Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Технология получения энтомопатогенных микроспоридий и нематод и их применение для защиты пасленовых культур

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Технология получения энтомопатогенных микроспоридий и нематод и их применение для защиты пасленовых культур"

РГБ ОД

5 / 2003 1

На правах рукописи

Пушня Марина Владимировна

ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ _ МИКРОСПОРИДИЙ и НЕМАТОД И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ . _ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ПАСЛЕНОВЫХ КУЛЬТУ? ........-

Специальность 06.01.11, - защита растений —- —------------

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Краснодар - 2000

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте биологической защиты растений

Научные руководители : - доктор биологических наук, профессор Исси И.В., • кандидат биологических наук Исмаилов В Л.

Официальные оппоненты: - доктор биологических наук, профессор Ярошенко ВЛ., - кандидат биологических наук, Орлов В.Н.

Ведущая организация - Краснодарский научно-исследовательский институт,овощного и картофельного хозяйства

Защита диссертации состоитсян[2 Я иИ>Йр^2000г. ^ ^ часов на заседании диссертационного совета К.120.23.01 в Кубанском государственном аграрном университете по адресу: 3500Н г. Краснодар, ул. Калинина, 13

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кубанского государственного аграрного университета

Автореферат разослан geicflSp^ 1999г.

Ученый секретарь

диссертационного совета ^ Девяткин А.М.

[J4

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Необходимость совершенствования систем защиты пасленовых культур от основных вредителей несомненна. Большинство современных инсектицидов, применяемых на этих культурах, экологически опасны и, как показывает практика, часто не обеспечивают нужной эффективности вследствие формированием резистентных популяций вредителей при их многократном применении. Поэтому важны изыскание и разработка новых средств и систем защиты пасленовых культур, основанных на экологических принципах управления агро-экосистемами, т.е. на умелом использовании естественных лимитирующих вредителя факторов, к которым относятся энтомофаги, энтомопатогены и биологически активные вещества (БАВ) природного происхождения. Среди энтомопато-генов значительное внимание уделяется нематодам и микроспоридиям. Наработка этих энтомопатогенов осуществляется в основном на различных насекомых. Целесообразность использования в качестве насекомого-накопителя тутового шелкопряда Bombyx mon L. была обусловлена тем, что как у нас в стране, так и за рубежом созданы искусственные питательные среды для круглогодичного разведения насекомого, позволяющие получать однородный биологический материал - удобную питательную среду для разведения микроспоридий и нематод. Учитывая, что энтомопатогенные нематоды и микроспоридии только начинают использоваться для защиты сельскохозяйственных культур, наши исследования представляются актуальными и обоснованными.

Цели и задачи исследований. Цель настоящей работы - разработать технологию получения знтомопатогенных микроспоридий рода Vairimorpha и нематод рода Steinerriema на гусеницах тутового шелкопряда, выращенных на искусственной пищевой среде, и оценить перспективы применения этих энтомопатогенов для защиты пасленовых культур от основных вредителей. Для ее достижения было необходимо:

1. Разработать технологию массового разведения гусениц тутового шелкопряда на искусственной пищевой среде с усовершенствованным соством, обеспечивающим оптимальное развитие гусениц в преимагинальный период.

2. Выяснить возможность и условия заражения гусениц тутового шелкопряда нематодами рода 51ететета и микроспоридиями рода УаттогрЬа и накопления инвазионного материала в необходимом количестве.

3. Определить влияние на патогенность развивающихся в тутовом шелкопряде микроспоридий и нематод условий разведения на несвойственном хозяине.

4. Изучить влияние условий содержания шелкопряда и состава ИПС на продуктивность микроспоридий и нематод и разработать оптимальные рецептуры ИПС и технологию выращивания насекомых.

5. Провести лабораторные и полевые испытания энтомопатогенов против основных вредителей пасленовых культур - колорадского жука, хлопковой совки, картофельной моли, проволочников и др.

6. Оценить возможность использования энтомопатогенов для защиты пасленовых культур от основных вредителей как самостоятельно, так и в комплексе с биологически активными веществами природного происхождения нового поколения и пестицидами.

Научная новизна исследований. Впервые разработаны отечественные искусственные пищевые среды на основе дешевых компонентов, обеспечивающие оптимальное развитие гусениц тутового шелкопряда в течение всего ларвального периода. Впервые созданы технологии наработки микроспоридий и нематод на гусеницах тутового шелкопряда. Разработана улучшенная добавлением биологически активных веществ терпенового ряда препаративная форма на основе энтомо-патогенных нематод, обладающая повышенной эффективностью против вредных насекомых.

Практическая ценность работы. Результаты исследований по разработке технологии массового разведения гусениц тутового шелкопряда на искусственной пищевой среде могут быть использованы как при выращивании насекомого для получения шелка, так и для наработки энтомопатогенных микроорганизмов для экспериментальных работ и в качестве продуцентов биопрепаратов. Показана

возможность использования энтомопатогенных нематод как самостоятельно, так и в сочетании с биологически активными веществами против колорадского жука и хлопковой совки, а также против картофельной моли в хранилищах.

Апробация работы. Основные результаты исследований по теме диссертационной работы докладывались на Всероссийском научно-производственном совещании "Экологически безопасные и беспестицидные технологии получения растениеводческой продукции" (Краснодар, 1994); на семинаре-совещании "Экологизация сельскохозяйственного производства Северо-Кавказского региона" (Анапа, 1995); на научно-практических конференциях "Эколого-экономические основы усовершенствования интегрирозанных систем защиты растений ст вредителей, болезней и сорняков" (Минск- Прилуки, 1996) и "Защита овоще-бахчевых культур от вредителей и болезней" (Тирасполь, 1996), на международном научном симпозиуме "Использование феромонов и других биологически активных веществ в защите и карантине растений" (Анапа, 1999).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 12 работ в виде статей, тезисов н рекомендаций производству.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, методики проведения исследований, результатов исследования, изложенных в 2-х главах, выводов и практических рекомендаций, содержит 27 таблиц и 5 рисунков. Список использованной литературы включает 267 источников, в том числе 117 зарубежных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Производство и применение биологических средств защиты растений на основе энтомопатогенных организмов и насекомых-накопителей.

Дан аналитический обзор литературы по разведению чешуекрылых на искусственных пищевых средах, особенностям получения и применения препаратов на основе энтомопатогенных микроспоридий и нематод, а также по современным средствам биологической защиты растений, используемых для защиты пасленовых культур.

Глава 2. Материалы и методы исследований.

Тутового шелкопряда разводили круглогодично на искусственной пищевой среде (ИПС), разработанной во ВНИИБЗР (Хлистовский, 1990). Состав сред приведен в таблице 1, при разведении микроспоридий его подвергали модификациям (см. главу 3.).

Заражение гусениц нематодами и микроспоридиями осуществляли по известным методикам (Веремчук, Данилов, 1978; Елфимова,1985) с учетом особенностей развития тутового шелкопряда. Оптимальный для заражения возраст гусениц и требуемые дозы заражения определяли экспериментально.

Продуктивности энтомопатогенов подсчитывали согласно имеющимся методикам (Веремчук, Данилов,1978; Елфимова,1985).

Для проведения лабораторных испытаний энтомопатогенов вредителей (кроме картофельной моли) отбирали из природных популяций. Картофельную моль содержали круглогодично в лаборатории.

Полевые испытания энтомопатогенов проводили на опытном участке ВНИИБЗР на растениях картофеля и томатов в соответствии с методикой определения эффективности биологических средств защиты растений (Черкасов и др., 1986). Численность вредителей при обработке растений нематодами учитывали через 1,3 и 5 суток. Учеты хлопковой совки при обработке микроспоридиями проводили через 3, 7 и 15 суток.

Производственные испытания энтомопатогенных нематод проводили на базе ОАО "Суворовское" Усть-Лабинскош района Краснодарского края согласно общепринятым методикам. Учеты численности вредителей проводили через 6 и 20 суток после обработки.

Конкретные методы, использованные в лабораторных и полевых испытаниях, описаны более подробно в данной главе диссертации.

Статистическую обработку результатов проводили методом сравнения средних значений в двух нормальных совокупностях (Снедокор, 1961), а также методами анализа данных одно- и двухфакторных опытов и результатов многолетних исследований (Доспехов, 1985).

б

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Глава 3. Разработка метода массового разведения на искусственной пищевой среде (ИПС) тутового шелкопряда как насекомого - накопителя энтомопатогенных организмов.

3.1. Разработка оптимальных рецептур ИПС. Усовершенствование состава искусственного корма велось в направлении поиска компонентов, обеспечивающих как оптимальное развитие насекомого- накопителя, так и оптимальный выход энтомопатогенных организмов. Наиболее существенными компонентами ИПС, определяющими развитие шелкопряда, являются белоксодержащие ингредиенты (Хлистовский, 1990; АпНе, 1975; Уаг^а\уа ег а1.,1988). Входящий в состав эталонной среды соевый шрот относится к дорогостоящим продуктам, поэтому он был заменен на сходный по химическому составу и более дешевый подсолнечный шрот (табл. 1, среды 1 -3). Результаты выращивания гусениц младших возрастов на средах, содержащих этот компонент, были на уровне контрольных и составили: выживаемость насекомых - 70,2-74,8 %, продолжительность развития -11,2-11,4 суток. Как дополнительные источники белка и одновременно стимуляторы роста в состав ИК для гусениц младших возрастов вводили кормовые дрожжи (табл.1, среды 10-14). При их концентрации 0,2 % выживаемость гусениц повысилась на 25,4%, масса гусениц увеличилась на 39,8% по сравнению с контрольными данными.

Дальнейшие модификации ИПС проводились для гусениц старших возрастов. По мнению отечественных и японских исследователей основным моментом здесь является увеличение содержания белковых компонентов и целлюлозы при одновременном сокращении количества воды (Злотин, 1981,1989; Уапа£а\уа е1 а1.,1988), что и было нами учтено в средах 6-12 (см. табл.1). Такое увеличение способствовало улучшению биологических показателей роста и развития гусениц тутового шелкопряда (табл.2). Так, при выращивании насекомых на среде "9" с 16% белка и 3% целлюлозы выживаемость гусениц составила 75,7%, продолжительность развития до У-го возраста была равна 23,2 суток, масса гусениц после линьки составляла 628 мг.

Таблица 1

Состав искусственных пищевых сред для гусениц тутового шелкопряда ( из расчета на 1 кг среды)

Компоненты : XX :Среды для гусениц младших возрастов: Среды для гусениц старших возрастов (г) :(эталон): 1 : 2 : 3 : 10 :11 :12 : 13 :14 :3"АИ:3"Б":3"В":6 : 7 : 8 : 9 : 10: 11:12

Лист шелковицы 180 Пшеничная мука 130 Соевый шрот 114 Подсолнечный шрот

Соли Вессона Глюкоза Лимонная кислота Аскорбиновая кислота Витамины группы "В" " Целлюлоза Пропионовая кислота Антибиотики Кормовые дрожжи

Дистиллированная вода

+ + +

.+ + + 100 50 -

+ + + + + + + + + +

+ +

+ +

+ + + + + + + + + ++ + + ++ +

50 50 100 100 100 100 100 100 150 180 200 100 100 160 160 160 160 160

5,0 30

20

5,0

: 5,0 5,0

5,0

Д.о-

+ + + + + +

+ + +

+ + + +

+ + + +

+ +

+

+

+ +

+

+

+ + + +

+ + + + + +

+ +

+ + + + +

+ + + + +

+ +

+ +

+ +

+ +

+ + + +

+ + + +

ОД 5,0 10 15 20

+ + + + + + + + + +

+ +

+ + + +

+ + + ++ + + +

+ + + + + +

+ + + + + +

+ + + + +

+ + + + +

+ + +

+ +

+ 10 10 30 30 30 30 30

+ + + + + 2,5 2,5 0 + + + + + 0,2 0 0

доведена до

1 кг

во всех

ИПС

Примечание: "+" - содержание компонентов такое же, как и в эталонной среде "-" - отсутствие компонентов

В составе сред для гусениц старших возрастов, непосредственно используемых для наработки энтомопатогенов, было уменьшено также содержание антибиотиков и антисептиков, при разведении на среде с половинной дозой этих компонентов основные биологические показатели насекомых существенно не изменялись, однако, сокращалась продолжительность ингибирования плесневых грибов (см. табл.2).

3.2. Разработка технологии разведения гусениц тутового шелкопряда на ИПС. Изучались особенности развития гусениц в разных режимах температуры и влажности. Установлено, что температура +24*С, оптимальная при разведении гусениц на естественном корме - листе шелковицы, является оптимальной и для развития гусениц на искусственном корме. При более низких температурах роста и развитие шелкопряда замедлялись, а повышение температуры приводило к гибели насекомых. Показано, что оптимальной для развития гусениц на ИПС является влажность воздуха 70-80 %, биологические показатели при этом режиме были высокими и составили: выживаемость гусениц рт 84,3± б, до 86,2±4,3 %, продолжительность развития гусениц до V-ro возраста- от 22,3+1,5 до 22,8+2,1 суток.

3.3. Особенности использования гусениц тутового шелкойряда для наработки спор микроспоридий рода Vairimorpha.

Для заражения гусениц тутового шелкопряда использовали микроспоридий Vairimorpha antheraeae, выделенных из дубового шелкопряда, и Vairimorpha sp., выделенных из озимой совки. Установлено, что гусеницы тутового шелкопряда заражаются этими несвойственными им видами микроспоридий, общий характер заболевания и последовательность заселения органов и тканей сходны с описанными ранее (Симчук, 1981; Елфимова, 1985; Ефименко, 1989), т.е. сперва паразиты рода Vairimorpha локализуются в жировом теле, где споры обнаруживаются на 6-е сутки после заражения, на 12-е сутки после заражения микроспоридии заселяют остальные органы и ткани. Через 15 суток после заражения погибает 6065% гусениц.

Определены также условия содержания насекомых, обеспечивающие оптимальный выход спор микроспоридий. Опыты показали что, для заражения рекомендуется использовать гусениц тутового шелкопряда ГУ-го возраста, при пер-

Таблица 2

Основные биологические показатели роста и развития гусениц тутового шелкопряда и выход спор микроспоридии У.апШегаеае на модифицированных ИПС

Номер : Выживаемость гусениц: Средняя продолжительность: Средняя масса гусениц : Продуктивность

среды : У-го возраста, % : развития гусениц до У-го : У-го возраста после : микроспоридий,

: ( Х± Б* ) : возраста, сутки (Х± вх ) : линьки, мг (Х±Бх) :млн. спор на

: : : гусеницу (Х±8х)

3 65,2±1,2 36,4±1,3. 502,4±2,2 46,6± 1,8

3"А" 72,3±0,8* 30,2±1,4* 550,5±7,1* 54,0±2,3*

6 36,7±3,4* 28,6±1,7* 543,0±6,2* 48,0±1,4

7 39,0±2,3* 27,6±2,2* 563,0±4,5* 89,0±3,7*

8 50,1±2,5 24,3 ±2,4* 592,0±2,1» 110.0±8,2*

9 75,7±1,9* 22,2±2,6* 628,0±5,3* 230,0±8,8*

10 65,4±0,8* 23,0±0,2* 620,9±3,4* 85,0±4,0*

11 48,3±1,2* 22,5±0,б* 600,0±8,2* 120,0±10,2*

12 23,4±0,5* 23,2±0,3* 600,2±5,5* 140,0±15,3*

XX

мпроль) 50,9±0,4 36,3±0,3 500,2±3,4 41,6±0,5

Примечание: *- существенные различия между сравниваемыми вариантами и контролем

вичной дозе заражения - 2,5 тыс. спор на гусеницу. Температура, оптимальная для

развития шелкопряда, обеспечивала и высокий выход спор патогенов. Аналогичные данные были получены и со вторым видом микроспоридий. Для дальнейшей наработки нами была выбрана микроспоридия Vairimoipha antheraeae, как заражающая более широкий круг насекомых-хозяев (Симчук, 1981; Соколова, 1990).

Было изучено влияние состава ИПС на продуктивность микроспоридий. Показано, что использование подсолнечного шрота в составе ИПС увеличивало выход спор V.antheraeae - продуктивность микроспоридий достигала 54 млн. спор на гусеницу, что подтверждало точка зрения о том, что включение в среду для насекомых- хозяев белковых компонентов со стимулиругонпгм действием активизировало спорообразование у микроспоридий (Мельник, 1978; Peroutka, Cinar, 1978). Продуктивность микроспоридий также значительно возрастала при увеличении в ИПС количества белковых компонентов и целлюлозы и при сокращении содержания антисептиков и антибиотиков (см. табл.2). Выход спор микроспоридий составлял в данном случае 120-230 млн. спор на гусеницу. 3.4. Особенности использования гусениц тутового шелкопряда для наработки энтомопатогенных нематод рода Steinernema»

Предварительные испытания показали, чю гусеницы тутового шелкопряда заражаются этими нематодами. Доля насекомых, зараженных нематодами, составляла 80,8% от общего количества погибших гусениц. Как свидетельствуют выполненные нами исследования, выход нематод определяется главным образом начальной дозой инвазии и возрастом гусениц, используемых для заражения (табл.3). Максимальный выход паразитов составил 25 тыс. нематод на одно насекомое при оптимальной дозе заражения 90 нематод на одну гусеницу (см. табл.3). Это не вполне согласуется с данными других авторов, которые пишут, что с возрастом устойчивость насекомых к неоаплектанам увеличивается, и одновременно растет число гусениц, в которых нематоды не развиваются из-за размножения чужеродной микрофлоры (Блинова, Иванова, 1980). По нашим данным, в гусеницах тутового шелкопряда старших возрастов создаются наиболее благоприятные условия для развития микропопуляции нематод.

Таблица 3

Влияние возраста гусениц тутового шелкопряда и начальной дозы инвазии на продуктивность энтомопатогенных нематод

Возраст гусениц : Выход нематод (тыс. особей) на 1 гусеницу при дозе заражения

: 90 нематод : 120 нематод : 180 нематод

II III-IV V 8 11 25 8 11 16 6 8 12

Н С ^0,05 0,6

Глава 4. Лабораторные и полевые испытания энтомопатогенных микроспоридий, нематод и биологически активных веществ (БАВ) природного происхождения.

4.1. Лабораторные и полевые испытания энтомопатогенных организмов против основных вредителей пасленовых культур.

Проведенные нами испытания показали, что гусеницы хлопковой совки заражаются микроспоридиями V.antheraeae, размноженными на несвойственном хозяине - шелкопряде. Для массовой наработки спор микроспоридий рода Vairimor-pha это является весьма важным, т.к. в ряде случаев при длительном культивировании патогена на несвойственном хозяине может произойти утрата патогенности для основного хозяина (Кольчевская, 1987; Кольчевская, Исси, 1987). Общая картина и характер заболевания сходны с описанными нами ранее (см. раздел 3.3-)-Максимальная гибель гусениц наблюдалась через 15 дней после заражения и составляла 70,7% для гусениц младших и средних возрастов и 55,5% для гусениц старших возрастов.

В лабораторных условиях нематоды Steinemema carpocapsae были испытаны против личинок колорадского жука и крымского щелкуна, гусениц хлопковой совки и картофельной моли. Все перечисленные виды вредителей заражались нематодами. Сроки гибели насекомых составляли для гусениц и личинок младших возрастов 1-3 суток, для личинок и гусениц средних возрастов 1-4 суток. В боль-

шей степени подвержены заражению гусеницы картофельной моли. Насекомых, в которых были обнаружены нематоды составляли 95,6-98,3%. В меньшей степени заражались личинки крымского щелкуна - 65,8-70,2%. В целом, биологическая эффективность знтомопатогенных нематод была выше против чешуекрылых вредителей - картофельной моли и хлопковой совки (она составляла для хлопковой совки - 76,3+1,2-88,'4±4,5 %; для картофельной моли - 83,3±3,6-97,2±4,3 %), чем против жесткокрылых вредителей (эффективность нематод для колорадского жука - 75,4±2,2-76,6±2,3 %; для крымского щелкуна - 60,3±4,3-70,3±1,5 %).

В полевых условиях (табл.4) нематоды были испытаны против колорадского жука и хлопковой совки, микроспоридии У.апШег^еае против хлопковой ссвки. Обработку против колорадского жука проводили в третьей декаде мая, когда жук находился на стадии личинок младшего-среднего возраста. Обработку против хлопковой совки проводили во второй - начале третьей декады августа, когда гусеницы находились на стадии средних-старших возрастов. Эффективность нематод против колорадского жука через 3 суток составила 72,3% против личинок младших возрастов и 61,4% против личинок среднего возраста, для хлопковой совки эффективность нематод равнялась 66,6% для гусениц средних возрастов и 50% для гусениц старших возрастов. Зараженность нематодами была такой же, как и в лабораторных условиях, т.е. - 65,6-80,0%. Споры микроспоридий обнаружены в 80% гусениц. После применения микроспоридий гусеницы начали погибать лишь через 5-6 суток. Гибель насекомых от микроспоридий составила через 15 суток 60-61,5%. Полученные нами результаты можно объяснить тем, что нематоды не успевают заразить большее число личинок и гусениц вредителей из-за своей высокой чувствительности к колебаниям температуры и влажности. Для микроспоридий же, которые более устойчивы к условиям внешней среды (Исси, 1986,1994), характерен длительный процесс развития в насекомом и трансовари-альная передача инвазии, т.е. наибольший эффект от применения простейших может наблюдаться в следующем поколении. Это согласуется с данными полевых испытаний микроспоридий Ефименко на сахарной свекле, когда во втором поколении озимой совки происходила массовая гибель насекомых (Ефименко,1989).

Эффективность энтомопатогенных организмов против основных вредителей пасленовых культур в полевых условиях (1994-98 гг.)

Таблица'Ц

Вариант:-:-■—

опыта- : Биологическая

: эффективность,%

Колорадский жук

Хлопковая совка

: для мла-:для сред-: : дшего : него : : возраста : возраста:

Поврежден- : Урожайность ность листь- : картофеля, ев, % : ц/га

Биологическая : Урожайность эффективность,% : томатов, -: ц/га

для среднего :дпя старших: возраста ¡возрастов :

Нематоды

$1етегпета 72,3 61,4

сагросархае

Микроспоридии

УаттогрЬа -

апЛегаеае

Эталон

(фастак) 86,2 78,9 Контроль (без обработки)

15,0

8,7 55,6

135,2 66,6 50,0

61,5

50,0

140,8 94,4

91,4 90,3

78,3

Н С Р

0,05

5,3

«6

10,1

29,1

8,6

4.2. Изучение возможности совместного применения энтомопатогенных организмов, БАВ природного происхождения и энтомофагов, В настоящее время достаточно широко изучается инсектицидная активность БАВ природного происхождения, содержащихся в эфирном масле кориандра. Некоторые компоненты эфирного масла были испытаны против вредных насекомых и клещей (Каклюгин и др., 1994). Кубовые остатки, обладающие акарицид-ной и инсектицидной активностью, получили название '.'Биостат".

Изучение возможности комплексного использования нематод 51етегпета саг-росарБае, препарата "Биостат" и инсектицидов: дециса, каратэ и "Суми -Альфа" проводили по следующей методике: каплю суспензии, содержащей определенное количество нематод, помещали на предметное стекло с углублением, сюда же добавляли раствор препарата "Биостат" в виде водной эмульсии в концентрации 0,001, 0,01 и 0,1% по д.в., и инсектицидов в концентрации 0,0001, 0,001,0,01, 0,1 и 1% по д.в. В контроле к суспензии нематод добавляли каплю дистиллированной воды. Предметные стекла, содержащие нематод и "Биостат", помещали в чашки Петри таким образом, чтобы на них попадал солнечный свет. Количество живых и погибших нематод определяли через 1, 3 и 7 дней после обработки, одновременно отмечали время, через которое капли начинали подсыхать. Предметные стекла, содержащие неоаплектан и пестициды, для предотвращения высыхания помещали в затемненный термостат. Количество живых и погибших нематод определяли через 1 и 3 суток.

Результаты исследований показали что, использование "Биостата" обеспечивало более длительную сохранность нематод. При добавлении препарата в концентрации 0,01% выживаемость нематод через 7 суток составляла 35,1+2,0 %, в то время как контрольный образец подсох через 1 сутки, т.е. очевидно, что "Биостат" можно использовать как стабилизирующую и антидесикантную добавку к суспензии энтомопатогенных нематод. При добавлении к нематодам вышеперечисленных инсектицидов их выживаемость на 3-й сутки была на уровне контрольной и составляла 82,3-100,0 %, что показывает возможность комплексного применения З.сагросарБае и пестицидов.

Т5

При определении возможности совместного использования нематод и энтомо-фагов колорадского жука и хлопковой совки - хищного клопа подизуса и габроб-ракона было установлено, что нематоды Б.сафосарвае заражают и подизуса, а габробракон не размножается в гусеницах, зараженных нематодами.

4.3. Лабораторные и полевые испытания БАВ природного происхождения в сочетании с энтомопатогенными нематодами и самостоятельно.

Результаты лабораторных исследований показали высокую эффективность "Биостата" против картофельной моли и хлопковой совки 66,8-75,9 %. "Биостат" проявил также значительную овицидную активность против картофельной моли и колорадского жука - 83,6-91,3 %. Инсектицидного действия в отношении колорадского жука нами не выявлено, хотя есть публикации (Каклюгин и др., 1994) о том, что одна из фракций "Биостата", а именно/-терпениол, обладает высокой активностью против личинок колорадского жуха. В полевых условиях эффективность "Биостата" была значительно ниже - овицидного действия против колорадского жука не выявлено, а эффективность против хлопковой совки составила 50%.

"Биостат" был испытан в лабораторных и полевых условиях в сочетании с нематодами. Препаративную форму готовили следующим образом: к суспензии нематод с титром 13,4 тыс. особей в 1мл добавляли 1/10 часть по объему водной эмульсии препарата с концентрацией по д.в. 0,01%. Как показали наши исследования, биологическая эффективность нематод возрастала как в лабораторных, так и в полевых опытах (табл.5). В лабораторных условиях она составляла для личинок колорадского жука - 84,4%, для гусениц картофельной моли - 93,4%, хлопковой совки - 76,6%. В полевых условиях активность применяемой препаративной формы также была значительно выше, чем эффективность отдельного нематодного препарата, и составила для личинок колорадского жука - 78,6%, а для гусениц хлопковой совки - 80,0%. Кроме того, препаративная форма более длительное время (3-4 суток) сохранялась на плодах и листьях растений.

Нематоды использовались в полевых условиях против колорадского жука и в сочетании с пиретроидом "Суми-Альфа" (расход в опыте 0,02 л/га). Норма расхода суспензии нематод - Юл/га. Расход рабочей жидкости 300 л/га. Эффективность

Таблица 5

Эффективность совместного применения энтомопато генных нематод и препарата "Биостат" против основных вредителей пасленовых культур в лабораторных и полевых условиях (1996-98гп)

Вариант : Лабораторные условия Полевой опыт

Количество гусениц (личинок): Биологиче-: Количество гусениц (личинок) на 25 (1): Биологи: в опыте, экз._: екая эффек-: растениях, экз.__: ческая

:до обработки: после обработки, тивность, : до обработки: после обработки : эффектив-

: : : % : : : ность, %

Колорадский жук

нематоды +

"Биостат" 90,0 5,0 84,4 25,8 4,2 78,6

нематоды ' 100,0 25,0 65,0 26,2 8,8 62,8

контроль 100,0 90,0 - 25,3 24,3 -

Н С Р 0 05 2,5 5,6

Хлопковая совка

нематоды+

"Биостат" . 15,0 2,0 76,6 1,5 0,3 80,0

нематоды 12,0 3,0 65,0 2,2 0,8 63,8

контроль 10,0 9,0 - 2,2 2,2 -

Н С Р0 05 7,2 15,2

Картофельная моль

нематоды+

"Биостат" 44,0 0 93,4 - - -

нематоды 24,0 4,0 76,3 - - -

контроль 30,0 28,0 - - - -

НС Рад, 12,3

Т7

применяемой смеси составила 82,1%, в то время как эффективность одних нематод - 71,3%, т.е. использование их в комплексе с пиретроидами возможно.

4.4. Производственные испытания энтомопатогенных организмов против основных вредителей томатов,

Производственные испытания энтомопатогенных нематод рода $1ешегпета проводили в июле 1998 года на базе ОАО "Суворовское" Усть-Лабинского района Краснодарского края. Погодные условия этого года были крайне неблагоприятными для применения биопрепаратов и выпуска энтомофагов: среднесуточные температуры значительно превышали среднемесячные значения и составляли +35-38°С при полном отсутствии осадков. Поврежденность томатов хлопковой совкой была высокой и составляла в среднем 270 плодов на 100 кустах (66,6 % вредителя - гусеницы среднего возраста, 33,3% вредителя - гусеницы старшего возраста), что в несколько раз превышало экономический порог вредоносности. Против хлопковой совки в хозяйстве провели одну обработку лепидоцидом (за 5 дней до проводимой нами обработки), однако, она не дала необходимого результата (табл.6).

Суспензией нематод обработали 1 га занимаемой площади, остальные 4 га были вторично обработаны лепидоцидом. Учет численности вредителя и повреж-денности томатов проводили согласно принятым методикам: на 10 кустах в 10 удаленных друг от друга участках. Норма расхода нематодного препарата - 10 л/га, норма расхода лепидоцида - 2 кг/га. Обработки проводили штанговым опрыскивателем. Как видно из данных таблицы 6, применение нематод значительно снизило уровень поражения томатов хлопковой совкой. Эффективность нематод составила 77,7%, в то время как эффективность двукратных обработок лепидоцидом не превысила 55,5%. Через 20 дней после обработки на опытном участке обнаруживались преимущественно гусеницы младшего возраста уже третьего поколения, которые повреждали в основном мелкие плоды. На эталонном же участке были выявлены гусеницы всех возрастов, повреждавшие плоды различного размера. Применение нематод снизило количество поврежденных томатов с товарным видом с 70% до 19,2% (в эталоне этот показатель составил 29,3%). Урожайность на опытном участке также достоверно превышала эталонную (табл.6). При-

Результаты производственных испытаний энтомопатогенных нематод против хлопковой совки на томатах (ОАО "Суворовское" июль-август 1998)

Таблица б

Фитосанитарное состояние томатов

: после обработки

Вариант: до обработки опыта : Количество поврежденных: количество поврежденных : Биологическая : Урожайность : плодов на 100 растений, штук, : плодов на 100 растений, штук,: эффективность, : томатов, : : втом числе товарного вида,: :в том числе товарного вида: % : ц/га I

! : % : : % : :

Суспензия нематод 270 (Юл/га)

Лепидоцид (2 кг/га) 270

70

70

65

160

1 9,2

29,3

77,7

55,5

85,0

68,0

Н С Р

0,05

18,1

2,7

10,0

бавка урожая составила 20%. Таким образом, можно сказать, что использование энтомопатогенных нематод против гусениц хлопковой совки на томатах в комплексе с лепидоцидом позволяет контролировать численность вредителя на этой культуре.

ВЫВОДЫ

1. В процессе исследований разработаны отечественные искусственные пищевые среды (ИПС) для массового разведения гусениц тутового шелкопряда. Эти ИПС отличаются простотой как простотой состава, так и способами приготовления при относительно невысокой стоимости компонентов, они обеспечивают нормальный рост и развитие гусениц в течение всего преимагинального периода. 2. Оптимальными параметрами гигротермического режима развития гусениц тутового шелкопряда на ИПСявляются: температура +24° С и влажность воздуха -70-80%. Основные биологические показатели роста и развития гусениц на модифицированных ИПС при соблюдении установленных параметров разведения составили: выживаемость гусениц У-го возраста - 65,4+1,2-75,7+1,8 %; продолжительность развития гусениц до У-го возраста - 22,2+2,6-24,3±2,4 суток.

3. Гусеницы тутового шелкопряда, выращенные на ИПС, восприимчивы к заражению микроспоридиями рода УаттогрЬа и нематодами рода 81етегпета. Оба паразита проходят в несвойственном им хозяине полный цикл развития.

4. Успешное развитие микроспоридий в тутовом шелкопряде определяется условиями содержания гусениц, в основном, температурным фактором, одинаково оптимальным и для хозяина, и для паразита. Другими факторами, влияющими на развитие патогена, являются возраст хозяина (максимальный выход спор при заражении гусениц старшего 1У-го возраста) и начальная доза инвазии , равная 2,5 тыс. спор на гусеницу). Продуктивность микроспоридий (интенсивность заражения) зависит также от состава ИПС, увеличение выхода спор микроспоридий происходит при увеличении уровня источников белка до 16% и целлюлозы до 3% и при уменьшении количества антисептических веществ и антибиотиков. Максимальный выход спор микроспоридий равнялся 140+15,3 млн. спор на гусеницу.

5. На интенсивность развития нематод наибольшее влияние оказывает возраст шелкопряда и начальная доза инвазии - при использовании гусениц У-го возраста

н при дозе заражения 90 нематод на гусеницу выход нематод является максимальным и составляет 25 тыс. особей на гусеницу. Стоимость наработки нематод, необходимых для обработки 1га сельскохозяйственных культур по разработанной нами технологии, составляет 40 руб.

6. Энтомопатогенные нематоды рода Steinernema в лабораторных условиях вызывали гибель основных вредителей пасленовых культур - колорадского жука, крымского щелкуна, картофельной моли и хлопковой совки. Биологическая эффективность составляла 60,0±4,3-97,2±4,3 %. Микроспоридии рода Vairimorpha, не снизившие патогенность для хлопковой совки после выращивания на несвойственном хозяине, вызывали гибель 55,5-70,0 % гусениц.

7. В полевых условиях биологическая эффективность нематод составляла: против колорадского жука - 61,4-72,3 %, против хлопковой совки - 50,0-66,6 %. Эффективность микроспоридий против хлопковой совки равнялась через 15 суток 50,0-61,5 %. Такие результаты можно объяснить тем, что нематоды не успевали заразить большее число личинок и гусениц вредителей из-за своей высокой чувствительности к колебаниям температуры и влажности, для микроспоридий же характерен длительный процесс заселения тканей хозяина и трансовариальная передача инфекции, поэтому наибольший эффект от применения простейших мы можем наблюдать лишь в следующем поколении. Таким образом, для борьбы с основными вредителями пасленовых культур мы можем рекомендовать использование этих организмов в комплексе с веществами, обладающими антидеси-кантным и стабилизирующим действием.

8. Совместное применение нематод с такими энтомофагами как габробракон и подизус показало, что нематоды оказались патогенными для хищного клопа по-дизуса, и в гусеницах, зараженных нематодами, не развивался габробракон, т.е. в полевых условиях желательно не совместное применение патогенов и энтомофа-гов, а их чередование.

9. В лабораторных и полевых условиях проведены испытания препарата " Био-стат". "Биостат" проявил себя как препарат, с антидесикантным действием. Выживаемость нематод в лабораторных условиях при добавке к их суспензии "Биостата" составила через 7 суток 35,1±2,0 %. В лабораторных условиях "Био-

стат" показал высокую овицидную 83,6% и инсектицидную активность 75,9 % против картофельной моли.

10. Эффективность нематод в полевых условиях увеличилась при их применении в комплексе с "Биостатом": для колорадского жука она достигла 78,1%, для хлопковой совки 80,0%. Таким образом, для борьбы с основными вредителями пасленовых культур мы мо^сем рекомендовать "Биостат" как антидесикантную добавку к препарату нематод. Нематоды также оказались совместимы с рядом пиретроидных препаратов. Эффективность смеси нематод в комплексе с "Суми-Альфа" против колорадского жука составила 82,1%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИЮ! Научно-исследовательским институтам, биолабораториям, занимающимся вопросами патологии насекомых и наработкой биопрепаратов, мы можем рекомендовать разработанную нами технологию наработки энтомопатогенных нематод и микроспоридий, состоящую из следующих этапов:

1) Инкубация грены тутового шелкопряда.

2) Приготовление ДОТС и содержание на ней гусениц при определенных условиях гигротермического режима. Необходимо учитывать, что для наработки спор микроспоридий ИПС для гусениц, должна отличаться от основной по ряду параметров.

3)3аражение насекомых при соблюдении оптимальных параметров и наработка на них организмов.

4) Выделение организмов.

В качестве защитных мероприятий по борьбе с основными вредителями пасленовых культур хозяйствам и картофелехранилищам мы можем рекомендовать:

А) Для борьбы с колорадским жуком и хлопковой совкой - обработку поврежденных растений суспензией нематод в комплексе с "Биостатом", или же чередование нематод с энтомофагами и биопрепаратами группы В.Липгщ1е1шз. Норма расходования суспензии нематод - 10 л /га или 134 млн. инвазионных личинок.

Б) Для борьбы с картофельной молью в хранилищах:

1) При появлении первых признаков повреждения клубней вредителем - об-

эр

Работку клубней суспензией нематод (из расчета 50-100 особей на клубень) или суспензией нематод с "Биостатом " (0,01 % по д.в.).

2) При подозрении на зараженность клубней - обработку "Биостатом " (0,1% по д.в.) для предотвращения отрождения гусениц.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1. Исси И.В., Пушня М.В., Агасьева И.О. Использование тутового шелкопряда в качестве насекомого- накопителя спор микроспоридий p.Vairimorpha/7 В сб.: Экологически безопасные и беспестицидные технологии получения растениеводческой продукции. Материалы Всероссийского научно- производственного совещания. Краснодар, 24-26 августа 1994г.Тез.докл.-Пущино,1994.-Ч.1.-С.140-143.

2. Агасьева И.С., Пушня М.В. Культивирование энтомопатогенной нематоды Neoaplectana carpocapsae на различных насекомых-хозяевах // Там же.- С. 144-146.

3. Пушня М.В., Агасьева И.С., Каклюгин В.Я., Исмаилов В.Я. Испытание фракций эфирного масла кориандра и энтомопатогенных нематод в борьбе с картофельной молью// В сб.: Экологизация сельскохозяйственного производства Северо-Кавказского региона. Тез.докл. семинара- совещания.-Анапа,1995.-С.133-134.

4. Агасьева И.С., Пушня М.В., Исмаилов В.Я. Использование тутового шелкопряда как насекомого- накопителя энтомопатогенных микроорганизмов// Там же,- С.133-134.

5. Агасьева И .С., Пушня М.В., Исмаилов В.Я. Разработка новых препаративных форм энтомопатогенных нематод// В сб.: Эколого-экономические основы усовершенствования интегрированных систем защиты растений от вредителей, болезней и сорняков. Тез.докл. научно- производственной конференции. Минск-Прилуки, 14-16 февраля 1996г.-Минск,1996.-Ч.1.-С.250-252.

6. Пушня М.В., Агасьева И.С., Каклюгин В.Я., Исмаилов В.Я. Биологически активные вещества против основных вредителей овощных культур// В сб.: Защита овоще- бахчевых культур и картофеля от вредителей и болезней. Тез. докл. научно- практической конференции. Тирасполь, 23-26 июля 1996г.-Тирасполь,1996.-С.206-208.

7. Пушня М.В., Агасьева И.С., Исмаилов В .Я. Новые препаративные формы энтомопатогенных нематод// Защита растений.-1997.-№1.-С.46-47.

8. Агасьева И.С., Пушня М.В., Исмаилов В.Я. Выращивание гусениц тутового шелкопряда на искусственной пищевой среде (ИПС) для накопления энтомопатогенных микроорганизмов//В сб.: Производство экологически безопасной продукции растениеводства. Региональные рекомендации. Вып.З.-Пущино,1997.-С.175-178.

9. Пушня М.В., Исмаилов В.Я. Наработка и испытания энтомопатогенных организмов для регулирования численности вредителей пасленовых культур// В сб.: Актуальные проблемы биологической защиты растений. Материалы научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Т.Т. Без-денко.-Минск, 1998.-С.94-95.

10. Исмаилов В .Я., Ширинян Ж. А., Пушня М.В., Агасьева И.С. Использование энтомоакарифагов и энтомопатогенных организмов в биозащите сельскохозяйственных культур // Информационный листок № 93-99.-Краснодарский ЦНТИ. -1999.-4с.

11. Пушня М.В. Использование энтомопатогенных нематод в биозащите пасленовых культур// Информационный листок № 2 03 . Краснодарский ЦНТИ.-1999.-Зс.

12. Пушня М.В., Исмаилов В .Я. Разработка препаративных форм энтомопатогенных нематод на основе биологически активных веществ// В сб. Биологически активные вещества в защите и карантине растений. Материалы симпозиума. Анапа, 30 августа- 4 сентября 1999 г.-С.Петербург,1999.-С.56-57.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пушня, Марина Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ПРОИЗВОДСТВО И ПРИМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДСТВ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ НА ОСНОВЕ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ ОРГАНИЗМОВ И НАСЕКОМЫХ-НАКОПИТЕЛЕЙ литературный обзор).

1.1. Особенности разведения чешуекрылых на искусственных пищевых средах.

1.2. Возможности применения микроспоридий в защите растений. Особенности получения спор микроспоридий.

1.3. Особенности получения и применения энтомопатогенных нематод.

1.4. Биологические средства защиты растений против основных вредителей пасленовых культур.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика объектов исследования.

2.2. Методика выращивания гусениц тутового шелкопряда на искусственной пищевой среде.

2.3. Заражение насекомых-хозяев.

2.4. Получение инвазионного материала.

2.5. Светооптические методы исследования энтомопатогенов.

2.6. Проведение испытаний энтомопатогенов.

Глава 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДА МАССОВОГО РАЗВЕДЕНИЯ НА ИСКУССТВЕННОЙ ПИЩЕВОЙ СРЕДЕ (ИПС) ГУСЕНИЦ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА КАК НАСЕКОМОГО- НАКОПИТЕЛЯ

ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ ОРГАНИЗМОВ.

3.1 .Разработка оптимальных рецептур ИПС.

3.2. Разработка технологии разведения гусениц тутового шелкопряда на ИПС.3*; •

3.3. Особенности использования гусениц тутового шелкопряда для наработки спор микроспоридий рода УаштогИа.5 б

3.4. Особенности использования гусениц тутового шелкопряда для наработки энтомопатогенных нематод рода 81етегпета.

ГЛАВА 4. ЛАБОРАТОРНЫЕ И ПОЛЕВЫЕ ИСПЫТАНИЯ МИКРОСПОРИДИЙ, НЕМАТОД И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ (БАВ) ПРИРОДНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ.

4.1. Лабораторные и полевые испытания энтомопатогенных организмов против основных вредителей пасленовых культур.'

4.2. Изучение возможности совместного использования энтомопатогенных организмов с БАВ природного происхождения и энтомофагами.'

4.3 Результаты лабораторных и полевых испытаний БАВ природного происхождения в сочетании с энтомопатогенными нематодами и самостоятельно.

4.4. Производственные испытания энтомопатогенных организмов против основных вредителей томатов.

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Технология получения энтомопатогенных микроспоридий и нематод и их применение для защиты пасленовых культур"

Характерной особенностью современного подхода к защите растений является целенаправленное использование всего многообразия средств и методов экологизированной защиты растений. Различные методы, разработанные наукой и внедренные в сельскохозяйственное производство, позволяют сократить применение традиционных пестицидов (Соколов, Захаренко, 1995).

Значительное место в арсенале биологических средств защиты растений принадлежит энтомопатогенным организмам, среди которых все большее внимание уделяется паразитическим нематодам и микроспоридиям. В литературе описано огромное количество эпизоотий в природных популяциях вредителей, вызываемых этими энтомопатогенами (Вейзер, 1972; Сандлер, 1974; Canning, 1981, 1982 а, Ь). Однако на практике использование этих организмов ограничивается рядом весьма существенных факторов: температурой окружающей среды, наличием или отсутствием капельно-жидкой влаги, характером листовой поверхности, инсоляцией, этологическими особенностями вредных членистоногих (Вейзер, 1972; Исси, 1994). Кроме того, необходимо учитывать, что действие микроспоридий, например, может проявиться лишь в следующем поколении т.е. оценку эффективности этих энтомопатогенов нельзя вести по тем же критериям, по которым учитывается биологическая эффективность остальных биопрепаратов (Исси, 1986, 1994; Canning, 1982 а, Ь). Рядом исследователей подчеркивается, что и нематоды и микроспоридии могут сохраняться в биоценозе в той или иной форме - либо в виде сложно устроенных спор, способных длительно существовать во внешней среде и поддерживать благодаря наличию различных способов трансформирования свою популяцию в популяции насекомых- хозяев - как это происходит с микроспоридиями (Исси, 1986,1994;Canning, 1982ab, Henry, 1985), либо мигрировать в более глубокие слои почвы - как это происходит с нематодами (Simons, Poinar, 1973). Нужно принимать во внимание и тот факт, что существуют ситуации, когда эти организмы нельзя заменить на бактериальные или химические препараты: при маесовом размножении скрытоживущих насекомых (Исси, 1985); при возникновении устойчивых к инсектицидам и бактериальным препаратам популяций насекомых (Canning, 1981, 1982ab), при необходимости получения долговременного эффекта. К тому же на данном этапе, когда большинство хозяйств практически не имеет средств для приобретения дорогостоящих пестицидов, применение энтомопатогенных организмов оправдано экономически.

В Канаде, Чехии и США разработаны и испытаны в полевых условиях лабораторные образцы микроспоридиальных биопрепаратов против чешуекрылых вредителей, результаты испытаний были вполне удовлетворительными. В США налажено первое промышленное производство микроспоридиальных препаратов "Нолок", затем "Нолобайт". Оба препарата имеют в качестве действующего начала споры микроспоридий, выделенных из азиатской саранчи. Препарат был испытан против кобылок на пастбищах крупного рогатого скота и действовал на кобылок в течение трех лет (Вейзер, 1972; Исси, 1994; Henry, 1987; Li Тао et al.,1994)

Достигнуты также практически значимые результаты в использовании энтомопатогенных нематод - в садоводстве, в первую очередь в борьбе со скрытно живущими вредителями ветвей, стволов и плодов (смородинная, малинная и яблонная стеклянницы, древесница въедливая, древоточцы, плодожорки, моли, огневки, яблонный пилильщик), а также с почвенными вредителями (корневые долгоносики, хрущи и т.д.) и саранчовыми (Данилов, Карпова, 1990,1994; Васильева-Некрасова, Метлицкий, 1997). Имеются и значительные успехи в использовании нематод и против основных вредителей пасленовых культур (колорадский жук и т.д.) (Иванова, Боровая, 1994; Иванова и др., 1994).

Во многом разработка препаратов на основе микроспоридий и нематод сдерживается из-за отсутствия линий по массовому разведению насекомых-накопителей. Существенным моментом в создании таких линий является правильный выбор насекомого-хозяина, на котором и будет осуществляться наработка энтомопатогенов. Как чрезвычайно удобная питательная среда для развития нематод и микроспоридий рассматривается в последнее время тутовый шелкопряд (Георгадзе, 1990; Хлистовский, 1990), собственно изучение болезней насекомых было начато с описания пебрины у тутового шелкопряда Л.Пастером в прошлом веке. Имеются данные о том, что возбудитель нозематоза у тутового шелкопряда патогенен для ряда совок и белянок, кольчатого шелкопряда (Кашкарова, Хаханов,1981). Установлено, что из 1 кг гусениц можно получить протозойный препарат, достаточный для обработки 20 га сельскохозяйственных культур. Выявлено, что и некоторые другие микроспоридии, выделенные из тутового шелкопряда и не столь патогенные, как Nosema bombycis, вызывают микроспоридиозы у совок (Yong-jn Wan et al., 1994 a, b). Как показали предварительные исследования, тутовый шелкопряд является восприимчивым к ряду микроспоридий, выделенных из дубового шелкопряда и других чешуекрылых (Хлистовский, 1990; Shen Zhong-yong et al., 1994). Возможность использования тутового шелкопряда как насекомого-накопителя эн-томопатогенных микроорганизмов обуславливается и тем, что на современном этапе созданы как у нас в стране, так и за рубежом искусственные питательные среды для круглогодичного разведения насекомого, позволяющие получать однородный биологический материал (Злотин,1989; Хлистовский, 1990; Аг-ilie,1975). При разведении шелкопряда для получения биопрепаратов необходимо обращать внимание и на тот факт, что при выращивании на искусственном корме у насекомых может повышаться устойчивость к ряду патогенов (Чил-Акопян и др., 1988; Agnus, Norris,1968), т.е. среды, обеспечивающие накапливание патогенов, должны отличаться по составу от сред для разведения маточной культуры.

Цель настоящей работы: разработать технологию наработки энтомопато-генных микроспоридий и нематод на гусеницах тутового шелкопряда, выращиваемых на искусственной пищевой среде (ИПС) и оценить перспективы использования этих энтомопатогенов для защиты пасленовых культур от основных вредителей.

В ходе исследований решались следующие задачи:

1. Разработать технологию массового разведения тутового шелкопряда на искусственной пищевой среде с усовершенствованным составом, обеспечивающим оптимальное развитие гусениц в преимагинальный период.

2. Установить возможность и условия заражения гусениц тутового шелкопряда нематодами рода 81етегпета и микроспоридиями рода УаттогрИа и способность накапливания в них инвазионного материала в необходимом количестве.

3. Определить влияние на патогенность развивающихся в тутовом шелкопряде микроспоридий и нематод условий разведения на нецелевом хозяине.

4. Изучить влияние условий содержания шелкопряда и состава ИПС на продуктивность микроспоридий и нематод и разработать оптимальные рецептуры ИПС и технологию выращивания насекомых.

5. Провести лабораторные и полевые испытания энтомопатогенов против основных вредителей пасленовых культур - колорадского жука, хлопковой совки, картофельной моли, проволочников и др.

6. Оценить возможность использования энтомопатогенов для защиты пасленовых культур как самостоятельно, так и в комплексе с биологически активными веществами и пестицидами.

Новизной исследования является следующее:

- до настоящего времени тутовый шелкопряд рассматривался преимущественно как объект для получения шелка. Наработка энтомопатогенных организмов на данном объекте до настоящего исследования практически не осуществлялась. Впервые разработанные ИПС обеспечивали как оптимальное развитие гусениц в течение всего преимагинального периода, так и оптимальное развитие энтомопатогенов.

- в результате культивирования на несвойственном хозяине нематоды и микроспоридии не утратили своей инвазионной способности, и вызывали заболевания в лабораторных и полевых условиях у основных вредителей пасленовых культур, и как показали дальнейшие исследования, энтомопатогенные нематоды и микроспоридии способны подавить развитие вредителей при их своевременном использовании.

- созданы препаративные формы биопрепарата на основе нематод с добавкой биологически активных веществ.

- доказана совместимость нематод с пестицидами и обосновано их совместное применение в интегрированной защите растений.

Для внедрения в производство мы можем предложить технологию массового разведения гусениц тутового шелкопряда и наработки на нем энтомопато-генных нематод и микроспоридий, а также методы применения нематод в комплексе с биологически активными веществами природного происхождения и пестицидами против основных вредителей пасленовых культур.

Основные положения и результаты исследований были доложены: на Всероссийском научно-производственном совещании "Экологически безопасные и беспестицидные технологии получения растениеводческой продук-ции"(Краснодар, 24- 26 августа 1994 г.), на семинаре-совещании "Экологизация сельскохозяйственного производства Северо-Кавказского региона (Анапа, 1995г.), на научно-практических конференциях "Эколого-экономические основы усовершенствования интегрированных систем защиты растений от вредителей, болезней и сорняков"(Минск-Прилуки,14- 16 февраля 1996 г.) и "Защита овоще-бахчевых культур от вредителей и болезней (Тирасполь, 23- 26 июля 1996 г.), на международном научном симпозиуме "Использование феромонов и других биологически активных веществ в защите и карантине растений" ( Анапа, 30 августа - 4 сентября 1999 г.).

Автор защищает следующие основные положения диссертационной работы:

- технологию наработки на гусеницах тутового шелкопряда энтомопато-генных микроспоридий и нематод;

- способы применения энтомопатогенных организмов против основных вредителей пасленовых культур как самостоятельно, так и в комплексе с биологически активными веществами и пестицидами.

По результатам исследований опубликовано 12 работ в виде статей, тезисов и рекомендаций, отражающих основное содержание диссертации.

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Пушня, Марина Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В процессе исследований разработаны дешевые отечественные искусственные пищевые среды (ИПС) для массового разведения гусениц тутового шелкопряда. Эти ИПС отличаются как простотой состава, так и способами приготовления при относительно невысокой стоимости компонентов, они обеспечивают нормальный рост и развитие гусениц в течение всего преимаги-нального периода.

2. Оптимальными параметрами гигротермического режима разведения гусениц на ИПС являются температура +24° С и влажность воздуха - 70-80 %. Основные биологические показатели роста и развития гусениц на модифицированных ИПС при соблюдении установленных параметров разведения составили: выживаемость гусениц У-го возраста - 65,4 +1,2-75,7± 1,8 %; продолжительность развития гусениц до У-го возраста - 22,2+2,6-24,3+2,4 суток.

3. Гусеницы тутового шелкопряда, выращенные на ИПС, восприимчивы к заражению энтомопатогенными микроспоридиями рода УаштогрЬ.а и нематодами рода 81етегпета. Оба паразита проходят в несвойственном хозяине полный цикл развития.

4. Успешное развитие микроспоридий в тутовом шелкопряде определяется условиями содержания гусениц; в основном, температурным фактором, одинаково оптимальным и для хозяина, и для паразита. Другими факторами, влияющими на развитие патогена, являются возраст хозяина (максимальный выход спор при заражении гусениц ГУ-го возраста) и начальная доза инвазии (равная 2,5тыс. спор на гусеницу). Продуктивность микроспоридий (интенсивность размножения) зависит также от состава ИПС, увеличение выхода спор микроспоридий происходит при увеличении уровня источников белка до 16 % и целлюлозы до 3 % и при уменьшении количества антисептических веществ и антибиотиков, максимальный выход микроспоридий был равен 140,0±15,3 млн. спор на гусеницу.

5. На интенсивность развития нематод наибольшее влияние оказывает возраст шелкопряда и начальная доза инвазии- при использовании нематод гусениц V-ro возраста при дозе заражения 90 нематод на гусеницу, выход нематод является максимальным и составляет 25тыс. особей на гусеницу. Стоимость получения нематод, необходимых для обработки 1га пасленовых культур, по разработанной нами технологии, составляет 40 руб.

6. Энтомопатогенные нематоды p.Steinernema в лабораторных условиях вызывали гибель основных вредителей пасленовых культур - колорадского жука, крымского щелкуна, картофельной моли и хлопковой совки. Биологическая эффективность составляла от 60,0 до 97,2 %. Микроспоридии p.Vairimorpha также не снизившие патогенность для хлопковой совки после выращивания на несвойственном хозяине, вызывали гибель 55,5-70,0 % гусениц.

7. В полевых условиях биологическая эффективность энтомонематод составляла: против колорадского жука 61,4-72,3 %, против хлопковой совки -50,0-66,6 %. Эффективность микроспоридий против хлопковой совки через 15 дней равнялась 50,0-61,5 %. Такие результаты объясняются тем, что нематоды не успевают поразить большее количество личинок и гусениц вредителей из-за своей высокой чувствительности к колебаниям температуры и влажности, для микроспоридий же характерен длительный заселения тканей хозяина и трансо-вариальная передача инвазии, поэтому эффект от применения простейших мы можем наблюдать лишь в следующем поколении. Таким образом, для борьбы с основными вредителями пасленовых культур мы можем рекомендовать использование этих организмов в комплексе с веществами, обладающими стабилизирующим и антидесикантным действием.

8. Совместное применение нематод с такими энтомофагами как подизус и габробракон показало что, нематоды оказались патогенными для хищного клопа подизуса, а в гусеницах, зараженных нематодами не развивался габробракон, т.е. в полевых условиях желательно чередование энтомофагов и энтомопа-тогенов.

9. В лабораторных и полевых условиях проведены испытания препарата "Биостат" в комплексе с энтомопатогенными нематодами и самостоятельно. "Биостат" проявил себя как препарат, обладающий антидесикантным действием. Выживаемость нематод в лабораторных условиях при его добавке к суспензии составила через 7 суток 35,1±2,0 %. В лабораторных условиях "Биостат" показал высокую овицидную 83,6% и инсектицидную 75,0% активность против картофельной моли.

10. Эффективность нематод в полевых условиях увеличилась при их применении в комплексе с "Биостатом": для колорадского жука она достигла 78,1%, для хлопковой совки 71,7%, таким образом, для борьбы с основными вредителями пасленовых культур мы можем рекомендовать "Биостат" как ан-тидесикантную добавку к суспензии нематод. Нематоды оказались совместимыми с пиретроидными препаратами, их эффективность в смеси с " Суми-Альфа" против колорадского жука составила 82,1%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Научно- исследовательским институтам, биолабораториям, занимающимся вопросами патологии насекомых и наработкой биопрепаратов, мы можем рекомендовать разработанную нами технологию наработки энтомопатогенных нематод и микроспоридий, состоящую из следующих этапов:

1) Инкубация грены тутового шелкопряда.

2) Приготовление ИПС и содержание на ней гусениц при определенных условиях гигротермического режима. Необходимо учитывать, что для наработки микроспоридий ИПС для гусениц, начиная с Ш-го возраста должна отличаться от основной по ряду параметров.

3) Заражение насекомых при соблюдении оптимальных параметров и наработка на них организмов.

4) Выделение организмов.

В качестве защитных мероприятий по борьбе с основными вредителями пасленовых культур хозяйствам и картофелехранилищам мы можем рекомендовать:

А) Для борьбы с колорадским жуком и хлопковой совкой - обработку -поврежденных растений суспензией нематод в комплексе с "Биостатом" или же чередование нематод с энтомофагами и биопрепаратами группы В.Шиш^егшБ. Норма расхода суспензии нематод -10 л/га или 134 млн. инвазионных личинок

Б) Для борьбы с картофельной молью в хранилищах:

1) При появлении первых признаков повреждения вредителем - обработку клубней суспензией нематод (из расчета 50-100 особей на клубень) или суспензией нематод с "Биостатом " (0,01% по д.в.)

2) При подозрении на зараженность клубней - обработку " Биостатом" (0,1% по д.в.) для предотвращения отрождения гусениц.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Пушня, Марина Владимировна, Краснодар

1. Агасьева И.С., Пушня М.В., Хлистовский Е.Д. Комбинированная выкормка гусениц тутового шелкопряда//Защита растений.-1995.-№9.-С.46-47.

2. Адашкевич Б.Г., Рашидов М.И. Биологическая борьба с хлопковой совкой на овощных культурах// Защита растений.-1986.-№6.-С.51-52.

3. Адашкевич Б.Г., Рашидов М.И. Хлопковая совка и ее энтомофаги на томатах в Узбекистане// В сб.: Биологический метод с вредителями овощных культур.-М., Агропромиздат.-1989.-С .133-143.

4. Админа Л.Я. Эффективность микроэлементов в составе различных солей при кормлении молодняка свиней// Химия в сельском хозяйстве.-1980.-№3.-С.59-60.

5. Адухов З.М. Биологическая защита томатов от хлопковой совки// Защита растений.-1987.-№10.-С.25-27.

6. Азизбекян P.P., Шагов Е.М., Шитикова И.Б. Новый бактериальный препарат "Колорадо" против колорадского жука// В сб.: Производство экологически безопасной продукции растениеводства. Региональные рекомендации. Вып.1.-Пущино,1995.-С.203-205.

7. Бабурашвили Э.И. Влияние повышенных температур на споры пебрины тутового шелкопряда// Тр.Груз.НИИ Шелководства.-1957.-Вып.3.-С.182-183.

8. Блинова С.П., Иванова Е.С. О культивировании нематодно- бактериального комплекса Neoaplectana carpocapsae на насекомых// В сб.: Гельминты насеко-мых.-М.,Наука.-1980.-С.12-18.

9. Вейзер Я. Микробиологические методы борьбы с вредными насекомыми.-М., Колос, 1972.-640 с.

10. Веремчук Г.В. Новый вид энтомопатогенных нематод рода Neoaplectana (Rhabditida: Steinermatidae)//Паразитология.-1969.-T.3.-№3.-C.249-252.

11. Вермчук Г.В. О массовом разведении нематодно- бактериального комплекса//Паразитология.-1972.-Т.6.-№6.-С.376-380.

12. Веремчук Г.В., Исси И.В. О развитии двух видов микроспоридий в энтомопатогенных нематодах рода Neoaplectana// В сб.: III-й Международный энтомологический конгресс, Москва, 2-9 августа 1968г. Тез.докл.-Л.,1971.-Т.2.-С.Ю5-106.

13. Веремчук Г.В., Данилов Л.Г. Методические указания по оценке инвазионной активности энтомопатогенных нематод рода Neoaplectana (Steinermatidae). -Л.,ВИЗР, 1977.-7с.

14. Воронин В.Н. Паразитоценоз капустной белянки в Ленинградской области// В сб.: Материалы II- Всесоюзного съезда паразитоценологовТез.докл,-Киев,1983.-С.66.

15. Георгадзе С.А. Энтонематоды рода Neoaplectana и их использование в борьбе против вредных чешуекрылых дубрав Грузии.-Тбилиси, 1990.-23с.

16. Гробов О.Ф., Зюман Б.В. Культивирование Nosema apis Zander, 1909 в культуре тканей медоносной пчелы// Паразитология.- 1972.-Т.6.-№2.-С. 176-179.

17. Гусев Г.В. Энтомофаги колорадского жука. -М., Агропромиздат.-1991.-173с.

18. Гусев Г.В., Коваль А.Г. Биологический метод борьбы с колорадским жуком. М., Агропромиздат.-1990.-70с.

19. Данилов Л.Г. Особенности инвазирования и последующего развития нематод Neoaplectana carpocapsae штамм "агриотос" в насекомых при свободном контакте паразита с хозяином // В сб.: Гельминты насекомых -М., Наука.-1980.-С.42-46.

20. Данилов Л.Г., Карпова Е.В. Испытания энтомопатогенных нематод против саранчовых// Защита растений.-1990.-№7.-С.34-35.

21. Данилов Л.Г., Карпова Е.В., Шиловская Т.Е. Энтомопатогенные нематоды против капустных мух// Защита растений.-1995.-№7.-С.40.

22. Депешко И.Т., Журавель О.М., Злотин А.З., Куприянова Л.В. Повышение продуктивности тутового шелкопряда при подкормке хлорно-кислым аммонием// Химия в сельском хозяйстве.-1980.-№3.-С.60-61.

23. Джураева М.К., Караваева H.H. Значение количественного фактора перо-ральной инфекции для развития нозематоза на выкормке// Труды Средне-аз.НИИ Шелководства.-1989.-№23 .-С.97-99.

24. Доспехов Б.А. Методика проведения полевого опыта.-М., Агропромиздат.-1985.-315с.

25. Елфимова Т.М. Оптимальные условия получения спор двух микроспоридий рода Vairimorpha в капустной совке.- Авт.дисс. на соиск.учен.степ.к.б.н.-Л.,1985.-20с.

26. Ефименко Т.М. Эффективность лепидоцида в отношении потомства здоровых и больных микроспоридиозом бабочек огородной совки// В сб.: Научные труды ВАСХНИЛ Сиб.отделение. -Новосибирск, 1987а.-С.74-81.

27. Ефименко Т.М. Восприимчивость капустной совки к Bacillus thuringiensis var. galleriae при экспериментальном микроспоридиозе // Бюлл.ВИЗР.-19876.-№68.-С.23-26.

28. Ефименко Т.М. Биологическое обоснование применения микроспоридий против совок самостоятельно и совместно с бактериальными препаратами.-Авт.дисс. на соиск.уч.ст.к.б.н.-JI., 1989.-18с.

29. Жиляева И.Н., Ежов Г.И., Кондратов Е.С. Разведение энтомопатогенных нематод Neoaplectana carpocapsae "agriotos" (Веремчук, 1972) на гусеницах капустной совки Brathra brassicae// В сб.: Материалы научн .конференции ВОГ.-1973.-Вып.25.-С.97-102.

30. Зайцева Н.М. Использование шротов масличных культур в кормлении животных. -Л., Колос.-1968.-12с.

31. Злотин А.З. Влияние плотности популяции и химической обработки корма на развитие Ocneria dispar L. при лабораторном разведении // Зоол.журн.-1965.-Т.44.-№12.-С. 1820-1823.

32. Злотин А.З. Теоретическое обоснование массового разведения насекомых// Энтомол.обозр.-1981 .-Т.60.-№3 .-С.494-510.

33. Злотин А.З. Техническая энтомология.-Киев. 1989.-184с.

34. Злотин А.З., Плугару И.Г. Словарь- справочник по шелководству.-Кишинев, 1989.-225с.

35. Иванова Т.С., Боровая В.П., Данилов Л.Г. Биологический метод борьбы с картофельной молью// Защита растений.-1994.-№2-С.39-40.

36. Ижевский С.С. Энтомофаги колорадского жука// Сельское хозяйство за рубежом." 1980.-№7.-С.28-31.

37. Ильиных A.B., Щербинин A.B., Лопаткин A.B. Влияние компонентов питательной среды на развитие гусениц непарного шелкопряда// В сб.: Тез.докл. I Всесоюзной конференции по промышленному разведению насекомых. Москва, февраль 1986.-М., 1986.-С.68-69.

38. Исрамлиева И.И. Влияние микробиологических препаратов на организм хлопковой совки// В сб.: Интегрированный метод защиты хлопчатника и сопутствующих культур от вредителей, болезней и сорняков.-Ташкент,1987.тоз1. С.75-77.

39. Исси И.В. Протозооноз капустной белянки и его значение для прогноза// Тр.ВИЗР,-1963 .-Т. 19.-С. 174-179.

40. Исси И.В. Микроспоридиоз капустной белянки и других насекомых и его практическое значение.- Авт.дисс. на соик.уч.ст.к.б.н.-JI., 1964.-35с

41. Исси И.В. Влияние микроспоридиоза на плодовитость непарного шелкопряда Lymantria dispar (Lepidoptera, Orgyidae) в ряду поколений// Тр.ВИЗР.-1968.-Bbin.31.-C.331-339.

42. Исси И.В. Закономерности протекания эпизоотий микроспоридиоза у капустной белянки в условиях Ленинградской области// В сб.: Биологическая защита овощных культур от вредных организмов. Кишинев, 1971а.-С.36-38.

43. Исси И.В. Влияние корма насекомого- хозяина на развитие микроспоридии Pleistophora schubergi// В сб.: Progress in Protozoology, IV Clermont-Ferrand.-1973.-P.173-174.

44. Исси И.В. Эволюция и филогения микроспоридий// Тр.Зоол.ин-та АНСССР.-Л.Д978.-Т.78.-С.30-43.

45. Исси И.В. Эпизоотология микроспоридиоза капустной белянки Pieris brassi-сае (Lepidoptera, Pieridae)// Тр.ВИЗР.-Л.,1980.-С.5-17.

46. Исси И.В. Взаимоотношение микроспоридий с клеткой хозяина// Парзито-логия.-1983.-Вып.31.-С. 124-143.

47. Исси И.В. Микроспоридиозы насекомых фауны СССР. Перспективы использования микроспоридий в защите растений.- Дисс. на соиск.уч.ст.д.б.н.-Л.,1985.-48с.

48. Исси И.В. Микроспоридии как тип паразитических простейших// Протозоология. -Л.,1986.-Вып. 10.-С.6-137.

49. Исси И.В., Червинская B.JI. О влиянии температуры на развитие Nosema mesnili и Pleistophora shubergi (Microsporidia)// Зоол.журн.-1969.-Т.48.-№10.-C.l 140-1146.

50. Исси И.В., Ткач М.Т. Эпизоотия микроспоридиоза в популяции картофельной совки Hydrecia micacea CSP (Noctidae)// В сб.: XIII-й Международный энтомологический конгресс. Москва, 2-9 августа 1968г.Тез.докл.-J1., 1971.-Т.2.-С.73-74.

51. Исси И.В., Радищева Д.Ф. Влияние вида и сорта кормового растения капустной белянки на микроспоридию Nosema mesnili// В сб.: Материалы Всесоюзного совещания протозоологов.-Канев,1982.-С.91-92.

52. Канарев Г., Пеева И. Възможности за исползване на изкуствени храни за черничевата коприента буба// Животн.науки.-1981.-№3.-С. 179-192.

53. Кандыбин Н.В. Новый энтомоцидный препарат "битоксибациллин"// В сб.: Бактериальные средства и методы борьбы с насекомыми и грызунами.1. Л.,1972.-С.63-79.

54. Кандыбин Н.В. Бактериальные средства борьбы с грызунами и вредными насекомыми. -М., Агропромиздат.-1989.-С.84-95.

55. Кандыбин Н.В. Микробиологические средства борьбы с колорадским жуком. М., Агропромиздат.-1990.-С.10-15.

56. Караиванов С. Исследование влияния температуры, нормы кормления и площади арены для питания на выкормке гусениц Bombyx mori L. IV и V возрастов // Животн.науки.-1988.-Т.25.-№7.-С.91 -98.

57. Караиванов С., Александров А., Захариева К., Янинов А. Результаты выращивания тутового шелкопряда при изменении обычного режима// Жи-вотн.науки.-1985.-Т.22.-№3 .-С.76-81.

58. Кашкарова Л.Ф., Хаханов А.И. Новый возбудитель нозематоза у тутового шелкопряда// Шелк.- 1980.-№5.-С.З 0-31.

59. Кашкарова Л.Ф., Хаханов А.И. Получение протозойного инфекционного материала// Защита растений.-1981.-№6.-С.29-30.

60. Кашкарова Л.Ф., Хаханов А.И. Антинозематозное средство при разведении тутового шелкопряда// Шелк.-1990.-Т.130.-№8.-С.12-14.

61. Клещинова Е.А. О возможности разведения Neoaplectana glaseri в синтетической среде// В сб.: Гельминты насекомых.-М.,Наука.-1980.-С.72-75.

62. Кольчевская E.H. Влияние корма совок на патогенные свойства микроспоридий// В сб.: Современные проблемы протозоологии. Тез. докл. IV-ro Всесоюзного общества протозоологов.-Л., 1987.-С.25-26.

63. Кольчевская E.H., Исси И.В. Влияние пассажей через несвойственного хозяина на патогенность микроспоридий// В сб.: Современные проблемы протозоологии. Тез.докл. IV-ro Всесоюзного общества протозоологов.-Л., 1987.-С.174-175.

64. Коничев A.C., Орловская Е.В., Коничева А.Г., Масюк Ю.А. Изучение искусственных сред для ряда насекомых// В сб.: Тез.докл. 1-й Всесоюзной конференции по промышленному разведению насекомых. Москва, февраль 1986г.-М.Д986.-С.14-16.

65. Король И.Т., Сокольчик А.Г. Результаты испытаний биопрепаратов в смеси с димилином против колорадского жука и других вредителей// В сб.: Защита сельскохозяйственных растений в условиях применения интенсивных техноло-гий.-Минск, 1987.-4.II.-C.97-99.

66. Короткова Е.А. Подкормка гусениц тутового шелкопряда различными видами водорослей// Шелк.-1989.-№3.-С. 15-17.

67. Крылова C.B. Один из способов адаптации Nosema meligethi из рапсового цветоеда в несвойственном хозяине- чешуекрылом// В сб.: Защита плодоовощных культур от болезней, вредителей и сорняков при интенсивной технологии возделывания.-Вильнюс,1988.-С.28-29.

68. Мамедова Ф.Н. Влияние Си, В и их солей на белковый обмен и продуктивность тутового шелкопряда. Авт.дисс. на соиск.уч.ст.к.б.н.-Баку, 1970.-25с.

69. Масюк Ю.А., Коничева А.Г. Искусственные среды для разведения насекомых// В сб.: Тез.докл. 9-го съезда ВЭО. Киев, октябрь 1984.-Киев,1984.-Ч.П.-С.38-39.

70. Мельник В.И. Корма и нозематоз// Пчеловодство.-1973.-№4.-С.19-20.

71. Мещеряков A.A., Гробов О.Ф. Развитие микроспоридий беспозвоночных в культуре клеток млекопитающих// Бюлл. ВНИИ Эксперем. Ветеринарии.-1983.-№49.-С.72-73.

72. Мещеряков A.A., Гробов О.Ф., Хаханов А.И., Кашкарова Л.Ф. Развитие микроспоридии Nosema bombycis Nageli в культуре клеток млекопитающих //

73. В сб.: Пути повышения качества шелковичных коконов в Узбекской ССР.-Ташкент, 1983.-С.71-74.

74. Нилова Г.В., Азизов Б.А. Применение микроспоридий против озимой совки// Защита растений.-1972.-№10.-С.23-24.

75. Нилова Г.В., Стрельникова Г.В. Действие некоторых физических факторов на споры микроспоридий Pleistophora schubergi Zwölfer и Nosema agriotidis Lipa et Issi// В сб.: Труды института зоологии и паразитологии АН Таджикской ССР.-1972.-С. 18-24.

76. Онацкий Н.М. Влияние микроспоридиоза на восприимчивость капустной белянки Pieris brassicae L. к кристаллообразующей бактерии Bacillus thur-ingiensis Berliner.- Авт.дисс. на соиск.уч.ст.к.б.н.-Jl., 1983.-24с.

77. Орловская Е.В., Масюк Ю.А. Разведение некоторых видов совок на искусственных пищевых средах// В сб.: Тез.докл.1-й Всесоюзной конференции по промышленному разведению насекомых. Москва, февраль 1986г.-М.,1986.1. С. 72-73.

78. Парпиев Б.А. Хлорат магния- биостимулятор для гусениц, дефолиант для шелковицы// Труды Среднеазиатского НИИ Шелководства.-1989.-№23.1. С.36-44.

79. Парпиев Б.А., Ламм Г.Я., Азимова И.М., Хамидова Ж.Б. Влияние добавки казеина к листьям шелковицы на продуктивные и репродуктивные свойства тутового шелкопряда// Труды Среднеазиатского НИИ шелководства.-1989.-№23.-С.44-48.

80. Перера Модика. Особенности биоэкологии, формирование очагов и вредоносности картофельной моли при осуществлении системы мероприятий по борьбе с ней в Краснодарском крае.- Авт.дисс на соиск.уч.ст.к.б.н.-М.,1992.-23с.

81. Петков М., Черкезов Н., Василов В. Изничване на изскуствено приготов-лени храна за объенждане на коприена буба// Животн.науки.-1986.-№2.-С.100-105.

82. Пойнар Д. Использование нематод в микробиологической борьбе с насекомыми// В сб.: Микроорганизмы в борьбе с вредными насекомыми и клеща-ми.-М.,Колос.-1976.-С.152-167.

83. Полякова В.П. Эффективность применения микроспоридии Vairimorpha antheraeae против совок// В сб.: Естественные враги насекомых- фитофагов.-Кишинев, 1987.-С.39-43.

84. Рубцова Л.В. К методике культивирования в лабораторных условиях эн-томопатогенной нематоды Neoaplectana carpocapsae// Изв.АН Азербайджана. Сер.биол.наук.-1990.-№3 .-С. 82-83.

85. Рыбина Л.М., Юревич И.А. Испытания микробных препаратов для борьбы с колоардским жуком в Литовской ССР// В сб.: Использование микроорганизмов и их метаболитов в сельском хозяйстве.-Л., 1980-Вып.45.-С.97-107.

86. Самохвалова Г.В. Влияние левомицетина на выживаемость и скорость развития тутового шелкопряда (Bombyx morí L.) при содержании на одуванчике // Вестн.Моск.ун-та.Сер.Биология.-1981.-№1.-С.24-26.

87. Сандлер Г. Использование нематод в борьбе с вредными насекомыми// В сб.: Биологические средства защиты растений.-М.,Колос.-1974.-С.80-120.

88. Сельскохозяйственная энтомология. Под ред. А.А.Мигулина и Г.Е. Осмоловского.-М.,Колос.- 1976.-448с.

89. Сикура А.И., Ижевский С.С., Тимофеева И.Л. Микробиологические средства борьбы с колорадским жуком.-М.,Колос.-1979.-С.26-35.

90. Симчук П.А. Особенности поражения гусениц озимой совки (Agrotis segetum) микроспоридиями Nosema pereziodes и N.antheraeae// Биол.науки.-1981 .-№4.-С.42-45.

91. Симчук П.А. Роль условий при культивировании микроспоридий// Защита растений.-1982.-№1.-С.32-33.

92. Симчук П.А., Лысенко М.А., Четкарова Е.М. Nosema antheraeae sp.n. (Microsporidia, Nosematidae)- паразит китайского дубового шелкопряда // Зоол.журн.-1979.-Т.58.-№4.-С.477-482.

93. Скуяне М., Жварте А. Разведение некоторых насекомых// Труды Латв. Сельскохозяйственной академии.-1985.-№226.-С.23-28.

94. Следзевская Е.Р. Изучение факторов, определяющих активность нематод Neoaplectana carpocapsae и эффективность их применения против насекомых вредителей сада// В сб.: Гельминты насекомых.-М.,Наука.-1980.-С.104-107.

95. Снедокор Дж.У. Статистические методы в применении к иссдедованиям в сельском хозяйстве и биологии.-М.,Мир.-1961.-500с.

96. Соколов М.С., Захаренко В.А. Проблемы экологизации защиты растений// В сб.: Производство экологически безопасной продукции растениеводства. Региональные рекомендации.Вып. 1 .-Пущино, 1995.-С.5-10.

97. Соколова Ю.Я. Ультраструктурные изменения в клетках чешуекрылых при микроспоридиозе и их роль в оценке патогенных форм. -Авт.дисс. на со-иск.уч.ст.к.б.н.-Л.,1990.-20с.

98. Старец В. А., Менчер Е.М. Метод оптимизации полу синтетических питательных сред для разведения насекомых- фитофагов// Зоол.журн.-1980.-Т.59.-№5.-С.771-776.

99. Степанова Н.Е. Энтомопатогенные нематоды в борьбе с картофельной молью// Защита растений.-1993.-№5.-С.20-21.

100. Тамарина H.A. Техническая энтомология- новая отрасль прикладной энтомологии// В сб.: Итоги науки и техники. Серия Энтомология.-1987.-Т.7.1. С.5-145.

101. Тамарина H.A. Техническая энтомология. -М., Изд-во МГУ.-1990.-200с.

102. Тучкова Т.Г., Богданова Н.И. Влияние подкормок хлореллой на биологию и продуктивность тутового шелкопряда.-Душанбе,1991.-10с.

103. Филиппов H.A. Перспективы биологической борьбы с колорадским жуком// В сб.: Защита овоще-бахчевых культур и картофеля от вредителей и болезней. Тез.докл. научно- производственной конференции. Тирасполь, 23-26 июля 1996г.- Тирасполь, 1996.-С.217-220.

104. Хлопцева Р.И. Использование энтомопатогенных нематод в защите растений// Защита растений.-1995.-№3.-С.47-48.

105. Хлистовский Е.Д. Полусинтетические питательные среды и приемы выкормки на них гусениц совок (Lepidoprera, Noctuidae). -Авт.дисс.на со-иск.уч.ст.к.б.к.-Ташкент,1968.-22с.

106. Хлистовский Е.Д. Предупреждение массовых заболеваний насекомых, культивируемых на питательных средах// Сельское хозяйство за рубежом.-1971.-№6.-С.46-48.

107. Хлистовский Е.Д. Массовое воспроизводство растительноядных насекомых на искусственных питательных средах.-М.,ВНИИТЭИСХ.-1973.-60с.

108. Хлистовский Е.Д. Принципы и методы разведения насекомых на искусственных полусинтетических средах.- Дисс.д.б.н.-Л.,1990.-52с.

109. Хлистовский Е.Д., Кондратьева Л.А. Выращивание личинок кубанского щелкуна на зародышево-дрожжевых питательных средах// С.-х. биология.-1981 .-Т. 16.-№4.-С.620-624.

110. Хлистовский Е.Д., Гречко Т.Д., Полтавцева М.Г., Кондратьева Л.А. Комбинированная выкормка гусениц тутового шелкопряда с применением искусственной среды//Шелк.-1986.-Т.126.-№4.-С. 14-15.

111. Хлистовский Е.Д., Гречко Т.Д., Кондратьева Л.А., Полтавцева М.Г. Пригодность отавного (осеннего) листа шелковицы при выкормке тутового шелкопряда на искусственном корме// Шелк.-1988.-Т.128.-№3.-С.14-15.

112. Цибульска А.И. Применение рижского штамма гриба белой мускардины в борьбе с колорадским жуком// В сб.: Патология насекомых и клещей.-Рига, 1972а.-С.5-36.

113. Цибульска А.И. Патологические изменения в организме колорадского жука, вызванные грибом B.bassiana (Bals.) Vuill// В сб.: Патогенные микроорганизмы вредителей растений.-Рига,1972б.-С.36-38.

114. Черкасов В.А., Эльин Б.Г., Гринберг Ш.А. Методика нормирования биологических средств защиты растений в сельском хозяйстве.-М.,1986.-С.11-12.

115. Черний А.М., Омелюта В.Г., Кубайчук К.А., Бакланова О.В. Выявление картофельной моли и борьба с ней.-М.,Агропромиздат.-1990.-18с.

116. Черныш С.И. К вопросу о стимулировании роста насекомых// В сб.: Тез.докл. 1-й Всесоюзной конференции по промышленному разведению насекомых. Москва, февраль 1986г.-М.,1986.-С.24-25.

117. Чил- Акопян JI.A., Кондратьева JI.A., Хлистовский Е.Д., Гречко Т.Д., Пол-тавцева М.Г. Методы биологической оценки бактериальных инсектицидных препаратов на основе Bacillus thuringiensis// Биол.журн.Армении.-1988.-Т.41.-№11.-С.938-940.

118. Шабалта О.М. Микробиологический метод борьбы с колорадским жуком на Кубани// Труды Кубанского с.-х. ин-та.-1977.-Вып.148 (176).-С.51-60.

119. Штейнхауз Э. Микробиология насекомых. М., Изд-во иностранной литературы.-1950.-3 50с.

120. Шумаков Е.М., Эдельман Н.М., Борисова А.Е. Опыт воспитания некоторых насекомых- фитофагов на искусственных средах// Докл.АНСССР.-1961.-№1.-С.237-240.

121. Шумаков Е.М., Эдельман Н.М., Борисова А.Е., Якимова H.A. Массовое разведение яблонной плодожорки на искусственных питательных средах// Труды ВИЗР.-1974.-Вып.40.-С.7-17.

122. Шумаков Е.М., Эдельман Н.М. Разведение насекомых- фитофагов на питательных средах// Усп.совр.биол.-1979.-Т.88.-№2.-С.277-292.

123. Эдельман Н.М. Питание насекомых на искусственных средах// Усп. совр.биол.-1961 .-Т. 51 .-№2.-С.204-220.

124. Эдельман Н.М. Принципы составления питательных сред для вредителей генеративных органов плодовых культур на примере яблонной плодожорки// Зоол.журн.-1970.-Т.49.-№8.-С.1240-1246.

125. Эдельман Н.М. Массовое разведение насекомых- фитофагов// В сб.: Итоги науки и техники .Сер. Энтомология.-1972.-Т.1.-С.6-121.

126. Alcazar J., Ramon K.V., Salas R. Un virus como agente de control de la polilla de la papa, Phthorimaea operculella// Rev.per.Ent.-1991.-V.34.-№12.-P.101-104.

127. Alcazar J., Cervantes M., Ramon K.V. Caractirizacion у patogenicidad de un virus granulosis de la polilla de la papa Phthorimaea operculella//Rev.per.Ent.-1992a.-V.35 .-№ 12.-P. 107-111.

128. Alcasar J., Salas R., Ramon K.V. Control de Phthorimaea operculella en almacenes rusticos, empleando virus granulosis en polvo//Rev.per.Ent.-1992b.-V.35.-№12.-P.l 17-120.

129. Andreadis T. G. Influence of Nosema pyrausta on field population of Macro-centrus grandii an introduced parasites of European cornborer Ostrinia nubilalis //J.Ivnertebr.Pathol.-1982.-V.39.-№2.-P.298-302.

130. Anderson R.M., May R.M. Infection diseases and population cycles of forest insects// Science.-1980.-V.210.-№65 .-P.8-61.

131. Angus T.A., Norris J.R. A composition of the toxicity of some varieties of Bacillus thuringiensis for silkworm larvae// J.Invertebr.Pathol.-1968.-V.l l.-№2.1. P.289-295.

132. Anneche D.R., Moran V.L. Potato tuber moth: biological control of economic benefit//Plant.Prot.News.-1992.-№29.-P.8-9.

133. Arilie M. Etude de quelques problems poses par 1 elevace ver a soie Bombyx mori L.-Paris, 1975.-32p.

134. Armstrong E. The effects of diets and age the longevity of adult Drosophilla willistoni infected with Nosema kingi//Z.Parasitenk.-1976.-V.48.-№3.-P.275-280.

135. Atanasiu M. Effects of certain pharmacological agents on silkworm hears Bombyx mori L.//Appicuture.-1969.-V.22.-№4.-P.5-7.

136. Ben Osman T. Residual achieving of four antibiothies in artificial insect diet after three hear shemurahion heakmilihs// J.Invertebr.Pathol.-1969.-V.12.-№2.1. P.185-188.

137. Bhanu D. Effect of asiphor on the hatchability of silkworm eggs in Bombyx mori L.// Zool.Anz.-1965.-V. 174.-№ 174.-P. 131-133.

138. Brinton F.E. Artificial diet for mass production of the codling moth Carpocapsa pomonella (Lepid.,01etherent.)//Canad.Entom.-1969.-V.101.-№6.-P.577-584.

139. Brooks W.M. Nosema sphingidis sp.n., a microsporidian parasite of tobacco hornworm, Manduca sexta// J.Invertebr.Pathol.-1970.-V.16.-№3.-P.390-399.

140. Brooks W.M. Nosema sphingidis sp.n., a microsporidian parasite of tobacco hornworm, Manduca sexta// J.Invertebr.Pathol.-1971.-V.17.-№l.-P.87-93.

141. Calavati C., Narasimhamurti C.C. Histopathological and experimental infection studies on Pleistophora ganapatii (Calavati) a microsporidian parasite of Odontotermes horni (Desn.)// Acta Protozool.-1982.-V.21.-№3-4.-P.257-265.

142. Canning E.U. Microsporidia for trematode control// Parasitology.-1981.-V.82.-P.120-121.

143. Canning E.U. Insect control with Protozoa// In: Biological control in crop production." 1982a.-P.201-216.

144. Canning E.U. An evaluation of protozoan characteristics in relation to biological control of pest// Parasitology.-1982b.-V.84.-P.l 19-149.

145. Cantwell G.E., Cantello W.W., Schroder F.W. Effect of Baeuveria bassiana on underground stages of the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera, Chrysomelidae)// Great lakes Entomol.-1987.-V.19.-№19.-P.81-84.

146. David D. Pathological changes of slavery glands of the gypsy moth Limantria dispar, caused by Microsporidian Nosema sp.// In: Praced.4-th Colloq. of Inver-tebr.Pathol.Netherlands.-1986.-P.349.

147. David W. Studies an the susceptibility to the virus infection in the silkworm, Bombyx mori L., rearing an artificial diet// J.Invertebr.Pathol.-1969.-V.14.-№l.1. P.96-104.

148. De Banstiani D. Situazione e prospettive délia bachicoltura, anche alla luce de-gli indizzi produffivi ed economici euzopi// Senta.-1989.-V.42.-№1.-P.l 1-14.

149. Der-I-Wang, Moeller F.E. Ultrastructural changes in the hypopharyngal glands of worker honey bees infected by Nosema apis// J.Invertebr.Pathol.-197 l.-V. 17.-№3.-P.308-320.

150. Farag F., Attia K. Dietas artificales en Lepidoptera unacompilacion de referen-cial// Comuns J.N.I. Ser.: Prod.veg.-1986.-№7.-P.3-51.

151. Fargues J. Spécificité des champignons pathogenes imperfaits (Hyphomycetes) pour les larves de coleopteres ((Scarabaeidae) et Chrysomelidae)// Entomophaga.-1976.-V.21.-№3.-P.313-323.

152. Fawler J.L., Reeves E.L. In vivo propagation of a microsporidian pathogenic to insects// J.Invertebr.Pathol.-l 975.-V.25.-№3.-P.349-353.

153. Fuxa J.R., Brooks W.M. Effects of Vairimorpha necatrix in spray and corn meal of Heliothis species in tobacco, soybeans and sorghum// J.Econom.Entomol.-1979.-V.72.-№4.-P.462-467.

154. Genova E., Todorov N. The effect of various levels of dietary protein food on first instar on viability, growth and development of Bombyx mori L., silkworm// In: 19-th Int.Congr.Entomol. Beijing, June28-July4 1992.: Proc.Abctr.-Beijing,1992.-P.623.

155. George C.K. The effects of malnutrition on growth and mortality of thread must flour beetle Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae) parasitised by Nosema whitei (Microsporidia: Nosematidae)// J.Invertebr.Pathol.-1971.-V.18.-№3.-P.383-386.

156. Georgis R. Nematodes for biological control or urban insects// In: Abstr.Pap., 194-th ACS Net.Meet.(Amer.Chem.Soc.), New Orleans, Aug.30-Sept.4 1987.-Washington (DC), 1987.-P.452.

157. Georgis R. Present and future prospects for entomopathogenic nematode products// Biocontr.Sci and Technol.-1992.-V.2.-№2.-P.83-98.

158. Glaser R.W., Mc Coy E.E., Girth H.B. The biology and economic importance of a nematode parasite in insects// J.Parasitol.-1940.-V.26.-№4.-P.479-594.

159. Hamilton D.W., Hathaway D.O. Codling moth Ins. Colon and mass product// Acad.Press. New-York, London, 1966.-P.339-354.

160. Hamilton J.T., Macdonald J. A. Control of potato moth, Phthorimaea operculella (Tellen) in stored seed potatoes// Gen. and Appl.Entomol.-1990.-V.22.-P.3-6.

161. Hamm J.J., Hare W.W. Application of entomopathogens in irrigation water for control of fall armyworms and corn earworms (Lepidoptera: Noctuidae) on corn// J.Econ.Entomol.-1982.-V.75 .-№6.-P. 1074-1079.

162. Hammamura Y., Kuweta K. Effects of gallic acid on the growth of the silkworm larvae Bombyx mori L.//Nature.-1966.-V.212.-№5068.-P.1386-1390.

163. Han Richou, Cao Li, Lio Xiuling. Relationship between medium composition, inoculum size, temperature and culture time in yields of Steinernema and Het-erorhabditis nematodes// Fund, and Appl. Nematol.-1992.-V.15.-№3.-P.223-229.

164. Han Richou, Cao Li, Lio Xiuling. Effects of inoculum size, temperature and time on in vitro production of S.carpocapsae Agriotos// Nematologica.-1993.-V.39.-№3.-P.366-375.

165. Hashimoto S., Ito T., Arai N. Preparation of artificial feed of the silkworm, Bombyx mori L. IM5 revetment in the mineral and vitamin B mixture// J. Sericult. Sci. Japan.-1977.-V.46.-№4.-P.475-486.

166. Hennon G.A., Baken G.L. The effects of host stage and temperature on the development of Hexametmis sp. (Nematoda: Mermethidae) in the australian plaque laugh Chonhoicehes kenminifera (Orthoptera: Acrididae)// Nematologica.-1991.-V.37.-№2.-P.213-224.

167. Henry J.E. Effects of grasshopper species, cage density, light intensity and method of inoculation on mass production of Nosema locustae (Microsporida: No-sematidae)//J.Econom.Entomol.-1987.-V.80.-№6.-P. 1245-1250.

168. Henry J.E., Oma E.A., Onsager J.A. Relative effectiveness of ULV spray application of spores of Nosema locustae against grasshoppers// J.Econom.Entomol.-1978.-V.71 .-№4.-P.629-632.

169. Henry J.E., Onsager J.A. Experimental control of the mormon cricket Anabrus simplex by Nosema locustae (Microspora: Micrisporida), a protozoan parasite of grasshoppers (Ort.:Acrididae)// Entomophaga.-1982.-V.27.-№2.-P.l97-201.

170. Henry J.E., Fawler J.L., Wilson M.G., Onsager J.A. Infection of West African grasshoppers with Nosema locustae Canning (Protozoa: Microsporida, Nosemati-dae)// Tropical Pest Management.-1985.-V.31.-№2.-P.144-147.

171. Hirschfelder H. Rapid method for distinguishing for Nosema apis// Bull. Apic.Doc.Sci.Techn.Inform.-1964.-V.7.-№ 1 .-P.7-17.

172. Holland M. New product fights citrus root weevil larval // Citrus Indastry.-1990.-V.71.-№4.-P.25-30.

173. Horie V. Present advances of nutritional physiology and artificial diet of Bombyx mori L. in Japan// In: 19-th Int.Congr.Entomol. Beijing, June28-July4 1992. Proc.Abstr.-Beijing,1992.-P.623-624.

174. Hostunsky Z., Weiser J. Production of spores of Nosema piozidae Kellen et Lindegren in Mamestra brassicae L. different infective dosage// Vest.Cespolec.Zool.-1972.-V.36.-№36.-P.97-100.

175. Hou R.F., Chan R.S. The consumption and utilization of the spiral blue-green algae Spirulina platensis in artificial diet by the silkworm, B.mori L.// Ento-mol.exper.appl.-1984.-V.35.-№l.-P.39-53.

176. Howell J.F. Problems involved in rearing the codling moth an diet in trays// J.Econom.Entomol.-1971 ,-V.64.-№3 .-P.3 81 -387.

177. Ito T. An artificial diet for the silkworm, B.mori L. and the effect of soybean oil on this growth// In: XI Inter.Kongress fur Entomologie.-Vien,1975.-S.157-161.

178. Ito T., Nacasone M. The Development of artificial diet leaf powder of any Food Plants for Eri- silkworm Raising// J.Sericult.Sci.Japan.-1967.-V.36.-№4.-P.309-314.

179. Ito T., Arai N. Artificial diets for silkworm Bombyx mori L. with special references to asemisynthetic diet for fifth instar larvae which includes a large amount of defeated soybean meal// J.Agr.Chem.Soc.Japan.-1973.-V.47.-№6.-P.397-401.

180. Ito T., Arai N., Fukuda M. Rearing of larvae silkworm Bombyx mori L. on semi synthetic diets// J.Agr.Chem.Soc.Japan.-1974.-V.48.-№7.-P.403-405.

181. Ito T., Arai N. Further studies on nutritive effects of asportic and glutamin acids on the silkworm B.mori L.// Agric.Biol.Chem.-1977.-V.41.-№l 1.-P.2209-2213.

182. Ishikawa Y., Mochizuki A., Ikeshoji T., Matsumoto Y. Growth Bombyx mori L. on the three different varieties of artificial diet// Appl.Entomol. and Zool.-1983.-V.18.-№l.-P.62-69.

183. Iwanari Y. Effects of the amounts of phosphorus and sodium in diets on growth of the silkworm B.mori L.// J.Sericult.Sci.Japan.-1978.-V.47.-№4.-P.333-337.

184. Kamioka Sh., Horie V., Watanabe K. Daily utilization of nitrogen in food by the silkworm Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)// Appl.Entomol.Zool.-1986.-V.21 .-№2.-P.289-298.

185. Kavakami K., Aoki K. The disease of Bombyx mori L. an artificial diet// Sans.Kenk.Acta.Seric.-1968.-V.67.-P.81-96.

186. Kaya H.K. Persistence of spores of Pleistophora schubergi (Cnidospora: Microsporida) in the field and their application in microbial control// J.Invertebr.Pathol.-1975.-V.26.-№3.-P.329-332.

187. Kaya H.K., Thurston G.S. Soil biotic factors, affecting entomopathogenic nematodes// In: 19-th Int.Congr.Entomol. Beijing, June28-July 4 1992.-Beijing,1992.-P.302.

188. Kaya H.K., Gaugler R. Entomopathogenic nematodes// Ann.Rev.Entomol.-1993.-V.38.-P. 181-206.

189. Kellen W.R., Lindgren J.E. Inflammatory response of the Indian meal moth, Plodia interpunctella to infection by Nosema geterosporum// J.Invertebr.Pathol.-1972.-V.4.-№4.-P.418-419.

190. Lay P.F., Canning E.U. Factors Affecting Spore Replication of Nosema algerae (Microspora: Nosematidae) in Pieris brassicae (Lepidoptera)// J.Invertebr.Pathol.-1985.-V.41.-P.20-26.

191. Lery X., Tediere G. A new serum- free medium for lepidopteran cell culture// Jinvertebr.Pathol.-1990.-V.55.-№3.-P.342-349.

192. Lewis L., Lynch R. Septicemia occurrence in cocoons related to silkworm rearing conditions// J.Invertebr.Pathol.-1970.-V.15.-№l.-P.43-48.

193. Li Tao, Yan Shentshen, Wang Guilin, Wang Weijuon, Liu Xiojan, Li Weiming, Qiao Anhai, Ge Shaorahg. Biological control of grasshoppers using Nosema locustae by China// J.Sichuan.Univ.Natur.Sci.Ed.-1994.-V.31.-№4.-P.556-562.

194. Lu Shunlin M., Ohkuma T., Lin Zhang che. Facilities for insect research and production//Tech.Bull.-1978.-№1576.-P.89-94.

195. Maddox J.V., Brooks W.M., Fuxa J.R. Vairimorpha necatrix a pathogen of agricultural pests: potential to pest control// In: Microbial control of Pest and Plant De-saeses.-l 978.-1980.-1981.-P.587-594.

196. Malone L. An comparison of the development of Vairimirpha plodie and V.nacatrix in the Indian meal moth Plodia interpunctella// J.Invertebr.Pathol.-1984a.-V.43.-№2.-P. 140-149.

197. Malone L. Factors controlling in vitro hatching of Vairimorpha plodie (Microspora) spores and their infectivity to Plodia interpunctella, Heliothis virescens, Pieris brassicae// J.Invertebr.Pathol.-1984b.-V.44.-№2.-P. 192-197.

198. Malone L., Wigley P. The morphology and development of Nosema carpocap-sae, a microsporidian pathogen of Golfing moth Cydia pomonella (Lepidoptera: Tortricidae) in New Zealand// J.Invertebr.Pahol.-1981.-V.38.-№3.-P.315-329.

199. Manoukas A.G. Protein hydrolisate- free larval diets for rearing the olive fruit flye, daces lea and nutritional role brewers yeast// Sterility princ. Insect Cont, 1974.-Vienna,1975a.-P.219.

200. Manoukas A.G. Low cost larval diets for mass production of the olive fruit flye// J.Ecinom.Entomol.-1975b.-V.68.-№ 1 .-P.22-25.

201. Mc Loughlin D. The studies of growth and development Bombyx mori L.// J.Econom.Entomol.-1966.-V.59.-№2.-P.401-404.

202. Milner R.J., Lutton G.G. Interactions between Oncopera albogutans (Lepidoptera, Hepialidae) and its microsporidian pathogen Pleistophora oncoperae (Protozoa, Microspora)// J.Invertebr.Pathol.-1980.-V.36.-№2.-P. 198-202.

203. Morohoschi S. Application of artificial diets of sericulture Japan// Proc. Jap. Acad.-1970.-V.46.-№1.-P.71-76.

204. Nacasone M. Nutrition of silkworm// J.Sericult. of Indian.-1970.-№1.-P. 1-4.

205. Novotny J. Influence of gypsy moth larvae age an the development of microsporidian diseases// Biologia.-l 99 l.-V.46.-№2.-P. 105-111.

206. Ogura N., Mamiya Y. Artificial culture of an entomogenous nematode, Steinernema kushidae (Nematode: Steinermatidae)// Appl.Entomol.Zool.-1989.-V.24.-№1.-P.l 12-116.

207. Octof T.H., Hague M.G. Entomophilic nematodes//Nematologica.-1992.-V.38.-№4.-P.447-448.

208. Onstad D.W., Maddox J.V., Cox D.J., Kornkven E.A. Spatial and temporal dynamics of animals and the host- density there should in epizootology// J.Invertebr. Pathol.-1990.-V.55.-№l.-P.76-84.

209. Pener T., Vasques T., Mollineda M. Chia masiva Heterorhabditis heliothidis sobne el hospenedo alternative Concya cephallonica// Prot.Plantas.-1991.-V.l.-№l.-P.7-14.

210. Peroutka M., Cihar R. The effects of pteridies on the developmental cycle of protozoan Nosema apis Z.//Apidologie.-1978.-V.9.-№4.-P.291-304.

211. Ralph W. Nematode applications for insect// Rural.Raeserch.-1989.-№143.-P.4-9.

212. Reynolds D.G. Laboratory studies of the microsporidian Pleistophora culicis infecting Culex pipens// Bull.Entomol.Res.-1970.-V.60.-№2.-P.2600-2602.

213. Rinder T.E., Elliot K.Y. Influence of Nosema apistosis of the hoarding behavior of the honey bee// J/Invertebr.Pathol.-1971.-V.30.-№l.-P.l 10-112.

214. Romagnoli P. Insetto mangia insetto// Agricop.-1989.-V.19.-№6.-P.32-35.

215. Sapra G.R., Kau N.D., Dass C.M. The artificial diet for insects// Indian J.Exp. Biol.-1982.-V.20.-№2.-P.193-195.

216. Shen Zhong- yuan, Huangake- wei, Qui Li. Cloning of a microsporidian Nosema bombycis (Microsporida: Nosematidae) in insect cell cultures by a limiting dilution method// Act.Sericult.Sin.-1994.-V.20.-№4.-P.231-234.

217. Shinbo H., Inokushi T. Sexual differences in the requirement for sulfur containing aminoacids in the silkworm, Bombyx mori L.// J.Sericult.Sci.Japan.-1977.-V.46.-№l.-P.63-68.

218. Sigel J.P., Maddox J.V., Ruensin W.G. Lethal and sublethal effects of Nosema pyraustae on the European corn borer (Ostrinia nubilalis) in Central Illinois// J.Invertebr.Pathol.-1986.-V.48.-№2.-P.167-173.m

219. Simons W.R., Pionar G.O. The ability of Neoaplectana carpocapsae ( Steinermatidae: Nematode) to survive extended period of desiccation// Ibid.-1973.-V.22.-№2.-P.228-230.

220. Singh P. Handbook of Insect rearing.-London, 1987.-V.II.-P.300-350.

221. Sloun P. Biological control active natural products.-London, 1989.-P.45-70.

222. Smirnoff W.A. Effects of some plant juices on the alerts caterpillar, Archips cerasivoranus, infected with microsporidia// J.Invertebr.Pathol.-1967.-V.9.-№l.-P.26-29.

223. Smirnoff W.A. Adaptation of Thelochania pristiphora on ten species of Diprio-dae and Tenthridinidae// J.Invertebr.Pathol.-1974.-V.23.-№l.-P.l 14-116.

224. Street D.A., Ralph D., Hink W.F. Replication of Nosema algerae in their insect cell lines// J.Protozool.-1980.-V.27.-№ 1 .-P. 113-117.

225. Suchun Li, Jueye Zhang, Jinhou Chen. Research on the technique of mass rearing entomopathogenous nematode Heterorhabditis sp.// In: 19-th Int.Congr.Entomol., Beijing, June28-July4 1992.Proc.Abstr.-Beijing,1992.-P.191-205.

226. Touguebaye B.S., Bouix J. Nosema manirae sp.n. microspiridie parasite de Chlio zacconinus Blezenski (Lepidiptera: Pyralidae), host experimental: cycle evaluative et ultrastructure// Z.Parasitenk.-1983.-V.69.-№2.-P. 191-205.

227. Undeen A.H. Growth of Nosema algerae in pig kidney cell culture// J. Protoo-zool.-1975 .-V.22.-№ 1 .-P. 107-110.

228. Undeen A.H.-, Maddox J.V. The infection of norms quito hosts by ejection with spores of the microsporidien Nosema algerae// J.Invertebr.Pathol.-1973.-V.22.-№2.-P.258-265.

229. Weiser J. Microsporidie als Parasiten Insecten.-Berlin, 1961.-110S.

230. Weiser J., Veber J. Mornosti boilogicheho boje s pea stivenickem americkyn (Hyphantria cunea Drury)// J.Cesk.Parasitol.-1955.-№l 1.-S.191-199.

231. Weiser J., Veber J. Die Microsporidie Thelochania hyphantriae Weiser des weissen Barenypinners und anderer Mitglider seiner Bioconose// Z.angew.Entomol.-1957.-B.40.-№1.-S.55-70.

232. Wijibingen J. Possibility of obtaining a monoxenic culture of the north-west European insect parasitic nematode, Hetrorhabditis sp.// Meded.Fac.Landbauwwentensch.Rijksuniv.Gent. -1991 ,-V.56.-№3.-P. 1297-1304.

233. Wilson G.G. Effects of Nosema fumiferanae (Microsporidia) on rearing of spruce budworm, Choristoneura fumiferana (Lepidoptera: Tortricidae)// Proc. Ento-mol.Soc.Ontario.-1980.-V. 111 .-P. 115-117.

234. Wilson G.G. Nosema fumiferanae, a natural pathogen of forest pest: potential for pest management// In: Microbial Control of Pests and Plant Diseases.- 1970-1980-1981.-P.516.

235. Wilson G.G. Pathogenecity of Nosema disstriae, Pleistiphora schubergi and Vairimorpha necatrix to larvae of the forest tent caterpillar, Malacosoma disstria// Z.Parasitenk.-l 984.-V.70.-№6.-P.763-767.

236. Wilson G.G., Kaupp W.J. Application of Nosema fumiferanae and Pleistophora schubergi (Microsporidia) against spruce Budworm in Ontario.-Environmental Canadian Forest Service Information report No IP-X-15.-1976.-24p.

237. Wilson G.G., Sohi S.S. Effects of temperature on healthy and microsporidia-infected cell culture of Malacosoma disstria hemocytes// Canad.J.Zool.-1977.-V.55.-№4.-P.713-717.

238. Yanagawa H., Watanabe K., Nokamura M. Composition of artificial diets of the original strains of the silkworm B.mori L., by applying a linear programming method// Bull.Sericult.Vatanabe.-l 988.-V.30.-№4.-P.569-588.

239. Yong-ji Wan, Zu-pel Chen, Lin Zhang, Yun Du. Nosema sp.- a pathogenic microsporidia isolated from the silkworm, Bombyx mori L.// In: 19-th Int.Congr. En-tomol.Beijing, June28-July4 1992.Proc.Abstr.-Beijing, 1992.-P.340-341.