Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Цитохимические и биохимические параметры крови и тканей свиней скороспелой мясной породы
ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Цитохимические и биохимические параметры крови и тканей свиней скороспелой мясной породы"

На правах рукописи

Дементьев Александр Владимирович

ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ КРОВИ И ТКАНЕЙ СВИНЕЙ СКОРОСПЕЛОЙ МЯСНОЙ ПОРОДЫ

06.02.01 - Разведение, селекция, генетика и воспроизводство

сельскохозяйственных животных 03.00.04- Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Новосибирск 2006

Работа выполнена в НИИ ветеринарной генетики и селекции ФГОУ ВПО Новосибирского государственного аграрного университета

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор

Короткевич Ольга Сергеевна

доктор сельскохозяйственных наук, заслуженный работник сельского хозяйства РФ, профессор Гудилин Иван Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Деева Валентина Семеновна

доктор биологических наук, профессор Суханова Галина Алексеевна

Ведущая организация - ФГОУ ВПО Кемеровский

государственный сельскохозяйственный институт

Защита состоится « т » & ■2006 г. в часов на заседании диссертационного совета Д 220.048.03 в ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет (630039, г. Новосибирск, ул. Добролюбова, 160).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет.

Авторефераг разослан «-^ » 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

В.Г. Маренков

№064

~Wf

А|сгуальн0сть темы. Проблему обеспечения населения мясом невозможно решить без интенсификации отрасли свиноводства (Шейко И.П.,2000; Кабанов В.Д., 2003; Мысик А.Т., 2004; Топиха В., Волков А., 2004). Удельный вес свиноводства в производстве мяса как наиболее скороспелой отрасли животноводства возрастает во всем мире (Питерская JI. и др., 2001; Данкверт С. и др., 2003; Соколов Н. и др., 2005).

Интенсификация свиноводства связана с необходимостью совершенствования существующих пород свиней, которые могли бы широко применяться при скрещивании и гибридизации (Тихонов В.П.; 1987 Бекенев В.А., 1997; Гу-дилин И.И. и др., 2000).

Важнейшим фактором увеличения производства свинины и улучшения ее качества является повышение эффекта селекции. В целях дальнейшего роста продуктивности в свиноводстве необходимо использование нетрадиционных методов ранней оценки хозяйственно полезных признаков. В области селекции свиней недостаточно изучены метаболические закономерности формирования скороспелости и мясной продуктивности.

Ферментам принадлежит значительная роль в развитии организма, так как они во многом определяют интенсивность метаболизма (Диксон А. и др., 1982; Ленинджер А., 1985; Валуев А.А., 2000; Северин Е.С., 2000; Глебская Л.В. и др., 2001; Плакунов В.К., 2001; Leningcr A.L., 1994; Campbell М.К., 1995; Cecarves Н. et al., 2000; Nishida H., 2001; Ondrechen M. et al., 2001; Terlecky et al., 2002).

Большую прижизненную информацию о клеточном метаболизме без использования биопсии дает определение активности ферментов в клетках крови цитохимическими методами (Меркурьева Р.В. и др., 1982; Боярчук О.Д. и др., 2000; Amir-Ahmady В., 2001; Batetta В., 2002). В литературе имеются единичные сообщения о применении цитохимических методов в целях ранней оценки продуктивных качеств свиней (Бажов Г.М., Бахирева Л.А., 1994).

В настоящее время в комплексе не изучено влияние генотипа хряков на динамику активности ферментов клеток крови, биохимические параметры крови, тканей, митохондрий различных органов у свиней скороспелой мясной породы новосибирской селекции.

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось определение средних популяционных значений активности ферментов в сыворотке, клетках крови, в тканях, митохондриях различных органов свиней скороспелой мясной породы в разные периоды онтогенеза и изучение изменчивости, наследуемости.

Для достижения поставленной цели было предусмотрено решение следующих задач:

1 .Выявить динамику цитохимических и биохимических параметров крови свиней в различные периоды постнатального развития;

2.Исследовать изменчивость, наследуемость и корреляции активности ферментов крови у свиней;

3.Определить основные закономерности метаболических процессов у свиней на уровне целого организма, тканей и субклеточных структур;

РОС НАЦИОНАЛЫ*. ■

3 tucaunTPlfi

4.Изучить влияние генотипа хряков-производителей на цитохимические и биохимические показатели их потомков Установить среднепопуляционные значения цитохимических и биохимических параметров крови и тканей и выяснить возможность использования их при интерьерной оценке свиней.

Научная новизна. На основании комплексных исследований впервые установлены средние популяционные значения активности ферментов крови свиней скороспелой мясной породы в разные периоды постнаталыюго онтогенеза.

Показана динамика ферментного спектра крови свиней в разные возрастные периоды. Определена активность энзимов в клетках крови, несущая значительную прижизненную информацию о клеточном метаболизме. Исследована кинетика показателей липидно-углеводного обмена. Обнаружены изменения ферментативной активности на уровне целого организма, на тканевом уровне и на субклеточном.

Установлена индивидуальная изменчивость цитохимических и биохимических показателей в тканях и органах. Изучено влияние генотипа отцов на цитохимические и биохимические показатели крови потомков. Определена наследуемость и повторяемость основных параметров метаболизма свиней. Раскрыта зависимость содержания микроэлементов в волосе свиней с рядом метаболических тестов в крови, различных органах и тканях.

Выявлена связь между цитохимическими и биохимическими параметрами. Выяснено, что в процессе онтогенеза может меняться не только величина, но и направление корреляций.

Практическая значимость. Проведена оценка свиней скороспелой мясной породы по цитохимическим и биохимическим параметрам крови и тканей.

Выявлены средние значения активности ферментов в сыворотке и клетках крови свиней в разные возрастные периоды онтогенеза. Они могут быть использованы при определении напряженности метаболизма, оценке состояния здоровья и осуществлении мониторинга популяции животных в различных экологических регионах.

Установлено влияние генотипа хряков-производителей на циюхи-мические и биохимические параметры крови и тканей потомков.

Обнаружено, чго уровень ряда микроэлементов в волосе свиней коррелировал с показателями метаболизма. Показана возможность применения щетины при оценке интерьера в качестве индикатора цитохимического и биохимического статуса организма.

Представленные в диссертации материалы используются в учебном процессе в Новосибирском государственном аграрном университете, Алтайском государственном аграрном университете, Иркутской государственной сельскохозяйственной академии, Кемеровском государственном сельскохозяйственном институте, Красноярском государственном аграрном университете при чтении лекционных курсов и проведении лабораторно-практических занятий по дисциплинам «Разведение сельскохозяйственных животных», «Биологическая химия с основами физической и коллоидной химии» для студентов зооинженер-ных и ветеринарных факультетов.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследований представлены на 6-й международной экологической конференции студентов и молодых ученых «РИО+Ю: Экологическая безопасность как ключевой фактор устойчивого развития» (Москва. 2002), «The 6 Russian-Korean International Symposium On Science and Technology», KORUS-2002, NSTU (Novosibirsk, 2002), 2-й научной конференции «Успехи современного естествознания» (Сочи, 2002), LX международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс». ИГУ (Новосибирск, 2002), 5-й международной научно-практической конференции «Научное обеспечение ЛПК Сибири, Монголии, Казахстана, Беларуси и Башкортостана (Абакан, 2002), международной научной конференции, посвященной юбилею почетного доктора ГУБ, профессора НГАУ Р.А. Цилькс «Современные исследования в области сельскохозяйственных наук в НГАУ» (Новосибирск, 2002), 2-й международной научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (Египет, 2003), 2-й международной конференции «Селекция, ветеринарная генетика и экология» (Новосибирск, Россия, 2003).

Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в центральных изданиях, в трудах СО РАСХН, НГАУ. Автором опубликовано 28 работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 148 страницах, содержит 62 таблицы, 5 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения, выводов, предложений и приложений. Список литературы включает 287 наименований, в том числе 76 на иностранных языках.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.Генотип хряков и возраст животных влияют на уровень цитохимических и биохимических параметров крови.

2.Генотип хряков скороспелой мясной породы влияет на активность ферментов тканей, митохондрий различных органов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проведена в период с 2000 по 2006 гг. на базе НИИ ветеринарной генетики и селекции (НИИВГиС) Новосибирского государственного аграрного университета, кафедры свиноводства НГАУ, учебного хозяйства ГПЗ «Тулинское» НГАУ.

Объектом исследования были свиньи скороспелой мясной породы новосибирской селекции (CM-J). Схема исследований представлена на рис.1. Животных подбирали в группы по принципу аналогов с учетом происхождения, породности, продуктивности, возраста, живой массы. Содержали животных в соответствии с предусмотренной технологией для комплексов и ферм. Исследования выполнены на 469 животных.

Рис. 1 Схема опыта

Предметом исследований являлись сыворотка крови, клетки крови (лимфоциты, нейтрофилы), органы и ткани (сердце, длиннейшая мышца спины, печень, почки, поджелудочная железа, селезенка, легкие, 12-перстная кишка), щетина, митохондрии, суиернатант сердца и печени свиней.

Биохимические и цитохимические анализы проводили в лаборатории НИИВГиС.

Исследования проведены на свиньях скороспелой мясной породы в следующие возрастные периоды постнатального онтогенеза: 2, 3. 4. 5, 6 месяцев. Пробы крови у свиней брали до начала кормления из ушной вены (36 - в двухмесячном возрасте, 96 - в трехмесячном. 42 - в четырехмесячном, 54 - в пятимесячном, 79 - в шестимесячном возрасте). Активность щелочной и кислой фосфатазы в сыворотке крови исследовали по гидролизу п-нитрофепилфосфата (Колб В Г и др., 1976). Цитохимическими методами определена активность клеточных дегидрогеназ крови: сукцинатдсгидрогеназы, лактатдегидрогеназы, яг-глицерофосфатдегидрогеназы, глюкозо-б-фосфатдегидрогеназы в лимфоцитах. кислой фосфатазы, миелопероксидазы - в нейтрофилах (Меркурьева Р.В. и др.. 1982); количество липидов и гликогена - в нейтрофилах (Меньшиков В.В., 1987). Содержание цинка, меди, свинца и кадмия в щетине свиней определяли совместно с С.А Патрашковым электрохимическим методом анодной инверсионной вольтамперометрии с помощью анализатора ТА-2.

Митохондриальную фракцию выделяли при помощи метода дифференциального центрифугирования в 0,25М растворе сахарозы (Schneider V., Но-geboom D, 1942), чистоту митохондриальной фракции определяли в фазово-конграсгном микроскопе Белок исследовали по О. Lowry et al. (1954).

Активность сукцинатдсгидрогеназы и цитохромоксидазы в митохондриях супернатанте печени и сердца свиней определяли с помощью методов V. Potter, V Schneider (1942), A. Hess, A. Pope (1953) в модификации Г.П. Гулидо-вой и И.Н.Сорокиной (1967).

Статистическая обработка результатов исследований выполнена с помощью пакета прикладных программ Statistica 6 фирмы Stat Soll Inc. (USA) и Excel версия 10 (Officc XP) корпорации Microsoft. Рассчитывались следующие показатели- средняя арифметическая, стандартное отклонение, ошибка средней арифметической, достоверность различий между средними значениями двух выборочных совокупностей с помощью критерия Стьюдснта (tst-TecT), коэффициенты корреляции по Пирсону. Тестирование соответствия фактических распределений нормальному оценивали визуально путем построения гистограмм распределения и с помощью критерия Колмогорова-Смирнова {Л). Проведены дисперсионный (для неравномерных комплексов) и регрессионный анализы (Снедскор Дж.. 1961; Меркурьева Н.К., 1970. Лакин Г.Ф . 1990; Фолконер Д.С., 1995; Васильева Л.А., 2000, 2004).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Влияние возраста и генотипа хряков на цитохимические показатели

Исследована активность а-глицерофосфатдегидрогеназы, сукцинагдегидро-геназы, лактатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, кислой фосфатазы и миелопероксидазы в клетках крови свиней СМ-1 новосибирской селекции. В эксперименте установлено, что у свиней (табл. 1) в возрасте от 2 до 3 - 4 месяцев происходило нарастание активности клеточных ферментов от минимального увеличения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в 1,12 раза (р<0,001) до максимального подъема активности а -глицерофосфатдегидрогеназы в 1,42 раза (р<0,001). В последующие возрастные периоды их активность снижалась. Нарастание активности изучаемых ферментов, видимо, обусловлено активированием гликолиза, пенгозофосфатного цикла, окислительного фосфорилирования, в которых они участвуют (Ьешгщег А.1.. е1 а1., 1994). Эти процессы способствуют интенсификации роста и развития, при которых потребность организма в пластическом и энергетическом материалах увеличивается. Обнаружена выраженная линейная регрессионная зависимость (рис 2) активности сукцинатдегидрогеназы и кислой фосфатазы в клетках крови свиней.

Активность сукцинатдегидрогеназы (гр/ЛФ)

Рис.2. Зависимость активности сукцинатдегидрогеназы и кислой фосфатазы в клетках крови свиней

Таблица 1. Возрастная динамика цитохимических показателей крови свиней СМ - 1

Показатель Возраст, мес

2 3 4 | 5 6

|

а -глицерофосфат- 254,52 317,69 361,38 292,90 271,37

дегидрогеназа, гр/ЛФ — + + + +

5,98 8,99 10,79 5,82 7,08

Сукцинатдегидрогеназа, 545,28 687,11 672,66 635,44 600,23

гр/ЛФ + + + + +

10,39 20,56 14.90 14,99 15,10

Лактатдегидрогеназа, 247,82 312,58 348,99 293.44 270,02

гр/ЛФ + + + + +

6,86 8,69 9,77 6,24 9,44

Глюкозо-6-фосфат- 168,14 188,56 215,99 187,05 160,98

дегидрогеназа, + + + + +

гр/ЛФ 4,82 4,57 8,86 5,26 4,96

Кислая фосфатаза, 71,21 93,53 91,56 94,28 77,10

ППК + + + + +

0,98 1,91 1,72 3,25 0,92

Миелопероксидаза, 67,44 85,98 82,43 67,45 71,28

ППК + + + + ±

1,05 1,67 1,46 0,77 1,01

Гликоген, СЦК 1,66 1,90 1,75 2,19 2,09

+ -4- + + +

0,04 0^04 0,03 0,07 0,06

Липиды, СЦК 2,13 2,32 2,42 2,57 2,92

+ + + + +

0,05 0,05 0,07 0,04 0,08

Подобная зависимость была выявлена для активности а-глицерофосфат-дегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы, сукцинатдегидрогеназы и миелогте-роксидазы. кислой фосфатазы и миелопероксидазы и для других ферментов Это дает возможность построения регрессионных уравнений и прогнозирования активности одного фермента по активности другого.

Выявлено постепенное увеличение уровня липидов и гликогена в ней-трофилах крови по мере роста животных в 3,38 и 3,32 раза (р< 0,001).

Установлено, что почти во все возрастные периоды дочери Светлого 1704 превосходили потомков Сигнала 1440 по активности клеточных энзимов, что свидетельствует о более напряженном метаболизме у потомства Светлого 1704 в сравнении с Сигналом 1440 и некоторыми другими производителями.

В таблице 2 показано влияние генотипа хряков на цитохимические показатели клеток крови потомков в возрасте 3 месяцев. Влияние генотипа производителей на активность клеточных дегидрогеназ составило от 14,6 до 20.1%.

Таблица 2. Дисперсионный анализ влияния генотипа хряков СМ-1 на цитохимические показатели крови потомков в возрасте 3 месяцев

Показатель мг МЯ мг ¿Г сл М8 с л И Р

Сукцинатдегидро- 8 24845,78 86 6862,76 3,620 0,001 0.201

геназа, гр/ЛФ в-глицерофосфат- 8 3988.21 86 1431,16 2,787 0,008 0,146

дегидрогеназа, гр/ЛФ Лактатдегидрогена- 8 4539,18 86 1421,24 3,194 0,003 0,174

за, I р/ЛФ Глюкозо-6-фосфат- 8 1241,59 86 361.50 3,434 0,002 0,189

дегидрогеназа, гр/ЛФ Гликоген. СЦК 8 0,085 86 0,053 1,618 0,131 0.056

Липиды, СЦК 8 0.121 86 0,075 1,605 0,135 0,055

Коэффициен! наследуемости цитохимических параметров, рассчитанный путем учетверения коэффициента внутриклассовой корреляции, был довольно высоким и изменялся от 0,584 до 0,801. Полученные данные свидетельствуют о наличии существенного генетического разнообразия по активности ферментов в клетках крови в изучаемой популяции свиней и о влиянии генотипа хряков на эти параметры.

В 6 месяцев коэффициент наследуемости энзиматической активности снижался до 0,348 - 0.536, а для показателей лигждного и углеводного обмена повышался до 0,544 - 0,868. Следовательно, более высокая наследуемость активности клеточных ферментов характерна для свиней в возрасте 3 месяцев Вполне закономерно, что не во все возрастные периоды генетические различия

одинаковы. Это связано с различной дифференциальной активностью генов в разные периоды онтогенеза.

Изучена повторяемость цитохимических параметров крови свиней. Из всех исследуемых показа!елей наиболее высокие и достоверные коэффициенты повторяемости получены по активности кислой фосфатазы, миелопероксидазы, лактатдегидрогеназы в период от 2 до 5 месяцев. Коэффициенты повторяемости были равны 0,502; 0,538 и 0,590 (0,05-0,001) соответственно. Между остальными параметрами была выявлена слабая положительная связь. Коэффициенты корреляции между активностью клеточных ферментов изменялись от 0,555 до 0,787 (р<0,05-0,001).

Нами изучено распределение свиней в возрасте 3 месяцев по активности сукцинатдегидрогеназы, кислой фосфатазы в клетках крови Полученные данные свидетельствуют о том, что распределение животных по активности этих ферментов соответствует нормальному, как и других изученных ферментов.

Таким образом, выявлены средние популяционные возрастные различия по цитохимическим параметрам у свиней СМ-1, которые могут быть использованы в качеств критериев оценки интерьера, здоровья и жизнеспособности животных.

Влияпие возраста и генотипа хряков на ферментативную активность крови

При анализе данных ферментативной активности в сыворотке крови свиней СМ-1 в различные периоды онтогенеза отмечено активирование щелочной фосфатазы с 2 до 3 месяцев.

В данный возрастной период наблюдалась самая высокая энзиматическая активность, которая была в 1,38 раза (р<0,001) выше, чем у 2-месячных поросят. Всрояшо, это связано с тем, что щелочная фосфатаза сыворотки представляет собой приблизительно равную смесь печеночных и костных изофермен-тов. Поступление щелочной фосфатазы из костей коррелирует с остеобластиче-ской активностью, т.е с образованием новой костной ткани (Wolf P.L., 1979). В последующие периоды постнатапьного развития обнаружено плавное снижение активности энзима.

Индивидуальная изменчивость щелочной фосфатазы в сыворотке крови была значительно выше в 3 месяца, чем вариация этого фермента в 2 месяца (табл. 3). При исследовании энзиматической активности в 3-месячном возрасте установлено, что она была выше у поросят Светлого 1704 и Совета 1628 в 1,30; 1,27 раза (р < 0.01-0,001), чем у Сигнала 1440. В возрасте 5 месяцев ферментативная активность крови у подсвинков Саяна 225, Сома 69 и Соболя 139 была достаточно высокой.

Таблица 3. Возрастная динамика активности щелочной фосфа-тазы (мМ/ч л) в сыворотке крови свиней СМ-1

Возраст, п Х±Ьх а

мес

36

96

42

54

79

1,6 6 +

0,01

2.30

+

0,07

2,26 +

0,05

2,03 +

0,03

1,98

+

0,04

0,06 0,68 0,33 0,21 0,35

3,61

+

0,43

29,56 +

2,13

14,60

+

1,59

10,34 +

0,99

17,68

+

1,41

Динамика изменения активности кислой фосфатазы в сыворотке крови животных в различные периоды постнатального онтогенеза сходна с характером изменения активности этого фермента в клетках крови В эксперименте наблюдалось постепенное увеличение ферментативной активности в сыворотке крови свиней в возрасте с 2 до 3 месяцев в 1,28 раза (р<0,01), до 4 месяцев - в 1,42 раза (р^0,001). В 6 месяцев активность изучаемого энзима была несколько выше относительно первоначальных значений. Кислая фосфатаза - это фермент. локализующийся в лизосомах, он является маркером Кислая фосфатаза участвует, в частности, в процессах превращения нуклеотидов в нуклеозиды. Активирование ее может свидетельствовать об усилении обмена нуклеиновых кислот (Плакунов В.П., 2001) Вариация этого фермента в сыворотке крови была существенно выше, чем в нейтрофилах крови во все возрастные периоды. Так в 2 месяца изменчивость кистой фосфатазы в клетках крови составляла 4,7 %, в сыворотке крови 28,6 % В 6 месяцев коэффициент вариации сывороточного фермента был равен 18,8 %.

Обнаружены различия между потомством отдельных хряков по уровню активности кислой фосфатазы в сыворотке крови. Активность ее у потомков Светлого 1704 была выше в 1,23 раза (р<0,001), чем у Соболя 139, в возрасте 4 месяцев

Полученные данные свидетельствуют об изменении фосфатазной активное ги крови свиней в различные периоды онтогенеза. Установлено влияние генотипа хряков СМ-1 на уровень ферментативной активности крови потомков.

Биохимические параметры тканей потомства разных хряков Активность тканевых фосфатаз

Важно изучить средние популяционные значения различных интерьер-ных показателей у животных. С этой целью исследована активность щелочной фосфатазы и кислой фосфатазы в сердце, длиннейшей мышце спины, печени, почках, поджелудочной железе, селезенке, легких, двенадцатиперстной кишке.

Наибольшая активность щелочной фосфатазы обнаружена в почках, наименьшая - в легких. Уровень активности щелочной фосфатазы в органах и тканях свиней можно представить в виде следующего ряда: почки > двенадцатиперстная кишка > печень > сердце > поджелудочная железа > селезенка > длиннейшая мышца спины > легкие.

Более высокая активность щелочной фосфатазы в сердце обнаружена у дочерей Светлого 1704 в сравнении с Сигналом 1440 (р<0,001). Нарастание эн-зиматической активности в почках найдено у потомков Светлого 1704 и Совета 1618 относительно Сигнала 1440 и Соболя 139 (р < 0,001).

Кроме различий по активности щелочной фосфатазы в органах и тканях наблюдалось большое индивидуальное разнообразие в уровне активности фермента в различных органах.

Исследована активность кислой фосфатазы в различных тканях свиней (табл. 4). Максимальная ферментативная активность установлена в печени. По активности кислой фосфатазы ткани располагаются в виде следующего ряда: печень > почки > сердце > селезенка > длиннейшая мышца спины> двенадцатиперстная кишка > поджелудочная железа > легкие.

Зафиксировано активирование кислой фосфатазы в длиннейшей ммпгце спины. Оно было характерно для потомков Совета 1618 и Сома 69 (р^0,05-0,01) в сравнении с Соболем 139. Увеличение активности кислой фосфатазы в селезенке относительно подсвинков Соболя П9 было найдено у дочерей Светлого 1704, Сома 69, Саяна 225, Совета 1618 (р<"0,05-0,001). Выявлена наибольшая сила влияния генотипа хряков на активность кислой фосфатазы в печени и сердце.

Таким образом, для популяции свиней СМ-1 новосибирской селекции определены средние значения активности щелочной и кислой фосфатазы в раз-•шчных органах и тканях Они могут быть использованы для экологического мониторинга

Микроэлементы щетины

С целью выбора биоиндикаторов ферментного статуса в сыворотке, клетках крови, в органах и тканях было изучено содержание четырех микроэлементов в щетине свиней в возрасте 6 месяцев Полученные данные свидетельствуют о том, что концентрация Zn в щетине была в 10.08 раза выше, чем Си Количество РЬ было в 2,21 раза больше, чем Cd.

Таблица 4. Влияние генотипа хряков СМ-1 на активность кислой фосфатазы (м М/ч л) в тканях

Кличка и Длиннейшая Подже- Двенад

номер мышца Сердце Печень Почки лудочная Селезенка Легкие * типерст

хряка спины железа кишк

x+sl 3r±sí X+s

Светлый 1704 3,73 4,12 33,62 6,46 2,83 3,87 2,75 3.69

+ + + + + + + +

0,10 0,13 0,81 0,15 0,10 0,12 0,09 0,13

Совет 1618 3,59 4,37 29,04 6,27 2,45 3,17 2,59 4,12

+ + + + + + + +

0,11 0,14 0,81 0,16 0,14 0,13 0,12 0,11

Саян 225 3,20 3,88 27,11 5,72 2,64 3,71 3,01 3,94

+ + + + + + + +

0,10 0,10 0,84 0,12 0,09 0,10 0,09 0,12

Сом 69 3,38 3,82 31,29 6,19 2,72 3,79 2,82 3,75

- 4- + + + + + +

0,09 0,13 0,86 0,14 0,10 0,12 0,12 0,13

Соболь 139 3,03 3,70 26,21 5,64 2,34 2,82 2,96 3,88

+ + + + + + + +

0,08 0,12 0,92 0,13 0,12 0,11 0,09 0,11

Сигнал 1440 3,05 3,68 26,74 5,63 2,51 3,27 2,70 3,51

+ + + + + + + +

0,09 0,10 0,82 0,13 0,11 0,11 0,08 0,12

Из литературных данных известно, что Zn входит в состав активного центра щелочной фосфатазы (Диксон М, Уэбб Э., 1982). Поэтому была предпринята попытка изучить возможность прогноза активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови по содержанию 7м в щетине.

Выявлена высокая положительная корреляция (табл. 5) между уровнем У.п и активностью щелочной фосфатазы в печени, мышцах и почках свиней (р<0,05-0,001).

Установлена средняя положительная корреляция между концентрацией 2п и ферментативной активностью в сыворотке крови (р<0,01). Таким образом, количество 7п в щетине может служить маркером активности щелочной фосфатазы в различных органах и тканях.

Таблица 5. Корреляции содержания микроэлементов в щетине с активностью ферментов в сыворотке крови, тканях и митохондриях различных органов свиней

Коррелирующие признаки Г ± у = а + Ьх

'¿п - щелочная фосфатаза сы- 0,428 у = 0,9969 +

воротки крови (3 мес) + 0,0097*х

0,13

7п - щелочная фосфатаза пе- 0,824 у =-37,4031 ^

чени + 0,3156*х

0,05

7л\ - щелочная фосфатаза 0,840 у = 0,7744 +

длиннейшей мышцы спины + 0,008*х

0,05

Zп - щелочная фосфатаза по- 0,872 у= 182,67 +

чек + 2,4416*х

0,04

Сс1 - сукцинатдегидрогеназа 0.641 у = 1010,7914+

митохондрий печени + 1108,2909*х

0,10

СА -сукцинатдегидрогеназа 0,573 у-2433,6211 +

митохондрий сердца + 1205,5161*х

0,11

Си - цитохромоксидаза ми- 0,551 у = -5,4183 »

тохондрий печени + 0,0369*х

0,12

Си - цитохромоксидаза ми- 0,690 у = 1508,9244 +

тохондрий сердца + 28,43*х

0,09

Некоторые авторы (ЯоЬагсЬ К.. 1991) сообщают о том, что Сс1 особенно легко связывается с сульфгидрильными группами, которые входят в структуру сукцинатдегидрогеназы. Поэтому нами проанализированы содержание Сс! в щетине и активность сукцинатдегидрог еназы в лимфоцитах крови, в митохондриях и супернаташе различных органов свиней. Найдена средняя связь между уровнем Сс1 в щетине и активностью сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени и сердца (р<0,05). Следовательно, количество Сс1 в щетине может быть биомаркером активности сукцинатдегидрогеназы в печени и сердце.

Установлено, что в состав активного центра цитохромоксидазы входит Си (Вегйт I й а!., 2001). Данные таблицы 5 свидетельствуют о наличии средней положительной связи между количеством Си в щетине и активностью цитохромоксидазы в митохондриях печени и сердца (р<0,05-0,01).

В целях выяснения возможности проведения в перспективе биотести- *

рования ферментного и микроэлементного статуса свиней были проведены корреляционный и регрессионный анализы, позволяющие выявить связи между уровнем микроэлементов в щетине и активностью ферментов в тканях и митохондриях печени и сердца.

Таким образом, изучение уровня микроэлементов в щетине показало возможность использования количества Zn, Си, С с) в щетине для прогнозирования активности некоторых ферментов в органах и тканях.

Активность оксидоредуктаз в митохондриях и супернатанте различных органов потомства разных хряков.

Большую роль в процессах тканевого дыхания, окислительного фосфори-лирования и выработки макроэргов играют цитохромоксидаза и сукцинатде-1идрогеназа (Ленинджер А., 1985) Была изучена активность этих оксидоредуктаз в митохондриальной фракции, супернатанте печени и сердца свиней.

Выяснено, что потомство Совета 1618 превосходит дочерей Сигнала 1440 по активности цитохромоксидазы в митохондриальной фракции печени (р<0,01), а потомки Светлого 1704 - сверстников Сигнала 1440 (табл. 6) в митохондриях сердца (р<0,01) По данным дисперсионного анализа, сила влияния * генотипа хряков на активность цитохромоксидазы в митохондриях сердца потомков была в 2 раза выше, чем в печени. Для цитохромоксидазы характерна низкая фенотипическая изменчивость.

Активность сукцинатдегидрогеназы в митохондриальной фракции печени и сердца была больше у дочерей Светлого 1704, чем у потомков Сигнала 1440 и Соболя 139 (р<0,05-0,001). Высокой активностью сукцинатдегидрогеназы в митохондриальной фракции печени и сердца характеризовались потомки Сома 69.

Увеличение активности цитохромоксидазы и сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени и сердца дочерей Светлого 1704, Совета 1618 и Сома 69 свидетельствует о большей выработке макроэргов и усилении энергетических превращений у них по сравнению с потомками Сигнала 1440 и Соболя 139 (СатрЬе! М.К., 1995).

Таблица 6. Влияние генотипа хряков СМ-1 на активность цитохром-оксидазы (ммкМ цитохрома С/мин "мг белка) в митохондриях, суперна-танте печени и сердца потомков

Кличка и номер хряка Митохондрии Супернатант

печень сердце печень сердце

Х±Ьх Х±$х Х±з-х

Светлый 1704 504.02 1949,75 4,18 21,38

+ + + +

9,58 21,37 0,14 0,33

Совет 1618 519,74 1872,51 4,22 20,78

+ + + +

8,36 23,78 0,13 0,37

Саян 225 499.97 1866,67 4,91 23,53

+ + +

8,97 17,30 0,11 0,28

Сом 69 498,55 1925,08 4,88 24,05

+ + + +

8,07 18,98 0,11 0,36

Соболь 139 491.35 1857,14 4,82 23,32

+ + + +

9,10 23,03 0,15 0,31

Сигнал 1440 471,54 1794,63 4,58 22,27

+ + + +

9,76 20,01 0,12 0,29

Дисперсионный анализ показал, что доля влияния генотипа хряков на активность сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени потомства во много раз выше, чем в митохондриях сердца. Поэтому в большей степени верную оценку генетических различий между животными можно сделать по активности сукцинатдегидрогеназы в печени. По активности цитохромоксидазы, наоборот, большие различия обнаружены между производителями по этому ферменту в митохондриях сердца, а не печени.

Следовательно, генетические различия и оценку генотипа производителей нужно проводить по активности сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени и по активности цитохромоксидазы в митохондриях сердца.

ВЫВОДЫ

1.Определены средние значения цитохимических и биохимических показателей крови, клеток крови, тканей, митохондрий различных органов свиней СМ-1, которые могут сложить в качестве нормы. Исследование активности ферментов в лимфоцитах и нейтрофилах крови цитохимическими методами да-

ет большую прижизненную информацию о клеточном метаболизме без применения биопсии.

2.Изучена кинетика 10 цитохимических и биохимических параметров крови свиней Выявлена возрастная динамика изучаемых показателей. Максимальная активность сукцинатдегидрогеназы. лактатдегидрогеназы, а-глицерофосфатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, миелопер-оксилазы в клетках крови и сывороточных фосфатаз обнаружена в 3-4-месячном возрасте животных. Наибольший уровень гликогена и липидов в ней-трофилах крови установлен в 5 и 6 месяцев. Обнаруженные изменения активности клеточных ферментов в крови свиней СМ-1 разных генотипов могут быть основой для мониторинга по этим тестам в процессе совершенствования породы.

3. Установлено влияние генотипа хряков-производителей на цитохимические и биохимические параметры крови, клеток крови, тканей и митохондрий различных органов потомков Доля влияния генотипа отцов на изучаемые показатели в крови и клетках была в пределах от 5,2 % для кислой фосфатазы сыворотки крови до 19,5 % для сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах Большее влияние генотипа хряков на активность клеточных дегидрогеназ у потомков было выражено в возрасте 3 месяцев. Влияние генотипа производителей составляло от 14.6 до 20,1 %.

4. Найдены различия по активности фосфатаз в восьми тканях свиней. Большая активность щелочной фосфатазы была определена в почках, двенадцатиперстной кишке, печени; кислой фосфатазы - в печени, почках. Выявлены различия по активности оксидоредуктаз в митохондриях печени и сердца свиней. Обнаружено, что у дочерей Светлого 1704 и Совета 1618 активность фосфатаз в тканях и оксидоредуктаз в митохондриях различных органов бьпа значительно выше, чем у потомства Сигнала 1440 и Соболя 139.

5. Коэффициенты наследуемости активности клеточных дегидрогеназ у свиней СМ-1 в возрасте 3 месяцев были довольно высокими и изменялись от 0,584 до 0,804. Эти данные свидетельствуют о наличии существенного генетического разнообразия по активности ферментов в изучаемой популяции свиней

6 Наблюдались возрастные изменения фенотипической изменчивости в отношении изучаемых параметров у свиней. Самая низкая индивидуальная изменчивость была отмечена у клеточных дегидрогеназ в возрасте 2 месяцев В 3-месячном возрасте фенотипическая изменчивость у этих ферментов нарастала. В возрасте 4 месяцев вариация энзимов увеличивалась от 2 до 5 раз в сравнении с 2 месяцами. Затем она снижалась в 5 месяцев Наибольшее фенотипическое разнообразие клеточных ферментов было в 6 месяцев. Изучена изменчивость цитохимических и биохимических показателей крови, тканей, субклеточных структур различных органов животных Определены 2 группы параметров, имеющих среднюю и низкую степень изменчивости. Выявлена большая индивидуальная изменчивость свиней по активности кислой фосфатазы в тканях. Среднее фенотипическое разнообразие было найдено для сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов, низкое - для миелопероксидазы нейтрофилов.

7. Исследована повторяемость цитохимических параметров крови животных. В возрасте 2-5 месяцев обнаружены наиболее высокие коэффициенты повторяемости (0,363-0,590; р<0,05-0,001). Эти данные подтверждают возможность использования активности клеточных ферментов в молодом возрасте для прогноза ферментативной активности в другие возрастные периоды.

8.Коэффициенты корреляции между активностью клеточных ферментов изменялись от 0,555 до 0,787 (р<0,05-0,001). Установлено наличие высокой положительной корреляции между уровнем Zn в щетине и активностью щелочной фосфатазы в сыворотке крови, печени, мышцах и почках свиней (р<0,05-0,001). Существует средняя достоверная связь между содержанием Cd в щетине и активностью сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени и сердца (р<0,05). Полученные данные свидетельствуют о наличии средней положительной связи между уровнем Си в волосе и активностью цитохромоксидазы в митохондриях печени и сердца (р<0,05). Следовательно, выявлена возможность использования уровня Zn, Си, Cd в щетине для прогноза активности некоторых ферментов в органах и тканях свиней.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.Полученные данные по возрастной динамике цитохимических и биохимических параметров крови и средние значения активности ферментов в тканях и митохондриях различных органов свиней могут быть использованы в качестве популяционной нормы для оценки интерьера свиней и постоянного мониторинга в разных экологических условиях на территории Западной Сибири

2.Концентрация Zn, Си, Cd в щетине свиней может служить в качестве неинвазивного теста для оценки активности ферментов в крови и в некоторых органах и 1канях свиней.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1 Dementyev A.V. Ecological aspects of metabolic processes in animals / L.V. Lazareva, A.V. Dementyev // KORUS-2002: Materials the 6th Russian-Korean International Symposium On Science and Technology. At the Novosibirsk State Technical University, Russia, 2002. — Vol. 3. — P.252.

2. Дементьев A.B. Ферменты тканей свиней / A.B. Дементьев // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. — 2002. —№ 1-2. — С.97-100.

3. Дементьев А В Экологический мониторинг популяции животных по ферментным тестам / A.B. Дементьев, Л.В. Лазарева IIРИО + 10: Экологическая безопасность как ключевой фактор устойчивого развития: Материалы VI междунар. эколог, конф. студентов и молодых ученых / МГТУ. — М., 2002. — Т. 1, —С. 122-123.

4. Дементьев A.B. Прогноз продуктивности свиней по энзиматическим тестам крови / A.B. Дементьев, Л.В. Лазарева // Успехи современного естествозна-

ния: Материалы II конф. (Сочи, 2002г) — М.' Академия естествознания, 2002. —■ № 4. — С.88-89.

5. Дементьев А.В. Молекулярные тесты в разведении животных / А В. Дементьев, Л.В. Лазарева // Студент и научно-технический прогресс- Материалы LX Междунар. науч.студ. конф. Биология. / НГУ — Новосибирск, 2002. — С.124-125.

6. Dementyev A. Enzymatic activity of mitochondria in pigs / L. Lazareva,A.De-mentyev, O. Ryavkin // Современные исследования в области сельскохозяйственных наук: Материалы междунар науч. конф. / МСХ РФ. НГАУ. - Новосибирск, 2002. — С. 61-62.

7. Дементьев А.В. Сравнительная оценка генотипов хряков по продуктивным качествам и интенсивности обмена веществ / Л.В. Лазарева, А.В. Дементьев, И.И. Гудилин // Научное обеспечение АПК Сибири, Монголии, Казахстана, Беларуси и Башкортос1ана: Материлы 5-й Междунар. науч.- практ. конф. (Абакан, 2002г.) / Новосибирск, 2002. — С.318-319.

8. Dementyev A.V. The Use of Molecular Tests in Pig Breeding / A.V. Dementyev // Proceeding of the 2"dInternational Conference on Veterinary Genetics Selection and Ecology / Novosibirsk — Russia, 2003 — Vo).2. — P. 87 - 88.

9. Dementyev A.V. Pig Productivity Forecasting for the Cell Ferment Activity / A.V. Dementyev, I.I. Gudilin // Proceeding of the 2nd International Conference on Veterinary Genetics Selection and Ecology / Novosibirsk — Russia. 2003. — Vol.2 —P. 80-81.

Ю.Дементьев А В. Мониторинг популяции свиней по активности клеточных ферментов / А В Дементьев // Современные наукоемкие технологии: Материалы 2-й Междунар. науч. конф (Хургада-Египет, 2003 г.) — М.: Академия естествознания, 2003. — № 3. — С. 64 - 65.

И.Дементьев А.В. Использование молекулярных тестов в разведении животных / А.В. Дементьев // Успехи современного естествознания. - М., 2003. — №5. —С. 37 —39.

12. Дементьев А.В. Прогноз продуктивности свиней по цитохимическим тестам крови / А.В. Дементьев // Зоотехния — 2004. — № 2. — С.26 -27

Подписано в печать 7 февраля 2006 г Формат 60x84 'Л6 Объем 1,0уч-изд л. Бума| а офсетная Гарнитура «I imes New Roman» Заказ № 204 Тираж 100 экз

Печатное издательство «Агро-Сибирь» Новосибирск, ул Никитина, 155, тел (383)267-19-90,264-00-72 e-mail agropnnt@mail ru

I 1

S

J3¿/1

í t/9ûûif

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Дементьев, Александр Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

1 .ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10 1.1 .Современное состояние отрасли свиноводства в России и зарубежных странах

1.2.Ферменты крови и тканей животных

1.3 .Биохимическая роль митохондрий

1.4.Роль микроэлементов в обмене веществ животных

1.5.Параметры липидно-углеводного обмена животных 27 2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 31 2.1 .Место и время проведения исследований 31 2.2.Исследования крови, тканей 33 2.2.1 .Цитохимические показатели 34 2.3.Определение оксидоредуктаз в митохондриях и супернатанте различных органов свиней

2.4.Статистические методы

3 .РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1.Сравнительная оценка генотипа хряков по цитохимическим параметрам крови

3.1.1 .Ферменты клеток крови

3.1.2.Показатели липидно-углеводного обмена

3.2.Влияние возраста и генотипа хряков на ферментативную активность крови 70 3.2.1 .Щелочная фосфатаза сыворотки крови 70 3.2.2.Кислая фосфатаза сыворотки крови

3.3.Биохимические параметры тканей потомства разных хряков

3.3.1.Активность щелочной фосфатазы в различных тканях свиней

3.3.2.Активность тканевой кислой фосфатазы

3.3.3. Микроэлементы щетины 91 3.4.Активность оксидоредуктаз в митохондриях и супернатанте различных органов потомства разных хряков

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Цитохимические и биохимические параметры крови и тканей свиней скороспелой мясной породы"

Актуальность темы. Проблему обеспечения населения мясом невозможно решить без интенсификации отрасли свиноводства (Шейко И.П.,2000; Кабанов В.Д., 2003; Мысик А.Т., 2004; Топиха В., Волков А., 2004). Удельный вес свиноводства в производстве мяса как наиболее скороспелой отрасли животноводства возрастает во всем мире (Питерская JT. и др., 2001; Данк-верт С. и др., 2003; Соколов Н. и др., 2005).

Интенсификация свиноводства связана с необходимостью совершенствования существующих пород свиней, которые могли бы широко применяться при скрещивании и гибридизации (Тихонов В.Н. 1987; Бекенев В.А., 1997; Гудилин И.И. и др., 2000).

Важнейшим фактором увеличения производства свинины и улучшения ее качества является повышение эффекта селекции. В целях дальнейшего роста продуктивности в свиноводстве необходимо использование нетрадиционных методов ранней оценки хозяйственно полезных признаков. В области селекции свиней недостаточно изучены метаболические закономерности формирования скороспелости и мясной продуктивности.

Ферментам принадлежит значительная роль в развитии организма, так как они во многом определяют интенсивность метаболизма (Диксон М. и др., 1982; Ленинджер А., 1985; Валуев А.А. и др., 2000; Северин Е.С., 2000; Глеб-ская JT.B. и др., 2001; Плакунов В.К., 2001; Leninger A.L. et al., 1994; Campbell M.K., 1995; Cecarves H. et al., 2000; Nishida H., 2001; Ondrechen M. et al., 2001; Terlecky et al., 2002).

Большую прижизненную информацию о клеточном метаболизме без использования биопсии дает определение активности ферментов в клетках крови цитохимическими методами (Меркурьева Р.В. и др., 1982; Боярчук О.Д. и др., 2000; Amir-Ahmady В., 2001; Batetta В. et al., 2002). В литературе имеются единичные сообщения о применении цитохимических методов в целях ранней оценки продуктивных качеств свиней (Бажов Г.М., Бахирева J1.A., 1994). Работа проводилась в соответствии с государственной программой

Совершенствование кемеровской и скороспелой мясной пород свиней с использованием методов комплексной оценки» (№ 146.18.2.26.2000г.) Автор диссертации принимал участие в работе по совершенствованию свиней скороспелой мясной породы, изучая цитохимические и биохимические показатели, определяющие формирование продуктивных качеств, которая выполнялась под методическим руководством профессора И.И. Гудилина.

В настоящее время в комплексе не изучено влияние генотипа хряков на динамику активности ферментов клеток крови, биохимические параметры крови, тканей, митохондрий различных органов у свиней скороспелой мясной породы новосибирской селекции.

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось определение средних популяционных значений активности ферментов в сыворотке, клетках крови, в тканях, митохондриях различных органов свиней скороспелой мясной породы в разные периоды онтогенеза и изучение изменчивости, наследуемости.

Для достижения поставленной цели было предусмотрено решение следующих задач:

1.Выявить динамику цитохимических и биохимических параметров крови свиней в различные периоды постнатального развития;

2.Исследовать изменчивость, наследуемость и корреляции активности ферментов крови у свиней;

3.Определить основные закономерности метаболических процессов у свиней на уровне целого организма, тканей и субклеточных структур;

4.Изучить влияние генотипа хряков-производителей на цитохимические и биохимические показатели их потомков. Установить среднепопуляци-онные значения цитохимических и биохимических параметров крови и тканей и выяснить возможность использования их при интерьерной оценке свиней.

5.0пределить уровень Zn, Си, Cd, Pb в щетине свиней.

Научная новизна. На основании комплексных исследований впервые установлены средние популяционные значения активности ферментов крови свиней скороспелой мясной породы в разные периоды постнатального онтогенеза.

Показана динамика ферментного спектра крови свиней в разные возрастные периоды. Определена активность энзимов в клетках крови, несущая значительную прижизненную информацию о клеточном метаболизме. Исследована кинетика показателей липидно-углеводного обмена. Обнаружены изменения ферментативной активности на уровне целого организма, на тканевом уровне и на субклеточном.

Установлена индивидуальная изменчивость цитохимических и биохимических показателей в тканях и органах. Изучено влияние генотипа отцов на цитохимические и биохимические показатели крови потомков. Определена наследуемость и повторяемость основных параметров метаболизма свиней. Раскрыта зависимость содержания микроэлементов в волосе свиней с рядом метаболических тестов в крови, различных органах и тканях.

Выявлена связь между цитохимическими и биохимическими параметрами. Выяснено, что в процессе онтогенеза может меняться не только величина, но и направление корреляций.

Практическая значимость. Проведена оценка свиней скороспелой мясной породы по цитохимическим и биохимическим параметрам крови и тканей.

Выявлены средние значения активности ферментов в сыворотке и клетках крови свиней в разные возрастные периоды онтогенеза. Они могут быть использованы при определении напряженности метаболизма, оценке состояния здоровья и осуществлении мониторинга популяции животных в различных экологических регионах.

Установлено влияние генотипа хряков-производителей на цитохимические и биохимические параметры крови и тканей потомков.

Обнаружено, что уровень ряда микроэлементов в волосе свиней коррелировал с показателями метаболизма. Показана возможность применения щетины при оценке интерьера в качестве индикатора цитохимического и биохимического статуса организма.

Представленные в диссертации материалы используются в учебном процессе в Новосибирском государственном аграрном университете, Алтайском государственном аграрном университете, Иркутской государственной сельскохозяйственной академии, Кемеровском государственном сельскохозяйственном институте, Красноярском государственном аграрном университете при чтении лекционных курсов и проведении лабораторно-практических занятий по дисциплинам «Разведение сельскохозяйственных животных», «Биологическая химия с основами физической и коллоидной химии» для студентов зооинженерных и ветеринарных факультетов.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследований представлены на 6-й международной экологической конференции студентов и молодых ученых «РИО+Ю: Экологическая безопасность как ключевой фактор устойчивого развития» (Москва, 2002), «The 6 Russian-Korean International Symposium On Science and Technology», KORUS-2002, NSTU (Novosibirsk, 2002), 2-й научной конференции «Успехи современного естествознания» (Сочи, 2002), LX международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс», НГУ (Новосибирск, 2002), 5-й международной научно-практической конференции «Научное обеспечение АПК Сибири, Монголии, Казахстана, Беларуси и Башкортостана (Абакан, 2002), международной научной конференции, посвященной юбилею почетного доктора ГУБ, профессора НГАУ Р.А. Цильке «Современные исследования в области сельскохозяйственных наук в НГАУ» (Новосибирск, 2002), 2-й международной научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (Египет, 2003), 2-й международной конференции «Селекция, ветеринарная генетика и экология» (Новосибирск, Россия, 2003).

Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в центральных изданиях, в трудах СО РАСХН, НГАУ. Автором опубликовано 28 работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 148 страницах, содержит 62 таблицы, 5 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения, выводов, предложений и приложений. Список литературы включает 287 наименований, в том числе 76 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Дементьев, Александр Владимирович

выводы

1. Определены средние значения цитохимических и биохимических показателей крови, клеток крови, тканей, митохондрий различных органов свиней СМ-1, которые могут служить в качестве нормы. Исследование активности ферментов в лимфоцитах и нейтрофилах крови цитохимическими методами дает большую прижизненную информацию о клеточном метаболизме без применения биопсии.

2. Изучена кинетика 10 цитохимических и биохимических параметров крови свиней. Выявлена возрастная динамика изучаемых показателей. Максимальная активность сукцинатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, а -глицерофосфатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, миелопер-оксидазы в клетках крови и сывороточных фосфатаз обнаружена в 3-4-месячном возрасте животных. Наибольший уровень гликогена и ли-пидов в нейтрофилах крови установлен в 5 и 6 месяцев. Обнаруженные изменения активности клеточных ферментов в крови свиней СМ-1 разных генотипов могут быть основой для мониторинга по этим тестам в процессе совершенствования породы.

3. Установлено влияние генотипа хряков-производителей на цитохимические и биохимические параметры крови, клеток крови, тканей и митохондрий различных органов потомков. Доля влияния генотипа отцов на изучаемые показатели в крови и клетках была в пределах от 5,2 % для кислой фосфатазы сыворотки крови до 19,5 % для сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах. Большее влияние генотипа хряков на активность клеточных дегидрогеназ у потомков было выражено в возрасте 3 месяцев. Влияние генотипа производителей составляло от 14,6 до 20,1 %.

4. Найдены различия по активности фосфатаз в восьми тканях свиней. Большая активность щелочной фосфатазы была определена в почках, двенадцатиперстной кишке, печени; кислой фосфатазы — в печени, почках.

Выявлены различия по активности оксидоредуктаз в митохондриях печени и сердца свиней. Обнаружено, что у дочерей Светлого 1704 и Совета 1618 активность фосфатаз в тканях и оксидоредуктаз в митохондриях различных органов была значительно выше, чем у потомства Сигнала 1440 и Соболя 139.

5. Коэффициенты наследуемости активности клеточных дегидроге-наз у свиней СМ-1 в возрасте 3 месяцев были довольно высокими и изменялись от 0,584 до 0,804. Эти данные свидетельствуют о наличии существенного генетического разнообразия по активности ферментов в изучаемой популяции свиней.

6. Наблюдались возрастные изменения фенотипической изменчивости в отношении изучаемых параметров у свиней. Самая низкая индивидуальная изменчивость отмечена у клеточных дегидрогеназ в возрасте 2 месяцев. В 3-месячном возрасте фенотипическая изменчивость у этих ферментов нарастала. В возрасте 4 месяцев вариация энзимов увеличивалась от 2 до 5 раз в сравнении с 2 месяцами. Затем она снижалась в 5 месяцев. Наибольшее фенотипическое разнообразие клеточных ферментов было в 6 месяцев. Изучена изменчивость цитохимических и биохимических показателей крови, тканей, субклеточных структур различных органов животных. Определены 2 группы параметров, имеющих среднюю и низкую степень изменчивости. Выявлена большая индивидуальная изменчивость свиней по активности кислой фосфатазы в тканях. Среднее фенотипическое разнообразие найдено для сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов, низкое - для миелопероксидазы нейтрофилов.

7. Исследована повторяемость цитохимических параметров крови животных. В возрасте 2-5 месяцев обнаружены наиболее высокие коэффициенты повторяемости (0,363-0,590; р<0,05-0,001). Эти данные подтверждают возможность использования активности клеточных ферментов в молодом возрасте для прогноза ферментативной активности в другие возрастные периоды.

8. Коэффициенты корреляции между активностью клеточных ферментов изменялись от 0,555 до 0,787 (р<0,05-0,001). Установлено наличие высокой положительной корреляции между уровнем цинка в щетине и активностью щелочной фосфатазы в сыворотке крови, печени, мышцах и почках свиней (р<0,05-0,001). Существует средняя достоверная связь между содержанием кадмия в щетине и активностью сукцинатдегидрогеназы в митохондриях печени и сердца (р<0,05). Полученные данные свидетельствуют о наличии средней положительной связи между уровнем меди в волосе и активностью цитохромоксидазы в митохондриях печени и сердца (р<0,05). Следовательно, выявлена возможность использования уровня цинка, меди, кадмия в щетине для прогноза активности некоторых ферментов в органах и тканях свиней.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Дементьев, Александр Владимирович, Новосибирск

1. Агишева Н.В. Фотоиидуцироваиные изменения структурно-функциональных свойств некоторых изоформ лактатдегидрогеназы в присутствии биогенных аминов: Автореф. дис. канд. с.-х. наук. - Воронеж, 2002. - 24с.

2. Авцин А.П. Микроэлеменозы человека /А.П. Авцин, А.А. Жаворонков, М.А. Риш, Л.С. Строчкова. М.: Медицина, 1991. - 496с.

3. Агаджанян А.Н. Химические элементы в среде обитания и экологический портрет человека / А.Н. Агаджанян, А.В. Скальный. М.: Изд-во КМК, 2001. -84с.

4. Алексеенко В.А. Цинк и кадмий в окружающей среде. М.: Наука, 1992. -200с.

5. Алиев А.А. Изучение липидного обмена у сельскохозяйственных животных / А.А. Алиев М.: Колос, 1980. - 380с.

6. Арчаков А.И. Биохимия и молекулярная биология / А.И. Арчаков, А.С. Медведев, В.П. Скулачев. М., 2002. - С. 302-341.

7. Бабеев А.А. Использование свиней типов СМ-1 для гибридизации / А.А. Бабеев, Г.Е. Казачок, В.И. Ефимов //Зоотехния. 1992. - № 2. — С. 5-7.

8. Баджинян С.А. Роль липидов в процессах взаимодействия различных мембранных структур с эндогенными физиологически активными веществами. М., 1985.-40с.

9. Бажов Г.М. Прогнозирование продуктивных качеств свиней в раннем возрасте: Учебное пособие / Г.М. Бажов, J1.A. Бахирева. Краснодар: Изд-во КГАУ, 1994.- 143 с.

10. Байматов В.Н. Регуляция обмена веществ у животных в норме и патологии / В.Н. Байматов, Э.Р. Исмагилова // Акад. вет. наук РФ; AM Респ. Башкортостан. Башк. гос. аграр. ун-т. Уфа, 2000. - 155 с.

11. Безенко С. Использование генного уровня наследственности в племенном и промчшленном свиноводстве // Свиноводство 2004. - № 2. - С. 2-3.

12. Безбородов A.M. Ферментативные реакции в биотехнологии. — М.: Наука, 1994.-64с.

13. Безбородов A.M. Ферментативные реакции в биохимии. М.: Наука, 1996.- 181с.

14. Безбородов A.M. Фосфатазные реакции. М.: Московская наука, 1994. -108с.

15. Бекенев В.А. Селекция свиней. — Новосибирск: СО ТАСХН, 1997. — 184с.

16. Белоновская Р.С. Ферменты / Р.С. Белоновская, А.И. Давыдова М., 2002.

17. Березин И.В. Исследование в области ферментативного катализа и инж-нерной энзимологии.-М.: Наука, 1990. -382с.

18. Березов Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровин. М.: Медицина, 1998.-704.

19. Бобкова Е.В. Сравнительное исследование структуры и функции фенила-лакил-ТРИК-синтетаз из Е. coli и Thermus thermophilus: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Новосибирск, 1991. - 16с.

20. Боярчук О.Д. Изменения в лизосомальном аппарате нейтрофилов при диссеминированном внутрисосудистом свёртывании крови / О. Д. Боярчук, С. Б. Коваль, Н.В. Лунина // Физиологический журнал. 2000. - Т. 46. - № 3. - С. 72-77.

21. Браунштейн А.Е. Процессы и ферменты клеточного метаболизма. М., 1987.-С. 172-191.

22. Бут П.Г. Антимикробная активность миелопероксидазы пероксидосом нейтрофила / П.Г. Бут, Р.А. Муравьев, В.А. Фомина, В.В. Росовин //Изв. РАН. Сер. биол. 2002. - № 3. - С. 266-270.

23. Валуев А.А., Гришин Б.Н., Шнесен М.И./Под ред. Романовского Ю.В. Молекулярная динамика ферментов. М.: МГУ, 2000. - С. 166.

24. Варнина Г.П. Лабораторные изменения липидов, липопротеидов и апо-липротеинов / Г.П. Варнина, А.Б. Сигалова, Н.Г. Рифан. М. 1997. - 429с.

25. Васильева JI.A. Биологическая статистика (Избранные главы). — Новосибирск: ИЦиГ СО РАН. 2000. - 124 с.

26. Васильева J1.A. Статистические методы в биологии. — Новосибирск : ИЦиГ, НГАУ. 2004. - 127 с.

27. Васильева Э. Когда успех обусловлен генетикой // Животноводство России.-2001.-№ 9.-С. 8-10.

28. Вебер Дж. Упорядоченная биохимическая программа экспрессии гена в раковых клетках // Биохимия. 2001. - Т. 66, № 10. - С. 1438-1449.

29. Виноградова Р.П. Принципы классификации и номенклатуры ферментов // Укр. биохим. журн. 2001. - Т. 73, № i . с. 153-159.

30. Виноградова Р.П. Молекулярные основы действия ферментов: Учеб. пособие. — Киев: Выш. шк., 1978. 280 с. 55.

31. Волков В.В. Формирование стада свиней нового генотипа и перспективы его совершенствования / В.В. Волков, Л.Д. Шмаргун, Н.В. Гупалов, М.А. Фенютина // Труды ВНИИплем «Итоги селекционно-племенной работы в свиноводстве». М.: Лесные поляны. 1992, 286 с.

32. Гаверова Ю.Г. Исследование влияния аминокислот на глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу и малатдегидрогеназу тутового шелкопряда / Ю.Г. Гаверова, А.С. Коничев //Съезд Биохимического общества РАН: Тез. стенд, со-общ. Ч. 1. Пущино, 1997. - 180с.

33. Гаврилин А.С. Разработка ферментного препарата для лечения больных маститом коров в лактационный период: Автореф. дис. . канд. вет. наук. -М., 2002.-21с.

34. Галебская JI.B. Ферменты и ферментные препараты / J1.B. Галебская, B.C. Немировский // С.-Петерб. гос. мед. ун-т им. И.П. Павлова. СПб.: СПбГМУ, 2001.-84с.

35. Герасимов В. Воспроизводительные качества помесных свиноматок и рост поросят при разных сроках подсосного периода / В.Герасимов, Е. Пронь, Г. Походня // Свиноводство. 2004. - № 2. - С. 19-20.

36. Гольдштейн Б.Н. Кинетические модели мультифункциональных ферментов / Б.Н. Гольдштейн, Г.А. Ермаков // 2-й съезд биофизиков России: Тез. докл. М., 1999. - Т. 2. - С. 405-406.

37. Горячев А.Н. Транспорт липидов и продуктов ПОЛ от кишечника при ожоговой травме различной тяжести //Актуальные проблемы патофизиологии: Межгород, конф. молодых ученых. СПб., 2002. - С. 24-26.

38. Гришкова А.П. Селекция свиней типа КМ-1 на высокие откормочные и мясные качества / А.П. Гришкова // Интенсификация животноводства в Кемеровской области: Сб. науч. тр. ВАСХНИЛ. — Новосибирск, 1990. С. 4245.

39. Гришкова А.П. Улучшение откормочных качеств свиней типа КМ-1 методом чистопородного разведения / А.П. Гришкова, Н.А. Тарасов, Е.В. Нечаева // Разведение и селекция в животноводстве. Новосибирск, 1990. - С. 90-94.

40. Гришкова А.П. Основные итоги селекции кемеровского заводского типа (КМ-1) / А.П. Гришкова // Сельскохозяйственная наука и ее влияние на развитие агропромышленного комплекса Кузбасса: Сб. науч. тр. РАСХН Кемерово, 1994.-С. 132-137.

41. Гришкова А.П. Создание и совершенствование высокопродуктивных типов и пород свиней для условий Сибири с использованием современных методов селекции: Автореф.дис. .д-ра.с.-х.наук. Новосибирск, 1994. - 49с.

42. Гудилин И.И. Генетическая структура по группам крови сибирского типа новой мясной породы свиней /И.И. Гудилин // Генетика, разведение и селекция свиней. М. - 1988. - С. 25-27.

43. Гудилин И.И. Откормочные и мясные качества свиней создаваемого сибирского типа новой мясной породы / И.И. Гудилин, А.А. Фридчер // Генетика. Разведение и селекция свиней. М. - 1988 (1989). - С. 190- 194.

44. Гудилин И.И. Выведение, совершенствование, использование кемеровской и скороспелой мясной пород свиней в Сибири: Автореф. дисс. . д-ра с.-х.наук. Новосибирск, 1995. - 37с.

45. Гудилин И.И. Методы создания и совершенствования пород свиней в Сибири / И.И. Гудилин, Б.Л. Панов, В.Л. Петухов //Проблемы селекции сельскохозяйственных животных. Новосибирск: Наука. Сибирское предприятие РАН, 1997.-С. 172-188.

46. Гудилин И.И. Интерьер и продуктивность свиней /И.И. Гудилин, В.Л Петухов, Т.А. Дементьева / Новосиб. гос. аграр.ун-т. Новосибирск, 2000. -251 с.

47. Гучь Ф.А. Южный тип мясной породы свиней / Ф.А. Гучь, Гуменный М.Ф. // Зоотехния. 1992. - № 9-10. - С. 7-10.

48. Данкверт С. Свиноводство / С. Данкверт, И. Дунин, В. Гарай, Е. Суслина // Животноводство России. 2003. - С. 2-5.

49. Данкверт С.А. Совершенствовать структуру животноводческого подкомплекса АПК // Зоотехния. 2004. - № 3. - С. 2-4.

50. Дегтева Г.К. Микробные гидролазы ферментные препараты / Г.К. Дег-тева, С.Н. Лавровский, Е.В. Беляева. — Н. Новгород: ННГУ им. Н.И. Лобачевского, 2001.-224с.

51. Дементьев А.В. Ферменты тканей свиней /А.В. Дементьев //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2002. - № 1-2. — С.97-100.

52. Дементьев А.В. Использование молекулярных тестов в разведении животных /А.В. Дементьев // Успехи современного естествознания. М., 2003. -№5.-С. 37-39.

53. Дементьев А.В. Прогноз продуктивности свиней по цитохимическим тестам крови /А.В. Дементьев // Зоотехния. 2004. - № 2. - С.26 —27.

54. Джанамия П.Х. Современные аспекты клинического применения ингибиторов ангиотензин-превращающего фермента: Учеб. пособие / П.Х. Джанамия, В.А. Назаренко, С.А. Николенко М.: Рос. гос. мед. ин-т, 1999. - 48с.

55. Диксон И. Ферменты: В 3-х т. Т. 1. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. -389 с.

56. Дунин И.М. Организация генетической экспертизы и племенного материала (продукции) в России / И.М. Дунин, И.А. Новиков // Современные проблемы развития свиноводства. Матер. 7-ой междунар.научно-произв.конф. Жодино. 2000. - С. 44-45.

57. Дунин И. Состояние племенного свиноводства в хозяйствах России по результатам бонитировки за 2002 г. / И. Дунин, В. Гарай // Свиноводство. -2004.-№ 1.-С. 7-9.

58. Епринцев А.Т. Ферментативная регуляция метаболизма ди- и трикарбо-новых кислот в растениях / А.Т. Епринцев, В.Н. Попов. Воронеж: Изд-во Воронеж, гос. ун-та, 1999. - 191с.

59. Женг И.-Б. Инактивация и частичное разворачивание лактатдегидрогеназы из сердца свиньи под действием п- хлормеркурибензоата /И.-Б. Женг, Б.-И. Чен, К.-С. Уанг// Биохимия. 2002 - Т.67, №5. - С. 699-704.

60. Жеребцов Н.А. Биохимия / Н.А. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. -Воронеж, Воронеж, гос. ун-т, 2002. 390с.

61. Зигненко А.В. Изучение функционального состояния криоконсер-вированных митохондрий печени крыс / А.В. Зигненко, И.Б. Мусатова, В.А. Моисеев // Укр. биохим. журн. 1999. - Т. 71, № 6. - С. 66-70.

62. Иекман И.С. Микросомальная ферментная система организма / И.С. Иек-ман, Е.А. Посонов. Киев: Феникс, 1996. - 340с.

63. Инструкция по бонитировке свиней / Гл. упр. животноводства (с Госинспекцией по плем. делу). М.: Колос, 1976. - 18 с.

64. Кабанов В.Д. Породы свиней / В.Д. Кабанов, B.C. Терентьева. М.: Аг-ропромиздат, 1985.-336.

65. Кабанов В.Д. Новая методика создания мясной породы свиней // Вестник с.-х.науки. 1992. - № 4. - С. 32-37.

66. Кабанов В.Д. Новая порода свиней скороспелая мясная // Вестник Российской академии с.-х. наук. - 1993. - № 6. - С. 6-9.

67. Кабанов В.Д. Новая порода свиней скороспелая мясная // Зоотехния. -1994.-№ 1.-С. 2-4.

68. Кабанов В.Д. Теоретические основы и методы работы по созданию скороспелой мясной породы свиней / В.Д. Кабанов, Н.В. Гупалов, В.А. Епишин, П.П. Кошель // Вестник Российской академии с.-х. наук. 1994. - № 6. - С. 41-46.

69. Кабанов В.Д. Теория высокой скорости роста свиней и ее практическое использование // Вестник Российской академии с.-х. наук. 1995. - № 4. - С. 36-39.

70. Кабанов В.Д. Новые направления селекции в свиноводстве // Вестник Российской академии с.-х. наук. 1996. - № 4. - С. 35.

71. Кабанов В.Д. Теория и методы выведения скороспелой мясной породы свиней /В.Д. Кабанов, В.Н. Гупалов, В.А. Епишин, П.П. Кошель. -М.: Изд-во ВНИИплем, 1998.-380с.

72. Кабанов В.Д. Свиноводство. М.: Колос, 2001.-431.

73. Кабанов В.Д. Интенсивное производство свинины. М.: Изд-во Россель-хозакадемии, 2003. - 400 с.

74. Казанков И. Иммуногенетическая характеристика хряков и ее использование при двух- и трехпородном скрещивании / И. Казанков, А. Коптелова, Н Сидуков, В. Хлебов // Свиноводство. 2004. - № 2. - С. 3-5.

75. Калашникова JI.A. Генная диагностика стрессчувствительности свиней/ JI.A. Калашникова, Н.В. Рыжова, Н.В. Гупалов: Тез. докл. II междунар.конф. «Молекулярно-генетические маркеры животных» // Аграрная наука. Киев, 1996.-С. 10.

76. Калуженц К.А. Ферменты в животноводстве. Воронеж: Центр. - Чернозем. кн. изд-во, 1974. - 56с.

77. Клемин В. Откормочные и мясные качества свиней различных генотипов

78. В. Клемин, В. Фатхуддинова, М. Ярбеков // Бюлл. ин-та генетики и разведения с.-х.животных. 1992. - Вып. 132. - С. 26-28.

79. Климов А.Н. Обмен липидов и липопротеидов / А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева. СПб., 1999. - 505с.

80. Клячко О.С. Изменение функциональных и структурных особенностей изоферментов лактатдегидрогеназы на разных стадиях онтогенеза Danio rerio / О.С. Клячко, Н.Д. Озернюк // Онтогенез. 2001.-Т .32, №5. - С. 374-376.

81. Кнорре Д.Г. Биохимия / Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина. М.: Высш. шк., 2002.-386с.

82. Кокорев В.А. Влияние йода на развитие и воспроизводительную функцию свиней / В.А. Кокорев, Е.В. Громова, B.C. Сушко, Г.Г. Смирнов // Зоотехния. -2004. № 1.-С. 16-18.

83. Колб В.Г. Клиническая биохимия / В.Г. Колб, B.C. Камышников. -Минск: Беларусь, 1976. 278 с.

84. Кольман А.В. Наглядная биохимия / А.В. Кольман, К.Г. Рем. М., 2000. -354с.

85. Комов В.П. Биохимия. М.: Дрофа, 2004. - 640 с.

86. Кононов В. Пути возрождения отрасли свиноводства в России // Свиноводство. 2002. - Спец. внеочередной номер. - С. 16-19.

87. Коралев А.П. Основы биохимии. Углеводы и липиды живых организмов / А.П. Коралев, С.Б. Гридина. Кемерово, 2001. - 214с.

88. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии: Учеб. пособие для студ. биол. спец. ун-тов / Под общ. ред. С.Е.Северина -2-е изд., перераб. и доп. — М.: Высш. шк., 1980. 272с.

89. Кочетов Г.А. Тиаминовые ферменты / АН СССР, Науч. совет по проблемам биохимии животных и человека. Ин-т биохимии им. А.Н. Баха. М.: Наука, 1978.-232с.

90. ЮЗ.Кретович В.Л. Введение в энзимологию. М.: Наука, 1986. — 332.

91. Крупянко В.И. Векторный метод представления ферментативных реакций / АН СССР. Ин-т биохимии и физиологии микроорганизмов. М.: Наука, 1990.-142с.

92. Крупянко В.И. Векторный метод представления ферментативных реакций: Автореф. дис. . д-ра биол. наук. Пущино, 1991.- 34с.

93. Крючковский А.Г. Репродуктивные качества свиноматок крупной белой породы при скрещивании с хряками мясных пород / А.Г. Крючковский, Д.Н. Лейман, В.В. Косачев //Разведение и селекция в животноводстве. Новосибирск, 1990а.-С. 70-72.

94. Крючковский А.Г. Развитие и продуктивность свиней создаваемого сибирского типа новой мясной породы / А.Г. Крючковский, Д.Н. Лейман, Г.Л. Дмитриева //Разведение и селекция в животноводстве. Новосибирск, 19906.-С. 72-76.

95. Кузнецов В.Ф. Влияние активации перекисного окисления липидов на формирование недостаточности фагоцитоза в эксперименте / В.Ф. Кузнецов, М.В. Милютин, В.А. Черешнев, В.Н. Захаров, Л.В. Пекшев // Кир. гос. мед. ин-т. Киров, 1996. - 7с.

96. Кудинов С.А. Биохимия животных и человека. — Киев: Наукова думка, 1991.-368 с.

97. Лазарева Е.С. Демиелизация нервных волокон при действии фосфоли-пидов / Е.С. Лазарева, А.Е. Демидов, Г.В. Максимов, С.И. Малкин //Вестн. МГУ. Сер. 16. 2001. - №4. - С. 21-24.

98. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. 343 с.

99. Левашов А.В. Мицелярная энзимология: методы и техника / А.В. Левашов, Н.А. Клячко // Изв. РАН. Сер. Химия. 2001 .-№ 10. - С. 163 8-1651.

100. Ленинджер А. Митохондрия. М.: Мир, 1966. - 315 с. 1 Н.Ленинджер А. Биохимия. -М.: Мир, 1974.-957.

101. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. -М.: Мир, 1985. 1056с.

102. Лейман Д.Н. Скрещивание маток создаваемой мясной породы СМ-1 с хряками гемпшир и дюрок в условиях свинокомплекса / Д.Н. Лейман, А.Г.

103. Крючковский, В.В. Корсачев: Сб.науч.тр. «Повышение эффективности селекционно-племенной работы в животноводстве» СО РАСХН, СибНИП-ТИЖ. 1994. - С. 40-43.

104. Литвиненко Н.М. Эндогенные фосфолипазы А2: Структура и функция / Н.М. Литвиненко, М.А. Кисель; АН Белорус. ССР. Ин-т биоорган, химии. Минск: Наука и техника, 1991. - 270с.

105. Марри Р. Биохимия человека: В 2-х т. / Р. Марри, Д. Тренер, П. Мейес, В. Родуэлл.- М.: Мир, 1993.-Т. 1.-381 с, Т. 2.-414с.

106. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под ред. В.В. Меньшикова. -М.: Медицина, 1987. 368 с.

107. Меркурьева Е.К. Биометрия в селекции и генетике сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1970. — 424 с.

108. Меркурьева Р.В. Биохимические и цитохимические методы определения активности ферментов и фермент-субстратных систем различной клеточной локализации: Методические рекомендации / Р.В. Меркурьева, Г.Л. Билич, Р.П. Нарциссов. М., Йокшар-Ола, 1982. 40 с.

109. Мирзов Э.Б. Жиро кислотный состав липидов плазмы крови облученных овец / Э.Б. Мирзов, В.О. Кобянко // С.- х. биология. Сер. биол. жив. -2000.-№2.- С. 79-83.

110. Мурашов С.В. Влияние газовой среды с повышенным содержанием углекислого газа на соотношение насыщенных липидов в цитоплазматических мембранах крови / С.В. Мурашов, В.Е.Куцанова, Ю.В. Дворецкая. -СПб.: Изд- во С.- Петерб. гос. ун.-та, 2001. С. 73-75.

111. Муртазина Д.А. Исследование фосфорилирования: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М., 1999. - 20с.

112. Мысик А.Т. Животноводство стран мира на рубеже веков //Зоотехния. — 2004.-№ 1.-С.2-8.

113. Нагоев Б.С. Пособие по клинической цитохимии нейтрофильных лейкоцитов /Каб.-Балк. гос. ун-т. Нальчик, 1979. - 113с.

114. Никитченко И.Н. Мясные качества и устойчивость к стрессам свиней, используемых для создания западного типа новой мясной породы / И.Н. Никитченко, Л.З.Гильман // Докл. ВАСХНИЛ. 1985. - № 11. - С. 34-36.

115. Николаев А.Я. Биохимия. М.: МИА, 2001. -476с.

116. Новгородцева Т.П. Возрастные и половые особенности фосфолипидного состава эритроцитов крыс линии Вистар в процессе постнатального онтогенеза / Т.П. Новгородцева, Э.А. Эндакова, И.Л. Иванова // Рос. физиол. журн. -2002. Т.88, №1. - С. 53-62.

117. Нуепина О.С. Биосинтез аденозинтрифосфата: элементарный химический синтез АТФ в окислительном фосфолирировании. М.: СПБу, 1997.-150с.

118. Овсянников А.И. Породы свиней в СССР. М.: Изд-во ВАСХНИЛ, 1970.-84 с.

119. Пангошкин Д.Е. Использование метаболитов углеводно-жирового обмена вымени и синтез молочного жира у лактирующих коров.: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Боровск, 1999. - 27с.

120. Панов Б.Л. Проблемы селекции сельскохозяйственных животных / Б.Л. Панов, В.Л. Петухов, Л.К. Эрнст и др. Новосибирск: Наука, 1997. - 283с.

121. Патрашков С.А. Аккумуляция тяжелых металлов в волосе сельскохозяйственных животных разных видов: Автореф. дисс. .канд.с.-х.наук. Новосибирск, 2003. - 18 с.

122. Петухов B.JI. Генетические основы селекции животных / В.Л Петухов, Л.К. Эрнст, И. И. Гудилин. М.: Агропромиздат, 1989. - 448 с.

123. Петухов В.Л. Ветеринарная генетика: ( По спец. «Ветеринария») / В.Л. Петухов, А.И. Жигачев, Г.А. Назарова. — 2-е изд., перераб. И доп. М.: Колос, 1996.-383.

124. Питерская Л. Современное состояние свиноводства Ставропольского края / Л. Питерская, И. Погодаева // Свиноводство. 2001. - № 6. - С. 9-11.

125. Плакунов В.К. Основы энзимологии. М.: Логос, 2001. - 127с.

126. Погодаев В.А. Интерьерные особенности свиней степного типа в зависимости от стресс-реакции на фторотановый тест //Новые направления поро-дообразования и породоулучшения в свиноводстве. — Персиановка. — 1992 (1993).- С. 75-84.

127. Попов Е.М. Кислые и щелочные реакции в организме / Е.М. Попов, Н.К. Наградов, М. Чернов.- М.: Наука, 1995. 96с.

128. Почерняев Ф.И. Селекция и продуктивность свиней. — М.: Колос, 1979. — 223 с.

129. Пряхин А.Н. Теория и методы строго кинетико-термодинамического анализа стационарных скоростей ферментативных реакций: Автореф. дис. . д-ра хим. наук. М, 1990. - 47с.

130. Рансберг К.Н. Энзимы: Ключ к здоровью и долголетию / Пер. с нем. -СПб.: Питер, 1999. 191с.

131. Ремонавский Ю.М. Молекулярная динамика ферментов / Ю.М. Ремо-навский, В. Эбелинч. М.: МГУ, 2000. - 300с.

132. Реннеберг Р. Эликсиры жизни: новейшие результаты в области исследования ферментов / Пер. с нем. М.С. Одинцовой; Под ред. И.В. Берзина. — М.: Мир, 1987.- 151с.

133. Решетник JI.A. Клинико-гигиеническая оценка микроэлементов дисбалансов у детей Прибайкалья: Автореф. дис. . д-ра биол. наук. Иркутск, 2000. - 43с.

134. Риш М.А. Генетический контроль микроэлементов человека и животных // Материалы второй российской школы «Геохимическая экология и биогеохимическое районирование биосферы». М., 1999. - 45с.

135. Розенгарт В.И. Ферменты двигатели жизни / АН СССР. - М.: Наука, Ленингр. отд-ние, 1983. - 160с.

136. Рудишин О.Ю. Оценка откормочных и мясных качеств свиней новой специализированной мясной породы // Бюл.науч.работ ВНИИГРЖ. С.Пб. -Пушкин. - 1993а. - № 136. - С. 6-9.

137. Рудишин О.Ю. Оценка хряков новой мясной породы по собственной продуктивности // Бюл.науч.работ ВНИИГРЖ. с. Пб. - Пушкин. - 19936. -№ 136.-С. 9-11.

138. Русинова О.С. Влияние температурной акклиматизации на активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы некоторых тканей черноморских султанок // Укр. биохим. журн. 1997. - Т.69, №5, 6 - С. 54-63.

139. Рыжова Д.П. Особенности ингибирования избытком субстрата различных олигомерных форм лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы / Д.П. Рыжова, М.В. Иванов // 2-й съезд биохим. о-ва РАН: Тез. стенд, сообщ. Ч. 1. -Пущино, 1997. -63с.

140. Сабурова Е.А. Ингибиторное действие полиэлектролитов на олигомер-ные ферменты / Е.А. Сабурова, М.Е. Бобрешова, Л.И. Елфимова, Б.И. Сухо-руков // Биохимия. 2000. - Т.65, №8. - С. 1151-1161.

141. Савченко М.Ф. Состояние здоровья детей, проживающих в зоне влияния угольных разрезов / М.Ф. Савченко, Л.А., Решетник, О.В. Лященко // Гигиена и санитария. 2000. - № 3. - С. 57-58.

142. Северин С.Е. Молекулярные основы действия ферментов /С.Е. Северин, Г.А. Кочетова. -М.: Изд-во моек, ун-та, 1985. 188с.

143. Северин С.Е. Биохимические основы патологических процессов. М.: Медицина, 2000. - 304с.

144. Сергеева И.Ю. Разработка способов активации ферментов с использованием молочной сыворотки: Автореф. дис. . канд. техн. наук. Кемерово, 2002.-18с.

145. Скальный А.В. Микроэлементозы человека (диагностика и лечение). — М.: Науч. мир, 1999. 96с.

146. Складовская Т.А. Взаимодействие белков и липидов молока коров и их динамика в период лактации: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. М., 2001.— 17с.

147. Скороходов А.В. Моделирование процессов ферментации в мембранных биореакторах: Автореф. дис. . канд. техн. наук. -М., 2000. 16с.

148. Скулачев В.П. Возможная роль активных форм О2 при вирусных инфекциях // Биохимия. 1998. - Т.63, №12. - С. 1691-1694.

149. Скулачев В.П. Кислород и явления запрограммированной смерти. М., 2000. - 50с.

150. Скуковский Б.А. Микроэлементы в кормах и продуктах животноводства Западной Сибири. Новосибирск: Зап.-Сиб кн. изд-во, 1978. — 103с.

151. Смолин С.Г. Физико-химические показатели и содержание ферментов панкреатического сока у кур, свиней и собак в сравнительно-видовом аспекте: Автореф. дис. д-ра биол. наук. Улан-Удэ, 1998. - 42с.

152. Снедекор Дж. У. Статистические методы в приложении к исследованиям в сельском хозяйстве и биологии. М.: Изд-во Сельхозиздат, 1961. — 503 с.

153. Соколов О.А. Экологическая безопасность и устойчивое развитие. Кн. 1. Атлас распределения тяжелых металлов в окружающей среде / О.А. Соколов, В.А. Черников. -Пущино, 1999. 164с.

154. Соколов Н. Чтобы не повторить ошибок прошлого // Животноводство России. 2005. - № 4. - С. 17-19.

155. Сопина В.А. Электрофоретические формы глюкозо-6-фосфатдегидро-геназы, кислой фосфатазы и эстераз у амеб Chaos carolinense и Ch. illinoisens // Цитология. 1999. - Т.41, №32 - С. 218-222.

156. Степанов А.Е. Физиологически активные липиды / А.Е. Степанов, Ю.М. Краснопольский, В.И. Швец. М.: Наука, 1991,- 136с.

157. Степанов В.И. Совершенствование селекционно-племенной работы -основа интенсификации породообразовательного процесса //Создание новых пород с.-х.животных. -М. 1987. — 148с.

158. Сторожок Н.М. Особенности состава липидов сиговых рыб — потенциальных источников полиненасыщенных жирных кислот семейства омега-3 / Н.М. Сторожок, М.М. Левочев, А.Н. Патрикеев // Материалы науч.-практ. конфер. М., 1998. - С. 177-180.

159. Суханова Г.А., Серебров В.Ю. Биохимия клетки. Томск: Чародей, 2000.- 183с.

160. Суханова Г.А. Активность протеолитических ферментов и ингибиторов в плазме крови мышей при опухолевом росте / Г.А. Суханова, О.Е. Акбашева // Бюл. Экспер. Биол. и мед. 1999. - т. 128. - № 7. - С. 69-72.

161. Сухова Н.О. Иммуногенетический анализ по группам крови племенных свиней крупной белой породы в процессе длительного замкнутого разведения / Н.О. Сухова, B.C. Деева, A.M. Андрющенко // Доклады РАСХН. -1997а.-№5.-С. 33-34.

162. Сухова Н.О. Оценка иммуногенетических различий между линиями и семействами свиней разных пород при замкнутом разведении / Н.О. Сухова, A.M. Машуров, B.C. Деева, Н.М. Набродова // Вестник Российской Академии с.-х.наук. 19976. - № 4. - С. 51 -54.

163. Тарасов Н.А. Пути и методы совершенствования кемеровского заводского типа мясных свиней / Н.А. Тарасов, В.У. Жебровская, А.П. Гришкова // Бюл.науч.работ ВИЖ. 1984. - Вып. 73. - С. 10-12.

164. Тимофеев П. Эффективность гибридизации в свиноводстве в условиях интенсивной технологии / П. Тимофеев, А. Рябов, Н. Пунськова // Зоотехния. 2004. - № 2. - С. 23-24.

165. Тихонов В.Н. Исполозование групп крови при селекции животных. -М.: Колос, 1987.-391 с.

166. Тищенко П.Д. Био-власть в эпоху биотехнологий / Рос. акад. наук. Ин-т филос.-М., 2001.- 177с.

167. Топиха В. Обеспечение высокой продуктивности свиней и селекционного процесса / В. Топиха, А. Волков // Свиноводство. 2004. - С. 2-3.

168. Трофимов В.А. Биохимия. Липиды, исследования липидов в клини-ке/В.А. Трофимов, В.Г. Янович, П.З. Лагадюк. Саранск, 2001. - 140с.

169. Трофимова Д.Н. Регуляция каталитической активности и олигомерного состава ферментов в обращенных мицеллах путем химической модификации (гидрофилизации и гидрофобизации): Автореф. дис. . канд. хим. наук. М., 2001.-24с.

170. Тютюнник Н. Н. Изоферментные спектры лактатдегидрогеназы органов норок и песцов в постнатальном развитии / Н.Н. Тютюнник, Л.К. Кожевникова, А.Р. Унжаков, Х.И. Мелдо // Онтогенез.—2002.— Т. 33, № 3.— С. 222229.

171. Тютюшкин Н.Н. Изоферментные спектры лактатдегидрогеназы органов норок и песцов в постнатальном развитии / Н.Н. Тютюнник, Л.К. Кожевникова, А.Р. Унжаков, Х.И. Мелдо //Онтогенез. 2002. - Т.ЗЗ, №3. - С. 222-229.

172. Унжаков А.Р. Возрастные особенности изоферментных спектров лактатдегидрогеназы органов норок / А.Р. Унжаков, Н.Н. Тютюнник, Х.И. Мелдо //Актуал. пробл. вет. науки: Тез. докл. / Моск. гос. акад. вет., мед. и битех-нол.- М., 1999. С. 229-230.

173. Ухтверов А. Скрещивание свиноматок крупной белой породы разных генотипов с хряками импортных пород // Свиноводство. 2004. - № 2 — С.5-6.

174. Федоренко Б.Н. Научное обеспечение процессов мембранного выделения ферментов: Автореф. дис. . д-ра техн. наук. М., 2002. — 47с.

175. Фереит Э. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир, 1999. -300с.

176. Филенко В.Ф. Оптимизация интенсивного выращивания ремонтного молодняка СМ-1 степного типа // Организация направленного выращивания молодняка свиней. Одесса. - 1989. - С. 20-28.

177. Филенко В.Ф. Методы ускоренной селекции при создании и совершенствовании новой мясной породы свиней СМ-1 степного типа // Повышение продуктивных и племенных качеств с.-х. животных. Ставрополь. 1990 (1992).-С. 77-82.

178. Филенко В.Ф. Особенности онтогенеза СМ-1 степного типа в эмбриональный и постэмбриональный периоды // Новое в разведении, в селекции, кормлении и технологии содержания свиней. Кинель. - 1991. - С. 106-110.

179. Филенко В.Ф. Новая мясная порода свиней СМ-1 степного типа на Ставрополье / В.Ф. Филенко, В.В. Поляков, С.Я. Лисохмара // Повышение продуктивных и племенных качеств с.-х. животных. Ставрополь. — 1991 (1992). -С. 77-82.

180. Филенко В.Ф. Рекомендации по ускорению селекции при совершенствовании районированных пород и создании степного типа новой мясной породы (СМ-1) // Повышение продуктивных и племенных качеств с.-х. животных. Ставрополь. — 1992. С. 84-86.

181. Филенко В.Ф. Иммуногенетическая характеристика популяции свиней СМ-1 степного типа и крупной белой породы // Зоотехния. 1993. - № 9. - С. 6-7.

182. ФилипповичЮ.Б. Основы биохимии. -М., 1999.-С. 163-192.

183. Фолконер Д.С. Введение в генетику количественных признаков: Пер. сангл. А.Г. Креславского, В.Г. Черданцева. М.: Агропромиздат, 1985 - 486 с.

184. Фудар И.О. Перекисное окисление липидов и процессы мембранодеста-билизации при гломерулонефрите у больных разного возраста / И.О. Фудар, Г.Г. Никулина // Журн. акад. мед. наук Украины. 2001. - Т.7, №2.- С. 285296.

185. Харатьян Е.Ф. Сравнительные данные по локализации дегидрогеназ у аэробных и анаэробных бактерий на субмикроскопическом уровне:Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1976. - 24с.

186. Шахов. А. Сохранение поросят при их доращивании // Свиноводство. — 2004.-№2.-С. 27-29.

187. Шейко И. П. Свиноводство республики Беларусь //Зоотехния. 2000. -№ 1. - С. 23-26.

188. Шманенков Н.А. Липидный обмен у сельскохозяйственных животных. -Боровск, 1978. 158с.

189. Эрнст Л.К. Генетические ресурсы сельскохозяйственных животных в России и сопредельных странах / Л.К. Эрнст, И.Г. Дмитриев, И.Н.Наронян СПб.: Изд-во ВНИИГРЖ, 1994. 473 с.

190. Юдинцева В.М. Влияние добавок ферментных препаратов в рационы свиней на процессы пищеварения: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — Дуб-ровицы, Моск. обл., 1971. 20с.

191. Ягужинский Л.С. О каталитической природе действия разобщителей окислительного фосфорилирования / Л.С. Ягужинский, Л.А. Ратникова, В.П. Скулачев //Митохондрии. Биохимические функции в системе клеточных ор-ганелл. М.: Наука, 1969. - С. 216-220.

192. Языкова М.Ю. Фосфорилирование лактатдегидрогеназы протеинкена-зами /М.Ю. Языкова, С.П. Петухов, В.И. Муронец // Биохимия. 2000. - Т.65, №Ю.-С. 1409-1414.

193. Янковский О.Ю. Образование комплекса между миелопероксидазой и оксолинами плазмы крови человека // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1995. -Т. 120, № 9. - С. 320-322.

194. Янович В.Г. Обмен липидов у животных в онтогенезе / В.Г. Янович, А.Н. Лагадюк, Н.В. Зачаров. М., 1991. - 317с.

195. Allen M.P. Computer simulations of liquids / M.P. Allen, D.J. Tildesley. Clarendon Press, Oxford, 1990. 115p.

196. Ambrosi L. Nephropathy induced by heavy metals / L. Ambrosi, C. Lowonte, L. Soleo et al. // Proceeding of the 4th Bari Seminar in Nephrology/ Bari, Italy, 1990.-P. 85-100.

197. Amir-Ahmady B. Regulation of the nutritional status / B. Amir-Ahmady, M.J. Salati Lisa//Biol. Chem.-2001.-Vol. 276, №13.- P. 10514-10523.

198. Anadalla P. Imbalance in coherence and recombination in gametie mitochondrial DNA / P. Anadalla, W.A. Eyre, S.M. Smith // Science. 1999. - Vol 286, № 5449. - P. 2324-2525.

199. Angle C.R. Osteotoxicity of cadmium and lead in HOSTE 85 and ROS 17/28 cells: relation to metallothionine induction and mitochonolrial binding / C.R. Angle, D.I. Thomas, S.A. Swanson // Biometales. 1993. - P. 179-184.

200. Bertini I. Handbock an metalloproteins /1. Bertini, A. Sigel, H. Sigel. Marcel Dekker, New York Basel, 2001. - P. 1182.

201. Bisogno Т. Biosynthesis uptake, and degradation of anandamide and palmi toylethanolamide in leukocytes / T. Bisogno, S. Maurelli, D. Melek, L. De Petro-cellis, V. Di Marzo//J. Biol. Chem. 1997, №6. - P. 3315-3323.

202. Bonomo R.S. Copper (II) completes with cycle (L-aspartil-L-aspartil) and cycle (L-glutamil-L-glutamil) derivatives and their antioxidant properties // I. Chem. Soc. Dalton. Trans. 1996. - № 14. p. 3093-3099.

203. Bustamante S. Nitrogen oxide products and dysfunction of mitochondria under apoptosis of red -thymocytes / S. Bustamante, G. Bersier, M. Romero // Arch. Bioch. and Biophys.- 2000.- Vol. 376, № 2. P. 239-247.

204. Campbell M.K. Biochemistry. New York: Intern. Edition, 1995. - 657 p.

205. Cecarves H. Polyfermentative origin of biosynthetic paths / H. Cecarves, L. James Miller Stanley //Orig. Life and Environ. Biol.- 2000. Vol.30, № 2- 4.- P. 204-205.

206. Chappuis P. Copper related diseases / P. Chappuis, B. Akal, I. Aballos // Metal Ions in Biology and Medicine. Paris: John Libbey Eurotext, 1998. - Vol. №5.-P. 729-736.

207. Corpas Francisko J. A dehydrogenase-mediated recycling system of NADPH in plant peroxisomes / J. Corpas Francisko, B. Barroso Juan, M. Sandalio Luisa, S. Distefano, Palma Jose M., A. Lupianez Jose // Biochem. J. 1998. -Vol.330, №2. - P. 777-784.

208. Cosgrove Nichael S. On the mechanism of the reaction catalyzed by glucose-6-phosphate dehydrogenase / S. Cosgrove Nichael, C. Naylor, S. Paludan, S. Adams Margaret // Biochemistry. 1998.-Vol.-37, №9. - P. 2759-2767.

209. Das A.M. Increased regulation of enzymes of respiratory sequence under the deficiency of guanine denacetate methyl transferase / A.M. Das, K. Ullrich, B. Is-brandt // J. Inherit. Metab. Disease. 2000. - Vol. 23, № 4. - P. 375-377.

210. De la Corte F.D. Glucose uptake in horses with polysaccharide storage myopathy / F.D. De la Corte, S.J. Valberg, J.M. Macleay, S.E. Williamson, J.R. Mickelson // Am. J. Veter. Res.- 1999.-Vol.60, №4. . p. 458-462.

211. Elinder С. Bilogical monitoring of metals / C. Elinder, L. Fribeg et al. -Jeneva, WHO, 1994.- 80p.

212. Fattoretti P. Cytochemical determination of succinate dehydrogenase activity in the blood cells of rats different in age / P. Fattoretti, R. Paoloni, U. Caseli, C. Bertoni- Freddari IIC. geronto. 1996. - Vol. 44, № 6. - P. 393-397.

213. Fowler B.A. Mechanisms of kidney cell injury from metals. Envir Health Persp., 1992.-P. 56-63.

214. Freunds K.T. Growth of rats during a subchronic intake of the heavy Pb, Cd, Zn, Mn, Cu, Hg and Be / K.T. Freunds, H.A. Ibrahim // Pol. J. Oceur. Med. -1990.-№2.-P. 224-232.

215. Fujisawa T. Structural characteristic of lactate dehydrogenase dissociation under high pressure studied by synchrothron high-pressure small-angle X-ray scattering / T. Fujisawa, M. Kato, Y. Inoko // Biochemistry 1999. - Vol. 38, №20. -P. 6411-6418.

216. Gech S. A contribution to histochemical localization of activities of succinate dehydrogenase and glucose-6-phosphate dehydrogenase in cleaving mouse // Ser.med. 1997. -Vol. 70, №2-3.-P. 113-121.

217. Gennart Y.P. Fertility of male workers exposed to cadmium. Lead, or manganese / Y.P. Gennar, Y.P. Buchet, H. Hoels, P. Ghuselem, E. Cenlemans, R.R. Lanwerys // Energ. Sante / Scrv. Vtd. 1993. - Vol. 4, № 2. - P. 260.

218. Goyer A. Environmentally related diseases of the unary tract. // Med. Clinics of Nrd America. 1990. - P. 377-389.

219. Hansson T. Lygand binding and enzyme catalysis studied by molecular dynamics simulations // Uphsalie. 1998. - 53p.

220. Hess H.H. Ultramicrospectrophotometric determination of cytochrome oxydase for quantitative histochemistry / H.H. Hess, A. Pope // J. Biol. Chem. 1953. - V. 204. - P. 295-262.

221. Hewitt C.O., Fszes C.M., Sessions R.B., Moreton K.M., Daffom T.R., Takei J., Dempsey C.E., Clarke A.R., Holbrook J.J. A general method for relieving substrate inhibition in lactate dehydrogenases // Protein Eng. 1999. - Vol. 2, №6 - P. 491-496.

222. Izawa S. Importance of glucose-6-phosphate dehydrogenase in the adaptive response to hydrogen peroxide in saccharomyces cerevisiae / S. Izawa, K. Maeda, T. Miki, J. Mano, Y. Inoue // Biochem.J. 1998. - Vol. 330, №2. - P. 811-817.

223. Jain S.K. Glutation and glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency can increase protein glycosylation // Free Radic. Biol, and Med.-1998.-Vol. 24, №1.-P. 197-201.

224. Kabata-Pendias A. Biogeochemistry of Trace Elements / A. Kabata-Pendias, H. Pendias Warsaw, Wyd. Nauk PWN. - 1999. - 400p.

225. Kan-Jen T. Impaired production of nitrate oxide, superoxide in granulocytese glucose 6 phosphate dehydrogenase deficient / T. Kan-Jen, M. Ion-Sih, C. Kwong Chow, S. Arnold, S. Sin Chao, D. Tsun-Yee Chiu //FEBS Lett. 1998. - Vol. 436, №3.-P. 411-414.

226. Karakaya H., Skanlan D.J., Mann N.H. Multiple oligomeric forms of glucose-6-phosphate dehydrogenase in cyanobacteria and the role of OpsA in assembly process //Microbiology. 1998. Vol. 144, №6.- P. 1549-1556.

227. Landrigan P.T. Lead poisoning I I Mount Sinai J. Med. 1995. - Vol. 62, № 5.-P. 360-364.

228. Lehninger A.L. Prinzipen der Biochemie / A.L. Lehninger, D.L. Nelson, M. Cox. Heidelberg-Berlin-Oxford: Spectrum Akademisher Verlag, 1994. - 1223 s.

229. Lindholm H. The response of cardio-vascular and respiratory systems to the test of graded physical load in the sick with mitochondrial myopathies and Mac Arule's disease / H. Lindholm, M. Lofber // Clin. Physiol. 1998. - Vol.18, №3. -P. 262-265.

230. Lorens I. Retrospective study of serum glucose concentration in cattle with mucosal disease // J. Veter. Med.Ser. A.- 2000. Vol. 47, №8. - P. 489-493.

231. Lowry O. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O. Lowry, N. Rosebrough, A. Farr, R. Radall // J. Biol. Chem. 1954. V. 195. - № 1. - P. 265271.

232. Martel T. Effect of cadmium on membrane potential in isolated rat hepato-cytes / T. Martel, M. Marian, F. Denizenu // Toxicol. 1999. -№ 2.- P. 161-172.

233. Maxwell L.C. The reaction of lead with constituency of the erythrocytes /L.C. Maxwell, F. Bischoff// J. Pharm. Ep., Ther. 1992. - Vol. 37. - P. 413.

234. Nishida H. Evolution of biosynthesis of amino acids and enzymes with wide substance specificity // Bioinformatics. 2001. - Vol. 17, № 17. - P. 1224-1225.

235. Nriagy Т.О. Zinc in the environment. Part I. Ecological Cycling. Jhn. Wiley and Sns, 1980.-215p.

236. Potter V.R. Studies on the mechanism of hydrogen transport in animal tissue / V.R. Potter, W.S. Schneider // J. Biol. Chem. 1942. - V. 142. - P. 543-548.

237. Pounds T.G. Cellular and molecular toxicity of lead in bone / T.G. Pounds, G.T. Long, T.F. Rozen // Environ. Health. Perspec. 1991. - P. 17-32.

238. Prasal Amanda. Essentiality and toxicity of zinc // J. Scand. Work., Environ, and Health.- 1993.-Vol. 73.-Suppl.№ i.p. 134-136.

239. Puis R. Mineral levels in animal health diagnostic data. — Canada: CAB, 1994.-P. 15-174.

240. Quinn К. A. The effect of deficiency of glucose-6-phosphate dehydrogenase under fever// Clin. Diseases. 1997. - Vol.25, № 5. - P. 1275.

241. Raha S. Re-population of cells by the mitochondria of a sick individual whose mutation point is in mitochondrial DNA in tRNA gene results in dysfunctional respiratory sequence / S. Raha, F. Merante, l.Tein // Hum. Mutat. 1999. - Vol. 13. -P. 240-254.

242. Robards K. Cd: Toxicology and analysis / K. Robards, P. Worsfold // Analyst. 1991. - Vol. 116, № 6. - P. 549-557.

243. Roeder B.L. A rapid method for determination of blood glucose concentration in cattle / B.L. Roeder, G.B. Schaalje, F.D. Clark, E.J. Kelly // J. Am. Veter. Med. Assn. 1996. - Vol. 208, №5. - P. 707-710.

244. Shamberger R.J. Trace metals in health and disease // Nutritional elements and clinical biochemistry. N.Y., 1980. - P. 241-275.

245. Schneider W.C. Cytochemical studies of mammalian tissues, the isolation of cell components by differential centrifugation a review / W.C. Schneider, G.H Hogeboom // Cancer Res. 1942. - V. 11. - № 1. - P. 1-9.

246. Sheridan P.P. Thematics is a simple calculating forecaster of an enzyme function for its structure / P.P. Sheridan, N. Panasik, J.H. Coombs, J.E. Brenehey // Biochim. Et Biophys acta.Protein struct, and Mol. Enzymol. 2000. - 1543. №2. -P. 417-433.

247. Spigel N.Y. Use of corticosteroids alone or combined with glucose to treat ke-tosis in dairy cows / N.Y. Spigel, R. Chen, Y. Avidar, E. Bogin //Am. Veter. Med. Assn. 1996. - Vol. 208, №10. - P. 1702-1704.

248. Sil S. Hematoporphyrin gives rise to hemoglobin peroxidase activity / S. Sil, M.C. Kar, S. Abhais // J. Mol. and Chem. Biol. 2000. - Vol. 4, № 2.- P. 168-174.

249. Simon D.K. Mitochondrial intestinal diseases and genetic characteristics / D.K. Simon, D.R. Johns // Calif. 1999. - Vol. 50. - P. 111-127.

250. Skalnaya M.G. The sexual differences in 16 year old children multielement hair analysis / M.G. Skalnaya, A.R. Grabeklis // Trace Elements in Med. 2002. -Vol. 3, № 3. - P. 74-76.

251. Smith C.M. Stimulation of lead absorbtion by vitamin D / C.M. Smith, De H.F. Luca, Y. Tanaka, K. Mahaffey // J. Natr.- 1978.- Vol. 108, № 5.- P. 843-847.

252. Smith K.B. Polynucleotides encoding the glucose-6-phosphate dehydrogenase of Streptococcus pneumonia / K.B. Smith, M.K.R. Urnham Пат.6127345 Cult, МПК7 а61 K48100, C07 H21/00. №08/962859; 03.11.1997;03.10.2000; НГТК 514/44.

253. Song Shi- Jing. The structure of active center carboxilased alpha-glycerol phosphate dehydrogenase from Palinugus Versicolor / Song Shi- Jing, Xu Yi-Bin, Lin Zheng- Jiong // J. Mol. and Chem. Biol. 1999. - Vol. 287, № 4.- P. 719-725.

254. Stringer K. A. Tissue activator of plasminogene suppresses the production of active forms of oxygen by macrophages // Pharmacotherapy. -2000. Vol. 20, №4. - P. 375-379.

255. Taylor D.E. Respiration of mitochondria after sepsis and prolonged hypoxia / D.E. Taylor, S.P. Kantcon // Amer. S. Physiol. 1998. - Vol. 12. - 275p.

256. Terlecki G. Further evidence for the importance of lipid bilayers in the interaction between lactate dehydrogenase and phosphatidylserin / G. Terlecki, J. Gutowich // Cell, and Mol. Biol. Lett. 2002. - Vol.7, № 3. - P. 905-910.

257. Torra M. Total and metallthionine found cadmium in the kidney of a population, in Barcelona (Spain) / M. Torra, Y. Eigueres, M. Bruner, M. Odanilaus, Y. Corbell //Bull. Environ. Contam. and Toxicl.- 1994. Vol. 53, № 3. - P. 509-517.

258. Vincent Jonh Berfra. Phosphatases in cell metabolism and signal translocation: structure, function ono/ mechanism of action. New York.: Springer. - 1995. - 370p.

259. Williams Jay H. Glucose-6-phosphate dehydrogenase alters rat skeletal muscle contractive apparatus and sarcoplasmic reticulum function / H. Williams Jay, H. Nelson Reagan, A. Klug Gary // Exp.Physiol. 1998.-Vol.83, №4. - P. 489-502.

260. Wolf P.L. Interpretation of increased and decreased serum alkalin phosphatase. In: Clinical enzymology / Ed/ J.C. Griffiths. New York: Masson, 1979, P. 111-121.