Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Трансферазы сыворотки крови как диагностические показатели при алкоголизме

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Трансферазы сыворотки крови как диагностические показатели при алкоголизме"

Министерство здравоохранения Российской федерации РЕХХШСКИ^ дГОСУДАРСГВЕНШЙ ЩИЦШСШ УНИВЕРСИТЕТ,

На. правах рукописи . УДС • 616 %89-088.41ГЛ 3-07 +616.36

1ШШ1 Игорь Иванович .

ТРАНСЙЕРАШ саворш КРОШ КАК . далгаосдазашЕ -покодтш- при • 'шегшзж

03.0e.04 - биохимия

Автореферат

диссертаций на соискание ученой стёпени кандидата биологических наук

Москва - 1993

: Работа выполнена а Российском государственной медицинском университете и Государственном научном центре наркологии МЗ Э

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профеооор Л.Ф.ПАНЧЕНКО :

Научный -консультант доктор медицинских наук, профессор;

и.н>штшцщ

Официальные оппоненты: Доктор биологичеохюс наук, профессор Р»В,Меркурьева Доктор медицинских наук, профессор А.А»Терентьев

Ведущая организация -Московская медицинская академия ю». И;М.Сеченова

Защита состоится " "_ 199 г в * " часов на за»

: седании Специализированного Ученого совета К 034.14.05 Российского государственного медицинского университета, по адресу: 117513 г.Москва, ул .Островитянова, I

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета

Автореферат разослан " " 199 г

Учений секретарь специализированного ученого Совета канд.мед.наук Т.Н.Клушина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Проблема алкоголизма, его патогенеза и ди&г-остихи сегодня успеино решается многими отечественными: ЙЛ.Ано-иной (1979,1988), А.Ф.Елюгероы (1968,1978), О.В.Днювым (1982, ?85), Н.Н.Ивандоа (1988,1990), И.А.Комиссаровой (1983,1988), ,П.Лебедевым (1975,1982), Г.В.Морозовы« (1983), О.Н.Островскиа Е982,1986), Л.Ф.Панченко (1980,1982), Й.Н.Пятницкой (1983,1988), ,В.Серовым (1976,1988), К.В.Судаковый (1971,1990), Т.В.Чорноб->вкиной (1985, .1592) и другими, и многими зарубежными, ис-[едователямя: 1згае1 У. (1970,1979), Л?ег.<гу В. (1985), За&^ри-го М. (1987), УиеЫ I. (1982), и другими.

В настоящее время установлено ведущее значение катехолами-в в нейрохимической патологии алкоголизма; показано, что в ос-ве предпочтения к алкоголю лажат цетаболические различия в об-не этанола; выдвинуто положение о тон, что в механизмах форми-вания абстиненции принимают участие этанолокислящие системы чени. Доказано, что хроническая алкогольная интоксикация ведет тяжелым висцеральным поражениям, среди которых печеночная, сер--мая, панкреатическая и почечная формы патологий занимают веду-э место, а длительные, многократные приеыы алкоголя приводят гарате печенью способности к восстановлению своей структуры и шции. Установлено, что в состоянии абстиненции организм испы->ает недостаточность в обеспечении своих обменных процессов бел-г и энергетическими ресурсами; показано, что хроническое злоу-ребление алкоголем приводит к повышении в сыворотке крови уров-органо-специфичных ферментов, что сывороточная гамиа-глутамил-нсфераза (ГГТ) быстро и выраяенно реагирует на алхоголыф"» и гае виды наркотических интоксикаций; идругое.

Однахо, несмотря на определенные успехи £ изучении, биохимических процессов, проблема объективизация диагностика этого заболевания с помощью определения биохимических показателей остается актуальной. Существующие в наркологии способы диагностики алкоголизма в определенной степени субъективны, так как ориентированы они преимущественно на опрос больного, на оценку его психопатологического статуса с цель» выявления определенных, характерных для алкоголизма синдромов, таких как синдром измененной реактивности, синдром психической зависимости и скндроы физичеа-кой зависимости.

С цельв объективизации диагностики алкоголизма все чаще прибегают к биохимическим методам исследований - определении различии* метаболитов в крози, а ыоче, регистрации активности ферментов в сыворотке крови.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось изучение закономерностей изменения активности некоторых ферментов сыворотки крови, в той или иной степени реагирующих на систематическое употребление алкоголя; патобиохимическая сценка значения этих изменений и разработка на этой основе биохимических критериев, которые можно было бы использовать с целью объективизации диагностики алкоголизма.

Для достижения втой цели решались следующие задачи;

I) оценка характера и степени участия таких ферментов, как аспаргатаминотрансфераза (АСТ), аланинаминотрансфераза (АЛТ), га! л'аглутачилтралсфераза (ГГТ), глютаматдегидрогенаэа IГДГ), лактат-дегидрогеназа (ЛДГ), лейцинаминопептидаза (ЛАП), холин(~-г4осте-¿-аэа (ХЭ) и щелочная фосфатаза прямо или косвенно участ-

вующих б метаболическом обеспечении функциональной активности печени, в ответе ферментных систем организма на хроническое упои ребление алкоголя;

5т

2) исследование дшшоога изменения активнооти сывороточных

ферментов в процессе развития алкоголизма / 1,11 и Ш стадия по * « *

классификации А.А.Портного (1962)/, изучение кликико-биохимииео-ких закономерностей течения алкоголизма я выявление возмажнооти их использования в целях диагностики;

3) патобиохигжческая оценка значения этих явлений;

4) разработка эизимодогкчвехих критериев 'для объективизации диагностики алкоголизма.

Научно-практическая ценность работа, Установлено, что в динамике развития алкоголизма, то есть в процессе перехода алкоголизма из его I стадии во Il-ю, и из 11-й стадии в Ш-в,- отмечается определенная последовательность изменений активности ферментов сыворотки крови, а именно: в начальной стадии заболевания происходит преимущественно увеличение активности ГГТ, затем увеличивается активность ACT и, наконец, увеличивается АЛТ. Выявлено, что алкоголизм I стадии в динамике энзииологически проявляется колебаниями уровня активности ГТТ в сыворотке крови и что диапазон этих колебаний выходит за пределы нормы. Подтверждено, чт,о определение в сыворотке крови активности трех ферментов: ГГТ, ACT и АЛТ,- может быть использовано для объективизации диагностики алкоголизма со статистической надежностью не менее 68-73**, t

при уровне значимости 0,01.

В работе ^первые обосновывается представление о ток, что повышение в сыворотке крови уровня активности ГГТ при систематическом употреблении алкоголя моасет являться следствием адапта-ционно-регуляторных механизмов вовлечения межуточного обмена цистеин-глутатиона в усиленный алхоголь-лигоадшй метаболизм, а также необходимости поддержания условий "нормального" обмена алкоголя ( и ацетальдегида) на фоне лицевого и функционального де-

фицита в организма цистеина и метиогоша. В райот^радвшдащ^--теоретическое представление об участии ферментных систем транс-фераз ГГТ, ACT и AJFI в обцеметаболических сдвигах, возникающих в процессе заболевания алкоголизмом; обосновывается адаптационно-регуляторная природа увеличения активности ГГТ и АС? в сыворотке-крови больных алкоголизмом I и II стадий; ввдзигаются предложения о терапевтических мероприятиях патогенетической направленности для проведения их в постабстинентный период с целых нормализации углеводного и белкового обменов.

Внедрение в практику. В 1980 году, с приоритетом от 28 ' декабря 1978 года Госкомитетом по изобретениям: СССР было выдано, в соавторстве, свздзтельство на изобретение "Способа диагностики алкоголизма" путей определенна в сыворотке крови активности трех ферментов: ГТ*Г, ACT и АЯГ. Решением Коалегаи МЗ FQSCP о» 21.09.1982 г и приказом МЗ СССР о* 30.12.1982 г признано целесообразным внедрение данного способа диагностики во все учреждение практического здравоохранения. В 1984 году бшш подготовлены, напечатаны и разосланы методические рекомендации: "Клинический и ферментный метода диагностики алкоголизма",-М.:МЗ РСФСР.

Апробация работы состоялась на объединенной научной конференции сотрудников ПНИЛ параклинических методов исследований в наркологии, Отдела биохимии Ь!Ж Российского государственного ые-дадшского университета и Лаборатории биохимии Государственного научного центра наркологии МЗ РФ 26 февраля 1993 г.

Материала диссертации представлялись в планшетной экспозиции на выставке "Научно-технические разработки вузов РСФСР для народного здравоохранения" - декабрь I960 г; в докладах на Международном симпозиуме "Биологические аспекты алкоголизма" - сентябрь il-83 г; ка 2-ой научно-практической конференции Института ВИД и нейрофизиологии АН СССР,- март 1988 г; на научной сессии 2-го

ЫОЛГНЙ ни. Н.И.Пирогов&,- февраль 1991 г.

Публикации. По теме диссертации опубликованы I тезисы, 5 статей, выцущеяы методичек е рекомендации: * Клинический и ферментативный метода диагностики алкоголизма", Н., 1964; получено авторское свидетельство на "Способ диагностики алкоголизма" W 762858, 1980, СССР.

Объем и структура диссертации. Работа изложен» на 104 иа-шшописных страницах и состоит из "Введения", 4-х глав: "Обзор литературы", "Объект и метода исследований", "Результаты собственных исследований", "Обсундение результатов", и 3-х разделов: "Вывода", "Список литературы" и "Приложение". Содержит 10 рисунков; 5 таблиц. Библиография - 191 работа, из них 65 работ зарубежных авторов.

СОДЕРЕАНЖ РАБШЫ

Материалы и методы исследований. В работе представлены •езультаты исследования ферментов сыворотки крови 161 мужчины, з которых НО человек - больные алкоголизмом, стационировашие-я в 15-й клинической псюсктрической больнице г.Москвы; 35 чело-ек доноров-добровольцев и 15 человек "практически здоровых", стз-ионировавпихся с цельи проведения экспертизы. Диагноз стадий якоголязма по классификация А.А.Портного (1962) ставился высоко-зазшфицированныии психиатраги-нархологани, сотрудниками Отдача > изучения молекулярных ыеэсанизиов наркомания 2-го МОЛГШ им. Й.Пирогова (РГМУ) - доктороы мед.наук, проф. И-Н.Пятницкой (зав. делом) и канд.нед.йаун« старшим научным сотрудником й.Г.Найде-вой. Ферментные исследования выполнены - при участии канд.биол. ув, стара его научного сотрудника отдела Т.В.Черкобровхкной.

Лица с заболеваниями печени в анаинезе или жалобами на. удоЕлетворитатькое соматическое состояние 9 основное

в*

мае группы не вишчалксь.. Кровь для исследования у Сольных брали из локтевой вены утрсы, натощак, с IrZ^fo дня нахозден&я их

* * ' ' ' V*

в стационаре. Необходимые, по показания^,. дезинтоксикационныа назначения: витамины. Bj, аскорбиновая й»елота; глпхоза, сернокислая магнезия,- при втои не сменялась, Проведенные предварительные исследования показали, что< уровень сывороточной активности ГГТ, ACT и АДГ у бсдьных алкоголизмом при лечения еташ препаратами достоверно не изменяется.

Сыворотку крови получая» центрифугированием. Активность фер центов определяли на спектрофотометре GS-4a (с те$(осгатируеиой кюветой) и автоматической анализаторе ЛКБ-Б600 (Ивеция) с. помощью стандартных тест-наборов реактивов "Лахема" (ЧССР) и "Бе-рингер иакхейм" (ФРГ). Величина активности ферментов рассчитывалась в международных единицах, при стандартных условиях. Активность ACT и АЛТ определяли по методу Rdifm«« г£о£.(195?). активность ГГТ - по методу 0?£owsb't М. d<4Л1963), активность ГДГ - по методу Scfctoidt Е. е/ at. (1962), активность ЛАП -по методу ТиррХ Н. d oi. (1962) , активность ДДГ— по методу F, efat\(I955), активность ХЭ - по методу Eittooh Q tk of. (1961) и активность lif& - по методу WouSQ^en Т, lit oi (1967).

9

При статистической обработке полученных результатов использовали критерий t Стьадента и соответствующий алгоритм рассчета, а также точный метод Фишера (Tlfi) и метод углового преобразования Фишера (у ), описанные и рекомендованные в руководстве £.В.1ублера (1978). На начальном этапе работы применяли графичес ки? способ статистического анализа (вариационное кривые распределения).

ОСНОЗШ РЕЗУЛЫАШ ИЗСЛВДОВАНШ

Разнообразие изменений активности ферментов сыворотки рови; ACT, АЛТ. ГГТ. ГДГ. ЛИГ. ЛАП. ХЭ и Ш5,- при алкоголизма

Известно, что злоупотребление алкоголе» нередко является ричкной таких заболеваний, как острый и хронический renar.tr-, щр-оз печени, алкогольная кардиошюпатия, алкогольный панкреатит я ругие. Поэтому свои исследования мы качали с изучения енвороточ-ой активности ферментов, которые чаще всего используются в обще-линической практике оценки функциональных наруыений печени, серц-а и других органов, таких как ACT, АЛТ, ГГГ, ГДГ» ЛДГ. ЛАП, ХЭ и 6.

На рисунке I представлены вариационные кривив раегтределе-ия активности ЛАП в сыворотке крови большое ашеоголиэмоц, "слу-айная" шборка - 23 чал. и практически здоревнх лиц - 36 чел.

Следует отиетахь, что у больнмх алкоголизмом в 3-х случаях з 13-ти активность МП превышала границу нормы {уровень актив-эсти в группе здоровых лиц).

рисунке 2 представлены вариационные кривые распределения ктизности лЭ больных алкоголизмом и здоровых лиц. Несмотря на э, что хотя в данном случае исследовались те se группы больных здоровых лиц, полученные вариационные кривые отличались от кри-ix распределения ЛАП. Так, если в первом случае у 3-х больных ст иен ость ЛАП превышала границу нср,-з, то кривая распределеши <тивности ХЭ в группе больных алкоголизмом имела двухгорбьгй ха-устер с максимумами вше и шле средней величины активности ХЭ зуппы здоровых лиц.

Разнообразием в распределении величин активности отличались остальные 6-ть исследованных нами фер5йнтов: ACT, МЛ, ITT,

¡г, лиг и т.

чаеэктк -

Рисунок I. Вариационные кривые распределения активное ЛАП в сыворотке крови больных алкоголизмом (---,+) в здо ровых лиц ( .......... ).

Частота.

Рисунок 2« Вариационные кривые распределения активы ХЗ в сыворотке крови больных алкоголизмом и здоровых лиц

(обозначения - те яе)

U"

Анализ всех пэлучешпо: Баргшцисннкя: кривых позволил сделать следующий шводг

- Алкогазта« гак заболевание сопровождается различными: изменениями активности ферюнтов сыворотки крови, тьдгас как ACT, АЯГ, ГТТ, ГДР, ЛДГ\ ЛАП, ХЭ и !Ц6,- как в сторону увеличения, тая и уменызедац» о выходом активности отдельных ферментов за пределы границ нори.

Так как из перечисленных вше фаркентоз иалболез часто ж пределами границ нор-ш оказывалась активность только трек из тех: ГГТ, ACT и АЛТ,- а своих дальнейшее исследованиях ш сосредоточились на изучении именно этих фергентоа.

Последовательность изменения активности ACT. АДТ и ГГТ в цииамкке заболевания алкоголизмом (I, II и Ш стадии)

В таблица I мгши представлены результаты исследования ад-гивности трансфер"'-: ГГТ, ACT и АЛТ,- в 4-х группах обследования: здоровые (контроль) - 42 чал.; больнее алкоголизмом I стадам - Z? чел.; больные алкоголизмом li стадии - 20 чел., и больше алкоголизмом Ш стадии - 34 человека. Анализируя полученные результаты следует отметить, что по мере прогрессирования завоевания активность всех исследованных ферментов возрастает. Лри-гем, если в I стадии алкоголизма мы наблюдет увеличение актив- ' юстн только ГГТ, то во П-й стадии вше нормы оказывается актив-юсть и ACT, а в Ш-й стадии - еще и АПТ.

На основании этой серии исследований бил сделан следующий вывод:

- Развитие алкоголизма, увеличение тяжести заболевания (то (сть переход его из I стадии во 11-ю, и из И~й в Ш-d) оопровсада-¡тся определенной последовательностью изменений активности транс-1епаз сыворотки крови, а именно: в начальной стадии заболевания

г Таблица I.

Активность сывороточных фариеитов ГГТ, ACT к АЛЕ в группах больных алкоголизмом I, И и Ш стадий (кровь бралась для исследования в 1-2-е сутки поступления обследуемого в стационар).

Исследо-

Статис-

ферменты, активность в ME

ванные группы тические

• параметры ГГТ ACT АЛГ

Здоровые 15,5*0,85 14,8*0,62 12,8*0,86

(контроль) ±С 5,44 3,97 5,48

42 чел. ¿¡to 3,4-29,3 6,7-21,7 2,2-23,4

Больные M±m 37,8*3,28 14,5*0,89 I0,4tl,08

алкоголизмом 1С 17,1 4,6 5,6

I стад. km 18,3-82,0 8,7-25,0 4,6-23,2

27 чел. P / 0,001 7 7 0,05 7 7 0,05

Больные алкоголизмом I! стад. 20 чел.

Mim

±С

бт Р

Рт

81,8*10,6

47,1 41,3-467,0 / 0,001 7 0,001

19,4*2,36 10,5

8,6-37,8 7 0,05 7 0,05

14,Oil,39 6,2 1,5-44,3 7 7 0,05 0,05

Больные алкоголизмом Ш стад. 34 чел.

±С

й'т Р

Р1

74t7±Il,I2 2I,8±2,52

64,6 14,6 15,8-565,0 5,5-63,0

/ 0,001 0,01

7 0,01 0,01

7 0,05 7 0,05

24,3*3,80 22,0 2,0-68,5 / 0,01 0,001 0,01

происходит преимущественно увеличение активности ГГТ, затем увеличивается и выходит за границу нормы активность ACT и, наконец, увеличивается активность АЛТ.

Колебание уровня активности ГГТ в сыворотке крови при. алкоголизма» Известно, что уровень активности любого фермента з крови здорового человека колеблется в течение дня, недели. Однако диапозсн этих колебаний, как правило, не превышав ¿2 С /Д.Вилкинсон, 1981/. По данным литературы это составляет порядка 10-2034% от средней величины активности. Поэтому в следующей серии исследований мы решили оценить степень колебания активности ферментов в сыворотке крови и у больных алкоголизмом.

Результаты изучения недельного уровня колебания ГГТ, ACT и АЛТ представлены в таблице 2. Величина колебания активности оценивалась как разность мезаду максимальным и минимальным ее значениями за неделю. Для этого кровь для исследования бралась повторно через каядые 1-3 дня в течение недели.

Полученные результата показали, что у больных алкоголизмом уровень недельного колебания ГГТ в 2-5 и более раз превышает уровень недельного колебания этого фермента в группе здоровых Лиц. Колебания зае ACT и AJ1T з группе больных алкоголизмом I стадии достоверно не отличались от контроля, группы здоровых лиц.

Мы обратили также внимание на то, что если больной алкоголизмом попадая в стационар не употребляет алкоголя, то уровень ГГТ у него снижается, тогда как возобновление приема алкоголя приводит к новому увеличения ГГТ. Следовательно, колебание уровня активности ГГТ в сыворотке крови больных алкоголизмом есть • ни что иное, как реакция ферментных, метаболических систем на то прекращающееся, то возобновляющееся употребление алкоголя.

На основании этой серии данных был сделай следующий вывод:

2.

м

Изменение' активности сыворотоцщх ферментов ГГТ» АФТ и АДГ в группе здороых и больных алкоголизме«, неделю.

жвл'ацшжия

Кссдеду-еше групш

Оцениваемые статист, параметр*

Шдесшаяыще значения изменения активности ферменте? за недеда р МЕ

КГ

АСТ

АЛГ

Практичес- М±т 2,^¿0,45 2,39±0,2б },61*0,34

ки здоровье, 1,76 1,00 . ¡.33

15 чел. ¿'т 0.6-&.2 0,8-4,0 0,4-3,7

Больные и±т 47,7*4,4Р 2Д2±0,24 1»90+0,37

алкоголизмом 20,3 г,и

I стад., йм> 5,7т40,1 0,5-4,7 0,0-3,6 .

21 чел. Р £ 0,001 7 7 0,05 Г ? 0,05

- Алкоголизм в динашже знзнмолргичеекк проявляется колебаниями уровня активное?« ГГТ в сыворотке крови, с вцходом ве-жичины активности за пределы границ нормы, что обусловлено периодичность® употребления алкоголя.

Отмеченные вызе ета и другие закономерности подвели нао к мысли о возможности использоаания ферментных показателей с цель» объективизации диагностики алкоголизма.

Трансфертам сыворотки крови как диагностические показатели при алкоголизме. Для 'оценки степени надежности использования фермектннх показателей с целью объективизации диагностики алкоголизма нами была проведена еа,е серия исследований. В таблице 3 представлены полученные результаты и статистическая'

Таблмда 3.

Статистическая кадашость использования для объективизации диагностики активности ГГТ, ACT и АЛТ, а также величины недельного колебания ГТТ (ГГТ)- по результатам 3-х разового обследования.

ГрУП"* Оце- Максшалыше значения активности

ш киваем. ферментов; за недела ( з Ш)

об*' пара- -

лед. метр ГГТ ГГТ ACT Ш

Критерий

рас-счета

п 31 15 30 31

0ДО- Ы$Л1 15,4*0,98 2,59*0,54 15,2+0,71 14,0±0,95

ро» 5,4 1,76 3,9 5,3

&т 7,0-33,7 0,0-6,2 8,0-22,5 5,3-21,4

Шй 0,0-5,0+) 7,4-23,0 3,4-24,6

п 31 21 34 34

Боль- й*т 4б,3$3,58 17,7+4,40 I6,3±I,I3 14,9*0,95

ше & 20*9 20,1 6,6 5,8

tfh 28,2-82,0 5,7-40,1 8,7-34,9 6,0-23,2

алко- 27 Д+> -88,0 5Д+)-57,9 3,1-19,9+) 4,9-28,1

голь.- «Г Р 1 0,001 / 0,001 7 0,05 7 0,05

I 3> Д* " 87,1* 93,45* - -

стад. 68-965» 73-I0W

HMQ алкоголь.

И 29 23 29 29

Боль- М*т 171,9124,3 86,6*11,8 22,1*1,10 16,8*1,56 ^ 131,2 56,5 5,9 8,4

й'т 43,0-467,0 17,4-205,0 15,0-42,0 9,2-31,0

89,0+)-434,0 27,0+)-199,6 20,0+)-36,0 0,0-33,6 *2С

р1.1 / 0,001 I 0,001 / 0,001 7 0,05 II 3> 90,5$ 69,15$ 68,05* - Р

стад. А 73-1009« 34-835& 46-869«*

Обозначения; лимиты, принятые в качестве диагности-

ж

ческих; - величина расхождения распределений для выбранного диагностического лимита; Л - доверительные границы полученной

величкна расхождения распределения распределений; t - критерий Стыодента; Р - выборочная частость; эмпирически выбранная диагностическая граница, обеспечивающая наибольшее расхождение;

с

- при уровне значимости 0,01; угловое преобразование Фииера.

оценка надеакостк использования ферментных показателей, таких как уровень ГГТ Одаксиыальное4значение за неделю), уровень недельного колебания ГГТ и уровень активности ACT и АЛТ.

Как следует из таблицы, полученные результаты и выполненные статистические рассчеты показали, что использование в качестве диагнсстического критерия уровня активности ГГТ может позволить ставить дифференциальный диагноз: "алкоголизм I стадии" или -"вдоров, алкоголем не злоупотребляет", - с надеяносгью не менее 68$ (при уровне значимости 0,01). Использование не в качестве диагностического критерия уровня недельного колебания ГГТ статистически гарантирует правильность диагноза в 73-100л;» случаев.

Информативная ценность таких показателей, как ACT и АЛТ, имеющих особое значение для диагностики алкоголизма Ш стадии, оказалась существенно ниже. Последнее предопределило недостаточную рф-фектизность использования данного комплекса ферментов для диагностики Ш стадии алкоголизма.

Изменения активности ферментов сыворотки крови и патогенез ■алкоголизма. Конечно, нас не йог не интересовать и такой вопрос - почему из 8-мм исследовавшихся наш ферментов только ГГГ оказалась наиболее чувствительной и реагирующей на систематическое употребление алкоголя?

Известно, что обмен веществ s организма, »принципе, заключается в последовательности ферментативных превращений субстратов и кх продуктов. В основе координации етих процессов лелат рехуля-тор»ше в з a; lv о л е ¡!: т в и я. Рехуляторнымк механизмами объясняется и

поддержание постоянства уровня активности ферментов крови, и пределы их колебаМия.

При заболевании алкоголизмом на механизмы адаптационно-регу-ляторного контроля накладываются аффекты и последствия хронической алкогольной ^интоксикации. На рисунке 3 представлена метаболическая схема возможного действия алкоголя на активизации цисте-ин-глутатионового оборота.

На сегодня хорошо известно, что судьба алкоголя в организме тесно связана с метаболизмом яирных кислот и липидов, опосредованным через ацетня»КоА - скнтетазные реакции. Не случайно злоупотребление алкоголем приводит к гипертрофии именно липидннх, жиро-1ШХ ззеньеа обмена, что в конечном счете вызывает жировую инфильтраций гепатоцктов, что, в свою очередь, приводит к усиленыо сво-боднорадакальных неферментных путей окисления липидов, в том числе и липидов мембран. /А.Ф.Блюгер и соавт.,1978; 3>i Ьиг.">о N. à oi,. 1977; Viciée» L. à ai. 1981/.

Естественно, что интенсификация жирового обмена требует поддержания на высоком уровне оборота КоА, который, как известно, в качестве функциональной группы содержит сульфгидрильную группу, активное состояние которой поддерживается за счет ее восстановительного обмена с глутатионом и цистеином. Но ГГТ ведь и является тем ферментом, который принимает непосредственное участие в синтезе-распаде глутатиона* с участием цистеина (см.рис.).

Следовательно, наиболее раннее и активное увеличение уровня активности ГГТ при алкоголизме - есть ответная реакция метаболических систем организма на вмешательство алкоголя прежде всего, и именно, в липидкый, жировой обмен.

Кал нами установлено, с увеличением тяжести заболевания алкоголизма, то есть при переходе заболевания из 1-й стадии во li-n, наряду с увеличением активности ГТТ в сыворотке крови начинает

Предполагаемая схема путей ектдоизадки цистеин-глугатион©-вого оборота в условиях злоупотребления алкоголем.

Глвкова( гдакогея)

Этанол

Пируват

Г

Ацетальдегид ^ >»— КоА

■ Ацетил-КоА \

<2>

\ Диад

) трлнарбоновых | кислот . \ \ \

\

\

Циет'еш I I

. I Г

I \

Щирнке ^ /

КИСЛОТЫ ^ ,

"^ч /

Яровая / рфкдьтрация / гепатоцктов /

Свободно-радикальное окисление аиров, липидов мембран

Обозначения: сплошными стрелкам! указаны основные направления метаболических превращений; пунктиров - "место" действия и его характер: - активирующий, - предотвращающий.

. ■ ' .. • 19-

аозрастать уровень активности, и ACT, тогда как уровень AJ3T продолжав« оставаться в пределах йеркйей границу нормы. Причина- более рзнйеГО КМ преимущественного увеличения при алкоголизме автив-\US6ffi t@$t а не АЛТ давно гфивл екает к себе внимание исследовате-8ей» ОбМойение атому искали и в особенностях физико-химического ja3W ббййбйй молекул этих ферментов, и а характере порахе-шя гейа?оцитов ЛС.Гибински, 1966/; не исключалась и, возможность 5лияния метаболических расстройств или возникновения, зкскретор-шх нарушений при алкоголизма / Оайагй&яДДЭбЭЛ

Алкоголизм, с биохимических, метаболических позиций иозко пред-:тави?ь с.ебе как процесс постепенного и нарастающего вмешательс-■ва алкоголя и продуктов его метаболизма в ход с бщедатаболических роцессов. Зго обстоятельство находит свое отраженна и в опреде-енноЛ последовательности, увеличения активности трансфераз в сыво-отне крови: превсначзльноы увеличении ГГГ> затеи ACT и, наконец, JH.

На рисунке 4 представлена метаболическая схема, возможных пос-вдствий такого вмешательства алноголя в сбщеметаболические про-зссн.

Как отмечалось выше, в условиях систематического злоупотреб-гния алкоголем в гепатоцитах происходит усиленное образование ^етил-КоА, интенсифицируется и его оборот в КоА - зависимых провесах /А.Г.Мойсеенон и соавт., 2982; Тг£то£|£2ез J. ¿ft/,1972; другие/.

В норме, при отсутствии алкогольной интоксикации, источником ¡разования ацетил-КоА является пируват, образующийся в процессе мнолиза. В условиях систематического употребления алкоголя проходит усиленное образование ацетил-КоА, что вызывает торможение иаолиза через соответствуйте регуляторнае механизмы (через ин-

Рисунок 4.

Возможная схема общеыетабодических путей активизации ACT в условиях злоупотребления алкоголеи.

Глюкоза(гликоген) СЕ>

/

Этанол Адетальдегид

Пируват

ЕирЕше кислоты

Vdt> Глуталат

Оксалоацетат

сЬкетоглутарат

Цикл трикарбоновнх кислот

Цикл мочевю

Обозначения: те яв, что и к рнс.З

гибирование пируваткиназной реакции /А.Уайт и ооавт.,1981$, и активизацию синтеза жирных кислот и пируваткарбоксилазной реакция, дополнительного поставщика оксалоацетата. В таких условиях неизбежно возникновение дефицита в пирувате и увеличенное образование оксалоацетата. И. как следствие этого - субстра-тное активирование ACT и лимитирование АЛТ.

В Ы В О Д Ц

1. Заболевание алкоголизмом сопровождается различными изменениями активности ферментов в сыворотке крови, таких как ACT, AJ3T, ГГТ, ГДГ, ЛАП, ДЦГ, ХЭ и как в сторону увеличения, так и уменьшения.

2. Развитие алкоголизма, увеличение тякести заболевания, т.е. переход из I стадии во И-ю» к из 11-й в ¡И-ю, сопровождается определенной последовательность!} изменения уровней активности траяс-£ераз сыворотки крови, а именно:в начальной стадии происходит преимущественно увеличение активности ГГТ, затем,по мере развития за-5'олевания увеличивается и выходит за границу кармы активность ACT, а, наконец, увеличивается и Ail?.

3. Алкоголизм I и И стадий з динамике энзкмологически проявляется колебаниями уровня активности ГГТ в сыворотке крови, с гс."-кодом уровня ее активности за пределы границ нормы, что обусловлено периодичным употреблением алхоге$г.

4. Определение в сывороке крови уровня активности трах ферментов: ГГТ, ACT ss АЛТ,- вдзег быть использовано для объектизиза-ции диагностики алкоголизма путш сопоставления степени и последовательности увеличения их активности у обследуемого с уровнем их активности в группе здоровых лиц. Увеличение активности ГГТ, а также ее колебания (относительные изменения в течение 3-7 дней)

является ведущим диагностическим признаком начала заболевания алкоголизмом, его I стадии.

5. Объективизация алкоголизма Ш стадии на основании определения в сыворотке крови активности трех ферментов: ГГТ, ACT и АЛТ,-не является достаточно эффективной, так как в Ш стадии алкоголизма изменения активности, этих ферментов утрачивают прекнюв свов закономерность.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. A.c. 762658, СССР. Способ диагностики алкоголизма /Г.В. -^ернобровкина, И.Н.Пятницкая, В.В.Куликов, И.И.Горшкин, В.И.Йва-нов, Н.И.¡¡Малахова,- Опубл. в Б.К., 1980,- №34.

2. Горшкин И.И, Ферментативная диагностика алкоголизма// Вопросы патогенеза, клиники и лечения алкогольных заболеваний: Тезисы докл.-.4., 1984.-С.59-61.

3. Пятницкая И.Н., Чернобровхина Т.В., Горшкин И.И. Алкоголизм: энзимодиагнсстические критерии здоровья и болезни// Бурн, невроп.психиатр., 19Ь4.-й«.2.-С.229-231.

4. Пятницкая И.И./Чернойровкета Т.Ь., Горюижин И.И. ¡^¡зиыо-диагчсстические критерии алкоголизма// лурн.невропат.психиатр., I9b5.-a-in.7.- С.1051-1053.

5. Горшкин И.И. Гамма-глутамилтрансфераза и патогенез алкоголизма// Алкоголизм: Республ.сборн.науч.трудов.- М.,1988.-С.67-69.

I

6. Горшкин И.И. Последовательность вовлечения ферментов, представленных в сыворотке крови (ГГГ, ACT, АЛТ), в алкогольный патогенез// Проблемы современной наркологии: Республ.сборн.науч. трудов.-М.,1991.-С.40-42.