Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА (NARCISSUS L.) И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА (NARCISSUS L.) И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ"



На правах рукописи АРУШАНОВА Елена Сергеевна

ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА (NARCISSUS L.) И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ

Специальность 06.01.11—защита растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА 1999

X ' / ✓

Диссертация выполнена на кафедре защиты растений Р< свинского Университета дружбы народов

Научные руководители доктор сельскохозяйственных га\ л, профессор Ю. И. Помазков, кандидат биологических наук, старшин научный сотрудник Л1. А. Келдыш

Официальные оппоненты доктор биологических на\к В. В. Мазин; кандидат биологических наук О. О. Белошап-кина.

Ведущее предприятие — Вссроссийский институт защиты растепли, г Санкт Петербург, Пушкин

Защита диссертации состоится «-Л» итсл 1999 г

в < /2- > час на заседании диссертационного совета Д 120 35 09 в Московской сельскохозяйственной академии им К А Тими-ря!ева

Адрсс 127550, Москва, \л Тимирязевская, 49 Ученый сьвст ЧСХА

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХА

Автореферат разослан « илаЛ . . 1999 г

Ученый секретарь диссертационного совета—

В. В. Исаичев

ОЬЩЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РА КОТЫ

Актуальность исследований. В настоящее время шмечаются тенденции возрастания внимания к качеству цветоводческой продукции, а также мерам но обеспечению ее фигосанитарной безопасности. особенно при жепорге растительного материала. В мире доход от продажи декоративных растений составляет около 50 миллиардов долларов, из них 12 приходится на Западную Пиропу н 6 - па США и Японию. В Гвропе лидерами являются Нидерланды (50 % мировой продукции цветоводе!ва), а также Лания. Ьслмия, Германия, Италия, Израиль (I.avvson. 1946). Луковичные культуры приобретают вес большую популярность благодаря не юлько их замечикмьным декоративным свойствам и незаменимостью при создании ландшафт» н раннсвесснний период, но и тем, что они относятся к категории важнейших выгоночных культур, позволяющих получать высококачественную продукцию в шмн^е время (Вылов, Зайцева. 1990).

Среди декоративных луковичных растении нарциссы занимают одно н» ведущих мест, уступая лишь тюльпанам по разнообразию окраски цветка. Увлечение згой культурой началось в XIX

веке, когда в Англии , были получены многочисленные гибриды между трубчатыми и крупнокорончагымн нарциссами. Современные copra сложные гибриды, многие ir» них полиплоиды. Коллекция ГНС l'AII им. II. В. I (каина насчитывает 265 круинокорончатых сортов; Кб трубчатых; 47 мелкокорончатых; 34 - разрешокорончатых; 26 - махровых и 26 - из всех прочих групп.

Промышленная основа цветоводства имеет свою специфику, которая подразумевает. широку ю интродукцию носилочного материала, его вегетативное размножение и монокультуру, что способствует интенсивному развитию болезней н расширению их ареала (Бойко, 1990).

. Сдерживающим фактором промышленного цветоводства являются инфекционные болезни, среди которых вирусные занимаю! наибольший удельный вес (Макутенайге. 1992). Они вызывают потерю декоративных качеств, ухудшение физиологического состояния растений и, в конечном счете, причиняют значительный экономический' ущерб. Интенсификация процессов производства усиливает вредоносность вирусных болезней и особенно смешанных вирусных инфекций. Особенностью вирусных болезней растений является гетерогенность вирусных популяций, представленных различными вирусами и их штаммами с разнообразными биологическими свойствами. Отрицательное влияние вирусов на репродуктивную способность растений приводит к фенотяпическому изменению признаков сорта,

-.-У-'

, ЦЕНТРАЛЬНАЯ НАУЧНАЯ Е1КЛИОТЕКА - .

«Лоск. ^ ^ . -ДвМИИ

снижению \ рожая lunp нишкш ннс t «>*it ion продыши на 40-70 "о II

В|>фОЖ lelllllO ИОеПрИИМЧННМХ К Н1ф\е i\l еорюн (Чифоф пиша

i'c 1срн.11||1Я )llip\ti)H HIILU>'IIIII\ Iы\р H h\e lapilllKOIll,l\ it to |OKI>!\ II icchiix ipciieciii.ix paeiciinux eiiocooeiiivel нпживанию il циркл |яцш| вшГл in к nil I le UM.KIH» шосп eue luiini о coeiaiic и pautpoci ранении BlipVCOM С южиос11. il\ lll.lt i1cîu MMI lia\kiiiiic Mip IHipi.ÔM (. Ш1МН L 1С io.iii aKiv.Liiaii.iM и i\ ми ни мни I p\ inn i манн >.11011

Цс п. h IUJ'in ut», ic vmaiimi \но.ш< iiucpaivpiiiix kiiiiii.i\ 11 lipe inapillc II.iii.IL 11«.». 1С №11 ШИН lipOHO IIIMIIC 11 i i>c_ ран CBII ICIC ii.CIBVIor о широком paeiipoeipaiiciinii Biipveou рншчнмх мнсоночичсскнх групп в koi амшоиных пасаж leiiuxx ichopaniBiii ix цисшчнмх к\ u.isp

Вскнше мим 1 1 iK/hv in. iuujio'iiiiiii иачимик 11.10 миног о вопроса ВШМИКАГ HUlÛvl lllMOlll tH) ICI. 1С I LH.HOIO 1ПЧЧСНИН ltlip\U)H lia pat 1ИЧНЫ\ lipe ili.ihiiic 1ЯХ \ irclsslls I I k 11.10 наших ИСС 1С KIRallllM ЯВЛЯ ЮСЬ (1ÎHK.1101111111L мер iKipi 01.1 ». вирченымн 1.1Г10 кнлипямп па laiuioii к\ ibivpc В спяш l мим емки iiili. с ю ivmiiuie ia.ui'in

1 II t\чип. с 1 ci ic hi. pacnpoc 1 ранения и харамер симшомоп nupvciiMX taon an,шип и ко 1 амшонных насаж амшях Narcissus I

2 Olipc ic ill 1 ». ни юной сое I an нирчеон и Переносчиков и iiMicniH. lOMiiiiiipviOliiitc шин 111 к|)екImu на нарциссах a кисже lia рл шчпыч нре (ciaHiiie |я\ порч (Ka {((talcs f ipe (сын ici mux в ko i акциях фон юной оранжереи I laniioio «нианическою сада

1 Paipaôoraib t амины енсюмы о< юров ichim Narcissus I для V i\ чтения качееша икорливпой цветчпои прол>кшш и сохранения пи юною и сортовою рашообрашя колпекций Научная новтпа работ На нарциссах лиа1 посгнрованы нссмопыненнме ион к\ пичре нпр\сы Bean \ellou mosaic virus (BYMV) I'olalo virus Y (PVY) Carnation latent virus (Cml V) Carnation mottle virus (CrnMV) Iobacco necrosis virus (TobNV) Arubis mosaic virus (AMV) Tomato ringspol virus ( loinRSV) AlIalfa mosaic virus (AI MV) Raspberrv nngspot virus (RRSV) Tulip breaking virus (TBV) I obacco rattle vims, (lobrtV) Всего выявлено 16 воiôvmrre leil прппа.нежащих к 10 таксономическим группам (Potv- Potex- Al MV-group Tobamo- Ncpo- Cutumo- Carmo-, Caria-, Carmo-Tobra- Tobacco пес-osis group)

И»>че1ше характера распространения BiipvcoB на рпличныч сортах Narcissus L и представите 1я\ фонической и с\бтропической флоры порядка Ltliales выявило наличие смешанных инфекций доминирующими компонентами которых являются Tobacco mosaic virus (TMV) и Cucumis mosaic virus (CMV) Число компонентов комплексной инфекции достигает 6

(сорт l'astelina). Показано, что частота встречаемости AMV; RRSV; TobNV; lomRSV: BYMV; TobRV составляет 18: 7; II: 5 - 6; 12 и 5.3 % соответственно ,ия каждого вируса

В результате проведенных исследований, показана возможность передачи на нарциссы CMV двумя нсспсцнфичсскнми видами глей: Macrosiphum rosac (1..) и My/us ccrasi (F.): BYMV - Aphis labae Scop., a l'VY -A. labae Scop, и My /us omatus l.aing.

Проведена оценка устойчивости-.растении Narcissus I,. (12 сортов) к 5 видам тлей, регулярно выявляемых и посадках нарцисса. Анализ устойчивое! и различных сортов не выявил обра шов, обладающих абсолютной устойчивостью.

Определены размеры »каната, обеспечивающие ¡ффекшвность оздоровления от комплекса вирусов при максимальном выходе растении: составы питательных сред ;ия получения адвентивных побегов н индукции ризогенеза. ' -

Впервые в растениях Narcissus I.. и некоторых представителях порядка I. ¡Hales диагност иронии вирус, серологически родственный Х-вирусу шалота (ХВИ1: ShXV) п нрнни.тлсжаший. как мы предполагаем, к ipynne XB1II-подобных вирусов (Вишниченко, Арушанова. Келдыш и др., 1999)

Практическая значимость_работы, В результате комплексных

вирусологических исследований на культуре Narcissus I,. получены данные по видовому составу вирусов, характеру их сочезаннй в составе комплексной инфекции, особенностям распространения. Они являются обоснованием для ра«работки и усовершенствования комплекса профилактических .мероприятий в создании системы противовирусной зашиты коллекционных насаждений Narcissus L. *

На основании экспериментальных. данных с учетом имеющихся сведений разработана методика оздоровления нарциссов от комплекса • вирусов, Определен оптимальный размер , женлапга для получения освобожденных от вирусов растений.

.Идентифицирован новый ХВШ-подобный вирус на p. Narcissus L. и некоторых представителях порядка Filiates. .

■ Апробация работы. Материалы доложены на XYII Международном симпозиуме (23 - 27 June, 1997. Beihesda. USA): на III Международной . конференции «Цветоводство - сегодня и завтра» (Москва, 1998).

Публикации. Основные результаты исследований опубликованы в 8 печатных работах.

Объем и содержание работы. Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста и состоит из введения, 15 глав, выводов и заключения.

-J-

l'aôoia ч> кр/ып 2(> lafi util, и i nocipiipoiiaiia 9 фоки рафиями и рисунками Список iiricpaivpi.i UK почаы 2lW iiaiiuiiiiiiMiniii in коюрмх 220 на itiiocip mm i\ чtiika\

(OIII'VKMIIU i'\l,OIM

I ОЫОР ЛИП l'A I УРЫ ПО 1Г Ml

I) otuope uticpai%pu приме Ким ii\блнкашш нос ic ши\ icr. лающие чарамернешкл »(.iiimiu.iM инрмпмм laôo шпациям поражающий рол NarcisMb I особспноыям ñiio loi им к\ ii.npia lloipoûiio рассмофс'ны и oíkv/tc tenu pauipocipaiiciuic и iipt.ioiKH.iKH.rb ннр\снмх taóo iciiaiiiui, поражающих lupuMui.! ими pjtiipoirip имшя вирхсов MCioibi и\ iicuio юнашш и ik.iuwhi.ic приемн иширнрованнои прогивовир\спон laiKiiiM Особое нэпманш. \ (с uno немо (ыонаник! кл тьг)ры апикальных морис к м как uniólo m важнейших мего юв освобождения растений от RHpNCHOII инфекции

2 УСЛОВИЯ МАИ РИАЛЫ И Ml ГОДЫ ИС СЛ1 ДОВАНИИ

Экспериментальная работа проводи ысь па кафедре lamiribi растений Российскою Унинсрсшоа фужбы народов и в оглею гаиипы растений Г 1авного бо1аннческою сала им II 1) Циаина в течение 1995-1999 i г

Основными объемами нее 1е.шваний яв1ятись представите™ порядка Líbales семейства Amarxllidaceae род Narcissus L, также проводили скрипншн на «араженность вир>самк среди различных представителей тропической и с\ бтропнческон флоры

Л 1« выявления и идентификации вирусов испотьзовали общепринятые схемы со сгаптаргным набором шиикаторных растений ( f-ulton.1960, 1967, Murant 1970а Помазков. 1978 Помазков Келдыш 1979, Келдыш, Помазков, 1980 Index оГ , 1983)

Опенка устойчивости форм, сортов и видов к возбудителям, переносчикам и векторный перенос проводили по стандартным методикам (Помажов, Келды.и, 1979, В пасов и др , 1990)

Испытание чкепериментальных растений посредством переносчиков проводили в боксах при оптимальной температуре 18-23 °С (Bnggs. 1959, Келдыш, 1967) Применяли iiaipysicy от I до 100 особей Обособленные популяции тлей-переносчиков в отношении которых проводится оценка на

устойчивость, поддерживали на основном кормовом растении под пюлятором. Наблюдения за характером поведения переносчика проводили в течение 24 часов. Учитывали число особен, оставшихся после подсадки. Если чере» сутки иа исследуемых «Ьормах не ocvaei ся ни одно» особи, то их относят к иммунным. Растения, на которых остается исходное количество .тлей или более, считаются восприимчивыми и могут рассматриваться в качестве кормовых растений. Растения, на которых сохранилось меньше исходного числа особой,относят к заселяемым (Келдыш. Помазков, 1980).

Все .экспериментальные работы но инфицированию и тестированию растении проводились и контролируемых условиях, исключающих возможность вторичного и перекрестного заражения.

Биологическое тестирование выполнялось по типовым .viя изучаемых групп вирусов методикам. В набор травянистых растений-индикаторов для механической передачи входили виды: Ni cot i ал a tabacum; N.rustica; N. .glutinosa; Petunia hybrida; Datura stramonium; Cucumis sativus; Chenopodium amaranticolor; Ch.quinoa: Phaseolus vulgaris.

Для приготовления инокулюма использовали 0,02 М фосфатный буфер pH 7,5-8,0 с добавлением различных стабилизирующих соединении: кофеина, ДИЭКА, 2 Ml-, никотннсульфата, активированною угля, аскорбиновой кислоты и iip.(Cadman, 1956; Fulton, I960; 1967; Pierpoint, Harrison, 1963; Lister, 1964; Мезьюз. 1973; Гиббс. Харрисон, 1978). В качестве абразива использовали целит или карборунд: непосредственно после инокуляции листья промывали водой, что способствовало увеличению числа образующихся местных поражении, а затем растения помешали в затененные условия на несколько часов для повышения восприимчнвости.( Holmes. 1929; Bawrden, Roberts, 1948). В качестве инфекниопного матсрихГа использовали листья Narcissus L.., травянистых индикаторов с признаками заболеваний. Очистку ;и концентрирование препаратов выполняли с помощью •дифференциального центрифугирования по схемам, которые рассматриваются в соответствующих разделах данной работы. ' Инфекционность препаратов контролировали методом биологического , тестирования на травянистых индикаторах, применяемых 'для диагностики и иде1ттификации определенных вирусов

- Видовой состав тлей в биоценозе декоративных луковичных растений определяли методом желтых чашек Мерике (Moericke. 1951).

При диагностике и идентификации вирусов, поражаюищх Narcissus L., использовались: визуальная . оценка зараженности, серологический тест (двойная иммунодиффузия в агаровом геле по Ouchterlony (1953)),

иммунофсрмсншыи .hijjihi I 1 ISA (Clark Adams 1977 Ьобкова. Чирков, 1ЧХ1 Iiiyrono, I48S At.uh.kob 19XS I angveld 1496 Beck, Husted 19%) с псгюлыонанисм reci-ciicicu проитодава Ml У ПИИКХ, НПО «Ьиочар» Л 1я постановки ссроло! ических реакции испотьшвали iиюле сыворотки и аитш сны, no ученные и<учреждении Ьолгарни I о ишилин Iермании США Кроме roio, применя шсь отечестеиные сыворогки и лишены m Института биоорганическои химии им Шемякина. 1СХА ПИИКХ

Регистрацию рс!>льтагов нммупоферментного анализа проводили на адсорбциомстре фирмы «l)>natcch» модсть HR-700 «Microplate Reader» Ссроло| ическочу unamuy мстоюм иммуноблоттиша подвергали распгге 1ьные жстракты после низкоскоростпого центрифугирования (10 ООО \ g 30 мин ) и очищенные прснарагы Экстракты по |учали in свежих ити замороженных зистьсв нсслс дуемых сортов Листья гомотнпнровали на холоде в crviiKe в присутствии жеграпфчюшао 0 2 М калий-фосфато! о буфера, рН 8 5

Иммупоблоттипг проводили в соответствии с протоколом, исполыуемым в качестве стандартною (Пшнничеико и др 1996, Vishmchcnko et al, 1994) В работе исполыовались ангисыворотки против рскомбинашною капсилною бе 1ка ЧВ111 (As 37) к рротив высокоочншсшкло препарата интактных вирусных частиц ХВШ (As I 4)

'Электронно-микроскопические исслетования проводили в ттектронном микроскопу ЕМ-301 (Philips) Контроль осуществлялся как в очищенных препаратах, так и прямым методом (Brandcs 11>57, Проненко 1966)

Методы иммуносорбции и декорирования исполь ювали в модификациях Вишниченко В К, Стельмащук В Я , Заврнева С К (1996)

Пассаж ХВШ-подобного вируса ш Narcissus L (сорт Super Star) проводили на 2-х недельные сеянцы шалота A ascalonicum (cr Creation) методом механической инокуляции при температуре 25°С и отностетыюн влажности 70% Тест-растения содержались в контролируемых условиях в течений. 3-4 педель Присутствие в них капсилпого белка ХВШ-подобного регистрировали на основании результатов нммуноблоЛшга с использованием As I 4

Оздоровление растений от вирусных болезней проводили методом культуры апикальных меристем Поверхностная стерилизация осуществлялась 0,1 % раствором сулемы или 0 1 % раствором диацида, время зкепозиции 7 минут (Высоцкий, Шершень, 1993) Апексы выделяли при помощи препаровальной ипы и малого глазного скальпеля Техника приготовления питатетьных сред, стерилизация бокса, инструментов, лабораторной посуды, растительного материала, методика вычленения и

посадки апексов, а также выращивание растеиий-регснсрантов общепринятые (Бутенко, 1964; Калинин. 1980; Трофимец, Остапенко, Бойко, 1985). Основная -питательная среда содержала макро- и микроэлементы по Мураснге-Скугу (МигаяЫ^е, Яах^, 1962), сахарозу 30 г/л; агар-агар 7 г/л; рН среды 5,6-5,8. Размер экспланта контролировали с помощью окулярмпкромстра.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Симптоматический анализ заболеваний, вызываемых вирусами на различных сортах ЫЛиС^НЦЯ 1..

• . Таблица I. Симптоматический анализ заболеваний на некоторых _сортах Narcissus L.__

Тип симптомов Copr

Светло-зеленая крапчатость She; Gigantic Star; Lady Luck

Белесая кранчатость Yellow Star; Selebrito; Artist's Model; Sioux •

Желто-зеленая полосчатость Kissproff; Bridal Rose; Shane's Cas'lc; Ullimus; Romi Barrow; Lord Nelson; Vivex

Желто-белая полосчатость Explorer; Victory; Credo; Spectacular

Желто-зеленая штриховатость Scarlett O'Hara; Lime ChitTon; Biscaine; Gigantic Star

Светло-зеленая штриховатость Am bergate. Explorer, White Plum

Краевой хлороз Lord Nelson, Walt Disney, Carlton

Деформация (морщинистость), краевой хлороз Undertone, Soldier Brave, Credo, Selebrito, Honic Tires

Гофрированносгь листовой пластинки Ambergate, Scarlett O' Hara

Пестролепестность цветков ; Daydream, Spectacular, Lemon Show, Artist's Model

Измельчение растений, отсутствие цветения Credo, Patriarch, Feeling ducky. Kindled

Mti. ie ШК.1ИИЯ проно шмыо нами в IWS-1998 г г, свидетельствуют о широком распространении и накоплении uiipvcoe различных ■ аксономичсских ipyiin па пре (ставшс ih\ сем Amaryllidaceae в жосистемах IM. ('астения с приhi.ik.imii ипрчиюи инфекции выяв ieiibi во всех kojuiCK нноннич насаждениях

В реч\ ч.|«не обе ie nm.inlui коллекционных насаждении Narcissus L В течение |ЧЧ*-1ЧУ8 it mmhobicho что внешние пришакн вирусных заболеваний варьпрмог По mm симптомов их можно рашелигь на iiccko ibko трупп (ia6i i)

Основной спек-ф снмпюмов - мотаикн полосатость шгрмховаюсть, пестро iciicCTiiocib HBeiKoii деформации листьев краевой viopo-», измельчение растении oicMciiine цветения —отмечен . нами на коллекционных посадках нарциссов

Установлено, «то прсоб иыаюшими на ку|ьтуре являются признаки жен о- ie lenort по юсатости и (сформация (морщинист ость)

На некоторых сортах оiмечено сочетание симптомов, например, деформация шстьен и нпрнховаюсть (Scarlett О Нага, Ambergatc), деформация и тмен.чение растении (Credo), краевой хлороз и жел то-телепат • полоса! ость (1 ord Nelson)

Количественный учет больных растений в динамике свидетельствует о том. что уве шчиваегся и пропет поражения сортов (габл 2), причем данная тенденция отмечена не только на культуре Narcissus L. но и на других луковичных культурах

Таблица 2

Распространение вирусных болезней в культуре Narcissus L по годам изучения

Период изучения (года) Культура Количество сортов (шт )/ % от общего числа сортов

Обследовано сортов % пораженных растений в сорте

до 10% 10-50 % >50 % 100 %

1986 Нарциссы 457/100 386/84,4 36/7,9 6/1,3 25/5,5

1995-96 Нарциссы 239/100 30/12,6 79/33.1 85/35.6 45/18.8

1997-98 Нарциссы 239/100 16/6.7 20/8,4 42/17.6 161/67,4

Из данных таблицы следует, что вирусологическая ситуация в коллекционных насаждениях за период с 1986 г. Иретерпела значительные изменения. Сорта, в которых было поражено 100 % растений, в 1986 г. составляли лишь незначительную долю от всей коллекции ( 5,5 %). К 1998 году больше половины обследованных сортов нарциссов оказались пораженными на 100%.

В связи с данными по расширению спектра хозяев вирусов, поражающих Narcissus L., за период 1996 - 1997 гг. были проведены исследования, в частности, визуальная диагностика, на представителях порядка Liliales (открытый и закрытый ipyirr). ■

Визуальный анализ и обследования растений из различных семейств порядка Liliales показали наличие растений с симптомами вирусных заболеваний.

Таким образом, отмечена тенденция распространения и увеличения степени поражения, а также стабильное присутствие вирусной инфекции, в целом типичное для большинства сортов.

Мониторинг распространения вирусов в коллекциях нарциссов.

Методом двойной диффузии в. геле было испытано 9 сывороток к различным вирусам и проанализировано более 100 сортов Narcissus L. с выраженными вирусоподобными симптомами.

Согласно полученным данным, в коллекционных насаждениях открытого грунта из основных возбудителей, зарегистрированных на нарциссах, нами выявлены: Tobacco mosaic virus (TMV) - на 5 сортах; Cucumis mosaic virus (CMV) - на 9 сортах. Из несвойственных возбудителей выявлены: Carnation mottle virus (CrnMV) - на 13 сортах; Soybean mosaic virus (SMV) - на 19 сортах; Chiysanthemum viras В (ChrVB) - на 18 сортах.

• По данным ДДА уровень распространения на изучаемых сортах таких вирусов, как CrnMV, SMV, ChrBV, TMV и CMV составляет соответственно 54,2; 79,1; 75,0; 20,8 и 57,5 %.

Согласно данным . серологического анализа, проведенного : методом двойной диффузии, в коллекционных насаждениях преобладают: SMV; CrnMV и ChrVB.

Растения различных сортов Narcissus были также проанализированы с помощью ИФА (ELISA), как одного из наиболее чувствительных и точных методов. В результате анализа, проведенного в культуре Narcissus L. были выявлены: Narcissus mosaic virus (NMV) - на 5 сортах; TBV - на 3 сортах; TMV - на 14 сортах; : ALMV - на 6 сортах; AMV - на 1 сорте; CMV-Hal6

юртах, Cml V - на 15 сортах CmMV - на 3 сортах I'obRV - на 2 сортах Potato virus S (PVS) - на 1 сорте, PVY - на 7 сортах, lobNV - на 4 сортах lotnRSV - на 2 сортах Пеан yellow mosaic virus (BYMV) - на 4 сортах RRSV - на 2 сортах

1акнм образом но данным ИФА, на кол юкцнонных насаждениях Narcissus I к числу доминирующих можно отнести TMV, CMV и Cml V

Таблица 3

Распространение вирусов на Narcissus I и раыичных представите 1ях порядка 1 ilialcs _ _

Количество видов/сортов 1 руппа вирусов Bo (Суди re i и

Lilialcs* Ч видов Ро1\- PVY. FBV, BYMV

Narcissus L ** 13 сортов

3 Л1 MV- Л1 MV |

6

1 1 obacco Nccrosis- lohNV

4

1 Polex- NMV

5

6 ГоЬапю- TMV

14

4 Nepo- RRSV, TomRSV,

9 AMV

11 Cucumo- CMV IAV

16

4 Carla- C'rnLV, PVS

15

- Carmo- CmMV

3

1 ГоЬга- lohRV

2

* - из продотированных 16 видов ** - из протестированных *4 сортов

- iO~

На представителях тропической и субтропической флоры по нашим данным были зарегистрированы: TBV - на 3 видах (Pofíanthes tuberosa; Tupistra sp.; Amary llis beladonna); NMV - на Semele andrógina; CrnLV - на 4 видах (Crinum asiaticum; Chlorophytum sp. I; Polianthes tuberosa; Amaryllis beladonna); ALMV - на 3 видах; CMV - на 10 видах; TMV - на 6 видах; Tomato aspermy virus (TAV) на Asparagus setaceus; AMV - на видах; TobNV -на Tupistra sp.; TobRV - на Zephyranthes candida; TomRSV на Chlorophytum sp.2; BYMV - на 2 видах.

Таким образом, по данным ИФА, на растениях сем. Liliales также преобладают TMV и CMV.

На культуре Narcissus L. и представителях порядка Liliales обнаружены основные: NMV, TMV, CMV и несвойственные вирусы: CmLV, CmMV, RRSV, TomRSV, PVY, PVS, TBV, BYMV, AMV, принадлежащие к различным таксономическим группам (Табл. 3).

Изучение характера распространения вирусов на различных сортах Narcissus L., а также в пределах видов порядка Liliales, в коллекциях выявило преобладание смешанных инфекций (табл. 4).

Таблица 4.

Распространение смешанной инфекции на Narcissus L. и _видах порядка Liliales по результатам ИФА_'

Число сортов и видов Количество сортов и видов со смешанной инфекцией/%

моноинфекция 2 возбудителя 3 возбудителя более 3-х возбудите-лей

Narcissus L; 34 сорта 6/17,6 8/23,5 11/32,4 9/26,5

порядок Liliales 16 видов 5/31,3 5/31,3 3/18,8 1/6,3

Показано, что, как правило, в составе комплексной инфекции присутствуют от 2 (сорта Undertone, Credo) до 6 (Pasteljna) компонентов у Narcissus L. и от 2 (Veltheimia viridifolia, Asparagus setaceus) до 4 (Polianthes tuberosa) y видов из порядка Liliales.

Присутствие TMV, CMV, NMV, PVY, TobRV было подтверждено данными биологического тестирования. Иэоляты NMV, CMV, TobRV и TomRSV, выделенные из нарциссов, в некоторой мере отличаются по физическим показателям и эффективности передачи от типовых штаммов, а

-il-

таюкс июлягов и« бобовых кулигур i ома гон и тюльпанов ( Волощ\к, 1985, Зитиклггс 1988 Терт я к 1990)

Но морфоло! ическим свойствам ^регистрирована идентичность типовых штаммов (по pe«v п.гатам яектронной микроскопии)

4.ИЗУЧ1 ИИ1 РОЛИ HU И В РАСШЧКЛ РАНЕНИИ ВИРУСОВ HA NARCISSUS I

Извил но. что распространение фитовирусов тесно свжано с ра1лнчными переносчиками которые являкнея )ффективнымн факторами их передачи в прирохе (Ратвя шша, 1975 I иббе Харрисон 1978) Исхотя m »того для разработки мероприятий по мшите растений от вирусной инфекции необходимо »пучение фэмил переносчиков и их вмимоотношении с вирусами Наиболее активную и многочиезенную группу переносчиков вирусов растений представляют i н< (Aphididae)

Нами в экосистемах текоративных луковичных кузыур выявлено 15 видов 1леи Данные полученные на основании ииюльюнання жел!ых чашек Мерике, свидетельствуют о наличии в составе сборов ви юв rieft приуроченных к pat шчным кулыурам (Aulacorthum solam (Kall) M>/us cerasi (F ), Hyalopterus pruni CieotTr Dvsaphib ьотЫ Kalt) наряду с вичами, характерными для цветочных растений (D\saphis tulipae Bd Ь Macrosiphum rosae(l ), Macrosiphum lilt (L.) My/us omalus I amg)

По резузьтатам вшуальных набпюдений (в динамике) на нарциссах зарегистрированы - My/us percicae Sulz A solani

Таким образом, отмеченные вилы глей правомерно рассматривать в качестве потенциальных векторов вирусов на тучаемых ку lbivpax

В современной экологической обстановке наблюдается усиление вредоносности и распространения несвойственных ряду культур раззичных вирусов Этому способствуют воздействия стрессовых, .чпропогепных факторов и приемов, используемых при интенсивных технолотях (Келдыш, Помазков 1985, Кетдыш 1995) При этом формирование новых патологических комплексов происходит на фоне количественного и качественного изменения динамики распределения вирусов переносчиков и состояния их популяций Векторы (переносчики) явзяюгея одним из существенных факторов изменения видового состава и расширения крута растений-хозяев вирусов (Келдыш Помажов Червякова, Арушанова, 1998)

Результаты женериментов по изучению роли тлей в распространении вирусов на нарциссы претставлены в таблице 5

Нил переносчика

Ni pcrsicae Sul/ Mac rosac ( I )

_M_ ccrasijl^ )

M pcisicae Sul/

I aô mua 5

Ihy чснис векторной перс ычи вирусов на Narcissus I ___

')ффск|пннос1ь Г Koinpo плюс перс мчи "о ^ |ес1ированне 4Х

Вирус

Л labae Scop

M рсгмсас Sul/ Л labae Seop

_M ornatus 1 л i цп

I--

40 I I 2X 22 2b П

H peiv ii.iaie проведенных жеперименюн iiiikumiki чю наряд с швеетным переносчиком M persicac во<можпа перс lana на нарциссы CMV двумя неспецифически-ч! ни ими i icii M rosae и M еегам BYMV- A fabae a PVY - A labae и M ornatus причем >ффск1Ивпос1ь передачи iiecnei шал изиронаншimii ни ими i leu сосыв ih ia I > - 40 "о

1аким обраюм ишпия в сфумхре афи юфауны 1\ковичпы\ декоративных культур шачиа 1ыюе месю они moim mi p.m. оире ie lemixio poib в перешче инфекции PVY H\MV и CMV Причем ш вп ia M cerasi была показана епособносдь к пере мче CMV щ основною \о1янна как крылатыми так и б*скрылыми стадиями

Использование сортов и видов об ia.iaioiunx устойчивостью к векторамf иредставтяст наиболее •ффектинный способ иинггы растении от патогенов вирусной 1ГИОЛОП1И причем особую ценность ыи практики пре 1ставляют сорта и виды об 1алающпс групповой усюйчивостi ю

Нами проводилась рабоы по опенке устойчивости 12 сортов Narcissus к 5 видам пей регулярно выяв |ясмых в посадках нарцисса

Анализ устойчивости раыичныч сортов нарциссов не выявил обратной, обладающих абсолютной устойчивостью (табт 6)

Реакция нарциссов на все изучаемые вн ты т ten в не юч выровнена, на всех сортах тли способны питаться в |счсние мерном достаточною для инфицирования Исключение cocíавляеч шин. I) sorbí коюрая на всех сортах нарциссов присутствовала не более I часа

Таким образом все 1еструемые copia Narcissus L о i нося гея к lace 1яемым а сорта Home lires и I ord Nelson являкнея кормовыми для M ccrasi и A fabae В ре>у плате иссте ювании ныле ichm усюичивые к

заселению различными вилами глей-переносчиков: M.persicae pruni - 4; М, ccrasi - 3.

- 3 сорта: П.

Таблица 6.

Опенка устойчивости некоторых сортов Narcissus I,. к тля.м-нсрсносчнка.м

TCCTIipyCMHii copi Число сохранившихся из 5 подсаженных особей через 1/3/24 часа

M.persicae A.fabac D.sorbi И.pruni М. ccrasi

Super Star 5/5/4 2/1/0 3/2/0 4/3/1 2/1/0

1 Ionic l'ircs 6/6/2 2/2/7 1/1/0 2/2/2 2/2/7

Bridal Rose ■ 3/3/2 2/1/У 0/0/0 4/2/0 2/1/9

A Hibernate 6/4/3 1/2/1 0/0/0 5/1/0 1/2/1

Undertone 5/4/0 - 2/0/0 - -

Credo 6/4/2 3/4/2 0/0/0 6/4/0 3/4/2

l.ord Nelson 5/5/4 4/2/6 1/1/0 2/3/2 4/2/6

l.imc Chi Hon - 2/0/0 1/0/0 2/2/2 5/2/1 n

Daydream 5/5/1 4/3/1 2/1/0 2/1/1 5/3/1

Patriarch 4/3/0 4/1/0 l/l/l 6/4/2 1/1/0

Tedstone 5/4/1 3/2/0 0/0/0 5/3/0 2/2/1

Sentinel 5/1/0 4/1/1 1/0/0 2/2/1 1/0/0

5. ИДШТИФИКА11ИЯ 11НСВ0ЙСТВ11 (11ЫХ ВИРУСОВ 11Л КУЛЬТУРЕ

NARCISSUS L.

Наряду с традиционными вирусами нами выявлены и несвойственные возбудители на видах, входящих в семейство Amaryllidaceae, порядок Liliales (Amaryllis L., Narcissus L..).

Задачей нашею . исследования был поиск вирусов, серологически родственных XBLL1 на представетелях таксонов эволюшюнно близких роду Allium. В результате проведенных исследований в растениях ряда видов, принадлежащих к семействам Liliaccae и Amaryllidaceae, был обнаружен вирус, серологически родственный ХВШ - первый представитель XBLLI-подобных вирусов, инфицирующих растения, не принадлежащих к роду Allium . Антиген, серологически родственный капсидному белку ХВШ, был обнаружен в двух видах рода Chlorophytum, в нескольких сортах Lilium L., :

амармтлмсон и нарциссов

Д|я aiuuiilid распространения \Blll на kv н.прс Narcissus ( ним (ыовали 2 anriiCbiBopoiMi к kjiicii uioviv 60 tkv - As >7 it As I 4 - к итпактным вирионам в очищенном npeiiapaic

\нали< ировоиыи с 7 lopiüMii Narcissus 1 IIa put IA и lb нрс ici ав iiiiM иммуноблоил »KCl рак I (ж (рис IA J и копией фированимх препарат» (рис 1Ь)

В жеграктач и концентрированных npeiiapaiax ирису icibmoi 2 к lacca вирусного капси того бетьа с мо ick\ |ярнммн массами 47 кДа и 28 кДа Причем v.c ш в (> еортач присметонлл ю ibko бе юк 2Х кДа (рис 1 А, Ь дорожки 1-4 и 6-7) в copie Super Star ( шрожка обнаружены оба класса капси mot о бе 1ка

Максимальная копнетрация uihhoi о анин сна наб по ылаеь в iiicii.hx нарциссов в фаю цветения помом\ |шш.ш р icitnu м.иый Mdicpiivi испо иновался ,и)я нол\чсния И'шшшш i\ ннрмнмх препараюв В таких препаратах приеч 1сгвоваЛн 2 к laeea вир\епого капси того бежа с Moichv тярными массами 2Н кДа и кДа (рис 2А) Ahiiici niopoiKa против рскомбинаншого капси nioi о бе 1ка \Blll \х 37 peai провала с бетком 28 кДа

(рис 2b) loi ia как ангисыворо|ка полученная прошв высокоочищепнмх ' , /-

I

1

1

- -ZJkA а. - - - '

«. - - - .------'2&KÙ.C.- - -

I 2 С 4 о 6 7 «9 I < С, } а о 7 ti 9

A b

Рис I Иччмюбтотшнг жстрактов и концентрированных препаратов ХВШ-подобного вир\еа нарциссов Дорожки 1 - 7 -сортообраэцы Narcissus 1 (Davdreain Sentinel I ord Nelson Credo Super Star 12 5 12 2) юрожки 8 Q - контро ik (проахали шрованные ранее жефак1ы 1\ка-шалога)

-/S-

препаратов XBIII As 1.4 реагировала с белками обоих классов (рис. 2В). В результате обработки -»кстракгов листьев Narcissus L.. нсиоиным детергентом Тритон х 100 освобождался и селимо it провал в стандартных условиях центрифугирования (SW 28, 25 ООО об/мин. 2.5 ч) реагирующий с As 37 белок с молекулярной массой 55 кДа (рис. 21').

Рис. 2. Элекгрофоретическнй и серологический анализ очищенных препаратов ХВШ-подобного -'вируса нарциссов: А - »лектрофоре» вирусного препарата в 10 % ИААГ; В, В -нммуноблопинг препарата, полученного с использованием соответственно As37 и Asl.4 : Г- иммупоблогтинг препарата, полученной) с использованием неионного дегергента тритон X-100, As37; Д - иммуноблоттинг очищенного препарата выделенного стандартным методом.

По-видимому, данный белок представляет собой димер капсидного белка с молекулярной массой 28 кДа, однако механизм их образования и структура в настоящее время неизвестны. Неясно также, какие различия в первичной структуре 28 кДа и 37 кДа капсидных белков ХВШ-подобного вируса нарциссов обуславливает столь существенную разницу их кажущихся молекулярных масс. Существование двух классов капсидного белка ХВШ-подобного вируса нарциссов может быть связано с гетерогенностью молекул капсидного белка этого вируса по степени гидрофильности, однако, трудно объяснить, почему при серологическом анализе методом иммуноблотинга 37 кДа капекдный белок реагирует с антисывороткой Asl.4 и не реагирует с антисывороткой As 37.

Исследование очищенных вирусных препаратов из листьев Narcissus L. методами иммуноэлектронной микроскопии выявило наличие в них массы гибких частиц длиной около 800 нм и диаметром 12 нм (рис 3).

Однако на основании факта декорирования незначительной части вирусных частиц можно сделать вывод о достаточно низкой степени

-/е-.

Рис 3 Иммупоэлсктронная фотография очищенных препаратов XBlll-подобного вируса нарцисса

ссроло! ического родства выявленного вируса XBLIJ

Результаты свидетельствуют о том, что в растениях нарциссов, амариллисов присутствует вирус, серологически родственный XBUI и принадлежащий, как мы полагаем, к ХВШ-подобным фитовирусам Наши исследования покатали, что данный вирус легко передается механически и способен репродуцироваться в сеянках шало/а в условиях моновирусной инфекции н накапливаться в них в значительных концентрациях

6 РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ОЗДОРОВЛЕНИЯ NARCISSUS L МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ

При разработке методов получения безвирусного растительного материала необходимо учитывать влияние генетических, физиологических, гормональных и физических факторов

По данным наших экспериментов наибольший выход безвирусных растений (до 75 % при культивировании эксплантов в 0,2 мм) наблюдали у сорта Super Star Приживаемость эксплантов малого размера была значительно ниже по сравнению с более крупными Оздоровительный эффект (по данным ИФА и ЭМ) был выше и достигал 57,1 - 75,0 % от числа регенерировавших Данные таблицы 7 свидетельствуют и о сортовой разнице в приживаемости эксплантов и в выходе безвирусных растений по трем размерам, хотя зависимость от размера экспланта сохраняется по сортам

Согласно модели «Скуга-Миллера» (Scoog, Miller, 1957), образование побегов стимулируется при наличии преобладающих концентраций

Таблица 7.

Влияние размера жепланта на выход бсзвирусных __________ рас I ciiiiti Narcissus !..__. _-

Размер Регенерировано

Сорт жеплашов.* Всего ' Безвирусных

мм шт. Го hit. %

0.2 8 26,6 6 75.0

Super Star 0.3 13 43.3 3 23,1

- '».5 15 50.0 1 6,6

0.2 7 23.3 4 57,1

Patriarch 0.3 Г' 10 33.3 3 30.0

0,5 13 43,3 0 0

. 0.2 8 26.6 5 62.5

Lord Nelson 0.3 12 40.0 3 25.0

0.5 13 1 Г- 43,3 2 15,3

/ *-30 •жеплапгов меристема! ичеекч>й гкани.

цшокинина но отношению к ауксину, тогда как обратное соотношение способствует образованию корней. Данная модель приемлема для большого числа растений, но ■ ее нельзя считать универсальной. Концентрации гормонов, необходимые для органогенеза, широко варьируют и для каждого вида определяются эмпирически (табл. 8).

При повышении концентрации «-нафтилуксусноц кислоты до 5 мг/л сильно возрастает процент образования каллусной ткани ( 31,0 % у сорта Lord Nelson), что является нежелательным in-за генетической нестабильности (Bal/an, 1978, Williams, Collin, 1976) и достаточно трудно добиться контролируемого морфогенеза (Катаева. Австисов, 1981 ).

В результате проведенных -жепериментов показано, что оптимальные концентрации гормонов для сортов Narcissus L.: БАП - 10 мг/л, ПУК - 1 мг/л, при которых получено наибольшее количество растений-регенерантов (до 40,3 % у сорта Super Star), при этом процент каллусообразования невысок (до 6,2 %)(табл. 9).

Таким образом, проведенные исследования показали, что приживаемость эксплантов разного размера и выход безвирусных растений-регенерантов зависит от многих условий: сортовых особенностей, состава среды, физических факторов выращивания. Однако, увеличить выход безвирусных растений возможно путем сочетания метода культуры •

- <g-

I ai» шил 8

Морфогенез мернегем Narcissus I па pa «личных ере tax

Сорт

Super Mar Patriarch

i ord Nelson

Состав epc Ii'

iml/l) »T ,ыя ne-

ДДИ mo inpo ванных MepiitiCM*

ресалки i >кеп lairra

f llo iv чено j paciciiiiii iioôeiiiiu кал ivc pcieiie-pjinon

Чарам ep opi .11101 elle M

I

IK. I фи I Ol op-MOHOB

I

1-

oe I финн op-

MOIIOB

21) 9 174 П ?

1 1)0 l 0 0 I 0 (I

1^4 10 К

43

Super Star

MC. <

Patnareli I ord Nelson

ЬДП 10 0_^

"l 1УК 0 5 ^

MC

ЬЛП 10 0 I

11УК 0 s

MC

I ord Nelson

0 0

НУК I 0

[>AI I 10 0 МУК I 0

4S 8 40 0 16 7

62 2 3

40 \ 38 7 30 4

MC t-

MC

1 8

Patriarch ЬАП 10 0 1 ЬАП 10 0 , 2 9

Lord Nelson НУК S 0 1 НУКM) ' 0 0

• 20 "жешышов меристема!ическои гканн

F<p- ^FT(ooS)

Табища 9

Сорт Погибло апексов * Характер opianoieiieia** Порчено растений-ре! енерантов, ""о

от инфекций, % в процессе культивирования, "о побеги m жеплапга % КОД ivc %

Super Star 5 7 43 2 4s 8 5 3 40 1

Patriarch 4 2 49 4 40 0 62 2 3 38 7 *30 4

Lord Nelson 43 56 9 36 7

* - ю 20 жеплатов

* * - среда содержащая ЬАП - 10 мг/ i НУК - 1,0 mi/ i

апикальных меристем с хемо- и термотерапией. Устойчивость сортов к инфекции также, несомненно, оказывает влияние на результативность оздоровления рода Narcissus L. от вирусов.

ВЫВОДЫ

1. Вирусные заболевания выянлены на 239 сортах Narcissus L. различногс промсхождения в насаждениях коллекционного типа, а также на 33 видах представителей тропической и субтропической флоры.

Отмечена устойчивая тенденция их распространения по сравнению с 1986 годом. Заражение комплексом вирусов отмечено практически на 100 % изучаемых сортов Narcissus L. Комплексная вирусная инфекция доминирует и на обследованных видах порядка Liliales, причем число компонентов вирусного комплекса варьирует от.2 до 6.

2. Доминирующими симптомами в насаждениях Narcissus !., являются -мозаика, полосатость, краевой хлороз, пестроленестность цветков, деформация листьев, измельчение растений. На изученных представителях тропической и субтропической флоры порядка Liliales доминировала мозаичность. . л , ' •

3. Данные симптоматического, серологического, индикаторного и электронно-микроскопического анализов свидетельствуют о широком распространении TMV; CMV; CmMV; PVY; CrnLV; NMV; AMV; RRSV; TobNV; TomRSV; BYMV и TobRV на культуре Narcissus L. 1

4. Установлено, что болыишкггво возделываемых сортов поражены ■ комплексом вирусов; 23,5 % сортов поражены 2-мя возбудителями, 32,4 % сортов - 3-м* возбудителями, а на 26,5 % сортов обнаружетю более 3-х возбудителей. ,'Л

5. В насаждениях Narcissus L. установлен состав комплексных инфекций, видовой состав возбудителей, выявлено широкое варьирование и трансформация признаков проявления «фусных комплексов. Наибольшая стабильность проявления симптомов, характерна для сортов: Lord Nelson, ; Scarlett O Hara, Super Star, Patriarch.

6. Среди обследованных сортов Narcissus L. не было выявлено представителей, обладающих комплексной устойчивостью к возбудителям. Показана тенденция расширения ареала нсспсиифических возбудителей (PVY; ShVX; CmLV; CmMV), что обуславливает необходимость оздоровления хозяйственно-иенных сортов Narcissus L. » " ■ . ■ : 7

7. Все тестируемые сорта нарюксов относятся к заселяемым, а сорт Honic " * Tires и Lord Nelson являются кормовыми для M. cerasi и A.fabaë. В результате

исследований выделены устойчивые к заселению различными видами тлей-переносчиков, M persicae - 3 сорта Л fabae - 4 сорта, H pruni - 4 сорта, M cerasi 3 сорта Выживаемость тлей на ра»личных сортах значительно колеблется

8 В результате проведенных исследований в растениях ряда видов, принадлежащих к семействам Liliaceae и Amaryllidaceae был обнаружен вирус, серологически родственный ShVX Антиген, ссрологнчески родственный капсидному белку ХВШ обнаружен в дву видах Chlorophytum, 4 сортах Amaryllis н 14 сортах Narcissus L

9 В экстрактах и концентрированных препаратах присутствовали 2 класса вирусного капсидного белка с молекулярными массами 37 и 28 кДа Исстедованпв очищенных вирусных препаратов и< листьев нарциссов методами иммуноэлектроннон микроскопии показало наличие в них массы гибких нитевидных частиц длиной ~ 800 нм и диаметром ~ 12 нм XBI11-нолобный вирус легко перелается механически и способен репродуцироваться в растениях шалота и нарцисса в условиях моноинфекции

10 С целью получения оздоровленных растений был апробирован метод культуры апикальных меристем Оптимальная величина экспланта составляла 0,2 мм для получения безвирусных растений, а концентрация

гормонов БАГ1 - 10 мг/л, НУК - 1 мг/л. при этом процент каллусообразования составлял ~ 6 2 % Для индукции ризогенеза уменьшали вдвое содержание минеральных солей в среде МС, концентрация НУК составляла 0,5 мг/л

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

При разработке системы защиты цветочных культур, и, в частности, Narcissus L, от вирусов необходимо учитывать особенности их эпидемиологии в условия коллекций и экспозиций Исходная позиция заключается в квалифицированной оценке экологической и фитосанитарной обстановки (состав вирусов и их переносчиков, состояние их популяций, биолого-экологические свойства растений хозяев и уровень взаимодействия между ними) Вирусы являются неотъемлемыми сочленами любой экосистемы, в этой связи, очевидно, нереально содержание во времени в коллекциях «безвирусных» линий, клонов и форм растений Оптимальная методология противовирусной защиты на современном этане ориентируется на формирование агроценозов, в которых реализуется возможность механизмов регуляции плотности вредных организмов и включает следующие основные этапы

• направленное формирование коллекций, экспозиций, ограничивающих

уровень распространения и непрерывность циркуляции традиционных и «новых» вирусов и переносчиков (введение устойчивых сортов и видов, в том числе с латентной реакцией);

• внедрение системы оздоровления при производстве посадочного и семенного материала (тестирование, термо (химио-) терапия, культура

. меристемы); .

• оздоровление отдельных сортов, представляющих ценность для генофонда,

• удаление из коллекций и экспозиций восприимчивых видов и сортов, перевод ценного материала в генные банки;

• проведение профилактических мероприятий (фитосанитарное тестирование, биологический и химический контроль переносчиков, соблюдение карантинных требований).

В результате таких подходов реализуется возможность создания

экосистем, ограничивающих вредоносность вирусов и их переносчиков.

Синеок работ, опубликованных но теме диссертации:

1. Келдыш М.Л., Червякова О.Н., Арушанова Е.С. Вирусные заболевания новых нетрадиционных культур // Тез. докл. Всерос. съезда по защите растений, - Пушкин. - 1995. С. 570-571.

2. Keldish -М., Arushanova Е., Pomazkov Y., Cervyakova О. Incidence of pome fruit viruses in ornamentals // XYll int. Symp. on virus diseases of Fruit trees. -1997.-p.« 174. p

3. Keldish M., Pomazkov Y., Cervyakova O., Arushanova E. Vcctors as a factor in widening host range for viruses of stone fruit trees // XYll int. Symp. on virus diseases of Fruit trees. - 1997. - p. 171

4. Арушанова E.C., Тимохина E.T., Байкалова O.C. Фитосанитарное состояние коллекционных посадок Narcissus L. и перспективы его оптимизации // Тез. докл. 111 межд. конф,- 1998.- с. 26-27."

5. Арушанова Е.С., Келдыш . М.А., Червякова О.Н. Роль декоративных растений в распространении вирусов на садовых культурах // Тез. докл. Всерос. совещ.: Актуальные вопросы теории и практики зашиты растений в условиях многоукладное™ с.-.х.- 1998. -с. 261-263. •

6. Келдыш М.А., Помазков Ю.И., Червякова О Н., Арушанова Е.С. Векторы как фактор изменения видового состава и расширения крута растений-хозяев вирусов плодовых культур // Тез. докл. Всерос. совещ.: Актуальные

вопросы теории и практики )ащиты растений в условиях мнотукладноеш 1,.ч . |99Х -с 261-263 ,

7 Keldish М , Pomazkov Y , Arushanova L , Cervyakova О Vectors as a factor in widening host rangt for viruses ol Iruit trees and small fruit crops (some factors of virus epidemiology)// Acta horticulture -472 - v I -p 23-26

8 Вишниченко В К , Арушанова С С Ке пыш М А Калошин А А Занриев С К Сероло! ически роист венный X вирусу шалота (XBUI) гибкий нитсвилныи вирус, не принадлежащий к роду Allium // Докл PACXII -1994 -№2 - с 23-26

Объем 1 5 п л

Заыз 342

Тираж 100

Типография Издательства ЧСХА 127550, Москва И 550, Тимирязевская у 1, 44