12.-P. 210.

242. Randomized, double-blind placebo-controlled trial of Coenzyme Q10 in patients with acute myocardial infarction / R.B. Singh et al. // Cardiovascular Drugs and Therapy. 1998. - №12. - P. 347-353.

243. Rehncrona, S. Brain lactic acidosis and ischemic cell damage / S. Rehncrona, I. Rosen, B.K. Siesjo // Biochem. and neurophys. 1981. - Vol. 1. - P. 297-311.

244. Role of central noradrenalin neurons in the contexual control of latent inhibition in taste aversion learning/ A.K. Mohammed et al. // Behav Brain Res. -1986.-Vol. 21.-P. 109-118.

245. Schmidt, B.M. Basal synthesis of acetylcholine in hippocampal synaptosomes is not dependent upon membrane-bound choline acetyltransferase activity / B.M. Schmidt, R.J. Rylett //Neurosci. 1993. - Vol. 54, № 3. - P. 649-656.

246. Sex-dependent effects of mescapable shock administration on shuttle-box-elevated plus-mare behavior / H.L. Steenbergen et al. // Physiol. Behav. 1990. -Vol. 48.-P.571.

247. Sinatra, S.T. Coenzyme Q10: a vital therapeutic nutrient for the heart with special application in congestive heart failure / S.T. Sinatra // Conn. Med. 1997. -Vol.61,№ 11.-P. 707-711.

248. Singh, R.B. Serum concentration of lipoprotein(a) decreases on treatment with hydrosoluble coenzyme Q10 in patients with coronary artery disease: discovery of a new role / R.B. Singh, M.A. Niaz // J. Cardiol. 1999. Vol. 68, № 1. - P. 23-29.

249. Skeletal muscle and blood CoQIO in health and disease / J. Karlsson et. al. // Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 1990. - Vol. 91. - P. 288-292.

250. Simultaneous determination of tissue tocopherols, tocotrienols, ubiquinols, and ubiquinones / P. Maurizio et al. // J. of Lipid Res. 1996. - Vol.37. - P. 893901.

251. Simultaneous modulation of retrieval by dopaminergic D (1), beta-noradrenergic, serotonergic-1A and cholinergic muscarinic receptors in cortical structures of the rat / D.M. Barros et al. // Behav Brain Res. 2001. - Vol. 124. - P. 1-7.

252. Soja, A.M. Treatment of congestive heart failure with coenzyme Q10 illuminated by meta-analyses of clinical trials / A.M. Soja, S.A. Mortensen // Mol. Aspects Med. 1997.-Vol. 159, №49.-P. 159-168.

253. Studies with ubiquinone-depleted submitochondrial particles. Effects of extraction and reincorporation of ubiquinone on the kinetics of succinate dehydrogenase / E. Rossi et al. // Eur. J. Biochem. 1970. - Vol. 16, № 3. - P. 508513.

254. Thomas, S.R. A role for reduced coenzyme Q in atherosclerosis / S.R. Thomas, P.K. Witting, R. Stocker// Biofactors. 1999. Vol.9. - P.207-224.

255. The effect of coenzyme Q10 on blood glucose and insulin requirement in patients with insulin dependent diabetes mellitus / C.B. Andersen et al. // Mol. Aspects Med. 1997. - № 18. - P. 307- 309.

256. The mechanism of action of beta-adrenoreceptor blockers as revealed by effects on open field locomotion and escape reactions in the shuttle-box / J. Haller et al. // Psychopharmacol. 1997. - Vol. 134. - P. 107-114.

257. The role of identified neurotransmitter systems in the response of insular cortex to unfamiliar taste: activation of ERK1-2 and formation of a memory trace / D.E. Berman et al. // J. Neurosci. 2000. - Vol. 20. - P. 7017-7023.

258. The transition from memory retrieval to extinction / M. Cammarot et al. // An Acad. Bras. Cienc. 2004. - Vol. 76, № 3. - P. 573-582.

259. Trumpower, B.L. The promotive Q cycl. Energy transduction by coupling of proton translocatiov to electron transfer by the cytochromebcl complex / B.L. Trumpower //J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 265. - P. 11409-11412.

260. Ubiquinone biosynthesis by the microsomal fraction from rat liver / A. Kalen et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1987. Vol. 926. - P. 70-78.

261. Ubiquinone (coenzyme Q) and the function of vitamine E / D.I. Green et al.//Nature. -1961.-Vol. 190, № 4733. P. 318 - 325.

262. Wal, H.N. Flash-induced electron transport in b and c-type cytochromes in Rhodospirillum rubrum. Evidence for a Q-cycle / H.N. Wal, R. Grondelle // Biochem. et biophys. Acta. 1983. - Vol. 725, №1. - P. 94-103.

263. Watanabe, Y. Syntheses and activities of bioquinone substances. Ubichromenol phosphates and related compounds / Y. Watanabe, T. Suzuki, T. Seki // Chem. and Pharm. Bull. -1971. Vol. 19, №86.-P. 1519-1525.

264. Weber, C. Coenzyme Q10 in the diet-daily intake and relative bioavailability / C. Weber, A. Bysted, G. Holmer // Mol. Aspects Med. 1997. - № 18.-P. 251-254.

265. Weinberger, J. Nerve terminal damage in cerebral ischemia: greater suscetabiliti of catecholamine nerve terminals relative to serotonin nerve terminals / J. Weinberger, J. Cohen // Stroke. 1983. - Vol. 14, № 6. - P. 986-989.

266. Wittliff, J.L. Separation of toad vemon constituens of silicagel impregnated glass filter paper / J.L. Wittliff // Toxicon. 1968. - Vol. 6, № 1. - P. 7375.

267. Zelnic, R. Thin-Iyer chromatography. Analysis of the bufadienolides isolated from toad venoms / R. Zelnic, L.M. Ziti // J. Chromatogr. 1962. - Vol. 9, № 3.-P. 373-375.

Информация о работе

Тихобразова, Ольга Павловна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2007
ВАК 03.00.13

Диссертация

Влияние буфотина и убихинона-10 на функции ЦНС крыс в норме и при гипобарической гипоксии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы