Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Цитокинины в регуляции транспорта и распределения ассимилятов в растениях

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Цитокинины в регуляции транспорта и распределения ассимилятов в растениях"

На правахрукописи

РОНЬЖИНА Елена Степановна

ЦИТОКИНИНЫ В РЕГУЛЯЦИИ ТРАНСПОРТА И РАСПРЕДЕЛЕНИЯ АССИМИЛЯТОВ В РАСТЕНИЯХ

03.00.12 - Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва - 2004

Работа выполнена на кафедре агрономии Калининградского государственного технического университета

Научный консультант:

действительный член РАН, доктор биологических наук,

пр°фесс°р а.Т. Мокроносов

Официальные оппоненты:

член-корреспондент РАН, доктор биологических наук, профессор Ю.В.Гамалей

доктор биологических наук, профессор О.Н. Кулаева

доктор биологических наук, профессор Е.Б. Кириченко

Ведущая организация:

Санкт-Петербургский

государственный

университет

Защита состоится 21 октября 2004 г. в 11.00 часов на заседании Диссертационного Совета Д 002.2Й01 при Институте физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН по адресу: 127276, г. Москва, Ботаническая ул., 35.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН.

Автореферат разослан «20» сентября 2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного Сов доктор биологических наук

Загоскина

2005-4 13514

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Рост численности населения нашей планеты на фоне ограниченности размеров пригодных для земледелия территорий вызывает необходимость эффективного управления формированием урожая. В связи с этим важно оптимизировать процессы роста, синтеза, транспорта и отложения органических веществ в запас.

Органы, производящие и потребляющие ассимиляты, образуют в растении единую, хорошо сбалансированную донорно-акцепторную систему (Курсанов, 1961, 1976, 1984; Мо-кроносов, 1981, 1983; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Первичными донорами являются фо-тосинтезирующие органы, главным образом, взрослые зеленые листья, снабжающие ассими-лятами все другие органы и ткани; гетеротрофные части растения, как правило, выступают в роли акцепторов. Эти пространственно разделенные элементы донорно-акцепторной системы связаны между собой с помощью флоэмы, по которой фотоассимиляты и некоторые другие метаболиты транспортируются от производящих к потребляющим и запасающим частям растений. Именно флоэмный транспорт является одним из важнейших факторов интеграции физиологических процессов в растениях на всех уровнях организации (Курсанов, 1976; Тур-кина, Павлинова, 1981).

В онтогенезе между донорными и акцепторными органами устанавливается сложная взаимосвязь, благодаря которой фотосинтез поддерживается на уровне, необходимом для обеспечения потребностей растения. Однако механизм формирования такой взаимосвязи не ясен. Отсутствует даже единое мнение о том, какому типу органов - донорам или акцепторам - принадлежит главенствующая роль в функционировании растения как донорно-акцепторной системы. Согласно одной из существующих точек зрения, определяющую роль играют акцепторы, посылающие сигнал неизвестной природы в сторону доноров и таким образом регулирующие их метаболизм (Мокроносов, 1981, 1983; Dinar, Rudish, 1985; Чиков, 1987; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Вторая сторона функциональной активности акцепторов заключается в их аттрагирующей способности, т.е. в ориентации транспортных потоков ассимилятов в растениях в сторону потребляющих и запасающих органов и тканей (Курса-нов, 1976; Мокроносов, 1981, 1983; Delrot, Bonnemain, 1985; Соколова, 1986; Борзенкова и др., 1988; Но, 1988 и др.). В то же время, существуют данные, показывающие, что изменение донорной функции листьев влияет на аттрагирующую активность акцепторов (Wyse, Saftner, 1982), а транспорт и распределение ассимилятов в растениях могут контролироваться донор-ными органами (Penot, 1963; Курсанов, Павлинова, 1967; Rovira, Boven, 1973). Поэтому не случайно некоторые исследователи основную роль в функционировании донорно-акцепторной системы отводят донорам (зонам загрузки, где формируется транспортный пул

ассимилятов) (Turgeon, 1987; Patrick, Offler, 1996; Patrick, 1997; Komor, 2000). Ряд авторов склоняется к модели с двумя активными центрами управления транспортом и распределением ассимилятов в растениях (Schulz, 1993,1997; Oparka, Turgeon, 1999).

Воззрения последней группы авторов в наибольшей степени согласуются с представлениями о регуляторных механизмах флоэмного транспорта ассимилятов в растениях, основанными на закономерностях, вскрытых Мюнхом (Munch, 1930). Движущей силой транспорта ассимилятов он считал градиент давления в проводящих путях, возникающий в результате формирования градиента осмотического потенциала вдоль флоэмы. Данные ряда авторов указывают также на то, что транспорт ассимилятов в растениях контролируется, в основном, на уровне загрузки веществ в листе - доноре и их разгрузки в акцепторных органах и тканях, т.е. в начале и конце транспортного пути (Eshrich, 1970; Geiger, 1975; Курсанов, 1976; Гамалей, 1990, 1994, 2002; Oparka, Turgeon, 1999; Oparka, Santa Cruz, 2000; Виллен-брик, 2002 и др.). На промежуточных этапах флоэмный транспорт, очевидно, поддерживается дополнительными двигателями, основанными на латеральном перераспределении метаболитов между ситовидными элементами и паренхимными клетками флоэмы и контрак-тильных изменениях белков актин-миозинового комплекса (Туркина, Соколова, 1972; Соколова, 1972; Туркина, Куликова, 1982; Kursanov et al.,1983). Однако в целом механизмы, контролирующие транспорт и распределение ассимилятов в растениях, неясны.

Литературные данные однозначно указывают на то, что метаболизм и транспорт ассимилятов в растениях находятся под гормональным контролем. Причем по характеру и интенсивности оказываемых эффектов среди растительных гормонов на первом месте находятся цитокинины. Они способны влиять на все стороны донорно-акцепторных отношений: формирование и функционирование фотосинтетического аппарата, транспорт и распределение ассимилятов в растениях, рост, развитие хозяйственно ценных органов и отложение в них запасных питательных веществ (Кулаева, 1973; Соколова, 1986; Муромцев и др., 1987; Борзенкова и др., 1988; Чернядьев, 1993,2001 и др.).

Одним из наиболее важных физиологических эффектов этих фитогормонов является аттрагирующая способность, которая проявляется в ориентации транспортных потоков ас-симилятов в сторону обогащенных цитокининами органов и тканей (Mothes et al., 1959; Кур-санов, 1976; Леопольд, 1968; Кулаеза, 1973; Соколова, 1986; Борзенкова и др., 1988; Но, 1988 и др.). Феноменологически аттрагирующее действие цитокининов неоднократно наблюдали многие авторы на модельных системах различной степени сложности и целых растениях, но его механизм пока неизвестен.

Возможно, аттрагирующий эффект связан со способностью цитокининов активиро-

вать метаболизм растительных тканей, стимулировать ростовые и биосинтетические процессы в них (Кулаева, 1973, 1982; Дефлинг, 1985; Муромцев и др., 1987 и др.). Метаболизация притекающих соединений должна интенсифицировать разгрузку ассимилятов из окончаний ситовидных элементов и увеличивать концентрационный градиент вдоль флоэмы (Wardlaw, 1968, 1999), усиливая передвижение веществ к акцепторам по Ai//P под влиянием разности давления в проводящих путях, что следует из современных воззрений о движущих силах флоэмного транспорта, основанных на осмотической гипотезе массового тока ассимилятов Мюнха (Munch, 1930).

Однако не исключено, что цитокинины влияют непосредственно на транспортные процессы. Тогда активация метаболизма растительных тканей может быть вызвана усиленным притоком к акцепторам питательных веществ, являющихся субстратами для биосинтетических реакций.

Предпринятые к настоящему времени попытки разделить транспортные и метаболические ответы на фитогормоны не позволили однозначно решить эту дилемму. Оказалось, что возможна активация цитокининами метаболических процессов без дополнительного притока веществ (Osbome, 1962; Кулаева, Воробьева, 1962, 1964), что позднее было подтверждено во многих экспериментах in vivo и in vitro. В то же время, обнаружено изменение транспортных процессов, происходившее вне зависимости от метаболических ответов растительных тканей на цитокинины (Turvey, Patrick, 1979).

Таким образом, существующие в литературе сведения о механизме регуляции транспорта и распределения ассимилятов в растениях, в том числе, с участием цитокининов, неоднозначны. Слабая изученность вопроса, очевидно, связана с интегральным характером этих процессов и исключительной сложностью растения как донорно-акцепторной системы. Поэтому начинать изучение механизма действия цитокининов на транспортные процессы целесообразно не на целом растении, состоящем из большого числа доноров и конкурирующих за ассимиляты акцепторов, а на более простых модельных системах.

Удачной моделью является изолированный лист, преимущество которого по сравнению с листом на растении состоит в том, что он освобожден от множественного контроля со стороны целого растения (Мокроносов, 1981,1983). Кроме того, отделенные листья лишены притока цитокининов из корней (Кулаева, 1962,1964) и потому более чувствительны к экзогенному цитокинину. Донором ассимилятов в изолированных листьях является мезофилл, акцепторами - средняя жилка черешок, в которых депонируются оттекающие из мезофилла продукты фотосинтеза (Leonard, 1939; Gunning, Barkley, 1963; Hartt, 1963; Miiller, Leopold, 1966; Leonard, King, 1968 и др.).

Именно на этой модельной системе была обнаружена аттрагирующая способность цитокининов. Мотес, Энгельбрехт и Кулаева (Mothes et al., 1959) впервые наблюдали, что кинетин, нанесенный на одну половинку взрослого изолированного листа тормозит отток подвижных метаболитов из листовой пластинки в среднюю жилку и черешок и индуцирует их приток из необработанного участка листа в обработанный. Таким образом, было показано, что под влиянием цитокинина в листе формируется новый акцептор, функционирующий параллельно с естественными акцепторами - черешком и средней жилкой.

Феноменологически аттрагирующий эффект цитокининов в изолированных листьях описан достаточно подробно, однако представления о его механизме носят разрозненный и противоречивый характер (Mothes et al., 1959; Mothes, 1960,1964; Mothes, Engelbrecht, 1961; Miiller, Leopold, 1966; Nakata, Leopold, 1967; Gersani, Kende, 1982; Kuraishi, Ishikawa, 1977; Penot et al., 1981; Соколова, Балакшина, 1992; Соколова и др., 2002; Парамонова и др., 2002). Хотя многие авторы считают, что из донорной в акцепторную половинку листа вещества притекают по флоэме, в месте нанесения фитогормона разгружаясь в мезофилл (Miiller, Leopold, 1966; Penot, 1978; Gersani, Kende, 1982), транспортные пути ассимилятов при этом эффекте изучены недостаточно. Еще менее понятны конкретные механизмы формирования акцепторной способности тканей зрелого отделенного листа под действием цитокинина.

В целом, оставались неясными и требовали дальнейшего изучения механизмы интеграции функционально различных органов и тканей растения в единую донорно-акцептор-ную систему и факторы, контролирующие флоэмный транспорт и распределение ассимиля-тов. Не была определена и роль цитокининов в регуляции этих процессов как в модельных донорно-акцепторных системах (в том числе, изолированном листе), так и в целых растениях. Выяснение этих вопросов важно с теоретической точки зрения и, кроме того, имеет большое значение для прикладных разработок в области растениеводства и биотехнологии для эффективного управления количеством и качеством урожая.

Цель и задачи исследования. Целью работы явилось изучение механизмов, контролирующих транспорт и распределение ассимилятов в растениях и интегрирующих фотосин-тезирующие, проводящие и потребляющие ткани и органы в единую донорно-акцепторную систему и выяснение роли цитокининов в регуляции этих процессов.

В соответствии с целью были сформулированы следующие задачи:

1. Проанализировать донорно-акцепторные отношения и возможные механизмы их регуляции в норме и при изменении донорно-акцепторного баланса у растений с морфологически различными типами акцепторов.

2. Проследить влияние цитокининов на транспорт и распределение ассимилятов в

системе целого растения и модельной донорно-акцепторной системе - изолированном листе.

3. Выявить специфику действия цитокининов на функционирование донорных и акцепторных органов; определить роль этих двух типов органов в регуляции транспорта и распределения ассимилятов в системе целого растения в связи с регуляторным действием цитокининов.

4. Выяснить механизм аттрагирующего эффекта цитскининов в модельной системе - изолированном листе, изучив следующие возможные причины этого явления:

• Индукция цитокининами структурных перестроек клеток флоэмы, приводящих к изменению направления транспорта веществ между мезофиллом и флоэмой за счет торможения загрузки ассимилятов во флоэму и индукции их разгрузки в мезофилл;

• Влияние цитокининов на работу активной транспортной системы, осуществляющей перенос Сахаров через клеточные мембраны в системе мезофилл-флоэма;

• Активация цитокининами структурных и функциональных изменений клеток мезофилла, приводящих к формированию между донорной и акцепторной частями листа.

5. Изучить механизм аттрагирующего эффекта цитокининов в системе целого растения, опираясь на данные, полученные на модельной донорно-акцепторной системе -изолированных листьях.

6. Проследить на примере цитокининов взаимосвязь между сигналами гормональной, осмотической и метаболитной природы при регуляции функционирования растения как донорно-акцепторной системы.

7. Разработать технологию повышения продуктивности сельскохозяйственных растений (на примере картофеля и томатов) с помощью БАЛ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Интенсивность, направленность транспорта ассимилятов и их распределение в растении контролируются функциональной активностью как донорных, так и акцепторных органов, причем наиболее эффективно - при одновременном участии этих двух элементов донорно-акцепторной системы.

2. Фактором интеграции различных частей растения в единую донорно-акцепторную систему и движущей силой флоэмного транспорта веществ является градиент давления вдоль транспортного пути, формирующийся вследствие существования между производящими и потребляющими ассимиляты органами.

3. Величина вдоль транспортного пути, определяющая интенсивность и направленность транспортных потоков фотоассимилятов в растениях, контролируется цитоки-

нинами на внутриклеточном уровне путем регуляции ростовых и метаболических процессов в донорных и акцепторных органах.

4. Специфика ответных реакций органов и тканей растения на цитокинин определяется их онтогенетическими особенностями. В производящих ассимиляты органах цитокинин стимулирует процессы, определяющие их донорную, а в органах, потребляющих ас-симиляты, - акцепторную функцию.

5. Донорная способность органов и величина осмотического потенциала (у/р) в начале транспортного пути определяется размером транспортного пула ассимилятов, формирование которого зависит от соотношения процессов, протекающих в клетках мезофилла: углеводной или неуглеводной направленности метаболизма, использования углерода на эпигенетические процессы, отложения в виде запасных соединений или включения в транспортные формы ассимилятов.

6. Акцепторные свойства органов и тканей определяются процессами, повышающими в конце транспортного пути: ростом растяжением и накоплением запасных, в первую очередь, полимерных и/или гидрофобных соединений, которые выходят из транспортного пула клеток.

7. Функционирование акцепторов, утилизирующих притекающие соединения, обеспечивает возможность постоянного притока ассимилятов из донорных в акцепторные органы в онтогенезе.

Научная новизна работы. В работе впервые проведено комплексное изучение функционирования донорных и акцепторных органов и процессов, контролирующих в онтогенезе транспорт и распределение ассимилятов в растениях, в том числе с участием цитокининов. На основании полученных данных разработана концепция, в которой впервые синтез, транспорт, распределение, потребление и запасание веществ интегрированы в единую систему взаимосвязанных процессов. Эта концепция также учитывает и описывает причинно-следственные связи между сигналами метаболитной, осмотической и гормональной природы при интеграции различных органов и тканей в единую донорно-акцепторную систему. Показано, что согласованное функционирование органов и тканей растения осуществляется благодаря формированию Д^, между ними. Его величина определяется ростовыми и метаболическими процессами, протекающими как на донорном, так и на акцепторном концах транспортного пути. Это позволило снять разногласия о роли различных элементов донорно-акцепторной системы в регуляции транспортных процессов в растениях.

Выяснено, что донорная функция органов и тканей зависит от наличия транспортного пула ассимилятов, определяющего величину осмотического потенциала на донорном

конце флоэмы. Размер транспортного пула зависит от углеводной или неуглеводной направленности метаболизма клеток мезофилла, использования углерода на эпигенетические процессы, протекающие в самом листе, отложения в клетках мезофилла в виде запасных соединений или включением в транспортные формы ассимилятов.

Акцепторные свойства органов и тканей определяются процессами, повышающими в конце транспортного пути: ростом растяжением и выводом ассимилятов из транспортного русла, в первую очередь, за счет накопления полимерных и/или гидрофобных соединений. Выявлена функциональная роль акцепторов, заключающаяся в обеспечении возможности транспорта веществ в течение длительного времени благодаря постоянной утилизации притекающих соединений.

Впервые проведено комплексное изучение действия цитокининов на функциональную активность донорных и акцепторных органов в системе целого растения. Выяснено, что эти фитогормоны активируют специфическую генетически детерминированную функциональную активность органов и тканей растения, что определяет особенности их ответных реакций на цитокинин, увеличивает между ними и тем самым влияет на интенсивность и направленность флоэмного транспорта веществ.

Для выяснения механизма аттрагирующего эффекта цитокининов использована модельная донорно-акцепторная система - изолированные листья с терминальной флоэмой открытого и закрытого типов, локально обработанные цитокинином. С ее помощью показано, что мишенью действия цитокининов является не флоэма или мембранные механизмы межклеточного переноса веществ, а паренхимные клетки акцепторных зон (в листьях - клетки мезофилла обработанной цитокинином половинки листа). Впервые изученное действие ци-токинина на листья с открытой терминальной флоэмой позволило показать принципиальную обратимость симпластного транспорта ассимилятов.

Выяснено, что аттрагирующее действие цитокининов как в модельной донорно-акцепторной системе - изолированных листьях, так и в системе целого растения, заключается в стимуляции процессов роста растяжением и накопления запасных полимерных и/или гидрофобных соединений. Определены наиболее значимые этапы регуляции цитокинин-за-висимого роста растяжением; показано, что он связан со снижением рН апопласта, через серию событий приводящим к повышению растяжимости клеточной стенки.

Теоретическая и практическая значимость работы. В работе выявлены ключевые физиологические процессы и определены механизмы, контролирующие транспорт и распределение ассимилятов в системе целого растения, установлена роль цитокининов в регуляции этих процессов, изучено действие этих фитогормонов на функциональную активность до-

норных и акцепторных органов. Важное теоретическое значение имеют разработанная схема формирования аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях и схема взаимосвязи между гормональными, метаболитными и осмотическими сигналами при регуляции цитокининами транспорта и распределения ассимилятов в системе целого растения. Разработанная и описанная экспериментальная модель - изолированные листья с открытым и закрытым типами терминальной флоэмы - может быть использована для изучения физиологических эффектов и механизмов действия цитокининов в растительных тканях. Предложена классификация акцепторов, учитывающая как особенности их метаболизма, так и способы разгрузки ассимилятов. Теоретические положения и экспериментальные данные диссертации создают основу для целенаправленного управления количеством и качеством урожая. Разработана технология применения цитокининов для повышения урожайности картофеля и томатов. Результаты работы используются в учебном процессе в Калининградском государственном техническом университете, в Екатеринбургском, Нижегородском, Орловском, Томском госуниверситетах в общих лекционных курсах «Физиология растений», «Экологическая физиология растений» и ряде спецкурсов.

Апробация работы. Результаты работы представлены на 2 Съезде ВОФР (Минск, 1990), V" International Youth Symposium on Plant Metabolism Regulation (Varna, 1990), 2, 3,4, 5 Международных конференциях «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1993, 1995,1997,1999), XV" International Botanical Congress (Tokyo, 1993), International Symposium «Physiology of Abscisic Acid (30 Years of Discovery)» (Pushchino, 1993), International Symposium on Plant Hormone Signal Perception and Transduction (Moscow, 1994), Mie.dzynarodowa Konferencja Naukowa: Altematywne Strategic Zycia Na Roznych Poziomach Organizacji: Biolo-gicznym i Kulturowym (Olsztyn, 1994), Международном совещании «Дыхание растений: физиологические и экологические аспекты» (Сыктывкар, 1995), I, II Международных симпозиумах «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (Пущино, 1995,1997), 3 Ежегодном симпозиуме «Физико-химические основы физиологии растений и биотехнология» (Москва, 1997), 4 Съезде РОФР и Международной конференции «Физиология растений - наука III тысячелетия» (Москва, 1999), серии лекций в Ботаническом институте Грайфсвалдского университета (Greifswald, апрель-май, 2000), Международных совещаниях «Crop Management and Technical Advances in Testing Postharvest Quality of Fruits» (Palanga, 2000, 2001), 4 Международной конференции «Регуляторы роста и развития растений в биотехнологиях» (Москва, 2001), Международной конференции «Актуальные вопросы экологической физиологии растений в XXI веке» (Сыктывкар, 2001), International Symposium «Plant under Environmental Stress» (Moscow, 2001), International Workshop

«Crop Management» (Helsinki, 2001), II Международной конференции по анатомии и морфологии растений (С.-Петербург, 2002), V Съезде РОФР и Международной конференции «Физиология растений - основа фитобиотехнологии» (Пенза, 2003), Международной научной конференции «Состояние и проблемы научного обеспечения овощеводства защищенного грунта» (Москва, 2003) и ряде других.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 66 печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 7 глав, в том числе обзора литературы и описания материалов и методов исследования, заключения, выводов и списка литературы ( 5" источников на р у с с к на иностранных языках). Она изложена на стр. машинописного текста, содержит табл. и рис. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Растение как донорно-акцепторную систему изучали на культурных и дикорастущих видах с различными типами акцепторов: картофеле (Solanum tuberosum L., сорт Невский), томатах (Lycopersicon esculentum Mill., сорт Balkonzuuber), чистяке весеннем Ficaria verna Huds. и лютике едком Ranunculus acris L. Культурные растения выращивали с соблюдением необходимых элементов технологии и агротехники без использования пестицидов (картофель в открытом грунте, томаты - в защищенном грунте в пленочных теплицах на солнечном обогреве). Дикорастущие виды произрастали в естественных условиях.

Для изучения функционирования растения как донорно-акцепторной системы и регуляторной роли цитокининов 1). Проводили анализ связей между донорными и акцепторными органами при естественном изменении баланса между ними в онтогенезе. 2). Уменьшали отношение донор/акцептор путем частичной дефолиации или увеличивали это отношение путем удаления части акцепторов. 3). Изменяли функциональную активность до-норных и/или акцепторных органов с помощью их экзогенной обработки БАП. 4). Изучали взаимосвязь между донорной функцией листьев или аттрагирующей активностью акцепторов и уровнем эндогенных цитокининов.

Механизм аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированныхлистьях изучали на листьях растений с различными типами терминальной флоэмы: тыквы (Cucurbita реро L., сорт Мозолеевская столовая) с открытой и бобов (Vicia/aba L., сорт Русские черные) с закрытой. Растения обычно выращивали в перлитовом субстрате на растворе Кнопа, содержавшем тройную дозу магния и двойную калия в факторостатных условиях фитотрона: интенсивности освещения 90 Вт/м2 ФАР, длине светового дня 16 ч, температуре воздуха для тыквы 22-24, для бобов 20-22°С, относительной влажности воздуха 80%. Исследования проводили на изолированных листьях третьего яруса на разных стадиях их развития: при дости-

жении 25 (ювенильные), 50 (растущие), 100% от их окончательной площади (5„м*) (зрелые листья), и при старении, регистрированном по 25%-ному снижению содержания хлорофилла.

Постановка опытов с изолированными листьями соответствовата схеме, разработанной Мотесом и др. (Mothes et al., 1959): опытную половинку отделенного листа опрыскивали раствором (обычно 10"4 М) БАП или других фиторегуляторов (зеатина, ИПА или их ри-бозидов, фузикокцина) из расчета 0.8 мкг/дм2, контрольную - дистиллированной водой. В ряде опытов регулятором обрабатывали весь лист. В качестве дополнительного контроля использовали необработанный лист интактного растения и/или отделенный лист, целиком опрыснутый водой. Отделенные листья помещали во влажную камеру (относительная влажность 96-98%) на рассеянный свет при комнатной температуре.

При выполнении работы было использовано около 30 методов и подходов, основные из них указаны ниже. Транспорт веществ в отделенных листьях регистрировали с помощью 50 мМ -сахарозы (удельная активность 30 кБк/мл, время распределения - 24 ч), 20 мкл которой наносили на обработанную фиторегулятором половинку листа при изучении торможения оттока или на обработанную водой при анализе индукции притока. Время предобработки регулятором (48 ч) и его концентрацию ( М) для максимального развития эффектов подбирали предварительно. Изучали также действие БАП на распределение С-фотоассимилятов (экспозиция в

14С02 20 мин, удельная активность "С02 - 9.78 МБк/моль, концентрация СОг - 0.5%). Количество метки оценивали отдельно в левой, правой половинках листа и черешке со средней жилкой, которые фиксировали и растворяли в смеси равных объемов концентрированных НСЮ4 и Н2О2 (Daie et al., 1986) в течение 24 ч при 55°С (Gia-quinta et al., 1983). Транспорт и распределение веществ в растениях оценивали по распределению ассимилированного 14С. Включение 14С в продукты фотосинтеза анализировали по модифицированному методу Дубининой и др. (1991); растворимые соединения разделяли двумерной хроматографией в тонком слое силикагеля в системах растворителей бутанол : муравьиная кислота : вода (6:1:1) и пропанол : изопропанол : аммиак (1:1:1) (Воронин и др., 1993). Радиоактивность образцов обычно просчитывали на жидкостно-сцинтилляционном /?-спектрометре 1219 RackBeta Spectral («LKB-Wallac», Финляндия), в отдельных случаях -на торцовом счетчике «Волна» («Изотоп», Россия), при анализе растворимых 14С-фотоасси-милятов - с помощью анализатора тонкослойных хроматограмм Rita-3200 («Raytest», Германия). Параметры COz-газообмена листа измеряли на газоанализаторах Infralyt-4 или Infralyt-5 («Veb Junkalor Dessau», Германия); интенсивность фотосинтеза определяли также радиометрически (Заленский и др., 1955). Содержание хлорофилла определяли по Вернону или Веттштейну (Гавриленко и др., 1975) на спектрофотометрах СФ-26А, СФ-46 (Россия) или

Specol-11 («Carl Zeiss», Германия). Определение цитокининов проводили по Белынской и др. (1990,1997) методом ВЭЖХ (приборы «LKB», Швеция или «Knauer» (Германия)). Фиксация материала для световой и электронной микроскопии была стандартной, материал заключали в Ероп 212. Срезы получали на ультратомах Reichert (Австрия) или LKB-4800 («LKB», Швеция), ультратонкие срезы исследовали под электронным микроскопом JEM 100B или JEM-СХ («Jeol», Япония), полутонкие - под световым микроскопом Amplival («Carl Zeiss», Германия). Жилкование анализировали на просветленных и окрашенных в спиртовом растворе сафранина листьях (Гендельс, 1987). Структуру мезофилла листа изучали по Мокроносову и Борзенковой (1978) в нашей модификации. Ир клеточного сока клеток отделенных листьев определяли с использованием внутриклеточного измерительного зонда давления (Husken et al., 1978), тканей отделенных листьев - на выпаривающем микроосмометре Vapour Osmo-metre («Knauer», Германия), органов целых растений - на рефрактометре ИФР-470 (Россия). Энергозависимость разгрузки ассимилятов изучали с помощью ингибиторов Н+-АТФазы плазмалеммы: орто-ванадата натрия, диэтилстильбестрола (ДЕС) и эритрозина Б, взятых в концентрациях 10-5 - 5x10-4 М. РН инкубационной среды (2 мМ ацетатный буфер, рН 6.5, содержавший 1 ммоль/л КС1) измеряли на универсальном ионометре ЭВ-74 (Беларусь), рН апопласта определяли с помощью рН-индикатора циранина (50 мМ), его флуоресценцию регистрировали при 405 и 470 нм на спектрофлуориметре MPF-4 («Hitachi», Япония). Размеры клеточных и тканевых структур измеряли с помощью прибора MOP-Videoplan («Reichert», Австрия), кусочков растительных тканей - на приборе Лектор-2000 (Россия), акцепторных органов растений - с помощью микрометра МК-025 (Россия) или штангенциркуля, площадь листовой пластинки - по площади ее отпечатка на светочувствительной бумаге, измеренного с помощью прибора MOP-Videoplan или весовым методом. Растяжимость клеточных стенок регистрировали с помощью диодного механотронного преобразователя перемещений и сил 6МХ1С (Россия) (Туркин и др., 1980). Биоэлектрический тканевый потенциал (БЭП) измеряли путем экстраклеточного отведения с помощью микроэлектродов. Углеводы определяли по Бьерри после их фракционирования (Белозерский, Проскуряков, 1955), белки - по Бредфорд (Bradford, 1976), аминный азот - формольным методом (Плешков, 1968).

Действие БАП на урожайность картофеля и томатов оценивали в мелкоделяночных опытах в открытом грунте. Количество делянок для каждого варианта - 4. Размер делянки под картофелем 25 м2, количество кустов на делянке - 100, общая площадь под опытом -0.02 га. Для томатов размер делянки - 20 м2, количество растений на 1 м2 - 4, общая площадь под опытом - 0.016 га. Дополнительно в микрополевых опытах изучали действие БАП на урожай бобов (Vicia faba L., сорта Херц Фрея и Русские черные). Растения выращивали в со-

судах (по 4 сосуда для каждого варианта) в условиях, близких к естественным.

У всех культур трижды в течение вегетации надземную часть опрыскивали водой (контроль) или 10"4 М раствором БАП (опыт); количество обработок и наиболее эффективную концентрацию раствора БАП подбирали предварительно. Все опыты проведены в течение трех вегетационных сезонов

Достоверность различий между вариантами оценивали по Меритерию Стьюдента при при необходимости проводили дисперсионный анализ. Взаимосвязь между процессами устанавливали с помощью корреляционного анализа.

Действие БАП на у/р клеточного сока отделенных листьев, определенного с использованием внутриклеточного зонда давления, изучено совместно с А.Б. Мещеряковым (ИФР РАН), растяжимость клеточных стенок, измеренную с помощью механотронной лампы, - совместно с Е.И. Шаровой, Ю.И. Шевцовым (БИНИИ СПбГУ). Газообмен растений чистяка и лютика при нарушении оттока ассимилятов исследован совместно с Л.А. Филипповой, Н.С. Мамушиной (БИН РАН), изменение фракционного состава углеводов в онтогенезе чистяка, картофеля и бобов - совместно с А.С. Гуревичем (КГТУ).

ДОНОРНО-АКЦЕПТОРНЫЕ ОТНОШЕНИЯ И ИХ РЕГУЛЯЦИЯ ЦИТОКИНИНАМИ В СИСТЕМЕ ЦЕЛОГО РАСТЕНИЯ Эксперименты по изучению донорно-акцепторных систем растений подтвердили, что интенсивность и качественная направленность фотосинтеза связаны с аттрагирующей активностью акцепторов (Мокроносов, 1981, 1983; Чиков, 1987; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Так, увеличение потребности в ассимилятах в онтогенезе при появлении и росте потребляющих органов приводило к соответствующему увеличению интенсивности фотосинтеза, синтеза сахарозы как основной транспортной формы углерода и усилению оттока ассимилятов из листьев. Завершение роста или отложения веществ в запас сопровождалось противоположными эффектами. В модельных экспериментах уменьшение потребности в ассимилятах после удаления акцепторов приводило в зависимости от длительности воздействия и видовых особенностей растений к 20-40%-ному торможению экспорта ассимилятов из листьев и 20-80%-ной репрессии фотосинтеза. Удаление половины листовой поверхности при сохранении прежней активности акцепторов, напротив, приводило к 30-80%-ному возрастанию интенсивности фотосинтеза и усилению оттока его продуктов из оставшихся листьев, что отчасти компенсировало создававшийся недостаток ассимилятов.

В этих же опытах проявилась множественность ответных реакций растений на изменение донорно-акцепторного баланса и разнообразие способов его поддержания. Результаты, полученные нами на картофеле, соответствовали традиционным представлениям о метабо-

литной регуляции фотосинтеза его продуктами по принципу обратной связи (Мокроносов, 1981,1983; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Однако результаты опытов с другими объектами например, быстрая (через 1-2 ч после удаления генеративных органов) репрессия фотосинтеза без существенного накопления каких-либо фракций ассимилятов в листьях у лютика или отсутствие ингибирования фотосинтеза при торможении оттока 14С-ассимилятов из листьев после удаления клубеньков у чистяка не могли быть объяснены с этих позиций и указывали на участие иных регуляторных механизмов, возможно, сигналов осмотической и/или гормональной природы.

В регуляции донорно-акцепторных связей у всех исследованных видов большая роль принадлежала цитокининам (рис. 1-3):

• В онтогенезе существовала высокая положительная корреляция между содержанием эндогенных цитокининов в органах с величиной или скоростью роста органа (г = +0.74 - 0.96), донорной функцией листьев (г = +0.96 - 0.99) (определенной по оттоку ассимилятов, интенсивности фотосинтеза, отношению транспортных (сахароза) и запасных (крахмал) форм углерода или аттрагирующей активностью акцепторов (г = +0.83 - 0.97) (регистрированной по притоку и накоплению иС-ассимилятов в этих органах).

Например, у картофеля содержание эндогенных цитокининов возрастало по мере роста листьев, резко снижаясь перед его окончанием. Параллельно изменению уровня цитокини-нов в онтогенезе изменялась интенсивность фотосинтетической фиксации , вслед за эти-

14.-,

ми процессами снижалось включение в сахарозу за счет увеличения синтеза крахмала и уменьшался отток 14С-ассимилятов из листьев (рис. 1а).

В клубнях также четко прослеживалась связь между содержанием эндогенных цито-кининов, ростом и аттрагирующей активностью этих акцепторов. При этом изменение уровня цитокининов в клубнях в онтогенезе несколько опережало увеличение их объема, накопление сырой и сухой массы и приток 14С-ассимилятов к ним (рис. 1 б).

Сходные эффекты мы наблюдали и у других исследованных видов растений - чистяка весеннего, лютика едкого.

• При нанесении на растение взамен удаленного в эксперименте акцептора БАП имитировал «запрос» этого органа на продукты фотосинтеза, активировал фотосинтетическую функцию листьев и влиял на распределение ассимилятов по растению (рис. 2).

Так, у лютика удаление генеративных органов уже через 2 ч вызывало почти двукратную репрессию фотосинтеза и торможение оттока его продуктов из листьев. Обработка верхушки стеблей 104 М раствором БАП отчасти восстанавливала эти процессы. Нанесение ци-токинина на генеративные органы интактного растения влекло за собой активацию фотосин-

(а)

Рис. 1. Взаимосвязь между содержанием эндогенных цитокининов и донорной функцией листьев (а) или акцепторной функцией клубней (б) в онтогенезе растений картофеля

Фенофазы: 1 - бутонизация, 2 - цветение, 3 - пожелтение нижних листьев, 4 - конец вегетации

1а, 16- зеатин+рибозид зеатина, пмоль/г сух массы; 2а - площадь листа, см2; За - фотосинтез, мг СОг/Сдм2 " ч); 4а - отток 14С из листьев, % от ассимилированного; 5а - 14С-сахароза/14С-крахмал; 26 - сырая масса клубня, г; 36 - объем клубня, см3; 46 - приток 14С в клубни, % от ассимилированного;

Относительная ошибка лежит в пределах от 5 до 10%.

Вариант опыта

Рис. 2. Действие БАП (10 М) на донорную функцию листьев и распределение асси-милятов по растению через 6 ч после удаления генеративных органов у лютика едкого.

а - фотосинтез, б - отток 14С из листьев, % от ассимилированного, в - приток 14С в генеративные органы (1, 4) или к верхушкам стеблей (2, 3), % от ассимилированного.

1. 4 - интактные растения, 2,3- растения с удаленными генеративными органами, 3 -верхушки стеблей обработаны БАП, 4 - генеративные органы обработаны БАП.

тетической функции донорных листьев, усиление оттока -ассимилятов из них и стимули ровало поступление 14С-ассимилятов в акцепторы.

Аналогичные явления мы наблюдали у чистяка и картофеля при удалении клубней, нанесении БАП на стебли взамен удаленных акцепторов или на клубни интактного растения. Локальное нанесение БАП на донорные или акцепторные органы усиливало, в зависи-

Вариант обработки

Рис. 3. Действие БАП на донорную функцию листьев и приток ассимилятов в стеблевые клубеньки в зависимости от способа обработки интактных растений чистяка весеннего.

а - фотосинтез, б - отток 14С из листьев, % от ассимилированного, в - включение !4С в сахарозу (1) и крахмал (2), д - приток 14Св стеблевые клубеньки, % от ассимилированного.

1 - растения, не обработанные БАП, 2 - БАП нанесен на стеблевые клубеньки, 3 - БАП нанесен на листья, 4 - БАП обработаны листья и стеблевые клубеньки.

мости от типа обработанных органов, соответственно их донорные либо акцепторные свойства, изменяло синтез, отток ассимилятов из листьев, их транспорт и распределение в растении, накопление в акцепторах. При этом наиболее значительные эффекты были обнаружены при одновременной обработке донорных и акцепторных органов (рис. 3).

В частности, у чистяка обработка БАП листьев, стеблевых клубеньков или одновременно обоих типов органов вызывала качественно сходные эффекты. Независимо от варианта обработки мы наблюдали стимуляцию и донорной функции листьев, и аттрагирующей активности акцепторов. Это проявлялось в активации фотосинтеза, усилении синтеза 14С

14л

сахарозы и снижении включения в крахмал, стимуляции оттока ассимилятов из листьев, и усиление их поступления в клубеньки. Донорная функция листьев была активирована в большей степени при обработке листьев, акцепторная - при нанесении БАП на клубеньки, но максимальных величин эти эффекты достигали при одновременной обработке БАП листьев и клубеньков. Сходный характер носили описанные процессы у картофеля и лютика при локальной обработке доноров или акцепторов или при полной обработке растений БАП.

В этих опытах четко проявилось дистанционное действие цитокининов: при экзогенной обработке акцепторных тканей БАП активировал донорную функцию листьев - усиливал фотосинтез и отток ассимилятов из них, а при обработке листьев - стимулировал поступление ассимилятов в акцепторы. Эти опыты показали, что транспорт и распределение ассими-лятов в растениях контролируются функциональной активностью как донорных, так и акцепторных органов. Кроме того, поскольку экзогенные цитокинины малоподвижны, остаются в месте нанесения (МоШеБ, 1964), очевидно, что их действие реализовывалось через какие-то промежуточные эффекты. Возможно, эффекты цитокинина были опосредованы его действием на Афр между донорами и акцепторами, что следует из представлений о Ащ и градиенте давления в проводящих путях как о движущей силе флоэмного транспорта веществ.

Это, в свою очередь, указывало на возможную роль сигналов осмотической природы в регуляции транспорта и распределения веществ в растениях. Теоретически, связь между сигналами гормональной, метаболитной и осмотической природы очевидна, однако возможность ее существования, механизмы установления и последовательность событий, обеспечивающих регуляцию транспортных процессов в растениях, до сих пор не исследованы. СТРУКТУРНЫЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ИЗОЛИРОВАННЫХ ЛИСТЬЯХ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЦИТОКИНИНОВ Изучение механизма действия цитокининов на транспорт и распределение веществ мы начали на изолированных листьях - модельной системе, в которой реализуется потенциальная способность этих фитогормонов активировать акцепторные свойства растительных тканей. Аттрагирующее действие цитокининов в этом случае сопряжено с превращением участка зрелого листа из донора в акцептор и проявляется в изменении транспорта веществ на противоположное. Иными словами, цитокинины вызывают в листе изменения, обратные происходящим в онтогенезе.

Изменение транспортных процессов в онтогенезе листа хорошо изучено. Известно, что ювенильные листья являются акцепторами ассимилятов (Курсанов, 1976; Мокроносов, 1981, Гамалей, 1990), которые разгружаются в мезофилл симпластически из незрелых ситовидных элементов жилок 3-4 порядков (Ти^еоп, 1989; Гамалей, 1990). Зона разгрузки дви-

движется по листу вместе с новообразованием ситовидных элементов (Гамалей, 1990).

При достижении листом Уз-'А окончательного размера приток веществ в него прекращается, и лист переходит к экспорт}' собственных фотоассимилятов (Курсанов, 1976; Мок-роносов, 1981). По мнению ряда авторов, причиной смены функционального состояния листа являются необратимые структурные и функциональные изменения транспортного пути (Schmalstig, Geiger, 1987; Turgeon, 1989). Одни из них предотвращают разгрузку флоэмы. К ним относят нарушение симпластических связей между мезофиллом и флоэмой в процессе формирования межклетников при переходе клеток мезофилла к растяжению (Turgeon, 1986, 1989). Начинающийся одновременно экспорт ассимилятов из листа связывают со структурными изменениями, индуцирующими загрузку: формированием в терминальной флоэме «загрузочных узлов» в виде комплексов клетка-спутница - ситовидный элемент (Гамалей, 1990, 1994). В открытой флоэме (соединенной с мезофиллом симпластически) загрузка интенсифицируется благодаря расположенным на границе клеток-спутниц с мезофиллом и ситовидными элементами плазмодесменным полям (1111) с сотнями ветвящихся в сторону спутниц плазмодесм. В закрытой флоэме (изолированной от мезофилла), загружающейся через апо-пласт, аналогичную роль выполняют протуберанцы (выросты) оболочки клетки-спутницы, многократно увеличивающие поглощающую поверхность.

Согласно иной точке зрения, экспорт ассимилятов из листа в онтогенезе начинается вследствие повышения активности фотосинтетического аппарата на фоне снижения потребления углерода на ростовые и морфообразовательные процессы, что приводит к возникновению положительного баланса углерода в клетках мезофилла и формированию транспортного пула ассимилятов (Turgeon, Webb, 1976; Но, 1988).

Таким образом, литературные сведения с равной долей вероятности позволяли считать мишенью действия цитокининов при аттрагирующем эффекте в изолированных листьях и мезофилл, и флоэму, поскольку показывали, что экспортно-импортная функция листа может регулироваться структурой и функционированием как флоэмы (Schmalstig, Geiger, 1987; Turgeon, 1986, 1989; Гамалей, 1990, 1994), так и мезофилла (Курсанов, 1976; Но, 1988), а в реализации аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях не исключено участие обеих тканей (Mulier, Leopold, 1966; Penot, 1978; Gersani, Kende, 1982).

Для решения вопроса о том, какая из них является мишенью действия цитокининов, изолированный лист являлся очень удачной моделью, поскольку наличие специализированных структурных приспособлений для обеспечения транспортных процессов позволяет экспериментально разделить эффекты этих фитогормонов как на структуру и функционирование флоэмы, так и на метаболизм паренхимных клеток (мезофилла) акцепторной зоны.

Оказалось, что к началу наших исследований этот эффект был получен исключительно на листьях растений с закрытой терминальной флоэмой, экспериментальные данные о возможности изменения цитокининами направления транспорта веществ у растений с открытой флоэмой отсутствовали. При этом некоторые авторы считали структурный аппарат симпластного транспорта более сложным и менее лабильным по сравнению с апопластным и классифицировали зоны экспорта и импорта ассимилятов на обратимые, в которых загрузка и разгрузка флоэмы обеспечиваются апопластными механизмами, и необратимые, основанные на симпластном транспорте (Offler, Patrick, 1986; Turgeon, 1989).

Более того, было очевидно, что регуляторные механизмы у растений с открытой и закрытой терминальной флоэмой могли различаться. Поэтому в качестве объектов исследования мы выбрали тыкву с открытой терминальной флоэмой листа и бобы с закрытой.

У обоих видов растений БАП изменял существующие в отделенных листьях донорно-акцепторные отношения. Нанесение фиторегулятора на правую половинку листа приводило к уменьшению содержания -сахарозы в средней жилке и черешке (начало эффекта - через 3, максимум - через 24 ч), что свидетельствовало о торможении оттока, и кроме того, стимулировало накопление в обработанном участке листа (начало эффекта через 6, максимум -через 48 ч), что указывало на индукцию притока веществ к месту нанесения цитокинина (табл. 1,2). Это свидетельствовало о потенциальной обратимости не только апопластного, но и симпластного транспорта.

На величину эффекта, по-видимому, влияла конкуренция за ассимиляты между искусственным (обработанной БАП половинкой листа) и естественным (черешком и средней жилкой) акцепторами. На это указывал тот факт, что индукция цитокинином притока около 50% 14С-сахарозы в зрелом листе тыквы происходила на фоне уменьшения поступления метки в среднюю жилку и черешок. У бобов такое явление отсутствовало, но при этом в обработанную БАП половинку зрелого листа притекало меньше (порядка 30%) 14С (табл. 1,2).

Способность цитокинина влиять на распределение веществ изменялась в онтогенезе листа и определялась его донорной функцией. Эффект отсутствовал у ювенильных акцепторных (25% Sbuk) листьев, появляясь параллельно со способностью экспортировать ассими-ляты у растущих (50% Smut), достигая максимума в зрелых донорных (100% Smux) и слабея в стареющих листьях, параллельно со снижением их экспортной функции (табл. 1,2).

В ювенильных листьях отсутствие реакции на цитокинин было обусловлено, вероятно, значительным потреблением веществ в листовой пластинке и черешке в результате интенсивных ростовых и метаболических процессов. Это существенно уменьшало способность донорной (обработанной водой) половинки экспортировать ассимиляты, которые, к тому же,

Действие КГ* М БАП на распределение !4С-сахарозы в изолированных листьях тыквы разного возраста

Вариант опыта Вариант обработки Стадия развития листа

ювенильный (25% 5»их) растущий (50% ) зрелый (100% ) стареющий

Контроль Обработанная водой половинка листа (14С) 83.7 ±1.9 70.7 ±1.2 49.4 ±1.8 88.2 ±1.5

Обработанная водой половинка листа 3.2 ± 0.2 6.2 ±0.9 5.5 ± 0.2 3.5 ± 0.3

Черешок и средняя жилка 13.1 ±0.4 23.1 ±1.1 45.1 ±0.6 8.3 ± 0.5

Торможение оттока Обработанная водой половинка листа 3.9 ± 0.3 3.0 ±0.5 3.1 ± 0.4 2.8 ± 0.4

Обработанная БАП половинка листа (14С) 83.7 ±0.7 78.1 ± 1.2 89.6 ±2.0 95.0 ±1.9

Черешок и средняя жилка 13.4 ±0.2 18.9 ±0.9 7.3 ± 0.5 2.2 ±0.3

Индукция притока Обработанная водой половинка листа (14С) 83.6 ±1.5 49.6 ±0.8 21.2 ±0.8 39.9 ± 0.5

Обработанная БАП половинка листа 3.1 ±0.3 20.4 ±1.8 52.1 ±2.3 28.0 ±0.3

Черешок и средняя жилка 13.3 ±0.4 30.0 ±1.4 26.7 ±1.7 32.2 ± 2.4

поступали в более сильные акцепторы - черешок и среднюю жилку. В растущих листьях потребление веществ на ростовые и морфообразовательные процессы снижалось, что обеспечивало потенциальную возможность проявления аттрагирующего эффекта цитокининов.

Дальнейшее уменьшение использования сахарозы в только что закончивших рост зрелых листьях, характеризующихся сильной донорной способностью (Курсанов, 1976; Мокро-носов, 1981, 1983; Гамалей, 1990), скорее всего, и обусловливало возможность формирования транспортного пула ассимилятов в обработанной водой и высокой аттрагирующей способности обработанной БАП половинок листа. В стареющих листьях лимитирующим фактором, вероятно, было изменение метаболической активности и развитие деградационных процессов, снижавших способность листа формировать ответную реакцию на цитокинин.

Действие 10"4 М БАП на распределение 14С-сахарозы

в изолированных листьях бобов разного возраста

н Стадия развития листа

Вариант обработки ювенильный растущий зрелый стареющий

3 0 (25% Я,™) (50% ) (100% )

Обработанная водой половинка листа (14С) 86.6 ±1.1 85.9 ±1.9 61.0 ±1.3 86.7 ±1.5

-0 § £ К Обработанная водой половинка листа 3.8 ±0.1 4.8 ±0.2 7.3 ± 0.2 5.2 ± 0.2

Черешок и средняя жилка 9.6 ± 2.7 9.3 ± 0.2 31.7 ±1.2 8.1 ±0.5

Обработанная водой половинка листа 2.4 ± 0.1 4.3 ± 0.2 5.8 ±0.1 2.2 ± 0.2

§ в * § 1 1 Обработанная БАП половинка листа (14С) 87.6 ±1.3 88.7 ±1.2 87.2 ±1.0 94.6 ±1.3

й' Черешок и средняя жилка 10.5 ±0.1 7.0 ±0.5 7.1 ± 0.2 3.3 ±0.1

Обработанная водой половинка листа (14С) 89.6 ± 3.2 74.3 ± 2.8 35.1 ±1.7 37.8 ±1.2

Индукция притока Обработанная БАП половинка листа Черешок и средняя жилка 2.3 ±0.1 8.1 ±0.2 14.3 ± 0.2 11.5 ±1.0 31.9 ±2.7 32.9 ±1.8 25.7 ±0.2 35.4 ±1.5

Таким образом, данные, полученные на листьях разного возраста, во-первых, еще раз подтвердили, что транспорт и распределение ассимилятов контролируются как на акцепторном, так и на донорном конце флоэмы. Во-вторых, они показали, что потенциальная возможность аттрагирующего эффекта в локально обработанных цитокинином листьях определяется рядом факторов: интенсивностью и направленностью метаболизма клеток мезофилла, влияющей на распределение веществ между внутриклеточным потреблением и формированием транспортного пула и определяющей способность листа формировать ответную реакцию на цитокинин; конкуренцией за ассимиляты между искусственным (обработанной цито-кинином половинкой листа) и естественным (черешком со средней жилкой) акцепторами.

При изучении механизма этого эффекта, в первую очередь, мы попытались выяснить,

какая из тканей - мезофилл или флоэма - является непосредственной мишенью регуляторно-го действия цитокининов.

В случае регуляции на уровне флоэмы причиной торможения цитокинином оттока в изолированных листьях могло быть торможение загрузки вследствие индуцированного фи-тогормоном изменения структуры клеток-спутниц, приводившего к снижению их функциональной активности. У растений с открытой флоэмой оно могло было быть вызвано разрушением или закупоркой плазмодесменных каналов, у растений с закрытой - сокращением поглощающей поверхности плазмалеммы спутниц вследствие исчезновения или уменьшения протуберанцев в них.

Мы проверили возможность прямого влияния цитокинина на структуру флоэмы в качестве причины его аттрагирующего эффекта. Однако с помощью электронно-микроскопических исследований было выяснено, что ни у тыквы, ни у бобов БАП не вызывал ожидаемых ультраструктурных изменений клеток-спутниц, способных привести к торможению загрузки. У тыквы не происходило ни сокращения числа ПП или плазмодесм в них, ни закупорки плазмодесменных каналов мембранными (эндоретикулярными) или каллозпыми пробками. У бобов протуберанцы в спутницах сохранялись. Эти факты показали, что вызванное цитокинином торможение оттока не было вызвано изменением структуры загрузочных блоков флоэмы (рис. 4).

При этом в клетках-спутницах мы наблюдали явления, характерные для изменения экспортно-импортного статуса листа и, по-видимому, являвшиеся следствием изменения направления транспорта веществ (Гамалей, 1990, 1994). У тыквы каналы эндоплазматического ретикулума (ЭР) в ответ на локальную обработку БАП трансформировались в большую центральную вакуоль, занимавшую на срезах 61.6 ± 4.3%. Цитоплазма, в норме равномерно распределенная по всему объему клетки, отодвигалась на периферию. В клетке появлялось большое количество мембранных складок и клубков, т.н. миелиноподобных тел (рис. 4а).

У бобов в спутницах уменьшался размер протуберанцев оболочки (рис. 46). Однако эти изменения были статистически недостоверными и незначительными (в обработанной водой половинке отделенного листа протуберанцы на срезах занимали 7.5± 1.3, в опрыснутой БАП - 5.2±2.1% от площади сечения клетки), вряд ли они могли привести к полному торможению оттока, и вероятнее, являлись его следствием (Pate, Gunning, 1969; Гамалей, 1990).

Вторая составляющая аттрагирующего эффекта цитокинина - индукция притока в ткани взрослого листа - на уровне флоэмы могла быть вызвана восстановлением меристема-тической активности и формированием либо новых флоэмных терминалей с незрелыми ситовидными элементами, способными к разгрузке, либо новых проводящих элементов флоэмы в

Рис 4 Изменение структуры клеток-спутниц терминальной флоэмы открытого у тыквы (а) и закрытого у бобов (б) типов через 48 ч после обработки 110-4 М БАП

/ - лист интактного растения, // - обработанная водой и /// - обработанная БАП половинки отделенного листа,

КМ - клетка мезофилла, КС - клетка-спутница, СЭ - ситовидный элемент, / - вакуоль, 2 - хлоропласт, 3 - плазмодесменное поле, 4 -митохондриальный ретикулум, 5 - эндоплазматический ретикулум, б - направление движения ассимилятов, 7 - мембранные складки и клубки, 8 - протуберанцы оболочки

уже существующих жилках. Это должно было проявляться в увеличении числа порядков жилкования или числа свободных окончаний в ареоле, либо в уменьшении площади ареолы и значительном увеличении их числа в листе. Возникновение ситовидных элементов в уже существующих жилках подтверждалось бы изменением их клеточного состава. У тыквы обращение транспортного потока могло происходить также благодаря образованию новых плазмодесменных каналов в ПП спутниц.

Однако у обоих видов цитокинин не вызывал новообразования элементов флоэмы: оставались постоянными число порядков жилкования, свободных окончаний в ареоле, ареол в половинке листа, площадь ареолы и число ситовидных элементов в мелких жилках (табл. 3); у тыквы также не изменялось количество плазмодесм в одном ПП (на поперечных срезах оно составляло 11-13 со стороны спутницы и 4-6 со стороны мезофилла).

Таблица 3

Характеристики жилкования зрелых листьев тыквы при действии 10"4 М БАП

Вариант Площадь ареолы, 2 мм Число ареол в половинке листа, тыс. Число ареол без свободных окончаний на 100 ареол Число свободных окончаний на 100 ареол

Лист интактного растения без обработки 0.10 ±0.01 31.3 ±2.0 78.1 ±6.5 24.8 ± 6.9

Половинки отделенного листа: Вода (контроль) КГ4 М БАП (опыт) 0.10 ±0.02 30.2 ±1.6 4.4 ± 6.3 25.6 ±6.3

0.10 ±0.02 32.0 ±1.4 77.3 ± 6.6 22.7 ±6.8

Совокупность этих данных показала, что аттрагирующий эффект цитокинина в изолированных листьях не был вызван прямым действием фитогормона на структуру флоэмы.

Другой причиной атграгирующего эффекта у растений с закрытой флоэмой (бобов) могло быть влияние цитокинина на работу активной транспортной системы, участвующей в загрузке ассимилятов из мезофилла во флоэму. Торможение оттока могло вызываться ее ин-гибированием, аттрагирующий эффект в целом мог возникать, если цитокинин изменял направление работы этой системы на противоположное, что представлялось менее вероятным.

Для проверки этой возможности мы использовали фузикокцин, стимулирующий Н+-АТФазу плазмалеммы (Магге, 1979) и потому, в противоположность цитокинину, являющийся потенциальным активатором оттока (Malek, Baker, 1978) (табл. 4).

Однако фузикокцин не стимулировал оттока 14С-сахарозы и не изменял вызванного БАП торможения ее оттока. Одинаковая закономерность была обнаружена у листьев бобов с

Действие БАП ( 10"4 М) и/или фузикокцина ( 10"4 М) на распределение 14С-сахарозы в зрелых изолированных листьях

Радиоактивность, %

торможение оттока индукция притока

Объект Вариант обработки обработанная водой половинка листа обработанная ре-гулятором(ами) половинка листа (14с) черешок и средняя жилка обработанная водой половинка листа (14С) обработанная регулятором (ами) половинка листа черешок и средняя жилка

Без обработки 6.0±0.5 63.5+1.8 30.5+1.7 63.5+1.8 6.0+0.5 30.5+1.7

Бобы БАП 5.6±0.8 88.5+2.3 6.0+0.8 40.3+1.0 27.6+1.2 32.0+1.3

Фузикокцин 4.2±0.3 78.4+1.3 17.3+1.1 47.2+1.6 24.1+2.0 28.7+1.8

БАП+фузикокцин 4.4±0.5 87.2+2.7 8.3+1.0 39.0+1.5 31.4+1.7 29.7+1.2

Без обработки 6.7±1.3 47.3+2.0 46.1+1.6 47.3+2.0 6.7+1.3 46.0+1.6

«3 БАП 4.1±0.5 90.0+1.3 5.9+0.5 23.4+1.4 52.7+1.7 23.9+1.9

Фузикокцин 4.5±0.6 85.7+1.5 9.8+1.6 37.3+1.5 28.4+1.6 34.3+1.6

БАП+фузикокцин 3.9+0.4 89.4+1.9 6.7+1.0 30.8+1.7 56.2+2.3 13.0+1.4

апопластной загрузкой ассимилятов, осуществлявшейся с участием Н+-АТФазы, и тыквы с симпластной загрузкой, происходившей без преодоления клеточных мембран и участия Н+-АТФазы (табл. 4).

В целом, полученные данные показали, что формирование под влиянием цитокинина зон импорта в уже выполняющих донорную функцию листьях, по-видимому, не связано с влиянием цитокинина на структуру флоэмы или изменением функционирования мембранных механизмов переноса Сахаров в системе клеток мезофилл - флоэма.

Альтернативной причиной могло быть влияние цитокинина на структуру и функционирование мезофилла. Это подтвердилось в дальнейших исследованиях. У обоих видов БАЛ повышал клеточного сока, что сопровождалось возникновением между донорной и акцепторной половинками, составлявшего к 48 ч эксперимента 0.2 МПа в зрелых листьях тыквы и 0.1 - бобов (рис. 5). Аналогичная закономерность была отмечена и при измерении отдельных клеток. Так, через 48 ч в обработанной БАЛ половинке зрелого листа бобов он составлял -0.44±0.11, а в обработанной водой -0.70±0.06 МПа. Величина Ау/р различалась наразных стадиях развития листа (рис. 6). У обоих видов растений этот градиент отсутствовал в ювенильных, появлялся в растущих, достигал максимума в зрелых и снижался в старе-

Время обработки,ч

О 10 20 30 40 50 60 70 80

й 0,00 -1-1-1---1-1-1-1

с §

3 -1,50

Рис. 5. Динамика изменения осмотического потенциала зрелых изолированных листьев тыквы (1, 2) и бобов (3, 4) при действии 10"* М БАП

1,3- обработанные БАП, 2,4- обработанные водой половинки листа. Стандартное отклонение лежит в пределах от 0.01 до 0.08 МПа.

Стадия развития листа

Рис. 6. Действие М БАП на осмотический потенциал в онтогенезе листа тыквы 1 - лист интактного растения без обработки, 2 - обработанная 48 ч водой половинка изолированного листа (контроль), 3 - обработанная 48 ч БАП половинка изолированного листа (опыт).

Стандартное отклонение лежит в пределах от 0.01 до 0.06 МПа.

ющих листьях.

Формировавшаяся разность у>р могла быть движущей силой направленного транспорта веществ при аттрагирующем эффекте цитокининов. Действительно, Г между Alffp и притоком 14С-сахарозы в листьях разного возраста у тыквы составил 0.99, у бобов - 0.88. При этом ингибиторы Н+-АТФазы — ор/ио-ванадат натрия, эритрозин Б и ДЕС в широком диапазоне концентраций (105 - 5x10"^ М) не уменьшали величину индуцированного БАП притока МС сахаро-зы. Эти данные свидетельствовали, что приток веществ в обработанную БАП половинку листа не требовал энергетических затрат на плазмалемме. Аналогичным образом разгружаются ассимиляты и во многих других акцепторных тканях, в частности, в молодом листе и запасающих органах с симпластной разгрузкой (Schmalstig, Geiger, 1985; Ding et al., 1988; Гамалей, 1994,2002; Вилленбрик, 2002 и др.).

Поскольку величина фр определяется молярной концентрацией раствора (т.е. числом молекул растворенного вещества в единице объема клетки), очевидно, что причиной повышения под действием цитокинина могло быть увеличение числа молекул воды по сравнению с числом молекул растворенных веществ в клетке. В свою очередь, это могло быть следствием использования ассимилятов, например, в дыхании, либо синтеза из относительно низкомолекулярных органических молекул нерастворимых, в первую очередь полимерных соединений, либо же дополнительным поступлением воды в клетки. Все эти явления мы наблюдали при действии БАП на изолированные листья.

При анализе состава -продуктов фотосинтеза (табл. 5) и с помощью электронно-микроскопических исследований мы обнаружили изменение направленности углеродного метаболизма под действием БАП: усиление синтеза осмотически неактивных нерастворимых соединений - веществ клеточных стенок, белков и других полимеров (фракция «остаток»), а также стимуляцию образования крахмала. Включение метки в растворимые вещества с относительно небольшой молекулярной массой снижалось. Очевидно, что эти процессы приводили к уменьшению числа молекул органических веществ в клетке, повышая \jfp в обработанном БАП участке листа. Кроме того, утилизация притекавших веществ обеспечивала поддержание Atftp между донорным и акцепторным участками листа на постоянном уровне длительное время (рис. 5).

Число молекул органических веществ в клетке могло уменьшаться также вследствие их использования в дыхании. Хотя БАП и вызывал активацию темнового дыхания, она была кратковременной, происходила на фоне очень низкой дыхательной способности отделенных листьев и вряд ли могла приводить к существенному потреблению веществ. Кроме того, существовало несоответствие временных характеристик этих процессов - более ранней (через

Таблица 5

Действие БАП на состав 14С-продуктов фотосинтеза зрелых изолированных листьев тыквы

Вариант Время включения 14С,мин Фракции, % от поглощенной листом радиоактивности

спиртоводора-створимая спиртоводонерастворимая

крахмал остаток сумма

Вода (контроль) 15 90.4 ± 0.6 0.4 ±0.1 9.2 ± 0.8 9.6 ±0.6

10"4 М БАП (опыт) 15 89.0 ±0.8 1.1 ±0.1 9.9 ±0.8 11.0 ±0.8

Вода(контроль) 15 + 45 87.9 ±0.9 2.3 ±0.2 9.8 ±0.9 12.1 ±0.9

10"4 М БАП (опыт) 15 + 45 82.8 ±1.0 17.2 ±1.0 13.3 ±0.9 30.5 ± 1.3

Примечание. Листья экспонировали в атмосфере с 14С02 15 мин, затем делили на две группы: в одной из них ткани каждой половинки листа фиксировали сразу, листья второй группы помещали еще на 45 мин во влажную камеру без 14С на рассеянный свет, затем фиксировали и проводили фракционный анализ -ассимилятов.

1.5 ч) стимуляции дыхания и значительно более позднего (через 3 ч) формирование и аттрагирующего эффекта в целом (через 24-48 ч).

Причину усиленного поступления воды в клетку, приводящего к повышению овод-ненности обработанных цитокинином тканей изолированного листа, мы выявили при анализе действия БАП на мезоструктуру листа и дальнейшем изучении цитокинин-зависимого роста. Оказалось, что БАП мог вызывать увеличение объема клеток. Однако характер эффекта определялся фазой жизненного цикла, которую проходила клетка в момент воздействия цитокинина. В ювенильных листьях, клетки которых находились на стадии деления, БАП активировал деления, в клетках растущих или только что закончивших рост зрелых листьев -растяжение, слабо влияя на стареющие листья (табл. 6).

При этом у листьев разного возраста существовала сильная связь между и увеличением объема клеток мезофилла (например, у тыквы г = 0.94) и чуть меньшая - между притоком 14С-сахарозы и увеличением объема клеток (у тыквы г = 0.88).

При изучении механизма цитокинин-зависимого роста растяжением мы обнаружили, что БАП вызывал серию событий в обработанном участке листа (рис. 7): 1. Снижение рН среды инкубации кусочков листа. 2. Изменение флуоресценции при 470 нм инфильтрированного в лист рН - индикатора пиранина, свидетельствовавшее о снижении рН апопласта. 3. Электропозитивацию БЭП, представлявшего собой разность электрических потенциалов между обработанной водой и цитокинином частями листа, свидетельствовавшую о генерации

Действие БАП на структуру мезофилла листьев тыквы разного возраста

Показатель Вариант обработки Фаза развития листа

ювенильный (25% ) растущий (50% ) зрелый (100% ) стареющий

Площадь листа, % от исходной Вода 101.0 ±0.5 102.3 ± 1.8 100.1 ±0.1 99.4±1.1

10"4 М БАП 118.3 ±1.8 100.5 ± 0.4 104.9 ±1.2 100.1±0.4

Толщина листовой пластинки, мкм Вода 94.3 ± 8.7 101.7 ±4.7 118.0 ±4.0 119.4±6.4

10-4 М БАП 99.8 ± 4.8 331.4 ±1.9 121.1 ±5.6 115.9+4.8

Объем клетки мезофилла, тыс. мкм3 - палисадного - губчатого Вода 0.5 ± 0.2 0.5 ±0.1 1.3 ±0.2 1.5+0.4

10-4 М БАП 0.3 ±0.1 0.7 ± 0.2 1.7 ±0.3 1.5±0.3

Вода 0.3 ±0.1 0.4 ±0.1 0.7 ± 0.2 0.8±0.2

10МБАП 0.2 ±0.1 0.5 ± 0.1 0.9 ± 0.2 0.8±0.1

Площадь межклетников в губчатом мезофилле, Вода 8.5 ±1.1 11.1 ±0.9 16.0 ±2.0 17.2±3.3

10-4 М БАП 15.2 ±2.4 16.0 ±1.1 20.3 ± 3.2 18.3±2.7

Число клеток з половинке листа, тыс. Вода 5267±260 7661± 820 7399 ±210 7783±530

104 М БАП 7361± 290 7915 ±840 7043 ±310 8343±700

трансмембранного потенциала. 4. Повышение на 25-30% растяжимости клеточных стенок тканей листа и нередко - их реакцию на кислый буфер. 5. Увеличение размеров листовых высечек (например, у зрелых листьев тыквы в опыте (с БАП) относительный прирост за 24 ч составил 0.13, в контроле (без БАП) - 0.06 СМ' 6. Увеличение размеров листовых высе-

чек в кислом буфере, возраставшее с уменьшением рН. Так, при рН 3.5 относительный прирост зрелых листьев тыквы за сутки составлял 0.56, а при нейтральном рН - 0.27 см^/см2

Эти данные подтвердили и расширили представления о снижении рН апопласта как причине активированного цитокининами роста (Маггё et al., 1974), позднее поставленные под сомнение (Brock, Cleland, 1989). Полученные результаты позволили также предположить следующую цепь событий, вызывавших цитокинин-зависимый рост: снижение рН апопласта нарушение связей между структурными компонентами клеточной стенки разрыхление клеточной стенки и увеличение ее растяжимости —► рост растяжением (см., напр., Полевой, Саламатова, 1991;Palmgren, 1998 и др.). Благодаря активации метаболических процессов, в

5,4 --1---1--1

-20 0 20 40 60 80 100

Время, мин

-20 -10 0 10 20 30 40

Время, мин

Рис. 7. Действие БАП на БЭП (а), рН среды инкубации (б), скорость растяжения клеточных стенок (в) и флуоресценцию пиранина при 470 нм (г) зрелых изолированных листьев тыквы.

Пунктирная линия - вода (контроль), сплошная линия - 10-4 М БАП (опыт).

том числе синтеза веществ клеточных стенок и белков, кратковременной стимуляции дыха-

дить к повышению рН цитоплазмы (Smith, Raven, 1979; Kurkdain, Guern, 1989; Gout et al., 1992), тем самым влияя на активность многих ферментов, а также вызывать генерацию трансмембранного потенциала и усиление поступления ионов в клетку. Эти процессы в сочетании с активацией цитокининами экспрессии генома (Кунаева, 1973, 1982) могли стимулировать метаболические процессы, в том числе синтез белков и структурных компонентов клетки, активировать дыхание, создавая условия для роста.

Увеличение растяжимости клеточных стенок под действием цитокинина должно было способствовать пассивному поступлению воды в клетку вследствие снижения противодавления клеточной стенки на протопласт. Благодаря повышенной способности клеточных стенок к растяжению у/р клеточного сока в обработанной БАЛ половинке листа в течение всего опыта должен был оставаться более высоким, чем в опрыснутой водой.

Рассматривая составляющие аттрагирующего эффекта цитокининов, мы полагаем, что причиной торможения оттока веществ являлось снижение концентрации транспортных форм углерода в цитоплазме клеток мезофилла вследствие их включения в полимерные соединения. Повышение у/р, появление его градиента между донорной и акцепторной частями листа скорее всего, являлось фактором, способствовавшим пассивной разгрузке ассимилятов из концов ситовидных элементов и вызывавшим передвижение веществ к месту нанесения БАЛ, т.е. являлось важной составляющей его аттрагирующего действия. Эти выводы согласуются с предположениями об обусловленности аттрагирующего эффекта стимуляцией биосинтетических (Mothes et al., 1959; Mothes, 1960, 1964) и ростовых (Mothes, 1960; Muller, Leopold, 1966) процессов, а также со взглядами о важности Дyip между донорной и акцепторной частями листа для индукции цитокинином притока веществ (Gersani, Kende, 1982).

Такое представление хорошо объясняло видовые и возрастные особенности транспортных ответов листьев на цитокинин. У бобов ростовая реакция на цитокинин была выражена слабее, чем у тыквы, хотя несколько большие изменения происходили в синтезе крахмала. В ювенильных листьях БАП активировал деления клеток мезофилла, незначительно влияя на их растяжение, накопление крахмала в пластидах было слабым. Таким образом, ни одного из факторов, необходимых для повышения в листьях этого возраста мы не обнаружили. Более сильная реакция ростовых и метаболических процессов на цитокинин формировалась у растущих листьев, сопровождаясь увеличением и появлением аттрагирующе-го эффекта. У зрелых листьев цитокинин значительно активировал как рост клеток растяже-

ния, цитокинин создавал условия для транспорта Н* и роста.

Прослеживалась еще одна цепочка событий: выброс Н+из клеток должен был приво-

БИМИОТЕКА СПетербург 09 Щ •«*

РОС НАЦИОНАЛЫ!

»

нием, сопровождавшийся образованием необходимых для его осуществления полимерных соединений, так и синтез крахмала. Благодаря этому, по-видимому, у таких листьев появлялся высокий и формировалась сильная аттрагирующая способность обработанных БАЛ тканей. В стареющих листьях ростовая реакция на цитокинин не была выражена. Хотя содержание крахмала у них увеличивалось, оно, вероятно, не могло обеспечивать формирование существенного и вызвать достаточно сильный аттрагирующий эффект.

Таким образом, при изучении механизма аттрагирующего действия цитокининов на модельной системе - изолированном листе - мы выяснили, что главными факторами, определяющими акцепторные свойства обработанного БАП участка листа, являются рост растяжением, сопровождающийся образованием высокополимерных веществ, и синтез крахмала. Уменьшение вследствие этого уровня транспортных форм ассимилятов ослабляет их поступление в транспортное русло и тормозит отток веществ. Активация цитокинином ростовых и метаболических процессов приводит к появлению между донорным и акцепторным участками листа, что, в свою очередь, является движущей силой индуцированного БАП пассивного притока веществ.

В целом, мы представляем себе следующую цепь событий, приводящих к формированию акцепторной способности обработанной цитокинином половинки отделенного листа (рис. 8).

РЕГУЛЯЦИЯ ЦИТОКИНИНАМИ АКЦЕПТОРНЫХ СВОЙСТВ ЗАПАСАЮЩИХ ОРГАНОВ В СИСТЕМЕ ЦЕЛОГО РАСТЕНИЯ

Для выяснения механизмов, контролирующих функциональную активность акцепторов важно было определить, в какой степени данные, полученные на изолированных листьях, могут быть распространены на акцепторные органы целого растения. При выяснении этой проблемы мы сосредоточили внимание на изучении растений с симпластной разгрузкой ассимилятов в акцепторах - клубнях стеблевого происхождения картофеля, стеблевого и корневого происхождения у чистяка, перикарпе томатов (Гамалей, 1990, 2002; Вилленбрик, 2002 и др.). Апопластную разгрузку ассимилятов, осуществляющуюся на границе между двумя организмами, по-видимому, следует рассматривать как перегрузку ассимилятов из транспортной системы одного организма в другой (Гамалей, 2002). Ее регуляция, вероятно, осуществляется на уровне транспортных процессов на мембранах.

Выше была отмечена связь между содержанием эндогенных цитокининов, аттраги-рующей активностью и интенсивностью роста органа. Далее мы обнаружили сильную взаимосвязь между другими параметрами в онтогенезе (рис. 9) и при обработке акцепторов БАП.

Рис. 8. Схема формирования аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях (на примере зрелого листа тыквы).

Объем акцептора, %

Рис. 9. Осмотический потенциал (а), приток С-ассимилятов (б), содержание эндогенных цитокининов (в), растворимых (светлые точки) и нерастворимых (темные точки) углеводов (г), аминного азота (светлые точки) и белков (темные точки) (д), отношение во-да:сухое вещество (е) в запасающей паренхиме как функция объема клубня картофеля (1) и чистяка весеннего (2), перикарпа томатов (3).

В онтогенезе величина у/р коррелировала с уровнем эндогенных цитокининов (г=-0.67-0.97), акцепторной способностью органа (г=-0.83-0.85) и его объемом &=-0.96-0.98) (рис. 9).

Например, у чистяка был обнаружен (0.10-0.26 МПа в зависимости от типа акцептора) между зонами загрузки (донорными листьями) и разгрузки флоэмы (корнями, цветками, клубеньками, молодыми растущими листьями). Хотя у других объектов (картофеля, томатов) Ау'р между донорами и акцепторами на некоторых этапах онтогенеза мы не зарегистрировали, у них тоже для периода роста запасающих органов, совпадавшего с сильной аттрагирующей способностью, были характерны и высокие значения у/р. Его величина несколько повышалась по мере роста органа и резко снижалась к концу онтогенеза, перед

14л

прекращением притока С-ассимилятов в акцепторы.

Уровень эндогенных цитокининов в онтогенезе коррелировал с направленностью метаболизма органа, т.е. долей нерастворимых углеводов (г = 0.92-0.98) и белков (г = 0.96), у/р коррелировал с содержанием этих веществ (г--0.69-0.98 для углеводов и г = -0.66 для белков) и долей нерастворимых веществ в общем пуле углеводов или азотистых веществ (для полисахаридов г = 0.92-0.99, белков г = 0.78) (рис. 9).

В первой половине вегетации, когда содержание эндогенных цитокининов в формирующихся акцепторах было достаточно высоко, шло накопление растворимых углеводов (особенно моносахаров). Содержание цитокининов уменьшалось во второй половине вегетации одновременно с резким снижением уровня Сахаров и значительным повышением содержания крахмала и в меньшей степени - компонентов клеточной стенки.

На начальных этапах онтогенеза содержание аминного азота в единице сухой массы возрастало, снижаясь к концу вегетации почти вдвое. Количество белка долгое время оставалось на постоянном уровне, существенно повышаясь к концу вегетации. Таким образом, доля полимеров по мере роста органа увеличивалась.

Содержание воды в акцепторе коррелировало с уровнем эндогенных цитокининов (г = 0.500.90), притоком 14С-ассимилятов (г = -0.60-0.85), объемом органа (г = -0.82-0.92), долей нерастворимых углеводов (г = -0.73-0.87) и белков (г = -0.67) (рис. 9).

Для ранних этапов роста акцепторов была характерна ббльшая оводненность тканей. По-видимому, это было обусловлено преобладанием растворимых веществ по сравнению с нерастворимыми полимерами, а также высокой способностью клеточной стенки к растяжению. Вероятно, эти факторы способствовали высокой скорости роста акцептора на начальных этапах онтогенеза. По мере замедления роста органа, параллельно со снижением уровня эндогенных цитокининов и уменьшением доли растворимых форм ассимилятов в нем умень-

шалось относительное содержание воды. Экзогенный БАП вызывал согласованное изменение этих параметров. Он стимулировал приток 14С-ассимилятов к обработанным акцепторам (например, после обработки стеблевых клубеньков чистяка приток 14С в них увеличился с 4.6 до 21.4%). Кроме того, БАП повышал ^.обработанных органов (на 24% клубней картофеля и 54 - чистяка). Этот цитокинин изменял также соотношение низкомолекулярных растворимых и высокополимерных нерастворимых соединений в сторону синтеза полимеров (доля растворимых углеводов в клубнях картофеля и чистяка под действием БАП уменьшалась с 1112 до 3-6%). При этом БАП изменял соотношение сухого вещества и воды в сторону большей оводненности тканей (у картофеля на 32, у чистяка на 41%).

Фитогормон активировал рост запасающих органов, наиболее эффективно действуя на начальных этапах роста растяжением. В этом случае цитокинин увеличивал объем органа обычно на 30, иногда до 70%. С возрастом эффективность действия БАП на рост уменьшалась, исчезая после его завершения.

При изучении механизма стимулированного цитокинином роста запасающих органов растяжением мы наблюдали ряд эффектов, сходных с обнаруженными на отделенных листьях: 1. Увеличение размеров высечек из запасающей паренхимы акцепторных органов в кислой среде и после обработки БАП. При этом цитокинин усиливал ростовую реакцию высечек на кислый буфер. 2. Снижение рН среды, в которой инкубировали фрагменты высечек из паренхимных тканей запасающих органов после добавления в нее БАП.

Эти данные показали, что начальные этапы роста клеток запасающей паренхимы, вероятно, были вызваны теми же событиями, что и при росте клеток мезофилла листа: выбросом в апопласт и серией последующих событий, приводивших к разрыхлению клеточной стенки. Включение цитокининами метаболических процессов, в том числе синтеза структурных полисахаридов и белков, способствовало длительному протеканию роста в онтогенезе.

Полученные результаты дают основание считать, что акцепторные свойства запасающих органов и тканей в системе целого растения, вероятно, тоже определяются процессами роста растяжением и накоплением высокополимерных веществ, повышающими в запасающей паренхиме акцепторов и поддерживающими его на постоянном уровне благодаря утилизации притекающих ассимилятов. Аттрагирующая способность цитокининов, по-видимому, заключается активации этих естественно протекающих в онтогенезе процессов. ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЦИТОКИНИНОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ УРОЖАЙНОСТИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР

Полученные результаты в сочетании с литературными данными свидетельствовали о влиянии цитокининов пуриновой природы на рост, развитие и функционирование донорных

и акцепторных органов на всех этапах онтогенеза растений (Кулаева, 1973; Соколова, 1986; Муромцев и др., 1987; Борзенкова и др., 1988; Чернядьев, 1993,2001 и др.). Это указывало на то, что управление формированием урожая с помощью синтетических аналогов природных цитокининов является перспективным направлением современного растениеводства. Высокая физиологическая активность цитокининов позволяет применять их в чрезвычайно низких концентрациях (г/га) (Кулаева, 1987), что в сочетании с быстрым разложением в растительных тканях (Ьа1оие е! а1., 1981; ЬеШаш, РаШ, 1983; Тао е! а1., 1983) должно обеспечивать чистоту сельскохозяйственной продукции. Однако технология повышения урожайности сельскохозяйственных (в том числе овощных) культур с помощью регуляторов роста цито-кининовой природы отсутствовала. Поэтому одной из задач работы являлась разработка технологии применения БАП при выращивании картофеля и томатов, позволявшей эффективно повысить урожайность этих культур.

Разработанная технология предусматривает внекорневую подкормку растений водным М раствором БАП трижды в течение вегетации: картофеля - в фазу бокового ветвления, в конце бутонизации - начале цветения и в фазу пожелтения нижних листьев; томатов - в фазы бокового ветвления, налива плодов и молочной спелости плодов и последующее выращивание до получения урожая согласно технологии, принятой для культуры. Норма расхода препарата - 6.8-9.0 г/га, расход рабочей жидкости на одну обработку был стандартным для выбранных культур и составлял 300-400 л/га.

С помощью такого подхода урожайность картофеля была повышена на 29, томатов -на 55% (табл. 7).

Таблица 7

Действие 10"4 М БАП на урожай картофеля сорта «Невский» и томатов сорта «БаШош&иЬег»

Картофель Томаты

урожай, кг/25 ьг опыт,% урожай, кг/20 опыт,%

вода БАП прибавка от кон- вода БАП прибавка от кон-

(контроль) (опыт) урожая троля (контроль) (опыт) урожая троля

102 ±9 132± 10 30 129 34±2 53 ±3 19 155

Эффект БАП, вероятно, был обусловлен тем, что первая обработка растений активировала формирование и функционирование фотосинтетического аппарата, стимулировала синтез ассимилятов. Вторая обработка усиливала фотосинтетическую функцию листьев, образование ассимилятов, улучшала их отток из листьев и поступление в запасающие органы, стимулировала рост, развитие и функционирование надземных хозяйственно ценных органов, отложение питательных веществ в запас в них. Третья обработка активировала рост за-

канчивающих рост надземных запасающих органов, задерживала старение растений, продлевая период активного накопления ассимилятов в хозяйственно ценных органах.

Абсолютный прирост рентабельности при использовании БАП в технологии выращивания картофеля, рассчитанный по данным 2000 года, составил 0.25, темп прироста рентабельности - 57%, что свидетельствовало о высокой экономической эффективности способа.

Экологическую чистоту продукции оценивали методом ВЭЖХ по остаточным количествам БАП и его прямого метаболита - рибозида БАП - в продуктах урожая в течение 72 ч после обработки. В клубнях картофеля эти соединения не обнаруживали, что могло быть обусловлено малоподвижностью цитокининов (Mothes, 1964), благодаря которой они оставались в месте нанесения - ботве. В плодах томатов обнаруживали только БАП в незначительном количестве - 0.07+0.01 мг/кг сырой массы и не позднее, чем через 24 ч после нанесения. Это свидетельствовало о быстрой и полной деградации БАП, который, как известно, включается в метаболизм растительных тканей, в течение 1-2 сут разлагаясь до аденозина, адено-зин-, гуанозин- и инозинмонофосфатов, гипоксантина, уреидов (Letham, Palni, 1983) - природных соединений, являющихся важнейшими метаболитами у всех живых организмов.

Полученные результаты позволяют считать БАП высокоэффективным экологически безопасным препаратом для использования в практике растениеводства с целью повышения урожайности сельскохозяйственных культур.

МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ И ИНТЕГРАЦИИ ОТНОШЕНИЙ МЕЖДУ ПРОИЗВОДЯЩИМИ И ПОТРЕБЛЯЮЩИМИ АССИМИЛЯТЫ ОРГАНАМИ В СИСТЕМЕ ЦЕЛОГО РАСТЕНИЯ

Проведенные исследования в совокупности с имевшимися в литературе сведениями (Курсанов, 1976,1984; Мокроносов, 1981,1983; Чиков, 1987; Гамалей, 1990, 1994 и др.) позволили обобщить в единую схему гормональные, метаболитные и осмотические механизмы регуляции отношений между донорами и акцепторами ассимилятов в растениях (рис. 10). на примере травянистых растений с апопластной загрузкой, доминирующих в умеренной зоне (Гамалей, 1990). В качестве донора ассимилятов рассмотрен мезофилл зрелого, завершившего рост листа. При разработке этой схемы мы основывались на результатах наших исследований, современных представления о путях ближнего и дальнего транспорта ассимилятов (Гамалей, 1990,1994, 2002; Вилленбрик, 2002; Курсанов, 1976, 1984; Боннемэн и др., 1984; Delrot, Bonnemain, 1985; Woswinkel, 1985; Patrick, 1990; Van Bel, 1993; Schulz, 1998 и др.) и сведениях о физиологических эффектах цитокининов (Кулаева, 1973; Соколова, 1986; Чиков, 1987; Муромцев и др., 1987; Борзенкова и др., 1988; Чернядьев, 1993,2001 и др.).

Уже на этапе первичного синтеза и метаболизма углерода в клетках мезофилла про-

Донор-мезофилл зрелого листа

Акцепторы с симпластной разгрузкой

Акцепторы с апопластнойразгрузкой

Рис. 10. Взаимосвязь между гормональными, метаболитными и осмотическими сигналами при регуляции цитокининами транспорта и распределения ассимилятов в системе целого растения. Интенсивность окраски блоков усиливается в направлении понижения осмотического потенциала.

КС - клетка-спутница, ПК - паренхимная клетка флоэмы, СЭ - ситовидный элемент, - процесс стимулируется цитокининами, - процесс тормозится цитокининами, гЛ - в регуляции процесса цитокинины не участвуют, либо их роль не ясна.

исходит сложная эндогенная регуляция, определяющая углеводную или неуглеводную направленность метаболизма, альтернативу между использованием углерода на образование сахарозы, временным депонированием в виде растворимых веществ в вакуолях или в форме крахмала в хлоропластах, либо потреблением в эпигенетических процессах. Их соотношение в значительной степени определяет донорную функцию листа, при этом обеспечивая буферность донорно-акцепторной системы.

Загрузка Сахаров из спутниц в ситовидные элементы происходит по симпласту по градиенту концентрации без энергетических затрат (Гамалей, 1990), поскольку \ур ситовидных элементов чуть выше, чем спутниц (Warmbrodt, 1986).

Один из важных механизмов регуляции транспорта ассимилятов в растениях, по-видимому, действует именно на этапе загрузки. Показано, что переносчик, участвующий в апопластной загрузке сахарозы во флоэму, чувствителен к давлению, которое развивается в клетках проводящих путей по мере их обогащения сахарозой (Coster et al., 1977; Smith, Mil-burn, 1980). Если акцептор не способен использовать притекающую сахарозу, в ситовидных трубках создается ее повышенная концентрация, что приводит к поступлению в них воды и развитию давления. Это не только выравнивает его градиент по длине ситовидных трубок и приостанавливает в них движение раствора, но и передает давление на мембрану, на которой находится переносчик сахарозы, вызывая приостановку загрузки ассимилятов. Ослабление давления в зоне акцептора приводит к противоположным эффектам (Курсанов, 1984,1986).

Массовый поток ассимилятов на дальние расстояния, скорее всего, обеспечивается разницей давления, возникающей на концах проводника в результате энергозависимой загрузки ассимилятов против градиента концентрации и между клетками мезофилла и клетками-спутницами терминальной флоэмы в доноре и отведением из транспортного русла путем разгрузки в акцепторах (Гамалей, 1990, 1994; Thorpe, Minichin, 1996 и др.). В определенной степени концентрационный градиент вдоль флоэмы на этапе дальнего транспорта поддерживается латеральным перераспределением сахарозы (и других метаболитов) между ситовидными элементами и паренхимными клетками, что влечет за собой измене-кие градиентов давления в проводящей системе (Курсанов, 1984, 1986). Латеральный перекос Сахаров, по-видимому, имеет большое значение при изменении донорно-акцепторного баланса в растениях в ответ на действие эндогенных или экзогенных факторов (Туркина, Соколова, 1972; Соколова, 1972).

Пути разгрузки сахарозы из флоэмы в ткани акцепторных органов в настоящее время изучены более или менее подробно. Показано, что характер разгрузки в разных акцепторах может быть активным или пассивным. Однако классификация акцепторов, предложенная ря-

дом авторов (Но, Baker, 1982; Гамалей, 1990; Мокроносов, Гавриленко, 1992), разработана недостаточно. Судя по нашим данным, в ней необходимо совместить способы разгрузки ас-симилягов с особенностями метаболизма акцепторов. Поэтому целесообразно выделить

I. Акцепторы с симпластной разгрузкой ассимилятов: 1. Ростовые (например, все меристемы, молодые развивающиеся органы и пр.). 2. Метаболитные (например, корни). 3. Запасающие (плоды, видоизмененные стебли и т.д.).

П. Акцепторы с апопластной разгрузкой ассимилятов: 1. Секреторные, или зоны активной секреции (нектарники). 2. Гетеротрофные организмы (растения-паразиты и симбионты). 3. Запасающие (семена).

В акцепторы первой группы ассимиляты разгружаются симпластно, и разгрузка может рассматриваться как продолжение флоэмного транспорта, который идет по без затраты энергии . Дальнейшее повышение у/р в этих зонах обусловлено понижением концентрации ассимилятов в потребляющих клетках за счет ряда процессов: потребления в дыхании, использования на ростовые процессы, отложения в запас в виде высокомолекулярных соединений, либо включением в продукты вторичного метаболизма и отводом в другие органы растения. Доминирование того или иного процесса детерминировано генетически и определяется типом и особенностями метаболизма акцептора. В ростовых акцепторах ведущим процессом, скоре всего, является формирование флоэмных окончаний и последовательное присоединение отдельных участков органа к единой транспортной системе растения.

Акцепторы второй группы, имеющие апопластную разгрузку, функционируют на границе между двумя организмами, например, между разными «поколениями» в семенах, между растением-хозяином и растением-симбионтом или паразитом. Ситуацию в этом случае можно рассматривать как перегрузку ассимилятов из транспортной системы одного организма в другой (Гамалей, 2002). В зонах активной секреции имеются специализированные секреторные клетки, обеспечивающие концентрирование и выделение секрета.

Механизм разгрузки в акцепторах такого типа состоит в секреции сахарозы из ситовидных элементов в апопласт и последующем поступлении сахарозы в цитоплазму потребляющих клеток. Энергетические аспекты этого этапа не совсем ясны. Поскольку концентрация сахарозы в апопласте значительно ниже, чем в ситовидных элементах (Курсанов, 1984, 1986), первый этап разгрузки должен идти по Дщ без затраты энергии. Дальнейшее поступление сахарозы из апопласта в потребляющие клетки акцептора осуществляются с помощью встроенного в плазмалемму переносчика. Этот процесс идет против концентрационного градиента, для его осуществления требуется энергия, генерируемая Н+-АТФазой плазмалеммы акцепторных клеток. Тем не менее, и в этих акцепторах наблюдается повы-

шение ч/р, поскольку притекающие вещества тратятся на рост, включаются в метаболизм, откладываются в запас или выводятся из акцептора в виде нектара. По-видимому, Ау/р необходим для поддержания не только симпластной, но и апопластной разгрузки ассимилятов.

Наши данные в сочетании с литературными сведениями показывают, что цитокинины контролируют все основные этапы функционирования растения как единой донорно-акцеп-торной системы (Кулаева, 1973; Соколова, 1986; Чиков, 1987; Муромцев и др., 1987; УаБ-БЙеуа, Э1ш11:гоуа, 1987; Борзенкова и др., 1988, 1998; Тапе]а е! а1., 1992; Чернядьев, 1993, 2001 и др.). Они активируют процессы, определяющие донорную функцию листьев: фотосинтетическую фиксацию световые и темновые реакции фотосинтеза, увеличивают долю углеводов среди продуктов фотосинтеза, сдвигая при этом отношение сахароза/крахмал в сторону синтеза сахарозы. Очевидно, что эти эффекты повышают содержание транспортных форм ассимилятов и тем самым понижают в донорной части транспортной системы растения. Цитокинины способны усиливать экспорт ассимилятов из листа. Возможно, они стимулируют и загрузку терминальной флоэмы, что, однако, требует подтверждения. Роль цитокининов в акцепторных тканях изучена явно недостаточно. Тем не менее, с уверенностью можно говорить о стимуляции этими фитогормонами синтеза биополимеров -крахмала, белка, веществ клеточных стенок и активации ростовых процессов, приводящих к повышению клеток акцепторов и тем самым - к усилению их аттрагирующей активности.

Можно заключить, что поскольку различные формы ассимилятов характеризуются различными осмотическими свойствами, их взаимопревращения приводят к изменению внутриклеточного давления вдоль транспортного пути и тем самым обеспечивают контроль над флоэмным транспортом и распределением веществ в растениях. Цитокинины, активируя метаболизм производящих и потребляющих ассимиляты органов, делают этот контроль более существенным благодаря созданию и поддержанию в онтогенезе между донорным и акцепторным концами флоэмы как проводника фотоассимилятов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное в работе изучение механизмов регуляции донорно-акцепторных связей в растениях ка разных уровнях организации - от субклеточного до организменного - позволило дать общую картину регуляции транспорта и распределения ассимилятов и интеграции функционально различных органов и тканей в единую донорно-акцепторную систему. Наши исследования показали, что эти процессы контролируются как на донорном (во взрослых листьях), так и на акцепторном (в потребляющих и запасающих органах) концах транспортного пути. При этом роль цитокияинов заключается в активации естественной функциональной активности и донорных, и акцепторных органов.

В листьях эти фитогормоны увеличивают скорость фотосинтетической фиксации СОг, снижают синтез крахмала как запасного вещества и увеличивают долю транспортных форм углерода среди продуктов фотосинтеза. Тем самым они повышают молярную концентрацию фотоассимилятов в доноре, создают более низкий вызывая осмотический приток воды и увеличивая давление донорной части проводящей системы.

На этапе дальнего транспорта перемещение ассимилятов во флоэме поддерживается их латеральным перераспределением между проводящими и паренхимными клетками флоэмы и дополнительными механизмами.

Усиление цитокининами функциональной активности запасающих акцепторных тканей, стимуляция роста растяжением и утилизация притекающих веществ путем их включения в нерастворимые, в первую очередь, полимерные соединения (крахмал, структурные полисахариды и белки) способствуют отводу ассимилятов из флоэмы, повышают в акцепторах, вызывают понижение давления в конце транспортного русла, тем самым стимулируя приток ассимилятов в потребляющие органы и ткани. Кроме того, метаболические и ростовые процессы в акцепторах обеспечивают отвод притекающих соединений из флоэмы, их утилизацию и благодаря этому создают возможность постоянного транспорта веществ от доноров к акцепторам в онтогенезе.

Совокупность описанных процессов, в итоге приводящих к понижению в начале и повышению в конце транспортного пути создает более значительный и градиент давления между донорными и акцепторными органами, величина которого регулирует интенсивность, направленность транспортных потоков фотоассимилятов и их распределение в растениях. Эти же процессы обеспечивают интеграцию его функционально различных частей в единую донорно-акцепторную систему.

ВЫВОДЫ

1. Впервые установлено, что аттрагирующий эффект цитокининов в изолированных листьях, сопровождающийся изменением направления флоэмного транспорта веществ на противоположное, существует в донорных органах как с закрытой, так и с открытой терминальной флоэмой, что свидетельствует об обратимости не только апопластного, но и сим-пластного транспорта ассимилятов.

2. Причиной аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях являются структурные и функциональные изменения в клетках мезофилла.

Торможение цитокининами оттока веществ из листовой пластинки вызвано уменьшением уровня транспортных форм углерода вследствие включения подвижных соединений в

полимеры - крахмал, структурные полисахариды и белки, что препятствует их поступлению во флоэму.

Индукция цитокининами притока веществ вызвана формированием градиента осмотического потенциала между донорным и акцепторным участками листа. Оно обусловлено стимуляцией процессов роста растяжением за счет повышения эластичности клеточной стенки, поступления воды в клетку и синтеза биополимеров, приводящих к уменьшению числа молекул органических веществ в единице объема клетки, и тем самым, - к повышению осмотического потенциала в акцепторном участке листа.

3. Причиной атграгирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях не является прямое влияние этих фитогормонов на структуру флоэмы или функционирование мембранных механизмов переноса Сахаров в системе клеток мезофилл - флоэма.

4. В системе целого растения интенсивность, направленность транспорта ассими-лятов и их распределение между органами и тканями контролируются функциональной активностью как донорных, так и акцепторных органов, причем наиболее эффективно - при одновременном участии этих двух элементов донорно-акцепторной системы.

5. Фактором интеграции различных частей растения в единую донорно-акцепторную систему и движущей силой флоэмного транспорта веществ является градиент давления вдоль транспортного пути, формирующийся благодаря существованию градиента осмотического потенциала между донорными и акцепторными органами.

6. Величина градиента осмотического потенциала между производящими и потребляющими ассимиляты органами определятся осмотическими свойствами их клеток и контролируется цитокининами на внутриклеточном уровне путем регуляции ростовых и метаболических процессов.

7. Специфика ответных реакций функционально различных органов и тканей растения на цитокинин определяется их онтогенетическими особенностями. Во взрослых листьях цитокинины стимулируют процессы, определяющие их донорную, а в потребляющих ассимиляты органах, - акцепторную функцию.

8. Донорная способность органов, связанная с формированием низкого осмотического потенциала в начале транспортного пути, определяется размером транспортного пула ассимилятов, формирование которого зависит от соотношения процессов, протекающих в клетках мезофилла: углеводной и неуглеводной направленности метаболизма, использования углерода на эпигенетические процессы, отложения в виде запасных соединений или включения в транспортные формы ассимилятов.

9. Акцепторные свойства паренхимных запасающих органов и тканей определяются процессами, повышающими осмотический потенциал в конце транспортного пути: ростом растяжением и накоплением запасных, в первую очередь, полимерных и/или гидрофобных соединений, которые выходят из транспортного пула клеток. Аттрагирующий эффект цитокшганов заключается в стимуляции этих процессов.

10. Функционирование акцепторов, обеспечивающее отвод из транспортного русла и постоянную утилизацию притекающих веществ, поддерживает поток ассимилятов по флоэме из донорных в акцепторные органы в онтогенезе.

11. Цитокинины являются высокоэффективными регуляторами продуктивности сельскохозяйственных растений. На основании полученных данных предложена экономически эффективная технология применения БАП, способствующая повышению урожайности картофеля на 29, томатов - на 55%.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ronjina E. The Possible Mechanism of Cytokinin-Directed Transport in Detached Leaves // XVth Intern. Botanical Congress (Tokyo, August 28 - September 3,1993). - Tokyo, 1993. - P. 458.

2. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т., Соколова СВ. О природе аттрагирующего действия цитокинина в изолированных листьях // Доклады РАН. Сер. биол. - 1994. - Т. 336. -№ 2. - С. 283 - 286.

3. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т. Донорно-акцепторные отношения и участие цитокининов в регуляции транспорта и распределения веществ в растениях // Физиология растений. -1994. - Т. 41. - № 3. - С. 448 - 459.

4. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т., Соколова СВ. Действие цитокининов на транспорт и распределение веществ в изолированных листьях. 1. Аттрагирующий и удерживающий эффекты у листьев с различными типами терминальной флоэмы // Физиология растений. - 1994. - Т. 41. - № 5. - С. 707 - 712.

5. Ronzhina E.S., Sokolova S.V., Mokronosov А.Т. A Possible Mechanism of Cytoki-nin-Stimulated Growth in Mature Leaves // Intern. Symp. on Plant Hormone Signal Perception and Transduction (Moscow, September, 4-10,1994). - Moscow - Programme & Abstracts. - Moscow: IPP, 1994. - P. 74.

6. Роньжина Е.С. Изучение природы разгрузки веществ при индуцированном ци-токинином транспорте в зрелых изолированных листьях // Materialy Miedzynarodowa Konferencja Naukowa: Alternatywne Strategic 2ycia Na R6znych Poziomach Organizacji: Biologicznym i Kulturowym (Polska, Olsztyn, wrzes"nia, 22-25,1994).- Olsztyn, 1994. - S. 42 - 43.

7. Роньжина Е.С., Соколова СВ., Мокроносов А.Т. Действие цитокининов на транспорт и распределение веществ в изолированных листьях. 2. Факторы, влияющие на реализацию эффектов цитокининов // Физиология растений. - 1995. - Т. 42. - № 1. - С. 61 - 67.

8. Роньжина Е.С., Филиппова Л.А., Мамушина Н.С. К вопросу о роли темнового дыхания в поддержании уровня ассимилятов в листе при нарушении их экспорта // Междун. совещание «Дыхание растений: физиологические и экологические аспекты» (Сыктывкар, 1116 сентября, 1995). - Программа и тез. докл. - Сыктывкар: Изд-во Коми НЦ УрО РАН, 1995. -С. 119-120.

9. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т. Роль цитокининов в регуляции донорно-акцепторных отношений в системе целого растения у Ficaria verna II Материалы I Междун. симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (Пущино, 1-5 августа, 1995). - Пущино: ИПФС, 1995. - Ч. II. - С. 158 - 160.

10. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т. Роль цитокининов и абсцизовой кислоты в регуляции донорно-акцепторных отношений в системе целого растения у Ranunculus acris II Материалы II Междун. симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (Пущино, 16-20 июля, 1997). - Пущино: ИПФС, 1997. - Т. 2. -С. 84-86.

11. Роньжина Е.С. Цитокинины как факторы эндогенной регуляции акцепторных свойств органов в системе целого растения // Современные аспекты агрономии и природопользования: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Рябой В.Е. - Калининград: КГТУ, 1997. - С. 52 -58.

12. Роньжина Е.С. СОг-газообмен листа при нарушении донорно-акцепторных связей в системе целого растения // Интродукция, акклиматизация и культивация растений: Сб. научн. тр. / КГУ. Отв. ред. Гуревич А.С. - Калининград: КГУ, 1998. - С. 63 - 68.

13. Роньжина Е.С. Донорно-акцепторные отношения и продуктивность растений // Проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Бедарев С.А. - Калининград: КГТУ, 1999. - С. 8 - 20.

14. Роньжина Е.С. К вопросу о механизме цитокинин - зависимого транспорта ас-симилятов в системе целого растения // Междун. конф. «Актуальные вопросы экологической физиологии растений в XXI веке» (Сыктывкар, 1-6 октября, 2001). - Тез. докл. - Сыктывкар: Изд-во Коми НЦ УрО РАН, 2001. - С. 323.

15. Ron'zhina E.S. Cytokinin Regulates Assimilate Transport and Bean Formation under the Effect of Heavy Metal (Lead) // Intern. Symp. «Plant under Environmental Stress» (Moscow,

October 23-28,2001). - Abstracts. - Moscow: Publishing House of Peoples' Friendship University of Russia, 2001. - P. 243 - 244.

16. Роньжина Е.С. Транспорт ассимилятов как фактор продуктивности растений // Актуальные проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв.ред. Паракшин Ю.П.Калининград: ЮТУ, 2001. - Ч. II. - С. 127 -140.

17. Роньжина Е.С. Аттрагирующий эффект цитокинина в изолированных листьях вызван не структурными перестройками флоэмы // Физиология растений. - 2002. - Т. 49. - № 1,-С. 87-97.

18. Роньжина Е.С. Изучение механизма стимулированного цитокинином роста растяжением клеток мезофилла листа двудольного растения (Cucurbita pepo L.) // II Междун. конф. по анатомии и морфологии растений (С.-Петербург, 14-18 октября, 2002). - Тез. докл. -С.-Пб., 2002. - С. 240.

19. Роньжина Е.С. Аттрагирующий эффект цитокининов и формирование урожая сельскохозяйственных культур // Современные проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Брысозовский И.И. - Калининград: КГТУ, 2002. - С. 131 - 155.

20. Ronzhina E.S. Cytokinins and Potato Productivity // Plant Nutrition. Growth and Diagnosis / Eds. Dris R., Abdelaziz F.H., Jain S.M. - Enfield, Plymouth: Science Publisher. - 2002. -P. 63 - 66.

21. Ronzhina E.S. Sink Activity of Cytokinins and Plant Productivity // Plant Physiology: Characteristics, Breeding, and Genetics / Eds: Dris R., Barry-Ryan C. - Enfield, Plymouth: Science Publisher. - 2002. - P. 38 - 42.

22. Роньжина Е.С. Водный обмен бобов при действии цитокинина // Известия КГТУ.-2002.-№1.-С.31-38.

23. Роньжина Е.С. Действие цитокинина на продуктивность бобов Vicia faba L. // Известия КГТУ. - 2003. - № 3. - С. 132 -142.

24. Роньжина Е.С. Структура фотосинтетического аппарата бобов Vicia faba L. при/ действии 6-бензиламинопурина // Прикладная биохимия и микробиология. - 2003. - Т. 39. -№4.-С. 465-472. /

25. Роньжина Е.С. Мембранный транспорт Н+ - пусковой механизм цитокинин-зависимого роста клеток мезофилла листа тыквы Cucurbita pepo L. // V Съезд РОФР и Международная конференция «Физиология растений - основа фитобиотехнологии» (Пенза, 15-20 сентября, 2003). - Тез. докл. - М.: ИФР РАН, 2003. - С. 427. ,

26. Роньжина Е.С. Регуляция цитокининами деления и растяжения клеток мезофилла в онтогенезе листа Cucurbita pepo L. // Физиология растений. - 2003. - Т. 50. - № 5. - С.

722 - 732.

27. Роньжина Е.С. Изменение уровня эндогенных цигокининов в растениях под действием 6-бензиламинопурина // Вопросы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Брысозовский И.И. - Калининград: КГТУ, 2003. - С. 109 - 118.

28. Роньжина Е.С. Структурные и функциональные перестройки мезофилла как возможная причина цитокинин-зависимого транспорта веществ в изолированных листьях // Физиология растений. - 2004. - Т. 51. - № 3. - С. 373 - 382.

29. Роньжина Е.С. Цитокинины и донорно-акцепторные отношения у картофеля // Известия КГТУ.-2004,-№6.-С. 114-121.

30. Роньжина Е.С. Сравнительный анализ действия фузикокцина, АБК и БАЛ в связи с проблемой аттрагирующего эффекта цитокининов // Физиология растений. - 2004. -Т. 51.- № 4.- С. 493-499.

Подписано к печати 23.08.2004. Заказ /3 . Объем 2.0 п л. Бумага 60x84 (1/16). Тираж 120 экз.

УОП КГТУ. 236000, Калининград, Советский пр-т, 1.

1917 4 Я 8

РНБ Русский фонд

2005-4 13514

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Роньжина, Елена Степановна

ВВЕДЕНИЕ

1. Обзор литературы

1.1. Растение как донорно-акцепторная система

1.2. Аттрагирующая активность акцепторных органов в системе целого растения

1.3. Регуляция цитокининами атграгирующей активности акцепторов

1.4. Аттрагирующий эффект, цитокининов в изолированных листьях

1.5. Смена функционального состояния и формирование мезофилла и терминальной флоэмы в онтогенезе листа

1.6. Действие цитокининов на структуру и функционирование флоэмы

1.7. Действие цитокининов на структуру и функционирование отделенного листа

1.8. Регуляция цитокининами роста растительных тканей

1.9. Цитокинины и донорная функция листьев

2. Материалы и методы исследований

2.1. Объекты исследований

2.2. Постановка опытов

2.3; Определение площади листовой пластинки

2.4. Определение объема запасающих органов

2.5. Определение содержания хлорофилла

2.6. Изучение феноменологии атграгирующего эффекта цитокининов и других биорегуляторов в изолированных листьях

2.7. Анализ распределения 14С-ассимилятов в растениях и радиометрическое определение интенсивности фотосинтеза

2.8. Изучение поглощения ИС-БАП растительными тканями

2.9. Идентификация и количественное определение эндогенных цитокининов

2.10. Электронная и световая микроскопия

2.11. Просветление листьев

2.12. Изучение энергозависимости разгрузки ассимилятов в изолированных листьях при действии БАЛ

2.13. Анализ структуры мезофилла

2.14. Изучение действия БАП на динамику роста растительных тканей

2.15. Анализ параметров С02-газообмена листа

2.16. Анализ включения 14С в продукты фотосинтеза

2.17. Фракционирование и количественное определение углеводов

2.18. Определение аминного азота

2.19. Количественное определение белков

2.20. Определение осмотического потенциала клеточного сока

2.21. Анализ поглощения экзогенной 14С-сахарозы тканями листа

2.22. Определение рН апопласта ф 2.23. Изучение растяжимости клеточных стенок

2.24. Измерение биоэлектрического тканевого потенциала (БЭП)

2.25. Измерение рН среды инкубации растительных тканей

3. Донор но - акцепторные отношения и их регуляция цитокининами в системе целого растения

3.1. Экспериментальная часть

3.1.1. Картофель

3.1.2. Чистяк весенний

3.1.3. Лютик едкий

3.2. Обсуждение результатов

4. Структурные и функциональные изменения в изолированных листьях при действии цитокининов

4.1. Экспериментальная часть

4.1.1. Изучение экспериментальной модели

4.1.2. Феноменология аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях

4.1.3. Изучение механизма аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях на уровне структуры флоэмы

4.1.4. Изучение причины аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях на уровне трансмембранного переноса веществ в системе клеток мезофилл - флоэма

4.1.5. Действие цитокининов на мезофилл

4.1.6. Изучение механизма цитокинин-зависимого роста растяжением fc 4.2. Обсуждение результатов

5. Регуляция цитокининами акцепторных свойств запасающих органов в системе целого растения

5.1. Экспериментальная часть

5.2. Обсуждение результатов

6. Возможность использования цитокининов для повышения урожайности сельскохозяйственных культур

7. Механизмы регуляции и интеграции отношений между производящими и потребляющими ассимиляты органами в системе целого растения

Введение Диссертация по биологии, на тему "Цитокинины в регуляции транспорта и распределения ассимилятов в растениях"

Рост численности населения нашей планеты на фоне ограниченности размеров пригодных для земледелия территорий вызывает необходимость эффективного управления формированием урожая. В связи с этим важно оптимизировать процессы роста; синтеза, транспорта и отложения органических веществ в запас.

Органы, производящие и потребляющие ассимиляты, образуют в растении единую, хорошо сбалансированную донорно-акцепторную систему (Курсанов, 1961, 1976, 1984; Мокроносов, 1981, 1983; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Донорами обычно являются фотосинтезирующие органы - взрослые зеленые листья, снабжающие ассимилятами все другие органы и ткани; гетеротрофные части растения, как правило, выступают в роли акцепторов. Эти пространственно разделенные элементы донорно-акцепторной системы связаны между собой с помощью флоэмы, по которой фотоассимиляты и некоторые другие метаболиты транспортируются от производящих к потребляющим и запасающим частям растений. Именно флоэмный транспорт является одним: из важнейших факторов интеграции физиологических процессов i в растениях на всех уровнях организации (Курсанов, 1976; Туркина, Павлинова, 1981).

В онтогенезе между донорными и акцепторными органами устанавливается сложная взаимосвязь, благодаря которой фотосинтез поддерживается на уровне, необходимом для обеспечения потребностей растения. Однако механизм формирования такой взаимосвязи не ясен. Пока отсутствует даже единое мнение по вопросу о том, какому типу органов - донорам или акцепторам - принадлежит главенствующая роль в функционировании растения как донорно-акцепторной системы. Согласно одной из существующих точек зрения, определяющую роль играют акцепторы, посылающие сигнал неизвестной природы в сторону доноров и таким образом регулирующие их метаболизм (Мокроносов, 1981, 1983; Dinar, Rudish, 1985; Чиков, 1987; Мокроносов, Гавриленко, 1992). Вторая сторона функциональной активности акцепторов заключается в их аттрагирующей способности, т.е. в ориентации транспортных потоков асси-милятов в растениях в сторону потребляющих и запасающих органов и тканей (Кур-санов, 1976; Мокроносов, 1981, 1983; Delrot, Bonnemain, 1985; Соколова, 1986; Бор-зенкова и др., 1988; Но, 1988 и др.). В то же время, существуют данные, показывающие, что изменение донорной функции листьев влияет на аттрагирующую активность акцепторов (Wyse, Saftner, 1982), а транспорт и распределение ассимилятов в растениях могут контролироваться донорными органами (Penot, 1963; Курсанов, Павлино-ва; 1967; Rovira, Boven, 1973). Поэтому не случайно некоторые исследователи основную роль в функционировании донорно-акцепторной системы отводят донорам (зонам загрузки, где формируется транспортный пул ассимилятов) (Turgeon, 1987; Patrick, Offler, 1996; Patrick, 1997; Komor, 2000). Ряд авторов склоняется к модели с двумя активными центрами;управления транспортом и распределением ассимилятов в растениях (Schulz, 1993, 1997; Oparka, Turgeon, 1999).

Воззрения последней! группы авторов в наибольшей степени согласуются с представлениями о регуляторных механизмах флоэмного транспорта ассимилятов в растениях, основанными: на закономерностях, вскрытых Мюнхом (Munch, 1930). Движущей силой транспорта ассимилятов он считал градиент давления в проводящих путях, возникающий в результате, формирования градиента осмотического потенциала (Дц/р)ц вдоль флоэмы. Данные ряда авторов; указывают также на то, что транспорт ассимилятов в растениях контролируется, в основном, на i уровне загрузки веществ в листе - доноре и их разгрузки в акцепторных органах и тканях, т.е. в начале и конце транспортного пути (Eshrich, 1970; Geiger, 1975; Курсанов, 1976; Гамалей, 1990,1994, 2002; Oparka, Turgeon, 1999; Oparka, Santa Cruz, 2000; Вилленбрик, 2002 и др.). На промежуточных этапах флоэмный транспорт, очевидно, поддерживается дополнительными двигателями, основанными на латеральном перераспределении метаболитов между ситовидными элементами и паренхимными клетками флоэмы и; контрактильных изменениях белков актин-миозинового комплекса (Туркина, Соколова, 1972; Соколова, 1972; Курсанов, 1976; Туркина, Куликова, 1982; Kursanov et al.,1983). Однако в целом механизмы, контролирующие транспорт и распределение ассимилятов в растениях, не ясны.

Литературные данные указывают на то, что метаболизм и транспорт ассимилятов в растениях находятся под гормональным контролем. Причем по характеру и интенсивности оказываемых эффектов среди растительных гормонов на первом месте находятся цитокинины. Они способны влиять на все стороны донорно-акцепторных отношений: формирование и функционирование фотосинтетического аппарата, транспорт и распределение ассимилятов в растениях, рост, развитие хозяйственно ценных органов и отложение в них запасных питательных веществ (Кулаева; 1973; Соколова, 1986; Муромцев и др.,1987; Борзенкова и др., 1988; Чернядьев, 1993, 2001).

Одним из наиболее важных физиологических эффектов этих фитогормонов является аттрагирующая способность, которая проявляется в ориентации транспортных потоков ассимилятов в сторону обогащенных цитокининами органов и тканей (Mothes et al., 1959; Курсанов,. 1976; Леопольд, 1968; Кулаева, 1973; Соколова, 1986; Борзенкова и др., 1988; Но, 1988 и др.). Феноменологически аттрагирующее действие цитокининов неоднократно; наблюдали многие авторы на модельных системах различной степени сложности и целых растениях, но его механизм пока неизвестен.

Возможно, аттрагирующий эффект связан со способностью цитокининов активировать метаболизм растительных тканей, стимулировать ростовые и биосинтетические процессы в них (Кулаева, 1973, 1982; Дефлинг, 1985; Муромцев и др., 1987 и др.). Метаболизация притекающих соединений должна интенсифицировать разгрузку ассимилятов из окончаний ситовидных элементов и увеличивать концентрационный градиент вдоль флоэмы (Wardlaw, 1968, 1999), усиливая передвижение веществ к акцепторам по Аур под влиянием разности давления в проводящих путях, что следует из современных воззрений о движущих силах флоэмного транспорта, основанных на осмотической гипотезе массового тока ассимилятов Мюнха (Mtinch, 1930).

Однако не исключено, что цитокинины влияют непосредственно на транспортные процессы. Тогда активация метаболизма растительных тканей может быть вызвана; усиленным • притоком к акцепторам питательных веществ, являющихся субстратами для биосинтетических реакций;

Предпринятые к настоящему времени попытки разделить транспортные и метаболические ответы на фитогормоны не позволили однозначно решить эту дилемму. Оказалось, что возможна активация цитокининами метаболических процессов без дополнительного притока веществ (Osborne, 1962; Кулаева, Воробьева, 1962, 1964), что позднее было подтверждено во многих экспериментах in vivo и in vitro.-.В то же время, обнаружено изменение транспортных процессов, происходившее вне зависимости от метаболических ответов растительных тканей на цитокинины (Turvey, Patrick, 1979).

Таким образом, существующие в литературе сведения о механизме регуляции транспорта и распределения ассимилятов в растениях, в том числе, с участием цитокининов, неоднозначны. Слабая изученность вопроса, очевидно, связана с исключительной сложностью растения как донорно-акцепторной системы и интегральным характером процессов транспорта и распределения веществ. Поэтому начинать изучение механизма действия цитокининов на транспортные процессы целесообразно не на целом растении, состоящем из большого числа доноров и конкурирующих за ассими-ляты акцепторов, а на более простых модельных системах.

Удачной моделью является изолированный лист, преимущество которого по сравнению с листом на растении состоит в том, что он освобожден от множественного контроля со стороны целого растения (Мокроносов, 1981, 1983). Кроме того, отделенные листья лишены притока цитокининов из корней (Кулаева, 1962, 1964) и потому более чувствительны к экзогенному цитокинину. Донором ассимилятов в изолированных листьях является мезофилл, акцепторами - средняя жилка черешок, в которых депонируются оттекающие из мезофилла продукты фотосинтеза (Leonard, 1939; Gunning, Barkley, 1963; Hartt, 1963; Mtiller, Leopold, 1966; Leonard, King, 1968 и др.).

Именно на этой модельной системе была обнаружена аттрагирующая способность цитокининов. К. Мотес, JI. Энгельбрехт и О.Н. Кулаева (Mothes et al., 1959) впервые наблюдали, что кинетин, нанесенный на одну половинку взрослого изолированного листа,тормозит отток подвижных метаболитов из листовой пластинки; в среднюю жилку и черешок и индуцирует их приток из необработанного участка листа в обработанный. Таким образом, было показано, что под влиянием цитокинина в листе формируется новый акцептор, функционирующий параллельно с естественными акцепторами - черешком и средней жилкой.

Феноменологически аттрагирующий эффект цитокининов в изолированных листьях описан достаточно подробно, однако представления о его механизме носят разрозненный и противоречивый характер (Mothes et al., 1959; Mothes, I960,; 1964; Mothes, Engelbrecht, 1961; Mtiller, Leopold, 1966; Nakata, Leopold, 1967; Gersani, Kende, 1982; Kuraishi, Ishikawa, 1977; Penot et al., 1981; Соколова, Балакшина, 1992; Соколова и др., 2002; Парамонова и др., 2002). Хотя многие авторы считают, что из донорной в акцепторную половинку листа вещества притекают по флоэме, в месте нанесения фитогормона разгружаясь в мезофилл (Mtiller, Leopold; 1966; Penot, 1978; Gersani, Kende, 1982), транспортные пути ассимилятов при этом эффекте изучены недостаточно. Еще менее выяснены конкретные механизмы формирования акцепторной способности тканей зрелого отделенного листа под действием цитокинина.

В целом, оставались неясными и требовали дальнейшего изучения механизмы интеграции функционально различных органов и тканей растения в единую донорно-акцепторную систему и факторы, контролирующие флоэмный транспорт и распределение ассимилятов. Не была определена и роль цитокининов в регуляции этих процессов как в модельных донорно-акцепторных системах (в том числе, изолированном листе), так и в целых растениях. Выяснение этих вопросов важно с теоретической точки зрения и, кроме того, имеет большое значение для прикладных разработок в области растениеводства и биотехнологии для эффективного управления количеством и качеством урожая.

При исследовании этой проблемы мы сосредоточили внимание на; изучении растений с симпластной разгрузкой ассимилятов в акцепторах. Апопластную разгрузку ассимилятов, осуществляющуюся на границе между двумя организмами (растением-хозяином и паразитом, двумя поколениями в семенах), по-видимому, следует рассматривать как перегрузку ассимилятов»из транспортной системы одного > организма в другой (Гамалей, 2002). Ее регуляция, вероятно, осуществляется на уровне транспортных процессов на мембранах.

Целью работы явилось изучение механизмов, контролирующих транспорт и распределение ассимилятов в растениях и интегрирующих фотосинтезирующие, проводящие и потребляющие ткани и органы в единую донорно-акцепторную систему и выяснение роли цитокининов в регуляции этих процессов.

В соответствии с целью были сформулированы следующие задачи:

1. Проанализировать донорно-акцепторные отношения и возможные механизмы их регуляции в норме и при изменении донорно-акцепторного баланса у растений с морфологически различными типами акцепторов.

2. Проследить влияние цитокининов на транспорт и распределение ассимиля-тов в системе целого растения и модельной донорно-акцепторной системе — изолированном листе.

3. Выявить специфику действия цитокининов на функционирование донорных и акцепторных органов; определить роль этих двух типов органов в регуляции транспорта и распределения ассимилятов в системе целого растения в связи с регулятор-ным действием цитокининов.

4. Выяснить механизм аттрагирующего эффекта цитокининов в модельной системе - изолированном листе, изучив следующие возможные причины этого явления:

• Индукция цитокининами структурных перестроек клеток флоэмы, приводящих к изменению направления транспорта веществ между мезофиллом и флоэмой за счет торможения загрузки ассимилятов во флоэму и индукции их разгрузки в мезофилл;

• Влияние цитокининов на работу активной транспортной системы, осуществляющей перенос Сахаров через клеточные мембраны в системе мезофилл - флоэма;

• Активация цитокининами структурных и функциональных изменений клеток мезофилла, приводящих к формированию Ац/р между донорной и акцепторной частями листа.

5. Изучить механизм аттрагирующего эффекта цитокининов в системе целого растения, опираясь на данные, полученные на модельной донорно-акцепторной системе - изолированных листьях.

6. Проследить на примере цитокининов взаимосвязь между сигналами гормональной, осмотической и метаболитной природы при регуляции функционирования растения как донорно-акцепторной системы.

7. Разработать технологию повышения продуктивности сельскохозяйственных растений (на примере картофеля и томатов) с помощью БАП

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Интенсивность, направленность транспорта ассимилятов и их распределение в растении контролируются функциональной активностью как донорных, так и акцепторных органов, причем наиболее эффективно - при одновременном участии этих двух элементов донорно-акцепторной системы.

2. Фактором интеграции различных частей растения в единую донорно-акцепторную систему и движущей силой флоэмного транспорта веществ является градиент давления вдоль транспортного пути, формирующийся вследствие существования Ду/р между производящими и потребляющими ассимиляты органами.

3. Величина Ау/р вдоль транспортного пути, определяющая интенсивность и направленность транспортных потоков фотоассимилятов в растениях, контролируется цитокининами на внутриклеточном уровне путем регуляции ростовых и метаболических процессов в донорных и акцепторных органах.

4. Специфика ответных реакций органов и тканей растения на цитокинин определяется их онтогенетическими особенностями. В производящих ассимиляты органах цитокинин стимулирует процессы, определяющие их донорную, а в органах, потребляющих ассимиляты, - акцепторную функцию.

5. Донорная способность органов и величина осмотического потенциала (ц/р) в начале транспортного пути определяется размером транспортного пула ассимилятов, формирование которого зависит от соотношения процессов, протекающих в клетках мезофилла: углеводной или неуглеводной направленности метаболизма, использования углерода на эпигенетические процессы, отложения в виде запасных соединений или включения в транспортные формы ассимилятов.

1. Акцепторные свойства органов и тканей определяются процессами, повышающими у/р в конце транспортного пути: ростом растяжением и накоплением запасных, в первую очередь, полимерных и/или гидрофобных соединений, которые выходят из транспортного пула клеток.

2. Функционирование акцепторов, утилизирующих притекающие соединения, обеспечивает возможность постоянного притока ассимилятов из донорных в акцепторные органы в онтогенезе.

Работа выполнена: на кафедре агрономии Калининградского государственного технического университета. В ней представлены результаты 18-летних (1987-2004 г.г.) исследований.

За постоянное внимание к работе и ценные советы искренне благодарю научного консультанта, действительного члена РАН, доктора биологических наук, профессора А.Т. Мокроносова (ИФР РАН). От души благодарю В.П. Холодову, С.В. Соколову, О.НКулаеву, Вл.В. Кузнецова,' В.А. Хохлову (ИФР РАН), Ю.В; Гамалея, М.В. Пахомову, НС. Мамушину, Н.С. Филиппову (БИН РАН), Е В. Белынскую, В.В. Кондратьеву (ГБС РАН), В.В. Полевого, Е.И. Шарову (БИНИИ С.-ПбГУ), а также других моих коллег за ценные теоретические и методические рекомендации, данные при выполнении и обсуждении отдельных этапов работы. Я благодарна также О.Н. Семихатовой (БИН РАН), Е.Б. Кириченко (ГБС РАН), В.П; Холодовой, О.Н. Кулае-вой, Ю.Г. Молотковскому (ИФР РАН), В.В. Полевому (БИНИИ С.-ПбГУ) за любезно предоставленную возможность использовать экспериментальную базу возглавляемых ими лабораторий для проведения отдельных этапов исследований.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Роньжина, Елена Степановна

ВЫВОДЫ

1. Впервые установлено, что апрагирующий эффект цитокининов в изолированных листьях, сопровождающийся изменением направления флоэмного транспорта веществ на противоположное, существует в донорных органах как с закрытой, так и с открытой терминальной флоэмой, что свидетельствует об обратимости не только апопластного, но и симпластного транспорта ассимилятов.

2; Причиной аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях являются структурные и функциональные изменения в клетках мезофилла.

Торможение цитокининами оттока веществ из листовой пластинки вызвано уменьшением уровня транспортных форм углерода вследствие включения подвижных соединений в полимеры - крахмал, структурные полисахариды и белки, что препятствует их поступлению во флоэму.

Индукция цитокининами притока веществ вызвана формированием градиента осмотического потенциала между донорным и акцепторным участками листа. Оно обусловлено стимуляцией процессов роста растяжением за счет повышения эластичности клеточной стенки, поступления воды в клетку и синтеза биополимеров, приводящих к уменьшению числа молекул органических веществ в единице объема клетки, и тем самым, - к повышению осмотического потенциала в акцепторном участке листа.

3. Причиной аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях не является прямое влияние этих фитогормонов на структуру флоэмы или функционирование мембранных механизмов переноса Сахаров в системе клеток мезофилл - флоэма.

4. В системе целого растения интенсивность, направленность транспорта ассимилятов и их распределение между органами и тканями контролируются функциональной активностью как донорных, так и акцепторных органов, причем наиболее эффективно - при одновременном участии этих двух элементов донорно-акцепторной системы.

5. Фактором интеграции различных частей растения в единую донорно-акцепторную систему и движущей силой флоэмного транспорта веществ является градиент давления вдоль транспортного пути, формирующийся благодаря существованию градиента осмотического потенциала между донорными и акцепторными органами.

6. Величина градиента осмотического потенциала между производящими и потребляющими ассимиляты органами определятся осмотическими свойствами их клеток и контролируется цитокининами на внутриклеточном уровне путем регуляции ростовых и метаболических процессов.

7. Специфика ответных реакций функционально различных органов и тканей растения на цитокинин определяется их онтогенетическими особенностями. Во взрослых листьях цитокинины стимулируют процессы, определяющие их донорную, а в потребляющих ассимиляты органах, - акцепторную функцию.

8. Донорная способность органов, связанная с формированием низкого осмотического потенциала в начале транспортного пути, определяется размером транспортного пула ассимилятов, формирование которого зависит от соотношения процессов, протекающих в клетках мезофилла: углеводной и неуглеводной направленности метаболизма, использования углерода на эпигенетические процессы, отложения в виде запасных соединений или включения в транспортные формы ассимилятов.

9. Акцепторные свойства паренхимных запасающих органов и тканей определяются процессами, повышающими осмотический потенциал в конце транспортного пути: ростом растяжением и накоплением запасных, в первую очередь, полимерных и/или гидрофобных соединений, которые выходят из транспортного пула клеток. Атграгирующий эффект цитокининов заключается в стимуляции этих процессов.

10. Функционирование акцепторов, обеспечивающее отвод из транспортного русла и постоянную утилизацию притекающих веществ, поддерживает поток ассимилятов по флоэме из донорных в акцепторные органы в онтогенезе.

11. Цитокинины являются высокоэффективными регуляторами продуктивности сельскохозяйственных растений. На основании полученных данных предложена экономически эффективная технология применения БАП, способствующая повышению урожайности картофеля на 29, томатов - на 55%. т

374

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное в работе изучение механизмов регуляции донорно-акцепторных связей в растениях на разных уровнях организации - от субклеточного до организ-менного - позволило дать общую картину регуляции транспорта и распределения ассимилятов и интеграции функционально различных органов и тканей в единую до-норно-акцепторную систему. Наши исследования показали, что эти процессы контролируются как на донорном (во взрослых листьях), так и на акцепторном (в потребляющих и запасающих органах) концах транспортного пути. При этом роль цитокининов заключается в активации естественной функциональной. активности и донор-ных, и акцепторных органов.

В листьях эти фитогормоны увеличивают скорость фотосинтетической фиксации СО2, снижают синтез крахмала как запасного вещества и увеличивают долю транспортных форм углерода среди продуктов фотосинтеза. Тем самым они повышают молярную концентрацию фотоассимилятов в доноре, создают более низкий yjp, 6 вызывая осмотическии приток воды и увеличивая давление донорной части проводящей системы.

На этапе дальнего транспорта перемещение ассимилятов во флоэме поддерживается их. латеральным перераспределением между проводящими и паренхимными клетками флоэмы и дополнительными механизмами.

Усиление цитокининами функциональной активности запасающих акцепторных тканей, стимуляция роста растяжением и утилизация притекающих веществ путем их включения в нерастворимые, в первую очередь, полимерные соединения (крахмал, структурные полисахариды и белки) способствуют отводу ассимилятов из флоэмы, повышают ц/р в акцепторах, вызывают понижение давления в конце транспортного русла, тем самым стимулируя приток ассимилятов в потребляющие органы и ткани. Кроме того, метаболические и ростовые процессы в акцепторах обеспечивают отвод притекающих соединений из флоэмы, их утилизацию и благодаря этому создают возможность постоянного транспорта веществ от доноров к акцепторам в онтогенезе.

Совокупность описанных процессов, в итоге приводящих к понижению цр в начале и повышению у/р в конце транспортного пути, создает более значительный Ау/Р и градиент давления между донорными и акцепторными органами, величина которого регулирует интенсивность, направленность транспортных потоков фотоассимилятов и их распределение в растениях. Эти же процессы обеспечивают интеграцию его функционально различных частей в единую донорно-акцепторную систему.

Научная новизна работы состоит в том, что в ней впервые проведено комплексное изучение функционирования донорных и акцепторных органов и процессов, контролирующих в онтогенезе транспорт и распределение ассимилятов в растениях, в том числе с участием цитокининов. На основании полученных данных разработана концепция, в которой впервые синтез, транспорт, распределение, потребление и запасание веществ интегрированы в единую систему взаимосвязанных- процессов. Эта концепция также учитывает и описывает причинно-следственные связи между сигналами метаболитной, осмотической и гормональной природы при интеграции различных органов и тканей в единую донорно-акцепторную систему. Показано, что согласованное функционирование органов и тканей растения осуществляется благодаря формированию Ау/р между ними. Его величина определяется ростовыми и метаболическими процессами, протекающими как на донорном, так и на акцепторном концах транспортного пути. Это позволило снять разногласия о роли различных элементов донорно-акцепторной системы в регуляции транспортных процессов в растениях.

Выяснено, что донорная функция органов и тканей зависит от наличия транспортного пула ассимилятов, определяющего величину ур на донорном конце флоэмы. Размер транспортного пула зависит от углеводной или неуглеводной направленности метаболизма клеток мезофилла, использования углерода на эпигенетические процессы, протекающие в самом листе, отложения в клетках мезофилла в виде запасных соединений или включением в транспортные формы ассимилятов.

Акцепторные свойства органов и тканей определяются процессами, повышающими у/р в конце транспортного пути: ростом растяжением и выводом ассимилятов из транспортного русла, в первую очередь, за счет накопления полимерных и/или гидрофобных соединений. Выявлена функциональная роль акцепторов, заключающаяся в обеспечении возможности транспорта веществ в течение длительного времени благодаря постоянной утилизации притекающих соединений.

Впервые проведено комплексное изучение действия цитокининов на функциональную активность донорных и акцепторных органов; в системе целого растения. Выяснено, что эти фитогормоны активируют специфическую генетически детерминированную функциональную активность органов и тканей растения, что определяет особенности их ответных реакций на цитокинин, увеличивает Ai//p между ними и тем самым влияет на интенсивность и направленность флоэмного транспорта веществ.

Для выяснения механизма аттрагирующего эффекта цитокининов использована; модельная донорно-акцепторная система — изолированные листья с терминальной флоэмой открытого и закрытого типов, локально обработанные цитокинином. С ее помощью показано, что мишенью действия; цитокининов является не флоэма или мембранные механизмы межклеточного переноса веществ, а паренхимные клетки акцепторных зон (в листьях - клетки мезофилла обработанной цитокинином половинки листа). Впервые изученное действие цитокинина на листья с открытой терминальной флоэмой позволило показать принципиальную обратимость симпластного транспорта ассимилятов.

Выяснено, что аттрагирующее действие цитокининов как в модельной донорно-акцепторной системе - изолированных листьях, так и в системе целого растения, заключается в стимуляции процессов роста растяжением и накопления запасных полимерных и/или гидрофобных соединений. Определены наиболее значимые этапы регуляции цитокинин-зависимого роста растяжением; показано, что он связан со снижением рН апопласта, через серию событий приводящим к повышению растяжимости клеточной стенки.

Теоретическая и практическая значимость работы определяется тем, что в ней выявлены ключевые физиологические процессы и определены механизмы, контролирующие транспорт и распределение ассимилятов в системе целого растения, установлена роль цитокининов в регуляции этих процессов, изучено действие этих фитогор-монов на функциональную активность донорных и акцепторных органов. Важное теоретическое значение имеют разработанная схема формирования аттрагирующего эффекта цитокининов в изолированных листьях и схема взаимосвязи между гормональными, метаболитными и осмотическими сигналами при регуляции цитокининами транспорта и распределения ассимилятов в системе целого растения. Разработанная и описанная экспериментальная модель - изолированные листья с открытым и закрытым типами терминальной флоэмы - может быть использована для изучения физиологических эффектов и механизмов действия цитокининов в растительных тканях. Предложена > классификация акцепторов, учитывающая как особенности их метаболизма, так и способы разгрузки ассимилятов. Теоретические положения и экспериментальные данные диссертации создают основу для целенаправленного управления количеством и качеством урожая. Разработана технология применения цитокининов для повышения урожайности картофеля и томатов. Результаты работы используются в учебном процессе в Калининградском государственном техническом университете, в Екатеринбургском, Нижегородском, Орловском, Томском госуниверситетах в общих лекционных курсах «Физиология растений», «Экологическая физиология растений» и ряде спецкурсов.

371

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Роньжина, Елена Степановна, Москва

1. И Аверина Н.Г., Шлык А.А. О влиянии кинетина на накопление и активность прото-хлорофиллида в этиолированных и постэтиолированных листьях ячменя // Физи-ол. растений. 1972. - Т. 19. - Вып. 3. - С. 487 - 495.

2. Ананьев Е., Клячко НШ., Кулаева О.Н. Быстрая ответная реакция белоксинтези-рующего аппарата изолированных семядолей тыквы на действие фитогормонов // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1978.- Т. 243. - № 5. - С. 1334 - 1336.

3. Ананьев Е., Шакирова Ф.М., Клячко H.JL, Кулаева О.Н. Влияние цитокинина на образование полисом из предшествующих мРНК и рибосом // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1980.- Т. 255. - № 2. - С. 508 - 510.

4. Афанасьева М.В. Передвижение питательных веществ в растениях. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1955. - 224 с.

5. Барьетас П. К. Накопление сухой массы при искусственном уменьшении листовой площади у хлопчатника // Докл. АН УзССР. 1961. - № 4. - С. 50 - 53.

6. Беликов И: Ф. Основные закономерности транспорта и распределения ассимилятов у сельскохозяйственных растений // Труды Биол.-почв, ин-та (Владивосток). — 1973.-Т. 20.-С. 154 160;

7. Белозерский А.Н., Проскуряков Н.И. Практическое руководство по биохимии растений. М.: Сов. наука, 1951.-388 с:

8. Белоногов Д.Е., Калининская Т.А., Лихолат Т.В; Влияние гиббереллина и 6-бензиламинопурина на урожай семян и сухой массы клевера лугового // Физиол. растений. 1983. - Т. 30, вып. 4. - С. 724 - 730.

9. Белынская Е.В., Кондратьева В.В. Соотношение природных цитокининов и абсци-зовой кислоты в процессе образования генеративных органов у жимолости голубой // Бюлл. Гл. ботанич. сада. 1989. - № 1. - С. 50 - 56.

10. Ю.Белынская Е.В., Кондратьева В.В., Кириченко Е.Б. Изменение баланса цитокининов и содержание эфирного масла в онтогенезе мяты // Изв. РАН. Сер. биол-1994. № 5. - С- 802 - 808.

11. П.Белынская Е.В., Кондратьева В.В., Кириченко Е.Б. Цитокинины и абсцизовая кислота в годичном цикле корневищ мяты // Изв. РАН. Сер. биол.-1997. № 3. — С. 274-279.

12. Бессонова В.П., Лыженко И.И., Михайлов О.Ф., Кулаева О.Н. Влияние кинетина на рост проростков гороха и содержание пигментов при избытке цинка в питательном растворе// Физиол. растений.- 1985,- Т. 32, вып. 1. С. 153 - 159.

13. Боннемэн Ж.Л., Дельро С., Дешпегель Ж.П. Механизмы аккумуляции веществ флоэмными окончаниями// Физиол. растений.- 1984—Т.31, вып. 2.-С.367 -383.

14. Борзенкова Р.А. Динамика эндогенных фитогормонов и их роль в формировании и функционировании фотосинтетического аппарата картофеля // Физиология картофеля: Сб. научн. тр. / УрГУ. Отв. ред. Мокроносов А.Т. Свердловск: Изд-во Ур-ГУ, 1985.-С. 16-35.

15. Борзенкова Р.А., Зорина М.В. Влияние кинетина и абсцизовой кислоты на фотосинтез, отток и распределение 14С-ассимилятов у растений картофеля // Физиол. растений. 1990. - Т. 37, вып. 3. - С. 546 - 554.

16. Борзенкова Р.А., Лунева Е.О., Зорина М.В. Гормональная регуляция донорно-акцепторных отношений в растении // Фотосинтез и продукционный процесс / Подред. Мокроносова А.Т. и др. Свердловск: Изд-во УрГУ, 1988. - С. 125 - 137.

17. Борзенкова Р.А., Собянина Е.А., Поздеева А.А., Яшков М.Ю. Действие фитогормонов на крахмалсинтезирующую способность в процессе роста клубней картофеля // Физиол. растений. 1998. - Т. 45. - № 4. - С. 557 - 566.

18. Бродский В.Я. Прямое деление ядра // Успехи соврем.биол. 1964. - Вып.58.- 367с.

19. Бурханова Э.А., Селиванкина С.Ю., Куроедов В.А. Влияние цитокинина на синтез РНК и на активность связанной с хроматином РНК-полимеразы в срезанных листьях ячменя // Физиол. растений. 1978. - Т. 25, вып. 6. - С. 1199 - 1205.

20. Бурханова Э.А., Федина А.Б., Баскаков Ю.А., Кулаева О.Н. Сравнительное изучение действия 6-бензиламинопурина, тидиазурона и картолина на рост интактных пророс-тковтыквы//Физиол. растений. 1984. - Т. 31, вып. 1. - С.13'- 19.

21. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.: Наука, 1964. - 272 с.23; Быков О.Д; К анализу кинетики газообмена растений на свету (теория вопроса) // Физиол. растений. 1962. - Т. 9, вып. 3. - С. 325 - 333.

22. Быков О.Д: К анализу кинетики газообмена растений на свету (экспериментальная часть) // Физиол. растений. 1962. - Т. 9, вып. 4. - С. 408 - 414.

23. Быков О.Д. Об интенсивности темнового дыхания при фотосинтезе // Бюлл. ВИР. 1969.-Вып. 14.-С. 19-24.

24. Быков О.Д., Сахаров Б.В. Фотосинтетический С02-газообмен листьев пшеницы: анализ эффекта Варбурга // Физиол.растений.-1980 -Т. 27, вып.6. С.1125 - 1134.

25. Вилленбрик И. Транспорт ассимилятов во флоэме: регуляция и механизм // Физиол. растений. 2002. - Т. 49. - № 1. - С. 13 - 21.

26. Вильдфлуш И.Р., Кукреш С.П., Ионас В.А. и др. Агрохимия. Мн.: Ураджай, 1995.-480 с.

27. Воронин П.Ю., Манжулин А.В., Хейн Х.Я Влияние низкой интенсивности освещения на структурно-функциональные признаки листа у кукурузы (Zea mays L.) I I Физиол. растений. 1993. - Т. 40. - № 3. - С. 379 - 383.

28. Воронкова Н.М. Транспорт и распределение ассимилятов у луков // Дис. . канд. биол. наук: 03.00.12. М.: ИФР АН СССР, 1980. - 19 с.

29. Гавриленко В.Ф., Ладыгина М. Е., Хандобина Л. М. Большой практикум по физиологии растений. М.: Высшая школа, 1975. - 392 с.

30. Гамалей Ю.В. Надклеточная организация растений // Физиол. растений. — 1997. -Т.44.-№6.-С. 819-846.

31. Гамалей Ю.В. Отток фотоассимилятов в природных и экспериментальных условиях // Физиол. растений. 1996. - Т. 43. - №. 3. - С. 328 - 343.

32. Гамалей Ю.В. Происхождение и локализация органелл растений // Физиол. растений. 1997.-Т. 44.-№.1.-С. 115-137.

33. Гамалей Ю.В. Транспорт и распределение ассимилятов в растении. Подходы, методы и направления исследований // Физиол.растений.-2002.-Т.49.-№ 1.-С.22-39.

34. Гамалей Ю.В. Флоэма листа. Л.: Наука, 1990. - 144 с.

35. Гамалей Ю.В. Фотосинтез и экспорт фотосинтатов. Развитие транспортной системы и донорно-акцепторных отношений // Физиол. растений. 1998. - Т. 45. - № 5. -С. 614- 631.

36. Гамалей Ю.В. Эндоплазматическая сеть растений. Происхождение, структура и функции (LIII Тимирязевское чтение). М.: Наука, - 1994. - 80 с.

37. Гамалей Ю.В., Пахомова М.В. Динамика транспорта и запасания углеводов в листьях растений с симпластной и апопластной загрузкой в норме и при экспериментальных воздействиях // Физиол. растений. — 2000. — Т.47. №1. - С. 120 — 141.

38. Гамалей Ю.В., Пахомова М.В: Мелкие жилки листа двудольных. 1. Структура и основы типологии // Ботанич. журн. 1983. - Т. 68. - № 3. - С. 287 - 301.

39. Гамалей Ю.В., Пахомова М.В. Структура клеток-спутников флоэмы листа. Результаты объемной реконструкции клеток по серийным срезам // Цитология. 1989. -Т. 23, вып. 5.-С. 934- 998:

40. Гендельс Т.В. Приготовление препаратов просветленных листьев для изучения их жилкования // Ботанич. журн. 1987. - Т. 72. - № 3. - С. 393 - 396.

41. Гербицид избирательного действия зенкор. Проспект фирмы «Байер» (ФРГ). М.: 1987.-4 с.

42. Головко Т.К. Дыхание растений (физиологические аспекты). — СПб.: Наука, 1999. -204 с.

43. Горышина Т.К. Ранневесенние эфемероиды лесостепных дубрав. JL: Изд-во Лен. ун-та, 1969.-232 с.

44. Горышина Т.К. Экология травянистых растений лесостепной дубравы. Л.: Изд-во Лен. ун-та, 1975. - 127 с.

45. Гудвин Т., Мерсер Э. Фитогормоны и родственные соединения // Введение в биохимию растений. М.: Мир, 1987. - С. 203 - 268.

46. Гуляев Б.И., Ильящук Е.Н. Влияние дефолиации на газобмен, площадь листьев и продуктивность растений подсолнечника // Докл. АНУССР.-1979.-№6.-С.473-477.

47. Гунар И.И:, Синюхин А.М; Распространяющаяся волна возбуждения у высших растений // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1962. - Т. 142. - С. 954 - 956.

48. Дерфлинг К. Гормоны растений: Системный подход. М.: Мир, 1985. - 304 с.

49. Джеймс В. Дыхание растений. М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1956. - 440 с.

50. Дзагнидзе Ш.Ш., Долидзе МД., Чанишвили Ш.Ш. Влияние регуляторов роста на передвижение фотоассимилятов в побеге виноградной лозы // Физиол. растений. -1986. Т. 33, вып. 2.- С. 289 - 295.

51. Дмитриева Н.Н., Липский А.Х. О роли ауксинов и кинетина при индукции делений в серцевинной паренхиме стебля табака // Физиол. растений. 1973. — Т. 20, вып. 2.-С. 339-346.

52. Дубинина И.М., Кудрявцева Л.Е., Бураханова Е.А. Изоляция и характеристика протопластов и вакуолей мезофилла листьев сахарной свеклы // Физиол. растений. 1989. - Т. 36, вып. 4. - С. 487 - 495.

53. Дубинина И.М., Кудрявцева Л.Ф., Бураханова Е.А. Распределение 14С в ассимилятах листа и в изолированных протопластах мезофилла у Beta vulgaris L. // Физиол. растений. 1991. - Т. 38, вып. 5.- С. 855 - 863.

54. Жолкевич В.Н., Гусев Н.А., Капля А.В. и др. Водный обмен растений / Под ред. Тарчевского И.А., Жолкевича В.Н. М.: Наука, 1989. — 265 с.

55. Загоскина Н.В., Запрометов М.Н; Влияние кинетина на образование фенольных соединений в длительной пассируемой культуре ткани чайного растения // Физиол. и биохимия культ, растений. 1983. - Т. 15. - С. 250 - 253.

56. Заленский О.В., Семихатова О.А., Вознесенский В.Л. Методы применения радиоактивного изотопа ,4С для изучения фотосинтеза. М. -Л.: Изд-во АН СССР, 1955.-88 с.

57. Иванов В.Б. Влияние хлорамфеникола на образование утолщений на корнях, вызванных а-нафтилуксусной кислотой (НУК), 6-бензиламинопурином и колхицином // Докл. АН СССР. 1966. - Т. 167. - № 5. - С. 1184.

58. Иванова Н.А. Влияние укоренения на фотосинтетический метаболизм изолированных листьев томатов // Учен. зап. Урал, ун-та: Свердловск. 1970. - № 113. - С. 114 - 120.

59. Ильящук Е.М., Гуляев Б.И., Лихолат Д.А. Взаимоотношение «источник—сток» у дефлорированных и плодоносящих растений подсолнечника // Физиология и биохимия культ, растений. 1981. - Т. 13. - № 6. - С. 613 - 620.

60. Карпов Е.А., Белозерова О.Л. Влияние регуляторов роста на фотосинтез и отток С|4-продуктов из листьев растений сои в репродуктивный период // Физиол. растений. 1985. - Т. 32, вып. 3. - С. 539 - 544.

61. Карпов Е.В. Морфофизиологические особенности сортов и гибридов картофеля, различающихся по скороспелости // Фотосинтез и продукционный процесс / Под ред. Мокроносова А.Т. и др. Свердловск: Изд-во УрГУ. - 1988. - С. 104-117.

62. Катунский В. М. О зависимости фотопериодической реакции растений от спектрального состава света // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1937. - Т. 15. - № 8. - С. 501 -505.

63. Кефели В. И. Рост растений и фотоморфогенез // Физиол. растений. 1987. - Т. 34.-№ 4.- С. 685-697.

64. Кефели В.И., Коф Э.М., Власов П.В., Кислин Е.Н. Природный ингибитор роста-абсцизовая кислота. М.: Наука, 1989. - 184 с.

65. Кефели В.И., Прусакова Л.Д. Химические регуляторы растений / Новое в жизни, науке, технике. Сер. биология. - № 7. - М.: Знание, 1985. - 64 с.

66. Кириченко Е.Б., Чернядьев И.И., Воронкова Т.В., Тайбуллина К.К., Доман Н.Г.

67. Активность фиксации углекислоты пыльниками и листьями хлебных злаков // Докл. АНСССР. 1986. - Т. 288. - № 4. — С. 1021 - 1024.

68. Клячко Н.Л., Кулаева О.Н. О периодичности белкового синтеза в листьях махорки //Докл. АН СССР. Сер. биол. 1965. - Т. 164. - № 2.- С. 216 - 218.

69. Клячко Н.Л., Партье В., Чаянова С.С., Володарский А.Д., Кулаева О.Н. Рибулезо-бифосфаткарбоксилаза в изолированных семядолях тыквы. Влияние цитокинина, света, антибиотиков // Физиол. растений. 1981. - Т. 28, вып. 4. - С. 811 - 817.

70. Кукина И.М., Микулович Т.П., Кулаева О.Н. Влияние фузикокцина на синтез РНК в изолированных семядолях тыквы // Доклады АН СССР. 1983. - Т. 272. - № 3. -С. 751 -754.

71. Кулаева О.Н. Влияние корней на обмен веществ листьев в связи с проблемой действия на лист кинетина // Физиол. растений. 1962. - Т. 9, вып. 2. - С. 229 - 239.

72. Кулаева О.Н; Гормональная регуляция физиологических процессов на уровне синтеза РНК и белка (XLI Тимирязевское чтение). М.: Наука, - 1982. - 82 с.

73. Кулаева О.Н. К вопросу о влиянии корневой системы на обмен веществ листа // Роль минеральных элементов в обмене веществ и продуктивности растений / Под ред. Журбицкого З.И. М.: Наука, 1964. - С. 224 - 229.

74. Кулаева О.Н. Цитокинины, их структура и функции. М.: Наука, 1973. - 263 с.

75. Кулаева О.Н., Воробьева И.П. К вопросу о влиянии кинетина на белково — нуклеиновый обмен листьев // Биология нуклеинового обмена у растений. М.: Наука, -1964.- 165 с.

76. Кулаева О.Н., Воробьева И.П. К вопросу о механизме действия кинетина на синтез белка// Физиол. растений. 1962. - Т. 9, вып. 1. - С. 106 - 108.

77. Кулаева О.Н., Клячко H.JI. О влиянии кининов на синтез белка в листьях // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1965. - Т. 164. - № 2. - С. 458 - 461.

78. Кулаева О.Н., Муромцев Г.С., Шакирова Ф.М., Хохлова В.А., Фофанова Т.А. Сравнительное изучение действия цитокинина и фузикокцина на рост изолированных семядолей тыквы // Физиол. растений. 1982. - Т. 29, вып. 5. - С. 886 - 894.

79. Кулаева О.Н., Романко Е.Г. Действие 6-бензиламинопурина на изолированные хлоропласты // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1968. - Т. 170. - № 2. - С. 464 - 468.

80. Кулаева О.Н., Свешникова И.Н., Клячко Н.Л., Попова Э.А. О восстановлении бел-ково-нуклеинового обмена срезанных листьев в процессе их позеленения под действием кинетина // Докл. АН СССР. С ер. биол. 1963. - Т. 152. - № 12. -С. 1475 -1479.

81. Кулаева О.Н., Хохлова В.А., Фофанова Т.А. Цитокинины и абсцизовая кислота в регуляции роста и процессов внутриклеточной дифференцировки // Гормональная регуляция онтогенеза растений / Под ред. Чайлахяна М.Х. М.: Наука, 1984. - С. 71- 86.

82. Кулаева О.Н., Цибуля Л.В. Действие цитокинина на рост высечек из этиолированных листьев фасоли // Физиол. растений. 1974. - Т. 21, вып. 4. - С. 709 - 713.

83. Куперман Ф.М. МорфоФизиол. растений. Морфофизиологический анализ этапов органогенеза различных жизненных форм покрытосеменных растений. М.: Высшая школа, 1984. - 240 с.

84. Курсанов А.Л. Взаимосвязь физиологических процессов в растении (XX Тимирязевское чтение). М.: Изд-во АН СССР, 1961. - 44 с.

85. Курсанов А.Л. Транспорт ассимилятов в растении. М.: Наука, 1976. - 646 с.

86. Курсанов А.Л. Эндогенная регуляция транспорта ассимилятов и донор-акцепторные отношения у растений // Передвижение ассимилятов в растениях и проблема сахаронакопления / Под ред. Печенова В.А. Фрунзе, Илим, 1986. - С. 110- 135.

87. Курсанов A.JI. Эндогенная регуляция транспорта ассимилятов и донорно-акцепторные отношения у растений // Физиол. растений. 1984. - Т. 31, вып. 3. - С. 579 - 595.

88. Курсанов А.Л., Бровченко М.И. Свободное пространство как промежуточная зона между фотосинтезирующими и проводящими клетками листовой пластинки // Физиол. растений. 1969. - Т. 16, вып. 6,- С. 965 - 972.

89. Курсанов А.Л., Кулаева О.Н., Коновалов Ю.Б. Действие кининов на созревающие и прорастающие семена // Revue roumain de biochimie. 1966 a. - Т. 3. - С. 81.

90. Курсанов А.Л., Кулаева О.Н., Коновалов Ю.Б. О возможности использования кининов для активации созревания и прорастания семян // Агрохимия. 1966 б. - Т. 4.-С. 107.

91. Курсанов А.Л:, Кулаева О.Н., Микулович Т.П. Взаимодействие фитогормонов в их влиянии на рост изолированных семядолей тыквы // Физиол. растений. 1969. - Т. 16, вып. 4.-С. 680-686.

92. Курсанов А.Л., Павлинова О .А. Сахаронакопление как функция ростовых процессов в корне сахарной свеклы // Физиол. растений. 1967.-Т.14, вып. 1.-С.21-28.

93. Леопольд А. Рост и развитие растений. М.: Мир, 1968. - 496 с.

94. Лобов В.П., Бондарь П.И., Сакало В.Д. Амилопласты. Киев: Наукова думка, 1982. - 135 с.

95. Любименко В.Н. Итоги и перспективы 150-летнего изучения фотосинтеза (1928) // Избранные труды. Киев, 1963.-Т. 1.-С. 294-319.

96. Макеев А.В., Кренделева Т.Е., Мокроносов А.Т. Фотосинтез и абсцизовая кислота // Физиол. растений. 1992. - Т. 39, № 1. - С. 183 - 195.

97. Мамулашвили Г.Г., Красавина М.С., Лялин О.О. О роли различных тканей стебля в передаче возбуждения // Физиол. растений.-1973.-Т.20,вып.4.-С.442—450.

98. Мамушина Н.С., Зубкова Е.К., Иванова Т.И. и др. Особенности функционирования основных этапов темнового дыхания ни свету у ранне-весеннего эфемероида Ficaria verna Huds // Физиол. растений. 1991. - Т. 38, вып. 3. - С. 474 — 484.

99. Мамушина Н.С., Филиппова Л.А., Зубкова Е.К. О функционировании гликолиза и окислительного пентозофосфатного цикла в ассимилирующих клетках // Взаимосвязь фотосинтеза и дыхания / Под ред. Вознесенского В.Л. Томск: Изд-воТГУ, 1988. -С. 5- 18.

100. Маркаров А.М. Метод ввода растворов физиологически активных веществ в стебли картофеля. Сыктывкар, 1986 в. - 15 с.

101. Маркаров A.M. Морфофизиология подземных побегов травянистых многолетних растений// Автореф. дисс. . д-ра биол. наук: 03.00.12. -СПб:ВИР,1996.—47 с.

102. Маркаров А.М., Головко Т.К., Табаленкова Г.Н. Морфофизиология клубнеоб-разующих растений. СПб: Наука, 2001. - 208 с.

103. Матвиенко И.И. Влияние различной температуры и интенсивности света на транспорт ассимилятов в растениях яровой пшеницы // Бюлл. ВНИИ растениеводства. 1982.-Т. 118. - С. 21 -22.

104. Медведев С.С. Физиологические основы полярности растений. С.-Петербург:1. Кольна, 1996. 160 с.

105. Мельников Н.Н. Пестициды. Химия, технология и применение. М.: Химия, 1987. - 712 с.

106. Мельников Н.Н., Новожилов К.В., Пылова Т.Н. Химические средства защиты растений. -М.: Химия, 1980.-280 с.

107. Методы изучения мембран растительных клеток / Под ред. Полевого В .В., Максимовой Г.Б., Синютиной Н.Ф.- JL: Изд-во Ленингр. ун-та, 1986. 192 с.

108. ИЗ. Мещеряков А.Б., Лукьянова О.А., Холодова В.П; Особенности водного обмена запасающей паренхимы корня сахарной свеклы Beta vulgaris L. в связи с сахарона-коплением // Физиол: растений. 1992. - Т. 39. - Вып. 6. - С. 1116 -1125.

109. Микулович Т.П., Хохлова В:А., Кулаева О.Н., Свешникова И.Н. Влияние 6-бензиламинопурина на изолированные семядоли тыквы // Физиол. растений. -1971L Т. 18, вып. 1. - С. 98 - 106.

110. Мокроносов А. Т., Рафес П. М. Реакция фотосинтетического аппарата на повреждение листогрызущими насекомыми // Проблемы онкологии и тератологии растений. Л.: Наука, 1975. - С. 173 - 178.

111. Мокроносов А.Т. Взаимосвязь фотосинтеза и функций роста // Фотосинтез и продукционный процесс / Под ред. Ничипоровича А.А.-М.:Наука,1988.-С.109-121.

112. Мокроносов А.Т. Донорно-акцепторные отношения в онтогенезе растений // Физиология фотосинтеза/Под ред. Ничипоровича А.А.-М.:Наука,1982.-С.235-250.

113. Мокроносов А.Т. Интеграция функций роста и фотосинтеза// Физиол. растений. 1983 а. - Т. 30, вып. 5. - С. 868 - 880.

114. Мокроносов А.Т. Онтогенетический аспект фотосинтеза.-М.:Наука,1981.-194 с.

115. Мокроносов А.Т. Фотосинтетическая функция в системе целого растения // Теоретические основы фотосинтетической продуктивности. М.: Наука, 1972. - С.355.362.

116. Мокроносов А.Т. Фотосинтетическая функция и целостность растительного организма (XLII Тимирязевское чтение). М.: Наука, 1983 б. - 42 с.

117. Мокроносов А.Т. Эндогенная регуляция фотосинтеза в целом растении // Физиол. растений. 1978. - Т. 25, вып. 5. - С. 938 - 951.

118. Мокроносов А.Т., Борзенкова Р.А. Методика количественной оценки структуры и функциональной активности фотосинтезирующих тканей и органов // Тр. по прикл. ботан. генет. селекц. 1978. - Т. 61, вып. 3. - С. 119 - 133.

119. Мокроносов А.Т., Гавриленко В.Ф. Фотосинтез. Физиолого экологические и биохимические аспекты. — М.: Изд-во МГУ, 1992. - 320 с.

120. Мокроносов А.Т., Иванова Н.А. Особенности фотосинтетической функции при частичной дефолиации растений // Физиол. растений. 1971. - Т. 18^ вып. 4. - С. 668 - 676.

121. Муромцев Г.С., Чкаников Д.И., Кулаева О.Н., Гамбург К.З. Основы химической регуляции роста и продуктивности растений М.: Агропромиздат, 1987.-384с.

122. Недялков Н., Баров В. Влияние степени повреждения симулятивным градом на некоторые физиологические показатели озимой пшеницы, выращиваемой на различных питательных фонах // Болг. Физиол. растений. 1974. - Т. 3. - С. 439 - 473.

123. Ничипорович А.А. Фотосинтез и теория получения высоких урожаев (XV Тимирязевское чтение). М.: Изд-во АН СССР, 1956. - 93 с.

124. Ничипорович А.А. Фотосинтетическая деятельность растений как основа их продуктивности в биосфере и земледелии // Фотосинтез и продукционный процесс / Под ред. Ничипоровича А.А. М.: Наука, 1988. - С. 5 - 28.

125. Ничипорович А.А., Осипова О.П., Николаева М.К. и др. Активность фотосинтетического аппарата растений и азотный обмен И Физиол. растений. 1967. - Т.14, вып. l.-C. 849- 859.

126. Оканенко А.С. Сахара в свекле // Биология и селекция сахарной свеклы. М.: Колос, 1968.- С. 335 - 340.

127. Опритов В.А., Мичурин С.В. Биоэлектрические потенциалы как звено в механизме сопряжения активного транспорта ассимилятов с метаболизмом // Тр. Биол.-почв. ин-та. Владивосток, 1973. - № 20. - С. 101 — 106.

128. Оруджев Э.М. Участие цитокининов пуринов ого ряда и производных фенил-мочевины в задержке старения листьев ячменя // Автореф. дисс. . канд. биол. наук: 03.00.12.- М.: ИФР РАН, 1992. 20 с.

129. Павар С.С., Клячко II.JI., Романко Е.Г., Циммерман К.-Х., Кулаева О.Н. Активация цитокинином синтеза рибулозобисфосфаткарбоксилазы // Физиол. растений. 1983. - Т. 30, вып. 3. - С. 459 - 466.

130. Парамонова Н.В., Красавина М.С., Соколова С.В. Ультраструктура хлоропластов клеток-спутников и мезофилла в связи с атграгирующим действием цитокининов // Физиол. растений. 2002. - Т. 49. - № 2. - С. 212 - 220.

131. Петинов Н.С., Бровцина В.И. Продуктивность фотосинтеза риса при различной густоте посева // Фотосинтез и вопросы продуктивности растений. М.: Изд-во АН СССР, 1964.-С. 70-74.

132. Полевой В.В. Роль ауксина в системах регуляции у растений (XLIV Тимирязевское чтение). JL: Наука, 1986. - 80 с.

133. Полевой В.В., Саламатова Т.С. Физиология роста и развития растений. JI.:

134. Изд-во Ленингр. ун-та, 1991. 240 с.

135. Положительное решение по патенту МПК 7 A01N43/90 «Способ повышения урожайности картофеля и томатов от 12.04.2004 / КГТУ. Автор Е.С. Роньжина.

136. Приступа Н.А. Накопление поглощаемых из раствора Сахаров в окончаниях проводящего пучка и в клетках мезофилла листа сахарной свеклы // Физиол. растений. 1969. - Т. 16, вып. 4.- С. 692 - 697.

137. Приступа Н.А. О транспортной форме углеводов в растениях тыквы // Физиол. растений. 1959. - Т. 6, вып. 1. - С. 30 - 35.

138. Прогресс в хлопководстве: рекомендации по применению дропп. Проспект АО «Шеринг» (Западный Берлин и ФРГ). М.: 1987. - 4 с.

139. Прокофьев А. А. Некоторые закономерности формирования и созревания плодов и семян // Тр. Биол.- почв, ин-та (Владивосток). 1973. - Т. 20. - С. 228 - 236.

140. Прудникова И.В., Мицук С.М., Тишкевич Т.К. и др. Влияние кинетика на образование и состояние хлорофилловых пигментов на свету и в темноте // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1983. - Т. 268. - № 4.- С. 1016 - 1019.

141. Расулов Б.Х. Фотосинтез и фотодыхание в онтогенезе некоторых видов хлопчатника // Физиол. растений. 1983. - Т. 30, вып. 4. - С. 637 - 645.

142. Расулов Б.Х., Пярник Т.Р., Иванова Х.Н., Кээрберг О.Ф. Элементы С02-газообмена и фотосинтетический метаболизм углерода листьев хлопчатника в условиях заторможенного экспорта ассимилятов // Физиол. растений. 1990. - Т. 37,вып. 1. С. 12- 19.

143. Романко Е.Г., Селиванкина С.Ю., Куроедов В. А. Влияние цитокинина на синтез РНК и на активность связанной с хроматином РНК-полимеразы в срезанныхлистьях ячменя // Физиол. растений. 1978. - Т. 25, вып. 6. - С. 1199 - 1205.

144. Романко Е.Г., Селиванкина С.Ю., Овчаров А.К. Участие цитокинин-связывающих белков из листьев ячменя в активации цитокинином синтеза РНК в изолированных ядрах и хлоропластах // Физиол. растений. 1982. - Т. 29, вып. 3. -С. 524-532.

145. Романко Е.Г., Селиванкина С.Ю., Оманн Э.Э. Влияние цитокининов на активность ряда хлоропластных и цитоплазматических ферментов в этиолированных проростках ржи // Физиол. растений. 1976. - Т. 23, вып. 3. - С. 543 - 549.

146. Романко Е.Г., Хейн Х.Я:, Кулаева О.Н. Влияние цитокинина на физиологическую активность хлоропластов // Биохимия. 1968. - Т. 33, вып. 3. - С. 547 - 552.

147. Романов Г.А. Международный Симпозиум «Ауксины и цитокинины в развитии растений» (Прага, 26-30 июля, 1999) // Физиол. растений. 2000. - Т. 47. - № 1.1. С. 166- 169.

148. Роньжина Е.С. 6-Бензиламинопурин высокоэффективный экологически безопасный регулятор роста растений // Вопросы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. /

149. КГТУ. Отв. ред. Брысозовский И.И. Калининград: КГТУ, 2003а. - С.119 - 127.

150. Роньжина Е.С. Атграгирующий эффект цитокинина в изолированных листьях вызван не структурными перестройками флоэмы // Физиол. растений. — 2002 а. — Т. 49.-№ 1.-С. 87 97.

151. Роньжина Е.С. Атграгирующий эффект цитокинина и фузикокцина в изолированных листьях // Пятая Междун. конф. «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 29 июня 1 июля, 1999). - Тез. докл. - 4.1. - М.:МСХА, 19996. - С.65-66.

152. Роньжина Е.С. Атграгирующий эффект цитокининов и формирование урожая сельскохозяйственных культур. 2. Изучение на модельных системах // Современные проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Брысозовский

153. И.И. Калининград: КГТУ, 2002 в. - С. 141 - 155.

154. Роньжина Е.С. Влияние нарушения оттока углеводов на газообмен растений // IV Всесоюзн. конф. молодых ученых по физиологии растительной клетки (Минск, 15 20 апреля, 1990). - Тез. докл. - М.: ИФР, 1990. - С. 36.

155. Роньжина Е.С. Влияние цитокининов на транспорт |4С-сахарозы в изолированных листьях тыквы // Второй съезд Всесоюзного общества физиологов растений.

156. Минск, 24 29 сентября, 1990). - Тез. докл. - М.: ИФР, 1992 а. - Ч. И. - С. 184.

157. Роньжина Е.С. Водный обмен при действии цитокинина // Известия КГТУ. -2002 г.-№ 1.-С. 31-38.

158. Роньжина Е.С. Действие цитокинина на продуктивность бобов Vicia faba L. // Известия КГТУ. 2003 б. - № 3. - С. 132 - 142.

159. Роньжина Е.С. Действие цитокинина на состав 14С-продуктов фотосинтеза // XXV научн. конф. профес.-препод. состава, научных сотрудников и аспирантов (Калининград, апрель, 1993). Тез. докл. - Калининград: КГУ, 1993 а. - С. 74.

160. Роньжина Е.С. Действие цитокининов на функциональную активность акцепторов ассимилятов в системе целого растения // Четвертая Междун. конф. «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 24 26 июня, 1997). — Тез. докл. - М.: МСХА, 1997 а.-С. 119.

161. Роньжина Е.С. Изменение баланса цитокининов и абсцизовой кислоты в онтогенезе листа // 13-я науч. конф. «Изучение и рациональное использование природных ресурсов (Уфа, 5-9 мая, 1991). Тез. докл. - Уфа: Ин-т биологии УрО АН1. СССР, 1991 б.-С. 35.

162. Роньжина Е.С. Донорно-акцепторные отношения и продуктивность растений // Проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Бедарев С.А. Ка лининград: КГТУ, 1999 в. - С. 8 - 20.

163. Роньжина Е.С. Изменение осмотического давления клеток мезофилла при действии цитокинина // Третья Междун. конф. «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 27 29 июня, 1995). - Тез. докл. - М:: МСХА, 1995 б. - С. 34.

164. Роньжина Е.С. Изменение уровня эндогенных цитокининов в растениях под действием 6-бензиламинопурина // Вопросы сельского хозяйства: Сб: научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Брысозовский И.И. Калининград: КГТУ, 2003 в. - С. 109 - 118.

165. Роньжина Е.С. Повышение урожайности томатов с помощью 6-бензиламинопу-рина //Материалы Междун. научн. конф. «Состояние и проблемы научного обеспечения овощеводства защищенного грунта» (Москва, 25-26 ноября 2003). Москва, 2003 д. - 78 - 81.

166. Роньжина Е.С. Природа индуцированных цитокинином ростовых процессов во взрослых изолированных листьях // Конф. молодых ученых (Киев, май 1992). — Тез. докл. Киев: ИФРГ, 1992 б. - С. 38.

167. Роньжина Е.С. Регуляция фотосинтетического метаболизма углерода абсцизо-вой кислотой при нарушении донорно-акцепторных связей в системе целого растения // Современные аспекты агрономии и природопользования: Сб. научн. тр. /

168. КГТУ. Отв. ред. Рябой В.Е. Калининград: КГТУ, 1997 б. - G. 59 - 69.

169. Роньжина Е.С. Регуляция цитокининами деления и растяжения клеток мезофилла в онтогенезе листа Cucurbita реро L. // Физиол. растений. 2003 е. — Т. 50. -№5.-С. 722-732.

170. Роньжина Е.С. Роль цитокининов в регуляции онтогенеза листа бобов Vicia faba L. II Шестая Междун. конф. «Регуляторы роста и развития растений в биотехнологиях» (Москва, 26 28 июня, 2001). - Тез. докл. - М.: МСХА, 2001 в. - С. 62.

171. Роньжина Е.С. С02-газообмен листа при нарушении донорно-акцепторных связей в системе целого растения // Интродукция, акклиматизация и культивация растений: Сб. научн. тр. / КГУ. Отв. ред. Гуревич А.С. Калининград: КГУ, 1998 а. -С. 63 -68.

172. Роньжина Е.С. Сравнительный анализ действия фузикокцина, АБК и БАП в связи с проблемой аттрагирующего эффекта цитокининов // Физиология растений. 2004 а. - Т. 51. - № 4. - С. 493 - 499.

173. Роньжина Е.С. Структура фотосинтетического аппарата бобов Vicia faba L. при действии 6-бензиламинопурина // Прикладная биохимия и микробиология.2003ж. Т. 39. - №4. - С. 465 - 472.

174. Роньжина Е.С. Структурные и функциональные перестройки мезофилла как возможная причина цитокинин-зависимого транспорта веществ в изолированных листьях//Физиол. растений. 2004 б. - Т. 51. - № 3. - С. 373 - 382.

175. Роньжина Е.С. Транспорт ассимилятов как фактор продуктивности растений // Актуальные проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Па-ракшинЮ.П. Калининград: КГТУ, 2001 г. -Ч. II. - С. 127 - 140.

176. Роньжина Е.С. Цитокинины и донорно-акцепторные отношения у картофеля // Известия КГТУ. 2004 в. -№ 6. - С. 114-121.

177. Роньжина Е.С. Цитокинины как факторы эндогенной регуляции акцепторных свойств органов в системе целого растения // Современные аспекты агрономии и природопользования: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Рябой В.Е. Калининград: КГТУ, 1997 д. - С. 52 - 58.

178. Роньжина Е.С., Евтушевская Ю.В. Структура мезофилла взрослого листа бобов (Vicia fib a L.) как показатель продуктивности растений // Проблемы сельского хозяйства: Сб. научн. тр. / КГТУ. Отв. ред. Докучаев Н.С. Калининград: КГТУ,2000.-С. 179- 184.

179. Роньжина E.C., Мокроносов А.Т. Донорно-акцепторные отношения и участие цитокининов в регуляции транспорта и распределения веществ в растениях // Физиол. растений. 1994 б. - Т. 41. - № 3. - С. 448 - 459.

180. Роньжина Е.С., Мокроносов А.Т., Соколова С.В. О природе атграгирующего действия цитокинина в изолированных листьях // Доклады РАН. Сер. биол. -19946. Т. 336. - № 2. - С. 283 - 286.

181. Роньжина Е.С., Соколова С.В., Мокроносов А.Т. Действие цитокининов на транспорт и распределение веществ в изолированных листьях. 2. Факторы, влияющие на реализацию эффектов цитокининов // Физиол. растений. 1995а. - Т. 42. -№ 1.-С. 61-67.

182. Сакало В.Д., Оканенко А.С., Вывалько И.Г. Особености радиального передвижения ассимилятов в сахарной свекле // Тр. Биол.-почв. ин-та.- Владивосток, 1969. -№20.-С. 131 136.

183. Саламатова Т.С. Физиология растительной клетки. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1983.-232 с.

184. Саляев Р. К., Озолина Н. В;, Прадедова Е. В. Влияние экзогенных фитогормонов и кинетина на гидролитическую активность протонных помп тонопласта а онтогенезе столовой свеклы // Физиол. растений. 1999. - Т. 46. - № 1. - С. 5 - 8.

185. Селиванкина С.Ю., Романко Е.Г., Овчаров А.К., Харченко В.И. Участие цитокинин-связывающих белков в листьях ячменя в активации цитокинином связанной с хроматином РНК-полимеразы // Физиол. растений.-1982.-Т. 29, вып.2.-С.274-281.

186. Семихатова О.А. Энергетические аспекты интеграции физиологических процессов в растении // Физиол. растений. 1980. - Т. 27, вып. 5. - С. 1005 - 1024.

187. Семихатова О.А., Заленский О.В. Сопряженность процессов фотосинтеза и дыхания // Физиология фотосинтеза / Под ред. Ничипоровича А.А. М.: Наука, 1982. -С. 130- 145.

188. Синюхин A.M. Функциональное значение потенциалов действия растительного организма. Вторая функция флоэмного пучка высших растений // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1972. - № 5. - С. 747 - 755.

189. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах. М.гНаука, 1972.—203 с.

190. Соколова С.В. Изучение кинетики поступления и превращений моносахаров в клетках проводящих пучков Beta vulgaris И Физиол. растений. 1972. - Т. 19. - С. 1282- 1291.

191. Соколова С.В. Участие фитогормонов в регуляции транспорта и распределения веществ в растении // Передвижение ассимилятов и проблема сахаронакопления / Под ред. Печенова П.А. Фрунзе: Илим, 1986. - С. 233 - 255.

192. Соколова С.В., Балакшина Н.О. Влияние фитогормонов на транспорт и распределение 14С-сахарозы в срезанных листьях сахарной свеклы // Физиол. растений. -1992.-Т. 39, вып. 3. С. 1088 - 1097.

193. Соколова С.В., Балакшина Н.О., Красавина М.С. Активация растворимой кислой инвертазы сопровождает индуцированное цитокинином превращение донор— ного листа в акцептор // Физиол. растений. 2002. - Т. 49. - № 1. - С. 98 - 104.

194. Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации. 2004. - 336 с.

195. Троян В.М., Безвенюк Э.А., Левченко С.И., Калинин Ф.Л., Саворона Т.А. Фи-тогормональная регуляция клеточного цикла // Матер. 2 Всесоюзн. конф. «Регуляторы роста и развития растений» (Киев, 25-27 мая, 1988). Киев, 1989.-С. 150 — 160.

196. Туйчибаев М., Кружилин А. С. Передвижение меченых ассимилятов из отдельных листьев хлопчатника//Физиол. растений-1965.-Т.12,вып.6-С. 1045 1050.

197. Туркин Н.И., Прияткин С.А., Андреев А.П., Полевой В.В. Новый метод измерения роста осевых органов растений за короткие промежутки времени // Физиол. растений. 1980. - Т. 27, вып. 2. - С. 437 -440.

198. Туркина М.В., Куликова А.Л. Пути изучения акгиноподобного белка в тканях высших растений // Физиол. растений. 1982. - Т. 29, вып. 5. - С. 837 - .846.

199. Туркина М.В., Павлинова О.А. Транспорт ассимилятов как фактор интеграции физиологических процессов в растении // Физиол. растений. 1981. - Т. 28, вып. 1. -С. 184-205.

200. Туркина М.В., Соколова С.В. Индукция инвертазы в проводящих тканях сахарной свеклы // Физиол. растений. 1972. - Т. 19. - С. 912 - 919.

201. Туркова Н. С., Фролова И. А. 1970. Некоторые особенности действия кинетина на растения // Регуляция роста растений химическими средствами. М.: Изд-во Моск. гос. ун-та, 1970. - С. 9.

202. Физиология картофеля: Сб. научн. тр. / УрГУ. Отв. Под ред. Мокроносова А.Т. Свердловск: УрГУ, 1985. - 152 с.

203. Филиппова Л.А., Мамушина Н.С., Зубкова Е.К., Мирославо Е.А., Кудинова Л.И. Взаимоотношения фотосинтеза и дыхания у ассимилирующих клеток в разных зонах растущего листа ячменя // Физиол. растений.- 1986.-Т. 33,вып.1.-С.66-74.

204. Филиппова Л.А., Мамушина Н.С., Заленский О.В. О функционировании основных этапов темнового дыхания во время фотосинтеза // Ботанич. журн. 1982. - Т.67, вып. 9. -С. 1169- 1178.

205. Филиппова JI.A., Мамушииа Н.С., Зубкова Е.К. О влиянии накопления ассимилятов на фотосинтез у клеток хлореллы // Ботанич. журн. 1977. - Т. 62, вып. 2. — С. 179 - 1.85.

206. Фотосинтез и продукционный процесс / Под ред. Мокроносова А.Т. и др. -Свердловск: Изд-во УрГУ, 1988. 180 с.

207. Фофанова Т.А., Хохлова В.А. Тканевая специфика ответной реакции клеток изолированных семядолей тыквы на действие фитогормона // Физиол. растений. -1983. Т. 30, вып. 3. - С. 421 - 430.

208. Хохлова В.А. Влияние цитокинина на формирование пластид в изолированных семядолях тыквы на свету и в темноте // Физиол. растений. 1977. - Т. 24, вып. 6. -С. 1189- 1193.

209. Цовян Ж.В., Петросян М.Т., Закарян Н.Е., Мурадян JI.A. Цитокининовая активность столонов и клубней картофеля в период их формирования // Учен. зап. Ереван, ун-та. 1983. - Вып. 2. - С. 128 - 133.

210. Чайлахян М.Х. Фотопериодическая и гормональная регуляция клубнеоб-разования у растений. М.: Наука, 1984. - 72 с.

211. Ченцов Ю.С. Общая цитология. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1984. - 352 с.

212. Чернядьев И. И., Козловских А. Д., Образцов А. С., Лукашевич П. И. Влияние 6-бензиламинопурина, тидиазурона и картолина-2 на продуктивность многолетних злаков // Агрохимия. 1989. - № 7. - С. 102 - 106.

213. Чернядьев И.И. Онтогенетические изменения фотосинтетического аппарата // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. - Т. 36. - № 6. - С. 611 - 625.

214. Чернядьев И.И. Регуляция фотосинтеза синтетическими цитокининами и повышение продуктивности растений // Прикладная биохимия и микробиология. -1989. Т. XXV, вып. 2. - С. 147 - 165.

215. Чернядьев И.И. Фотосинтез и цитокинины // Прикладная биохимия и микробиология. 1993. - Т. 29. - № 5. - С. 644 - 674.

216. Чернядьев И.И. Фотосинтез растений в условиях водного стресса и протекторное влияние цитокининов // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. - Т. 33.-№ 1.-С.5-17.

217. Чернядьев И.И., Вольфова А., Хвойка Л., Фриедрих А., Доман Н.Г. Влияние соединений с цитокининовой активностью на фотосинтез сельскохозяйственных растений // Прикл. биохимия и микробиология. 1984. - Т. 20. - № Г. - С. 107 - 114.

218. Чернядьев И.И., Доман Н.Г., Козловских А.Л., Образцов А.С. Влияние биорегуляторов на фотосинтетический аппарат злаковых трав // Прикл. биохимия и микробиология. 1989.-Т. 25. - № 1. - С. 101 - 110.

219. Чернядьев И.И., Козловских А.Л. Влияние 6-бензиламинопурина, тидиазурона и картолина на активность фотосинтетических ферментов и содержание АТФ в листьях многолетних злаков // Физиол. растений. 1990. - Т. 37. - № 2. - С.335-341.

220. Чернядьев И.И., Козловских А.Л. Влияние цитокининовых биорегуляторов на фотосинтез овсяницы // Прикл. биохимия и микробиология. 1992. - Т. 28, вып. 1. -С. 114 - 122.

221. Чернядьев И.И., Козловских А.Л. Влияние цитокининовых фиторегуляторов на фотосинтез овсяницы // Прикл. биохимия и микробиология. 1992. - Т. 28. № 1. -С. 114- 122.

222. Чиков В.И. Фотосинтез и транспорт ассимилятов. М.: Наука, 1987. - 186 с.

223. Чиков В.И., Чемикосова С.Б., Бакирова Г.Г. и др. Влияние удаления части колоса или листьев на транспорт ассимилятов и фотосинтетическую продуктивность яровой пшеницы // Физиол. растений. 1984. - Т. 31, вып. 3. - С. 475 - 481.

224. Чиков В.И., Яргунов В.Г. Влияние интенсивности экспорта ассимилятов на фотосинтетический газообмен листа // Адаптивные реакции в формировании фотосинтетического аппарата. Пущино: НЦБИ АН СССР, 1980. - С. 40 - 41.

225. Шакирова Ф.М., Ананьев Е., Клячко Н.Л., Кулаева О.Н. Влияние цитокинина на образование полисом из предшествующих иРНК и рибосом // Докл. АН СССР. Сер. биол. 1980. - Т. 255. - № 2. - С. 508 - 510.

226. Шакирова Ф.М., Конрад К., Клячко Н.Л., Кулаева О.Н. Связь между действием цитокинина на рост изолированных семядолей тыквы и синтезом в них РНК и белка // Физиол. растений. 1982. - Т. 29, вып. 1. - С. 52 - 61.

227. Шевелуха B.C. Рост растений и его регуляция в онтогенезе. М.: Наука, 1992. — 594 с.

228. Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Дегтярев С.В., Кочиева Е.З., Прокофьев М.И., Новиков Н.Н., Ковалев В.М., Калашников Д.В. Сельскохозяйственная биотехнология / Под ред. Шевелухи B.C. М.: Высшая школа, 1998. - 416 с.

229. Шугаев А.Г., Соколова С.В. Смена путей митохондриального окисления в период начального формирования клубней картофеля // Физиол. растений. 2001. -Т. 48.-№ 1.-С. 55-61.

230. Щипарев С.М., Медведев С.С., Шарова Е.И., Танкелюн О.В. Практикум по биохимии растений / Под ред. Полевого В.В, Щипарева С.М. СПб.: Изд-во СПбГУ, 1996.-200 с.

231. Юдина О.С. Об участии в дыхании введенной в лист экзогенной глюкозы // Ботанич. журн. 1969. - Т. 54, вып. 5. - С. 477 - 482.

232. Abrams G.J. von, Pratt Н.К. The Effect of Kinetin and Naphtalenacetic Acid upon Localized Accumulation as Related to Senescence in Detached Leaves // Planta. 1967.- Bd. 76. H. 3. - P. 306 - 308.

233. Achhireddy N.R., Kirkwood R.C., van den Berg G. The Development of Pisum sativum Explant System for Studies Concerning Source-Sink Activities // Physiol. Plant. -1984.-V. 61. -Fasc. 1. P. 130 - 134.

234. Adedipe N.O., Tletcher R.A. Вenzyladenine-Directed Transport of Carbon—14 and Phosphorus-32 in Senescing Bean Plants // J. Exp. Bot.-1970.-V.21.-№69.-P.968- 974.

235. Alderfer R.G., Eagles C. F. The Effect of Partial Defoliation on the Growth and Photosynthetic Efficiency of Bean Leaves // Bot. Gaz. 1976. - V. 137. - № 4. - P. 351.

236. Allinger P., Michael G., Martin P. Einfluss von Cytokinen und anderen Wuchstoffen auf die Stoffveriagerung in abgeschnittenen Blattern // Flora. -1969. Bd. 160. - H. 6. -P: 538- 551.

237. Asahira Т., Nitsch J.P. Tuberisation in vitro: Ullucus tuberosus et Dioscorea // Bull. Soc. Bot. France. 1968. - V. 115. - P. 345 - 352.

238. Auer G.A., Laloue M., Cohen J.D., Cooke T.S. Bensyl Adenine Uptake and Metabolism during Petunia Shoot Organogenesis // Int. Symp. Physiol, and Biochem. of Cytokines in Plants, Sept. 10-14, 1990. Liblice, Czechoslovakia. - Abstracts. - 190. - P. 4.

239. Aufhammer W., Solanky S. Beeinflussung der Assimilat-speicherungprozesse in der Sommergerstenahre durch Kinetinbehandlungen // Z. Pflanzenemahr. und Bodenk.1976.-Bd 4.-S. 503 514.

240. Axelos M., Barbet J., Peaud-Lenoel C. Influence of Cytokinin on the Biosynthesis on Light-Harvesting Chlorophyll a/b Proteins in Tobacco Cell Suspensions Detection by Radioimmunological Assay // Plant Sci. Lett. 1984. - V. 33. - № 2. - P. 201 - 212.

241. Barrier G.E., Loomis W.E. Absorption and Translocation of 2,4- Dichlorophenoxy-acetic Acid and 32P by Leaves // Plant Physiol. 1957. - V. 32. - № 2.- P. 225 - 231.

242. Barton R. Fine Structure of Mesophyll Cells in Senescing Leaves of Phaseolis // Planta. 1966. - Bd. 71.- H. 2. - S. 314 -318.

243. Batchelor S.M., Elliott B.C. The Isolation of Protoplasts of Amaranthus tricolor andm

244. Their Use in Proton Extrusion Studies // Proc. Aust. Blochem. Soc. 1981.-V.14.- P.l 17.

245. Bengston C., Falk S.O., Larsson S. Effects of Kinetin on Transpiration Rate and Ab-scisic Acid Content of Water Stressed Young Wheat Plants // Physiol. Plant. 1979. - V. 45.-N l.-P. 183 - 88.

246. Beraud J., Penot M. Action de Quelques Phytohormones sur 1'Absorption et le Transport Ioniques Chez la Fenilla de Pelargonium zonale // Z. Pflanzenphysiol. 1982. -Bd. 106.-H. 5.-S. 391 -399.

247. Bernadette L., Fongy R., Geiger D.R. Kinetics of Several Leaf Sugars during Phloem Loading in Beta vulgaris // Plant Physiol (Suppl.). 1976. - V. 57. - № 401. - P. 77.

248. Biddington N.L., Thomas T.N. A Modified Amaranthus betacyanin bioassay for Rapid Determination of Cytokinins In Plant Cell Extracts // Planta. 1973. - V. 111. - № 2.-P. 183 - 188.

249. Bidwell R.G.S. Plant Physiology.-London-N.-Y.: Macmillan Publ.Co.Inc:,1974 -643 p.i

250. Boasson R., Bonner J.T., Laetsch W.M. Induction and Regulation of Chloroplast Replication in Mature Tobacco Leaf Tissue // Plant Physiol.-1972.-V.49.-№l.-P.97-l 11.

251. Bohner J. Fruchtgrosse und Konkurenzverhalten bei Tomatenfriichten Beziehungen zwischen Zellzahl, Zellgrosse und Phytohormonen. Doct. Dissertation: Universitat Ho-henheim, 1986.

252. Boote K. J., Jones J. W., Sterage G. H. et al. Photosynthesis of Peanut Canopies as Affected by Leafspotty and Artificial Defoliation // Agron. J. 1980. - V. 72. - № 2. - P. 247 - 252.

253. Bosselaers J.P. Cytokinin Effects Leaf Architecture in Phaseolis vulgaris L. // J. Exp. Bot. 1983. - V. 34. - № 145. - P. 1007 - 1017.

254. Bousquet G.E., Thimann K.V. Lipid Peroxidation Forms Ethylene From 1-Aminocyclopropane-l-carboxylic Acid and May Operate in Leaf Senescence // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. - V. 81. - P. 1724 - 1727.

255. Bowes G., Ogren W. L. Oxygen Inhibition and Other Properties of Soybean RDP-carboxylase // J. Biol. Chem. 1972. - № 247. - P. 2171 - 2176.

256. Bradford M.M. A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Micrograms Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding // Anal. Biochem. -1976. V. 72. - № 1/2. - P. 248 - 254.

257. Brautiggam E., Muller E. Transportprozesse in Vallisneria-Blattern und die Wirkung von Kinetin und Kolhizin. III. Induction einer Senke durch Kinetin // Biochem. Physiol. Z. Pflanzen. 1975. - Bd. 167. - H. 1. - S. 29 - 39.

258. Brock T.G., Cleland R.E. Biophysical Basis of Growth Promotion in Primary Leaves of Phaseolus vulgaris L. by Hormones Versus Light. Solute Accumulation and the Growth Potential // Planta. 1990. - V. 182. - P. 427 - 431.

259. Brock T.G., Cleland R.E. Role of Acid Efflux during Growth Promotion of Primary Leaves of Phaseolus vulgaris L. by Hormones and Light // Planta. 1989. - V. 177. - P. 476-482.

260. Виске C.D., Walker D.A., Baldry C.D. Some Effects of Sugarphosphate on Carbon Dioxide Fixation by Isolated Chloroplasts // Biohem. J. 1966. - V. 101. - P. 636 - 641.

261. Burt R.L. Carbohydrate Utilization as a Factor in Plant Growth // Austral. J. Biol. Sci. 1964. - V. 17. - P. 867 - 877.

262. Calmes J., Vignes D. Modifications des echanges gazeux et du metabolisme glu-cidique de la feuille isolee par rapport a la feuille sur pied // Photosynthetica. 1976. - V. 10. - № 3. - P. 255-263.

263. Carlson S.J., Chowrey P.S. A Reevaluation of the Relative Roles of Two Invertases; INCW2 and IVR1, in Developing Maize Kernels and Other Tissues // Plant Physiol. -1999.-V. 121.-P. 1025- 1035.

264. Carmi A. Effect of Cytokinins and Root Pruning on Photosyntheis. and Growth // Photosynthetica. 1986. -V. 20. - № 1. - P. 1 - 8.

265. Carmi A., Shomer I. Starch Sccumulation and Photosynthetic Activity in Primary Leaves of Bean (Phaseolus vulgaris L.) // Ann. Bot. (Gr. Brit). 1979. - V. - 44. - № 4. -P. 479-484.

266. Carr D. J., Wardlaw I. F. The Supply of Photosynthetic Assimilates to the Grain from the Flag Leaf and Ear of Wheat// Austral. J. Biol. Sci. 1965. - V. 18. - P. 711 - 719.

267. Chatfield J.M., Armstrong D.J. Cytokinin Oxydase from Phaseolis vulgaris Callus Tissues. Enhanced in vitro Activity of the Enzyme in the Presence of Copper-Imidasole

268. Complexes // Plant Physiol. 1987. - V. 84. - № 3. - P. 726 - 731.

269. Chatfield J.M., Armstrong D.J. Regulation of Cytokinin Oxidase Activity in Callus

270. Tissues of Phaseolis vulgaris L. cv. Great Northern // Plant Physiol. 1986. - V. 80. - №. f 2. - P. 493 - 499.

271. Chaves das Neves H.J., Pais M.S.S. A New Cytokinin from the Fruits of Zantedeschia aethiopica II Tetrahedron Lett. 1980a. - V. 21. - P. 4387 - 4390.

272. Chaves das Neves H.J., Pais M.S.S. Identification of a Spathe Regreening Factor in Zantedeschia aethiopica II Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980b. - V. 95. — P. 1387- 1392.

273. Chernyadev I.I., Chvojka L., Friedrich A.A., Volfovd A., Bresinovd A. Photosynthesis in Sugar beet Leaves under the Influens of Cytokinins and Triazine Herbicide // Photosynthetica. 1986. - V. 20. - № 2. - P. 196 - 203.

274. Chernyadev I.I., Friedrich A., Chvojka L, Doman N.G. Cytokinins and Photosynthesis // Wissenschaft. Z. Univ. Greifswald. 1983. - H. 32. - № 3-4. - S. 21-22.

275. Chibnall A.C. Protein Metabolism in Rooted Runner Bean Leaves // New Phytol. -1954.-V. 53.-№ l.-P. 31 -38.

276. Chin C.K., Weston G.D. Distribution in Excised Lycopersicon esculentum Roots of the Principal Enzymes Involved in Sucrose Metabolism // Phytochemistry. 1973. - V. 12.-P. 1229- 1235.

277. Chouldhury N.K., Imaseki H. Loss of Photochemical Function of Thylakold Membranes and Photosystem 2 Complex During Senescence of Detached Barley Leaves // Photosynthetica. 1990. - V. 24. - № 3. - P. 436 - 445.

278. Claussen W., Biller E. Die Bedeutung der Sacharose und Starkegehatte der Blatter fur die Regulie-rung der Netto-Photosyntheseraten // Ztschr. Pflanzenphysiol. 1977. -Bd. 83. -№3.-S. 189- 208.

279. Clifford P.E., Offler С.Ё., Patrick J.W. Growth Regulators Have Rapid Effects on Photosynthate Unloading from Seed Coats of Phaseolus vulgaris L. // Plant Physiol.1986. V. 80. -Ks 5.- P. 635 - 637.

280. Colin M., Thimann K.V. The Role of Protein Synthesis in the Senescence of Leaves // Plant Physiol. 1972. - V. 49. - № 1. - P. 64 - 71.

281. Courduroux J.C. Mecanisme physiologie de la tuberisation du topinambour // Bui. Soc. fran?. physiol. Veget. 1966. - № 12. - P. 220 - 232.

282. Cseke C., Weede N.F., Buchanan В., Uyede A.D. A Special Fructose Bisphosphate Function as a Cytoplasmic Regulatory Metabolite in Green Leaves // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1982. - V. 79. - № 4. - P. 4322 - 4326.

283. Cutter E.G. Structure and Development of Potato Plant // The Potato Crop. The Scientific Basis Improvement / Ed. Herns P.M.-London: Chapman & Hall, 1978.-P.70-152.

284. Daie J., Watts M., Alony В., Wyse R.E. In Vitro and In Vivo Modification of Sugar Transport and Translocation in Celery by Phytohormones // Plant Sci. — 1986. — V. 46. -№ 1.- P. 35 -41.

285. Daie J., Wyse R.E. Hormonal Regulation of Phloem Loading of Sucrose in Phaseolis vulgaris // Proc. Plant Growth Reg. Soc. Am. 1983. - V. 10. - P. 139 - 143.

286. Daley I.E., Van Staden I. Cytokinins Spinach Chloroplasts // Ann. Bot. 1981. - V. 48. - № 2. - P. 235 - 244.

287. Damish W. Die Photosynthese in Der Kornfullungs periode und ihre Bosiohung zum Stoffszuwachs bei Winterweizen // Photosynthetica. 1974. - V.8. - №4. - P. 131 - 158.

288. De Boer J., Feierabend J. Comparative Analysis of the Action of Cytokinin and Light on the Growth of Rye Leaves // Planta. 1978. - Bd. 142. - H. 1. - S. 67 - 73.

289. Delrot S., Bonnemain J.-L. Le Transport Lateral du Carbone Assimile // Physiol. Veget. 1979.-V. 17. - № 2. - P. 217 - 212.

290. Delrot S., Bonnemain J.-L. Mechanism and Control of Phloem Transport // Physiol. Veg. 1985. - V. 23. - № 2. - P. 199 - 220.

291. Denizci R. Uber den Einfluss von Kinetin und Idolylessigsaure auf das Austreiben der Knospen von Pisum sativum II Planta. 1966. - Bd. 68. - H. 2. - S. 141 - 156.

292. Dennis D.T., Stubbs M., Coultate T.P. The Inhibition of Brussels Sprout Leaf Senescence by Kinins // Can. J. Bot. 1967. - V. 65. - P. 1019 - 1027.

293. DeRopp R. Kinetin and Auxin Activity // Plant Physiol.-1956.-V.31.-№2. P. 253 -254.

294. Dickson R.E., Larson Ph.R. Incorporation of 14C-Photosynthate into Major Chemical Fractions of Source and Sink Leaves of Cottonwood // Plant Physiol. 1975. - V. 56. -№2.-P. 185- 193.

295. Dinar M., Rudich J. Effect of Heat Stress on Assimilate Partitioning in Tomato // Ann. Bot. 1985. - V. 56. - № 2. - P. 239 - 248.

296. Ding В., Parthasarathy M.V., Niklas K., Turgeon R. A Morphometric Analysis of the Phloem Unloading Pathway in Developing Tobacco Leaves // Planta. - 1988. - V. 176. -№2. -P. 308-318.

297. Dorffling K., Tietz A., Fenner R. et al. Einschluss von Abscisinsaure auf den Transk;port und die Einlagerung von Assimilaten // Ber. Dtsch. bot. Ges. 1984. - Bd. 97. - H. 1/2. - S. 87 - 99.

298. Elliott B.C. Differential Effects on Fusicoccin and Cytokinin-Stimulated Betacyanin Synthesis by ATPase Inhibitors and Uncouplers // Plant Sci. Lett. 1979. - V. 15. - P. 251 -264.

299. Engelbrecht L. Beitrage zum Problem der Akkumulation von Aminosauren in Blat-tzellen // Flora. 1961. - Bd. 150. - H; 1. - S. 73 - 86.

300. Engelbrecht L. Cytokinin Activity in Larval Infected Leaves // Biochem. Physiol. •> Pflanzen. 1971a. - V. 162. - P. 9 - 27.

301. Engelbreht L. Cytokinins in Buds and Leaves during Growth, Maturity and Ageningwith a Comparison of two Bio-assays) // Biochem. Physiol. Pflanzen. 1971b. - Bd. 162.-S. 547-558.

302. Entsch B.E., Letham D.S. Enzymic Glucosylation of the Cytokinin-6-Benzylaminopurine // Plant Sci. Lett. 1979. - V. 14. - P. 205 - 212.

303. Ernst D., Schafer W., Oesterhelt D. Isolation and Identification of a New Naturally Occurring Cytokinin (6-Benzylaminopurine Riboside) from an Old Anise Cell Culture (Pimpinella anisum L.) // Planta. 1983. - V. 159. - P. 222 - 225.

304. Erwee M.G., Goodwin P.B., Van Bel A.J.E. Cell-Cell Communication in the Leaves of Commelina cyanea and Other Plants // Plant Cell Environ.-1985.-V.8.-№2.-P. 173 -178.

305. Eshrich W. Biochemistry and Fine Structure of Phloem in Relation to Transport // Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1970. -V. 21. - P. 193 -214.

306. Evans L.T. Crops and World Food Supply, Crop Evolution and the Origin of Crop Physiology // Crop Physiology. Some Case Histories. N.-Y., 1975. - P. 1 - 22.

307. Evans L.T., Dunstone R.L. Some Physiological Aspects of Evolution in Wheat // Aust. J. Biol. Sci. 1970. - V. 23. - P. 725 - 741.

308. Farineau N., Roussaux I. Influence de la 6-Benzilaminopurine sur la Differencial on Plastidale dans les Cotyledons de Concombre // Pliysiol. Plant. 1975. - V. 33. - № 2. -P. 194 - 202.

309. Farrar J. F. Fluxes of Carbon in Roots of Barley Plants // New Phytol. 1985. - V. 99.-№ l.-P. 57-69.

310. Farrar J. F. Respiration Rate of Barley Roots: its Relation to Growth, Substrate Supply and the Illumination of the Shoot // Ann. Bot. 1981. - V. 48. - № 1. - P. 53 - 63.

311. Feierabend J. Characterization of Cytokinin Action on Enzyme Formation during the Development of Photosynthetic Apparatus in Rye Seedlings. Enzymes of the Reductiveand Oxidative Pentose Phosphate Cycles // Planta. 1970. - V. 94. - № 1. - P. 1 - 7.

312. Feierabend J. Der Einfluss von Cytokininen auf die Bildung von Photosyntheseen-zymen in Roggenkeimlingen // Planta. 1969. - Bd. 84. - H. 1. - S. 11 - 19.

313. Fellows R.J., Geiger D.R. Structural and Physiological Changes in Sugar Beet Leaves During Sink to Source Transition // Plant Physiol. 1974. - V. 54. - № 5. - P. 877- 885.

314. Feng K.A. Effects of Kinetin on the Permeability of A Ileum сера Cells // Plant Physiol. 1979. - V. 51. - №. 5. - P. 868 - 870.

315. Fetene M., Beck E. Reversal of the Direction of Photosynthate Allocation in Urtica dioica L. Plants by Increasing Cytokinin Import into the Shoot // Bot. Acta. 1993. - V. 106.-№3.-P. 235-240.

316. Fisher D.G. Movement of Lucifer Yellow in Leaves of Coleus blumei Benth. // Plant Cell Environ. 1988. - V. 11. - P. 639 - 644.

317. Fisher D.G. Ultrastructure, Plasmodesmatal Frequency, and Solute Concentration in Green Areas of Variegated Coleus blumei Leaves // Planta. 1986. - Bd. 169. — H. 1. -S. 141 - 152.

318. Fletcher R.A., Teo C., Ali A. Stimulation of Chlorophyll Synthesis in Cucumber Cotyledons by Bensyladenine // Can. J. Bot. 1973. - V. 51. - №. 5. - P. 937 - 939.

319. Fosket D.E., Tepfer D.A. Hormonal Regulation of Growth in Cultered Plant Cells // In Vitro. 1978. - V. 14. - № 1. - P. 69 - 75.

320. Fries N. The Effect of Adenine and Kinetin on Growth and Differentiation of Lu-pinus // Physiol. Plant. 1960. - V. 13. - P. 468.

321. Fritz E., Evert R.F., Heiser W. Microradiographic Studies of Phloem Loading and Transport in the Leaf of Zea mays L. // Planta. 1983. - V. 159. - № 3. - P. 193 - 206.

322. Geiger D.B. Phloem Loading and Associated Processes // Phloem Transport (Eds. Aronoff S, et al.). -N.-Y.: Plenum Press, 1975. P. 251 - 283.

323. Geiger D.R. Chilling and Translocation in Inhibition // Ohio J. Sci. 1969. - V. 69. -P. 356-366.

324. Geiger D.R. Effect of Sink Region Coaling on Translocation of Photosynthate // Plant Physiol. 1966. - V. 41. - P. 1667 - 1672.

325. Geiger D.R. Servaites J.S., Fuchs M.A. Role of Starch in Carbon Translocation and Partitioning at the Plant Level // Austr. J. Plant Physiol. 2000. - V. 27. - P. 571 - 582;

326. Geiger D.R., Giaquinta R.T., Sovonick S.A., Fellows R.J. Solute Distribution in Sugar beet Leaves in Relation to Phloem Loading and Translocation // Plant Physiol; -1973.-V. 52. № 3. - P. 585-589.

327. Geiger D.R., Sovonick S.A., Shock T.L., Fellows R.J. Role of Free Space in Translocation Sugar beet // Plant Physiol. 1974. - V. 54. - № 6. - P. 892 - 898.

328. Gerhauser D., Bopp M. Cytokinin Oxidases in Mosses. 1. Metabolism of Kinetin and Benzyladenine in vivo II J. Plant Physiol. 1990. - V. 135. - P. 680 - 685.

329. Gersani MM Kende FL Studied of Cytokinin-Stimulated Translocation in Isolated Bean Leaves//J. Plant Growth Regul.- 1982.-V. 1. -№2.-P. 161 171.

330. Gersani M., Lips S.H., Sachs T. The Influence of Shoots, Roots and Hormones on Sucrose Distribution // J. Exp. Bot. 1980. - V. 31. - № 120. - P. 177 - 184.

331. Ghildiyal M.C., Laxmi V. Influence of Benzyladenine on Photosynthesis in Mung-bean Under Different Source Sink Relationships // Photosynthetica. - 1989. - V. 23. -№ 4. - P. 667 - 670.

332. Giaquinta R.T., Lin W., Sadler N.L., Franceschi V.R. Pathway of Phloem Unloading of Sucrose in Corn Roots // Plant Physiol. 1983. - V. 72. - P. 362 - 367.

333. Glazewski S. Wplyw akceptorow asymilatow na intensywnosc procesu fotosyntezy w lisciach grochu i owasa // Pamietn. Pulaw. 1975. - № 64. - S. 121 - 133.

334. Gleadow R.M., Dalling M.J., Halloran G.M. Variation in Endosperm Characteristics and Nitrigen Content in Six Wheat Lines // Austral. J. Plant. Physiol. 1982. - V. 9. - P. 539-551.

335. Goicoechea N., Dolezal K., Antolin M.C., Stmad M., Sanchez-Diaz M. Influence of Mycorrhizae and Rhizobium on Cytokinin Content in Drought-Stressed Alfalfa // J. Exp. Bot. 1995. - V. 46. - P. 1543 - 1549.

336. Gout E., Bligny R, Douce R. (1992). Regulation of Intracellular pH Values in Higher Plant Cells. Carbon-13 and Phosphorus-31 Nuclear Magnetic Resonance Studies // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. - P. 13903-13909.

337. Gunning B.E.S., Barkley W.K. Kinin-induced Directed Transport and Senescence // Nature. 1963. - V. 199. - № 14890. - P. 262 - 263.

338. Gunning B.E.S., Pate J.S. Transfer Cell: Dynamic Aspects of Plant Ultrastructure. -London: McGraw Hill, 1974. P. 134 - 179.

339. Gunning B.E.S., Pate J.S., Briarty L.G. Specialized "Transfer Cell" in Minor Vein of Leaves and Their Possible Significance in Phloem Translocation // J. Cell Biol: 1968. -V. 37.-№3.-P. 7- 12.

340. Habeshaw D. Translocation and the Control of Photosynthesis in Sugarbeet // Planta. 1973. - V. 110. - № 3. - P. 213 - 226.

341. Hall A. J., Brady C. J. Assimilate Source-Sink Relationships in Carsicum annuum L. II: Effects of Fruiting and Defloration on the Photosynthetic Capacity and Senescence of the Leaves // Austral. J. Plant Physiol. 1977. - V. 4. - № 5. - P. 771 - 783.

342. Hall A.J. Assimilate Source-Sink Relationships in Capsicum annuum L. I: The Dynamics of Growth in Fruiting and Deflorated Plants // Austral. J. Plant Physiol. 1977. -V. 4. - № 4. - P. 623 - 636.

343. Hall R.H. Cytokinins as a Probe of Development Processes // Ann. Rev. Plant Physiol. 1973. - V. 24. - P. 415 - 444.

344. Hartt C.E. Translocation as a Factor of Photosynthesis // Naturwissenschaften. -1963. Bd. 50. - H. 21. - S. 666 - 667.

345. Hartt C.E., Korschak H.P. Sugar Gradient and Translocation of Sucrose in Detached Blades of Sugarcane // Plant Physiol. -1964. V. 39. - № 3. - P. 450 - 473.

346. Hashimoto T. Synergistic Effect of Indoleacetic Acid and Kinetin on the Primary Thickening of Pea Stem Segments // Bot. Mag. (Tokyo). 1961. - V. 74. - P. 110 - 117.

347. Hayes P.M., Patrick J.M. Photosynthate Transport in Stems of Phaseolus vulgaris L. Treated with Gibberellic Acid, Indole-3-acetic Acid or Kinetin. Effects of the Site of Hormone Application // Planta. 1985. - Bd. 166. - H. 3. - P. 371 - 379.

348. Heber U. Metabolite Exchange between Chloroplasts and Cytoplasm // Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1974. - V. 25. - P. 393 - 421.

349. Hein M., Brenner M.L., Brun W.A. Effect of Pod Removal on the Transport and Accumulation of Abscisic Acid and Indole-3-acetic Acid in Soybean Leaves // Plant Physiol. 1984: - V. 76. - № 4. - P. 955 - 958.

350. Helchel G.H., Turner N.C. C02 Assimilation of Primary and Regrowth Foliage of red maple (Acer rubrum L.): and red oak (Quercus rubra L.): response to defoliation // Oe-cologia. 1983. - Bd. 57. - № 1/2. - S. 14 - 19.

351. Hemberg Т. The Effect of Kinetin on the Occurrence of Acid Auxin in Coleus blumei II Physiol. Plant. 1972. - V. 26. - Fasc. 1. - P. 98 - 103.

352. Hemberg Т., Larsson V. Interaction of Kinetin and Indoleacetic Acid in the Avena Straight Growth Test // Physiol. Plant. 1972. - V. 26. - Fasc. 1. - P. 104 - 107.

353. Hewett E.W., Wareing P.F. Cytokinins in Populus X robusta: Qualitative Changes during Development // Physiol. Plant. 1973. - V. 29. - Fasc. 3. - P. 386 - 389.

354. Heyser W., Leonard O., Heiser R. et al. The Influence of Light, Darkness and Lack of CO2 on Phloem Translocation in Detached Maize Leaves // Planta. 1975. - V. 122. -№ l.-P. 143 - 154.

355. Hillman W. The Effect of Light and Kinetin on Nonphotosynthetic Growth in the Lemnaceae // Plant. Physiol. (Suppl.). 1967. V. 32. - P. 48.

356. Ho L. C., Baker D.A. Regulation of Loading and Unloading in Long Distance Transport System II Physiol. Plant. 1982. - V. 56. - Fasc. 2. - P. 225 - 230.

357. Ho L.C. Metabolism and Compartmentation of Imported Sugars in Sink Organs in Relation to Sink Strength II Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1988. - V. 39. -P. 355 -378.

358. Ho L.C. Partitioning of Assimilates in Fruiting Tomato Plants // Plant Growth Regul. 1984. - V. 2. - № 4. - P. 277 - 285.

359. Hoddinott J., Swanson O.A. Carbohydrate Translocation in Bean Plants: Light and Sink Effects // Plant Physiol. (Suppl.). 1975. - V. 56. - №. 2. - P. 18.

360. Hofacker W. Untersuchungen zur Photosynthese der Rebe. Einfiup der Entblatter-rung der Dekapitierung der Ringelung und der Entfernung der Traube // Vitis. 1978. -Bd. 17.-№ 1.- S. 10-22.

361. Hole C.C., Thomas Т.Н., Barnes A. et al. Dry Matter Distribution between Shoot and Storage Root of Carrot, Parsnip, Radish and Red Beet // Ann. Bot. 1984. - V. 53. - №5.-P. 625-631.

362. Hopkinson J.M. Studies of the Expansion of the Leaf Surface. IV. The Carbon and Phosphorus Economy of a Leaf// J. Exp. Bot. 1964. - V. 41. - № 1. - P. 125 - 137.

363. Hordan R. Cytokinin Oxydase and the Degradative Metabolism of Cytokinins // Plant Growth Substances / Eds.: Pharis P.P., Rood S.B. Springer, Heidelberg, 1990. -P. 282 - 290.

364. Horgan R., Hewett E. W., Horgan J. M., Purse J. G., Wareing P. F. A New Cytokinin from Populus X robusta II Phytochemistry. 1975. - V. 14. - P. 1005 - 1008.

365. Horgan R., Hewett E. W., Purse J.M., Wareing P. F. A New Cytokinin from Populus X robusta II Tetrahedron Lett. 1973. - V. 30. - P. 2827 - 2828.

366. Hormonal Regulation of Development. II. The Functions of Hormones from the Level of the Cell to the Whole Plant // Encyclopedia of Plant Physiology. New Ser. V. 10. / Ed. Т.К. Scott. Berlin et al.: Springer-Verlag, 1984. - P. 35 - 44.

367. Humphries E.S., Thorne G.N. The Effect of Root Formation on Photosynthesis of Detached Leaves // Ann. Bot. 1964. - V. 28. - № 11. - P. 391 - 400.

368. Husken D., Steudle E., Zimmerman U. Pressure Probe Technique for Measuring Water Relations of Sells in Hugher Plants // Plant Physiol. 1978.-V.61. - №1. - P. 158.

369. Incoll L.D., Neales T.F. The Stem as a Temporary Sink before Tuberisation in He-lianthus tuberosus L. II J. Exp. Bot. 1970. - V.21. - № 67. - P. 469 -476.

370. Iriuda N., Kikuta Y., Okazawa Y. Significance of Phosphorylase on Starch Synthesis of Potato Tuberization // J. Fac. Agr. Hokkaido Univ. 1983. - V. 61. - P. 233 - 243.

371. Isebrands J.G., Dickson R.E., Larson. Ph.R. Translocation and Incorporation of 14C into the Petiole from Different Regions Within Developing Cottonwood Leaves // Planta. 1976. - Bd. 128. - H. 2. - P. 185 - 193.

372. Jameson P.E., McWha J.A., Haslemore R.M. Changes in Cytokinins During Initiation and Development of Potato Tubers // Physiol. Plant. 1985. - V. 63. - Fasc. 1. - P. 53 - 67.

373. Jameson P.E., McWha J.A., Wright G.J. Cytokinins and Changes in Their Activity During the Development of Grain of Wheat (Triticum aestivum L.) И Z. Pflanzenphysiol.- 1982.-Bd. 106.-S. 27-36.

374. Jewer P.C., Incoll L.D. Promotion of Stomatal Opening in the Grass Antheophora pubescens Nees by a Range of Natural and Synthetic Cytokinins // Planta. 1980. - V. 150.-P. 218-221.

375. Jokota Т., Takahashi N. Cytokinins in Shoots of the Chestnut Tree // Phytochemistry.- 1980. V. 19. - P. 2367 - 2369.

376. Jones H., Eagles J.E. Translocation of 14C Carbon Within and Between Leaves // Ann. Bot. 1962. - V. 26. - № 104. - P. 505 - 510.

377. Jones H., Martin R., Porter H. Translocation of 14C in Tobacco Following Assimilation of C02 by a Single Leaf// Ann.Bot. -1959. V. 23. - № 5. - P. 493 - 508.

378. Jones L. H., Martinkova H., Strnad M., Hanke D. E. Occurrence of Aromatic Cytokinins in Oil Palm (Elaeis guineensis Jacq.) // J. Plant Growth Regul. 1996. - V. 15. -P. 39-49.

379. Jones R., Jordan W.R., Skoog F. Effect of Cytokinins on Growth and Auxin in Coleoptiles of Derooted Avena Seedlings // Plant Physiol. 1971. - V.48.-№l .-P.97-99.

380. Jones R., Kaufman P. Regulation of Growth in Avena Stem Segments by Gibberellic Acid and Kinetin // Physiol. Plant. 1971. - V. 24. - Fasc. 4. - P. 491 - 497.

381. Kartusch B: Freilandmessunger der Gaswechselveslanfe bei den Friihjarsgeophyten Calanthus nivalis und Ficaria verna // Oecologia plantarum. 1979. - V. 14. - № 2. - S. 177- 185.

382. Katsumi M. Physiological Effects of Kinetin // Physiol. Plant. 1963. - V. 16.1. Fasc. l.-P. 66-72.

383. Kaufman P. Role of Gibberellins in the Control of Intercalary Growth and Cellular Differentiation in Developing Avena Internodes // Ann. N.-Y. Acad. Sci. 1967. - V. 144.-P. 191 -203.

384. Kaufman P. The Effects of Growth Substances on Intercalary Growth and Cellular Differentiation in Developing Internodes of Avena sativa. II. The Effects of Gibberellic Acid//Physiol. Plant. 1965. - V. 18. - Fasc. l.-P. 703-724.

385. Kemp H., Fuller R., Davidson R. Inhibition of Plant Growth by Root-Drench Applications of Kinetin// Science. 1957. -V. 126. -№ 3284. - P. 1182.

386. King R.W., Wardlaw S.F., Evans L.T. Effect of Assimilate Utilization on Photosynthetic Rate in Wheat// Planta. 1967. - V. 77. - P. 261 -276.

387. Kinoshita I., Tsuji H. Benzyladenine Induced Increase In DNA Content per Chloro-plast in Intact Bean Leaves // Plant Physiol. -1984. - V. 76. - № 3. - P. 575 - 578.

388. Klyachko N.L., Ananiev E., Kulaeva O.N. Effect of 6-Benzylaminopurine and Ab-scisic Acid on Protein Synthesis in Isolated Pumpkin Cotyledons // Physiol. Veget. -1979.-V. 17. № 3. - P. 501-511.

389. Kocher H., Leonard O.A. Translocation and Metabolic Conversion of 14C-Labelled Assimilates in Detached and Attached Leaves of Phaseolus vulgaris L. in Different Phases of Leaf Expansion // Plant Physiol. 1971. -V. 47. - № 2. - P. 212 - 216.

390. Koda V., Okazawa V. Characteristic Changes in the Levels of Endogenous Plant Hormones in Relation to the Onset of Potato Tuberization // Jap. Your. Cop. Sci. 1988.-V. 52.-№4.-Р. 17-20.

391. Koda V., Okazawa V. Cytokinins in Growing Potato Tubes // Jap. Your. Cop. Sci. -1977.-V. 46,-№2.-P. 31.

392. Koda Y. Changes in Levels of Butanol- and Water-Soluble Cytokinins during the Life Cycle of Potato Tubers // Plant Cell Physiol. 1982. - V. 23. - № 5. - P. 843 - 849.

393. Komor E. Source Physiology and Assimilate Transport: The Interaction of Sucrose Metabolism, Starch Storage and Phloem Export in Source Leaves and the Effects on Sugar Status in Plants // Austr. J. Plant Physiol. 2000. - V. 27. - P. 497 - 505.

394. Korner Ch., Palaez-Riedl S., van Bel A.J.E. CO2 Responsiveness of Plants: A Possible Link to Phloem Loading// Plant Cell Environ. 1995. - V. 18. - P. 595 - 600.

395. Koshimizu K., Kusaki Т., Mitsui T. Isolation of a Cytokinin, (-)-Dihydrozeatin, From Immature Seds of Lupinus luteus // Tetrahedron Letters. 1967. — V. 14. - P. 1317.

396. Kuraishi S. Effects of Kinetin Analogs on Leaf Growth // Sci. Pap. Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo. 1959. - V. 9. - P. 67 - 104.

397. Kuraishi S., Ishikawa F. Relationship between Transpiration and Amino Acids Accumulation in Brassica Leaf Discs Treated with Cytokinin and Fusicoccin // Plant Cell Physiol. 1977. - V. 18. - P. 1273 - 1279.

398. Kuraishi S., Okumura P. The Effect of Kinetin on Leaf Growth // Bot. Mag. (Tokyo). 1956. - V. 69. - P. 300 - 304.

399. Kurkdjian A., Guam J. Intracellular pH: Measurement and Importance in Cell Activity // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1989. - V. 40. - P. 271 - 303.

400. Kuroda M., Ozawa Т., Imagawa H. Changes in Chloroplast Peroxidase Activity in Relation to Chlorophyll Loss in Barley Leal Segments // Physiol. Plant. 1990. - V. 80. -№ 4. - P. 205 - 211.

401. Kursan.ov A.L., Kulikova A.L., Turkina M.V. Aktin-Like Protein from the Phloem of Heracleum sosnovskyi // Physiol. Veget. 1983. - V. 21. - № 3. - P. 353.

402. Kursanow A.L. Uber den EinfluB der Kohlenhydrate auf den Tagesverlauf der Photo-synthese // Planta. 1933. - Bd. 20. - H. 5. - S. 535 - 548.

403. Lagerstedt H.B., Langston R.G. The Mobilizing Force of Kinetin // Life Sci. 1967. -V. 6.-P. 145 - 184.

404. Lambers H. Cyanide-Resistant Respiration: Its Distribution and Physiological Significance // Encyclopedia of Plant Physiol. New Ser. V. 18. / Ed. Douce R., Day D.A., 1985.-P. 328-356.

405. Lang D.J., Langille A.R. Influence of Plant Growth Stage and Concentration of Cytex and Kinetin Applications on Tuber Yields of Two Potato Cultivars // Horz Sci. -1984.-V. 19:-№4: P:582;

406. Lazar G., Fedorcsak J., Solymosy F.E. Fractionation of Nucleic Acids Isolated by the Phenol- and DEP-Methods From Leaf Tissues at Different Stages of Development // Phytochemistry. 1969. - V. 8. - № 12. - P. 2353 - 2366.

407. Leigh R.A. The Role of the Vacuole in the Accumulation and Mobilization of Sucrose // Plant Growth Regul. 1984. - V. 2. - P. 339 - 346.

408. Leigh R.A. The Solute Composition of Vacuoles // Adv. Bot. Res. 1997. - V. 25. -P. 171 - 194.

409. Lenz F. EinfluB der Frucht auf Photosynthese und Atmund // Ztschr. Pflanzenernahr und Bodenk.- 1977.-Bd. 140. -H. 1.-S.51—61.

410. Leonard M., Kinet J.-M. Endogenous Cytokinin and Gibberellin Levels in Relation to Inflorescence in Tomato // Ann. Bot. 1982. - V. 50. - № 1. - P. 127 - 130.

411. Leonard M., Kinet J.-M., Bodson M., Bernier G. Enhanced Inflorescence Development in Tomato by Growth Substance Treatment in Relation to 14C-Assimilate Distribution // Physiol. Plant. 1983. - V. 57. - Fasc. 1. - P. 85 - 89.

412. Leonard O.A. Translocation of Carbohydrates in the Sugar beet // Plant Physiol. — 1939. V. 14. - № 1. - P. 55 - 74.

413. Leonard O.A., King D.L. Vein Loading and Transport in Detached Leaves // Plant Physiol. 1968. - V. 43. - № 3. - P. 460 - 463.

414. Leonard Q.A., Glenn R.K. Translocation of Herbicides in Detached Bean Leaves // Plant Physiol. 1968. - V. 43. - № 9. - P. 1380 - 1388.

415. Letham D.S. Regulators of Cell Division in Plant Tissues. A Comparison of the Activities of Zeatin and Other Cytokinins in Five Bioassays // Planta. 1967. - Bd. 74. - H. 3. - S. 228 - 242.

416. Letham D.S. Zeatin, a Factor Inducing Cell Division from Zea Mays // Life Sci.1963.-V. 8.-P. 569-573.

417. Letham D.S., Palni L.M.S. The Biosynthesis and Metabolism of Cytokinins // Ann. Rev. Plant Physiol, and Plant Mol. Biol. 1983. - V. 34. - P. 163 - 197.

418. Lewis C.E., Noctor G., Causton D., Foyer Ch.H. Regulation of Assimilate Partioning in Leaves // Austr. J. Plant Physiol. 2000. - V. 27. - P. 507 - 519.

419. Lis E.K., Antoszewski R. Do Growth Substances Regulate the Phloem as Well as the Xylem Transport of Nutrients to the Strawberry Receptacle? // Planta. 1982. - V. 156. -№ 6. - P. 492 - 495.

420. Liithen H., Claussen M., Bottger M. Growth: Progress in Auxin Research // Progress in Botany. 1999. - V. 60. - P. 315 - 340.

421. Maass H., Klambt D. Cytokinin Biosynthesis in Higher Plants // Metabolism and molecular activities of cytokinins / Ed. J. Guern, C. Peaud-Lenoel. Berlin — N.-Y.: Springer - Verlag, 1981. - P. 27 - 33.

422. Madore M.A., Oross J.W., Lucas W.J. Symplastic Transport in Ipomoea tricolor Source Leaves // Plant Physiol. 1986. - V. 82. - № 2. - P. 432 - 442.

423. Malek F., Baker D.A. Effect of Fusicoccin on Proton Co-transport of Sugars in the Phloem Loading ofRicinus communis L. // Plant Sci. Lett. 1978. - V. 11. - № 3-4. - P. 233-239.

424. Mariani C.P., Rassio N., Orsenigo M. An Hypothesis on a Possible Regulation of Photosynthesis in Maize Plants Exposed to Continuous Illumination // Caryologia. -1977. V. 30. - № 4. - P. 492 - 493.

425. Маггё E. Fusicoccin: a tool in Plant Physiology // Ann; Rev. Plant Physiol. 1979. -V. 30.-P. 273 -288.

426. Маггё E., Colombo R., Lado P., Rasi-Caldogno P. Correlation Between Proton Extrusion and Stimulation of Cells on Leaf Fragments and Isolated Cotyledons // Plant Sci.1.tt. 1974. - V. 2. - № 3. - P. 139 - 150.

427. Marshner H., Krauss A., Mares D.J. et al. Knolleninduction und endogenen Knol-lenwachstum in Abhangigkeit von exogenen und endogenen Faktoren // Ber. Dtsch. bot Ges. 1984. - Bd 97. - H. 1/2. - S. 269 - 282.

428. Mauk C.S., Bauscher M.G., Yelenosky G. Influence of Growth Regulator Treatments on Dry Matter Production, Fruit Abscission, and ,4C-Assimilate Partitioning in Citrus // J. Plant Growth Regul. 1986. - V. 5. - P. 111 - 120.

429. McCalla D.R., Morre D.J., Osborne D.J. The Metabolism of a Kinin, Benzyladenine // Biochim. Biophys. Acta. 1962. - V. 55. - P. 522 - 528.

430. McWha J.A., Jameson P.E. Are Cytokinins Implicated in Tuberisation in Potato (Solatium tuberosum L.)? // Acta Univer. Agric. (Brno), Fac. Agron. 1985. - V. 33. - P. 467 - 470.

431. Meinl G., Gessler H. Uber den Zusammemhard zwischen dem Volumen und der Oberflache der Kartoffel // Der Zuchter. 1960. - Bd. 30. - H. 70. - S. 117 - 121.

432. Melis R.J.M., Van Staden J. Tuberization and Hormones // Z. PflanzenphysioL -1984.-V. 113.-№3.-P. 271 -283.

433. Mengel K., Judel G.K., Friedrich В., Mocklinghoff G. Starkebildung im Weizenkom im Verlaufe der Kornfullingsphare // Ber. Dtsch. bot Ges. -1984. Bd 97. - H. 1/2. - S.197.210.

434. Menzel C.M. Tuberization in Potato at High Temperatures: Responses to Exogenous Gibberellin, Cytokinin and Ethylene // Potato Res. 1985. - V. 28. - № 2. - P. 263.

435. Meynhardt J., Malan A. Translocation of Sugars in Double Steam Grape Vines // South Africa J. Agric. Sci. 1963. - V. 6. - P. 337 - 338.

436. Michael G. Uber die Beziehungen swisclien Chlorophyll und Eiweibabbau im ver-gilbenden Laubblatt von Tropaeolum // Z. Bot. 1935. - Bd. 29. - H. 3. - S. 385 - 394.

437. Michael G. Uber die Mitwirkung von Phytohormonen an der Regulation der Speicherung-sprozesse im Getreidekom // Ber. Dtsch.bot. Ges. 1984. - Bd. 97. - H. 1/2.-S. 151 - 165.

438. Mikulovich T.P., Wollgiehn R., Khokhlova W.A. et al. Synthesis of Plastid and Cytoplasmic Ribosomal RNA's in Isolated Pumpkin cotyledons. Effect of Cytokinin and Light // Biochem. und Physiol. Pflans. 1978. - Bd. 172. - H. 1/2. - S. 101 - 110.

439. Milburn J.A. Pressure Flow // Encyclopedia of Plant Physiology. New Ser. — V. 1. / Eds. Zimmermann, M.H., Milburn J.A. Berlin: Springer, 1975. - P. 328 - 354.

440. Miller C.O. Kinetin and Kinetin-Like Compounds // Moderne Methoden der Pflan-zenanalyse. Berlin: Springer-Verlag, 1963. - V. 6. - S. 194 - 202.

441. Miller C.O. Kinetin and Related Compounds in Plant Growth // Ann. Rev. Plant Physiol Plant Mol. Biol. 1961b.-V. 12. - P. 395 - 408.

442. Miller C.O., Skoog F., Okumura F., Saltza M. von, Strong F. Isolation, Structure and Synthesis of Kinetin, a Substance Promoting Cell Division // J. Amer. Chem. Soc. -1956.-V. 78.-P. 1375 1380.

443. Miller C.O., Skoog F., Saltza M. von, Strong F. Kinetin: a Cell Division Factor from Deoxyribonucleic Acid // J. Amer. Chem. Soc. 1955. - V. 77. - P. 1392.

444. Miller C.O. Cytokinin Inhibition of Respiration by Cells and Mitochondria of Soybean, Glycine max (L.) Merrill. // Planta. - 1979. - V. 146. - P. 503 - 511.

445. Miller C.O. Cytokinin Inhibition of Respiration in Mitochondria from Six Plant Species // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - V. 77. - P. 4731 - 4735.

446. Miller C.O. Cytokinin Modification of Mitochondrial Function // Plant Physiol. -1982. V. 69. - № 4. - P. 1274 - 1277.

447. Mironov V., Veylder L., van Montagu M., Inze D. Cyclin Dependent Kinases and Cell Division in Plants - the Nexus // The Plant Cell. - 1999. - V.l 1. - №4.-P. 509-521.

448. Mlodrianowski F., Gessella E. Effect of Kinetin and Chloramphenicol on Chlorophyll Synthesis and Chloroplast Development in Detached from Lupin Cotyledons under Low Light Intensity // Acta Soc. Bot. Pol. 1974. - V. 43. - № 1. - S. 149 - 160.

449. Moore Т. C. Regulation of Plant Grown and Development by Endogenous Hormons // Bioregulators for Pest Control. Wash.: Amer. Chem. Soc., 1985. P. 85 -93.

450. Mothes K. Der Beitrag der Kinetinforschung zum Verstandis pflanzlicher Korrela-tionen // Ber. Dtsch. Bot. Ges. 1961. - Bd. 74. - H. 1. - S. 24 - 38.

451. Mothes K. Uber das Altem der Blatter und die Moglichkeit ihrer Wiederveijungung // Naturwissenschaften. 1960. - Bd. 15. - S. 337 - 351.

452. Mothes K., Engelbrecht L., Kulajewa O. Uber die Wirkung des Kinetins auf Stick-stoffverteilung und EiweiBsynthese in isolierten Blattern // Flora. 1959. - Bd. 147 - H. 5. - S. 445 - 464.

453. Mothes K., Engelbreht L., Schutte H.R. Uber die Akkumulation von a-Aminoisobuttersauere im Blattegewebe unter dem EinfluB von Kinetin // Physiol. Plant. 1961.-V. 14. — Fasc. 1.-P.72-75.

454. Mothes K. The Role of Kinetin in Plant Regulation // Colloques Intern. Center Nate. Recherche Sci. 1964. - V. 123.-№1.-P. 131 - 141.

455. Mothes К., Engelbrecht L. Kinetin-Induced Directed Transport of Substances in Excised Leaves in the Dark // Phytochemistry. 1961. - V. 1. - № 1. - P. 58 - 62.

456. Mudrack F. Uber die Assimilaxionstatigkeit und washstum von Ficaria verna II Planta. 1935. - V. 23. - № i2. - S. 71 - 104.

457. Muller K., Leopold A.C. Correlative Aging and Transport of P32 in Corn Leaves under the Influence of Kinetin // Planta. 1966 a. - Bd. 68. - H. 2. - S. 167 - 185.

458. Muller K., Leopold A.C. The Mechanism of Kinetin-Induced Transport in Corn Leaves // Planta. 1966 b. - Bd. 68. - H. 2. - S. 186 - 205.

459. Mulligan D.R., Patrick J. W. Gibberellic Acid — Promoted Transport of Assimilates in Stems of Phaseolus vulgaris L. // Planta: 1979. - V. 145. - H. 3. - P. 232 - 237.

460. Munch E. Die Stoffbewegungen in der Pflanze. Jena: Fischer, 1930. - 235 s.

461. Musgrave, M.E., Siedow J.N. A Relationship between Plant Responses to Cytokinins and Cyanide-Resistant Respiration // Physiol. Plant. 1985. - V.64. - Fasc. 1.-P. 161-166.

462. Naito K., Tsuji H., Hatakeyama I. Effect of Benzyladenine on DNA, RNA, Protein and Chlorophyll Contents in Intact Bean Leaves: Differential Responses to Benzyladenine According to Leaf Age // Physiol. Plant. 1978. - V. 43. - Fasc. 3. - P. 367 - 371.

463. Nakata S., Leopold A.C. Radioautographic Study of Translocation in Bean Leaves // Amer. J. Bot. 1967. - V. 54. - N 4. - P. 769 - 772.

464. Nandi S. K., Letham D. S., Palni L. M; S., Wong О. C., Summons R. E. 6-Benzylaminopurine and Its Glycosides as Naturally Occurring Cytokinins // Plant Sci. -1989b.-V. 61.-P. 189- 196.

465. Nandi S.K., Palni L.M.S., Letham D.S., Wong O.C. Identification of Cytokinins in Primary Crown Gall Tumors of Tomato // Plant Cell Environ.-1989a.-V.12.-P.273-283.

466. Nelson C.D. The Translocation of Organic Compounds in Plants // Canad. J. Bot. -1962. V. 40. - P. 757 - 770.

467. Nitsch J.P., Nitsch C. La Probleme de Taction des auxines sur la division cellulaire: Presence d'um cofacteur de division dans le tubercle de topinambour // Ann. Physiol. Veg. 1960. - V. 2. - P. 261 - 268.

468. Norsberger I., Humphries E.C. The Influence of Removing Tubers in Drymatter Production and Net Assimilation Rate of Potato Plants // Ann. Bot.-1965.-V.29.-P.579-588.

469. Obata-Sasamoto H., Suzuki H. Activities of Enzymes Relating to Starch Synthesis and Endogenous Levels of Growth Regulators in Potato Stolon Tips during Tuberiza-tion // Physiol. Plant. 1979. - V. 45. - P. 320 - 324.

470. Ofifler C.E., Patrick J.W. Cellular Pathway and Hormonal Control of Short-distance Transfer in Sink Regions // Phloem Transport. N.-Y.: Alan R. Liss, 1986. - P.295-306.

471. Okazawa Y. Physiologicab Significance of Endogenous Cytokinin Occured in Potato Tubers During Their Developmental Period // Soc. Jap. 1970. - V.39. - №2.-P:171-176.

472. Olufaio O.O:, Daniels R.W.S., Carisbrick D.H. The Effect of Pod Removal on the Translocation of^^^14C-Photosynthates From Leaves of Phaseolis vulgaris L. cv. Lochness //J. Hort. Sci. 1982. - V. 57. - № 3. - P. 333 - 338.

473. Oparka K.J., Santa Cruz S.S. The Great Escape: Phloem Transport and Unloading of Macromolecules // Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 2000. - V.51. - P.323-347.

474. Oparka К.J., Turgeon R. Sieve Elements and Companion Cell-Traffic Control Cen-•> ters of the Phloem // Plant Cell. 1999. - V. 11. - P. 739 - 750.

475. Osborne D.J. Effect of Kinetin on Protein Synthesis and Nucleic acid Metabolism in Xanthium Leaves During Senescence // Plant Physiol. 1962. - V. 37. - №5. - P.595-602.

476. Palit P., Kundu A., Mandal R. K. et al. Source-Sink Control of Dry Matter Production and Photosynthesis in Rice Plant after Flowering // Indian J. Plant Physiol. 1979. -V. 22.-№2.-P. 87-91.

477. Palmer C.E., Barker W.G. Influence of Ethylene and Kinetin on Tuberization and Enzyme Activity in Solanum tuberosum L. stolons Cultured in vitro // Ann. Bot. 1973. - V. 37.-№ 1.-P. 85-931

478. Palmer C.E., Smith O.E. Cytokinins and Tuber Initiation in the Potato Solanum tuberosum L. И Nature. 1969 a. - V. 221. - № 5177. - P. 175.

479. Palmer C.E., Smith O.E. Effect of Abscisic Acid on Elongation and Kinetin Induced Tuberization of Isolated Stolons of Solanum tuberosum L. Cultured in vitro И Plant, Cell Physiol. 1969 b. - V. 10. - № 3. - P. 657 - 664.tr

480. Palmer C.E., Smith O.E. Effect of Kinetin on the Tuber Formation on Isolated Stolons of Solanum tuberosum L. Cultured in vitro // Plant, Cell Physiol. 1970. - V. 11. -№ 3. - P. 303 -314.

481. Palmer M.V., Scott I.M., Horgam R. Cytokinin Metabolism in Phaseolus vulgaris L. II. Comparative Metabolism of Exogenous Cytokinins by Detached Leaves // Plant Sci. Lett. 1981. - V. 22. - № 2. - P. 187 - 195.

482. Palmgren M.G. Proton Gradients and Plant Growth: Role of the Plasma Membrane H+-ATPase // Adv. Bot. Res. 1998. - V. 28. - P. 1 - 70.

483. Parthier В., Lerbs C., Lenmann J., Wollgiehn R. Cytokinin Controlled Expression in Pumpkin Cotyledons // Biologia Plantarum. - 1995. - V. 27. - № 1. - P. 131 - 138.

484. Parthier В., Malaviya В., Mothes К. Effects of Chloramphenicol and Kinetin on Uptake and Incorporation of Amino Acids by Tobacco Leaf Disks // Plant Cell Physiol. -1964. V. 5. - № 4. - P. 401- 413.

485. Pate J.S., Gunning B.E.S. Transfer Cells // Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1972.-V. 23.-P. 173- 196.

486. Pate J.S., Gunning B.E.S. Vascular Transfer Cells in Angiosperm Leaves a Taxo-nomic and Morphological Survey // Protoplasma. - 1969. - V. 68. - № 2. - P. 135 - 156.

487. Patrick J. W. Auxin Promoted Transport of Metabolites in Stems of Phaseolus vulgaris L. Further Studies on Effects Remote from Hormone Application // J. Exp. Bot. -1979.-V. 30.-№ 114.-P. 1 - 13.

488. Patrick J.W. Sieve Element Unloading: Cellular Pathway, Mechanism and Control // Physiol. Plant. 1990. - V. 78. - Fasc. 2. - P. 298 - 308J

489. Penot M. Etude de la Migration Orientee du 14C dans le Liber de Tradescantia viridis IIC. R. Akad. Sci. Paris. 1966. - V. 262. - P. 874 - 877.

490. Penot M. Etude du Role des Appels Moleculaires dans la Circulation Liberienne // Theses Fac. Sci. Univ. Strasburg, Paris. 1965. - P. 1-49.

491. Penot M. Mouvements liberiens du phosphore lies a l'appel de cinetine // C. r. Acad, sci. Paris. 1963. - V. 256. - P. 488 - 490.

492. Penot M., Beraud J:, Poder D. Relationship between Hormonedirected Transport and Transpiration in Isolated Leaves of Pelargonium zonale (L.) // Aiton. Physiol. Veg. -1981.-V. 19.-№3:-Р. 391 -399.

493. Peterson R.L., Barker W.A., Howarth M:J. Development and Structure of Tubers // Potato Physiology / Ed. Li P.H. N.-Y.: Academic Press, 1985. - P. 123- 152.

494. Peterson R.L., Yeung E.G. Ontogeny of Phloem Transfer Cells in Hieracium floribundum II Can. J. Bot. 1975. - V. 53. - № 6. - P. 2745 - 2758.

495. Pollock С. J., Lloyd E.J. The Distribution of Acid Invertase in Developing Leaves of Lolium temulentum L. // Planta. 1977. - V. 133. - P. 197 - 200.

496. Penot M. Hormone-Directed Transport in Detached Leaf- Phytohormonal Competition // Symp. on Growth Regulators in Fruit Production, Poland 16-22 September 1977. -Acta Horticultural. 1978. - № 80. - P. 75 - 77.

497. Ray S., Choudhuri M. A. Effects of Plant Growth Regulators on Grain-filling and Yield of Rice//Ann. Bot. 1981.-V. 47.-P. 755-758.

498. Regulation of Development. I. Molecular Aspects of Plant Hormones // Encyclopedia of Plant Physiology. New Ser. - V. 9. / Ed. Millan J. Mac. - Berlin et al.: Springer-Verlag, 1980. - P. 513 - 541.

499. Renfroe M.H:, Brown R.W. Changes in Cytokinin Concentration during Early Development of American Sycamore Leaves // Can. J. Bot. 1983. - V. 61. - P. 1931-1934.

500. Richmond A.A., Lang A. Effect of Kinetin on Protein Content and Survival of De-tachedXanthium Leaves // Science. 1957. - V. 125. - №-3249. - P. 650 -651.

501. Rijven A.H.G.C., Evans L.T. Inflorescence Initiation in Lolium temulentum L. X. Changes in 32P 1псофога^оп into Nucleic Acids of the Shoot Apex at Induction // Austral. J. Biol. Sci: 1967. - V. 20: - P; 13 - 24.

502. Roitsch Т., Bittner M., Gadt D.E. Induction of Apoplastic Invertase of Chenopodium rubrumby D-Glucose and a Glucose Analog and Tissue-Specific Expression Suggest a Role in Sink-Source Regulation // Plant Physiol. 1995. - V. 108. - P. 285 - 294.

503. Ronzhina E. The Possible Mechanism of Cytokinin-Directed Transport in Detached Leaves // XVth Intern. Botanical Congress (Japan, Tokyo, August 28 September 3, 1993). - Tokyo, 1993. - P. 458.

504. Ronzhina E.S. The Effect of BAP and IAA on the Distribution of 14C-sucroce in Detached Leaves // Vlh International Youth Symposium on Plant Metabolism Regulation (Bulgaria, Varna, October 8 13, 1990). - Abstracts. - Varna, 1990. - P. 75.

505. Ronzhina E.S. Cytokinins and Potato Productivity // Plant Nutrition. Growth and Diagnosis / Eds. Dris R., Abdelaziz F.H., Jain S.M. — Enfield, Plymouth: Science Publisher. 2002 a. - P. 63 - 66.

506. Ronzhina E.S. Sink Activity of Cytokinins and Plant Productivity // Plant Physiology: Characteristics, Breeding, and Genetics / Eds: Dris R., Barry-Ryan C. -Enfield, Plymouth: Science Publisher. 2002b. - P. 38 - 42.

507. Rovira A.D., Bowen G.D. The Influence of Root Temperature on ,4C-Assimilate Profiles in Wheat Roots // Planta. 1973. - V. 114. - № 1. - P. 101 - 107.

508. Saha S., Nagar P.K., Sircar P.K. Cytokinin Concentration Gradient in the Developing Grains under Upper Leaves of Rice (Oryza sativa) During Grain Filling // Can. J. Bot. — 1986. V. 64. - P. 2068 - 2072.

509. Satler O., Thimann K. Metabolism of Out Leaves During Senescence // Plant Physiol. 1983. - V. 71. - № 1. - P. 67 - 70.

510. Sattelmacher C.M., Marschner H; Cytokinin Activity in Stolons and Tubers of Solatium tuberosum during the Period of Tuberization // Physiol. Plant. 1978. - V. 44. -Fasc. 1.-P. 69 -72.

511. Sattelmacher В., Marschner H. Cytokinin Activity in Stolons and Tubers of Solatium tuberosum during the Periods of Tuberization // Physiol. Plant. 1978. - V. 44.-P.60-79.

512. Schmalstig J.G., Geiger D.R. Phloem Unloading in Developing Leaves of Sugar Beet. I. Evidence for Pathway Through the Symplast // Plant Physiol. 1985. - V. 79. -№2.-P. 237- 241.

513. Schmalstig J.G., Geiger D.R. Phloem Unloading in Developing Leaves of Sugar Beet.II.Termination of Phloem Unloading // Plant Physiol.-1987.-V.83.-№ l.-P. 49-52.

514. Schmalstig J.G., Geiger D.R., Hitz W.D: Pathway of Phloem Unloading in-Developing Leaves of Sugar beet // Phloem Transport. N.Y.:Alan R. Liss, 1986.-P. 231-237.

515. Schmitz K., Cuypers В., Moll M. Pathway of Assimilate Transfer between Meso-phyll Cells and Minor Veins in Leaves of Cucumis melo L. // Planta. 1987. - V. 171.l.-P. 19-29.

516. Schnepf E., Pross E. Differentiation and Redifferentiation of a Transfer Cell: Development of Septal Nectaries of Aloe and Gasteria // Protoplasma. 1976. - V. 89. - № 1. -P. 105-121.

517. Schulz A. Phloem. Structure Related to Function // Progress in Botany. 1998. - V. 59.-P. 429-475.

518. Scott R.A., Livermann I.L. Promotion of Leaf Expansion by Kinetin and Bensylami-nopurine // Plant Physiol. 1956. - V. 31. - № 4. - P. 321 - 322.

519. Sembdner G., Herrmann G., Schliemann W. Growth // Progress in Botany. 1992. -V. 53.-P. 99-125.

520. Setter T.L., Brun W.A. Abscisic Acid Translocation and Metabolism in Soybeans Following Depodding and Petiole Girdling Treatments // Plant Physiol. 1981. - V. 67. -№4.-P. 774 -779.

521. Setter T.L., Brun W.A., Brenner M.L. Stomatal Closure and Photosynthetic Inhibition in Soybean Leaves Induced by Petiole Girdling and Pod Removal // Plant Physiol.г/1980. V. 65. - № 5. - P. 884 - 887.

522. Shaw M., Manocha M.S. Fine Structure in Detached, Senescing Wheat Leaves // Can. J. Bot. 1965. - V. 43. - № 6. - P. 747 - 755.

523. Shindy W.W, Weaver R.J. Export of Photosynthate Affected When Leaves are Pre-treated With Griwth Substances // Nature. 1970. - V. 227. - № 5255. - P. 301.

524. Shindy W.W., Kliewer W.M., Weaver R.J. Bezyladenine-induced Movement of 14C-labelled Photosynthate into Roots of Vitis vinifera //Plant Physiol. 1973. - V. 51. - № 2.-P. 345-349.

525. Shiroya M., Lister G.R., Nelson C.D., Krotkov G. Translocation of 14C in Tobacco at

526. Different Stages of Development Following Assimilation of 14СОг by a Single Leaf//

527. Can. J. Bot. 1961. - V. 39. - № 3. - P. 855 - 864.

528. Shrank A. R. Stimulation of Avena Coleoptile Growth by 6 (Substituted) Thio- and Amino- purines // Arch. Biochem. Biophys. 1958. - V. 77. - P. 258 - 267.

529. Sigma-Aldrich Catalog: USA,Canada, 2002-2003. 2896 p.

530. Singh B.N., Lai M.B. Investigation of the Effect of Age on Assimilation of Leaves // Ann. Bot. 1935. - V. 49. - № 3. - P. 291 - 307.

531. Sjolund R.D. The Phloem Sieve Elements. A River Runs through It // Plant Cell. -1997.-V. 9.-P. 1137-1146.

532. Skoog F., Miller C.O. Chemical Regulation of Growth and Organ Formation in Plant Tissues Cultured in vitro II The Biological Action of Growth Substances. Symp. Soc. Exp. Biol. Cambridge: Cambridge Univ. Press, 1957. V. 11. - P. 118 - 131.

533. Smith O.E., Palmer C.E. Cytokinin Indused Tuber Formation on Stolons of Solanumtuberosum И Physiol. Plant. 1970. - V. 23. - Fasc. 4. - P. 599 - 606.

534. Smith R.A, Raven J.A. Intracdiular pH and Its Regulation // Ann. Rew. Plant Physiol. 1979. - V. 30. - P. 289 311.

535. Sommer N. Longitudinal and Lateral Response of Etiolated Pea Sections to Indoleacetic Acid, Gibberellin, Kinetin, Sucrose and Cobaltous Chloride // Physiol. Plant. 1961. - V. 14. - Fasc. 6. - P. 741 - 749.

536. Sonnewald U., Willmitzer L. Molecular Approches to Sink-Source Interactions // Plant Physiol. 1992. - V. 54. - № 6. - P. 1267 - 1270.

537. Sovonick S.A., Geiger D.R., Fellows R.J. Evidence for Active Phloem Loading in the Minor Veins of Sugar beet // Plant Physiol. 1974. - V. 54. - № 6. - P. 886 - 891.

538. Spence I.A., Humphries E. С. Effect of Moisture Supply, Root Temperature and Growth Regulators on Photosynthesis of Isolared Rooted Leaves of Sweet Potato // Ann. Bot. 1972.-V. 36.-№144.-P. 115 - 121.

539. Srivastava B.I.S., Arglebe C. Effect of Kinetin on Ribosomes of Excised Barley Leaves // Physiol. Plant. 1968. - V. 21. - № 4. - P. 851 - 857.

540. Srivastava B.I.S., Arglebe C. Studies on Ribosomes from Barley Leaves. Changes During Senescence // Plant Physiol. 1967. - V. 42. - № 11 - P. 1497 - 1503.

541. Starck S. Photosynhesis and Endogenous Regulation of the Source-Sink Relation in Tomato Plants // Photosynthetica. 1983. - V. 17. - № 1. - P. 1-11.

542. Stella L. The Pattern of Translocation During Leaf Aging // Symp. Soc. Exp. Biol. -1967.-V. 21.-P. 438-488.

543. Stillwell W., Hester P. Kinetin Increases Water Permeability of Phosphatidylholine Lipid Bilayers // Plant Physiol. 1983. - V. 71. - № 3. - P. 524 - 530.

544. Stitt M. Plasmodesmata Play an Essential Role in Sucrose Export from Leaves: A Step towards an Integration of Metabolic Biochemistry and Cell Biology // Plant Cell.1996.-V. 8.-P. 565 571.

545. Strnad M. Enzyme Immunoassays of N^-Benzyladenine and N6-(we/a-Hydroxy-benzyl)adenine Cytokinins // J. Plant Growth Regul. 1996. - V. 15. - P. 179 - 188.

546. Strnad M. The Aromatic Cytokinins // Physiol. Plant. 1997. - V. 101. - P. 674 - 688.

547. Sugiura M., Umemura K., Oota Y. The Effect of Kinetin on Protein Level of Tobacco Leaf Disks // Physiol. Plant. 1962. - V. 15. - № 4. - P. 457 - 464.

548. Supniewski J., Krupinski J., Supniewska H., Wall aw В. The Biological Properties of Kinetine and Thiokinetine // Bull. Acad, polon. sci. 1957. - V. 5. - P. 19.

549. Suzuki M., Mortimer D. Sugar Concentration Gradients of the Sugar Beet Plant in Relation to Translocation // Gan. J. Bot. 1973. - V. 51. - № 8. - P. 1733 -1739.

550. Sweet G., Wareing T. Role of Plant Growth in Regulation of Photosynthesis // Nature. 1966. - V. 210. - № 1. - P. 105 - 107.

551. Tanaka, A., Kawano, K., Yamaguchi, J. Phytosynthesis, Respiration and Plant Type of the Tropical Rice Plant //IRRI Tech. Bull. 1966. - № 7.

552. Tanaka, A., Yamaguchi, J. Dry Matter Production, Yield Components and Grain Yield of the Maize Plant// J. Fac. Agric. Hokkaido Univ. 1972. - V. 57. - P. 71 - 132.

553. Taneja R., Varma S.K., Dayal J., Datta K.S. // Biologia Plantarum. 1992. - V. 34. -№ 1-2.-P. 85-91.

554. Tanner W. On the Possible Role of Abscisic Acid on Phloem Unloading // Ber. Dtsch. bot. Ges. 1980. - Bd. 93. - S. 349 - 351.

555. Tao G.Q., Letham D.S., Palni L.M.S. Summons R.E. Cytokinin Biochemistry in Relation to Leaf Senescence. I. The Metabolism of 6-Benzylaminopurine and Zeatin in Oat Leaf Segments // J. Plant Growth Regul. 1983. - V. 2. - № 2. - P. 89 - 102.

556. Tavares J., Kende H. The Effect of 6-Benzylaminopurine on Protein Metabolism in Senescing Corn Leaves // Phytochemistry. 1970. - V. 9. - № 8. - P. 1763 - 1770.

557. Thimann K.V., Satler S.O., Trippi V. Further Extension of the Syndrome of Leaf Senescence // Plant growth substances (Ed. P.F. Wareing). London: Academic Press, 1982. - P. 539 - 548.

558. Thome G. N., Evans A. F. Influence of Tops and Roots on Net Assimilation Rate of Sugar-Beet and Spinach Beet and Grafts between Them // Ann. Bot. (Gr. Brit.). 1964. -V. 28. -№ 12.-P. 499- 508.

559. Thome G.N., Koller H.R. Influence of Assimilate Demand on Photosynthesis, Diffuse Resistances, Translocation and Carbohydrate Levels of Soybean Leaves // Plant Physiol. 1974. - V. 54. - № 2. - P. 201 - 207.

560. Thorpe M.R., Minichin P.E.H. Mechanisms of Long- and Short-Distance Transport from Sources to Sinks // Photoasimilates Distribution in Plants and Crops / Eds. Zamski E., Schaffer A.A. N.-Y.: M; Dekker, 1996. - P. 261 - 282.

561. Thorpe M.R., Lang A., Minchin P.E.H. Short Term Interactions Between flows of Photosynthate // J. Exp. Bot. 1983. - V. 34. - № 138. - P. 10 - 19.

562. Thrower S.L. Translocation of Labelled Assimilates in the Soybean. III. Translocation and Other Factors Affecting Leaf Growth // Austral. J. Biol. Sci. 1964. - V. 17. -№2.-P. 412 -426.

563. Tietz A., Ludewig M., Dingkuhn M., Dorffling K. Effect of Abscisic Acid on the Transport of Assimilates in Barley // Planta. 1981. - Bd. 152. - H. 6. - S. 557 - 561.

564. Tizio R. Presence de kinines dans la periderme de tubercles de pomme de terre // C. R. Acad. Sci. 1966. - V. 262. - P. 868 - 869.

565. Trecharne K.I., Stoddardt I.L. Effect of Gibberellin on Photosynthesis in Red Clover // Nature. 1968. - V.220. - № 5166. - P. 457 - 458.

566. Trip P.M. Sugar Transport in Conduction Elements of Sugar beet Leaves // Plant Physiol. 1969. - V. 44. - № 5. - P. 717 - 725.

567. Trippi V., Thimann K. The Exudation of Solutes during Senescence of Oat Leaves // Physiol. Plant.- 1983.-V. 58.-№ 1.-P. 21-28.

568. Turgeon R. Termination of Nutrient Import and Development of Vein Loading Capacity in Albino Tobacco Leaves // Plant Physiol. 1984. - V. 76. № 1. - P. 45 - 48.

569. Turgeon R. The Import Export Transition in Dicotyledonous Leaves // Phloem Transport. - N. Y.: Alan R. Liss, 1986. - P. 285 - 291.

570. Turgeon R. The Sink Source Transition in Leaves // Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. - 1989. - V. 40. - P. 119 - 138.

571. Turgeon R., Hepler P.K. Symplastic Continuity between Mesophyll and Companion Cells in Minor Veins of Mature Cucurbita pepo L. leaves // Planta. 1989. — Bd. 179. -H I. - S. 24 - 31.

572. Turgeon R., Webb J.A. Leaf Development and Phloem Transport in Cucurbita pepo: Transition From Import to Export // Planta. 1973. - Bd. 113. - H. 2. - P. 179 - 191.

573. Turgeon R., Webb J.A. Leaf Development and Phloem Transport in Cucurbita pepo: Maturation of the Minor Veins // Planta. 1976. - V. 129. - № 3. - P. 265 - 269.ft

574. Turgeon R., Webb J.A., Evert R.F. Ultrastructure of Minor Veins in Cucurbita pepo Leaves // Protoplasma. 1975. - V. 83. - № 3. - P. 217 - 232.

575. Turvey PM. Patrick J.W. Kinetin-promoted Transport of Assimilates in Stems of Phaseolus vulgaris L. Localized Versus Remote Site(s) of Action // Planta. 1979. - V. 147.-№2.-P. 151 - 155.

576. Tyree M.T. The Symplast Concept. A general Theory of Symplastic Transport according to the Thermodinamics ofTrreversible Processes // J. Theor. Biol. 1970. - V. 26.-P. 181-214.

577. Тутее M.T., Christy A.L., Ferrier J.M. A Simpler Interative Steady State Solution of

578. Miinch Pressure-Flow Systems Applied to Long and Short Translocation Paths // Plant

579. Physiol. 1974. - V. 54. - № 5. - P. 589 - 600.

580. Van Bel A.J.E. The Transport Phloem. Specifics of its Functioning // Progress in Botany. 1993.-V. 54.-P. 134- 150.

581. Van Dobben A. Influence of Temperature and Light Conditions on Dry Matter Distribution, Development Rate and Yield in Arable Crops // Netherl. J. Agric. Sci. 1962. V. 10.-P. 377 - 389.

582. Van Kesteren W.J.P., van der Sclioot G., van Bel A.J.E. Symplastic Transfer of Fluorescent Dyes from Mesophyll to Sieve Tube in Stripped Leaf Tissue and Party Isolated Minor Veins of Commellna benghalensis И Plant Physiol.-1988.-V.88.-№3.-P.667-670.

583. Van Staden J. Seasonal Changes in the Cytokinin Content of Ginkgo biloba Leaves // Physiol. Plant. 1976. - V. 38. - Fasc. 1: - P. 1 - 5.

584. Van Staden J. Seasonal Changes in the Cytokinin Content of the Leaves of Salix babylonicall Physiol. Plant. 1977. - V. 40. - Fasc. 4. - P. 296 - 299.

585. Van Staden J., Dimalla G.G. The Distribution of Cytokinins in Tuberiring Potatoes // Ann. Bot. 1977. - V. 41. - № 174. -P.11 - 13.

586. Vanderhoef L., Key J. Inhibition of Kinetin of Cell Elongation and RNA Synthesis in Excised Soy bean Hypocotyl // Plant Cell Physiol. 1968. - V. 9. - P. 343 -351.

587. Vonk C.R., Ribot S.A. Assimilate Distribution and the Role of Abscisic Acid and Zeatin in Relation to Flower-Bud Blasting Induced by Lack of Light, in Iris cv. Ideal I I Plant Growth Regul. 1982. - V. 1. - № 2. - P. 93 - 105.

588. Vreugdenhil D. Abscisic Acid Inhibits Phloem Loading of Sucrose // Physiol. Plant. -1983. V. 57. - № 4. - P. 463 - 467.

589. Walker A.J., Thomley J.H.M The Tomato Fruit: Import, Growth, Respiration and Carbon Metabolism at Different Fruit Sizes and Temperatures // Ann. Bot. 1977. - V. 41.-№6.-P. 977-985.

590. Wang R., Rom C. R. Effects of 6-Benzyladenine on Gas Exchange and Spur Development of'Delicious' apple // Hort. Science. 1987. - V. 22. - P. 1036.

591. Wardlaw I. F., Porter H. K. The Redistribution of Stem Sugars in Wheat During Grain Development // Austral. J. Biol. Sci. 1967. - V. 20. - P. 309 - 318.

592. Wardlaw I.F. The Control and Pattern of Movement of Carbohydrates in Plants // Bot. Rev.- 1968. V. 34. - № 1. - P. 79 - 105.

593. Wardlaw I.F., Moncur L. Sucrose, Sink and Hormonal Control of Translocation in Wheat// Planta. 1976. - Bd. 128. -H. 1. — P. 93 - 100.

594. Warmbrodt R.D. Solute Concentrations in the Phloem and Assosiated Vascular and Ground Tissues of the Root of Hordeum vulgare L. // Phloem Transport. N.-Y.: Alan R. Liss, 1986. P. 935 - 944.

595. Weaver R.J., Shindy W.W., Kliewer W.M. Growth Regulator Induced Movement of Photosynthetic Products into Fruits of "Black Corinth" Grapes // Plant Physiol. 1969.

596. V. 44. № 2. - P. 183 - 186.

597. Wendy В., Bidwell R.C.S. Rates of Photosynthesis in Attached and Detached Leaves // Plant Physiol. 1965. - V. 40. - № 3. - P. 446 -451.

598. Whitty C.D., Hall R.H. A Cytokinin Oxidase in Zea mays И Can. J. Biochem. 1974. - V. 52. - P. 789 - 799.is

599. Wittwer S.H., Dedolph R.R. Some Effects of Kinetin on the Growth and Flowering of Intact Green Plants // Amer. J. Bot. 1963. - V. 50. - P. 330.

600. Wojcieska U., Szczypa E. Transport asymilatow wytworzonych w poszczegolnych organach roslin zbozowych w roznych fazach wzrostu i rozwoju // Pamietn. Pulaw. -1975. № 62. - S. 61 - 67.

601. Wollgiehn R. Untersuchungen uber den Einfluss des Kinetins auf den Nucleinsaure und Proteins toffwechsel isolierter Blatter // Flora. - 1961. - Bd.151. - H.3. - S.411-437.

602. Wolswinkel P. Phloem Unloading and Turgor-Sensitive Transport: Factors Involved in Sink Control of Assimilate Partitioning // Physiol. Plant. 1985. - V. 65. - Fasc. 3. — P. 331-339.

603. Wood A., Bradbeer J.M. Nucleic Acid of Senescent Bean Leaves // Biochem. J. -1966. V. 98. - № l.-P. 32-38.

604. Woodvard R. G., Rawson H. M: Photosynthesis and Transpiration in Dicotylen-donous Plants // Austral. J. Plant Physiol. 1976. - V. 3. - № 3. - P. 257 - 267.

605. Wyse R.E., Saftner R.A. Reduction in Sink-mobilization Ability Following Periods of Hight Carbon Flux Treatments // Plant Physiol. 1982. - V. 69. - № 1. - P. 226 - 228.

606. Wyse R.E., Saftner R.A. Reduction in Sink-Mobilizing Ability following Periods of High Carbon Flux // Plant Physiol. 1982. - V. 69. - № 1. - P. 226 - 228.

607. Ying Z.-H., Heber U., Raghavendra A.S. Light-Depended pH Changes in Leaves of C4-Plants. I. Cytosolic Alkalization and Vacuolar Acidification in Comparison of C3-Plants // Planta. 1993. - Bd. 189. - H. 3. - S. 278 - 287.

608. Ying Z.-H., Neimanis S., Wagner U., Heber U. Light-Depended pH Changes in the Leaf Mesophyll of C3-Plants. I. Recording pH Changes in Different Cellular Compartments of Leaves by Fluorescent Probes // Planta. 1990. - Bd.182. - H.2. - S.244-252.

609. Zhang K., Letham D. S., John P.C.L. Cytokinin Controls the Cell Cycle at Mitosis by Stimulating the Tyrosine Dephosphorylation and Activation of P34 cdc2 like HI Histon Kinase// Planta. 1996. - Bd. 200. - H. 1. - S. 2 - 12.

610. Zhu X. R., Matsumoto K. Absorption and Translocation of 6-Benzylaminopurine in Satsuma (Citrus unshiu Marc.) Trees // J. Jpn. Soc. Hortic. Sci.-1987.-V.56.-P.159-165.

611. Ziegler H. Die Physiologgie pflanzlicher Drusen // Ber. Dtsch. bot. Ges. 1965. - Bd. 78. - S. 466 - 477.