Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Цитохимия кальция в нейронах виноградной улитки (анализ изменений содержания кальция при действии катионов разной валентности на изолированный ганглий)

ВАК РФ 03.00.17, Цитология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Смильгявичюс, Людас-Альгирдас Домининкович

ВВЕДШИЕ. б

ГЛАВА I.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

IЛ.Содержание ионов в клетках и во внеклеточной среде.

1.2.Зависимость содержания кальция в клетках от ионного состава среды.

1.3.Механизмы регуляции транспорта ионов через мембраны.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект.

2.2. Приготовление препарата для исследований.

2.3.Методика количественно определения содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов виноградной улитки

2.4.Методика определения АТФазной активности выделенной фракции плазматических мембран нейронов виноградной улитки.

2.5. Растворы.

2.6.Статистическая обработка экспериментальных данных.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1.Изучение зависимости содержания связанного в ядре и цитоплазме и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций Са**+, одновалентных катионов и температуры среды.

3.1.1.Зависимость содержания связанного кальция в ядре нейронов от внеклеточных концентраций Са и времени инкубации.

3.1.2.Зависимость содержания связанного кальция в цитоплазме нейронов от внешних концентраций Са^+ и времени инкубации.

3Л.3.Изменение содержания общего кальция в ганглиях виноградной улитки в зависимости от внешних концентраций кальция и времени инкубации.

ЗЛ.4.Изменение содержания связанного кальция в-ядре и цитоплазме нейронов виноградной улитки от температуры.

3Л.5.Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов от внешних концентраций ионов натрия ЗЛ.6.Зависимость содержания общего кальция в нейронах улитки от внеклеточных концентраций ионов натрия.

ЗЛ.7.Зависимость содержания связанного кальция в ядрах и цитоплазме нейронов от концентрации ионов лития в окружающей среде.

ЗЛ.8.Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов и содержания общего кальция в ганглиях от концентрации ионов калия в окружающей'среде. 65 3.2.Зависимость содержания связанного и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций ионов стронция,магния, бария, кадмия.

3.2.1.Зависимость содержания общего кальция в нейронах от концентрации ионов стронция в среде.

3.2.2. Влияние концентрации ионов магния в среде на содержание общего кальция в нейронах улитки.

3.2.3. Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов, а также содержания общего кальция в нейронах от внешней концентрации ионов бария.

3.2.4. Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме и количества общего кальция в нейронах от внешних концентраций ионов кадмия.

3.3. Изменение содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов и содержания общего кальция в ганглиях от ионов лантана.

3.4. Зависимость содержания связанного и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций ионов никеля и кобальта.

3.4.1.Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций ионов никеля и времени инкубации ганглиев.

3.4.2. Зависимость активности М*+-К+ - АТФазы мембран нейронов виноградной улитки от внешних концентраций ионов никеля.

3.4.3.Зависимость содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов от внеклеточных концентраций ионов кобальта.

3.5. Сезонные изменения содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов и содержания общего кальция в ганглиях виноградной улитки.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Зависимость содержания связанного в ядре, цитоплазме и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций кальция, одновалентных катионов и температуры.

4.1.1.Анализ экспериментальных данных о связывании кальция нейронами в зависимости от внеклеточных концентраций кальция на основе адсорбционной модели.

4.1.2. Зависимость содержания кальция в нейронах от температуры.

4.2. Зависимость содержания связанного и общего кальция в нейронах от внеклеточных концентраций ионов бария,стронция, кадмия, магния

4.3. Влияние ионов лантана на внутриклеточное содержание ионов кальция.

4.4. Влияние внеклеточных концентрация ионов никеля и кобальта на • содержание кальция в нейронах улитки.

4.5. Сезонные колебания содержания связанного и общего кальция в нейронах улитки.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Цитохимия кальция в нейронах виноградной улитки (анализ изменений содержания кальция при действии катионов разной валентности на изолированный ганглий)"

Данные последних лет свидетельствуют о том, что ионы кальция играют важную роль в таких биологических процессах, как рост и дифференцировка клеток ( Божкова В.П. и соавт., 1977; Буровина И.В. и соавт., 1982; Мусиенко B.C. и соавт., 1982), внутриклеточный метаболизм (sulakhe P.V. et al , 1980), перенос электрических зарядов через плазматическую мембрану нервных и мышечных клеток во время генерации потенциала действия (Hagiwara s.,1974), взаимодействие актина и миозина и уровень секреторной активности клеток (Орлов С.Н. и соавт., 1982). Особенно выражена роль Са^+ в системе циклических нуклеотидов, осуществляющей передачу гормональных и нервных сигналов от внешней мембраны клетки ¡к внутренним цитоструктурам, в том числе к клеточному ядру. Ионы кальция необходимы для действия гормонов (Rasmussen Н. et al, 1974) и синтеза РНК в нервной ткани (Вепринцев Б.Н., 1971; Третьяк Н. Н., 1982). Высказывается предположение об участии в регуляции транскрипции при функциональной активности нервных клеток (Разумовская Н.И. и соавт., 1981). Ионы кальция оказывают стабилизирующее влияние на мембраны и их проницаемость (Ясайтис А.А., 1973; Rose Б. et al, 1975).

Управление этими процессами может осуществляться, по-видимор, му, только благодаря тонкой регуляции уровня самого Са в разных участках клетки. Для поддержания низкой концентрации внутри

7 R клеточного ионизированного кальция (10-10 М), в то время как во внеклеточной среде концентрация равна М (Baker P.P. et al«, 1978клетка использует специальные системы транспорта и связывания ионов (Лазарев А.В. и соавт., 1982).

Участие ядер в регуляции внутриклеточной концентрации Са^+ в клетках и, в частности, нервных почти не изучено, несмотря на 2+ то, что содержание ионов Са в ядрах значительно повышает их содержание в цитоплазме. Не выявленными остаются закономерности распределения ионов кальция между ядром и цитоплазмой в нейронах.

Отклонение содержания кальция в клетках от нормы приводит к развитию не только функциональных, но и морфологических нарушений в деятельности многих органов и систем организма (биологическая кальцификация тканей, кальциноз сосудов, атеросклероз и т.д.). Для этого важным представляется определить насколько изменения ионного состава среды отражаются на распределение содержания кальция в цитоструктурах, на его содержании в клеточных ядрах и цитоплазме.

Хорошей моделью для таких исследований служат большие нервные клетки взрослых моллюсков.

Адекватным методом исследования может быть только цитохимический, позволяющий не только идентифицировать нейроны, но также определить содержание веществ в ядре и цитоплазме целой клетки.

Цель настоящей работы заключалась в определении зависимости изменений содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов и общего клеточного кальция в нейронах виноградной улитки от ионного состава внеклеточной среды.

Решались следующие задачи: I) выяснить возможности применения эриохрома черного Т для количественного определения содержа* ния связанного кальция в нейронах методом цитофотометрии; 2) оп^ ределить в ядре и цитоплазме изменения содержания связанного кальция и общего клеточного кальция в нейронах в зависимости от внекле точных его концентраций и температуры среды; 3) определить в ядре и цитоплазме изменения количества связанного кальция и в нейронах количества общего кальция от наличия в среде инкубации ионов разной химической природы м4", к4", м4", Бг24", Ва24\ са2*,Мв2? Са24',Со24',М24',Ъа-34'}4) исследовать влияние ионов никеля на Яа4"-к4" -АТФазную активность мембран нейронов; 5) построить математическую модель, описывающую зависимость изменений содержания кальция в клетке от ионного состава среды.

В результате проведенных исследований осуществлены сравнительные измерения содержания кальция в ядре и цитоплазме целых нейронов и общего кальция в нейронах от ионного состава внешней среды, температуры и времени инкубирования ганглиев. Предложена кинетическая модель зависимости содержания кальция в нейронах от катионного состава среды инкубации ганглиев. Показано, что в нейронах имеются два типа мест, связывающих ионы кальция: лабильно связывающие, на которых адсорбированный кальций замещается другими катионами и прочно связывающие, на которых кальций не замещается.

Впервые установлена волнообразная форма кривой зависимости количества связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов от внеклеточной концентрации ионов никеля и кобальта. Выявлен двухфазовый эффект действия ионов никеля на На^-к* -АТФазную активность изолированных мембран нейронов. Установлено, что изменения концен# трации натрия во внеклеточной среде вызывает изменения внутриклеточной концентрации лабильно связанного кальция в основном за счет прямой конкуренции ионов натрия с ионами кальция за те же места связывания.

Настоящая работа является заданием Всесоюзной научно-технической програмы 0.74.05 "Разработка новых направлений исследований генетического аппарата, биополимеров и структур клетки" по теме Кафедры биохимии и биофизики ВГУ "функциональная роль поливалентных ионов в биофизических мембранах", № гос.регистрации 81054093.

Практическая значимость работы состоит в том, что впервые показана возможность применения красителя эриохрома черного Т для количественного определения связанного кальция в ядре и цитоплазме целого нейрона улитки методом цитофотометрии. Показано, что ноличестно связанного кальция в ядре и цитоплазме этого же нейрона и содержание общего кальция в нейронах улитки изменяются параллельно при изменении ионного состава внеклеточной среды. Методика количественного определения связанного кальция в нейронах и результаты работы используются на кафедре цитологии, гистологии и эмбриологии Тбилисского государственного университета и при проведении спец.курсов лекций и "Большого практикума" для студентов биологов-зоологов факультета естественных наук Вильнюсского государственного университета.

Основные положения, которые выносятся на защиту:

1) Равновесное содержание общего кальция в нейронах при изменении внеклеточной концентрации кальция имеет вид адсорбционной зависимости.

2) Повышение концентрации ионов К+ или уменьшение концентрации ионов ла* во внешней среде вызывает увеличение содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов.

3) При внеклеточном действии ионов ва2 *,Бг2 *,м^2+,Ьа3^ выявлено существование двух типов мест связывания кальция в ядре и цитоплазме нейронов: лабильно связывающие, на которых адсорбированный кальций замещается, и стабильно связывающие, на которых не замещается.

4) Зависимость количества связанного кальция в ядре и цитоплазме нейронов и зависимость активности №г-к4' -АТФазы выделенных мембран нейронов от внеклеточных концентраций ионов никеля имеет сложный вид: при низких концентрациях ионов никеля - инги-бирование как связывания кальция, так и активности фермента; при более высоких - увеличение содержания кальция в ядре и цитоплазме и активности зяа^-к* -АТФазы мембран нейронов.

5) Количество связанного кальция в ядре и цитоплазме и количество общего кальция в нейронах изменяется параллельно с изменениями ионного состава среды.

Заключение Диссертация по теме "Цитология", Смильгявичюс, Людас-Альгирдас Домининкович

1. Изменение равновесного содержания общего кальция в нейро нах при изменении концентрации внеклеточного кальция имеет вид адсорбционной зависимости и определяется изменениями содержания лабильно связанного кальция: ДК = 15 ммоль Са /кг; R^ =9,5 ммоль Са /кг; s = ммоль Са /кг сырой массы ганглия).2. Деполяризация мембраны нейронов повьш1енной концентрацией К"^ во внешней среде или удаление №L*^ ИЗ раствора сопровождается повьш1ением содержания связанного кальция в ядре и цитоплазме ней^ ронов.3. Количество связанного кальция в ядре и цитоплазме и обще го кальция в нейронах уменьшается при увеличении внеклеточных кон центраций ионов бария, стронция, магния, кадмия и лантана, и стре миться к половинному значению начального содержания кальция. Это указывает на существевание в нейронах мест связывания с различным сродством к кальцию: лабильно связывающие, на которых адсорбиро ванный кальций замещается и стабильно связывающие, на которых кальций не замещается. Полученные результаты описываются адсорб ционной моделью.4. Зависимость количества связанного кальция в ядре и цито плазме нейронов от концентрации ионов никеля имеет сложный вид: при низких концентрациях внеклеточного никеля (0,05:0,5мМ) - со держание связанного кальция уменьшается, при средних (I-IO мМ) -

увеличивается и при высоких (20-80 мМ) - опять уменьшается. Ус тановлено, что ионы никеля при высоких концентрациях (20-5-80 мМ) непосредственно конкурируют с Са за места связывания.5. Кривые зависимости активности а^"** - К"*" - АТФазы выде-124-

ленных мембран нейронов от концентрации ионов щ имеют вол 2+ нообразный вид с гтнкщмом активности фермента при 0,5 мМ Ni '^"^ и максимумом при 2 ШШ .6. Обнаружены выраженные сезонные изменения содержания свя занного кальция в ядре и цитоплазме и содержания общего кальция в нейронах виноградной улитки. Максимальное содержание обнаруже но в марте, минимальное в 2-3 раза меньше - в мае сентябре. Се зонная динамика содержания кальция в нейронах более вьфажена чем изменение его содержания при вариации ионной среды.7, Установлено, что количество связанного кальция в ядре и цитоплазме и количество общего кальция в нейронах изменяются параллельно при изменениях ионного состава среды. Количество связанного кальция во всех нами изученных случаях больше в ядре, чем в цитоплазме.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Смильгявичюс, Людас-Альгирдас Домининкович, Вильнюс

1. Агроскин Л.С., Бродский В.Я., Папаян Г.Б., Раутиан Л.М. Проверка применимости закона Бугера-Бэра в цитофотометрии: анализ гистохимических реакций, выявляющих аминокислотные остатки в белках. Цитология, 1970, т.12, II, с.1471-1476,

2. Агроскин Л.С.,Папаян Г.В.Цитофометрия. Л.:Наука,1977.-295 с.

3. Дцомонис В.М., Заблоцкайте Д.П., Нарушевичус Э.В., Пономарев В.Н., Сабаляускас В.И., Смильгявичюс Л.Д., Тамулевичготе В.И. Некоторые аспекты механизмов проницаемости клеточных мембран. В кн.: Биофизика мембра: Материалы симпозиума24-28 сентября I97I г., Паланга. Каунас, 1972, с. 15-36.

4. Антонов В.Ф., Курелла Т.А., Аглова Л.Т. Распределение между цитоплазмой и ядром в гигантских нейронах Tritonia diome- dia Биофизика, 1965, т.10, вып.6, с.1087-1091.

5. Божкова Б.М., Чайлахян "Л.М. Специфическая роль ионов в предзародышевом и зародышевом развитии. В кн.: Внешняя среда и развивающийся организм. М.: Наука, 1977, с. 210-256.

6. Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука, 1966, 355 с.

7. Булычев А.Г. Изменение структуры и энергетического обмена митохондрий и ядер при альтерирующих воздействиях на клетку и организм. Б кн.: Механизмы проницаемости, возбуждения и повреждения клетки, Л.: Наука, 1969, с. 130-147.

8. Буровина И.В,, Сидоров А.Ф. Распределение калия, натрия, кальция, фосфора в нервных клетках ганглиев моллюсков Pianorbis corneus по данным рентгенеспектрального микроанализа. Ж. Эволюц.биохим. и физиол., I97I, т.7, 6, с.576-579.

9. Буровина М.В., Пивоварова Н.Б., Погорелов А.Г. Распределение натрия, калия, магния и кальция в ооцитах травяной лягушки по данным рентгеновского микроанализа. Цитология, 1982, т.24, 5, с.569-575.

10. Беренинов А.А. Транспорт ионов через клеточную мембрану. Л.: Наука, 1978, 286 с. 11. Б.Д.Герасимов, П.Г.Костюк, Б.А.Майский. Изменение электрических характеристик мембраны гигантского нейрона при увеличении наружной концентрации ионов калия. Биофизика, 1965, т. I, Ш 2, с. 272-280.

11. Голубев A.M. Количественная оценка активности цитохромоксидазы. Арх. патол. 1969, 8, с. 93-95.

12. Григорьева В.А., Литвиненко О.А. Внутр! ц1ньокл1-тиний розпод1 л кальц110 Б скелетных м,язах за экспериментально! М,ЯЗОБО дистрофИ. Укр. бА:0Х1М.журн., 1973, т.45, I, с. 24-28.

13. Грушко Я.М. Ядовитые металлы и их неорганические соединения в промышленных сточных водах. М.: Медицина, 1972. 96 с.

14. Гюльханданян А.В. В кн.: Биология и научно-технический прогресс. Цущино-на Оке, 1974. 180 с.

15. Жилюкас Р., СмильгяБИчус А., Сабаляускас И. Вжяние двухвалентных ионов на Na,К1АТФазную активность плазматических мембран, выделенных из нейронов виноградной улитки. Научные труды высших учебных заведений Литовской ССР, Биология, 1978, т.6, Ш 2, с. 47-52.

16. Заалишвили М.М. Физико-химические основы мышечной деятельности.Тбилиси: Мецниереба. I97I. 376 с.

17. Збарский И.Б., Делекторский В.В., Троицкая Л.П., Перевощикова К.А. Новые данные об элементарных грибовидных частицах ядерных мембран. Цитология, 1973, т. 15, 16 12, с. I453-I457.

18. Збарский И.Б., Мокровский А.А., Перевощикова К.А., Гаппаров М.

19. Зеленская B.C., Олейникова Т.Н., Сорокина З.А. Внеклеточные пространства нервных ганглиев брюхоногих моллюсков. В кн.: Физиология и биохимия беспозвоночных. Л.: Наука, 1968, с.8491.

20. Иващенко А.Т. Исследования аденозинтрифосфатазной активности ядер клеток печени и тимуса крысы. Биохимия, 1978, т. 43, II, с. 2064-2068.

21. Кафиани К.А., Маленков А.Г. Роль ионного гомеостаза в явлениях роста и развития. Усп. совр. биол., 1976, J 81, с.445 463.

22. Квиклите-Рузгене А.В. Зависимость величины нейронов от концентрации ДНК функциональная связь адсорбированного кальция в ядрах нервных клеток виноградной улитки. Дис... канд.. бисл.наук. Вильнюс, 1969. 155 с.

23. Коноплицька О.Л., Силакбва А. Mg Са -АТФаза ядер скелетных м,яз1в кролд-в у Н0рм1й за експериментально! мязоводистроф11 Укр. б1ох1м.журн. 1975, т.47, 2, с.179-184.

24. Костенко М.А., МусиЛ{енко B.C., Смолихина Т.И. Влияние рН и внутриклеточного содержания Са на рост отростков нейронов прудовика в культуре. Цитология, I98I, т. 23, 7, с.779-787.

25. Костюк П.Г. Ионные процессы в гигантских нейронах моллюсков.Ж.6И0ХИМИИ и физиол., 1969, т.5, J 2, с. 218-225.

26. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт. М.: Мир, 1980. 341 с.

27. Крышталь О.А. Блокирующее действие ионов кадмия на кальциевый входящий ток в мембране нервной клетки. Докл. АН СССР,

28. Крышталь О.А., Пидопличко В.И. Токи смещения, связанные с актиБэдией воротного механизма кальциевых каналов в мебране нервной клетки. Докл. АН СССР, 1976, т. 231, 5, с.1248I25I.

29. Кудинов А. Ферментативные процессы транспорта Са в нервных клетках. В кн.: Молекулярная биология. К., 1976, Ш 13, с.57- 74.

30. Кудинов А. Системы транспорта в субклеточных структурах нервных клеток. Автореф. Лдс... докт. биол. наук. Киев, 1979, 45 с.

31. Курский М.Д., Бакшеев Н.С, Биохимические основы механизма действия серотонина. К.: Наукова думка, 1974. 294 с.

32. Курский М.Д., Михайленко Е.Т., Федоров А.Н. Транспорт кальция и функция гладких мышц. Киев.: Наукова думка, I98I. 172 с.

33. Лазарев А.Б., Поротилов В.И. Механизмы регуляции и интезтрации транспорта ионов через мембраны. Биологические науки, 1982, I, с. 5-16.

34. Митюшин В.Н. Роль ядерной мембраны во внутриклеточном транспорте веществ. Биофизика, 1968, т. 13, 2, с.373-376,

35. Можаева Г.Н., Наумов А.П. Вжяние поверхностного заряда на стационарную калиевую проводшлость мембраны перехвата Раивье. Ш. Действие двухвалентных катионов. Биофизика, 1972, т.ХШ, вып. 5, с. 801-808.

36. Мукумов М.Р., Ходоров Б.И. Влияние ионов ш"*" на быстрые натриевые каналы в миокарде лягушки, Докл. АН СССР, 1978, т,241, 6, с. I475-I477.

37. Мусиенко B.C., Костенко М.А. Влияние биогенных аминов на морфологическую дифференцировку нейронов взрослых моллюсков в

38. Нестеров В.П. О функциональной специфичности распределения натрия и калия в мышцах круглоротых и морских костистых рыб. Докл. АН СССР. Сер. Б,, 1972, т. 206, 4, с. I022-I024.

39. Орлов Н., Покудин Н.И,, Кравцов Г.М. О влиянии "одновалентных катионов на транспорт кальция в митохондриях. Болл. экспер. биол., 1982, 5, с. 50-52.

40. Пирс Э. Гистохимия. М.: иностр. лит., 1962. 962 с ил.

41. Петруняка В.В. Происховдение и функция каротиноидсодержащих мембранных структур клеток моллюсков. Цитология, I98I, т.23, Л 2, с. 154-158.

42. Разумовская Н.Й., Дамбинов А., Куликова О.Г., Белявцев Л.М., Говорова Я.Б. Роль кальция в реализации нервного контроля синтеза РНК в скелетных мышцах. Биохимия, 1979, т. 44, J II, 2094--2099.

43. Разумовская Н.И., Дамбинова А., Демина М.Н., Говорова Л.В. О возможном участии кальция в регуляции РНК синтезирующей активности клеточных ядер ткани головного мозга. Вол. эксперим. и мед. I98I, т. 91, 6, с. 677-679.

44. Рожманова О.М. Na"- к+ активируемая аденозинтрифосфатаза HefipOHOB улитки Helix pomatia. Ж. ЭВОЛЮЦ. биОХИМ. И фИЗИ- ол., I97I, т. 7, 3, с. 247-253.

45. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Высшая школа, 1973. 319 с.

46. Рнбальченко В.К., Курский М.Д. Молекулярная организация и ферментативная активность биологических мембран. К.: Наукова думка, 1977. 212 с.

47. Сабаляускас Й.Ю. Электронномикроскопическое изучение структурных изменений выделенных плазматических мембран. Автореф.

48. Сояяев Р.К. Поглощение веществ Наука, 1969, 206 с.

49. Сахаров Д.А. Генеалогия нейронов. М.: Наука, 1974, с.3741.

50. Силакова А.И., Эпшейн Ф., Санина О.Л., Беляева А.В. Влияние фрагментации ядер скелетных мышц диэтиловым эфиром на активность их АТФазных систем. Биохимия, 1974, т. 30, вып. 5, с. 936-941.

51. Силакова А.И., Гула Е.М., Коноплицкая О.Л. Влияние SH -реагентов на Mg"*", са" -АТФазу ядер скелетных мышц кроликов. Б кн.: Тезисы сообщ. У Всес. симпоз. "Структура и функции клеточного ядра", Новосибирск, 1975, с. 56-57.

52. Ситковский М.В. Молекулярные механизмы активации лимфоцитов.В кн.: Биологическая химия, М., 1979, т. i с.13-235.

53. Скульский И.А. Естественное распределение щелочных элементов в тканях животных. Б кн.: Физикохимические аспекты возбуждения и проведения. М., 1970, с. 39-48.

54. Сорокина З.А. Измерение активности ионов водорода вне и внутри нервных клеток ганглиев моллюсков. Ж. эвол. биохшл. физиол., 1965, T.I, 4, с. 343-350.

55. Сорокина З.А., Зеленская B.C. Особенности электролитного состава гемолимфы брюхоногих моллюсков. Ж.эвол. биохим. физиол., 1967, 3, с. 25-30.

56. Сорокина З.А., Холодова Ю.Д. Ионный состав нервных ганглиев брюхоногих моллюсков. В кн.: Физиология и биохимия беспозвоночных. Л.: Наука, 1968, с. 76-84.

57. Сорокина З.А., Холодова Ю.Д. Содержание

58. Смильгявичус А., Квиклите А., Нарушевичус Э., Чибирайте Н. Статистические параметры разряда нейронов при равных концентрациях Со ,N1 Mg" В кн.: Статистическая электрофизиология, Вильнюс, 1968, Ч.1, с. 517-524.

59. Сравнительная физиология животных (Под общ. ред. Л.Проссера)М.: Мир, 1977, т.1, 608 с.

60. Ташглухамедов Б.А,, Гагельганс А.И., Маматкулов X., Махмудова Э., Журавель Ю.Н, Исследование влияния ионов никеля на транспорт Са и окислительное фосфорилирование в митохондриях печени. В кн.: Штохондри. М,, Наука, 1973, с, 156-160.

61. Тимкин В.Н., Щеколдина Т. Г., Кузьмин С М Влияние ионов Mg"*" И Са на АТФазную активность, включение уридина -Н и размер ядер, выделенных из коры головного мозга крыс, Укр. 6ioxiM, ж,, 1973, т, 45, 6, с. 706-711.

62. Третьяк Н.Н, Факторы среды, определяющие выживаемость и регенерацию нейронов моллюсков в культуре. Автореф. Дис... канд. биол. наук. М., 1982, 17 с.

63. Трощин А,С. Проницаемость клеточного ядра. Цитология, 1963, т.5, 6, с. 601-614.

64. Хассельбах В,, Вебер Г. Внутриклеточная регуляция мышечного сокращения, В кн.: Молекулярная биология. М.: Наука, 1964, с. 237-256.

65. Ходоров Б,И. Общая физиология возбудимые, мембран. М.: Наука, 1975. 405 с.

66. Холодова Ю.Д,, Сорокина 3,А, Поглощение кальция и новокаина мембранными фрагментагли скелетных мышц. В кн.: Биофизика мембран, Каунас, I97I, с. 768-778.

67. Хьюз М.Н. Неорганическая химия биологических процессов. М.: Мир, 1983, 414 с.

68. Ченцов Ю.С., Поляков В.Ю. Ультраструктура клеточного ядра. М.: Наука, 1974. 267 с.

69. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных мембран, Минск: Наука и техника, I98I. 215 с.

70. Alvarez-Leefmans P.J., Rink T.J., Tsien R.Y. Free calcium ions in neurones of Helix aspersa measured with ionselective microelectrodes. J.Physiol., 1981, v.315, p. 531-548.

71. Atkinson A., Hunt S., Lowe A.G. Maganese activation of a (Na-K)-dependent ATPaze in pig brain microsomes. Biochim. Biophys. Acta, 1968, v.167, p. 469-474.

72. Baker P.P. Transport and metabolism of calcium ions in nerve Prog.Biophys.molec.Biol., 1972, H 24, p. 177-223.

73. Baker P.P. Regulation of intracellular Ca and Mg in squid axons. Ped.Proc, 1976, v.35, U 14, p. 2589-2595.

74. Baker P.P. The regulation of intracellular calcium. In: Calcium Biol.Syst. 30 Symp.Soc.Exp.Biol., Englefieled Green, 1975 Cambridge e.a., 1976, p. 67-88.

75. Baker P,F., Blaustein M.P,, Hodgkin A,L., Steinhardt R.A, The effect of sodium concentration on calcium movements in giant axons of Loligo forbesi, J,Physiol.(Lond,),1969. v,192, p. 43-46.

76. Baker P.P,, Crawford A.C, Mobility and transport of magnesium in squid giant axons. J.Physiol.(Lond.), 1972, N 227, p. 855-874.

77. Baker P.P.,Glisch H.G. Does metabolic energy participate 45 directly in the Na dependent extrusion of Ca ions from squid giant axons. J.Physiol. (Lond.),1973, v.223, p.44-46,

78. Baker P.P., Hodgkin A.L., Ridgway E,B, Depolarization and calcium entry in squid giant axons, J.Physiol.(Lond,), 1971®, V.218, p. 709-755.

79. Baker P.P., Hodgkin A.L., Ridgway E.B. The early phase of calcium entry in a giant axon. J.Physiol, (Lond,),1971 V.214, p. 33-34.

80. Baker P.P., Mc Naughton P.A. Calcium dependen calcium efflux from intact squid axons: Ca-Ca exchange or net extrusion J.Physiol.(Lond.),1976®, v.258, N 2, p. 97-98.

81. Baker P.P., McNaughton P.A. Kinetics and energetics of calcium efflux from intact sqqiid giant axons. J.Physiol. (Lond.),1976, N 259, p. 103-144.

82. Baker P.P., McNaughton P.A. The influence of extracellular calcium binding on the calcium efflux from squid axons. J.Physiol,(Lond.),1978, N 276, p. 127-150.

83. Baker P.P., Schlaepfer W. Calcium uptake by axoplasm extruded from giant axons of Loligo. J.Physiol, (Lond,),1975» V.249, p. 37-38,

84. Barton J. Quantitative analysis of the results of the enzymatic digestion of nuclei. Thesis, University of Missouri, Columbia, Mo, 1951, p.63-65.

85. Batra S C baniel E.E. Effect of multivalent cations and drugs on Ca uptake by the rat myometrial microsoas. Сотр. Biochem, and Physiol.,1971, A 38, Ж 2, p. 285-300.

86. Bers Donald M., Langer Glenn. Uncoupling cation effects on 24 cardiac contractility and sarcolemmal Ca J,Physiol., 1979, v.237, N 3, p.332-341. binding. Amer.

87. Bers Donald M., Philipson Kenneth D., Nishimoto Ann Y, Sodium-calcium exchange and sidedness of isolated cardiae sarcolleraal vesicles. Biochim.biophys.Acta, 1980, v.601, N 2, p. 358-371.

88. Blaustein M.P. The ins and outs of calcium transport in squid axons: internal and external ion activation of calcium offlux. Ped.Proc.,1976, v. 35, N 14, p.2574-2578.

89. Blaustein M.P., Russell J.M. and de Weer P. Calcium efflux from internally dialysed squid axons: the influence of external cations J. supramolec.Struct., 1974, v.2, p.558-581.

90. Blaustein M.P. and Russell J.M. Sodium-calcium exchange and calcium-calcium exchange in internally dialysed squid giant axons. J.Membr.Biol,, 1975, v,22, p, 285-312.

91. Bosher S.K. The effects of inhibition of the strial Ы K а- activated ATPase by perilymphatia oubain in the guinea pig. Acta oto-laryngol., 1980, v.90, N 3-4, p. 219-229.

92. Brinley P.J.Jr., Spangler S.G. and Mullins L.J. Calcium and EDTA fluxes in dialyzed squid axons. J.gen.Physiol, (Lond.), 1975, V.66, p. 223-250.

93. Brinley P.J,Jr., Tiffert Т., Scarpa A., Mullins L.J. Intracellular calcium buffering capacity in isolated squid axons. J.gen.Physiol., 1977, W 70, p. 355-384.

94. Brinley F.J. Calcium buffering in squid axons. Annu.Rev. Biophys. and Bioengineer.Palo Alto, Calif., 1978, v.7, p.363-392.

95. Brinley F.J., Jr. Regulation of intracellular calcium in squid axons. Fed.Proc, 1980, v.39, N 10, p. 2778-2782.

96. Britten John S., Blank Martin Effects of cations of biologically active surfaces-specific binding sites in the Na-K -ATPase. J,Colloid and Interface Sci.,1973, v. 43, N 3, p. 564-570.

97. Browning J.L., Nelson D.L. Biochemical studies of the excitable membrane of Paramecium aurelia. I Ca fluxes across resting and excited membrane. Biochim.biophys. Acta, 1976, V.448, N 2, p. 338-351.

98. Burton R.P., Janfeerally F.R. The mobilization of calcium and bicarbonate by raised concentrations of potassium in the haemolyraph of the snail, Helix pomatia. J.exp.Bid,, 1976, 64, p. 603-614.

99. Carafoli E. The interaction of Ca with the mitochondrial membrane and with a soluble mitochondrial glycoprotein. In: Biomembranes Archit., Biogenesis, Bioener. and Differentiat. New York e.a., 1974, p. 221-230.

100. Carafoli E., Grompton M, The regulation of intracellular calcium. In: Current topics in membranes and transport, V. 10, Membrane properties: mechanical aspects, receptors, energetics and calcium dependence of transport, U.Y. Acad. Press., 1978, p. 151-217.

101. Carvelho A.P. In: Abatr.Pap. Presented Symp.Calcium Brinding Proteins. Warsaw, 1973, p. 24-53.

102. Carvalho C.A.M, Fluxes of Ca Sr and Mg in synaptos*, omes. Life Sci, 1979, v. 25, N 1, p. 73-82.

103. Carvalho C.A.M,, Carvalho A.P. Active calcium transport and binding by sarcoplasmic reticulum visualized by a fluorescence technique, Sciens.biol,, 1976, С 2, N 4, p. 239-253.

104. Caswell A.H, Methods of measuring intracellular calcium. Int.Rev.Cytol. N.Y. Acad.Press, 1979, v.56, p. 145-182.

105. Christoffersen G.R.J. Chloride conductance and the effect of esitracellular calcium concentration on resting neurons in the snail, Helix pomatia. Comp.Biochem. and Physiol. 1973, A 46, N 2, p. 371-389. 114. De Lorenzo R.J. Calmodulin in neurotransmitter release and synaptic function, Fed.Proc.,1982, v,41, W 7 ,p,2265-2272,

106. Dunn W.J, Red blood cell calcium and magnesium. Biochim. biophys. Acta, 1974, v.352, p. 97-116.

107. Erdelyi L. The effects of barium ions on some stimulus evoked excitatory jost-synaptic potentials in the brain of Helix pomatia L. Comp.Biochem. and Physiol.,1979, A 63, N 3, p. 345-354.

108. Erdelyi L, Barium ions block the acetylcholine evoked slow H-response in the neurones of Helix pomatia L, Neu3X>sci, Lett., 1979, V.13, N 2, p. 213-216.

109. Pleisher L.N., Yozio Т., Bentley P.J. Effect of cadmium on epithelical membranes, Toxicol, and Appl.Pharmacol., 1975, V. 33, N 2, p. 384-387.

110. Friedman M.A., Staub J. Inhibition of mouse testicular Ш А synthesis by mutagens and carcinogens as a potential s single mammalian assay for mutagenesis. Mutat.Res.,1976, V.37, N 1, p. 67-76.

111. Glynn J.P. Ions in relation to moult cycle of Homarus. Comp.Biochem.Physiol., 1968, v.26, p. 937-946.

112. Godfraind T. Calcium exchange in vascular smooth muscle, action of noradrenaline and lanthanum. J.Physiol. (Lond.), 1976, V. 260, p. 21-35.

113. Greenaway P. Calcium regulation in snail Limnaea, J.Exp. Biol., 1971, V.54, p. 199-214.

115. Voltage clamp analysis of two inward current mechanisms in the egg cell membrane of a starfish. J.Gen.Physiol., 1975, v.65, p. 617-644.

116. Hamaguchi Yukihisa, Mabuchi Issei. Measurement of intracelular free calcium concentration of the starfish egg by means of the microinjection of aequorin. Cell Struct. and Funct., 1978, v.3, p. 259-263.

117. Hammershlag R., Chin A.J., Dravid A.R. Inhibition of fast axonal transport of (3H) protein by cobalt ions. Brain, Ren.,1976, V. 114, N 2, p. 353-358.

118. Harrow James A.C., Das Prasum K,, Dhalla Naranjun S. Influence of some divalent cations on heart sarcolemmal

122. Iwasa K., Inabushi T. Co 2+ and bin uptake by crab nerve fibers in resting state and potassium depolarization. Biochem. and Biophys.Res.Commun. 1983» v.Ill, N 2, р,5бО566.

123. Kanino K., Inouye K,, Ogawa M., Uyesaka N., Inouye A. Calcium-binding of synoptosomes isolated from rat brain cortex J.Membr. Biol.,1975, N 23, p. 21--31.

124. Kilhoffer M.C., Haiech J., Demaille J.G. Ion binding to calmodulin. A comparison with other intracellular calciumbinding proteins. Mol. and Cell Biochem., 1983, v,51, N 1, p. 33-54.

128. Hohlhardt M., Bauer В., Krause H,, Fleckenstein A. Selective inhibition of the transmembrane Ca conductivity of mammalian myocardial fibres by Ni, Co and Un ions. Pflugers Arch., 1973, N 338, p. 115-123.

129. Kostyuk P.G., Krishtal O.A., Doroshenko P.A. Calcium currents in snail neurones. I. Identification of calcium current. Pflugers Arch., 1974, N 348, p.83-93.

130. Kostyuk P.G., Krishtal O.A., Doroshenko P.A. Calcium currents in snail neurones. II. The effect of external calcium concentration on the calcium inward current, Pflugers Arch., 1974, N 348, p. 95-104.

131. Kostyuk P.G., Krishtal O.A., Pidoplichko V.I. Asymmetrical displacement currents in nerve cell membrane and effect of internal flouride. Nature, 1977, v.267, N 5бОб, p. 70-72,

132. Krijevic K. and Lisiewicz A. Injections of calcium ions into spinal motoneurons. J.Phys. aol., v.225, 1972, p. 363390.

133. Zemes ukio gyvuliij patologines histologijos praktinis vadovas. Vilnius, Mintis, 1964. -159 p. 149. Lew V.L,, Tsien R.Y., Niner C Bokchin R.M. Physiological [Ca level and pump-leak turnovers in intact red cells measured using an incorporated Ca chelator. Nature, 1982, V.298, p. 478-481.

134. Lowry O.H., Rosebrough H,J,, Randall R.J., Pall A.L. Protein measurement with the folin phenol reagent. J.Biol, Chem., 1951, V.I93, p. 265-274.

135. Madeira O.M.C, Carvalho A.P. """nteraction of cations and local anesthetics with isolated sarcolemma. Biochim. biophys. Acta, 1972, N 266, p. 670-683.

136. Mayer C.J., Breeman С can, Casteels R. Pflugers. Arch., 1972, N 337, s. 333-341.

137. Miller A., Bronner P. Calcium uptake in isolated brushborder vesicles from rat small intestine. Biochem.J., 1981, V.I96, N 2, p. 391-401.

138. Mullins L.J. A mechanism for Na/Ca transport. J.Gen. Physiol., 1977, N 70, p. 681-695.

139. Mullins L,J., Brinley P.J.Jr. Sensitivity of calcium efflux from squid axons to changes in membrane potential. J.Gen.Physiol., 1975, N 65, p. 135-152.

140. Nachshen D.A., Blaustein M.P. Influx of calcium, strontinm and barium in presynaptic nerve endings. J.Gen. Physiol., 1982, v.79, N 6, p. 1065-1087.

141. Pento T.J. Lanthanum inhibition of calcitonin sercetion and calcium uptake in porcine thyroid slices. Mol. and Cell. Endocrinol., 1977, v.9, N 2, p.223-226.

142. Peterson R.N., Russell L., Bundman D., Preund Mathew. Calcium binding to plasma nembrane vesicles of boar spermatozoa. Biol.Reprod., 1979, v.21,]J 3, p.583-588.

143. Prusch D. Active calcium extrusion by Amoeba proteus. J.Exp.Zool., 1980, V.212, N 3, p. 475-477.

144. Rasmussen H. Hormonatcontrol skeletal and mineral homeostasis. Amer.J.Med,, 1974, v.56, p. 751-758.

145. Rassmussen H., Goodman D.B.R. Relatioship between calcium and cyclic nucleosides in cell activation, Physiol. Rev.,1977, V.57, N 3, p. 421-509.

146. Requena Jaims. Effect of magnesium on calcium efflux in dialyzed squid axon. Biochim.biophys.Acta, 1978, v.512, N 2, p. 452-458.

147. Requena J., Mullins L.J., Brinley P.J. Calcium content and net fluxes in squid giant axons. J.Gen.Physiol., 1979, V.73, N 3, p. 327-342.

148. Requena J., Di Polo R., Brinley P.J.Jr., Mullins L.J. The control of ionissed calcium in squid axons. J.gen.Physiol,, 1977, N 70, p. 329-353.

149. Robblee L.S., Shepro D, The effect of external calcium and lanthanum on platelet calcium content and on the release reaction. Biochera. et Biophys.Acta, 1976, v,436,W 2, p. 448-459.

150. Robertson J,D, Composition of muscle in lobster and cephalopoda, J,Exp.Biol., 1965, v,42, p.153-175.

151. Rose В., Loenstein W.R. Permeability of cell junction depends on local cytoplasmic calcium activity. Nature,1975, V. 254, p. 250-252,

152. Russel J.M., Blaustein M.P. Calcium efflux from barnacle muscle fibres dependent on externels cations. J.Gen.Physiol., 1974, V.63, p. 144-161.

153. Sanborn W.G., Langer G.A. Specific uncoupling of excitation and contraction in mammalian cardiac tissue by lanthanum.- J.Gen.Physiol., 1970, v.56, N 2, p. 191-217.

154. Sato Т., Fujii T. Binding of calcium and magnesium ions to human erythrocyte membranes. Chem.Pharm.Bull., 1974, v. 22, p. 368-374.

155. Schami Y., Messer H.H., Copp D.H. Calcium binding to placental plasma membranes as measured by rate of diffusion in a flow dialysis system. Biochim.biophys. Acta, 1974, v. 339, N 3, p. 323-333.

156. Schanes A.M., Bianchi C.P. The distribution and kinetics of release of radiocalcium in tendon and skeletal muscle. J.Gen.Physiol., 1959, N 42, p. 1123-1132. 2+

157. Schatzraann M.J. Active calcium transport and Ca -activated ATPase in human red cells. Curr, Topics Merabr.Transport 1975, Ж 6, p. 124-168.

158. Schatsmann H.J. 1973, цит. no Черницкий E.A., Воробей A.В. Структура и функции эритроцитарных мембран. Минск: Наука и тезшика, I98I- 215 с.

159. Schatzmann H.J., Yincenzi P.P. Calcium movement across the membrane of human red cells. J.Physiol.,1969, v. 201, p. 369-381.

160. Sienert von G,, Langendorf H. lonenhaushalt im Zellkern. Naturwissenschaften, 1970, v.57, N 3, p. 119-123. 2*.

161. Simonson L., Christoffersen G.J, Intracellular Ca ac2+ tivity in HeliiK: neurons: effects of extracellular Ca H*, Na" and M, Comp.Biochem, and Physiol,, 1979, A 63, К 4, p. 615-618.

162. Somerraeyer M.G,, Knauss T C Weinberg J.M,, Humes H.D. 2+ Characterization of Ca transport in rat renal brush-border membranes and its modulation by phosphatidic. Acid, Biochem. J., 1983, v.214, N 1, p, 37-46,

163. Steffensen D. Chromosome structure y/ith special reference to the role of metal ions. In: Internat ,Rev,Cytol,, Nev; York-London, 1961, v,12, p. 163-197.

164. Steer M,L., Levitzki A, The interaction of catecholamines, Ca and adenylate cycles in the intact turkly erythrocyte. Arch,Biochem,Biophys., 1975, v.167, p. 371-376, 184. E. Sugaya and M. Onozuka. Unequal distribution of calcium and magnesium of snail neuron, Experientia, 1978, v.34, N 10, p, 1299-1301,

165. Sulakhe P.Y,, Drummond G.I,, Ng D,C, Calcium binding by skeletal muscle sarcolemma, J,Biol,Chem,,1973, v.248, p, 4150-4157.

166. Sulakhe P.V,, Louis P.J.St, Passive and active calcium fluxes across plasma membranes. Prog.Biophys.MolecBiol., 1980, V.35, p. 135-195.

167. Szabolcs M. Effect of different compounds and treatments on calcium transport of the fragmented sarcoplasmic reticulum. Acta Physiol,Acad,Sci,Hung,, 1980, v,56, N 1, p.82-83.

168. Trosper Terry L., Philipson Kenneth D. Effects of dival4- 4-4- ent and trivalent cations on Na -Ca exchange in cardiae sarcolemmal vesicles. Biochem. et Biophys. Acta, 1983» V. 731, N 1, p. 63-68.

169. Toshiharu Shiba, Uruno Tsutomu, Kubota Kazuhiko, Takagi Keijiro. Determination of calcium ions effluxed from smooth muscle into Ca2+ free physiological solution by 2+ means of Ca selective electrode. J.Pharm.-Dyn.,1981, V.4, N 2, p. 109-115.

170. Tuana B.S., Dhalla U.S. Purification and characterization of a Ca2+ dependent ATPase from rat heart sarcolemma. J.Biol.Chem., 1982, v.257, N 23, p. 11440-11445.

171. Tucker Robert K., Matte Albert. In vitro effects of cadmium and lead on ATPases in the gill of the rock crab, Cancer irroratus. Bull.Environ.Contam. and Toxicol., 1980, v.24» N 6, p. 847-852.

172. Utida S, ATPase activity in cell gill. Comp.Biochem.Physiol., 1971, V.38A, p. 443-447.

173. Vadasz I. Effect of inhibitors of ionic channels on ionic currents of the Br-type cell of Helix pomatia. Acta Biochim. et Biophys. Acad.Sci.Hung., 1976, v.11, N 2-3, p. 168-174.

174. Vogel V/. Calcium and Lanthanum effects at the nodal membrane. Pflug. Arch., 1974, Bd. 350, p. 25-39.

175. Wakasugi H., Stolze H., Haase W., Schulz I. Effect of L a*

176. Waku Keizo, Hayakawa Puraie, Fakazawa Yasuo, The effect of cadmium ions and cadmium-metallothionein on the activities of phospholipid-synthesizing enzymes of rat liver microsomes in vitro. Arch.Biochem. and Biophys., 1980, v. 204, N 1, p. 288-293.

177. Wallach S., Reizenstein D.L,, and Bellaria J.V. The cellular transport of calcium in Rat Liver. J,Gen.Physiol,, 1966, V. 49, p. 743-762.

178. Weiner M.L., Lee K.S. Active calcium ion uptake by inside out and right side-out vesicles of red blood cell membranes. J.Gen.Physiol., 1972, v. 59, p. 462-476.

179. Wells G.P. The water relation on snail and slug. III. Factors determining activity in Helix pomatia. J.Exp.Biol. 1944, V.20, N 2, p. 79-87. 201. V/illiams R.J.P. Calcium chemistry and its relations to biological function. Calcium Biol.Syst. 30 Symp.Soc.Exp. Biol.Englefield. Geen, 1975, Cambridge e.a., 1976, p.1-17.