Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование

Солодовников, Виталий Валерьевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование"

□□34 сьаь^

На правах рукописи

СОЛОДОВНИКОВ Виталий Валерьевич

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СОКРАТИТЕЛЬНЫХ И ПРОВОДЯЩИХ КАРДИОМИОЦИТОВ КРЫС В АСПЕКТЕ ГИПОТАЛАМИЧЕСКОЙ НОНАПЕПТИДЕРГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ

03. 00. 25. ГИСТОЛОГИЯ, ЦИТОЛОГИЯ, КЛЕТОЧНАЯ БИОЛОГИЯ

ИССЛЕДОВАНИЕ)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1; :-:: зссэ

Оренбург - 2009

003476962

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор, з.д.н. РФ

Стадников Александр Абрамович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Полякова Валентина Сергеевна

доктор медицинских наук, профессор Ямщиков Николай Васильевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Росздрава»

Защита состоится 6 октября 2009 г. в 09°° часов на заседании диссертационно совета Д 208. 066. 04 при Государственном образовательном учреждении высше профессионального образования «Оренбургская государственная медицинск академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» ] адресу: 460000, Оренбург, ул. Советская, 6, зал заседаний Учёного совета

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Оренбургск государственная медицинская академия Росздрава»

Автореферат разослан «4» сентября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

Шевлюк Н. Н.

Общая характеристика работы Актуальность проблемы.

Изучение реактивности и пластичности клеток и тканей по-прежнему относится к числу актуальных вопросов морфологии, требующих дальнейшего разрешения. Задача эта важна не только с позиций учения о биологии тканей, но и определена запросами медицинской практики.

Разработка этой проблемы в течение длительного времени является предметом кропотливого исследования, однако многие ее аспекты до сих пор остаются дискуссионными. Особенно это касается раскрытия нейроэндокринных механизмов регуляции реактивно-пластических свойств миокарда. При этом на первый план выступает необходимость изучения морфофункциональных механизмов, обеспечивающих расширение диапазона адаптивных свойств различных кардиомиоцитов, в том числе, с позиции их нейроэндокринного контроля.

Несмотря на то, что структурной реорганизации миокарда млекопитающих животных и человека, наблюдаемой в различных экспериментальных и клинических условиях, посвящена обширная литература (Румянцев П.П., 1967; Katzberg P. et al., 1977; Бродский В.Я., 1981; Большакова В.Н., 1991; Дедков Э.И., 1995; Швалев В.Н. с соавт. 1992; Павлович Е.Р., 2003, 2006; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.Ш., 2004; Саликова С.П., 2008), многие аспекты реактивных, адаптивных и репаративных преобразований сократительных и проводящих кардиомиоцитов нуждаются в уточнении. В первую очередь это касается диапазона гисто- и органотипических свойств структурных элементов миокарда при воздействиях на организм различных экстремальных факторов и установления роли нейроэндокринных факторов в регуляции процессов репаративных

гистогенезов (Zachary D.D. et al., 1987; Стадников A.A., 1989, 2001).

Известно, что в дефинитивном миокарде млекопитающих исчерпан обособленный пул миогенных кардиомиоцитов (Sasaki К. et al., 1970), а в условиях различных экспериментальных воздействий отмечаются процессы гиперплазии и гипертрофии сердечных миоцитов, внутриклеточная регенерация и незначительная инициация синтеза ДНК (Румянцев П.П., 1982; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.Ш., 2004). Тем не менее, в научной литературе имеются указания на то, что в реактивно измененном миокарде взрослых экспериментальных животных возникают кардиомиоциты с признаками бласттрасформации (Стадников A.A., 2001). Однако до сих пор убедительных морфологических доказательств в этом плане крайне мало.

В последние годы значительное внимание уделяется изучению гипоталамической нейросекреции, роли и значимости нонапептидных гормонов подбугорья в позитивной регуляции клеточного и тканевого гомеостаза, в том числе и репаративных гистогенезов (Стадников A.A., Шевлюк H.H., Козлова А.Н., 2006; Стадников A.A., Шевлюк H.H., 2006; Канюков В.Н. с соавт., 2007; Стадников A.A., 2008; Саликова С.П., Бахтияров Р.З., 2008). Вместе с тем, относительно подобного влияния гипоталамических нонапептидов на различные виды кардиомиоцитов фактов крайне мало, и имеющиеся сведения характеризуются противоречивостью.

ультраструктурной реорганизации сократительных и проводящих кардиомиоцтов, особенно в условиях воздействия на организм дестабилизирующих факторов.

Цель и задачи исследования.

Цель работы - экспериментально-гистологическое обоснование диапазона структурно-функциональной реорганизации

сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в условиях измененной гипоталамической нонапептидергической нейросекреции.

Для достижения этой цели поставлены и решены следующие задачи:

1. Изучить морфофункциональные параллели между структурно-функциональной реорганизацией сократительных, проводящих кардиомиоцитов и реактивными изменениями крупноклеточных (супраоптические и паравентрикулярные) ядер гипоталамуса крыс в условиях избегания эмоционально-болевых воздействий.

2. Определить характер морфофункциональных изменений сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в культурах тканей in vivo по методу Ф.М. Лазаренко.

3. Исследовать особенности реактивных и пластических свойств сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в условиях их органотипического сокультивирования in vivo (по методу Ф.М. Лазаренко) и в диффузионных камерах с супраоптическими и паравентрикулярными ядрами гипоталамуса.

Научная новизна.

Получены новые данные о характере адаптивных и дезадаптивных изменений сократительных и проводящих кардиомиоцитов млекопитающих (крыс) в условиях стрессирования, культивирования и органотипического сокультивирования с нонапептидерическими ядрами гипоталамуса in vivo по Ф.М.Лазаренко (по критериям

ультраструктурного и иммуноцитохимического анализа). Получены новые доказательства, подтверждающие положение о стойкой детерминированности тканеспецифических свойств сократительных и проводящих кардиомиоцитов.

Впервые установлено прямое позитивное влияние нонапептидов крупноклеточных ядер гипоталамуса на диапазон органо- и гистобластических потенций клеток миокарда.

Сформулировано положение о стресс-лимитирующем воздействии гуморальных факторов супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса на компенсаторно-приспособительные возможности кардиомиоцитов в условиях действия дестабилизирующих факторов.

Наряду с известными явлениями гетероморфности при ультраструктурной реорганизации дефинитивных кардиомиоцитов, впервые показана возможность их дедифференцировки в условиях культивирования in vivo.

Теоретическая и практическая значимость.

Полученные результаты позволяют дополнить существующие представления о закономерностях репаративного процесса в миокарде взрослых млекопитающих. Они создают теоретическую базу для дальнейшего уточнения механизмов восстановления поврежденного миокарда млекопитающих. Выявленные в описательном плане констатации фенотипической реорганизации реактивно измененных различных видов кардиомиоцитов, расширяют представления о диапазоне их биологических потенций в условиях органотипического культивирования мышцы сердца in vivo. Проведенное исследование открывает перспективы для последующего изучения прямого влияния нонапептидов крупноклеточных ядер гипоталамуса на процессы гибели, переживания, пролиферации, роста и цитодифференцировки клеток миокарда, в том числе и для целей коррекции репаративного

кардиомиогенеза. В своей совокупности полученные данные создают предпосылки для дальнейшего развития научной базы прикладных аспектов клинической кардиологии.

Реализация результатов исследования.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе Оренбургской государственной медицинской академии при проведении практических занятий по дисциплинам «Гистология, цитология и эмбриология», «Внутренние болезни (по разделу Кардиология)», на кафедрах гистологии и госпитальной терапии.

Положения, выносимые на защиту:

1. Объем гисто- и органотипических потенций дефинитивного левожелудочкового миокарда и проводящих кардиомиоцитов правого желудочка крыс в условиях эмоционально-болевого стресса и культивирования in vivo по Ф.М. Лазаренко определяется тканеспецифической детерминированостью сердечной мышечной ткани, реализуемой под контролирующим влиянием нейроэндокринных факторов крупноклеточных ядер гипоталамуса.

2. Гипоталамические нейропептиды супраоптических и паравентрикулярных ядер подбугорья оказывают позитивное влияние на адаптивную реорганизацию сократительных и энергетических компартментов клеток у стрессированных и культивируемых in vivo кардиомиоцитов.

3. Адаптивный характер воздействия нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы на клеточный и тканевый гомеостаз миокарда проявляется в активизации функциональной деятельности фибробластов, макрофагов, эндотелиоцитов и адвентициальных клеток.

4. Адаптивный ресурс проводящих кардиомиоцитов (по критериям

апоптозной доминанты) в условиях избегания эмоционально-болевого воздействия и культивировании оказался выше по сравнению с сократительными миоцитами.

Апробация работы.

Региональная научно-практическая конференция молодых ученых и специалистов (Оренбург, 2003), II Международная Пироговская научная медицинская конференция молодых ученых (Москва, 2007), IX конгресс МАМ (Бухара, 2008), Всероссийская научная конференция «Нейробиологические аспекты морфогенеза и регенерации», посвященная памяти чл.-корр. АМН СССР профессора Ф.М. Лазаренко (Оренбург, 2008), Всероссийская конференция «Медицинская наука и образование Урала» (Челябинск, 2008).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 8 работ, из них 6 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 155 страницах и состоит из введения, обзора литературы, главы по материалам и методам исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка использованной литературы, включающего 231 источник, в том числе 133 иностранных. Работа иллюстрирована 7 таблицами и 35 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ Исследование проведено на 162 белых беспородных лабораторных крысах-самцах массой 180-200г. В соответствии с целью и задачами работы объектами изучения служили: миокард левого желудочка и правого предсердия, гипоталамус и нейрогипофиз. Сведения по количественному распределению использованных животных и изученных объектов приведены в таблицах №1, №2, №3.

Таблица 1.

КОЛИЧЕСТВО ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЖИВОТНЫХ

Характер экспериментальных воздействий Опытные серии Интактные животные

моделирование ЭБС

Эмоционально-болевой стресс (ЭБС) [1-я группа животных] 12 4

10-суточный эмоционально-болевой стресс [2-я группа животных] 12 4

Итого: 24 8

различные варианты культивирования

доноры реципиенты

Культивирование кусочков миокарда по Ф.М. Лазаренко 20 20

Сокультивирование кусочков миокарда с паравентрикуляными (ПВ) и супраоптическими (СО) ядрами гипоталамуса по Ф.М. Лазаренко 20 20

Сокультивирование кусочков миокарда с паравентрикуляными (ПВ) и супраоптическими (СО) ядрами гипоталамуса в диффузионных камерах 20 20

Сокультивирование миокарда с участками коры больших полушарий — 10

Итого: 60 70

Таблица 2.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ИССЛЕДОВАННОГО

МАТЕРИАЛА В СЕРИЯХ ПО МОДЕЛИРОВАНИЮ ЭБС_

Серии эксперимента Исследованные объекты

Миокард СО и ПВ ядра нейрогипофиз

(ПП и гипоталамуса

ЛЖ)

ЭБС (однократный) 12 12 12

Контроль 4 4 4

ЭБС (длительный) 12 12 12

Контроль 4 4 4

Таблица 3.

Количество исследованного материала в эксперименте по культивированию и сокультивированию по методу Ф.М. Лазаренко, а также

сокультивированию в ДК

количество исследованных имплантатов

Серии экспериментов/сутки 2 сут 4 сут 8 сут 12 сут

Культивирование миокарда по методу Ф.М. Лазаренко 10 10 10 10

Сокультивирование кусочков миокарда с паравентрикулярными и супраоптическими ядрами гипоталамуса крыс по методу Ф.М. Лазаренко 10 10 10 10

Сокультивирование кусочков миокарда с паравентрикулярными и супраоптическими ядрами гипоталамуса крыс в ДК 10 10 10 10

Сокультивирование кусочков миокарда с участками коры больших полушарий 2 2 2 2

Итого 32 32 32 32

Моделирование эмоционально-болевого стресса проводили у 24 крыс. В специальной камере животных подвергали воздействию тока силой 4 мА, избежать которое животные могли только путем ухода на платформу, расположенную в центре камеры. Это приводило к выработке условного рефлекса избегания, проявлявшегося в постоянном нахождении крыс на платформе. Последующее неупорядоченное нанесение коротких ударов тока (6 мА в течение 2 сек) через пол платформы сопровождалось формированием стрессорной реакции у животных, обусловленной как

наличием конфликта между выработанным условным рефлексом избегания и безусловным болевым раздражителем, так и постоянным напряженным ожиданием электроболевого раздражения.

При этом животные были разделены на 2 группы. В первой группе (12 крыс) однократно в течение 5 час моделировали состояние эмоционально-болевого стресса по методике СШеБ1с1ега1:о й а1. (1974). Животные 2 группы (12 крыс) испытывали воздействие тех же стрессорных факторов, что и животные первой группы, но в течение 10 суток ежедневно по 5 час. Контролем служили 8 интактных крыс аналогичной массы, находившихся в условиях вивария. Материал для исследования (миокард левого желудочка, правого предсердия, крупноклеточные ядра переднего гипоталамуса (супраоптические, паравентрикулярные и нейргипофиз) брали по завершении эксперимента через 1, 3, 6 и 10 суток в условиях декапитации животных под эфирным наркозом.

Культивирование фрагментов миокарда левого желудочка, правого предсердия от интактных животных осуществлено в полном соответствии с методикой автора (Ф.М. Лазаренко,1959). Оно проведено на 70 животных.

Крыс-доноров декапитировали под эфирным рауш-наркозом, производили вскрытие грудной полости и сердце осторожно и быстро выделяли из окружающих тканей и помещали в стерильные чашки Петри с охлажденной (+4°С) средой 199. Взятые кусочки размером 1-1,5мм3 тщательно промывали в нескольких порциях среды 199 с добавлением стрептомицина в разведении 50000 ед. на 1 мл. Указанные дозы антибиотиков не влияют на результаты эксперимента (З.С. Хлыстова, 1958), но предотвращают имплантаты от инфицирования. Затем полученный материал измельчали глазными ножницами до консистенции кашицы. Образовавшуюся массу смешивали с целлоидиновым "песочком" в соотношении 1:2 согласно рекомендациям автора метода (Ф.М. Лазаренко, 1959).

Крысам-реципиентам под эфирным наркозом, с соблюдением правил асептики и антисептики под кожу передней брюшной стенки производили имплантацию полученной смеси. При этом у каждого животного было сформировано по 2 имплантата.

Животных умерщвляли в утренние часы (10.00-11.00) декапитацией под эфирным рауш-наркозом. Имплантаты осторожно выделяли при помощи ножниц и пинцета, стараясь не нарушить целостность наружной соединительнотканной капсулы. Каждый имплантат разрезали бритвой на 2 части, одну из которых использовали для светооптического исследования, другую для электронномикроскопического.

В сериях опытов по совместному культивированию сократительных кардиомиоцитов и околоузлового миокарда правого предсердия с ядрами гипоталамуса к имплантированному материалу добавлялись соответствующие фрагменты гипоталамуса. У животных-реципиентов накануне имплантации производили электрическое разрушение супраоптических и паравентрикулярных ядер гимпоталамуса. После эвтаназии крыс-доноров быстро вскрывалась полость черепа, извлекался головной мозг и помещался в стерильную чашку Петри с охлажденной до +4°С средой 199. Выделение крупноклеточных нейросекреторных ядер гипоталамуса производились при помощи микроскопа МБС-9, используя стереотаксические карты (Я.Буреш с соавт., 1962). Гипоталамус разрезался фронтально, ориентируясь по перекресту зрительных нервов. Затем глазными ножницами клиновидно вырезались небольшие фрагменты в области залегания супраоптических и паравентрикулярных ядер. Извлеченные фрагменты гипоталамуса помещались в другую стерильную чашку Петри с питательной средой 199. Для контроля на каждую стадию опыта вместо участков гипоталамуса помещались фрагменты лобных долей конечного мозга тех же крыс-доноров. Для оценки правильности выделения гипоталамических ядер проводился выборочный анализ взятого для

трансплантации материала и оставшихся после выделения ядер частей гипоталамуса.

Прооперированных животных содержали в стандартных условиях вивария. В каждой серии опытов взятие материала осуществляли через 2, 4, 8,12 суток от начала имплантации.

Органотипическое сокультивирование in vivo сократительных и проводящих кардиомиоцитов с супраоптическими и паравентрикулярными ядрами гипоталамуса в диффузионных камерах проведено на 24 крысах. Контрольное культивирование кардиомиоцитов (без ядер гипоталамуса) проведено на 8 животных.

Диффузионные камеры изготавливались из полихлорвиниловых капсул на основе модификации методов G. Algire et al. (1954), Т.П. Евгеньевой (1983, 1994), Э.И. Дедкова (1995, 1996). Использована модификация дифузионных камер (С.Д. Валов, 1998) на основе рацпредложения № 1241, выданного 23.10.98 г. Оренбургской государственной медицинской академией. При этом применялись миллипоровые фильтры фирмы «Sinpor» с величиной пор 0,3 мкм. В полость камеры помещали 3-4 фрагмента миокарда левого желудочка, проводящей системы и фрагментов гипоталамуса, содержащих паравентрикулярные и супраоптические ядра (размером по 3 мм3). Выделение ядер производили выше описанным способом. Камера закрывалась плотно с двух сторон крышками с фильтрами. Готовые камеры помещались в стерильную чашку Петри со средой 199. Крысам-реципиентам под эфирным наркозом с соблюдением правил асептики и антисептики производили подкожную имплантацию по две диффузионной камеры. Для контроля на каждую стадию опыта в ДК вместо участков гипоталамуса помещались фрагменты коры больших полушарий тех же крыс-доноров.

В работе применен комплекс методик: гистохимии, световой и электронной микроскопии, морфометрии, иммуноцитохимических

исследований.

Для гистологического исследования материал фиксировали в 12%-м водном растворе нейтрального формалина, жидкостях Буэна и Карнуа, обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в парафин-целлоидин. Приготовление серийных срезов толщиной 5-6 мкм осуществляли на ротационном микротоме МПС-2. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином, нуклеиновые кислоты выявляли по Браше, общий белок - по Даниелли, гликоген и нейтральные мукополисахариды (гликопротеиды) - периодат-Шифф реакцией по Мак-Манусу. Идентификацию нейросекрета проводили парадьдегид-фуксином по Гомори-Габу в модификации Поленова (1962). Гистохимические реакции сопровождались ферментативными контролями (амилаза, рибонуклеаза) [Пирс, 1962].

Материал, предназначенный для ультрамикроскопического исследования, фиксировали 30 мин при комнатной температуре, целиком погружая в смесь 2% параформальдегида и 2,5% глутаральдегида, приготовленную на 0,1 М фосфатном буфере (pH 7,2-7,4) по прописи Glauert (1975). Затем имплантат бритвой разрезали на кусочки размером 0,5-1,0 мм3, которые погружали в свежую порцию охлажденной (+4° С) смеси 2% параформальдегида и 2,5% глутаральдегида и фиксировали еще в течение 1,5 час. После фиксации кусочки промывали в трех порциях 0,1 М фосфатного буфера с 5% сахарозой в течение 30 мин при температуре +4° С. Материал постфиксировапи в 2% растворе 0s04 на том же буфере в течение 2 час на холоде. Затем кусочки вновь промывали при комнатной температуре в трех порциях 0,1 М фосфатного буфера с 5% сахарозой по 10 мин в каждой порции. Материал обезвоживали при комнатной температуре в серии спиртов возрастающей концентрации и абсолютном ацетоне по следующей схеме: спирт 50° - 2 порции по 10 мин; спирт 70° - 2 порции по 10 мин; спирт 90° - 2 порции по 10 мин; спирт 96° - 2 порции по 10 мин; две порции смеси 96°

спирта и абсолютного ацетона (1:1) — по 10 мин; в абсолютном ацетоне — 15 мин. После дегидратации кусочки оставляли для пропитки в смеси эпона 812 и аралдита при комнатной температуре в течение 10-15 час. Образцы заливали в смесь эпона и аралдита по прописи Уикли (1975). Полимеризацию проводили при +37° С в течение 48 час.

Полутонкие срезы (1 мкм) окрашивали метиленовым синим и основным фуксином по прописи Sato и Shamoto (1973). Ультратонкие срезы, изготовленные на ультратоме LKB-5 (Вгошша, Sweden) подвергали двойному контрастированию растворами уранилацетата и цитрата свинца по Reynolds (1963). Исследование ультратонких срезов и их фотографирование производили в электронном микроскопе ЭМВ100АК при увеличениях от х4000 до х40000.

С использованием набора Dako Cytomation; LSAB2 System - HRP, USA идентифицировали белок p53 в миокарде стрессированных и контрольных животных.

Необходимая количественная информация получена в ходе морфометрических исследований парафиновых и полутонких срезов с помощью винтового окуляр-микрометра МОВ-1-15" у4.2.

Полученные результаты обрабатывали на компьютере по правилам параметрической статистики, с использованием критериев оценки достоверности результатов по Стьюденту, с учетом вариабельности первичных измеряемых объектов и индивидуальной изменчивости (Плохинский И.А., 1970, Ташкэ К., 1980; Автандилов Г.Г., 1990) на ПЭВМ Pentium с использованием пакета программ «Statistica 6,6 for Windows» и программного пакета «MS Excel 2007». Различия средних величин считали достоверными при уровне значимости р<0.05 (95%).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Морфофункциональные параллели менаду структурно-функциональной реорганизацией кардиомиоцитов и реактивными изменениями нонапептидергических нейросекреторных клеток (ИСК) гипоталамуса в условиях ЭБС Наши исследования на животных в условиях однократого ЭБС показали однонаправленную структурно-функциональную реорганизацию нонапепидергической нейросекреторной системы гипоталамуса (супраоптические и паравентрикулярные ядра).

В условиях ЭБС по ВеБ1с1ега1о й а1. (1974) анализ светооптических, ультраструктурных и морфометрических данных, характеризующих нейросекреторные клетки исследованных ядер подбугорья, свидетельствует об увеличения объема ядер и ядрышек «светлых» (функционально активных клеток), при одновременном снижении объема их цитоплазмы. Размеры ядра и ядрышек нейросекреторных клеток возрастают значительно быстрее, нежели объем их цитоплазмы, о чем свидетельствуют увеличение ядерно-цитоплазматического и ядерно-ядрышкового отношения в 2,2 раза против соответствующих параметров у интактных животных (Таблица № 4).

Таблица 4.

Морфофункциональная характеристика «светлых» нейросекреторных клеток (НСК) крупноклеточных ядер гипоталамуса крыс в условиях __ЭБС (стадия 6 суток)_

Морфометричес-кие показатели (объем-У) НСК супраоптических ядер НСК паравентрикулярных ядер

Интактные крысы (контроль) п=5 Опыт п=7 Интактные крысы (контроль) п=5 Опыт п=7

V ядра мкм3 475,8±17,0 717,3±11,7 ] 610,8±20,2 817,5±8,9

V ядрышка мкм3 33,7±11,1 56,9±9,01 36,7±0,9 62,6±5,5

V цитоплазмы мкм3 2138,9±12,6 3188,4±14,7 2997,1±11,7 3311,8±17,1

Повышение функциональной активности крупноклеточных ядер гипоталамуса всегда проявлялось в уменьшении общего количества секреторных гранул в аксонах и доли элементарных гранул, а также в накоплении в терминапях «пустых» пузырьков.

В этих участках аксонов регистрировались крупные митохондрии, свободные рибосомы, расширенные канальцы эндоплазматического ретикулума.

Вместе с тем в сериях опытов по длительному стрессированию (через 10 сут) мы установили, что происходит существенное изменение соотношения активизированных ИСК и пикноморфных клеток супраоптических и паравентрикулярных ядер в пользу последних (Таблица №5).

Таблица 5.

Соотношение «светлых» (А) и пикноморфных (Б) нейросекреторных клеток гипоталамуса в условия хронического (длительного) ЭБС (стадия-10 суток) (в условной единице гистологического среза, окулярная вставка 25мм2,

об. 90, ок. 10).

Супраоптические ядра Паравентрикуляные ядра

А Б А Б

Интактные крысы (контроль) п=5 4,2±0,01 2,1±0,01 3,9±0,01 1,9±0,01

Опыт (Юсуток ЭБС) п=6 2,2±0,01 3,7±0,01 2,8±0,02 4,0±0,01

По сравнению с серией опытов по однократному стрессированию крыс содержание подобных дегенеративно измененных элементов в изученных нейросекреторных центрах гипоталамуса достоверно возрастает.

При этом большинство ИСК супраоптических и особенно паравентрикуляных ядер, находящихся в состоянии функциональной гиперактивности (гиперсекреции), характеризовались гипертрофией не только ядер, ядрышек, но и органелл синтеза.

Наиболее характерным для подобных нейросекреторных клеток является большая численность лизосом, аутофагических вакуолей, крупных липосом и их скоплений.

На этом основании мы предполагаем, что в условиях длительной стрессорной нагрузки эта часть функционально активных НСК исчерпывает свои «материальные ресурсы», истощается и подвергается ультраструктурной дегенерации. Вероятно, часть из них переходит в фенотипическое состояние пикноморфных элементов, т.е. тех клеток, которые имеют угловатую, различной степени сжатости форму перикарионов и пикнотические ядра.

В этой связи мы делаем заключение о том, что длительная (в условиях 10 суточного стрессирования животных) гиперсекреция нонапептидергических НСК крупноклеточных ядер гипоталамуса протекает на грани истощения, «физиологической дегенерации» (по Поленову A.M., 1993) на фоне блокирования высвобождения нейросекреторного материала на уровне нейрогипофиза.

Полученные факты безусловно свидетельствуют об имеющемся дисбалансе (рассинхронизации) между процессами продукции гипоталамических нейрогормонов и их эвакуацией в систему общего кровотока, что формирует у животных нейроэндокринную регуляторную недостаточность.

Данное заключение в полной мере нашло свое подтверждение в результатах наших гистологических исследований миокарда у стрессированных крыс. Было установлено, что описываемые изменения гипоталамических структур коррелировали с изменениями в миокарде. При

однократном моделирование ЭБС у животных отмечены изменения ультраструктурной организации мышечных волокноподобных комплексов кардиомиоцитов (КМЦ) и кровеносных сосудов сердца. Наблюдается расширение цистерн эндоплазматической сети (в большей степени у сократительных кардиомиоцитов), пересокращение участков миофибрилл (Рис. 1).

Рис. 1- Фрагмент сократительного кардиомиоцита левого желудочка сердца крысы. ЭБС по Ве5|<ЗегаЮ. Стадия: 3 сут. Ув. х 28300.

А - миофибриллы Б - митохондрии

Через 3 сут после стресса (по Оез1ёега1о е1 а1., 1974) у большинства сократительных кардиомиоцитов отмечено своеобразное «сжатие» митохондрий с уплотнением их матрикса и усилением осмиофилии митохондриальных мембран.

При этом органеллы преимущественно локализуются в подсарколеммапьной области и в ряде случаев отделены от миофибрилл и соседних митохондрий своеобразным «светлым ореолом».

В условиях данной серии опытов (в сроки 1-3 сут наблюдений)

отмечались изменения не только у КМЦ, но и у стромальных компонентов миокарда (выраженный внутри- и межклеточный отек, геморрагии, явления кариопикноза, кариорексиса клеток интерстиция). Подобные изменения наблюдались и у сократительных и у проводящих кардиомиоцитов, но в большей степени у первых.

В эндотелии капилляров, сохраняющих обычную структуру на светооптическом уровне, при электронномикроскопических исследованиях обнаруживается резкое усиление явлений микропиноцитоза, образование эндотелиальных выростов, что свидетельствует о повышении процессов проницаемости капилляров. Капилляры, содержащие сладжированные эритроциты, нередко заполнены осмиофильными гранулами.

На стадии 10 сут эксперимента не удается уловить каких-либо фатальных гистологических изменений миокардиальных клеток по сравнению с сердцами контрольной группы животных.

Таким образом, наиболее выраженные изменения, наступающие в миокарде в результате однократно перенесенного эмоционально-болевого стресса, обнаруживаются у животных через 3 суток.

При длительном (10 сут) стрессировании животных у гипертрофированных сердечных миоцитов раньше других структур повреждались митохондрии. Наиболее часто наблюдалось их набухание сопровождающееся увеличением размеров, уменьшением электронной плотности матрикса и дезорганизацией крист. Имело место разрушение наружной и внутренней мембран митохондрий, образование вакуолей.

Вслед за описанными выше нарушениями субклеточной организации митохондрий в кардиомиоцитах наблюдались деструктивные изменения структуры миофибрилл, которые были неоднородными. В некоторых сердечных миоцитах миофибриллы находились в состоянии неравномерного сокращения, в них наблюдались пересокращенные участки.

Значительные изменения претерпевала также и сарколемма, что

проявилось в дискомплексации базальной пластинки и локальных деструктивных изменениях цитомембраны.

Нами также установлены значительные изменения сосудов микроциркуляторного русла. Обнаруживались капилляры, заполненные сладжированными эритроцитами.

При иммуноцитохимической окраске стрессированного миокарда (по Оез1с1ега1о и длительный эмоционально-болевой стресс) на проапоптотический белок р53 была выявлена положительная реакция положительная реакция в серии опытов по моделированию длительного эмоционально-болевого стресса.

Качественный светооптический и ультраструктурный анализ синусного узла и приузлового миокарда прежде всего показал, что у интактных и стрессированных животных клеточные элементы синусного узла и приузлового миокарда существенно различаются по содержанию ряда тканевых компонентов во всех обследованных случаях. Так в синусном узле преобладали компоненты соединительной ткани (особенно жировой с преобладанием бурых

адипоцитов), а также нервные волокна (немиелинизированные и миелинизированные) по сравнению с приузловым (Рис. 2).

Рис. 2. Миелиновые нервные волокна в синусном узле крысы в условиях длительного стрессирования животных. Ув. х 26000

Следует подчеркнуть то обстоятельство, что в условиях однократного и особенно длительного стрессирования крыс в синусном узле мы наблюдали значительное увеличение количества соединительнотканных элементов за счет возрастания численности не только волокон, но и клеток (тучных, жировых, лейкоцитов).

При этом изменялось соотношение темных и светлых проводящих миоцитов достоверно не менялось.

Наши исследования показали, что миоциты синусного узла крыс имели округлую или овальную форму и содержали меньше миофибрилл по сравнению с сократительными кардиомиоцитами приузлового миокарда.

Только в условиях длительного стрессирования животных встречались деструктивно измененные миоциты синусного узла, содержащие лизосомы разной ультратструктурной организации и миелиновые тельца, а также дискомплексированные миофибриллы. При этом в интерстиции резко возрастало количество реактивно измененных соединительнотканных элементов (клеток фибробластического ряда, адипоцитов, коллагеновых и эластических волокон с признаками локальной фрагментации).

Помимо сохранных нервных элементов в синусном узле наблюдались деструктивные изменения осевых цилиндров нервных проводников (отек нейроплазмы, скопления нейрофиламентов и микротрубочек). При этом в осевых цилиндрах и леммоцитах наблюдались вакуоли и липосомы. Все это в своей совокупности свидетельствовало об очаговых поражениях проводящих миоцитов правого предсердия в условиях длительного стрессирования крыс.

Характер структурно-функциональных изменений КМЦ крыс при культивирование in vivo по методу Ф.М. Лазаренко

При культивировании in vivo по методу Ф.М. Лазаренко на вторые сутки опыта в окружающей имплантат области наблюдаются признаки выраженного асептического воспаления со значительной экссудацией и миграцией полиморфноядерных лейкоцитов.

Через 2 сут культивирования миокардиальные кусочки дискомплексированы и представлены фрагментированными волокнистыми структурами. Отмечались тесные контакты между кардиомиоцитами и лейкоцитами.

При этом, в области их взаимодействия, происходит разрыхление компонентов базальной мембраны, нарушение целостности цитолеммы кардиомиоцитов и выход органелл в межклеточное и перикапиллярное пространство, где они подвергаются лизису и фагоцитозу лейкоцитами макрофагами. В этот период наблюдается существенная активизация клеток фибробластического ряда (как клеток донорского материала, так и реципиентов). Соединительная ткань разрастается по межцеллюлярным пространствам, обрастает каждый кусочек целлоидина. Одновременно происходит врастание в имплантат гемокапилляров.

Так в составе волокноподобных структур мышечной ткани левожелудочкового миокарда мы обнаружили 3 основных типа сократительных кардиомиоцитов, которые отличались друг от друга структурными изменениями, а также выявлены переходные формы между ними.

Во-первых, определялись сохранные кардиомиоциты. Такие клетки не имели выраженных дегенеративных изменений цитоплазмы и содержали светлые ядра овальной формы.

Во-вторых, присутствовали дегенерирующие кардиомиоциты. Они имели ядра с выраженными явлениями пикноза, рексиса и последующего лизиса.

Третий тип кардиомиоцитов (наблюдаемых среди сократительных миоцитов) составили перестраивающиеся клетки. Главным признаком подобных кардиомиоцитов на светооптическом уровне является присутствие сохранного ядра в проекции дегенеративно измененной периферической цитоплазмы.

Установлено, что особенностью перестраивающихся кардиомиоцитов является наличие в проекции их клеточной территории структурно сохранного ядра, заполненного эухроматином с незначительными участками его прикариоллемной конденсации.

К 4 сут культивирования, одновременно с появлением по периферии миокардиальных имплантатов соединительной капсулы, в интерстициальных соединительнотканных прослойках кусочков миокарда донора повышается численность округлых и отростчатых фибробластоподобных клеток. Через восемь суток от начала культивирования миокарда по периферии имплантата и внутри него развивается молодая соединительная ткань, богатая кровеносными сосудами и малодифференцированными фибробластами, подобная грануляционной ткани. В этот период фрагменты миокарда выглядели еще более уменьшенными в размерах, были в большей части лизированы по сравнению со вторыми и четвертыми сутками культивирования. Кардиомиоциты как правило характеризовались деструктивными изменениями ядер и цитоплазмы, что позволяет оценить их как некротические. Ультраструктурный анализ культивируемого материала показал, что в это время основную часть клеток в имплантате составляют фибробласты. В промежутках между активизированными фибробластами и отложениями фибриллярного и аморфного компонентов межклеточного вещества наблюдались скопления и тяжи клеток, представляющие эндотелиальные почки роста сосудов микроциркуляции.

Через двенадцать суток от начала культивирования отмечались дифференциация и созревание грануляционной ткани, формирующей наружную капсулу имплантата и капсулы вокруг целлоидиновых песчинок. Следует отметить, что проводящие кардиомиоциты не подвергались существенной структурно-функциональной перестройке (в наблюдаемые сроки эксперимента). Данные миоциты оказались более устойчивыми с точки зрения их переживания в культуральных условиях.

Органотипическое сокультивирование миокарда и крупноклеточных ядер гипоталамуса по методу Ф.М. Лазаренко и в диффузионных камерах

Анализ полученного материала позволил установить, что в миокардиальных трансплантатах, культивируемых совместно с участками гипоталамуса, содержащими крупноклеточные нейросекреторные ядра, в основном наблюдалась та же этапность структурных превращений, аналогичная той, которая была выявлена ранее при культивировании только кусочков миокарда без добавления гипоталамических структур.

Однако через 2 сут культивирования характер гетероморфизма кардиомиоцитов был несколько иным, по сравнению с контрольными вариантами опытов (культивирование одних только кусочков миокарда; сокультивирование фрагментов миокарда и участков коры больших полушарий).

В миокардиальных трансплантатах присутствовали кардиомиоциты только двух основных типов - это дегенеративно измененные и переживающие клеточные формы как сократительные, так и проводящие.

Последние имели крупные светлые ядра с конденсированным хроматином в области перикариолеммы. На фоне прозрачной кариоплазмы отмечались крупные глыбки гетерохроматина. Вокруг центрально расположенных ядер, как правило, наблюдались скопления митохондрий. В цитоплазме переживающих кардиомиоцитов между миофибриллами и в проекции митохондрий, отмечались светлые вакуоли (крупные и мелкие). Контуры сохранных кардиомиоцитов четкие, без видимых разрывов сарколеммы.

Друг с другом переживающие кардиомиоциты соединялись по вставочным дискам, имеющим прямой или ступенчатый вид. Важно отметить, что по сравнению с контрольными сериями, в опыте, при совместном культивировании кусочков миокарда скрупроклеточными ядрами

гипоталамуса, в сохранных кардиомиоцитах как сократительных, так и проводящих, обнаружено значительное увеличение, объема клеточных ядер.

Через 4 сут от начала эксперимента депрессивное состояние в кардиомиоцитах нарастало. На фоне погибших кардиомиоцитов обнаруживались только единичные переживающие формы клеток.

В клеточных элементах сосудов, на этом этапе, наоборот, обнаруживалось заметное усиление процессов их активизации. В артериолах происходила дезинтеграция и расслоение клеток, образующих стенки сосудов. Через 8 и 12 сут от начала сокультивирования фрагментов миокарда с участками гипоталамуса в проекции разрушающихся кардиомиоцитов наблюдались многочисленные макрофагоподобные клетки. Анализ серийных препаратов показал, что в данных условиях опыта присутствовали более крупные макрофагоподобные клетки, по сравнению с условиями культивирования миокарда без ядер гипоталамуса. Такие клетки имели четкие контуры, крупные овальные или округлые ядра с большими ядрышками и вакуолизированную цитоплазму.

На этих этапах в центральных областях миокардиальных кусочков, между остатками кардиомиоцитов наблюдались удлиненные веретеновидные клетки, которые имели овальные ядра с ядрышками и темно-базофильную цитоплазму. На периферии трансплантатов, вдоль края кусочка, также располагались тяжи из подобных клеток, а также новообразованных гемокапилляров.

В этот период на периферии, в клеточной зоне роста, обнаруживались крупные отростчатые фибробластоподобные клетки, которые имели овальные или округлые ядра с ядрышком и светло-базофильную цитоплазму. В местах контактов этих клеток между собой было практически невозможно определить их границы. В зоне роста трансплантатов определялись крупнопетлистые эндотелиальные разрастания. Полученные данные свидетельствуют о позитивном влиянии культивируемых нейросекреторных клеток гипоталамуса на сохранность кардиомиоцитов обоих видов и васкулогенез в зоне имплантатов.

выводы

1. В условиях моделирования эмоционально-болевого стресса по Desiderato и при длительном стрессировании, а также при культивировании in vivo объем гисто- и органотипических потенций дефинитивного левожелудочкового и околоузлового миокарда правого предсердия крыс свидетельствует о стойкой тканеспецифической детерминированности сердечной мышечной ткани как особого поперечнополосатого типа сократительной ткани.

2. Нейрогормоны крупноклеточных ядер гипоталамуса являются стресс-лимитирующими факторами относительно дезадаптивной морфофункциональной реорганизации сократительных кардиомиоцитов левого желудочка и проводящих кардиомиоцитов правого предсердия, протекающей на фоне блокирования высвобождения гипоталамических нонапептидных секреторных гранул на уровне аксовазальных комплексов нейрогипофиза.

3. Гипоталамические нонапептиды оказывают положительное влияние на сохранность сократительных, энергетических, проводящих ультраструктур кардиомиоцитов, в том числе тех клеточных форм, которые были разбалансированы при длительном эмоционально-болевом стрессе.

4. Длительное стрессорное воздействие негативно сказывается на гистогенетических процессах в сократительных кардиомиоцитах. На это указывает возрастание проявлений запрограммированной клеточной гибели (апоптоза) в сократительных кардиомиоцитах.

5. Клетки с положительной иммуноцитохимической реакцией на белок р53 чаще выявляются среди сократительных крадиомиоцитов, чем в популяции проводящих кардиомиоцитов. Это свидетельствует о большей устойчивости проводящих кардиомиоцитов к стрессорным условиям.

6. При культивировании миокарда взрослых крыс in vivo возможна дедифференцировка дефинитивных сердечных миоцитов путем сегрегации ядерно-цито плазматических компартментов.

7. При культивировании миокарда крыс в диффузионных камерах получены сходные данные о структурно функциональных изменениях сократительного миокарда по сравнению с обнаруженными в аналогичные сроки имплантации по методу Ф.М. Лазаренко.

8. Воздействие нонапептидергической ГГНС на клеточный и тканевой гомеостаз миокарда проявляется через стимуляцию васкулогенеза и активности фибробластов, макрофагов, эндотелиоцитов и периваскулярных клеток и носит адаптивный характер.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Солодовников В.В., Фарех Ф.М.Ш. Морфофункциональное состояние крупноклеточных ядер гипоталамуса и миокарда крыс в условиях эмоционально-болевого стресса. Сборник материалов Региональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов г. Оренбург, 2003, с. 106-107.

2. Сальников В.А., Пресняков C.B., Солодовников В.В. экспериментально-гистологическое исследование морфофункциональной реорганизации «интактных» участков миокарда и проводящей системы сердца крысы при экспериментальном инфаркте. Материалы научного совещания «Актуальные проблемы учения о тканях» Санкт-Петербург, 14 апреля 2006 г. Санкт-Петербург: Изд-во BMA, 2006, с. 91-92.

3. Сальников A.A., Пресняков C.B., Солодовников В.В. Морфофункциональная характеристика «интактных» участков миокарда и проводящей системы сердца при экспериментальном инфаркте. Морфология, 2006, т. 130, №5, с. 78.

4. Солодовников В.В. Морфофункциональная реорганизация различных типов кардиомиоцитов крыс при эмоционально-болевом стрессе. Морфология, 2007, т. 131, №3, с. 93-94.

5. Солодовников В.В., Бахтияров Р.З. «К вопросу о морфологических изменениях эндотелия при сердечной недостаточности» Материалы всероссийской конференции студентов и молодых ученых «Пироговские чтения» г. Москва. Вестник РГМУ, №2 (61), 2008, с. 53 - 54.

6. Стадников A.A., Солодовников В.В. «Ультраструктурная оценка гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы (ГГНС), сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в условиях длительного стрессорного воздействия». Морфология, Т. 133, №2,2008, с. 128.

7. В.В. Солодовников, C.B. Пресняков, В.А. Сальников «Клеточные механизмы адаптивной реорганизации дефинитивного миокарда крыс в экспериментальных условиях». Материалы конференции «Медицинская наука и образование Урала», посвященной 10-летию ЮУНЦ РАМН // Медицинская наука и образование Урала, №4,2008, с.112 - 113.

8. В.В. Солодовников Ультраструктурные и иммунноцитохнмические аспекты реорганизации миокарда крыс в условиях эмоционально-болевого стресса (ЭБС). Материалы Всероссийской научной конференции «Нейробиологические аспекты морфогенеза и регенерации» // Морфология, Т.134, №5,2008, с. 93.

ООО «Агентство «Пресса» г. Оренбург, ул. Комсомольская, 45 тел.: 29-22-22

ЛР № 087103 от 28.08.2009 г.

Отпечатано 31.08.2009 г. Заказ № 1536. Тираж 150 экз.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Солодовников, Виталий Валерьевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОКРАТИТЕЛЬНЫХ И ПРОВОДЯЩИХ КАРДИО-МИОЦИТОВ В АСПЕКТЕ ИХ РЕАКТИВНОСТИ И ПЛАСТИЧНОСТИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Материалы и экспериментальные методы.

2.2 Методики, использованные при обработке полученного материала.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Морфофункциональные параллелли между структурно-функциональной реорганизацией кардио-миоцитов и реактивными изменениями нонапептидер-гических нейросекреторных клеток гипоталамуса в условиях эмоционально-болевого стресса.

3.2. Характер структурно-функциональных изменений кардиомиоцитов крыс при культивирование in vivo по методу Ф.М. Лазаренко.

3.3. Органотипическое сокультивирование миокарда и крупноклеточных ядер гипоталамуса по методу Ф.М. Лазаренко и в диффузионных камерах.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование"

Актуальность проблемы.

Несмотря на то, что структурной реорганизации миокарда млекопитающих животных и человека, наблюдаемой в различных экспериментальных и клинических условиях, посвящена обширная литература (Румянцев П.П., 1967; Katzberg P. et al., 1977; Бродский В .Я., 1981; Большакова В.Н., 1991; Дедков Э.И., 1995; Швалев В.Н. с соавт. 1992; Павлович Е.Р., 2003, 2006; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.Ш., 2004; Саликова С.П., 2008), многие аспекты реактивных, адаптивных и репаративных преобразований сократительных и проводящих кардиомиоцитов нуждаются в уточнении. В первую очередь это касается диапазона гисто- и органотипических свойств структурных элементов миокарда при воздействиях на организм различных экстремальных факторов и установления роли нейроэндокринных факторов в регуляции процессов репаративных гистогенезов (Zachary D.D. et al., 1987; Стадников

А.А., 1989, 2001).

Известно, что в дефинитивном миокарде млекопитающих исчерпан обособленный пул миогенных кардиомиоцитов (Sasaki К. et al., 1970), а в условиях различных экспериментальных воздействий отмечаются процессы гиперплазии и гипертрофии сердечных миоцитов, внутриклеточная регенерация и незначительная инициация синтеза ДНК (Румянцев П.П., 1982; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.Ш., 2004). Тем не менее, в научной литературе имеются указания на то, что в реактивно измененном миокарде взрослых экспериментальных животных возникают кардиомиоциты с признаками бласттрасформации (Стадников А.А., 2001). Однако до сих пор убедительных морфологических доказательств в этом плане крайне мало.

В последние годы значительное внимание уделяется изучению гипоталамической нейросекреции, роли и значимости нонапептидных гормонов подбугорья в позитивной регуляции клеточного и тканевого гомеостаза, в том числе и репаративных гистогенезов (Стадников А.А., Шевлюк Н.Н., Козлова А.Н., 2006; Стадников А.А., Шевлюк Н.Н., 2006; Канюков В.Н. с соавт., 2007; Стадников А.А., 2008; Саликова С.П., Бахтияров Р.З., 2008). Вместе с тем, относительно подобного влияния гипоталамических нонапептидов на различные виды кардиомиоцитов фактов крайне мало, и имеющиеся сведения характеризуются противоречивостью.

Требуют также уточнения сведения о значении, которое имеют различные клеточные элементы миокарда (кардиомиоциты, немышечные клетки сердца) на этапах адаптации и репарации, о влиянии на эти процессы внутри- и межсистемных регуляторных факторов, и, в первую очередь, это касается выяснения значения гипоталамических нонапептидов в регуляции процессов ультраструктурной реорганизации сократительных и проводящих кардиомиоцтов, особенно в условиях воздействия на организм дестабилизирующих факторов.

Цель и задачи исследования.

Цель работы - экспериментально-гистологическое обоснование диапазона структурно-функциональной реорганизации сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в условиях измененной гипоталамической нонапептидергической нейросекреции.

Для достижения этой цели поставлены и решены следующие задачи:

3. Исследовать особенности реактивных и пластических свойств . сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в условиях их органотипического сокультивирования in vivo (по методу Ф.М. Лазаренко) и в диффузионных камерах с супраоптическими и паравентрикулярными ядрами гипоталамуса.

Научная новизна.

Получены новые данные о характере адаптивных и дизадаптивных изменений сократительных и проводящих кардиомиоцитов млекопитающих (крыс) в условиях стрессирования, культивирования и органотипического сокультивирования с нонапептидерическими ядрами гипоталамуса in vivo по Ф.М.Лазаренко (по критериям ультраструктурного и иммуноцитохимического анализа). Получены новые доказательства, подтверждающие положение о стойкой детерминированности тканеспецифических свойств сократительных и проводящих кардиомиоцитов.

Теоретическая и практическая значимость.

Реализация результатов исследования.

Положения, выносимые на защиту:

1. Объем гисто- и органотипических потенций дефинитивного левожелудочкового миокарда и проводящих, кардиомиоцитов правого желудочка крыс в условиях эмоционально-болевого стресса и культивирования in vivo по Ф.М. Лазаренко определяется тканеспецифической детерминированостью сердечной мышечной ткани, реализуемой под контролирующим влиянием нейроэндокринных факторов крупноклеточных ядер гипоталамуса.

4. Адаптивный ресурс проводящих кардиомиоцитов (по критериям апоптозной доминанты) в условиях избегания эмоционально-болевого воздействия и культивировании оказался выше по сравнению с сократительными миоцитами.

Апробация работы. региональная научно-практическая конференция молодых ученых и специалистов (Оренбург, 2003), II Международная Пироговская научная медицинская конференция молодых ученых (Москва, 2007), IX конгресс

МАМ (Бухара, 2008), Всероссийская научная конференция «Нейробиологические аспекты морфогенеза и регенерации», посвященная памяти чл.-корр. АМН СССР профессора Ф.М. Лазаренко (Оренбург, 2008), Всероссийская конференция «Медицинская наука и образование Урала» (Челябинск, 2008).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 8 работ, из них 6 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 155 страницах и состоит из введения, обзора литературы, главы по материалам и методам исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка использованной литературы, включающего 231 источника, в том числе 133 иностранных. Работа иллюстрирована 7 таблицами и 35 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Солодовников, Виталий Валерьевич

выводы

1. В условиях моделирования эмоционально-болевого стресса по Desiderata и при длительном стрессировании, а также при культивировании in vivo объем гисто- и органотипических потенций дефинитивного левожелудочкового и околоузлового миокарда правого предсердия крыс свидетельствует о стойкой тканеспецифической детерминированности сердечной мышечной ткани как особого поперечнополосатого типа сократительной ткани.

5. Клетки с положительной иммуноцитохимической реакцией на белок р53 чаще выявляются среди сократительных крадиомиоцитов, чем в популяции проводящих кардиомиоцитов.

Это свидетельствует о большей устойчивости проводящих кардиомиоцитов к стрессорным условиям.

6. При культивировании миокарда взрослых крыс in vivo возможна дедифференцировка дефинитивных сердечных миоцитов путем сегрегации ядерно-цитоплазматических компартментов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Солодовников, Виталий Валерьевич, Оренбург

1. Абельсон, Ю.О. Регуляция секреции антидиуретического гормона / Ю.О. Абельсон // Усп. физиол. наук.-1977.- т.8.- с. 109-133.

2. Абдрашитова, Э.Х. Гистологические исследования слизистой оболочки надгортанника в онтогенезе и экспериментальных условиях / Э.Х Абдрашитова // Автореф. дис. канд. наук. Оренбург, 1965.- 23 с.

3. Автандилов, Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов // М., Медицина, 1990.- 384с.

4. Акмаев, И.Г. Структурные основы механизмов гипоталамической регуляции эндокринных функций / И.Г. Акмаев // М.: Наука, 1979.227 с.

5. Акмаев, И.Г. Современные представления о взаимодействиях гипоталамической нейросекреторной и вегетативной нервных систем в регуляции эндокринной и гомеостатической функций / И.Г. Акмаев // Морфология. 1992.- Т. 102, N 3,- с.5-39.

6. Багров, Я.Ю. Химическая характеристика гипоталамических нейрогормонов, их биосинтез и механизм действия / Я.Ю. Багров, И.А. Красновская / В кн. Нейроэндокринология // под ред. член-корр. РАИ А. Л. Поленова. СПб., 1993.- часть 1.- с.89-95.

7. Бажанов, А.Н. Структурная и гистохимическая характеристика слизистой оболочки пищевода в онтогенезе и эксперименте / А.Н. Бажанов // Автореф. дис. канд. наук. Оренбург, 1965.-35 с.

8. Беленков, Ю.Н. Сопоставление данных эхокардиографии и морфометрии сердца у здоровых лиц и больных с сердечнойнедостаточностью разного происхождения / Ю.Н. Беленков, И.М. Рыфф // Кардиология,-1981.- N 3.- с.84-87.

9. Блинова, Е.В. Ультраструктура миокарда мышей при стрессе и экспериментальной терапии антиаритмиками / Е.В. Блинова, Д.С. Балашов, Д.С. Блинов, Е.А. Карпова, В.М. Бакайкин, JI.B. Ванькова, В.В. Кашицина // Морфология.- 2008.- т. 134, №5.- с.57.

10. Бокерия, JI.A. О клинико-морфофункциональных особенностях и механизмах аритмогенеза при идиопатическом синдроме удлиненного интервала Q-T / JI.A. Бокерия, Е.З. Голухова, Е.Р. Павлович Е.Р., И.П. Полякова // Вестн. РАМН. 1996. - №5. - С. 3-9.

11. Большакова, Г.Б. Межтканевые взаимоотношения в развитии сердца / Г.Б. Большакова//М.: Наука, 1991.-220 с.

12. Бродский, В.Я. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка / В.Я. Бродский, И.В. Урываева // М.: Наука, 1981.257 с.

13. Буреш, Я. Электрофизиологические методы исследования / Буреш Я., Петрань М., Захар И. // М.: ИЛ., 1962,- с.420.

14. Валов, С.Д. Влияние нейроэндокринных факторов на репаративный гистогенез околоушной железы при культивировании в диффузионных камерах //Морфология.- 1999.- т.116, N 5.- с.34-37.

15. Валов С.Д., Семченко Ю.П. К вопросу о влиянии нейромедиаторов и нейропептидов на гистогенез железистых покровных эпителиев при культивировании в организме // Сб. науч. трудов, Томск.-2002.-вып.2.-с.98-99.

16. Володина, Е.П. Гистологическое и гистоавторадиографическое изучение эпителия передней доли гипофиза в онтогенезе и эксперименте / Е.П. Володина// Автореф.дис.д-ра наук. М., 1970.- 40 с.

17. Гавриш, А.С. Пространственная организация микроциркуляторного русла и органно-тканевых функциональных элементов миокарда / А.С. Тавришь // Арх. анат., 1984.- N 7.- с.36-42.

18. Данилов Р.К., Ибрагимова И.Ф. Пролиферация и дифференцировка миоцитов при экспериментально вызванной гипертрофии миокарда // Арх. анат.- 1993.- т. 104, вып.3-4.- с.62-73.

19. Дедков, Э.И. Изменения миокарда взрослых крыс при культивировании в диффузионных камерах in vivo / Э.И. Дедков // Морфология.-1995.-т. 108, N2.- с.46-48.

20. Дунаев, П.В. Авторадиографическое исследование щитовидной железы, культивируемой по методу Ф.М. Лазаренко / П.В. Дунаев // Арх. анат.-1963.- т.45, вып. 10.- с.40-43.

21. Ерохина, И.Л. Пролиферация и синтез ДНК на ранних стадиях развития миокарда / И.Л. Ерохина//Цитология,- 1968.-t.10, N 2.-с.162-171.

22. Канюков, В.Н. Репаративные гистогенезы тканей глаза в условиях экспериментального моделирования дефектов и их замещения / В.Н. Канюков, А.А. Стадников, А.А. Горбунов, Е.А. Ломухина // Морфология. 2007. - т. 131, №3. - С.73.

23. Клишов, А.А. Регуляция реактивных и приспособительных изменений скелетно-мышечной и сердечно-мышечной тканей // Арх. анат.- 1977.-т.72, вып.2.- с.105-112.

24. Коган, А.Х. Липидные перекисно-радикальные механизмы повреждения миокарда при инфаркте, ишемии, постишемической реперфузии икатехоламинных некрозах / А.Х. Коган, А.Н. Кудрин // Актуальные проблемы современной патофизиологии. Киев.-1981.- с.174-175.

25. Колесникова, Л.В. Количественная характеристика тканевой и ультраструктурной организации миокарда крысы / Л.В. Колесникова, Л.М. Непомнящих // Арх. анат.-1978.- т. 74, вып.4.- с.28-33.

26. Константинова, М.С. Гормоны нейрогипофиза- вазопрессин и окситоцин. Физиология эндокринной системы / М.С. Константинова, Ю.В. Наточин // Под ред. В.Г. Баранова. Л.: Наука, 1979.- с.90-119.

27. Красновская, И.А. Изменение нейросекреторной системы крыс в условиях длительной гипоксии / И.А. Красновская // Пробл. эндокринол.- 1974.- т.20.- с.53-57.

28. Кузик, В.В. Ультраструктура преоптического ядра стерляди через один год после удаления гипофиза / В.В. Кузик, Д.М. Макина, Е.В. Озирская // Морфология. 2003.- т. 124, N 5,- с.57-58.

29. Кузик, В.В. Адаптационные возможности парааденогипофизарного пути гормональной регуляции / В.В. Кузик // Материалы VII Всероссийской конференции «Нейроэндокринология 2005».-Спб.:РАН.- с. 100-102.

30. Кузнецов, Г.Э. К вопросу о морфологическом обосновании стадий хронической сердечной недостаточности / Г.Э. Кузнецов, И.Г. Мурзакаев, А.А. Алябьева, Л.Р. Тенчурина, И.Г. Помилуйко // Морфология. 2008. - Т.134. - №5. - С.78.

31. Лазаренко Ф.М. Закономерности роста и превращения тканей и органов в условиях культивирования их в организме.- М.: Медгиз.- 1959.- 400 с.

32. Махова, А.Н. Особенности восстановительных и компенсаторных процессов в патологически измененных органах в эксперименте / А.Н. Махова//Морфология.- 2003.- т. 124, N 5.- с.61-64.

33. Махова, А.Н. Гистоавторадиографическое исследование сердца при экспериментальной ишемии миокарда / А.Н. Махова, В.Н. Шляпников // Арх. пат.-1979.- т.41, вып.З.- с.40-48.

34. Махова, А.Н. Изменение миокарда предсердий при внезапной смерти у людей пожилого и старческого возраста с ишемической болезнью сердца / А.Н. Махова, А.В. Николаева // Морфология.- 2008.- т. 134, №5.- с. 83.

35. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Ф.З. Меерсон // М.: Медицина, 1984.-345 с.

36. Меерсон, Ф.З., Пешникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пешникова // М.: Медицина, 1988.-253 с.

37. Меерсон, Ф.З. Защитные эффекты адаптации и некоторые перспективы развития адаптационной медицины / Ф.З. Меерсон // Усп. физиол. наук.-1991.- т.22, N 2.- с.52-89.

38. Науменко, Е.В. Модификации функций гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы взрослых животных, вызванные воздействиями в раннем онтогенезе / Е.В. Науменко // Нейроэндокринология. СПБ, 1994.- часть 2.- с.152-181.

39. Непомнящих, JI.M. Морфогенез важнейших общепатологических процессов в сердце / JI.M. Непомнящих // М.: Наука-1991.- 315 с.

40. Непомнящих, JI.M. Морфометрия и стереология гипертрофии сердца / JI.M. Непомнящих, E.JI. Лушникова, Г.И. Непомнящих // М.: Наука.-1986.- с.312-420.

41. Павлов, Г.Г. Стромальные компоненты сердца: развитие, структурные и функциональные особенности / Г.Г. Павлов // Онтогенез.-1991.- т.22, N 6.- с.575-590.

42. Павлович, Е.Р. Ультраструктура кардиомиоцитов ножек пучка Гиса в сердце крысы / Е.Р. Павлович, И.А. Червова // Арх.анат. 1977. - Т. 73. — вып. 12. - С. 39-44.

43. Павлович, Е.Р. Количественный электронномикроскопический анализ проводящих и рабочих миоцитов синоаурикуляной области сердца у внезапно умерших от коронарной болезни или алкогольной кардиомиопатии / Е.Р. Павлович // Морфология, 2003.- N 5.- с.66.

44. Павлович, Е.Р. Ультраструктурное исследование атриовентрикулярного узла сердца человека при внезапной сердечной смерти / Е.Р. Павлович // Журнал Современные наукоемкие технологии. — 2005. №7. - С. 55-56.

45. Павлович, Е.Р. Сравнительный количественный анализ строения рабочего миокарда правого предсердия и папиллярных мышц правого желудочка сердца интактной крысы / Е.Р. Павлович // Журнал Современные наукоемкие технологии. 2006. - №3. - С. 40-41.

46. Павлович, Е.Р. Ультраструктурное выявление специализированных проводящих межузловых путей сердца с учетом их тканевых и клеточных компонентов / Е.Р. Павлович // Журнал Современные наукоемкие технологии. 2007. - №3. — С. 87-88.

47. Павлович, Е.Р. Количественные методы ультраструктурной диагностики изменений проводящего и рабочего миокардасиноаурикулярной области сердца при различной патологии человека / Е.Р. Павлович // Журнал Современные наукоемкие технологии. 2008. -№8. -С. 59.

48. Пирс, Э. Гистохимия. М.: ИЛ., 1962.- 944 с.

49. Поленов, А.Л. К вопросу о функциональном значении гипоталамической нейросекриции / А.Л. Поленов // Арх. анат,- 1962.т. 43, вып. 9.- с.3-9.

50. Поленов, А.Л. Эволюция гипоталамо-гипофизарного нейроэндокринного комплекса / А.Л. Поленов // Эволюционная физиология.- Л.: Наука, 1983.- часть 2.- с.53-109.

51. Поленов А.Л., Константинова М.С., Гарлов П.Е.// Нейроэндокринология часть 1, СПБ.-1993.- с.139-187.

52. Поленов А.Л., Константинова М.С., Гарлов П.Е. Гипоталамо-гипофизарный нейроэндокринный комплекс // Нейроэндокринология. СПБ., 1994. т.2.- с.139-286.

53. Поляков, А.А. Гистологические исследования слизистой оболочки кишки в процессе развития в экспериментальных условиях / А.А. Поляков // Автореф. дис канд. наук. Л., 1953. 23 с.

54. Румянцев, П.П. Кардиомиоциты в процессах репродукции, диффе-ренцировки и регенерации / П.П. Поляков // Л.: Наука.-1982. 280 с.

55. Румянцев, П.П. Электронномикроскопический анализ процессов дифференцировки и пролиферации клеточных элементов развивающегося миокарда / П.П. Румянцев // Арх. анат.- 1967.- т.52, вып.З.- с.67-77.

56. Рыбкин, И.И. Структурный анализ миокарда 2-месячных крыс при культивировании in vitro с позиций тканевого гомеостаза / И.И. Рыбкин // Морфология.- 1995.- т. 108, N 2.- с. 49-51.

57. Саликова, С.П. Ультраструктурная характеристика реактивно измененного миокарда при культивировании in vitro / С.П. Саликова, А.А. Стадников //Морфология. 2003.- т.124, N 5.- с.16-19.

58. Саликова, С.П. Роль структурных изменений эндотелия и миокарда в развитии экспериментальной сердечной недостаточности / С.П. Саликова, Р.З. Бахтияров // Морфология. 2008. - Т.134. - №5. - С.20-25.

59. Самосудова, Н.В. Нарушение сократительной функции миокарда и ультраструктура кардиомиоцитов после эмоционально-болевого стресса /Н.В. Самосудова, В.В. Глаголева//Арх. анат., 1983, т. 84, вып. 2.- с. 4349.

60. Саркисов, Д.С. Очерки по структурным основам гомеостаза.- М.: Медицина.- 1977.-с.351-372.

61. Саркисов, Д.С. Сосуды. В кн.: Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций.- М.: Медицина.- 1987.- с.295-306.

62. Сауля, А.И. Постстрессорные нарушения функции миокарда / А.И. Сауля, Ф.З. Меерсон // Кишинев «Штиинца», 1990.-159 с.

63. Семченко, Ю.П. Изменение эпителия глотки при культивировании в организме / Ю.П. Семченко // Бюл. экспер. биол.- 1968.- т.92, N.7.-с.97-100.

64. Семченко, Ю.П. Гистогенетические особенности эпителиальных тканей слизистых оболочек глоточной и ротовой поверхностей мягкого неба в онтогенезе и в экспериментальных условиях / Ю.П. Семченко, Л.В. Ков бык // Морфология, 1995, т. 108, N. 2, с.54-56.

65. Стадников, А.А. Изменения клеток аденогипофиза при совместной имплантации с различными ядрами гипоталамуса / А.А. Стадников // Арх. анат.- 1989.-t.97, вып. 10.- с.63-70.

66. Стадников, А.А. Ультраструктурные особенности реактивных изменений кардиомиоцитов взрослых крыс при культивировании in vivo

67. А.А. Стадников, Э.И. Дедков // Морфология, 1994.- т. 106, N 4.6.- с. 124128.

68. Стадников, А.А. Нейробиологические аспекты регуляции репаративных гистогенезов / А.А. Стадников // Морфология.- 1995.- т. 108, N 2.-с.16-19.

69. Стадников А.А., Шевлюк Н.Н. Морфофункциональная характеристика гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы крыс самцов в условиях эмоционально-болевого стресса / А.А. Стадников, Н.Н. Шевлюк // Морфология,- 1996.- т.5.- с.38-42.

70. Стадников, А.А. Эндоцитосимбиоз в эукариотических клетках млекопитающих и факторы его регуляции / А.А. Стадников, Н.Н. Шевлюк, А.Н. Козлова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. — 2006, №4. С. 46-49.

71. Стадников, А.А. Гипоталамические факторы регуляции процессов роста, пролиферации и цитодифференцировки эпителия аденогипофиза.-Екатеринбург, Уро РАН.- 1999.- 137 с.

72. Стадников, А.А. Роль гипоталамических нонапептидов во взаимодействиях про- и эукориот (структурно-функциональные аспекты). Екатеринбург, Уро РАН.- 2001.- 243 с.

73. Стадников, А.А. Гипоталамическая нонапептиедгическая регуляция клеточного и тканевого гомеостаза взаимодействий про- и эукариот / А.А. Стадников // Морфология.- 2008.- т.134.- №5.- С.14-19.

74. Судаков, К.В. Экстракардиальная регуляция при эмоциональном стрессе / К.В. Судаков, Л.Ю. Ульянинский // Патол. физиол. и экспер. терапия.- 1984,- N 6.- С.3-12.

75. Угрюмов, М.В. Вазопрессинергическая система гипоталамуса -развитие и пластичность / М.В. Угрюмов // Тезисы докладов 3-го Международного симпозиума «Современные проблемы нейробиологии». Саранск, 2001.- с. 133-134.

76. Ухов, Ю.И. Морфофункциональная характеристика задних гипоталамических ядер при остром инфаркте миокарда / Ю.И. Ухов, Т.Ю. Баранова//Морфология.- 2008.- т. 134, №5. с. 98-99.

77. Фарех, Ф.М.Ш. Нейроэндокринная регуляция структурно-функциональной реорганизации миокарда (экспериментально-гистологическое исследование) // Автореферат на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. — Оренбург. 2004. - 26 с.

78. Фролов, Б.А. Роль нарушений центральных механизмов нейргуморальной регуляции в исходе вирусной инфекции / Б.А. Фролов, Г.Н. Смагин, В.К. Филиппов // Докл. АН СССР, 1990.- т.314, N 3.- с.764-767.

79. Фролов, В.А. Морфология митохондрий кардиомиоцитов в норме и патологии / В.А. Фролов, В.П. Пухлянко // М.: Изд-во УДН.-1989.-123 с.

80. Фролов, В.А. Сезонные перестройки липолитических процессов и функция миокарда у кроликов при гемодинамической перегрузке сердца / В.А. Фролов, JI.B. Ефимов // Кардиология, 1984.- т.24, N 2- с. 104.

81. Фролов, В.А. Сердечный цикл / В.А. Фролов, Е.В. Богданова, Т.А. Казанская // М.: Изд-во Моск. ун-та, 1981.-135 с.

82. Хитров, Н.К. Адаптация сердца к гипоксии / Н.К. Хитров, B.C. Пауков //М.: Медицина, 1991.-230 с.

83. Хлыстова, З.С. Влияние некоторых антибиотиков на тканевые элементы в ранах молочной железы / З.С. Хлыстова // Тр. Оренб. мед. ин-та, вып.6.- Оренбург, 1958.- с.265-275.

84. Хлыстова, З.С. Сравнительное исследование превращений дермального и энтеродермального эпителиев в культурах в организме / З.С. Хлыстова// Арх. анат., I960.- т.38, вып.1.- с.43-47.

85. Чекулаева, JI.И. Авторадиографическое исследование кожного эпителия в культурах ткани по методу Ф.М. Лазаренко / Л.И. Чекулаева // Арх. анат., 1961.- т.41, вып.12.- с.57-63.

86. Шаров, В.Г. Ультраструктура поврежденного кардиомиоцита / В.Г. Шаров, Ш.Б. Иргашев, Д.И. Мавриди, Г.М. Могилевский В кн.: Ультраструктура сердца. Ташкент, Медицина, 1988.- с.53-68.

87. Швалев, В.Н. Морфологические основы иннервации сердца / В.Н. Швалев, А.А. Сосунов, Г.Н. Гуски // М.: Наука, 1992.- 366 с.

88. Ямщиков, Н.В. Гибель кардиомиоцитов и разрушение структур в эмбриональном гистогенезе / Н.В. Ямщиков // Арх. анат.- 1985.- т.88, N 3, с.79-84.

89. Ямщиков, Н.В. Структурная организация мышечной ткани сердца и нарушения миогенеза в различные периоды развития: Дисс. на соиск. учен. степ. докт. мед. наук.- 1991.- 336 с.

90. Ayettey A.S., Tagoe С.Н., Yates R.D. Ultrastructural characteristics of atrial, ventricular and subendocardial (Purkinje) cells of the fruit-eating bat Eidolon helvum // Acta anat. 1993. - Vol. 147. - P. 89-96.

91. Alario A., Beato M.J., Trancho G. Body weight gain, food intake adrenal development in chronic noise stressed rats // Physiol Behav.- 1987.- v.40.-c.29-32.

92. Anversa P., Olivetti G., Loud A.V. Morphometric study of early postnatal development in the left and right ventricular myocardium of the rat. I. Hypertrophy, hyperplasia and binucleation of myocytes // Circ. Res.-1980.- v.46, N 4.- p.495-502.

93. Ashraf M., Halverson C. Ultrastructural modifications of nexuses (gap junctions) during early myocardial ischemia // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1978.-v.10, N. 9.p.263-269.

94. Aumont M.C., Swingheadauw В., Nag A. C., Cutiletta A.F., Zak P. Separation of muscle and non-muscle cells from adult rat myocardium // Biol. Cell.- 1980.- v.37.-p.l 19-120.

95. Bai S., Campbell S.E. Moore J. A., Morales M.C., Gerdes A.M. Influence of age, growth, and sex on cardiac myocyte size and number in rats // Anat. Rec.- 1990.- v.226, N 2,- p.207-212.

96. Bishop S.P., Drummond J.L. Surface morphology and cell size measurement of isolated rat cardiac myocytes // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1979.-v.ll.-p. 423-433.

97. Bockman D.E., Redmond M.E., Kirby M.L. Alterations of earlyvascular development after ablation of cranial neural crest // Anat. Rec.- 1989.-v.225.- p.209-217

98. Borg Т.К., Rubin K., Lundgren E., Borg K., Obrink B. Recognition of extracellular matrix components by neonatal and adult cardiac myocytes // Dev. Biol.- 1984.- v.104.- p.86-96.

99. Borg Т. K., Buggy J., Sullivan Т., Laks J., Terracio L. Morphological and biochemical characteristics of the connective tissue network during normal development and hypertrophy // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1986.- v. 18, Suppl. J.- p.247.

100. Brilla C.G., Reams G.P., Malsch В., Weber K.T. Reninangiotensin system and myocardial collagen matrix // Eur. Heart. J.- 1993.- v.14, Suppl J.- p.57-61.

101. Brodsky W.Y., Tsirekidze N. N., Arefyeva A.M. Mitotic-cyclic and cycleindependent growth of cardiomyocytes // J. Mol. cell, cardiol.- 1985,- v. 17, N 5.- p.445-455.

102. Brodsky W.Y., Arefyeva A.M., Uryvaeva I.V. Mitotic polyploidization of mouse heart myocytes during the first postnatal week // Cell. Tissue Res.-1980.- v.210.-p.l33-144.

103. Bugaisky L.B., Zak R. Differentiation of adult cardiac myocytes in cell culture. // Circ. Res.- 1989.- v.64.- p.493-500.

104. Campbell S.E. Collagen matrix in the heart. In: Eghbali-Webb M., editor. Molecular biology of collagen matrix in the heart. Austin, TX: R.G. Landes Company, 1995.-p 93-111

105. Carver W., Terracio L., Borg Т.К. Expression and accumulation of interstitial collagen in the neonatal rat heart // Anat. Rec.- 1993.- v.236, N 3.-p.511-520.

106. Caulfield J.B., Borg Т.К. The collagen network of the heart // Lab. Inv.-1979.- v.40.- p.364-372.

107. Caulfield J.B., Tao S.B., Nachtigai M. Ventricular collagen matrix and alterations // Adv. Myocardiol., New-York, London.- 1985.- v.5.- p.257-269.

108. Claycomb W.C. Long-term culture and characterization of the adult ventricular and atrial cardiac muscle cell // Basic Res. Cardiol.- 1985.- v.80, Suppl. II.- p. 171-174.

109. Claycomb W.C., Lanson N.A. Proto-oncogene expression in proliferation and differentiating cardiac and skeletal muscle // Biochem. J.- 1987.- v.247.-p.701-706.

110. Claycomb W.C.,Moses R.L. Growth factors and TPA stimulate DNA synthesis and alter the morphology of cultured terminally differentiated adult rat cardiac muscle cells // Dev. Biol.- 1988.- v.127.- p.257-265.

111. Cluzeaut F., Maurer-Schultze B. Proliferation of cardiomyocytes and interstitial cells in the cardiac muscle of the mouse during pre- and postnatal development // Cell, tissue kinet.- 1986.- v. 19, N 3.- p.267-274.

112. Crabos M., Roth M., Hahn A.W., Erne P. Characterization of angiotensin II receptors in cultured adult rat cardiac fibroblasts. Coupling to signaling systems and gene expression // J. Clin. Inv.- 1994.- v.93, N 6.- p.2372-2378.

113. Cutilleta A.F., Aumont M.C., NagA.C., Zak R. Separation of muscle and non-muscle cells from adult rat myocardium. An application to the study of RNA polymerase // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1977.- v.9.- p.399-407.

114. Dark W.A., Rudniclc S.J., Simpson D.G., LaPres J.J., Decker R. Cultured adult cardiac myocytes maintain protein synthetic-capacity of intact adult hearts // Am. J. Physiol.- 1993.- v.264, N 2, Pt.2.- p.573-582.

115. David H., Bozner A., Meyer R., Wassilev G. Pre- and postnatal development and ageing of the heart: Ultrastructural results and quantitative data // Exp. Path., Suppl. 7. Jena: VEB Gustav Fischer Verlag.- 1981,- p. 176.

116. De la Cruz M.V., Markwald R.R. Living morphogenesis of the heart // Boston Birk.- 1998.- v.97, N 7.- p.316-321.

117. Decker M.L., Behnke-Barclay M., Cook M.G., Lesch M., Decker R. Morphometric evaluation of the contractile apparatus in primary cultures of rabbit cardiac myocytes // Circ. Res.-1991.-v.69, N 1.-p.86-94.

118. Decker M.L., Simpson D.G., Behnke M., Cook M.G., Decker R.S., Morphological analysis of contracting and quiescent adult rabbit cardiac myocytes in long-term culture // Anat. Rec.- 1990.- v.227, N 3.- p.285-299.

119. Deepak A.D., Timothy F.W., Reynold A.P., Mathur S.K. CD38/ cyclic ADP-ribose-mediated Ca2+ signaling contributes to airway smooth muscle hyperresponsiveness // The FASEB J.- 2003.- v. 17, N 3.- p.452-454.

120. Dedkov E.I., Stadnikov A.A., Russell M.W., Borisov A.B. Formation of leptofibrils is associated with remodeling of muscle cells and myofibrillogenesis in the border zone of myocardial infarction // Micron.-2007.-№38(6).- p.659-667.

121. Desiderato O., MaKinon J.R., Hisson H. Development of ulcers in rats following stress termination // J. Сотр. Physiol. Psychol.- 1974.- v.87, N 2.-p.208-214.

122. DeRuiter M.C., Poelmann R.E., VanderPlasde I., Mentink M.M., Gittenbergerde Groot A.C. The development of the myocardium and endocardium in mouse embryos. Fusion of two heart tubes // Anat. Embryol. Berl.- 1992.- v.185.- p.461-473.

123. Dicorleto P.E., De la Motte C.A. Characterization of the adhesion of the human monocytic cell line U937 to cultured endothelial cells // J. Clin. Inv.-1985.- v.75.- p.1153-1161.

124. Diglio C.A., Grommas P., Glacomelli F., Wiener J. Rat heart-derived endothelial and smooth muscle cell cultures: Isolation, cloning and characterization//Tiss.Cell.- 1988.- v.20, N4.-p.477.

125. Dostal D.E., Rothblum K.N., Conrad К. M., Cooper G.R., Baker K.M. Detection of angiotensin I and II in cultured rat cardiomyocytes and fibroblasts//Am. J. Physiol.- 1992.-v.263, N 4.- p.851-863.

126. Dowell R.T., McManus. R.E. Pressure induced cardiac enlargement in neonatal and adult rats: Left ventricular functional characteristics and avoidance of cardiac muscle cell proliferation in the neonate // Ctrc. Res.-1978.- v.42.- p.303-310.

127. Eid H., Chen J.H., de-Bold A.J. Regulation of alpha-smooth muscle actin expression in adult cardiomyocytes through a tyrosine kinase signal transduction pathway // Ann. N.Y. Acad. Sci.- 1995.- v.752.- p.192-201.

128. Engelmann G.L., Dionne C.A., JayeM.C. Acidic fibroblast growth factor and heart development. Role in myocyte proliferation and capillaryangiogenesis // Circ. Res.- 1993.- v.72, N 1.- p.7-19.

129. Eppenberger H.M., Eppenberger-Eberhardt M., Hertig C. Cytoskeletal rearrangements in adult rat cardiomyocytes in culture // Ann.N.Y. Acad. Sci.-1995.- v.752.- p.128-130.

130. Eppenberger-Eberhardt M., Flamme I., Kurer V., Eppenberger H. Reexpression of a smooth muscle actin isoform in cultured adult rat cardiomyocytes // Dev. Biol.- 1990.- v. 139, N 2.- p.269-278.

131. Forbes A., Sperelakis W. Submicroscopic structure of the mammalian myocardiocytes // Cancer Res.- 1982.- v.21, N 8.- p.989-992.

132. Frank J.S., Beydler S. Intercellular connections in rabbit heart as revealed by dulck-frozen, deepetched, and rota-ryreplicated papillary muscle // J. Ultrastruct. Res.- 1985.- v.90, N 2.- p. 183-193.

133. Frederickson R.G., Morse D.E., Low F.N. High-voltage electron microscopy of extracellular fibrillogenesis // Am. J. Anat.- 1977.- v. 150.- p.l-33.

134. Ganote C.F, Liu S.Y., Safavi S., Kaltenbach J.P. Anoxia, calcium and contracture as mediators of myocardial enzyme release // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1981.- v.13, N 1.- p.93-106.

135. Gerdes H., Kasten R. Ultrastructure of malignant myogenic tumors of soft tissues: rhabdamyosarcoma and leymyosarcoma // Fukuoka acta. Med.- 1980-v.64.- p.228-248.

136. Gittenbergerde Groot A.C, Bartelings M.M., Poelmann R.E. Overview: cardiac morphogenesis. In: Dark E.B., Markward R.R., Takao A. Developmental mechanism of heart disease // New York: Futura.- 1995.- p 157-168.

137. Golfman L.S., Hata Т., Beamish R.E., Dhalla N.S. Role of endothelin in heart function in health and disease // Can. J. Cardiol.- 1993,- v.9, N.7.- p.635-653.

138. Grafe M., Graf К., Auch-Schwelk W., Terbeek D., Hertel H., Fleck E. Cultivation and characterization of micro- and macrovascular endothelial cells from the human heart // Eur. Heart. J.- 1993.- v. 14, Suppi I.- p.74-81.

139. Guo J.X., Jacobson S.L., Brown D.L. Rearrangement of tubulin, actin, and myosin in cultured ventricular cardlomyocytes of the adult rat // Mol. Cell. Cytoskeleton.- 1986.- v.6, N 3.- p.291-304.

140. Guski H. The effect of exercise on myocardial interstitium: An ultrastructural morphometric study // Exp. Path.- 1981.- v.18.- p.141-150

141. Hamaoka K., Sawada T. Hypoplastic heart induced by neonatal hypothalamic lesions in mice // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1987.- v.19, N 8.-p.741-749.

142. Hilal-Dandan R., Merck D.T., Lujan J.P., Brunton L.L. Coupling of the type A endothelin receptor to multiple responses in adult rat cardiac myocytes // Mol. Pharmacol.- 1994.- v.45, N 6.- p. 1183-1190.

143. Hirasawa A., Hashimoto K., TsuJimoto G. Distribution and developmental change of vasopressin VIA and V2 receptor mRNA in rats // Eur. J. Pharmacol.- 1994,- v.267, N 1.- p.71-75.

144. Hirata Y., Kanno K., Eguchi S., Капо H. Effect of an ATI receptor antagonist on angiotensin II-induced cardiomyocyte hypertrophy in vitro // Blood. Press. Suppl.- 1994.- v.5.- p.84.88.

145. Horackova M., Mapplebeck C. Electrical, contractile, and ultrastruetural properties of adult rat and guineapig ventricular myocytes in long-term primary cultures // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 1989.- v.67, N 7.- p.740-750.

146. Imai Т., Hirata Y., Emorl Т., Yanaglsawa M., Masaki Т., Marumo F. Induction of endothelin-1 gene by angiotensin and vasopressin in endothelial cells // Hypertension.- 1992.- v.19, N 6, Pt.2.- p.753-757.

147. Irons C.E., Murray S.F., Glembotski C.C. Identification the receptor subtype responsible for endothelin-mediated protein kinase-C activation and atrial natriuretic secretion from atrial myocytes // J. Biol. Chem.- 1993.-v.268, N 31.- p.23417-23421.

148. Ito H., Hiroe M., Hirata Y., Adachi S., Tujino M., Marumo F. Endothelin-1 as an autocrine factor in hypertrophy of cardiomyocytes // J. Circ.- 1992.- v. 56, N 5.- p.1314-1318.

149. James Т.п., Sherf L., Fine G., Morales A.R. Comparative ultrastructure of sinus node in man and dog // Circulation. 1966. — Vol. 34. - P. 139-169.

150. Kardami E., Stoski R.M., Doble B.W., Yamamoto Т., Hertzberg E., Nagy J.I. Biochemical and ultrastructural evidence for the association of basic fibroblast growth factor with cardiac gap junctions // J. Biol. Chem.- 1991.-v.266, N 29.- p.1551-1557.

151. Kasten F.H., Kudriavtsev В., Rumyantsev P.P. DNA content of isolated rat heart cells during postnatal development. Quantitative cytochemistry of mono- and binucleated myocytes // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1982.- v.14, N 5.-p.43.

152. Kawahara F., Mukal A., Oda Y., Nakanlshl I. Left ventricular of the heart: tissue Repair and localization of collagen types I, II, III, IV and fibronectin.-Virchows Arch., 1990.- v.417, N3.- p.229-236.

153. Kawamura K., James T.N. Comparative ultrastructure of cellular junction in working myocardium and the conduction system under normal and pathologic conditions //J. Mol. Cell. Cardiol. 1971. - Vol. 3. - P. 31-60.

154. Katzberg A.A., Farmer B.B., Harris R.A. The predominance of binucleation in isolated rat heart myocytes // Am. J. Anat.- 1977.- v.149, N 4.- p.489-500.

155. Koch-Schneldemann S., Gehr P., Rutlshauser В., Eppenberger H. Attachment of adult rat cardiomyocytes (ARC) on laminin and two laminin fragments // J. Struct. Biol.- 1994.- v.113, N 2.- p.107-116.

156. Li R.K., Yau T.M., Weisel R.D., Mickle D.A., Sakai Т., Choi A., Jia Z.Q. Construction of a bioengineered cardiac graft // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.-2000.- N 119.- p.368-375.

157. Loud A.V., Anversa P., Giacomelll F., Wiener J. Absolute morphometric study of myocardial hypertrophy in experimental hypertension. Determination of myocyte size // Lab. Inv.- 1978.- v.38.- p.586-596.

158. Luscher Т.Е., Wenzel R.R. Endothelin and endothelin antagonists: pharmacology and clinical implications.- Agents and Actions.: Suppl.- 1995.-v.45.- p.237-53.

159. Matlib M.A., Lee S.W., De Pover A., Schwartz A. A specific inhibitory action of certain benzothiazepines and benzodiazepines on the sodium-calcium exchange process of heart and brain mitochondria // Eur. J. Pharmacol.- 1983.- v. 89.- p.327-328.

160. McCallister L.P., Trapukdl S., Neely J.R. Morphometric Observations on the effects of ischemia in the isolated perfused rat heart // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1979.- v.l 1, N 7.- p.619-630.

161. McNutt A.V., Fawcett W.S. Quantative of cytoplasmic in electron micrographs // Lab. Inv.- 1974.- v.16, N 8.- p.996-108.

162. Morley G.E., Jalife J. Cardiac gap junction remodeling by sretch. Is it good thing? // Circulation Research. 2000. - V.87. - №4. - P.272-274.

163. Moses R.L., Claycomb W.C. Differentiated membrane specializations and myofibrillar breakdown and recovery in cultured adult cardiac myocytes treated with TPA and diacylglycerol // J. Cell. Sci.- 1989.- v.93, N 1,- p.95-105.

164. Moses R.L., Delcarpio J.B., Claycomb W.C. Morphometry of cultured myocytes. In: Biology of isolated Cardiac Myocytes // New-York, Elsevler.-1988.- p.41-53.

165. Nag A.C., Cheng M. DNA synthesis of adult mammalian cardiac muscle cells in long-term culture // Cell. Tissue. 1986.- v.18, N 4.- p. 491-497.

166. Nag A.C., Lee M.L., Koslur J.R. Adult cardiac muscle cells in long-term serum-free culture: myofibrillar organization, and expression of myosin heavy chain isoforms. in vitro cell // Dev. Biol.- 1990.- v.26, N 5.- p.464-470.

167. Neffgen J.F., Korecky B. Cellular hyperplasia and hypertrophy in cardiomegalles induced by anemia in young and adult rats // Circ. Res.-1972.-v.30, N 1.- p.104-113.

168. Nishida M., Springhorn J. P., Kelly R.A., Smith T.W. Cell-cell signaling between adult rat ventricular myocytes and cardiac microvascular endothelial cells in heterotypic primary culture // J. Clin. Inv.- 1993.- v.91, N 5.- p.1934-1941.

169. Oron U., Mandelberg M. Focal regeneration in the rat myocardium following cold injury // Cell. Tissue Res.-1985.- v.241, N 2.- p.459-463.

170. Paparelli A., Pellegrini A., Lenzi P., Gesi M., Soldani P. Ultrastructural changes in atrial tissue of young and aged rats submitted to acute noise stress // J. Submicrosc. Cytol. Pathol.- 1995.- N 27.- p.137-142.

171. Pellegrini A., Soldani P., Gesi M., Lenzi P., Paparelli A. The action of diazepam on noise-induced alterations in rat atrial tissue: An ultrastructural study // J. Submicrosc. Cytol. Pathol.- 1996.- N 28.- p.507-512.

172. Perriard J.C., von-Arx P., Bantle S., Eppenberger H.M., Eberhardt M., Messerll M., Soldatl T. Molecular analysis of protein sorting during biogenesis of muscle cytoarchitecture. Symp. Soc // Exp. Biol.- 1992.- v. 46.-p.219-235.

173. Petersen R.O., Baserga R. Nucleic acid and protein synthesis in cardiac muscle of growing and adult mice // Exp. Cell. Res.- 1965,- v.40.- p.340.

174. Pinson A. The Heart Cell in Culture.- Boca Raton, Fla., CRC Press.- 1987.-v. 1 and v.2.-p.548.

175. Piper H.M. Cell Culture techniques in heart and vessel research.- Berlin, Springer-Verlag, Germany.- 1990.- p. 139-154.

176. Porter G.A., Bankston P.W. Myocardial Capillaries in the fetal and the neonatal rat: a morphometric analysis of the maturing myocardial capillary bed // Am. J. Anat.- 1987.- v. 179.- p. 108-115.

177. Ratajska A., Fiejka E., Sieminska J. Prenatal development of coronary arteries in the rat: morphometric pattern // Folia Morphol.- 2000.- N 59.-p.297-306.

178. Robinson T. F., Cohen-Gould L., Remlly R.M., Capasso J.M., Factor S.M. Extracellular structures in heart muscle // Adv. Myocardiol., New-York, London.- 1985.- v.5.-p.243-255.

179. Robinson T. F., Factor S.M., Capasso J.M., Wittenberg B.A., Blumenfeld O.O., Selfter S. Morfology, composition, and function of struts between cardiac myocytes of rat and hamster // Cell. Tissue Res.- 1987.- v.249, N 2.-p.247-255.

180. Rumyantsev P.P. Interrelation of the proliferation and differentiation processes during cardiac myogenesis and regeneration // Int. Rev. Cytology.-1977,- v.51.-p. 187-273.

181. Rumyantsev P.P. New comparative aspects of myocardial regeneration with special reference to cardiomyocyte proliferative behavior. In: Mechanisms of growth control, ed. Becker P.O., Charles C.T., Springfield, Illinois.- 1981.-p.311-342.

182. Sage J.A., Gaven S.C. Ultrastructural comparison between skeletal and cardiac muscles // Cancer.- 1984.- v.52, N 2.- p. 189-193.

183. Sans-Coma V., Duran A.C., Fernandez В., Fernandez M.C., Lopez D., Arque J.M. Coronary artery anomalies and bicuspid aortic valve. In: Angelini P, editor. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins.- 1999.- p. 17-25.

184. Sasaki R., Morishita Т., Yamagata S. Autoradiographic studies on heart muscle cells in normal rats. Tohoku // J. Exp. Med.- 1970.- v. 100.- p. 1-13.

185. Sawada Y. Hemodynamic effects of short-term noise exposure. Comparison of steady state and intermittent noise at several sound pressure levels // J. Circ.- 1993,- N 57.- p.862-872.

186. Schwarzfeld T.A., Jacobson S.L. Isolation and development cell culture of myocardial cells of the adult rat // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1981.- v. 13, N 6.- p. 563-575.

187. Sedmera D., Pexieder Т., Hu N., Dark E.B. Developmental changes in the myocardial architecture of the chick // Anat. Rec.- 1997.- v.248.- p.421-432.

188. Sedmera D., Pexieder Т., Vuillemin M., Thompson R.P., Anderson R.H. Developmental patterning of the myocardium // Anat. Rec.- 2000.- v. 258.-p.319-337.

189. Selye H. Stress without distress.- New York: Hodder and Stoughton. 1974.-p.125-130.

190. Sergio O. Ioshii, Kyoko Imanaka-Yoshiba, Toshimichi Yoshida Organization of calse-questrin-positive sarcoplasmic reticulum in rat cardimyocytes in culture // Journal of cellular Physiology.- 1994.- v.158.-№l.-p. 87-96.

191. Simpson P., McGrath A., Savlon S. Myocyte hyperthrophy is neonatal rat heart cultures and its regulation by serum and by catecholamines // Circ. Res.-1988.-v.51, N 6.- p.787-801.

192. Soldani P., Pellegrini A., Gesi M., Lenzi P., Cristofani R., Paparelli A. SEM/TEM investigation on rat cardiac subcellular alterations induced by changing duration of noise stress // Anat. Rec.- 1997.- N 248.- p.521-532.

193. Stainier D.Y., Lee R.K., Fishman M.C. Cardiovascular development in the zebrafish. I. Myocardial fate map and heart tube formation // Dev.Anat.-1993.- v.119.- p.31-40.

194. Terracio L., Borg Т.К. Immunohistochemical characterization of isolated and cultured cardiac myocytes. In: Biol. Isol. Adult Cardiac Myocyte // Elsevier. Sci. Publ. Co. Inc.- 1988.- p.54-67.

195. Terracio L., Gullberg D., Rubin K. Expression of collagen adhesion proteins and their association with the cytoskeleton in cardiac myocytes // Anat. Rec.- 1989.- v.223, N 1.- p.62-71.

196. Truex R.C. The sinoatrial node and its connections with the atrial tissue // The conduction system of the heart. Structure, function and clinical implication. Philadelphia: Lea and Febiger. - 1976. - P. 209-226.

197. Van den Hoff J.B., Kruithof P.T., Moorman F.M., Markwald R.R., Wessels A. Formation of myocardium after the initial development of the linear heart tube // Dev. Biol.- 2001.- v.-240.-p.61-76.

198. Van den Hoff J.B., Moorman F.M., Ruijter J.M., Lamers W.H., Bennington R.W., Markwald R.R. Myocardialization of the cardiac outflow tract // Dev. Biol.- 1999.- v.212.- p. 477-490.

199. Van-der-Bent V., Church D.J., Vallotton M.B., Meda P., Kern D., Capponi1. Л L

200. A.M., Lang U. Ca . 1 and protein kinase С in vasopressin-induced prostacyclin and ANP release in rat cardiomyocytes // Am. J. Physiol.- 1994.-v.266, N 2, Pt.2.- p.597-605.

201. Van-Groningen J.P., Wenlnk A.C.,Testers L.H. Myocardial capillarres: increase in number by splitting of existing vessels // Anat. Embryol. Berl.-1991.-v. 184, N l.-p. 65-70.

202. Villarreal F.J., Kim N.N., Ungab G.D., Printz M. P., Dillmann W. Identification of functional angiotensin II receptors on rat cardiac fibroblasts // Circulation.- 1993.- v. 88, N 6.- p.2849-2861.

203. Viragh S. and Challice C.E. The impulse generation and conduction system, ultrastructure of mammalian heart // New York, London, Academic Press. 1977.-P. 127-178.

204. Weiss R., Canway B. Would healing and collagen formation // J. Cell. Boil.- 1985.- v.28.- p.997-999.

205. Winegrad S., Wisnewsky C., Schwartz K. Effect of thyroid hormone on the accumulation of mRNA for skeletal and cardiac a-actin in hearts from normal and hypophysectomized rats // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1990.- v.87.-p.2456-2460.

206. Wu J.M. Cheng Т., Sun S.D., Nlu D. D., Zhang J.X. Wang S.H. Tang J., Tang C.S. Effect of endothelin, angiotensin II am ANP on proliferation of vascular smooth muscle cells anc cardiomyocytes // Sci. China.- 1993.- v. 36, N 8.- p.948-953.

207. Xu Y. J., Gopalaknshnan V. Vasopressin increases cytosolic free Ca2+. in the neonatal rat cardiomyocyte. Evidence for VI subtype receptors // Circ. Res.- 1991.- v. 69, N 1.- p.239-245.

208. Zachary I., Woll P.J., Rozengurt E. A role for neuropeptides in the control of cell proliferation // Dev. Biol.- 1987.- v.124, N 2.- p.295-308.

209. Zak R. Development and proliferative capacity of cardiac muscle cell // Circ. Res.- 1974.- v.34/35, Suppl. II, N 2.- p.17-26.

210. Zeydel M., Puglia K., Eghbali M., Fant J., Seifter S., Blumenfeld O.O. Properties of heart fibroblasts of adult rats in culture // Cell. Tissue Res.-1991.- v. 265.- N 2.- p. 353-359.

211. Zhang S., Hirano Y., HiraokaM. Arginine vasopressin-induced potentiation of unitary L-type Ca2+ channel current in guinea pig ventricular myocytes // Circ. Res.- 1995.- v.7, N 4.- p.109-115.

Информация о работе

Солодовников, Виталий Валерьевич
кандидата медицинских наук
Оренбург, 2009
ВАК 03.00.25

Диссертация

Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы