Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Технология получения препарата Биокан и оценка его иммунобиологических свойств

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "Технология получения препарата Биокан и оценка его иммунобиологических свойств"

На правах рукописи

Николаев Андрей Александрович

Технология получения препарата Биокан и оценка его иммунобиологических свойств

03.00.23—Биотехнология 16.00.03 - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и ИММУНОЛОГИЯ

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2006

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ).

Научные руководители: доктор биологических наук

Мирзаев Микаил Нурбагандович; доктор биологических наук, профессор, Член-корреспондент РАСХН Девришов Давудай Абдулсемедович.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Тихонов Игорь Владимирович; доктор ветеринарных наук, профессор Сухарев Олег Иванович.

Ведущая организация — Государственное научное учреждение «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко» (ГНУ ВИЭВ).

Защита состоится Л? июня .2006 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д.220.042.01 в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23, тел. (495) 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО МГАВМиБ.им. К.И. Скрябина.

Автореферат разослан. ¿Г мая 2006 г.

Т.Н. Грязнева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Заболевания опорно-двигательной системы (ОДС) животных встречаются достаточно часто й являются одной из важнейших проблем ветеринарии (Давыдов В.Б.; 2000; Козлов H.A.,, 2002; Мельников Н. М., 2004; Timöthi В., 2000). Какой-то одной ггрйчйны, приводящей к развитию этих? заболеваний, не существует. Имеет значение ряд факторов, ослабляющих хрящ, и вредное воздействие которых приводит к развитию патологического процесса.

Профилактикой заболеваний опорно-двигательной системы-' собак является обеспечение нормального развития скелета и поступление в организм гйВстаточного количества питательных веществ с препаратами на основе комбинированных пищевых добавок (Алексеева Л.И., Беневоленская Л.И., Насонов Е.Л. й'др., 2000; Palmieri L., 1990; Conte A. et al., 2001). С помощью коллагенного (желатинового) гидролизата можно препятствовать или существенно замедлять -дегенеративные процессы в соединительной ткани. Коллагенный гидролизат- Питает й регенерирует хрящ суставов, сухожилия, связкии кости и устраняет последствия недостаточного питания или повреждения суставов.

Широкое применение при заболеваниях ОДС собак нашли также препараты на основе гййкозамйНгликана (Капустин Р.Ф., 1997; Timo-ithi Е., Michael P. at all. 2000). Известны и другие препараты, используемые для профилактики заболеваний ОДС животных: румалон, хио-нат, альфлутоп, айьфлутоп, траумёл^йдр:'""'-:!"j:,|ll!il';"" ■ >

В то же время у известных npenapatoÎB Отечественных и зарубежных производителей имеются определенные недостаткй - узконаправленный характер, низкая эффективность в тех случаях, когда у животных одновременно заболеваниями ОДС имеет Mècfo нарушение мйк-робиоценоза кишечника. В последнее время это явление встречается очень частой'Йрй 5^к''йабл10да0тся сйй^енйё* всасЁтаНия1и ;д^гих^ минеральнЙГ компонентов °йз;"кишечника, -ч-кг отрицательно влияет напроцесс pérericpâujm крящев6Й!Й коЙгйой ^гканй: ! iisci-

; Поэтому исследования,l4flànpâBrieHHÈÎéuH&w^^ й

композиций ' препаратов;' соДб^кащйх' в! свбём'составе- вёЩества, стимулирующие, процессы регенераций в тканях и нормализующие микрофлору жёлудочй0-кйщечногё;4ракта животных (ЖКТ), являются-актуальными для ветеринарной медицины и биотехнологии-. , ; ч

" Цель и задачН'иЬЙедОваний. Целью работы'-яв л яется-разработка

■-■Ï^ MîiNfSkC-O ОЛ , ■ '! ■ \:.г('эГ ;v

технологии получения нового препарата Биокан для профилактики и лечения заболеваний опорно-двигательной системы собак, содержащего в своем составе источники белка, минеральных элементов, глюкозамин, пробиотические микроорганизмы и изучение основных параметров его безопасности и эффективности, г .......

Для достижения поставленной цели необходимо .бвдго решить следующие задачи.

1. Оптимизировать компонентный состав препарата, содержащего гидролизат желатина, глюкозамин и другие ингредиенты..

2. Изучить острую и хроническую токсичность препарата.

3; Изучить действие препарата на основные иммунобиологические показатели организма животных. .. Гг , ,

4. Изучить действие препарата на кишечную микрофлору животных. . ......._ .. ,.

5. Определить эффективность препарата при остеоартрозе и остеохондрозе собак.

6. Разработать проект нормативно-технической документации на препарат. . , ■ .

Научная новизна. Впервые разработана технология получения новой композиции препарата, содержащего глюкозамин, желатин, лакто-и . бифидобактерии и , используемого при заболеваниях! опорно-двигательной системы собак. : . ,.

Изучены основные параметры безопасности и эффективности препарата. Установлено, что препарат не оказывает отрицательного воздействия на иммунобиологический статус животных, не угнетает метаболизм дочек и печени. : ; ч

Показана высокая эффективность препарата дри патологии опорно-двигательной системы собак. ...

Практическая значимость. Для профилактики и лечения, заболеваний ОДС собак предложена новая форма препарата^ содержащего в своем составе вещества, стимулирующие регенерацию прврежденных хрящевых тканей и стимулирующих развитие симбиотической микрофлоры ЖКТ собак (желатин, глюкозмин, лакто- ,и. бифидобактерии и

ДР-)- ..-...■ .

Результаты работы вошли в стандарт организации СТО и инструкцию по применению препарата. ' ? Апробация, результатов диссертации. Основные результаты работы доложены на XII Международном конгрессе по болезням мелких

домашних животных (Москва, 2004). , Положения и результаты, выносимые на защиту.

.... Д.,Состав й технология получения новой формы препарата - хонд-|>опротектора, содержащего г^рол^зат желатина, глюкозамин, минеральные компоненты и симб*готические, микроорганизмы кишечника (лакто- и бифидобактерии). г

2. Данные по изучению токсикологической и иммунобиологической характеристики препарата на лабораторных животных.

3. Результаты апробации препарата в лабораторных и производственных условиях.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 3 работы. ..V , Объем и структура диссертации. Материалы диссертации' изложены на 135 страницах и включают введение* обзор литературы,'собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, сведения ,р практическом использовании результатов, рекомендации по использованию научных, выводов, список использованной литературы (278 источников, из которых 221 отечественных'и 57 иностранных), приложения. Работа содержит 26 таблицы и 6 рисунков.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ < Материалы и,метод1 л исследований

' . "_-■.„.' ';■■»'■. ■ !■■" , • . I < : • • V: ; г'-. '

- : ■< " \ < Ч < ? . : И , | ,; ; . ■ ■ Ч . . ■ 1 . >\ I ,

Работа;ь выполнена в научно-исследовательской лаборатории инфекционной патологии й биотехнологий ФГОУ В ПО МГАВМиБ в период 1999-2005 гг. Изучение терапевтической эффективности опытных партий препаратами его пройзводств'ейньш испытания при болезнях,О ДС животных проводили в ветеринарной клинике «Артемида» (Йошкар-Ола) и питомнике «Тимантти Сол ид»/Москва). ¡. рбъектами исследований служили белые беспородные мыши, кры-кролики и _соб^ки.

Для определения влияния препарата Биокан на организм животных применяли клинические, .иммунологические, биохимические, микро-^бирлогичсскис, токсикологические и др. методы исследований.

Ежедневно проводили клинический осмотр опытных животнь1х.

В образцах крови определяли содержание эритроцитов, лейкоцитов,

отношение отдельных видов лейкоцитов вычисляли йз"1Ь0 подсчитанных клеток в мазке крови, фиксированном метиловым спиртом и ок-

рашенном по Романовскому-Гимзе. В сыворотке крови йсбледовали количество лизоцима й бактерицидную активность. Общий белок в сыворотке определяли по биуретовой реакции.

Активность ферментов аминного обмена аспартатаминотрансфера-зы (ACT) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) и др. биохимические показатели сыворотки крови контролировали общепринятыми методами и на биохимическом анализаторе ELAN-6160. Количество глюкозами-на определяли по реакции конденсации с ацетилацетОном и регистрации оптической' плотности на спектрофотометре! (Кочетков Н.К., 1987).

Токсикологические свойства препарата Биокан'оценивали общепринятыми методами. J

Всего в опыте использовали 11 взрослых беспородньЫ и 16 собак, принадлежащих разным хозяевам и проходивших курс лечения в клинике под нашим наблюдением в течение 2-х месяцев! '

Результаты обрабатывали статистически и сравнивали между собой, а также с соответствующими показателями клинически здоровых животных, находящихся в адекватных условиях содержания.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Технология получения препарата Биокан

Разработка оптимальной рецептуры препарата. :

В процессе приготовления оптимальных рецептур препаратов существенное значение имеет подбор вспомогательных компонентов, не ' обладающих фармакологической активностью,: но обеспечивающих (в зависимости от формы препарата) растворение,'эмульгирование, сус-пензирование и смешивание действующего' вещества.

Вспомогательные вещества должны быть индифферентными по своим физиологическим действиям на организм, устойчивыми, к; воздействию различных химических, физических и биологических факторов среды, обеспечивать необходимую консистенцию: и форму, соответствующую разработанному способу применения. . . , ;

Препарат Биокан в качестве хондропротективных компонентов содержит гидролизат желатина, глюкозамин, а также лакто- и бифидо-бактерии и минеральные элементы. :

При составлении оптимальной композиции готовой лекарственной формы препарата все Ш1гредиенть:г были-предварительно лгадштовле-

ны для внесения в состав -композиции. ¿Процедура предварительной подготовки включала гомогенизацию и обеспечение достаточно высокой дисперсности компонентов, что необходимо для лучшей смешиваемости и сыпучести готовой формы препарата.

Содержание ингредиентов в различных вариантах препарата варьировали на предварительных этапах работы. При этом были апробированы варианты, содержащие хитин или глюкозамин, желатин или казеин- В результате предварительных исследований было показано, что наиболее благоприятное действие на развитие подопытных животных оказывают препараты, содержащие в своем составе гидролизат желатина, а также глюкозамин. В табл. 1 представлены количественные соотношения ингредиентов. Отличительной особенностью препарата Биокан является то, что он содержит глюкозамин отечественного производства и пробиотические штаммы микроорганизмы.

1. Компонентный состав препарата Биокан

Компоненты, входящие в состав препарата Количество компонента, г/кг препарата

Вариант 1 Вариант 2

Кальций 18 11,0

Магний 2,8 3,0

Калий 2,0 2,0

Марганец 0,1 0,2

Цинк 0,2 . 1,0

Натрий : 6,9 6,8

ВитаминС ■ ■ 10 13,0

Желатина гидролизат 680 680

Глюкозамин 54,0 80,0-85,0

Хитозан 141_146' 0

Дрожжи 60 148

Сухая биомасса бифидо- и лак-тобактерий с титром Ю10/г 10,0; 40,0

Глицерин 10-15 - "" 10-15

Учитывая известную информацию о том, что сухие тонкодисперсные препараты в процессе изготовления могут накапливать статическое электричество и налипать на стенки оборудования, в препарат в качестве антистатика вносили небольшие количества (0,5-1,5%) жира, глицерина.

Оптимизация последовательности операций при изготовлении

препарата , <

При изготовлении сухих препаратов важно обеспечить, чтобы они-не слеживались при хранении, не содержали комков, не обладали излишней гигроскопичностью и действующее вещество было распределено равномерно по всему объему. Для приготовления готовых лекарственных средств в форме порошков могут быть использованы различные смесители в зависимости от предполагаемого объема производства. Например, при налаживании крупнотоннажного производства может быть использовано отечественное оборудование типа СЦЛ-150, предназначенное для сухого смешивания порошкообразных материалов, автомат фасовочно-упаковочный РТ-УМ-21-Ш со шнековым дозатором или РТ-ДВ-01 с тензоплатформой. Примерная блок-схема технологической линии производства препарата Биокан представлена на рис. 1. Это оборудование позволяет дозированно фасовать препарат в пакеты до 2000 г.

Рис. 1. Блок-схема технологии получения препарата

1- гомогенизатор компонентов; 2- смеситель; 3- сборник готового препарата; 4- дозатор; 5- фасовочно-упаковочный аппарат

Последовательность технологических операций приготовления препарата представлена выше, но при этом следует отметить, что предварительно лучше приготовить отдельно минеральные и органические компоненты. Для этого сначала тщательно размешивают до гомогенной массы минеральные микро- и макроэлементы, а затем'также гомогенизируют органические вещества. Далее из приготовленных компонентов путем тщательного смешивания готовят конечную форму препарата. Готовый препарат хранят в закрытой емкости и по мере необходимости дозируют, фасуют и передают на склад готовой продукции.

Изучение основных характеристик препарата Биокан . < Сохранность и стабильность препарата.

Одним из важнейших параметров фармацевтических средств является их стабильность. От этого параметра зависят условия и время хранения; другие важные характеристики, определяющие в целом терапевтические и коммерческие качества препарата. Поэтому при разработке новых лекарственных средств обязательно устанавливаются параметры стабильности как действующего вещества, так и готовой формы препарата. Для упрощения работ по определению стабильности препаратов предложен метод «ускоренного старения», заключающийся в хранении исследуемых образцов препарата при относительно вы-, соких температурах.

В своих исследованиях мы хранили препарат при 35-37°С и этот режим считали экстремальным для препарата, т.к. уже через 6 месяцев активность его снижалась на 50%. При хранении препарата в режимах 4-5°С и 20-25°С активность препарата в течение 9 месяцев сохранялась на исходном уровне. ~

Следует отметить, что основные индикаторные компоненты препарата, которые могут терять активность в процессе хранения, а именно глюкозамин и витамин С, отличались достаточной устойчивостью в составе препарата (табл. 2).

2. Стабильность компонентов препарата Биокан

Срок хра- Содержаний глкжозамина в Содержание витамин С в

нения, препарате- % препарате, %

мес. при 4°С приЗ 5-3 7°С при 4°С приЗ 5-3 7°С

1 7,4 7,7 1,3 1,1

6 7,5 7,5 1,1 1,2

9 7,4 ' 7,6 — ' 1,2 0,8

12 ■ 7,3 ; 7,2' 1,2 0,4

15 7,6 7,4 , 1,0 0,5 -

Однако, как видно из представленных данных, при температуре выше 30°С через 9-12 месяцев хранения содержание нативного витамина С резко снижается, т.е. он разрушается, а при 4°С до 12 месяцев уровень витамина существенно не снижается. Что касается содержания глюкозамина в препарате^ это соединение отличается высокой устойчивостью в предлагаемой композиции, и в течение года и более его

количество остается практически без изменений.

ВажнЬгм компонентом препарата БйоКан являются лакто- и бифи-добактерии. Поэтому от сохранности их в активном состоянии зависит качество препарата. ь -

; • Было* установлено;) что через 15 месяцев хранения препарата число живых микроорганизмов снизилось на 40%. Таким образом, срок хранения препарата при 4^0. не менее 12 месяцев.

Токсикологические параметры.

Острая токсичность.; Острую токсичность оценивали на белых беспородных мышах. Из увлажненного хлеба готовили гранулы,1 содержащие до 500 мг/г препарата. В процессе ежедневного скармливания препарата.животным в течение 30 суток каких-либо отклонений в их физиологическом состоянии не выявлено. Все подопытные животные охотно поедали корм с препаратом, были подвижны, к концу опыта масса тела мышей, получавших препарат была на 6-10% выше по сравнению с контролем. . - : ^

Хроническая токсичность. Изучение хронической токсичности препарата проводили на беспородных белых крысах-самцах массой'110-120 г. Опытной группе из 6 животных ежедневно скармливали препарат в дозе 1 г/гол. Другой группе из 6 животных скармливали ежедневно обычный корм. В течение 2-х месяцев наблюдений не было отмечено негативного воздействия препарата на общее поведение и физиологическое состояние живртных. Эти данные свидетельствуют о том, что Биокан при длительном скармливании не вызывает интоксикации животных и не обладает кумулятивными свойствами.

При вскрытии и визуальной оценке возможного наличия патологических отклонений, новообразований и пр. установлено, что все внутренние органы подопытных и контрольных животных находятся в пределах физиологической нормы. Анализ данных, полученных в процессе изучения действия длительного скармливания препарата на основные гематологические и биохимические показатели крови крыс, подтверждает отсутствие негативного эффекта. Было отмечено, что Биркан оказывает положительное действие на обмен веществ подопытных животных.

Хаким образом, представленные -данные позволяют сделать вывод о том, чтр Биокан можно отнести к безвредным препаратам.

Действие препарата на некоторые иммунобиологические показатели организма лабораторных животных

Показатели клеточного и гуморального иммунитета.

Действие препарата на Т- и В- клеточное звено иммунитета изучали на белых мышах массой 18-20 г. В опыте было исследовано 40 мышей, которых разделили на 2 группы. Первая группа получала препарат в дозе 1 г/кг, вторая — контрольная получала корм без добавления препарата. Было установлено, что количественные показатели по содержанию лимфоцитов в крови у подопытных мышей находятся в пределах физиологической нормы. Относительное количество ауто-РОК в крови мышей опытной группы на 14-е и 30-е сутки опыта составляет 4,3±0,31% и 3,9+0,30% соответственно, те же показатели в контрольной группе составляют 4,1 ± 0,33% и 3,9 ±0,28%.

Показатели естественной резистентности организма животных.

Проведенные нами исследования показали, что препарат Биокан не оказывает заметного воздействия на содержание лизоцима в сыворотке крови подопытных мышей. Что касается бактерицидной активности сыворотки крови мышей, можно отметить некоторое повышение ее через 14 суток после дачи препарата. Величина бактерицидной активности находится в пределах 29-35 % при фоновых показателях 14-24 %. Однако те же данные, полученные через 30 суток после прекращения дачи препарата, свидетельствуют об отсутствии существенной разницы между бактерицидной активностью сыворотки крови опытных и контрольных животных. В определенной мере с изложенными данными согласуются и результаты исследований по действию препа-. рата на фагоцитарную активность нейтрофилов крови. Активность фагоцитоза на 14-15 сутки после начала опыта была несколько выше у нейтрофилов животных, получавших препарат в терапевтической дозе и составляла 52-72%, против 28-36% у контрольных животных.

Таким образом, препарат Биокан не оказывает длительного воздействия на содержание лизоиима и бактерицидную активность сыворотки крови животных.

Изучение эффективности и безвредности препарата при лечении болезней опорно-двигательной системы собак

- Эффективность препарата при лечении ос геоартроза. '

Для проверки- эффективности препарата были проведены лабора-

торные и производственные испытания на разных животных. В одном из опытов была-сформирована группа из 11 голов: При этом экспериментально было выявлено, что подопытные и контрольные, животные имели практически одинаковые исходные показатели.

Содержание общего белка и сахара ,в сыворотке крови подопытных животных находится на нижней границе или даже ниже физиологичен ской нормы для, собак (белок - 5,9-7,6 г%, сахар - 90-110 мг%). Это является свидетельством нарушения обменных процессов в организме животных. ,_.'.,

Препарат скармливали собакам после тщательного смешивания с кормом в дозе Д 0.0 г/10 кг массы.

Установлено, что препарат позитивно влияет на состав кишечной микрофлоры животных, происходит значительное снижение количества условно-патогенных микроорганизмов в кишечнике собак (табл.3). "..... ...... "■•'" ''

3. Действие препарата Биокан на микрофлору кишечника собак

Микроорганизм До опыта Через 15 суток

Кол-во, 1я/г Кол-во, 1§/г

Бифидобактерии 8,25 9,83

Лактобактерии 7,30 9,40

Энтерококки 6,90 6,30

Эшерихии, всего в т.ч. со слабой, лактазной активн., % 7,30 0,45 6,90 0

Гемолитические, % 0 0

Лактозонегативные энтеробактерии, % 1,40 0

Аэробные бациллы 3,50 3,20

Стафилококки 4,20 2,90

Дрожжи, плесени 2,5-3,0 . 1,50

Кандида 1,50 1,20

Эти данные согласуются с известной информацией о том, что производные хитина (хитозан, глюкозамин) оказывают стимулирующее действце. на развитие, лактог и бифидобактерий^; .

При определении биохимических показателей сыворотки крови собак дополнительно контролировали также состояние минерального обмена, особенно кальция, магния, фосфора. Как'известно, именно эти минеральные элементы входят в состав костной ткани, принимают не-

посредственное участие в метаболических процессах, происходящих при регенерации поврежденных хрящей и костей.

Данные табл. 4 показывают, что некоторые биохимические показатели, которые незначительно выходили за пределы физиологических норм, после применения препарата через 30 суток практически приходят в пределы нормы. ■

4. Биохимические показатели крови собак, получавших Биокан

Параметр Единица изм. 15 дней 30 дней Норма

Общий белок г/л 49,90±3,49 59,90±2,99 51-73

Альбумины ■ г/л; ■■» . 26,70±1,33 28,40±1,70 27-35

Глобулины г/л". 24,00±1,44 34,00±2,04 27-44

Глюкоза ммоль/л ; 4,43±0,22 6,43±0,38 4,2-7,2

Общ. билируб. мкмоль/л 2,30±0,16 4,2±0,29 3,4-12,0

Прямой билир. мкмоль/л 1,40±0,07 1,40±0,08 0-4,7

АсАТ МЕ/л 13,00±1,78 13,00±0,78 7,2-17,3 :

АлАТ МЕ/л 14,00±0,70 14,00±0,84 8-92

Триглицериды ммоль/л 1,07±0,05 1,07±0,06 0,4-1,62

Щел. фосфат. МЕ/л 43,00±2,58 43,00±3,01 10-158

Амилаза МЕ/л 1060,00±63,6 1060,00±74,3 165-1300

Кальций ммоль/л 1,73±0,08 2,03±0,12 2,2-3,2 ,

Фосфор ммоль/л 1,81±0,11 1,51 ±0,09 0,67-2,9

Магний ммоль/л 1,02±0,05 1,01±0,07 0,5-1,1

Железо ммоль/л 21,20±1,27 24,10±1,20 19,8-32

Содержание белка и глюкозы в сыворотке крови подопытных животных на второй месяц получения препарата на 22-27,5% и 15-30% соответственно выше, чем у контрольных животных, в положительную сторону изменяется также содержание глобулинов в общей массе белков и фосфорно-кальциевый обмен, о чем свидетельствует соотношение указанных элементов. Происходит не только интенсификация углеводного и белкового обмена, но и приближение соотношения кальция и фосфора к 2:1. Итогом благоприятного действия препарата на организм животных является регуляция обменных процессов в пораженных остеопорозом суставах. Улучшение обмена кальция,' фосфора, кишечной микрофлоры, несомненно, является одним из элементов лечебного эффекта препарата. - - ■"■ л ;

Эффективность препарата против заболеваний суставов выразилась в том, что через 40 суток полностью освободились от симптомов

болезни суставов 50% собак, а после длительной (60-75 суток) обработки выздоровели 87-100% животных.

По своим качествам (безвредности и лечебной эффективности) препарат Биокан не уступает известному на ветеринарном рынке препарату Гелакан. По таким параметрам, как нормализация минерального обмена при патологии ОДС животных, предлагаемый Биокан превосходит Гелакан. Об этом1 свидетельствуют представленные в табл. 5 данные о кальцие-фосфорном обмене и соотношении этих элементов между собой.

5. Эффективность различных вариантов препарата при лечении собак

Вариант опыта Масса жив. до лечения, кг Масса на 35 сутки после лечения, кг Биохимические показатели на 35 сут,

Белок, г/л Са, ммоль/л Р, ммоль/л Са:Р

Контроль 19,42± 0,65 20,50± 1,12 53,76±3,22 2,94±0,20 1,21± 0,06 2,4

Биокан 20,16± 0,73 22,44± 0,87 64,43±4,5 2,70±0,16 1,85±. 0,12 1,4

Гелакан 20,07± 0,45 22,50± 0,54 65,65±3,9 2,81±0,14 1,76± 0,08 1,5

Говоря о роли кальция и фосфора в метаболизме собак надо отметить, что в период роста и при заболевании опорно-двигательной системы потребность в указанных минералах резко возрастает. При нарушении соотношения этих минералов наблюдается остеомаляция^ т.е. размягчение костей, собака, при ходьбе начинает делать непривычные щадящие движения. В запущенных случаях наблюдается деформация скелета, искривление длинных костей конечностей и др. Поэтому сбалансированное питание с добавлением препаратов, содержащих необходимые компонентыдля обеспечения полноценного синтеза костной и хрящевой ткани, является основой профилактики и лечения различных патологий ОДС животных. ......V

Данные, представленные в таблице 5, свидетельствуют о положительной роли препарата Биокан на фосфорно-кальциевый обмен собак, страдающих заболеваниями ОДС. Соотношение Са и Р в процессе лечения приходит в норму, т.е. излишнее содержание кальция в сыворотке, связанное с вымыванием его из разрушающейся косиной ткани,

нормализуется, что является свидетельством наличия лечебно-профилактического эффекта как у Биокана, так и Гелакана.

Особого внимания заслуживают данные о содержании свободных аминокислот в сыворотке крови подопытных животных. Показано, что количество аминокислот в крови больных и здоровых собак существенно не отличается. Однако содержание пролина в сыворотке больных животных достоверно выше на 71,4%.

. В отличие от ряда аминокислот (тирозин, лейцин, триптофан, лизин) в коллагене содержится большое количество пролина и оксипро-лина. Они при этом выполняют роль не только механическую, но и регуляторную, участвуя в пролиферации и дифференциации клеток костной и хрящевой ткани; Повышение содержания пролина в сыворотке крови животных является свидетельством деструктивных процессов в тканях при заболеваниях ОДС, что приводит к дисбалансу аминокислотного обмена.

В определенной степени это подтверждается данными, полученными при более детальном анализе динамики концентрации пролина в процессе лечения собак препаратом Биокан (рис.2). .

3 2,5 2' ^ мг% 1,5 1 ^ 0,5 0

2,42.35

2,352 2

2,35

1.

30

60

Время

[иКонтроль □ Больное жив.без лечения □ Больное жив:лечЁиокаьг| • *" Рис. 2. Концентрация иролина в сыворотке крови собак

На рисунке видно, что содержание проди^а „в сыворотке больных собак находится .на более.высрком уровне (и выще'физиологической нормы) ^ на 71,42г95,8%дю сравнению с крнтролем. В конце лечения, на 60 -день опыта, эта разница составляет 29,2%, идет нормализация аминокислотного и белкового обмена, восстановление хрящей. ■»'»■'"Таким образом,* разработанный препарат Биокан обладает высокой лечебной эффективностью при болезнях оморпо-двигательной систе->-1СШг',СОбак, ■л.Эффшшюцост&^ДШ^пар^та Биокан характеризовалась нор-

мализацией фосфорно-кальциевого обмена у больных собак и нормализацией метаболизма в хрящевых" тканях,'что подтверждалось Данными об обмене основных аминокислот, особенно пролина. У животных исчезала хромота, болезненность в суставах. Через 2 месяца Лечения животные были активны и подвижны.

- ВЫВОДЫ

1. Впервые разработана технология изготовления препарата Био-кан для лечения и профилактики заболеваний опорно-двигательной системы собак, содержащего в качестве хондропротекторных веществ Гидролизат желатина, глюкозамин, минеральные компоненты и про-биотические микроорганизмы — лакто- и бифидобактерии.

2. Разработанный препарат по внешнему виду представляет собой сыпучий порошок светло-серого цвета, удобный для применения животным вместе с кормом. "

3. Биокан по своим токсикологическим свойствам можно отнести к практически безвредным веществам. Определить острую токсичность препарата не удалось из-за физической невозможности введения его подопытным мышам в соответствующих дозах.

4. При ежесуточном скармливании белым мышам препарата Биокан у животных наблюдается повышение темпов накопчения живой массы на 10-13% по сравнению с контролем. ;

^ 5. Препарат не обладает кумулятивным действием, при ежедневном Скармливании в терапевтической дозе 1 г/кг в течение 2-х мес. белым крысам признаков интоксикации не отмечаено.

7. Препарат Биокан достаточно стабилен при хранении в комнатных условиях, т.е. сохраняет нативность и целевую активность основных ингредиентов в течение 12 месяцев.

6. Препарат, охотно поедается животными, не оказывает; отрицательного воздействия на гематологические, биохимические и иммунологические показатели крови животных. , г .- ..

8. Препарат способствует нормализации обмена кальция, фосфора и белков, что выражается в восстановлении физиологических норм содержания пролина и соотношения Са:Р в сыворотке крови подопытных собак. ..-I, . ; 1

9. Препарат обладаёт1 выражсиным лечебным -эффектом, при заболеваниях опорно-двигательной системы собак. При скармливании его собакам с явными признаками болезни конечностей в" течение двух

месяцев в дозе 1 г/кг массы животного наблюдается существенное улучшение, как физиологического состояния в целом, так и двигательных функций животных.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ

РЕЗУЛЬТАТОВ

1. Разработан и утвержден стандарт организации на «Препарат для профилактики и лечения патологий опорно-двигательной системы собак».

2. Разработана инструкция по применению препарата Биокан при патологиях ОДС собак.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

Препарат Биокан рекомендован ветеринарным специалистам и владельцам собак, клиникам и питомникам для профилактики и лечения болезней опорно-двигательной системы животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Мирзаев М.Н. Пищевая добавка для профилактики и лечения заболеваний опорно-двигательной системы собак /Мирзаев М.Н., Николаев A.A., Девришов Д.А., Чойжилсурэн Б. //Материалы XII Международного Конгресса по болезням мелких домашних животных.-М.: Ассоциация ветеринарных врачей,- 2004.- С. 176.

2. Данилевская Н.В. Хондропротекторы и их использование в ветеринарии /Данилевская Н.В., Николаев A.A. //Ветеринар, 2002,- № 3.-С. 20-23.

3. Данилевская Н.В. Клинические аспекты применения фармакологических препаратов, биологически активных добавок и кормов, содержащих шЗ и о>6 полиненасыщенные жирные кислоты /Данилевская Н.В., Николаев A.A. //Ветеринар, 2003,- № 2.- С.10-13.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Николаев, Андрей Александрович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Природа патологий опорно-двигательной системы животных

2.Биохимические механизмы патологий опорно-двигательной 13 системы животных

3 Роль минеральных элементов в обменных процессах, связанных 20 с болезнями опорно-двигательной системы (ОДС)

4.Современные методы и средства борьбы с болезнями ОДС 29 животных

5.Роль пробиотиков в нормализации обмена веществ и оздоровле- 38 # нии животных

II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 42 I 1. Материалы и методы

2.Технология получения препарата Биокан

2.1. Разработка оптимальной рецептуры препарата

3. Оптимизация последовательности операций при изготовлении 56 препарата

4. Изучение основных характеристик препарата Биокан 57 4.1 .Сохранность и стабильность препарата

4.2.Токсикологические параметры препарата

5.Действие препарата на иммунобиологические показатели орга- 64 низма лаборатоных животных

5.1. Показатели клеточного и гуморального иммунитета

5.2. Действие препарата Биокан на гематологические и биохими- 68 ческие показатели крови лабораторных животных

6. Изучение эффективности и безвредности препарата Биокан при 76 лечении патологий опорно-двигательной системы собак

III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

IV. выводы

V. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

VI. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Технология получения препарата Биокан и оценка его иммунобиологических свойств"

Актуальность проблемы. Заболевания опорно-двигательной системы животных встречаются достаточно часто и являются одной из важнейших проблем ветеринарии [23, 42, 58, 59, 153, 162, 167, 207, 209, 243, 257]. Какой-то одной причины, приводящей к развитию этих заболеваний, по-видимому, не существует. Имеет значение ряд факторов, так или иначе ослабляющих хрящ, вредное воздействие которых суммируется и в итоге это приводит к развитию патологического процесса.

Профилактикой заболеваний опорно-двигательной системы с точки зрения питания является обеспечение нормального развития скелета и обеспечение достаточного количества питательных веществ для костей и суставов, прежде всего у собак крупных пород, с помощью препаратов на основе комбинированных пищевых добавок [1, 2, 6, 38, 50, 52, 66, 67, 69, 95, 99, 100, 106, 118, 131, 141, 142, 143, 146, 147, 149, 157, 160, 175, 182,213,260].

Применением коллагенного (желатинового) гидролизата можно препятствовать или, по крайней мере, существенно замедлить дегенеративные процессы в соединительной ткани. Коллагенный гидролизат питает и регенерирует хрящ суставов, сухожилия, связки и кости и, таким образом, облегчает или даже устраняет последствия предыдущего недостаточного питания или повреждения суставов, их деформирования, препятствует дальнейшему разрушению хряща. При этом улучшается подвижность суставов и уменьшается боль. Среди широкого круга лекарственных средств, применяемых при заболеваниях опорно-двигательной системы собак в последнее время, ведущее место занимают препараты на основе гликозамингликана [39, 238, 206, 218], коллагенного, или желатинового гидролизата, а также хондроитин-сульфата (Хондроитин сульфат натрия), рекомедуемого при дегенеративно-дистрофических заболеваниях суставов и позвоночника: первичный артроз, межпозвонковый остеохондроз, остеоартроз, остеопороз, и др.

Прием препаратов - хондропротекторов улучшающих структуру хряща не направлен на снятие воспаления в суставе, но способствует замедлению прогрессирования артроза, укреплению хрящевой ткани. Хондропротекторы могут применяться внутрь, внутримышечно, внутрисуставно. К первым относятся препараты «Дона», «Структум» или пищевые добавки, содержащие ххондротин сульфат или гликозамингликаны, которые являются строительным материалом хряща

Известны и другие препараты, используемые для профилактики заболеваний ОДС животных - румалон, хионат, альфлутоп, альфлутоп, траумель и др.

В то же время нельзя не отметить наличие определенных недостатков у известных препаратов отечественных и зарубежных производителей - они имеют узконаправленный характер и малоэффективны в тех случаях, когда у животных одновременно с заболеваниями опорно-двигательной системы имеет место нарушение нормального микробиоценоза кишечника. В связи с ухудшением условий среды, низким качеством кормов и антибиотикотера-пией в последнее время это явление встречается очень часто. При этом наблюдается снижение всасывания кальция и др. минеральных компонентов из кишечника, что, естественно, не может не сказаться на реакциях регенерации хрящевой и костной ткани. Поэтому не вызывает сомнений актуальность исследований, направленных на создание новых форм и композиций препаратов, содержащих в своем составе вещества стимулирующие как процессы регенерации в тканях, так и размножение полезной микрофлоры кишечника животных.

Цель и задачи работы Целью работы является разработка технологии получения нового препарата Биокан для профилактики и лечения заболеваний опорно-двигательной системы собак, содержащего в своем составе источники белка, минеральных элементов, глюкозамин и изучение основных параметров безопасности и эффективности его.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: -оптимизация компонентного состава препарата, содержащего гидро-лизат желатина, глюкозамин, и другие ингредиенты;

-изучение острой и хронической токсичности препарата; -изучение действия препарата на основные иммунобиологические показатели организма животных;

-изучение действия препарата на кишечную микрофлору животных; -установление эффективности препарата при остеоартрозе и остеохондрозе собак

-разработка проектов нормативно-технической документации на препарат;

Научная новизна. Впервые разработана технология получения новой композиции препарата, содержащего глюкозамин, желатин, лакто - и бифи-добактерии и используемого при заболеваниях опорно-двигательной системы собак. Изучены основные параметры безопасности и эффективности препарата, установлено, что препарат не оказывает отрицательного воздействия на иммунобиологический статус животных, не угнетает метаболизм почек и печени. Показана высокая эффективность препарата при остеохондрозе и ос-теоартрите собак.

Практическая ценность работы. Для профилактики и лечения заболеваний ОДС собак предложена новая форма препарата, содержащего в своем составе вещества, стимулирующие регенерацию поврежденных хрящевых тканей и стимулирующих развитие симбиотической микрофлоры ЖКТ собак (желатин, глюкозмин, лакто- и бифидобактерии и др.). Результаты работы вошли в разработанный стандарт организации СТО и Инструкцию по применению препарата.

Положения, выносимые на защиту:

Технология получения новой формы препарата- хондропротектора, содержащего в своем составе гидролизат желатина, глюкозамин, минеральные компоненты и симбиотические микроорганизмы кишечника (лакто - и бифидобактерии).

Данные по изучению токсикологической и иммунобиологической характеристики препарата на лабораторных животных.

Результаты апробации препарата в лабораторных и производственных условиях.

Апробация.

Результаты диссертационной работы представлены на XII Международном конгрессе по болезням мелких домашних животных, Москва, 2004 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах и включает следующие разделы: введение, литературный обзор, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, сведения о практическом использовании результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы, который включает источников, в том числе иностранных, и приложение. Иллюстрационный материал диссертации включает 6 рисунков и 26 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Николаев, Андрей Александрович

ВЫВОДОВ

Препарат Биокан рекомендован ветеринарным специалистам и владельцам собак, клиникам и питомникам для профилактики и лечения болезней опорно-двигательной системы собак.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Николаев, Андрей Александрович, Москва

1. Абдуладзе К.И. Ветеринарная рецептура с основами терапии и профилактики / К.И. Абдуладзе, В.М. Данилевский, О.И. Волкова. М.: Колос.- 1986.-310 с.

2. Абдулаев Д.В. Цинк в организме с.-ж животных /Д. В. Абдулаев.-Ташкент.: Узбекистан.-1979.-184 с.

3. Абдурэзков У.А. Метод Илизарова: теория:, эксперимент, клиника./ У. А. Абдурэзков, Б.Р. Комник, Е. М. Хахалев : тез. докл. обл, международ, конф. — Курган. 1991.С 81-89.

4. Аблямитов П.Ф. Отчеты геологоразведочных экспедиций / П. Ф. Аблямитов, А. Г. Тюрин. Казань: ЦНИИгеолнеруд, 1999.-138 с.

5. Авакаянц Б.М. Использование физ. и биол. факторов в ветеринарии и животноводстве/ Б. М. Авакаянц, А. В. Коробов, К. А. Трескунов.—М.; МВА., 1992.-273 с.

6. АвцынА.П. Микроэлементозы/ А.П. Авцын.-М.:Медицына.-1991.326с.

7. Албулов А.И. Новые методы экстрадирования трав/ А. И. Албу-лов//: мат. науч. конф., посвящ. 80-летию фитотерапевта К.А.Трескунова 1999 г. — Черноголовка, 1999.- С 4-9.

8. Алиева А.А. Профилактика нарушений обмена веществ у с.-х. животных. / А.А. Алиева. — М.: Агропромиздат, 1986. 402 с.

9. Алюшин М.Г., Артемьев А.И., Тракман Ю.Г. Синтетические полимеры в отечественной фармацевтической практике. М.: Медицина, 1974. - 257 с.

10. Антипов В.А. Использование пробиотиков в животноводстве /Антипов В.А. // Ветеринария. -1991. № 4. - С. 55-58.

11. Антипов В.А. "Отечественные пробиотики для животноводства" -в книге "Биологические основы продуктивности сельскохозяйственных животных"/ В.А. Антипов, Г.Н. Мартынов.- М., Колос, 1980. том 2.

12. Антипов В.В. "Симбионтные микроорганизмы пищеварительного тракта, их роль и состав" .Сельское хозяйство. М., Колос, 1980.

13. Антипов В.А. Биологические препараты симбионтных микроорганизмов и их применение в ветеринарии / В.А. Антипов // Сельское хозяйство за рубежом—1981.-№ 2.-С. 43-47.

14. Антипов В.А. Эффективность и перспективы применения пробиотиков / В.А. Антипов, В.М. Субботин // Ветеринария. 1980. - № 12,- С. 5558

15. Атлас ветеринарной гематологии. / Под ред. В Риган, Т. Сандерс, Д. Деникола. — М.: АКВАРИУМ ЛТД, 2000. 673 с.

16. Багирова В.Л., Демина Н.Б., Девяткина И.А и др. Современные аспекты использования вспомогательных веществ в технологии лекарственных препаратов // Фарматека. 1998. - №6. - С. 34-36.

17. Базарновой М.А. Клиническая биохимия/Под ред. проф. проф. В.Т. Морозовой, Высщая школа, 1986. с. 216-223.

18. Базилевская 3. В. Закрытые повреждения позвоночника/3. В. Бази-левская. — М.: Медицина, 1962.- 461 с.

19. Бакулина Л.Ф. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использовавние в ветеринарии. / Бакулина Л.Ф./ Тимофеев И.В., Перминова Н.Г. Биотехнология, 2001. №2. - С. 48-56.

20. Бакулина Л.Ф. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использование в ветеринарии / Л.Ф. Бакулина, И.В. Тимофеев, Н.Г. Перминова // Биотехнология. 2001. № 6 - С. 48-56.

21. Балдин Ю.П. Оценка течения репаративного остеогенеза. Метод, рекомендации / Ю.П. Балдин., К. С. Десятниченко. РНЦ «ВТО» им. Г. А. Илизаро-ва; — Курган, 1991.

22. Бауман В. К. Биохимия и физиология витамина D/ В. К. Бауман.-Рига.: 1989.-307 с.

23. Белоус А. М. Механизмы регенерации костной ткани/ А. М. Белоус,

24. A. А. Корж.- М.: Медицина.- 1972. 359 с.

25. Белоус А. М. Физиологическая роль железа./ А. М. Белоус, К. Т. Конник.—Киев: Наукова Думка. 1991.-96 с.

26. Березкина С.В. Лекарственные формы ветеринарных препаратов/ С.В. Березкина.-Спб. Лань.-1996.-206 с.

27. Берэинь, И. В. Научные основы витаминного питания с.-х. животных/ И. В. Берэинь // Материалы 2-го Всесоюзного симпозиума- Юрмала, 1987. С. 17-19.

28. Бессарабов Б.Ф. Лекции по птицеводству за 1996-1997.

29. Бессарабов Б.Ф., Найденский. М.С., Байдевятов А.Б., Николаенко

30. B.П. "Влияние стрессов на здоровье и продуктивность сельскохозяйственных птиц "М: лекция 1996.

31. Бессарабов Б.Ф. Препарат против вакциналного стресса /Б.Ф.Бессарабов, И.И. Мельнкова и др.// Птицеводство.- 1998.-№5.-с.29-30.

32. Бессарабов Б.Ф. "Практические советы птицеводам" М., 1974.

33. Бессарабов Б.Ф., "Методы контроля и профилактики незаразных болезней птиц", Колос, 1988.

34. Билибин А.Ф. "Дисбактериозы, аутоинфекция и их значение в патологии и клинике человека", М., Медицина, 1970.

35. Биотехнология: учеб. пособие для вузов/ И.В. Тихонов, Е.А. Рубан, Т.Н. Грязнева и др.; под ред. акад. РАСХН Е.С. Воронина. -СПб.:ГИОРД, 2005. 792 с.

36. Блохина И.Н. "Дисбактериозы"/ И.Н. Блохина, В.П. Дорофейчук.-Л. -.Медицина, 1979.

37. Блохина И.Н. "Дисбактериоз и его профилактика",М: "Педиатри", М., Медицина, 1994. №10.

38. Борисенко А.Н. " Токсигенные свойства кишечной палочки и их роль в патологии птиц"/ А.Н. Борисенко, Т.Н. Рождественская,- М., " Ветеринария" 1994. №3.

39. Борисов М.С. Диагностика лечение профилактика закрытых и открытых повреждений суставов и сухожилий у животного: дис. . д-ра вет. наук /М.С. Борисов; МГАВМиБ.: 2001.-261 с.

40. Бушов, А.В. Эффективность хелатного комплекса препаратов меди и калия йодита при железодефецитной анемии поросят / А.В. Бушов, О.А. Липатов.

41. Буянов А. А. Влияние хитозана на иммунную и эндокринную системы поросят/ А.А. Буянов, В.Н. Видении, A.M. Грячюхин // Ветеринария .-2004.-№2. С. 47-51.

42. Вальдмзн А. Р. Витамины в свиноводстве/ А. Р. Вальдмзн,— Рига.:- Зинантне.- 1977.-195 с.

43. Венедиктов A.M. Химические кормовые добавки в животноводстве/ А. М. Венедиктов, А. А. Ионас.— М.: Колос, 1979. 357 с.

44. Волков Г.П. Рентгеноангиографическая диагностика нарушений заживления переломов длинных костей конечностей: автореф. дис. канд. мед. наук/Г.П. Волков; КГУМ.-Казань, 1991.-26с.

45. Воробьев В.А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции /В.А. Воробьев, Е.А. Лыкова // Микробиология, эпидемиология и иммунология.- 1999.- № 6.—С. 102-105.

46. Воробьева Л.И. Микробиологический синтез витаминов/ Воробьева Л. И. М., Медицина, 1982.- 532 с.

47. Воронович И. Р. Заживление переломов костей: экспериментальные и клинические исследования/ И. Р. Воронович, И. В. Ролевич, А. А. Губко //— Минск: Наука и техника.- 1994. №7. - С. 54-67.

48. Галатов А.Н. Влияние глауконитового концентрата на рост и развитие молодняка овец/ А.Н. Галатов, Б.И.Щукин, Г.В. Беднягин.// Ветеринария.- 1999. №4. с 18-21.

49. Голиков А. Н. Нервные болезни животных/ А.Н. Голиков.- М. Колос, 1972.-427 с.

50. Голиков С. Н Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И. В. Саноцкий, Тиунов JI.H.- М., Медицина, 1986. 173 с.

51. Гончарова Г.И. Современные аспекты дисбактериоза кишечника и его бактериологическая диагностика/ Г.И. Гончарова, А.З. Смолянская.- М.: Медицина, 1978.-346 с.

52. Горелик О.В. Влияние цеолита на молочную продуктивность и биохимический статус крови коров/ О.В. Горелик, Т.В. Прокофьева, Н.А. Тура-сова// Материалы международной науч. практ. конф., посвященной 70-летию УГИВМ, ч.2., Троицк, 1999.- С. 21-28.

53. Горшевикова Э.В. Применение биоспорина в лечении экспериментальной гнойной раны/ Э.В. Горшевикова, Ю.А. Фурманов, А. Т. Слабоспиц-кая // Клин, хирургия. 1992. - №9/10.-С. 30-32.

54. Гроссклаус Р. В. Калий в организме человека и его получение с пищей/Р.В. Гроссклаус// Химия в сел. хоз-ве.: 1994. - №2. - С. 23-31.

55. Грязнева Т.Н. Изучение свойств бифидобактерий, выделенных от разных видов животных/ Грязнева Т.Н. , Лештаева А.В., Любимов Д.Н., Лукьянова Л.В.//Ветеринарная медицина.: 2002.- №1. С. 13-14.

56. Гурвич Д.Н. Материалы по изучению уровней биохимических показателей крови у молочных коров в зависимости от условий кормления и содержания: автореф. дис. канд. биол. наук. Л., 1953. 54 с.

57. Донкор Д.Д. "Использование пробиотиков галлиферма и СБА при профилактике колибактериоза у цыплят яичного направления." М., 1994.

58. Давлетов Э.Г. Материалы к анализу некоторых сторон биохимического механизма токсического действия тяжелых металлов: автореф. дис. . канд. биол. наук. — Д., 1974. 32 с.

59. Данилов Р.К. Ортопедия, травматология и протезирование / Р. К. Данилов, В. Г. Гололобов, И. А. Одинцова.-М. Мир, 2000. 678 с.

60. Дедух Н. В. Остеоартрозы: пути фармакологической коррекции/ Н. В. Дедух, И. А. Зупанец, В. Ф. Черных и др.— Харьков, Основа, 1992. 531с.

61. Дейл 3. Жидкостная колоночная хроматография / 3. Дейл, К. Мацек, Я. Янак. — М.: Мир, 1978. 692 с.

62. Дерезина Т.Н. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях / Т.Н. Дерезина // Матер, междунар. науч. практ. конф. Воронеж, 2002.- С. 112-119.

63. Дерезина Т.Н. Новое в диагностике, терапии и профилактике незаразных болезней животных/ Т. Н. Дерезина, Д.А. Камчатный // Сб. науч. тр. Донского ГАУ. Пос. Персиановский, 2002.- С. 371-378.

64. Джанова З.Ф. "Сочетанное применение пробиотика бифидумбакте-рина и иммуномодулятора тималина для профилактики колибактериоза у цыплят", Санкт-Петербург: 1995.

65. Дженсен Р. Болезни крупного рогатого скота при промышленном откорме/ Дженсен Р., Маккей Д. — М., Колос, 1977. 237 с.

66. Димитров С.И. Диагностика отравлений животных / С. И. Димитров.— М., Агропромиздат, 1986.-142 с.

67. Добровольский В. В. Цинк и кадмий в окружающей среде / В. В. Добровольский. М.: Наука, 1992. - 238 с.

68. Дросольна И И. Зависимость начальных этапов пентофосфорного цикла от обмена витамина С при патологии соединительной ткани/ И. И. Дросольна //Вопросы мед. химии.- 1992. №5.- С. 41-44.

69. Душейк А. А. Витамин А, обмен и функции / А. А. Душейк. — Киев, Думка,- 1989.-206 с.

70. Дюкарев В. В. Кормовые добавки в рационы животных / В. В. Дю-карев, А. Г. Ключевский, И. В. Дюкар.- М., Агропромиздат, 1985.-174 с.

71. Ерохин И.А. Псевдомембранозный колит и «кишечный сепсис» -следствие дисбактериоза, вызванного антибиотиками/ И.А. Ерохин, С.А. Шляпников // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1997. т. 156. №2. - С. 108111.

72. Ершов Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений / Ю.А. Ершов, Т.З. Плетнева.— М., Медицина, 1989. 471 с.

73. Жуленко В. Н. Ветеринарная токсикология/ В. Н. Жуленко, М. И. Рабинович, Г. А. Таланов.— М.: Колос, 2002. 438 с.

74. Зайцев В.П. Охрана труда в животноводстве/ В.П. Зайцев, М.С. Свердлов,- М.: Агропромиздат, 1989.-392с.

75. Зентальская Н.С. Первенец отрасли, М.: "Птицеводство", №5. 1996.

76. Карпуть И.М. Профилактика колибактериоза бройлеров энтеро-бифидином/ И.М. Карпуть, Ю.Г.Зелютков, В.В.Гребешко, Минск: Вопросы теории и практики ветеринарии и зоотехнии, т. 29. 1992.

77. Интизаров М.М. "Микрофлора тела животных" / М., МВА, Лекция,1989.

78. Камалов И.И. Рентгенодиагностика закрытой позвоночно-спинальной травмы и ее последствий/ И. И. Камалов,— Казань,: Облиздат, 1992.-172 с.

79. Капустин Р.Ф. Функциональная морфология коленого сустава собак в норме и при патологии в условиях действия глюкозамина: дис. к. б. н. М., 1997.

80. Карташов П.А. Лучевая болезнь сельскохозяйственных животных/ П.А. Карташов, В.А. Кирман, В.Г. Ильин,- М.:Колос. 1978.-469с.

81. Кац Э. Количественный анализ хроматографическими методами/ Э. Кац. — М.: Мир, 1990.-374с.

82. Кашин А.С. Антропогенно-экологические органопатологии молодняка животных / А.С. Кашин. Барнаул, 2002.- 241 с.

83. Квасников Е.И. Антагонистическая активность молочно-кислых бактерий по отношению к возбудителям кишечных заболеваний домашних птиц/ Е.И. Квасников, Т.Н. Шишловская, Н. М. Коваленко// Микробиологический журнал.-1983.- №5. Т. 45.с 53-64.

84. Кей Д.М. Гипонатриемия и гипернатриемия//Трудный диагноз: сб.ст., -М., 1992.- Т. 1.- С. 382-399.

85. Кирсанов К. П. Лечение переломов тазового шва и крестцово-подвздошного сочленения у мелких домашних животных / К. П. Кирсанов// Ветеринар. 2001. - № 3. - С. 6-9.

86. Киршин В.А. Ветеринарная противорадиационная защита/ В.А. Киршин, В.А. Бударков.- М.: Агропромиздат, 1990.-387с.

87. Киршин В.А. Ветеринарная радиобиология/ В.А. Киршин, А.Д. Белов, В.А. Бударков,- М.: Агропромиздат, 1986.-241 с.

88. Кирюшин Г.В., Тимофеев Б.А., Созинов В.А. Химиотерапевтиче-ские препараты", Справочник, Киров, 1997.

89. Ковалев В.Ф. Некоторые проблемы применения антибиотиков в животноводстве и ветеринарии / В.Ф. Ковалев // Антибиотики и медбиотех-нология. 1989 .-№ 10. - С. 725-729.

90. Колесова Е.Н. "Профилактическое действие ацидофилина и ами-лосубтилина при колибактериозе у цыплят", Новосибирск: Актуальные проблемы развития птицеводства в Сибири. 1981.

91. Комаров Ф.И. "Биохимические исследования в клинике" Ф.И Комаров, Б.Ф. Коровкин, В.В. Меньшиков, Элиста, АПП "Джангар", 1998.

92. Комиров Р.Ю. «Ваша собака», Р.Ю. Комиров.-Баку, Олимп,-1993.248с.

93. Кондрахин И.П. Алиментарные и эндокринные болезни животных/ И. П. Кондрахин.- М., Аграпромиздат, 1989.- 408с.

94. Кошик Т. Ф. Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине/ Т. Ф Кошик, Я. И. Гонский, В. А. Слободян и др. // Тез. докл. VIII Всесоюзной конф. — Ивано-Франковск, 1978. Вып. 2.

95. Крылова Н.Н. Биохимия мяса / Н.Н., Крылова, Ю. Н. Лясковская. 3-е изд., перераб. и доп. М.: Пищевая промышленность, 1968. - 462 с.

96. Кузнецова А.С. Итоги и перспективы научных исследований по созданию и применению бифидумсодержащих препаратов/ А.С. Кузнецова, Д.Г. Никитина,- М.: Мир, 1986.-368с.

97. Лаврищева Г.И. Морфологические и клинические аспекты репара-тивной регенерации опорных органов и тканей / Г. И. Лаврищева, Г. А. Оноприенко.- М.:Мир, 1996. 472 с.

98. Лагунов В.А. Эпизоотическая обстановка в промышленном птицеводстве/ В.А. Лагунов, Л.А. Венгеренко //Птицеводство,-1997.- №6.-с 12-16.

99. Лазарев Н.И. Вредные вещества в промышленности, неорганические и элементоорганические соединения / Н.И. Лазарев, И.Д . Гадаскина.-Л.: Химия, 1977.-419 с.

100. Лебедев П. Т. Минеральное и витаминное кормление животных / П.Т. Лебедев, Омск, 1962.-274 с.

101. Линн Д.П. Почему пробиотики и пищеварительные ферменты важны для питания лошади/ Д.П. Линн, Р.З. Станойлович // Специализированный журнал по животноводству.- Еврофермер.- 2006.- №2.- С.25-32.

102. Литусов Н.В. Эволюционно-иммунобиологические аспекты в механизме действия эубиотика биоспорина / Н.В. Литусов, И.А. Поберий, О.П. Мисников, А.В. Степанов // Иммунология Урала, 2002. №1. - С. 14.

103. Лифшиц В. М. Биохимические анализы в клинике/ В. М. Лифшиц,

104. Лобырева Л. Б. Липолитическая активность спорообразующих бактерий Bacillus subtilis // Микробиология. 1979. - Т. 48, № 2. - С.

105. Лопатина Т.К. Иммуномоделирующее действие препаратов -эубиотиков/ Т.К. Лопатина, М.С. Бляхер, В.Н. Николаенко // Вестник Российской академии медицинских наук 1997. - № 3. - с. 30 - 34.

106. Лоуренс Д. Р. Клиническая фармакология: в 3 т./ Д. Р. Лоуренс, П. Н. Бенитт.— М.: Медицина.- 1993. 1т.

107. Лудевиг, Р. Острые отравления/Лудевиг Р., Лос К. / Пер. с нем.

108. C.М. Ноздрина. — М.: Медицина, 1983.-562 с.

109. Луковников А.В., "Охрана труда", М., Колос. 1978.

110. Лукьяновский В.А. Болезни костной системы животных / Лукья-новский В. А., Белов А. Д., Беляков И. М.— М.- Колос.- 1984. 302 с.

111. Лушников К.В. Органические кислоты: свойства и спектр применения в сельском хозяйстве/ К.В.Лушников, С.В. Желамский //. Специализированный журнал по животноводству. Еврофермер. 2006.- №2. - С.-14-19.

112. Мажуга П. М. Цитология и генетика: в 2 т./ П. М. Мажуга, Т. П. Вечерскав. Мир, 1974. - Т.1.

113. Макарцев Н.Г. Кормление сельскохозяйственных животных / Колос. 1995.

114. Максимов В.И. Препарат на основе хитина «СОЛИХИТ» для лечения кишечного дисбактериоза животных/ В.И. Максимов, В.Е. Родоман, С.Е. Васкун // Тр. 5. конф. Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана. Москва-Щелково, 1999. С. 1165-168.

115. Максимов В.И. Препараты на основе хитина. / В.И Максимов, В.Е. Родоман //Тез.7 съезда Всеросс конф. Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана. Москва-Щелково, 1999.- С. 1165-168. '

116. Малик Н.И. Ветеринарные пробиотические препараты / Н.И. Малик, А.Н. Панин //Ветеринария.- 2001.- №1.- С.46-51.

117. Майоров А.И. "Болезни собак"/ А. И. Майоров, Ф.И. Василевич, В.А. Голубева, Е.П. Данилов- 3-е изд. ипс. -М.: Колос, 2001.- 472 с.

118. Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М. Д. Маш-ковский. М.: МИР.- 1993. - 2т.

119. Меерсон Ф.З. "Адаптация, стресс и профилактика" / М., "Наука",1981.1.l

120. Меерсон E.M. Клеточно-генетические, иммунологические, биохимические методы в характеристике осложненного течения заживления костных ран/ Е. М. Меерсон, В. К. Ильин, А. И. Говалло и др.— М.: ЦИТО, 1997. 479 с.

121. Мертевели Т.В. Биохимия животных: учеб.пособие для вузов/под ред. Н.С. Шевелева.-СПб.: ЛАНЬ, 2005. 296 с.

122. Микулец Ю. И. Взаимосвязь витамина Е и железа у цыплят-бройлеров в онтогенезе: автореф. дис. канд. биол. наук: —Боровск, 1996. 29 с.

123. Митин В.Н. Оперативные методы лечения вывихов тазобедренного сустава у мелких животных: Автореф. дис. . канд. вет. наук./ М., 1984.-42с.

124. Могилевич И.М. Полимерные системы для регулируемого выделения лекарственных веществ/ И.М. Могилевич, Н.В. Мейя // Хим. фарм. журн. 1919. - № 3.- 403-442.

125. Мозгов И.Е. Фармакология/И.Е Мозгов,- М.: Колос, 1971.

126. Мозгов И. Е. Фармакология: учеб. для вузов / И. Е Мозгов. — М.;Аграпромиздат.: 1985.-416 с.

127. Морозовой В.Т. Руководство по клинической лабораторной диагностике / Под ред. проф. М.А. Базарновой, В.Т. Морозовой / Клиническая биохимия. К., Высшая школа, 1986. С. 216-223.

128. Москалев Ю.И. Минеральный обмен / Ю.И. Москалев.- М.: Медицина, 1985.-458 с.

129. Мымрин И.А. Бройлерное птицеводство/ И.А. Мымрин.-М.: 1989.142с.

130. Макарцев Н. Г «Роль белков в организме» // Киев,: ГУП Облиз-дат, 1999.-272 с.

131. Михкиева Е.К. "Стресс и иммунитет у птиц" // Е.К Михкиева, Н.А. Болотников, В.С.Олейник, Ленинград: 1983. 264 с.

132. Надиров Н К. Токоферолы и их применение в медицине и сельском хозяйстве / Н. К. Надиров.— М.: Наука, 1991. 125 с.

133. Натансон А.О. Витамин А и его недостаточность/ А. О. Натансон. М.: Аграпромиздат.- 1961. - 183 с.

134. Нацименто JI.M. Гиперкалиемия и гипокалиемия//Трудный диагноз: в 2 томах / Под ред. Р.Б. Тейлора, т. 1. М., Медицина, 1992. С. 302-322.

135. Никитин И.Н. Организация и экономика ветеринарного дела/ И.Н Никитин, М.Х. Шайхаманов, В.Ф. Воскобойник,-М.: Колос,- 1996. 486 с.

136. Новашин С.М. Новые антибиотики в лечении бактериальных инфекций/ С.М. Новашин, И.П. Фомина,- Киев,: Урожай,- 1979.243 с.

137. Ноздрюхина JI. Р. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека / Л. Р. Ноздрюхина. М.: Наука, 1977. - 397 с.

138. Ноздрюхина Л. Р. Нарушение обмена микроэлементов и пути его коррекции/Л. Р. Ноздрюхина.-М.: Наука, 1980. 243 с.

139. Нормы и рационы кормления с.-х. животных: справ, пособие / А. П. Калашников, Н. М. Клейменов, В. Н. Баканов и др.; М.: Агропромиздат, 1986.- 451 с.

140. Ньюман, У. Минеральный обмен кости / У. Ньюман, М. Ньюман. М.: Мир, 1961.

141. Осипенко А. В. Патофизиологические механизмы регенерации,/ В. В. Базарный, А. П. Ястребов: Метод, рекомендации ,Свердловский гос. мед. ин-т; Свердловск, 1991. 192 с.

142. Основы наружной терапии болезней кожи. Васкулиты кожи. /Под ред. Е.В. Соколовского. СПб.: СОТИС, 1999. - С. 361-372.

143. Панин А.Н., Серых Н.И. и др. "Пробиотические препараты в ветеринарии", / М.:Колос, 1997. 241 с.

144. Пастухов М В. Закономерности изменений костной структуры укрупного рогатого скота в онтогенезе: Автореф. дис.д-ра вет. наук. Л.,1979.-49 с.

145. Перетц JI.Г. Витаминообразующая функция микробов нормальной кишечной флоры/ Л.Г. Перетц, Г.И. Грязнов,- ЖМЭИ, 1978, №6.с201-243с.

146. Перетц М.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма животных и пробиотиков на рост и сохранность цыплят/ М.Г. Перетц, М: Птицеводство №1,1996. С54-56.

147. Петров Р.В. Иммунология острого лучевого поражения/ Р.В Петров, М.: Агропромиздат,-1962.289с.

148. Петрухин И.В. Кормовые добавки / И. В. Петрухин. М.: Колос, 1992.-421 с.

149. Пивняк И.Г. Микробиология пищеварения жвачных / И.Г. Пив-няк, Б. В. Тараканов. М. Колос, 1982.- 351 с.

150. Привало О. Е. Витамины в кормлении животных/ О.Е. Привало, С.М. Паенок, Тусак Я.С.— Киев: Урожай.- 1983,- 371 с.

151. Радкевич П.В. Ветеринарная токсикология/ П.В. Радкевич.— М.: Колос, 1972.-376 с.

152. Рожков Ю.П. Ранняя диагностика остеодистрофии с.-х. животных с применением катионообменника-алюминантной окиси алюминия/ Ю. П. Рожков.- Саратов, Облиздат.- 1982.-86с.

153. Роудер Джозеф Д. Ветеринарная токсикология/ Пер. с англ. М. Степкин.-М.: Аквариум. 2003. - 416 с.

154. Руководство по гастроэнтерологии / А.Л. Гребенева, А.И. Ха-занова, С.Д. Подымова и др.; под ред. А.Л. Гребенева, М.: Медицина, 1995. Т. 2.

155. Рыбачков В.В. Эндогенные интоксикации / В. В. Рыбачков, Э. В. Малафеева//тез. докл. международного симпозиума. СПб., 1994.-С. 57- 64.

156. Самохин В.Т. Профилактика нарушений обмена микроэлементов у животных / В.Т. Самохин. М.: Колос, 1981. - 325 с.

157. Самошкин И.Б. Реконструктивно-восстановительные операции при врожденной и посттравматической патологии тазобедренного сустава у собак: Автореф. дис.д-ра вет. наук. М., 1999. - 29 с.

158. Сенина З.И. Производство, применение и эффективность премиксов/ З.И Сенина.- М.: ОНТИТЭИмикробиопром, 1976. 376 с.

159. Справочник Видаль ветеринар / Е.А. Толмачева, Е.А. Лицарева, Е.Л. Самолова, Н.Л. Спивак.-М.: АстраФармСервис, 2004. 480 с.

160. Сидоренко Б.А. Нарушения водно-электролитного обмена и кислотно-основного состояния/ Б.А. Сидоренко, Е.Т. Разумова // Справочник терапевта: под ред. Ф.И. Комарова.-М.,- Здоровье, 1980. С. 569-578. к

161. Сидоров М.А. «'Основы профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных животных» / М.А.Сидоров., В.В.Субботин/ Ветеринария, №1.- 1998.

162. Симпсон Джейм У. Болезни пищеварительной системы собак и кошек / Под ред. В. В. Гриценко Пер. с англ. Г.Н. Пимочкиной.-М. Аквариум. -2003.-496 с.

163. Скулачев В.П. Энергетика биологических мембран/ В.П. Скула-чев. Серия: Биологические мембраны.- М.: Наука. 1989. - 460 с.

164. Скурихин В. Н. Витаминное питание с-х животных и птиц / В.Н. Скурихин, М.: Колос,-1984.-198с.

165. Скурихин В. Н. Методы анализа витаминов A, D, Е и каротина/

166. B. Н. Скурихин, С. В. Шабаев М.: Аграпромиздат. - 1996. - 305 с.

167. Слабоспицкая А.Т. Ферментативная активность бацилл, перспективных для включения в составбиопрепгаратов / А.Т. Слабоспицкая,

168. C.С. Крымовская, С.Р. Резник // Микробиол. журн. 1990. - Т. 52, № 2. - С. 9-14.

169. Слободян В.А. Кадмий и злокачественный рост: атореф. дис. канд. мед. наук. — Ивано-Франковск, 1975. -32 с.

170. Смирнов А.О., Садовой Н.В., Литусов Н.В., Филин В.А., Побе-рий И.А., Доронин А.Н. Выживаемость бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis при прессовании таблеток биоспорина. Биотехнология. -1997.-№4. - С. 17-21.

171. Смирнов О.А. Разработка технологии получения таблеточной формы препарата биоспорин / О.А. Смирнов, А.Т. Харечко, Н.В. Содовой и др. // Биотехнология. 1996. - №11. - С. 51-55.

172. Соколов В.Д. Фармокология/ В.Д. Соколов, М.И. Рабинович, Г.И. Горшков,-М.: Колос,- 1997.-409 с.

173. Сретенович Л.М. Значимость использования органически связанного селена в питании людей и животных. / Л.М. Сретенович //Специализированный журнал по животноводству. Еврофермер.- 2006.- №2.-С.-19-20.

174. Станойлович Л.М. Ипользование пробиотиков лактур и мткро-бонд в кормлении несушек./ Л.М. Станойлович, Р.С. Станойлович, С. Б. Живкович // Специализированный журнал по животноводству. Еврофермер.-2006.- №2.- С. 43-47.

175. Строжа И.К. Усвоение пищевых веществ в организме животных/ И. К. Строжа, JT. К. Вевере. — Рига: Зинатне. 1977.-461с.

176. Стыскин, Е.П. Практическая жидкостная хроматография/ Е.П. Стыскин, JI. Б Ициксон, Е.В. Брауде. М.: Мир, 1988. -259с.

177. Субботин В.В. ,Степанов К.М. Влияние бифацидобактерина на кишечную микрофлору поросят Ветеринарная газета, №5, 1998.

178. Субботин В.В. Новые пробиотики/ В.В. Субботин,- Омск, Аку-Пресс, 1998.-89 с.

179. Таланов В.В. Санитария кормов / В.В. Таланов, Б.Н. Хмелев-ский. М.: Агропромиздат, 1991. - 293 с.

180. Тарасенко B.C. Экспериментально-клиническое обоснование применения споробактерина в комплексном лечении панкреонекроза / B.C. Тарасенко, В.И. Никитенко, А.А. Стадников // Вестник хирургии. 2002. -Т. 161, № 1.-С. 2-8.

181. Таштемиров P.M. Возрастные изменения скелета и мышц тазовой конечности куракульских овец предгорной зоны Узбекистана: автореф. дис. канд. вет. наук. Самарканд. 1983. — 38 с.

182. Терруан Т. Взаимодействия витаминов / Т. Терруан. М.: Мир, 1969.-229 с.

183. Тимошко М.А. В Стресс и адаптация с.-х. животных в условиях индустриальной технологии / М. А. Тимошко. Кишинев, -Мирен.-1992. - 192 с.

184. Тихонов И.В., Применение пробиотика «Биод 5ж» в ветеринарии// ТихоновИ.В., Водолажская С.А. // Ветеринарная медицина.- 2004.- №4.- С.11-12.

185. Тихонов И.В. Совершенствование технологии производства пробиотика Биод-5 и методов его контроля./ И.В. Тихонов, Т.Н. Грязнева, Лиморенко А.П., Васильев П.Г., Водолажская С.А. Ветеринарная медицина.-2004.-№4.- С.40-42.

186. Гуревич И.В. Влияние пробиотика Биод-5ж на биохимические показатели и уровень картизола в сыворотке крови телят, больных простой диспепсией/ И.В. Гуревич, В.А.Гаврилов, В.И.Максимов // Ветеринарная медицина. -2004.-№4.- С. 28-29.

187. Уайт А. Основы биохимии. В 3 томах. Т. 3. / А. Уайт; пер. с англ. Л.М. Гинодмана; под ред. Ю.А. Овчинникова.- М., Мир, 1981.- 726 с.

188. Фармакология: учеб. пособие для вузов / В.Д. Соколов, М.И. Рабинович, Г.И. Горшков, и др.; под ред. В. Д. Соколова.— М., Колос, 1997.-543 с.

189. Федчук А.А. Использование биоспорина в ветеринарной гинекологии./ А.А. Федчук, A.M. Чебыкин // Сб. статей. Вып.З. Екатеринбург, Ур-ГСХА, 1999.-С. 76-78.

190. Фуруй Ф.И. Стратегии создания адаптивной системы промышленного животноводства / Ф.И. Фуруй, В.П. Федоряка, С.Х. Хайдарлиу :и др. Кишинев, 1987.-502 с.

191. Ханенко А.Т. «Биохимическая адоптация» / А.Т. Ханенко, Л.В. Бойко, Н.М. Щеголева, Киев.-Вима, 1998. -152с.

192. Харкевич Д. А. Фармакология/ Д. А. Харкевич,-М.-Медицина, 1993 .-578с.

193. Хасанов И.А. Тенденции развития мирового птицеводства/ И.А. Хасанов // Птицеводство, №5 1997.с34-42.

194. Хаскинсон Э. Остеоартрит (остеоартроз). Лечение ревматических заболеваний/ Э. Хаскинсон. — М.: Медецина, 1986. 279 с.

195. Хеминен Х.Р. Секреты суставного хряща./ Х.Р. Хеминен, A.M. Сээменен// Наука и жизнь.: 1995. №2.-С. 24-32.

196. Хмельницкий Г.А. Ветеринарная токсикология/ Г.А. Хмельницкий.- М.: Агропромиздат, 1987.- 426 с.

197. Хрусталева И.В Функциональная морфология и патология аппарата движения с.-х. животных/ И.В. Хрусталева.- М.; MB А., 1987.-109 с.

198. Червяков Д.К. Лекарственные средства в ветеринарии/ Д.К. Червяков, П.Д. Евдокимов, А.С. Вишкер, -М.: Колос, 1977.С.354

199. Чернякова В.И. Бактериологическая ииммунологическая эффективность биоспорина при неспецифическом язвенном колите/ В.И. Чернякова, И.М. Береза, С.И. Селезнева // Микробиол. журн. 1993. - Т. 55, № 3. -С. 63 - 67.

200. Чубатова С.А. Гелевая основа для МИБП с бактериофагами/ С.А. Чубатова, Е.Л. Жиленков, В. М. Попова // Тез. докл. международной онференции, посвященной памяти академика РАМН и РАМТН И.Н. Блохи-ной: М. 1988.

201. Шарова Л.В. Премиксы, выпускаемые Ефремовским биохимическим заводом / Л.В Шарова.- М.: ВНИИСЭНТИ НПО «Медбиоэкономика», 1989.-24 с.

202. Щербаков П.Л. Значение бактисубтила в лечении диарей и дис-бактериозов/ П.Л Щербаков //Лечащий Врач. 1998. - № 1. - С. 20-22.

203. Щербакова Э.Р. Изучение комбинированного применения антибиотиков с пробиотиками/ Э.Р. Щербакова, М.М. Медведева. -М.: Медицина, 1976.-207 с.

204. Юмашев Г.С. Повреждения тел позвонков, межпозвонковых дисков и связок / Г.С. Юмашев, JI.J1. Силин. -Ташкент,: Медицина, 1971.- 592 с.

205. Юшков В.В. Иммунокорректоры/ В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, А.В. Казьянин,- Екатеринбург.-000 "ИРА УТК", 2002. 255 с.

206. Ястребов А. П. Система крови и регенерация костной ткани/А. П. Ястребов, А. В. Осипенко. Свердловск.: 1990. - 354 с.

207. Ястребов А. П. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов/ А. П. Ястребов. Свердловск.: 1988.-358с.

208. Ястребов А.П. Регенерации костной ткани в норме и при патологии. /Ястребов А.П., Осадчук А.В.— Свердловск. Мед.Север.-1987. -184 с.

209. Ястребов А.П. Система крови и регенерация костной ткани/ А. П. Ястребов. Свердловск. - Свердловск.: 1990. - 241 с.

210. Adams М. R., Marteau P. On safety of lactic acid bacteria from food. International Journal of Food Microbiology, -1995. -vol. 27, P. 263-264.

211. Aguirre M., Collins M.D. Lactic acid bacteria and human clinical infection. Journal of Applied Bacteriology, -1993 -75, P. 95-107.

212. Aso Y., & Akazan, H. Prophylactic of a Lactobacillus casei preparation on the reccurrence of superficial bladder cancer. Urology International, -1992.-V.49.-P. 125-129.

213. Bansal S. Probiotics in healyh and diseasts / Bansal S. Hi. Assoc pnysicians.-2001.- №7. P. 735-741.

214. Benedettini G. Immunomodulation by Bacilllus subtilis spores /Benede-ttiniG, Delibero C, Pierotti R. // Boll. 1st. Sieroter.Milan -1983 № 6- P. 509-516.

215. Bartlett J.G. Antibiotic-associated diarrhea, N. Enge. J. Med. 2002, 346, P. 334-339.

216. Berridge, J. Inozitol triphosphate and diacylglicerol as second mes-sengersj| Biochem.J. 1984.,V. 220. P.345-360.

217. Berridge J., Irvine R.F. Inositol triphosphate as second in cellular signal transduction ||Nature., 1994/ V.312., P. 315-321.,

218. Black F. Т., Andersen, P.L, Orskov J., Orskov F., Gaarslev K., Lau-lund, S. Prohylactic efficacy of \actobacilli on traveler's diarrhea. / Travel Medicine (proceedings, vol.) 1989. - P. 333-335.

219. Charteris W.P., Kelly, P.M., Morelli, L., Collins J. K. Antibiotic susceptibility of potentially probiotic Lactobacillus species.lI Journal of Food Protection, -1998.- 61, P. 1636-1643.

220. Curragh H. J., & Collins, M. A. High levels of spontaneous drug resistance in Lactobacillus. Journal of Applied Bacteriology, -1992. -73, P. 31-36.

221. Davidson В. E., Kordias, N., Dobos, V., & Hillier, A. J. Genomic organization of lactic acid bacteria. Antonie van Leeuwenhoek, -1996. -70, P. 161183.

222. Fekety R. Guedelines for the diagnosis and management of Clostridium d$?c//e-associated diarrhea and colitis. Am. J. Gastro-enterology, 1997, 52, -P. 739-750.

223. Fox S.M, Walker A.M. The ethiopathogensis of osteochondrosis. Vet Med.-1993.-2.- P.l 16-122.

224. Goldin В., Gorbach, S. L., Saxelin, M., Barakat, S., Gualtieri, L., & Salminen, S. Survival of lactobacillus species (strain GG) in human gastrointestinal tract. Digestive Diseases and Science. 1992.- 37, - P. 121-128.

225. Goodman S.A., Montgomery R.D., Fitch R.B at all. Serial Orthopaedic Examinations of Growing Great Dane Puppies Fed Three Diets Varyng in Calcium and Phosphorous Resent Advances in Canine and Feline Nutrition. 1998. V.2., P.-3-12.

226. Grinstein S., Goetz J.D. Control of free cytoplasmye calcium by intracellular pH in rat lymphocytes // Ibid., 1985. V.819., P. 267-270.

227. Hazewinkel HAW Sceletal disease. In Wills JM, Simpson KW, tds. Waltham book of clinical Nutrition of the Dog and Cat. Pergamon 1994.- P. 395420.

228. Hilton E., Kolakowski, P., Singer, C., & Smith, M. Efficacy of Lac-tobacillius GG as a diarrhea preventative. Journal of Travel Medecine. -1997. -4. -P. 41-43.

229. Hosoda M., He F., Hiramatu M., Hashimoto, H at all. Effects of Lactobacillus GG intake on fecal microflora and defecation in healthy volunteers. / Bi-fidus. -1994.- 8, P. 21-28.

230. Igimi S., Ruy С .H., Park S. H. Transfer of conjugative plasmid pAMBl from Lactis to mouse intestinal bacteria. / Letters in Applied Microbiology.-1996.-23. P. 31-35.

231. Ishiwa H., Iwata. M. Drug resistance plasmids in Lactobacillus fer-mentum. Journal of General and Applied Microbiology. -1980.- 26. P. 71-74.

232. Isolaruri E., Juntunen, M., Rautanen, Т., at all. A human Lactobacillus strain (Lactobacillus casei sp. Strain GG) promotes recoveri from acute diarrhea in children. Pediatrics. -1991.- 88. P. 90-97.

233. Isolauri E., Kaila, M., Mykkanen. H. at all. Oral bacteriotherapy for viral gastroenteritis. Digesure Diseases and Science. -1994. -39, P. 2595-2600.

234. Korpela R., Moilanen, E., Saxelin M. at all. (Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC 53013) and platelet aggregation in vitro. International Journal of Food Microbiology. 1997.- 37. - P. 83-86.

235. Leclercq R., Derlot, E., Weber, at all. Transferable vancomycin and teicoplanin resistance in Enterococcus faecium. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. -1989.- 33. P. -10-15.

236. Lee Y.-K., & Salminen, S. The coming of age of probiotics. Trends in Food Science and Chemotherapy. -1995.- 6. P. 241-245.

237. Leng Z., Riley, D. E., Berger, R. E., at all. Distribution and mobility of tetracycline resistsnce determinant tetQ. Journal of Antimicrobial Chemotherapy.- 1997.- 40,-P. 551-559.

238. Lim K.S., Huh, C. S., Beak Y.J. Antimicrobial susceptibility of bifidobacteria. Journal of Daily Science. -1993. -76, P. 2168-2174.

239. Lin M.-Y., Savaiano, D., & Harlander, S. (1991). Influence of non-fermented dairy products cjntaining bacterial starter cultures on lactose maldigestion in humans.// Journal of Dairy Science, 74, P. 87-95.

240. Marteau P., Pochart, P., Bouhnik, Y., at all. Fate and effects of some transiting micro-organisms in the human gastrointestinal tract. // World Review on Nutrition and Dietetics. -1993. -74, P.-1 -21.

241. Matteuzzi D, Crociani, F., Brigidi P. Antimicrobial susceptibility of Bifidubacterium. Annales de Microbiologic (Paris). 1983.-134A. P. 339-349.

242. Morelli L., Sarra, P. G., & Bottazzi, V. In vivo transfer of pAMBl from Lactobacillus reuteri to Enterococcus faecalis. Journal of Applied acteriol-ogy. -1988.- 65,-P. 371-375.

243. Muir P., Dubielzig RR, Johnson KA, Shelton GD Hypertrophic osteodystrophy and calvarial hyperostosi. Compendium.-1996.-18.- 141 p.

244. Nap R.C. Harzevinkel HAW Growth and sceletal development in the dog in relation to nutrition a review.// Vet Quarterly 1994.- 16.- P. 50-59

245. Nicas T.I., Cole, C.T., Preston, D. A., at all. Activity of glycopeptides against vancomycin-resistant gram-positive bacteria. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. -33. -1989. P. 1477-1481.

246. Nijsten R., London, N., van den Bogaard, at all. In-vivo transfer of resistance plasmids in rat, human, or pig-derived intestinal flora using a rat model. // Journal of Antimicrobial Chemotherapy, -1995. -36, P. 975-985.

247. Nisyizuka Y. The role of proten kinase С in cell surface signal. // Nature, 1984. V.308. 693 p.

248. Lavalle J., Robson H. Susceptibilities of members Bacteriodes fragilis group to antimicrobial agents. Antimicrobal Agents and Chemotherapy, 1992. -P. 36. -2051-2053.

249. Pouyssegur J. The grouht factor fctivitable Na/H txchange system. // Trends Biochem. Sci., 1989. - V.10. -P. 453-455.

250. Raza S., Graham, S.M., Allen S. J., at all. Lactobacillus GG promotes recovery from acute nonbioody diarrhea in Pakistan. Pediatric Infectious Disease Journal, 1995. 14,-P. 107-111.

251. Rinckel L. A., & Savage, D. C. Characterization of plasmids and plasmid-borne marcolide resistance from Lactobacillus sp. Strain 100-33. Plasmid. -1990. -23,-P. 119-125.

252. Riser W.H. A half centuri of canine hip displasia.// Seminars Vet Med Surg (Small Animal). -1987- 2.- P.87-91

253. Saaverda J.V., Bauman, N.A., Oung I., at. all. Feeding of Bifidobacterium bifidum and Streptococcus thermophilus to infants in hospital for prevention of diarryea and shedding of rotavirus. Lancet, 1994. 344, P. 1046-1049.

254. Saiyers A.A. Gene transfer in the mammalian intestinal tract. //Current Opinion in Biotechnology, -1993. -V. 4, P. 294-298.

255. Saxelin M., Rautelin, H., Salminen, S., & Makela, H. Safeti of commercial in prodacts with viable Lactobacillus strains. Infections Diseases Clinical Practice, -1996. -5. P. 331-335.

256. Scuhulz K.S, Payne JT. Aronson E // Escherichia coli bacteremia associated with hypertrophic osteodystrophy in a dog. JAVMA 1991. 1991.- P. 1170-1172.

257. Siitonen S., Vapaatalo, H., Salminen, S., at. all. Effect of Lactobacillus GG yoghart in prevention of antibiotic associated diarrhea. Annals of Medicine.-1990.-22. P. 57-59.

258. Stevens A.M., Shoemaker, N.B., Li, L-Y., & Saiyers, A.A. Tetracycline regulation of genes on Bactericides conjugative transposons. Journal of Bacteriology. -1993. -175. P. 6134-6141.

259. Tiina M-S., Jaana, M., Maria S. Lactic actid bacteria with health claims interactions and interference with gastrointestinal flora. // International Dairy Journal. -1999.- 9. P. 25-35.

260. Walker D. C., Klaenhammer T. R. Isolation of novel IS3 group insertion element and construction of an integration vector for Lactobacillus spp. Journal of Bacteriology. -1994. -176. P. 5330-5340.

261. William R., Brawner J. The role jf Diagnostic Imaging in Assessment of Canine Sceletal Development. Resent Advances in Canine and Feline Nutrition. 1998. V.2. -P. 13-37.

262. Williams E. Salmonella dublin skin lesions in a veterinary surgeon Lancet. 1969. - P. 737-739.

263. Wistrom J., Northy S., et al. Frequency of autibiotic-associated diarrhea in 2462 antibiotic-treated hospitalized patients a prospective study. // J. An-timicrob. Chemother. 2001. -47. - P. 48-50.

264. Wistrom J., Northy S., et al. Frequency of autibiotic-associated diarrhea in 2462 antibiotic-treated hospitalized patients a prospective study. // J. An-timicrob. Chemother. 2001. - 47. - P. 48-50.

265. Wolf B.W., Garleb, D. G., Casas, I. Safety and tolerance of Lactobacillus reuteri in healthy adult male subjects. // Microbial Ecology in Health and Disease. 1995. -8.-41-50. - Sci. - V.10. - P.453-455.1. A ic i

266. О результат клинического iiciim iuiiiiw препарата Бшжан дли профилактики н лечении опорно-дпигатслмюН системы собак в lu'icpiinnpiioii клинике «Артемида»

267. Лечению препаратом было подвергнуто 10 собак различных возрасти» п пород. Из 1П1х:р1пеншпауцер-4, дог-1, немецкая ивчарка-5, ротвейлер-3, южноафриканский бурбуль-1, кавказская овчарка-1,бультерьер-1.

268. Ipenapar скармливали в дозе 10 г па 1 кг массы чела животного один раз вдень в течение двух месяцев.

269. У всех животных перед началом лечения были отмечены различные клинические признаки заболевании опорно-двигательной снстемы(артриты, артрозы, переломы костей, дискосиопдилопатия, вывихи, слабость связок).

270. После проведенного лечения у животных наблюдалось либо полное излечение либо значительное улучшение общего состояния организма.

271. В период дачи препарата побочных эффектов не наблюдалось.

272. На основании результатов испытаний рекомендуем препарат Биокан для для профилактики и лечения оиорно-двнга тельной системы собак.6 декабря 2005 года.г.Иошкар-Ола

273. Аспирант Ф1 ОУИ МГАВМ и Б им. IC.I I. С1арной клиники «Артемида»,1. Акт

274. О результатах клинических испытаний препарата Биокан для профилактики и лечении заболсиании онорно-двигателмюн системы собак it питомнике «Тимантти Сол ид».

275. Ру ко води тел ь 11 и го м н и ка «Тимантти Солид»1. УТВЕРЖДАЮ:

276. Генеральный директор 00 «Агровет» Д.А. Девришов2006 г.1. ПРОЕКТ1. СТАНДАРТ ОРГАНИЗАЦИИ

277. ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОПОРНО-ДВИГАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ СОБАК БИОКАН1. СТО .00012 -20061. Москва 20061. MS1. Предисловие1.РАЗРАБОТАН: ООО «АГРОВЕТ»

278. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ: Генеральным директором ООО «АГРОВЕТ3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

279. В настоящем стандарте реализованы нормы статьи 16, 17 Федерального закона от 27 декабря 2002 года№184-ФЗ "О техническом регулировании"

280. Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, и/или распространен без разрешения ООО «АГРОВЕТ»1. СТО.ООО 12 -20061. Введение

281. Настоящий стандарт распространяется на препарат БИОКАН, предназначенный для профилактики и лечения болезней опорно-двигательной системы собак.

282. В качестве активного компонента содержит гидролизат желатина, глюкозамин, лакто- и бифидобактерии и минеральные соли.

283. Настоящий стандарт может быть использован с целью сертификации данной продукции.1. СТАНДАРТ ОРГАНИЗАЦИИ

284. ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОПОРНО-ДВИГАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ СОБАК БИОКАН1. Технические условия1. Дата введения 20061. Область применения

285. Настоящий стандарт распространяется на ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОПОРНО-ДВИГАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ СОБАК1. БИОКАН

286. Положения настоящего стандарта подлежат обязательному применению предприятием, осуществляющим производство и контроль качества препарата на территории Российской Федерации.

287. Настоящий стандарт может быть использован контролирующими организациями с целью подтверждения соответствия препарата установленным требованиям, в том числе для сертификации.2. Нормативные ссылки

288. В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие нормативные документы:

289. ГОСТ 12.0.004-90 Организация обучения безопасности труда.1. Общие положения.

290. ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ. Общие санитарно-гигиеническиетребования к воздуху рабочей зоны1. JW1. ГОСТ 28085-89

291. ГОСТ 28498-90 ГОСТ 29112-911. ГОСТ 29230-911. ГОСТ Р 8.579-20011. ГОСТ Р 51314-99

292. ГФ X, стр 442 ФС 42-26-20-89технические условия. Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности.

293. Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования Среды питательные плотные.(для ветеринарных целей).Общие технические условия.

294. Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные.

295. ГСИ. Требования к количеству фасованных товаров в упаковках любого вида при их производстве, расфасовке, продаже и импорте1. Колпачки алюминиевые икомбинированные к флаконам и бутылкамдля лекарственных средств, крови икровезаменителей

296. Раствор натрия хлорида 0,9%изотонический

297. Вода дистиллированная для инъекций

298. Стандарт организации (СТО): Стандарт, утвержденный и применяемый организацией для целей, установленных статьей 17 Федерального закона «О техническом регулировании», для совершенствования производства и обеспечения качества продукции.

299. ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОПОРНО-ДВИГАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ СОБАК БИОКАН

300. Белок гидролизат желатина, источник строительного материала для регенерации хряща.

301. Пробиотические микроорганизмы способствуют нормализации микрофлоры кишечника и утилизации кальция.

302. Лиофилизация высушивание из замороженного состояния под вакуумом.

303. Глюкозамин способствует регенерации костной и хрящевой ткани, играет роль пребиотика.

304. Микробиологическая чистота отсутствие в популяции клеток микроорганизмов других видов.1. S3f

305. Безвредность препарата отсутствие вредных для организма последствий местного и общего характера после применения.

306. Концентрация водородных ионов (рН) реакция среды (кислая, щелочная, нейтральная) рН - отрицательный логарифм концентрации водородных ионов при основании 10.

307. Колония (КОЕ) микроорганизмов потомство одной микробной клетки на твердой питательной среде.

308. Стерильность отсутствие микрофлоры в препарате, объектах, на питательных средах

309. Документ о качестве (паспорт) документ, подтверждающий соответствие качества вакцины требованиям стандарта.

310. Требования безопасности и охраны окружающей среды

311. По биологической безопасности препарат должен соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008.

312. Производственный процесс должен быть организован в соответствии с требованиями ГОСТ 12.3.002.

313. Производственное оборудование должно соответствовать требованиям ГОСТ 12.2.003.

314. Санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны по ГОСТ 12.1.005;

315. Персонал, занятый в производстве препарата, должен быть обеспечен средствами защиты в соответствии с требованиям ГОСТ 12.4.011.

316. Обучение рабочего персонала безопасности труда должно быть организованно в соответствии с требованиями ГОСТ 12.0.004.

317. В процессе производства должен быть налажен контроль допустимых выбросов в атмосферу согласно ГОСТ 17.2.3.02.