Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительная характеристика действия этанола и ацетальдегида на ферменты печени и почек при беременности

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Сравнительная характеристика действия этанола и ацетальдегида на ферменты печени и почек при беременности"

ЛШНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР

ЧЕЛЯБИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

СВЕГЕНОК Ирина Романовна

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕЙСТВИЯ ЭТАНОЛА И АЦЕТАЛЬДЕГИДА НА ФЕРМЕНТЫ ПЕЧЕНИ И ПОЧЕК ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

(03.00.04 — Биохимия)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ЧЕЛЯБИНСК - 1981

Работа выполнена ц О$|0!Йиордена Трудового Красного Знамени госу-- дарственном медшдаском институте имени .М. И. Калинина

НаучньГй руководитель: доктор медицинских наук, профессор К. Н. Груздева.'

Официальные ошюненты: доктор медицинских наук, профессор Л. Ф. Панченко

доктор медицинских наук, профессор Н. А. Глотов

Ведущее предприятие — 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт имени Н. И. Пнрогова

Защита' диссертации состоится _>>___, 1982 г.

на заседании специализированного Ученого Совета К. 084.04.02 Челябинского государственного медицинского института (г. Челябинск, ул. Воровского, 64)'

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинского государственного медицинского института (г. Челябинск, ул Воровского, 64)

Автореферат разоедзн * Н СР СПр С!/1 !■!_ 1982 года

Ученый секрегирь специализированного Совета- кандидат медицинских наук, доцент

К.'М. Лебедева

,i7"i ОБЩАЯ ХАР&ЛЕРИСТШ. РАБОТЫ

' —Актуальность проблемы. Лрогрессирущеё распространение хронического алкоголизма и связанный с этим экономический и моральный УЧерб, наносимый современному обществу, превратили проблему, алкоголизма в одну из актуальных в современной наркологии. Важность проблемы подчеркнута в ряде постановлений Совета Министров СССР, которые предусматривают,наряду с изучением социальных вопросов, связанных с алкоголизмом, расширение научных исследований,, направленных на изучение патогенеза, терапии и профилактики алкогольных заболеваний. За последние 15 лет обозначилось самостоятельное направление в изучении женского алкоголизма, который отличается быстрым формированием физической зависимости, более эло-качественнш течением с частыми рецидивами и неблагоприятным прогнозом (Г.Н.Герман, 1971; Ф.Ф.Гордееня, 1971, 1974; А.А.Абаскули-ев, Г.А.Султанов, 1976; М.Х.Гонопольская, В.Р.Шлейфер, 1979; V.L. Xdndteci , 1972; M.Keller , Т. Hfron , 1974 и др.). Имеются данные о неблагоприятном т?"иянии злоупотребления алкоголем на ге-неративнш фушидеи женского алкоголизма, а такяе на развитие плода и потомства. Поскольку в период беременности снимется устойчивость организма к воздействию токсических веществ, то возможно не только прямое, но и косвенное действие алкоголя, обусловленною тeim изменениями, которые возникают под его влиянием в организме матери (В.И.Бодяжина, 1963, 1964; А.А.Летучкх, 1969; В.Д.Дульнев, 1971; С.Д. Ulleleod, 1971; L.G. Hannetal , 1975; Rawat Arun К. , 1979).

В настоящее время не стаивает сомнения тот факт, что этанол обладает выраженным токсическим действием на организм, результатом чего является нарушения функции внутренних органов, б том числе печени и почек (А.Г.Гукасян, 1968; И.В.Стрельчук, 1973; И..1.

Пятницкая с сэавт., 1977; Е.Б.Нашкапг, Н. 1972;

С.8. Ъ1Ъег, .1966, 1973). Однако механизм токсического поражения стих органов еще не достаточно изучен, а'работы, посвященные изучению метаболизма почечной ткани при алкогольной интоксикации единичны и весьма противоречивы. Спорным остается вопрос и о роли ацзтальдегида - основного метаболита этанола в генезе основных проявлений алкоголизме^ В связи с этим представляло интерес сравнительное изучение активности ряда ферментов печени и почек при воздействии на организм Животных атанола и-ацегальдегеда.

Цель и задачи исследования*. Все вшеизлсшенное' псс/:рии:о основанием для проведения эксперимента, целью которого' было изучение на крысах-самках динамики активности не исследуемой ранее констелляции ферментов углеводного обмена в процессе развития хронической зтанольной и ацеталвдегидаой интоксикации, а также при беременности, протекающей на фоне предварительного воздействия на крыс этилового алкоголя и его непосредственного метаболита - ацетальдегида.

Исходя из этого были определены следующие задачи:

1. Изучить активность глшозо-6-фосфатазы, фруктозо-1,6-ди-фосфагазы, кислой и щелочной фосфатазы и глнжозофосфагизомеразы в пеиени и ткани почек у крыс при воздействии этанола.

2. Изучить активность тех'ке ферментов в печени и почках в динамике хронической ацетаяьдегидной интоксикации.

.3. Изучить активность специфических и .неспецифических фосфат аз, глюкозофосфатизомеразы в печени и ткани почек'беременных крыс с предшествовавшей алкогольной интоксикацией.

4. Изучить активность Ьшеуказаншх ферментов в-печени и почечной ткани у беременных животных с предаествовашшй ацетальде-г.чдной интоксикацией. .

Ь. Определить актиьность кислой и щелочной фосфатазы, а также глюнозофосфатизомораэы в сыворотке крови при всех исследуемых состояниях.

Научно-практическая ценность и новизна работы. Значение исследования данного спектра'ферментов, состоящего из глюкозофос-фатизомеразы, специфических и неспецифических фосфатаз позволяет в определенной степени судить о сдвигах в процессах глюконеогене-за, гликолиза и косвенно об условиях для синтеза макроэргов в печени и почках при алкогольной и ацетальцегидной интоксикациях как у беременных, так и небеременных животных. Такие исследования печени при беременности ранее не проводились. В почках же эти ферменты при воздействии на организм ацетальдегида не изучались не только у беременных, но и у небеременных животных. А ведь этот . орган, выводящий.из организма токсические продукты, несомненно подвержен их действию, особенной в условиях беременности, когда кроме введенного ацетальдегида или.продуктов его метаболизма выводятся и эндогенные токсины. При беременности метаболические процессы в почках не .'исследовались и при воздействии 'этанолу, что представляет не меньший интерес, особенно в сравнении с печенью -основным органом',' обезвреживающим токсические вещества, поступающие в организм. ■ • '.'■'■• ■

В результата проведенного исследования показано, что все испытанные наш виды воздействия на животных приводят к более выраженным изменениям активности ферментов в почечной ткани по сравнению с'печенью. Впервые получены данные о динамике'определенного спектра ферментов при длительной алкоголизации животных в сравнении с ацетальцегидной интоксикацией. Ноеым является а то» что впервые изучено влияние различных сроков алкогольной я ацетальдегидной интоксикации на метаболизм данных органов у живот-

них с наступившей беременность!).

Установлено, что воздействие этанола и ацетальдегида вызывает в метаболизме печени и почек изменения, сво/стьеннге гипокси-ческому состоянию, при этом усиливаются гликсип.тические процессы, а также активизируются глюконеогенные ферменты. Причем ацетальде-гид не всегда вызывал сдвиги аналогичные действии алкоголя.

Следовательно, пути метаболизма этанола и ацетальдегида различны, что особенно ярко подтвердилось в опытах на беременных жи-.вотных с предварительным введением этих вецеств. Установлено так-зе, что при беременности, развившейся после длительного введения исследуемых токсических веарств, активизируются компенсаторно-защитные механизмы организма, что особенно выражен.' после воздействия ацетальдегида.

В работе приводятсп данные, обосновывающие эги положения, которые вносят новое в изучение вопросов механизма алкогольной интоксикации путем расшифровки отдечьных звеньев метаболизма печени и Почек при длительной интоксикации и доказывают фазовый характер найденных изменений. А это в сво» очередь имеет практическое значение, поскольку должно'учитываться при изучении соответствующих интоксикаций на производстве (ацетальдегид) и в быту (этанол), а таги® в акушерско-гинекологической практике,, поскол* ку повышение компенсаторно-защитных возможностей организма при беременности после воздействия токсических веществ, монет привес ти к истоденкю их и срыву в период родов, когда напряжение их 6} дет особенно велико.

На основании проведенного исследования подготовлена методическая разработка для проведения практического занятия по патофизиологии со студентами третьего курса медицинского института на тему: "Изменения в печени и почках при экстремальных состоя-

!иях" (изменения активности неспецифпчзских фосфатаз при дейст-1ии токсических веществ).

Апробация работы. Основние положения диссертации доложены: ia Юбилейной научной конференции Омского государственного меди-(инского института, посвященной 60-летию Великой Октябрьской социалистической революции (1977); на зональной научной конференции ю химии и химической технологии (г.Тобольск, 1977); на третье!.« ¡сесоюзном симпозиуме "Структура, биосинтез и превращение липндои : организме человека" (г.Ленинград, 1978); на 1У Всесоюзном био- ' :ш/ическом съезде (г.Ленинград, 1979); на третгэм Всесоюзном сиы-юзиуме по медицинской этимологии (г. "i'-трахань, 1979); на Респуб-гиканской конференции "Вопросы гигиены и профпатологии в сеязи с развитием нефгрхим!»и в Сибири" (г.Смен, i960); на Всесоюзном сим-юзиуме "Биохимия алкоголизма" (г.Гродно, 1980); на втором Есе-ююзном симпозиуме "Структура и функции лизосом" (г.Новосибирск, !930); на второй итоговой научно-практической конференции ЦН11Л (мского государственного медицинского института "Актуальнее во-[росы экстремальных и терминальных состояний" (г.Омск, 1901). •

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных ра-;от. _

Объем рабо?н. Материалы .диссертации изложены. на 106 странных машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора ли-'ературы (2 главы), четырех глав собственных исследований, заклю-¡ения, еыво.дот, и указателя литературы, включающего 222 отечест-¡енкпх и 145 иностранных источников. Диссертация иллюстрирована | таблицами к 21 рисунком. .

• Материалы и методы исследования. Работа бгаа выполнена на :70 белых крысах-самках массой 150-220 г, содержавшихся на стан-дртном пищевом режиме. Животные всех групп находились'б одина-

о • •

ковых условиях, из них: крысы одной опытной группы пслучали этанол в дозе 1/4 №¡50» другой опытной группы - ацетальдегид в дозе 1/4 контрольные животные получади в эквивалентное количест-

вах дистиллированную воду. Для получения точно датированной беременности через 15, 30, 60, 90 и 120 суток после начала эксперимента часть крыс каздой группы спаривалась с интактньми самцами по общепринятой методике (Я.М.Кабак, 1968; И.А.Эскин, 1968) и подвергалась исследованию на 19-й ¿*,ень беременности, а остальных животных забивали путем декапитации в вышеуказанные сроки эксперимента. Актиеность ферментов определяли в печени, почках и сыворотке крови. Определение активности глюкозо-6-фосфатазы (3.1.3.9) проводили по методу M.a.Swanson (1955), фруктозо-I,6-дифосфатазы (3.1.3.II) - по методу, описанному Ю.Г.Юровицким-и Л.С.Мильман

- 41

(1967), кислой (3.1.3.2) и щелочной (3.1.3.1) фосфатазы по методу 0.¿.Bessey .O.H.Lowry ,M.J.Brock (1946) и глюкозофосфатизомера-эы (5.3.1.9) - по методу Б.Ф.Коровккна (1965).

Статистическая обработка полученных данных проведена с вычислением ■средней арифметической (X), стандартного отклонения средней арк^метичесхой (а) и с установлением степени достоверности (р) по таблице СтЫодента (Й.А.Ойвин, I960).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСЩЭДИЕ

Проведенными исследованиями установлено, что при алкогольной интоксикации на 15-й день исследования в печени увеличилась активность глгокоэо-6-фосфатазы и щелочпой фосфатазы на 26fi и (соответственно», способствовавших выходу глюкозы в кровь; Поскольку запасы углеводов в почках более ограничены, чем в печени, то здесь активировался и другой источник углеводов - процесс глю-кснеогеиеза. В пользу этого говорит повышение активности "клгаче-

вых" ферментов конечного этапа гляяснеогенеза - ГлвкозЬ-б^фосфа-тазы На 31% и фруктозо-1,6-дифосфатазы на 22%, а такёе глйкозофос-ф&.Тйзомеразы.на 12а (р ^ 0,05 во всех случаях). В го же время в печках, вероятно, происходили определенные структурные нарушения, так как повязалась активность кислой фосфггтазы на 17% (р < 0,01). По-видимому, в начальный период формирования хронической алкогольной интоксикации з организме подопытных животных, как при любых экстремальных состояниях, возникает неспецифическая реакция со стороны системы гипофиз - кора надпочечников с последующей усиленной секрецией глюкокортикоидоа (П.Д.Горизонтов, 1960; В.Н.Дзяк, 1930). А при поступлении в организм токсических веществ усиливается необходимость в дополнительных затратах энергии на их обезвреживание, что Вызывает включение всех механизмов для удержания нормального уровня гликемии (Л.Г.Лейбсон, 1962).

Возникающая кэ этом фоне беременность вызывала еще более ви» рисеннкз изменения в печени, поскольку и в этом органе повышалась активность глюкозофосфатизомеразы на 38/5 (р< 0,001), В условиях беременности, ко где. запасы гликогена в печени снижены (С.А.Масай-лова, 1974), з значительной степени усиливались дополнительные пути синтеза глюкозы, а именно глюконеогенез. Это подтверждается достоверны?.! повышением активности глюкозо-6-фосфатазы (на 295?) и фруктозо-1,6-дифосфатазы (на 15$), при р*< 0,05 в обоих случаях. В почках в этой ситуации также происходило усиленное образование глюкозы в процессе пгоконеогензза, так как при беременности оставалась повышенной активность фруктоз0-1,6-дифОсфатазы на 19$ (р 0,02) и глюкозофосфатизомеразы на 32$ (р«£ 0,01), наряду с этим увеличивалась активность щелочной фосфатазы на 10% При (р-£ 0,05). Беременность повнзает нагрузку на печень и почки, следствием чего, вероятно, явилось усиление деструктивных процес-

БЖЯНИЕ ЭТАНОЛЫЮ^ И АДЕТ.ОДЕГВДНОЙ ИНТОКСИКАЦИЙ

ЗКСПЕГК МЕНТА

Группа живот- : Исследуеиие ; показатели Д н и

15 1 30

ных : К : 3 А К о А

I люкозофосфат-пзонераза 11,21 0,4 10,81 ' о> 10,71 0'.5 12,81 О.'Э II, о! 0,6 II,61 0,7

Глюкозо-6-фос-фатаза 381 3 481 * 3 441 3 381 4 541 * 4 441 * 3

■Т'Я>"КТ030-1,6- дйфосфатзза 491 ? 541" г 461 г 501 г 471 О С 461 2

иа Ш Кислая фосф.атаза 5 411 23 5091 30 ' 5031 18 5341 12 5?11 16 5641 17

'»елочная фос-фатаза 32, Г1 2,7 44 01* О 48;41*27,71 6,1 3,3 29,81 з> 25,01 3,0

Глокозофосй.'эт-изомераза 10,31 0,6 14,21х • о;б 10,51 0|5 12,31 0> 9,41* 0,7 12.51 0,7 .

- Г.такозо-б-'Тос-фатаза • 241 2 311* 2 311« 2 371 3 401 2 371 2

Ы Й Груктозо-Т,6-дифосфатаза 4«1 2 551* 2 5б1* 2 511 I 451* 2 481 4

См ц - Кислая фос-фатаза 5821 19 9^71* 16 6761* II 6001 20 7121« II 6141 38

З-ело'гпая фосфата за зо, о1 1.9 32,61 2,2 29,31 3|0 18 81х 1.7 38.91 3,9

ПринечЕние. К - контроль; Я - этанол; А - ацетальдегид;

контролем. Активность .глюкозофосфятизомеразы /Ю мг белха/час; глюкозо-6-фосфатазы ? ческого фосфата /I г бежа/час; кислой полз /I г белка/час. •

Таблица I

НА. АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ ПЕЧЕНИ К?УС 3 ДИНАМИКЕ ( X 1 m )

и с еле д 0 в a h и я

60 : 90 : 120

к : Э : А : к : 3 : А » К : 0 i : А

9,It 0,6 9,7t 0 ,5 ic.ot 0,6 10,5t о;з 10 4 t 0,5 12 2t * Ü> S,5t 015 8 7t 0,5 7 ui C'P

36t 3 40t 3 45t 4 32t 4 39t 4 44t * -3 42t 4 38t 2 ->2+ *

40t г 44t 2 38t T 46t 3 45t 2 44t 3 5lt 3 . 4P.t 2 4Pt -> и

49lt 14 544t « 17 5I3t 18 422t 16 498t « 19 ' 580t * 28 494t 22 478t 18 441t ¿Í5

28,6t 3,9 21,6t з;0 24,4t 2,7 32,It ".5 34,4t ".I 31,5t . 3,7 28,5 t 28,6t 2,9 28,2t 3|I

12,3t i;o. 12,7t 0,8 10 ,2t 0,6 7.5t 0,4 8,10,2 7,8t 0|6 8,6t 0|6 10, ot 10,8t«

31t 2 35t 4 24t 2 30t I 3ct 2 32t 2 32t 3 3lt 2 32t 2

43t 2 48t ■J 50t 3 50t 2 53t 3 48t 2 52t 2 52t • 3 r?t 'S"

590t 31 635Í 46 610t 34 . 478t 31 • 4I9t 16 44 it 19 517t 10 »6t 17 2Ó~

29 It 3,3 31,6t 3,2 23,9t 31,ot' 4',2 20,5t » . 1.8 29,4t 2.6 35,9t 3 2 32, Ot 2,7 41 5 t 4 ' П

* - достоверные различия в сравнении с внгзжена н мкг ^руктозо-б—'tocfата ктозо-1,6-дифосфатззь! - в мг неоргзии-лочиой фосеГзтазы в мкаддях р-нитрофе-

сов и связанное с этим увеличение активности кислой фосфатазы на 68% (р 0,001) и 24% (р <■ 0,01) соответственно в печени и почка-' по сравнении с контролем,

Црк дальцейлем Поступлении этанола в организм крыс (30 дней), по-вэдилому, повышалась потребить организма в глюкозе. Об этом свидетельствует то, что по данным, полученным в налеЛ лаборатории на тех же животных, в печени происходил распад гликогена, однако, количество глюкозы в органе не увеличивалось, вероятно, в результате .чыдвленной Hai.ni повышенной глюкозо-6-фосфатазной активности к вичода глкж.озы в. кровь (Р.^.Цовиксва с соавт., 1979). Это хорошо согласуется с представлениями й.К»&лецкого, который считает, что под влиянием этанола происходит мобилизация гли: о гена с последующей гиперглнкемией. По его кгенют это осущестг лл-тся посредством выброса адреначиня из надпочечников (Ю.К.Е,;?дкнй, 19оЗ, 1953).

В почках в это время происходило угнетение процесса глгако-цсогенеуа, что по.дтпзрядается снижением активности специфических фосфатаз - гл:оксео-6-фосфатазы на 78^ (р < 0,001) и фруктозо-1,5-дифосфатазы на 10"? (р0,0а). ото мойшо объяснить влиянием поступающих в почки продуктов метаболизма этилового спирта, а возмогло, к самого этанола, который не успел окислиться в печени (¿.и. , н. , 1972).

При беременности в этот период найденные изменения, особенно в печени, выражена еще в большей степени. Об угнетении глюко-несгенеза свидетельствует понижение, активности фруктозо-1,6-ди-фосфатэзьг на 12? (р-^ 0,02), о,нарушении процессов энерг.т^бразо-ваник косвенно говорит угнетение активности глюкогофосфатизомерэ-зы на и щелочной фосфатазы на 36$ (р0,01 в обоих случаях). По-видимому, здесь происходит нарушение метаболизма глюкозы и

связанного с ним обмена макроэргических соединений, о чем говорит снижение активности неспецифических фосфатаз (Ю.К.Едецкий, 1958). Снижение активности глюкозофосфатизомеразы могло быть связано с подавлением альтернативных путей метаболизма глюкозы и усилением реакций пентозомонофосфатнаго пунта (0.А.Днепровская, 1974).

В ткани почек происходило ингибирование активности неспецифических фосфатаз и глюкозофосфатизомеразы, что, по-видимому, также было связано с измерением обмена глюкозы и сопряженных с ним реакций образования макроэргических соединений. При анализе данных, полученных на 60-й и 90-й дни исследования, в печени не было найдено существенных изменений в активности изучаемых ферментов. Оставалась, увеличенной лишь активность кислой фосфатазы на 11& (р«0,05) на 60-й день исследования и на 15% на 30-й день исследования (р<.0,01). Вероятно, в этот период включаются дополнительные пути окисления этанола, в частности микросомальная зтанолокислящая система. В почках происходит, наоборот, угнетение активности кислой фосфатазы уже после двухмесячной интоксикации (на 14% при р <. 0,01) и повышение активности глюкозофосфатизомеразы (на 25$ при р <0,05), спустя 90 дней после введения крысам этанола» чтс связано, по-видимому, с изменением глюкоз о образовательных- процессов в этом органе и стабилизацией мембран (А..АЛокровскяй с соавт., 1976).

В почках беременных животных так же в эти сроки менее заметны изменения в активности изученных ферментов. Возникновение беременности на фоне предварительной двухмесячной алкогольной интоксикации вызывало достоверное увеличение активности глюкозо-фосфатизолеразы к глюкозо-6-фо.сфатазы в ткани почек на и СО? соответственно, что говорит в пользу активации процессов образования глюкозы.

BEifiHIE ЗТЛНОЛЬНОй И АЦЗТАЛ^.21ЭДКОП ИПШГШИЯ

CXOiftPOTSHTA

1'пуппа тавот- ' Исследуемые • показатели д к и

15 30

ных : к - 3 1 А '. к : с

ГлэкозоИсфат-изомерчза г, et 15,4Í 0|5 * 1'5,0-0',5 15,4Í о;з 14 ßl rr. ' o'/:

ы Ггакозо-б-о^с-фатаэа. 45- О 59- * 5" 3ñl 2 64Í з 501« 4 5SÎ 5

5г . tg ы CW s Ей ' Фруктозо-.г ,6-ди'Тостатаза' 713 « 6 64Í 75t ■ 4 64l * p ?!.'!

Кислая :";ос-'Катаза . 9, Ol 0,3 10,5-o;^ Q б'.з Í. 'il с 'я о;Г с 0 ' '

"елочная' ^псфатазз 29,5Í О 30, 0|9 26 ;з1 I,'2 . ■ <:t G !" 23 Cl i;i P'J r-,

ГгакотТосфат-изоне раза 12,6 í 0,6 16,6Í .1.0 »í 0, f. Tr iJ TP il*i'3 Ç i;o i;c

ы Г'лчк 03 о~б-t ослята за 62Î fot n c. 59l 4 551 4 60Í ' 2~

œ Щ ■1руктозо-Т/-71 г'-^огЛ атаза ' fi9Í 2 62Î * 4 ' 4~ 7C'l e-?t 5 f-Pl 5

е., И Кислая фос- 10 3Í 0 ,5 12 ,8Í 0,4 К 12,2t 0',3 "ÏO 2Í 0> 7 Ql 0',4 * 9,3 0,6

П'елочная 'Тосфзтаза 26 7Í ■ 0,8 29 ,4Í o;e ft 29,71*26,61 0,6 ?-■< 5ls?s I ï;i 2|0

Примечание. К - контроль; S - отанол; А - агеталч^егид; ?

контролем. Актшшо-сть гжпко?о?эс?ат!:зз:.1епзн

/10 у,г ^елка/чао, ггокозо-б-Тос-атая-; :: -^укто topa /I г бел;а/'тас, кислоI" ;; 'ге^оч^о? '¡ос'Уагаз

бедка/час

12

Tsrtmniq 2

.товность.ютгнэов легок kf*j б лшлосз

i - W •)

:: с С е д 0 в a H И Я

60 : 90 120

:с : о A : к j Э i 1 ; к J 3 1 Д 4

. 15 г •7Î. 4 17 I ji 5~ о <ti 9 IB ( vj— ,4 г , -J- 43 П, '¿ 0,9 II Q ci 4 к í~ 5

- 53- ■ 4 hl* 4 2 33 4 V 46-1 4 50— 4 40? 48 ! 4

H3Í 3 * n-ii 3 О- 5 8 f. 3 ¥ 763 Pli 5 - rr-t-Г. 4 » 7IÍ 3

с— J 7, 0, 91 * 7 0, 9Í 2 к fi 0' 5- n > 8 С J — 3 0, çi a, oí - 0,2 7 . 442 p oi fj

И 2~ 23, 1, II 2 с / f 2- I s m "i; 01 2 ?Я I ?.Í с > 0, 07 сЛ "ó; б it "ó; ц y* i 1

13, 0 ?i * 5 12, 0 10, 0 5Î ■7 j с ' 6 „+ i - 5 II 0, 07 IT 3Í 0,9 1-4. •J , « 7 -j "O", +

er.i * с 4PÍ 5 53Í. 3 5IÍ з 4SÍ 4 34— 5 Í4Í 5 59Í ñ

Ч -С- 4 7HÍ 6 7ll 3 "7 ni 1 74Î 2 73-t 4 3 4

2- ' II. 0, 4Í ID 0 ol 3 5' 5Í 2 7 Q ,oi о * 6 0, 3~ * To,oi o;? If, Û r-+ 13, 0, <T

4 „+ 4 i; Ç- I 24 0, o— ç 23 I 20, I, ci 6 i;2 ?í; С¿ 2 * "b' " 1 el * 4

'■остэь:;;, :iue различия р cf авнеики с

гт: нз ? ¡./кг fryiCT03o-6-r'jcí-?.7a

-rocí"тазы в иг i'cofrai;.-Т'ос-Г: 'j;:?!x р-иитгочаиила /10 ш

1-я

При 120-днеЕИОй эганалыюй интоксикации в печени наступает, по-видимому, адаптационный период в ответ на постоянно поступающий в организм станол с включением дополнительных этанолокислякн щих механизмов (шкросомальной, этанолокислящей система, ката-лазы и т.д.) (Л.Ф.Панчеико с соавт., 1979; J.P.Warburg et al. , 1961; C.E.Lieber, I,.!.:.De Carli, , 1970; T.b.Parby, C.G.Lieber , 1979). В почках же c этот период уке происходит срыв адапташон-но-приспособктельных механизмов, что выражается в угнетении активности всех изученных ферментов.

При возникновении беременности так же, как и в предыдущий, срок исследования, не найдено существенных изменений в активности исследованных ферментов печени. А в почечной ткани наблюдалось лишь повышение активности щелочной фосфатазы.

Что касается ацетальдегидной интоксикации, то в начальный период ее развития (lb дней) е печени значительно повышалась активность щелочной фосфатазы (на Ы% при р ^ 0,05). В то же время по данным других авторов из нашей лаборатории происходило снижение запасов гликогена в этом органе, в то время как количество свободной глюкозы не отличалось от уровня контроля. Одновременно найдено снихзние количества молочной кислоты и повмдание содержания пирувата. (Новикова Р.Ф. с соавт., 1979). По-ьидимоыу, ото связано со стимуляцией метаболизма глюкозы в печени'. Однако, вследствие конкуренции ацетальдегиддегидрогеназы и лактатде-гидрсгеназы за ксферменты, дальнейшее превращение пирувата, по-видимому, тормозится, что и ведет к его накоплению. В почках же усиливается процесс гликолиза, что ведет к нг.коплению лактата (Р.Ф.Новикова, IS7S). Возникшая на этом фоне беременность ьь'знвал^ напряжение адаптационно-приспособительны механизмов. 3 п-'.-эни уснлпяались процессы обмена глюкозы, что ьмражялог.ь в по-

выпении активности гтзетз-б-фсфжгт:^ на 29¿р.^ 0,051, фруг- . тозо-1,-6-дифосфатазн на Т7% Ср-« ®»<32'1 е пастой фзсфатазы: на при р < 0,001. В организме,■ по-вшроззяу, возникала повьпенная потребность'в глюкозе. В почечной ткани повышалась активность неспецифических фосфатаз (кислой фосфомоногэетеразы на 18%, щелочной -на 11% при р 0,01 в обоих случаях), способствующих обмену глюкозы и фосфатов и, возможно, транспорту их через почечные канальцы. При более длительна! поступлении--ацетальдегида в организм нивотных (30 дней), не обнаружилось существенных сдвигов в активности изучаемых ферментов как в печени, так и в почках, Беременность, развивающаяся после этого срока интоксикации, так же не вызывала заметных изменений.в ферментативной активности исследуемых органов.

При 60-дневной интоксикации гщетадьдегидом в печени хотя и имелись колебания в активности ферментов, однако эти сдзиги были статистически не достоверны. По-видимому, гепатоциты в этот период справлялись-с окислениям поступающего ацетальдегида, в то время как в почках угнеталась активность неспецифйческих фосфатаз,, возможно, в результате непосредственного действия ацетальдегида. . . '

Во время беременности в организме, по-видимому, включаются мощные адаптационные, механизмы в ответ на действие этого токсического агента с активированием механизмов обезвреживания, с использованием глюкозы в процессах детоксикации. С адаптацией организма можно связать и отсутствие достоверных изменений, как и в предыдущий срок исследования, в активности изучаемых почечных ферментов. - .'''"■'

При развитии ацетальдегидной интоксикации на 90-й день- исследования в печени усиливался глюконеогенез, как дополнительный

источник углеводов, что подтверждается найденным повышением активности глюкозо-6-фосфатазы на 23% (р«с0,05), кислой фосфатазы на 37% (рс 0,001) и глюкэзофосфатизомеразы на 16% (р с 0,01), а также данными, полученными в нашей лаборатории другими автораки, которые свидетельствуют о накоплении в печени глюкозы (В.Г.Купор с соавг., 1980). П' беременности, как и в предыдущий срок'исследования, не выявлено существенных изменений в метаболизме это^о органа, что указывает на включение адаптационных механизмов. 3 почках же в этих условиях снижалась активность не'сиецифических фосфатаз (кислой фосфатазы на 18% при р^0,001 и щелочной '- на 16?о при р. с 0,01), что свидетельствует о снижении мощности защитных барьеров при повышенной нагрузке на почечную ткань.

При четырехмесячном введении ацетальдегида в печени происходило накопление глюкозы (Р.Ф.Новикова с соавт., 1979) с одновременным снижением глюкозо-6-фосфатазной активности на 24$ (р<.0,05), что, вероятно, связано с конкурентным торможением обмена этого моносахарида. В почках процессы утилизации глюкозы также нарушались, что выражаюсь, по-видимому, в угнетении гликолиза, показателем чего является снижение активности глюкоз офосфатиз омеразы, уменьшение количества пировиноградной ю:слоты и накопление глюкозы (Р.4.Новикова с соавт., 1979).

• ■

В,печени.беременных крыс в процессе усиления метаболизма глюкозы реализуется гликолитический путь-, являющийся наиболее экономичным при восполнении энергетических, затрат в условиях гипоксии.' В почках,в этот период повышается активность щелочнйй фосфатазы на"28$ (р"-0,05), возможно, принимающей участие в реаб-сорбции глюкозы и выделении ее в кровяное русло.

Таким образом, на основании сравнительного исследования действия этанола и ацетальдегида в длительном хроническом экспе-

' Ю -Л;":

рименте на крысах к ада с определенностью показано, иго влияние этих веществ на активность изученных ферментов не идентично. Различное действие этанола и ацетальдегида, однонаправленное лишь на некоторых этапах исследования, показано на двух органах - печени и почках, различных по функции, но участвующих в процессах деток-сикации этих веществ, в освобождении от. них организма. Следовательно, полученные данные показывают, что.алкогольная интоксикация не в полной мере является результатом ацетальдегвдной интоксикации и пути метаболизма этанола к ацетальдегида не всегда одинаковы, что подтвердилось и в опытах на беременных животных с предварительной интоксикацией этанолом и ацетальдегидоМ. Эти исследования убедительно показали, что при беременности, развившейся после введения этих веществ, активируются компенсаторно-эацитные механизмы организма, что особенно выражено после воздействия ацетальдегида. Это подтверждает высокую способность ор-. ганизма окислять ацетальдегид, особенно в стрессовых ситуациях (беременность, интоксикаций, что менее выражено для этанола.

Выявленные в работе различия в действии этанола и ацеталь-

*

дегида на одни й те же показатели согласуются с новыми литературными данными ( Р.К. ЛГагша , T.V.IÍ. Ре г ь and. , 1979; D.B. Pottei; с.л.Chin , J.a. ¿towland , 1930) о непосредственном токсическом действии этанола и способности ацетальдегида более активно . метаболизировать в тканях.

. ЮН 2 ОД ¿2 '

X. Активность тяюаамэ-б-чроефгешга, кислой, щелочной фосфагаэд а ажгтзв^мфазив^огае^иаы у интак-тных, так и у беременных: ярые шппе в '.гкагш якджк, тгед в лечена. ,

2. При зксперименталинай алкогольной м щ^етшадеглдаой иэ-токанкщиях и при бег 'ешоетд, .развившейся иа их фше зз дццанл и'ло'иах изменяется активность всех -адуяенных фэсфатав и згашкозо-фосфатизомерааы- ■ ■ •

' 3. Хроническая алкогольная интоксикация, шзиеая фазовый характер изменений» приводит к более вырааенанз «здеигшл в активнос-•335 изучсышх ферментов лочгчаоЛ тзшнз по сравнению -с печенью.

4. Выявтедаые сдвига згрз -Епздг&етвги ггтанола характеризуются повышением активности гзшавэо-«£-ф>сфатазы ¡и щелочной фосфата-, зы в лечени, тлюкозо-6-фосфатазы, ^дуЕтоз.й-1,б-дйфосфатазы, кислой фосфат азы и глшпзофосфатизомеразы в жвт дотек -с последую- •".

- щим угнетением активное™ всех исследуемых ферментов в почках и нормализацией их в печени. • -.".'■■

5. Ацетальдегид вызывает повышение активности гяюкозо-бчфос-фатазы, кислой фосфатазы и глюгсозофосфатизомеразы в печзни г более поздние сроки, чем втанол, привода я резкому , снижению активности этих ферментов в конце исследования, что особенно выражено для глюкозо-6-фосфатааы. В тюши почек также происходит угнетение актишостл неспецифичесяюс ;фосфатаз и таюкозофосфатизомеразы.. .

6. Увеличение .активности гзгашгао-внфосфатазы и фруктоз о-1,6-дефосфатазы на первых аташах этангшьаой и ацеталздегкдной интоксикаций указывает на усиление интекезгоноета процессов глюконеоге-неза, что проявляется и при берекедаости, развившейся после предварительного .воздействия иссяедуемшс токсических веществ.

7. При беременности, возникающей на фоне различ!:ой дли тел ь-

1о

ности предварительного воздействия этанола.происходят следующие изменения активности исследуемых ферментов:.

а) после двухнедельной предварительной интоксикации к концу беременности повышается активность глгакозофосфатизомеразы, фрук-тозо-1,6-дифосфатазы, кислом фосфатазы в печени и в почках и увеличивается активность печеночной глакозо-б-фосфатазы и почечной щелочной фосфатазы; . .

б) после 30-днёвлой интоксикации к концу беременности наблюдается угнетение активности глюкозсфосфатизомеразы, фруктсзо-1,6-дифосфатазы и щелочной фосфатазы в печени; в почках же уменьшается активность глюкозофосфатизомеразы и неспецифических фосфатаз;

в) увеличение сроков предварительной интоксикации в конце беременности в печени не вызывает значительных.изменений активности изученных ферментов,-'а в почках повышается активность глю-коэо-6-фосфагазы, глюкозофосфатизомеразы и щелочной фосфатарн, что указывает на мобилизацию компенсаторно-защитных механизмов организма. .

8. При беременности, возникающей на фоне различной длительности воздействия ацетальдегида наблюдаются изменения активности изученных-ферментов, подобные найденньм при предварительной алкогольной интоксикации, но выраженные в меньшей степени.

СПИСОК РАБОТ, ОПШШКОВАННЫХ ПО ТЕШ ДОЗЕРТАЦИИ

1. Метаболические основы деструктивных изменений печени при алкогольной интоксикации. Б кн.: 1У Всесоюзный биохимический съезд. Тезисы научных сообщений. т.З. Москва, 1979, с.104-105 (Совместно с К.Н.Груздевой, Т.Д.Сарапкиной, В.П.Елисеевой, Л.И. Дмитриевой, Б.А.Антифьевой).

2. Ферментные спектры крови беременных .крыс с алкогольной

интоксикацией. В нн.: Тезисы докладов Всесоюзного (шестого Гродненского) симпозиума, Минск, "Наука и техника", 1980, с.48 (Сов-м'стно с К.Н.Груздевой, С.В.Мусихиной, .Г.А.Логгуховым,.

3. Активность лизосомальньг: ферментов печени и миокарда при воздействии на организм этанола и ацетальдегида. В кн.: Структура и пункции лизосом. Тезисы докладов 2-го Всесоюзного симпозиума. Новосибирск, 3-5 ноября 1980 г., Ьовосибирск, 1980, с.57-58 (Совместно с К.Н.Груздевой, В.Е.Высок'огорским, Л.М.Дмитриевой).

4. Особенности метаболических сдвигов"при беременности на фоне алкогольной интоксикации. В кн.: Патогенетические, клинико-' терапевтические аспекты изучения алкоголизма. Труды /Омский гос. мед.ин-т.им. и.Калинина и областная клкнич.психие.гр.б-ца,Омск,. 1980, с.22-23 (Совместно с Г.АДогуховым, С.В.Мусихин:й).

5. Ферментативная активность паренхима; озных органов и кров/ алкогол^зкрованннх беременных животных. В кн.: Патогенетические, клинико-терапевтическке аспекты изучения алкоголизма. Труды/ -ОмскиI5. гос.мед.ин-т им. М.И.Калинина и областная клинич.психиатр, б-ца, Омск, 1950, с.20-22 (Совместно с С.В.Мусихиной).

• 6. Характеристика некоторых фосфатаз печени и почек беременных крыс с предшествующей алкогольной и ацетальдегидной интоксикацией. 3 кн.: Экстремальные и терминальные состояния. Труды/ Омский гос.мед.ин-т им.М.И.Калинина, ¥ 139,. Омск, 1980, с.60-62.

7. Исслздованкя активности некоторых ферментов печени и почек при хронической алкогольной интоксикации и возникновении на этсм фоне беременности. В сб.: Научио-тэхнический прогресс в.теоретической и клинической медицине. Омск, 1981, с.33.

"Ом. сРп.тип (4)."!«Я£г 34«. , НЮ