Сравнительная характеристика структурных и функциональных особенностей гемоглобина в ряду позвоночных

Коношенко, Светлана Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Сравнительная характеристика структурных и функциональных особенностей гемоглобина в ряду позвоночных
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Сравнительная характеристика структурных и функциональных особенностей гемоглобина в ряду позвоночных"

УКРАТНСЬКА АКАДЕМ1Я АГРАРНИХ НАУК Г Д1НСТИТУТ Ф1310Л0Г1Г1 БЮХ1ЛШ ТВАРИН

I , , На правах рукопису

КОНОШЕНКО Св1тлана Володимир1вна

УДК 547.963.4:577

ПОР1ВНЯЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА ГРУКТУРНИХ I ФУНКЦЮНАЛЬНИХ ОСОБЛИВОСТЕЙ ГЕМОГЛОБ1НУ В РЯДУ ХРЕБЕТНИХ

03.00.04 — б|Ох1м!Я

АВТОРЕФЕРАТ

дисертаци на здобуття наукового ступени доктора бшлопчних наук

ЛЬВ1В — 1994

Робота виконана на кафедр! бншмп Симферопольського державного } верситету.

Науковий консультант — доктор бюлопчних наук,

професор Сухомлжов Б. Ф.

ОфЩшж опоненти: , доктор бюлопчних наук,

професор Стародуб М. Ф.; доктор бюлопчних нау-<, професор Янович В. Г.; , доктор медичмих наук,

професор Шлемкевич М. П.

Провщна установа — Кшвський державний ушверситет ¡м. Т- Шевч

ка, кафедра бюх1мм. ^

Захист дисертаци вщбудетъея о ^С*1- годиш на засщанш спеша^зовано! вчено! ради Д 020.14.01 в 1нс тут\ ф1зюлоги 1 бюхьчм тварин.

Адреса шетитуту: 290034, м. Льв1вт34, вул. В. Стуса, 38.

3 дисертащею можна ознайомитися в б1блютеид 1нституту фЫологп 1 £ х1мИ тварин.

Автореферат роз1слашш «

Вчений секретар спещал1зованоУ ради, кандидат бюлопчних наук

КИРИЛ1В Я. I.

' ■ 31ГШ.ЕА ХАРНТЕРШТИКЛ РСЕОТИ

Актуалыпсть проблекк. Питсння вБОлацiï вiдносятье я' до числа загадьноб1олог1чннх проблей, вивчення яких остоннiи часок перенесено i на иолекулярнкй ргвекь. 3 точки зору систе-.ыатиш-т та еволюцхх осослквий хнтерес квляе порхвняльне вивче:;-ня ф! 3iîko-xi kî4hkx, структур них i Сункц1ональнкх особливостсй Ф1з1ологгчно актквних иолекул, а такок иолекулкрпюг статей, н:с! викокують в органi3L'i вааливх б1олог!чн1 ¡¿ункцП. ГПзнаянп тага, як Ц1 колекулярш систем;: винтеит, в якогу напряику йсоз ïx розвиток i як.в npoueci еволицН Бхдбувалась iitTerp&yin он— pev m елехент1в систем и, являе- задачу велико"! теоретично! bez-ливос TÏ.

Наука, яка зайьгазться цицк пптачняии - лорхвняльна 6îoxi-ыхя, в1Днооиться до числа тих, та ивидко розвкваютьсл, особливо в останнх.два деснтир^ччЕ. Везения проблем поргвнялько: ôîoxîuî д потребуй все б1льшр'1увагк дослхдник1В до вивченкн гоиологхчних,бхлк1в, якл вшгзнувть одлшюву функщй в рхзних орган!змах / Y a. ¡dos , 1968; Крепе, 1976; 1981/.

Ршпше-Крепе ' / I9S7 /сфориулпвав полояёння,. яке .вхдобра-aas зогальн! прийцши о'ргаягзадЛ' сагих рiзних'функциональна систем. Сундакентальна розробка дього долЬкенкя налевить А.". Уголеву / 1985, .1989/, в hkîë автор доказуе, що еволвд!îîhî пере-творення повиязан1 з перерозаод!лры ун1версальних ^ункцхонавь-них олок!в, як! 1деят!тчн1 або шд1бн1;В клхтиках.окреаих пред-стазнш<хв, -до.'зпахсдпться на piaHnx етапах еволюцхИного роэ-зотку. Проте, -ця кондепцхя.поки ао не"; кабула налкйого роззит- • ку на молекуляркэку .рхвнз .5, зозрега, ' зовЫы не поруиугтьсп в, .лэтвднях про/еволюцхв геь-оглобхна.

Геиоглобхн,'порнд з-хншши бхополхиера^и,; г однии з об"ек-тхв дилогенетичнога анаотзу. Н&лвЁЕЛИвхша функцхя геиоглобхну /приаднаннн i тренспорт киеяю/.з лтроке.розпэвездкення стали лричизов .TOÏ велико? поваги, яку вийвлали.' i зиявляать богато досл1дштк1в до цього ;дх1хального бхлка. Про. це евхдчтгь б'агатк?. ¡¿-онд наМхльа ycnîumiix i плодотворних досл1джень, пк1 буг.и в:*-icaiisHi на-npoTHsi ocTaiiïiix десятпрхч-в слецхаглзовених лабора-торхях / frhiii. .,1280; , 1980,

1У81, ÏSÎS2; ID'Bq, IvSO.;'Стйродуб, 19Б5;. Cntj, , 1990/.

■¿осл!д2елня;г^ог.'1э6'хнхв ъ еволицхляоь'-у аспект: давно цх-'Сзхдчзакян дього с постою зсллиувчкй по*

- г -

tík 1иформацтТ як про структурн!, так й про зластивост! геиоглоб1н!в, якí налегать р!зниу групаи тахинного св! ту I£uÁv¿éas,d£.% 1965, 1975, , 1969,1975, 1976,.1978; ó-eoe¿jtrA*t% 19751981, 1985; Дук"яненка,1н., 1991/. s

Проте, робота по зивчеяшэ стурктурних та функц1онапьних влес-тивостеа геиогаобШз в порхвняльноыу аспект! ае vaaxb систеыатда-ного характеру, головню» чянои шв"язан1 з дослхдхенняу дои1нуо-ч-лх по kijrbkíchoüy aaícty фраяпй reuo i\íio<5íhíb. 1яфориад1я про структурн! i функцхокальн! властивост! ыхяорних фракцхй хае доесть фрагментарний характер i не даа иоаливост! зробити Ц1лкови-?у oufнку структурних i <руннц*ональнях змн гемоглобину з ф!логе-He3i.

Дана робота винивда як лоичне продовасення багатор!чних дос-л1дзень, якх проводиться на кафедр i QioziuiY С1ыферопольс:ышго университету по вивченню 6ísxíb hpobí, в тому числ! i геиогзюб1ла, в пор iвняльно-еволвд!йяоыу аспект! /Сорк!на, Коноиенко, Бород!на, 1977f Коношенко, iн., 1982, 1986, 1988, 1939, 1990, 1Э91; Остолоэ-ський, !н., 1988» 1990; Толкачова» Ноношенко, Лавачов, íh., 1991/.

. Р езудътати цих досл1джень стаорвютъ основу для яор1вняльво? характеристика структурних i функцхональних властивостей геногло-б!н!в зребетних в ф1логенет«знону аспект!.

Мета i задач! доел!дкен^. Метоп роботи бут - даги $iaoreae-тичну oqiBsy bíakís в структурних 1 функц!оаапьнвх властявостях гемоглсбШв на piBHi icsacia: хребатнвх.

3!доов1дно цьоыу, вирхшувались'тагй задач!:

X . Дати оц!нку електрофоретично.Г та- íзоелектричноI гетере-генност! гемоглоб1н1в онреаих представяшав р1зних клас1в хребет-них. -

2. О характер изувата спор1днен!сгь докисню як головнях, так i HiHopSirx електрофоретичяих фракцхй гемоглоС1н!в. Дати ф!логв-ветичлу оц!нку в1дн1н геаогло01н1в за спор1даеа!стю до кисп1г.

3. Охарактеризувати suíhqk»: летний склад головнях í ы!норних електрофорететших (£®акц!й геаогяоб!шв, визначигн характер зм!в

в ам1нокисаганоыу склад! геаоглоб1н!в у логенетичному аспект!.-

Вивчити внутр^шпюиодекулярну динам 1ку- головнях; !и!норних франц!й Ее«оглоб1н!в, встановити характер з»1а даного пфамвтра ыолекуа геиоглоб1ла у ф!логенези

5. Визначигн зв"язокструнтурно-динан1чнихвластивостеа ге-

- 3 -

ыоглобШв з функциональною активна®.

Наукова новизна. Встановлено, що у ф1логенез1 хребетних в!дбувалися закошшря! зм!нн в структурних ! функцхональних властивостях геморлоб1Н1в. Про це св1дчать дан! з ам1нокислотно-го анализу головнях 1 и1норних електрофоретичних фракций геио-глобШв, в1дн!ни в р!вн! внутрIшньомолекулярноI рухливост! фрака тагах в!ды!ни в спорхдненост! до кисню, що корелюють а! структурно-динам!чними параметрами гемоглобШв представншив усхх клас!в хребетних.

Показано* що в характер! зм!н спорхдненост! головнях фракам геиоглобШв до кисав виявлязться певна зежшоы!рн1сть. Еросл1дкуаться знкження спор1дненост! фракц1й гемоглобШв до кисню при переход! в!д 01льв низькях ф!логенетичних хруп хребет-них до б!лыв вищих.

Видова специф1чн1сть аминокислотного складу геыоглобХнхв обуыавдена,..головнии чиной, вхдыхнамя ва!сту полярних аы1нокислот. Рхвень вн1сту Идрофобних аминокислот е б!льн коксерватив-ний.

В ряду хребетних спостерхгаеться певна законоы!рн1Сть в характер! зыхн сп!зв!дношення дикарбонових ! основних ак!нокислот в склад! тетранерних гемоглобШв: зниження даного показника при ступеневому переход! в1д класу ряб до класу ссавц!в.

Просл!д*уеться .,в!дпов!дн!сеь зм!н сп1вв!дношення дикарбоновях ! основних али но кислот в геыоглобхнах вы1нам IX спор!дненос-т! до кисню.

Вперше за данями ЯИР-релаксацП в протонних системах електрофоретичних фракцтй гемоглобШв встановлено, що внутрхшньомолеку-лярна дкнамIка геыоглобхнхв характеризуемся фхлогенетичними особ-ливостяыи. Показано, що в процес! ф1логенезу вхдбувалося законо-мгрне збиьшення внутрхшньоыолекуляряо!' рухливост! гемоглобша. ,

- 1Ш станом динаы!чно! структури гемоглоб!на та його функ-ц!ональною активности прослгджуеться корелятивний зв"язок: чип менша внутрхшньоыолекулярна рухлив!сть быка, тиы б!льша його спор1Днен!сть до кисню.

Показано, що тл!козил!рування геиоглоб1Н1в являв собою унгверсальний механгзн хх модиф1кац1йнох м1нливостх, оск!льки спостерхгаеться в ус!х групах хребетних, В1Д круглоротих ! риб до ссавц!Е.

Одерханий експериментальний матер!ал даа гидставу ввежати,

у фхлогенез! хребэтяих г1збувал;юя законоугрн1'зм1ки сгрук--турно-диназЛчних злаатазостеЯ геаоглоб!на та-його спор1Дненост1 да гасна, кгл сприяли б! льа ефектазлхй з!ддач! киснв ткаяинаи.

Теореткчне { праатичке значения зоботи Проведено пор1вняльне досл1дэсення с трунтур но-^ун кцIональ-них властизоетей геуоглабхнхз онреукх представкикхв р1зних клаг!в хребетних в фхлэгенетэтноиу асяеетК Одержан! результата розкра-вегть важливий аспект ароблени пор*Бкнльнах бхох!ыг5 геиоглоб!-н!в, характеризуя» под:!, п;о в1дбувалися а ходг розвитку I становления 1х ыахроыолеяулярних сжтеи та цавяязан1, головниачином, 31 структурно-динашчяиыя 1 функНоналанини власгавостяаи. дихадьного геыопротехну.

Результата дзсл!дяень доззаяяють виязита деякх законои!ряое-в роззятку струЕТ^рно-функцхональнях властивостей геаогяоб!ну в процесх фхлогенеза хрёбетних.

?озкрит1 законоытрност! в характер! логенетэтнцх в1дк1Н. Функционально г активност! електро^оретячнях 4ракцгй ганоглобШв»

Рэзкрит1 деяк1 незгдок! рак!не еспекти внутрхпньоаолекуляр-но! рухокостх геаогжзб1а!в, 'встанбвлеяий зв"язок даного струк-?уряо-дин£а1чкого. першетра з функцговальное актявнхста б!лка.

Влерге показано, що з пронесI филогенезу вхдбуваються зако-. нонгрнх зихнл ваутр1ЕНЬоаолаяулярно? длнаахки гешглаб1нхв, цо "31дп0в1дег' харак-геру , зы!н IX кяскево-транспортних власглвостей.

Результата дзслхдгень ыаять певне практячне значения для розуихння ^хлзгзнетдчних зз"язкхв ихж окреними групааи х видами хребетних, для б!ох1м1чио1 систематики». ,

Мазер1аля робота вккэриетовувться при' викладаши затального курсу "Бхологхчна хШя I молекулярна бтлогхя" г спецхальаих кур-с!в "Структурнсн| унед 1оаалБН.! нластязосм <Илк1в", "Бхозймхя кро-? з!**.

Апообац1Я робот??. ..

авзерхали дяеертацП булл подан! х дояладалисъ; . на 2 Всесоюзному б1ох1иНнэуу з"1здх / Рига,197г1- :ф.'Д на 17 / Дн1пропетро2ськ, 1Э82 р./, У Двано-*ранк1вськ, 1987 р./, УГ /5к2в, 1992 р./Укра:кських,б!ох1м1чних з"хздах, .. на'ХШ Ук-рахяськсау ф1з1олог1ЧНоыу з"5Гзд1 / Харк1в,1990 р./» на ХУ иххнаг-рсдн1й кзн^еренцН ^агн1тний резонанс в б!ологИних системах?

/Ерусалгш, 1992/.

Структура i обе яг дисертацЛ. Дксертац1я складаеться з введения, огляду лхтератури / 2 глеви/, описания ыатерхал1в i методов, результат!в власних дослхджень з гх обговореннлц / з главк/, 9 biíchobkíb i списку використаноУ л!тератури / 386 дкерел, в тому числ! 79 вгтчизняних i 307 хнозешптх авторíb/. Д исертацШа робота викладена на 231 CTopinni машинописного тексту, вклвчаючи 45 ctopihok списку л1тератури. Текст дисерта-цП про i лнетровлний 24 таблицяыи í 45 рисунками.

ШЕРШИ ТА ИЕТШИ ДОСИДИШЬ 0бпектоы досл1дяень булк статево зрШ особини предстаэ-никгв.вести клас1в зребетних.

К лас ссавц!в: лидина ^сте sa^/fns, бик Scs ¿амлыь , свиня iciofcL* f греиландський тюлень Pcu¿cf>¿>i'¿i<s ^zsefCurt-díws. Клас птахи: голуб &£umé<\ ¿y/a, % доцапш! качки CL,-?as./>-Са-tyx.J^/fehes, , до каин i кури породи корн i ш e¿>€t*<s eicmesHu/i, Клас плазуни: черепаха середньо-азiатська Teréudo hci.s--fned¿ , bje водяний Ма+ъс'х -étsse¿¿a¿a..

Клас зеановодн1: жаба трав"яна Лд/'^гл^-д.,

safi'a cipa Bu-fa .

Клас kíctkdeí ркби: кефаль-сгаг!ль rtlútfft cutiAtuz^

скорпена ,Scx>if>iuncL. joütMs, % короп tyfuncü cay*'с . ,

тоБстолоб f/jfpcfti--Hia.£r>/r'c/L-¿js

Предствзник класу круглорот: - тлнога рхчкова ¿-avpeé'L^ j-Écc-via-é-r&s,.

В koshííí видов1й rpyni класу бул> не пение П-ти особкн. "атер!алры досл*даень був геуоглобтн. Геиоглоб^ вкдонлк з еритроцгтМв за методом Драбкпга / , 1949/, але

без толуола, цоб попер^дити ¿'творения ыетгеггоглобшу. Концент-paaia геыоглоб1ну в геыолгзагах мзначали унхфткозаяии ге;лгло-б1шпан1днии' ыетодоы, якиГ: викэристовузться• в практкцх клп;{ч-hoi 6ioxiyii. Електрофоретичну гетерогённ!сть геног'лобШв виз-начали методом дкек-електрофорезу i 7%-uy по r.i акр i naz; i дно i; у • rerJ ] , 1964/. Електрофоретично гомогенн! ¿ракцП .

геиоглобШз вид i ля ли за допо^'огою препаративного електрофарезу в блоках 750-иого' ШУТ, зикористовувчи сяеа1ально вэтотовлен!. канери /.¿адаькиП-,-.Багдасарвкн, 1975/. -

Анал13 чистота 1 гошгенност! препаративно вид:лених <Й?акц!й проводили методой анал^ичного електрофорезу в ¡ТА4Г / ЯягК , 1964/.

Нолекулярну пасу досл1дауваних геыоглобШв визначали за цетодом гель-($1льтз>ацп в тоннэыу шар! сефадекса С-100 "й-1 у Сормна, Коноаенко, 1975/. Визначення к1льк1сного втЛсту ыетгецоглобхну проводили Д1аниетгеыоглос5}новм» методом Душаковський, 1970/. Бглковий компонент глоб!н одерживали, використовуачи ыетод !золяц!I геково'! групи, розробленийТеоре-лоы та Акееоноы/ ТЬе-сгсСС , 1955/. К!лък1сниа вн1ст

а}»'1 но кие лот в онрешгх 4ра.щ1ях геуогаоб1НХВ визначали за до помогаю ыетода хроматограф!? на папер! / Пасх!на,1954; Зайцева, Твленава, 1958/, вдаюрис.товуючи 24~х та 72-х годинн! г!дрол!-эати б1лк!в у 6 и солян1й кислот!. лыасний ви!ст аминокислот визначали в икр наЮО.игк ггдролхзу, та в аи! но кислот-них запиши«./ Бейл!^ 1965/. .

К1лыасний вы!с* гл1козил1ровано1 форыи гемоглоб!ну визначали колоршетричнш методом /Даш лова, Лопай на, 1986/. 1зоелектрично фокусування гешглоб!н!в зд!йсншвали в спец!аль-них анал!тячзих юлонках в град!ент! рй 6,0 > 8,0, я гай створ-авали сорбхтоы в р13нцх концентрациях в борно-боратноиу буфер! /рН 8,4/ та в град!гнт! густини сахарози / ТраУцысий, ¿аиць-кий, Ионий, 1976/.

Внутр!инъоыа лекулярну ^динашку фракций геыоглобШв вив-чвли методой Я!.!Р-релаксЕцП / Ваашан, Пронхн, 1979, 1986; Аксенов, 1983; Федотов, 1983/. Релаксац!йн! показании эд^ыали на .

-релаксом етр! -120" /" дрн/ при теыпе-

ратур! 25°С, В якост! досл!джуваних зразк!в вигористовували Ю^-нГрозчини геыоглобШв у важк!й вод1 Д20/. .

Напрукен!ст!Ь иаигётного поля була 1,7 Т» частота резонансу / ^ / - 20 «гц. Спад в!льно1,!ндукц!1 /СВ1/ реасцрували в режим! д!одного детектуваяня. Чад ы!д 90°-ними !ш1ульсеии.склвдад Г с. Нохна точка гфиво! надоплюзадась 30 раз! в.

Для реестрадП спаду ампл!туди сп!нового еха / С АСЕ/ ви-користовували багатогипульсну посд!довн!сть Кара-Парсела-йейбу-иа-Г!ла. Час ыга послхдовностями складав I с. Кожиа точка кри- . во Г нанэплввалась б! ля 300 раз!в.

Визначення час1в релаксацН окреиих гоыпонентздЦснюяали' за допокзгоп програшого забезпечення ф!рыи * .

- 7 -

Спор!днен1сть електро$оретично гоыогенних фракц!й гедагло-б!н1В до кисню визначали спектрофотоыетричник иетодоы побуду-вання вривих киснево!' дисоц!ацН / Шорохов, 1974/, використо-вували 0,55ь-н! розчини гешглоб:н1в в 0,01 15 трис-НС1 буферI, рН 7,0. Бм1ст ыетгеыоглоб!ну в досл!дЕуваних розчшах не перевод ував Ъ%

Цифров! дан!, як! одеркували в результат! дослгдаень, ста-тистйчно обробляли'за не то дои калих виЗорок / Бейл!, 1964/. 0б"еы сукупност! складав, в середньоыу, в1д II до 15. Пор}вняння двох зы1нних величин зд!йснювали на основ! -Ь -критерию Сьэден-та. В дисертац!йн!й робот! говориться про зы1ни лише в ют ви-падках, коли Р /0,05. Для встанавлення тхсноти взагшзв"язку ы1ж двока показникаыи визнаяали коеф!ц!ент корелящГ /г/.

РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛШЕЯЬ 1А !Х ОБШОРЕННЯ

I. Гетстогеянтсть I Функц{ональна активность гемоглоб!-н!в огоеиих представник!в хребетних

1.1. Характеристика цдатпйного складу ! деяккх фтзинр-х!1Лчнгос пшаыетр1в гешглоб!нхв

В!дпов1дно сучасним уявленняы гетерогенн!сть гекоглоб!-н!в - це один з нойвееливших кехан!зыгв широко? адалтац11 до р1зномал1тного спектру ншливкх фактор:в як внутр1пнъого, так I, що особливо Б8яливо,зовн!шнього середовища. "

Одерганх неми дан1 св!дчать про те, що перевазсна бЬтъахстъ вивчених гекоглобШв у предстевник1в р!знкх класхв хребетних е гетерогенн! I роздхлювться методом електрофорезу з ПАЛТ на окре-кГфракцН /рис.1/.

Б!льша чистина дослхдкуваних гекоглоб!н!в характаризуеться - застои двэх аЗо трьох електрофоретично гомогеянкх фрахсц!;!. Вик-■ лвченкп створювть гешглобхяи голуба, дойкзнхх качок та гренлакд-сысйго тюленя. В "коан!й. гетерогенн!й систем! геыоглобШв монна вад1лиги одну абб да! головн: фракцП з найб!льп високта в'-хстои б!лка та шпоры!.

. При аналхз! даних дкск-електро^ореза в ПААГ спостер!гапться тенденция зшкення в!дноснох електрофоретично'1 рухливост!Дэ*/ вивчених гецоглобШв в яапряику вгд круглоротпх ! ркб до ссаз-Ц1В /тайл.1/. Так, пкцо величина 11 эф головних I изнорних фргш-ц!й геиоглоСШв у представнтив гфуглоротих ! риб варйэз в ие-ках 0,52-0,8, то для геиоглобШв представнкк!в !някх клас!в

хребетних значения Каф позлтно зни&уеться: у зеыноводних -0,41-0,59; у плазушв -0,38-0,47; у птах1в - 0,29-0,53, у назеиних ссавц1в - 0,19-0,38; Кэф $ракц1й геиоглобхну грен-ландсьюго тшзеня знаходяться в ыеаах 0,28-0,56.

1 2 3 4 5 6 7 3 9 Ю 11 12 15 14 15 18

; i

ел шт

v шь шв +

Рис. I. Диск-електрофорёграыи геыоглобШв: I - ладши; 2 - бика; 3 - евин!; 4 - гренландського тюленя; 5 - голуба; 6 - качок; 7 - курей; 8 - вуяа; 9 - черепахи; 10 - заби травпяно1; II - с!ро1 жаби; 12 - кефал1-сцнг!ль; 13 - скорпени; 14 - товстолоба; 15 - коропа; 16 - ыгнопт р^-

НОВОи

Результат« досл1даень по вцзначешт ыолекулярноГиаси фракцгй геаоглобШв показувть, що П значения для досл!дгу-вгяих б^лгаз а тшов1 для геиоглобШв хребетних 1 знаходяться в неках 65300-66400. Викдюченняы а геыоглобхн ыхноги, три фрак-ц!? якого являють собой, коноиери / иолекулярна'каса $раяц1й 17400 - 17500/.

Таяга чкноц, очезидно, що в кажнхй . гетерогенньЗ систем зивчеаиих гемоглаб!н1в окреы! £ракщ I характеризуются одкано-вга» субодшичниу складом сво1Х «олекул, але В1др1знявться величиною поверхневого заряду / дшп з. електро£оретачно? рухрыост!/, що ионе бути обуиозлено певнкми Сфуктурниаи в!д1цнеши.

Таблиця I

■ Локазникй в1днооного процентного вмгсту та вгдносно! електрофоротично!' рухпмпс!^ електрофорэтично гомогенних фрпкцЩ гемог.лоб!н!в окремнх

■ прсдеташмкг в хребетнйх (п -11-12)

0 б 1 ч к .т и д о с л! Д ж е н н я

1'ПКИ ЛгсдИна Бик ; Свйня Тюлень.

■!•){» -1 . - К; ; на-2; Нв-З ; Нв-1 ! Нп-2 * . [Нв-2* ;нв-з. |Нв-1 : Нв-2 ; Нв-З н Нв-4 : Нв-5

Вм! гур, ¡и пи.% и-'- е:;о!5 ОД35 3,0* 0,017 5,00,04 950,92 16,7 0,14 1 46,80,60 . 36.51 0,48 П ,35-0,092 13,з! 11.51 0,095 0,098 36,5± 0,50 27,4± 0,26

Ч' 0,006 0,2150,006 0,33± 0,007 0,25± 0,35- 0,191 0,24^ 0,007 0,007 0,004 0,006 * 0,38^ 0,008 Ь,2О£-0,006 0,33± 0,42^ '0,007 0,009 0,52± 0,009 0,560,01

11'ЧНЧ:)- : и б , г к т и -Д 0 с л I д ж е н н я

Ш'КИ : Голуб : . Кички Кури. : Вуж : Черепаха

."Л/П (Ь[ ; Цв-1*| Нв-2 ; 1и-з : Ни-4 ; Нв-1* ; нв-2 : Нп-3 : нв-1*; Нв-2 ; Нв-1* Нв-2

Им! («Т. мч.:- 1П ),() '12,0- 39100,55 0,51 7,0-1 ' 0,06 12,0-1 0,1 47.0± 0,62 35.0± 0,43 18.01 0,15 60,0± 40,0± 0,72 0,55 00.0± 0,90 '20.0± 0,12

0,' • 0,( 131 0,451 0,49-ИДЗ 0,009 0,009 0,531 0,009 0,670,01 0.29± 0,005 0,43± 0,008 0,460,008 0,38± 0,451 У,ООП 0,009 0,391 0,007 0,471: 0,009

Показни-ки 0 б > 0 к т и Д о с л i д ж е н н я

Жаба трав. Жаба cipa i Скорпена | Кефаль-синПль

X Нв-1 ; Нв-2 н : Нв-1 ; Нв-2 j Нв-1 ; Нв-2 : Нв-3 • • : к .: : Нв-1 : Нв-2 : Нв-3

Вшст, 58,0Í , 0,$0 42.0± 0,59 62,0± 0,^5 за,о± 0,50 . 7,0± 44.0± 49,0Í 0,05 . 0,60 0,63 ■47.0± 0,61 41,0Í 12.0 0,09

Кеф 0.47Í 0j008 0.59Í 0,009 0,41± 0,008 0,590,009 0,.56í .0,61* 0,77* 0,009 0,012 0,011 0,54* 0,009 0,63* 0,011 » 0,75 0,01

Покаэни- КИ о б • а К т и доел!д ж е н н я

Короп ! Товстолоб : . MiHora ■■ ■ -

Нв-1 i : х ; Нв-2 • : Нв-1 : Нв-2 : Нв-1 : Нв-2 ; Нв-3

Bmíqt, в»дн.% 33.0Í о,5а 67,00,83 32,0± . 0,30 68:0-• 0..Ó2 64,5± . 22,3¿ 0,69 0,18 13.2* 0.Í0

Кеф 0,60* 0,01 . 0,80± 0,011 0,55± 0,009 0,7?i 0,52* 0,63± 0,013 0,009 0,009 0^78-0,012 .

х - фракцй' э найб^льш високим bmíctom бхлка.

1.2. 1зоелектрична гетерогенность геыоглобШв Методом 1аоелектро$окусування в град!ент! рН встанов-лений б1льи високий р!вень гетерогенное®! геыоглобШв. При !зоелектрофокусуваян! геиоглобхни роздгляються на 2-6-ть !зо-електричних коыпонент1в в йенах рН 6,24 - 7,81 Д>ис.2-4, табл.2/. Для б!льпост! гёыоглоб!н!в н!льк!ст* !зоелектричних KoimoHeHTiB нараховувалась в!д 4-х до 6-ти. В 1зоелектричнкх спектрах кожна вад!лити компонента з найб!льш високим BuicTou б1лка та MiHopHi.

Величина pi головних конпонент1в знаходяться в межах, бли-зьких. до'нейтральних або слаболугних значенв рН /в1д 6,84 до 7,65/. Характер !зоелек1ричних спектр!в uas видову специфхчость. Виявлен1 достов1рнГ / Р / 0,05 J вхдн1ни як в кглькоси гзо-електричних кошюнент!в, Taic i" в значениях ix р I .

Як ! при електрофорез! в ПАЙ? просл1джуаться текденц!я загального знигення "кислотноет!" б!лка в!д круглоротих i риб до ссавц!в, що вияваяеться, зокреиа, в п1двиценн! pi головних компонент!». '• - "

сл1д в! диктата, що досх остаточно не вирхшено питания про природу так звано! п1Пнрогетерогенност1п геыоглобШв, що вияв-лягться ыетодаыи хзоелектричного фокусування. В гИтератур! об-говорпеться питания про те, цо однхею з причин "хпкрогетероген-HocTi" 6iлкгв иоЕуть бути ix постсинтетичнх ыодиф!кац!Г /Tpoi-цький, Алицький, 1984; Стшодуб, 1985/. До таких ыоди$!кг_ цхй взноситься й вефериевтативнё глгкозил!рування / Галенов, Боднар, Диккер, Ромашин, 1989/.

В зв"язку з тик було дод!льниы виявити в склад! !зоелекзрич-аих спектрхв глхкозил1ровану фориу геаоглоб1ну. Було встанов-лено, що вс! !зоелектрячн1 спектри ыаать один гл! козилгровшшй компонент, ' який локал!зуетъся " в зон1 слабокислих значень рН -1рад!анта /табл. 3/.

Ц! дан1 св!дчать про те, цо гл!козил1рування е одв!ею з причин попщрення цек гетерогенност! гешглоб!н1в та являв собою ун!вфсальний Jiexanis« "ix ыадиф!ка[ц!йно? ушливост!, оск!-льки спостер1гавться у вс!х трупах хребетних: вгд круглоротих i риб до ссавд1в.

Очевидно, в !зоелектричних спектрах в1добракааться б1льш pi3HouaHiTHHii склад гетерогенно! скстеци геиоглоб1ну, де е як

Таблиця 2

Характеристика ]эоелектричних компонентов гемоглобпив окремих представит« в хребетних (п=7-9)

¡Гемоглобин: р1 1эоелектричних компонентов (М±т )

хребетних: : I : п ; ш : 1У : У : У1

I : 2 : 3 ! 4 . : 5 I 6 : 7 : 8

Ссавц! ' Людиаи Бика , Св'ин! Тюленя Птахи Голуба Качок. Курей

Плазуни . Бужа

Черепахи

Земновод- ЗКаби н< трав«янся

'' Жаб и-с1роУ

6,36±0,008

6.6 ±0,015 6,29±0,03 6,73±0,01 6,8 ±0,013 6,4 ±0,04 6,4 ±0,01

6.7 ±0,02 6,62±0,03 6,65±0,02

6,46±0,025

6,49±0,01. 7,0 ±0,03 6,57±0,04 7,0 ±0,02 7,7*±0,02 6,58±0,05 6,5 ±0,01 7,15±0,008 7,09±0,01 6,73±0,015

6,78±0,02

7,00±0,009 7,5Х±0,025 6,85±0,038 7,28*±0,03

6,84 ±0,02 6,68±0,02 7,48*±0,009 7,35*±0,01 7,25*±0,01

7,42 ±0,015 7,6±0,014 -"7,75 ±0,03

7,36*±0,024 7,65±0,06 -V

7*39 ±0,02 7,5 ±0,015 7,62^0,025

6,99 ±0,01 -7,3 ±0,03

7,04*±0,03 >,54±0,032 7,65Н±0,01

7,69 ±0,02 - .

7,46 ±0,02 7,5б±0,008

7,56 ±0,02

7,2 ±0,015 7,46 ±0,01 7,55 ±0,01 7,76 ±0,009

6 '

Риби

. Скорпени 6,5 ±0,01 6,9 ±0,03 7,3 ±0,017 7,5 ±0,015 7,7 ±0,03

Кефаль-син-г!; ль

Товстолоба Коропа

Круглорот Миноги р1 чково'1'

6,24±0,03 6,93 ±0,019 7,24±0,016 7,63 ±0,024 7,81±0,0Г

6>45±0:,06-6(65 ±0,11 7,26*±0,12 7,47 ±0,04 7,62*±0,08

6,8 ±0,03 7,27*±0,04 7,39*±0,03 7,62 ±0,02

6,38±0,01 6,82 ±0,03 7,12*±0,02 7,46*±0,045

и ля

* - компонёнти з найбхльш високим вм!стом бхлка*

Рис. 2. 1зовлектричн1 спек?ри геыоглоб1н1в: людини (X), бика (2), овин! (3), тюленя (4), голуба (бУ, качок (6).

Рис. 3. Хзоелектричн! спектри гемоглоб!Щв: курей (I), черепахи (2), вужа (3), жаби трав'яно! (4), жаби с!ро! (б), коропа (6).

- Г6 -

Рис. 4. 1зоелектричн1 спак-гри гешглобШв: .товстозюба

Д /, кефал1-синг1ль/2/, сюэрпени /5/, «1ногя /4/.

геаетична детармпюван! форни молекул / 1зогеыоглобхни/, так 1 продукта IX постсинтетична? шди^1кад1 х. Падхбна асобливхстъ 13оелектричних спектр!в прослхдзуаться при вивтекн! сироваг-кового альбуиIау /Сорк1на, Бородина, Яоаосхенко, 1976; Коношен-кз, Павлова, 1980; Конопенко, Дрокаретська, 1982/. Бивчення питания про природу крогетерогенпост!" сироваткового альбун!-ку дозволило встшхобити, що головною причиною !зоелектрячно? гетерогенное^ даного. бхлка е його коиплексування з аяршши кис-лотаии, а такоя, иозслшю, з вхльшщи аьанокислотаыи / Сорк1на, Хонозенко, Бородхна, 1977; Соркхна, Коношзйю, 1влзв, 1978/.

В гЛ тсратур1 е таюж дан1 про гл!возилхруваяня сяроватко-вэго альбуихку / , ,1983/.

Ток;а чмюы, для рхзних б!лкхв иожлива реалхзацгя як сле-ц-.г^чнпх, так I загальялх цехаахзк!в постсинтетичнох цодифхка-ц{1 / капргпслад-, гл±козтпрувачня /, що приводить до появления "популяцхй" колекуд з новики ф13ико-х1м1чниаи властетостяни.

, Раблщн 5 .■

KisbsicHi® Eiîic2 rairosTBiipo'Eaaaï форги б!лка в 1зоелекгфотзих.|рш:ц1я2 rsaorasSíais окре«их представаякЛв хребегякх / п = 7-9 /

Клас хрвбегнйх i Геыоглоб!к Т р I хзоелекг-} ручного kol¡-I rOBSÎXSy i Si'icT raiтюза-л1рэваиого гэ-коглобхву, %

Ccasui Звдшк 6 ,35 ,+ 0,0,08 3,5 + 0,21

. Бика 6,6 +0,015 2.,8 +0,22

Свакх 6,29 + 0,03 3,2+0,18

йигевя 6,73 + 0,01 2,0 +0,18

Птахи Голуба 6,S0 + 0,013 2,8 + 0,17

■ Качок 6,4 + 0,04 5,1 1.0,25

. Кур ей 6,4 ¿0,01 3,0 + 0,21

Плазуни Зука 6,7 +0,02 3,2 + 0,25

Черепахи ■ 6,62 + 0,03 3,0 + 0,23

ЗвЫНОВОДЕХ .Х&би 6,65 + 0,02 3,2.-+'0,20

трав^яноТ

Жаби cipoï 6,46.+. 0,025 3,3 + 0,25

Ряби ..." Скорпани 6,50 + 0,01 4,0 +0,26

-KeÈasi- 6,24 + 0,03 3,9 + 0,18

. ÇHHTiJlb

. Коропа': 6,8 + D.,03 . 4,2 + 0,28

.Тавстодоба 6*45.. + 0,06 4,3 +0,25

Круглоротх Мхноги' 6^38 +jO ,01 • . 3,8 + 0,19

. рхчкбво?

Таблиця 4

Покаэники полунасичення киснем (PgQ,MM рт.ст.) електрофоретично.гомогенних фракщй гвмоглоб! híb окремих'представшее 'хребетних (MÍ» ; п= 7-8 )

* Людйна ~~ ¡ Бйк 1 ":'. ' . СвднТГ" ; Г 1 ТЕдёнь

H^I Нв-2Х ÍHb-3 i Нв-I I Нв-2К I Нв-I ;Нв-2х * Нв-3 : Цв-I Гнв-2 : Нв-3 : Нв-4К

г_!-:--!-i------5—,—■—=-i--—,—-j—_-i--

■20*1,1 26-0,9 17*1,0 I7±0,9 26-1,I 22±I,0 25*0,8 I8±0,9 33*0,9 32*1,0 28*0,9 22*1¿I

¿ Голуб '__^ Качки' • '• . ffipH; - - By»

Нв-5 ; Нв-2 j Нв^З ; Нв-4 j Нв-I* j fofo; \ Hp-3 . j Нв-I* |hb-2 1

35-0,9 30*1,1 31*1,1 31*1,0 37*1,I 27*1,0 29*0,7 25*0,6 27ÍQ.65 ;27*0,9 23*0,9 .,.

Черепаха l Жаба трав. ; Еаба cipa ; йкорпена ~ j Кефаль-сини ль

Нв-I* I Нв-2 \ Нв-1К ; Нв-2 ;Нв-1* ! Нв-2 1 Нв-1 } Нв-2 j Нв-3* ! Нв-I* | Нв-2 ! Нв-3 25-0,8 22*1,I 22*0,9 17*1,1 25*Q,9 20±1,0 13*0,8 17*0,9 15*0,8 20*0,8 18*0,9 Х4±1,1 •

_Короп_; Товстолоб ; MiHora ?

' Нй-1 : Нв-2* ; Ha-I'i На-2* i Нв-I* : Нв-2 ! Нв-3 : * "" ФРакЧ^ 3 наплыл високим bmíctom --:-:-:--—---:-^--—s . б!лка.

12-0,6 17*0,8 13*0,6 18-0,7 17*0,9 £0*0,8 13*1,1

РзО.ММ РТСТ

¿¡п

30 -

КРУГЛО-

РОП

го -

| л

РИ 6Н

№

земн000д- лла31ни н/ ,

гЬ 1

Г*1 I.

V í

ПТАЖЙ

)»

кг

/ / / /

) / н

/ /

. / «;

у / /

»то■ нот тоет- скор кетпь- жаба жма чр£- ш го- кур» шм млень свння впк лщанна га лов пен а гннпль та. с/ра паж а лув

:ф| I I

Рис. б. Пор!вняльна характеристика спор{дненос^ до кисню головних

(заштриховано) 1 м!норнйх електрофоретично Гомогеннйх фракц!й гемоглоб}н}в окремих представник}в хребетних (цифрямй позначен!

номера фраКЦШ»

1.2 .. ТО * дчено ^ктро^ретично

ra:jomi.qrrr fabmiй гешглобШв до киенд

■Bvzpss. cebsïbîî чк ten» язса1зжувгнях reaoraoöiets cnoorepi--гагться es risbsrf в характер! !зоедажгр5$яйх.спектров» аде та-ш г сод! .яуяазЦакагьао?' активное*!. e¿eEqrofc?pet*racr rouorea-

аих фраздИ! 5V табд« Л/. '

Влвчецшг кротах sîtokcboï" дисоцтацП акс1геуоглоб!н1в показало.» вф'^ухпсЦональаа гетерогенность' ге^зглпбШв видоспецл-фхчиа. i е ароявсы -¡¡щ>оти корил рзакцп орган1зиу на pi3Hi уыо-55г серед<швдд 1скузоккя. Rsiîâtxin .зесогов спор 1даен1 ста до клена жграктерязузг&ся як голова!, ïbk i HlHôpaî 4ракцИ. геамчю-бШг.-sisara-sa 1федс?квняк1в кгасу риб. •

Текз осз&аэдхств. данах • re-jorsifiiafs .коге бутя повезена з ка:, цо нор!ва-яно. з представнккшпх îmsux класхв хребетних, р zCn icкувть з- складнях, яшяязих роже зовн{шнього середови-¡¡Сй, гхшг на етюЕйьа^аяссор-х»! влоесивося* гешгдобгну ведн-.ваать псих! екэлогхчдх фзкторл» ЕЭ!фсиа, текпература, сшидк!сть клт-й-у, глйбтка, saler ккеза. у вод Г, вглжинз, рЯ,. cojsoaiéîb, iuutibi-csjíü& ззг-:1кггого .га внулзхшнього середоз.зца /Зугс"янен-. к-з", i921./» В ■ зз'гяз:су з. да; ,сд!д в!до?1*и*и, ада геаоглоб!н CKúptiexn: --ыагорузаяво? ряби,, хорактеразуетвея 61-льшэв. еаорхдагаДетэ до кяаззг...ш>рimsaja з гехоглобХноу кефал!г ■ сягатль', - кнлД&Гх,. а/.йтвнод., аедагтчноГ риби. ■

Cnor,îsasfiic7i до-киска reüar^oöiaiB xaniiîx хребетнях також ras пеан!- фээгенеткчн! оаабливсст!. У представяяк1в xasçis зсаасгадйжх- та плазуахз сяостёрггеетвся ценна слорхдаенхста. до кхс'на as гозовагх тек I' цхнорнет.^&кчгЖ геубглобшхв; ЦЯ осаб-лу'зх.сть ¿у'Ггсцтнальзкх 5лаак-востей £рагщ!8- гешгяобШв, але в б1льа.1й i'ipi, с .ю с тор i raí тхьел rasos у представишь в кзасу. ÜT2XÍB» . -,

Tasiw -чдаои, з характер! svîh функционального пояазника гсцогдобхнха праслхдаугться-пеана захаяаихрахсть:'зхження спо- ■ pííurssacTi до кдоаэ -пра аереязд! э!д' б1льш казьних до гене-' ' тамгах грул* зребатасих до з;щих. Найб!льа значях змпхи

спостсрхгозться дря "переход! вхд класу' раб "до 'каасу зёановод-Ехх, a TaiisH 'зхд 'класу -илазун1В до 'кзасу атаххв /'psfc.'ë'/. ' Очевгдао,- sÄ'li зребехних на суау,' появления леге'нь» еволиц!й--но- а1дта5й!уват5Г. пост1йну теыпературу"¥|ла-

..... ......, ,„ . . .,--.21:.:;..., .......

j riïaxis' та ссавцхв, ï» в зв"язку з циа, 1ятенсн$1 sania иегег ' божгауу,— все ц'е з^^вклося pysiföoo сетов левяих suis ккс-нево-трантаортнхг власткзостей геыоглоб1н!в в напркяу знизе еннй ix спор1дн5носй до кнснв та ni движения-■ Бфеккзност! на eràii розвалтаяення в тванияах.

-„. Аналог i чна б!ох1кхчка логхка просл1дЕуаться. при едапта-ï opraaísuiB до бхльаих вязот, ноли pisi-co зь'ппзстъся парчх-альний тиск киснв в атмосфер! / Дудаев, 1979/, а танэх п!д валявом частях хлтенсквнкх $>!зичеих навантазенъ /Голкачоза , Коношенш, Левачгг, i н. ,1991/. В процес! ад ал гад i ï вхдбуваг-тьсн зякЕення спорхдненост1 гешглобшу до кизнп, до сприяе б!лыа eçeKTKBEift передач! кисшв тканинам.

С55 мм тг ст.

, ______«*©

.л-"'" I Î .

го

|«или»ОТ|[—I >м в и )—тиажи ^

с с»ал 11

Риг. 6. Ф!лагенетяч«а oçiHKa 3íííH сдор!дяеност! до

киста головнях 4рекц1й геиоглоб1н!в представ-никгв pisHHX клас1в храбе^них.

"Иор1внялышй анал!? данях аа спорхднеа!ста> до кисни показав, но в раду хребетаих cmcTepiranrbCH зм!ни функцхональнох активности гемогдобШв В1ДП0В1ДН0.принцип./ "каскада": голов-Hf фршсцН текоглоб!Е!в у предстевник!в попереднього класу маг ють таку к або анашНчну спор!днен!сть до киснв, що .й окрем! MÎHopHi 5ракц1ï у представнтпиа наступного класу /ркс.5/.

Така сподгаешнсть в фукад1ональних властггаэсткх ípaK^ifi reuorxo6iHÍB дозволяв зробити припуцення про моглтшсть спрназвано ï реалхзац!1 ka молекулярному рхвн! пам"ят! про минули» еШГеЕолвдН /*еволзц1йва пви"ять"/, со повикко и&уя з

генез! певпе адаптивне значения.'Кабул», onpeai uiHopsi фрак-ц11 гемоглобШв е евойпц! шш 6i льн раннi i кодуються генами, як! кались-но гли бути дслйнантниыи. :. " •

, 2. ф!логенетячи! особдивост! сто уктуоних властавостеД re«or.io6!Hift хпёбетаи» .

2.Д* Пор льва хш&ктеристгаа &гЬтокясд?*ного складу електпо фор ет-тчпо гомогенних ФоакаЦ} гецогдобЩв хребегаих . j

Досл!дженйй oviro кислотного складу та внутрхшньйыолеку-лярно! рухоиост! фракц!й дозволяла встаньвити деяк| занонок!р-ност1 i ф!логенетичк! особливое в структурн0-4уняц16надьно-' ыу взагаозв^язку геыоглоб!н!в.

Проведений вами аяёоиз a^iнокислотного складу електрофо-ретичногоиогеннихфракций гецоглоб1н1в..вяявляз як загальн! особлинзс-Ti к! льк! енота' ву хстуеи i но кис лот так i в1ДУ1НИ, як! обуыовлейх видовою енещ«$1чи1ств гьыоглоб1н1в, що узгодаугть-ся э'сучасювга уявде.чкшш , 1975» 1976» 1978/.

Для веix досл1дяувгнгас гешглобШв поааЗан високиа зи!ст 25i3, Асп, Сер,. Гл!, Ала, Бал з Мет, 1ей з Хле та порЪняна нд-зькйй вкГст Цис, Арг ! Тгф. Разин з тяа спостер!гаються видо-si в!дшни ! вшШщ uis окрекшй фракц! ягщ в кехах одн!еТ ге-терогенно! еистешг гецаглоб1н$ .

Таблшя 5

к1жбк1сеий ви!ст ашнакшлот в електрофор етично. гамогенвих фрекц!ях гёшглоб1ну и!ноги / икг на100 нет зату . öi лка;. д = ii-I5:/

Ф р а к уТТ

Амгнакисло-. ти

ЙВ.:'- I

Es -'Z.-

Hb - 3

Цис.

Iis

Tic

Api Асп Сер Tai "Гду

2,32 8,23

■ УФ;

4,04 ; 8,60 ' 8 ,7U 11,0 : 5,85

+ сив,-¿0,28 + 0,50, +•0,46 + .0,50 + 0»45 + 0,50 + 0,25

2,7 +0,Н 8*10+0*50 5,90 + 0*50 5,17 + 0,41 10,83 +.Q.45 10,10 + Q»5Ö 10,65 + 0,45 9,60 + 0,50

2*51 : 5,ю 4,96 3,18 6.3Ö ,8,02 "13,60

+ 0,05, + 0,45 + 0,35 + 0,50, + 0,35 + 0,29. .'+0,50" + 0,45

I 2 I 3 ПГ-

ïpe $,?0 + 0,32 5,36 10,45 2,82 £ 0*21

Ала Id,30 J.0,45 7,80 ¿Ó^Ô 7,95 +.0,45

T»ç> 445 + 0,40 5,60 + 0,30 5,38 + 0,25

Jaí+Hei 10,43 i 0,50 9,70+: 0,45 7,50 + 0,48

7,94 + 0,38 5,54 + 0,40 7,42 + 0,50 Лей + 1ле ' 8,20 + 0,48 9,80 + 0,45 . 10,0 + 0,45

• Тврактф simia vix франц!яии гейоГлобШв а специф^Ч-ай для кохйоГозидухребБ<гаих. Про те, jtôi досидзузан! 6ij¡-KH Bí^pfзняпться oBiíiстон, Яериза все, йолярних ашно кисло î, для яки* всЛааовлей на!Шльи йисокйЙр!вень вар1абельноси /таблЛОД

Bççîa6e2bHÎcTb для всъого taßopy ашнояшлат встанйвле-на в вмшх 41,7 ^ 74,8}^ НШхльш вйгойй вар!абеленость покат-зана,для Арх* Гл1 J îpe ^7,6- 74,8/, найуенпа

для Аса, Ала, Вал а Ии i Лей / 41,7 -5Z,S%J+

Е1льк1свийш1ст Г^дрофобийХ шанокийлот-е б*лызста5!ль-аиа, чо св! ДЧй*ь яро консервативну д1я доб1ру вар íвн! акреиях д1ляаой И0лв«улй -íei{3ráo6iáy¿ бйШ1дйваенай г!дрофобних та яо-ляряхяа^нокислот^Р/!^ таксж не х^актеризузться значниыи aiieiBäsa4 cnpauaBöfficsi rçurпереход! Bis б1дьа низьких ф!ло-хааеяйаизс ^ynxpjeöefHKX До б1льш вщих* Величина VP /Р для вивчетих геыоглобШ.в здайэдитызя s иеках 0,56 - 0,85. Для tSi-льгост! ípaiinífi rei;orffi6ÍHiB цей покнзник дор1внш 0,60 - 0,65 /ïàfijull/. Овк!дьш is особдив1с«ь аухнокисштнаго складу г е-irarmöiniB заявляешься у sciz ipynax хребетяих в лйдс4авй дри-Пускати, да пейн1структурн{ блоки ôIukoboï юлекули /наприк-лед»_:геНов1 ¿гфорыувалн1 яки*зайяят1, перевешй),

rispti^oßHi гш1аоктлотнД аалиики, головням читай сфорнувались на раанкму.esaaí еволщН а^шга>б1ву. Дальш! незначн! зк!ви Мдрофойни* д!ляной ôiMosoï кохекуяи в zzpoqecí филогенезу Моглв сприйта удосконаленню структурно-*ун1щ1онал1>них властй-вое*еЙ reuoraoöiay*

ОДерхёв! результат ев1дчать про те, цо в!до!яи nix &аи* ц!йвй гемомюбШв вк!ды£1Сноиу Büíctí б1лывйет! au i но кислот е р!8носщ>ямаваийша. Сйряиовано з1^1ншться /зростг£/ bwÍct Ар* ïa Сер в головнях i осенях ы1норнй*5ракц1ях геюглобШв i

Таблиця 6

Ii. :ч

'■о >*

: К1льк1сний bmíст ам}нокислот в електрофоретична гомогённих фракц1ях гемоглоб!нгв окремих представник!в класу риб (мкг на Í00.мкг гидрол1аату • ' . • ■ б1лке ,' 11-15 )

'■'■ Короп

Товстолоб

Скошена :,

Кефаль-синг!ль

ЛОТ« ' 1:HB-I : к . HB-2 : HB-I х Нв-2 '."нв-í » • i . Нв-2 : ж . Нв-з t H . Нв-I ! Нв"2' ! Нв-3

" I : 2 ; 3 : 4 ' 5 i 6'. < : 7 : 8 » ! '9 . ; 10 l 11 -

Цис 4,57* 0,36 5,2* O.bO зг 5,5* 0,36 3,-0* 0,42 : 3,95* ■ 0*45 3,92* 0,5 3,9* 0,4 3,85* 0,45 3,5* 0|5 . •

; л |,з 6,38* o;2i. 3,98* 0,3 6,69* 0,27 4,02* 7,52* 0,4 . 7,45*. ' 0,35 ш :.' 8,0* О'Зб 6,58* 0|40 6,55*• - Û.45

Г fíe" .<; ,3,39* 0.! 22 3,15* 0|5 3,23* 0,24 3,27* 0,3 5,5* 0,45 . ■ 5,2* ' 0,50 .. 4,0* 0,36- ' '4,2* 0,45 4,25* 0¡38 4,50* 0,40

в '2.4* -.0,14 2,55* 0,2 4,63* 0,3 3,03* oils ■ 4,1* 0¡28 ; 3,72* 0„40( -4,53* 0,35 6,0* .: Р,25 5,90* 0,45 3,50* 0,35 ;

Ücri ¡ -•* t ' 4 »... ■ Í0.4* 0,â5 . 9,25* 0,3 12,3* û.ia 9,9* 0,3 10,8* 0,20 I2;S6* 0,3 14¿25* "0,32 12.0* . Q,¿8 13,66* 0j'35 13,70*' 0¡28

" CeJ) 1 5,68* 0¡49 , 6,69* 0|25 5,98* 0,5 6,0* o;i7 4,5* 0,4В- 6,4* 0,20 • 5,0* 0,49 7,12* , 0,50 5,63* 0,25 4,50* Q¡46

11 '

fa tr В

"fca CE

• со ~

."С ~

в t I -s?-. г ^ г .2=

ь ¡- «в •

а - . • «в " ?, » ' - " -

: . '.' ' ' ■ С ' |-< '

нн осл о«о ОСП ОГО -O-J'.-.OOI ..

оо - - - - •» ■ - - - — - .»••» - - - N1

- - ГО-J iS^OT . itb-СЛ СОСЛ -fo-o ifc^ СТЮ

СЛ-О 1+ OI+ CTI+; :-!+ ..osj-.ooqj' 1 +

(+ .. •■ 1+ м-

oto оаз oto осл ' о-о осо о<о on

"слоа ¿^ст стн "ело low сон roo

А юн M ÏO O rf^cn . ÍOiO

1+ 1+ 1+ t+ 1+ 1+

ом O® OtO' ОСЛ 0<! ОЫ O-O OH

• o- -'-- - - - - - - »•» -

■t»- foi—i ын .uto rfs-CD -co-o >t»-ro н-

ara lo i+ сл oit+ o i+ сто i+ joco

1+ 1+

OtO o CD 0<0 O^- OCT> О СО oto OOD

ГОСО HCD coto COO н{}> HCT Hrf* roo

нго свсо roi+ сосл осл oo Hto t-n+

1+ 1+ 1+ 1+ » +

' СЛ

OM OCC ОСО о^з OCT> OH OCT

». tlJ - » » - ■ - - . fo - -

• со- I&.00 >t*co coo roo ист .н- гоо> cri

CTiP» -ГОСТ OCT Ш1+ СТГО CTit^ -ОСО СО ГО

1+ 1+ t+. . 1+, 1+ 1+ .1+

>-1 ост> oto осо о<2 orf^ он

ого - « -» — » - - - • -н ост

- - rf^CT стcd roo ¿»-ел госо со- - -, it»<¡ ото сх> .стн+ CDi+ .íoo стаз >^ст

- CT 1+ 1+ t+ H- CT 1+

OH O-J Ott Oi> ООЭ ОСЛ OH

- ГО - ~ » - - - - - - - - CO Otb

со- tfc.ro coro л-о com h- — -

O-O ОСТ -СТ0Э .CT (+ О 1+ CDJS СТГО

CD 1+ 1+ W-. ОН Ш

H-

OH 0-s3 OCD O.Ê- OCD OCT OH OCT

"CO-» » • • . - • - - - - - -

ГО- COÇTI rfs-ст ^O СЛГО ГООО СОН to

CDO C3Ö3 tOI-t- ÍOI+ oo roo ОГО гост

V+ 1+ 1+ 1+ . 1 +

OCO О <2 oto OCO 0-n2 00> -Oh OtP>

- - - - -- - - - - - - - Ю — .

ÎOifc- ^.ÇD СТО COCT ГОСТ СТГО Л- степ

стел н5 OI+. спо оого оо то оо

1+ 1+ 1+ 1+ 1+ 1+ н-

ого о-о oto осп .oj^ он , od

^О CT CT<t»- 42.СЛ сон ife.05 Ст- ГОСТ?

сл i+ ст i+ осо сто сл i+ сто oto го о

1+ 1+ 1+ 1+ и-

- S2 -

ж-

ë es в

я .»9

ЯВ i/O "ж ' 3= hm« Ж II 3 ИИ1 3C xt-H

,1, * !■ § яс ЯЙ

о m -

X.D 1С яп ж T> <Z> t<2 3 sx

3S Л) .

ж> ■

-¿СЬДО rf"

o— coi

t®<00 00

io «

¡si,«:

ж .03 аю яЗ?

3S л-

да сЗм

se- ас ж

<D s» 2

■«3 се»

жз -as ¡o

13 -as

- ■■! И и«е «в

ЗЕ ж зс

« 2 .

31)

¿сых*

С£} хж

..... х> ж

ЗЕ

!S Tflo

s —,

S v3C iE» 5D

яс

JE so •«S. 3E

-«m до

H* i:

ош ; л-

ШЦЖ

да.11

oes .1

■3D

(св í

-а» Л Si,

■ж>

о gw ю ю о

а о « ы «i га

iо

O « (Й Я M ^ _ __ _ _

°i o О О О О Û* о р о о о о о" о -м+i +i+i 4*+»+-»+<-м-у.

+«-+» О О Ш О OJO О О О О

ОО О« ♦<» Ol -оол^ям

*. -Ф. о- * о

я 0> ю п иэ «о «о £> is о

л зе

яг

гс

aar >

.. ii

ilO

"я яв -3c

® 3D

Ж «s

— да-.

.ж-ж ил ж

о ш из В Ч1 «м

о о ю о

9 £0 Ю

ta га о м о m о ^ n n n Nia

о о о о о о о о о .о о о р о ни +1 +> +1 +■ -f» +» +i +1 -H +1 +1 +1 +1

SmSBS.BOSO S В 8 S S

n Œ t» <» eus to »«lOúo г> m

ta ш xa s Ф о о ом о m м юш со чг со *-«-ск « ю 2> ей io to to

ooooooooop _ _ _ +i +i +« +i +i -«-i +1+1 +Г+» +i ч-i +i

О О О О О о ООО ~ -

о о о о

■ - +H-I +1 ООО

____ _ ОО О О Ö _ _ _

Mta» -otOtfceiooMS

M Ш «от M № ID CD « ®<D aí:J> оГ

Soja to о«« о мш ю со m to

о о о о о о о р О ООООО +1-+I +1 +) +1 +i +1 +7 -+| +1+1 +1 ю о о о о о о го to хг аз м о о

¡Oí af> » . * * . А * » •

- . г- м о> р- od со tía со со со о и г- ^ м м »-«

m й о -о ô о м гг ш ю ¿S -«i

го ю еа to *-* « м na^í

OOQQOOOQOOOOOO

+1+1+1 +Í+I+I +1 +Г +1 +1 +I-+I +1 +1

ВО О "О». (О нмнпош Ю Oí О

ох f. бою »о « qi н ш cd

. — — - jQ — — » — — »

Й9 «О lO О IV Г4- О м Ю IÛ IÛ С>

ООО О'! . -Tf Ю tu 1

СО О О О Oí о w W n m xf lo

о о о о ооо о о о о роо +1+1+1+1+1 +1 +1 +1 +» +« +1 +1 +1 +1 On »nOH40 n(0n-*í Г- (D a мш тог- ш о> tvt <о н хг

si ю tt> tq мо ol ю (£> (о о о> о>

4-4

о ш мою о о со о о о се т о

■СМПЮСМСОЮ'Й'О! -«а* ю со ю О О ООО О О О Ô ООО О о

+1 +Г +» +» +» +» +Г +1 +I+-I +1 +1 я о о t- о ш ее та о» to г* о а» о» <4* СЭ Ol to » l> tû н л> 4>> IV ш

n ф ло «о (о шю г^ г- ы

-н - M

О Q Cj.o OJO Q O JO о О ID Oí О ПЮв И Ю -i» «О IOJD -СГ СП Й5

О О О О О О О о о О о о о о " ~ ......... +« +» +1+1 +t +1 +1 +1 +1

m «

о «s

•œ и.

x да о ■ч

0 t.

1 *

+Í +» +t -+|

вёв« _ __

00 Д t>- Ч1 о — СО !>

ai о» ш m м о a м п sx> io cd r^ см

■<r О Ol г> to c^

о а о

(. «s По ■с «=: o r- ï-.

çw —i V о в

в Я ^ 4

■ ê ё

^ «

£J» Ч Ж *2

X К. ф о < H Ш Ol Ч

Таблица В

К|льк1сний BMÍGT амшкнслот р е.цектрафоретично гомогенник- фракциях ' ^ •• гемоглобине ояремих прадотавник! в клаоу птах!в (мкг на 100 мкг . rjAPOfl\a¿Ty <Ндка, п » И-Ш

; Amíhokhc- 1 голуд i начни ■ ^ ; " ^н

guu I на-г* I .№»-а* ; Нв-з -I, ив-4. ; W* ;; нв-з* >-3

Цис 3,20-0,25 2,90*0,30 2,90*0,30 3,0*0,30 a,50*Q,30 2,70*0,36 3,0*0,20 ■ 2,50*0,15

ли . 9,20*0,40 5,70*0,40 4,40*0,50 8,70*0,20 5.40*0,20 0,60*0,20 6,80*0,20:8,50*0,25

Tic 7,20*0,30 8,10*0,20 6,0 *0,40 2,70*0,20 3, '0±0,3Q &,Б0*0у34. 6.20*0,40 6,30*0,50

Apr 5,0 *0,40 7,30*0,40 7,40*0,40 2.0*0,30 2,80*0,20 7,40*0,28 г 7,10*0,30 5,20*0,20 1

' Асп ¿8,0*0,85 10,0*0,50 7,60*0,60 11,30*0,30 13,50*0,50 8,0*0,15 10,30*0,28 10,50*0,30

Сер . Б,50*0,ВО 6,40*0,30 9,70*0,30 5,20*0,40 11.;40*0,40 6,20*0,25 6,10*0,20 5,60*0,20

Гл1 4,90*0,20 10,0*0,50 Ц,6*0,50 7,70*0,30 9,0*0,50 5,^*0,45 .4,90*0,40.5,10*0,40

Глу 10,3*0,40 10,4*0,40 13,8*0,50 6,0 *0,50 6,0*0,50 7,6*0,28 9,60*0,20 11,8*0,35

fpe 5,50*0,35 6,0*0,50 6,80*0,40 9,0 *0,30 6,0*0,40 5,5*0,40 5,0*0,45 6,10*0,42

Ала "6,0 *0,50 5,0*0,20 6,0 ±0,30 5,4 *0,50 5,0*0,30 7,0*0,25 9,0*0,20 8,70*0,18

Тир .4,50*0,28 5,6*0,40 6,90*0,50 5,70*0,50 6,9*0,50 4,6*0,45 3,9*0,50 4,J0*Q,50

й«Ц+Мбт 7,90*0,35 11,3*0,40 9,70*0,30 10,3*0,30 9,6*0,50 В,0*0,38 8,2*0,25 6,90*0,28

6,50*0,40 10,9*0,60 8,90*0,20 14,7*0,50 7,2*0,30 7,6*0,20 7,1*0,46 6,0 *0,40

14,0*0,50.^8*0,20 14,4*0,50 .13,2*0,50 14,6*0,60 Ц 6*0,60 Ц,0*0,48 Ц,60*0,60

н - фраршГ з нййбиьшия BUJQTOH.

Тпблиця Ь

ШДыМсний вкис* аМнокислот в елект^офорётично гомотЫих фракц!ях 1 гемоглобШв окремих «родставтж1в класу ссавц{в (мкг на 100 мкг И доол] зату б!лйа; п = 11-15)

ЙМ^НО-г Людина I Бик ! Свиня * Тюлень

КПСЛОТИ ; нв-1 ? • . ' к ; Нв-2 ! Нв-3 * 1 Нв-1 • к Нв-2 :Нв-1 ; • Нв-2* ; Нв-3 1 * нв-1 * Нв-2 ; 1ш-з ; • к Нв-4 Нв-5 V

I { 2 ; 3 ♦ : 4 1 В • 6 • ~ * 1 7 ! 8 ; ' _ ! 9 | .10. { 11 1 12 ; 13 14

Цио 2 0,20 2,434 0,20 2,430,30 2,50± 0,38 2,484 о!4о 2,804 0,50 2;В0-0,33 3,804 0,48 2,344 0|40 2,604 0,45 2,604 0,50 & V

N13 10»5-0,45 о?ёо" 10.0± о,4е Ю475± 0,40 9,84 0,30 12.34 0,30 Юьб-0,30 • 8,504 0,30 Юа424 0,28 7,204 0,30 6 ¿954 0,45 5,934 0,40

Г1с 10,74 0,30 9,204 0,20 8,200,35 7,8о4 0,20 8,0± 0,30 10.04' 0,40 .7,704 Ъ ¡25 6,04 0,40 3,604 0,30 6,404 0,00 6,374 0,50 3,924 0,30 4,544 0,35

Арг 3,26± 0,20 3,26± 0,20 • 3,80± .0,10 о'бо 4,304 0,50 3,04 0,20 6,404 О! 25 5,704 0,20 4,304 0,50 3,104 0,40 3,154 0,40 3,204 0,45 3,§о4 0,30

А с п Ю|4± 0,40 Ю;4± 0,40 II ¿2* 0,40 8,54 0,30 10,904 0,20 6,404 0,20 Пд54 0,30 0,20 9,104 0,40 10,984 0,50 н.64 0,50 8,674 0,40 7,904 0,50 .

Оор 7,20± 0,30 •Б,Э0± 0,20 5,60± 0,30 7,204 0,30. 5,504 0,28 8,00,40 Й,954 0,40 9,504 0,30 6,204 0,35 Б, 904 0,50 5,604 0,45 7,904 0,48 8,404 0,50

1 Я1 4*700.30 4,70± 0.20 4,70± 0.30 5,400.40 4,90± о: 5о 7,204 0.20 п'яп б,б'о4 П.2Гт 7,504 Г),ЯП 7,304 п.яп 7,854 П.Р.П 9,54-' П 7,804 Г) ЯП

СО-

СИ-

- 29" -

4-1 <п - МО + 1 о»«* 1-1 OiCJ r^cT 4-4- ■ ioo~ +4 аэю-av --o a> +4 Г-СО ■ oes H4

со-ч* ОТО . -M £>CO это" +1 c\tco OQ ИЧ - +1 -■ч-о 4-( Ю" с^-чр-a> -■ o» -4-1 ОЮ oo >—1 4-1 . CUIO MO* t—4

4-4 Ol юю стГо +1 £> cocao" +1 enevi cria +i ю*о" +i LO cocr cío* +1 ища. cao 4-1 CQ^P OO t—1 -

+1 с- - ЫСГ» г"о* 4-4 LO ■ +i coco г>о 4-4 ana 4-4 . COCÍ ■c^a +4. ■ отит 4-1 счо" h-+

4-1 C4Í WC5 !>0 ■w in tea +i IOIOl счсГ +t. -COCÍ C^-rt CO.O +(• ■ cncn ¡>"a 4-1 1—4 O M"

-И СО лв» • со'сГ -M tOO изо +1 сотг ¡>"o .-w .. OCT-ЮО + 1 ' • О^Ч» oí'o 4-4. -tO-ít* r-'o" 4-1 - * TplíJ «O H-

4-4 ' aso" am. ava -M v-tcej аГо -4-1 оггг- ■rfQ +4 ю-ч» coo- 4-4 OLO coa-. 4-1 U31CT rra

4-4 lO-d» +i « Ю-Ч* 4-1 m-T -И. tO: .UJ* - 4-1 oto 4-1 ОЮ

oo нч o>o г-О rj'O ' a"o" H-+ ¡NO СТО t—t

4-4 Ю СЭ>3» +1 0-Ч* +1 lOrl« 4-1 LO о-ч*- -l-l ca-^ 4-4 ¡v-4* 1-1 WIO

COO . <еО COQ. COO OQ TÍO:

+ 1 -H

ОЧ1 СП-У

caco

сэ-О wo. a>o -ч<сз ото

4 -И

с>jm ' c-a- too". +i

-14 to -X3 ПЛ 05<M

!>0 ICO

J-)

a +)

4M -Ч«-^

a —

hO coo . ->•1

О . 4-4 •Oí

О - - — ь-íO CD О'

О. "Т -

I—«Q

OCU

-ы . +1 О Ю-Ч» -<Г) - - -ч« . Г-О . г-Ю

■И +1

Л' о

C-OJ -<л

~ - W -

!>0 НО

+1 4-4

con > -ч*

7ГО D-0"' Ч<0

J-) 4-4 •

г -и ■ ti - +< из-; щ.. co-q* Н-1С0. акч. сою -<\г г>см - - - - -,.oí - . - -

;-г>о:,- г-о ООО" - МО. -wOt Р-О

5«. 13

'О

biO

Я '

ч -

., <в -" -Я«

С- г"

а . ч • ~

ч" js • . л - . <и да *j$

о ?

a s <а и

>в-

a о es

0 е..

1 ».

<э

Таблщя IQ

PtseHï вар1абельност1 аыJкокислот в геиоглоб1нах окрених представнккхв хребетаих

Аы1яокислсти ЦИч .. JÍ3 FÍ8 Apr J Асп Сер Гл1

1ндекс Bapíar белыгаст!, % 55,0 67,6 74,8 73,0 52 S 72,8 г'

Aviнокислота Тре Ала Вал+ Фен Кет 2ей+ Тле

1ндекс вар i отбельное Ti, $ ТО,5 50,0 59,4 43,6 61,2 41,7

ряду хребетних з!д риб до плазун!в, а тагах загалънкй buíct дикарбонових та основних ebsjíkqкислот /табл. ii/.

На рис. 7 дака гра&хчкао^нка suia у сп!вв1,дноаенн1 дика] бонових i основних auíнокиолот в елоктрофоретично гоыогещшх 4ракц1ях геюглоб!н1в, де ыозаа вад!лети д!лянки а лаШдьшщ 1нтервалон в значениях величин иДС/В: при переход! лщ ^^ круглоротих до класу ряб, а також BiÄ класу .риб до власу зем-новодних та в{д плавун:в до класу ссавц!в. в характер! shíh показ ника ДС/В &акц!й теч>аиерних гёмоглоб1вхв noma звдлтити вевзу cnpRüoBßEicTb: аникення величщщДС/В при переход! вгд класу риб до класу ссавцхв. Поквзник ДС/В геиоглобШз у пред-ставникхв класу птапв практично эдаящтася на тоыу a píbhí «о fi у пдазун1в* *

Виявляцться певкий взаакоав^язок.в выхнах хшяазника ДС/В í спор1дненост! $ракц1й геиоглобШл до eiche, В характер: з«1 неструктурного î ¿ункц!енального показнтйв геиогло-

6íh1b просл{джуеться обернена залеанхсть, котра збер!га£тьсн в напряыку в1д риб до ссшщ!в /рис.,8.; ? =0,84/.

На рисунку В цожна такох в1ди!тити, до ступень зыхн як спорхдненост1 до кисно, так i сп1вв1днощення дикарбонових i основних амim»кислот в толовних фршщ1ях гелогдобШв знщу-еться при переход! в!д бхльш низьких фхлогенетцчнкх хруп хре-бетних до б1льш вщих, ц| дай! дозволяйте зробитк припуден-ня про те, ко зи|нц я xliiixmoï структда! геыоглойШв в про цес! 4)1логенезу в!дбувалися HepiBHouípHo i наШльш .icrorai а

¿аолнця íj.

Покааники ri даофобнаст{ (eníвв;дяощення Идрофобних Í полярних

ам!нокислот) 1 DO/ü(сп^в^дношення дияарбонових i осиовних акйнокис-fiot) електрофоретично гомогенних фракц!й геморлоб{н*в окремих предатавниц!в

хребетних

Почаз- Люднна i Бик i Свиня ; Тюлень Í Голуб

ники Ив-1;Нв-2х:Нв-3 :Нв-1;Нв-2*|Нэ-1:Нв-2*;Нв-3:Нв-1 : Нв-2: Нв-3 i Нв-4* Н.в-5 ;одна фракц!я ■ ¡ . ' . i, • t . • f • < » Í.

NP/P DC/B 0,74 0,85 0,85 0,72 0,72 0,60 0,63 0,65 0,69 0,73 0,77 0,63 0,69 0,62 0,74 0,79 0,66 0,73 0,69 0,75 0,85 1,09 0,80 1,09 1,29 J,4 i;5 1,04

Покаэ- Качки í Кури 1 Вуж 1 Черепаха- \ Жаба трав.i Жаба cipa

ники Ив-I^ Нв-2 : Нв-3 : Нв-4;Нв-1* fls-2 Цв-3 ; Ha-I^Ha-2 :Нв-1*; Н&-2 5 Ив-I* Hb-2¡Hb-I* : Нв-2 « » ¡ « ♦ • i i ( _ i 4 • :

НР/Р ВС/В 0,70 0,66 0,89 0,72 0,75 0,73 0,65 0,59 . 0,58 0,57 0,60 0,61 0,60 0,64 0,62 1,1 1,2 1,3 1,6 0,72 0,99 1,1 0,96 1,13 0,95 1,16 1,15 1,43 1,0 1,43

Показ- ' Короп ! Товстолоб Í Скорпена | Кефаль-синг1 ль 1 Щнога

ниии Н:-1 : Нв-2* | Нв-Г i Нэ-2* : Нв-I i Нв-2 { Нэ-3* ÍHb-I* Нв-2 Нв-3 ÍHb-I31 1 Нв-2 ! Нв-3

ÍÍP/P 0,65 0,72 0,61 0,75 0,67 0,65 ,0,65 0,65 0,66 0,68 0,71 0,56 0,66 .1,47 1,96 1,34 1,90 1,36 1,5 1,90 1,31 1,55 1,90 0,93 1,06 1,32

* - годови1 фракц1{ гемоглоб{н1в»

»c/ь -

-г .

Рис. ФЬюгенетична оц!нка-зи!н в сл1вв1дноиенн! дикар-бонових í основа гас ш1нотаслот ДС/В/ в гешглосИ-иах хребетвих. « - голове: фракд! ï, - - itimpKi ЗракцП.

н •

14 '

. _ _ - V- •

• i. r ч-

1 - r

' i i - - _ '»V

Л---------------^

i 1 i

Ai 9.« до -14 16 tí ZO ВС /6

Рис. 8. .KopeiBqtäH& залога!сть 3irÍH сиор1днен0стх до кис-яю /Р50/ 1 сп!вв!дношення дикербонових. i основ-вих^нокисло» /1С/В/длнгановвих$равд!й геш-тяоб1и!в лрвдстевник!в класу риб ДД зеннавадаих /2/, wiasyHiB /3/ i рсаза1в./4/.

15.

1.0

айх могли стати причинов зм!я в ф!зинэ-х!м!чяих / вхдносна елект-зофоретична рухом!сть ¡±раздхЯ,р1 хзоелектричних :юшонен?1з/ I функц!ональних властивостях дихалгного гэиопротехду.

- ■ 2 -2. Вствчення внутрхиньоиолекулярно? рухливост!

гвкоглобхнхв хоебетяих методом Я'(Р -оелаксац!!

- 2 .2.1. Яорхвняльна характеристика знутрхшньоыолеку-

лярноУРУхлизост! електрофоретично гомогеннюс фракдхй геяоглоб1И1в .

Вивчеяня процес1в сп1н-сп!новох релаксацг? в протс?;.:5х : птетеиах фравдхй гегюглобгнлз дозволило з певшй од 1 нити нвень IX внутрхшьоыолекуляршн рухяивост!» Процёся сп!н-сп1но-зоГ релаксацЛ вивчаля одно!мпульснов ыетодикоп за спадом'зхль-' го? !ндукц1? та-за допоиогоо багато1шульснох пося1довносм, за спадом вшил туди спинового еха. В якост1 зразна на рис.9 физеден! крив! спаду в}льно1 }ядукц1Т $ранц!2 геноглоб1ну лн 1ини. д]ам. од.) " ^ ' ' г '

аа

0.4

0.05 0.1 0.15 0.2 t/ms

Рис. 9. Крив: спаду в1льноГ йхдукцП факц!й гемоглоб!-ну лшдшл. ¡¡¡PK - ивидкорелаксуючий юмлонент, ПРК - повхльнорелаксуючиа компонент/ цифрами позначен! номера фретШ/,

На.пхдставг даяих; лгтератури /Дксъоиов,. 1983;. 1заян ticos, .браков, Золкоз, Зав"яя>в, 1983/ irasua В1ды1тити: одерзан! зна-ення 4acii релакседН. св^чать про те, .до швздкорелаясувчий ошрнент спада-.вольноí íjuytoji'f в1доов1дед-реладс^|^протЬн'1э айб1дьа,_!д1ль1ГО- упановаяих í матарухлизк^ д|лшок.'гло*були. р' ■ в'язку- з ция, "час релаксант'ЩС спаду в!гьноГ !ядукц!'х" мхе

бути викор истая ий як параметр внуцр^шшзюлегуглярно? рухливост! в б!лку, що несе 1нфоруад1в про дшаШчну структуру найменш лаг-б!льних д!лянок макромолекула геиоглобгну. Анал!з час!в релаксат цИ коыпонен* спаду вйпл! ту ди сп!нового еха дозволяв в!днести ШРК до рблаксацИ - найбхльш рухоиих д1лянок глобули б!лка, год! як пов!льнорелаксуючий компонент - до релаксацП протон!в води, во входять в розчинник виасл}д°к водмевого оби!ну. Тону

в якост! показника 1нтенсивност! внутр!иньоыолекулярно1 _ динамки в найб1лыа рухливих д!лянках б!лковоУ глобулиыозе бути ги-користаний час релаксацП ШРК..

В табл.12 подан! Значения час!в ?елаксад!х.ШРХ спаду, в! ль-но!' !ндукц11 I спаду анпл!туди сп!нового еха, пкх одержан! не-, •годом ЯЫР-релаксацП для електро^оретично геыогекних §равд!й' дослхдкуваних геыоглобШв.

Пор!вняльний аналха час!в релаксацП дав жиливгсть встаг-новити, до Е кохн!й гетфОгенн!Л спсхен! геыоглоб!ну в 61 льшов та з нейшов внутрашнъошлекулярною динаи!ков. Так, в гетерогенн!й систем! геыоглоб!ну н!воги найнезщу внутрЗшньо-нолекулярну динеы!ку ыае фракц!й Нв-3, а яайб!льшу - фракц!я Нв-2. У представяшав гагасу риб наШльш низькав внутр!шньоиа-лекулярною диншчков характер ту ттъся фракцН Яв-1 / аэрон, товстолоб, скорпена/.! Яв-3 /кефаль-синг!ль/. У представад-к!в класу зеыноводних 1 плазун!в ыенвов внутр!шньоцолекуляриав рухои!стю в!др!зняоться фракцН Нв-2.. У представник!в класу птах!в фракцП геыоглобШв такон В1др!зняиться пс ргвяв внут-р!шньоыолекулярноТЕ динам!ки.. Так, в гетерогенн!й систеы! геш-глоб:иу доыашн!х кур ей внузр!шьоиолек^лярна р,ухон!сть 5ран-ц!й зростш в налрнаку Нв-2-» Нв-3 — Нв-1, в геыогйобШ дои£шн!х качок - в напрянку Нв-4-»> Нв-1 "Нв-£ — Нв-3. Показвики внутр!шньоиолекулярно1 рухокост! гемоглоб!ну голуба близьк! до в!дпов!днго: по«азник1в ®?акц1й Нв-1 геиоглоб!-н!в.донаш!х вдрей та., качок.

Спостер! гшТЬся р 1 заий р! вень внутр!шньоиолекулярно I рухо-ыост!фракц!й геноглобШву лредставнюив класу ссавц1в. В ге-терогенн!йеистен! хемоглоб!ну лвдини внутр!шньомолекулярва ¿цукан!!». фракц!йзростае в «апрянку Нв-З-* Нв-1 Нв-2. Така х спрянован!сть просл!д*увться для ге1;оглоб!ну свив!* Убика пенсии р!внеы вну!р!шньонолекул}фноТ динан!ки гецоглоб!ну характер из угться фракц!н Нв-1. В геноглоИн! грен ланды, ко го яь

см

^ £

CÍ ® E-

2 ® В аз о

о ¡D

~ 5- &■

« s —

о x е- ■< я

Й Ц S 2Г ^^ оэ

о st s « í*

s ä

в.- m Ч

2 аз o a a se - и- &

о m* с. о s о s- S

ST н4 ф

я- с о» а X

ci а

к s

<a с£ m

«f >*• — азг t-> X

Р«>»4 —•

о ч. чэ.: « п а

s 3 t-

ск а

3 я

с£ m

стгк Е-" а . ж

«mi« -

г- Ä

аг-а»

aj н- >в< u m' Ü о X я зг .

4 вт

® i—. я

о.— 01

я 3. о

"о Э о a в е»-. а- -о

« x ïw- s' Box « г: s* » л а> в ч и, ~ о га я ;

со i

ol i

m i

¡B

Ci.

m 1

s '

S : x-ra я -

cr.-.-

-35Lr-

, дз +илг

«о <£>СЧ

язо -о - - -

но

+1м СЙ

-ччэ -о

- - со -<оа но

+1 тГ

+ti-i юлг

<00 -о

- - со -<00 i—ю

■+« § zno

+1 ь-« qo

соо а>о

+t<5

<оо •«го

+•1 <

w «

но

9 ЭТО

X.. 1—»- -

НО

ж 0. +*

ca Юн

t ISO mot

in -0

.ai « -

НО

+4 00 H

АО +ÍH-

too счо

сто" азо

аз гв

•НО +11-4

too QO

гэсГ сво*

+» о +iet

Юн счёз

¡no -a - - со -

<ю на.

+1н

. _ ом

оо -о

— - - о -

-•»о >-<о

ы.

-. о. .

8 S3-

ils 2

sr-

err i

at i в»

т е. 33- о» ti § río 0« -О нО

•• •• Oí +»н COO

сп i ar Я »* *• So

m ЭС - +IH Юн CVIO Ш +1 oí оы -с, г» -но

— —

ж H 1 +»н cao tOcxJ

а - 33 юо tû * НО

a:«

CfA о p.

•е-

i «

ж. -

T »

■ зе-.

'.st

о»

+IQ

coo

+ÍH

юо

+IH

оо

изо

+tH

оо

изо'

+< H

«это

<QO

+» S:

-ЧТО'

СП -MO

+t H

оси

Ю -ЙО

<o -но

+«ia

Oto H —

W ■ »

«-Ю

—ta

H О

er « o a о

I о

MO je ar

ir ■

e2*

Иокаэники Вуж ; Черепаха Жаба трав. 1 Жаба с1ра Короп

Нв-1*; Нв-2 к : нв-1 : Нв-2 к Нв-1 нв-2: { Нв-!1! Нв-2 Нв-1 | Нв-2*

Те ШРК (СМ), 10~3ме 4,8± ' 4,49± 0,009 0,009 4,55* 0,009 4,3± 0,008 4,4* 0,009 3,5* 0,009 4,6* 4,15* 0,008 0,008 . 3,0± 3,5* 0,007 0,007

Т2 ШРК (САСЕ), мс 14,0- ПА8± 0,02 0,022 12а8± .0,019 ИЛ* 0,018- "А0* 0,б18 8,4* 0,012 13.0* 10,0* 0,02 0,02 5,5* 7,95* 0,01 0,012

ПокаЭники Товстолоб » Скорпена 1 Кефаль-синНль ; М1нога

Нв-1 ,:Нв-2* : Нв-1 1 Нв-2 : х : Нв-3 : к. :Нв-1 : Нв-2! нв-з !нв-1к: нв-2: нв-

т2 ШРК (СВ1), 10"3мс

Тг ШРК (САСЕ), мо ,

3,15- 3,7- 3,1± 3,б± 3,3* 4,0- 3,6± 3,3± 2,5± 3,0± 2,1±л 0,007 0,008 0,007 0,008 0,008 0,008 0,008 0,007 0,006 0,008 0,00Й

5,87± 8,45- 6,0± 8,0- 7,0± Ю.О

9,3±

6,5*

6Л± 8,2-

О',012 01015 0)0Н 0|013 0,бП 0,б2 . 0,Й18 0,6н 0,¿12 0',015 0|009

к - фракцН з Иайб1лып високим вм1стом б1лка.

тгшр*.{с»|),мс ю"5 А

ЗНЕННК*%УЧ земноаодн! ;^Г^ ..|гс7Ш

тгшрх(сдсе).мс 5

• !

__-------1-!•

I_: - @

Н|-УГП0Р0Т1ЫР»6Н ^^^ГаЁМНОбОДН! (»ДУ^ППМУНИ I.

— ЮО^ЦЫРМ.

Рис. 10. Фхлзгеяетична оц!нка час!в релаксацН /?£/

ШРК спаду вхдьно? вдукцх? Д/ та спаду ашл1-туди сп!нозога еха. /Б/ електрофоретично гомз-геиних фракцШ геиоглобШв хребетних; • - голов*, Н1 фрака!I, • - ¡пнорн! £ракцН.

лекя яалбхльа високкм- рхвнеы внутр1пягоыолехулярно? дпнау!ки . 31 др!зняаться францхя Нз-5, штм з напряияу обмезення внут-9!онмыодекулярна 1 руяигост! йдуть'.факц!? Яв-1у Яв-2, Яв-3 I Яз-4 /гохозна •/. На рисунку 10 дала графхчиа оцхнка фЬтогенс-тичнях в1дшн- часгв реадссацН *ПРЕ спаду -зЬтыю? хндукцЛ та спаду аыпы.туди спхнозого.еха вдеетрофорвтячяо гошгенних фракция досл!дхуваних геаоглобгнхз хребетних,Щ дал! вкелугть

на se, що в фхлогенез! вхдбувалося эахошнпрнезростання знут-рхшньонолекулярнох pyxouocTi гемоглоб!ну. Найб1льш значн! в1д-ыхни вн утр i пньоыолекуяяр но Y динамки ге«оглоб!ну прослхДЕують-ея при переход! вхд класу адглоротих /шнога/ до класу риб, в1д класу риб до класу зеыноводних та в1д класу плазун!в до класу nTaxiB. У предстазншив класу ссавц!в пор1вняно з предстал-никаии плазун!в зм!ни в!дпов!дних показкикхв геыоглобхну не та-кх значн!, що коке св!дчати про стаб1л!зац1ю структурно-дина-uí4hhx параыетр!в reuowio6iHy на певному етап! флогенеза хре-бетпих. ' • ,

2.2.2. Зв"язок внута!шньоиолекулярно? динамiки фрак-д!Я геиоглобхитв зУх&ункцхональнов акттанхстю

31ставлення показдик1в цолунасичення фракц!й гекоглобШв киснеы а результатами ЯМР -релаксахц i дало uosnmicTí встанови-ти певний взаемозвиязок míe станок динвм1Чно'1 структури б1лка та його .фунвдхональною.активнхстп: чип цента внутрхиньоыолеку-лярна динанхка геиоглобшу, тик виде його спор!днен1сгь до кис-но.

На рис. II ,12 дана граф!чна oniHKa залежностх полунаск^-чення фракц!й гсчоглобШв киснем В1Д 4aciB релаксадП спаду в1льно! 1ндукц:í та спаду аплхтуди сп1нового еха, що виранено в логарифухчних величшах. На пхдстав1 цих результат!в ыокяа пргшустити, що однхею а.причин pi3Hoí функционально í активност! франки reuorm6iHÍB моке бути, поряд 3i сзруктуршши особли-востяии фракц1й, р!зна !нтексивнхсть хх внутрíшъоцо лекулярноi рухошстд. Очевидно, чгаг вона никче, тим noBiriiíiime зд!йснве-ться к.-*, т -шнфэриацШий nepexifl при дезоксхгенадй' геыоглобхну. Вщповхдно, гемоглобин з б!льш обмекеною внутр!шньомо-лекуляраов динвихкав будуть мати б!льш високу спорхдненхсть до кисню. Така аакояоьчрнхсть прослхдеугться в гетерогенних систепах bcíx дослхдкуваних геыоглобШв.

Б0рш1ялышйанал!з одерааних даних дозволив встановити певну в1дпов!дн1сть у фхлогенетичних особливостях знутрхшьо-молекулярнох рухоыост! фракц!й геиоглобхнхв та íx спорхдненост! до киснв. Прослхджуеться .пряма хсореляцхйна залегнхсть в хер актер! зц!н покааника полунасичення фракц!й геыоглобШв киснем ! внутр1щньо11оаекудярно5[ рухомост! £ракц!й. Коеф:ц!ент кореляцИ' г = + 0,9 /р>98£/.

1.6 1.4 1.1 10

р5о

i »1 ii

-1.-., I-

И и

№ ь

4« 06 Ов 1.0 12

' ■ ' -

1*4 *«Т»

1.6 1.4

\г и

Е^РвВ

I I_I_I_I_I_и.

о.б оа ю 12

й4 0.6

06 1.0 и 14

ЦТ,

ЦР5о

г?

1.4 06 0 в 10 11

ЦТ,

Рис, II» Роапод1л величин Р50 в1дпов*дао до час1в релаксацН /Г2/ ШРК спаду в!лыю* 1идукц|* /«— / та спаду гшплНуди сп1-кового еха / для фракц1й /позначен! вдмереши/ оч>еиих геиоглобШв храбетних: А - вдини{ В - гренландського тюленя; В - доиадш1х качок? Р - вурей.

см ■

и. ■>

и---и

ft,!'

-Ч'

tít '.f

а—:>.■■■.<.

1.6 (.4. '

12 10

-j-* * i

• 04 be ое lo

tyso й

tr-r< m

-J—i—j—■ i i

igPso

ог b4 OS ' 06 ' 10 12

' 1.4

и lé

02 04

0,8 ).o кг

1.0

-1-1_I_I_' ■

о г

04 06

о,в ю

* Рис. Í24, РЬзпод1л величин Р50 в1дЯов1дно до час!в релаксацИ ^^ cliony Bijibiioï 1ядукцИ /•— / Та спаду аипл!туди спЬювого еха /о— / дли fpojcuiif .о tip eu tri геыоглоб!н1в хребетних: А - черепа-xrt; fe - жпби *рав"п!го'1{ В - ко$ал1-сииг1ль$ Г - м!нОги.

уть ц!ех залеаност! полягаа в тому, що при переход! в!д ниж-их ф!логенетичних труп хребетних до вкцих зростаа вяутрхпыьо-олекулярна динамика фракц!й геыоглобШв /зокрема» з головних раш^ях/ 1 разоы з тш знихуаться 1х спор!днен!сть до кисни рисДЗД

Ьд Рэо

1.8

1.6

1.2

1.®

ЬдТг

Рис. 13^ Яореляцхйна залеянхсть спорхдненост! до кисню Л>5(3/ в!д вну^шьоюлекулярно? рухошстх Д^ ШРК спада ампл1туди сп!нового еха/ для головних 4ракц1й геаоглоб!нтв предстазник!в . кладу риб Д/, зеыноводних /2/, плазун!в/3/ та птах! в А/.

Такии чинои, результата дослхдяень св!дчать про те, до в фоцес! Ф!логенезу йсов законом!рнийрозвиток структурно-дина-ичних 1 функц!оналъних властивостей ге1!оглоб!ну. Очевидно» в результат! аы!нокислотних зашн ! внутр1шяьоиолекулярних пере-5удов зу1ннвалась внутрхиньоыолёкулярна динаы!ка геаоглоб!ну га його функциональна активность» Зм1яи киснево-транспортяих зластивостей геыоглоб!ну в!дбувалися в напрямку л!двиценн0 зфективност! даяого б!лка на етап! розвантазензя в тканинах*

1нал!эувчи результата доел!даень можна просл!дити певзе ¡получения флогенвтичних зи!а гешглоб!ну ! шэрфофункц!оноль-юГ еволпц!I хребетних. В результат! класячних пор!зняльяо-

анатои1чних, онтагенетичних i палеонтолог1чнкх досл1дкень-в1до-ui OCHOBHÏ напряыки i шляхи еволвцН хребетних / C&tùu> ,1986/, Вих!днов предковов формою"^ребетних рахувтъся давя! безщелешй,' в!д яких вшикли пргаЛтивн! безщелешп, то дали початок давни' рибаы. Подальша еволшц1н привела до появи хрящових i кхстко-вих риб, як! активно заселяли вода! б1оцекози й дали велику pis-ноыая!тн1сть спецхаизованих форы, що об"вднущтъ б!лъше 60-тй сучасних радхв.

Адалтац!я риб до складних, ы1нливих умов зовн1шнього сере-довища, коли на киснево-транспортн! властивост! гемоглобхву впливають pisHi- екалог!чн! фактори / зокреыа, температура, вы!ст киснв у вод!, П солон!сть, глибина i швидктсть плину/, сдрияла розвитку структурно-динау!чних, властивостей гешглобхну в налрпаку п!дтриыання ёого висонэ ï слорхдненостх до кисно..

Подальша еволюц!я зребетних була пов"язана зх зыхною водного середовща 1екування казешгос. Пристосувоння до' названого способу життя / дихання аткосфернш повхтряц, подолання ipsBi-Taniï та ïhffli/ супроводжувались р!зкиы п!двищенняы р!вня орга^ н!зацН. Це безпосередньо вообразилось й на иолекулярн!й ево-люц! ï геиоглобхну. Вхдзначено piskitô с-фибок н!к кдасоц риб i клесоы эеувоводних з розвсткои як с5руктурнЬ-диаш1чних, так i функцхональнкх властквостейгедоглобшу. £еаоглобш стаз б1лы ефективциы на eïani розввнтааедня в тканиаах.

Гювна . неаалезгпсть bîâ водного сер.едовиза з"явкласп у плазун!в. Проте, як i зеиноводнх, рептил! ï кали недовершений ite-та(3рл1зц, цо визначахо.ся noüKxioaepisien, тобто задалислр температуря siza. зйд soBuiouix уиов. Такий Х1Д розвитку хребетаих вплшув К на структурну .оргсаизадхв ыолекули ;геыог,лоб1пу. Роз-в«ток,cîpyr.Typîio-дvaci'iчштх i функцхо.цальнпх властивостей г.е-гоглобхну йшов без значних стрябкхв nix класаыи зеыноводних î плазунхв, :

Здгш!сть aiÂSpiïiyBaiîî npcTiflHy теыпсра^уру т!ла Исторично с клалась незалеано у гаыойотерь-нкх - птаххв i ссавцхв. у птах!в В1фобгася високоефэктивний иеханхзи дихаяня, для .чого став потр!бнш досить !нтенсивний ыетаболхзы. Це такая сгдобра-зилзсь на розвитку геыоглоб1ну. Ставея настулкий рхзкил стрибок з посклениы ррзвкткои структурно-динш!чних ! функциональных парадетр!в геиоглоб1ну в Toiiy к непряику, що у .предегавндкхв попер едн!х клас!в.

у ссавц!в сфорыувався радикально новий i б!льш узосконале-:ий тип розмноження - живород!ння та вигодузання палят. В ai2 pyni хребетних розвиток геыаглоб!ну иов сво í ф!логенетичй особ-:ивост!, що.проявилися, головним чиноы, на р!зн! структурного актора. Разе« з тип нала íiicae деяка стаб!л!зац!я динаы!чних i ¡ункц!ональних парамегр!вгеноглоб!ну, -

Таким чином, в процес1"филогенеза йшов закошнирний розви-ок структуру их,i динамхчних i функцтональних властивостей гемо-лоб!ну. Очевидно, еволвцхйаа icTopíH гемоглоб!ну являа собою укупн!сть триз.алих пер!од1з, що характернауються bíjihochob ста-:1льн:стл i переыежувться пер годами пор!зняно ивкдких; зм1нювань.

Розвиток еволяцхйнйх уявлень про ф^муваняя структура i Функ-;ií гёотглоб!ну>даз аожлйв!сть кране зрозуи!ти молекулярн! основи ЯологхчноГ eSójmaií f. виявити занэнои!рност!, чо визначвють роз-¡итак структур но-$ункц! онельних взавыозв"яз к! в як а гемоглоб!н!, ах ! в 1нших 61 лига. '

• ; - В ЯСНО ВК И

1. Характер в!д1«н. в спор1дненост! до кисив головнях 1 «íHop-:их елбК1рофореКтчншс:>фравд1й}гешглоб1н1в у представних!з р!зних :д&с!в хребетних мае ввдову специф!чк!сть i ыояе бути проявом ¡ироти нории реакцЛ органам у на ы!нлив! уиози середовища !сну-анно, . ^ 1 ; ■•-•■

2. Вставовлеяо, щовхарвктер! зм!н спордаеност! до киеяв оловних фракция гемоглббШв просл!джуеться певна законом 1рн1сть: ниаення спор!дненост! до киенп при переход! в!д б!льа ндаьких |!ллгенетичних груп хребетн!« до.б!льа вящих. Яайб!льа значн! зм1-и в спор!дненост! Й1акц1й геыоглобШв до киенв в!дм!чаються при :ереход! в!д класу риб до класу Зеыневодних, а такс* в!д класу лазун!в до класу птах!в.

3. Показано, а» гл!козилхрування а одн!ео а причин поииреяня еж гетерогенное*! геиагдоб!н1в i являв собою ун!версальний ме-:ан1зы íx ыодиф1яац1йяаГ м!нливост1, осniльки спостер!гаеться у cix групах хребетних, в!д круглоротих i риб до ссавц!в.

4» Видова специфичность аиiно кислотного складу геуоглоб!я!в буяовлека, перш за все, в!дм^вш/й в к!льк!снону ви!ст! полярних а!нокислот^ р!вень ва!сту г!дрофобних ам!нокизлот в б!льа яэнсер-ативний. В!дсутк!сть значндас в!дм!н f заиэно«!ркостёйв к!льк!сао-у buíctí г!дрофобних еш!нокисхот, а такса в сп!зв!двоаевн1 г!дро-

фобних 1 полярних а^нонислот в ге«оглаб!нах при переход! в!д бгльш низьких ^логенетичних труп хребетпих до б1льи вицих дозволяв зробити припущення про те, що основа! г!дрофобн! дхлянки ыолекули гемоглоб!ну, в тому чиол1 вхдпов!дн! аа стабШзацгю 1 функцхонування гена, фори увалке я на сааих ракнхх еталах ф1дог? незу.

5« В!дыхни гемоглобШв в к1льк1сноыу вшст1 бхльшоси нокислот.е р!эноспряыованиык. Слряиоваяо зи!нэзться вы!ст Арг та Сер /зростаг в напрякку в!д круглэротих 1 риб до клас^ птаххву та загальниЁ В1лст дикарбонових ! осковних шанокислот. За вик-люченнян гемоглобину ихаоги, в характер! зу!н сп!вв!дновення дикарбонових I основнйх аы! ко кислот в склад! тетраыерних геыогло-б1н!в у преяставник!в 1ниих класхв хребетних просл!дкуеться зни-ження даного показника при ступеневоцу переход! В1Д класу риб до класу .сеавц!.в.

6. Встановлена в1дпов!дк*сть змш сп1вв1дноиення дишрбоко-вих I основних аигнокисдот в головних фракц!ях геыоглобШв зы1-наи 1х спор1даеност1 до кисно» Р!вень фоогенетичних в!до!н В1Д-швиних сзруктурно-<?ункц!ональвих поназникхв неоднозначвиЕ. Най-б!льп знача! зи!ни в!духчаються при переход! вхд класу риб до клг су зекноводних.

7. Вперве за даники ЯМР-релаксац!Т в протокних системах еле! тро£оретичних драгапй геноглобхнхв Остановлено, со внутр1шньоио-лекулярна динаахка геиоглобШв характер из уе тьс в фхлогенетэтнш.' и особливостяцк.

В прочее! фхлогенезу-вгдбувалэся законокхрке збггьзеннк внут р1шнь01юлехулярно"1 дипашки геыоглобхна. Найбхл'ьш 'заачн! зыхни в рхвнх внутр!сньоиолекулярно! рухоаоот! гекэглоб!н1в проелгдху-ються при переход! вхд класу круглоротих до класу риб, в:д класу ркб до класу зеиноводних те вхд класу плазуихв до класу птах!в.

8. Вперве показано, но м!е станок динамично: структур» геыо-глоб!ну та йога функциональной активн!сто просл!джуеться певний взаамозв"язок: чии менша внутр!иньоиолекулярка динаыхка* б!лка, ткм б! льва його спор1днен!сть до ккенп. • ' '

9. Встаяовлена вхдпо^днхеть фхлогенетичних особливостей вяутр!ЕНЬоиолекулярно1;динаы !ки,гелоглобШв та IX спор!дненсстх до ккгню. В процес! ф!логенезу йдов зшгоноихрнкй розвкток структурно—дкнви !чнкх ! фунюйональних властивостей геиоглобгну. ВIд-в}чен1 найб1льг значн! еволпиШ! . с*ркбки вхд класу рцб до хсласу

ятозодкях i зи плазукхз до клее у дтаххз, а тахсх деяка ctatíf-'зацхя етрукт;фн0-дункцх0нальних-парацетр1в ге»гоглоб1ну пря пе-:ходг до -класу ссазцхв.

Очевидно, до за i ни с тру ктур н а-д i ч н их зластизостеЗ revo-:осНну та /.ого спорхднекостГ до киска з процес! фхлогенезу з1д-'зал'лся з напр янку, я кий сприяв б!лъа ефектившЯ зхддачх киснв аяинаа. ..

Слисок coÚít*- оиубл!коваяих по те«} дясеотахН'--

. Сухомлинов Б.-5., "Дацкив М.З., Коробоз З.Н., Демчук В.В. ,.Ко-яошэнко С.З., др.•Биохимическая-'эволюция гемоглобина и мио-глобина // Ш Всесоюзный биохим.-съезд: Тез.дскл: ,.. т. I, Рига, '1974.С. 15.

. Соркина Д.А'., Ксношенко C.B. О применении метода гель-фильтрации.' з тонком слое сефадекса для-определения молекулярного веса альбуминов сыворотки крови // Прикладная оиохкм. и'микробиол. - 1975. - т.- XI, > 5. - G. 792-797.. . Ксношенко C.B. Аминокислотный, состав и сррдстзо к кислороду ** геагаглобиноз' домашних уток-// Укр.йкохим-.ж. 1986. - т. 58, 5, с. 69-71. '

. Соркина Д. А., Бородина Я.Я., Яоношеняо С.З. Исследование фй-зико-хишческих свойств и частичной -Я-кснцёвси аминокислотной последовательности, альбумина .сыворотки. крови кур..// Журн. эволюц.биохим. и физиол. -.1978., т. Х1У, » 5,- с. 422-427. Ноношенхо C.B. 1зоелектричш спектря та' спорзсдненхстьдо молекулярного кисню гемоглобхнхв домашнгх качок //У Укр. dtoxiM. з'Х зд: Тези допоз.', ч. 2, - Киг.н, 1987. - С. 14. , Коношенко GiВ.; Аминокислотный состав и сродство к кислороду гемоглобинов кур // Дел. э-ВИНИТИ, $ 1650-79, IS79. ■ Коношенко C.B. К вопросу о структурной гетерогенности гемоглобина морских рыб // йурн. эвол.биохим. и физиол4 - IS87. -?. ХХШ, » 3. - G. 41.

Соркина Д.А.-, Коношенко-С.З.,. Явлен В.Н. Особенности аминокислотного состава альбумина сыворотки крови кур.// яури.эвол. биохим.. и .'физиол.- - 1978. - т, Щ, с. 294-295.

9. Коношенко C.B., Лаура Т.А. Изоэлектрические спектры и пептщ ные карты главных электрофоретических фракций гемоглобина домашних уток // Укр.биохим.ж. - 1988. т. 60, № 2. ~

С. 78-81.

10. Коношенко C.B. Изоэлектрическая гетерогенность гемоглобина домашних уток // Укр.биохим.ж. - 1988. - т. 60, № 5.

С. 72-74.

11. Соркина Д.А., Коношенко C.B., Бородина Н.И. Особенности структуры и физико-химических свойств альбумина сыворотки крови гибридов кур // Ш Укр.биохим.съезд; Тез.докл., ч. 2, Донецк, 1977. - С. 198-199.

12. Коношенко C.B., Богдасарова Л.А. Возрастные особенности содержания гликозилированного гемоглобина,глюкозы и пировино-градной кислоты в эритроцитах гибридных кур // Вестник сельскохоз. науки. -1989, №11. - С. 159-160.

13. Коношенко C.B. Сравнительная характеристика изоэлектричес-ких спектров и сродства к кислороду гемоглобинов кур и домашних уток // Деп. в Укр. НИИЯТИ, 1993.

14. Коношенко C.B. Поргвняльна характеристика структурно-функ-цхональнм гетзрогенност! гемоглобгнхв хребетних // ХШ Укр ,ф1з10Л. з'Узд: Тези допов., т. I, Khïb, 1990. - С. 163.

15. Коношенко C.B. Изоэлектрическая гетерогенность и сродство

к кислороду гемоглобина кур в зависимости от возраста // Ук биохим.ж. - 1990. - т. 62, № 5. - С. 90-92.

16. Коношенко C.B. Структурно^-функцХональш властивостг гемо-глобхнхв двох вид/в земноводних // У1 Укр.бхоххм. з'^зд: Тези допов., ч. I, Ки1в, 1992. - С. 14.

17. Коношенко C.B., .Чмелёва С.И. Структурно-функциональные cboî ства гемоглобинов двух видов рыб: карпа и толстолоба // Бис полимеры и клетка. - 1991. - т. 7, № 3. - С. 73-76.

IB. Толкачёва Н.В., Коношенко C.B., Левачёв H.H., др. К вопросу о функциональных свойствах белков'крови у высокотренированных спортсменов // Космическая биол. и авиакосм.медицина. -1991, » 5. - С. 15-17. .

19. Berzbsr.sky Z.Y., Koncshenko S.V., liofcoz V.L., Ostoloveky E Study of the effect of protein dynamic state on desoxygena tior. of haemoglobin fractions // ZV Internat.conf. о-Г-Мс.р-netic Resonance in bioi, systems. Jeru.sp.len, Israel. -1=32. —TP, 219.

. Herzhansky M.V., Konosbenko S.V., Sunevich A.V., Ostolovsky E.M. Я-NMR-relaxation at "transition oi haemoglobin // XV Inter-

■ nat. conf. of magnetic resonance in biol. systems, Ierusalem, Israel-.- 1992. -P. 219.

- Коношенко C.3. Внутримолекулярная подвижность и сродство к кислороду гемоглсбкнов среднеазиатской черепахи lestudo Horsfieldi . и ужа водяного Natrix tesseilata . Биополимеры и

клетка , 1993. 9, 5 б, стр. 47-50.

- Коношенко С.В., Байала Иссо. Сравнительная характеристика внутримолекулярной подвижности и сродства к кислороду гемоглобинов в ряду позвоночных. Биополимеры и клетка. 1994, 10, .7-2, етр.72-74.

Информация о работе

Коношенко, Светлана Владимировна
доктора биологических наук
Львов, 1994
ВАК 03.00.04

Автореферат

Похожие работы