Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на развитие Drosophila melanogaster и проявление генетических и фенотипических эффектов

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на развитие Drosophila melanogaster и проявление генетических и фенотипических эффектов"

На правах рукописи

шш

СИДОРОВ Павел Владимирович

ВЛИЯНИЕ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ИМПУЛЬСНОГО ЛАЗЕРНОГО

ИЗЛУЧЕНИЯ НА РАЗВИТИЕ ШЮБОРНИА МЕЬАШСАвТЕК И ПРОЯВЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ И ФЕНОТИПИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ

03 00 01 - радиобиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Обнинск - 2008

Работа выполнена в Лаборатории радиобиологии не ио низ иру ю щих излучений (БИО-ЭМИ) Института естествознания Калужского государственного педагогического университета им К Э Циолковского

Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор

Чернова Галина Васильевна

Официальные оппоненты Доктор биологических наук

Жураковская Галина Петровна

Кандидат биологических наук Арсланов Тимур Альтафовнч

Ведущая организация Российский государственный аграрный университет -

Московская сельскохозяйственная академия им К А Тимирязева (Калужский филиал)

Защита состоится 23 сентября 2008 г в 1100 часов на заседании диссертационного совета Д 00101101 при Государственном учреждении -Медицинским радиологический научный центр Российской академии медицинских наук по адресу 249036, г Обнинск Калужской обл, ул Королева, 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ - Медицинский радиологический научный центр РАМН

Автореферат разослан «QV » 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета

Палыга Г Ф

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

В настоящее время сложилась ситуация, когда вся биосфера, включая человека, круглосуточно подвергается воздействию антропогенных источников электромагнитных излучений (ЭМИ) при уровнях, существенно превышающих естественные интенсивности и нарушающих электромагнитный батане, -важнейший компонент биогенной коммуникации (Popp F -А , Chang J J ,1998)

Одним из типов ЭМИ, применяемом уже более 40 лет, является низкоинтенсивное импульсное лазерное излучение (НИЛИ), которое, действуя на живые системы различных уровней организации (макромолекулы, клетки, ткани, органы, организм) вызывает ответную реакцию в виде комплекса разветвленных цепей взаимосвязанных и взаимообусловленных процессов, в том числе биофизических, биохимических морфологических и физиологических (Елхов М П, Каплан М А, 1993, Алешина Т Е, 2001, Мелехова О П , 2005)

Важным является вопрос об инициации ответных реакций на воздействия НИЛИ Несмотря на то, что открыты разнообразные биоэффекты действия неионизирующих ЭМИ на живые системы (Эндебера ОП, 1996, Кару ТЙ, 2001, Чернова Г В и др, 2007), вопросы, касающиеся процессов включения механизмов в реализацию адаптивного ответа организма, привлекают особое внимание На данном периоде состояния проблемы биоэффектов НИЛИ представляются особенно значимыми исследования изменений в функционировании генетических систем в соматических клетках при его воздействии на организмы, находящиеся на разных стадиях онтогенеза, которые могут отражаться на развитии морфологических структур и соответствующих признаков у взрослых особей

Работа в этом направлении открывает дополнительные перспективы получения ответов на многие актуальные вопросы (в том числе и те, которые позволят сформировать новые представления о механизмах действия НИЛИ) и определяет актуальность темы исследования В этом плане важными представляются сведения из работы П Г Светлова (1972) Из нее следует, что индивидуальное, развитие есть телеономичесхий процесс, который характеризуется стратегией и тактикой Существенные отклонения в морфогенетических процессах, определяющих стратегию онтогенеза, могут приводить к изменениям в процессе развития (Мелехова О П, 2005) Эксперименты, позволяющие вскрыть особенности поведения генов в ядрах соматических клеток, могу г быть направлены на изучение обмена между хроматидами гомологичных хромосом (соматический кроссинговер) (Алиханян СИ и др , 1985, Жученко А А , Король А Б , 1985, Жученко А А , 2006)

Целью данной работы является изучение влияния НИЛИ на разные стадии индивидуального развития Drosophila melanogaster и оценка его генетических и фенотипических эффектов

Задачи, связанные с решением поставленной цели:

• Исследовать половые и возрастные особенности проявления некоторых популяционных показателей у БгоБорШа те1аш^аа1ег при воздействии НИЛ И на разные этапы онтогенеза

• Оценить относительную величину соматического кроссинговера у разных генотипов БгоэорШа те1а1к^аз1ег, облученных НИЛ И, в зависимости от стадии индивидуального развития

• Выявить зависимость частоты встречаемости рекомбинантных форм на разных стадиях онтогенеза БгойорМа те1а1К^а51ег от дозы энергии НИЛИ в виде «доза - эффект»

• Провести анализ изменений некоторых морфологических структур у ВгоБорМа теЬпс^аэгег, определяемых генетическими процессами на разных стадиях индивидуального развития и воздействием НИЛИ

• Изучить степень выраженности фенотипических эффектов в зависимости от стадии онтогенеза, дозы НИЛИ и генотипа

Положение, выносимое на защиту Воздействие низкоэнергетического импульсного лазерного излучения на разные стадии индивидуального развития живых организмов обусловливает генетические эффекты, влияя на фенотипическую и популяиионную изменчивость в проявлении признаков

Научная новизна и практическая значимость работы

Изучено распределение БгозорМа meldnogaster по нескольким иопуляционным признакам (численность, жизнеспособность, масса тела) в ходе и\ индивидуального развития Показана его зависимость ог дозы НИЛИ Впервые проведена количественная оценка влияния всех факторов, контролируемых в эксперименте и случайных - остальных, на исследованные признаки Определены дозы НИЛИ, оказавшие более выраженное действие на их проявление

Выявлены закономерности проявления часюты встречаемости рекомбинантных форм, обусловленные генетическими процессами в соматических клетках ЬгоьорЫа melanogaster Особенности фенотипического проявления генетических эффектов зависели от стадии индивидуального развития, на которой были облучены особи и их генотипа Наибольшую чувствительность к действию НИЛИ проявили особи на ранней стадии постзмбрионального периода всех исследуемых генотипов При этом впервые (наряду с другими данными) по результатам анализа дисперсионных комплексов отмечено, то сила влияния изучаемою в данной работе фактора (НИЛИ) в значительной степени определялась градациями других факторов генотипами облученных особей и стадиями их индивидуального развития Стадиоспецифичность фенотипического проявления генетических эффектов

НИЛИ наблюдалась при изучении некоторых морфологических структур на теле Drosophila melanogaster

Методические подходы и методология экспериментальных исследований могут быть необходимы для разработки пороговых норм воздействия на живые организмы неионизирующими излучениями и апробации разрабатываемых разными научно-техническими центрами аппаратов для физиотерапевтической практики

Апробация работы

Апробация диссертационной работы была проведена на заседании совета Лаборатории радиобиологии неионизирующих излучений (БИО-ЭМИ) Института естествознания Калужского государственного педагогического университета им К Э Циолковского 03 Об 2008 г (протокол № 5)

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на студенческих научных конференциях Калужского государственного педагогического университета им К Э Циолковского (2003 - 2005), XIV научно практической конференции «Современные возможности лазерной терапии» (Великий Новгород, ноябрь 2003 г - Великий Новгород, Калуга - 2004), IX Всероссийской научно-практической конференции «Образование в России медико-психологический аспект (Калуга - 2004)», III Международной конференции «Электромагнитные излучения в биологии» (Москва, Калуга -2005), научных конференциях аспирантов и преподавателей КГПУ им КЭ Циолковского (2005 - 2008), XII Всероссийской научно-пракгической конференции «Образование в России психологические, педагогические, медицинские, экологические аспекты» (Калуга - 2008)

По результатам научно исследовательской работы в 2004 г автору настоящей диссертационной работы была присуждена стипендия имени НВ Тимофеева-Ресовского за сравнительный анализ проявления биологического действия низкоинтенсивного лазерного излучения в процессе индивидуального развития дрозофил

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 2 статьи в журналах, рецензируемых ВАК МОиН РФ

Сгруктура работы

Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста и включает следующие главы «Введение», «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты исследований и их обсуждение», «Выводы» В рукош ;и приведены 35 иллюстраций, 18 таблиц Список цитированной литературы содержит 114 публикаций на русском языке и 37 - на иностранном

Глава I. Обзор литературы

В данной главе рассматриваются современные представления о механизмах действия НИЛИ на живые системы, дана общая характеристика развития Drosophila melanogaster и генный контроль отдельных его стадий Материалы представлены в четырех разделах 11 «О механизмах действия НИЛИ на биологические системы, различных типов излучений», 12 «Методы идентификации фотоакцепторной молекулы, направленные на изучение механизмов воздействия лазерного излучения на клеточном уровне», 1 3 «Модификация некоторых показателей живых организмов экзогенными электромагнитными излучениями»; 14 «Общая характеристика развития дрозофилы и генный контроль отдельных его стадий»

Глава П Материалы и методы исследования

Работа проведена на Drosophila melanogaster (Drosophihdae, Díptera) Использованные нами в экспериментальной работе линии были получены в лабораториях кафедры «Генетики и селекции» МГУ им М В Ломоносова п Института биологии развития РАН

В ходе изучения влияния ИК НИЛИ на различные признаки Drosophila melanogaster формировали экспериментальные группы из 2-х - 3-х суточных самок и самцов, полученных по известной методике (Мыльников С В, 1991) Проводили массовые скрещивания с использованием особей различных линий Drosophila melanogaster в зависимости от решаемой в каждом опыте задачи В зависимости от варианта экспериментальных скрещиваний либо самок, либо самцов, либо обоих родителей подвергали воздействию НИЛИ Во всех вариантах скрещивания, кроме подопытных групп, формировали контрольные, которые не подвергались лазерному воздействию Все группы были представлены не менее 5 повторностями

Для изучения особей на ранних стадиях развития яйца собирали через каждые 15 мин кладки, при исследовании более поздних стадий развития - в течение 1 - 2 ч кладки Для массового сбора яиц в более длительном интервале времени использовали сосуды (объемом 0,75 - 1 л), в которые помещали 200 -300 пар особей, а затем выносили их в чашки Петри (диаметром 5-6 см) с питательной средой Если нужно было собрать единовременно большое количество яиц, использовали специальные камеры (Joon S В , Fox A S , 1965) Для проведения некоторых опытов использовали темную питательную среду, на фоне которой яйца лучше видны Для этого в среду перед разливом добавляли патоку

При облучении особей на третьей стадии постэмбрионального развития, для синхронизации материала применяли подходы (Хвостова В В и др, 1977) Через 96 ч (при соблюдении определенных температурных условий и влажности) после завершения откладки яиц личинок подвергли облучению

Индивидуальное развитие особей, включенных в скрещивание, проходило на стандартной питательной среде (Медведев К Н , 1966)

В течение всего периода размножения и развития дрозофилы экспериментальные пробирки с объектом исследования размещались в термостате ТС - 80М (220 В, 50 Гц, 180 Вт) с целью культивирования в условиях оптимальных температур 24,0±0,1 С0

Подвергнутых воздействию НИЛИ особей на разных стадиях индивидуального развития характеризовали по ряду популяционных характеристик (численность, выживаемость, масса тела взрослых особей) и изменению морфологических структур на теле у исследуемых особей

В подопытных и контрольных группах использовались только виргинные самки, которых сразу же после экспозиции любого из вариантов скрещивали с самцами

Всего в экспериментах было проанализировано 187252 особей Drosophila melanogaster

В качестве источника ИК НИЛИ использовали широко внедренный в лазеротсрапсвтические кабинеты АЛТ «Узор-А-2К» с длиной волны 890 нм Аппарат выполнен Калужским медико-техническим центром по ГОСТ Р 50267 0 - 92 ИК-диапазон исследовался в силу его соответствия максимуму пропускания излучения тканями (Скобелкин Ю К, 1997)

Частота посылки импульсов инфракрасного света на биообъект составляла 80, 150, 300, 600 1500, 3000 Гц, что соответствовало возможностям средне-частотных терапевтических аппаратов (Евстигнеев А Р, 2000, 2001) и условиям эксперимента, это определило следующие дозы энергии НИЛИ (в мДж/см2) 2 6, 4 9, 9 9, 19 7, 49 4, 98 7 при проведении экспериментальных исследований Расчет доз энергии НИЛИ производился по предложенной формуле (Евстигнеев А Р , 1994,2000).

По пученные данные подвергали статистическому анализу в программе Microsoft Exel - 2007 Основой его явились алгоритмы и формулы ПВ Терентьева, НС Ростовой (1977), ПФ Рокицкого (1978), НА Плохинского (1978), Г Ф Лакина(1990)

Глава III. Результаты исследований и их обсуждение

3.1. Воздействие НИЛИ на родительские формы линии Д-32 Drosophila melanogaster. Анализ изменения популяционных признаков.

Численность и жизнеспособность Drosophila melanogaster на разных этапах онтогенеза и масса тела взрослых особей

Для изучения данного показателя в обследованные группы включались особи стадий раннего развития (по Rabmowith М, 1941) 10 (99,00±0,60 мин после откладки яйца), 11 (109,00±0,51), 12 (120,00±0,90) В этот период развития в зародыше можно выделить три группы ядер бластодермальные, расположенные на поверхности зародыша, ядра желточных клеток, локализованные в

центральной части эмбриона, и ядра первичных полярных клеток Эти три группы ядер дают начало всем клеточным линиям, дифференцирующимся в течение эмбрионального периода в ткани и органы личинки и имагинальные диски

Стадии постэмбрионального развития определялись по ЕВ Полуэктовой (1975), ТА Детлаф (1995) Количество эмбрионов (в расчете на одну ?) характеризуют данные рис ]

Видно, что увеличение их числа происходило на 4 сутки почти в 1,5 раза, составляя 5,1±0,3 (по сравнению с предыдущими сутками - 3,5±0,3), а при сравнении с контрольными значениями оно было более существенным (5,1±0,3 и 2,7±0,3, соответственно, что обусловило повышение количества эмбрионов в 1,9 раза)

Более выраженная динамика числа эмбрионов наблюдалась при облучении в указанной дозе НИЛ И (2,6 мДж/см2) самцов (рис 1) Возрастание их количества происходило на 2, 3 и 4 сутки наблюдения На 2 сутки численность эмбрионов была равной 5,6±0,3, что в 1,4 раза больше по сравнению с первыми сутками (4,0±0,7) ив 1,6 - по сравнению с контролем (3,9±0,3) На 3 сутки их число было увеличено в 1,4 раза Среднее количество особей за весь период наблюдения также было выше контрольных значений (5,4±0,4 и 3,6±0,4 соответственно)

При использовании другой дозы энергии (9,9 мДж/см2) в случае облучения самок отмечено снижение количества эмбрионов в 1,3 раза на 4 сутки наблюдения по сравнению с предыдущими (рис 1) При облучении же сампов имело место меньшее количество эмбрионов в 1,5 раза по сравнению с контролем в 1 сутки исследования

Облучение самок НИЛИ (доза энергии 49,4 мДж/см2) обусловило увеличение числа эмбрионов на вторые (в 1,4 раза) и четвертые (в 1,4 раза) сутки исследования по сравнению с контрольным их числом (рис 1) Если подвергались лазерному излучению самцы, то в первые сутки происходило снижение количества эмбрионов (2,6±0,5 - в опыте, 4,2*0,6 - в контроле), в четвертые - увеличение 3,8±0,1 и 2,7±0,3 - в контроле, соответственно Однако эти изменения не отразились на значениях, отражающих общую плодовитость родительских форм

Жизнеспособность эмбрионов и особей на 7, 8, 9 стадиях постэмбрионального развития, полученных от родительских форм при использовании облученных самцов (доза 2,6 мДж/см2), была значительной и составила 99,4±0,2%, в контроле - 97,1±1,1%

Достаточно высокая жизнеспособность эмбрионов и особей на 7, 8, 9 стадиях постэмбрионального развития обусловила формирование большего количества имаго по сравнению с контрольными группами в основном при облучении НИЛИ родительских форм, когда дозы энергии составили 2,6 и 49,4 мДж/см2

I 2 3 4 __^ 5__

Я Контроль К Сайки, доза -энергии 2.6 мДж/см2 О Самцы, доза -люргаи 2.6 мДж/см2 в Самки. Д|i'ju энергии 9.1> мДхс/см2 Ci Самцы, дача шер'ии 9.9 мДж/см2 ■ Самцы. дозе )нергии 49.4 мДж/см2 Я Самом, Доза »нергии 49.4 мДж/ем2____ _ _ _______________

Рис. 1. Численность эмбрионов Drosophila melanogaster линии D-32, полученных от подвергнутых воздействию НИЛИ родительских форм.

По оси абсцисс показаны результаты по 4 этапам (I, 2, 3, 4) наблюдения и общий (5) показатель, характеризующий всех исследованных особей (п=5536, из них 729 контрольных) при дозе энергии НИЛИ 2,6 мДж/см2, 9,9 мДж/см2, 49,4 мДж/см3. По оси ординат - количество особей в расчете на одну 2 (одну из родительских форм). Примечание: Здесь и на следующих рисунках данные представлены в виде средней величины и её стандартной ошибки. Достоверные различия в динамике наблюдения показаны в скобках, экспериментальные различия по сравнению с контролем - без скобок: * - Р <0,1 (тенденция к достоверности), ** - Р <0,01, *** - Р <0,001.

Результаты анализа составленного дисперсионного комплекса показали, что выявленное изменение численности особей сопряжено с существенным влиянием НИЛИ (28,4±5,4% из 100% всех факторов, вызвавших вариативность величины результативного признака). Подтверждением являются и результаты исследования массы тела взрослых особей, облученных на разных стадиях постэмбриоиального развития.

3.2. Генетические эффекты НИЛИ у Drosophila melanogaster на разных стадиях онтогенеза и зависимость их проявления от дозы КИЛИ и генотипа особей.

Известно, что генетическая рекомбинация - фундаментальное свойство, представленное на всех этапах организации живого (Жученко А. А. и др., 2006). Она может обеспечить, в частности, перестройку генома соматических клеток и явиться источником изменчивости детерминируемых им признаков.

Доказательство соматического (митотического) кроссинговера показано в исследованиях на дрозофиле при наблюдении мозаичных пятен у особей с генотипом ysn'/y'sn (Patterson J.T., 1930; Алиханян С.И. и др., 1985). Гены у (yellow - желтое тело) и sn (singed - опаленные щетинки) находятся в X -хромосоме - первой хромосоме Drosophila melanogaster. В настоящей работе контрольные и подопытные группы представлены особями - носителями генов,

локализованных также в первой хромосоме Drosophila melanogaster: у (yellow), w (white), f (foked), ct (cut).

На рис. 2 отражена дозовая зависимость количества рекомбинантных форм (имаго), которые подвергались воздействию НИЛИ на третьей стадии постэмбрионального развития.

О Относительное чисяо рекомбинаитов генотипа -y+ctf+vVy+ct-4-f

Е9 Относи-г спьнос число рекомбинаитов генотипа -y+ct+C/yctf»-

Рис. 2. Число рекомбинаитов имаго, полученных при воздействии НИЛИ на особей третьей стадии гюстэмбрионаиьного развития.

По оси абсцисс показаны дозы энергии (мДж/см2), по оси ординат - частота встречаемости генотипов, выраженная в процентах и их стандартной ошибки.

Достоверное увеличение общей относительной величины соматического кроссинговера наблюдалось и при самой малой примененной в опыте дозе НИЛИ (2,6 мДж/см"), в то время как дозы энергии НИЛИ, определяемые 4,9 мДж/см2 и 19,7 мДж/см2, не обнаруживали значимого эффекта.

При воздействии НИЛИ также на особей третьей стадии постзмбрионального развития, но других генотипов: уЛ^с^/у^сЙ* и у+чг+сФ-//у+ч^(Л+{, направленность дозовой зависимости была подобна ранее описанной (рис. 2). Однако достоверно эффективным было влияние следующих доз НИЛИ: 9,9 мДж/см2, 19,7 мДж/см2, 49,4 мДж/см2 и 98,7 мДж/см2, соответственно (рис. 3).

При этом отметим, что все рекомбинантные особи (имаго) обнаружили один фенотип и проявляли доминантные признаки. Вместе с тем разные генотипы имели существенные (статистически значимые) различия в фенотипическом проявлении признака. Причина, обусловившая их, определяется тем, что один генотип являлся тригетерозиготой по генам у~сгГ, а другой - тригетерозиготой w+ct+f^

Доя оценки влияния на частоту соматического кроссинговера изученных двух факторов (фактор А - доза энергии НИЛИ, фактор В - генотипы облученных особей на третьей стадии постэмбрионального развития) был составлен двухфакторный неравномерный дисперсионный комплекс для качественных признаков. Его результаты показаны на рис. 4.

особей третьей стадии постэмбрионального развития.

По оси абсцисс показаны дозы энергии (мДж/см ), по оси ординат - частота встречаемости фенотипов, выраженная в процентах и их стандартной ошибки.

Рис. 4. Зависимость частоты соматического кроссинговера от дозы энергии (фактор А: А0 - контроль, А1 - доза энергии НИЛИ: 2,6 мДж/см2, А2 — 4,9 мДж/см2, А3 - 9,9 мДж/см2, А4 - 19,7 мДж/'см2, А5 - 49,4 мДж/см2, А6 - 98,7 мДж/см2) и генотипа (фактор В: В, - у+сЬ77/у+с(<Т, В2 -у'йТ//уйГ) облученных особей 1)гс«орЬ;1а melanogasteг на 3 - ей стадии постэмбрионального развития, по результатам дисперсионного анализа двухфакторного неравномерного комплекса для качественных признаков.

По оси абсцисс -- градации факторов, по оси ординат - частота кроссинговера в %.

В выборочном комплексе оказалось достоверным влияние доз НИЛИ и суммарное действие обоих учитываемых в анализе факторов. Это означает, что сила влияния фактора А (НИЛИ) в значительной степени определялась градацией другого фактора В (генотипами облученных особей). При оценке достоверности влияния разных доз НИЛИ на результативный признак

значимыми оказались различия между градациями: А, и А4 (2,6 и 19,4 мДж/см2, соответственно, р<0,001), А! и А5(2,6 и49,4 мДж/'см2, соответственно, р<0,01).

Другие проведенные нами исследования свидетельствовали о выраженной стадиоспецифичности влияния НИЛИ.

Полученные результаты согласуются с признанием того, что исходное функциональное состояние организма, и прежде всего его генетических систем, создает определенные внутренние (эндогенные) условия формирования первичных звеньев ответной реакции, определяет пороговые величины, направленность и степень выраженности того или иного эффекта (Чернова Г.В. и др., 1993, 2007; Каштан М.А. и др., 1997).

3.3. Фенотипические проявления генетических эффектов у Drosophila melanogaster при воздействии ПИЛИ на разные стадии развития.

Исследована зависимость изменения одного из систематических признаков расположение щетинок (макрохет) на груди Drosophila melanogaster от дозы НИЛИ и генотипа подвергнутых его воздействию особей на разных стадиях индивидуального развития. Их число, форма и положение генетически детерминированы. Каждую из них можно определить у взрослой особи - имаго (Медведев H.H., 1966; Бардышев Г.Д. и др., 1984).

При воздействии НИЛИ наблюдалось появление дополнительных щетинок, увеличение их размеров. При этом была отмечена смена их положения и формы на груди Drosophila melanogaster.

При исследовании передних скутелярных щетинок изменения выявлены только при дозе энергии НИЛИ 49,4 мДж/см2 (рис. 5). Анализ появления щетинок на груди Drosophila melanogaster с новым, не характерным для данного вида расположением, не показал статистически значимых изменений.

------ Т : . ;. I

71

j- "1,. rf -— 1-

— ------ --- I . )—i :.....'

2.Г> 4.9 У.9 14.7 4У.4 У8.7 ¡С

Рис. 5. Результаты воздействия НИЛИ на особей третьей стадии постэмбрионального развития (имевшими в генотипе гены: у, й, 1), отражающие зависимость фенотипического изменения передних скутелярных щетинок на груди ОгояорЫ1а те1апо§а51ег от дозы энергии НИЛИ. По оси абсцисс показана доза энергии НИЛИ (мДж/см2), по оси ординат -относительная численность имаго (Р±тр%) с изменением фенотипа.

Количество же особей с увеличенным числом и измененной их морфологией следовало выраженной зависимости от дозы энергии НИЛИ (рис. 6).

Рис. 6. Фенотипические проявления признака у имаго, полученного при воздействии НИЛИ на особей 3-ой стадии постэмбрионального развития, имевших в генотипе гены у, с!, £

По оси абсцисс - дозы воздействия (мДж/см2), по оси ординат - процент (с его стандартной ошибкой) особей с увеличением числа щетинок и изменением их морфологических особенностей на груди ОгозорЫа те1а!^аз1ег. В контрольной группе на первом этапе исследования исследуемый признак не выявлен.

Результаты анализа частоты встречаемости особей первого поколенач с морфологически измененными щетинками на груди Бго5орЫ1а те1агк^аз1ег показаны на рис. 7.

2.6 4,9 9,9 19,7 49,4 98,7 Koirrpo/n.

Ш J -ran BJI Утаи 3 Ш зтап П И того в эксперименте

Рис. 7. Особенности распределения особей первого поколения с морфологически измененными щетинками на груди Drosophila melanogaster при облучении самок (генотипы родительских форм: $y+et+f//y+ctf (фенотип: 2y'ct+f), c5'yctf7/ (фенотип: ¿? yctf); генотип F,: 9 y+ct+f//yctf', в y+ct+f//).

По оси абсцисс - доза энергии НИЛИ (мДж/см2), оси ординат процент особей с его стандартной ошибкой (Р±тр%). Показаны результаты трех этапов наблюдения.

При использовании дозы энергии 2,6 мДж/см2 (рис. 7) наблюдалось достоверное увеличение численности особей с проявлением отклонений в развитии признака (суммарном его значении) по трем этапам наблюдения в 2,5 раза. Статистически значимое увеличение частоты встречаемости измененных форм обнаружили при дозе НИЛИ, равной 9,9 мДж/см2 суммарно по трем этапам наблюдения.

На рис. 7 показано, что высокую биологическую активность обнаружила доза энергии, равная 49,4 мДж/см2 (суммарное значение по трем этапам наблюдения превысило контрольное - в 4,2 раза).

Как видно из приведенных данных (рис. 5, 6, 7), направленность дозовой зависимости в случаях облучения на ранней стадии постэмбрионального развития и родительских форм для получения имеет свои особенности.

Итак, по результатам сравнительного анализа действия НИЛИ в разных его дозах отмечены особенности в феяотипическом проявлении изучаемого признака (число, положение щетинок и изменения их морфологических особенностей на теле ОгозорШа тпе1аш^ах1ег) при облучении на разных стадиях индивидуального развития ОгозорЫ1а me!anogaster.

Для уточнения стадиоспецифичности влияния НИЛИ приводим результаты дисперсионного анализа. Его результаты показаны на рис. 8.

Рис. 8. Зависимость частоты появления особей с морфологически измененными щетинками на груди ВгоБорЫк те1аш^а81ет от дозы энергии НИЛИ (фактор А: А0 - контроль, А, - 2,9 мДж/см2, Аг - 4,9 мДж'см2, А3 - 9,9 мДж/см2, А4 - 19,7 мДж/см2, А5 - 49,4 мДж/см2, А<5 - 98,7 мДж/см2) и стадии онтогенеза (фактор В: В, -облученные особи на третьей стадии постэмбрионального развития, генотип 9 у+й+С/ус1£ в усСШ; В2 - облученные самки генотипа у*й+(//у+с1+Г, генотип - усх?'//).

Четыре градации фактора А (А, - доза энергии НИЛИ 2,9 мДж/см2, А2 - 4,9 мДж/см", А3 - 9,9 мДж/см2, А5 - 49,4 мДж/см2) обнаружили отклонение по сравнению с контролем. Достоверно же значимым уклонением от контрольных значений оказалось то, которое было обусловлено дозами энергии НИЛИ: 2,6 мДж/см2 (р<0,05), 49,4 мДж/см2 (р<0,05), доза энергии 4,9 мДж/'см2 определила тенденцию к достоверным изменениям (р = 0,1). Статистическая значимость

влияния данного фактора (НИЛИ) весьма высока Критерий Фишера, рассчитанный в дисперсионном комплексе, превышал его стандартное значение при втором пороге вероятности безошибных прогнозов (Бф =3,01>Р5!=2,8) Сила влияния другого фактора (стадии онтогенеза) была достоверной (Бф =6,36>Еа =3,8)

Достоверным оказалось взаимодействие градаций обоих факторов при = 2 27 > Бя = 2,1 и суммарное их действие при = 2,93 > Р5, = 2,6 (что свиде1ельствует о высшей степени достоверности д2х) Важным является то, что анализ влияния каждого фактора в отдельности без совместного анализа действия обоих факторов может сформировать недостаточно полное представление о степени выраженности их взаимообусловленности

Другие наблюдения генетических эффектов действия НИЛИ были проведены на примере изучения частоты появления мозаичных пятен на груди БгозорЫа те1аш^аз1ег

Как показали результаты, полученные при анализе следующих вариантов скрещивания 1)Р ^ ? у\\асИ7/уЧ/сЛ х $ уЧ^'П/, 2) Р О у\у+сГГ//уЧ^аТ х :- о у^/'сШ/, 3)Р у <2 у\уасШ/у+\>,'"с1+Г х о уч/аШ, анализируемые признаки (мозаичные пятна) проявились только у потомства родительских форм, когда воздействию НИЛИ подвергались самки - знак облучения) Проявление признака наблюдалось только при двух дозах НИЛИ (19,7 и 49,4 мДж/см2), различия в значениях которых определялись только частотой следования импульсов

Как уже указывалось, в данной работе дозы НИЛИ определялись частотой следования импульсов (ГЦ) при постоянной мощности излучения (Вт) и одинаковым временем воздействия Можно полагать, что, обладая собственной частотой колебаний, биологические системы могут входить в резонанс с внешней воздействующей частотой НИЛИ и обусловливать биоэффективность во ¡действия

С увеличением количества квантов (падающих на единицу поверхности в единицу времени) повышается вероятность получения молекулой - мишенью некоторою количества энергии, необходимой для запуска реакций на разных уровнях организации живых систем

Некоторые из использованных нами частот следования импульса НИЛИ, видимо, вызывали необходимые для биоэффекта амплитуды активности биологических систем В соответствии с предложенной моделью (Кузьмичев В Е, Чернова Г В , 2000) механизма реализации воздействия излучения на биологические системы наблюдаемые эффекты связываются с нелинейным поглощением квантов света Причем, стимуляция наиболее специфичных для того или иного объекта процессов может быть объяснена наличием у участвующих в этих процессах молекул некоторого избыточного запаса энергии, благодаря чему они уже могут находиться в области колебательного квазиконтинуума Все указанное приводит, по-видимому, к активации ядерного аппарата клеток, систем ДНК - РНК - белок, соответствующих

генетических систем-ферментов, стимуляции синтеза макроэргов (АТФ), митотической активности и генетической рекомбинации в ходе деления соматических клеток

Важным являются и заключения, вытекающие из анализа всех проведенных в данной работе дисперсионных комплексов и отчетливо свидетельствующие о том, что генетические эффекты НИЛИ и их фенотипические проявления зависят не только от дозы НИЛИ и частоты следования импульсов лазерного излучения, но и от генотипа подвергнутых его воздействию особей, стадии их индивидуального развития, а также суммарного влияния всех контролируемых в эксперименте факторов

Выводы:

1 Проявление изученных популяционных признаков (численность, жизнеспособность, масса тела) в ходе индивидуального развития в 28 4±5 4% (из 100% влияния всех факторов, контролируемых в эксперименте и случайных - остальных) зависит от дозы НИЛИ Наиболее выраженное влияние оказали две из них 2,6 мДж/см2 и 49,4 мДж/см2

2 Относительная величина соматического кроссинговера у разных генотипов Drosophila melanogaster, облученных на ранних стадиях постэмбрионального периода развития и имаго, обнаружила неодинаковую направленность изменений Влияние изученною фактора (стадии онтогенеза) достоверно (Рф = 6,36 > F5! = 3,8)

3 Частота встречаемости рекомбинантных форм в разные периоды развития Drosophila melanogaster имела выраженную зависимость от дозы НИЛИ Действие данного фактора на особей ранних стадий постнатального развития обусловило достоверное появление рекомбинантов при дозах НИЛИ 2 6 9 9, 19 7, 494, 98,7 мДж/см2 Статистически значимая относительная величина рекомбинантов в F,, полученных от скрещивания облученных родительских форм, имевших в генотипе те же гены, наблюдалась только при дозе 4 9 мДж/см2

4 На фенотипическое проявление генетических эффектов НИЛИ (на примере изучения числа, формы и положения макрохет на теле Drosophila melanogaster; оказывали влияние три контролируемых в экспериментальной работе фактора стадия онтогенеза, доза НИЛИ, генотип облученных особей Достоверным явилось взаимодействие градаций указанных факторов и суммарное их действие (ifx = 0,20±0,06, Рф - 2,9 > Fs[ = 2,6)

5 Выраженность фенотипических эффектов (частота появления рекомбинантных форм и изменения морфологических структур на теле Drosophila melanogaster) характеризуют достоверные границы генеральных параметров 1) т|2А = -С 0,037 - 0,163 (фактор А - дозы НИЛИ, 2) f|2x, указывающий что действие НИЛИ в значительной степени определяется генотипами облученных особей (f(2x = -С 0,015 - 0,185) и стадиями онтогенеза (т'Д-С 0,098 -0,302)

Список публикаций по теме диссертации:

1 Сидоров В В , Сидоров П В , Чернова Г В О некоторых особенностях индивидуального развития особей Drosophila melanogaster, полученных от подвергнутых низкоинтенсивному импульсному лазерному излучению (НИЛИ) родительских форм // Образование в России медико-психологический аспект IX Всероссийская научно-практическая конференция Материалы конференции Калуга - 2004 - С 296-298

2 Сидоров П В, Сидоров В В, Чернова Г В Сравнительный анализ проявления биологического действия низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения в процессе индивидуального развития разных генотипов Drosophila melanogaster // Современные возможности лазерной терапии Материалы XIV научно-практической конференции Великий Новгород, ноябрь 2003 г - Великий Новгород, Калуга, 2004 -С 226-228

3 Желнина Н В, Сидоров П В , Чернова Г В Некоторые генетические эффекты электромагнитного излучения крайне высокой частоты // Вестник Челябинского государственного педагогического университета сер 10, -Челябинск ЧГПУ, 2004 - № 5 - С 106-111

4 Желнина Н В , Чернова Г В , Жулина О В , Сидоров П В Оценка влияния лунных ритмов и низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения (X = 890 нм) на частоту мейотической рекомбинации у самок Diosophila melanogaster // Pressing problems of biology, 2004 - Томск Изд-во Сибирского государственного медицинского университета - Vol 3(1) - С 22-23

5 Чернова Г В , Ергольская Н В, Крюкова А С, Сидоров П В Оценка рекомбинационного действия низкоинтенсивного импульсного лазерною излучения красной области спектра (X = 640 нм) у Drosophila melanogaster // Вестник Нижегородского университета им НИ Лобачевского Серия Биология Вып 1, часть 7 Электромагнитные поля и излучения в биологии и медицине -Н Новгород Изд-воННГУ,2004 -С 65-73

6 Сидоров П В , Сидоров В В , Чернова Г В Влияние низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения ближнего ИК-диапазона на некоторые признаки Drosophila melanogaster, облученных на разных стадиях // Сб научных трудов лауреатов областных премий и стипендий, Калуга изд-во КГПУ им К Э Циолковского, 2005. - С 67-73

7 Чернова Г В, Ергольская Н В, Крюкова А С, Сидоров П В Исследования влияния низкоинтенсивного лазерного излучения красной области спектра (Я, - 640 нм) на частоту мейотической рекомбинации у Drosophila melanogaster // Электромагнитные излучения в биологии (БИО-ЭМИ-2005),- Москва Калуга, 2005 -с 177-182

8 Ворсобина Н В , Сидоров В В , Сидоров П В, Чернова Г В О некоторых отдаленных последствиях действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Сборник научных трудов лауреатов областных премий и

стипендий вып 2 Калуга изд-во КГПУ им КЭ Циолковского, 2006 - С 178190

9 Бабкина В В , Сидоров П В , Чернова Г В О воздействии видимого красного света с длиной волны 650-660 нм на организм Drosophila melanogaster // Научные труды КГПУ им К Э Циолковского Серия Естественные науки 2006 - Калуга изд-во КГПУ им КЭ Циолковского - С 181-192

10 Чернова ГВ, Сидоров ПВ, Бабкина ВВ, Сидоров В В Результаты исследования влияния видимого красного света с длиной волны 650-660 нм на массу взрослых особей облученных на разных стадиях онтогенеза // Сб научных работ лауреатов областных премий и стипецций, 2007 г - вып 3, часть? -Калуга изд-во КГПУ им КЭ Циолковского - С 110-118

11 Сидоров П В , Чернова Г В , Сидоров В В , Ворсобина Н В О изменениях некоторых популяционных и морфофишологических показателей при воздействии низкоинтенсивным лазерным излучением на разные стадии онтогенеза Drosophila melanogaster // Научные труды КГПУ им К Э Циолковского Серия Естественные науки 2008 - Калуга изд-во КГПУ им КЭ Циолковского - С 165-170

12 Сидоров ПВ, Чернова ГВ, Сидоров В В Изучение действия лазерного излучения на различные стадии индивидуального развития организма в связи с экологическими аспектами образования // XII Всероссийская научно-практическая конференция «Образование в России психологические, педагогические, медицинские, экологические аспекты» Материалы конференции Калуга - 2008 - С 270-274

Подписано в печать 22 07 2008 Формат 60x84/16 Бумага офсетная Печать трафаретная Уел печ л 1,5 Тираж 100 экз Зак№225

Отпечатано «Наша Полиграфия», г Кал>га, ул 1 рабцевское шоссе Лиц ПЛД № 42-29 от 23 12 99

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Сидоров, Павел Владимирович

Введение

I. Обзор литературы

1.1. О механизмах действия НИЛИ на биологические системы t различных типов излучений

1.2. Методы идентификации фотоакцепторной молекулы, 16 направленные на изучение механизмов воздействия лазерного излучения на клеточном уровне

1.3. Модификация некоторых показателей живых организмов 25 экзогенными электромагнитными излучениями

1.4. Общая характеристика развития дрозофилы и генный 30 контроль отдельных его стадии

II. Материалы и методы исследования

2.1. Объект исследования и условия проведения опытов

2.2. Особенности экспозиции низкоинтенсивным импульсным 49 лазерным излучением

III. Результаты исследования и их обсуждения

3.1. Вариабельность численности особей на разных стадиях развития Drosophila melanogaster и массы тела имаго при воздействии НИЛИ.

3.2. Проявление соматического кроссинговера на разных 70 стадиях развития Drosophila melanogaster, зависимость его от генотипа организма и дозы НИЛИ

3.3. Фенотипические проявления генетических эффектов у 85 Drosophila melanogaster при воздействии НИЛИ на разные стадии развития

IV. Выводы

V. Литература

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на развитие Drosophila melanogaster и проявление генетических и фенотипических эффектов"

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Известно, что электромагнитные излучения (ЭМИ) присутствовали на земле на протяжении всего времени существования планеты. Но за последние десятилетия произошел резкий рост уровня их напряженности. Естественные ЭМИ дополнились различными излучениями антропогенного происхождения, которые нарушили годами сложившееся природное равновесие, в том числе и электромагнитный баланс, важнейший компонент биогенной коммуникации (Рорр F.-A., Chang J.J., 1998). Флуктуации электромагнитного фона, являясь мощным стрессовым фактором, вторгаются в эволюционно сложившиеся механизмы адаптации видов (Зубкова С.М. и др., 1999;Булякова Н.В., Азарова B.C., 2002).

Характер отклика биосистемы на указанное экзогенное воздействие определяется следующими его параметрами: длиной волны излучения, мощностью излучения, дозой воздействия, диаметром светового пучка, поляризованностью (линейной, круговой, эллиптической и т.д.), типом воздействия, временем экспозиции, частотой модуляции, длительностью импульса, коэффициентом заполнения, созданием и релаксацией когерентности, учётом монохромотичности.

Одним из типов ЭМИ, применяемом уже более 40 лет является низкоинтенсивное импульсное лазерное излучение (НИЛИ), которое, действуя на живые системы различных уровней организации (макромолекулы, клетки, ткани, органы, организм) вызывает ответную реакцию в виде комплекса разветвлённых цепей взаимосвязанных и взаимообусловленных процессов, в том числе биофизических, биохимических, физиологических и морфологических (Елхов М.П., Каплан М.А., 1993; Алешина Т.Е., 2001; Мелехова О.П., 2005).

Важным является вопрос об инициации ответных реакций на воздействия НИЛИ. Несмотря на то, что открыты разнообразные биоэффекты действия неионизирующих ЭМИ на живые системы (Эндебера О.П., 1996; Чернова Г.В. и др., 2007), вопросы, касающиеся, процессов включения механизмов в реализацию адаптивного ответа организма привлекают особое внимание. Актуальной остается концепция минимизации дозы, ибо энергии НИЛИ должно быть достаточно для запуска ответной реакции организма, приводящей к тем фенотипическим проявлениям, которые определяются как биостимулирующие. Уменьшение дозы воздействия позволяет использование лазерного излучения инфракрасной (ИК) - области спектра в медико-биологических исследованиях и, что особенно важно, для целей диагностики и лечения различных заболеваний человека. На данном периоде состояния проблемы биоэффектов НИЛИ особенно значимыми являются исследования изменений в функционировании генетических систем в соматических клетках при его воздействии на организмы, находящиеся на разных стадиях онтогенеза, которые могут отражаться на развитии морфологических структур и соответствующих признаков у взрослых особей.

Работа в этом направлении открывает дополнительные перспективы получения ответов на многие актуальные вопросы (в том числе и те, которые позволят сформировать новые представления о механизмах действия НИЛИ) и определяет актуальность темы исследования. В этом плане важными представляются сведения из работы П.Г. Светлова (1972). Из нее следует, что индивидуальное развитие есть телеономический процесс, который характеризуется стратегией и тактикой. Существенные отклонения в морфогенетических процессах, определяющих стратегию онтогенеза, могут приводить к изменениям в процессе развития (Мелехова О.П., 2005). Эксперименты, позволяющие вскрыть особенности поведения генов в ядрах соматических клеток у организмов на разных стадиях индивидуального развития, могут быть направлены на изучение обмена между хроматидами гомологичных хромосом (соматический кроссинговер) (Алиханян С.И. и др., 1985; Жученко А.А., Король А.Б., 1985; Жученко А.А., 2006).

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью данной работы является изучение влияния НИЛИ на разные стадии индивидуального развития Drosophila melanogaster и оценка генетических и фенотипических эффектов.

ДЛЯ РЕАЛИЗАЦИИ ПОСТАВЛЕННОЙ ЦЕЛИ БЫЛИ РЕШЕНЫ СЛЕДУЮЩИЕ ЗАДАЧИ:

1. Исследовать половые и возрастные особенности проявления некоторых популяционных показателей у Drosophila melanogaster при воздействии НИЛИ на разные этапы онтогенеза.

2. Оценить относительную величину соматического кроссинговера у разных генотипов Drosophila melanogaster, облученных НИЛИ в зависимости от стадии индивидуального развития.

3. Выявить зависимость частоты встречаемости рекомбинантных форм на разных стадиях онтогенеза Drosophila melanogaster от дозы НИЛИ, в виде «доза — эффект».

4. Провести анализ изменений некоторых морфологических структур на теле Drosophila melanogaster, определяемых генетическими процессами на разных стадиях индивидуального развития и воздействием НИЛИ.

5. Изучить степень выраженности фенотипических эффектов в зависимости от стадии онтогенеза, дозы НИЛИ и генотипа.

ПОЛОЖЕНИЕ, ВЫНОСИМОЕ НА ЗАЩИТУ. Воздействие низкоэнергетического лазерного излучения на разные стадии индивидуального развития живых организмов обусловливает генетические эффекты, влияя на фенотипическую и популяционную изменчивость в проявлении признаков

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Изучено распределение Drosophila melanogaster по нескольким популяционным признакам (численность, жизнеспособность, масса тела) в ходе их индивидуального развития. Показана его зависимость от дозы НИЛИ. Впервые проведена количественная оценка влияния всех факторов, контролируемых в эксперименте и случайных — остальных, на исследованные признаки. Определены дозы НИЛИ, оказавшие более выраженное действие на их проявление.

Выявлены закономерности появления частоты встречаемости рекомбинантных форм, обусловленные генетическими процессами в соматических клетках Drosophila melanogaster. Особенности фенотипического проявления генетических эффектов зависели от стадии индивидуального развития, на которой были облучены особи, и их генотипа. Наибольшую чувствительность к действию НИЛИ проявили особи на ранней стадии постэмбрионального периода всех исследуемых генотипов. При этом впервые (наряду с другими данными) по результатам анализа дисперсионных комплексов отмечено, что сила влияния изучаемого в данной работе фактора (НИЛИ) в значительной степени определялась градациями других факторов: генотипами облученных особей и стадиями их индивидуального развития. Стадиоспецифичность фенотипического проявления генетических эффектов НИЛИ наблюдались при изучении некоторых морфологических структур на теле Drosophila melanogaster.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Методические подходы и методология экспериментальных исследований могут быть необходимы для разработки пороговых норм воздействия на живые организмы неионизирующими излучениями и апробации разрабатываемых разными научно-техническими центрами аппаратов для физиотерапевтической практики.

Материалы исследования могут использоваться в научно-исследовательской и педагогической деятельности ученых, занимающихся исследованием влияния НИЛИ на индивидуальное развитие живых организмов.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Апробация диссертационной работы была проведена на заседании совета Лаборатории Радиобиологии неионизирующих излучений (БИО-ЭМИ) Института Естествознания Калужского государственного педагогического университета им. К.Э. Циолковского 3 июня 2008 г. протокол № 5.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: студенческих научных конференциях Калужского государственного педагогического университета им. К.Э. Циолковского (2003 - 2005); XIV научно практической конференции: «Современные возможности лазерной терапии» (Великий Новгород, ноябрь 2003 г. - Великий Новгород, Калуга 2004); IX Всероссийской научно-практической конференции «Образование в России: медико-психологический аспект (Калуга - 2004)»; III Международной конференции «Электромагнитные излучения в биологии» (Москва, Калуга - 2005); научных конференциях аспирантов и преподавателей КГПУ им. К.Э. Циолковского (2005 - 2008); XII Всероссийской научно-практической конференции «Образование в России: психологические, педагогические, медицинские, экологические аспекты» (Калуга - 2008).

По результатам научно исследовательской работы в 2004 г. автору настоящей диссертационной работы была присуждена стипендия имени Н.В. Тимофеева-Ресовского за сравнительный анализ проявления биологического действия низкоинтенсивного лазерного излучения в процессе индивидуального развития дрозофил.

ПУБЛИКАЦИИ РАБОТЫ. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ. Из них 2 — в включенных в перечень ВАК журналах

СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста и включает следующие главы: «Введение», «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты исследований и их обсуждение», включающие три раздела, «Выводы». В рукописи приведены 36 иллюстраций, 18 таблиц. Список цитированной литературы содержит 114 публикаций отечественных авторов и 37 - зарубежных исследователей.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Сидоров, Павел Владимирович

Выводы:

1. Проявление изученных популяционных признаков (численность, жизнеспособность, масса тела) в ходе индивидуального развития в 28.4±5.4% (из 100% влияния всех факторов, контролируемых в эксперименте и случайных - остальных) зависит от дозы НИЛИ. Наиболее выраженное

О О влияние оказали две из них: 2,6 мДж/см и 49,4 мДж/см".

2. Относительная величина соматического кроссинговера у разных генотипов Drosophila melanogaster, облученных на ранних стадиях постэмбрионального периода развития и имаго, обнаружила неодинаковую направленность изменений. Влияние изученного фактора (стадии онтогенеза) достоверно (Бф = 6,36 > Fst = 3,8).

3. Частота встречаемости рекомбинантных форм в разные периоды развития Drosophila melanogaster имела выраженную зависимость от дозы НИЛИ. Действие данного фактора на особей ранних стадий постнатального развития обусловило достоверное появление рекомбинантов при дозах НИЛИ: 2.6, 9.9, 19.7, 49.4, 98,7 мДж/см2. Статистически значимая относительная величина рекомбинантов в Fb полученных от скрещивания облученных родительских форм, имевших в . генотипе те же гены, л наблюдалась только при дозе 4.9 мДж/см .

4. На фенотипическое проявление генетических эффектов НИЛИ (на примере изучения числа, формы и положения макрохет на теле Drosophila melanogaster) оказывали влияние три контролируемых в экспериментальной работе фактора: стадия онтогенеза, доза НИЛИ, генотип облученных особей. Достоверным явилось взаимодействие градаций указанных факторов и суммарное их действие (г| х = 0,20±0,06, Рф = 2,9 > Fst = 2,6).

5. Выраженность фенотипических эффектов (частота появления рекомбинантных форм и изменения морфологических структур на теле Drosophila melanogaster) характеризуют достоверные границы генеральных параметров: 1) r\2A = -С 0,037 0,163 (фактор А - дозы НИЛИ, 2) ti2x, указывающий что действие НИЛИ в значительной степени определяется л генотипами облученных особей (f| х = -С 0,015 0,185) и стадиями онтогенеза (tj2x 0,098 - 0,302).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Сидоров, Павел Владимирович, Обнинск

1. Аджимолаев Т.А., Зубкова С.М., Лапрун И.Б. К механизму действия лазерного излучения на структуру и функцию нервной клетки // Проблемы биоэнергетики организма и стимуляция лазерным излучением. — Алма-Ата, 1976. - С. 45-46.

2. Аджимолаев Т.А., Зубкова С.М., Лапрун И.Б. Средства и методы в квантовой электронике в медицине. Саратов: Изд-во СГУ. — 1976. — С. 156.

3. Алешина Т.Е. Индуцированные низкоинтенсивным лазерным излучением (А,=890нм) морфофизиологические и биохимические изменения в процессе развития Drosophila melanogaster. Автореф. . к.б.н. - Обнинск, 2001. - 23с.

4. Алиханян С.И., Акифьев А.П., Чернин Л.С. Общая генетика, М.: Высш. школа, - 1985. - 448 с.

5. Андрюшина Н.Б., Золотницкая В.П., Проценко Н.Е. Лазеротерапия как физеотерапевтический фактор при лечении трофических язв нижних конечностей // Современные возможности лазерной терапии, 2000 г., Новгород. С. 4-8.

6. Артюхов В.Г., Путинцев О.В. Оптические методы анализа интактных и модифицированных биологических систем. Воронеж: Изд-во Воронежского государственного университета, 1996. - 240с.

7. Артюхов В.Г., Башарина О.В., Пантак А.А., Свекла Л.С. Влияние излучения He-Ne лазера на ферментативную активность и оптические свойства каталазы // Бюллетень экспериментальной биологии имедицины. 2000. - т. 129, №6. - С. 633-636.

8. Афанасьева Н.И., Кару Т.Й., Тифлова О.А. Оксидазы bd и bo вкачестве первичных фотоакцепторов при воздействии низкоинтенсивного видимого монохроматического излучения на клетки ESCHERICHIA COLI // ДАН. -1995. т.345, №3. -с.404-405.

9. Бердышев Г.Д., Голда Д.М., Зуй В.Д. Общая и молекулярная генетика // Киев: Вища школа Головное изд-во, 1984. 239 с.

10. Ю.Бецкий О.В., Ильина С.А. Кожа и проблема взаимодействия миллиметровых волн // Миллиметровые волны в медицине и биологии М.: ИРЭ АН СССР, 1989. - С. 296-3 01.

11. П.Бриль Г.Е., Панина Н.П. Влияние излучения гелий неонового лазера на электрокинетические свойства клеточных ядер // Лазерная и магнитная терапия в экспериментальных и клинических исследованиях: Обнинск, МРНЦРАМН, 1993. - С.10-12.

12. Бронштейн И.Б., Кафиани К.А. Белки, изменяющие конформацию ДНК и их предполагаемая роль в генетической рекомбинации // Успехи современной биологии. 1983. - т.96, вып.1 (4). - с. 13 -27.

13. Будаковский А.В. Воздействие экзогенных и эндогенных полей на метаболизм клетки // Сб. трудов междунар. конф. «Электромагнитные излучения в биологии (БИО-ЭМИ-2000)». -Калуга: Изд-во КГПУ. 2000 г. - С. 32-37.

14. Булякова Н.В. Влияние излучений гелий неонового лазера на рост и развитие новорожденных крысят // ДАН. - 1998. -т. 358, №1. - С.127-130.

15. Булякова Н.В., Азарова B.C. Регенерация икроножных мышц и состояние иммунной системы у облученных крыс при воздействии лучей гелий неонового лазера // Известия АН. Серия Биологическая. - 2002, №1. - с. 38-50.

16. Воронина О.Ю., Каплан М.А., Степанов В.А. Нерезонансный механизм биостимулирующего действия низкоинтенсивноголазерного излучения // Физическая медицина. 1992. - Т. 2. - № 1-2. -С. 40-50.

17. Гайдук В.И., Цейтлин Б.М. Резонансный механизм воздействия мм-излучения на поляризованные молекулы биомембран // Миллиметровые волны в медицине и биологии — М.: ИРЭ АН СССР, 1989.-С. 289-295.

18. Гамалея Н.Ф., Шишко Е.Д., Яниш Ю.В. Механизм лазерной биостимуляции факты и гипотезы // Известия АН СССР. Сер. Физическая. - 1986. - Т. 50, № 51. - С. 1027-1032.

19. Гамалея Н.Ф. Лазеры в экспериментальной клинике. М.: Медицина, 1972.-232с.

20. Гладких С.П. Низкоэнергетическое лазерное излучение (НЭЛИ) и энергетика клетки. Зависимость: доза эффект //В сб.: Новые аспекты лазерной медицины и техники на пороге XXI века. - № 5. — Москва — Калуга. - 2000. - С. 36-55.

21. Гладких С.П. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) на структуру и функции металлосодержащих ферментов // Актуальные аспекты лазерной медицины, 2002, Москва. - С.406 -407.

22. Гончарова Л.Л., Покровская Л.А., Ушкова И.Н., Малькова Н.Ю. Роль антиоксидантных механизмов в реакциях организма на действие низкоинтенсивного лазерного излучения// Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. - Т.34.-Вып. 3.- С. 368-374.

23. Груздев А.Д. Гетерохроматин и однонитевые разрывы ДНК (гипотезы) // Генетика. 1999.- т.35, №7. - с.869 -872.

24. Гуринович Г.П., Зорина Т.Е. Люминесцентно-спектроскопические излучение распределения хлорина 1б и его производных клетках HeLa // Физическая медицина. 1993. - Т.З, № 34. - С. 5-22.

25. Девятков Н.Д., Зубкова С.М., Лапрун И.Б., Макеева Н.С. Физикохимический механизм биологического действия лазерного излучения // Успехи современной биологии. 1987. - Т. 103. - Вып. 1. - С. 31-43.

26. Детлаф Т.А. Безразмерные критерии времени развития зародышей, личинок и куколок дрозофилы и зародышей пчелы в таблицах нормального развития // Онтогенез. 1995. - Т. 26. - С. 125-131.

27. Древаль В.И. Роль лигандов при воздействии ионизирующего излучения на Са АТФазу и Mg - АТФазу // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1994. -т.34, вып.2.-с.210-211.

28. Евстигнеев А.Р. Классификация лазерных импульсных полупроводниковых терапевтических аппаратов по частотно-энергетическим параметрам // Современные методы флуоресцентной диагностики, фото динамической и лазерной терапии: Обнинск, 2001.- с.23-27.

29. Елхов М.П., Каплан М.А. Взаимодействие низкоинтенсивного лазерного излучения с живой биологической тканью // Физическая медицина Т.З, №1-2. 1993. - С. 79-82.

30. Жимулев И.Ф.Молекулярная и генетическая организация гетерохроматина в хромосомах дрозофилы // Соросовский образовательный журнал, Т. 6, №2. 2000. - С. 76 - 83.

31. Жимулев И.Ф. Действие генов в раннем развитии дрозофилы // Соросовский образовательный журнал, №7, 1998. — с. 30 — 34.

32. Жученко А. А., Гужов Ю.Л., Пухальский В.А. Генетика. М.: КолоС, 2006.-480 с.

33. Илларионов В.Е. Основы лазерной терапии. М.: Изд-во «РЕСПЕКТ» Объединения ИНОТЕХ-Прогресс, 1992. - 123 с.

34. Каплан М.А., Курсова JI.B., Елхов М.П., Бизер В.А., Неборак Ю.Т. Попытка использования сверхмощного инфракрасного лазерного излучения для лечения злокачественных новообразований // Физическая медицина, Т. 3, № 1-2. 1993. - с. 38-40.

35. Каплан М.А. Электроэнцефалографическая оценка действия низкоинтенсивного инфракрасного лазерного облучения на мозг человека // Лазеры и аэроионы в биомедицине. Калуга-Обнинск. -1997.-С. 29.

36. Кару Т.Й., Календо Т.С., Лобко В.В. Зависимость биологического действия низкоинтенсивного видимого света на клетку от параметров излучения, когерентности, дозы и длинны волны // Изв. АН СССР. — 1983. Т.47, N 10. - С. 2017-2022.

37. Кару Т.Й., Афанасьева Н.И, Прохоров A.M. Цитохром-с-оксидаза как первичный фотоакцептор при лазерном воздействии света видимого и ближнего ИК-диапазона на культуре клеток // ДАН СССР. 1995.т.342, №5 (июнь). с. 693-695.

38. Кару Т.И., Пятибрат Л.В., Календа Г.С. Импульсное лазерное излучение с ?i=820hm увеличивает адгезивные свойства клеточной мембраны: зависимость от темнового периода между импульсами //

39. ДАН. 1999. - т.369, №1. - сЛ 16-118.

40. Кару Т.И. Первичные и вторичные клеточные механизмы лазерной терапии // Низкоинтенсивная лазерная терапия / Под общей редакцией С.В. Москвина, В А. Буйлина. М: ТОО «Фирма «Техника»», 2000. -с.71-95.

41. Кару Т.Й. Клеточные механизмы низкоинтенсивной лазерной терапии // Успехи современной биологии.- 2001.- т.121, №1. с. 110-120.

42. Кац В.А. ФДТ: современное состояние, проблемы и перспективы // Вопросы онкологии. 1992. - Т.38, №6. - С. 35-42.

43. Климанов М.Е., Северская Л.П., Карпицкая B.C. Низкоинтенсивная инфракрасная лазерная терапия: Методическое пособие / Под общ. ред. М.А. Каплана. Обнинск, МРНЦРАМН, 1993. - 74с.

44. Колтаков A.M. Влияние фотодинамического воздействия и его отдельных составляющих на морфофизиологические и биохимические показатели Drosophila melanogaster // Автореф. дис. канд. биол. наук, 0бнинск.-2006.-18с.

45. Коновалов Е.П., Радионов Б.В., Кавкало Д.Н., Калабуха И.А. Влияние гелий-неонового лазерного излучения на активность ферментов // Врачебное дело. 1991, №11 (992) ноябрь. - с. 42 - 47.

46. Корочкин И.М., Бабенко Е.В. Механизмы терапевтической эффективности гелий-неонового лазера. М: Медицина. - 1990. - 238 с.

47. Костерин С.А., Браткова Н.Ф. Mg2+ -АТФаза плазматической мембраны гладкомышечных клеток как рН чувствительный ферментативный сенсор // ДАН. 1995.-t.342, №5. - С. 696-699.

48. Кузьмичев В.Е. Изучение действия инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на различные стадии онтогенеза Apis mellifera и Drosophila melanogaster // Автореф. дис. канд. биол. наук. -Обнинск, 1997. 20 с.

49. Кузьмичев В.Е., Чернова Г.В. О нелинейном механизме поглощения электромагнитных излучений биологическими макромолекулами //

50. Электромагнитные излучения в биологии (БИО-ЭМИ-2000): Труды международной конференции. Калуга. - 2000. - с.114-121.

51. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону: Изд-во Ростовского университета, 1990. - 224 с.

52. Лавренчук Г.И., Серкиз Я.И., Рябченко Н.Н., Дудченко Т.Н. Модифицирующее действие низкоинтенсивного электромагнитного излучения на облученные клетки // Радиационная биология. Радиоэкология. 2001. - Т. 41. - № 1. - С. 73-77.

53. Лакин Г.Ф. Биометрия. М: Высшая школа, 1990. - 352с.

54. Лобашев М.Е. Генетика, 1967. Л.: Изд-во. Ленинградского университета. — 751 с.

55. Лохматова С.А. Влияние длительного импульсного электромагнитного облучения СВЧ диапазона малой интенсивности на семенники и придатки семеннников крыс // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1994. - т.34, вып.2. - с.279-285.

56. Мантейфель В.М., Бакеева Л.Е., Кару Т.И. Облучение He-Ne лазером изменяет ультраструктуру митохондрий в последующих генерациях дрожжевых клеток //ДАН. 1999. - т.366, №5. - с.702-704.

57. Медведева Н.Н. Практическая генетика. М.: Наука, 1966.- 338с.

58. Мелехова О.П. Влияние локального лазерного облучения на эмбриональные клетки низших позвоночных // Электромагнитные излучения в биологии. Труды III международной конференции. — Калуга, 2005. С. 334 - 340.

59. Мельников И.И. Механизмы действия низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения (НИЛИ) на биологические ткани в молекулярно клеточном аспекте // Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии. - Томск, 2004. - т.З, №1.- с.112-113.

60. Москвин С.В. Эффективность лазерной терапии. — М.: НПЛЦ «Техника», 2003. 256 е., 67 ил.

61. Пальцев Ю.П., Желтов Г.И., Комарова А.А. Биологические эффекты и критерии оценки опасности лазерного излучения // Вестник Академии Наук. Медицинские науки. 1992, №1. - С. 32-36.

62. Пасс Х.И. Фотодинамическая терапия в онкологии: механизмы и клиническое применение // Физическая медицина. 1993. - Т.З. - №3-4.-С. 5-22.

63. Петин В.Г. Биофизика неионизирующих физических факторов окружающей среды // Учебное пособие. Обнинск: МРНЦ РАМН, 2006.-265 е.: ил.

64. Петрищев Н.Н., Михайлова И.А. Основания для применения НИЛИ в медицине // Современные возможности лазерной терапии: Сб. науч. тр. XII науч.-практ. конф. ноябрь 2000 г. Новгород-Калуга, 2000. -С. 22-22.

65. Петров И.Ю., Бецкий О.В. К вопросу о механизме биологического действия низкоинтенсивного электромагнитного миллимитрового излучения // Миллиметровые волны в медицине и биологии — М.: ИРЭ АН СССР, 1989. С. 242-247.

66. Петрышева С.Г., Романова Т.П., Бриль Г.Е. Сравнительный анализ содержания катехоламинов в эритроцитах при действии лазерного излучения in vivo и in vitro // Физическая медицина. 1994. - т.4, №1-2.-С. 16.

67. Пикулев А.Т., Бышнева Л.Н., Зырянова Л.Н., Лаврова В.М., Филимонов М.М. Действие лазерного излучения на Na, К -АТФазную активность синаптосом головного мозга крыс // Радиационная биология. Радиобиология. 1991. - т.31, вып.2. - с.252-256.

68. Полуэктова Е.В., Митрофанов В.Г., Бурыченко Г.М., Мяснянкина Е.Н., Бакулина Э.Д. Дрозофила Drosophila // М.: Наука, 1975. С. 128-146.

69. Плохинский Н.А. Математические методы в биологии. Учебно-методическое пособие // Изд-во Моск. ун-та. 1978. - 265 с. с ил.

70. Пухова Я.И., Салмин В.В. Исследования влияния излучения N2 -лазера на кинетику генерации активных форм кислорода гранулоцитарно макрофагальными клетками в системе цельной крови // Радиационная биология. - 1995. - т.35, вып.2. - с.286-290.

71. Рокицкий П.Ф. Введение в статистическую генетику // Мн., «Вышэйш. школа». 1978. - 448 с. с ил.

72. Самойлов Н.Г. Морфологические основы лазерной терапии // Низкоинтенсивная лазерная терапия / Под общей редакцией С.В. Москвина, В.А. Буйлина. М: ТОО «Фирма «Техника»», 2000. - с.95-115.

73. Светлов П.Г. Критические периоды развития макрохет в жизненном цикле D. melanogaster // Докл. АН СССР. 1967. - с. 226 - 228.

74. Серов O.JL Электронный вариант курса лекций по «Генетике развития». Новосибирск: НГУ, 1998. 66с.

75. Скобелкин O.K. Применение низкоинтенсивных лазеров в клинической практике. М.: ООО «Полиграф-иформ», 1997. — 298с.

76. Смирнов В.Г. Цитогенетика. М.: Высшая школа., 1991. - 247 с.

77. Терентьев П.В., Ростова Н.С. Практикум по биометрии пособие // Л., Изд-во Ленингр. ун-та. 1977. — 152 с.

78. Тетерина Т.П. Свет, глаз, мозг. Принципы цветолечения. Калуга: Облиздат, 1998. -215с.

79. Тифлова О.А. Бактериальная модель для исследований влияниялазерного излучения на интенсивность клеточного деления // Радиобиология. 1993. - тЗЗ. вып.3.-с.323-328.

80. Толчинская В.Е., Филлипович Ю.Б. Характеристика ферментативной активности фракций грены тутового шелкопряда (Bombyx mori L.) в процессе ее развития // Биохимия насекомых.- М.: МГПИ.- 1972.-Вып. 15.- С. 31-39.

81. Федосеева Г.Е., Смольяникова Н.К., Кару Т.И., Зеленин А.В. Изменение структуры хроматина лимфоцитов после облучения He-Ne лезером // Радиационная биология. Радиобиология. 1987.- Т. 27, вып. 5.-С. 605-609.

82. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Аратюнян А.В., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. СПб.: Наука, 2003. -327 с.

83. Хвостова В.В., Корочкин Л.И., Голубовский М.Д. Проблемы генетики в исследованиях на дрозофиле, Новосибирск: Наука. 1977. -278 с.

84. Цыб А.Ф., Каплан М.А. Лазерная и магнитная терапия в экспериментальных и клинических исследованиях, 1993. — Обнинск: МНРЦ РАМН.-123 с.

85. Ченцов Ю.С. Общая цитология. М.: Изд-во МГУ, 1995. - 348 с.

86. Чернавский Д.С., Хургин Ю.И. Физические механизмы взаимодействия белковых макромолекул с КВЧ излучением // Миллиметровые волны в медицине и биологии — М.: ИРЭ АН СССР, 1989.-С. 227-235.

87. Чернова Г.В., Кузьмичев В.Е., Эндебера О.П., Каплан М.А. Некоторые результаты исследований действия низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на организменном уровне // Физическая медицина. 1993. - Т.З. - № 3 - 4. - С. 44-45.

88. Чернова Г.В., Эндебера О.П., Кожухарь А.Ю., Беденко В.П. Модификация некоторых показателей живых организмов экзогенными электромагитными излучениями // Вестник Калужского университета. Калуга, 2007. - С. 48 - 55.

89. Черняков Г.Ч., Корочкин В.Л., Бабенко А.П., Бигдай Е.В. Реакции биосистем различной сложности на воздействия КВЧ излучением // Миллиметровые волны в медицине и биологии М.: ИРЭ АН СССР, 1989. - С. 140-168.

90. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В., Карпова Е.С., Телегина JI.B. // Российский онкологический журнал. 1998. - №4. -С. 3-12.

91. Шаталкин А.И. Регуляторные гены в развитии и проблема морфотипа в систематике насекомых // Чтения памяти Н.А. Холодковского. 2003. - 109 с.

92. Шевченко А.С., Кобялко В.О., Шевченко Т.С., Каплан М.А. Влияние лазерного облучения на вход 45Са и характер связывания 1-аналино-8-сульфоната с фибробластами китайского хомячка // Физическая медицина.- 1993. т.З, №1-2. - с.24-27.

93. Эндебера О.П. Оценка биологической эффективности инфракрасного низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на уровне характеристик приспособленности у Drosophila melanogaster// Автореф. дис. канд. биол. наук, 0бнинск.-1996.-20с.

94. Эндебера О.П., Чернова Г.В. Исследование биоэффективности низкоэнергетического лазерного излучения на модельном биообъекте и некоторые актуальные вопросы радиобиологии неионизирующих излучений // Электромагнитные излучения в биологии (БИО-ЭМИ-2000).

95. Abbadess A. R., Burdick А.В. The effect of X irradiation on somatic crossing - over in Dr. melanogaster // Genetics. - 1963. - V.48. - P. 1345 -1356.

96. Anderson H., Roberge M. DNA topoisomerase II: a review of its involvement in chromosome structure, DNA replication, transcription end mitosis // Cell Boil. Int. Rep. 1992. -V. 16. - P. 717-724.

97. Arvanitaki A., Chalozonitis N. Reactiones bioelectriques a la photoactivation des citocromes // Arch. Sci. Physiol. 1947. - Vol. 1. - P. 385-405.

98. Baker W.K. Position effect variegation. I I Advances Genet. - 1968. -V.14.-P. 133- 169.

99. Berns M.W., Bewley W., Sun Ch. Ho, Templin P. Free Laser Irradiation at 200 mm Affects DNA synthesis in Living cell // Proc. Natl. Acad. Sci USA. - 1990. - v.87, april. - p. 2810-2812.

100. Bogdanov Y.F., Dadashev S. Ya., Grishaeva T.M. In silico search for functionally similar proteins involved in meiosis and recombination in evolutionarily distant organisms // In Silico Biology. 2003. — V. 3. — P. — 173-185.

101. Blank Soo L., Lin H. et al. // Bioelektrocchem. Bioenerg. 1992. -V. 28.-P. 301-309.

102. Bodenstein D. The postembryonic development of Drosophila. // In: «Biology of Drosophila». N.Y. London, John Wiley and Sons. 1950. - p. 275-367.

103. Bryant P.S. Cell lineage relationships in the imaginal wing disk of Drosophila melanogaster. // Developm. Biol. 1970. - V. 22. - P. 389 -411.

104. Fristrom I.W. The developmental biology of Drosophila. Annual Rev. Genet., 1970 №4. p. 325 - 246.

105. Garcia Bellido A., Merriam J.K. parameters of the wing imaginal disc development of Drosophila melanogaster.// Developm. Biol. - 1971. -V. 24.-P. 61-87.

106. Chubykin V.L. Genetic control of the formation and reorganization of chromocenter in Drosophila // Russ. J. Genet. 2001. - V. 37. - P. 888 -893.

107. Chubykin V.L. Structural characteristics of the chromocenter in ovary cells of C(3)G and nod mutations of Drosophila melanogaster // Russ. J. Genet.- 2001. V.37. - P. 1032-1040.

108. Gilbert L.S., Schneiderman H. A. The content of juvtnile hormone and lipid in lepidoptera. Sexual differences and developmental changes.// Gen. and Compar. Endocrinol. 1970. - V.l. -P.453 - 472.

109. Glazkov G.V., Rogozin I.B., Glazkov M.V. Comparative study and prediction of DNA fragments assjciated with various elements of the nuclear matrix // Biochim. Biophys. Acta.-2001.-V. 1517. -P.351-364.

110. Gruzdev A.D., Lezzi M. The torsional state of DNA in a transcriptionally heperactive puff of polytene chromosomes // Chromosomes Res. 1998. - V.6. - P. 367 -378.

111. Joon S.B., Fox A.S. Permeability of premature eggs from Drosophila collected with the «ovitron». Nature. - 1965. - P. 206.

112. Kary T. Stimulation of metabolic processes by low-intensity visible light: a scientific basis for biostimulation // M. Wolbarsht (Ed). Laser Application in Biology and Medicine. Vol. 5, Plenum Press: New York, 1991. - P. 1-47.

113. Kary T. Primary and secondary mechanisms of action of visible to - near IR radiation on cell // J. Photochem. Photobiol. B: Biol. - 1999.-Vol. 49. - P. 1-17.

114. Kimura R., Hirano T. ATP dependent positive supercoiling of DNA by 13S condensini a biochemical implication for chromosome condensation // Cell. - 1997. - V. 90. - P. 625-634.

115. King J.C. Differences between populations in embryonic developmental rates.// Amer. Naturalist. 1959. - V. 93. - P. 171.

116. Kruk N. N. Tikhomirov S. A., Andreyuk G. M., Dzhagarov В. M. In: Ultrafast Processes in Spectroscopy. N. Y.: Plenum. - 1996. - P. 523526.

117. Lawrence P.A. The Marking of a Fly: The Genetics of Animal Desing. Oxford: Blackwell Sci. Publ., 1992. p. 232.

118. NOthinger R. The larval development of imaginal disks. // In: Thebiology of imaginal disks, Ursprung H., NOthinger R. (Eds.). Berlin -Heidelberg, N.Y., Springer-Verlag. 1972. - v. 5. - p. 1-34.

119. Onweneel W. Normal and abnormal determination in the imaginal disks of Drosophila with spewial special reference to the eve disks // Acta embroil, exper, N 1, P. 95-119.

120. Passarella S., Casamassima F., Milinari S. et al. Increase of Photo Electrochemical Potential and ATP Synthesis in Rat Liver Mitochondria Irradiated in vivo by Helium-Neon Laser // FEBS Lett. V. 175. - P. 9599.

121. Patterson J.T. Somatic segregation produced by X rays in Drosophila melanogaster// Proc. Nad. Acad. Sci. - 1930. - V. 16. - P. 109 -111.

122. Poulson D.F. Histogenesis, organogenesis and differentiation in the embryo of Drosophila melanogaster Meigen. // In: Biology of Drosophila. N.Y., John Wiley & Sons. 1950. - p. 168 - 274.

123. Popp F.-A., Chang J.J. The physical background and the informational character of biophoton emission // Biophons. Dordrecht et al: Kluwer Academic Publishers. 1998.- P. 239-250.

124. Rabinowitz M. Studies on the and early embryology of the egg of Drosophila melanogaster. J. Morphol., 1941. - p. 1 - 36.

125. Rochkind S. et al. A single Transcutaneous Light Irradiation to Injured Peripheral Nerve: Comparative Study with Five Different Wavelengths // Lasers in Medicine Science. 1989. - V. 4. - P. 259-259.

126. Schubiger G. Anlagenplan, Determinations-Zustan und Trunsdeterminations-Leistungen der mannlichen Vorderbeinscheibe von Drosophila melanogaster.// Roux'Arch. Entwicklungs mech. Organismen. 1968.-V.160.-P.9-40.

127. Sonnenblick B.P. The early embryology of Drosophila melanogaster

128. In: Biology of Drosophila / ed. M. Demerec. John Wiley: New York, 1950.- 62- 163 p.

129. Tower J. Aging mechanisms in fruit files // BioEssays. 1996. - V. 18. -№ 10.-P. 799-807.

130. Tuner J. Hode L. Laser therapy in dentistry and medicine. -Stockholm, Sweden: Prima Books, 1996. 236 p.

131. Warner H.R., Hodes R.J., Pocinki K. What does cell death have to do with aging // J. Am Geriatr. Soc. 1997. - V. 45. - № 9. - P. 1140-1146.

132. Wurgler F.E. Radiatuin-induced translocations in inseminated eggs of Drosophila melanogaster // Mutat. Pes. 1971. - V.13, №4. - P.353-359.