Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Трансмембранный перенос ионов натрия и воды в опухолевых и нормальных клетках в интактном и облученном состоянии

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Тушишвили, Дали Иродионовна

Введение.

ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Транспорт натрия и воды в клетках опухолей

1.2. Влияние ионизирующей радиации на траншем- . . бранный перенос натрия и воды в клетках

ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И МАТЕРИАЛ.

2.Г. Обоснование применяемых методов исследования

2.2. Материал и подготовка его к эксперименту

2.3. Методика исследования изменений концентрации натрия с помощью натрий-селективных электродов

2.4.1 Методика исследования изменений воды.помощью. . тритиевой метки

2.5. Определение На"¥*-АТФ-азной активности.

2.6. Методика облучения животных.

2.7.' Методы обработки результатов.

ГЛАВА 3.СОБСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ.

3.Г." Транспорт ионов натрия. в. опухолевых и. . нормальных клетках.

3.2. Транспорт воды в опухолевых клетках.

3.3. Действие ионизирующей радиации на .траншем- -бранный перенос ионов натрия и.воды в опухо-. . левых клетках.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Трансмембранный перенос ионов натрия и воды в опухолевых и нормальных клетках в интактном и облученном состоянии"

Актуальность работы. Современная клиническая онкология,широко использующая в своей практике лучевые методы лечения опухолевых заболеваний, требует более углубленного понимания на клеточном и субклеточном уровне тех патологических процессов, которые возникают как в процессе малигнизации клеток, так и в ходе воздействия на них ионизирующей радиации.

Применение физических и физико-химических методов открыло широкие возможности исследования механизмов канцерогенеза не только на организменном уровне, но и в самой клетке, в частности, её важнейшей в функциональном отношении составной части -- биологической мембране. Мембраяологический аспект - одна из центральных проблем в биологии и в настоящее время привлекает большой интерес. Одним из наиболее важных и интегральных показателей функционального состояния мембраны является трансмембранный перенос ионов, изменение величины и направления которого имеет место при различных патологических состояниях.клетки. Эти явления могут иметь место в процессе озлокачествления клеток в условиях лучевого воздействия. N

Цель работы. Клетки перевитых опухолей, находящихся во взвешенном состоянии в растворе Рингера, представляют .собой удобный объект для изучения многих свойств клеточных мембран озлокачествленных клеток, что позволяет, с нашей точки зрения, разработать более совершенные методы лучевого лечения в онкологической практике.

В зависимости от условий облучения ионизирующая радиация может рассматриваться как ингибитор или стимулятор многих клеточных процессов. Цель работы - выявить некоторые механизмы влияния ионизирующего облучения в. определенном диапазоне доз на транспорт натрия и воды в малигнизированной клетке, попытаться найти объяснение некоторым феноменам, связанным. © лучевым воздействием на. опухоль, имеющим место в. эксперимент© и клинике.

Задачи работы.

Г. Исследовать особенности переноса ионов натрия и воды через клеточные мембраны опухолевых клеток как в интактном состоянии, так и в условиях функционального отягощения - увеличения концентрации натрия или калия в. растворе, омывающем клетки; сравнить трансмембранный перенос: натрия в малигнизи-рованных клетках и их нормальных аналогах.

2. Проследить действие ионизирующей радиации в определенном: диапазоне доз на транспорт натрия и воды в малигнизи-рованных клетках и выявить некоторые особенности его нарушения в условиях лучевого воздействия.

Научная новизна.

Г. Выявлена принципиальная разница между опухолевыми и нормальными клетками по критерию трансмембранного; переноса натрия: при увеличении концентрации натрия со 140 до 16Г -Г68 мМ/л в растворе Рингера, в котором находятся опухолевые клетки, в них, в отличие от нормальных, в значительно большей степени стимулируется активный транспорт натрия.

2. Исследовано действие рентгеновского излучения на трансмембранный перенос натрия. Облучение в-дозах 0,05' Кл/кг и 0,15 Кл/кг через 20 часов приводит к изменению величины активного транспорта, стимулированного 15^-ным увеличением концентрации, причём эффект от воздействия радиации в этих дозах различен по величине, направлению и механизму.

3. В работе впервые прослежен транспорт воды в опухолевых клетках как в интактном состоянии, так и под действием ионизирующей радиации. Показано, что при увеличении концентрации натрия в растворе Рингера, наблюдается выход воды,направленный во внешнюю среду, а после облучения в дозе 0,15 Кл/кг - отмечается угнетение трансмембранного переноса воды.

Практическая ценность. Показано принципиальное отличие опухолевых клеток от нормальных при инкубации их в рингеро-вском растврре, в котором концентрация натрия повышена со 140 до I6I-I68 мМ/л.

Установление зависимости эффекта радиационного воздействия на перенос натрия и воды в клеточных мембранах от дозы облучения может служить теоретической основой .для разработки в будущем более совершенных методов лучевой терапии в онкологической практике.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на:

- Ш-ем Всесоюзном съезде патофизиологов, Тбилиси,1982 год,/Тезисы докладов с.319/;

- II-ой Закавказской конференции онкологов, Ереван, 1982 год,/Тезисы докладов,с.496/;

- Конференции молодых ученых-медиков Грузии, Бакуриани, 1982 год,/Материалы конференции, с.170/;

- Научной Закавказской конференции патофизиологов, Баку, 1982 г./ Материалы 7-ой Закавказской конференции патофизиологов, с.311-313/;

- Республиканской научной конференции молодых медиков Грузии, Бакуриани, 1984 г. /Материалы конференции. с.195/.

Публикации. Результаты проведенных исследований отражены в 7 публикациях по теме диссертации.

Объем "работы. Диссертация состоит из 4 глав - литературного обзора, собственных данных, заключения и выводов. Работа содержит 135 страниц машинописного текста, иллюстрирована 17 рисунками и 4 таблицами.

Библиографический указатель содержит 162 источника: 65 отечественных и 97 зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Тушишвили, Дали Иродионовна

ВЫВОДЫ

1. При сравнении показателей транспорта натрия в опухолевых клетках и их нормальных аналогах , погруженных в раствор Рингера с концентрацией натрия 140 мМ/л, каких-либо принципиальных отличий не выявлено,

2. Увеличение концентрации натрия в растворе Рингера от 140 до 161-168 мМ/л - на 15-20% - приводит к значительному усилению активного транспорта натрия в опухолевых клетках, а также к возрастанию в них натрий-калиевой АТ^азы. В нормальных - не-озлокачествленных - клетках подобного явления не наблюдается. При концентрации натрия в растворе Рингера 161 мМ/л в клетках карциномы Эрлиха имеет место однонаправленный перенос воды в сторону внешней среды.

3. Действие ионизирующей радиации на клетки карциномы Эрлиха в разных дозах после облучения приводит к изменению величины активного транспорта натрия в зависимости от условий облучения. В дозе 0,05 Кл/кг он усиливается, в дозе 0,08 Кл/кг -- не меняется, при облучении дозой 0,15 Кл/кг - угнетается.

4. Трансмембранный перенос воды после воздействия ионизирующей радиации в дозе 0,05 Кл/кг практически не меняется ни по своей величине, ни по направлению при дозе 0,15 Кл/кг - отмечается его угнетение.

Транспорт воды в большей степени, чем транспорт ионов натрия, в условиях облучения в указанных дозах коррелирует с изменением активности натрий-калиевой АТФ-азы.

5. Выявленная разница в транспорте натрия и уровне активности натрий-калиевой АТФ-азы нормальных и опухолевых клеток в интактном состоянии и в условиях облучения создаёт основу для разработки ряда новых методов лечения онкологических больных, которые могут быть в дальнейшем использованы в клинической практике.

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Представленный нами материал еще раз подтверждает существующее в настоящее время мнение, что мембраны клеток являются активным регулятором клеточного метаболизма. Одним из путей реализации регуляторной роли мембран в клетке является изменение активности ряда ферментов в зависимости от структурно-функциональных характеристик мембран. Развитие различных патологий, в частности, опухолевый рост, лучевое поражение, сопровождаются, как правило, изменением физико-химических свойств мембран, что приводит к соответствующим вариациям в активности многих ферментов, в частности натрий-калиевой АТФ-азы, и это, в свою очередь, может вызывать изменение работы натрий-калиевого насоса.

Наши опыты еще раз показали, что активный транспорт в опухолевых клетках, находящихся в условиях нормального гомеостаза ( в растворе Рингера обычной концентрации ) практически ничем не отличается от такового в нормальных клетках. Помещение же этих клеток в условиях функционального отягощения (увеличение концентрации натрия на 15%) тотчас приводит опухолевые клетки в принципиально иное состояние - в них усиливается работа механизмов против оградиентного переноса (активного транспорта). Мы установили эту реакцию клеток с помощью разработанной в нашей лаборатории методики тотчас после изменения условий их функционального состояния. Иначе говоря, показано, что в опухолевых клетках, в отличие от их нормальных аналогов, чётче и быстрее срабатывают механизмы обратной связи в ответ на экстремальный фактор»

Предположение о сильной обратной связи, которой характеризуется ионный гомеостаз асцитных клеток карциномы Эрлиха, высказал А.Г. Маленков в 1976 г. К этому выводу он пришел путём ряда теоретических выкладок и обнаружил, что его расчеты находят подтверждение в работах упомянутых нами выше » Шиг/э-фт^/1967/, исследовавших кинетику к алий-натриевого соотношения асцитных клеток при помещении их в бескалиевую среду и последующем перенесении в нормальную. В отличие от опухолевых нормальные клетки, как правило, не могут восстановить ионный гомео-стаз и, вообще, выжить, как считает Н.Н. Никольский / 1965 / , после столь глубокого нарушения ионного равновесия. Наличие сильной обратной связи обусловливает состояние, при котором ионный гомеостаз асцитных клеток в ответ на возмущающее действие будет отвечать релаксационным, а может быть, и актоколебательным поведением. В данном случае автор ведёт речь о колебаниях, характеризуемых периодом около часа, то есть таким порядком длительности периода, который отмечен A.M. Векслером и др. /1972/ для клеток асцитных опухолей по изменению объёма клетки.

Возмущение ионного гомеостаза, происходящее в начале митоти-ческого цикла, по мнению А.Г. Маленкова, вероятно, является тем автономным стимулом, который каждый раз заводит эту систему и, таким образом, "дирижирует" макромолекулярными системами в течение митотического цикла. С другой стороны, малые значения мембранного потенциала и наличие высокой исходной проницаемости делает системы "ионный гомеостаз клетки" асцитных опухолей относительно мало чувствительной к внешним воздействиям.Для того,чтобы вызвать такие же,как у нормальных клеток,изменения ионного гете-рогенитета путём увеличения пассивной ионной проницаемости) (но не отключения активного транспорта!), требуются очень интенсивные воздействия ( например, большие дозы поверхностно-активного вещества или гидролитического фермента).

Исходя из высказанной мысли и собственных экспериментальных данных приходим к заключению, что отличие между ионным градиентом опухолевых и нормальных клеток хорошо согласуется с отличиями биологических свойств этих объектов: опухолевые клетки менее чувствительны к стимулирующим неспецифическим повреждающим воздействиям, деление по-видимому, в значительной мере не зависит от регулирующих факторов? они быстро реагируют на избыточные порции ионных потоков, поступающих в клетку и с помощью активного транспорта восстанавливают свой ионный гомеостаз.

Последнее положение легко связать с развиваемой в настоящее вреяя точкой зрения о механизме возникновения в клетке неспецифической ответной реакции на внешний повреждающий агент. Л.Х.Эй-дус, рассматривая механизмы этой реакции, полагает, что в клетке низкомолекулярные органические субстраты распределены неравномерно и поэтому их компартментализация поддерживается непрерывным трансмембранным переносом против градиентов концентрации. Резкие внешние воздействия сдвигают равновесие, существующее между активным транспортом и диффузией, в результате чего возникает тенденция к выравниванию концентрации низкомолекулярных соединений в клетке. Адсорбция дополнительных количеств этих соединений на макромолекулах приводит к снижению их конформамонной подвижности, а, следовательно, и биологической активности. В результате снижается интенсивность метаболизма. При умеренных воздействиях эти состояния обратимы, при более значительных повреждениях сильно ингибируется активный транспорт, поэтому возврат к норме задержан на длительное время. Обратимость при умеренных воздействиях обусловлена восстановлением исходной компартментализации в резулмате функционирования внутриклеточных мембран. При резких повреждениях ингибируется активный транспорт, поэтому возврат к норме затруднён (задержан на длительное время), а в некоторых случаях необратим.

Имеются данные, из ноторых следует, что необратимость в развитии неспецифической реакции связана о прекращением поступления субстратов для гликолиза / G ol-^cceJL&z- , 1956/, согласно которым в модели некроза перфузия глюкозы восстанавливает ингибированное окислительное фосфорилирование, и повреждение клетки репарируется как в аэробных, так и анаэробных условиях. Причиной необратимости повреждения может быть нехватка глюкозы, с истощением пула которой некоторые авторы / zf • , 1959/ связывают также распад лизосом с высвобождением лизосомальных ферментов. Вели сопоставить эти данные с результатами, полученными B.C. Шапотом с соавторами ,(1979), показавшими, что поглощение глюкозы в опухолевых клетках идёт скорее и в значительно больших количествах, чем в нормальных,станет понятным, почему озлокачествлённые клетки легче восстанавливают ионный гомеостаз, а в некоторых случаях могут проявлять большую активность ферментной деятельности и работы насоса*

Если увеличение ионной концентрации в растворе Рингера,омывающем клетки, считать достаточной силы агентом (он несомненно приводит к сдвигу равновесия между активным транспортом и диффузией), то нормальные клетки, по-видимому, реагируют на это путём снижения биологической активности и если не уменьшением величины активного транспорта, то во всяком случае и не его усилением»

Реакция опухолевых клеток на внешний фактор принципиально иная: противоградиентный перенос усиливается за счёт повышения уровня ферментативной активности, дополнительные количества низкомолекулярных соединении вытесняются из клетки усиленной работой натрий-калиевого насоса. Иначе говоря, реакция опухолевой клетки на внешние факторы протекает существенно отлично от нормальной. И лишь экстремальный агент такой силы, как значительные дозы облучения ионизирующей радиации / 0,15Кл/кг/ может привести ферментативные процессы, и, в конечном итоге, активный транспорт к угнетению.

Из наших опытов следует, что реакция опухолевой клетки на радиационный фактор различна в зависимости от дозы облучения. По этому поводу правильно, на наш взгляд, замечает Л.Х.Эйдус /1977/, что различные изменения интенсивности ферментативных процессов в те или иные сроки наблюдения сами по себе ещё не достаточны для суждения о механизме радиационного повреждения. Периодический характер изменений ещё не позволяет судить о направленности вызываемых радиацией сдвигов, отражённых в разрозненных данных, без учёта динамики неспецифической реакции. Понятными становятся также причины интенсификации отдельных биохимических реакций /"активаций"/, их механизмы, временной характер, зависимость от исходного физиологического состояния клеток и других ферментов.

Таким образом, картина ионного гетерогенитета в озлокачес-твлённой клетке в условиях воздействия ионизирующей радиации нам представляется в еле,дующем виде. Как показали работы К.П. Балицкого и Е.П.Шубы /1963/, мембранный потенциал малигнизиро-ваняых клеток значительно меньше по абсолютной величине, чем нормальных. По данным А.Г.Маленкова /1976/, суммарная ионная проницаемость у опухолевых клеток минимум в 3-4 раза выше, чем у гомологичных нормальных. Если к тому же принять, что по степени активности ионов нормальные клетки не сильно отличаются от опухолевых /А.Г.Маленков, 1976/, а поверхность последних характеризуется значительно большей относительной проницаемостью для ионов хлора, то все эти факторы могут привести к значительному ионному гетерогенитету при уменьшении мембранного потенциала. Значительный ионный гетерогени-тет при высокой проницаемости мембраны может поддерживаться только за счёт интенсивной работы активного транспорта. Что касается величины мембранного потенциала, то она может остаться без существенных изменений, если учесть данные С.М.Марти-росова и Л.Г.Микаэляна /Г970/, А.Г.Маленкова /1973/, А.С. Ильина с соавторами /1976/, показавших, что в случае электронейтральности активного транспорта / а это можно допустить на основании наших предположений в п. 3.3 /, разделение ионов осуществляется за счёт работы микроскопических насосных систем типа сократительной вакуоли, не ведущей к дополнительному повышению мембранного потенциала.

Ионизирующая радиация, как показали многочисленные исследования в этой области, способствует увеличению проницаемости мембраны, что, в свою очередь, должно ещё больше усилить интенсивность деятельности натрий-калиевого насоса. Эта картина и наблюдается, по-нашим данным, при облучении в сравнительно небольших дозах / 0,05 Кл/кг /. Увеличение дозы облучения приводит к ингибированию активного транспорта при сохранении по-прежнему высокой проницаемости клеточной мембраны. Что касается обратной связи в этих условиях, то она, безусловно, начинает страдать при действии высоких доз радиации /более 0,08 Кл/кг/. Конкретно - под регулятором обратной связи в нашей модели мы понимаем уровень ферментативной активности, в частности, натрий-калиевой АТФ-азы, который в значительной степени определяет характер ответа клетки в виде работы помпы на увеличенные порции ионов, проникающие в клетку и покидающие её вследствие повышенной клеточной проницаемости. Из наших данных следует, что активность натрий-калий-АТФ-азы в значительной мере подвержена влиянию ионизирующей радиации в дозах свыше 0,15 Кл/кг, и отсюда "ухудшение" работы обратной связи в этом диапазоне доз облучения, которое, в конечном итоге, приводит к ослаблению работы активного транспорта в опухолевой клетке.

Мы присоединяемся к существующему мнению о том, что компоненты нетоксической терапии следует искать среди веществ, непосредственно действующих на поверхность клеток и меняющих их ионный гомеостаз. Путём воздействия различными агентами на этот важнейший показатель клетки можно, в принципе, добиться соответствующего изменения режима клетки, а это, в свою очередь, позволит создать некоторые предпосылки возможности обратного процесса - нормализации опухоли.

Выявленное нами различие опухолевых и нормальных клеток по критерию усиления работы активного транспорта и роста уровня активности натрий-калиевой АТФ-азы в определенных условиях позволяет надеяться в дальнейшем попытаться найти пути разработки дополнительных, тестов экспресс-диагностики в онкологической практике и при определю нии эффективности лечения опухожй лучевыми методами.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Тушишвили, Дали Иродионовна, Тбилиси

1. Г. АЙВАЗИШВИЛИ М.А. Влияние ионизирующего излучения на транспорт натрия и воды в верхних отделах тонкого кишечника кролика. Автореферат кандидатской диссертации, Тбилиси, Онкологический Научный Центр МЗ ГССР, 1981, с.3-18.

2. АЙРАПЕТЯН С.Н. Влияние температуры на мембранный потенциалгигантских нейронов улитки. Биофизика,1969, т.14,1$ 4, с. 663-668.

3. АКИМОВ Ю.А. Влияние динитрофенола и азида натрия на электрофизиологические свойства гигантских нейронов виноградной улитки. Физиологический журнал СССР, 1973, т.59, Л I, С. 53-61.

4. ЕАВРО FJ3. Изменение импульсации в стволе блуждающего нервакроликов при острой лучевой болезни. Медицинская радиология, I960, т.5, с.9-12.

5. ЕАЛИЦКИЙ К.П., ШУБА Е.П. Труды 8-го Международного противоракового конгресса, т.4, М.-Л.,1963,с.55. Цит.по А»Г.Маленкову.

6. БЕРГЕЛЬСОН А.Д. Биологические мембраны. Изд-во "Наука", М., 1975, с.3-181.

7. БЛЕСЛЕР В»М. Физико-химические авторегуляции в клетках. Труды Московского общества испытателей природы. Изд-во "Наука", 1968, т.28, с. 234-239.

8. БУШАКОВА Е.Б., ЗАСЛАВСКИЙ Ю.А., ШИШКИНА Л.Н. Влияние изменений в липидах мембран на активность Ыа+К+-зависимой АТФазы. Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР, М. ,1981, вып.24, с.17.

9. БУШЕВА И.А., ИВАЩЕНКО А.Т., УТЕУЛИН К.Р. Изменение активности АТФаз ядер клеток печени и тимуса облученных крыс. Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР,1981,в.24.

10. ВАСИЛЬЕВ Ю.М., ГЕЛЬФАНД И.М. Изменение клеточной поверхно* сти основа биологических особенностей опухолевой клетки. Вестник АН СССР, 1968, т.3»,с.45-^49.

11. ВАСИЛЬЕВ Ю.М., МАЛЕНКОВ А.Г. Клеточная поверхность и реакции клетки. Изд-во "Медицина", М.,1968, с.3-190.

12. ВЕПХВАДЗЕ: Р.Я., МЦХВЕТАДЗЕ А.В., КОТАРИЯ Р.З. Влияние ионизирующей радиации на трансмембранный перенос калия в по-лицеллюлярных мембранах. Радиобиология, 1978,т.18,вып.4, с.607-610.

13. ВЕРЕНИНОВ А.А. Зависимость потока натрия из мышечных волокон наружу от концентрации натрия в среде и разности электрических потенциалов между клеткой и средой. Биофизика, 1967» т.13, с. 555-558.

14. ВЛАДИМИРОВ Ю.А. Структура и функции биологических мембран.

15. Сборник статей., М., 1971, с. 31-53.

16. ВОЙКОВ В.Л., МАЛЕНКОВ А.Г. Исследование электропроводностисуспензий нормальных и опухолевых клеток. Биофизика, 1971, т. ГО, вып.4, с.656-662.

17. ВОЛЬФ М., РАСБЕРГЕР К. Лечение ферментами. Изд-во "Мир", М.1976, с.142-231.

18. ГЕРАСИМОВА Г.К., НАХИЛЬНИЦКАЯ З.Н. Роль сульфгидрильныхгрупп в повреждении транспортной функции мембран эритроцитов. В сборнике "Действие ионизирующего излучения на клеточные мембраны", Атомиздаг, М.:,1973, с. 51-57.

19. ГРИНШГЕЙН Дж. Биохимия рака. Изд-во иностранной литературы, 1951, с.68-71.

20. ГРОДЗЕНСКИЙ Д.Э., ИВАНЧЕНКО Т.И. Изменения объема электролитов у крыс при воздействии ионизирующего излучения. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1961, т.51,$ 6, с. 62-65.

21. ДАВЫДОВА С.Я., СОЛОВЬЕВА А.А., ПЕВЗНЕР Г.М., ШАЛОТ Г.С.

22. Структкра и функции биологических мембран. Сборник статей. Изд-во "Наука", М., 1971,с.87-94.

23. ДАТЛОВИЦКАЯ Э.В., КРАСНОВСКИЙ А.Ф., БЕРГЕЛЬСОН Л.Д. Связывание калия и натрия фосфолипидами нормальных и опухолевых тканей. В кн.:"Физико-химические механизмы злокачественного роста", Изд-во "Наука", М.,1970,с. 82-83.

24. ДВОРЕЦКИЙ А.И., ЕГОРОВА Е.Г., СЛЕПЧЕНКО В.А., КУЛИК Л.Н.,

25. ФИЛИМОНОВА Л.А. Влияние ионизирующей радиации на На^.-АТФ-АТФ-азную активность мембран различных по радиочувствительяости органов крыс. Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР, М., 1981, вып.24, с. 16.

26. ДЕЖЦША Н.С- Исследования рецепции облученных участков тела в эксперименте на животных. Медицинская радиология,1959, т.4, № 8, с.17.

27. ИЛЬИН А.С., МАЛЕНКОВ А.Г. К моделированию ионного транспорта.Анализ возможностей механизма внутриклеточной осморегуг-ляции. Биофизика, Г976, т.21, В I, с. 70-73.

28. КАВЕЦКИЙ Е.Р. Опухоль и организм. Госмедиздат УССР, Киев,1. Г962, с. 268-269.

29. КАТЦ В. Нерв, мышца и синапс. Изд-во "Мир", М., 1968, с. 9200.

30. КАЧУ? Л.А., КИСЕЛЕВ П.Н.,ШУТК0 А.Н. Ранние нарушения процесса обмена воды через желудочно-кишечный тракт при лучевом поражении организма. Вопросы радиобиологии ЦНИИРРИ МЗ СССР, Ленинград, I960, т., 24, с.124-137.

31. КОЛОМЕЙЦЕВА И.К."Мембраносвязанные ферменты биосинтеза липддов в лучевом поражении и восстановлении биомембран". Информационный бюллетень радиобиологии АН СССР, М., 1981, вып.24, с.25.

32. K0H0HEHK0 Н.И., КОСТКК П.Г. Мембранные токи, индуцированныевходом ионов натрия в гигантские нейроны моллюсков. Нейрофизиология, 1975, т.7, № 5, с.541-549.

33. КОСТНС П.Г. Активный транспорт ионов в нервной клетке и егосвязь с электрическими процессами на поверхностной мембране. Украинский биохимический журнал, 1970, т.43, № I, с.9-16.

34. КОСТЮК П.Г., КРЫШТАЛЬ О .А., ПВДОПЛИЧКО В.И. Элекгрогэяныйнатриевый насос и связанные с ним изменения проводимости поверхностной мембраны нейронов. Биофизика, 1972, т.17, $ 6, с. 1048-Г054.

35. КОСТЮК П.Г. Активный транспорт ионов в нервной клетке. Вкн.:"Общая физиология нервной системы", изд-во "Наука", Л., 1979, с. 182-217.

36. ЛЕВ А.А. Опредежние активности и коэффициентов активностиионов калия и натрия в мышечном волокне лягушки при помощи катион-чувствительных стеклянных микроэлектродов. Биофизика, 1964, т.9, J^ ГО, с. 686~694.

37. ЛЕВ А.А. Ионная избирательность клеточных мембран. Изд-во1. Наука", Л.,1975, с. 323.

38. ЛЕНЙНДШЕР А. Биохимия. Изд-во "Мир',' М., 1976, с.362-484.

39. МАЛЕНКОВ А.Г. Ионный гомеостаз и адгезионные свойства нормальных и опухолевых клеток. Автореферат докг орской диссертации, Пущино, 1973, с. 3-24.

40. МАЛЕНКОВ А.Г. Ионный гомеостаз и автономное поведение опухоли. Изд-во "Наука", М., 1976, с. 3-I7I.

41. МАЛЬЦЕВА Е.Л. ,ПАЛЬМИНА Н.П. Изменение активности ядернойглюкозо-6-фосфатазы при действии ионизирующей радиации на животных-опухоленосителей. Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР, М., 1981, вып.24, с.12.

42. МАРТИРОСОВ С.М., МИКАЭЛЯН Л.Г. Ионный обмен при электрогенном активном транспорте ионов. Биофизика.,1970, вып.15,№ I, с.104.

43. МЦХВЕТАДЗЕ А.В., КУЧЕРЕНКО Т.М. Прямое и опосредованное влияние радиации на передачу возбуждения в верхнем шейном симпатическом ганглии кошки. Радиобиология, 1968,т.8.вып.4, с. 624.

44. НАДАРЕИШВИЛИ К.Ш. Вопросы влияния ионизирующего излученияна сердечно-сосудистую систему. Изд-во "Медицина",М.,1966, с. 5-7.

45. НАДАРЕИШВИЛИ К.Ш. , САНАЯ Т.В., ТЕВДОРАДЗЕ В.В., САНДОДЗЕ В.Я.

46. Метод исследования активного транспорта и проницаемости полицеллюлярных мембран при помощи катион-селективных электродов. В сборнике " Вопросы биологической и медицинской техники", Изд-во "Мецниереба", ТбилисиД972, с 215-227.

47. НАХИЛЬНИЦКАЯ З.Н., ГЕРАСИМОВА Г.К. Некоторые итоги изучениямеханизма нарушения транспорта ионов калия в облученных эритроцитах. В сборнике "Действие ионизирующего излучения на клеточные мембраны", Атомиздат, М., 1973, с.84-90.

48. НИКОЛЬСКИЙ Н.Н. В кн.: Руководство по цитологии", Л., 1965,т.1, с.491.

49. ОЗЕРСКИЙ М.И. Действие рентгеновского излучения на проницаемость ионов в водорослях. Радиобиология, 1969, т.9, вып.1, с. 85-89.

50. ОКАДА Ш. Радиационная биохимия клетки. Изд-во "Мир", М.,1974, с. 186-193.

51. ПИНУС Е.А., РАБИНОВИЧ Я.М.,СКУЛАЧЕВ В.П. Белковый синтез имембранный потенциал митохондрий. Биохимия, 1973, т.38, вып.4, с. 730-732.

52. РЫБАЛЬЧЕНКО В.К., КУРСКИЙ М.Д. Молекулярная организация иферментативная активность биологических мембран. "Наукова Думка", Киев, 1977, с.5-240.

53. РАСКУДОВА С.Т., ИВАЩЕНКО А.Т., ЧЕРНЫХ А.Б. "Защита циклическим 3',5' -АШ активности АТФ-аз плазматических мембран печени облученных:крыс". Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР, М„, вып. 24, 1981, с. 13.

54. САВИЦКИЙ И .В. Нарушения функции дегидрогеназ и моноаминоксидазы в облученном организме и пути восстановления их активности. Информационный бюллетень Радиобиологии АН СССР, М., Г981, вып.24, с.27.

55. САНАЯ Т.В. Действие ионизирующего излучения на физиологические свойства мембран полярных клеток кожи лягушки.Автореферат кандидатской диссертации,Тбилиси,Институт? физиологии АН ГССР, 1973, с.21-24.

56. САЧИР0ГЛУ М.-Цитировано по Вольф М. и Рапсбергер Лечение ферментами. Изд-во "Мир", М.,1976,с.150.

57. СЛ0ЖЕНИКИНА Л.В.,УШАКОВА Т.Е.,МИХАЙЛЩ A.M.,КУЗИН A.M. Ферменты плазматических мембран клеток печени крыс раннего онтогенетического развития при действии ионизирующего излученияУйн-формациояный бюллетень Радиобиологии АН СССР,1981,24,с.,7.

58. СНИСАРЬ Й.А.,ТЫЕИНА Н.В.Ацетилхолинэстераза субклеточных структур мозга при рентгеновском облучении.Информационный бюллетень Радиобиологии,АН СССР, 198Г,вып.24, с.23.

59. ТРУНОВА Н.М. Изменение электроретинограммы "под лучом". Радиобиология, 1967, т.7, вып.4, с.548.

60. УРЕАХ В.Ю. Биометрические методы. "Медицина" ,М. ,1964, С.З-4Г6.

61. ШАП0Т B.C. О некоторых биохимических аспектах взаимоотношения опухоли и организма. В кн»:"Проблемы медицинской химии", М., Изд-во "Медицина", Г973,с.184-221.

62. ШУТК0 А.Н. Исследование механизмов ранних нарушений процесса всасывания и обмена воды в организме при воздействии ионизирующей радиации с помощью дейтерия. Автореферат кандидатской диссертации.Л.,ЦНИРРИ МЗ СССР, 1967, с.3-19. ,

63. ЭЙДУС Л.Х. Неспецифическая реакция клеток и радиочувствитель--,ность. Атомиздат» М., 1977, с.8-129.

64. ABERCROMBIC M., AMBROSE E. The surface properties of cancer cells (review). Cancer Res., 1962, v.22, N 5,p.525-548.

65. ALEXANDER D.R. Isolation a digoxin-binding protein from a brain membrane preparation containing Na, К activated ATF-ase. PEBS letters, 1974, v.45, N 1, p.150-154.

66. ANSWELL G.A., HICKMAN J. The properties of spleen a denosi-net riphosphatasa and the effect of x-irradiation. J.Biol, chem., 1953, 201, p.651.

67. BACHOFER C.S., WITTRY S.E. Electroretinogram in response to x-rad stimulation. Science, 1961, v.133, p.642.

68. BACK Z.M., ALEXANDER P. Ion fundamentals of radiobiology. -Oxford: Fergamon Press., 1961, p.75-81.

69. BEAUFAU H., COMPENHOUT F., TAN, de DUVE C. Influence of various hepatotoxin treatments of the state of some bound enzymes in rat liver. Biochem.J., 1959» v.73, N 4, p.610.

70. BERGEDER H.D. Finfluss von rentgenstrahlen auf isolierte muskeln. Strahlentherapie, 1958, Bd 106, H.3,S.309-313.

71. BERGEDER H.D. On the action mechanism of ionizing radiation to irritation process. Effects of ionizing radiation of the nervous system. Tienna, 1962.

72. BERGEDER H.D., HORCIN 0. Modification of phosphate metabolism in isolated muscles by roentgen irradiation. Strahlentherapie, 1960, Bd 113, S.207.

73. BINDER H.J., POWELL D.W., TAI I.H., CURRAN P.F. Electrolyte transport in rabbit ileum. Amer.J.Physiol.,1973»v.225.

74. BRESCIANI E., AURIC OHIO F., FIORE C. Effect of x-rays on movements of sodium in human erythrocytes. Radiat.Res.,1964, v.21, N4, p.394-399.

75. BRIERLEY G.P. Ion accumulation in heart mitochondria in "Energy linked function of mitochondria". N.-I.-London: Acad.Press, 1963, p.237.

76. BRINKMAN R. Radiobiology of nervous receptors. Effect of ionising radiation on the nervous system. In: Proc.of a symp. - Vienna, 1962, p.3.

77. CARPENTER D.O. Membrane potential produced directly by the Na* pump in Aplysia nervons. Сотр.Biochem.Physiol.,1970, v.35, N 3, P.371-385.

78. CHAN P.C., ROSENBLUM M.S. Effects of sulfhydryl group modification on erythrocyte membrance adenosine triphosphatase. Proc.Sec.Exp.Biol.Med., 1969, v.130, N 1, p.143-145.

79. CHRISTOFFORSEN G.R.G. Steady state contribution of the Na, K-pump to the membrane potential in identified neurons of a terrestial snail, Helix pomatia. Acta physiol.scand.,1972, v.86, Н 4, p.498-514.

80. CLAEKSON T.W. The transport of salt and water across isolated rat ileum. Evidence for at least two distinct pathways. J.Gen.Physiol,, 1967, v.50, p.695-728.

81. CLAEKSON T.W., EOTHSTEIN A. Transport of monovatent cations by the isolated small intenstine of the rat. Amer.J.Physiol., 1960, v.199, N5, p.898-906.

82. CUBRAN P.F. Na, G1 and water transport by rat ileum in vitro. J.Gen.Physiol., 1960, v.43, p.1137-1148.

83. DAEDEN A.B. Changes in membrane potentials content and fiber structure in irradiated from sertorium nincle. Amer. J.Physiol., 1960, v.198, 13, p.709-714.

84. DAWSON K.B., ROSEN D. Increased response of the frog nerve-muscle preparation following x-irradiation. Effects of ionizing radiation on the nervous system. Proc.of a symposium, Vienna, 1962, p.43.

85. DETHEEIDGE J.F., MATTHEUS J., SMYTH D.H. The effect of inhibitors on intestinal transfer of glucose and fluid. -J.Physiol., 1966, v.183, N2, p.369-377.91 . FISHER M. Acute radiation effects in kidney. Proc.Soc.

86. Exp.Biol.Med., 1953, v.83, p.266-273.92 . FOETE S.C. Na, К ATF-ase activity in the plasmatic membranes of the Ehrlich ascites tumor cells. Biochem. et Biophys.Acta, 1973, v.88, p.620-629.

87. FEANKENCHAEUSER B.A., HOGGKIN A.J. The action of calcium on the electrical properties of squid axons. J.Physiol., 1957, v.57, p.218-244.

88. GALLACHEE C.H., JUDAH J.E., EESS K.B. Enzyme changes duringliver autolysis. J.Pathol.a.Bacterid., 1956, v.72, N 1, p.247.

89. GOODNER G.J., MOORE Т.Е., BOWERS J.L., AMSTRONG ff.D. Effectsof acute whole body x-irradiation on the absorption and dis22 Ъtribution of Na and IrOH from the gastrointestinal tractof the fasted rat. Amer.J.Physiol., 1955, v.183, N 3, p.475-484.

90. GRUNDFEST H., KAO C.J., ALQJAMIRANO M. Bioelectric effects of ions microinjected into the giant axon of Lobigo.

91. J.Gen.Physiol., 1954, v.38, N2, p.245-282.

92. HAINS E., GECK P., PIETRZYK. Mechanisms of amino acids transport in Ehrlich ascites tumor cells. Ann.N.-Y.Acad. Sci., 1975, v.264, p.428-444.

93. HEATON J.W., CODE C.F. Sodium-glucose relationship during intestinal sorption in dogs. Amer.J.Physiol., 1969,v.216, p.249-255.

94. HI . KERKUT G.A., THOMAS R.C. An electrogenic sodium pump in snail nerve cells. Сотр.Bioсhem.Physio1., 1965» v.14, N 1, p.167-183.

95. KERNAN R.P. Membrane potential changes during sodium transport in frog sartorius muscle. Nature, 1962, v.193,N4819, p.986-987.

96. KINNEY V.R., CODE C.F. Canine ileal absorptions effect of carbonic anhydrase inhibitor on transport. Amer.J.Physiol., 1964, v.207, p.998-1004.

97. K0N0NENK0 N.J., KQSTYUK P.G. Furthee studies of the potential-dependence of sodium-induced membrane current in snail neurones. J.Physiol.(Lond.),1974,v.45, N 1, p.150-134.

98. KONOPHA K., JEYKO W., MAKSALON J. Studies on the metabolism of erythrocytes under irradiation conditions in vitro. Zenr.Nouk.Y.t., 1975, 2, N 1, p.145-160.

99. KOSTYUK P.G., KRISHTAL O.A., D0R0SHENK0 P.A. Calcium currents in snail neurones.I.Identification of calcium current. Pfliig.Arch., 1974, it.348, N 1, p.83-93.

100. KOYER G., SCHOFFENIELS E. Potential difference and net flux of water ecross isolated amphibian skin. Internat.J.Radi-at.Biol., 1965, v.9, N 5, p.461-465.

101. Ц8. KUNKEL H.A., HOLME G. The influence of inorganic ions on phosphorylation reactions. In: Progress in Radiobiology. - Ed.Mitchel, 1957, p.52-57.

102. LAMBERT A., OSCARSSON 0. Anoxic depolarization of mammalian nerve fibres. Acta physiol.scand., 1952, v.30, Suppl.111* p.99-110.

103. LAMBERT J.D.C., KERKUT G.A., WALKER R.J. The electrogenic sodium pump and membrane potential of identified neurones in Helix aspersa. Сотр.Biochem.Physiol., 1974, V.47A,1. N 6, p.897-916.121 . LARIS P.O., BOOTMAN M., PERSHADSINGH H.A., JOHNSTONE R.M.

104. Physiol.(Paris), 1970, t.62, Suppl.1, p.192-193.

105. MAHMOR M.F., GORMAN A.L.F. Membrane potential as the sum of ionic and metabolic components. Science, 1970,v.167, N 3914, p.65-67.

106. X3I. MELAUGHLIN J., MEENOVITCH E. A simple and sensitive modification of the chem procedure for arthophosphate determination on the presence of Trition x-100. Analyt.Biochem., 1976, 70, p.643-644.

107. MILLER H., SHEAR M., GREENSTEIN L., LONG K. Citric acid metabolism in carcino-genests, and is relationship to calcium metabolism. Cancer Res., 1950, v.10, N 6, p.636-641.

108. MULLINS L.J., BRIENLEY F.J. Potassium fluxes in dialysed squid axons. J.Gen.Physiol., 1969, v.53, N 6, p.704-740.

109. MTERS D.K., LEVY L. Shape transformation of erythrocyte ghosts on addition of adenosine triphosphate to the modi-um. Nature, 1964, v.204, N 12, p.1324-1330.

110. MYERS D.K., CHURCH M. A comparison of the inhibition of stromal adenosine triphosphate and inhibition of sugar permeability in erythrocytes. Nature, 1967, v.213, N 7.P.636-642.

111. PIETRZYK C., HAINZ E. The sequestration of Na+, K+ and CI" in the cellular nucleus and its energetic consequences for the gradient hypothesis of amino acid transport in Ehrlichcells. Bio chim.Biophys. Acta, 1974, v.352, p.397-411.

112. PIETRZYK G. Regulation of the elecfcrogenic (Na+,K+) pump of Ehrlich ceils by intracellular cation levels. Biochim. Biophys. Acta, 19748, v.513, p.89-98.

113. POST R.L., KUME S. Chemistry of active sodium ion transport. Ins 25th Int.Congr.Physiol.Sci.Munich, 1971. Munich,197 7 v.8, p.84-85.

114. POWELL D.W., MALAWER S.J. The relationship between water and solute transport from isoosmotic solutions by rat intestine in vivo. Amer.J.Physiol., 1968, v.215, p.49-55.

115. QUAY J.F., AMSTRONG W. Sodium and chloride transport by isolated bullfrog small intestine. Amer.J.Physiol.,1969, v.217, p.694-702.

116. ROTTHENBERG M.A. Studies on permeability in relation to nerve function. Biochim.Biophys.Acta, 1950, 4, p.96.

117. SCHULTZ S.G., ZALUSKY R. Ion transport in isolated rabbit ileum.I.Short-circuit current and Na bluxes. J^Gen.Physiol., 1964, v.47, p.567-584.

118. SEYMOURA, DAWSON K. Variation in the response and threshold to electrical excitation of x-irradiated from nerve with dose and dose-rate. Int.J.Radiat.Biol., 1967, v.12, N 1, p.1.

119. SMITH T.S., ROBINSON S.C. The membrane potential of Ehrlich ascites tumor cells: an evalution of the Null Point Method.- J.Cell.Physiol., 1981, v.106, N 3, p.399-406.

120. SMITH Т.О., LEVTNSON C. Direct measurment of the membrane potentials of Ehrlich ascites tumor cells: Jack of effect of valinomycin and ouabain. J.Membrane Biol., 1975» 23, p.349-365.153 . stenberg w.M. Цитируется ПО /12/.