Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ РАННЕГО РАЗВИТИЯ НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ ПРИ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯХ В ОПТИЧЕСКОМ ДИАПАЗОНЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

ВАК РФ 03.00.30, Биология развития, эмбриология

Автореферат диссертации по теме "ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ РАННЕГО РАЗВИТИЯ НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ ПРИ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯХ В ОПТИЧЕСКОМ ДИАПАЗОНЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ"



На правах рукописи

Медведева Анна Александровна

ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ РАННЕГО РАЗВИТИЯ НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ ПРИ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯХ В ОПТИЧЕСКОМ ДИАПАЗОНЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

03.00.30 - биология развития, эмбриология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА 2008

Работа выполнена на кафедре эмбриологии Биологического факультета Московского государственного университета имени М. В. Ломоносова

Научный руководитель: доктор биологических наук

Бурлаков Александр Борисович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Дубовая Татьяна Клеониковна (Российский государственный медицинский университет)

доктор биологических наук, профессор Козлов Юрий Павлович (Российский университет дружбы народов}

Ведущая организация:

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ БИОФИЗИЧЕСКИЙ ЦЕНТР им. А.И. БУРНАЗЯНА ФМБА РОССИИ

Защита диссертации состоится

апреля 2008 года в 15 часов 30 минут на заседании диссертационного совета Д 501.001.52 при Московском государственном университете имени М. В. Ломоносова ло адресу: 119992, Москва, Ленинские горы, д.1, корп. 12, Биологический факультет, ауд.

С диссертацией можно ознакомиться факультета МГУ имени М. В. Ломоносова

Автореферат разослан 21 апреля 2008 года

в библиотеке Биологически -

Ученый секретарь диссертационного совета:

кандидат биологических иду» Калистратова Елена Николаева

Актуальность темы

Одним из отражений химических энергетических процессов, происходящих в клетках, является сверхслабое излучение (ССИ), присущее всем биологическим системам. Еще в 1923 году А.Г. Гурвич сообщил об обнаруженном им очень слабом «ультрафиолетовом излучении, сопровождающем экзотермические химические реакции, идущие как в различных живых тканях, так и in vitro». По концепции А.Г. Гурвича и его последователей, излучение представляет собой специфический фактор, стимулирующий митозы, поэтому оно получило название митогенетического (Гурвич, Гурвич, 1945). В работах А.Г. Гурвича и сотрудников впервые было показано дистантное, бесконтактное нехимическое влияние живых организмов друг на друга. Затем Ж. и М. Магру (Magrou et al., 1931; Magrou, 1932) показали, что дистантные воздействия бактериальных культур {стафилококк, Bact. tumefaciens) и молочнокислых ферментов на половые продукты и на оплодотворенные яйцеклетки морских ежей угнетали их последующее развитие и способствовали появлению аномалий, в то время, как при дистантном взаимодействии бактериальных культур с эмбрионами комаров наблюдали, наоборот, эффект положительной биокоррекции — ускорение вылупления личинок комаров (Magrou et al., 1931).

В настоящее время наличие дистантных взаимодействий убедительно продемонстрировано на клеточных и органных культурах животных (Казначеев и др., 1981; Казначеев, Михайлова, 1981; Молчанов, 1985; Moltchanov, Golantzev, 1995), на растительных тканях (семена, почки, листья, древесная кора) (Кузин и др., 1994; Кузин, 1997, 2002; Будоговский, 2004; Бурлаков и др., 2008), на насекомых (Бурлаков и др., 2008), на волосах и крови человека (Voeikov, Novikov, 1997; Xun Shen et al., 1999; Кузин, 2002), у бактерий (Николаев, 1992; Wainwright et al., 1997; Nikolaev, 2000; Trushin, 2003; Nikolaev et al., 2006), на эмбрионах низших позвоночных (Бурлаков н др., 1999, 2000, 2005; Доронина и др., 2002; Burlakov, 2000; Бурлакова и др., 2000,2001, 2002; Володяев, Белоусов, 2007 и др.).

Исследование дистантных не химических влияний живых организмов друг на друга, основанных на их способности излучать и реагировать на сверхслабые излучения в оптическом диапазоне, в настоящее время вступило в новую фазу, поскольку появляется возможность объективной приборной регистрации биоизлучений. В последнее десятилетие сверхслабые излучения разной длины волны от биологических объектов разного уровня организации были непосредственно зарегистрированы с помощью фотоэлектронных умножителей (ФЭУ) (Moltchanov et al., 1995; Novikov et al„ 1995; Xun Shen et al., 1995; Белоусов и др., 1997, 2000, 2002, 2003; Burlakov, 2000; Орел и Дзятковская, 2000; Beloussov, 2002, 2006; Orel et al., 2004; Белоусов, Володяев, 2006; Загускин, 2007; Володяев, Белоусов, 2007 и др.). Излучение биообъектов - биофотонная эмиссия, по ряду признаков, обладает особыми квантовыми свойствами: высокой степенью когерентности, свойствами т.н. "сжатого света" и др. (Рорр, Ke-hsuch, 1993; Белоусов и др„1997; Bajpai, 1999; Рорр et al„ 2002; Рорр, 2006 и др.).

Выявлена непосредственная связь интенсивности сверхслабых излучений с биологической реакцией взаимодействующих объектов. Показано, что изменение физиологической активности (секреция в куг ьтуре

имени К.Л. Тимирязева ЦНБ им«нн Н.И. Железно^.?

Фонд научной литературы № —

гормональной стимуляции) сопровождается увеличением интенсивности сверхслабого свечения, что в свою очередь стимулирует физиологическую активность дистантно взаимодействующей с ней интактной культуры (Moltchanov, Golantzev, 1995). С другой стороны, анализ частотно-амплитудных характеристик сверхслабого излучения эмбрионов вьюна показал их изменения при дистантных взаимодействиях (Белоусов и др., 2002, 2003). Большинство исследователей (Молчанов, 1985; Кузин и др., 1987; Popp, Ke-hsuch, 1993; Кузин, 1997, 2002; Будоговский, 2004; Бурлаков и др., 1999, 2002, 2003; Moltchanov, Golantzev, 1995; Voeikov, Novikov, 1997; Белоусов и др., 1997; Bajpai, 1999; Popp et al., 2002; Popp, 2006 и др.) предполагают электромагнитную природу эффекта; Ю.А. Николаев (1992) допускает участие акустических волн.

Однако, возможности приборов позволяют вычленять только определенный измеряемый параметр излучения, тогда как биоиндикация охватывает весь информационный спектр. До настоящего времени механизмы дистантного взаимодействия остаются неизвестными. Электромагнитное излучение от большинства биологических объектов имеет очень низкую интенсивность. По оценке Ф.-А. Поппа (Popp, 1992), мощность электромагнитного взаимодействия биологических объектов лежит в диапазоне 10-17—10-15 Вт (эквивалентно ~100—-103 квант/сек в диапазоне ближний УФ — ближний ИК). Как столь слабый сигнал может оказывать специфическое действие (стимуляцию клеточных делений или физиологических функций, изменение скорости развития и появление аномалий развития) остается дискуссионным вопросом. Не смотря на это, феномен сверхслабого излучения биологических объектов, с одной стороны, а также его участия в регуляции процессов жизнедеятельности, с другой стороны, в настоящее время все больше привлекает исследователей, переводя изучение самоорганизации биологических систем на новый уровень.

Целью данной работы является изучение феномена оптического взаимодействия эмбрионов низших позвоночных и его проявление при изменении оптических характеристик среды.

Задачи, связанные с решением поставленной цели:

• Анализ параметров эмбрионального развития зародышей низших позвоночных после их взаимодействия в оптическом диапазоне:

а) изменения скорости развития

б) процента погибших и аномально развивающихся зародышей

• Оценить интенсивность свободно-радикальных реакций в эмбрионах вьюна Misgurnus fossil is в процессе оптического взаимовлияния

• Исследовать эффект дистантного взаимодействия при изменении оптических параметров среды между взаимодействующими объектами с помощью:

а) интерференционных светофильтров

б) прецизионных оптических систем (призменные уголковые световозвращатели)

• Проследить отдаленные последствия 24-х часового оптического контакта зародышей вьюна по;

а) динамике вылуплен ия, темпам роста предличинок и личинок

б) темпам становления основных звеньев репродуктивной системы (гипофиз, гонада)

Положение, выносимое на защиту

Оптический контакт групп эмбрионов низших позвоночных может оказывать влияние на их дальнейшее развитие.

Научная новизна и практическая значимость работы

Показано, что оптический контакт групп разновозрастных зародышей низших позвоночных (Misgumus fossil is и Xenopus laevis) может приводить к изменению темпа развития, процента эмбриональной смертности и появлению аномально развивающихся особей в группе. Наблюдаемые эффекты стадиоспецифичны. Последствия 24-х часовых оптических взаимовлияний сохраняются на протяжении последующего онтогенеза, что прослежено по изменению темпов вылупления, роста и становления основных звеньев репродуктивной системы (гипофиза и гонады). Впервые показано достоверное изменение интенсивности свободно-радикальных реакций в эмбрионах вьюна в процессе оптического контакта. При изменении оптических характеристик среды, через которую взаимодействуют группы эмбрионов, с помощью интерференционных светофильтров с максимумами пропускания в дальнем УФ (372 им, 379 нм) и сине-зеленой ( 546 нм) областях спектра наблюдается замедление темпов развития зародышей, а ускорение развития • в ближнем УФ (386 нм), фиолетовом (401 нм, 405 нм), красном (628 нм) н ИК <1000 нм) диапазонах. Благодаря биологическому тестированию, основанному на оптическом взаимодействии групп одновозрастных эмбрионов вьюна, удалось выявить наличие пространственной анизотропии прнзменных уголковых световозвращателей, используемых для оснащения ретро рефлекторных систем космических аппаратов. Установлено, что они оказывают влияние на эффект оптического взаимодействия групп одновозрастных зародышей низших позвоночных в соответствии с их оптическими характеристиками.

Апробация работы

Основные положения диссертации были доложены на Международном форуме по проблемам науки, техники и образования (Москва, Россия, 2004); III Международной конференции «Электромагнитные излучения в биологии» (Калуга, Россия, 2005); Международной конференции «Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных» (Саранск, Россия, 2005); I Съезде физиологов СНГ (Сочи, Россия, 2005); Международном конгрессе «Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине» (Санкт-Петербург, Россия, 2006); XIV, XV научных семинарах МГУ имени М.В. Ломоносова - Система «Планета Земля» (Москва, Россия, 2006, 2007); 8th EMBL International Predoc Symposium «Biology of disease» (Heidelberg, Germany, 2006); The Geilo NATO ASI

School «Evolution from Cellular to Social Scales» (Geilo, Norway, 2007), IX Международной конф, "Оптические методы исследования потоков" (Москва, 2007); 2-ой научн. конф. с участием стран СНГ "Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов" (Петрозаводск, Россия, 2007).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ. Из них 2 - в включенных в перечень ВАК журналах, 8 - в материалах международных конференций, 3 тезисов.

Структура работы

Диссертация изложена на 12S страницах машинописного текста и включает следующие разделы: ((Введение», «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты», «Обсуждение», «Выводы», «Список литературы», «Приложение». В рукописи приведены 25 иллюстраций, 2 таблицы. Список цитированной литературы содержит 154 источника.

Глава I Обзор литературы

ÍJ«- ——^ puvînûTpuûûbTCjt vôÛpbmwnÎïvC Ñ pCÁCl Çinj ' 'O'*""^?t1tff

оптического взаимовлияния биологических систем разного уровня организации. Дгнны; ^р^гггг^и г Л. ргслс,':^: oÎkmuii,

феномен дистантного взаимодействия объектов разного уровня организации, роль свободно-радикальных процессов в биологических системах, чувствительность зародышей в критические периоды эмбриогенеза.

Глава II Материалы и методы исследования

Работа выполнена на вьюне Misgurnus fossil is L. (Cobitidae, Cyprini formes, Teleostei, Pisces), толстолобике Hypophthalmichthys molitrix Val. (Cyprinidae, Cyprin i formes, Teleostei, Pisces) и шпорцевой лягушке Xenopus laevis Daudin (Pipidae, Salientia, Amphibia). Икру получали стандартным методом гормональной стимуляции (Костомарова, 1975). Оплодотворение яйцеклеток осуществляли сухим способом. Инкубацию эмбрионов вьюна производили при температуре 17,8 С", шпорцевой лягушки-при 22-23С", толстолобика-при 28С" в термостате ТСО 1/80 СПУ.

Эксперименты по оптическому взаимодействию зародышей низших позвоночных проводили по разработанной схеме (Бурлаков и др., 1999). В полузакрытые кварцевые кюветы 10x10x40 мм наполовину заполненные водой, помещали по 50 зародышей определенной стадии развития, кюветы для оптического контакта ставили строго одну на другую (рис. 1). Контрольные группы зародышей соответствующих стадий содержали в отдельно стоявших кюветах (рис. 1 а, е). Группы кювет экранировали друг от друга черной фотобумагой. Дополнительными контроля м и служили группы, оптически совмещенные с кюветами без биологического объекта (рис. 1 б, в, г, д). Для экранирования от возможных внешних электромагнитных воздействий на протяжении всего эксперимента 20-24 часа [предварительно выявленное оптимальное время (Burlakov, 2000)} кюветы помещали в закрытый металлический контейнер.

Рис. 1 Схема эксперимента по оптическому взаимодействию зародышей низших позвоночных.

Контроль; а, е - группы зародышей, развивающиеся в отдельно стоящих кюветах; б, в,г,д- совмещенные с кюветами без биологического объекта. Опыт: оптическое взаимодействие зародышей при расположении <гстарших» групп над (А) и под (Б) кюветами с «младшими».

сМладшвя* возрастная группа шСтаршая» возрастная группа

По окончании эксперимента каждую группу зародышей из кювет переносили в отдельные чашки Петри и с помощью бинокулярного микроскопа МБС-9 определяли: (1) стадии развития зародышей; (2) число погибших эмбрионов; (3) число аномально развивающихся эмбрионов. Для определения стадий развития зародышей использовали таблицы нормального развития вьюна (Костомарова,

1975),

Определение интенсивности свободно-радикальных реакций в системе целого организма осуществляли методом привитой сополимеризацни (Козлов, 1970), модифицированного для эмбриональных объектов (рыбы, амфибии) (Мелехова,

1976) и сцинтилляцношгой радиометрии.

Исследование эффектов оптического контакта при помещении в оптические каналы волнового взаимодействия узкополосных (± 3 нм) интерференционных светофильтров (ИС) с максимумами пропускания: 372 им, 379 им, 386 нм, 401 нм, 405 нм, 455 нм, 482 км, 546 нм, 628 нм, 1000 нм, светофильтры помещали между кюветами с зародышами.

Рис. 2 Прохождение световых лучей через УСВ при переносе изображения.

Исследование эффектов оптического контакта при помещении в оптические каналы волнового взаимодействия при змеиных уголковых световозвращателей (УСВ). УСВ представляет собой систему из трех взаимноперпенди кул ярных зеркал, используется в практической космонавтике для оснащения ретро рефлекторных систем космических аппаратов, С его помощью осуществляется параллельный перенос падающего на него излучения (рис. 2), при этом фронты падающих и отраженных световых волн параллельны (в отличие от зеркал, где это условие соблюдается только при нормальном падении). Сечение волнового фронта, падающего на входную грань УСВ, делится его ребрами и их изображениями на шесть секторов.

При падении волны на какой-либо сектор реализуется одна из шести последовательностей отражения ее от каждой из трех граней. При отражении от УСВ доставляющей в секторах 1 и 4 нарушается баланс фаз относительно отраженной волны в секторах 2,3, 5, б, где он одинаковый

{гориэонпльнаяО

Рис. 3 Условное отображение баланса: а — фаз и амплитуд для 5-компоненты отраженного света (горизонтальная поляризация); б -фаз (амплитуды равны) для Р-компоненты отраженного света (<вертикальная поляризация).

(рис. За). Скачек фазы Р-компоненты отраженной волны для парных секторов 2 и 3, ] и 4, 5 и 6 показан на рис. 36.

Экспериментальные группы эмбрионов располагались на расстоянии 1 см от УСВ так, чтобы они могли оптически контактировать между собой только через УСВ, и

изображение одной группы строго проецировалось на другую (рис. 4). Контролем служили эмбрионы из тех же кладок, содержавшиеся в аналогичных условиях в кюветах, изолированных друг от друга, дополнительным контролем - соответствующие группы зародышей в кварцевых кюветах, размещенных непосредственно одна на другой (прямой оптический контакт групп зародышей). В дополнительной серии экспериментов группа зародышей оптически совмещалась через УСВ с кюветой без биологического объекта.

Для анализа отсроченного эффекта 24-х часового оптического контакта исследовали

Рис. 4 Схема постановки опытов по влиянию УСВ на эффект оптического контакта зародышей низших позвоночных

динамику вы клева, сравнение линейных размеров тела и скорости становления основных звеньев репродуктивной системы (гипофиза и гонады). Объекты фиксировали в жидкости Буэна и после стандартной бутанольной проводки заливали в парафин. Фронтальные и сагиттальные срезы толщиной 5 мкм, изготовленные на микротоме Mi crom HM 440Е, окрашивали реактивом Шиффа (PAS-реаюшя), паралъдепщ-фуксином по Гомори-Габу с докрзской азановым методом по Гейденгайну, железным гематоксилином по Гейденгайну. Основные типы тропоцитов гипофиза вьюна идентифицировали на основании топографических, гистохимических и гистофизиологнческнх критериев, полученных нами предварительно на толстолобике. Для этого проанализировано 68 особей вьюна к 130 особей толстолобика. Фотографирование препаратов производили на микроскопе Biosonic Leica DM LS.

Все эксперименты проводили в 5-15 кратной повторности, всего проанализировано 150000 эмбрионов вьюна, 1700 эмбрионов шпорцевой лягушки. Полученные результаты подвергали статистической обработке. Дня выявления различий использовали t-критерий Стьюдента, критерий Пирсона х3 для сравнения эмпирических распределений и критерий Пирсона х1 ДО* сравнения двух альтернативных распределений.

Глава III Результаты исследования и их обсуждение

3.1 Вариабельность эмбрионального развития низших позвоночных при их оптическом контакте. 3.1.1. Оптическое взаимодействие (OB) эмбрионов низших позвоночных. Анализ морфологических эффектов. Темп развития

1.) при небольшой разнице в возрасте в результате оптического контакта эмбрионов на стадиях 1, 2, 3 (начало дробления) с зародышами на стадии 0 (15 мнн после оплодотворения) наблюдали взаимное ускорен не/замедление темпов развития (эффект проявляется в смешении максимумов распределения по стадиям эмбрионов в группе к моменту завершения оптического контакта); синхронизацию/десынхронизацию развития (оценкой служат дисперсии бинормального распределения эмбрионов по стадиям в группе к моменту завершения оптического контакта) в «старших» и «младших» группах. Проявление того или иного эффекта обусловлено природным «качеством» подопытного материала. В соответствии с существующими в рыбоводстве стандартами выделяют три категории качества икры: I (>60% оплодотворения), II (60-30% оплодотворения) и III (<30% оплодотворения). Показатели синхронности развития икринок в группе (доля особей, имеющих сходную Tg), эмбриональной смертности для трех данных категорий различны и при 24х часовом контакте наблюдается усугубление тех особенностей, которые в контрольных группах будут выявлены только спустя 3-5 суток (к моменту вылупления). Возможно, близость стадий развития увеличивает вероятность резонансных эффектов, что сказывается на сходстве параметров развития в «старших» и «младших» группах.

2.) с увеличением разнимы в возрасте эффекты OB в «старших» и «младших» группах зародышей чаще разнонаправпены:

а) 24-х часовое ОВ групп зародышей стадий 5, 6, 7 (морула, ранняя и средняя бластулы) с эмбрионами стадии 0 (15 мин. после оплодотворения) приводит по окончании эксперимента к замедлению темпов развития эмбрионов «младшей» группы (р<0,05) (понижение порядкового номера стадии развития с максимумом распределения на 1-2 стадии), тогда как «старшие» развиваются без отклонений либо с некоторым опережением (р<0,05);

б) взаимодействие эмбрионов 9,10 (конец бластул яцин, начало гаструляции) и более поздних стадий с зародышами стадии 0 (15 мнн. после оплодотворення) приводит к снижению темпов развития «старших» (р<0,01) на фоне нормального либо ускоренного развития зародышей «младшей» группы (р<0,01) (уровни значимости приведены для серии экспериментов с использованием зародышей из икры I, II категорий).

Разница эффектов О В в двух вышеперечисленных вариантах, вероятно, обусловлена принципиальным отличием характеристик сверхслабых излучений, отражающих функциональное состояние этих групп зародышей и, в процессе реализации генетической программы в данные «критические» периоды развития (Белоусов и др. 2002). Период нахождения эмбрионов в процессе бластуляции характеризуется десинхронизацией делений ядер и запуском работы собственного генома (б стадия). Эмбрионы на 9, 10 стадии находятся в стадии завершения бластуляции и переходе к гаструляции. Отмеченная ранее тенденция к «обмену» частотными характеристиками ССИ между группами зародышей при длительных взаимодействиях (Белоусов и др. 2003) дает основание предполагать, что описанные ранее эффекты ОВ между разновозрастными группами зародышей вьюна (Бурлаков и др., 1999, 2000, 2005; Виг1акоу, 2000) могут быть связаны с изменениями частотно-амплитудных характеристик их ССИ (Белоусов и др., 2003). Аномалии развития

Результатом ОВ может быть появление различных аномалий развития, специфических для каждого случая подбора взаимодействующих стадий. Особенно ярко это проявляется в нарушениях морфогенезов при формировании головных и туловищных структур зародыша. Так, оптическое совмещение зародышей 0-1-й стадий с зародышами 8-й стадии (поздняя высокая бластула) вызывало появление зародышей с раздвоением головного конца (до аарздишай) -<р5б;05); пр;;чс»: уровень раздвоения мог быть в

каудальной области (рис. 5). Следует отметить, что наши наблюдения за всю многолетнюю работу с ранним

Рис. 5 Предяичинки вьюна: а, б, в— раздвоение

с™,дела ра~>нья: оптического контакта зародышей О-1-й

** ff.lt ЛШЛЛ».! * , — 1/Лг!чЛ

развитием вьюна показали, что "двухголовые" зародыши могут появляться в неблагоприятных условиях получения и инкубации икры (3-4 на 500-600 развивающихся эмбрионов). Но поскольку мы проводили эксперименты на икре, в том числе, и высокого качества, подобные аномалии не встречались ни только в контрольных группах, но и во всех остальных партиях оплодотворенной и не вошедшей в эксперимент икры. Поэтому такая частота появления аномалий после определенных оптических контактов может считаться специфическим нарушением.

Следует отметить, что зародыши, с образовавшимися после ОВ глубокими морфогенетическими нарушениями, были достаточно жизнеспособны, проходили вылупление, жили в предличиночный период, то есть такие значительные аномалии

не вызывают

катастрофических изменений и гибели всей системы -организм довольно долго живет и развивается.

Нам впервые удалось проследить изменения

динамики развитая и определенные нарушения морфогенеза после

длительного ОВ

разновозрастных ранних зародышей шпорцевой

лягушки - вида, наиболее используемого в настоящее время как объект лабораторных исследований в биологии развития. Экспериментальные

воздействия не только оказывали влияние на изменение темпов последующего развития, но и вызывали появление аномалий (рис. 6).

Э мбр ион ал ь на я сме ртность

Увеличение эмбриональной смертности с 7-10% до 18-24% (р<0,01) наблюдается в опытных «младших» группах зародышей вьюна при ОВ эмбрионов стадии 0 с зародышами стадий гаструляции и старше (>10 стадия). Показано, что степень достоверности результатов зависит от природного качества икры, определяемого % оплодотворения и вылупления. Высоко достоверные результаты получали в опытах с икрой I, II категории.

Обратный эффект (коррекцию эмбриональной смертности) (р<0,001) с 50% до 3020% наблюдали при ОВ эмбрионов этих же стадий, полученных из икры III категории (для эксперимента в «старшую» отбирали живых, нормально развивающихся особей). Таким образом, однородность эмбрионов в каждой группе, их синхронизированное развитие важно для проявления эффекта дистантного взаимовлияния.

Рис. 6 Аномалии развития шпорцевой лягушки после оптического взаимодействия: односторонняя сшофтальмия (А), микрофталъмия (Б), раздвоение хвостового отдела (В). Г- нормальная личинка того же возраста.

3. 1. 2. Интенсивность свободно-радикальных реакций в ранних зародышах вьюна в процессе оптического взаимодействия.

Дяя исследования эффекта ОВ зародышей вьюна на самых ранних сроках, когда морфологические изменения еще не выражены, был проведен анализ интенсивности свободно-радикальных реакций, [метод привитой сополимернзацнн (Козлов, 1970; Мелехова, 1976) и радиометрии], как показателя общего физиологического состояния (Воейков, 2003; Мелехова, 2005) и чувствительности биологических систем к слабым и сверхслабым воздействиям (Мелехова и др., 1999, 2001, 2004, 2005; Новиков, 2004). Показано достоверное изменение уровня свободно-радикальных реакций (УСР) в эмбрионах при оптическом контакте зародышей вьюна. В зависимости от сочетаемых стадий, наблюдали снижение или увеличение показателей УСР. Так, через 2,5 часа после начала ОВ эмбрионов 0 (15 мин. после оплодотворения) и б (ранняя бластула) стадий развития наблюдали снижение показателя УСР по сравнению с контролем, в «старшей» группе в 1,3 раза (р<0,05), а в «младшей» группе - в 14 раза (р<0,01). При совмещении эмбрионов 0 (15 мин. после оплодотворения) и 28 (появление 13ой пары сомитов) стадий к 2,5 увеличивается в 2,5 раза - в «старшей» (р<0,001) и в 2,6 раз (р<0,001) - в «младшей» группах. Изменение относительных показателей УСР для этих сочетаний стадий проиллюстрировано на рисунке 7.

Различия эффектов ОВ групп зародышей при сочетании разных стадий могут быть связаны с разницей физиологического состояния детекторов и индукторов ССИ (б стадия - период начала бластуляции, характеризующийся запуском работы собственного генома организма, и 28 стадия - сомитогеиез). Стадиоспецифичность эффектов ОВ зародышей вьюна, отмеченная по ряду морфологических признаков ранее (Бурлаков и др., 1999, 2000), проявляется, в данном случае, на уровне свободно-радикальных процессов.

Анализируя следующие параметры развития при ОВ: темпы эмбриогенеза, смертность, количество и специфика аномалий, необходимо отметить, что четкой корреляции между увеличением / уменьшением УСР и конкретным проявлением того или иного эффекта не обнаружено. Это связано с тем, что показатель УСР отражает интегральную скорость окислительного метаболизма клеток, изменение которого сопровождает целый ряд процессов, как становления, так и дезорганизации биологических систем.

Рис. 7 Изменение относительных показателей УСР 0рт опыпМрт контроль) (М±т) через 2,5 чесе после начала оптического взаимодействия зародышей 6 и 0 стадий (а); 28 и 0 стадий (б).

часам взаимовлияния показатель УСР

Динамика УСР в процессе оптического контакта эмбрионов 5 и 0 стадий развития.

В первые 4 часа ОВ отмечено достоверное снижение показателей УСР в «старшей» (р<0,01) и «младшей» (р<0,001) группах. Через 9-15 часов взаимодействия показатели УСР в опытных «старших» и «младших» группах эмбрионов превышают таковые в контроле вплоть до окончания ОВ {табл. 1).

Табл. 1 Показатели УСР (М±т) в зародышах Мм^игпи! /оззШз в процессе 24х часового оптического взаимодействия, находящихся в начале эксперимента на стадиях 5 (моруяа) - «старшая» группа и 0 (15 ми», после оплодотворения) ~ «младшая» группа.

Достоверность различий (уровень значимости: * - 0,05; ** - 0,01; ***-0,00)>

Сравнительны Й анализ динамики относительн ых показателей

УСР (¿ртошл^ртгоотроль) в течение 24х часового ОВ выявил различия проявления данного эффекта в зависимости от пространственного положения групп эмбрионов. Так, было показано что, кривые, описывающие динамику относительных показатей УСР эмбрионов из нижних кювет, располагаются выше таковых для верхних, т. е. более выраженное изменение УСР отмечается в группах «старших» и «младших» эмбрионов, располагающихся в нижнем положении (рис. 8).

Явление «эффекта положения» до конца остается неясным. Наличие анимально-вегетативного градиента и ориентация зародышей амфибий и рыб во время дробления анимальным полюсом вверх может быть одной из причин описываемого явления, поскольку процессы, проходящие в верхнем и нижнем полюсах дробящегося зародыша принципиально различаются (работа генетического аппарата, геометрические преобразования поверхностей, связанные с процессами деления клеток - на анимальном полюсе, процессы утилизации и транспорта питательных веществ — на вегетативном полюсе), что может влиять на неоднородность ССИ в разных направлениях.

Однако, «эффект положения» наблюдается и в случаях взаимодействия зародышей более продвинутых стадий. Нами также было отмечено достоверное (р<0,01) увеличение УСР в нижних группах при ОВ эмбрионов на стадии гаструляции (12, 14 стадии). Данный эффект уже нельзя объяснить наличием анимально-вегетативного градиента, поскольку зародыши вьюна на этих стадиях обычно располагаются хаотично, строгой ориентации в пространстве нет. Другой вероятной причиной может служить разница смены сред, преодолеваемых ССИ, идущим от верхних групп к нижним (зародыши, вода, кварц, воздух, вода, зародыши) и от нижних групп к верхним (зародыши, вода, воздух, кварц, вода, зародыши).

Эксгнрммтгаль* ныа группы зародышей БРМ а размы* интервалы вранами оптхчвсксхо исшггит. кол-во импульсов/мин

«Стершие» А часа Я часов 15 ЧЯИЙ 20 часов 23чка

слит (верх) 371,3412,9' 464,11 14,2"* 521,6115,3"* 442,5116,6 " 447,в±17,7

ОПЫТ (НИЗ) 452.71182 461,2114,9" 452.6113* 562,3115 "* 476,8114.9 **

Кон1рогъ 41в,в±13,3 408,3117,4 396,6122,2 379,5116.7 «17,7114,1

«Млядшв«»

сшит (верх) 306.5±12,1 — 32в,в114,9 339,1115,6 * 44«! 16.1 " 411,6112,6

ОПЫТ (НИ1) 351.2114.3 *** 467.21162"" 433114.4 441,1414,2 ™ 505,3116,5"*

Контрагъ 425115,2 351,4± 17.1 293.9114 365115,6 353,5116.9

Рис. 8 Динамика относительных показателей УСР (М±т) в

процессе 24х часового оптического взаимодействия зародышей вьюна при разном положении кювет;

Кювета с эмбрионами «старшей» группы стоит над кюветой с эмбрионами «младшей» группы (А)

Кювета с змбрионлни «старшей» группы стоит кюветой с эмбрионами «младшей» группы (Е) —

♦ стершая группа ____младшая группа

ёрт, 1,8

1.4

1

0.1

АД

--Т-Г" I ' I-г—Г-г-1-1—Т-т—

11 13 15 17 19 21 23 время, ч

3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 «реме, ч

Существование состояний повышенной чувствительности биологических систем послужило основой к использованию развивающихся зародышей, в качестве тест-объектов малых и сверхмалых доз различных излучений и биологически активных веществ (Мелехова и др., 2004, 2005). Все это соотносится с представлениями о «критических периодах» эмбрионального и постэмбрионального развития биологических объектов разного уровня организации (Гольдшмидт, 1927, 1932; Светлов, 1978).

При изучении динамики показателей УСР в процессе ОВ групп эмбрионов вьюна, находящихся в начале взаимодействия на стадиях 5 (морула) и 0 (15 мин.

после оплодотворения), установлено, что через 4 часа оптического контакта наблюдается общее снижение показателей УСР в «старших» и «младших» группах, тогда как через 9-15 часов взаимодействия показатели УСР в опыте возрастают в 1,5 раза. Принципиальное различие эффектов кратковременных (несколько первых часов) и длительных (12-22 часа) взаимодействий было обнаружено Л, Q. Белоусовым при сравнении характеристик ССИ разновозрастных групп зародышей вьюна при наличии или отсутствии OB (Белоусов и др., 2003). «В течение 1-го часа OB наблюдали постепенное возрастание процента нулевых значений излучения. Параллельно с этим возрастало количество и высота редких больших импульсов (оцениваемых по величине куртозиса). Кроме того, корреляция между спектрами Фурье оптически взаимодействующих образцов понижалась быстрее, нежели при отсутствии оптических контактов. Измерения спектров Фурье после длительных (12-22-часовых) OB показали, что между образцами произошел «обмен» автокорреляционными характеристиками спектров - суммы автокорреляционных коэффициентов в подавляющем большинстве случаев инвертировались (часто - с «перехлестом»), или, по крайней мере, сглаживались относительно контрольных образцов» (Белоусов и др., 2003). Делается вывод, что описанные ранее эффекты OB между разновозрастными группами зародышей вьюна могут быть связаны с изменениями частотных характеристик их ССИ. «Если эффекты кратковременных OB (понижение средней интенсивности суммарного сигнала) можно, хотя бы отчасти, свести на известную из теории взаимодействующих осцилляторов «субрадиацию» (Popp and Li, 1993; Popp, 2000), то для длительных OB удовлетворительной модели пока не существует. Во всяком случае, наблюдаемые эффекты выходят за рамки представлений о классическом резонансном взаимодействии линейных осцилляторов. Вместе с тем, теоретически показана возможность «обмена» характеристиками при взаимодействии нелинейных осцилляторов солитонного типа. Весьма вероятно, что сверхслабые биологические излучатели обладают сходными свойствами» (Белоусов, 2002).

3. 2. Взаимодействие групп зародышей низших позвоночных при изменении оптических характеристик среды между ними.

3.2.1. Помещение в оптические каналы волнового взаимодействия интерференционных светофильтров (ИС).

Оптическое взаимодействие зародышей (6, 7, 8 стадий - бластуляция) с дробящейся икрой (0, I, 2 стадии) приводит к увеличению темпов развития (смещение максимумом распределения на 1-2 стадии в большую сторону) эмбрионов в областях: 386 им, 401 нм, 405 нм, 628 нм и 1000 им; взаимное отставание (смещение максимумом распределения на 1-2 стадии в меньшую сторону)- в областях 372 нм, 379 нм, 546 нм; замедление младших и 0 эффект у старших - 455 нм, 482 нм (рис. 9).

Ошх-леспй nR ИЧЦРНРШ1Р трчплв р-ивитня в «СХОДЩИХ»

группах зародышей, взаимодействовавших через ИС с максимумами пропускания в более длинноволновой области исследуемого диапазона^J546 hm, 628 hm Jp<0_,01JU 1000 нм (р<0,05)]. Спустя сутки после окончания эксперимента, наблюдали проявление отсроченного эффекта OB в более коротковолновой области спектра [372, 379, 386, 405, (р<0,05); 401 нм (р<0,01)]. Достоверного изменения темпов

развития после ОВ через ИС, пропускающих в сине-голубой области (455 им и 482 им), не выявлено. Эффект ОВ в области 546 км сохраняется на протяжении двух суток (рис. 9А),

Сразу после окончания ОВ в «младших» труппах зародышей эффекты ускорения \ замедления темпов развития проявились во всех вариантах взаимодействия через ИС, Через сутки, наблюдаемые изменения темпов развития сохранились лишь в вариантах ИС с максимумами пропускания 401 им, 455 нм (р<0,05); 546 нм, 628 нм (р<0,01), тогда как в остальных случаях эффект нивелировался (р>0,05) (рис. 9Б). Картина синхронизации темпов развития «старших» и «младших» зародышей вьюна при их ОВ, в присутствии ИС с разными максимумами пропускания, позволяет выделить области, стимулирующие ускорение ! замедление темпов эмбрионального развития (рис. 9) по сравнению с эффектами прямого ОВ (замедление темпов развития эмбрионов «старшей» группы и слабое ускорение «младших»).

Рис. 9 Направление скорости развития зародышей вьюна после оптического взаимодействия через интерференционные светофильтры в «старшей» (А) и «младшей» (Б) группах

(Т -ускорение; замедление, о — изменение не достоверно),

проявление эффекта сразу после окончания 24-х часового взаимодействия и-проявление эффекта через сутки после окончания 24-х часового взаимодействия

^^ ■ ■■ ■ •.............- ■ ■ ■ ......

372 379 386 401 405 455 Л92 54« 628 1000 (н

-V лґ\ А ' :" •——""""Ж: —т—

^ МГ ^ЭД^Ж у - ІІІ -

___Іиі______'___________1_■'— - .....________________.....■ ■ '............................. — ■_■ ■ - '-У.-У:.

Сходную картину наблюдали в экспериментах по ОВ через ИС, групп зародышей одного возраста, находящихся на стадиях развития: 3 (32 бластомера), 3,5 (64 бластомера); б (ранняя бластула); 8 (поздняя высокая бластула), 9 (поздняя эпителиальная бластула). В присутствии ИС (максимумы пропускания: 372 нм, 379 нм, 482 нм, 546 нм) наблюдали снижение темпов развития эмбрионов в верхних и нижних кюветах (р<0,05), ускоренное развитие - в присутствии ИС (максимумы пропускания: 401 нм, 405 нм, 628 нм) (р<0,05). Следует отметить, что при прямом ОВ зародышей одинаковых возрастных групп достоверных эффектов не обнаружено.

Для зародышей ранних стадий дробления было показано, что изменение оптических характеристик среды при ОВ с помощью ИС увеличивается процент гибели и степень рассикхрониэацин развития зародышей в группе. В экспериментах по ОВ зародышей одиновоэрастных трупп ранних стадий дробления, разделенных

ИС с полосами пропускания 401нм, 482 им или 546 км, отмечали появление (до 8%) (р<0,01) зародышей, со значительными нарушениями морфогенеза, приводящим к появлению специфических аномалий развития (рис. 10). Увеличение смертности (на 20%) отмечено при использовании ИС 482 нм и 546 им (р<0.01)._____________

Рис. 10 Типичные аномалии развития в группах одновозрастных вьюнов, помещенных в эксперимент на начальных стадиях развития, разделенных ИС с полосами пропускания 401нм, 482 нм или 546 нм, А - недоразвитие туловищного и хвостового отдела; Б - образование 2-х неравноценных голов и недоразвитие туловищных и хвостовых отделов; В - норма.

Таким образом, наблюдаемые изменения параметров эмбрионального развития вьюна после ОВ в присутствии НС с различными максимумами пропускания в диапазонах УФ, видимого света и ИК могут свидетельствовать о специфическом влиянии на процесс развития определенных узких спектральных зон ССИ.

3.2.2. Помещение в оптическив каналы волнового взаимодействия призменных уголковых световозвращателей (УСВ).

В результате ОВ одновозрастных групп эмбрионов вьюна через УСВ отмечено достоверное изменение параметров их дальнейшего развития. Этого никогда не наблюдалось при прямом ОВ одновозрастных зародышей. В процессе работы было выявлено, что воздействие УСВ на характер ОВ определяется не только размещением образцов относительно рабочей поверхности УСВ, но и качеством изготовления последних.

/

В случае, когда распределение

угловое энергии

светового потока на выходе УСВ имеет сложный характер (рис. 11) дифракционной картины (многопятновая

система), наблюдали широкую вариабельность ответа

одновозрастных эмбрионов при их ОВ через противоположные сектора такого УСВ.

При расположении кювет с зародышами, например, в секторах 1 и 4 (нумерация ведется относительно заводской маркировки), в обеих кюветах наблюдается достоверное (р<0,01) ускорение развития по сравнению со всеми контрольными группами. Причем в 1-м секторе ускорение

А Б

Рис, 11 Распределение энергии светового потока. А - изображение Б-трехмерное

светящейся «точки», распределение анергии прошедшей через УСВ. световой волны на выходе из УСВ.

выражено в смещении максимумов распределения (все эмбрионы на 13 и 14 стадиях), в 4-м — ускорение темпов развития наблюдается, главным образом, как определенная рассинхронизация - увеличение дисперсии распределения (зародыши 12, 13 и 14 стадий), как по сравнению с группой из первого сектора, так и со всеми контрольными группами, где встречаются эмбрионы 12, 13 стадий, а также достоверное (р<0,001) двукратное увеличение эмбриональной смертности и увеличение (р<0,05) количества аномально развивающихся зародышей по сравнению с контрольными. В группе из 1-го сектора, наоборот, выражено снижение (р<0,05) числа аномалий по сравнению с контролем и экспериментальными группами 4-го сектора (р<0,001).

Через сутки после окончания ОВ наблюдалось четырехкратное увеличение (р<0,001) числа погибших эмбрионов, в то время как в опытных группах отмечено увеличение погибших в 1,8 (рЗ),01) в группах эмбрионов из первого, и в 1,5 (р<0,01) в труппах из четвертого, секторов. В обеих группах, взаимодействовавших через УСВ, наблюдали ряд аномалий развития.

Когда угловое распределение энергии светового потока на выходе УСВ имеет несложный характер дифракционной картины (двупятновая система), наблюдается меньшая вариабельность ответа зародышей Misgurnus fossilis после их ОВ через противоположные сектора такого УСВ, и значительная коррекция процессов развития, приводящая к снижению эмбриональной смертности при исходно низком качестве икры вьюна (рис. 12). В результате ОВ через «двупятновый» УСВ, при размещении кювет с эмбрионами в 1 и 4 секторах УСВ №482 наблюдали снижение смертности до 40% (р<0,001) в группе эмбрионов, расположенной на 1-м секторе, куда излучение попадало, проходя из 4 в 1 сектор, тогда как при обратном прохождении оптического пути (от 1 сектора к 4), реакция эмбрионов не отличалась от контроля (100% гибель) ¿не 12А). При угловом смещении световых максимумов на 9° (УСВ №485), эффект положительной коррекции развития снижался я в 3 раза (рис. 12Б).

Рис. 12 Выживаемость (%) эмбрионов вьюна после 24-часового

дистантного оптического

взаимодействия при размещении кювет на І и 4 секторах УСВ М482 (А) и УСВ №485 (Б).

Показано наличие симметрично анизотропных участков УСВ. Такого рода анизотропия при

передаче дистантных взаимовлияний через многозеркальную систему может быть объяснена с позиций неидентичности передачи вектора поляризации ССИ в зависимости от направления движения исходно поляризованного излучения через

УСВ. Предложена модель, основанная на ОВ групп одновозрастных эмбрионов вьюна, для тестирования качества (индивидуальных свойств) УСВ.

3. 3. Отсроченный эффект оптического взаимодействия зародышей вьюна.

Оптическое взаимодействие разновозрастных зародышей вьюна стадий 10-19 (гаструляция) и 0-1 (начало дробления) приводит к ускоренному развитию «младших» и задержке развития эмбрионов «старших» групп. Этот эффект сохраняется и после прекращения дистантных взаимодействий. На рис. 13 представлена динамика вылупления зародышей «старшей» группы после 24х часового оптического контакта. Момент начала вылупления в группе опытных животных отсрочен, в среднем, на 6 часов (р<0,01).

Рис. 13 Динамика вылупления Зародышей вьюна (М±т) после 24х часового оптического контакта, В начале взаимодействия эмбрионы находились, соответственно. на стадиях 12 дародышавосс

бластомера).

■*ллыт гититпппь

Дальнейшие наблюдения за предличинками и личинками выявили достоверные различия в темпах пигментации и закладки элементов кровеносной системы (рис. 14) только у особей «старшей» возрастной группы. На б день развития линейные размеры тела контрольных особей превышают таковые в опыте на 10-15% (р<0,05) (рис. 14). Объем и форма желточного мешка, характеризуют общее отставание в развитии особей после оптического контакта.

Рис. 14 Размерны й ряд (М±т) и общий вид предличинок в возрасте 6 суток после оптического контакта (а) и« контроле (б), Рс-перикард; озоновый метод Гейденгайна, сагиттальный срез. 06.5. ок.1 Ох,

Рис. 15

Цитодифферен цировка гипофиза вьюна, появление соматотропоцитов (СТЦ'); азаноеый метод Гейденгайна, фронтальный срез. Об. 100. к.Юх.

Ключевым маркером динамики постэмбрионального развития является становление основных, звеньев репродуктивной системы (гипофиз и гонада). Схема расположения разных типов тропоцитов в гипофизе была получена нами, предварительно, на другом представителе карпообразных рыб — белом толстолобике (НурорЫИаЬп \chthys тоШт, СургМскге). У вьюна в результате сравнительного гистохимического анализа, выявлено замедление темпов морфологической и цитологической

дифференцировки гипофиза после оптического контакта. Появление первых ацидофильных клеток (соматотропоциты) в гипофизах особей опытной группы отмечено на 16-18 день, в контроле - 12-14 день (рис. 15); первые базофильные клетки (тнреотропоцкты) у особей из опытной группы появляются на 23-25 день, в контроле - на 19-20 лень.

Показано, что задержка темпов развития затрагивает и скорость дифференцировки клеток полового ряда. Анализ состояния первичнололовых клеток (ПИК) у особей из опытных и контрольных групп выявил следующее: у зародышей в возрасте 10 суток доля полнморфноядерных ППК (рис. 16А) в опытной группе составляет 30-40% от общего количества ППК (рис. 16Б), в контроле — 10-20% (р< 0,05), достоверных различий по количеству ППК в опыте и контроле не обнаружено. К моменту 20-22 суток у животных из опытной группы отмечается снижение количества гоноцитов по сравнению с контролем на 15-20% (р< 0,05).

дДТ*?^*-»^ "Г*1"""

Рис. 16 Вариабельность ППК вьюна в возрасте 10 суток. А - полиморфноядерные, Б - с округлым ядром; окраска железным гематоксилином по Гейденгайну, тангентальный срез в области нефротама. Об. 100. ок.20х.

Отсроченный эффект 24-х часовых ОВ зародышей вьюна наблюдается не только в процессе эмбриогенеза, но и в постэмбриональном развитии.

Выводы:

1. Оптический контакт изолированных групп зародышей низших позвоночных приводит к изменению темпа развития, процента эмбриональной смертности и появлению аномально развивающихся особей. Наблюдаемые эффекты стади ослецифичны.

2. В процессе оптического взаимодействия разновозрастных групп эмбрионов вьюна наблюдается достоверное изменение показателей интенсивности свободно-радикальных реакций. Корреляции относительной величины данного показателя и проявления конкретного морфологического эффекта дистантного взаимодействия не обнаружено.

3. Помещение в оптические каналы волнового взаимодействия интерференционных светофильтров влияет на эффект дистантного взаимовлияния как разновозрастных, так и одно возрастных групп эмбрионов вьюна. Использование интерференционных светофильтров с максимумами пропускания в дальнем УФ {372 нм, 379 им) и зеленой (546 км) областях спектра приводит к замедлению темпов развития зародышей; в ближнем УФ (386 нм), фиолетовом (401 им, 405 нм), красном (628 нм) и ИК (1000 нм) диапазонах - к ускорению темпов развития.

4. Помещение в оптические каналы волнового взаимодействия приз манных уголковых световозвращателей оказывают влияние на эффект дистантного взаимодействия одноаозрастных групп зародышей вьюна в соответствии с их анизотропией и индивидуальными характеристиками.

5. Эффекты 24-х часового оптического взаимодействия могут сохраняться на протяжении последующего онтогенеза, проявляясь в изменении темпов вылупления, роста предличинок и личинок, становления основных звеньев репродуктивной системы (гипофиза, гонады).

Список публикаций

1. Бурлаков А.Б., Бурлакова ОЗ., Капранов Ю.С., Корогкина М.Р., Перминов C.B., Куфаль Г.Э., Медведева АЛ., Голиченков В.А. Эффекты дистантного взаимовлияния эмбрионов, возникающие при прохождении биоизпучения через лазерные уголковые световозвращатели // Труды Международного Форума по проблемам науки, техники н образования (под ред. В.П. Савиных, В.В.Вишневского). М., Академия наук о Земле, 2004,т.З, с.26-27.

2. Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Капранов Ю.С., Корогкина М.Р., Голиченков В.А., Перминов C.B., Куфаль Г.Э., Медведева A.A. Управление волновыми информационными потоками при дистантных взаимодействиях на ранних стадиях развития вьюна при помощи лазерных уголковых световозвращателей. // Труды Vitt Международной научно-технической конференции «Оптические методы исследования потоков». Москва, 2005, с.48-55

3. Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Капранов Ю.С., Короткина М.Р., Голиченков В.А., Перминов C.B.. Куфаль Г.Э., Медведева АЛ. Управление дистантным взаимодействием биологичеких объектов при помощи оптических приборов. Анализ механизмов воздействии. //Электромагнитные волны и электронные системы. 200$, т.10, с.57-66.

•4. Бурлаков А.Б., Медведева A.A., Полуэктова О.Г. Становление гонадотропної функции гипофиза у представителей разных по способу размножения экологических групп рыб из отряда карпообразных // Материалы Междунар, Конф. «Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных». Саранск, Из-во Мордов. ун-та, 2005, с.38-39.

5- Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Капранов Ю.С,, Пермннов C.B., Голиченков В.А., Куфаль Г.Э., Медведева A.A. Трансформация биоизлучения лазерными уголковыми световозвращателями как способ анализа степени их анизотропии И Труды Ш международной конференции «Электромагнитные излучения в биологии». Калуга, КГПУ, с.51-55.

6. Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Капранов Ю.С., Пермннов C.B., Голиченков В.А., Куфаль Г.Э., Медведева A.A. Коррекция развития низших позвоночных при помощи лазерных уголковых отражателей Н Научные труды 1 Съезда физиологов СНГ. Сочи, 2005, т.2, №699, с.245.

7. Бурлаков А.Б., Добрынина М.Т., Медведева АЛ., Полуэктова ОТ. Развитие гипофиза и дифференцировка его секреторных клеток в раннем постэмбрионачьном развитии толстолобика Hypophthaimiçhthys molitrix (Çyprinidae) // Вопросы ихтиологии, 2006, т.4б, ML с. 101-1 і2.

8. Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Капранов Ю.С., Пермннов C.B., Куфаль Г.Э., Медведева A.A., Голиченков В.А. Использование лазерных уголковых световозвращателей для исследования свойств сверхслабого биоизлучения // Тез. IV международного Конгресса «Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине», 2006, с. 86.

9. Бурлаков А.Б., Бурлакова О.В., Медведева A.A., Голиченков В А. Анализ биологического действия спектральных составляющих сверхслабых излучений ранних зародышей вьюна // Тез. IV международного Конгресса «Слабые н сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине». Санкт-Петербург, 2006, с.85,

Ю.Бурлаков Aü., Медведева A.A., Бурлакова О.В., Малахов Ю.И., Голиченков В.А. Особенности биологического действия спектральных составляющих сверхслабых излучений вьюна в раннем онтогенезе // Сборник избранных трудов IV международного Конгресса "Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии к медицине". Санкт-Петербург, 2006, с.34-40,

11.Бурлаков А.Б., Малахов Ю.И., Медведева A.A., Бурлакова О .В., Голиченков В.А, Анализ спектрального состава сверхслабых излучений ранних зародышей вьюна // Труды IX Международной конф. «Оптические методы исследования потоков». М., Издательский дом МЭИ, 2007, с,328-331,

12. Бурлаков А.Б., Медведева A.A., Падалка С.М., Бурлакова О.В., Доронина Н.Ю., Косова Г.В., Мелехова О.П, Голиченков В.А, Изменение уровня свободных радикалов как показатель биокоррекции раннего развития рыб // Материалы и доклады Международного симпозиума «Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата». Астрахань, Изд-во AI'ГУ, 2007, с.437-439.

13. Падалка С.М., Бурдакова О.В., Медведева A.A., Косова ГЗ., Мелехова ОЛ. Бурлаков A.B., Голиченков В Л. // Материалы 11 научн. конф, с участием стран СНГ «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов». Петрозаводск, Карельский научный центр РАН, 2007, с.111-112,

Курсивам выделены названия статей, опубликованных в журналах, включенных в перечень ВАК.

¿зЛх .....™

------ ■/І ¿с о ■ /

-----------------„;~Г~>г-- "........."їииЬ—

' -..........ь

¿Ясс. / . - О

Подписано в печать 20.03.200S г. Печать трафаретная

Заказ Ка 187 Тираж: 75 экз.

Типосрафня «11-Й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36

(495) 975-78-36, (499)788-78-56 ;