Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Вирусные и нематодные инфекции и совершенствование мер борьбы с ними на картофеле

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Саеид Насроллах Неджад Сафар

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вредоносность вирусов картофеля.

1.2. Характеристика некоторых вирусов и вызываемых ими болезней на картофеле.

1.3. Способы распространения вирусов картофеля.

1.4. Методы диагностики вирусов.

1.4.1. Иммуноферментный анализ (ИФА).

1.4.2. Иммуноблотинг.

1.4.3. Полимеразная цепная реакция.

1.4.4. Электронно-микроскопические методы исследований.

1.4.5. Диагностика вирусов с использованием растений-индикаторов (биологическое тестирование).

1.5. Основные направления борьбы.

1.5.1. Значение селекции в защите картофеля от вирусов и ее перспективы.

1.5.2. Получение трансгенных растений, устойчивых к вирусной инфекции

1.5.3. Химический метод борьбы с переносчиками вирусной инфекции.

1.5.4. К вопросу разработки биологического метода защиты картофеля.

1.5.5. Преиммунизация растений.

1.5.6. Агротехнические мероприятия.

1.6. Методы оздоровления растений картофеля от вирусных болезней.

1.6.1. Термотерапия, как метод оздоровления от вирусов.

1.6.2. Оздоровление картофеля от вирусов методом культуры ткани.

1.6.3. Декапитация и регенерация верхушек как методы оздоровления картофеля от вирусных болезней.

1.6.4. Химиотерапия в системе защиты картофеля от вирусных болезней.

ГЛАВА 2. МЕТОДИКА И МАТЕРИАЛ.

2.1. Место сбора материала.

2.2. Почвенно-климатические условия Московской области.

2.3. Материалы и методы исследований.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Изучение видового состава вирусов и нематод и их ассоциативного комплекса на различных сортах в период хранения и на вегетирующих растениях картофеля.

3.1.1. Оценка степени инфицированности вирусами и их ассоциациями различных партий и сортов семенного картофеля.

3.1.2. Оценка инфицированности различных сортов картофеля вирусами, нематодами и их ассоциациями на вегетирующих растениях.

3.1.3. Симптомы заболеваний, вызванных вирусами и их комплексами на картофеле.

3.1.4. Видовой и родовой состав нематод выявленных в ризосфере картофеля.

3.2. Оценка вредоносности моно- и смешанных вирусных инфекций на картофеле.

3.3. Диагностирование некоторых вирусов картофеля с использованием полимеразной цепной реакции и оценка ее эффективности и метода ИФА.

3.4. Разработка экологически безопасных мер борьбы с вирусами и нематодами при выращивании картофеля.

3.4.1. Изучение нематицидной активности некоторых экологически безопасных способов дезинфекции почвы и клубней картофеля в вегетационном опыте.

3.4.2. Изучение влияния антистрессовых препаратов на инфицированность растений комплексом вирусов и нематод и урожай картофеля.

3.4.3. Оценка антивирусной активности и биологической эффективности некоторых экологически безопасных биопестицидов и физиологически активных веществ.

3.4.4. Оценка влияния экологически безопасных препаратов на вегетативную продуктивность и урожай растений картофеля.

ВЫВОДЫ.

Предложения производству.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Вирусные и нематодные инфекции и совершенствование мер борьбы с ними на картофеле"

Картофель является основной пищевой, кормовой и технической культурой во многих странах мира, характеризуется большой пластичностью, адаптивностью и потенциальной продуктивностью. Его выращивание сосредоточено преимущественно в северном полушарии, хотя родина картофеля - Южная Америка. Картофель обладает богатым содержанием углеводов, витаминов и минеральных веществ, поэтому данная сельскохозяйственная культура является основной пищевой культурой человека и животных и ценным сырьем для пищевой промышленности (Жуковский, 1964). Получение высоких урожаев картофеля предусматривает снижение потерь от вредителей и болезней. На данной культуре широко распространены вирусные, грибные, бактериальные болезни и нематоды, включая карантинные объекты.

Из различных фитопатогенов картофеля особое значение имеют вирусы и нематоды, нередко составляющие взаимосвязанный фитопатокомплекс. На картофеле в странах бывшего СССР выявлен 21 вид ультрамикроскопических возбудителей, в том числе 16 вирусов, 4 фитоплазменных возбудителя и 1 вироид (Шмыгля, 1985, 1995). В настоящее время в мире известно более 30 вирусов, поражающих картофель и вызывающих снижение его урожая от 10 до 80 % (Амбросов, 1975, Шпаар, Шуманн, 2001). В последние годы широкое распространение получили почвенные вирусы и, в первую очередь, передаваемые нематодами, которые отличаются большой вредоносностью на различных культурах. На фоне, грибных, бактериальных и вирусных болезней значительный ущерб картофелю приносят паразитические нематоды, среди которых особо опасны цистообразующие (Heteroderidae), включающие два карантинных вида, стеблевая и клубневая нематоды (Ditylenchus) и многочисленные представители корневых эктопаразитических перфораторов, включая нематод переносчиков вирусов семейств Longidoridae и Trichodoridae. В последние годы наблюдается прогрессирующий характер фитопаразитарного загрязнения фитоценозов России, нередко приобретающий характер эпифитотии, при этом особое значение приобретают 5 ассоциативные взаимоотношения различных групп фитопаразитов, как это было показано на примере изучения нематод семейства Longidoridae и Trichidoridae и переносимых ими непо- и тобравирусов (Романенко, 1993, 1994, 1996; Romanenko, 1996). Для разработки оптимальной интегрированной и экологически безопасной системы защиты картофеля от болезней и вредителей в условиях интенсивных технологий, необходимо в первую очередь знание видового состава возбудителей и фауны переносчиков, методов диагностики и прогноза появления и распространения потенциально опасных возбудителей и переносчиков, их взаимоотношений как между собой, так и с представителями полезной микрофлоры и фауны, что на сегодняшний день является наиболее перспективным в области защиты растений.

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Саеид Насроллах Неджад Сафар

ВЫВОДЫ

1. Установлена методом серологического тестирования (ИФА) зараженность клубней семенного картофеля следующими вирусами: X, Y, М, S, L, TRV, выявлена степень их доминирования; смешенная инфекция на всех обследованных сортах представлена 2 и более компонентами, наиболее распространенными из которых были: M+L, X+M+L, TRV+M+S+L, X+L, X+M+S+L, TRV+L.

2. Методом ИФА были выявлены вегетирующие растения картофеля зараженные 13 вирусами; кроме X, Y, М, S, L и TRV обнаружены еще 7 вирусов, неспецифичных для клубневой инфекции, включая AMV, TBRV, TomRSV, TRSV, TNV, CMV, TMV. Наиболее распространенными комплексами вирусов на вегетирующих растениях картофеля были следующие: X+S, X+S+M, X+S+M+L, X+TRV, X+AMV, AMV+TRV+L. Моноинфекция отмечена редко, лишь для отдельных вирусов.

3. Степень инфицированности обследованных растений картофеля вирусами различна. Наиболее пораженными были сорта картофеля - Орбита, Невский Бербанк. Слабопоражаемым был сорт Романо и среднепоражаемыми вирусами были сорта Истринский, Майдас.

96

4. Установлены оптимальные режимы при ПЦР-диагностировании вирусов картофеля групп карла (М и S) (денатурация 94°-1 мин, отжиг праймеров 45°-мин, элонгация 72°-2 мин.) и потеке (вируса X) (денатурация 94°-1 мин, отжиг праймеров 52°-4 мин, элонгация 12°-3 мин). Выявлена идентичность результатов ПЦР и ИФА методов диагностики фитовирусов.

5. В посадках картофеля Москвы и Московской области выявлены 4 вида нематод, известных как переносчики вирусов: Longidorus elongatus, Xiphinema diversicaudatum (семейство Longidoridae, отряд Dorylaimida) и Trichodorus similes и Paratrichodorus teres (семейство Trichodoridae, отряд Triplonchida). Численность векторов в исследованных экосистемах варьировала от 1 до 40 %. Уровень сопряженности распространения вирусов и нематод векторов для изучаемых экосистем составляет 68-80 %.

6. В обследованных посадках, в прикорневой почве растений картофеля обнаружены представители 42 родов нематод, в том числе паразитических -11 (Globodera rostochiensis, Pratylenchus, Paratylenchus, Helicotylenchus, и др.), свободноживущих - 13 (преимущественно роды отряда Dorylaimida), хищных - 4 (Mononchus и др.), микогельминты - 4 (Tylenchus, Aphelenchus и др.) и сапробионты - 10 (преимущественно представители отряда Rhabditida).

7. Растения картофеля сорта Романо, пораженные вирусом TRV и его комплексом с другими вирусами значительно уступали по высоте (до 70 %), побегообразованию и урожайности ( в 2-4 раза) здоровым растениям.

8. В условиях вегетационных опытов установлена значительная нематицидная активность исследуемых штаммов бактерий-антагонистов (Pseudomonas fluorescens, AR-33, Bacillus thuringiensis 86, 132, Bacillus polymixa, A-l, Enterobacter sp., 49) и гриба - антагониста Trichoderma virida, штамм R. на комплекс наиболее опасных паразитических видов нематод (Globodera rostochiensis, Longidoridae, Trichodoridae и др.)

9.Установлено высокое нематицидное действие олигофуростанозида и иммуноцитофита на нематод-переносчиков непо- (AMV) и To6pa-(TRV) вирусов: Xiphinema diversicaudatum и Paratrichodorus teres ( снижение их

97 численности в ризосфере и количества инфицированных ими растений) при обработке клубней и надземных органов картофеля.

10. Испытываемые препараты (иммуноцитофит, олигофуростанозид, циркон, Ф760, Ф1153, нарцисс, планриз, триходермин, никфан) полностью не элиминировали вирусы в тканях растений картофеля, однако существенно снижали ихсодержание. Выявлена высокая антивирусная активность у препарата нарцисс. Препараты различались по действию на конкретные вирусы - отмечен наиболее низкий уровень снижения содержания вируса погремковости табака (TRY) и самый высокий - в случае вируса X картофеля. Установлено высокое антивирусное действие олигофуростанозида и иммуноцитофита на непо- (AMY) тобра- вирусов (TRV).

11. Большинство исследованных препаратов (кроме циркона и никфана) оказывали положительное влияние на рост, образование побегов и урожай картофеля сортов Романо и Орбита пораженных комплексом вирусов. При обработке клубней и вегетирующих растений картофеля в 1,5-2 раза увеличивались рост и побегообразование растений, а урожай - в 2-3 раза.

Предложения производству

1. Рекомендовать провести широкие производственные испытания препарата нарцисс от комплекса вирусов поражающих картофель и препарата - олигофуростанозид (0,0001 % по с.в.) для подавления активности непо- и тобра- вирусов и нематод их переносчиков - лонгидорид и триходорид путем обработки клубней и опрыскивания растений. 2. В качестве устойчивого к вирусам рекомендуется сорт картофеля Романо.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Саеид Насроллах Неджад Сафар, Москва

1. Амбросов А. Л. Вирусные болезни картофеля и меры борьбы с ними. -Минск.: Урожай, 1975. 208 с.98

2. Аршава Н.В., Вишниченко В.К. и др. Идентификация компонентов вирусного комплекса, персистирующих в культурных растениях рода Allium // Сельскохозяйственная биология. 1996, №5, 105-111.

3. Атабеков И. Г. Биотехнологические методы в создании безвирусного растениеводства в СССР // Вестник АН СССР. М, 1988 № 6 - С. 19-25.

4. Бабоша А.В. и др. Ингибирование серологических реакций фитовирусов белками и его количественная оценка иммуноферментным анализом // Физиология растений. 1990. Т.37. Вып. 66 1154-1161.

5. Бирюзова В.П. Электронно- микроскопические методы исследования биологических объектов. М. 1963.

6. Блоцкая Ж.В. Вирусы картофеля. -Минск: Урожай, 1989, 72 с.

7. Бобкова А.Ф., Чирков С.Н. Применение ИФА для диагностики вирусных заболеваний растений // Сельскохоз. биология. 1983, №5, 32-36.

8. Богоутдинов Д.З., Кинчарова М.Н., Карачанова Б.В. Изучение антивирусной активности некоторых веществ на томатах. Тез. док.конф. N 41, 1997, С. 139140.

9. Боровая В.П., Иванова Т.С. Влиянте биопрепаратов на продуктивность картофеля. // Защита и карантин растений, N 11,2001, С. 19.

10. Борисов Б.А., Коновалова Г.Н., Субботин С.А., Эшназаров К. Перспективное направление в биологической борьбе с нематодами. Ж. Защиты растений. 1992. №7. с. 21-22.

11. Борьба с вирусными болезнями растений. Пер. с нем. Г.И. Лойдиной. Ред. И.Г. Атабеков и В.А. Шмыгля. М. - Агропромиздат, 1986, 480 с.

12. Вайшер Б., Браун Д.Д.Ф. Знакомство с нематодами. Общая нематология. Учебник для студентов. Pensofit and Scientific Press Ltd. София-Москва. 2001. 206 с.

13. Вартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция // Молекулярная биология. М. Наука. 1991. Том 25. Вып. 4, с. 926-936.

14. Н.Власов Д.Ю., Власов Ю.И., Теплоухова Т.Н., Ларина Э.И. Методические указания по векторной передаче вирусов, поражающих сельскохозяйственные культуры//Л., ВИЗР, 1990, с. 22-42.

15. Власов Ю.И. Вирусные и микоплазменные болезни растений. -М.: Колос, 1992.-С.207.99

16. Власов Ю.И., Ларина Э.И. сельскохозяйственная вирусология. М.: Колос, 1982-239с.

17. Гайдук П. И. Изучение антивирусного действия некоторых химических соединений с целью защиты семенного материала картофеля от вирусных болезней: Автореф. дисс. канд. биол. наук. -М., 1992. 18с.

18. Ганшина Е. Влияние вирусной инфекции на урожайность и крахмалистость клубней картофеля./ Вирусные болезни сельскохозяйственных растений и меры борьбы с ними. Л.: ВАСХНИЛ, 1978, С.120-121

19. Гар К.А. Методы испытания токсичности и эффективности инсектицидов. -М. Изд. с.х. лит., журн. и плакатов, 1963. 288 с.

20. Гиббс А., Харрисон Б. Основы вирусологии растений. М. Мир. 1978, 429 с.

21. Гнутова Р.В. Иммунологические исследования. Фитовирусология. М., "Наука", 1985, с. 182.

22. Егоров A.M. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. М. Высшая школа, 1991, 228 с.

23. Жукова М.И. Токсикация растений против тлей-переносчиков вирусов картофеля. Экол. экон. основы усовершенствования интегр. систем, защиты растений от вредителей, болезней и сорняков, Минск, 1996, 4.2 -С. 14-15.

24. Жуковский П.М. Культурные растения и их сородичи. Систематика, география, цитогенетика, экология, происхождение, использование. Л. отделение изд-ва "Колос". 1964. 792с.

25. Защита растений от болезней. Ред. Шкаликов В.А.- М.: Колос, 2001,245с.

26. Зыкин А.Г. Вирусные болезни картофеля. Л., "Колос" ленингр. отделение, 1976. 152с.

27. Зыкин А.Г. Выращиваем безвирусный семенной картофель // Защита растений. 1978. - № 1. - С.26-27.

28. Камераз А. Я., Яшина И. М., Склярова Н. И. Генетика устойчивости картофеля к наиболее распространенным болезням // Генетика и селекция100болезнеустойчивых сортов культурных растений. М.: Наука, 1974. С.247-268.

29. Касс Х.А. Тли переносчики вирусных болезней картофеля в Эстонской ССР и меры борьбы с ними: Автореф. дисс. канд. с-.х. наук - Л., 1980. 16с.

30. Келдыш М.А., Помазков Ю.И. Вирусные и микоплазменные болезни древесных растений. М. Наука. 1985. - 133 с.

31. Кирюхин В., Гамева Ф., Парфенова А. Биосинтез и качество крахмала при заражении картофеля вирусами Ж. картофель и овощи, №9, С.39, 1971.

32. Кирьянова Е.С., Кралль Э.Л. Паразитические нематоды растений и меры борьбы с ними. Л. "Наука", 1969, Т.1, 443 с.

33. Курт Л.А. Действие продуктов обмена гриба Aspergillus niger van Tieghen на личинок галловой нематоды. // Бюл. Всес. Ин-та гельминтол., 1975, вып. 15, с. 84-87.

34. Кутсаманова И.Н. Совершенствование приемов защиты картофеля от вирусных болезней. Автореф. канд. биол. н. М. МСХА. 1999. 16 с.

35. Кучумов А.П., Князев В.А. Источники патерь картофеля и борьба с ними М., 1978, С.15-18.

36. Малахов В.В., Рыжиков К.М., Сонин М.Д. Система крупных таксонов нематод. Подклассы, отряды, подотряды. Зоологический ж. М. "Наука". 1982. Т. LXI, вып. 8, с. 1125-1134.

37. Мартынова Г.П. Влияние триходермина на поражение растений корневыми гнилями и урожайность ячменя на северо-востоке РФ. Автореф. дис. к. б. н. М. 1998. 24с.

38. Мацкевич Н.В. Нематофагин в культуре шампиньона. Ж. Защита и карантин растений. 1997. № 7, с. 18.

39. Методические рекомендации по применению иммуноферментного анализа для диагностики вирусов картофеля (сост. А.Г. Атабеков)ю М. Колос, 1985. -35 с.

40. Мехтиева Н.А. Хищные нематодофаговые грибы. Баку. "Наука" . 1979. 395с.101

41. Московец С.Н., Горбаренко Н.И., Жук И. П., Использование метода культуры апикальных меристем в сочетании с пониженными температурами для оздоровления картофеля от мозаичных вирусов // с.-х. биология. 1973. - Т.8. - № 2. - С.271-275.

42. Одинец А.Г. Сравнительное испытание иммунологических методов для массовой диагностики вируса крапчатости гвоздики // Сельхоз. биология. 1983. №5, 37-41.

43. Одинец А.Г., Романенко Н.Д., Томилин А.А. Применение иммуноэлектронной микроскопии при определении полевой вирофорности нематод переносчиков неповирусов. Тез. докл. науч. конф. ВОГ. М. 1989, ч. 2, с 35.

44. Парамонов А.А. Основы фигогельминтологии. Изд-во АН СССР, 1962, т.1, 476 с.

45. Парамонов А.А. Основы фитогельминтологии. М., Наука. 1964. Т. 2. 445с.

46. Пересыпкин В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология. М.: Агропромиздат, 1989.

47. Помазков Ю.И., Келдыш М.А. Методические указания по защите плодовых и ягодных культур в питомниках от повторного заражения вирусными и микоплазменными заболеваниями. М. Колос. 1979, 16 с.

48. Простяков А.П., Бобкова А.Ф. МВХО //1982, Т. 27, №4,463-467.

49. Реунов А.В., Реунова Г.Д., Жилина Т.Т. Ингибирование размножения вируса табачной мозаики и Х-вируса картофеля кинетином в листьях локально поражаемых, растений-хозяев // Известия АН СССР, Биология. 1977. - № 4. -С.621-623.

50. Романенко Н.Д. Нематоды семейства Longidoridae-переносчики неповирусов в СССР // Всесоюзное совещание по нематодным болезням с.-х. культур. Воронеж, 1987, с. 46-54.

51. Романенко Н.Д. Фитогельминты-вирусоносители семейства Longidoridae. М., "Наука", 1993,284с.

52. Романенко Н.Д. Фитогельминты-вирусоносители семейства Longidoridae, их взаимосвязь с неповирусами и разработка научных основ борьбы с ними на плодово-ягодных культурах и винограде. Док. дисс. в форме науч. доклада. М., 1994, 84с.102

53. Романенко Н.Д. Изучение фауны нематод-вирусоноситедей семейств Longidoridae и Trichodoridae // Систематика, таксономия и фауна паразитов // Материалы конференции. М., 22-24 октября, 1996, с. 103-104.

54. Романенко Н.Д. Изучение паразито-хозяинных взаимоотношений нематод, вирусов, грибов и бактерий в различных биоэкосистемах основа стратегии биологической защиты растений. В кн.: «Актуальные проблемы общей паразитологии». Наука. М. 2000. 159-174.

55. Самеди А. Афидофильные вирусы картофеля и усовершенствование мер борьбы с ними. Автореф. канд. биол.н. М. -РУДН. 2000. 18 с.

56. Смирнов В.В., Киприанова Е.А. Бактерии рода Pseudomonas продуценты новых антибиотиков // Механизмы биосинтеза антибиотиков. М., "Наука", 1986, с. 149-160.

57. Смирнов В.В., Киприанова Е.А. Бактерии рода Pseudomonas. Киев, "Наукова думка", 1990,264с.

58. Соловьева Г.И. О роли фитонематод в инокуляции патогенной микрофлоры. Труды ГЕЛАН, "Наука", М„ 1965, Т. XVI, с. 120-124.

59. Сопрунов Ф.Ф. Хищные грибы-гифомицеты и их применение в борьбе с патогенными нематодами. Изд. АН Турк. ССР, Ашхабад, 1958, 366с.

60. Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению в Российской Федерации. Приложение к журналу "Защита и карантин растений." № 5. Справочник. "Колос", М., 1998-2001.

61. Субботин А.С. Паразитические бактерии из рода Pasteuria новые биологические агенты в борьбе с нематодами. Защита растений. М., 1992, с. 25.

62. Суменкова Н.И. О методах приготовления препаратов нематод для морфо-таксономических исследований // Фитогельминтологические исследования. М., "Наука", 1978, с. 127-136.

63. Твердюков А.П., Никонов П.В., Гощенко Н.П. Биологический метод борьбы с вредителями и болезнями в защищенном грунте (Справочник). М., 1993, 159с.

64. Теплоухова Т.Н., Ларина Э.И. Роль нематод в эпифитотиологии вирусных инфекций. М. 1991, 126-127.

65. Трофимец Л.Н. Вирусные болезни картофеля. М.: Агропромиздат, 1990.-78с.103

66. Трофимец JI. Н. Метод культуры тканей в семеноводстве картофеля // Тр. ВНИИКХ. 1977. - В. 30. - С.3-11.

67. Трофимец А.И., Замотаев А.И., Варицев Ю.А., Князева В.П., Герасимова К.Ф., Усков А.И., Бабоша А.В., Егорова В.П., Русинова Е.Я. Иммуноэлектронный метод диагностики. Защита растений. - 1985. - 11. -С. 8-10.

68. Хлопцева Р.И. В ожидании большого скачка. Защита растений. М., 1992., с. 17.

69. Чесноков И. Г. Болезни вырожденного картофеля в СССР и борьба с ними. -JL М.: Сельхозиздат, 1961.

70. Шевелухи B.C. Сельскохозяйственная биотехнология. М.: 1998. 416с.

71. Шпаар Д. Новый штамм вируса Y картофеля. Защита растений, 1995, №6. -С.43.

72. Шпаар Д., Шуманн П. Борьба с вирусными и вироидными болезнями в Германии. //Защита растений, 2001, N 5, С. 15-17.

73. Шмыгля В.А. Как оздоровить посадочный материал картофеля. // Защита растений, 1985, N2, С. 19-20.

74. Шмыгля В.А., Абрамова О.В. Меры диагностики вирусов в селекции и семеноводстве картофеля. Метод, указания дляФПК. М.: ТСХА, 1985, 27 с.

75. Шмыгля В.А. Методы диагностики вирусов в селекции и семеноводстве картофеля. Метод, указания для АПК. М. 1987,27 с.

76. Шмыгля В.А. Как оздоровить посадочный материал картофеля. Защита растений, 1995, №2. С. 19-20.

77. Шмыгля В.А., Кинякин Н.Ф., Кутсаманова И.Н. Приемы оздоровления картофеля от вирусных болезней//Изв. ТСХА, 1997, вып.,4 -С 133-145.

78. Allen W.R., Ebsary В.А. Transmission of raspberry ringspot, tomato black ring and peach rosette mosaic viruses by an Ontario population of Longidorus elongatus. Canadian Journal of Plant Pathology, 1988, 10, pp. 1-5.

79. Clark M.F., Adams A.N. Characteristics of the microplate method of Enzyme -Linked Immuno Sorbent Assay for the detection of plant viruses // J. Gen. Virol, 1977, v. 34, N 3, pp. 475-483.

80. Erlich H.A. PCR technology // N.Y. Snjecton Press. 1989.

81. Flegg J.J.M. Extraction of Xiphinema and Longidorus species from soil by a modification of Cobb's decanting and Sieving technique // Ann. Appl. Biol. 1967, V. 60, P. 429-437.

82. Hecht M., Hunnius W. Detection of potato leaf roll virus and potato viruses M, S, X and Y by dot immunobinding on plain paper.// Potato Res., vol 31, 1981, P.367-373.

83. Henson J. M., French R. The polymerase Chain reaction and plant disease diagnosis //Annal Reviev of Phytopathology. 1993, vol. 31, 81-109.

84. Hewitt W.B., Raski D.J. Nematode vectors of plant viruses. Biol. Trans. Dis. Agents. N.Y.: L. Acad, press. 1962. P. 63-72.

85. Hoof H.A. Trichodorus teres a vector of rattle virus // Netherlands Journal of Plant Pathology. 1964, v. 70, p. 187.

86. Hoof H.A. Transmission of tobacco rattle virus by Trichodorus species // Nematologica. 1968, v. 14, pp. 20-24.

87. Janse J.D. New methods of diagnosis in plant pathology perspectives and pitfalls // Bui. OEPN. 1995, vol. 25, N1-2, 5-17.

88. Joseph B.M., Garnsey S.M., Gonsalves D. et al. The use of enzyme-linked immunosorbent assay for detection of citrus tristeza virus // Phytopathology, 1979, vol. 69, N2,190-194.

89. Kaminska M. Virus infection of lilies in Poland // Phytopathologia Polonica. 1996, N11,51-58.

90. Kassanis В., Govier D. The role of the helper virus in aphid transmission of potato aucuba mosaic virus C.S. Cener. Virology, 1971, 13, 221-223.

91. Kassanis В., Govier D.F. Evidence that a component other then the virus particle is needed for aphids transmission of potato virus y. Virology, 1974, V. 57(1), p.221-223.

92. Putnam M. L. Evolution and selected methods of plant disease diagnosis // Crop protection. 1995, vol. 14, N6, 517-525.

93. Romanenko N.D. Nematodes of the famaly Longidoridae (Nematoda, Dorylaimida) as veators of the nepo-viruses in the former USSR // Russian J. of Nematology, 1996, v. 4, N 1, p. 94.

94. Schuster G. Antiphytovirale verbindungen mit Guanidinstrukter.// Phytopatol., Bd. 103, H. 1,1982, S. 77-86.

95. Schuster G. Further progress in the development of antiviral substances.// Plant Virology. Proc. of 9-th conf.of Czechoslovak plant Virologiest, Brno, 1988.

96. Tamada Т., Harrison B.D. Application of enzime linked immonosorbents assay to the detection of potato leafroll viruses in potato tubers // Plant Disease. 1980. Vol. 96, N1,67-78.

97. Taylor C.E., Brown D.J.F. Nematode vectors of plant viruses // Cab. International, Wallingford, UK, 1997, 286pp.

98. Taylor C.E., Robertson W.M. Location of tobacco rattle virus in the nematode vector, Trichodorus pachydermus Seinhorst // J. Gen. Virol., 1978, v. 6, pp. 179-182.

99. Wyss U. Feeding of Trichodorus, Longidorus and Xiphinema // In: "Nematode vector plant viruses." London-New York, 1975, pp. 203-221.106