Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структура десны в условиях нормы, использования "Овестина" и фитоэстрогенов на модели гипоэстрогенного состояния

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Структура десны в условиях нормы, использования "Овестина" и фитоэстрогенов на модели гипоэстрогенного состояния"

На правах рукописи

КОЗЛОВА Алипа Юрьевна

003055В1Т

Структура десны в условиях нормы, использования «Овестина» и фитоэстрогенов на модели гипоэстрогенного состояния (экспериментальное исследование)

03 00 25 - гистология, цитология, клеточная биология 14 00 21 - стоматология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских на\ к

Новосибирск-2007

003055617

Работа выполнена в ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН и ГОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава

Научные руководители

доктор биологических наук, профессор

кандидат медицинских наук, доцент

Официальные оппоненты

доктор медицинских наук, профессор

кандидат медицинских наук,

Ведущая организация ГОУ ВПО академия Росздрава

Бгатова Наталия Петровна Петрова Татьяна Геннадиевна

Машак Светлана Викторовна Буйкин Сергей Валерьевич

ювская государственная медицинская

Защита состоится февраля 2007 г на заседании диссертационного

совета Д 208 062 05 при ГОУ ВПО Новосибирском государственном медицинском университете Росздрава (630091, г Новосибирск, Красный проспект, 52)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава (630091, г Новосибирск, Красный проспект, 52)

Автореферат разослан

»де&д^рЛ 200бг

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук,

профессор Волков А В

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования

Состояние пародонта имеет большое значение для поддержания гомеостаза полости рта От его структурной целостности зависит множество функций барьерная, трофическая, рефлекторной регуляции жевательного давления, пластическая и амортизирующая (Иванов В С , 1998, ) Показано, что нарушение барьерных свойств слизистой оболочки десны ведет к развитию различных патологий (Lingstrom Р et al, 2003)

Значительную роль в физиологии полости рта играют половые стероидные гормоны Многие данные показывают чувствительность тканей полости рта к изменению в крови уровня женских половых гормонов. Дефицит эстрогенов ведет к истончению, атрофии эпителия, развитию воспаления в слизистой оболочке полости рта (Litwak et al, 1970, Forabosco et al, 1992, Schmidt F et al, 2002, Ceausu I et al, 2006)

Показано, что в слизистой оболочке полости рта, в связи наличием в клетках эпителия, эндотелиоцитах и фибробластах рецепторов к эстрогенам, происходят такие же циклические изменения, как в слизистой оболочке влагалища Подобные изменения в слизистой оболочки полости рта не отмечаются у мужчин (Dolcini F, Sabbatim RC, Paolinelh С , 1989)

Для коррекции гипоэстрогенных состояний применяется заместительная гормонотерапия (Липсетт М , 2000, Leimola-Virtanen et al , 1997, Eliasson et al, 2003) В то же время возможность возникновения злокачественных заболеваний при ее использовании заставляет искать альтернативные методы лечения, которые могли бы обеспечивать положительный терапевтический и профилактический эффект без риска развития рака в репродуктивных органах и обладать минимальными побочными эффектами (Вихляева Е М , 1997, Diez-Peres А, 2006) Для этого в настоящее время применяются фитоэстрогены - природные вещества, входящие в состав растений и обладающие эстрогеноподобным действием, противовоспалительной, противомикробной и противораковой активностью, связывающиеся с рецепторами к эстрогенам (Вишневский А С и др , 1999)

В связи с недостаточностью сведений о структурной организации десны в условиях гипоэстрогенных состояний, и для выявления возможности использования фитоэстрогенов для коррекции гомеостаза полости рта, выполнено данное исследование Цель исследования:

Выявить особенности структурной организации десны в условиях нормы, гипоэстрогенного состояния, использования препарата «Овестин» и фитоэстрогенного комплекса

з

Задачи исследования:

1 Определить морфометрические критерии структуры эпителиоцитов шиповатого слоя эпителия, эндотелиоцитов кровеносных и лимфатических капилляров десны в условиях нормы

2 Изучить структуру десны крыс самок (ультраструктуру эпителиоцитов, эндотелиоцитов кровеносных и лимфатических капилляров, структуру интерстиция) через 21 и 28 сутки после овариэктомии

3 Исследовать структуру десны крыс самок (ультраструктуру эпителиоцитов, эндотелиоцитов кровеносных и лимфатических капилляров, структуру интерстиция) через 21 и 28 сутки после овариэктомии при коррекции состояния фитоэстрогенным комплексом

4 Изучить структуру десны крыс самок (ультраструктуру эпителиоцитов, эндотелиоцитов кровеносных и лимфатических капилляров, структуру интерстиция) через 21 и 28 сутки после овариэктомии при использовании препарата «Овестин»

5 Изучить структуру десны крыс самок (ультраструктуру эпителиоцитов, эндотелиоцитов кровеносных и лимфатических капилляров, структуру интерстиция) через 21 и 28 сутки после овариэктомии при совместном использовании фитоэстрогенного комплекса и препарата «Овестин»

6 Провести сравнительный анализ морфологических изменений в десне крыс при использовании различных подходов к коррекции гипоэстрог енного состояния

Научная новизна

1 Методами световой, электронной микроскопии и морфометрии показано, что в условиях дефицита эстрогенов в эпителиоцитах шиповатого слоя эпителия происходит снижение численных плотностей десмосомальных контактов, прикрепленных и свободных полисомальных рибосом, уменьшение концентрации крист митохондрий В эндотелиоцитах кровеносных ^ и лимфатических капилляров уменьшается содержание люминальных, цитоплазматических и базальных микропиноцитозных везикул, увеличиваются размеры интерстициальных пространств

2 Выявлено, что пероральное введение овариэктомированным животным гормонального препарата «Овестин», обусловливает достоверное увеличение численной плотности десмосом в эпителиальной выстилке десны В цитоплазме эпителиоцитов остаются ниже соответствующего уровня в контроле численные плотности рибосом В эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров увеличиваются объемные плотности микропиноцитозных везикул

3 Показано, что введение овариэктомированным животным фитоэстрогенного комплекса оказывает более выраженный корригирующий

4

эффект на структуру эпителиоцитов шиповатого слоя эпителиальной выстилки десны Возрастают численные плотности десмосом, прикрепленных и свободных полисомапьных рибосом, объемные плотности мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума и митохондрий, концентрация крист митохондрий Увеличиваются численные плотности прикрепленных и свободных полисомапьных рибосом в эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров

4. Выявлено, что совместное введение овариэктомированным животным гормонального препарата Овестин и фитоэстрогенного комплекса оказывает выраженное корригирующее и стимулирующее действие на обменные процессы в десне Происходит повышение плотности эпителиальных контактов, возрастание численной плотности прикрепленных и свободных полисомапьных рибосом в эпителиоцитах и эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров, увеличение объемной плотности микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров

5. Практическая значимость.

Полученные количественные и качественные характеристики структуры десны в норме и при дефиците эстрогенов могут быть использованы в качестве критериев для оценки состояния органа в условияч нарушения гомеостаза организма

Выявленное корригирующее действие на структуру десны использования гормонального препарата «Овестин» и фитоэстрогенного комплекса следует учитывать при разработке рекомендаций для коррекции гомеостаза полости рта при дисфункции яичников Положения, выносимые на защиту:

1 1 В условиях дефицита эстрогенов в десне происходит снижение численных плотностей десмосом, прикрепленных и свободных полисомальных рибосом в эпителиоцитах, уменьшение численной плотности рибосом и объемной плотности микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров

2 Раздельное применение при овариэктомии гормонального препарата «Овестин» или фитоэстрогенов оказывает корригирующее действие на структуру десны, но не обеспечивает полного восстановления структуры органа

3 Совместное пероральное применение гормонального препарата «Овестин» и фитоэстрогенного комплекса обеспечивает наиболее эффективную коррекцию структуры десны в условиях дефицита эстрогенов

Внедрение результатов исследования. Результаты диссертационной работы используются в лекционных курсах и семинарских занятиях на кафедре анатомии, физиологии и валеологии Новосибирского государственного педагогического университета Полученные данные о корригирующем влиянии фитоэстрогенов на структуру десны в условиях дефицита эстрогенов внедрены в научно-исследовательскую работу отдела профилактической и экологической лимфологии ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН

Апробация результатов исследования Основные положения диссертации доложены на IV Всероссийском конгрессе «Хирургическая стоматология и челюстнолицевая хирургия» и всероссийском симпозиуме «Новые технологии в стоматологии (Новосибирск, 2005), 6-й научно-практической конференции врачей (Новосибирск, 2005), VII Международном симпозиуме и VIII Чуйской научно-практической конференции «Проблемы саногенного и патогенного эффектов экологического воздействия на внутреннюю среду организма» (Бишкек, 2005), на I Сибирском съезде лимфологов (Новосибирск, 2006), на научно-практической конференции «Клинические проблемы микроциркуляции» (Москва, 2006)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ из них одна статья в научном журнале, рекомендованном ВАК России

Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста Содержит 16 таблиц, иллюстрирована 29 рисунками, состоит из введения, обзора литературы, главы о материалах и методах исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и практических рекомендаций Список использованной литературы включает 231 наименование, из них 110 отечественных и 121 иностранных источников

Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором

Содержание работы Материал и методы исследования

Работа выполнена на крысах самках породы Вистар, характеризующихся высокой устойчивостью к инфекциям (Лейн-Петтер У,1964, Западнюк ИП, 1974) и низкой индивидуальной вариабельностью структурно-функциональных параметров организма В работе использовано 70 крыс массой 220-250г Работу с животными проводили в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12 08 1977г №755)

Гипоэстрогенное состояние моделировали удалением яичников

Двустороннюю овариэктомию проводили под эфирным наркозом Анализ

б

влагалищных мазков через различные сроки после овариэктомии косвенно свидетельствовал о постепенном снижении в крови концентрации эстрогенов (Николов Ц С. и др , 1964)

Коррекцию гипоэстрогеного состояния проводили через 2 недели после овариэктомии при заживлении послеоперационного шва Использовали гормональный препарат «Овестин», в состав которого входит женский гормон эстриол и фитоэстрогенный комплекс - биологически активную добавку «Кедровая сила» Основу этой биологически активной добавки составляет жмых ядра кедрового ореха, плоды шиповника, фруктоза и измельченные семена льна Семена льна содержат диетически значимое количество фитоэстрогенов (в виде лигнанов), что дает основание использовать это средство для повышения концентрации половых гормонов (Обухова JI А ,2003)

Животные были разделены на группы Первая группа - интактные животные Вторая группа - животные, которым под эфирным наркозом проводили двустороннюю овариэктомию Третья и четвертая группы -крысы, которым через 14 дней после овариэктомии в течение 7-ми и 14 дней перорально вводили фитоэстрогенный комплекс Пятая и шестая группы -овариэктомированные животные, получавшие через 14 дней после операции в течение 7-ми и 14 дней препарат «Овестин» Седьмая и восьмая группы -крысы, получавшие течение 7-ми и 14 дней через 14 суток после операции «Овестин» и фитоэстрогенный комплекс одновременно

В качестве объекта исследования использовали образцы десны Животных декапитировали через 14, 21 и 28 сутки после овариэктомии

Для светооптического исследования образцы десны фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в парафин (Волкова О Е , Елецкий Ю К, 1982) Срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали гематоксилином Майера, эозином и заключали в канадский бальзам

Для изучения образцов десны в просвечивающем режиме электронного микроскопа их фиксировали в 1% растворе 0s04 на фосфатном буфере (рН=7,4) (Milloning G, 1961), дегидратировали в этиловом спирте возрастающей концентрации и заключали в эпон Из полученных блоков готовили полутонкие срезы толщиной 1 мкм, окрашивали толуидиновым голубым, изучали под световым микроскопом и выбирали необходимые участки тканей для исследования в электронном микроскопе Из отобранного материала получали ультратонкие срезы толщиной 35-45 нм на ультратоме LKB-Nova, контрастировали насыщенным водным раствором уранилацетата (Уикли Б, 1975), цитратом свинца (Reynolds ES, 1963) и изучали в электронном микроскопе JEM 1010

Структуру десны исследовали и фотографировали в световом и электронном микроскопах При увеличении 4000 в электронном микроскопе фотографировали эпителиоциты шиповатого слоя эпителия, соединительнотканные клетки, эндотелиоциты лимфатических и кровеносных микрососудов Фотографии с негативов печатали при увеличении 8000-1500

Морфометрические исследования выполняли в соответствии с общепринятыми принципами и методами (Автандилов Г Г и др, 1984, Непомнящих Л М , Лушникова Е Л , Непомнящих Г И, 1986, Шкурупий В А Самойлов К О , Верещагина Г Н, 2001, \Veibel Е Я , 1979)

Морфометрию эпителиоцитов шиповатого слоя эпителия десны (по 30 клеток на каждую группу) проводили при конечном увеличении в 32000 раз с помощью закрытой тестовой системы с 144 точками

Эндотелиоциты кровеносных капилляров (по 20 клеток на каждую группу) морфометрировали при конечном увеличении в 32000 раз с помощью многоцелевой открытой тестовой системы

Различия между сравниваемыми средними считали достоверными при р<0,05 ^-критерий Стьюдента)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Структура десны крыс самок в условиях нормы.

Структурно-функциональная организация клеток тканевого микрорайона определяется микроокружением, и, следовательно, состоянием интерстиция и эндотелия лимфатических капилляров (Бородин Ю И , и др , 2000-2006, Козлов В И и др , 1994, ЕгЬай 1 С , Нойпап ШБ, 1991, Уа1епгие1а О .1, 1992, МагсЬеШС е1а1, 1996)

В интактном пародонте в эндотелиоцитах лимфатических капилляров были хорошо развиты все органеллы, микропиноцитозные везикулы занимали базальное, люминальное положение, определялись внутри цитоплазмы клеток Преобладали контакты эндотелиоцитов типа интердигитаций и конец в конец К эндотелиоцитам подходили стропные филаменты, поддерживающие сосуд в открытом состоянии

В эпителиальной выстилке десны крыс самок интактной группы клетки шиповатого слоя располагались плотно, межклеточные пространства имели небольшие размеры Отмечали большое количество десмосом В цитоплазме эпителиоцитов выявляли тонофиламенты, митохондрии, мембраны гранулярного эндоплазматического ретикулума и рибосомы

Отмечали наличие коллагеновых волокон в интерстиции Просветы кровеносных капилляров были слабо выражены Эндотелиоциты кровеносных капилляров на люминальной поверхности имели небольшие выросты и микроворсинки В цитоплазме эндотелиоцитов было много микропиноцитозных везикул и хорошо выражены все цитоплазматические

8

органеллы Среди межклеточных контактов выявляли типа конец в конец, наложения и интердигитации

Наблюдали отдельные фибробласты, тучные клетки и макрофаги В фибробластах была хорошо развита гранулярная эндоплазматическая сеть с большим количеством прикрепленных рибосом Митохондрии имели четко выраженные кристы. Вокруг фибробластов располагались пучки коллагеновых волокон Макрофаги содержали небольшое количество мелких первичных и вторичных лизосом и фагосом Тучные клетки были равномерно заполнены гранулами различной электронной плотности 2. Структура десны крыс самок после овариэктомин. Через 21 сутки после овариэктомии в десне отмечали расширение просветов кровеносных и лимфатических микрососудов Увеличивалось содержание тучных клеток, которые часто находились в состоянии дегрануляции

При исследовании ультраструктурной организации эпителиоцитов шиповатого слоя эпителиальной выстилки десны наблюдали возрастание размеров межклеточных пространств При этом в 2,2 раза снижалась частота расположения десмосомальных контактов Снижалась электронная плотность цитоплазматического матрикса Изменялись значения объемных и численных плотностей цитоплазматических органелл Объемная плотность митохондрий возрастала на 30%, а концентрация крист митохондрий снижалась на 75% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума возрастала на 45% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом снижались на 56 и 68% соответственно На 25% возрастала объемная плотность вторичных лизосом

В структуре кровеносных капилляров отмечали истончение эндотелиальной выстилки Наблюдали отек периваскулярного пространства, дезорганизацию пучков коллагеновых волокон в интерстиции

В ультраструктурной организации эндотелиоцитов кровеносных капилляров происходило снижение на 42% объемной плотности митохондрий Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума уменьшалась на 39% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом снижались на 62 и 53%, соответственно Объемная плотность люминальных микропиноцитозных везикул снижалась на 42%, цитоплазматических - на 47%, а объемная плотность базапьных микропиноцитозных везикул - на 40%.

Отмечали истончение эндотелиальной выстилки лимфатических капилляров, наличие межэндотелиальных контактов открытого типа Наблюдали значительный отек периваскулярного пространства и дезорганизацию пучков коллагеновых волокон в интерстиции

9

В цитоплазме эндотелиоцитов лимфатических капилляров происходило снижение на 32% объемной плотности базальных микропиноцитозных везикул Величины цитоплазматических и люминальных микропиноцитозных везикул снижались на 25 и 48%, соответственно Объемная плотность митохондрий возрастала на 34% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума увеличивалась на 45% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом снижались на 52 и 63%, соответственно Наблюдаемые структурные признаки свидетельствовали о нарушении лимфатического дренажа в органе Происходило набухание цитоплазмы фибробластов, расширение цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума, снижение содержания прикрепленных рибосом Отмечали возрастание размеров интерстициальных пространств

Через 28 суток после овариэктомии в структуре десны сохранялись структурные изменения, свидетельствующие о снижении ее барьерных свойств Увеличенными были размеры межэпителиальных пространств, снижались плотность и количество десмосомальных контаетов, возрастало содержание тучных клеток вдоль микрососудов

Происходило нарушение обменных процессов в собственной пластинке слизистой оболочки, о чем свидетельствовало снижение концентрации микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных капилляров Отражением сохраняющегося нарушения лимфатического дренажа в слизистой оболочке десны являлись увеличенные размеры интерстициальных пространств, набухание цитоплазмы эндотелиоцитов лимфатических капилляров и снижение объемной плотности микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах лимфатических капилляров Все перечисленные изменения свидетельствовали о сохраняющемся и возрастающем с течением времени нарушении гомеостаза полости рта в условиях гипоэстрогенного состояния

3 Структура десны оварнэктомированных крыс, получавших перорально «Овсстин».

При введении животным через 14 суток после овариэктомии в течение 7 дней гормонального препарата «Овестин», в структуре десны развивались изменения, свидетельствующие о некоторой коррекции структурных изменений, связанных с гипоэстрогенным состоянием Хотя в эпителиальной выстилке сохранялись структурные изменения, отражающие снижение барьерных свойств - увеличенными были размеры межэпителиальных пространств, сниженными плотность и количество десмосомальных контактов, происходило возрастание концентрации микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных капилляров, что является отражением усиления трансэндотелиального переноса В то же время

ю

сохранялись структурные признаки, свидетельствующие о недостаточности лимфатического дренажа в десне - набухание цитоплазмы эндотелиоцитов лимфатических капилляров, снижение объемной плотности микропиноцитозных везикул, расширение интерстициальных пространств

При введении животным «Овестина» в течение 14 дней в эпителиальной выстилке десны наблюдали возрастание плотности расположения эпителиальных клеток При численная плотность десмосомальных контактов была выше, чем у интактных животных на 30% Возрастала электронная плотность цитоплазматического матрикса эпителиоцитов Отмечали эухроматизацию ядер Структура ядрышек свидетельствовала об активизации синтеза РНК Объемная плотность митохондрий не отличалась от соответствующего значения в контроле, неизменной оставалась численная плотность митохондрий, а концентрация крист митохондрий была снижена на 25% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума возрастала на 15% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом были снижены на 22 и 35%, соответственно На 34% возрастала объемная плотность вторичных лизосом

В эндотелиоцитах кровеносных капилляров отмечали возрастание объемной плотности митохондрий на 26% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была снижена на 20% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом оставались меньше соответствующих значений в контроле на 16 и 22% В то же время объемная плотность люминальных микропиноцитозных везикул возрастала на 25%, цитоплазматических - на 38%, а объемная плотность базапьных микропиноцитозных везикул - на 24% Периваскулярные пространства были умеренно расширены

В ультраструктурной организации эндотелиоцитов лимфатических капилляров происходило возрастание на 26% объемной плотности базальных микропиноцитозных везикул На 18 и 22%, соответственно увеличивались величины цитоплазматических и люминальных микропиноцитозных везикул Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была увеличена на 25% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом сохранялись сниженными на 27 и 32%, соответственно

Размеры интерстициальных пространств были увеличены Фибробласты имели структурные признаки активации синтетических процессов Тучные клетки находились в состоянии дегрануляции

Пероральное введение животным после овариэктомии гормонального препарата Овестин оказывало корригирующее действие на структуру десны В эпителиальной выстилке отмечали изменения, отражающие повышение

и

барьерных свойств слизистой оболочки - возрастала плотность эпителиальных контактов Происходило увеличение концентрации микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных капилляров, что является отражением усиления обменных процессов между кровеносными капиллярами и интерстицием. Усиливался лимфатический дренаж слизистой оболочки десны, о чем косвенно свидетельствовало возрастание объемной плотности микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах лимфатических капилляров

4. Структура десны овариэктомнрованных крыс, получавших перорально фитоэстрогенныи комплекс.

При введении животным фитоэстрогенов в течение 7 суток, в десне проявлялись структурные признаки, свидетельствующие о коррекции изменений, связанных с гипоэстрогенным состоянием Возрастали барьерные свойства эпителиальной выстилки - повышенной была плотность эпителиальных контактов Происходило возрастание содержания рибосом в эпителиоцитах и эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров

Более значимые структурные изменения в десне выявляли через 14 суток использования фитоэстрогенов Плотность расположения десмосомальных контактов эпителиоцитов соответствовала уровню в контроле. Возрастала электронная плотность цитоплазматического матрикса Объемная плотность митохондрий была увеличена на 40%, концентрация крист митохондрий возрастала на 46% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума повышалась на 32% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом увеличивались на 28 и 33%, соответственно На 50% возрастала объемная плотность вторичных лизосом Наблюдаемые изменения в структурной организации эпителиоцитов животных, которые получали после овариэктомии фитоэстрогенный комплекс, свидетельствовали о стимулирующем действии средства на внутриклеточные процессы

В структуре кровеносных капилляров сохранялось повышенным содержание цитоплазматических органелл Возрастали на 35% объемная плотность митохондрий и на 47% - объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом увеличивались на 28 и 36%, соответственно Объемные плотности люминапьных, цитоплазматических и базальных микропиноцитозных везикул соответствовали значениям в контроле

При исследовании структуры лимфатических капилляров отмечали разрыхление межэндотелиапьных контактов Объемная плотность митохондрий достоверно и численные плотности рибосом достоверно не отличалась от соответствующих значений в контроле Объемная плотность

12

мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была увеличена на 25% Размеры интерстициальных пространств сохранялись увеличенными

Таким образом, при введении овариэктомированным животным фитоэстрогенного комплекса в десне развивались изменения, свидетельствующие о коррекции структурных нарушений, связанных с гипоэстрогенным состоянием Возрастали плотность эпителиальных контактов, увеличивались численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом в эпителиоцитах и эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров, что является структурной основой для реализации обменных процессов в тканевом микрорайоне

5. Структура десны овариэктомированных крыс, получавших перорально одновременно «Овестин» и фитоэстрогены.

При сочетанном введении в течение 7 суток препарата «Овестин» и фитоэстрогенов, плотность расположения десмосомальных контактов эпителиальной выстилки соответствовала уровню в контроле Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума в цитоплазме эпителиоцитов возрастала на 24% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом соответствовали уровню в контроле На 18% повышалась объемная плотность вторичных лизосом

В цитоплазме эндотелиоцитов кровеносных капилляров происходило возрастание на 18% объемной плотности митохондрий Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом возрастали на 22 и 26%, соответственно Объемная плотность люминальных микропиноцитозных везикул была увеличена на 24%, а объемные плотности цитоплазм этических и базальных микропиноцитозных везикул не отличались от соответствующих значений в контроле

В цитоплазме эндотелиоцитов лимфатических капилляров на 42% повышалась объемная плотность базальных микропиноцитозных везикул Величины цитоплазматических и люминальных микропиноцитозных везикул не отличались от соответствующих значений в контроле Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была увеличена на 28% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом не отличались от соответствующих величин в контроле Отмечали узкие интерстициальные пространства

У животных, которым фитоэстрогены и «Овестин» вводили в течение 14 суток, плотность расположения десмосомальных контактов в эпителии была выше контрольных значений Концентрация крист митохондрий увеличивалась на 47% Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума возрастала на 32% Численные плотности

Но 140К 140+ф<

Рис. I. Структура эпителноцитов шиповатого имя эпителия десны крыс в норме и после овариэктомин

а - Численная плотность десмосом - численная плотность структур (число в тестовой площади)

б - Концентрация крист митохондрий вн/5у нар - соотношение между поверхностной плотностью внутренней и наружной мембранами митохондрий).

в - Численная плотность прикрепленных рибосом (МА - численная плотность структур (число в тестовой площади)

К- контроль; 28ов - 28 суток после овариэктомии; 14 фк - 14 суток применения фитоэстрогенного комплекса; 14о- 14 суток использования «О вести на»; 14о+фк -14 суток совместного применения фитоэстрогенного комплекса и препарата «Овестин» * -обозначены величины, достоверно отличающиеся от соответствующих показателей нн тактных крыс контрольной группы.

И

прикрепленных и свободных полисомальных рибосом повышались на 23 и 30%, соответственно На 42% возрастала объемная плотность вторичных лизосом

В цитоплазме эндотелиоцитов кровеносных капилляров отмечали повышение содержания цитоплазматических органелл Происходило возрастание на 50% объемной плотности митохондрий Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом возрастали на 35 и 43%, соответственно Объемная плотность люминальных микропиноцитозных везикул была увеличена на 30%, а объемные плотности цитоплазматических и базальных микропиноцитозных везикул повышались на 27 и 23%, соответственно

В эндотелиоцитах лимфатических капилляров наблюдали возрастание на 50% объемной плотности базальных микропиноцитозных везикул Величины цитоплазматических и люминальных микропиноцитозных везикул увеличивались на 28 и 32%, соответственно Объемная плотность митохондрий достоверно не отличалась от соответствующих значений в контроле Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была увеличена на 36% Численные плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом не отличались от соответствующих значений в контроле Отмечали узкие интерстициальные пространства

Совместное введение животным в течение 14 суток гормонального препарата «Овестин» и фитоэстрогенного комплекса оказывало корригирующее и стимулирующее действие на обменные процессы в десне Происходило повышение плотности эпителиальных контактов, возрастание численной плотности прикрепленных и свободных полисомальных рибосом в эпителиоцитах и эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров, увеличение объемной плотности микропиноцитозных везикул в эндотелиоцитах кровеносных и лимфатических капилляров Совместное применение фитоэстрогенов и препарата «Овестин» оказывало наиболее значимое корригирующее действие на структуру десны в условиях гипоэстрогенного состояния

ВЫВОДЫ

1 Структура десны в условиях нормы характеризуется наличием электронноплотных интерстициальных пространств с пучками коллагеновых волокон, узкими просветами лимфатических и кровеносных капилляров, наличием одиночных фибробластов, макрофагов и тучных клеток Определены морфометрические критерии структуры эпителиоцитов и эндотелиоцитов лимфатических и кровеносных капилляров интактных животных

условиях гипоэстрогенного состояния // Материалы II всероссийской научной конференции «Микроциркуляция в клинической практике» Москва, 2006 - С 25-26

8. Козлова А Ю , Изотова Е В , Петрова Т Г, Бгатова Н.П Использование фитоэстрогенов для коррекции состояния слизистой оболочки полости рта и слюнных желез в условиях овариэктомии // Современные проблемы науки и образования -2006 -№3 - С 26-27

9 Изотова Е В , Козлова А Ю , Петрова Т Г, Юрьева М В , Бгатова Н П Ультраструктура эндотелиоцитов кровеносных капилляров поднижнечелюстной слюнной железы и слизистой оболочки десны в условиях дефицита эстрогенов // Вестник Новосибирского государственного университета Серия Биология, клиническая медицина 2006 Т 4 - № 2 - С 84-90

Подписано к печати 21 12 2006 формат-60х84 - 1 печатный лист

Бумага офсетная Печать Riso RP 3105 ЕР Тираж 90 экз Номер заказа 1986 ООО РПК «Радуга» Г Кемерово, ул Соборная, 6