Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Супрабульбарные и нейрохимические механизмы регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Супрабульбарные и нейрохимические механизмы регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга"
НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ АРМЕНИЯ РГ8 1ИСТЙТУТ ФИЗИОЛОГИИ им. акад. Л.А.ОРШИ
На правах рукописи
НЕРСЕСЯН ЛАУРА БАХПМЕВНА
СУПРАШЬБАРНЫЕ И НЕЙРОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ АКТИВНОСТИ ДЫХАТЕЛЬНЫХ НЕЙРОНОВ ПРОДОЛГОВАТОГО МОЗГА
Ч.00.09 - Физиология человека и животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
ЕРЕВАН - 1995
Работа выполнена в лаборатории, физиологии Евгетативвай нервной системы Института физиологии им. акад. Х.А.0рбела Национальной Академии наук Республики. Армения:
Научный консультант: академик HAH РА,
доктор медицинских наук, профессор О.Г.ЕйМАВШНЕ
Официальные оппоненты: член-корреспондент РАН,
доктор биологических наук, профессор А.Д.ЮЗДРАЧЕВ
доктор биологических наук, профессор Н.С.АКОШЕ'
доктор биологических наук 1.0.НАГАПЕШН
Ведущая организация - Кафедра нормальной физиологии Ереванского государственного медицинского института им. М.Гераци 153 РА.
Защита состоится " & " Яб-К&^ЬЛ IS95 г. в •/У часов ка заседании Специализированного сонета О Sj3 ПРИ Институте физиологии им. акал. Ж.Ä.Gpdsm КАН РА (375028, Ереван, ул. Бр. Орбели, 22, тел. 27-04-41).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотека Института физиологии им. акад. Л.А.Орбели БАЕ РА."
Автореферат разослан i " КОЯ^рЗ 1995 г.
Ученый секретарь Специализированного совета, ^ ,
кандидат медицинских наук Ту^Цу^ Э.Г.КОСТАНЯН
ОНЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Сложная адаптивная регуляция паттерна дыхания, соответствующая конкретным потребностям организма, - результат координированной деятельности многих физиологических механизмов, совокупность которых и составляет функциональную систему внешнего дыхания. К числу регулирующих механизмов этой системы, в' первую очередь, относятся супрабульбарные влияния, так как только с их участием может быть обеспечено наиболее совершенное приспособление дыхания к меняющимся потребностям организма в газообмене. В целом физиологическая система, контролирующая внешнее дыхание, настолько сложна, что это дало основание Fenn еще в 1963 году при открытии международного симпозиума по регуляции дыхания отметить, что проблему интеграции внешнего дыхания правильнее рассматривать как одну из проблем поведения, а но частной функцией организма.
Особое место среди супрабульбарных механизмов респираторного контроля занимают структуры лимбической системы, так как в естественных условиях существования организма организация адаптивного поведения с его вегетативными коррелятами осуществляется при их непременном участии.
К настоящему времени накошен достаточно большой экспериментальный материал, свидетельствующий об участии трех основных образований'лимбической системы - лимбической коры, ашгдалы а гипоталамуса, в регуляция рада вегетативных функций, в том числе и дыхания. В острых и хронических экспериментах на разных видах животных показано, что разрушение ила раздражения передней лимбической коры - "висцерального поля" лимбической коры ( Wall, Davis, 1951« Showers, СгозЪу, 1958; Showers, 1959; Kaada, i960; McCeary, Moore, 1965'К амигда-лярных ядер С Anand, Dua, 1956; Kling et al., 1960; Ursin, Kaada, 1960; Koikegaml, 196t-; Алликметс, 1966; Bonvallet, ВоЪо, 1972; Мгалоблишвили, 1974; Applegate, Kapp, 1483; Haloper'et al., 1984), гипоталамических структур ( Gellhom, 1957; Hess, 1957; Redgabe, Gellhorn, 1958; Bau, 1966; Hyde, Gogafce, 1966; Петриляк, Брачок, 1967; Сергиевский :i соавт., 1975; Evans, 1976; Monteau, Hila'ire, 1977, 1973 ) вызывают отчетливые изменения дыхания (от резкого стимулирования
угнетения, иногда доходящего до апноэ). В большинстве из этих ра<5от, отливающихся значительной противоречивостью данных, исследовались в основном параметр; внешнего дыхания. Однако по изменению' внешнего дыхания - интегрального показателя дыхательной системы в целом, нельзя судить о функциональной» состоянии различных групп респираторных нейронов и, ° следовательно, выявить особенности нейронных механизмов регуляции акгивнооти бульварного дыхательного центра структурами лимбичеокой системы. Поэтому наиболее перспективным для изучения еупрабульбарных механизмов респираторного контроля является применение мкрозлекгродной техники регистрации им- . пульсной активности различных типов дыхательных нейронов продолговатого мозга. Подобно тому как методика исследования активаости одиночных волокон сыграла большую роль в выяснении функции легочных рецепторов, так и микроэлектродная техника исследования активности одиночных нейронов продолговатого мозга, разряжающихся в ритме дыхания, произвела настоящий переворот в существующих представлениях о деятельности центрального аппарата регуляции дыхания и открыла новую страницу в исследованиях этой области.
; Актуальность изучения центральных механизмов регуляции дыхания чрезвычайно велика, так как это не только проблема теоретической нейрофизиологии, но и база для правильного понимания закономерностей функционирования одной из важнейших систем жизнеобеспечения организма в норле, при различных экстремальных условиях и в патологии.
При'исследовании центральных процессов регуляции паттерна дыхания весьма важным является выяснение нейрохимических (нейромедиаторных) механизмов регуляции активности бульварных дыхательных нейронов. Развитие методов химической идентификации и классификации структур мозга, основанных на определении в телах нейронов, их аксонах и тёрмина-лях содержания веществ-передатчиков информации между нейронами, открыло широкие возможности для дальнейшего изучения функций ДНС. В настоящее время считается, что большинство- химических соединений, принимающих участие в передаче информации между нейронами, представлены тремя классами -
аминокислотами, аминами и пептидами.
В ряде исследований о применением классических методов введения вещества (в кровяное русло, внутри цистералъяо, топической аплликацией) изучено влияние на дыхание, эхтйвяость диафрагмального нерва и респираторннх нейронов возможных ней-ромедиаторов, их предшественников, ингибиторов и антагонистов (Ильиченко, 1970;. Bolme, Fuze, .1973; Сергиевский и соавт., 1975; ВоЗлае et al., 1977s .lambert et el., 1978$ Armijo et al., 1979s EKJridge et al., 1979s Lundbfjrg et al., 1979s ' Mueller et al., 1979» 1935s Olson et al., 1979s Cljenaick et al., 1980s Hazinski et al., 1980; Yamada et al., 1981$ Hedner et al., 1983; Millhorn et al., 1983s Войнов и соавт., 1984). Однако интерпретация данных, полученных в этих экспери- ; ментальных условиях, значительно осложняется из-за наличия j барьеров на путях распространения вещества (гемато-знцвфала-ческого, энзЕматического и пр.), медленного его распространения, возможности опосредованных эффектов вследствие обширности зоны воздействия вещества и тесной функциональной взаимосвязи мааду разными участками ВДС. Благодаря этому воегда возникает вопрос о первичном ила вторичном генезе наблюдаемых дыхательных реакций, что существенно снижает ценность полученных результатов. Поэтому разработанный еле в 1950-х годах С Nastuk, 1953s Del Castillo, Katz, '1955, 1956, 1957 ) и затем модифицированный в лаборатория Eccels_ ( Curtis, Eccels, 1958 а,Ъ; Curtis, 1964 ) метод введения минимальных доз вещества с помощью шкроэлектрофорвтических инъекций непосредственно в среду, окружающую нейрон, в сочетании с параллельной регистрацией его активности сразу привлек внимание исследователей. Широкому распространению этого метода в последние годи способствовало внедрение в практику физиологического и фармакологического эксперимента многоканальных . макроэлектродов. С их применением появилась реальная возможность подведения нескольких нейротропных веществ именно к тем нейронам, активность которых исследовалась. В связи с этим становятся очевидным, что решающими для выяснения рола различных нейромедиаторных систем в центральной регуляции паттерна дыхания являются данные, полученные при изучении
йлияния прямой микрояонофоретячесной аппликации исследуемых веществ к одиночным бульбарным респираторным нейронам. Такие данные в литературе малочисленны п весьма разноречивы ( Sal-
Eoiraghi, Stelner, 1963; Denavit-Sautie, Champagnat, 1975; Denavit-Saubie et al., 197.8; Kirsten et al.t 1978; Böhmer et al., 1979; Champagnat et al., 1979-, 1980, 1982; Fallert et al., 1979; Jordan, Spyer, 1981 ). МездУ тем изучение нейрохимической организации процессов регуляции активности ин-спираторыих и экспираторных нейронов продолговатого мозга необходимо на только для дознания интимных нейрофизиологических механизмов функционирования бульбарного дыхательного центра, но и для эффективного нейрофармакологического управленая дыхательной функцией организма.
Цодъ и задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в изучении роли корково-амигдало-гипоталамического звена лимбпческой системы и некоторых нейромедиаторных систем мозге в регуляции активности нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга.
В соответствия с поставленной целью были определены следующие основные задачи:'
- исследовать характер активности различных типов дыхательных нейронов, локализованных в области вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга;
- изучить особенности реакций нейронов вентрального дыхательного ядра-на низко- и высокочастотное раздражение передней лимбической корн. Посредством детального сканирующего раздражения исследовать топическую локализации и количественное соотношение подавляющих и облегчающих влияний передней лимбвчеокой коры на активность тестируемых дыхательных нейронов;
- изучить эффективность, характер и особснностп нисходящих влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на импульсную активность одиночных функционально идентифицированных нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого, мозга;
- провести сравнительное исследование влияния передней и задней областей медиального гипоталамуса на импульсную активность одиночных инспираторных и экспираторных нейронов
продолговатого мозга;
, - провести сравнительное изучение характера з^зфв рентных влияний передней и задней областей латерального' гипоталамуса на активность респираторных нейронов продолговатого мозга. Исследовать реакции одиночных инспираторных я экспираторных нейронов на пачечное раздражение заднелатеральной области гипоталамуса в разные фазы дыхательного цикла; "
- методом микроиоиофореза исследовать реакции одиночных функционально идентифицированных нейронов,вентрального -дыхательного ядра продолговатого мозга на подведение аминокислот - I -глутамата и ГАЫК (в норго и на фоне блокады ГАМК-рецеп-торов бакукуявном);
- изучить влияние на Импульсную активность одиночных инспираторных и экспираторных нейронов продолговатого мозга микроионофоретической аппликац£н. коноаминов - серотонина я нор-адреналина (в норме и на фоне блокады альфа- зли бвта-адрено-рецепторов фентолаиином а пропранололом.соответственно);
- провести сравнительный анализ эффектов влияния исследованных моноаминов на активность одних и тех же тестируемых нейронов; .
- изучить влияние на импульсную активность нейронов вентрального дыхательного ядра микроионофоретической аппликации ацетилхолина, М- и Н-холиноблокаторов.(атропина и эт-пенала соответственно);
- исследовать реакции одиночных инспираторных и экспираторных нейронов продолговатого мозга на микроионофорети-чвскоз подведение морфина как классического представителя опиатов и опиоидяых пептидов (мэт-энкефалина и бета-эндорфи-на) в норме и на фоне блокады оплатных рецепторов налоксо-ном;
- сравнить эффекты влияния микроионофоретической аппликации исследованных нейроактивных веществ на дыхательные нейроны с эффектами влияния их микроаппликации на неспецифа-ческие (без дыхательной активности) нейроны области вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга.
Научная новизна работа. В настоящей работе впервые проведено систематическое сравнительно-микроэлектрофизиоло-гическое исследование характера, особенностей и механизмов
яияния основных структур лиийической системы (лимбической :оры, ашгдалы и гипоталамуса) на импульсную активность даночных функционально идентифицированных дыхательных юйронов продолговатого мозга с цедыв выяснения роли корко-ю-амигдало-гипоталашчесного звена лимбического мозга в 1роцессах центральной регуляции паттерна дыхания.
Выявленные в данном исследовании особенности нейрофизиологической структуры различных лимбических'звеньев функциональной системы регуляции дыхания свидетельствуют о более гибкой организации регуляторяых механизмов на уровне гипоталамуса и кортикомедиальной ашгдалы. Согласно полученным экспериментальным данный, эта структуры лимбического мозга участвуют в регуляции активности медуллярных дыхательных нейронов без четкой топографической организации а их эфферентные влияния являются менее дифференцированными, чем' влияния базолатеральной ашгдалы и лимбической коры.-В передней лимбической коре и базолатеральной"амиЗгдале нами об-нарукены топографически ограниченные функциональные области, вызывающие качественно различные реакции нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга. При этом показано преобладание подавляющих реакций исследованных дыхательных нейронов над возбудительными.
Сравнительное изучение характера эфферентных влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на активность нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга выявило большую реактивность'тестируемых нейронов раздражении кортикомедиальной группы ядер ами-гдали, чем Ьри стимуляции базолатеральной группы. Обнаружено, что среди амигдалярных структур наиболее эффективным нисходящим влиянием ва активность исследованных медуллярных дыхательных нейронов обладает центральное ядро.
Полученные нами данные о качественном отличии эфферентных влияний кортикомедиальной и базолатеральной групп . ядер на активность бульбарннх дыхательных нейронов указывают на разную функциональную организацию амигдалярных структур, отличающихся по своему филогенетическому развитию.
При сравнении эффективности влияния изученных лимбических образований на импульсную активность респираторных
нейронов продолговатого мозга установлено,- что найболее низкий порог вызова реакций и наибольшая их эффективность и выраженность набжщаются при раздражении гиготаламических структур, что свидетельствует о том, что гипоталамус является важным звеном в лимбических механизмах регуляции дыхания, а не пассивной исполнительной системой для более высоких уровней регуляции. Показано, что наиболее эффективным.влиянием на активность исследованных дыхательных нейронов обладает заднелатералышй гипоталамус.
Результаты экспериментов с пачечным раздражением задне латерального гипоталамуса в разные моменты дыхательного цак ла позволяют придти к предположена® о большем выходе ни сход щвго разряда гипоталамуса на популяцию янспираторных нейрон С этим предположением согласуются а данные о- более низком пороге вызова реакций в популяции инспираторных нейронов по сравнению с экспираторными, полученные наш при тетаничес-ком раздражении гипоталамических структур.' Причем среда исследованных инспираторных нейронов наиболее легко возбудимь ми оказались раннеинспираторные нейроны. Исходя из подученн данных, можно полагать, что гипоталамаческоа влияние на бульбарный механизм выключения экспирации и включения инсш раторной фазы реализуется посредством проприобульбарных ре! неинспираторных нейронов вентрального дыхательного ядра щх долговатого мозга.
В качестве гипотезы высказывается предположение о том что система выходных регуляторных нейронов исследованных нами лимбических структур представлена полиэффекторными не: ронами интагративного типа, запускающими не только днхател ныв, но и другие вегетативные нейроны продолговатого мозга Установленные в настоящей работе возбуждающие и подавляюща влияния передней лимбической коры, амигдалы и гипоталамуса на. активность бульбарных .дыхательных нейронов являются, по видимому, одним из нейрофизиологических механизмов супра-бульбарно'й интегративной системы лимбичеакого мозга, осуществляющей качественно новый тип регуляции, обеспечивают координацию дыхательных изменений с другими компонентами эмоционально-поведенческих реакций организма.
В детальных мякроионофорегаческих исследованиях на
бояыюм фактическое материале установлен гетерохимазм нейронов области вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга (реактивность на аппликацию двух в более нейроактив-ных веществ). Выявлена высокая чувствительность исследованных бульбарных дыхательных нейронов к аминокислотам, ионо-аминам и опиатнш веществам.
Посредством микроионофоретической аппликации специфических блокаторов показано участие ГАМК и ооиоадных пептидов в ингибиторных механизмах бульбарного дыхательного центр. Установлено- существенное различие паттерна тормозной реакции при действии огшетнш. веществ и ГАЖ. Опнатнке вещества Подавляли максимальную, пиковую частоту импульсов в залпах исследуемых нейронов, в то время как ГАМК полностью блокировал их спайковую активность.
Данные, подученные в мякроионофоретических экспериментах с ащшнкацией норадреналина и серотонина, дают основание полагать наличие на нейронах бульбарного дыхательного центра разных типов ноноамлнергических рецепторов.
При помощи микроионофоретической аппликации альфа- и бета-адреноблокаторов показано, что возбудительные реакции йвспираторннх в экспираторных нейронов на микроионофо-ретическое подведение норадреналина опосредованы активацией альфа-адренорецелторов, а подавляющие - бета-адрано-рецедторов.
Результаты настояцей работы о полихимизме респираторных нейронов продолговатого мозга свидетельствуют, по-видимому, о том, что выявленные наш возбуждающие и подавляющие влияния исследованных лимбичвских структур осуществляются посредством сложной гетерохимической системы нисходящих путей, конвергирующих на этих нейронах.
Теоретическое и практическое значение работа. Настоящая работа является фундаментальным исследованием, посвящениям одной из наиболее актуальных проблем современной нейрофизиологии и физиологии дыхания - изучению центральных механизмов регуляции активности бульбарного дыхательного центра..
Результата данного исследования являются теоретической основой для понимания нейронных механизмов регуляции
активности инспираторных и экспираторных нейронов продолговатого мозга структурами лимбической системы. На основании анализа полученных данных сформулированы важные'положения, сви-детельствуккцие об особой роли корково-амигдало-гипоталамичес-кого звена л ямбического мозга в иерархической организации си-' ствш центральной регуляции дыхательной функции организма.
ЭлектролизНологические данные о характере и особенностях модулирующего влияния каждой из исследованных структур на активность .медуллярных дыхательных нейронов позволяют-выявить значение разных уровней регуляции лимбической системы и их взаимодействие в процессах центрального респираторного контроля, выявить клеточные механизмы, обеспечивающие сложную адаптивную регуляцию паттерна дыхания.
Практическая ценность полученных результатов очевидна и опредедяется тем, что они могут быть использованы в клинической ^практике для выяснения патогенеза вегетативных дисфункций центрального происхождения, при диагностике и лечении нарушений дыхательной системы лимбического генеза.
Результаты проведенного исследования важны не только для нейрофизиологии, йо и для нейрофармакологии, так как выяснение нейрохимических (нейромедиаторных) механизмов ре-гуляри активности респираторных нейронов продолговатого мозга даст возможность разработать методы целенаправленного поиска новых фармакологических препаратов избирательного действия на центральные процессы регуляции паттерна дыхания. Следовательно, расширит возможности управления деятельностью бульбарного дыхательного центра посредством фармакологической коррекции его функций в условиях патологии и экстремальных воздействий, что представляет особый интерес для клиники гипоксических состояний организма, для космической биологии я практической медицины.
Данные настоящей работы могут быть использованы научными коллективами, изучающими проблему центральной организации механизмов рету.гации висцеральных функций, которая является одним из основных направлений современной нейрофизиологии. Их целесообразно включить в лекционные курсы по нейрофизиологии и физиологии дыхания в вузах медико-биоло-гичозчого профиля.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на: П, Ш, 1У съездах Армянского физиологического общества (Ереван, 1974, 1979, 1987); П конгрессе Болгарского общества физиологических наук (София, 19"4); ХП, ХШ, Х1У, ХУ съездах Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлова (Тбилиси, 1975; Алма-Ата', 1979; Баку, 1983; Кипиаев, 1987); УП, УШ Всесоюзных конференциях по электрофизиологии центральной нервной системы (Каунас, 1976; Ерозан, 1980); 1У, У, У1 .Всесоюзных конференциях по физиологии вегетативной нервной система (Ереван, 1976; 1982, поеная. 100-летию со дня роящения акад. Л.А.Орбели; 1988); XI, ХП Воег^знж конференциях по физиологии и патологии к^ртико-висцврядъннх взаимоотношений (Ленинград, 1981, посвящ. 50-летию отдела физиологии висцеральных систем им. акад. К.М.Быкова; 1986, посвящ. 100-летию со дня рождения акад. К.М.Быкова); П конгрессе Болгарского фармакологического общества (Пловдив, 1984); Научной сессии Армянского физиологического общества и Института физиологии им. акад. Л.А.Орбела "Актуальные вопросы нейрофизиологии" (Ереван, 1985); Всесоюзной кояфарен ции "Современные' проблемы физиология нервной и мышечной систем", посвящ. 100-летию со дня рождения акад. И.С.Бараташвили (Тбилися, 1985); Всесоюзной конференции "Современные проблемы нейробиологии", посвящ. 50-летию Института физиологии акад. И.С.Бараташвили (Тбилиси, 1986); П, Ш Международных симпозиумах по фармакологии траясшттерных взаимодействий (София, 1986, 1990); Всесоюзной конференции "Проблемы нейрогуморальной регуляции деятельности висцеральный систем", посвящ. 80-летию со дня.рождения акад. В.НДернигевского (Ленинград, 1987); УП, УШ научных конференциях "Центральная регуляция вегетативных функдай" (Тбилиси, 1987, 1989); П, Ш Всемирных конгрессах по нейронау-кам (Будапешт, 1987; Монреаль, 1991); Всесоюзной конференции по физиологии пептидов (Ленинград, 1988); Международных конгрессах физиологических обществ (Хельсинки, 1989; Глазго, 1993); Всесоюзной конференции "Механизмы действия медиаторов и гормонов на эффекторные клетки" (Суздаль, 1989); 7 Всесоюзной конференции "Физиология и биохимия мв-диаторнкх процессов" (Москва, 1990); Выездной сессии Науч-
ного Совета "Физиология человека и животных" АН УССР (Донецк, 1991); Научной сессии Института физиологии им. акад. Л.А.Орбели, посвяэд. 50-летию организации Института (Ереван, 1993).
Публикации. Материалы диссертации представлены в 47 печатных работах.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 380 страницах машинописного текста,.иллюстрирована'82 рисунками (18 диаграммами) и 2 таблицами. Диссертация состоит из введения; обзора литературы по основным вопросам затронутых проблем; восьми глав экспериментальной части, включая описание методики, результаты собственных исследований, обсужден не полученных данных; заключения; выводов и списка цитированной литературы, содержащего 760 источников.
МЕТОДИКА
Эксперименты проведены на взрослых кошках весом 2,5-3,5 кг, наркотизированных смесью хлоралозы и нембутала (45 и 5-10 мг/кг соответственно, внутрибршинно). '
Голова животного жестко фиксировалась в стереотаксичес-ком приборе, с дорсальной стороны обнажался продолговатый мозг на уровне 3,5 мм ростральнее и каудальнев задвижки л на 4,5 мм латеральнее от средней линии. Исследовалась область вентрального дыхательного ядра бульбарного дыхательного центра, где локализованы и инспираторные, и экспираторные нейроны. Для измерения посредством ртутного манометра кровяного давления животного вскрывалась и канюлировалась бедренная артерия.
Импульсная активность одиночных нейронов области вентрального дыхательного ядра отводилась экстраклеточно стеклянными микроэлектроники, заполненными 2М раствором цитрата талия или ЗМ раствором хлористого натрия (диаметр кончика 1-2 мкм, сопротивление 3-5 мОм). Координаты положения микроэлектрода определяла в рострокаудальном направлении - относительно задвижки, литеральном - средней линии, в вертикальном - от дорсальной поверхности продолговатого мозга. Индифферентный электрод укреплялся в лобной кости. ПЬтон-иалн
действия нейронов через катодный повторитель подавались на вход усилителя переменного тока японской установки "Nihon Kohden" и регистрировались на одном из каналов двухлучевого осциллографа. Для функциональной идентификации зарегистрированных дыхательных нейронов одновременно с импульсной активностью нейрона на втором,канале осциллографа регистрировалось внешнее дыхание животного при помощи угольного датчика, подключенного через мостовую схему, и усилителя постоянного тока. Нейроны области вентрального дыхательного ядра, не разряжающиеся синхронно с фазами дыхания, условно обозначены как неспецифические (без дыхательной активности). Осциллографическая регистрация записывалась на пленке в непрерывном режиме посредством фоторегистратора' "Nihon Kohden". Параллельно импульсная активность тестируемого нейрона обрабатывалась на анализаторе NTA-I024 (Венгрия) и записывалась в виде частотограмм двухкоорданатным самописцем. В зависимости от разрядной активности нейрона временной интервал, в котором огсчитывалось количество импульсов, подбирался равным 200 или 500 мс (бин, шаг анализа).
Низко- и высокочастотное (5-100 Гц) раздражение лимби-ческих структур производилось через стереотаксически введенные биполярные константа новые электрода (диаметр кончиков 50 мкм) с межполюсным расстоянием 0,5-0,6 мм, сопротивлением около 20 кОм. После установки раздражающих электродов обнаженнее участки мозговой поверхности орошажись теплым вазелиновым маслом. Стимуляция осуществлялась прямоугольными толчками тока длительностью 0,5 мс и интенсивностью, равной пороговым для каждой структуры значениям (0,05-0,4 мА). Начало раздражения синхронизировалось с той фазой дыхательного цикла, с кото .рой совпадала активность регистри-.руемого. нейрона, - и длилось два-три дыхательных цикла .в зависимости от частоты дыхания животного. В ряде экспериментов применялось пачечное раздражение (10 стимулов с межстимуль-ным интервалом 10 мс), наносимое в разные фазы дыхательного цикла. Для определения точности локализации раздражающих электродов исследуемая структура в конце опыта электролитически разрушалась и производился гистологический контроль.
Полученные экспериментальные данннв подвергнуты тща-
тельной статистической обработке, результаты которой представлены в диссертационной работе.
Для микрояонофорвтической аппликации исследуемых нейро-актцвных веществ применялись пятиканальные стеклянные микро-элоктроды, центральный канал которых (диаметр Л,8-1,5 мил), заполненный ЗМ раствором хлористого натрия, служил для экс-.траклеточной регистрации импульсной активности тестируемого нейрона. Этим же раствором заполнялся и одич из боковых каналов, используемый для контроля токовых эффектов, так как изменение фоновой активности'негрона может быть обусловлено и непосредственным действием на него электрического тока. Однако изменение активности нейрона при действии йа него • электрического тока всегда совпадало с моментом пропускания его через ыикроэлектрод и прекращалось с окончанием поляризации, тогда как эффекты от воздействия химических веществ имели, как правило, латентный период и хотя бы минимальное последействие. Пропуская через боковой канал ток того или иного направления, получали сведения о возможных электрических эффектах и, таким образом, дифференцировали их от влияния На нейрон исследуемого нейроактявного вещества. Остальные каналы заполнялись свежеприготовленными растворами исследуемых в данном эксперименте веществ соответствующей рН и в концентрации, не превышающей 0,5-1 М. Дозированное введение вещества осуществлялось изменением силы и длительности действия форетического тока. Макроаппликация осуществлялась с помощью поляризационной установки толчками положительного (для I-глутамата отрицательного) тока силой 20-80 нА в течение 10-40 с. В некоторых случаях при проверке ареактивно-сти тестируемого нейрона к исследуемому веществу применялась более длительная аппликация. Для исключения возюяных артефактов, связанных с диффузией электролитов из кончиков микроэлектрода, при его приближении к Heiipony применялся ток обратного направления (удерживающий) порядка 10 нА. Эффекты веществ считались истинными в случае их обратимости, воспроизводимости и если они не имитировались контрольными токами. Применение многоканальных микроэлектродов позволило исследовать реакции одного и того же тестируемого нейрона на прямое подведение к нему нескольких нейроакгивных веществ.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЩОВАНИЙ
Характер импульсной активности нейронов
вентрального дыхательного ядра
продолговатого мозгй
Изучение параметров фоновой активности исследованных в данной .серии экспериментов нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга (317 - 182 инсдираторных, 135 экспираторных) показало, что их активность широко варьировала от нейрона к нейрону по соотношению времени начала и конца залпа о соответствующей фазой дыхательного цикла, по длительности залпа, по числу импульсов в залпе, по средней частота импульсов в залпе, по местоположению максимума частоты импульсов в залпе, т.е. по характеру распределения мэним-пульсвнх интервалов внутри залпа, при одновременной стабильности характера импульсной активности каждого нейрона. По главному признаку бульварных дыхательных нейронов - приуроченности их залповой активности к определенным периодам фаз вдоха и выдоха, в популяции как инспираторных, так и экспираторных, нейронов вентрального дыхательного ядра наш выделены группы "ранних", "полных" и "поздних" нейронов- (по принятой классификации), отличающихся по характеру импульсной активности . I. Активность, опережающая фазу инспирации. Залпы этого типа, опережали фазу вдоха примерно на 150-350 мс и занимали первую половину фазы инспирации. Максимум частоты импульсов наблюдался в начала залпа с последующим ослаблением к концу залпа. 2. Активность, совпадающая с фазой'инспирации. Залпы этого типа начинались одновременно с фазой вдоха в заканчивались либо с окончанием инспирации, либо в начале фазы ввдоха. Частота импульсации в залпе постепенно нарастала, достигая максимума или в последней трети залпа (у 58$ нейронов), или в середине залпа (у 42$ нейронов), с последующим урежением к концу залпа. 3. Активность, возникающая после начала фазы инспирации. Залпы этого типа начинались в различные моменты времени после начала фазы вдоха. Частота импульсации в залпах постепенно увеличивалась, достигая максимума в конце залпа, и резко прекращалась с
началом экспирации. В тех же случаях, когда активность "позднего" инспираторного нейрона заканчивалась в начале экспирации, частота импульсавди в залпе отчетливо уменьшалась с началом фазы ввдоха. 4. Активность, опережающая фазу экспирации. Залпы этого типа начинались в конце фазы вдоха, за 200-300 мс до начала фазы выдоха, и занимали первую половину экспираторной фазы. Частота импульсацаи чаще всего быстро достигала максимума в первой половине залпа, постепенно снижаясь к его концу, т.е. в залпах большинства зарегистрированных "ранних" экспираторных нейронов, как и "ранних" инспи-раторных нейронов, максимум наименьших межимпульсных интервалов отмечался в начале залпа. 5. Активность, совпадающая с фазой экспирации. Залпы этого типа возникала одновременно с началом фазы выдоха и прекращались либо с возникновением инспирации, либо за некоторое время до ее начала. Частота им-пульсации в залпах этого типа постепенно увеличивалась, достигая максимума в последней трети залпа, с последующим уре-жением к концу залпа. В залпах некоторых "полных" экспираторных нейронов (у 28%) частота импульсацаа, достигнув максимума к середине залпа, оставалась примерно одинаковой, урежаясь лишь в самом конце залпа. 6. Активность, возникающая после начала фазы'экспирации. За'лпы этого типа начинались в различные моменты времени после начала фазы выдоха и заканчивались большей частью с началом фазы вдоха. Частота импульсации плавно нарастала, достигала максимума во второй половине залпа и резко убывала к концу залпа.
Итак, анализ гистограмм частотного распределения импульсов в залпах различных типов исследованных дыхательных нейронов показал, что группы "ранних" инсгшраторяых и экспираторных нейронов характеризуются сравнительно резким подъемом активности в начале залпа с последующим постепенным снижением к концу залпа, в группах "поздних" анспираторных и экспираторных нейронов, наоборот, максимум частоты импуль- . сов приходится на конец залпа, а у большинства "полных" ин-спираторных и экспираторных нейронов наблюдается в последней трети залпа. Поскольку в обеих популяциях встречаются нейроны с симметричными формами распределения межимпульсных интервалов, этот параметр может быть использован при клас-
сификацяЕ нейронов в популяций и инсшраторных, и экспираторных нейронов. Иначе говоря, характер распределения импульсов в дыхательном залпо является дополнительным критерием, уточняющим принадлежность данного нейрина к определенной группе.
Детальное исследование локализации точек отведения описанных типов дыхательной активности выявило, что наибольшая концентрация нейронов с инспиратсрной активностью набл-д-злась в участке, расположенном на 2 мм ростральное, I мм кз ,% <льнее задвижки, 3-4,5 мм латеральнее от средней линии, на глубине 3,2-4 мм от дорсальной поверхности продолговатого мозга. Нейроны с различными типами экспираторной активности в исследованной наш области вентрального дыхательного ядра чаще всего встречались в участке между задвижной а 2,5 мм каудальнее задвижки, 2,8-4,2 мм латеральнее от средней линии, на глубине 2,5-3,3 мм от дорсальной поверхности медудлн..Инспираторные нейроны преобладали над экспираторными в соотношении приблизительно 2,2:1. Это соотношение могло меняться в зависимости от глубины наркоза, состояния животного. Выявление участков с большей плотностью нейронов одной популяции никак не исключало наличие в этом же участке нейронов другой популяции. При этом ни в популяции инспираторных, ни в популяции экспираторных нейронов^не обнаружено объединения нейронов со сходным типом активности в отдельные клеточные агрегаты. Об этом свидетельствует тот факт, что при некоторых позициях макроэлектрода могла регистрироваться активность как двух нейронов, относящихся к разным группам одной и той же популяции, так и нейронов, относящихся к разным-популяциям. "&к как дыхательные нейрони„р@спо®эяенн среди ретикулярных клеток, активность которых не синхронизирована с фазами дыхания; встречались также случаи одновременной регистрации активности дыхательного и неспецифического (без дыхательной активности) нейронов.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что в исследованной нами области вентрального дыхательного ядра инспираторные и экспираторные нейроны не образуют строго обособленных центров, а распределены локально неравномерной плотностью с зоной перекрытия на уровне задвижки.
Среди исследованных наш нейронов вентрального дыхательного ядра наиболее многочисленную группу в обеих популяциях
«
составляли клетки, имеющие празн'айа "полных". В инспираторной популяции они составляли около ОД? от общего количества зарегистрированных инспираторных нейронов, в зкспараторной - 58£. "Ранние" и "поздние" составляла соответственно в йнсляраторной популяции примерно 40$ ("ранние" - 25$, "поздние" - 15$). в экспираторной - 42$ ("ранние"'- 19$, "поздние" - 23$). Ен-спираторные залпы отличались большей интенсивностью импульса-ции и меньшей длительностью по сравнению с экспираторными.
Помимо описанных типов инспнраторной и экспираторной активности в единичных'-случаях была зарегистрирована активность переходного типа, возникающая во второй половине фазы вдоха и заканчивающаяся в первой половине фазы выдоха (инспираторно-экспираторная), и наоборот (экспараторно-инспираторная), а также активность с модулированной частотой импульсов в залпе. Нейроны с модулированным тэйом активности разряжались непрерывно с резким учащением импульсацаи во время фазы вдоха ила выдоха.
Следует отметить, что какой бы точки зрения ни придерживались исследователи, изучающие структурно-функциональную организацию центрального дыхательного аппарата, относительно взаиморасположения инспираторных и экспираторных нейронов, большинством из них признается, что во время каждой фазы дыхательного цикла в активность вовлекаются .несколько групп дыхательных нейронов с разными характеристикам, т.е. признается многообразие видов фоновой активности бульбарных дыхательных нейронов. Разногласия имеются лишь в отношении количественного соотношения различных групп дыхательных нейронов продолговатого мозга. Эти расхождения, возможно, объясняются тем, что соотношение возбужденных инспираторных и экспираторных нейронов и различных типов в каждой из популяций зависит от состояния животного, условий опыта, т.е. от режима работы бульбарного дыхательного центра.
Микроэлоктрофизиологическое исследование влияния передней лимбической коры на активность нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга
Изучены реакция 175 одиночных функционально идентифицированных нейронов вентрального дыхательного ядра (9*6 инспк-
ратсрных, 79 экспираторных) ва низко- и высокочастотное раздражение передней лимбической коры.
Стимуляция исследованных наш димбических структур частотой 5-имп/с не оказывали влияния на активность тестируемых дыхательных нейронов. Слабый эффект, который начинал проявляться с Ю имп/с,. однонаправленно усиливался с увеличением частоты раздражения. В .основном применялось раздражение частотой 30-50 иып/с. Бри этом изменения в характере импульс-*ной активности .дыхательных нейронов и дыхания животного при . стимуляции л^бвческих структур имели более низкий порог, чем сдвиги исходного уровня артериального давления. Исходя из этого*.учитывались лишь те.изменения в характере активности'дыхательных нейронов, которые возникали сразу после на-
• несения порогового для дыхания раздражения данной структуры,
• и. не учитывались вторичные изменения, которые могли возникнуть в результате изменения гемодинамики.
Во всех экспериментах эффекты' считались истинные только в. случае их обратимости и воспроизводимости.
Стимуляция различных участков исследуемой области вызн-
• вала выраженные изменения импульсной активности (подавляющего или облегчающего характера) у 130 дыхательных нейронов (72 инсЦраторных, 58 экспираторных). .
■ • От общй'о количества .отвечающих инбпироторных нейронов подавление, активности наблюдалось у 50 нейронов, активация -
• у 22. Зффект подавления преобладал и в популяции экспираторных'нейронов. Из 58 реактивных экспираторных нейронов угнетением активности на стимуляцию-передней.лимбической коры
•отвечалг-41 нейрон, а возбудительные реакции были зарегистрированы У 17 нейронов.
. Подавляющие реакции -выражались в уменьшении средней частоты импульсов в дыхательных залпах и в удлинении межзалповых интервалов. При возбудительных реакциях инспираторных I экспираторных нейронов, напротив, имело место увеличение средней частоты импульсов в дыхательных залпах и уменьшение межзалповых интервалов.
Как при увеличении, так и при уменьшении средней частоты импульсов в различных дыхательных залпах под влиянием ' стимуляции исследуемых структур могли меняться длительность
залпов н количество импульсов в них без изменения характера распределения импульсов в залпе. При этом изменения средней частоты импульсов в залпах "полных" инспараторных и экепира- . торных -нейронов наблюдались за счет изменения в равной степе--„ни как.числа импульсов в залпе, так и*длительность 'залпа,, тогда как у "ранних" я "поздних" инспираторных и экспираторных нейронов средняя частота импульсов мёнядась в большей степени за счет изменения количества импульсов в залпе, чем длительности залпа. - 4
• При сравнонаи пороговых ингвнсивносгей.раздражений, вызывающих реакции инспираторных и экспираторных нейронов,' установлено, что порог более низкий для инспираторных-единиц. В популяции инспираторных нейронов наиболее' легкр возбудимыми оказались раниеинспираторные нейраны.
Изменения в характере залповой активности-Тестируемых' дыхательных -нейронов со про воздались соответствующими изменениями дахания животного. ¡Гак, -уменьшение средней, частоты,импульсов в залпе и удлинение межзалповых интервалов,, т.е. уменьшение сюэрости их возникновения, сопровождалось уреже-нием дыхания, тогда как-при. изменении'этих параметров в сторону увеличения наблюдалось учащение дыхания.
Итак, анализ.параметров залповой активности, различных типов дыхательных нейронов, зарегистрированных в норме и в условиях стимуляцаи, показал, что наиболее изменчивыми' параметрами дыхательных залпов оказались, скороать их возникнове- ' н'ля, длительность и количество импульсов в них,, а наиболее • устойчивыми - соотношение залпов с фазами дыхания и характер распределения межимпульсных интервалов в залпе. -
Детальное исследование локализации участков Кор! передг ней лимбической области, стимуляция -которых вызывала описанные изменения импульсной активности- дыхатадьных' нейронов, выявило, что подавляющие реакции в большинстве случаев развивались при раздражении дорсальной области передней лимбической коры,, в то время как возбудительные - при стимуляции нижней, вентральной ее части. Возбудительные реакции в-основном регистрировались при стимуляции, участков лимбической коры, расположенных на уровне и ниже, колена мозолистого4 тела.. При повторных раздражениях одних и тех же участков передней
лимбической коры направленность реакций оставалась без изменения. алеете с тем следует отметить, что подавляющие реакции, вызванные стимуляцией дорсальной области передней лимбической коры, часто реверсировали в возбудительные при перемещении раздражающих электродов в взнтральную область. Сопоставление эффективности стимулящй обеих зрн передней лимбической кора показало большую рзактивность дыхательных нейронов на раздражение дорсальной области по сравнению с вентральной.
. Таким образом, характер ответных реакций тестируемых дыхательных нейронов (преимущественно подавление или возбуждение) был тесно связан с локализацией стимуляций, т.е. в передней лимбической коре нами обнаружены неоднородные по характеру своих влияний функциональные зоны, вызывающие качественно различные реакции исследуемых дыхательных нейронов. При зтом подавляющие реакции значительно преобладали над возбудительными .
Исследование особенностей эфферентных влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на активность бульбарннх дыхательных нейррнов
• Влияние кортикомелнальной группы ядер. Исследованы реакции 168 дыхательных нейронов продолговатого мозга (92 ин- ' спвраторных,' 76 экспираторных) на стимуляцию центрального, ыедиального и кортикального ядер миндалевидного комплекса.
При сравнении эффективности эфферентных влияний отме-ченнах ядер выявлена несколько большая реактивность исследованных инешраторных и экспираторных нейронов на стимуляпрю центрального ядра. Так, реактивными на раздражение центрального ядра оказались 140 дыхательных нейронов (77 инспиратор-ных,' 63 экспираторных), на стимуляцию медиального - 134 (74 инспираторных, 60 экспираторных), а кортикального - 129 (71 внепираторннх, 58 экспираторных).
При раздражении центрального ядра возбудительные и подавляющие .реакции инспираторннх и экстре торных нейронов развивались почти в равном соотношении с некоторым преобладанием возбудительных реакций (55$). Так, из 77 реактивных
инспираторных нейронов 42 нейрона отвечали г.озбудителышм, а 35 - подавляющим типом реанщй. Такая же направленность изменения импульсной активности наблюдалась и в популяции экс-, пира торных нейронов. Из 63 отвечающих экспираторных нейронов-облегчение активности обнаружилось у 35, подавление - у 28 нейронов.
Несколько большее превалирование возбудительных реакций дыхательных нейронов наблюдалось при раздражении медиального и кортикального ядер. При стимуляции медиального ядра возбуждением отвечали 81 дыхательный нейрон (45 инспираторных, 36 экспираторных), а подавлением - 53 (29 инспира-торных, 24 экспираторных); при раздражении кортикального ядра активация наблюдалась у 73 дыхательных нейронов Х43 инспираторных, 35 экспираторных), угнетение активности имело место у 51 нейрона (28 инспираторных, 23 экспираторных).
Эффекты стимуляции медиального и кортикального ядер носили в основном однотипный характер за исключением нескольких случаев, когда нейрон, ареактивный на раздражение кортикального ядра, отвечал вэзбудительным (в 3-х случаях) или подавляющим (в 2-х случаях) типом реакций на стимуляцию медиального ядра аттдаля.
Итак, полученные экспериментальные данные относительно эфферентных влияний центрального, медиального и кортикального ядер на импульсную активность одиночных инспираторных и экспираторных нейронов показали, что кортикомедиальная группа ядер миндалевидного комплекса вызывает выраженные изменения импульсной активности исследованных нейронов как облегчающего, так и подавляющего характера с некоторым преобладанием активирующих влияний. Изучение реакций нейронов вентрального дыхательного ядра, зарегистрированных пра сканиру-- ищем.раздражении кортикомедиальной группы ядер, выявило отсутствие топографической упорядоченности облегчающих и подавляющих зон в этой группе ядер. Обнаружено, что среди ядер кортикомедиальной группы наиболее эффективным эфферентным влиянием на импульсную активность исследованных.дыхательных нейронов обладает центральное ядро, наименее - кортикальное.
Влияние базолагезальной группы ядер. Результаты настоя-
щего исследования показали, что стимуляция базолатеральной группы ядер амигдалы оказалась менее эффективной в отношении влияния на импульсную активность бульбарных дыхательных нейронов по сравнению с эффективностью раздражения кортикомеди-альной' группы ядер. Так, из 164 исследованных дыхательных нейронов (91 инспираторных, 73 экспираторных) отвечающими на стимуляцию базолатеральной группы ядер оказались 103 нейрона (57 инспираторных, 46 экспираторных).
Изучение характера и количественного соотношения различных ответных реакций нейронов вентрального дыхательного ядра на раздражение базолатеральной группы ядер выявило преобладание подавляющих реакций. От общего количества реагирующих дыхательных нейронов угнетение активности обнаружилось у 67 нейронов (37 инспираторных, 30 экспираторных), а возбудительные реакции наблюдались у 36 нейронов (20 инспираторных, 16 экспираторных). Одновременно результаты данной серии экспериментов выявили выраженную специфичность характера ответных реакций тестируемых дыхательных нейронов на стимуляцию базолатеральной группы ядер в зависимости от зоны раздражения.
Обнаружено, что раздражение латерального ядра амигдалы в основном оказывало Подавляющее действие на импульсную активность инспираторных и экспираторных нейронрв продолговатого мозга. Преобладание подавляющих влияний на спайковую активность различных типов дыхательных нейронов наблюдалось и при раздражении мелко клеточной области базального ядра.
Из структур базолатеральной группы ядер облегчающее влияние на импульсную активность исследованных дыхательных нейронов оказывала в основном крупноклеточная область базального ядра, что выражалось в увеличении средней частоты импульсов в дыхательных залпах и уменьшении межзалповых интервалов, т.е. увеличении скорости их возникновения, сопровождающееся учащением дыхания. Необходимо отметить достаточно выраженную стабильность эфферентных влияний мелкоклеточной и крупноклеточной областей базального ядра при повторных раздражениях.
Сравнение пороговых интенсивностей раздражения ашгда-лярных структур, вызнвапцпх ответные ре акт«; различных типов исследованных днхателькнх а Тронов, тагам •-¡чало, что по-
рог вызова реакщй для инспираторнгх единиц (особенно раане-инспираторных) более низкий, чем для экспираторных.
Таким образом, сравнительное изучение эфферентный влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на импульсную активность одиночных функционально идентифицированных нейронов вентрального дыхательного ядра продолгоеэ-того мозга показало, что нисходящие влияния каждой из исследованных структур имеют свои особенности и обнаруживают четкие различия в характере вызываемых реакций. Результаты' проведенного исследования дают основание заключить, что в пределах миндалевидного комплекса существует определенная дифференциация эфферентных влияний на импульсную активность бульбар-ннх дыхательных нейронов. Полученные наш экспериментальное данные о качественном отличии эфферентных влияндй кортикоме-диальной и базолатвральной групп ядер на активность респираторных нейронов продолговатого мозга указывают, по-видимому, на разную функциональную организацию амигдалярннх структур, отличающихся по своему филогенетическому развитию.
Сравнительное изучение характера эфферентных влияний гипоталамических структур на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга
Втаяние задне- и перзлнемэдпального гипоталамуса. Изучены реакция 138 одиночных дыхательных нейронов (76 инспираторннх, 62 экспираторных), локализованных в области вентрального дыхательного ядра. От общего количества исследованных анспираторных л экспираторных нейронов реактивным! на стимуляцию заднемедиального гипоталамуса оказались 68 инспиратор-ных и 56 экспираторных, а на раздражение переднемедиального -65 инспиреторных и 54 экспираторных нейронов..
Возбудительные реакции при стимуляции заднемедиального гипоталамуса наблюдались у 53 инспираторннх и 44 экспираторных нейронов, а переднемедиального - у 43 инспираторннх и 36 экспираторных. Эти реакции выражались в повышении средней частоты импульсов в дыхательных залпах как за счет увеличения числа импульсов з залпе, так и уменьшения длительности залпов. При этом имело место укорочение межзалповых ангерва-
лов, т.е. увеличение скорости их возникновения, сопровождающееся учащением дыхания.
Остальные 15 реактивных инсдираторных, 12 экстраторных нейронов на стимуляцию задаемедиального и 22 инспиратор-ных, 18 экспираторных нейронов - переднемедиального гипоталамуса отвечали подавляющим типом реакций, что выражалось в уменьшении средней частоты импульсов в дыхательных залпах и в удлинении межзалювнх интервалов, сопровождающемся уреже-нием дыхания.
Как при облегчающих, так и при подавляющих влияниях гипоталамуса порог вызова реакций в популяции инслираторных нейронов был ниже, чем в популяции экспираторных. Среди ин-спираторных нейронов наиболее низкий порог наблюдался у раннеинспирвторных нейронов.
При сравнительном исследовании действия стимуляции задней и. передней областей медиального гипоталамуса на импульсную активность одних и тех же бульварных дыхательных нейронов выявлены как однонаправленные (облегчающие, подавляющие, отсутствие эффекта), так и различные сочетания разнонаправленных влияний.
Установлено несколько типов разнонаправленных влияний: I) раздражение задней области оказывало возбуждающее влияние на имйгльсную активаость дыхательного нейрона, передней - подавляющее; 2) стимуляция задней области вызывала подавляющий эффект, передней - облегчающий; 3) раздражение задней области не, оказывало заметного влияния на активность исследуемого нейрона, передней - вызывало подавляющий или вовбувдающий эффект; 4) стимулящя задней области вызывала облегчающий или подавляющий эффект, передней - не оказывала влияния на импульсную активность тестируемого нейрона.
Итак, при детальном сканирующем раздражении задней и передней областей медиального гипоталамуса нами выявлено отсутствие рещпрокнык механизмов, четко локализованных в цра-делах этих структур, в отношении влияния на активность респираторных нейронов продолговатого мозга.
Вшщде задяе- ц переднелэтегального гипоталамуса. Эффекты стимуляции латеральных структур гипоталамуса исследо- • ваяы на 143 бульбарных дыхательных нейронах (78 инспиратор-
них, 65 экспираторных). Из них реактивными на раздражение заднелатерзльного гипоталамуса оказались 137 нейронов (75 ин-с пара торных, 62 экспираторных), а переднелатерального - 127 (69 инсдираторних, 58 экспираторных).
При раздражении здднелатерального'гипоталамуса из 75 реактивных ияспираторных нейронов 61 нейрон отвечав возбуди- ■; тельным типом реакций, 14 - подавляющим. Такая не направленность реакций наблюдалась и в популяции экспираторных нейронов. Так, из 62 отвечающих экспираторных нейронов облегчение активности наблюдалось у 50 единиц, угнетение - у 12.
Преобладание возбудительных реакций дыхательных нейронов обнаружилось и при раздражении переднелатерального гипоталамуса. Как показал анализ полученных данных, аз 69 реактивных инспираторннх и 58 экспираторных нейронов активация в ответ на стимуляцию переднелатерального гипоталамуса наблюдалась у 48 пнепираторных и 40'экопараторных. Остальные 21 реагирующих инспираторннх и 18 экспираторных нейронов отвечала на раздражение переднелатерального гипоталамуса уменьшением средней частоты импульсов в дыхательных залпах и скорости их возникновения, сопровождающемся урезеяяем 'дыхания.
Таким образом, Изменение паттерна дыхания животного под влиянием стимуляции гипоталамуса, как и других исследованных нами структур лимбической системы, всегда было связано с изменением скорости возникновения, дыхательных залпов и средней частоты импульсов в них без изменения характера распределения межимпульсных интервалов. Этот инвариантный показатель, вероятно, отражает свойства и место однородной группы нейронов в системе, а также взаимосвязи с нейронами других групп, поскольку сохраняет стабильность в диапазоне применяемых стимуляций исследуемых структур, пока сохраняется ритмическое дыхание. Только при экстремальных воздействиях устойчивость распределения межимяульсных интервалов в дыхательных • залпах временно нарушается, что выражается в превращении залювой импульсация в непрерывный разряд, либо в полном прекращении разрядной активности нейрона, т.е. имеет место нарушение функции дыхательного нейрона, связанное с расстройством межнейронннх взаимоотношений в дыхательном центре, приводящее к остановке дыхания. Так, в ряде случаев при по-
давяяющих влияниях стимуляции исследуемых структур лимбичес-кой системы некоторое превышение пороговой интенсивности реа-дражения вызывало полное прекращение разрядной активности тестируемого дыхательного нейрона с последующим восстановлением исходной активности после выключения раздражения.
Сравнительное изучение действия раздражения задней и передней областей латерального гипоталамуса на импульсную активность одндх и тех же дыхательных нейронов продолговатого мозга показало, что эти влияния, как и при стимуляции задне- и переднемедиального гипоталамуса, могли быть как однонаправленными, так и разнонаправленными. Заслуживает внимания тог факт, что при исследовании однонапра|кпешшх влияний указанных структур выявлены более низкий порот' и большая выраженность ответных реакций тестируемых дыхательных нейронов на стимуляцию заднелатерального гипоталамуса по сравнению с раздражением переднелаторального.
Таким образом, подученные нами экспериментальные данные показала, что структур медиального и латерального гипоталамуса оказывают 'весьма выраженное находящее влияние на им-пульоную активность нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга. Шесте с тем 'результаты настоящего исследования указывают на отсутствие в этих структурах строгой локализации облегчающих я подавляющих зон. Полученные данные свидетельствуют лишь б некотором преобладании подавляющих влияний со стороны переднего (передней областя медиального и латерального гипоталамуса) по сравнению с задним. При стимуляции как задне-,в переднеыедиальцого, так и задне- и перед-нелатерального гипоталамуса превалировали возбудительные реакции. Установлено, что наиболее эффективное, низкопороговое и выраженное влияние на активность Исследованных дыхательных нейронов оказывает заднелатеральный ^ипоталамус.
Реакции инспирэторных и экспираторных нейронов на пачечное раздражение заднелатерального гипоталамуса в разные Дазц дыхательного- цикла. Изучены реакции 59 инсдираторных и 42 экспираторных нейронов вентрального дыхательного ядра, активных в течение всей соответствующей фазы ("полных" по принятой классификации).
Ареактявныщ на стимулянта гяшт&яшуоа оказались около
Ъ% исследованных дыхательных нейронов. 78$ инспираторных нейронов от общего количества реактивных инспираторных нейронов на раздражение гипоталамуса в первую половину .фазы инсшрации отвечали возбудительным типом реакций. У 22% рё'активных^ин-спираторннх нейронов в этих условиях эксперимента, напротив, наблюдалось уменьшение средней частоты импульсов в залпе, за которым следовало некоторое укорочение послезалпового интервала. Стимуляция гипоталамуса во второй половине фазы инспирации не оказывала заметного влияния на паттерн инспираторных залпов. Пачечное раздражение гипоталамуса в фазе инспирации независимо от момента нанесения стимулов не вызывало реверсии фаз дыхательного цикла (от инспирации к экспирации)'.
Реверсия фаз дыхательного цикла (от экспирации к инспирации) имела место только при раздражении во время фазы экспирации. Стимуляция гипоталамуса в разные момента экспираторной фазы в большинстве случаев вызывала внеочередной переход от фазы экспирации к фазе инспирации. Прекращение экспираторного залпа импульсов под влиянием стимуляции гипоталамуса сопровождалось укорочением послезалпового интервала и активацией следующего экспираторного залпа импульсов. Описанный тип ответов наблвдался у 75$ реактивных экспираторных нейронов. Остальные 2Ь% реактивных экспираторных йейронов, напротив, отвечали на стимуляцию гипоталамуса увеличением длительности экспираторного залпа импульсов.
При регистрации спайковой активности инспираторных нейронов стимуляция гипоталамуса во время экспираторной фазы, позволила выявить в 40 случаях из 57 возникновение внеочередного залпа импульсов тестируемого инспираторного нейрона. В 5 случаях в этих условиях эксперимента эффект отсутствовал, а в 12 - раздражение гипоталамуса в фазе экспирации приводило к задержке возникновения очередного инспираторного залпа импульсов. При этом в связи с усилением хеморэцеп-торного драйва наблюдалась активация следующего залпа импульсов тестируемого инспираторного нейрона.
Результаты этой серии- экспериментов свидетельствуют, таким образом, о том, что гиготаламический контроль активности исследованных респираторных нейронов продолговатого иоз-га чс^зстшимтоя посредством действия на механизм вшиаче-
ввя экспираторной фазы и включения инспираторной фазы. Облегчающее влияние гипоталамуса на этот механизм выражалось в появлении внеочередного залпа инспираторных нейронов и возникновении внеочередного вдоха (реверсии фаз дыхательного цикла от экспирации к инспирации). Подавляющее действие, напротив, приводило к запаздыванию появления фоновой активности инспиратор-ных нейронов и очередной смены фаз дыхательного цикла от экспирации к инспирации.
Мщхзионофоретическое исследование влияния аминокислот и моноаманов на активность нейронов области бульбарного дыхательного центра .
Влияние Ь-^глутамата q ГАМК. От общего количества нейронов (95 - 37 инспираторных, 28 экспираторных и 30 несдецифи-ческих) области вентрального дыхательного ядра, у которых исследовалась чувствительность к 1^глуташту, 33 инспира торных, 25 экспираторных и 26 несдецафических нейронов показала выраженные возбудительные реакции на введение Ь-гдутамата. Тормозные реакции не были обнаружены.
Активация нейронов возникала с коротким латентным периодом (0,5-1 с) и длилась в течение всего времени введения вещества. После прекращения ионофоретической аппликации L-глутамата исходный уровень фоновой активности нейрона восстанавливался обычно в течение 15-50 с. Микроионофоретическая аппликация L-глутамата оказывала выраженное облегчающее влияние на импульсйую активность тестируемого нейрона током уже порядка 20-30 нА.
Диаметрально противоположный эффект наблюдался при ыи-кроионофоретической аппликации ГАМК. Все реактивные респираторные и неспецифические нейроны (32 инспираторных, 24 экспираторных и 23 неспецифических) отвечали тормозным типом реакций. Ареактивннми к ГАМК оказались 5 инспираторных, 4 экспираторных и 7 неспецифическнх нейронов.
Тормозные реакции возникали с латентным периодом 1-2 с, а эффекты последействия могли наблюдаться в течение 15-40 с после выключения форетического тока.
Возбуждающие и тормозные влияния L-глутамата и ГАМК
соответственно были генерализованными для популяции инспира-' торных и экспираторных нейронов. Эти генерализованные влияния наиболее четно выявлялись в опытах, в которых одновременно регистрировалась активность инспираторного и экспираторного нейронов, или в тех случаях, когда аппликация Ь-глутамата. вместе с возбуждением инспираторного (экспираторного) нейрона вызывала разрядную деятельность соседнего, ранее молчащего экспираторного (инспираторного) нейрона. Так, в ряде случаев введение 1^-глутамата наряду с активацией тестируемого фоново-активного инспираторного нейрона выявляло фоновомолчащий экспираторный нбйрон. При выключении форетического тока на фоне частично восстановленной исходной активности инспираторного нейрона, когда пока еще продолжала проявляться разрядная деятельность экспираторного, микроионофоретяческая аппликация ГАМК подавляла импульсную активность как выявленного экспираторного, так и тестируемого инспираторного нейронов. Поело выключения форетического тока восстанавливалась активность только тестируемого инспираторного нойрона.
Результаты наших экспериментов показали также, что ми-кроионофоретическая аппликация блокатора ГАМК-роцепторов -бикукулина, антагонизировала ингибиторные реакции как инспираторннх (у 26 из 30), так и экспираторных (у 19 ия 22) нейронов вентрального дыхательного ядра, вызванные микроапшш-кацией ГАМК. Эти данные, свидетельствующие о специфичности тормозного действия ГАМК на активность исследованных инспираторннх и экспираторных нейронов, дают основание предположить участие ГАМК в ингибиторных механизмах бульбарного дыхательного центра.
Влияние норадреналина и серотонина. Получоннне экспериментальные данные выявили высокую чувствительность нейронов области вентрального дыхательного ядра к микроионофоретачес-кой аппликации моноаминов. Так, при подведении норадреналина из 67 исследованных инспираторннх, 56 экспираторных и 45 неспецифических нойронов реагирующими оказались 75,1? инспираторннх. 75,2$ экспираторных и 75,5? неспацифических нейронов. При этом из 51 реактивных инспираторннх, 42 экспираторных а 34 неспецифичсских нейронов возбудительным типом реакций отвечали 30 ино гиря торных, 24 экспираторных и "21 неспецифлчес-
кик нейронов. Подавляющие реакции наблюдалась соответственно 7 21 инспираторного, 18 экспираторных и 13 неспевдфических нейронов. Среди исследованных нейронов не удалось обнаружить заметной разницы в порогах чувствительности к норадреналину.
Четкие реакции лнспираторных, экспираторных и неспецифических нейронов возникали при силе форатического тока 4060 нА с латентным периодом 3-6 с, длились в течение всего времени введения вещества и исчезали через 10-20 с после прекращения аппликации.
При подведении сэротонина из 64 исследованных инспира-торных, 53 экспираторных и 41 неспецифических нейронов реактивными оказались 45 (70,3$) инспираторных, 37 (69,8$) экспираторных и 29 (70,6$) неспецифических нейронов. Половина отвечающих нейронов показали возбудительные реакции, остальные - угнетающие.
При исследовании влияния микроионофорвтической аппликации норадреналана и серотонина на импульсную активность одних и тех же тестируемых нейронов наш установлено 9 различных комбинаций эффектов, которые могли быть как однонаправленными, так и -разнонаправленными. Нейроны относились к разряду реактивных, если их импульсная активное?-? менялась яе менее, чем,на 20% от исходного уровня, а наблюдаемые реакции считались истинными при их обратимости и воспроизводимости. Повторная аппликация всегда"производилась после полного восстановления исходной фоновой активности тестируемого нейрона.
Сравнение возбудительных и тормозных эффектов микроионофорвтической аппликации моноаминов и аминокислот - Ь-глутама-та и ГАЩ .соответственно на активность одних и тех же исследуемых нейронов показало, что возбудительные-и тормозные реакции, наблюдаемые при подведении моноаминов, были несколько слабее и шелл более кратковременный следовой эффект по сравнению с действием на те же нейроны аминокислот._ • Угнетающее влияние микроаппликации моноаминов также отличалось от глубокого подавляющего действия на те же самые тестируемые нейроны области вентрального дыхательного ядра микроинъекции ГАМК. Так, если при аппликации моноаминов подавление фоновой активности тестируемого нейрона выражалось
в уменьшении максимальной, пиковой частоты импульсов в залпе, то микроионофоретическое подведение ГАМК к его мембране вызывало полное прекращение импульсной активности с последующим восстановлением после прекращения форетического тока.
Изучение реакций инспираторных и экспираторных нейронов вентрального дыхательного ядра на микроионофоретическую аппликацию норадреналина на фоне блокады альфа- или бета-адренорецепторов фентоламином и пропранололом соответственно выявило, что активирующие влияния норадреналина на исследуемые дыхательные нейроны в большинстве случаев (у 39 клеток • из 46) ангагонизировались злектрофоретически. введенным фентоламином, а подавляющие - пропранололом (у 32 клеток из 38). Полученные данные, таким образом, показали, что возбудительные реакции тестируемых нейронов при микроионофоретическом подведении норадреналина опосредованы активацией альфа-адре-норецепторов, а подавляющие - бета-адренорецепторов.
Итак, результаты настоящего исследования свидетельствуют о важной роли моноаминергических механизмов в процессах центральной регуляции паттерна дыхания.
Влияние микроионофоретической аппликации
холинеруических и опиатных веществ на активность ■ нейронов области бульбарного дыхательного центра
Влияние ацзгилхолина, №■ и Н-холиноблокаторов. Изучены реакции 62 дыхательных.(34 инспираторных, 28 экспираторных) и 56 неспецифических нейронов области вентрального дыхательного ядра. Из общего количества исследованных нейронов чувствительными к ацетилхолину оказались 14 дыхательных (6 инспираторных, 8 экспираторных) и 19 неспецифических. Основным показателем того, что тестируемый нейрон относится к категории холиночувствительных, служило обратимое, воспроизводимое, однонаправленное изменение его биоэлектрической активности в ответ на прямое микроионофоретическое подведение ацетилхоли-на. При этом учитывались лишь те эффекты, при которых нейро-нальная активность изменялась не меньше, чем на 20^ от исходного уровня активности нейрона.
II дыхательных (5 инспираторных, 6 экспираторных) :: 15
^специфических нейронов отвечали возбудительным типом реакций на микроиояо;роретичесное подведение ацетилхолина. Повышение активности реактивных клеток проявлялось с латентным периодом, равным 7-10 с, и длилось в течение всего времени введения вещества. После прекращения форетического тока исходный уровень активности нейрона восстанавливался через 8-12 с.
Возбудительный эффект ацетилхолина антагонизировался М-холиноблокатором атропином только у I инспираторного и 3 неспецифическнх, а Н-хслиноблокатором этпеналом - у 2 неспецифическнх нейронов.
Подавление импульсной активности в ответ на электрофоре-тическое подведение ацетилхолина наблюдалось у I инспираторного, 2 экспираторных и 4 неспецифическнх нейронов. Остальные тестируемые нейроны оказались а реактивными к действию ацетилхолина. Нечувствительные к ацетилхолину нейроны выявлялись в результате повторных и длительных (до: 80 с) аппликаций, при которых их импульсная активность не претерпевала заметных изменений.
На электрофоретич векую ■ аппликацию атропина большинство реактивных нейронов (8 инспираторных, 6 экспираторных и 21 неспецифических) отвечали тормозным типом реакций. Реакция длилась в течение всего времени введения вещества и исчезала через 5-10 с после прекращения фореза. Эффекты возникали с латентным периодом 6-10 с.
Возбудительные реакции на введение атропина наблюдались у 2 инспираторных, I экспираторного и 4 неспещфических нейронов. Важно отметить, что реактивными к действию атропина были как чувствительные (8 дыхательных и II неспецифическнх), так и нечувствительные (9 .дыхательных и 14 неспецифических) ' к ацетилхолину нейроны.
При изучении влияния шкроионофоретической аппликации этпенала на активность исследуемых.нейронов выявлен в основном умеренный подавляющий эффект у 6 инспираторных, 5 экспираторных и 12 неспецифическнх нейронов. Активацией на введение этпенала отвечали только I инспираторный, I экспираторный и 3 неспецифических нейрона. Остальные тестируемые нейроны на этпенал не реагировали. И в данном случав не было
<
обнаружено корреляции между чувствительностью исследуемых нейронов к ацетилхолину и этпеналу.
В наших экспериментах выявлена бо&ьшая встречаемость хо-линореактивных клеток среди неспецифических нейронов^^бласти вентрального дыхательного ядра по сравнению с нейронами, разряжающимися в ритме дыхания. При этом неспеца^аческие холин-ергические нейроны были диффузно рассеяны среди нехолинерги-ческих.
В ряде опытов, исследовались реакции выявленных холино-цептивных дыхательных нейронов на электрическую стимуляцию заднелаторальной области гипоталамуса в условиях аппликации к их мембране М- или Н-холиноблокаторов (атропина и этпенала соответственно).
Полученные результаты показали, что облегчающие влияния гипоталамуса на активность нейронов вентрального дыхательного ядра не купировались при аппликации к мембране тестируемых нейронов ни атропина, ни этпенала.
Таким образом,, низкий процент холинореактивных клеток, обнаруженных нами среди исследованных дыхательных нейронов, и тот факт, что реакции этих нейронов на подведение ацетилхо-лина не антагонизировались М- или Н-холиноблокаторами, т.е. были неспецифическими, дают основание предположить, .что хо-линергическая регуляция паттерна дыхания осуществляется не на бульбарном уровне.
Влияние морфина и эндогенных опиоядных пептидов. Результаты данной серии экспериментов показали, что микроионофоре-таческая аппликация как экзогенных (морфин), так и эндогенных (мет-энкефалин, бета-эндорфин) опиоидов оказывала преимущественно угнетающее действие на импульсную активность большинства дыхательных и неспецифических нейронов области вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга. Так, около 79? реактивных дыхательных и 77? неспецифических нейронов, у которых исследовалась чувствительность к морфину, показали выравненные подавляющие реакции на введение этого наркотика.
Изменения нейрональной активности реактивных клеток возникали с латентным периодом 4-8 'с и длились в течение всего времени введения вещества. Эффект последействия, наблюла еглый после выключения форетического тока, равнялся Ю-
»
15 с. Сходные эффекты наблюдались и при микроионофоретическом подведении исследованных опиоидных пептидов (мет-энкефелина и бета-эндорфина). И в этих случаях выявлено явное преобладание подавляющих реакций дыхательных и деспецифическвх нейронов.
Из 86 исследованных- дыхательных нейронов (49 инспиратор-ных, 37 экспираторных) реактивными на аппликацию ыет-энкефали-на оказались 63 нейрона (36 инспираторных, 27 экспираторных). Из них подавляющие реакции на введение мет-энкефалина имели место у 51 дыхательного нейрона (29 инспираторных, 22 экспираторных), возбудительные -.у 12 (7 инспираторных, 5 экспираторных) . Из 33 исследованных на чувствительность к мет-энкефа-лину неспецифических нейронов 19 подавлялись, 5 возбуждались и 9 нейронов оказались а реактивными
При макроапшшкацаи бета-эндорфина из 81 дыхательного-нейрона (47'инспираторных, 34 экспираторных) реагирующими оказалась 35 инспираторных (74,4^ от"общего количества исследованных инспираторных нейронов) и 25 экспираторных-(73,5£). При этом подавляющие эф|екты наблюдались у 28 инспираторных и 19 экспираторных, а активация у 7 инспираторных и 6 экспираторных нейронов. Преимущественно угнетающее влияние микроионо-форетической аппликации бета-эндорфина обнаружено и среди неспецифических нейронов области вентрального дыхательного ядра.
Сравнение эффектов микроионофоретаческой аппликации исследованных опиатных веществ и ГАМЕС на активность одних и тех же тестируемых нейронов области вентрального дыхательного ядра показало, что паттерн тормозной реакции при действии ГАЖ существенно отличается от характера угнетающего влияния опиатных веществ. Последние подавляли максимальную частоту импульсов в залпах исследуемых нейронов, в то время как ГАЖ полностью блокировал их спайковую активность.
Выявленные в наших экспериментах подавляющие реакции нейронов вентрального дыхательного ядра на мякрояонофорета-ческую аппликацию опиоидных пептидов и морфина являются, по-видимому, специфическими, т.е. связанными с опиатннми рецепторами., так как в большинстве случаев (у 92$ реактивных нейронов) антагонизировались михроионофоретически введенным блокатором опиатных рецепторов - надоксоном, т.е. имели нз-локсонзависимый характер. Возбудительные же реакции тестируе-
мых нейронов на микроионофоретическую аппликацию морфина и опиоиднюс пептидов наблюдались значительно pese подавляющих и практически не блокировались налоксонЪм.
Такта образом, полученные результаты свидетельствуют о преимущественно угнетающем специфическом влиянии исследованных опиоидных" агонистов на активность нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатою мозга.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Установленные в настоящей рабств особенности нейрофизиологической структуры различных лимбических 'звеньев функциональной системы регуляции дыхания свидетельствуют о более гибкой организации регуляторннх механизмов на уровне гипоталамуса и кортикомедиальной амигдалы. Очевидно, эти структуры лимби-чаокого мозга участвуют'в -регуляции активности бульбарных дыхательных нейронов без четкой топографической организации и их эфферентные влияния являются менее дифференцированными, чем влияния базолатеральной амигдалы а лимбической коры. На основании полученных наш данных о наличии в передней лимбической яоре и базолатеральной амигдалв определенно локализованных дискретных зон, оказывающих качественно различное влияние на активность респираторных нейронов продолговатого мозга, мы полагаем, что эти структуры, являясь филогенетически более поздними образованиями лшбической системы, имеют сходную функциональную организацию.
Благодаря прямым двусторонним связям лимбической корн с амигдалой и гипоталамусом ( Wolf, Satin, 1966; Замбржицквй, 1972; Aggieton et al., 1980; Price, 1981; Карцева, 1985) обеспечивается, вероятно, оперативная модуляция уровня активности бульбарных дыхательных нейронов в зависимости от конкретных потребностей организма. Использованная нами методика тетанического раздражения является адекватной для целей нашего исследования - изучения характера и- особенностей модулирующего влияния различных структур лимбического мозга на активность бульбарных дыхательных нейронов, но не позволяет выявить moho-, олчго- или полисинаптическую организацию проводящих путей нисходящего разряда этих образований. Однако выявленная в ряде
гистохимических исследований ( ТеггеЪеггу, Neafsey, 1985; Van der Кооу at аХ., 1984; Карцева, 1985) прямая проекция передней лимбической корн в область ваго-солитарного комплекса продолговатого моЗга указывает на возможность п непосредственной (без релейных переключений) ламбикофугальнсй модуляции активности бульбарных дыхательных нейронов.
СравнительЕО-микроэлактрофизиологическое исследование эфферентных влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на импульсную активность нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга выявило особенности этих влияний и различия в характере вызываемых ими реакций. Весьма вакнш, на наш взглвд, является тог факт, что полученные наш данные показали качественно различный характер ответных реакций исследованных дыхательных нейронов при стимуляции кортико^ медиальной или базолатеральной труппы ядер, что указывает на разную функциональную организацию аиигдалярных структур, отличающихся по своему филогенетическому развитию. Выявленные в наших экспериментах возбуждающие и подавляющие влияния аиигдалярных структур на активность респираторных нейронов продолговатого мозга могут осуществляться как через амигдалогипотала-мическиб проводящие путл, так и через систему лрямах амигдало-бульбарнйх путей, обнаруженных, за последние годы благодаря широкому внедрению новейших гистохимических и ауторэдиографичас-ких методов ретро- и антероградного транспорта маркеров в работах, выполненных на крысах, коксах и обезьянах ( Schwatcr et ах., 1980, 1982; Васильева и соавт., 1981; Price, IS8I; Майский, 1983; Takeuchy et аХ., 1983; Van der Кооу et al., 1984; GasseX et aX., 1986 ).
Обнаружено, что среди исследованных нами образований лимбического мозга наиболее эффективное и выраженное влияние на активность нейронов вентрального дыхательного ядра оказывают гипоталамические структуры, что указывает на то, что гипоталамус является важным звеном в лимбических механизмах регуляции дыхания, а не пассивной исполнительной системой для более еысоких уровней регуляции. Полученные нами экспериментальные данные об отсутствии реципрокных механизмов, четко локализованных в передней и задней областях медиального и латерального гипоталамуса, и о наибольшей эффективности и выраженности
влияний заднелатерального гипоталамус^ на активность бульбар-пых дыхательных нейронов дают основание полагать, что1 организация эфферентных структур гипоталамуса сходна о той,-которая была выявлена при изучении афферентных структур. Эта данные подтверждают представление о том, что в заднелатвральной об-дй.т.. ~й!;оталамуса находится максимальная плотность локализации айферентно-эфферентных нейронов, замыкающих гипоталамо-взсцеральную рефлекторную дугу (Баклаваджян, 1988).
Итак, оценивая'результаты проведённого исследования относительно эфферентных влияний изученных нами структур лимбической системы на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга, мы пришли к заключению о том, что чем более высоко организована интегрирующая структура, тем дифференцированнее топографическая организация ее нисходящих влияний и тем больше превалирование подавляющих влияний над возбуждающими.
Описанные нами дыхательные реакции, возникающие при стимуляции передней лимбической коры, амигдалн и гипоталамуса, являются, по-видимому, компонентами сложных интегрированных реакций, имеющих определенную локализацию в этих структурах. Действительно, в аспекте целостной и взаимосвязанной организации регуляторных процессов организма трудно представить наличие в лимбических образованиях специфических структур, активирующих или подавляющих только функциональную систему дыхания. Поскольку изолированное функционирование какой-либо оляой системы является биологически нецелесообразным, то маловероятно, чтобы каждый компонент целостной реакции имел свое самостоятельное представительство, т.е. свои отдельные типы нейронов в гипоталам* се, амигдале и лимбической коре. Поэтому мы полагаем, что система выходных регуляторных нейронов этих лимбических структур предбтавлена полиэффекторными нейронами инте-гративного типа, запускающими не только дыхательные, но и другие вегетативные и соматомоторныв проявления эмоционально-поведенческих реакций организма. Для проверки нашего предположения необходимы гистохимические*исследования, позволяющие выявить характер и степень пространственного распределения аксонных коллатералвй этих предполагаемых нейронов.
Таким образом, полученные нами злектрофззпологические
данные о характере в особенностях модулирующего влияния каждой из доследованных структур на активность бульбарных дыхательных "нейронов свидетельствуют о том, что в процессах центрального респираторного контроля структурами лимбической си-стоиы решающим является не какой-то одна уровень регуляции, а взаимодействие разных уровней интеграция, каждый из которых обладает и самостоятельными эфферентными каналами. Только эта множественность контроля, доцуокающая дублирование и взаимозаменяемость способов управления, может обеспечить наибольшую устойчивость и надежность передачи центральных влияний на такой жизненно важный центр, как дыхательный, и координировать дыхательные изменения с другими компонентами эмоционально-поведенческих реакций организма.
Микроиовофоретические данные настоящей работы о гетеро-хияшзме клеток области бульбарного дыхательного центра, их высокой чувствительности к различным нейроактивным веществам указывают на сложную нейрохимическую организацию этой многоканальной полнфункциональной системы центральной регуляции паттерна дыхания. Задача будущих исследований - изучить химическую дифференциацию функционально различных нисходящих каналов, конвергирующих на нейронах бульбарного дыхательного центра.
Выявленные нема особенности нейромедиаторных механизмов регуляции активности респираторных нейроьов продолговатого ыозга важны не только для познания тонких нейрофизиологических механизмов их функционирования, но могут быть использованы в для фармакологической коррекции нарушений функции дыхательной системы, что представляет большой интерес для практической медицины.
ВЫВОДЫ
I. Анализ параметров залповой активности нейронов вентрального дыхательного ядра продолговатого мозга в условиях отинулятдаа исследованных ламбических структур показал, что наиболее изменчивыми параметрами дыхательных залпов оказались скорость их возникновения, длительность и количество импульсов в них, а наиболее устойчивыми - соотивиение зал-
пов с фазами дыхания и характер .распределения межимпульсных интервалов в залпе. 9
2. Сравнение пороговых интенсивностей раэйажения^лимби-' ческих структур, вызывающих ответные реакции различных типов бульбарннх дыхательных нейронов, выявило, что порог вызова реакций для инспираторных единиц более низкий, чем для экспираторных. В популяции инспираторных нейронов наиболее легко возбудимыми оказались раннеинспираторныв нейроны.
3. Установлено, что дорсаЗаная область передней лимбичес-кой корн является зоной максимальной локализации подавляющих, а вентральная, субкаллозальная, - зоной преимущественной локализации возбуждающих влияний на импульсную активность респираторных нейронов продолговатого мозга. Обнаружено преобладание подавляющих реакций исследованных дыхательных нейронов над возбудительными.
4. Сравнительное изучение характера эфферентных влияний различных ядерных образований миндалевидного комплекса на импульсную активность одиночных функционально -идентифицированных дыхательных нейронов продолговатого мозга выявило большую реактивность исследованных нейронов при раздражении кортвко-медиальной группы ядер амигдалы, чем при стимуляции базолате-ральной группы.
5. Исследование реакций нейронов вентрального дыхательного ядра, зарегистрированных при сканирующем раздражении центрального, медиального и кортикального ядер, показало, что эта группа ядер амигдалы вызывает выраженные изменения импульсной активности тестируемых нейронов как облегчающего, так и подавляющего характера (без их топографической упорядоченности) с некоторым преобладанием активирующих влияний. Установлено, что наиболее, эффективным нисходящим влиянием на импульсную активность исследованных дыхательных нейронов обладает центральное ядро.
6. Изучение характера и количественного соотношения ответных реакций нейронов вентрального дыхательного ядра при раздражении базолатеральной группы ядер амигдалы показало преобладание подавляющих реакций внсшараторннх.-И экспираторное нейронов. Из структур базолатеральной амигдалы облегчающее влияние оказывала в основном крупноклеточная область ба-
зального дара. Полученные данные о качественном отличии эфферентных влияний кортикомедиальной и базолатеральной груш ядер на активность исследованных респираторных нейронов продолговатого мозга указывают на разную функциональную организацию амигдалярных структур, отличающихся по своему филогенетическому развитию.
7. При детальном микроэлектрофизиологгт;вском исследовании влияний задней и передней областей медиального и латерального гипоталамуса на импульсную активность одиночных медуллярных дыхательных нейронов установлено диффузное распределение и пересытив активирующих и деактивирующих зон в пределах исследованных структур, что указывает на отсутствие реципрокных механизмов, четко локализованных в задней и передней областях медиального и латерального гипоталамуса. При раздражении как задав- и переднемедиального, так и заднв- и переднелатерального гипоталамуса преобладали возбудительные реакции исследованных дыхательных нейронов.
8. Сравнение эффективности и характера влияний изученных лимбических образований на активность нейронов вентрального дыхательного ядра показало, что наиболее низкий порог вызова реакций и наибольшая их эффективность и выраженность наблюдаются при раздражении гиготаламических структур (особенно заднелатеральной области гипоталамуса), что свидетельствует о том, что гипоталамус является важным звеном в лимбических механизмах регуляции дыхания, а не пассивной исполнительной системой для более высоких уровней регулящи.
На основании полученных в настоящей работе данных об особенностях нейрофизиологической структуры исследованных лимбических звеньев функциональной систелы регуляции дыхания сделано заключение о том, что чем более высоко организована интегрирующая структура, тем дифференцированнее топографическая организация ее эфферентных влияний на активность бульбар-ных дыхательных нейронов и тем больше превалирование подавляющих влияний над возбуждающими.
10. В качестве гипотезы выдвигается предположение о том, что система выходных регуляторных нейронов исследованных лим-бических структур состоит из полиэдре кто рных нейронов инте-гративного типа, запускающих не только дыхательные, но и дру-
г
гие вегетативные и соматомоторные проявления эмоционально-поведенческих реакций организма.
11. Установлено, что микроионофоретическая.аппликация ацетилхолина и антихолинергических, М- и Н-холинб'блокирующих веществ - атропина и этпенала соответственно, не оказывает существенного влияния на активность исследованных дыхательных нейронов. Показано, что на фоне блокады М-, и Н-холинорецепто-ров сохраняется возбуждающее влияние гипоталамуса на активность бульбарных дыхательных нейронов. Обнаружена большая встречаемость холинореактивных клеток среди неспещфических (без дыхательной активности) нейронов области вентрального'дыхательного ядра по сравнению с нейронами, разряжающимися в ритма дыхания.
12. В микроионофоретических исследованиях выявлена высокая чувствительность нейронов области вентрального дыхательного ядра к аминокислотам (глутамату и ГАМК), моноаминам (норад-реналину и серотонину) и опиатным веществам (морфину, мат-эн-кефалину и бета-ондорфину). Установлен гетерохимизм исследованных нейронов (реактивность на аппликацию.двух и более ней-роактавных веществ). Наибольшая эффективность и выраженность возбудительных и подавляющих реакций тестируемых нейронов наблюдались при подведении аминокислот (Ь-глутамата и ГАМК соответственно).
13. Показано, что подавляющее действие ГАМК на импульсную активность инспираторных и экспираторных нейронов вентрального дыхательного ядра купировалось специфическим блока-тором ГАМК-рецепторов - бикукулином, а угнетающее влияние опиоидннх агонистов - налоксоном, специфическим блокатором опиатных рецепторов, что свидетельствует, по-видимому, об участии ГАМК и опиоидннх пептидов в ингибиторных механизмах бульбарного дыхательного центра. Установлено, существенное различив паттерна тормозной реакции при действии опиатных веществ и ГАМК. Опиатные Еещества подавляли максимальную, пиковую частоту импульсов в залпах исследуемых нейронов, в то время как ГАМК полностью блокировал их спайковую активность.
14. Микроионофоретические данные о возбуждающих и подавляющих влияниях нэ активность исследованных дыхательных нейронов норадреналина и серотонина, а также о различных
комбинациях.эффектов этих моноаминов при их подведении к одному и тому же тестируемому нейрону дают основание предположить наличие на нейронах бульбарного дыхательного центра разных типов моноаминергических рецепторов.
15. В микроионофоретаческих экспериментах с аппликацией норздреналина на фоне блокады альфа- пли бета-адренорецепто-ров (фентоламином и пропранололом соответственно) установлено, что возбудительные реакции инспираторных и экспираторных нейронов при подведении норадреналина опосредованы активацией альфа-адренорецепторов, а подавляющие - бета-адренорецепторов.
16. Результаты настоящего исследования о полихимизме бульбарных дыхательных нейронов свидетельствуют о том, что выявленные нами возбуждающие и подавляющие влияния лимбичес-ких структур осуществляются посредством сложной гетерохими-ческой системы нисходящих путей, конвергирующих на этих нейронах. Полученные данные о нейромедиаторных механизмах регуляции активности респираторных нейронов продолговатого мозга могут быть использованы при разработке адекватных методов нейрофармакалогического управления дыхательной функцией организма.
Список работ, опубликованных по материалам диссертации
1. О локализации инспираторных. и экспираторных нейронов бульбарного дыхательного центра кошки. Журн. эксперкм. и' кли-нич. медицины; 1973. Т. 13. В 5. С. 43-51.
2. О нейронных механизмах гитталамической регуляции бульбарного дыхательного центра. В кн.: "П конгресс общества физиол. наук". София. ЕАН. 1974. С. 7 (соавт.: Баклаваджян О.Г.).
3. Характер импульсной активности бульбарных дыхательных нейронов. В кн.: "Второй съезд Армянского физиол. общества". Ереван. 1974. С. 71-77.
4. Электрофизиологический анализ влияния медиальной области гипоталамуса на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга. В кн.: "ХП съезд Всесоюзн. физиол. общества им. И.П.Павлова". Тбилиси. Л.: Наука. 1975. Т. 2. С. 126.
5. Исследование роли мадиалыой области гипоталамуса в регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга. Физиол. журн. СССР. 1976. Т. 62. й 10. С. I4Î0-I42I (со-авт.: Баклавзджян О.Г.).
6. Анализ активности медуллярных дыхательных нейронов в норме и при раздражении гипоталамуса. В кн.: "Матер. УП Всесоюзя. конф. по электрофизиологии центральной нервной системы". Каунас. 1976. С. 288.
7. Исследование импульсной активности бульбарных дыхательных нейронов при раздражении латеральной области гипоталамуса. В кн.: "Матер. 1У Всесоюзя. конФ. по физиологии вегетативной нервной системы". Ереван. 1976. С. 227.
8. О некоторых механизмах супрабульбарной регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга. В кн.: "Третий съезд Армянского физиол. общества". Ереван. 1979.
С. 150-155.
9. Нейронные механизмы регуляции активности бульбарных .дыхательных нейронов некоторыми структурами лиыбичвской системы. В кн.: "ХШ съезд Всесоюзя. физиол. общества им. И.П. Павлова"i Алма-Ата. Л.: Наука. 1979. T. I. С. 326-327.
10. Влияние острой гипертензии на импульсную, активность бульбарных дыхательных нейронов. Курн. эксперим. и клинич. медицины. 1979. Т. 19. й 6. С. 35-39.
11. Микроэлектрофазиологичеснэе исследование влияния переднего отдела лимбичэской коры на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга. В кн.: "îfeTep. УШ Всесоюзн. конф. по электрофизиологии центральной нервной системы". Ереван. 1980. С. 380-381.
12. Влияние некоторых структур гиютзламуса на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга. В кн.: "Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы". Ереван. 1980. С. I6I-I63.
13. Исследование некоторых механизмов надбульбарной регуляции дыхания. В сб.: "П Зе^союзн. конф. по физиологии й патологии кортико-вистлрральных взаимоотношений, посвящ. 50-летию отдела физиологии висцеральных систем им. акад. K.M. Быкова". Л.: Наука. 1981. С. 180.
14. Электрофизиологическое исследование характера активности дыхательных нейронов продолговатого мозга в условиях активации барорецедторов. В кн.: "Матер. У Всесоюз. конф. по физиологии вегетативной нервной системы, посвящ. 100-ла-тию со дня рождения акад. Л.А.Орбели". Ереван. 1982. С. 234.
15. Макроионофоретичвокое исследование влияния некоторых нейротрансмиттерных веществ на активность нейронов области бульбарного дыхательного центра. Физиол. журн. СССР. 1982. Т. 68. 12. С. I63I-I638 (соавг.: Баклаваджян О.Г., Олейник Г.Н., Саруханян Р.В.).
16. Микроионофоретическое исследование влияния биогенных аминов на активность нейронов дыхательного центра продолговатого мозга. В кн.: "Х1У съезд Всесоюз. физиол. общества им. И.П.Павлова". Баку. Л: Наука. 1983. Т.2. С. 226.
17. Реакции нейронов области бульбарного дыхательного центра на микроионофоретическое подведение опиатных веществ и серотонина. Физиол. журн. СССР. 1984. Т. 70. № 2. С. 130137 (соавт.: Баклаваджян О.Г., Олейник Г.Н., Саруханян Р.В.).
18. Microiontophoretiical study of the influence of some pharmacological substance on the medullary respiratory neurons. Second Congress of the Bulgarian Pharmacol, society. Plovdiv. 19Ç4; P. 2J6 (соавт.: Baklavadjian O.G. ).
19. Исследование механизмов действия норадреналина на активность бульбарных дыхательных нейронов. В кн.: "Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы". Ереван. 1984., С. 140-143.
20. Нтаяние лимбической коры и гипоталамуса на активность медуллярных дыхательных нейронов. Физиол. журн. СССР. 1985. Т. 71. » 3. С. 304-309.
21. Микроионофоретическое исследование влияния опиатных веществ на активность нейронов дыхательного центра продолговатого мозга. В сб.: "Современные проблемы физиологии нервной и мышечной систем", посвящ.- 100-летию со дня рождения акад. И.С.Бериташвили. Тбилиси. 1985. С. 128.
22. Микроионофоретическое исследование нейрохимических механизмов регуляции активности медуллярных дыхательных нейронов. В сб.: "ХП Всесоюз. конф. по физиологии и патологии
кортико-Е®стиральных взаимоотношений, посвящ. 100-летию со дня роязденая акад. К.М.Быкова". Л.: Наука. 1986ч С. 116.
23. The role of opiate receptors in the mechanisms of regulation of the bulbar respiratory neurons activity. II International symposium pharmacology of transmitter interactions. Bulgaria. Sofia. 1936. P. 64 (соавт.: Baklavad-jian O.G. ).
24. Микроэлектрофазиологачесное исследование влияния амягдалы на активность дыхательных нейронов продолговатого мозга. В сб.: "Современные проблемы нейробиологии", посвящ. 50-летию Института физиологии им. акад. Й.С.Беритапшяла. Тбилиси. 1986. С. 268-269.
25. Monoaminergic mechanisms regulation of the ЪиГЬаг respiratory пеигопз activity. X International congress of . Neuropathology. Stoc&olm. 1986 (соавт.: Baklavadjian O.G.).
26. Центральные механизмы регуляции активности бульбар-ных дыхательных нейронов некоторой структурами лиабической системы. В кн.: "Матер. У1 Всесоюзн. конф. по физиологии вегетативной нервной системы". Ереван. 1986. С. 221.
27. Microionfcophoretic study of some neurotransmitter mechanisms of regulation of the activity of bulbar respiratory neurons. In books "Trends in the Pharmacology of Neuro- ■ transmission". Bulgarian,Acad. Sci. Sofia. 1987.' P. 22-29 (соавт.: Baklavadjian O.G. ).
•28. Амигдалярные механизмы регуляции активности медуллярных дыхательных нейронов. В сб.: "Проблемы нейрогумораль-ной регуляции деятельности висцеральных систем", посвящ. 80-летию со дня рождения акад. Б.Н.Черниговского. Л. 1987. С. 73-74 (соавт.: Сар^ханян Р.В.).
29. Подавляющее действие некоторых нейротропных вещеотв на активность медуллярных дыхательных нейронов. В кн.: "Четвертый съезд Армянского физиол. общества". Ереван. 1987.
С. 73-74.
30. Некоторые нейронные механизмы центральной регуляции дыхания. В сб.: "Центральная регуляция вегетативных функций" Тбилиси. 1987. С. 201. *
31. Медиаторные механизмы регуляции активности бу ль барных дыхательных нейронов. В кн.: "ЗУ съезд Всесоюзв. физиол.
общества им. И.П.Павлова". Кишинев. Л.: Наука. 1987. Т. I. С. 231-232.
32. The action of microiontophoretically applied putative neurotransmitters on single bulbar respiratory neuron; M World Congress of Keuroscience (IBEO). Budapest. 198?. e. 833.
33. Нейрофармакологическое исследование активности дыхательных нейронов продолговатого мозга. В сб.: "Актуальные вопросы нейрофизиологии". Ереван. 1988. С. 167-174.
34. О платные механизмы регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга. В сб.: "Физиология пептидов". Л. 1988. С.-I35-I36.
35. Гипоталамическио механизмн регуляции активности вегетативных нейронов продолговатого мозга. В сб.: "Структурная и функциональная организация мозжечка". Ереван. 1988.
С. 16 (соавт.: Баклаваджян О.Г., Адамян Ф.А., Багдасарян К.Г., Еганова B.C., Мкртчян А.Г.).
36. Neuronal mechanisms of hypothalamic regulation autonomic functions. Congress of Physiological Sciences. Helsinki. 1989. P. 177 (соавт.: Baklavadjian O.G., Bagdassarian K.G., Eganova V.S., Mkrtchian A.G. ).
37. Особенноcte реакций дахательвых нейронов .продолговатого мозга на микроионофоретическую аппликацию норадреналина. . В сб.: "Механизмы действия медиаторов и горлонов на эффектор-Ш9 клетки"./Суздаль. 1989. С. 126 (соавт.: Баклаваджян О.Г..).
38. Микроионофоретическое исследование влияния холинерги-чеокнх веществ на активность медуллярных дыхательных нейронов, «изиол. журн. СССР. 1989. Т. 75. № 7. С. 948-954 (соавт.: Баклаваджян О.Г.).
39. Микроэлектрофизиологичбское исследование влияний амигдалярных структур на активность бульбарных дыхательных нейронов. В сб.: "Центральная регуляция вегетативных функций". Тбилиси. 1989. С. 159-160 (соавт.: Баклаваджян О.Г.).
40. Реакций дыхательных нейронов продолговатого мозга на пачечную стимуляцию гипоталамуса. Физиол. журн. СССР. 1990. Т. 7S. Л 5. С. 604-612 (соавт.: Баклаваджян О.Г.).
41. Microiontophoretic study of cholinergic nechaninmo of eupramedullary control of respiration. Ill International sjcposium pharmacology of transmitter interactions. Hofia.
1990. P. 72 (соавт.: Baklavadjian 0. G.).
42. Реакции нейронов области бульварного дыхательного центра на микроионофоретическую аппликацию ацетилхолина и хо-линоблокаторо'в. Матар. У Всесоюзн. конф. "Физиология и биохимия медиаторных процессов". Мосета. 1990. С. 67 (соавт.: Баклавадаян О.Г. ).
43. Limbic mechanisms of the regulation cf the activity of medullary respiratory neurons. Ill World Congress of Neuroscience (IBRO). Montréal. 199*1. P. 181.
44. Супрабульбарные механизмы регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозга, Beg.: "Некоторые проблемы современной физиологии". Донецк. 1991. С. 44 (соавт.: Еганова B.C.).
45. Некоторые корковые механизмы регуляции активности дыхательных нейронов продолговатого мозге. Научная сессия, посвящ. 50-летию организации Института физиологии им. акад. Л.А.Орбели. Ереван. 1993. С. 75 (соавт.: Еганова B.C., Худоян Е.А., Маркосян P.M.).
46. Neuronal organization of the hypobhalamo-visceral reflex arc.ч'International Union Physiological Sciences. Glasgow. 1993. P. 56 (соавт.: Baklavadjian O.G., Bagdas-sarian E.G.).
47. Neuronal, organization of the amygdalo-visceral reflex arc. XV World Congress of Neurosciencç (IBE6). Kyoto. Japçn. 1995. P. 153 (соавт.: Baklavadjian O.G., Avetissian E.A., Bagdassarian K.G., Eganova V.S.).
В -а ,_ р г»* гз Гч.
J3 3 Е 3 Е с. Е 3
>3 J Ю г zf re х- ДЗ
О' с. 3 с. tr е
со IN» Е т~ - ^ с» 9
3 С" г с. -га л Е ■зг ег о-
г fs. Т» 3 -л с" tr Е
ТВ Е с. w S Е дг СГ •с
с. 3 9 с" э 5 3 со
6 Е г г- "3 •3 •з-
е» с. ■та 3 3 3 Е
»■в е t> в с. г* Л с» с"
с» «г с а та cf tf с. сг
0 п гг г СГ СГ ■3- ■3
сь С" JZ. с' С- 3 гз 'З ю •3*
в tr е г~ гг
х. 1— СГ 3 с? е Е
в п 3 г с? "оЗ е S g
СГ 3 гг -з с' О" 3 дг Е Е
с" ч 3 СГ гЗ со J=-
гг ^ с' со ГУ Е •з- JE. а-
СГ 3 <о 3 □г JZ. Е Г"
ХГ -з -3 ,3 л 3 от
1Г гх 5 Е 1ГГ f-
с е Е в в ■гз S о-
a е с, 'З 3 5 вг •с.
•3 гт ГО г» с' гз Е с. Е
3 a JO ег с Е tr с* Е
г •з- ^ со с" 1— N
е Е со СГ S с р
3 ДГ ГУ •3 '3 1Г 3
Е Г" % X. Е с. Е S ti г*
С С— 3 д Е да о "о!
■3" о- с* АГ *
Е с тз СГ 3 3
3 с" «а со -з с" г-
"3 Е £Г 5 3 5 -П. с"
ГГ X. 3 Е ■Е- г ■3" »3
Л 3 •3 •з
а Е г- •3- тз Е ъ* 3 гЗ
« са ■з «г ■ 3 с. Е ■3
Ё je. СГ гз 3 г- от ег ДЗ
•з- 3 В ef г е л 3
с Е СГ со JC- с. с" S тС-
X. го Е СГ Е 3 с-
О" с" р СГ гз Г" Ск О"
г— tr •зг 3 с» •з- Д5 'З
-3- -з f— г р- СГ
js Е •3- 3 со Е 3 Да
3 •3 ,3 са tr X. Е ^ •3 Е г Е W £
Е (_ СГ да л гз- в
г— от ЕГ «о е 3 с» 5
В г S 5 с" Е
с. =• Е •з- СГ f— Е Е NÍ Е
'3- в .а JCT Е с" 5 , сг =.
3 »з- 1 «г г? тз
•3- СГ S л Е •3 Е
сэ в I Е 1 Е 1
г—
14» -3
■3 Е Гч> г-Б
с- е £
0 л
- "S
1 ?
. э t¿
С" 3 W Гс.
«§■
с -з в з с
ог р-
■tr
е ir g
а* гз Е гу>
г
fo £Г Л
О- з 6
•3 1 «_
ДЗ 5
3 Г
6 <=.
6 1г|-
■\J СГ с" I—
ё ir л. с со
-i-
Е
Е <_
5
-i-от
rfT Ck
та с" I
s er | с'
•=■ S £ сг
"•i
с»
о- е
з 6 е* с.
If ТО
ЕГ
•3 с
з Е
Г -Л
=. С.
6
Е с*
«i
rfr
н- л. С В от
и
3 гг
с. е
с,
Р" -з-
ÍÍ
Л г-з. е
,=• е ое ь. с" 3 3 3 г ^г г- С Е 1П Т *3 .р
е р- е ar je. та 6 з с" "з Я- -з- 3
S-I -3
. е с.
г- сг
ff É Т
я- «_ е
ГЗ "3" с*
£Г •З-
tr г£Г га 5 3=.
• -з с-Е S СГ ГЗ- 'З
¿г
О- 3 со с. е 3 и- 3
'а т л.
u Е СГ
.3 г- г-
'г
е- с. с" е -а о- jr rfr <3 Е 3
13 "3 г
■л Е 3
е .с- г
=- I '33
т 1
«_ с"
3 I— Г ГХ
-з «г в U 9
./» "з- е
6 í- ^ 3
О S
3 ,3 3
г- Е г-
'SJ л- -33
1_ С» ь.
з сг е г- с.
С» -3- тз
с?
о- S м
-3 . Е с"
-3 г» TS е 3 СГ 3
г гз Е с
з с- е
г- сг с"
с? о Е 3 Е с íf -3 гх "3" ,р
■з Е 3 *3- X.
Г 3 3 Г- ГЗ W • 3 =.
з дз е
г "3- С"
С Е
С"
о- 6 3 »3 с» г
"з* SÜ
и В со
Е 3 -3-
со 3 3
6 г С
-г» Ю S е i г-
*Т
с" дг г£3
Доз
6 -3 ,3 Е
■3" о-
3 л .О г- Е ,3 с" с, «г
СГ «ГШ
к- 5« 3
л гх г о- .с- -з г- о е
с"
а -э d 3-
е 8
ZJ 7Г
г
с*
а
■з* ■з*
T 1
Sbinf.li Itn^ifliui jtilip:
^braqruubi'ï liumnLgiluibçWjpfig jnLpiupui\i¿ jriLjiJi l| nr^i/fi g I{nflqb-qwjfili jpпЪЪbpjn uli«i(ií|nipjuib ijpiu ßnquih uiqribgni.ß-
jrnli P^iiLjPt» Ii umiu\id\aiiiuuil}nLßjnLVi\jbp(i ifuiujiti £ ¿blimpiaí>[íq|i n^nqpr' uitiuili mi{jiu^libpp PnLJL bli uuiifiu PtuguiSuijtnbi |_fiifPJilj. ímiímtimpqji lluipq:ui¡npnq tnuipPbp iíiul[uipquil{libp{i ti lipuilig i{in[muqr(b(jni.p juili li2iuUu-l|nLp jm.\iD ({ЬТшрпЪЫцЛ íulinqnL[3jsu\i qnpbnLif, ¡p\i¿iqbu
Vjiü. n[iupqbL ш j1! £ui jt1 ^ ifbfuuilifiqinibpp, npnlig иццЛ ni(nLiT bli 2P^1-¿шпшЦшЪ mp;igbu¡i ÎVipq íuipiTuipnrp^uilj t{iupquii¡npnt.iTj;i..
1)ЬрЦш íbinuici niant. ¡3 juili luprijnLliglibpp Jhb lijuduiíi ej3jni.li nt-bblj Ii. IbuiuigpgpnLPjnLli bli libplpu juiglinLU n¿ lí¡iui jli lib jpnt>[iq[in-[nqfiuijfi, шд_ IiujIl lib jp пФшр^ш^гцпс^^ш j[i PUuqiui[wn'bbpnLir:trbí) bui-i{ui|_ni( ({шгашрфиЬ if[i({pnfi nlin3>npbmfil{ 4bmioqnmntfl jnOibbj-nnf-- Ршдш joi-i{bL t bpl|uipuiijm.li niqbufi WijfinMibpli í bmbpnpfitljiqiJ4
uijuhlipb Puipáp qqui jljnLß juiV ripiAnpniJ bp!{m. Ii uiUb^fi libjpnuill-иф^ Ii jntpbpfi "Ыршт/ииГР: Snupuiluimnuli P|_r.tiumnplih pfi ií|il{pnfcLbl|inpn-5npbm[ill шщ|_[1Цшд[1ш j[i if[i¿ngm| iqiupqijuib t íhimiqnmi[uib libjpnuipnm Yí jnLpbp|i qbpp l|nt¡nbqiu j(ili lib"liinpnli[i lib jpnlilibpfi qppq-
iTiuli It Öl^ifuili Jb[umli¡iqi/íibpnLi/:ll ju и ¿[uiumitiEji шЦлш1.,иЬрО Ьр^шрш-ijntli ni.f|bqti Il lupimu 2li¿uiljuili lib jpnViibpfi щп^бЬ^ЬЧ^Ь
t}bpuiPbpjuiL, íuiiliuliuitpuli ruß jui JP, ь|!{ш jntiJ hli, np ilbp linqtf|ig íuijrn-liuiPb(lL{iu& (.{n/ffti 1{шпп(.gi(iu!)gíibp(i tpqnq Ii öli^nq iuqqbgnL¡J jntblib-pp |ipuil|uiliiugi(nLL/ bli uijrç lib jp nVi^ibp [i ijpui qnLqiuLT[imijnq ijuijpt¿p nt-q¡slibp[i Piuprj Sbmbpng[iJiil{ iuiirmliuipqti J¡i£ngm}i
Umuigi[iu!) mi| jm^ \ibp{i qn p h lui '{in Ti li2uil<uiknl-í' jnLtiti uilililuijin lipuilip Ipupnq bVi oquuiqnpbijb^ lji|ilit>Iiuit{uili qnpb pli[3uig nuf 1{Ь1шрп-■liuil[uili biuqnuí nLlibgnq ilbqbinuiinjii} [ишЪс^шp ni.df\!bp¡i upujilnqblibqll u|Uip-quiPuiliifuili, ftli¿mbu tuili íuiifijljupqti (_fitíP{itüuqnii/ nulib-
gnq [uuiliquipruilljljpji шЬлппрг^'Гш!! b. PnLdi/ttili íun/uip:lJpliu)puH|m.li iil-qbqb 2¿шtT^tul^шlib jpnlilibp|i qnpbnLlibnLß jiuli "lib jpnJbrjtiuiinnpúi jfili ifb[uuili(iqi/libp[i muipqmPmlinLtJ'p L^jb íluipuiijnpni.,"jni.Ii t шиц^и ({ui-тшрЬ^ 11ц|Шпи!|{Ш1Г^1[шЬ щрщштiflib'p qnpbplifîuigti 1{Ь1илрп-
WliBili Цшр^ш1}г)р1Гш\1 1}рш plimprnJIi iiiqqnq Imp ^bquiifji £nglibpji Чш jui-UuPbpiTuili imifmp, b., IbuiliuiPuip, lipuilig Ipupriq bli !{{ipmnilb[ l{nd-qbquijfili 2^¿u,nuJ'[u1''' llblimpnlifi [uuitiquipijiiiti 3>m.W{g[iuibbp|i l{iupqmi(np-IJujVi plijjhuggnni,npp 2щ<п 'l^pb-tip V«2u>\iuiЦ.ru.pjnL\i ni.li¡i li[ipuinmlimli Prf24nLP Яш|Т«ир s
-
Нерсесян, Лаура Бахшиевна
-
доктора биологических наук
-
Ереван, 1995
-
ВАК 03.00.13
- Механизмы реализации гипоталамических влияний структурами дыхательного центра
- Роль нейропептидов в бульбарных механизмах регуляции дыхания
- Таламические механизмы регуляции активности бульбарных дыхательных нейронов продолговатого мозга
- Респираторные влияние красных ядер и черной субстанции и механизмы их реализации
- Респираторные влияния сенсомоторной коры мозга и мозжечка и механизмы их реализации
