Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Трансмиссия возбудителя чумы "неблокированными" блохами

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Трансмиссия возбудителя чумы "неблокированными" блохами"

РГБ им

,

4 | ■ р ' • > ' ,

I ' ^ »

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

Казахский противочумный научно-исследовательский институт

"На правах рукописи УДК 616.981.452-036,21'

СУЛЕЙМЕНОВ Вахтияр Мукаиэвич

ТРАНСМИССИЯ ВОЗБУДИ 1ЕЛЯ ЧШ "НЕЕЛОНИРОВАННЬШ" МОХАШ

03.00*07 - мийробиолотг

АВТОРЕФЕРАТ- . -

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук 4

Алматы - 1993 г.

Работа выполнена в Казахском противочумном научно-исследовате.

ком институте министерства здравоохранения Ресцублики Казахстан.

I . . ' .

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТА: цоктор мед.наук проф. И.Л.Ыартиневсккй - зав,лаб.генетики Казахско

противочумного н.-и. института, ,

доктор мед.наук проф. Б.В.Каральник - зав.лаб.иммунодиагностики КМЭМИБ Ма Республики Казахстан,

доктор мед.наук проф. З.ТЛемирбеков - зав.каф. эпидемиологии АГШ/ врачей МЗ Республики Казахстан.

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ: • •

научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавкас Г.Ставрополь, РФ.

Автореферат разослан " " (ХЛ/и^Л^- 1993 г. Защита состоится ""Г/ " 1993 г. в " " часов

в специализированном Совете по защите диссертаций при Алма-АтинсК! Ордена.Трудового' Красного Знамени государственном медицинском инс туте им. С.Д.Асфендиярова,

V -

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Алма-Атинского Ордена Трудового Красного Знамени государственного меди цинского института им. С.Д.Асфендиярова.

Ученый секретарь специализированного Совета

Р.Ф.Сидорен»

• - з -

Общая характеристика работы

АКТУАЛЬНОСТЬ. Проблема энзоотия чумы по длительности и интенсивности исследований существенно выделяется в ряду природноочаго-чнх инфекционных болезней. Однако парадоксальность ситуации состоят * том, что интерпретация ввкнеЯшхположений проблемы, вытекающих столь объемного пйэноплзноеого материала, имеет зачастую прямо тротироположнуш направленность, с упорно прогрессирующей тенденци-такого развития. Все это позволяет уже открыто. трактовать сов->еменное состояние изучения проблемы энзоотии чуш как кризисное, ^повременно подвергая сомнению и ев методологию (Анисимоп и др., 965 и др. ).

Подобное положение наглядная иллюстрация замечания Е.М.Ралля 1965) о том, что "любая цепочка взаимосвязанных фактов, наблюдае-ых я природе или опыте, многими немедленно объявляется закономер-остьп", В результате, метод редуиции-сведёния свойств целого к войствам частей (Тюхтин, Урманцев, 1986), составил стратегию на-чного поиска.

Представленные варианты гипотез, отстаивающие приоритетность эхранения возбудителя чумы в яиде спорадических случаев (Марин и 1.,1972), в носителях и переносчиках в слабовирулентной форме 1омарадский и др., 1961), в блохах в "замурованных" норах (Акиев, '69) в форме "теллурической'* чумы (ваЛЛаааг<1-, 1963), в [кроочачках (Наумов, 1955), в клещах (Классовский, 1986), в сапро-тмой форме после трансформации возбудителя (Соколов и др., 1984), симбиозе с сапрофитами почвы в Л-форме (Ларина, Сагимбеков, 1990), корнях растений (Риркус и др., 1990), в исходной форме в виде са-офитов (Солдэгкин, Руденчик, 1988; Дятлов, .1986) и т.д., не по-олячт судить об авторской опенке "экологического содержания" тех цельных феноменов, которые привлекаются в качестве основных яргу-

центов взглядов их авторов.

Такая ситуация полностью сохраняет значение высказывания Ю.М.Ралля (1965) о том, что "эпизоотологию чумы интересуют типичные законы, обеспечивающие видовую жизнь чумного микроба в природе

Один из истоков современного кризиса базируется на феномене бактериального "блока" преджелудка у блох ( Васо , иаг1;1ш. , 1914), положенный в основу так называемого специфического механизма передачи чумного микроба (Бибикова, Классовский, 1974), Ло настоящего Бремени он является ведущим инструментом познания эпизоотического процесса. Такой механизм передачи сразу поставил чуцу в исключительное положение среди всех природноочаговых полезней, возбудител которых передаются "«сблокированными" блохами, независимо от формы и размеров их клеток - вирусы, риккетсии, бактерии и т.д. Несостоятельность такого механизма перодачи проявилась в самом факте возникновения различных гипотез, посвященных механизму эпизоотическог процесса. Необходимость критического анализа современных представлений о механизме передачи возбудителя чумы достаточно обоснована результатами экспериментальных и полевых наблюдений, изложенных в доступной нам литературе. Настоящие исследования посвящены характеристике альтернативного механизма передачи возбудителя чумы "не-блокированными" блохами и обоснования его значения в механизме энзоотии чумы,

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ, Основная цель работы - экспериментальное обоснование механизма передачи возбудителя чумы "небронированными" блохами, составляющего, пр-нашеыу мнению, основу трансмиссивного механизма энзоотии чумы. Для достижения цели были поставлены след ющие задачи:

1. Определение основных условий эффективной передачи возбуди теля чумы "неблокированннми" блохами.

2. Определение зф$ектшшости передачи возбудителя чумы "неб;

кированными" Слохэми рода ХепорэуНа .

3. Изучение особенностей инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов, вызванного уксусом одной "неблокироланной"

блохи.

4. Анализ механизма энзоотии чумы при условии трансмиссии возбудителя чумы "неблокированными" блохами.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Вопрос о роли "неблокированных" блох в энзоотии чумы, несмотря на многообразие многолетних исследований, решался достаточно определенно в отрицательном его значении и ограничивался лишь констатацией отдельных случаев эффективных передач. Научная новизна Настоящего исследования заключается в экспериментальном обосновании трансмиссии чумного микроба "неблокиро-».аиными" блохами, как основного механизма передачи возбудителя в триродннх очагах чумы. В ходе исследований впервые экспериментально )боснот?анн основные условия аффективной передачи возбудителя "не-«локированными" блохами.

Впервые определены особенности инфекционного процесса у раз-■ичнмх по уровню ре истянтлости видов лабораторных и диких грызу-оч при минимальных параметрах такой передачи - наличии одной араженной "неблокировянной" блохи и низких концентраций микроба заражающей их крови.

Даны качественно новые интегральные признаки основного пере-осчика чумы, обуславливающие его активное участие в эпизоотичес-эм процессе.

Продемонстрирована диагностическая ценность различных лабо-1торных методов исследования в системе чумной микроб - одна "не-юкйрованная" ^лохэ - один грызун.

В итоге, новые приоритеты в одной из ключевых проблем.эпизоо-ш чумы - механизме передачи возбудителя, позволили обосновать ха-

- б -

зактер функциональных связей всех членов биоценоза - популяций ос-ювного носителя, возбудителя и основного переносчика, лежащих в зснове механизма энзоотии чумы.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ. Результаты исследований позволяют приз-тать несостоятельность гипотез о механизме эпизоотического процес-за, противоречащих общепризнанным представлениям об.'эволюции живых систем.

Определение основной роли Чнеблокирояанных" блох в трансмиссии возбудителя, дает возможность внедрить рациональную схему эпи-зоотологического контроля за территорией очага и обосновать програ] му научных наблюдений за всеми фазами эпизоотического процесса.

Разработаны методы наблюдения за эпизоотическим процессом по тестам изменения фагоцитарной активности полиморфноядернмх лейкоцитов и аллергической перестройки организма носителей. Доказана роль фагоцитирующих клеток в механизме естественной изменчивости чумного микроба.

Результаты исследований в течение ряда лет используются в кур с'ах лекций при подготовке советских и зарубежных специалистов по особо опасным инфекциям,^

Практическое применение перечисленных разработок подтверждено двумя актами депонирования штаммов, двумя авторскими свидетельстве

Положения, ЕШОСШШ НА ЗАЩИТУ:

1. Несостоятельность трансмиссии чумного микроба "блокированными" блохами, как основного механизма его циркуляции в природных очагах и гипотез с непаразитарной фазой переживания возбудителя.

2. Условия эффективной передачи чумного микроба "неблокирова ними" блохаш.

3. Особенности инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов при укусе одной "неблокироваиной" блохи.

4. Системно-функциональные основы трансмиссивного характера

энзоотии чумы.

АПРОБАЦИЯ. Материалы диссертации обсуждены на научш конференциях Талды-Курганской (1989), Гурьевскт"» (1989), Уральскс (1907-89) противочумных станций, Казахского (Среднеазиатского) П{ ти^очумиого научно-исследовательского института (1966-1992), про-типоч,умных учреждений Средней Азии я Казахстана (1989).

ПУБЛЙ1САЦИИ. Результаты исследований изложены в 22 работах* v которых 22 опубликованы ? центральных и зарубежных издательствах, или материалах республиканских конференций.

СТРУ1ШРА И ОЕШ!. Диссертация состоит ^из введения, четырех глав, заключения, выводов, списка литературы и оформлены на 153 страницах машинописного текста, рукопись иллюстрирована 14 таблицами и 20 рисунками. Список использованной литературы содержит На именования работ на русском (208) и иностранном (61) языках.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ГЛАВА I. Механизм передачи возбудителя в современных гипотез природной очаговости ч.умы.

Многолетнее изучение закономерностей эпизоотического процесс; не привело на сегодняшний день к выработке единого взгляда на механизм энзоотии чумы. (Ралль, 1965; Козлов, 1979 и кн.др.); Ни од! из авторов не подвергает сомнении выводы Б.К.Фенюка (1939, 1944), Meyer K.P. (1942) и мн.др. об ¡эндемии чумы, как проблеме экологич« Тем удивительней исключительно широкий диапазон взглядов на механизм процесса. По отношении к прочности'связи возбудителя с носителем и переносчиком все гипотезы можно разделить на дяе группы:

1. Гипотезы с паразитарным механизмом циркуляция чумного микроба (Ти'нкер, -1940; Иофф и др.', 1951 и мн.др.).

2. Г;гтотеаы предполагавшие закономерны* выход чумного микроба

i пределы цепи носитель-переносчик, т.е. непаразитарный период ,'реживания чумного микроба (Содцаткин, Руденчик, 1988; Дятлов, )08 и др.).

Механизм "блоковой" передачи доминирует в гипотезах первой ууппы и частично второй - в период циркуляции возбудителя среди шоунов.

Каковы же характеристики передачи чумного микроба "блокировании" блохами, вызывающие сомнение в 'закономерности такого меха-1зма трансмиссии возбудителя?

1. Несоответствие способности или частоты образования блока эновым видам блох (Бибикова, Классовский, 1974; Barroughs , 194?

мн.др.).

2. Видовые различия в количестве поглощаемой крови (Балашов др., 1961 и др.).

3. Зависимость образования "блока" от числа поглощенных кле-ок чумного микроба (Бибикова, Классовский, 1974).

4. Краткая продолжительность жизни "блокированных" блох (Би-икова, Классовский, 1974; Kartman et al. , 1958).

5. Затрудненное питание (Бибикова, Классовский, 1974; Ново-рещенова, 1973). 4

6. Ограниченная подвижность (Бибикова, Классовский, 1974; овокрещенова, 1973).

7. Краткость периода заразительности "блокированных" блох (Би-икова, Классовский, 1974),

8. Низкая инфекциозность укуса "блокированных" блох (Бибико-а, Классовский, 1974).

9. Экологическая необоснованность циклической смены фенотипов ¡умного микроба (¡Браун, 1968; Burrows, Bacon, 1956; Burrows',

957 и мн.др.).

Необходимо также учитывать, что естественнореэистентные и им-

мунные грызуны исключаются из числа особей, способных обеспечить бактериемию достаточной степени (септицемию). Специфические антитела и стабильно низкая температура нор существенно препятствуют процессу "блокирования". Полная неопределенность в сроках образования "блока"свидогельсТвуит 0 незакономерном характере данного феномена.

С учетом одновременного и постоянного влияния всех этих факторов на "^локообразочание", реальная ценность тпкого механизма передачи, при наличии устойчивого состояния энзоотии чумы, предст! ляется сомнительной.

Мы считаем, что передачу чумного микроба "блокированными" блс хамч необходимо квалифицировать как слу^.аСную, не имеющую закономерного характера и, в итоге, не определяющую механизм передачи возбудителя чумы в его природных очагах.

Что касается механизма передачи возбудителя в гипотезах с пре, полагаемым непаразитарным периодом его переживания, то можно конст тировать его отсутствие-- авторы не идут дальшей свободной интерпр» гации какого-либо факта пли априорного утверждения своей позиции.

В итоге, вместо решения проблемы, возникает ряд дополнительны: юпросов: природа, и причина стабильности свойств чумного микроба, >тс.утствие следов предшественников и межвидовых контактов, механизк гередачи и мн. другие. В ряде случаев возникает необходимость обос-ования видового статуса возбудителя чумы.

Переходя к изложению альтернативного механизма передачи, отмени, что, по-нашему мнению, основная роль в обеспечении трансмиссив ого характера энзоотии чумы, принадлежит "неблокированным" блохам.

ГЛАВА 2. Условия эффективной передачи возбудителя чумы "небло-фованными" блохами.

Исследования по изучению эффективности передачи чумного микро-

ia "неблокированными" блохами были начаты достаточно давно и итоги ¡го отражают выводы В.А,Бибиковой с соавтЛ1968,1974), что этот гуть передачи "... играет скромную роль... в силу редкости этого галения", но "вероятность-заражения может возрасти ... при массовок штании зараженных насекомых на зверьке". Последнее действительно юдтвердилось многими исследователями (Голов, Иойз, 1927; Деревян-1енко с соавт., 1962; Blanc ,Baltazard , 1942 и мн.др.).

Основу всех опытов составляла групповая подкормка заражении; 5лох, причем, в итоге лишь констатировались факты наличия или отсу зтвия эффективной передачи.

При анализе данных работ мы выявили два чрезвычайно важных, ш iani взгляд, положения:

1. Ни в одной работе, посвященной передаче чумного микроба бл хами, не рассматривается роль в этом процессе температурозависимых антигенов и свойств (37°), определяющих его вирулентность.

2. Не дифференцируются результаты исследований, сходных с работой, например, Д.А.Голова, И.Г,Иоф$а от исследований, сходных, например, с работой Деревянченко с соавт.'

Одщеизвестно наличие в природе у чумного микроба двух фенотипов - характерного для теплокровного организма (36°), имеющего по/ ный набор антигенов и признаков, присущих ему как виду и составляв щих основу его вирулентности и характерного для пойкилотермного о{ ганизма блох, лишенного антигенов и признаков, зависимых от 37°. Однако ни в одной работе не отмечено дифференцированного интереса к роли данных фенотипов в передаче их блохами.

Что касается второго положения, то первая группа исследовате, работала с возбудителем, выращенным при 28°, т.е. лишенным вируле тних свойств. Вторая группа работала с блохами, зараженными на аг визирующих грызунах, т.е. сущеность этих опытов была совершенно различная.

Эти данные послужили отправной точкой для выяснения роли ви рулентных свойств чумного микроба в передаче его "неблокированны ми'' блохами.

Исследование проводили с использованием болых мышей, блох Х.сЬеор1з и штаммов чушого микроба № 1435 и 1053 (Средиеазиаг. скнй пустынный очаг, для. белых мышей 344 и 160 м.к.).

В первой серии опытов блох Х.сЬеор1з однократно кормили на лго1мрутс;их белых мшах, зараженных штаммами 1435 и 1853.

Во второй серии блох заражали дозированию на аппарате Пшенич

нова - концентрация штамма 1435,выращенного при 37° (опыт), в де-

фибринированной крови морских свинок, последовательно возрастала 1 4 7

каждом опыте от 10 до 10 м.к. в I мл крови. Общим для всех опьич было:

- содержание зараженных блох при 13-15°С.

- однократный выпуск блох на белых мышей через 2-12 суток содержания при 13-15°С

- индивидуальное содержание белых мышей с кормящимися на них блохами в течение 18-20 часов, с контролем возможного "блока" преджелудка после заражающего кормления.

В контроле, блох, зараженных теми же штаммами, выращенными 1ри 28°, по 1-5 особей кормили на 10 мышах через 48 и 72 часа удержания при 13-15°С.

Дополнительно 900 зараженных на агонирующих мышах блох иссле-овзно на наличие "блока" через б, 9 и 12 суток содержания их при 3-15°С.

Отметим, что в контрольной серии опытов от единичных павших и збитьгх на 30 сутки мьшей возбудитель- выделен не был. Через 12 су-эк только у одной блохи отмечен "блок" преджелудка.

Эффективность передачи возбудителя чумы оценивали по наличию

зптическмх форм чуни у белых мышей. Результаты первой серии опы-эв отражены в таблице I.

Таблица I

Эффективность передачи возбудителя чухш "неблокированными" блохами Х.с1шор1з зараженными на агонирующих белых мшах

№! № штамма {Количество!Срок хранения!Количество мыш.'й!Сроки п! чумного !блох на !блох до корм-! в !из них в ¡гибели

! шьфоба ¡одной мыши!ления в опыте!опыте'септичес- 'мышей(в _!_!_! (в сутках) !_!кой форме !сутках)

1853 I 3 15 I 17

(ы>50- т 6. 15 I 5

160 м.к.) I 10 15 I 8

I 12 15 3 3-16

3 ' 3 5 1 ~ 16

3 6 5 I II

3 10 5 3 10-13

1435 3 2 10 I 28

(Ы)50- 3 ' 3. ' 30 I 5

344 м.к.) 3 6 30 Зх) 5-14

3 7 10 I 23

гх)

четвертая мшь пала на 7 сутки с выделением чумного микроба из лачени и селезенки

Кормление на мышах даже по одной зараженной "неблокированной" блохи, во все сроки наблюдения обеспечивает инокуляцию возбудителя в дозах, достаточных для развития септической формы, Пониженная температура хранения блох, задерживая размножение клеток, проя вила себя как важный.фактор, стабилизирующий заразительность блох на протяжении довольно длительного времени - 12 суток (срок наблюдения).

Интересны результаты второго этапа исследования - передачи чу ного микроба "свеэепившиш" (через 3-4 чесе после заражения) блохами с дозированным заражением, (таблица 2).

Таблица 2

Передача малых доз Х.сЬеорАз 1435 ( - 344 м.к.) "свежепившимн" блохами

№ !Нол-во!Концентрация!Длительыость 1 Количество мышек!Сроки труп-!блох !чушого мик-!кромленця ! в !йз ннх~с]гибели пи ! на !роб* а крови! блох Iгруппе ¡септичес!мышей ¡одной ! (м.к./мл) !(в часах) ! !кой фор-!(в сутки !мыши ! I ! !ые !_

1 1 5'Ю4 3 ГО I 7

5-Ю6 ,1 . 1» - I 5

3 3 Ю4 20 и I 9

2 3 Ю5 II 7 3 13

ю7 И 20 2 7-12

Ю7 3 7 2 13-15

3 го4 1! 20 2 5-7

5 ю7 « 10 1х> 13

х)

чумной мйкроб выделен из селезенки

Для эффективной передачи возбудителя вполне достаточно кратк( временного кормления блох на грызунах. Эффективность ее аналогична предыдущим сериям опытов. Не отмечено влияние на интенсивность передачи количества блох (1-5), кормившихся на мыши, по-видимому, из-за незначительных колебаний в и^окулируемых дозах. Абсолютные цифры результатов на данной этапе исследований, позволяют более объективно оценивать их при всех изменяющихся параметрах опытов.

Итоги их позволяют сделать вывод об определяющем значении пол-юго набора свойств и пр!знаков чумного микроба, ответственных за ;го вирулентность в передаче его "неблокировакными" блохами - из !49 белых мьвгей у 28 опте чепе септическая и у 2 локальная формы чум Низкая температура срдеркания блох стимулирует способность к

эовососанию и сохраняет их .заразительность на протяжении длмтель-зго периода, нашого превышающего период жизни "блокированных" лох. Вирулентная форма возбудителя обеспечивает эффективную лз-Едачу даже при очень низких концентрациях микроба в заражающей лох крови (10^ м.к./мл) и коротком периоде их питания на грызуне, еобходимо указать на отмеченную на:-,м особенность - при наличии в аракающей крови 10^ м.к./мл в индивидуальных посевах блох отые-ается рост 10-40 колоний, если концентрация клеток ниже - посевы сегда отрицательные. Ванным момента.«! передачи возбудителя "небло-нрованннш" блохами является высокая подвижность и активность их ;ри питании.

ГЛАВА ЗДарактер инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов после ук-уса "неблокированной" блохи

Способность "неблокированных" блох x.cheopis вызывать септическую форму у высокочувствительных к чумному микробу белых •шшей, поставила перед необходимостью выявления следующих вопросов:

- сравнительной эффективности передачи чумного микроба одной 'неблокированной" блохо!Ьдругих видов рода Xenopaylla;

- характера инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов, вызванного одной "неблокированной" блохой.

Условия выявления первого вопроса были аналогичны предшествующим исследованиям:

- содержание зараженных блох при 13-15°С до заражающего кормления;

- заражение белых мышей по схеме одна блоха - одна мышь (1820 часов).

Штамм Y.pesfcis 224 (Среднеазиатский пустынный очаг, LD^Q для белых мшей - 180 м.к.). Блохи - X.cheopis, X.skrjaMni,

X.caspica, X.conformis (однократно) из инсектария института.. Продолжительность наблюдения за белыми мытами - один месяц.

Для решения второго вопроса в качестве объекта передачи были выбраны морские свинки, белью крысы и большие песчанки с незнзоо-тичной территории. В качестве переносчиков использовались блохи !{.cheopis, X.skrjaMni, x.caaplca. Блох заражали на шкурках эелых мышей взвесью штамма Y.peatis 161 (Ьей- , Сред.Аз.пустын-шй очаг, iD^o Для белых мышей - 85 м.к.) выращенного при 37°. концентрация возбудителя в разных сериях опытов колебалась от 10^ ,о 5*10 м.к. в I. ш дефибршшрованной крови морских свинок.'Зара-ение грызунов строго индивидуально - одна блоха - один грызун (180 часов). До заражающего кормления блохи содержались при 13-15°С течение 3-6 суток. Так как возбудитель чумы относится к факульта-ивным внутриклеточным паразитам (Burrows, Bacon, 1956), специфике кии для которых является хронический инфекционный процесс, мы следовали Наиболее сажный начальный период его развития (до 30-i суток), определяющий дальнейшее его течение.

Лабораторные методы регистрации инфекционного процесса включа-бактериолагический, серологический, биологический методы, метод ределения изменений цитоцидной активности фагоцитов в НСТ-тесто, утрикожные аллергические пробы с основными антигенами возбудителя гистологическую характеристику гранулематозного воспаления.

I. Эффективность передачи возбудителя чумы блохами рода Xenopsylla

Результаты исследований отражены в таблице 3.

Основной еывод, который можно сделать из результатов данных медований, это равная эффективность передач возбудителя чумы -количеству септических форм у различных видов блох рода Хепор-11а . В данную таблицу не вoseл разовый опыт с блохами X.conduis - эффективность передачи укусами единичны?" блох составляла

% - из 12 белых мышей у 3-х зарегистрирован сепсис. Вариабельность ражающих доз не отражается на результатах, по-видимому из-за нез-чительных колебаний инокулируемых доз микроба.

Таблица 3.

Эффективность передачи возбудителя чумы одиночными "неблокированныш" блохаш рода ХепорзуНа

M Вид блох 'Концентрация'Количество!Из них пало с септи-

i! !микроба в за'белых мы- ! ческой формой чумы_

! . ! раненной кро!шей в ! 771 Г"^ „ а J__!ви в м.к./мл! опыте ! а6с ! в h_

, ï.cheopis I07-25'I07 291 36 I2,3±I,92

. Z.ekrjttbini » 58 7 12,0^4,38

. X.caspica » 77 13 I6,8±4,28

. X.cheopis I04-IÛ5 45 6 I3,3±5,II

. X.cheopia 25*IO7 70 (контроль)

^ контрольные блохи заражались Y.pestis 1435, выращенном при 28°

Чтобы облегчить окончательный вывод об эффективности переда-и возбудителя чутш "неблокированными" блохами, приведем итоговые ифры всех трех этапов исследований (таблица 4).

Таблица 4.

N

Суммарные показатели эффективности передачи возбудителя чумы "неблокированными" блохами рода ХепорауНа

5 этапа иссле-!Общее количество¡Общее количество! % сований ! белых мышей !септических форм!

_1 _ ! чумы_ !_

I 155 14 9,0

.2 94 12 12,6

3 . 471. 62 10,3

Итого: 720 88 10,2

Абсолютные показатели эффективности передач возбудителя чумы 'неблокированными" блохами, вред ли можно интерпретировать каким-

либо иным способом, как не признанием реальности такого механизма передачи. Септические формы чумы, избранные в качестве индикатора при работе с высокочувствительными белыми мышами не единственные показатели процесса - из 120 выживших в последней серии мышей, у четырех в реакции нейтрализации антигена (ШАг) зафиксированы специфические антитела 1:40-1:80. Вся сумма полученных результатов 5есспорко подтверждает и вццеляет наиболее важный момент этой передачи - ведущее значение вирулентных свойств возбудителя в трансмиссии, обуславливающих высокую инвазивноегь единичных клеток мик-юба.

Данный момент тесно увязывается еще с двумя важными нризнака-и. Во-первых, эпизоотическое значение приобретают бактериемии у рызунов любой интенсивности. А таких, не соответствующих по уров-ю "блокообразованню", регистрируется достаточно много (Головко и р. 1979 и г.и.др.). Во-вторых, незначительное количество клеток икроба сводит до минимума патогенное действие на переносчика, ко-эрый выполняет свои функции, обладая максимальной активностью при зижении и питании. Температура окружающей среды, как всеобъемлю-1й фактор, выступает как важный регулятор длительности периода фазительности блох.

И, наконец, все вышеперечисленные положения полностью исклга-1ют необходимость смены фенотипа и обеспечивают чумному микробу ркуллцию в том или ином природном очаге в типичной для вида фор. В этом, по нашему мнению, ключ к познанию стабильности цирку-рутощей популяции возбудителя и отражение автономного цикла ее ществования, который, по мнению И.И.Шмальгаузена (1968) повышает гойчивость живых систем в эволюции и составляет ее "генеральную ига".

Передача возбудителя чу™ в вирулентной форме "неблокироаад-

дай" блохами, лишена недостатков "блоковой" передачи, неопределен-эсти других механизмов, еще не предетавленных в многочисленных-лпотезах и, по нашему мнению, является основным и исходным момен-ом в расшифровке трансмиссивного механизма энзоотии чумы.

2. Характеристика инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов после укуса одной "неблокированной" блохи

Трансмиссия возбудителя чумы "неблокированными" блохами высо-очувствительным грызунам открыла еще одну сторону данного процесса ептические формы чумы -у белых мышей не превышают 16% в начальный ериод процесса. У часта особе-й наблюдается выработка специфичес-их антител, часть гибнет без бактериологического подтверждения умы. Следовательно, и у высокочувствительных грызунов манифестные ормы процесса наблюдаются у незначительной доли популяции.

Естественно,.что характеристика механизма передачи невозможна ез участия грызунов с различной' степенью видовой резистентности возбудителю чумы.

На следующем этапе исследований по трансмиссии возбудителя неблокированными" блохами были использованы морские свинки - 18, елые крысы - 85 и больнице песчанки - ИЗ.

Бактериологическое исследование. В различные сроки после зара-:ения пали 8 морских свинок, 8 белых крыс и 14 больших песчанок. 1актериологическое исследование как павших, так и забитых после жончания наблюдения грызунов отрицательное.

Серологическое исследование. Серологическому исследованию в »еакциях пассивной гемагглютинации (РПРА) и нейтрализации антигена !РНАг) с чумными эритроцитарными диагностик/наш бкли подвергнуты ¡ывороткн вшивших грызунов (30-40 сутки).

Специфические антитела были выявлены только в РНАг - у 15 бе-

лнх крыс - 1:40 - 1:320, у 2-х больших песчанок - 1:80 - 1:640 и у одной морской свинки - 1:160. В предыдущих сериях у белых мышей в РИА г антитела были выявлены в четырех случаях - 1:40 - 1:80. Результаты свидетельствуют,во-первых, о жизнеспособности малых доз вирулентной формы микроба в широком, по степени резистентности, диапазоне организмов грызунов, во-вторых, о практически затруднительном обнаружении особей с.антителами вне фазы острых проявлений чумы различной интенсивности.

В контроле - в сыворотках 18 больших песчанок после укуса одиночных блох, зараженных авирулентной формой штамма Y.pestia 161, выращенного при 28°, специфических антител выявлено не было.

Изменение фагоцитарной активности полиморфноядерных

лейкоцитов грызунов ■

Широкий диапазон степени инфекционной чувствительности различное видов грызунов к возбудителю чумы является общеизвестным фактом [о мнению Ю.М.Ралля (1965) "у основных и второстепенных носителей умы имеются различия в фагоцитарной активности". До настоящего вре ¡ени это не получило конкретного подтверждения. Учитывая ведущую оль фагоцитоза в антимикробной защите.организма (Румянцев, 1983; аянский, Маянский, 1983; К1еЪалоГГ, Klark , 1978), логично пред-оложить, что в основе различий видовой чувствительности лежат гене-лчески детерминированные различия эффективного потенциала професси* альных фагоцитов. Более того, возбудитель чумы является внутрикле-эчным паразитом ( Burrows, Bacon, 1956) и При трансмиссии проник-)вение внутрь фагоцитирующей клетки,является обязательным условием >аимодействия с организмом, фагоцитарная система является ведущей в 1Тогенезе чумы (Покровская, Каганова, 1947; Burrows* Bacon, 1956, др.). Отсюда необходимость в наличии данных об антимикробном потен зле фагоци?св человека, жизотных и т.д. и динамике его изменений

при инфекционном процессе.

Исходя из этого, мы впервые получили такую характеристику в' не ме и при экспериментальной чуме (Исин, Сулейменов, 1986; Исин, Сулейменов, 1987; Исин, Сулейменов и др. 1987). В результате были пс лучены достоверные различия в показателях антимикробного потенциала фагоцитов у чувствительных и резистентных видов животных. При экспериментальной чуме отмечено фазное изменение антимикробного ш тенциала лолиморфноядерных лейкоцитов, коррелирующее- с данными о видовой чувствительности грызунов. Однако довольно резкие отличия "лабораторной" и дикой чумы как в количественном, так и в качеств! ном отношениях, определило необходимость изучения реакции фагоцит; рующих клеток при естественном методе заражения грызунов - укусом блох. Данные наблюдения впервые проведены нами на белых крысах и больших песчанках. Исходную реакцию фагоцитов определяли по измен ниям цитоцидного потенциала лолиморфноядерных лейкоцитов в НСТ-тесте непосредственно перед выпуском на 18-20 часов на каждого гр зуна по одной "неблокированной" блохи X.caspica ( зараженной Y'.pes-fcis 161, Ю4 м.к./мл крови (для белых крыс) и ю' м.к./мл крови (для больших песчанок), выращенном при 37°. Результаты приведены в таблице 5.

Полученные данные чрезвычайно интересны и, на наш взгляд, от ражают принципиальный характер ответной реакции фагоцитов на вне; рение инфекционного агента, В отличие от шприцевого метода зараж« ния, при естественном методе фаза депрессии активности полиморфне ядерных лейкоцитов (ГШ) чрезвычайно растянута. У белых крыс тол] ко после ^недели значения НСТ-теета превысили контрольные данньи Только у одной особи, значение НСТ-теста^к концу I недели лревыша, контрольные. У больших песчанок только у 3-х особей была отмечгн обратная реакция на укус зараженной блохи. В остальных случаях о

.ючено снижение значений НСТ-теста.

Характер изменений цитоцидного потенциала НМЛ позволяет расшис гавать ряд "белых Пятен" начального периода инфекционного процесса, 1о-первых, фагоциты чутко реагируют на присутствие очень малых доз ¡ирулентной формы возбудителя чумы. Однако отсутствие бурной реак-|ИИ, вероятно, отражает истинную картину развития хронической формн умы, наличие которой зарегистрировано ь дальнейших исследованиях, ледовательно, в отсутствие факторов, способствующих обострению про есса, развитие хронической формы чумы практически Не отражается а здоровье грызуна. Напротив, происходящие иммунные процессы явля-гся Дополнительным механизмом защиты от ряда инфекционных болезней

Таблица 5

Характер изменения щтоцидного потенциала полиморфноядерных лейкоцитов грызунов после индивидуального заражения чумой "неблокированной" блохой Х.сазр1са

>уп-

[Ы

Вид грызунов!____Значения НСТ-теста

!к-во Гперед !к-во Г !ис след!зараже1 и с след! I !грызун!нием 'Грызун!

-1-г-

П I Ш ! 1У

I 1

#«9ели_„ _

. Белые крысы 52 5,76± 52 3,4± ' 4,2± 4,6± 6,20,36 0,35, 0,53 0,35 0,51

. Большие ' 25 ' 45,84± 29 19,371

песчанки 4,38 2,14

Все различия опытных и контрольных значений НСТ-теста статис-тески достоверны - 0,001.

-вторых, чрезвычайно малые инокулируемые дозы возбудителя нагляд-демонстрируют высокий уровень адаптации к крайне агрессивной сре-теплокровного организма. В-третьих, функцию переносчика выполня-вс.е взятые в опыт "неблокмрованнне" блохи. А при условии сохране-: их высокой активности, это очень вакная характеристика естест-

венного переносчика возбудителя чумы. Таким образам, естественный механизм заражения грызунов обуславливает плавное развитие инфекционного процесса и встреча носителя с возбудителем не носит харак тера трагедии. Наоборот, их взаимная адаптация обеспечивает норма; ную жизнедеятельность возбудителя и повышение иммунного статуса хс зямна, что немаловажно для последнего.

Патоморфологнческое наследование. Отсутствие интенсивного ра: мноаения возбудителя у морских свинок, белых крыс и больших песчанок после укуса "неблокированной" блохи, закономерно выдвигает на первый план вопросы об эпизоотической роли таких передач в естест венной популяции грызунов.

Внутриклеточные паразиты (к таким относится и возбудитель чу мы) вызывают преимущественно хронический процесс, интимные механи мы которого подробно изложены в обширной литературе (Маянский, Ма янский, 1989; Йегер, 1986 и мн.др.). Хроническое воспаление разви вается в случаях, когда агент с умеренной силой действует в теисте длительного времени (Турк, 1985). Его универсальным проявлением является инфекционная гранулема, с хорошо изученным механизмом и циклом развития (Кононов, Зиновьев, 1984; Струков, Кауфман 1982; Wi.ll.iams, МШата, ' 1983. и мн.др,).

Стадии хронических инфекций, соответствующие гранулематозно воспалению (эпителиоидно-клеточный гранулематоз, эк-гранулематоз характеризуются низкой кантагнозностью и олигобациллярностью поражений. Эк-гр&нулемы могут персистировать в организме неопределенно долгое время и являются механизмом персистенции возбудите; и постоянным источником рецидива активнох'о процесса при временнс снижении уровня[ защитных сил организма. При чуме ЭК-гранулеш, I признак иммунных процессов, описаны Л.Н.Котургой (1958, 1962 и '

и др. авторами. Исходя из краткого изложения характеристики гра-нулематозного воспаления как типовой реакции организма при хронических инфекциях, основу латоморфологических исследований в ш них опытах составляли поиски инфекционных гранулем у грызунов, : раженных укусом одиночных "неблокиронантга" блох при их индивидуальном кормлении на каждом зверьке.

Всего было исследовано 15 морских свинок, 77 белых крыс и 119 больших песчанок (из них 19 песчанок контрольных, зараженных

п 1

штаммом 161-28 , концентрация 5'10 м.к./мл крови). Морские евин забиты на 34 сутки, белые крысы на 33-48 сутки,- большие песчанки на 21-49 сутки. Помимо этого, на наличие гранулем был исследован полевой материал, добытый осенью 1988 г. на территории Южного Прибалхашья. Из 92 песчанок 27 отловлены в зоне длительного протекания эпизоотий (Таукумский э/о), остальные в зоне эпизоотии, начавшейся в 1986 г..(Корейский п/о).

В итоге, инфекционные эпителиоидноклеточные гранулемы были обнаружены у 53% морских свинок, 38% белых крыс и 23% больших песчанок. Преимущественная локализация гранулем в печени связана с физиологией ПМЛ, клеток с коротким периодом циркуляции а крови 5-7 часов (Маянский, Маянский, 1989) и тесной связью с печенью. Гранулемы всех видов грызунов чаще были единичными, реже множественными, с локализацией в периваскулярных пространствах, связаны с адвентициальной оболочкой кровеносных сосудов. У отдельных особей гранулемы подвергнуты частичному или полному склерозу или некрозу. Из 92 больших песчанок, отловленных в поле, в 13/случаях выявлены гранулемы, в большей степени характерные для очага в песках Tayкумы.

Анализируя суммированные результаты патоморфологического исследования всех грызунов, следует отметить, что у части их выяв-

ны морфологические признаки, характерные для затяжного течения мы. Обращает на себя внимание обратная зависимость частоты гра-лематозного воспаления от видовой резистентности грызунов. Нали-е гранулематозного воспаления у грызунов опытных групп (в отли-е от контрольной) свидетельствует о высокой инвазивности виру-нтной формы возбудителя и высокой инфекциозности укусов одной сблокированной" блохи. Реализация эффективной передачи возбуди-' ля зависит от степени индивидуальной резистентности грызуна.

В итоге, картина патоморфологических изменений в органах гры-нов и частота гранулематозного воспаления - от 23 до 53%, в зави-мости от их вида, еще одно бесспорное доказательство двух важ-йших признаков трансмиссивного механизма передачи чумного мик-ба: ■ ;

- во-первых, способности практически каждой "неблокированной" гохи передавать необходимое, для возникновения хронической формы ■мы, количество клеток возбудителя;

- во-вторых, значения индивидуальной и видовой резистентности )ыэунов для реализации эффективной передачи возбудителя.

Исследование эффективности кожно-аллергических проб. Мнение специфичности и механизме развития гиперчувствительности замед-:нного типа (ГЗТ) однозначно и Не требует доказательств. Исполь-. звание ГЗТ при чуме в кожно-аллергических пробах известно доста->чно давно (Коробкова, 1955; Шмутер с соавт., 1957 и мн.др.). Как завило, объектом исследования в работах данного плана являлись *бораторные и дикие грызуны, иммунизированные или зараженные чачительныш дозами вакцины или вирулентных штаммов.

В нашу.задачу входило-изучение эффективности Основных антиге-оэ чумного микроба в кожно-аллергических пробах в условиях инфн-лррвания грызунов малыми дозами вирулентных клеток чумного' микро-

— f.4 —

ба - после индивидуального заражения одной "неблокированной" бл хай.

В качестве диагкостикумов в аллергических пробах были испо зованы следующие антигены чумного тигр оба, выделенные наш из в циннога штампа И7 . I. Капсульннй антиген. 2. Липополисахарид сульного антигена. 3. Липополисахарид (JH1C) клеточной стенки (ц двух температурах выращивания микроба - 28° и 37° и получения (+* и +63°). 5. Антиген Буавена. 6. Основной соматический антиген ((

Предварительный отбор антигенов проводили на белых крысах ' рез 7-10 дней после заражения Индивидуально укусами одиночных "i блокированных" блох (концентрация Y.pestis 161 (37°) - b'Vp м. в I мл крови) или 50 м.'к. того же штамма и/к).

Специфичность аллергических проб с вышеуказанными антигенам проверялась на белых крысах, зараженных Y.pseudotuberculosis, T.enterocolitica, В.abortus, P.tularensis, E.coli, S.typhimuriui E.risiopatia, 1.monocytogenes, Str.hemoliticus.

Предварительное испытание продемонстрировало преимущество л пополисахарида, полученного "холодным" методом и антигена Буавен Данные антигены, а также фракция I, были апробированы еще раз на малых сусликах и 12 полуденных песчанках, через две недели после

О С

подкожного заражения 10 - 10 м.к. вирулентных штаммов чумного микроба.

Во всех опытах введение 100 м.кгв 0,1 мл физиологического раствора внутрикожно в положительных случаях вызывало образование цапул через 24 часа величиной от 0,2 х 0,2 мл до 1,0 х 1,0 см.

В опыте грызуны бьши заражены индивидуально укусами единичнь "неблокированннх" блох. Сроки постановки проб колебались от 21 дс 44 суток.

Таблица 6

Частота положительных аллергических проб о антигенами чу;чного микроба (ЧМ) у грызунов, зараженных укусом "неблокированной"блохи"

(Количество! Антиген ЧЖ$)

Вид грызунов 'грызунов в! ! группе ! ! И ЛПС !антиген !Буавена

эские свинки 15 I 2 _

ше крысы 77 3 23 12

тьшие песчанки 100 - 6 2

Итого: 192 2,1 16,1 7,5

■Липопописахарид заметно выделяется по частоте положительных зультатов среди всех групп животных. Величина папул колебалась 0,2 х 0,2 см до 1,2 х 1,2 см. На него приходится и основная до-интенсивных реакций - из 31 в 9 случаях размер папул составлял 5 х 0,5 и вше. Такие реакции характерны для белых крыс и боль-х песчанок.

Наличие и интенсивность положительных проб не коррелируют ни дозой возбудителя в заражающей блох крови, ни с наличием специ-ческих антител, ни с наличием мнфекционно-аллергических гранулем, .пример, для грызунов с гранулемами отмечена минимальная интенсив-сть реакций, а при малых концентрациях микроба 5*10^ м.к./мл личина реакций достигала 1,2 х 1,2 см. Аналогично соотношение, и наличием антител. Мы считаем, что в данном случае нет никаких' ютиворечиП с мнением А.Й.Кульберга и др. (1984). или С.А.Узенцова др. (1981) о наличии корреляции мекду продукцией антител и аллер-1ческими пробам!, однако вряд ли целесообразно сводить те или гае. связи ответных реакций организма к фиксированному итогу без •юта динамичности конкретных параметров этих реакций, в значитель-эй степени зависяип'х от индивидуальных свойств особи.

Роль ЛПС в патогенезе чумы общеизвестна - он определяет осн( ную картину инфекционного процесса и его использование в аллерги* кой диагностике чумы вполне обосновано как по специфичности, так по чувствительности. Наличие незначительной доли перекрестных рее ций с возбудителем псевдотуберкулвэа не может исказить общей картины в случае полевых испытаний.

Использование иммуцодепрессантов для повышения чувствительности лабораторных методов исследования. Сложность- проблемы энзоотии чумы определяет необходимость расширения практических аспектов применения различных методов лабораторного исследования материала.

. Преодоление недостаточной разрешающей способности того или иного метода, дает повышение чувствительности только одного конкр! ного метода. Более продуктивным, на наш взгляд, является воздейси непосредственно на объект исследования - грызуна, с целью обостреь подострых и хронических форм инфекции. В этом случае следует оашдз относительного увеличения чувствительности всех применяемых методе Наиболее перспективными в этом плане представляются иммунодепресса ты (Браткова и др., 1961; НауазЩйа, ¡957 и мн.др.). Приоритет здесь до сих пор остается за кортикоетероидами. Мы расширили круг препаратов с йммунодепрессивнышдейегвием за счет аминокислот, в частности цистеина, превышающего по своей активнее™ кортизон:1Л>^0 У.рез1;1з 1435 для белых мышей после внутрибрюшинного введения 10 цистеина составляла 39 м.к.(кортизон 5 мг п/к- 138 м.к., контрол1 5(01 м.к.КСулейменов и др.,1990). В опыта были использованы нортизс и цистеин. 127 белых крыс было заражено 50 м.к. штамма У.рез^э 161. На 7-10 сутки пало 37 особей, из них 7 с бактериологическим пс гвервдением процесса. Через 40 дней 40 крысам л/к был введен кортизон (22 мг), остальным 50 цистеин внутрибрюшинно (22 мг). Через одн шделю животные были исследованы в аллергических пробах с фракцией

тополнсахаридом чумного микроба. После учета результатов жиротные гы с бактериологическим и серологическим исследованием.

Результаты бактериологического исследования были отрицательны-Обращает внимание высокий npoiiei-гг положительных результатов се-гических и аллергических тестов.

В обеих' группах в 32% случае? обнаружены специфические антитела -ы FHAr от 1:40 до 1:320, в одном случае I:I2G0 (цистеин). В груп--бработанной кортизоном количество положительных аллергических i составляло 10$ и 201 (ЛПО, в группе, обработанной цистеи-соответственно 6% и 32%. Величина папул колебалась от 0,2 х 0,3 . до 0,0 х 1,0 см. Более ингаюирнне реакции отмечены в первой ine - 0,4 - 0,7 х 1,0 см. Как и предыдущих исследованиях не от-зна корреляция между наличием антител и положительными аллергичес-II пробами. Такой вариант повышения чувствительности методов ис-дования может быть применим для решения некоторых вопросов энзоо-чумы.

Подводя итоги изучения особенностей инфекционного процесса у ;зунов, вызванного укусом одной "неблокированной" блохи отметим, | все виды блох родаXenopsylla обладают примерно равной степенью ;екциозности в случае заражения их вирулентной формой возбудителя, инфекциозность не зависит от концентрации возбудителя в заражага-1 блох крови. Пониженная температура.внешней среды играет роль ста-лизиругщего и пролонгирующего фактора инфекциозности "неблокирован-х" блсх. Из данных рнродор вытекают органически связанные с ними едующие положения:

- рпнзсотическур значимость имеет бактериемия любой интенсивное!

- постоянная циркуляция возбудителя в вирулентной форме отража-

• ягтгномнкй никл его разрития и определяет стабильность его свойст!

- передаче рсзбудителя основное место принадлежит здоровым,

актирным блохам;

- укус одной зараженной "неблокированной" блохи обуславливав развитие хронического процесса в виде гранулематозного воспаления представляющего собой типовую реакцию организма и механизм персис тенции возбудителя.

ГЛАВА IУ. Системно-функциональные основы трансмиссивного

механизма энзоотии чумы

Неизменность ситуации в эпизоотологии чумы сохраняет значенш высказывания Ю.М.Ралля (1965) о том, что "Эпизоотологию интересую' типичные законы, обеспечивающие видовую кизнь чумного микроба в природе".

Настоятельная необходимость познания законов формирования и дальнейшего эволюционного развития уровней организации материи, п£ вел в науке к внедрению системного подхода к объектам изучения. Эт принцип получил свое развитие и в эпизоотологии чумы. И.С.Солдатки (1968) за систему принимал комплекс грызун-блоха-микроб, М.П.Козло (1979) - эпизоотический процесс. Однако триада грызун-блоха-микрсб как система, не может обеспечить долговременного существования воз будителя, а эпизоотический процесс трактуется как процесс распрост нения возбудителя инфекционной болезни среди животных. Понятия "энзоотия" или "энзоотический процесс" значительно шире и включают в себя эпизоотический процесс, как этап энзоотии. Следовательно объект-системы, выбранные И.С.Солдаткиньм и М.П.Козловым не отличаются целостностью и не могут обеспечить долговременного существования чумного микроба.

В.С.Тюхтин и Ю.А.Урманцея (1988), раскрывая суть правильного подхода к.изучаемому объекту, делают вывод о том, что отображение структуры и организации объекта-системы выступает главной интеграль «Й характеристикой знания об объекте. Системному анализу энзоотии

должно предшествовать характеристика участников энзоотического зсса, раскрывающая основной механизм их взаимоотношений. При , популяционный подход к рассматриваемому вопросу (Айала, 1984; ганский, 1986 и др.), является единственно приемлемым, отвечающим эсти поставленной задачи.

ПОПУЛЯЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ

Уникальный характер эволюционного пути возбудителя чумы лодчер-ется специализацией только двух видов палочковидных форм микро-низмов - возбудителей чумы и туляремии к трансмиссивному механиз-ередачи. Стабильная приуроченность чумного микроба к грызунам, чающихся относительно невысокими продолжительностью жизни и сте-ч резистентности, значительной численностью и плотностью посей, соответствующих оптимуму эстафетной передачи, носит свой ин-[дуальный эволюционный смысл. В отличии, например, от возбудите-туберкулезэ, проказы и т.п., приспособленных к длительно живущим ¡евам, или обитателей козшых покровов и кишечника, с менее жест-I требованиями к видовому составу хозяев. Определенные параметры "рафичрских зон активных природных очагов чумы, объясняется, по-■ндому, соответствием их оптимуму трансмиссии возбудителя.

Свойства чумного микроба - выраженная температурФ-(37°) зависеть синтеза антигенов и связь их с вирулентностью ( Н1еисЬ± а1, 1959; Вихтоте, 1962 и др.), питательных потребностей гготсз, Л11еЪ , 1966 и др.), стабильность свойств чумного микроба еделах ареала конкретных носителей и различие их по природным гам (Марпшевский, 1969 и др.), внутриклеточный характер паразитизм гготгз , 1963), особенности инфекционного процесса у грызунов лль, 1965 и др.) и сопряженность изменения свойств возбудителя сменсй хозяев в очагах

(Некипелов, 1962 и др.), наглядные показатели эволюционной направленности процесса специализации к условиям теплокровного организма Высокая степень лабильности вирулентных свойств микроба, предполагает необходимость редкого ограничения "экологической ниши" возбудителя, п максимальной степени способствующей сохранению стабильнос свойств популяции чумного микроба в природных очагах. Это возможно при обеспечении циркуляции ого только в вирулентно"' форме (37°), соответствующей его видовому статусу, что согласуется с тезисами И.И.Шмальгаузена (1969) об "ограничении понятия адаптации" и "автономности развития, как генеральной линии эволюции". Вирулентность возбудителя чумы является интегральным свойством, имеющем основное экологическое значение и положение о нем, как об основном условии зохранения патогецгшх бактерий а популяции хозяина (Браун, 1968), цля чумного микроба абсолютно во всех отношениях.

ПОПУЛЯЦИЯ НОСИТЕЛЯ

Основу функциональных взаимоотношений биоценоза популяций но-:ителя - возбудителя - переносчика составляет популяция носителя, :ак "экологическая доминанта" биоценоза (Одум, 1975), определяющая -.арактер взаимосвязей всех его членов, видовой состав и свойства юпуляций шдо~(возбудителя) и эктопаразита (переносчика).

РажнеРшим признаком популяции носителя является определенный идовой уровень резистентности, обусловленный приоритетностью фа-оцитарной системы иммунитета (Румянцов 1973; Маянскчй, 1983*,Kle-anoff, Claris 1 1978), в том числе и при чуме (Ралль, 1965; eyer , 1950; BUrrowa, Bacon', 1956 и др.). В эксперименте ведущая оль фагоцитарной системы впервые продемонстрирована нами на нтактных животных различных видов (Исин, Сулёйменов, 1987) и при кспериментальной чуме (Исин, Сулейменов и др. 1987 ). Еще одно под-аерждеиие это нашло при наблюдении за цитоцидной активностью поли-

юрфоядерных лейкоцитов больших песчанок р процессе эпизоотии в лшом Прибалхашье (Новиков и др., 1990), выполненных под нашим руководством.

Фагоцитарная система является ^едущим механизмам естественно?! изменчивости возбудителя. В опытах in vitro и in vivo'3nepnbie (Лтчабпрог, Сулейменоя и др., 1989; Атчпбаров, С.улеГшенов и др., [990; Атчабароя, Сулейменов, 1991) доказано мутагенное действие фагоцитирующих клеток грыяуноп на чумно" микроб - получен широки'" спектр мутантов по питательным потребностям, вирулентности. Внутриклеточный характер паразитизма чумного микроГ'а о^услопливает преимущественно хронический инфекционный процесс (КовалелекиЯ, 1983; Лдамс, 1983 и др.), что впервые'продемонстрировано нами на модели одна "неблокированная" блоха - один грызун. (Сулейменов и др.,1989) Частота гранулемотозного воспаления обратно пропорционально степени видовой резистентности грызунов - морские свинки - 56%, белые крысы- 32%, большие песчанки - 23%. В полевых условиях, в зоне эпизоотии, инфекционные гранулемы обнаружены нами в 13% случаев.

Уровень популяционной резистентности носителя, по нашему мнени представляет. собоР лимитирующий фактор для степени популяционной ви рулентности возбудителя, что четко прослеживается по всем природным очагам чумы - более резистентному носителю соответствует ^олее вирулентный роз^удитель и наоборот - это согласуется с тезисом Биго-на и др. (1989) о соотгетствии генетически детерминированных.уровне резистентности носителя и вирулентности возбудителя. .

Особенности паразитизма чумного микроба и специфики гранулема-тозного рречесся (Корялррский, 1983; Канатор, 1984; Суле^менов и дт>., I9P9; Од^кеноу, 1990^' тюзголяпт отнести последний к постоянному источнику кнф-кции. Р основе ш'.ркуляиии чумного микроба лежит обязательна-1 ^ррдача то каждому новому поколению грызунов. Е за-

висимости от условий темпы ее или ускорены - острая эпизоотия, или очень замедленны и отдельные, регистрируемые случаи чумы у грыэуно* создают впечатлений спорадических, днффуяно распределяющихся случаев. Замедленная циркуляция возбудителя может солроговдатвся возникновением новой полны эпизоотического процесса на фоне предыдущей. Эдняко снижение численности основного носителя в процессе эпизоотии

I

шкогда не достигает критического уровня (Варшавский, Шилов, 1973 1 др.) и я приходном' очаге чеегда имеются условия для закономерного тооцесса циркуляции чумного микроба.

Эти функции могут быть реализованы только доминирующим видом 'рыгп'на; Следовательно категория основного носителя экологически боснована.

Популяция переносчика

Экспериментальный материал продемонстрировал высокую инфекци-:{Ность укуса одной "неблокированноГ*" блохи при обязательном нали-1И в ней вирулентной формы возбудителя. Это неизбежно влечет при-1ание 'эпизоотической значимости бактериемия любой ин ..-.нсивности, шичие которых отмечалось многократно (Лаврентьев, 1964'; Островс-[й, Солда^кин, 1965 и др.).

Общепринято, что роль переносчика ограничивается сохранением какое-то время возбудителя и передачей его носителю - реципиенту.

Очевидно, что в механизме эпизоотии с этих позиций, место пе-носчика выделяется своей выраженной пассивностью и односторонней висимостыо от прокормителя. Мы считаем такую трактовку роли пе--юсчика неполной и лишенной полноценного эволюционного смысла, этой связи мы обратили внимание на три факта:

- развитие эпизоотий чумы в условиях повышенного обилия но-*елей и переносчиков.

- наличке определенных периодов повышенной численности блох в шерсти;

- особенности питания блох, требующие обязательного участия в э.том процессе ангикоагулянтов, являющихся имыунодепрессантами (Шебалин, Серов, 1988).

Мы предположили об иммунодепрессивном влиянии множественных укусов блох на организм грызуна.

Это подтвердилось в наших опытах с укусами неяараженных блох белых мышей и белых крыс и последующим определением величины Ы) чумного микроба. Укусы блох Х.сЬеорхэ почти в 27,9 повышают чувствительность белых мышей, а Х.сазр3.са в 6 раз чувствительном белых крыс. Сопоставление данных с действием 100 ед. гепарина (в 3 раза), позволяет определить степень иммунодепрессивного влияния укусов блох как достаточно интенсивное.

Блохам принадлежит активная роль индукторов эпизоотического процесса, обусловленная их функцией постоянного "иммунодепрессивного пресса". Такая функция может быть свойственна только наиболее массовому виду переносчика - отсюда экологическая обоснованность критерия основного переносчика.

По нашему мнению, популяция переносчика л природном очаге осуществляет две органически связанные функции - передача возбудителя и иммуиодепрессиЕные действия на организм носителя.

В процессе взаимоотношений популяций носителя, возбудителя и переносчика необходимо выделить следующие основные положения.

Для популяции носителя:

- роль экологической доминанты;

- специфический патогенез инфекционного процесса с ведущей рольг фагоцитарной системы имуунитета;

- грд\'сий хзгактер.хронического (гранулематозного) воспаления

бактериемии любой степени;

- популяционная резистентность, как "лимитирующий" фактор для фулентности популяции розбудителя;

- экологическая обоснованность критерия основного носителя в жкретном природном очаге.

Для популяции возбудителя чумы:

- внутриклеточный паразитизм;

- мутационный характер изменчивости;

- циркуляция по цепи носитель - переносчик только в типичной рулентной форме, как основное .условие сохранения вида;

- эпизоотическая значимость бактериемии любой интенсивности.

Для популяции переносчика:

- передача розбудителя чумы в вирулентной форме "неблокированнъ охами, как основной механизм трансмиссии;

- функция постоянного "имиунодепрессивного пресса", как ванс-йшее условие активной индукции, эпизоотического процесса;

- экологическая обоснованность критерия основного переносчика.

Мы считаем, что терминальные состояния у любого из членов эпи-

этической триады - агональный сепсис ,у носителя, слабая вирулент-:ть у, возбудителя, "блок" преджелудка у блох не являются фактора-движения эпизоотического процесса.

Данные положения позволяв? определить взаимодействие популяций ювного носителя, возбудителя чумы и основного переносчика, как злюционно обоснованные, достигшие уровня взаимообусловленности 5заимозависимости.

. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Ю.М.Ралль (1965) определил причину неудачи научного осмысления [родного процесса, указав на необходимость ситезного познания всех !НОВ триады с позиций их единства и взаимообусловленности, а не их

взаимосвязи.

Биоценоз, слотсипщяЯся р природном очаге, представлен популяциями носителя, переносчика и возбудителя, где среди важнейших признаков поцуляции необходимо выделить ее устойчивость (Одум, 1975), э характер их связи определить как взаимозависимый (Дэжо, 1975).

Популяция носителя в биоценозе выполняет функцию экологическо' доминанты (Одум, 1975) и определяет основные характеристики возбудителя и переносчика.

В специфическом механизме патогенеза выделяется непосредственное взаимодействие чумного микроба, как внутриклеточного паразита, ( Burrows, 1963) с функциональными элементами фагоцитарной системы иммунитета (Голубинский и др. 1985 и .др.),обуславливающими механиз естественной изменчивости (Атчабаров, 1990).

Популяционная резистентность грызунов представляет собой лимитирующий фактор естественного отбора возбудителя чумы.

Возбудитель чумы обладает■всеми признаками адаптации к услови ям теплокровного организма (Burrows , Bacon , 1966 и др.). Внутриклеточный паразитизм обуславливает хроническое гранулематоз-ное воспаление, как основную форму процесса И механизм персистен-ции возбудителя (КовалеГ( 1903 и др.).

Популяции переносчика, как необходимому фактору циркуляции вс будителя, свойственны две основные функции.

Первая - передача возбудителя "неблокированными" блохами. Этс обеспечивает чумному микробу циркуляцию в типичной для конкретного очага вирулентной форме (принцип автономности развития). При этом эпизоотическую значимость приобретают бактериемии любой интенсивности, а в передаче учавствуют активные, здоровые особи.

Вторая - иммунсдепрессивное действие укусов блох, как активге индуктор эпизоотического процесса.

Эти положения выявляют полную взаимозависимость и взаимообусловленность популяций основного носителя, возбудителя и основного 1ереносчика и соответствуют выводу К.Одума (1975) о "выраженной тенденции экосистем и.популяций эволюционировать на основе естест-■енного отбора таким образом, чтобы достигнуть состояния саморегу-■ии".

Таким образом, в основе механизма энзоотии чумы лежит эволю-ионно обусловленное взаимодействие популяций основного носителя, озбудителя и основного переносчика, как саморегулирующийся меха-изм естественного отбора и сохранения видов.

ВЫВОДЫ

1. Передача возбудителя чумы в вирулентной, типичной для каж->го очага форме "неблокированными" блохами, составляет основной >ансмиссивный механизм циркуляции чумного микроба в природных очах чумы.

2. Гранулемагознов воспаление, как основа хронической формы мы, обусловливающей персистенцию возбудителя, обеспечивает ус-йчивую циркуляцию чумного микроба в популяции носителя.

3. Функция постоянного "иммунодепрессивного пресса" наравне тередачей возбудителя, составляет интегральную характеристику ювного переносчика чумного микроба.

4. Эволюционно обоснованное взаимодействие популяций основного :ителя, возбудителя и основного переносчика в очагах чумы, нахо-ся на уровне взаимозависимости и взаимообусловленности.

5. Эпизоотический процесс в природных очагах чумы представляет ой механизм естественного отбора и сохранения видов основного ителя, возбудителя и основного переносчика.

- 38 -

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Б.М.Сулейменов, М.И.Матаков. Влияние антител к различным антигенам чумного микроба на интенсивность блокообразования. //ХП межреспубл. н.-практ. конф. противочум. учрежд. Ср.Азии и Ка захстана по профилак. чумы. Алма-Ата, 1985, с. 71-72.

2. Ж.М.Исин, Б.М.Сулейменов, А.М.Айкимбаев. Кислородзависимь: цитоцидный потенциал фагоцитов как основа различия чувствительное грызунов к чуме. //У межреспуб. конф. аллергологов и иммунологов Казахст. и республик Ср.Азии совм. с Пленумом Научного Совета по иммунологии АМН СССР. Алма-Ата, 1986.

3. Ж.М.Исин, Б.М.Сулейменов. К вопросу об антибактериальных свойствах иммунных сыворотках при чуме. //Иммунология и спец. пр< филактика особо опасных инфекций. Саратов, 1986, с. 25-32.

4. Ж.М.Исин, Б.М.Сулейменов. Сравнительное изучение антимик ного потенциала полиморфоядерных лейкоцитов животных с различной видовой чувствительность!) к возбудителю чумы. //Междунар. журн. "Гигиены, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии". Прага, 19 № - 3, с. 335-342.

5. Ж.М.Исин, Б.М.Сулейменов, A.M.Айкимбаев. Изменение антда робного потенциала фагоцитирующих клеток больших песчанок при в* риыентальной чуме. //МЭИ, Москва, 1987, №-11, е.. 87-88.

6. Ж.М.Исин, Т.И.Тугамбаев, Б.М.Сулейменов. Роль эндотокеш в патогенезе чумной инфекции. //Сб.работ "Бактериальные токсины' ИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи, 1987, с. 51-54.

7. Б.М.Сулейменов, М.И.Матаков, Й.М.Исин, Л.Н.Котурга, Б.Б чабаров. Экспериментальное обоснование механизма передачи возбу, теля vvmu. //Маг.обл. н.-практ. конф. Гурьевской ПЧС по проф. о опасных инфекций. Гурьев, 1989, с. I79-I9I.

?. Б.М.Сулейменов. Системно-функциональные основы трансмис

кого механизма энзоотии чумы. //Совр, аспекты эпиднадзора за особ опасными инф. Алма-Ата, 1990, с. 44-4?.

9. Б.М.Сулейменов, А.М.Айкимбаев, Ж.М.Исин. Иммунодепрессивн! действие аминокислот при экспериментальной чуме //Матер.регион. с< вещ. противочум.учрежд. по эпид. и эпиэ. и проф. особо опасных^инфекций. Куйбышев, 1990,- с. 200-201.

10. Б.М.Сулейменов, Б.Б.Атчабаров, Р.Р.Рахматкулов, Н.С. Майка нов //Аргининзависймые вирулентные штаммы чумного микроба из Заура ского степного очага чумы //Матер.регион, со'вещ.противочум.учрежд. по эпид.,эпиз. и проф. особо опасных инфекций. Куйбышев, 1990,

з. 201-203.

11. Б.М.Сулейменов, М.И.Матаков. Условия передачи возбудителя зумы "неблокированными" блохами //Матер.регион.совещ.противочум., гчрежд. по эпид. эпиз, и проф. особо опасных инфекций. Куйбыдов, [990, с. 203-205.

12. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Ж.М.Исин. Мутагенная актив-юсть фагоцитов большой песчанки. //Матер.регион.совещ. противочум, чрежд.по эпид. эпиз. и проф. особо опасных инфекций. Куйбышев, 990, с. 21-22.

13. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Ж,Ы.Исин. Мутагенное действа агоцитоа на чумной микроб. //ЮЭЙ, 1989, №-4, с. 10-14.

14. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Н.С.Майканов. Популяционные заимоотношения основных носителей и возбудителя чумы в природных чагах. //Матер. 5 объед. съезда гигиен.эпид.,инфекц. Алма-Ата, 391. 1-1У, с. 118-121.

15. Н.С.Майканов, Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов. Условия сущест звания аргининзависимой вирулентности популяции чумного микроба в ^уральском степном очаге. //Матер. 5 объед.съезда гигиен, эпид., {фекц. Алма-Ата, 1991, 1-1У, с. 131-132.

16. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Н.С.Майканов. Аргининзависим; зулентная популяция чумного микроба Зауральского степного очага чу! ""енетика, микробиол. и совершенствование лаб.диагное. особо опасны: Секций. Саратов, 1991, с. 98-106.

17. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов. Изменчивость чумного микроба Ч действием фагоцитирующих клеток //Экоген. 1991 (а), Томск. №-1,

3, 9.

18. Б.М.Сулейменов, Б.Б.Атчабаров. Штамм бактерий чумы, предназ иной для проведения генетических и микроб, исследований //Авт. идетельство № - 1705342.

19. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов. Штамм бактерий чумы, предназ ченный для проведения генетических и микробиологических исследова-й //Авт. свидетельство № - 1712405.

20. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Т.И.Гугамбаев. Экологические пекты изменчивости чумного микроба //Организация эпиднадзора при ме и меры ее профилактики. Матер.межгос. н-практ. конф. Алма-Ата, 92 - 2. - С. 183-186.

21. Н.С.МаРканов, Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Т.И.Тугамбаев, Р.Рахманкулов. Экологические аспекты циркуляции оргининзависимой фулентной популяции чумного микроба в песках Бийрюк (Зауральский гепной очаг).' //Организа«. -,я эпиднадзора при чуме и меры ее профила! «т. Матер, межгосудар. н-практ. конф. Алма-Ата, 1992. -2. - С. 37-240.

22. Б.М.Сулейменов, Б.Б.Атчабаров. Функциональные связи популя! зсителя, возбудителя, переносчика в природных очагах чумы. /Организация эпиднадзора при чуме и меры ее профилактики. Матер, ежгос. н.-првкт. конф. Алма-Ата, 1992.- 2. -С. 274-27$.

23. Т.И.Гугамбаев, Б.М.Сулейменов, Б.Б.Атчабаров, Н.С.МаЙканов •Р.Рйхманкулов. Антигены чумного микроба в аллергической диагности

экспериментальной чумы. //Междунар. симпозиум по аллергологии и слинической иммунологии. Тез.докл. Алма-Ата» 1992. - раздел I- СЛ'

Принято в печать

1, Б.М.Сулейменов, Т.И.Тугамбяев, Б.Б.Атчабаров, Д.Н.Котурга. [нфекционный процесс у грызунов после укуса одной "неблокированной' лохи. - ЗШЭИ. - Москва.

2. Б.М.Сулейменов, Т.И.Тугамбаев, И.И.Матаков, Б.Б.Атчабаров, .С.Майканов, Р.Р.Рахманкулов. Аллергические пробы у грызунов после рансмиссии возбудителя чумы одной "неблокированной" блохой. -роблемы особо опасных инфекций, - Саратов.

3. Б.Б.Атчабаров, Б.М.Сулейменов, Ж.М.Исин, Н.С.Майканов. адунно-генетичееки(; новы изменчивости чумного микроба. - Пробле-4 особо опасных инфекций - Саратов.

4, Б.М.Сулейменов, М.И.Матаков, Б.Б.Атчабаров. Трансмиссия )зб,удителя чумы "неблокированньши" блохами. - Проблемы особо щсных инфекций. - Саратов.