Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

УСТОЙЧИВОСТЬ СЛИВЫ К ВИРУСУ ШАРКИ

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "УСТОЙЧИВОСТЬ СЛИВЫ К ВИРУСУ ШАРКИ"



На правах рукописи Л АХМАТОВА Ирина Тимофеевна

УДК 634.22 : 632.38

УСТОЙЧИВОСТЬ сливы К ВИРУСУ ШАРКИ

Специальность 06.01.11 — Защита растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

МОСКВА 1997

Диссертация выполнена в отделе вирусологии (в настоящее время лаборатория получения и производства безвирусного посадочного материала) Научно исследовательского селекционно-технического института плодоводства (НИСТИП), г Кишинев, Республика Молдова, з 1981 — 1996 гг.

Научный консультант — доктор биологических наук, профессор Т. Д. Вердеревская.

Официальные оппоненты доктор сельскохозяйственных наук, профессор Н. В. Агафонов; доктор биологических наук, профессор Ю. И. Помазков; доктор биологических наук, профессор Г. Ф. Говорова.

Ведущая организация—Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомникоеодства

Защита диссертации состоится /^х 1997 г

в 7 час на заседании диссертационного совета Д 120 35 09 в Московской сельскохозяистьенной „кадемии им К А Тимирязева (127550, г Москва, у л Тимирязевская, 49 Ученый совет 1СХА)

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХ \

Автореферат разослан А^Ъ-^чг?

1 г

Ученый секретарь диссертационного совета с- В. А. Шкаликов

- 2 -

I. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Марка сливы - самое вредоносное вирусное ваболевание плодовых культур -возникло в 1915-1916гг. в Македонии (D. Atanasoff, 1932) и к настоящему времени широко распространилось во многих европейских странах,в том числе и в Молдове (А.S.Roy, I.M. Smith, 1994). Болезнь встречается в 22 районах республики, наиболее поражена зона традиционного выращивания слива- Хынчештский, Ревинский и Каларашский районы (Т.Д. Верде-ревская, Е Г. Ывринеску, 1985). По нашим данным степень распространения заболевания в ряде хозяйств Резинского района достигает 24-75Х (табл.1), вредоносность шарки сливы проявляется в двух формах: потеря вкусовых качеств плодов в результате изъязвления и опадения плодов за 20 дней • до ' созревания основного урожая. Несмотря на существование во многих европейских странах системы контроля заболевания, направленной на получение беэви-русного посадочного материала,в 1960-1970гг. потери урожая сливы в наиболее пораженных регионах достигли 70-100Z (Т. Д. Верде-ревская.в. Г.иаринеску,1985; Blattny С. .Heger М. , 1965; Jordovlo' IL , 1976; Sutiö а ~ Rankovlc M. , 1983; Trtfonov D., 1974). Do мнению авторов, работ,они были обусловлены, восприимчивостью старого европейского сортимента сливы к вирусу шарки.

В связи с- этим исследование устойчивости сливы к вирусу варки,отбор и эксплуатация в промышленных насаждениях толерантных и устойчивых сортов и форм сливы представляется актуальным.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - создание молдавского генофонда сливы, толерантного к устойчивого к вирусу Варки. '..-.

Задачи исследований: J.•.■.■,-

1. Изучить природу устойчивости сливы к вирусу варки.

2. Разработать достоверную методику для оценки устойчивости сливы к вирусу варки.

3. Оценить устойчивость к парке молдавского генофонда сливы, включаодэго:

а) районированные и распространенные сорта

б) новые и интродуцированные сорта

в) гибридный материаш

в условиях естествешюгои in,y,vwn">in,nr" Bttrai?'n" __

ЦЕНТРАЛЬНАЯ НАУЧНАЯ БИБЛИОТЕКА

4. Разработать стратегию авшиты насаждения сливы от вируса шарки с учетом вирусоустойчивости сортов.

5.Исследовать некоторые альтернативные способы зашиты сливы от вируса варки.

Таблица 1.

Степень распространения шарки в промыжленных насаждениях сливы некоторых хозяйств Реэинсного района. 1987 г.

Хозяйство Сорт Гсд посадки Уровень заражения,Z

сада

К-э им. К. Маркса, Тулеу грае 1977 42

с. Трифешть Анна Шлет 11

Альвена 1978 67-75

С-а "Вица ноуэ". ЧЬадавская 1977 17-18

о. Куйзовка фаммя

Альвена - 30-46

Аяиа Bier - 2

К-8 им. Дммнртгь, Ренклод Хра- - 12

с. Подгорень мовых

Молдавская - 30

ранняя

Сентябрьская - 22

Альвена - 27

Ш. Кирова, Альвена 1878 24

С. Рошканъ

Научная новизна. Разработано новое направление в валите * растений от вирусов - ядукция устойчивости хозяев продуктами вторичного метаболизма, обладавдими биоантиоксидантнши свойствами - стероидна« глякозидами (A.c. СССР N 1135164). раскрыт механизм действия данных, совдхжнхй « паюсистемв растение-вн-

рус: стимуляция ааяитных реакций растения-хозяина с одновремен-' ним ингнСированием инфекционности вируса Установлен антивирус-вый эффект стероидных гликоэидов в отношении вирусов табачной мозаики. некротической кольцевой пятнистости листьев косточковых, варки сливы." Шказано, что данные соединения участвуют в формировании устойчивости растений к вирусам, т.е. являются факторами устойчивости к вирусам.

Впервые стероидные гликоаиды обнаружены в почках, листьях, плодах, коре и ядрах косточек сливы с помощью тонкослойной хроматографии и установлена корреляционная зависимость между содержанием стероидных глик08ид0в в почках сливы и ее устойчивостью к вирусу парки (г - - 0,76).

Разработан новый метод оценки устойчивости сливы к вирусу ■арки в условиях естественного инфицирования вирусом. Установлена корреляционная зависимость между содержанием вируса шарки в растении и степенью поражения листьев (г - 0,69), степенью поражения листьев и степенью поражения плодов (г - 0,63). На основании сделанных выводов разработана система критериев для достоверной оценки устойчивости сливы к вирусу шарки в условиях естественного инфицирования вирусом, включаювея следующие шжа-- ватели: .;-"',.' ;

- содержание стероидных глиновидов в почках

- содержание вируса в растении

- степень поражения листьев

- степень поражения плодов.

С помощью данной системы проведена оценка устойчивости мол- • давского генофонда сливы к вирусу щррки на естественном инфекционном фоне, отобраны толерантные и устойчивые образцы, что в. дальнейшем нашло подтверждение при искусственном заражении.

Впервые дана характеристика патогенвости выявленных на территории Шлдовы традиционного молдавского и вишневого изолятов вируса варки. Показано, что молдавский иволят характеризуется бо-" лее высокой агрессивностью и более продолктельным инкубационным периодомСразница 1 год), чем недавно обнаруженный изолят из вгани. , *'. ■ • "

; практическая значимость. Разработанный способ иммунизации с целью повьшения устойчивости растений С а. о. ОООР М 1186164)

на 1988 год внедрен в 50 хозяйствах ЬЬддовы и за ее пределами (Прибалтика,Ленинградская область, Белоруссия, Дальний Восток) оо значительным экономическим эффектом (см. "Приложение").3 соединения под коммерческими названиями молдстим, павстим и эко-стим включены в "Список химических и биологических средств завиты растения и регуляторов роста, разрешенных для применения в сельское и лесном хозяйстве Республики лЬлдова" ( Кишинев, 1994 ч.II, стр. 384, 391, 399) как индукторы устойчивости растений - иммунизаторы.

На фоне естественного, ч затем и искусственного заражения отобрано 3 устойчивых и 10 толерантных сортов и 11 толерантных гибридных форм,из которых сформирован молдавский 1енофонд толерантных и устойчивых к шарке образцов сливы. Эти сорта и гибриды переданы по актам Министерству сельского хозяйства и продовольствия Республики ! злдова для эксплуатации в промышленных насаждениях сливы.

По результатам оценки дана характеристика восприимчивости к шарке районированного и распространенного в насаждениях сортимента сливы, который разбит на группы, различающиеся по устойчивости к патогену. Для каждой группы разработаны меры профилактики и аазоты от шарки, изложенные в "Рекомендациях по профилактике и защите насаждений сливы от вируса варки с учетом виру-соустойчивости сортов", утвержденных Ученым Советом НИСТИП в декабре 1990г. и переданных Министерству сельского хозяйства и продовольствия.

Устойчивые и толерантные образцы использованы в качестве родительских форм для получения габридов сливы. Получен гибридный материал, на котором е настоящее время изучается каследуе-шсть устойчивости к шарке гибридным потомством сливы.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены па: II международной конкуренции по ххкяи и биотехнологии биологически активных природных соединений в Будапеште, 1683; 14 международной симпозиуме по химии природных соединений в Познани (Полыа). 1884; VII всесоюзном совещании по вирусным болезням о Е&хьнгсе^ 1984; Всэсосэнсй научно-практической конференция со плодоводству в Нехнтслолэ, 1985; 3 международной мояфэреяцни по химии в биотехнология биологически чшшкшх природных _соа дине-

ний в Софии,1985; Международном симпозиуме по фитопатологии биологического общества ГДР в Ашерслебене,19Ь6; 1У республиканской конференции физиологов и биохимиков Молдавии в Кишиневе,I9t36; III Всесоюзном совещании по устойчивости сельскохозяйственных растений к болезням и вредителям в Риге,1986; III областной конференции молодых ученых в Мичуринске,1989; Международном совещании по вирусным болезням растений в Атерслебене (Германия),1969; Европейском симпозиуме по органической химии в Белграде (Югославия),1969; Республиканской научно-практической конференции "Проблемы современного садоводства" в Киеве,I9Ö9; Всесоюзном научно-практическом семинаре "Индуцированная устойчивость сельскохозяйственных культур к фитопа-тогенам" в Кабардино-Балкарии,1989; Международном совещании по марке сливы в Пловдиве (Болгария),1989; IX Всесоюзном совещании по им-»Огаитету растений к болезням и вредителям в Минске,I99T; Международной научной конференции,посвященной 100-летию открытия вирусов Д.И.Ивановским в Ростове-на-Дону,1992; Международном совещании по регуляторам роста и развития растений в Москве,19ЭЗ; Международной . конференции по молекулярно-генетическим маркерам и селекции растений в Киеве,1994; Международной конференции "Фундаментальные и прикладные проблемы в фитовирусологии" в Ялте,1994; Международном симпозиуме "75 лет исследованиям по фитопатологии и устойчивости растений в Ашерслебене" (Германия) ,1995; Международном совещании по ¡парке сливы в Лангелусе (Австрия),1995; Общеевропейском совещании по шарке сливы в Будапеште (Венгрия),1996.

Публикации работы. По теме диссертации опубликованы 42 печатные работы и авторское свидетельство СССР № II35I64. . .

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 327 страни- . цах машинописного текста и состоит из введения, 12 глав (глава II включает в себя рекомендации производству), выводов, списка использованной литературы и приложений. Экспериментальный материал изложен в 50 таблицах в тексте и в 42 таблицах Приложения. Список использованной литературы состоит из 218 наименований, в том числе 147 зарубежных авторов.

Автор выражает глубокую признательность и благодарность за помощь и поддержку цри выполнении исследований научному консультанту, д.б.н.,проф. Т.Д.Вердеревской, коллективу Отдела вирусологии ШСТИП, а также докт.хим.н.,проф. П.К. Кинте, кандидатам химических наук Н.Е. Мащенко, С.А. Швецу, В.А. Бовейко, Т.С. Дукышец Института генетики АН РМ. ,

II. Игсто, материалы и методы проведения исследований

Работа проводилась в 1981~1995гг. в отделе вирусологии НКСТИП (сейчас лаборатория получения и производства безвирусного посадочного материала). Начиная с 1988г. исследования велись в рамсах "Программы по целевой селекции сливы на устойчивость к парне",разработанной совместно с отделом селекции и сортоизучения института. Спектральные исследования осуществлялись совместно с лабораторией скрининга биологически активных веществ Института генетики АН Республики Мэлдова. Полевые эксперименты проводились в коллекционных насаждениях сливы НИСТИП, совхоза "Фруктовый Донбасс" Дубоссарского района, колхоза "Советский пограничник" Ниспоренского района и в СПХ "Яаовень".

Материалы исследований :

1. "МэлдавсюЛ" и "вишнёвый" изоляты вируса шарки сливы.

2. 66 сортов и 59 гибридов сливы (табл. 2).

3. Растения-индикаторы видов Niootiana acuminata L и Chenopodtim foetldum L.

4. Стероидные гликоаиды павстим.молдстим, а кости«, функио-вид, томатонин, F-гитонкн, дигитонин, мелонгозид

Таблица 2

Сорта и гибриды сливы, исследуемые в экспериментах по кг учению устойчивости сливы к вирусу парки

Районированные к Анна Шет, Венгерка итальянская, Венгерка встречанциеся в крупная сладкая, Кишиневская ранняя, Вен-васаяяевиях герка юбилейная. Памяти Костиной, Персико-

вая, Ренклод Альтана, Соперница, Тулеу грае, Удлинейная, Поздняя Храмова, Кабардинская ранняя. President, Stanley, Молдавская ранняя, Венгерка молдавская, Сентябрь, екая, Альвена, Венгерка ажаяская, Венге]рка Кодринская, Аватан

Новы» я ; Равняя Храмова, Ватуся, Отличная, Rpeoa

перспективные осени. Венгерка поздняя, Ренклод храмовых, Памяти Вавилова, ИЫмвая, Венгерка дувкг-

*ая, Красавица, Венгерка самая повлиял

Юпродуцированные Дряновска, ГаСровская, Синяя Юбилей, Ввн-- . repica домашняя 4012, Венгерка домшняя 4003,

Венгерка домапшяя 4001, .Вт*, Кирке, Вен: гврка кавказская, Легенда, Елген, Сивая, . Мелитопольская ранняя, Бон-де-бри, Фронтиер, Венгерка Авербаха, Оермина, Ренклод веленый, Montfort, Agen 707, Hernann, Orase románlasca, Bystrlóka, Óaóanska Najbolja, Óaüanska lepotica, fiaüansky бебег, 6a£anska rodna, CaÓanska rana, Reine-Claude d'Oulllns, Opal, Sooldus, Jelta boutlloovidna, Berbank

Гибриды 2-11-72, 3-7-116, 3-10-165, 3-18-168, Я-2Э-5.

3-21-136, 3-23-166, 3-25-45, 3-26-28, 3-4-35, 3-27-128, 3-32-118, 3-33-76, 3-62-19, 4-8-68, 3-38-126, 4-19-37, 4-19-46, 11-8-29, 3-8-148, 3-14-108, Э-21-91, 3-21-154, 3-23-112, . 9/57, 3-24-69, 3-25-76, 3-27-10, 3-30-58, 3-32-120, 3-38-91, 3-41-32, 4-7-44, 4-8-25, 4-19-42, 10-36-ИЖ, 9/58, 11/8 , 7/9 , 2/15, 3/35, 22/72, ' 11/9, 7/45, 8/19, 10/71, 4/50, 21/106, 21/82, - . 6/62, 4/36, 7/31, 8/81, 5/28, 2/12, 23/77,

2-5, В-IX-19-29-42-12-20, В-IX-29-35/14-11-20

Методы исследований:

1. Хроматография в тонком слое на силикагеле 6-50 Содержание стероидных гликовидов (СГ) в почках сливы в рекогносцировочном эксперименте определяли с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) на силикагеле в-50. Навеску растительного материала (1г) измельчали до гомогенного состояния, засыпали в колбы, валивали 10мл 70Х-ного метанола и в"стаивали неделю при комнатной температуре для получения экстракта. Х&оматографию на силикагеле 0-50 проводили по следующей схеме:

- готовили хромагографическую систему хлороформ: метанол (7:3)

- стеклянные пластинки покрывали силикагелеы

- на подготовленные хроматографические пластинки капилйром наносили готовые метанольные экстракты, а тага© вещество-свидетель известного химического строения и молекулярного веса

- помещали пластинку в хроматографическую систему на 1 час

- высушивали пластинку

- высуиенную пластинку проявляли реактивами Эрлиха или Сань е.

2. Спектрофотометрия

Для определения содержания СГ в разлз шых органах сливы в количественном выражении использовали спектрометрию на спектрофотометре Specord ДОМ при длине волны 2б0нм. Экстракты из высушенного при +60 °С до постоянного веса растительного материала получади как описано выше. Впоследствии количество анализируемого материала было снижено до 25мг. Из-за отсутствия условий для хранения метангта он был заменен 70Х-ным этанолом. 25мг высушенного растительного материала валивали 5мл 701-ного этанола. Оптическую плотность полученных экстрактов определяли с помощью спектрофотометра Specord 40М.

3. Иммуноферментный анализ

Содержание вируса парки з листьях сливы определяли с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) по методу М. F.Clark, А. N. Adans {1977), оптимизированному для условий Молдовы tt X Билкей (1892).

Пробы для анализа отбирали в сроки,оптимальные для выявления вируса: конец мая - начало июня. Использовали молодые верхушечные листья одно-двухлетних побегов из середины и глубины кроны. Вирус з тестируемом образце избирательно отлавливался и иммобилизовался специфическим антителом,адсорбированном на твердой поверхности (полистернночые пластинки для микротитрования -плашки).Отловленный вирус затем реаг.фует с добавленными специфическими антителами, которш связаны с энзимом (а нависе экспериментах - аэлочная фосф^газа). Пэсге промывки меченое энзимом антитело с захваченным вирусом обнаруживается гллорныетрически добавлением подходпззго дет фермента субстрата. Оптическую плотность растворов определяют на спектрофотометре И-600 фирмы Dynateoh при длине золны 410нм.

4. Фитопатологнч- скаа оценка

Степень поражения листьев и плодов оценивали по скале

• . -Ю - " Т. Ф. Бивол, Т. Д. Вердеревской, X. Кеглера, Е. А. Кукурузак, разработанной для шаркисливы и основанной на вивуально определяемой интенсивности симптомов на листьях и плодах (1984).

5. Индукция устойчивости

; Для изучения возможности индукции у растений-хозяев устойчивости к вирусу шарки с помощьп СГ, очищенным по методу van Oosten Н. J. (1970) препаратом вируса шарки сливы заражали индикатор Niootiana acuminata. С появлением отчетливых оимптомов растения среэали и помещали в заранее приготовленные водные растворы СГ (с - 0.005Х).Срезанные контрольные растения помещали в воду. Обработку водными растворами СГ проводили 24 часа при комнатной температуре. После этого вирус с помощью буфера переносили на индикатор Chenopodlum foet idum, реагирующей на заражение местными некрозами. Наилучший результат по переносу вируса парки обеспечивал 0.02М калиево-фосфатный буфер, pH 8.0 с добавлением 0.01М DIEKA, 25Z никотин-основания, 2Z ШГ (MB 6000) и 0.4Х кофеина ( по Вилкей Е Д., 1992). Чэрез 15 дней проводили подсчет некрозов ва листьях индикатора.

6. Заражение

Искусственное ааражение "молдавским" иволятом вируса парки отобранных на естественном инфекционном фоне сортов и гибридов сливы осуществляли с помощью шитков - участков коры с зараженного побега, которые окулировали в крону исследуемых деревьев. Материал для заражения отбирали в коллекционном саду сливы НЮ-ТИП с деревьев сорта Венгерка молдавская, сильно аа^аяюнного вирусом варки ( интенсивные симптомы заболевания на листьях и плодах). Иодуиоферментный анализ подтвердил присутствие вируса варки в черенках, отобранных для заражения (коэффициент эксткн-ции составил о. 685). Сныптомы заболевания на восприимчивых сортах проявлялись уда черев 4-6 месяцев после эараления.

7. Статистический анализ результатов исследований

Экспериментальный материал обрабатывали с помощью дисперсионного я корреляционного анализов по Дэс^хову в. А. (1979).

- 11 -

Ш. Результаты исследований.

1. Стероидные гликозиды как факторы устойчивости сливы к

вирусу шарки.

Вторичные метаболиты растений - стероидные гликозиды, благодаря антиоксидантным свойствам, способны стимулировать защитные реакции растения-хозяина, индушоуя у него устойчивость к вирусам. Это Сило установлено нами в серии экспериментов,проведенных в патосистемах втм-томатк, БТЙ-таОак, НКП-виташ( Балашова И. Т., 1984; Шахматова И. Т. "Др., 1989; Палилова А. Е и др.. 1990),и относится к экзогенным стероидным гликозидам. Какова же роль эндогенных стероидных гликозидов в формировании потенциала устойчивости у содержащих их растений- хозяев"7

Наличие стероидных гдикозидов (СГ) в почках, листьях, плодах и ядрах постов с сливы установлено с помощью тонкослойной хроматографии, причем устойчивый к шарке codt отличался более интенсивной окраской пятна.что позволяло предположить более высокий уровень содержания СГ. С целью получения количественной информации по данному показателю использовали спектрофотс!. - грию на фотометре Specord 40М. Обработка данной информации с помощь» дисперсионного аналиаа подтвердила вначимые на 5Х-ном уровне различия между вариантами опыта; содержание СГ в почках толерантных и устойчивых сортов было значимо выше (табл. 3). Это ука-по на связь между устойчивостью к заболеванию и содержанием Ср в растении-хозяине и предполагало участие данных соединений в процессе вирусного патогенеза. Последнее было подтверждено в серии экспериментов по изучению изменений содержания СГ в листьях и плодах сливы в результате заражения шаркой, проведенных в 1984-1986гг.. Показана неоднозначность данных изменений в разных органах сливы: в листьях содержание СГ возрастает,в плодах - снижается (табл. 4 5).Следовательно,СГ расходуются в процессе патогенеза. Учитывая повышенное содержание СГ в толерантных и устойчивых сортах можно предположить, что выполняемые ими при этом функции носят характер зашиты от патогена,и содержание данных соединений в растении шлет отражать уровень его устойчивости к шарке и использоваться в качестве маркера для определения реального статуса устойчивости хозяина в условиях естественного инфицирования вирусом.

- 12 - Таблица 3

Результаты дисперсионного анализа количественного содержания СГ в почках сливы различных по устойчивости к варке сортов и гибридов. НИСТИП, 1984г.

I I |Разность с| Данные визуаль-

М | Варианты (сорта ¡Содержание |критерием ной фитопатоло-

п/п| и гибриды сливы) |СГ в почках! К | гической оценки

| I I (Хер.) | устойчивости *

1__I_-I_L

1. Альвена 1.17 -0.62 В ,

2. Stanley 2.07 0.38 Т

3. Венгерка кодр. 1.96 * 0.27 У

4. Памяти Вавилова 2.06 0.37 У

5. Венгерка молд. 1.07 -а 62 В

в. Изюмная 1.97 0.28 \ т

7. В/67 1.07 -0.62 В

8. 7/45 1.34 -0.35 В .

0. 7/31 1.48 -0.21 в

ia 9/168 1.38 -0.31 В

11. 8/19 1.36 -0.33 В

12. 8/87 1.37 -0.32 В

13. 11/8 • 1.27 -0.42 В

14. 10/71 1.94 0.25 в

15. 6/28 2.76 • 1.07 У

16. 7/9 2.38 0.69 У

Критерий Ы - 1. вв ВОР - 0.44

Об

* по Вердеревской Т.Д. я др. ("Устойчивость сортов к гибридов сливы к вирусу варки".- "Генетика иммунитета и селекция сельскохозяйственных растений на устойчивость в Молдавии".- Вишнев: Огиинца. - 1984. - С. 99-107)

В - восприимчив ;

I - толерантен

У - устойчив

Таблица 4

Изменение содержания СГ в листьях сливы в результате заражения вирусом шарки. Коллекция НИСТИП.

1084г.

Сорта (А) Наличие вируса (В) X (НСР - 0,25)

- + А 06

Альвена 0,49 1,99 1,24

Stanley 1,42 0,92 1.17

Венгерка кодринская 0,85 0,92 0,89

Памяти Вавилова 0,59 1,97 1,28

Венгерка молдавская 0,98 1.11 1,05

Изюмная 0,78 1,37 1,08

Венгерка поэднян 0,89 1,19 1,04

Венгерка" итальянская 1,69 1,54 1,57

Венгерка юбилейная 1,87 2,76 2,32

Ренклод Храмовнк 1,14 1,08 1.11

г CHOP ^ОДО) 1,06 1,49 •

• В <35

1985 г.

Сорта (А) Наличие вируса (В) X (НСР - 0,10)

А 05

♦ 1

Мэлдавская ранняя 0,34 0,62 0,48

Аиатан 0,36 0,34 0,34

Ренклод Храмовых 0,57 0,90 0,74

Венгерка вбилейная 1,14 1,26 1,20

Ренклод Альть^а 0,70 0,66 0,73

: - - 14 - .

Венгерка молдавская 0,56 0,58 ~ 0,57

Памяти,Вавилова 0,79 1,07 . 0,93

Наемная 0,43 0,89 0.66

х (НСР - 0,05) 0,61 0,75 г

В 05 -

1986 г.

Сорта (А) 1 Наличие вируса (В) X (НСР -0,39)

А 05

-

Венгерка молдавская 0,74 1,31 1,03-

Изюмная 1,44 .1,65 1,55

Памяти Вавилова 2,41 2,75 2,58.

Венгерка итальянская 1,98 2,38 2,18

* (HOP - 0,28) 1.64 2.02

В 05 • - ■

Таблица 6

Изменение содержания СГ в плодах сливы в результате заражения вирусом варки. . Коллекция НИСТИП

1984 г.

Сорта (А) Наличие вируса'(В) + X (НСР -0,15) к 05

Альвена 1,26 0,86 1.06

Stanley 1.40 1.03 1,22 .

Венгерка кодрннская 1,21 0.91 1.06

Памяти Вавилова 1,20 -1.08. 1.12

- 16 -

Венгерка молдавская 0.99 0,85 0,92

Изюмная 1,23 0,63 0,93

X (НСР - 0,09) 1,22 0,89

В Об

1985 Г.

Сорта (А) Наличие вируса (В) X (НСР - 0,53)

А 05

— +

Молдавская раннкл 2,11 1,75 1,93

Аяатая 2,80 1,53 2,17

Ренклод храмовых 2,94 1,10 2,02

Венгерка яйилейная 2,08 3,65 2,87

Ренклод Альтана 2,05 2,62 2,34

Соперница 3,76 1,88 2,82

Венгерка молдавская 2,76 2,53 2,65

Памяти Вавилова 2,03 1.61 1,82

Изкыная 3,64 0,99 2,27'

X (НСР - 0,25) 2,67 1,96

В 05

• / 1986 Г.

Сора (А) Наличие вируса (В) х (НС? - 0,39) _ А 05

Венгерка молдавская 1,78 0,84 1,32

Иэшная г,3б 1,06 . 1,71

- 1в

Памяти Вавилова 2,95 Венгерка итальянская 1,99

1,90 2,50

2,43 2,25

X (НСР - 0,28) 2,27 1,58

В 05

2. Разработка теста для диагностики устойчивости сливы к вирусу шарки по содержанию СГ в почках.

Традиционно селекция растений-хозяев на устойчивость к патогену состоит ив трех этапов:

- фотопахологическая оценка на естественном инфекционном фоне и отбор толерантных и устойчивых образцов

- искусственное заражение отобранного материала (создание искусственного инфекционного фона)

- фитопатологическая оценка на искусственном инфекционном -фоне и отбор толерантных и устойчивых образцов.

Трудности мониторинга вируса парки сливы на первом этапе отбора связаны с тем, что устойчивость сливы к вирусу шарки контролируется полигенно, в с отсутствяем механического переноса патогена в естественных условиях. Авторы предшествующих работ, проводя только симптоматическую оценку, не наблюдали зависимости между устойчивостью сортов по листьям и плодам (не подтвердив, однако, данное заключение корреляционным анализом между исследуемыми показателями). В результате на последнем этапе селекции у них не прослеживалось "никакой зависимости между восприимчивостью в условиях естественного заражения и устойчивостью' прк искусственном заражении... "'( Вердеревская Т.Д. и др. "Устойчивость сортов и гибридов . сливы к вирусу шарки". -"Генетика иммунитета и селекция сельскохозяйственных растений на устойчивость в Молдавии". -Кишинев: Шгииица. - 1984. - С. 106). Сказанное свидетельствует о том, что для проведения успешного первичного отбора в патосистеме слива-вирус варки (облигатный парши? механически не передается, а генетически контролируется полигенно) только симптоматических характеристик недостаточно.

Они должны быть дополнены характеристиками, реально отражающими статус устойчивости растения-хозяина Как например, факторы устойчивости - стероидные гликозиды.

Показатель содержания СГ в спящих почках сливы (возможность ранней диагностики устойчивости) сравнили с помощью корреляционного анализа с надёжным базовым показателем - степенью поражения плодов. Первоначально эксперимент провели на 8-и контрастных по .устойчивости к парке сортах сливы, базовые показатели которых подтверждены рядом авто^ов(Устойчивость сортов и гибридов.....1984; ВапкоУ1с М. , 19ГЗ; }?апкоУ1с М., Раигхтс Б., 1988)

и сомнений не вызывают. С помощью корреляционного анализа 8-и ковариационных пар была установлена зависимость между исследуемым и базовым показателями с коэффициентом - 0,75. Корреляция вначима на 52-ком уровне, средней степени, обратной взаимозависимости: чем болыи гдикозидов содержится в почках сливы, тем меныйе- поражаются плоды вирусом парки С табл. 6).

Таким образом, было показано, что содержание СГ в растении отражает уровень устойчивости его к вирусу шарки и может служить биохимическим маркером при оценке устойчивости.

В>1988 году эксперимент был повторен в коллекционном насаждении- Сливы- на естественном инфекшонном фоне с использованием 47 ковариационных пар. Для соблюдения принципа единственного логического различия отбирали только зараженные растения (контроль* с помощью ИФА); восприимчивые, толерантные и устойчивые об-эзцы были представлены в равной пропорции. Это позволило провести полновесный анализ зависимости между содержанием СГ в почках сливы и степенью поражения ее плодов вирусом шарки на бо-•¿ее высоком уровне значимости. Наличие корреляционной зависи-коста между исследуемыми показателями подтверждено на О. IX-ном уровне с коэффициентом - 0,63. Корреляция средней степени, обратной взаимозависимости (табл. 7).

Таким образом подтверждено, что показатель содержания 'СГ в почках сливы отражает уровень устойчивости ев к вирусу шарки, и • можэт использоваться как тестерныа при оценке устойчивости на естественном инфекционном фоне.

- 18 - Таблица б

Нереляционный анализ данных по содержанию СГ в почках сливы (X) и степенью поражения ее плодов вирусом шарки (Y).

Коллекция ЫНЮШ. 1985 г. ' *

: i--г—-1-—-1--—

(Значения ( Отклонения | Квадраты | Произведения Сорта |признаков! от среднего! отклонений |

(варианты) |— У Г—_ i _ I-г—i—г~Н-—

IX | Y ЦХ-х) |(Y-y) |(Х-х)2 |(Y-y)2 | (X-*)(Y-y)

Памяти 1.09 О 0.05 -25.86 0.0025 668.74 -1.2930 Вавилова

Венгерка 1.79 О 0.75 -25.86 0.5625 668.74' -19.3950 поад.

Opal 1.10 0 0.06 -25.86 0.0036 668.74 -1.5516

Stanley 1.66 8.7 0.62 -17.16 0.3844 294.47 -10.6392

Ренклод Хра- 0.53 32.4 -0.51 6.54 0.2601 42.77 -а 3354 мовых

Венгерка 0.82 41.6 -0.22 15.74 0.0484 247.76 -3.4628 юбилейная

Венгерка 0.75 54. 2 -0.29 28.34 0.0841 8Св.16 -8.2186 молд.

Венгерка 0.69 70.0 -0.46 44.14 0.2025 1948.34 -19.8630

итал. .".'.'.

Zx.y 8.33 206.9 1.5481 6342.70 -67.7686

х.у 1.04 25.86

-67.7686 " 1 / 1 - Г

г . ------------——; . -0.75 Sr -\/-- - 0.27

N1.6481 *6342.698 1 П-2

г 0.7S

Чг--- - •——--2.78; t -2.31

Sr 0.27 06

tr > t - корреляционная зависимость суцественна. 05

Таблица 7

Кореляционный анализ между содержанием СГ в почках сливы (X) и степень» поражения ее плодов вирусом шарки (У). Коллекция ЫНИИП. 1988 г.

Сорта (варианты) .. _ ... | Значения | | признаков | ■ 1 Отклонения от среднего г "' 1- Квадраты |Произведе-отклонений | ния

1 1 X | 1 | 1 V I 1 (Х-х) ! СУ-у) 1 (Х-ад2 |(У-У)2 |(Х-х)*а-у)

1 1 1 2 | 1 з 1 1 4 5 ■ 1 6 I • 1 7 I в

Ренклод 1.26 10.4 0.02 -11.45 0.0004 131.10 -0.229

Ахьтава 1.21 2.4 -0.03 -19. 45 0.0009 378.30 0.584

1.16 13.8 -0.09 -3.05 0.0881 9.30 0.275

1.13 1а 8 -0.11 -3.05 0.0121 9.30 0.336

1.17 18.0 -0.07 -3.85 0.0049 14.82 0.269

Кишиневская 0.93 15.2 -0.31 -6.65 0.0961 44.23 2.061

ранняя 1.42 12.0 0.18 -9.85 0.0324 97.02 -1.773

0.95 19.2 -0.29 -2.65 0.0841 7.02 0.769

0.98 28.0 -0.26 6.15 0.0676 37.82 -1.599

0.91 24.0 -0.33 2.15 0.1089 4.62 -0.709

Памяти 1.76 1.2 0.52 -20. 65 0.2704 426.42 -10.738

Вавилова 2.06 3.6 0.81 -18.25 0.6561 333.06 -14.783

1.95 4.0 0.71 -17.85 0.5041 318.62 -12. 673

1.84 2.4 0.60 -19. 45 0.0036 378.30 -11.670

Изюмная 1.19 6.8 -0.05 -15.05 0.0025 226.50 0.753

1.39 24.8 0.16 2.95 0.0225 а 70 0.443

1.63 9.6 0.29 -12.25 0.0841 150.06 -3.553

• 1.43 15.2 0.19 -6.65 0.9361 44.22 -1.263

1.36 13.6 0.11 -а 25 0.0121 еаоб -0.907

Кирке 1.87 14. С. 0.63 -7.85 о^заба 61.62 -4.945

' - 20 -

1.86' tt. 0 ' 0.62 -15.85 0.3844 251.22 -0.827

1.67 6.0 0.43 -15.85 0.1849 251.22 -6.815

1.95 16.0 0.71 -5.85 0.5041 34.22 -4.153

Авва met 0.99 4.0 -0.25 -17.85 0.0625 318.62 4.462

1.01 8.8 -0.23 -ia05 0.0529 170.30 aOOl

1.09 6.8 -0.15 -16.06 0.0Й26 £26.60 2.7б2

0.99 3.6 -0.25 -18.25 0.0625 333.62 4.562

Тулеу грао 1.59 0.5 0.35 -21.35 0.1225 455.82 -7.472

1.75 6.7 0.51 -15.15 0.2601 229.52 -7.726

1.11 28.0 -0.13 6.15 0.0169 37.82 -0.799

Венгерка 0.92 58.4 -0.32 36.55 0.1024 1335.90 -11.969

обыкновенная 1.08 43.2 -0.16 21.35 0.0256 455.82 -2.416

0.96 50.0 -0.28 2а 15 0.0784 792.42 -7.882

1.11 26.5 -0.13 4.65 0.0169 21.62 -0.604

1.11 90.0 -0.13 ба 15 0.0169 4644.42 .-8.859

Соперница 0.91 64.4 -0.33 42.55 0.1089 1810.50 -14.041

0.93 49.0 -0.31 27.15 0.0961 737.12 416

1.01 32.4 -0.23 10.56 0.0529 111.30 -2.426

1.05 47.9 -0.19 26.05 0.0361 678.60 -4.949

President 0.86 20.0 -0.38 -1.85 0.1444 а 42 0.703

Молдавская 0.94 65.6 -0.30 43 75 0.0900 1914.06 -13.125

0.97 65.6 -0.27 4а7Б 0.0729 1914.06 -11.812

Венгерка 1.17 27.6 -0.07 5.75 0.0049 за 06 -0.402

Юбялейвая 1.23 42.4 -0.01 20.55 0.0001 422.30 -0.205

1.51 42.4 0.27 -19.45 0.0729 378.30 ! -5.251

1.06 1^4 -0.18 -а 45 0.0256 11.90 0.621

Z*.y 59.37 104а 6 5.0511 20560.9975-171.0045

«,у - 1.24;21.85

-171.0045 г - ----------------- - 0.53

N103885.654472

0.53

Бг - 0.12503 Ьф--- 04.24; Ь -3.39

0.125 001

Ъф > I - корреля'шя значима на 0.1Х-ном уровне.

001

3. Оценка уотойчивооти молдавского генофонда сдивы к вирусу шарки.

А. Способ оц нки устойчивости.

Важными предпосылками для достоверных опытов по определе-•яию устойчивости сливы к вирусу шарки является соответствующие изоляты вируса и надежные методы определения устойчивости, которые гарантируют наиболее достоверную оценку устойчивости.

В Мэлдове в естественных условиях выявлены 2 изолята вируса шарки - "молдавский" и "вишнёвый" (Вердеревская Т.Д., Мари-неску & Г., 1085; Ка1азЬ}ап J. А. вЬ а1., 1988). С цель» отбора наиболее агрессивного изолята вируса для создания искусственного инфекционного фона неучена патогенность обоих изолятов при искусственном заражении ими трех контрастных по устойчивости к парке сортов сливы. В результате эксперимента показана более высокая агрессивность традиционного "молдавского" изолята при более продолжительной инкуСадионном периоде (разница с "вишневым" изолятом - 1 год) (табл.8)./Учитывая этот факт, для соада-ния искусственного инфекционного фона в 1989г. испольаовали "молдавский" иволят виртса парки.

- 22 - Таблица 8

Патогенность "молдавского" и "вишневого" иволятов вируса шарки сливы. Коллекция НИСТИП.

1 , ..- I Содержание Степень 1 | Степень ■ (Содержание

1 вируса в рас- поражения | поражения | СГ

Сорта |Годы|тении. листьев,* | плодов, * | в почках

| 1 I М.И.* | в. и.* М.И. В. И. 1 | Vt.IL В. И. 1 | М.И. I В. И.

Кирке - 1988 0.015 0.033 0 0 0 0 1.86 1.06

устой- 1989 0.069 0.135 0 0 16.0 10.7 1.79 1.89

чивый 1990 0.060 0.075 0 0 ■ - - 1.44 1.42

1991 0.025 0.025 2.8 2.0 3.6 1.6 1.82 1.91

Анна Шпет- 1988 0.012 0.016 0 0 4.0 0 1.14 0.99

толерант- 1989 0.069 0.107 0 0 6.0 14.0 1.11 1.03

ный 1990 0.089 0.119 12.0 0 0.81 0.74

1991 0.075 0.161 16.0 8.0 8.0 6.0 1.18 1.08

Соперница- 1988 0.044 0.015 0 0 32.4 0 1.01 0.91

восприим- 1989 0.186 0.073 48.4 35.6 28.0 20.0 0.9Р 0.93

чивый 1990 0.792 0.604 68.0 54.0 0.77 0.79

1991 0.248 0.309 49.6 43.6 34.4 39.6 1.09 0.91

* М. И. - "молдавский" изолят вируса шарки сливы

* Ей. - "вишневый" изолят вируса шарки сливы •

Надежность показателей, применяемых при оценке устойчивости, определяли с помощью корреляционного анализа. В экспериментах исследована взаимозависимость между:

- содержанием вируса в растении и степенью поражения листьев

- степенью поражения листьев и степенью поражения плодов

ва 95 ковариационных парах. Прямая, значимая на О. IX-ном уровне корреляционная зависимость средней степени установлена между ■сследуемши показателями (вклотая установленную ранее зависимость между содержанием СГ в почках и степенью поражения плодов) по следупрй схеме:

- 23 -ПОКАЗАТЕЛИ Биохимические Симптоматические

Следовательно, первичная оценка устойчивости сливы к вирусу шарки на естественном инфекционном фоке достоверна при использовании следующих показателей:

- содержание СГ в почках

- содержание вируса в растении

- степень поражения листьев

- степень поражения плодов.

При обработке результатов полевых экспериментов, з дисперсионном анализе наряду с традиционно применяемым контролем вос-• приимчивости (сорт Молдавская ранняя) был задействован контроль устойчивости, что дало возможность отобрать высокотолерантные сорта сливы, близкие по своим показателям к европейскому стандарту устойчивости - сорту Кирке.

Б. Результаты оценки устойчивости к вирусу парки районированных и распространенных в насаждениях сортов сливы.

Оценку устойчивости 21 районированного и распространенного в насаждениях сорта сливы к зпрусу шарки проводили на естественном инфекционном фоне коллекции ЕИСТКП с 1983 по 1991 год по приведенным выше показателям. В таблице 9 представлена схема эксперимента. Отбор толе.антных и устойчивых образцов проводили на основании статистически значимой близости оценочных показателей Исследуемого сорта к показателям контроля устойчивости. На рис. 1 приведен пример такого отбора на одном из оценочных показателей - содержании СГ в почках. За период исследований из 21 районированного и распространенного в насаждениях сорта для оценки на искусственном инфекционном 'боне были отобраны сорта:

- 24 -

- President

- Stanley ■ - Opal

- Памяти Вавилова

- Памяти Костиной

- Персиковая.

Таблица 9

Схема эксперимента по оценке устойчивости к вирусу шарки районированного и распространенного в насаждениях сортимента слива Коллекция НИСТИП. 1988-1991гг.

Показатели

N Варианты (сорта) (методы исследований)

1. Молдавская ранняя ? контроль 1. Содержание СГ в почках восприимчивости . (спектрофотометрия)

2. President

3. Stanley

4. Сентябрьская . 2. Содержание вируса в . б. Тулеу грае растении

6. Opal (иммуноферментный

7. Анна Шлет • анализ)

8. Ренклод Альтана

9. Венгерка молдавская

10. Кишиневская ранняя 3. Степень поражения

11. Венгерка юбилейная .. листьев

12. Памяти Вавилова .(фитопатологическая

13. Игпыная. оценка)

14. Памяти Костиной

15. Соперница

16. Персиковая Г \

17. Венгерка крупная сладкая 4. Степень поражения

18. Кабардинская ранняя.. .. плодов

19. Венгерка ажанекая . ..(фитопатологическая

20. Ренклод Храмовых оценка)

21. Кирке - контроль устойчивости ■

- Z 5"—

1988г

НСРМ,=0 25

I г 3 4 5 6 7 8 9 10 II 13141516 If 3 /PiiO

1989г

16

LZ

ов

II

Q±

HCP =033 • 001

I г 3 <4 5 в 7 8 9 Ю II IZ 13 /4 <5 10 17 18 19 20 ¿1~jf

1990»

Ы

10

06

г

I

mkH

08

.. 1991г.

U

10

ал

I 2 3 4 S б 7 8 9 '0II /г 13 14 15 16 1718 10 2021 /Г

нУс;0.гг

I

S3 1

I I K-N KS] I

i г 3 4 5 7 в g ю и iz i3 ы is ¡6 if

is 19 20 21 w

Рис. l. Отбор толерантных и устойчизых к варке обраацов из районированных и распространенных в насааде-ниях сортов по содержанию СГ в спящих почках.

- ?6 -

В. Результата оценки уотоЯмгаости к вирусу шарки новых и ннтродуцированных сортов сливы.

Оценка устойчивости ряда новых и п гродуцированных сортов сливы к зирусу парки проводилась на ее -ественчоч инфекционном фоне коллекционного насаждения совхоза "фруктовый Донбасс" о 1989 по 1991 год по приведенным выпе показателям. Сх»ча эксперимента приведена в таблице 10. Толерантные и устойчивые образцы отбирали на основании статистически значимой б.т »ости их оценочных показателей к показателям контроля устой,гивссги (пример - на рис. 2). За период исследований из 35 сортов было отобрано 5 для оценки на фоке искусственного заражения ьлрусом:

- Agen 707

- Памяти Костинс!

- Ca£anska Najbolja

- Удлиненная

- President

НИ один из клонов Венгерки домашней не проявил толерантности или устойчивости к вирусу ни по одному из оценочных показателей на естественном инфекционном фоне.

Г. Оценка отобранных с">тов слизы на искусственном инфекционном фоне.

Высокий естественный инфекционный фон коллекционных 'осаждений сливы позволил выделить ряд сортов, обладающих определенным уровнем устойчивости к вирусу шарки: Памяти Вавилова, Памяти Костиной,Персиковая,Удлиненная, fiaöanska Najbolja, Agen 707. President, Stanley, Opal. Эти и другие сорта сливы, отобранные другими исследователями Европы на естественном инфекционном фоне (Scoldus, Jelta boutilkovidna, Ifontfort, Reme-Claude d'Oullins, Berbank и др.) и представляющие интерес для изучения устойчивости к "молдавскому" изоляту вируса, были размножены в совхозе "Еистру" Оргеевского района и высажены на опытный участок ОПХ "Яловень" площадью 2,59 га как коллекционябе насаждение сливы в апреле 1989 года В августе этого же года саженцы были заражены "молдавским" изолятом вируса шарки сливы. В мае 1990г. в ходе подеревного обследования этого насаждения, отсутствие симптомов заболевания на листьях установлено у сортов: Кирке, Удлиненная, Opal, President и Jelta boutilkovidna,причем содер-

новых и интродуцированных сортов сливы.

Коллекция совхоза "вруктовый Донбасс". 1989-1991гг.

7. Ранняя Храмова . * растении

8. Поэдн.чя Храмова (иммуноферментный

9. Натуся . . анализ)

10. Agen 707

11. Удлиненная .

12. fiaiansky бебег

13. Синяя юбилей

14. Bystriika а Степень поражения

15. Венгерка самая поздняя . листьев

16. Краса осени (фитопатологическая

17. President оценка) .

18. Буря

1°. Памяти Костиной -

20. Венгерка итальянская .

21. Hermann

22. Венгерка домашняя 4003 4. Степень поражения

23. Габровская плодов

24. Stanley (фитопатологическая

25. 6a2anska Najbolja оценка)

26. kfantfort ■

27. Кабардинская ранняя.

28. Кирке - контроль устойчивости и др.

N Варианты (сорта)

Показа те л и (методы исследований)

восприимчивости

2. Grasa romániasea

3. Дряновска

4. Отличная

Б. Венгерка домашняя 4012 6. Венгерка домашняя 4001

1. Молдавская ранняя - контроль

1. Содержание СГ в почках (спектрофотометрия)

2. Содержание вируса в

1989«

16

12

08

нп

Ггз-> 5 6 7 8 9 ю и 121314 15161? 13ы

I

I 1

1990«

.„нср^ОЗО Щ-А.

I г 3 ч 5 0 73 9 и II 1113 4 15 10 I? 1Ь 1112021 ^ Ы

/Э9/г

14

КО

0.6

ч?

§ I

НСР =00? " 001

«234 5 8 7 & 9 10 II 121514 1516 I? ¡813 202! N

Рис. 2. Отбор толерантных и устойчивых к шарке образцов сливы из новых и интредуцированных сортов по со-дерааниао СГ в спящих почках.

жание вируса (E4|Q- 0.283) диагностировано только у сорта Opal. В 1994 - 1995 гг. оценка устойчивости была проведена по полной схеме. Результаты исследований представлены в таблице 12 и на рисунках 3 и 4.- Они свидетельствуют о существовании в европейском и молдавском сортименте толерантных и устойчивых к парке образцов, йэ при этом, сорта, обладающие определенным уровнем устойчивости, модно разделить на 3 группы: , •

1) сорта с полевой устойчивостью к вирусу - Opal,Удлиненная и Jelta boutilkovidna - будучи инфицированными, они не проявляли симптомов ни на листьях, ей на плодах и вирус парки не"выявлялся у них с помощью'ЙФА'на протяжении 5 лет с момента заражения

2) высокотолерантные сорта, блокирующие инфекцию по всему габитусу, - реагирует на инфекционный фон симптомами на на листьях и плодах, сравнимыми с устойчивым контролем: Berbank,. President, 6a£anskc lepotica.&aianska Najbolja

3) высокотолерантные сорта, блокирующие инфекцию на уровне листьев, - реагируют на инфекционный фон сильными симптомами на листьях, но близки к устойчивому контролю по степени поражения плодов - Scoldus,Памяти Вавилова,Agen 707, Stanley, Reine-Claude d'Oullins.

Д. Результаты оценки устойчивости гибридов сливы на искусственном инфекционном фоне.

Отобранный ранее на естественном инфекционном фоне гибридный материал сливы (Вердеревская Т. Д., и др., 1984) был оценен нами в условиях искусственного инфицирования вирусом в коллекции сливы колхоза "Советский: пограничник" Ниспоренского района в 1988-1989 гг. и во вновь сформированном гибридном массиве ОПХ "Яловень" в 1991-1994 гг. (площадь 2,85 га). Результаты исследований представлены в таблицах 12-15.

Как можно видеть из таблицы 12, наиболее статистически близкими к устойчивому контролю в условиях искусственного заражения вирусом в насаждении колхоза "Советский пограничник" оказались формы: 3-25-75, 3-33-75; 3-23-112, 3-32-119, 3-32-120 н 3-52-19. Они были отобраны с искусственного фона как толерантные и устойчивые.размножены и в 1997 году будут высалены в ОПХ НИСТЯП как коллекционное насаждение слива -

Таблице. 11

Содержание вируса шарки в искусственно инфицированных сортах слива ОПХ "Яловень".

Среднее, X к К +

N Варианты (сорта) __

1993г. 1994г. 1995г.

1. Венгерка молдавская - Кв 145 100 C3

2. Ренклод зеленый 27 55 95

3. Габровская 101 50 31

4. Montfort P5 32 72

5. Венгерка душистая 52 79 100

6. Öa5anska гапа 46 80 100

7. Персиковая - 25 11

8. Scoldus 76 93 58

9. Памяти Вавилова - 80 98

10. Agen 707 - 77 59

11. Stanley - 69 93

12. Rome-Claude d'Oulllns 90 66 100

13. Berbank 5 67 55

14. President - 64 97

15. fcaianska lepotlca 26 62 42

16. Öaüanska Najbolja - 60 55

17. Удлиненная 6 7 7

18. Opal 8 7 35

19. Jelta boutllkovidna 8 9 10

20. Кирке - Ky 11 7 11

/993« %

50

I 2 34 56 7 8 --

1954г. %

50

25

И

12 3 4 5 6 7 в 9 10 11 12 13141516 17181Я 20 М сорта.

«5 Н.З

1995г.% ш

113 4 5 б 7 8 д 10 11 1Е 1314 15 /0 17 (8 19 20 Ц сорта.

Рис. а Отбор толерантных и устойчивых к варке сортов сливы на искусственной инфекционном фоне - по степени поражения листьев.

Рас. 4. отбор толерантных я устойчивых к варке сортов сливы на искусственной инфекционном фоне по степени поражения ""УГ"

Таблиц» 18

Результаты количественной оценки устойчивости ряда гибридов ставы искусственно зараженных вирусом шарки. Колхоз "Советский пограничник", 1089г.

1 ........—'-" Н1 1 1 . | Содержание | Степень пора- Г 1 I Отклонение | Степень -1 1 Отклонение

| Гибриды | вируса. х | жения дисть- 1 от | поражпия 1 от

■ 1'' ' 1 Е I ев, х, X 1-г -—1 плодов, X, ZH-г

1 1 410 1 1 ■ 1 Кв 1 ■ ■ ку | 1 Кз | ■ i ку

1. Молдавская ранняя - Ив 0.750 100.0 Кв 100.0 60.0 Кв 51.8

2. 8-2Б-7Б 0.792 23.0, -77.0 га о 6.8 -53.2 -1.4

3. 3-18-158 0.648 34.3 - -65.7 С4.3 22.6 -37.4 14.4

4. 3-10-16Б , 0.604 за б -66.6 33. б 21.6 -38.4 13.4

б. 4-17-74 0.472 32.0 -68.0 32.0 67.4 7.4 59.2

6. 3-14-108 0.381 44.1 -55.9 44.1 - - -

7. 3-32-160 0.322 26.0 -75.0 25.0 12.0 -48.0 3.8

а 3-26-29 . 0.303 28.1 -71.9 28.1 1.3 -5а 7 -6.9

9. 3-24-69 0.263 27.0 -74.0 27.0 га 5 -36.6 15.3

10.3-23-112 0.220 0 -100.0 0 4. б -66.6 -а 7

11.4-26-83 0.206 ав -96.4 ае •■„ - - - - -

12.4-19-42 0.203 56.1 -4а 9 56.1 21.7 -38.3 las

1^3-32-120 0.119 0 -100.0 0 ~ 2.4 -57.6 -6.8

14.3-27-111 0.117 аз : -91.7 8.3 - '. - -

16.3-62-19 0.111 - ■ -' 4.0 -66.0 -4.2

16.3-33-76 0.099 0 -100.0 0 0.3 -69.7 -7.9

17.3-32-119 0.060 0 -100.0 . 0 ае -56.4 -4.6

1& Кирке - Ку 0.117 0 -100.0 Ку аг -51.8 Ку

юр . 23.6 06

НОР 14.1 05

Партия из 9 сортов и ю ггбр.соз сливы, выезл.".цал .искусственный инфекционный фен СГГ"! "Ялоэень" э 10а=г., з чае 1С83 г. была иьфлотрсрака "уо-^азскум" ,;золятом вируса глрл!. СХ-и-л устойчивости прозоги-аеь в 1031-1993гг.. К согзлэчию.н/ СД/Ч из сортов или гибридез не был стсСран в зге Я гар?:г,: по пс-члзггеллм устойчивости, однако сценка друге? партии, состс^й лз 13 гибридных форм сливы была болев успешой.

Она была высажена в ОГК "Я-юе^нь" э мае 19-., гс„а. а /».г в августе заражена "молдазскич" гзеллточ вирус ^рчи сл.'г.л Оценка устойчивости к в/?усу проводилась а 1932-10С4гг.. Результаты представлены в таблицах 13-15. На фене дсчугстзеч^ого заражения статистически близкими к устойчлвсуу контролю о-екчл/оь формы. 3/35, 4/36, 4/50, 22/72, 23/77, причем фермы 4/СО. 22/72 23/77 не проявляли симптомов заболевания на л?стьлх и плодах на протяжении всего периода исследования, хотя вирус у них диагностировался с помогаю ИФА в первые 2 года поолэ заражения (т-'л. 13). Эти Форш были отобраны как зысокотолэрантные на искусственном инфекционном фоне а размножены.

Таким образом, в результате комплексной оценки устойчивости, проведенной поэтапно на естественном и искусственком инфекционных фонах был сформироь л молдавский генофонд толеран-твых и устойчивых в тарке образцов сливы, представленный в таблице 16. Все указанные сорта и гибриды были переданы по актам Министерству сельского хозяйства и продовольствия Республики Молдова,размножены и в 1997 году ими будет заложено коллекционное насаждение слива Остальной исследованный в Молдове сортимент оказался восприимчивым к вирусу парки в той или иной степени.

Та&яица 13

Содержание вируса парки в искусственно вараженных

гибридах оливы. ОПХ "Яаовень".

—,---,-----.-

N I (Среднее содержание вируса варки по годам

ПП | Гибриды |-1-—-г-

I | 1692 i 1993 | 1994 _i_i_i_;_i_'

1. Венгерка -Кв 0.750 0.930 0.511 молдавская

2. 2/15 0.259 0.254 0.228 ' а 6/62 0.258 0.401 0.171

4. 23/77 0.249 0.061 0.095

5. 11/9 С. 226 0.378 0.254 в. 2-5 0.209 0.800 0.318

7. 21/106 0.185 . 0.109 - 0.198

8. 22/72 0.167 0.121 0.029

9. 21/82 0.124 0.104 0.194

10. 4/36 0.123 0.238 0.037 .11. 4-8-58 0.043 0.346 0.184

12. 2/12 0.037 0.136 0.326

ia 3/35 0.023 0.115 0.142

14. 4/50 0.016 0.153 0.045

15. Кирке - Ry 0.089 0.079 0.037

Таблица 14

Степень поражения листьев гибридов сливы вирусом шарки. Искусственный инфекционный фон. ОПХ "Яловень".

1992

1993

1994

Отклонение _ от X Кв Ку

Отклонение _ от х Кв Ку

Отклонение _ от х Кв Ку 7.

1. Вэнгерка-Кв 71.0 Кв 71.0 71.6 КВ 71.6 53. 6 Кв 53.4

молдавская

2. 2/16 21.9 -49.1 21.9 12.6 -59.0 12.6 22.1-31.5 21.9

3. 6/62 29.6 -41. 4 29.6 15.3 -56.3 15.3 19.0-34,6 18.8

4. 23/77 0 -71.0 0 0 -71.6 0 0 -53 6 0

5. 11/9 22.2 -48.8 22.2 57.1 -14.5 57.1 45.1 -8.5 44.9

6. 2-5 25.7 -45.3 25.7 38.7 -32.9 38.7 47.7 -5.9 47.5

7. 21/106 21.4 -49.6 21.4 22.9 -48.7 22.9 18. 0-35. Ь 17. 8

8. 22/72 0 -71.0 0 0 -71.6 0 0 -53.6 и

9. 21/82 24.6 -46.4 24.6 "7. 9 -53.7 1/.9 26.3-27.3 26.1

10. 4/36 0 -71.0 0 0 -71.6 0 0 -5а 6 0

11. 4-8-58 23.0 -48.0 23.0 34.7 -36.9 34.7 3. 7-4£ 9 3 5

12. 2/12 11.6 -59.4 11.6 10.2 -61.4 10.2 10.0-43.6 9.8

1а 3/35 15.7 -65.3 15.7 20.2 -61.4 20.2 15.3-37.8 16.6

14. 4/60 0 -71.0 0 0 -71.6 0 2. 7-50.9 2. 5

16. Кирке - Ку 0 -71.0 ку 0 -71.6 Ку 0. 2-53. 4 Ку

ВОР 9.9 НСР 7.9 ЮР 7.6

Об 05 05

Степень поражения плодов гибридов Искусственный инфекционный фон.

• Таблица 15 сливы вирусом шарки. ОПХ "Яловень".

I

1993

1994

N I пп|

Варианты опыта.

х г

Отклонение

от Кв Ку

X

х

Отклонение

от Кв Ку

1.

2.

а

4. ,

5. '

6. 7.

а

9.

10. 11. 12.

ia

14.

15.

Венгерка - Кв молдавская „ 2/15 6/62 23/77

■11/9 .

2-5 21/106 22/72 21/82 4/35 , 4-8-58 2/12 3/35 4/50

Кирке - Ку

65.6

Я. 4. О

о ■

Кв 65.6

-56.2 9.4

-65.6 О

-65.6 О ,

18.7 -46.9 18.7

О -65.6 О

10.9 -54.7 10.9

О -65.6 О

9.1 -56.5 9.1

2.6 -баО 2.6

1.7 -63.9 1.7 О -65.6 Ку

36.2 Кв

3.2 15.6 О 26.4 25.8 15.4

0.3 О 29.0 0.1 4.7 1.0 0.7

-за О -20.6 -36.2 -9.8 -10.4 -20.8

-35.9 -36.2 -7.2 -36.1 -31.5 -35.2 -35.5

35.5

2.5 14.9 -0.7 25.7 25.1 14.4

-0.4 -0.7 28.3 -0.6 4.0 0.3 ку

ШР 5.7 Об

НСР 4.6

Об

- за -

Таблица 16

Молдавский генофонд толерантных и устойчивых к гзрке образцов сливы.

Толерантные

Устойчивые __

Сорта Гибриды

1. Удлиненная 1. Памяти Костиной 1.3- 33-75

2. Opal 2. Памяти Еавллоза 2.3-3C-11S

3. Jelta boutilkovitína 3. Stanley 3.3-31.-120

4. Seo Idus 4.3-23-112

5. Agen 707 5.3-25-75 5. Reine-С laude d'Oullins 6. 3/35

7. Berbank 7. 4/35

8. fia£anska lepctica 8. -i/53

9.Сабагека Najbolja 22/72 10. President 10. 23/77

1У. Стратегия залиты насаждений сливы от вируса сарчи с учетом вирусоустойчивсоти сортов (рекомендации произволе.зу).

Необходимость рекомендаций то защите насаждений сливы от вируса шарки с учетом вирусоустсйчивости сортов возникла з к'-зи с широким распространением,высокой вредностью вируса на территории республики я восприимчивостью подавляющего болышнстза районированных сортов к "молдавскому" изоллту вируса сарки. Кроме того, необходимость подобных разработок была обусловлена ужестсчэнием требований к охране окрухахмей среды в последнее время.

Группа сильновосприимчивчх сортов: Молдавская ранняя, Сен-тзбрьаая,Венгерка итальянская, Сопзрница, Венгерка молдавская. Шрваз два сорта реагируют па заражение некрозом кроны, поэтому закладывать прсмьЕзденниэ насаждечин этими сортами не рекомендуется. Сорта Венгерка итальянская. Соперница и Венгерка моддавс-

кая дазсгг чернослив высокого качества Однако,из-ва высокой восприимчивости к вирусу шарки, могут потерять до 10QX урожая. Поэтому их доля в промышленном сортименте должна неуклонно сокращаться за счет постепенной замены вьюокотолераптными и качественными сортами. При закладке промышленных насаждений сливы сильновосприимчивыми сортами необходимо соблюдать следующие правила: - ,

- использовать свободный от вируса шарки посадочный матерная

- соблюдать пространственную изоляцию от возможных источников заражения - не менее 1 км

- осуществлять ежегодный фитосанитарный контроль аа состоянием насаждений, в молодых (2-3 года) садах зараженные деревья раскорчевать и сжечь их на краю поля •"

- в первую декаду октября ежегодно обрабатывать посадки этих сортов препаратами, предназначенными для уничтожения тлей -переносчиков вируса .

Аналогичные меры профилактики и защиты следует применять при промышленном возделывании группы восприимчивых сортов: Тулеу грае. Венгерка юбилейная/ Кабардинская ранняя, Кишиневская ранняя, Изюмная, Венгерка крупная сладкая, Венгерка ажанская. Они хотя и не так сильно поражаются шаркой, как предыдущая группа сортов, но при эпидемическом распространении заболевания могут потерять до 60S урожая.

Группа толерантных сортов: Анна Шлет, Ренклод Храмовых, Ренклод Альтана, Поздняя Храмова, Персиковая. Толерантность к вирусу; характеризующая данные сорта, выражается в незначительном поражении плодов и несущественных потерях урожая при заражении. Следовательно, применение профилактических мероприятий можно ограничить: . ...V

- использованием безвирусного посадочного материала при закладке сада ' . - . ' 'V

- фитосанитарным контролем, удалением и сжиганием пораженных деревьев. • - '

Группа вуокотолерагтвых сортов; Памяти Вавилова, Памяти Костиной. Кирке, President, Stanley. В условиях естественного заражения вирусом симптомы на плодах слабо выражены или их нет совсем. Потерь урожая не происходит. Однако,будучи латентно ин-

филированными,эти сорта могут представлять опасность чак источники заражения в посадках восприимчивых сортов. Поэтому, с целью профилактики заболевания следует использовать для закладки промышленных насаждений свободный от вируса посадочный материал и осуществлять фитосанитарный контроль молодых садоз.

Данные рекомендации утверждены Ученым Советом НИСТЛП 19 декабря 1990 года и переданы Министерству сельского хозяйства и продовольствия Республики Мэлдова.

У. Исследование некоторых альтернативных способов залиты растений-хозяев от вируса зарчи.

Вирус шарки сливы, подобно друпг • вирусам растений, вызывает изменения метаболизма растения-хозяина, сопроводдаюшиеся активизацией энергетических систем протопласта, окислительно-восстаьозителььой л фстссинтетипесчсЖ Еи1еаги Ь., 1едс М.,1989). Поэтому применение индукторов устойч-изостл, обладающих антисчи-слительной активностью, мелет Сыть елтуальаым и для растений-хозяев вируса варки.

Работа проводилась на растениях-индикаторах М гсап.паЬа, которые заражали "молдавским" изолятом вирус шарки. 3 сер,м экспериментов было показано, что обработка растений водными растворами стероидных гликозилэз (с - О. С05Х) значимо снижге? с содержание вируса в растекга» С габл. 17). Ср^ьла данное розультаты с полученными ранее в отношении вирусов табачной мозаики (1034) а некротической кольцевая пдтн^огостн косточковых (19ЬЗ), мы пришли к выводу, что мехзя/зм этого деления зсхлю^слзтся 2 кес-пецифическом повышении устойчивости растения-хозяина, наряду со снияенуем ин£екционнсстн вируса. Индукция у растений-¿озяез устойчивости к вирусу зарки с помощью стероидных гликсаигов, с нашей точки зрения, может служить весомым дополнением к ухе существующим способам повышения устойчивости.

- 41 - Таблица 17

Снижение содержания вируса шарки сливы в листьях растения-хозяина N. асшигъгЛа Ь. под действием СГ (С - 0.005%). 1991г.

Кол-во некрозов на 1л тест-раст. v x Отклоне-

Варианты - ние от Группа

.г контроля

I II III 1У У У1 УП УШ IX X

1. Контроль 407 40.7 К к

11 12 63 57 54 35 49 30 - 49 47

2. Иавстим 135 13.5 -27.2 1У

13 12 22 12 3 21 И 22 7 12

а 1йлдстим - 169 6.9 -2а 8 1У

25 14 12 5 31 20 22 11 12 17

4. Экостим . - 118 11.8 -28.9 1У

28 3 21 5 9 23 7 3 5 14

5. функиозид 160 16.0 -24.7 1У

9 7 10 26 46 - 7 15 31 8 0

6. Томатонин 140 14.0 -26.7 1У

14 23 13 10 4 5 17 6 34 14

7. Прототоматин 100 10.0 -30.7 1У 7

8 4 15 18 7 20 8 11 4 5

а Г-гитонин 211 21.1 -19.6 ГУ

33 2 12 25 8 37 15 12 44 23

9. дигитогсш 160 16.0 -24.7 1У

29 8 5 18 21 10 15 27 11 16

10. Нелокгозид 143 14.3 -26.4 1У

32 21 12 4 37 12 4 14 1. 6

НЗР в.вв 05

выводы

1. Пйрка (оспа) сливы является самым распространенным и вредоносным вирусным заболеванием плодовых культур в европейских странах и в Мэлдове. Потери урожая восприимчивых сортов в годы эпидемий достигает 70-100%.

2. Контроль заболевания может осуществляться по двум взаимно дополняющим друг друга направлениям:

- профилактика заражения во всех ее формах (безвирусный посадочный материал, фитосанитарный контроль и залита от пе^носчиков вируса)

- генетический король со стороны растения-хозяина (толерантные и устойчивые сорт? и гкориды сливы).

В зонах с высокой степенью распространения заболевания последний способ является единственной возможностью сохранения культуры растения-хозяина.

3. Сдаовирусы, в том числе и вирус изрки сливы, активизирует энергетические системы протопласта, высвобождая свободные перекасные радикалы, наруаашке целостность и функционирование биомеморан протопласта. Природные биоантиоксиганты - стероидные гликозиды - снижают инфекционнсть фитовирусов, стимулируя заветные реакции растения-хозяина, т. е. являются индукторами устойчивости - иммунизаторами.

4. Стероидные гликозиды содержатся в почках, листьях, плодах, коре и ядрах косточек сливы, участвуют з патогенезе вируса »рки и являются факторами уетоЛдагюетя к оарке.

5. Полигенный контроль устойчивости сливы к вирусу шаркл ре позволяет г*сти отбор толерантных и устойчивых образцов нз Фоне естественного заражения только по фенотипу. Оценка должна проводиться кошиоксно с пр«-влечением биох>««яческих характеристик.

6. Пзкааатель содержания стероидных глинвзкгов в спящих почках сливы коррелирует с показателем ее устойчивости к вирусу шрки (степень горздеяш плодов), следовательно ыэжат испольво-ваться как тестерный ори оценка устойчивости.

- 43 -

7. Прямая корреляция средней степей установлена между: -содержанием вируса в растеши и степенью поражения

листьев (г - 0,69) - степенью поражения листьев я степенью поражения плодов (г - 0.63). . . . ' • • \ v Следовательно, данные показатели можно использоватьдля оценки устойчивости сливы к вирусу парки в условиях естественного инфицирования вирусом.

8. Отбор толерантных и устойчивых образцов при количественном типе устойчивости возможен на основании статистически аначимой близости показателей устойчивости варианта к показателям стандарта устойчивости.

9. Традиционный "молдавский" изолят вируса ¡варки сливы об-' ладает более продолжительным инкубацнонвм периодом (разница 1 год) и более высокой агрессивность», чем недавно выявлений изолят из вишни, в силу чего может быть использован для создания искусственного инфекционного фона парки сливы в условиях Молдовы. . . -

10. Комплексная оценка устойчивости молдавского генофонда сливы к вирусу шарки, проведенная поэтапно на естественном и искусственном инфекционных фонах, показала:

- полевой устойчивостью к вирусу обладают сорта ннтроду-цированные - Jelta boutilkovldna. Opal, районированный сорт селекции НИСТИП - Удлиненная U

- высокую толерантность к вирусу на уровне европейского стандарта устойчивости - сорта Кмрне - проявляют сорта:

. районированные селекции НИСТИП - Памяти Вавилова, Памяти Костиной;

районированные зарубежной селекции - Stanley. President; ннтродуцированные - Sooldus. Agen 707, Reine-Claude d'Oullins, Ôaianska lepotica. 6a5anska Najboja. Berbank; гибриды - 3-25-75, 3-33-75. 3-23-112. 3-32-119, 3-32-120. 3-52-19. 3/35. 4/36, 4/50, 22/72, 23/77. Данные сорта " формы переданы по актам Шнистерству сельского хозяйства и продовольствия Республики Молдова и размножены для закладки молдавского генофонда толерантных и устойчивых к парке образцов.

11. Ни один из исследованных нами клонов Венгерки домашней (Венгерка молдавская. Венгерка домашняя 4001, 4003, 4012) не проявлял устойчивости к толерантности к вирусу шарки сливы на естественном инфекционном фоне.

12. Стратегия защаи насаждений сливы от вируса шарки должна складываться с учетом вирусоустойчивости сортов, т.к. это единственный способ сохранить культуру растения-ховянна с минимальными экономическими и экологическими затратами з зонах с эпидемическим характером развития заболевания.

Основные положения диссертации опубликованы в следующих работах:

1. Действие стероидных гликозидов на вирус табачной мозаики, совместно с Кинтей O.K.. Журнал "Известия АН МССР",1982, К 4, с. 40-42.

2. Изучение антивирусной активности стероидных гликозидов на очищенном вирусе табачной мозаики, совместно с Вепдеревской Т. 2., Кинтей EL К., Косаковской О. И.. Журнал "Известия АН МССР", 1082, N 4, С. 62-64.

3. Studios on antiviral actlvlty of steroidal glyccsides usin? TWV-irodel, with Kmtia P.K.. Abr'r. of II Irn-ern. Conference on Cham. & Biotech. B'oaotive Nat. Products, Budapest, 1983, p. 225.

4. Антивирусная активность стероидных гликозидов на модели вг-руса табачной мозаики, совместно с Вердеревской Т. Д., Кинтей П.К.. 15урнал "Сельскохозяйственная биология", 1934, N 4, 0.83-86.

5. Стероидные гликоаилн как фактор устойчивости к вирусу табачной мозаики. Сборник "Вирусные заболевания культурных растений Молдавии", 1084. КишивекВгиинца, с. 12-20.

6. Вторичные метаболит растений (стероидные г ликов иды) как фвкторы фитоимцуннтета. совместно с Балашовой Н. О., Килей а К., Лззурьевским Г.В., Тиминой О.а , Рущук КС.. Ыащзнко ELZ., Вобейко В. А., Дииццвщ Е.С.. Сборник "Генетика иммунитета и селекция оельсяоховвЯственных растений на устойчивость в Молдавии", Кишинев: Шповца. 1084, с. 19-37.

7. фактическое иеоолмаинм гликозидов, обладаидьх антивирусам! свовсндами, для тшнпн устойчивости томатов к комплексу

■ - 45 - -

эаОолеваний, совместно с Вердеревской Т. Д., Кинтей Е К.. Сборник "Теория и практика использования иммунитета сельскохозяйственных растений к вирусным болезням", 1984, с.95-97.

8. Antiviral Effect of Some Steroidal Glycosides on the Tobaooo Mosaic Virus Infectlvity, with Kintia P. K.. Abstr. of the 14th Intern. Conference of Chemistry Nat. Products, Poznan, Poland, 1984. p. 255.

9. Антивирусная активность стероидных гликозидов и практическое использование их в целях химиопрофилактики вирусных болезней растений. Автореф. дис. канд. биол. наук. Тбилиси, 1984, 13с.

. 10. Химический иммунизатор растений. Авторское свидетельство СССР N 1135164, 1985, 5с. . соавторы Вердеревская Т.Д.. Кинтя П.К . Тимина О.О., РущукВ.С.. ' .

11. Стероидные гликозиды как возможные факторы устойчивости ставы к вирусу шарки. Сборник "Интенсификация садоводства -составная часть выполнения Продовольственной программы vСССР", Мелитополь 1985, с. 172-173.

12. Structure-Activity Correlations for Antiviral Properties of Steroidal Glycosides, with Choban I.N., Dlmoglo A.S., Bersuker I.B., Kintia P. K.. Ia- Third Intern Conf. on Chem. » Biotech, of Biol. Active Nat. Products. Sofia. Bulgaria. 1985. v.5. p. 431-435.

13. - Применение стероидных гликозидов для повышения общей.и антивирусной устойчивости овощных культур (на примере томатов), совместно с Кинтей ПК., Вердеревской Т.Д. , Тиминой 0.0.. Рущук Е С.. Кишинев: Шгиинца, 1985. Бс.

14. Plant second metabolites -steroid glycosides - as plant viruses inhibitors, »lth Blvol T. F., Kintia P. K.. Ia- Recent Results in Plant Virology. DDR. 1986. p.4.

15. Швышение активности рибонуклеазы в листьях томатов под действием пурпуреагитозида как защитная реакция растений на заражение ВТМ, совместно с Вердеревской Т.Д,. Кинтей ПК.. Журнал "Сельскохозяйственная биология", 1986, N 5. с. 89-91.

16. Действие стероидных гликозидов ва ультраструктуру клеток контрастных по устойчивости к ВТЫ образцов томата, совместно с Палиловой А. Е, Балашовой Н. Е , Орловым П. А.. Кинтей Е К.. Сборник "Генетические методы ускорения селекционного процесса".

Кишинев: Игиинца, 1986, с. 166-175.

17. Стероидные гликозиды как факторы устойчивости растений к вирусным инфекциям, совместно с Бив о л Т. О., Кибенко Т. Я. , Кин-тей П. К. , Харитон A. R . Сборник "Сизиолого- биохимические основы повышения продуктивности л устойчивости растения", Кишинев:Игиинца. 1986, с. 143.

18. Потенциальные индукторы устойчивости растений - стероидные гликозиды, совместно с Вердеревской Т. Д.. Кинтей П. К. . Тиминой О. О., Поликсеновой а Д. . Писаревой Г.Ф.. Тезисы VT11 Всесоюзного совепалия по устойчивости с/х растений к болезням и вредителям, Рига, 1986, ч. II, с.77.

19. Строение и биологическая активность стероидных гликозидов ряда спиростана и фуростана, совместно с Кинтей П. К., Лазурьев-ским Г. а , Балашовой Н. Е , Суруаиу А. И., Ляхом а А.. Киии-нев: Щгиинца, 1987, -trf-ic., идл..

20. Химиотерапия фитовлрусных инфекций, совместно с Балашовой а а. Деп. ВИНИТИ N 2082-В29, рекомечд. Ученым советом ЮГ АН UCCP, Кишинев, от 30 марта 1989г., 89с..

21. Изучение устойчивости сортов сливы к вирусу шарки в условиях Молдавии, совместно с Зарейчуком Г. а, Билкей а X , Журавлем A. U.. Сборник "Проблемы интенсификации садоводства", Мичуринск, 1089. с. 204-206.

22. The analysis of scire plum varieties and hybrids rer'stan^a to sharka (plum pox) virus, with Btvol 7. F., Zareichluk G. Y., Bilkei N. D. . Juravel А.Ы. In: Recent Results in Plant Virology, DDR, 1989, p. 63-65.

2a The initial heritaMlity analysts or plim hyDrlcs susceptibility to sharka (plum pox) virus, with Blvol 7. F., Yerderev-skaya T. D., Kukuruzak E.A.. In: Recent Results m Plant Yirology, DOR, 1989, p. 7-9.

24; Anttphytovlral activity of plant secondary aetabollfs -steroidal clyocslties. *lth Kintla P. X., Yerderevskaya T.D., Bagush L. Yu. , Kcsatovskaya 0. I.. In: Book of Abstr. of 6th European Syap. of Стгг-iia Q»Bl3try, Belgrade. Yugoslavia, 1983, p. 347.

2S. CSjasKa устой»:тюста районированного а аерсхгэкт.»зного coptit-SEiira слазь к вирусу шарха в условнах iCCP, совшстао с Зарей-

чуком Г. В., Билкей Н. Д.. яуравлем А. М.. Сборник "Проблемы современного садоводства", Киев. 1989, с. 79. .

26. Стероидные гликозиды как индукторы устойчивости растений к вирусной инфекции, совместно с Вгрдеревской Т. Д., Eorymu JL П., Косаковской О. И., Кинтей IL К.. Сборник "Индуцированная устойчивость сельскохозяйственных культур к фитопатогенам", ; Ростов-на-Дону, 1989, с. 12-13.

27. Программ за целева селекция на сливата кгьм устойчивост на вируса на шарката в Молдавия. Растениевздни науки, 1990, XXVII, N 4, с. 65-66. , ;

28. Шрфометрическая оценка структуры хлоропластов растений табака при воздействии стероидных гликозидов и вирусной инфекции, совместно с Палиловой А. Е , Орловым П. А., Шэрбан Е. Д., Балашовой Н.П. Журнал "Цитология и генетика", 1990, т.24, N 2, с. 38-41. •

29. Steroidal Glycosides as Plant Resistance Inductors, with Balashova N.N., Kintia P.K.. In: Acta Agronomica Hungerica, 1990. V. 39, N1-2. p. 183-191. , ; .

30. Индукция устойчивости растений к вирусным болезням: применение вакцинации. Журнал "Сельскохозяйственная биология", 1991, N 3, с. 39-50. '.

31. Индукция устойчивости растений к вирусам биологически активными веществами (иммунизация), журнал "Сельскохозяйственная биология", 1992, N 3, с. 13-22.

32. Исследование содержания стероидных гликозидов в тканях сливы и связи этого показателя с устойчивостью к вирусу шарки, совместно с Кинтей ПК., Вердеревской Т.Д.. Материалы научной конференции, посвященной 100-летию со дня открытия вирусов Ивановским Д. И., Ростов-на-Дону. 1992, с. 68-69. ; : '

33. Вирус шарки сливы в Республике Молдова. Анализ устойчивости сортов и гибридов, совместно с Зарейчуком Г. В., Билкей Е Д., Вердеревской Т. Д., Гуравлем А.М.. Там же, с.73-74.

34. Использование вового препарата Молдстим для повышения адаптивных свойств чикроразмноженных растений земляники, совместно с Абраменко Н. VL, Вердеревской Т. Д., Кинтей Е К.. Сборник "Регуляторы роста и развития растений". Москва, 1993, 4.1, с. 83.

35. Биоантиоксвданты - стероидные гликозиды - как индукторы ус-

тойчивости к вирусным инфекциям, совместно с Кинтей П. К., Вердеревской Т.Д., Спыну К.И.. Там же, с.94.

¿6. Применение некоторых химических и природных соединений для ингибирования вируса НКП косточковых пород, совместно с Богувем Л. XX , Кинтей П. К., Щустером Г.. Там же, ч. 2, с. 144.

37. Стероидные гликозиды как маркеры устойчивости сливы к вирусу шарки, совместно с Журавлем А. iL , Вердеревской Т. Л , Кинтей П.К.. Соорник "Иэлекулярно-генетические маркеры и селе ашя растений", Киев, 1994, с. 137.

38. Plum resistance to plum pox virus in Maldova. Some biochemical aspects, with Klntia P. K., Verderevskaya T. D., Bilkey N.0., Juravel A.M.. In: Fundamental and applied problems in phytovlrology, Yalta, 1994, p. 23.

39. Resistenz der Pflaume Gegenuber dem Scharka-Vlrus-Elnige. Biochemische Aspekte, with Verderevskaya I.D., Klntia P.K-, Bllkel N. D., Schuravel A.M.. In: Arch. Phytopath. Pflanz., 1996, V. 29, p. 289-297.

40. The programme of plum selection on resistance to plum pox virus in Moldova, with Verderevskaya Т.О., Juravel A.VI, Bllkel N.D. .Klntia P. K.. In: 75 Years of phytopathologlcal and resistance research at Aschersleben. 1995, p. 11.

41. Биохимические аспекты устойчивости сливы к вирусу шарки в Мэлдове, совместно с Вердеревской Т.Д.. Кинтей П.К.. Вилюе л Н. Д., Дуравлем A. Ы.. Журнал "Известия Академии наук Республики Иолдова", 1995, N 6 ( 279). с. 19-22.

42. Plum reslstanoe and tolerance to Plum Pox Virus, with Verderevskaya T. D., Juravel A. U., Zentohlk E. Z., Ostapenko A.a. In: Abstr. of Middle European Meeting on Plum Pox, Budapest, 2-4 October, 1996, p. 9.

43. One Blooheeioal Marker of Plun Resistance to PPV, with Verderevskaya T. D., Klntia P. K., Juravel A. M., Ostapenko A. 3.. Ire Abstr. of Middle European Meet in« on Plum Pox, Budapest, 2-4 October, 1096, p. 13.

Объем 3 п л

Заказ 528

Тираж 100

Типография Издательства МСЧЛ 127550 Москва И 550, Тимирязевская ул 44