Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительный физиологический анализ эффективности различных энтеросорбентов на модели термического поражения (экспериментальное исследование)

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительный физиологический анализ эффективности различных энтеросорбентов на модели термического поражения (экспериментальное исследование)"

НИЖЕГОРОДСКИЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ

т од —

1Р Щ0&

На правах рукописи УДК 612.015.34-092.9-001.17

НЕДЕЛЯЕВА Анна Вячеславовна

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ЭНТЕРОСОРБЕНТОВ НА МОДЕЛИ ТЕРМИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ (экспериментальное исследование)

03.00.13 — физиология человека и животных

14,00.16 — патологическая физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород — 1994

Работа выполнена в Нижегородском НИИ травматологии п ортопедии МЗ РФ.

Научный руководитель — доктор медицинских наук Г- Я. Левин.

Официальные оппоненты: Доктор медицинских наук, профессор А. М. Абакаров,

Доктор ветеринарных наук, профессор И. А. Пахмутов.

Ведущее учреждение — Московский НИИ общей патологии н патологической физиологии.

Защита состоится ................. 1994 г.

в ..УЗ....... часов на заседании специализированного Совета

К 120.40.02 при Нижегородском сельскохозяйственном институте (603107, Н.,Новгород, пр.- Гагарина,.97).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского сельскохозяйственного института (603107, Н. Новгород, пр. Гагарина, 97).

Автореферат разослан ................................... 1994 г.

Ученый секретарь специализированного Совета к. б. н-, доЦснт // // Н. Н. Асафова

с/'/С ' «-"

ВВЕДЕНИЕ

. Актуальность проблемы. Гомеостаз относится к числу актуальных проблем, раадатащих взаимоотношения организма и среды, единство организма, его способность к адаптации и изменению резистентности- Несмотря на непрерывную и временами даже значительную изменчивость воздействий факторов внешней среды, механизмы гомеостаза позволяют организму сохранять жизнеспособность и постоянство внутренней среды (Горизонтов Л.Л., 1981). Однако, несмотря «а наличие сложных регуляторкых систем (нервной, эндокринной, гуморальной) в условиях действия чрезвычайного раздражителя, может возникать их недостаточность, а отсюда - нарушения гомеостаза,. которые служат начальным этапом развития различной патологи.:.

Одним из путей повыиения устойчивости организма в экстремальных условиях является энтеросорбция (Гончаров И.Б. с соавт., 1988). Энтеросорбция способствует метаболической коррекции, основной целью которой является снижение кон-, ценгращш токсических веществ в жидких средах и тканях организма (Суздалева В.6., 1987; Шалимов С.А. с соавт., 1988).

Вместе с тем ощущается разрыв между практическим использованием препаратов и физиологическим обоснованием метода. По современным представлениям, интерпретация физиологических аспектов знтеросорбции облегчается появлением новых данных о полостном и мембранном пищеварении, транспортных механизмах в сг«нке кишечника, явкзйокерностях секреций и всасывания (Уголев :А.М., 1985; Гайьперкн Ю.М., Лазарев П.И., 1986).

Токсические вещества,- независимо от пути' проникновения, вызывают нарушения функционирования биологичеада систем гомеостаза на различных уровнях организации организма. При всех путях проникновения токсины попадают в кровь и распределяются по органам и тканям (Беляков H.A., 1991).

В условиях действия чрезвычайных нагрузок первичное повреждение усугубляется накоплением в организме эндогенных токсинов - возникает.эндогенная интоксикация. Для большинства патологических .состояний, сопровождающихся развитием эндогенной интоксикации, характерны активация и освобождение протеинаэ, ' образование среднемолекулярных пептидов, системное нарушение шлроциркуляции, повышение проницаемости клеточных меыбрад и капилляров, рост концентрации продуктов лерекисчюго окисления липидов (ПОЛ) и свободных жир-

«

ных кислот., поражение энергетического аппарата клеток, нарушение энтералыюл среда (Лифаиц Р.И., 1078; Рябиник В.Е., 1978; Умалений М. А. с соазт., 1979; NaglerA., 107?; Odes-seyR., 1987; tteely. А., • 1888)'.'

Проблема эндогенной интоксикации шеет большое значение не только для медицины, но и для ветеринарии. Она развивается как при поступлении в органиэм животных экзогенных ядовитых Ееаес.тв, так и при избыточном образовании в тканях конечных продуктов обмена веществ, или при нарушении конъюгации и экскреции из организма (Парий Б.И., 1985).

Особенно наглядно проявляется роль эндогенной интоксикации в развита" такого вида патологии как.ожоговая болезнь.

В проблеме эндогенной интоксикации при термической травме до сего времени остается много нерешенных вопросов.

Остается неясной роль эндотоксинов интестииального тракта в возникновении постожоговой эндоток^емии, практически не исследована ее динамика. Изучение этих вопросов приобретает особое значение в связи с появлением и все более широким применением знтеросорбентов, снитощх тдсток-семию практически любой этиологии.

Важное значение может иметь сравнительное исследование эффективности различных знтеросорбентов с целью выявления механизмов их действия в условиях нарушенной энтеральной среды, что имеет место после термической травмы. Дальнейшей разработке проблемы посвящено наше экспериментальное исследование.

Тема диссертации является Фрагментом комплексной темы (шифр 074-01) НИИ травматологии и ортопедии Российской Федерации.

Дель работы: в эксперименте на животных изучить ряд физиологических функций в условиях экстремальных состояний (ожоговая травма), и разработать подходи и способы коррекции, эндогенной интоксикации с применением комплекса знтеросорбентов. .

' Для достижения поставленной цели было необходило решение следующих задач:

- провести сравнительно-физиологический анализ действия различных знтеросорбентов на функциональное состояние печени при термической травме,

- изучить роль токсичных метаболитов в механизме развития эндогенной интоксикации,

- изучить динамику - зндотоксеыии на модели термического поражения,

- исследовать влияние различных классов антеросорбентов на показатели эндотоксеши и разработать комплекс антеросорбентов, пйиболее'эффективно нормализующий метаболические процессы.

Новизна научных исследований. Впервые доказало, что в условиях экстремальных воздействий (экспериы. стоговая травма) зндогещая интоксикация обусловлена в значительной степени попаданием в кровоток эндотоксинов бактерий интес-тикадьного тракта, которые в.норме.в крови отсутствуют.

. На модели термического поражения установлено, что эн-теросорбенты ыогут бшь эффективны при нарушении гомеоста-тических функций организма. Они способны не только свааы-вать эндотоксины желудачн'о-киыечкого тракта, но и элиминировать среди&№йекумярнце пептиды ив циркулирующей крови. Впервые прскеден сравшкгелашй функциональная акаиив

аффективкости различных еигервсорбенгав, . •

Получены доказательства. гвштояротекторкого действия антеросорбентов.

Доказано, что комплекс энтэросорйентов наиболее эффективно нормализует наруввпшг м^аеба8ичес51ие процессы при термической травме.. ',

Научно-практически значимость работы. Результаты настоящей работы позволили вяачиуелнш образом дополнить существующие представления о характере, степени выраженности и временной динамике метаболических процессов, при ¡эндогенной интоксикации а условиях чергдаческого поражения, что имеет об-

- о -

щебиологическое значение и открывает ноже подходы для использования энтероссрбентов и медицинской и ветеринарной практике. При этом определен» оптимальные дозировки эитеро-сорбентов и сроки их применения при термической травмо.

Разработан новый способ оценки цитотокснческих сг.ойств среднемолекулярных пептидов (СМ11).

Показано, какие из эитеросорбонтов наиболее эффективны на разных этапах нарушения гомеостатических функций организма.

Полученные данные могут быть рекомендованы, для использования в ветеринарии при лечении зкзо- и яндотежсикозов.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. В экспериментах на животных демонстрируется состояние ряда физиологических функций организма в условиях экстремальных воздействий (ожоговая травма).• Показана роль печени в механизмах выравнивания нарушенного гомеостаза.

2. На модели термического поражения до|сазаю, что эффективным способом метаболической коррекции и профилактики, развития функциональной недостаточности печени является зн-теросорбция. Обосновывартсл способы коррекции эндогенной интоксикации с применением комплекса энтероссрбентов.

■ Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на конференции молодых ученых Нижегородского Ш1ИТ0 (г.Нижний Новгород, 1989), на 6-ой Республиканской научно-практической "онференции по проблеме термических повреждений (г.Нижний Новгород, 1990), на Международной конференции '"Интенсивное лечение тяжелообожженних" (г.Москва, 19РП), республиканской конференции "Актуальные вопроси ле-

чецш окогов" (г.Ташкент, 1092), на 8-ой зональной конференции молодых ученых и специалистов "Медико-биологические и экологические проблемы развития Севера" {г.Архангельск, 1932).

По темз диссертация опубликовано 10 научных работ, получено 1 iiBiopcKco- свидетельство СМ° 1691747). Материалы диссертации вошш в методические рекомендации по проблеме НИИ '»'равиа-хологии и орюпедии (ш4р 07-1-01).

Объем я структура работы. Материалу диссертант иого-мши на 157 страницах мавшюшювого текста, состояv из введения. трех глав, заключения, вшюдов и указателя литературы. БлйяксграЬи ьключсшт 103 источагка, из ник. сгечестш'.-кж - 121 и сйрубежшх - 72.

МАТЕРИАЛ« И МЕТОДУ ИССЛЕДОрЛШШ Э::"пер:;;,!йнта::ьные исследования проводили на белых бссзсро?.«ак ::р:;сач своего пола массой Тсдп CQO-Et'O г. и бе-лй xaSopivropiari i,« массой toju 16-18 г. Ca.ro й слшах Шло испотлъошю 500 криз г £540 мшс-Я. Крассг ског пло-аг;;ь:о Z0-IZZ Пйверхяооти тег.сл и глубпьсн III Б - IV с?ел;ш 1:-»!:сс"лк в сСлзстн c:i:.<:u конгактаим споаЛоа под коыоугадо-г..'Ч нт?ос<и: (£0 нг/кг тела). Нссл'/лош'ш ¡¡ролол^,; Ч'.рсз cyir;!, с«.л едок п?«е о:-;,era. Ifciv, и: о;.:; у

h£se осусостййялч '.'угон ^екалигаи««.

Siuaj прозед«>:н> следуш» серки экспоркшигоз: 1 из»;« (кси.троль) - сСоююхт крысц бс-э пркизшмш sure-

росороентов (100'Крис). 2-7 серии (опыт) - обоккекни; крисы, которым вводили эиге-рсс^рбеШ'»:

го второй серии - углеволокнистый адсорбент (ваулен) в дозе

40 мг/кг массы тела (62 крысы), в третьей серии - углеволокнистый материал АУВМ-МН "Днепр"

в дозе 40 мг/кг массы тела (50 крыс), в четвертой серии - низкомолекулярный поливинилпирролидон

(энтеродез) в дозе 200 мг/кг массы тела (42 крысы), в пятой серии - полиметилсилоксан (энтеросгель) в дозе

1000 мг/кг массы тела (52 крысы), в шестой серии - "медицинский лигнин" (полифепан) в дозе

500 мг/кг массы тела.(54 крысы), в седьмой серии - карбоксильный катионит (биосорбент

КМДМ-0-5) в доге 100 мг/кг массы тела (60 крыс). 8 серия - обожженные крысы, которым вводили комплекс энте- • росорбентов, состоящий из: ваулена в дозе 12 мг/кг массы тела, энтеродеза в дозе 200 мг/кг массы тела, энте-росгеля в дозе 1000 мг/кг массы тела (42 крысы). Кроме того, в серии на интактных крысах (80 животных) проводилось гистологическое исследование печени и биохимические исследования крови по методикам, описанным далее.

Энтеросорбенты вводил.) в желудок через зоид 1 раз в сутки в течение 1, 3 и 5 дней в зависимости от задачи эксперимента. . Оптимальную концентрацию знтеросорОентов определяли на 450 обожженных мышах (ожог III А - В степени на площади 30 % поверхности тела). Учитывали процент летальности мышей через 2 суток после охога.

Во всех сериях экспериментов на ' модели термического поражения изучалось влияние знтеросорбентов на показатели общей и специфической токсичности, л также проводилось исс-

- а -

ледование функционального состояния печени.

Для определения уровня эндотоксинов интестинального тракта в крови (специфическая токсичность) использовали метод биотестирования на мышах, в котором для сенсибилизации последних применялся дактиношщин (Киселев П.Н., Шульс Т.Н., 1981). По калибровочной кривой находили дозу бактериального эндотоксина (БЭТ), соответствующую летальности мышей при биотестировании,

Для оценки обаей токсичности крови определяли уровень среднемолекулярных пептидов (Габриэлян Н.И., Липатова В.И., 1984). Аутоиммунные й токсические свойства сыворотки крови оценивали'по разработанному нами способу (а.с. No 1691747).

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) изучали по уровню малонового диальдегида в плазме крови методом Гончаренко М.С., Лапшовой A.M. (1985).

Функциональное состояние печени оценивали по следующим покавателям: ыстивпость трансаминаз (ACT, АЛТ) (метод Райт-мана-Френкеля, 1957), содержание церулоялазмина в сьазоротке крови (Мдальская Т.Н. с соавт.. 1989), содержание общего белка рефрактометрически и белковых фракций методом электрофореза на бумаге'.-

Кроме того, во всех сериях экспериментов проводили гистологическое исследование печени. Определяли содержание. гликогена js печени крыс (окраска по методу Веста) и наличие жировой дистрофии.

Все данные ;татистически обработаны с вычислением кри- • терпя достоверности Стьюдента, уровня значимости и коэффициента корреляции по программе Middls на компьютере IBM PC/AT.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛИОВАНИП

1. Динамика эндогенной интоксикации поело воздействия стресс-фактора, обусловленного термической травмой

В первой части настоящего исследования изучат выраженность и динамику развития эндогенной интоксикации после тяжелой термической травмы. Исследовали эидотоксемию, вызванную увеличением концентрации в крови среднемолекулярных пептидов (СМП), а также связанную с попаданием в кровоток эндотоксинов интестинального тракта, Последнюю оценивали в опытах на мышах, сенсибилизированных дактиномишшом, которым вводили сыворотку обожженных крыс.

Как показалп проведенные исследования, в условиях нару-шегной знтералыюй среды эндотоксины попадают в кровоток из кишечника в максимальном количестве уже в первые сутки после термической травмы. Их концентрация в крови остается на достаточно высоком уровне в первые трое суток после ожога, и лишь к 7 суткам.количество эндотоксинов интестиналь-ного траста, существенно снижается (рис.1).

Эндогенная интоксикацщ после термической травмы обусловлена не только поступлением в кровоток эндотоксинов кишечника, но и другими факторами, среди которых важнейшую роль играют СМП. Как свидетельствуют полученные нами данные, уровень последних в крови возрастает уже в первые сутки после ожога на 75&. В отличие от эндотоксинов иитести-налыюго тракта, концентрация "средних молекул" остается на высоком уровне более длительное время (рис.1).. . .

Рис. 1

к

I

-•■Л

"мл

ш

ж

I

io'L

VCA.-Д

(s 2са)

£1,3

О.2 ii

0,i

J

[if

|

I

сш

30

20

10

Hi

Hi

ПТС

ШМЙНИЕ ТЕРМИЧЕСКОМ ТВШЫ НА ЗИДОГО <НУШ №Ш;сикациш

»IPUCbt: bj-KUTAfvUlbC,

□ сутки после ожога,

И-ЧСРЕЗ 3 СУТОК ЮСЛс Ш'ГГА, 0-Ч=КЗ 1 СУ Юл ПОСЛЕ ОЖОГА.

Кроме сбцей концентрации "средних молекул" предложенным нами оригинальным методом исследовалась и их токсичности.. - в частности, цитотсксичность СМП. При этом установлено, что показатель токсичности сыворотки (ПТС) увеличивается уг.е через сутки после ожога ь 3,5 раза и ос-

таегся достаточно снссш* на протяжении всего периода исследования - через "! суток поело ожога этот показа! ель увеличен в 2,4 раза :'р;-с.1).

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что дс-тахикационная терапия должна проьс-диться в Сшижайкие часы после термической травмы, в тот период, когда эндотоксины содержатся в кровотоке в максимальном количестве, а СШ обладают наибольшей цитотоксичностью.

"• 1"'рдвнигольнач оцетдейстпия различных эптеросор-бентов при ожоговой энлотокссмии и нарушении Функционального состояния печени

Ра второй части настоящей работа проведен сравнительно Физиологический анализ э1фективиости практически всех основш« видов о^теросорбентс-в, имеющихся в России и СНГ (саулсна. энгеросгелп, энтеродеза, пол ¡Щепана и суспензии ДУВМ), а также применяемого в ветеринар;::! биосорбента КМДМ-6-5.

Установлено, чт'о знтеросорбшш, прогоднмач в первые сутки после воздействия стресс-фокЬра, в значительной степени препятствовала попаданию в кровоток эндотоксинов ин-тестинялыюго происхождения - их концентрация уменьшалась в 5 раз. В первые сутки после ожога наиболее эффективным оказался эптеросгель. Через 3 суток после термической травмы действие этого сорбента уступаю эффективности биосорбента КМЛМ-С-5, а через 7 су'гок после ожога максимапьным Действием обладал'энтгросгель (рис.Я).

рис. 2

1МГСУПСИ ЗСУТСК 1 СУТОК Ш" ПОСЛЕ ПОСЛЕ ПОСЛЕ ОЖОГА ОЖОГА ОЖОГА

слияние швшзрбции ИА-УРО-ошь эцдргашяюв в сыворотке крови оишг&шхзятньи

{З-ШКЯШЮ.

аюешипм (О-сюшим для.

(¡Щ-кюсичшг лия.

Ранее считалось, что в. основе механизма действия эн-теросорбентов лежит их способность связывать токсические вещества и токси'ы в желудочно-кишечном тракте и вместе с кюл! выводиться из организма (Шиманко И.И. с соавт.. 1984). За последние годи высказываются предположения, что действие

энтеросорбции более сложно. По мнению Земскова B.C. с со-авт.(1988), существует еще один механизм детоксикационного эффекта энтеросорбции, связанный с обратным пассажем токсичных веществ из крови в кишечник с дальнейшим их связыванием на сорбенте. Наши данные подтверждают это предположение: при применении энтеросорбентов концентрация СМП значительно уменьшается - через сутки после термической травгы в среднем на 60 %, черев 3 суток - на 24 Z, через 7 суток - на 34 %. В наибольшей степени уровень СМП в сыворотке крови снижается под влиянием полифепана и биосорбента КМДМ-6-5.

Можно полагать, что уменьшение СМП после энтеросорбции связано не только с их сорбцией, но и с улучшением де-токсикациошюй функции печени, .которое показано в наших исследованиях, а также с уменьшением их образования. Последнее может быть обусловлено снижением протеолиза, в частности. за счет уменьшения лизиса клеток и, отсюда, выхода лизосомальных ферментов.

После энтеросорбции существенно снюхается не только уровень СМП, но и их цитологическое действие. При'применении энтеросгеля через 3 суток после ожога показатель токсичности сыворотки снижается максимально по сравнению с другими сорбентами - на 54 %, а при введении суспензии АУВМ лишь на 21 1.

Резкое уменьшение эндогенной интоксикации явилось важнейшей причиной снижения летальности обожженных животных после энтеросорбции.

Летальность обожженных крыс (контрольная группа) к ?

дню наблюдения составляла X. При применении эптеросо^-Оентов она снижалась до 22-24 X.

Аналогично действуют знтеросорбентн на летальность обожженных ммгей. Как показали проведенные исследования, летальность особенных мышей в контрольной группе составила ИХ. в rpyu'.ie леченных биосорбентом КМДМ - 33 Z.

Снижение эндогенной интоксикации под влиянием энтеро-ссрбции сопровождается и улучшением функции жизненно вагнкч органов, в частности, печени. В значительной степени восстанавливается нарушенная ожогом одна из основных функций печени - белоксинтезирующая.

Ухе'с первого дня после термической травмы на фоне применения энтеросорбентов г. значительной степени нивелируется гипопротеинемия. Концентрация общего белка с снворотке крови опытных крыс (после зктеросорбцли) возрастает в перше сутки после ожога в среднем на 23 Z, через 3 суток - на 26 %, через 7 суток - на JO % (рис.3).

Ликвидируется не только гипо-, но я диспротеинемия -резко увеличивается как относительное, так и абсолютное содержание альбуминовой Фракции. При1применении различных энтеросорбентов абсолютное содержание альбуминов возрастает р среднем на 11 - 52 % через сутки после ожога, через 3 рутой после термической травмы - на 18 - 73 7.. через '! суток, - на 33 - 56 7, (по сравнению с контрольной группой) (рис.3). Выраженное действие на Оелоксиитезирующуга функцию ' печени оказывают энтеросгель и биосорбент КМДМ-6-5.

Научено также действие энтеросорбентов на концентрации; г. крови синтезируемого в печени естественного ачтиоксидшж

Рис. О

г/л

С'ЛГМ ПЛСЛ! 5С4-МХГМС'^ 7СЛг«Г0М

ее

40

30

20 10

Я Ц

¥ 1

$1- .Ч-!

Д. ',!

а

СМГ« ]

ВЛИЯНИЕ ЗИТСРЗС^РЯИГС? ИД СОАЕРЖАШЕ аг.шгго ПЕЛКА

■к

№

ш р||§

Дг

й!

%

0 Ш

ПЛШШС ЗИТСРОСПРгЦИИ НА СОДЕРЖАНИЕ .АЛЬПУМИНЛ С СЫООРОТИЕ КРОВИ 050Ж-7ХЕ11КЫХ :КИВ0Т!1ЫХ

£3 ИНПШИЯ!,

ГЗ о:ми£К1«!1.

3|1ЩСС0?£|»Ч :

П :-.»лгн,

о СУСПЕН1ИЙ М&Н.

□ политсяш,

П сиосэги^г килм,.

£3 :чт(гсег(».

Г/

церулоплазмина. Установлено, что через сутки после ожога концентрация ЦП уменьшается, что может быть связано с его потреблением в процессах инактивации ПОЛ, По нашим да ным, онтеросорбциа способствовала достоверному возрастал™ со-

держания этого антиоксиданта. Можно предположить, что увеличение .ЦП под влиянием энтеросорбции может быть связано с. двумя причинами: с увеличением его синтеза в печени Со чем свидетельствуют наши данные о восстановлении белоксинтези-рующей функции печени после энтеросорбции) и с уменьшением процессов ПОЛ. Последнее может быть обусловлено связыванием энтеросорбентами катехоламинов, способствующих нарастанию в крови концентрации жирных кислот, в свою очередь являющихся субстратом для запуска реакций ПОД, а также увеличению ци-толитических токсинов, вызывающих высвобождение лизосомаль-ных ферментов и активацию протеолиза (Hiramatsy М. е.а., 1984; Davies К.. 1937).

В дальнейшем, в периоде острой ожоговой токсемии содержание ЦП в 2 раза превышало норму. Нами установлено, что в этот период существенно возрастает уровень МДА у обожжен -кых крыс. Можно предположить, что ЦП, который является одним из наиболее активных эндогенных антиоксидантов, перестает участвовать в подавлении ПОЛ. Это может быть связано, в частности, с его блокадой продуктами нарушенного метаболизма. Энтеросорбенты могут сорбировать токсичные продукты метаболизма, способствуя, тем самым, активному вовлечению ЦП в процессы ПОЛ. При этом снижается не только концентрация активной формы ЦН, но и уровень МДЛ у леченных крыс.'

Печень занимает центральное место в процессах переами-нирования и в. синтезе аминокислот (Гичев Ю.П., 1990). Нами установлено, что после термической травмы происходит резкое увеличение активности трансаминаз (ACT, АЛТ), свидетельствующее о значительной выраженности процессов цитолиза в не-

чени (Блюгер А.Ф.. 1979, Однопозов А.К., 1986). После энте-росорбции активность трансаминаз в сыворотке крови значительно снижалась.

Гепатопротекторное действие эитеросорбентов подтверждается и результатами гистологических исследований, проведенных во всех экспериментальных сериях. Установлено, что у обожженных крыс во все сроки наблюдения резко снижается количество гликогена в печеночных клетках и наблюдается выраженная жировая дистрофия. После энтеросорбции отмечалось снижение жировой дистрофии и увеличение содержания гликогена в печени. Наибольшим гликогенсбереганшм действием обладал энтеросгель.

Таким образом, нами установлено, что после энтеросорбции активируются защитные механизмы, обеспечивающие возврат нарушенных функций печени к исходному физиологическому уровню. Показана роль печени в механизмах выравнивания нарушенного гомеостаза.

Следует отметить,- что эффективность эитеросорбентов неодинакова на разных этапах развития ожоговой болезни, максимальны.! эффект энтеросорбции наблюдается в стадию ожогового шока.

В отдельной серии экспериментов на обожженных мышах (460 животных) исследовалась эффективность различных'дозировок эитеросорбентов: от общепринятой до увеличенной в 2-4-6 раз.

Установлено, что при применении общепринятой дозировки ваулена летальность обожженных мшиёй снижалось на 30%, при увеличении дозировки в 2 раза летальность продолжала умень-

шаться - в среднем на 50%. Дальнейшее увеличение концентрации оказалось 'неэффективным. Увеличение общепринятой дозировки знтеродеза в 2 раза также приводило к значительному снижению летальности обожженных мышей (на 57%). Дальнейшее увеличение дозировок оказалось нецелесообразным из-за отсутствия эффекта и возможностью возникновения нежелательных эффектов, например, гипопротеинемии, что отмечено, в наших исследованиях.

При применении других сорбентов в увеличенных дозировках не наблюдали дальнейшего увеличения выживаемости животных.

3. Физиологические механизмы изменения уровня некоторых токсичных метаболитов при комплексной энтеросорбции Нами установлено, что испытуемые энтеросорбенты действуют неодинаково на разные звенья нарушенного метаболизма при термическом поражении. Это может быть связано с разной химической природой этих энтеросорбентов, а отсюда - с преобладанием того или иного механизма детоксикационного действия. Это дает основание полагать,'что наиболее эффективным может быть комплекс энтеросорбентов различного класса.

Нами Предложено использовать комплекс, состоящий из. 3-х энтеросорбентов: ваулена, знтеродеза и энтеросгеля.

Установлено, что при применении комплекса энтеросорбентов с первых суток после термической травмы эндотоксины интестинального тракта в крови обожженных животных полностью отсутствовали, что не удавалось достигнуть при использовании любых дозировок любого энтеросорбента. При при-

менении комплекса энтеросорбентов также в максимальной степени уменьшается концентрация и токсичность СЗЯ1 (табл.1).

Наиболее выраженное снижение эндогенной интоксикации под влиянием комплексной знтеросорбции привело н к максимальному уменьшению летальности обогсленных крыс - шшвае-мость животных составила 84% (ори применении каждого из сорбентов не выше 78%).

Преимуществом комплексной энтеросорбции является то, что используется не увеличенная, а обычная дозировка энте-родеза и энтеросгедя, а дозировка ваулена в комплексе в 3 • раза менызе общепринятой.

Таким образом, проведенные нами исследования показали, что в экстремальных условиях (эксаернм.ожоговая траы;а) развивается комплекс процессов, сукестэеннш мгменхсм которых является эндогенная интоксикация. Она обусловлена не только возрастанием концентрации СУД, но и высоким содержанием в гхсви эндотоксинов иитеслшзлыюго тракта у:;е в бли-:::аптае часн после воздействия стросс-^актсра. Вмсскозйек-тксвум коррекция ¡метаболических пару^екпй после

с:юга является раннее навпачс-го сатероссрСонтов.

Лзссстко. что для поддсЕ/'аг." и «лр'лчтъпой .«»аерики г.ечкгса к для сохранения биоцс::ссп у;:;:рср::орц чрсбустся постоянное присутствие в химусе теердин частиц (Гальперин ю.М., Лшпрев П. И., 1986). В условиях естосздодки-о па-V« ика, когда частиц» хшгуса шгсааяруют с юдочким вор-скнками, значительно уволичквоотся секреция и вс-г.сиваппо. При экстре»«ашш воздействиях сснроторназ активность -чгте-рсиитсв резко снижается. В услсьи:« термической тргач.;к на-

Таблица 1. Влияние знтеросорбции на концентрацию ароматических С№1 в сыворотке крови обожженных крыс (усл.ед.)

( 1 Время ! исследо- |вания 1 1 Ожог (контрольная группа) ЗНТЕРОСОРБЕНТН

ваулен энтеросгель онтородео комплекс знтеросорбен- тоь

1 ; С./ТКИ :ожога 1 0,35 ± 0,03* 0,24 0,01" 0.20 ± 0,02"* 0,18 ± 0,02*' 0,15 ± 0,02*"

! • |3 суток 1 после 0,23 ± 0,03* • .'0,25 ± 0.02"* 0.19 ± 0,04** 0,21 ± 0.03** 0, 15 ± 0.01"*

СУТОГ 0,25 ± 0,02**' 0,29 ± 0,07 0 27 ^ г" р * р П -1 *

ГТ^г.гчани?: * - различи дсстсч ?рны по - различил достоверны по —'.--п^ ! п С. С5 !.

сравкеши с псчагагохлми контрольной

рушения энтералыюй среды настолько велики, что линь используя комплекс знтеросорбентов удается в значительной степени нормализовать ее состояние. Свободный пассаж сорбентов по кишечнику; связывание токсичных метаболитов с помощью знтеродева; биотрансформация высокотоксичных веществ в менее токсичные; сорбция на поверхности макро-, мево- и ми1сропор ваулена - несколько возможных механизмов, обеспечивающих высокую эффективность комплекса знтеросорбентов при ожоговой эндотоксемии. ,

Выявленные нами нарушения гомеостатических функций организма (одним из механизмов которых является эндогенная интоксикация), не являются специфичными только для термической травмы, но и обнаруживаются и при других экстремальных состояниях. Данная проблема имеет обцебнолсгическое значение и играет важнуо роль в различных областях медицины и. ветеринарии.

В ветеринарной практике экстракорпоральные методы де-токсккации не могут найти широкого применения в связи с большими техническими сложностями, а также многочисленными осложнениями. В этом плане приоритетное значение может иметь энтеросорбция.

Этот метод является важной альтернативой антибиотико-терапйи. Уменьиение притока в кровь книечных токсинов может быть достигнуто без риска осложнений, возникающих в связи с применением высоких доз антибиотиков, т.е. без диарреи, дисбактериоза и токсичности для почек (Николаев В.Г.,1984).

Можно полагать, что энтеросорбция, как физиологический путь удаления из организма тонических веществ может конку-

рировать, а в ряде случаев и вытеснять другие методы профилактики и лечения зндотоксемии.

ВЫВОДЫ

1. На модели термического поражения получены новые данные о механизме возникновения и развития эндогенной интоксикации, и дано физиологическое обоснование использования энтеросорбентов для ее коррекции,

2. Установлено, что в механизме развития эндогенной интоксикации после термического поражения, важнейшая роль принадлежит метаболитам нарушенной энтеральной микрофлоры, максимальная концентрация которых в крови наблюдается с первых суток после воздействия стресс-фактора.

3. Выявлено, что при применении энтеросорбентов в значительной степени снижается концентрация в крови эндотоксинов интестинального тракта, содержание СМП и их цитотоксич-ность.

4. Показано, что после энтеросорбции активируются защитные механизмы, обеспечивающие возврат нарушенных функции печени к исходному физиологическому уровню: снижается гипо-и диспротеинемия, нормализуется гликогенсберегающая функцш печени и предотвращается развитие жировой дистрофии.

5. Установлено, что при применении комплекса различны; энтеросорбентов в максимальной степени нормализуются нару юенные метаболические процессы при термической травме, чт приводит к наиболее выраженному снижению летальности обож женных животных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанный метод оценки цитотоксичности (Ml, основанный на измерении степени лизиса аутологичных лейкоцитов может бить использован для определения тяжести эндогенной интоксикации (а.с.№ 1691747).

2. Результаты комплексного использования энтеросорбентов различной химической природы позволяют предложить этот принцип для целей детоксикационпой терапии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Неделяева A.B., Левин Г.Я. Энтеросорбция в остром периоде ожоговой болезни: (Эксперим.исслед.) // Матер.6-ой Респ.научно-практ.конф.по проблеме термических павреждё-ний. - Горький, 1990. - С.91-92.

2. Неделяёва A.B., Кушнер P.M. Энтеротоксемия и ее коррекция в острый период ожоговой болезни // Сб.науч.тр.Горь-ковского НИИТО. - Горький, 1990. - С.99-104.

3. Эфферентные. методы в комплексном лечении больных с тяжелыми ожогами: Метод.рекомендации / Нижегородский НИИТО; Сост. Левин Г.Я., ■ Царёвский H.H., йсаченкова O.A., Неделяе-

. ва: A.B. - Н.Новгород. 1991. - 17 с.

4. Неделяева A.B.. Понемарева Р.В., Палукова К.П., Левин Г. Я. Использование нового знтеросорбента КМДМ-6-5 для детоксикации при ожогах // Матер.1-ой Всесоюз.конф. по теоретической и органической хтти.- Волгоград, 1Ö91.- С."0-11.

5. A.C. №1691747 , МКИ и Ol N 53/53 Способ определения

эндотоксемии при ожогах / Левин Г.Я.. Кораблев С.Б., Неделяе-ва А.В.. Кушнер P.M.//Открытия.Изобретения.-1991.-N 42.- С.32

6. Неделяева А.В., Левин Г.Я. Энтеросорбция в остром периоде ожоговой болезни // Междунар.конф. "Интенсивное лет чение тяжелообсжженных": Тез.конф. - М., 1092. - С.124-125.

7. Неделяева А.В., Левин Г.Я. Влияние энтеросорбции на аутосеисибилиэацию и эндотоксемию при термической травме // 1-ая респ.конф.комбустиологов "Актуальные вопросы лечения ижогов": Тез.докл. - Ташкент, 1992. - С.80-81.

8. Неделяева А.В. влияние энтеросорбции на функцию печени и эндотоксемию при ожогах // 8-ая зональная конф. молодых ученых и специалистов-медиков "Медйко-биологические и экологические проблемы развития Севера". - Архангельск, 1992. - С.77-78.

9. Nedeliaeva A.V., Levin G.Ya. The Influence of Ente-rosorptlon on Endotoxemla in Burns Illness // Annals of the Mediterranean Burns Club. - 1992. - N°4. - P.236-239.

10. Nedeliaeva A.V., Levin G.Ya. Application of Ente-rosorbents in the Acute Period of Burns Disease // Second International Conf. on Burns and Fire Disasters: perspectives 2000. - Palermo, Italy, 1992. - P.77

11. Левин Г.Я., Неделяева А.В. Лечение ожоговой эндо-токсемии с помощью комплекса знтеросорбентов / Нижегородский НИИТО. -Н.Новгород, 1993. - 8 с.-- Леп. в ВИНИТИ 21.04.93, N°1061-B93.