Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации

Курандо, Екатерина Эдуардовна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации"

004613934

КУРАНДО ЕКАТЕРИНА ЭДУАРДОВНА

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ИЗМЕНЯЮЩЕЙСЯ ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2010

1 8 НО Я 2010

004613034

Работа выполнена в лаборатории микобактериозов Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко» Россельхозакадемии (ГНУ «ВИЭВ»),

Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент

Букова Наталия Константиновна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Шумилов Константин Васильевич,

Заслуженный деятель науки РФ

доктор ветеринарных наук, профессор Масимов Нусрат Абулфатович

Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных» СО Россельхозакадемии

Защита диссертации состоится »М01 Ог. в '/О часов на заседании диссертационного совета Д 220.011.01 в Федеральном государственном учреждении «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ») по адресу: Россия, 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, д. 5, телефон/ факс (495) 253-14-91.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «ВГНКИ».

[

Автореферат разослан « '7» 10г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат ветеринарных наук, доцент,

Заслуженный ветеринарный врач РФ Козырев Ю.А.

1. Общая характеристика работы.

1.1. Актуальность темы. В XXI веке туберкулез продолжает оставаться одной из наиболее сложпых проблем инфекционной патологии. В системе профилактических и оздоровительных мероприятий основополагающее место занимает комплекс диагностических методов, включающий клиническое, аллергическое, патологоанатомическое и бактериологическое исследования животных.

Проведенные в XX веке противоэпизоотические мероприятия привели к сокращению распространенности туберкулеза на значительной территории Российской Федерации, уменьшению количества больных животных с поздними и генерализованными формами туберкулеза, но, в то же время, увеличению поголовья скота с проявлением микобактериозов. Изменилась роль каждого метода исследования животных на туберкулез. В 30-40 годах подвергали убою животных, клинически больных и с открытыми формами туберкулеза легких, вымени, кишечника и матки, которые диагностировались, в основном, бактериоскопическим исследованием. С 1932г. в основу противотуберкулезных мероприятий был положен метод Банга, а в 1940г. в качестве основного метода диагностики туберкулеза было введено аллергическое исследование животных. Результаты туберкулиновой пробы являлись решающими при определении состояния по туберкулезу животных и хозяйств, где на фоне широкой распространенности болезни ошибки были редки.

На рубеже 50-60 годов возникла и стала широко распространяться ситуация, когда у реагировавших на туберкулин животных диагноз на туберкулез не подтверждался бактериологическим исследованием. При этом выделяли различные виды нетуберкулезных микобактерий, роль которых была недостаточно изучена в патологии человека и животных. Таким образом, появилась проблема микобактериозов и необходимость определения эпизоотического статуса поголовья скота. С этого времени показания туберкулиновой пробы стали ориентировочными, а эпизоотический статус хозяйств определяют по результатам бактериологического исследования, так как от выделенных видов микобактерий зависит уровень проведения профилактических и оздоровительных мероприятий.

Выделение культур микобактерий из биологического материала во многом зависит от вида питательной среды. Несмотря на большое разнообразие питательных сред, применяемых при культуральном исследовании, срок выделения возбудителя туберкулеза колеблется практически в одинаковых пределах. Кроме того, не всегда удается со 100% эффективностью выявить возбудителя туберкулеза из патологического материала больных животных, тем более обнаружить микобактерий с

ослабленной жизнеспособностью или ферментативной активностью, или присутствующие в исследуемом материале в небольшом количестве (В.В. Власенко, 1998). Стало актуальным внедрение в лабораторную практику новых питательных сред, которые позволяли бы сократить сроки выделения культур микобактерий (В.И. Белоусов и соавт., 2004).

В.В. Власенко и П.Й. Багрий (2001) разработали оригинальную питательную среду ВКГ, позволяющую выявить микобактерии в исследуемом материале в течение 2-4 суток. Испытание этой среды, которая позволила бы ускорить выделение возбудителя туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий из биологического материала, представляется весьма актуальным.

В современных условиях, при изменяющейся эпизоотической ситуации, актуальным является ревизионная оценка применяемых методов исследования животных на туберкулез и усовершенствование комплекса бактериологической диагностики болезни.

1.2 Цель и задачи исследований. Усовершенствование комплекса диагностических тестов при бактериологическом исследовании на туберкулез животных в современных условиях проявления эпизоотического процесса инфекции.

Задачи исследований:

- охарактеризовать изменения эпизоотической обстановки по туберкулезу крупного рогатого скота в Российской Федерации за 1961-2008гг.;

- провести анализ результатов бактериологических исследований на туберкулез животных в субъектах Российской Федерации за 1978-2008гг.;

- изучить культуральные, морфологические, биохимические и биологические свойства микобактерий, выделенных из биоматериала зоопарковых животных;

- изучить чувствительность питательных сред ВКГ, Левенштейна-Иенсена, ФАСТ-ЗЛ к росту референтных туберкулезных и нетуберкулезных микобактерий;

- изучить эффективность питательной среды ВКГ со стимулятором роста для выделения возбудителя туберкулеза бычьего вида из биоматериала крупного рогатого скота;

- изучить биологические свойства микобактерий, выращенных на среде ВКГ, на морских свинках и кроликах;

- усовершенствовать схему бактериологических исследований на туберкулез животных.

1.3. Научная новизна. Впервые охарактеризованы динамика и закономерности проявления эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота и птицы в Российской Федерации, проведен ретроспективный анализ результатов бактериологической диагностики туберкулеза животных в РФ за 1961-2008гг. Создан компьютерный банк данных бактериологических исследований, отражающих изменения показателей распространенности туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота в субъектах Российской Федерации в 1978-2008гг. Определен видовой состав микобактерий, выделяемых в различных регионах Российской Федерации.

Изучены культуральные, морфологические, биохимические и биологические свойства микобактерий, выделенных из биоматериала зоопарковых животных. Изучены свойства питательной среды ВКГ со стимулятором роста для ускоренного выделения микобактерий из биоматериала животных. Усовершенствована схема бактериологического исследования на туберкулез и микобактериозы животных.

1.4. Практическая значимость работы. Результаты исследования по определению видового спектра микобактерий, выделенных от крупного рогатого скота и объектов внешней среды, создают основу дифференцированного проведения профилактических и оздоровительных мероприятий при микобактериальных инфекциях. Усовершенствованная схема исследований биоматериала от животных повышает качество бактериологических исследований и может быть использована в бактериологических и научных лабораториях.

О практической значимости результатов исследований также свидетельствуют разработанные автором (в соавторстве) «Методические рекомендации по диагностике микобактериальных инфекций животных» и «Методические рекомендации по идентификации М. avium subsp. paratuberculosis и других микобактерий комплекса avium-intracellulare», утвержденные директором ГНУ «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным М.И. 15.03.10г., и методические рекомендации «Система медико-ветеринарных мероприятий в сельских очагах туберкулеза», утвержденные директором ГНУ «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным М.И., директором ВНИТИБП,

академиком РАСХН Самуйленко А.Я. и директором ФГУ «Центр ветеринарии» Л.К. Кипгем в июле 2009г.

1.5. Личный вклад автора заключается в постановке цели и задач, сборе эпизоотологических данных и результатов бактериологических исследований биоматериала от животных в ветеринарных лабораториях РФ за 1961-2008гг., создании компьютерной базы данных бактериологических исследований, сборе и анализе видового состава нетуберкулезных микобакгерий, выделяемых в различных регионах РФ, бактериологическом исследовании биоматериала от животных зоопарка и идентификации выделенных микобактерий, испытании новой среды ВКГ со стимулятором роста, анализе, обобщении и интерпретации полученных результатов собственных исследований и исследований, проведенных научными сотрудниками по проблеме туберкулеза и микобактериозов, в подготовке научных публикаций, участии в разработке методических рекомендаций.

1.6. Апробация работы. Материалы работы доложены на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Я.Р. Коваленко (г. Москва, 2006г.), на XV Московском Международном ветеринарном конгрессе (г. Москва, 2007г.), на Международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел» (г. Москва, 2008г.), на заседаниях ученого совета ГНУ «ВИЭВ» (2007, 2008, 2009гг.). Основные положения, выводы и практические предложения, изложенные в диссертации, обсуждены и одобрены на межлабораторном совещании научных сотрудников ГНУ «ВИЭВ» (2010г.). Материалы диссертации используются при чтении цикла лекций врачам-бактериологам ветеринарных лабораторий субъектов РФ на курсах повышения квалификации ветеринарных врачей в ФГУ «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория».

1.7. Основные положения, выносимые на защиту. Полученные результаты исследований позволяют вынести на защиту следующие основные положения:

- результаты ретроспективного анализа изменений проявления эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота и птицы в Российской Федерации за 1961-2008гг.;

- результаты анализа бактериологических исследований биоматериала животных в ветеринарных лабораториях РФ за 1978-2008гг.;

- видовой состав микобактерий, выделяемых в различных регионах РФ;

- распространенность микобактериозов крупного рогатого скота в субъектах РФ;

- эффективность питательной среды ВКГ для ускоренного выделения микобактерий;

- усовершенствованная схема бактериологических исследований биоматериала на туберкулез и микобактериозы крупного рогатого скота.

1.8. Публикация результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 7 научных статей, в том числе три - в научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ.

1.9. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 170 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 2 схемами. Список литературы включает 474 источника, в том числе 91 - иностранных авторов.

2. Собственные исследования

2.1. Материалы и методы исследований. Работа выполнена в 2005-2009 гг. в лаборатории микобактериозов ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко» и в отделе бактериологии ФГУ «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория» в соответствии с заданием 02.01.01. Российской научно-технической программы фундаментальных и приоритетных прикладных исследований.

Банк статистической информации, необходимой для анализа проявлений эпизоотического процесса туберкулеза в Российской Федерации, формировали на основе данных официальной ветеринарной отчетности за 1961-2008гг.

При анализе проявлений эпизоотического процесса использовали методы, описанные в «Рекомендациях по методике эпизоотологического исследования» (Бакулов И.А. и соавт., 1975), в «Руководстве по общей эпизоотологии» (под редакцией И.А. Бакулова и А.Д. Третьякова, 1979), в «Методических указаниях по эпизоотологическому исследованию» (Бакулов И.А. и соавт., 1982).

Для анализа уровня бактериологических исследований, выделения и идентификации культур микобактерий в ветеринарных лабораториях Российской Федерации были собраны данные экспертиз лабораторий, результатов исследований научно-исследовательских институтов и ветеринарных станций, опубликованные в научных и научно-производственных ветеринарных печатных изданиях.

Исследовали бактериологически биоматериал от 20 голов крупного рогатого скота из неблагополучных по туберкулезу хозяйств, реагировавших на туберкулин для млекопитающих и имеющих характерные для туберкулеза изменения, 5 коров из благополучных по туберкулезу хозяйств, убитых с диагностической целью; козы; 32 животных (слон, черепаха, ящерица, птица) и 14 проб помета выгульных загонов птиц, направленных для исследований из Московского зоопарка.

Культуральные, морфологические, биохимические и биологические свойства выделенных микобактерий изучали в соответствии с методическими рекомендациями «Бактериологическая и биохимическая идентификация микобактерий» (Оттен Т.Ф., 1994), с приказом Минздрава СССР №558 от 08.06.78г. «Об унификации микробиологических методов исследований при туберкулезе» и приказом Минздрава РФ №109 от 21.03.03г. «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», «Наставлением по диагностике туберкулеза животных» (М., 2002).

Для определения эффективности среды ВКГ со стимулятором роста для культивирования возбудителей туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий, наряду с микобактериями, выделенными от продуктивных и зоопарковых животных, использовали референтные штаммы микобактерий: М. tuberculosis H37RV, М. bovis 8, М. bovis BCG, М. avium 2282, М. fortuitum и М. intracellulare, а также культуру M.tuberculosis, выделенную от козы, культуру M.bovis, выделенную от крупного рогатого скота (ВИЭВ, экспертиза №79 (3/1), культуру M.avium, выделенную от свиней.

Проводили заражение морских свинок и кроликов культурами микобактерий, выращенными на среде ВКГ и на среде Левенштейна-Йенсена. Всего было использовано 48 морских свинок и 54 кролика.

Гомогенаты образцов (печень, селезенка, легкие) от морских свинок исследовали в ПЦР с использованием тест-системы «МТБ-КОМ». Кроме того, в работе использовали ПЦР-тест системы «Туб-Диф», «MAIS-Диф» и «Авиум».

Полученные в процессе цифровые показатели обрабатывали методами вариационной статистики (Ашмарин И.П., Воробьев A.A., 1962), а также при помощи программы «Statgrafícs», включающей определение средней арифметической (М), ошибки средней (т), достоверности разности средних показателей (Р) с помощью критерия Стъюдента, связь между факторами определяли методом корреляционного анализа.

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Характеристика изменений эпизоотической обстановки по туберкулезу крупного рогатого скота и птицы в Российской Федерации за 1961-2008гг.

В России туберкулез крупного рогатого скота начали официально регистрировать с 1892 г., причем пораженность животных варьировала от 0,001 до 18,0 и более процентов (Я.Р. Коваленко, 1967). До коллективизации сельского хозяйства мероприятия по борьбе с туберкулезом заключались в убое больных животных с признаками общего истощения или с поражением вымени. В хозяйствах отмечали до 15-40% зараженных туберкулезом животных (И.В. Поддубский, 1967).

В 1923г. издан Ветеринарный устав РСФСР, а в 1926г. Наркомзем РСФСР принял постановление о систематической и плановой борьбе с туберкулезом. Первоначально предписывался убой животных с открытыми формами туберкулеза легких, вымени, кишечника и матки, которые определялись по результатам бактериологических исследований. Затем наставлением, утвержденным Наркомземом и Наркомздравом РСФСР в 1926г., и инструкцией, изданной Наркомземом СССР в 1932г., в основу противотуберкулезных мероприятий был положен метод Банга. В 1940г. было введено аллергическое исследование скота в качестве основного метода диагностики туберкулеза, результаты которого являлись решающими при определении состояния по туберкулезу животных и хозяйств. В предвоенные годы заболеваемость туберкулезом крупного рогатого скота снизилась до 1-1,5% и к началу 1941г. составляла в совхозах 2,4%, в колхозах - 1,5% (B.C. Киселев, 1959).

В 1956г. был принят план мероприятий по ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота. До 1970г., в основном, были ликвидированы изоляторы больного скота, значительно снизилось количество выявляемых новых неблагополучных пунктов и практически были оздоровлены хозяйства целого ряда областей и автономных республик.

В период развития промышленного скотоводства (с 1970г.) постепенно улучшалась эпизоотическая ситуация. Если в 1961г. было выявлено 1319 новых неблагополучных пунктов, то в 1981г. - 275, что на 20,8% меньше. К началу 1986г. уменьшилось (на 35,0%) и число пунктов, остававшихся неблагополучными. Однако значительно увеличился коэффициент очаговости (с 23,7 в 1961г. до 89,0 в 1985г.) и увеличился процент обнаруженных случаев туберкулеза при убое животных.

Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота с 1992г. проявляет тенденцию улучшения. Если на 01.01.93г. было 1264 неблагополучных пунктов, то на 01.01.09г. их осталось только 82, т.е. в 15,4 раз меньше (табл. 1).

В 50 годах XX столетия мощный резервуар М. avium представляло зараженное поголовье кур, содержавшихся на Подворьях граждан и мелких птицефермах общественных хозяйств. В дальнейшем количество вновь выявляемых очагов и заболеваемость кур туберкулезом постепенно снижалась (с 4,2% в 1954г. до 0,1% в 1975г.) и проблема борьбы с туберкулезом птиц была практически решена при строительстве крупных птицефабрик и ликвидации мелких птицеферм. Однако эпизоотический процесс туберкулеза птиц не прервался, так как рост поголовья домашней птицы в личных хозяйствах, создание мелких птицеферм вновь вызвал подъем заболеваемости птиц туберкулезом. В 1995г. туберкулез кур был зарегистрирован на территории 13, в 1997г. - 29, в 1998г. - 42 и в 1999г. - 45 субъектов РФ. В 2006г. выявили 15, в 2007г. -17 неблагополучных пунктов по туберкулезу кур.

Таблица 1 - Динамика проявлений эпизоотического процесса туберкулеза

крупного рогатого скота в Российской Федерации за 1992-2008гг.

№ Годы Кол-во Заболело Заболело Коэффи- Число Число случаев

п/п н/п ж-ных ж-ных на циент случаев туберкулеза

(гол.) 100000 гол. очагово- туберкуле- при убое скота

(инцидент- сти за при убое в расчете на

ность) скота (гол.) один н/п (гол.)

1. 1992 1264 89749 153,7 64,9 69698 55,1

2. 1993 1228 67906 133,5 54,9 47477 38,6

3. 1994 1172 62337 139,0 54,7 31933 27,2

4. 1995 1108 57733 94,9 50,0 27884 25,1

5. 1996 1006 53783 151,1 53,4 21250 21,0

6. 1997 865 38926 129,5 45,0 н/д н/д

7. 1998 779 31501 105,2 40,7 н/д н/д

8. 1999 669 23031 80,9 34,4 6093 9,1

9. 2000 589 22326 80,9 37,9 9300 15,8

10. 2001 455 13543 49,7 29,7 6349 13,9

И. 2002 304 6595 24,6 21,7 4240 13,9

12. 2003 283 12322 48,0 43,5 4646 16,4

13. 2004 220 7558 31,5 34,3 3714 16,8

14. 2005 157 7360 33,1 46,8 2477 15,7

15. 2006 128 5330 25,1 41,6 2289 17,8

16. 2007 116 4056 19,1 34,9 2017 17,3

17. 2008 82 5014 23,6 61,1 2372 28,9

Примечание: коэффициент очаговости - среднее число реагирующих на туберкулин животных в одном-неблагополучном пункте; н/п - неблагополучный пункт; н/д - нет данных.

Анализ эпидемической ситуации по туберкулезу показал, что с 1992г. значительно увеличились показатели заболеваемости и смертности населения от

туберкулеза. С 2001г. началось постепенное снижение значения показателя заболеваемости с 88,5 (2001г.) до 82,4 (2006г.) случая на 100 тыс. населения. Как отмечает М.В. Шилова (2005), с начала роста заболеваемости (1990г.) показатель смертности от туберкулеза увеличился в 2,8 раза. Таким образом, в 1990-2006гг. в РФ произошло ухудшение эпидемической ситуации по туберкулезу, которая и в настоящее время остается весьма напряженной.

В конце 50 годов XX столетия возникла и стала все более актуальной проблема реагирования на туберкулин для млекопитающих крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах без подтверждения инфекции. Это касается инфицирования животных нетуберкулезными микобактериями, т.е. микобактериозов, которые широко распространены в различных регионах Российской Федерации. В 2001г. выявили 87,0% и в 2008г. - 89,9% реагирующих на туберкулин животных в благополучных по туберкулезу хозяйствах (табл. 2).

Таким образом, в структуре микобактериальных инфекций произошли изменения. Наряду с уменьшением неблагополучия поголовья скота по туберкулезу, увеличивается проявление микобактериозов животных.

Таблица 2 - Выявление реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота в РФ за 2001-2008гг.

Годы Выявлено реагирующих животных:

Всего в т.ч.

в неблагопо- в благопо- на 100 тыс.

лучных пунктах лучных пунктах голов

2001 103720 13543 (13,0%) 90177 (87,0%) 331,5

2002 93467 6595 (9,7%) 86872 (90,3%) 323,9

2003 93688 12322 (13,2%) 81366 (86,8%) 317,3

2004 74254 7558 (10,2%) 66696 (89,8%) 278,3

2005 68787 7360 (10,7%) 61427 (89,3%) 276,6

2006 57285 5330 (9,3%) 51955 (90,7%) 244,8

2007 45952 4056 (8,8%) 41896 (91,2%) 197,6

2008 49922 5014 (10,1%) 44908 (89,9%) 211,5

2.2.2. Результаты бактериологических исследований на туберкулез в ветеринарных лабораториях Российской Федерации за 1978-2008гг.

Ретроспективный анализ данных статистической ветеринарной отчетности показал, что количество проведенных лабораториями экспертиз биоматериала от реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота относительно стабильно, но в последние годы проявляется тенденция снижения.

В 1982-1992гг. в среднем за год проводилось 34,4 тыс. экспертиз, в 2000-2007гг. -17,8 тыс. Количество выделенных культур микобактерий было сравнительно невелико и колебалось в различные годы от 7,2% (1985г.) до 3,2% (2005г.). При этом на долю туберкулезных микобактерий приходилось 89,5% в 1982-1992гг. и 55,2% - в 20002007гг. Различные виды нетуберкулезных микобактерий в 1982-1992гг. выделяли в 18,0% и в 2000-2007гг. - в 44,8% случаев (табл. 3).

Снижение количества бактериологических экспертиз на туберкулез коррелирует со снижением количества неблагополучных пунктов, заболеваемости и пораженности туберкулезом туш убитых животных (г = 0,8-0,9).

Таблица 3 - Результаты бактериологических исследований биоматериала от крупного рогатого скота на туберкулез в Российской Федерации за 1982-1992гг. и

2000-2007ГГ.

№ п/п Годы К-во новых н/п К-во экспертиз К-во выделенных культур микобактерий % Из них:

Возбу дите-ли туберкулеза % Нетубер кулез-ные микобак терии %

1. 1982 254 18566 1310 7,05 1262 96,3 48 3,6

2. 1983 384 26276 1693 6,4 1629 96,2 64 3,7

3. 1984 463 26043 1353 5,23 1230 90,9 123 9,0

4. 1985 568 24969 1814 7,2 1453 80,0 361 19,9

5. 1986 749 ■36615 2273 6,2 1869 82,2 404 17,7

6. 1987 446 44808 2198 4,9 1706 77,6 492 22,4

7. 1988 471 48996 2086 4,2 1583 75,8 503 24,1

8. 1989 382 51036 2623 5Д 1848 70,4 775 29,5

9. 1990 198 32018 1461 4,5 1163 79,6 298 20,3

10. 1991 205 35514 1258 3,5 1023 81,3 235 18,7

11. 1992 257 33895 1803 5,3 1518 84,1 285 15,8

Всего 4377 378736 19872 5,2 17802 89,5 3588 18,0

В среднем за год 398,0 34430,5 1806,5 5,2 1618,3 326,2

1. 2000 145 22410 1313 5,8 927 70,6 386 29,4

2. 2001 78 22384 973 4,3 466 47,8 514 70,2

3. 2002 71 21602 872 4,0 476 54,5 396 45,4

4. 2003 87 19868 664 3,3 518 78,0 146 22,0

5. 2004 50 17962 733 4,0 316 43,1 417 56,8

6. 2005 45 15378 488 3,2 207 42,4 281 57,6

7. 2006 29 13722 589 4,3 218 37,0 371 63,0

8. 2007 35 9405 382 4,0 195 51,0 187 49,0

Всего 540 142731 6013 4,2 3323 55,2 2697 44,8

В среднем за год 67,5 17841,3 751,6 415,3 337,1

В подавляющем числе выделяли культуры М. bovis (79,2% в 1978-1994гг. и 95,9% в 2000-2006гг.). Культуры М tuberculosis выделяли в среднем в количестве 1,4% в 1978-1994гг. и 2,1% - в 2000-2006гг. Удельный вес изолированных культур М. avium также невелик и составил в среднем 2,0% в 1978-1994гг. и 2,1% - в 20002006гг. Эти данные свидетельствует об отсутствии влияния М. tuberculosis и М. avium на проявление эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота.

Результаты анализа полученных культур нетуберкулезных микобактерий показали преимущественное выделение быстрорастущих микобактерий (59,2%), в то время как нефотохромогенных культур было 14,7%, фотохромогенных - 3,9% и скотохромогенных - 22,3%.

По бактериологическому исследованию биоматериала от свиней ежегодно проводили в среднем 274 экспертизы и выделяли по 305 культур микобактерий (15,8% исследованных проб). Из выделенных культур 59,7% приходится на возбудителей туберкулеза и 40,3% культур - на нетуберкулезные микобакгерии. Среди возбудителей туберкулеза 63,2% культур составляют М. avium, 35,7% - М. bovis и 1,1% - М. tuberculosis. Это свидетельствует об отсутствии влияния М. tuberculosis на эпизоотический процесс туберкулеза свиней, обусловленного М. bovis.

2.2.3. Видовой состав нетуберкулезных микобактерий, выделенных в различных регионах Российской Федерации

Частота выделения культур и их видовой состав зависит от географического положения субъектов РФ. Отмечается вариабельность видов нетуберкулезных микобактерий. По данным В.Н. Кудякова (1984), в хозяйствах Пензенской области чаще выделялись микобактерии III группы по Раньону. Г.А. Юдин (1987) выделял М. intracellulare в 30,6%, М. avium - в 15,3%, М. vaccae - в 14% и М. phlei - в 6,5%, в единичных случаях - М. smegmatis, М. fortuitum и М. scrofolaceum. Н.П. Овдиенко с соавт. (1989) также чаще выделяли микобакгерии III группы по Раньону, среди которых превалировали культуры М. avium-intracellulare. В хозяйствах Вологодской области полученные изоляты принадлежали к микобактериям III (36,0%) и IV (28,0%) групп по Раньону (А.И. Кузин, Л.К. Семина, 1991).

В Сибири и на Дальнем Востоке A.C. Донченко (1987), в основном, выделял микобактерии комплекса avium-intracellulare, М. smegmatis и М. fortuitum. В зоне Западной Сибири выделение нетуберкулезных микобактерий колебалось от 4,0 до 93,3% (Л.В. Погуляева, Т.А. Беспалова, 1991), с высокой частотой выделения

нефотохромогенных микобактерий (до 50,0%) и быстрорастущих микобактерий. Отмечены единичные случаи выделения фотохромогенных (1,2%) и скотохромогенных (2,4%) микобактерий. На территории Западно-Сибирского региона Ю.И. Смолянинов (1994) выделял М. smegmatis (50%), М. fortuitum (32%), М. vaccae (8,7%), М. avium-mtracellulare (6,5%), М. phlei (2,2%).

В хозяйствах Алтайского края И.П. Никифоров и соавт. (1991) выделяли культуры микобактерий всех четырех групп по Раньону.

И.В. Эфендиева и соавт. (2001) выделяли от животных в хозяйствах Дагестана, Северной Осетии, Чечни и Краснодарского края нетуберкулезные микобактерии II (51,3%), III (4,2%) и IV (44,5%) групп, среди которых основная масса относилась к М. scrofulaceum, М. gordonae, М. smegmatis и М. fortuitum. P.A. Нуратинов и соавт. (1990) в хозяйствах Дагестана выделяли в 81,9% случаев микобактерии II (М. scrofulaceum, М. gordonae) и IV (М. fortuitum, М. smegmatis и М. phlei) групп по Раньону. Ю.Ю. Данко (1983) в хозяйствах Ленинградской, Псковской и Калининградской областей чаще выделял культуры М. avium-intracellulare (63,6%). Также чаще выделяли (14,1%) эти микобактерии в хозяйствах Амурской области, Приморского и Хабаровского краев (Н.М. Мандро, 2001).

Н.И. Прокопьева (2003) отмечает особенность Якутского региона в превалирующем выделении культур М. vaccae. Однако, в количественном отношении, отмечается снижение выделения этого вида микобактерий с 60,4% в 1991-1992гг. до 36,1% в 2001-2002гг. Кроме М. vaccae, автор выделяла М. phlei, М. fortuitum, М. smegmatis, М. kansasii, М. diernhoferi и М. marinum.

Приведенные данные указывают на обширную и повсеместную распространенность нетуберкулезных микобактерий, роль которых возрастает в патологии людей и животных.

2.2.4. Результаты бактериологических исследований биоматериала животных зоопарка

Нами исследованы пробы помета птиц, пробы мазков из зоба птиц и биоматериал от павших и убитых животных, принадлежавших Московскому зоопарку.

При культуральном исследовании 14 проб помета из выгульных загонов птиц культуры микобактерий выделены в 2 случаях (14,2%), мазков из зоба 3 попугаев - в одном случае.

В результате исследований биоматериала от животных культуры микобактерий выделили в 18 из 32 случаев (56,25%). Культуры микобактерий выделили из биоматериала 3 ворон, 2 воробьев, 2 попугаев, цапли, фазана, 4 тетеревов, 2 кекликов, гуся болотного, ящерицы и слона.

Колонии микроорганизмов на яичных средах вырастали единичные или множественные точечные, чаще беспигментные, иногда кремового цвета.

Бактериоскопическим исследованием мазков, приготовленных из выросших колоний и окрашенных по Цилю-Нельсену, выявили кислотоустойчивые микобакгерии.

Рост культуры микобактерий из биоматериала слона наблюдали через 20-25 суток на среде ФАСТ-ЗЛ и через 25-30 суток на среде Левеиштейна-Йенсена при температуре 37°С. Колонии микобактерий были гладкими, цвета слоновой кости. Культура не росла на МПБ, а также на среде Левенштейна-Йенсена при температуре 18-22°С и 45°С и с добавлением хлористого и салициловокислого натрия. Изучение ферментативных свойств культуры показало отсутствие никотинамидазной, пиразинамидазной и уреазной активности. ПЦР-исследование культуры дало положительные результаты с тест-системой «Туб-Диф» и отрицательные - с тест-системами «MAIS-Диф» и «Авиум». Биологическим исследованием выявлен генерализованный туберкулез у кроликов и морских свинок. По совокупности изученных свойств культура микобактерий, выделенная из биоматериала слона, отнесена к М. bovis.

Культуры микобактерий, выделенные от гуся болотного, тетерева, фазана, цапли, воробья, попугая, вороны, кеклика и ящерицы были идентичными. На яичных средах культуры образовывали мягкие, влажные колонии (S-форма), серовато-белого или желтовато-белого цвета, хорошо росли при 37°С, слабее - при 45°С, на среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5% NaCl рост отсутствовал. Для выделенных культур характерны были положительная каталазная, никотинамидазная и пиразинамидазная активность. При ПЦР-исследованиях положительные результаты получены с тест-системой «MAIS-Диф» и «Авиум», отрицательные - с тест-системой «Туб-Диф». Биологическим исследованием культур идентифицирован возбудитель туберкулеза птичьего вида.

Таким образом, от птиц и ящерицы Московского зоопарка выделены культуры М. avium, а от слона - М. bovis.

2.2.5. Результаты испытаний питательной среды ВКГ со стимулятором роста в сравнении со средами Левенштейна-Иенсена и ФАСТ-ЗЛ

Целью нашего исследования была оценка культуральных, морфологических и биологических свойств туберкулезных и нетуберкулезных микобактерий, выращенных на среде ВКГ со стимулятором роста.

2.2.5.1. Исследование посевов на питательные среды Левенштейна-Иенсена, ФАСТ-ЗЛ и ВКГ референтных штаммов микобактерий

При посевах референтных штаммов микобактерий показано, что культура М.tuberculosis H37R,, выросла на среде ФАСТ-ЗЛ на 19, на среде Левенштейна-Йенсена -на 33 сутки. Культура M.bovis 8 выросла на среде ФАСТ-ЗЛ на 21, на Левенштейна-Йенсена - на 39 сутки. Культура M.bovis BCG выросла на среде Левенштейна-Йенсена на 4 сутки (на ФАСТ-ЗЛ роста не выявляли). Культура M.avium 2282 выросла на 4 сутки на среде Левенштейна-Йенсена и на 16 сутки - на ФАСТ-ЗЛ.

При посеве культур на среду ВКГ М. tuberculosis H37RV, М. bovis 8, M.bovis BCG, М. avium 2282 в разведениях со стимулятором роста (от 1 мг/см3 и далее до 10"6) после выдерживания их в термостате при 37°С в течение 24 и 48ч. на 2-4 сутки получен рост культур всех видов микобактерий. Колонии росли в виде полупрозрачных, белых восковидных или серо-белого цвета колоний, иногда с желтоватым оттенком, с ровной поверхностью и краями. Колонии легко снимаются с поверхности среды и суспендируются в физиологическом растворе.

Морфологически все выделенные культуры отличаются от традиционных представлений о возбудителе туберкулеза. При микроскопии мазков, окрашенных по Цилю-Нельсену, отмечены разные формы клеток: от кокков и овоидов голубого и розового цвета до характерных палочек красного цвета с зернистостью.

При посеве штаммов М. fortuitum и М. intracellulare рост на среде ВКГ наблюдали в течение от 2 до 15 суток. На среде появлялись круглые полупрозрачные колонии серо-белого цвета, иногда с желтоватым оттенком, легко снимающиеся с поверхности и суспендирующиеся в физиологическом растворе. При дальнейшем культивировании наблюдали слияние колоний в сплошной «газонный» рост.

При микроскопии выросших культур нетуберкулезных микобактерий на среде ВКГ во всех мазках обнаруживали мелкие красные палочки, изогнутые и разной формы (в виде капли, головастика) - уже на вторые сутки культивирования.

2.2.5.2. Результаты исследований по выделению микобактерий туберкулеза на среде ВКГ из биоматериала животных

Образцы биоматериала обрабатывали по методу А.П. Аликаевой (1963). Из суспензии обработанного материала готовили мазки и отбирали пробы для ПЦР-исследования. Оставшуюся суспензию использовали для посевов на питательные среды. ПЦР-исследование проводили с тест-системой «МТБ-КОМ».

При микроскопии мазков, приготовленных из посевной суспензии и окрашенных по Цилю-Нельсену, во всех случаях обнаружили палочки красного цвета.

На среде ВКГ через 48 часов после посева рост культур наблюдали во всех образцах, а на МПА и МПБ рост микрофлоры отсутствовал. На среде ВКГ культуры росли в виде сплошного воскоподобного налета бело-серого цвета с желтоватым оттенком.

Микроскопией мазков, приготовленных из 2- и 5-суточных культур, выросших на среде ВКГ, и окрашенных по Цилю-Нельсену, во всех случаях выявляли овоиды, кокки и палочки разного размера, голубого и красно-розового цвета, а также образования округлой формы.

Микроскопией мазков из 15-суточной культуры, выросшей на среде ВКГ, и окрашенных по Цилю-Нельсену, на фоне синих длинных и тонких палочковидных образований выявляли овоиды и кокки розового цвета, а в мазках этих же культур 1,5-месячного роста на ВКГ выявляли красного цвета россыпи кокков, ди- и тетракокки, овоиды, большое количество палочек разной величины с зернистостью, что подтверждает их способность трансформироваться в классические формы возбудителей туберкулеза.

При посеве на среды ВКГ, Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-ЗЛ, МПА и МПБ стимулятора роста и при ежедневном просмотре посевов в течение 15 дней роста микрофлоры не выявили.

По шесть образцов патологического материала крупного рогатого скота с характерными для туберкулеза изменениями, а также 7- и 15-суточных культур, выросших из образцов патматериала на среде ВКГ, были исследованы методом ПЦР. В четырех образцах патматериала, а также в двух образцах 7-сугочных культур и в трех образцах культур 15-суточного роста получен положительный результат ПЦР с тест-системой «МТБ-КОМ», т.е. определено наличие ДНК возбудителя М.Ьоу1з (табл. 4).

Таблица 4 - Результаты ПЦР-исследования патматериала и культур, выросших на среде ВКГ из патматерила крупного рогатого скота с характерными для туберкулеза изменениями

№№ образцов №№ животных Результат исследования

патматериала культур, выросших в течение:

7 суток 15 суток

1 6 положительный отрицательный положительный

2 12 отрицательный отрицательный отрицательный

3 1469 положительный положительный отрицательный

4 399 положительный отрицательный положительный

5 214 отрицательный отрицательный положительный

б 57 положительный положительный отрицательный

2.2.5.3. Результаты биологического исследования культур, выросших на среде ВКГ

Для исследования использованы культуры микобактерий, выросшие на среде ВКГ из посевов референтных штаммов возбудителя туберкулеза человеческого, бычьего и птичьего видов, а также культуры, выросшие на этой среде из посевов биоматериала от крупного рогатого скота с туберкулезными изменениями (3 культуры). Для контроля взяли культуры референтных штаммов, выросших на среде Левенштейна-Йенсена.

В опытах использовали 27 морских свинок и 27 кроликов. Культуры, выращенные на среде ВКГ и среде Левенштейна-Йенсена, использовали для заражения животных в равных дозах, каждой культурой заражали по 3 морские свинки и по 3 кролика. В течение опыта пало 3 кролика из группы животных, зараженных референтным штаммом М.аушш 2282. Оставшиеся животные были убиты через 71 сутки после заражения.

При патологоанатомическом вскрытии морских свинок, зараженных М.ЬоУ18 и материалом от животных с туберкулезными изменениями, наблюдали увеличение паховых лимфоузлов, в легких - геморрагические участки, полупросвечивающиеся узелки серо-желтого цвета, зернистость, увеличение печени и селезенки, в обоих органах - крупные и мелкие туберкулы, а у морских свинок, зараженных М.ШЬегсиЬзк, кроме описанных изменений, обнаруживали язвочки и некроз в месте введения, увеличение региональных лимфоузлов. У морских свинок, зараженных культурами М.аушт, не выявили патологоанатомических изменений.

У кроликов, зараженных М.Ьоу13 и материалом от животных с туберкулезными изменениями, патологоанатомические изменения характеризовались увеличением легких с множеством очажков, отдельные очажки были в селезенке и печени. У кроликов, зараженных М.ШЬегси10313, в двух случаях отмечали единичные узелки в легких. В остальных случаях патологоанатомических изменений не обнаруживали. У павших и убитых кроликов, зараженных референтным штаммом М.аушт, установили однотипную патоморфологическую картину сепсиса: легкие увеличены и отечны, печень увеличена и кровенаполнена с хорошо выраженным рисунком долек, селезенка кровенаполнена и увеличена в 2-3 раза.

В делом, патологоанатомические изменения у животных, зараженных референтными штаммами возбудителей туберкулеза, были более выраженными, чем у животных, зараженных культурами со среды ВКГ. Кролики, зараженные референтным штаммом М.аушт, пали от септической формы туберкулеза, а кролики, зараженные культурой, выросшей на среде ВКГ, оставались живыми, но при вскрытии у них наблюдали очаги туберкулеза в паренхиматозных органах.

При гистологическом исследовании материала от животных, зараженных М.ШЬегси1оз1з и М.Ытэ, как референтными штаммами, так и культурами со среды ВКГ, находили гранулемы с некротизированным центром, окруженные зоной эпителиоидных, отдельных гигантских и лимфоидных клеток и соединительно-тканной капсулой. У кроликов, зараженных М.аушт, отмечена диффузная гистиоцитарно-эпителиоидная пролиферация во всех органах с наличием микобактерий в клетках пролиферата.

От всех животных биоматериал обрабатывали по методу А.П. Аликаевой (1963) и сеяли на среды: Левенштейна-Йенсена, МПА, МПБ и ВКГ.

В мазках из суспензии патматериала от животных, зараженных культурами, выросшими на среде ВКГ, окрашенных по Цилю-Нельсену, наблюдали клетки розово-красного цвета: кокки мелкие и крупные с полым центром, одиночные, кучками и небольшими цепочками, диплококки, «полоски» кокков, палочки короткие и длинные с полым центром и зернами по полюсам, прямые и изогнутые палочки, заключенные в «вакуоли», круглые и овальные формы с полым центром и зернами по краям, фигуры разной формы из кокков и палочек.

На МПБ и МПА роста микрофлоры не было, на среде Левенштейна-Йенсена через 1,5 мес. появились характерные колонии, выросшие из патматериала от морских свинок, зараженных М.Ьоу1з, через 2-3 недели - от кроликов, зараженных М.аушт.

Через 2-4 суток на среде ВКГ появились мелкие круглые полупрозрачные колонии серо-белого цвета, иногда с желтоватым оттенком, легко снимающиеся со среды и суспендирующиеся в физиологическом растворе. В дальнейшем колонии сливались, образуя на среде «газонный» рост.

При микроскопии мазков культур 6-15 суточного роста, выросших из патматериала на ВКГ, наблюдали красные мелкие и крупные кокки, диплококки, овоиды с полым центром, мелкие прямые и изогнутые палочки, иногда более крупные с полым центром, различные фигуры в виде «улиток», «торов», «крестов», слипшиеся конгломераты из кокков, овоидов и палочек.

При ПЦР-исследоваиии с системой «МТБ-КОМ» гомогеиатов от лабораторных животных положительные результаты получены в 8 из 12 (66,6%) случаев материала от зараженных животных М.1иЬегси1оз18, в 6 из 12 (50,0%) зараженных М.Ьоу1з, в 11 из 18 (61,1%) случаев от зараженных животных биоматериалом с туберкулезными изменениями.

Таким образом, биологическим исследованием культур, выращенных на среде ВКГ, подтверждена их идентичность с возбудителями туберкулеза.

2.2.5.4. Изучение возможности использования среды ВКГ для выделения культур микобактерий из крови зараженных животных

У 11 не павших лабораторных животных, зараженных микобактериями разных видов, через 71 сутки после заражения из сердца отбирали пробы крови (по 2,5 см3) в стерильные пробирки с 0,1 см3 гепарина, добавляли стимулятор роста и помещали в термостат при 37-3 8°С на 48ч. Пробы крови, обработанные стимулятором роста, сеяли на питательные среды: ВКГ, МПА и МПБ.

На МПА и МПБ роста микрофлоры не было, на среде ВКГ на 2-4 сутки наблюдали рост культур из всех 11 образцов крови в виде мелких круглых колоний бело-серого цвета, слившихся в «газон».

Через 6 суток культуры, выросшие из крови на среде ВКГ, пересеяли на среду Левенштейна-Йенсена, приготовили мазки и окрасили их по Цилю-Нельсену. В мазках наблюдали мелкие голубые кокки, иногда собранные в гроздья, клетки розово-красного цвета: вакуоли с зернистостью, крупные кокки, овоиды, толстые изогнутые палочки, прямые тонкие палочки с зернистостью и другие формы.

На среде Левенштейна-Йенсена через 1,5 мес. роста микроорганизмов не наблюдали.

2.2.5.5. Испытание РА для дифференциации культур микобактерий, выросших на среде ВКГ

Для дифференциации культур разных видов микобактерий, выросших на среде ВКГ, апробирована методика РА на стекле, предложенная А.П. Лысенко (2002).

В качестве антигена использовали культуры микобактерий человеческого и бычьего видов со среды ВКГ; антителами служили антисыворотки к M.bovis Vallee, к антигенам нетуберкулезных микобактерий, предоставленные автором разработки, а также негативная сыворотка крови крупного рогатого скота. Учет реакции проводили в течение 4 мин.

Установлено, что изоляты со среды ВКГ четко агглютинировались антисывороткой к М. bovis, частично - антисывороткой к антигенам нетуберкулезных микобактерий и не агглютинировались негативной сывороткой крови крупного рогатого скота.

Таким образом, РА на стекле может позволить дифференцировать культуры человеческого и бычьего видов, выросших на ВКГ, от птичьего вида и нетуберкулезных микобактерий, но не позволяет дифференцировать М. bovis и М. tuberculosis.

2.2.6. Усовершенствованная схема бактериологических исследований биоматериала на туберкулез и микобактериозы

При усовершенствовании схемы бактериологических исследований биоматериала мы исходили из результатов собственных исследований, анализа данных бактериологических исследований в ветеринарных лабораториях, данных научных исследователей и практических ветеринарных специалистов, занимающихся проблемами туберкулеза и микобактериозов.

Согласно «Наставлению по диагностике туберкулеза животных», утвержденному Департаментом ветеринарии МСХ РФ 18.11.02г., биоматериал от убитых животных исследуют культуральным (посев на питательные среды) и биологическим методом (заражение биоматериалом морских свинок). Для выращивания микобактерий используют плотные яичные среды Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-ЗЛ, ФИНН-2, Гельберга или Петраньяни. Рост на этих средах микобактерий туберкулеза бычьего вида обнаруживают на 20-60 сутки, человеческого - на 20-30, птичьего - на 10-20, нетуберкулезных микобактерий - на 3-30 сутки.

Полученные нами данные показывают, что на среде ВКГ рост микобактерий любого вида появляется намного раньше, на 2-4 сутки, и поэтому биоматериал следует

высевать как на яичные среды, так и на среду ВКГ. При этом необходимо проводить раздельно посевы суспензией, приготовленной из заглоточных, подчелюстных, бронхиальных и средостенных лимфоузлов, и суспензией, приготовленной из брыжеечных лимфоузлов и лимфоузлов области илеоцекального соединения и подвздошной кишки.

Одновременно следует проводить заражение биоматериалом не только морских свинок, но и белых мышей, по 2-3 животных каждого вида.

Независимо от обнаруженных патологических изменений следует проводить посевы биоматериала от морских свинок и белых мышей на яичные среды, например, Левенштейна-Йенсена и среду ВКГ. У выделенных культур изучают и описывают свойства, проводят идентификацию микобактерий с применением ПЦР-исследования с разными тест-системами (См. схему).

3. Выводы

1. Современная эпизоотическая ситуация туберкулеза крупного рогатого скота в РФ характеризуется проявлением тенденции снижения количества эпизоотических очагов, заболеваемости животных и туш с патологическими изменениями, характерными для этой болезни. Одновременно увеличивается проявление микобактериозов животных.

2. Создание компьютерного банка данных бактериологических исследований, отражающих динамику выделения культур микобактерий, обеспечивает возможность ретроспективного анализа и оперативной оценки обстановки по туберкулезу и микобактериозам в субъектах РФ.

3. Установлено, что ежегодно ветлабораториями страны проводится в среднем 17,8 тыс. бактериологических исследований на туберкулез крупного рогатого скота, из которых положительный результат не превышает 3,2-5,8%: 55,2% культур приходится на возбудителей туберкулеза и 44,8% - на нетуберкулезные микобакгерии. В структуре видовой принадлежности превалируют M.bovis - 95,2%. Удельный вес M.tuberculosis и M.avium среди выделяемых культур незначителен - 2,1 и 1,4%, соответственно. Из нетуберкулезных микобактерий 59,2% относятся к IV группе, 22,3% - ко II, 14,7% - к III и 3,9% - к I группе по классификации Ranyon (1959).

Видовой спектр микобактерий, выделяемых из биоматериала свиней (15,8%), представлен нетуберкулезными микобактериями — 40,3%, M.avium - 63,2%, M.bovis -35,7% и M.tuberculosis - 1,1%. У животных зоопарка превалируют микобактерии комплекса M.avium-intracellulare, в единичных случаях выделяются M.bovis.

4. Установлено, что на среде ВКГ не наблюдается различий в морфологии культур микобактерий разных видов: рост культур референтных штаммов М.ШЬегси1о513 Н37Ку, М.Ьоу13 8, М.аушт 2282 появляется на 2-4 сутки в виде круглых полупрозрачных колоний серо-белого цвета, сливающихся к 5-6 суткам в «газон». При микроскопии мазков культур референтных штаммов микобактерий, выросших на среде ВКГ, окрашенных по Цилю-Нельсену, наблюдали полиморфизм клеток: кокки, овоиды, прямые и изогнутые палочки разной величины, шаро-, груше-, амебоподобные формы с полым центром и зернистостью - голубого, розового или красно-фиолетового цвета.

5. ПЦР-исследование шести культур микобактерий, выросших на среде ВКГ из патматериала крупного рогатого скота с характерными для туберкулеза изменениями, в 5 случаях подтверждает наличие ДНК возбудителя бычьего вида.

6. Биологическим исследованием подтверждена идентичность патологоанатомических изменений у морских свинок и кроликов, вызываемых культурами, выросшими на среде ВКГ, и культурами возбудителей туберкулеза, выросшими на средах Левенштейна-Йенсена и ФАСТ-ЗЛ.

7. Усовершенствованная схема бактериологических исследований биоматериала животных, дополнительно включающая использование белых мышей и питательной среды ВКГ для выделения микобактерий, изучение биохимических свойств культур и их идентификацию в полимеразной цепной реакции позволяет своевременно определить эпизоотический статус поголовья скота по туберкулезу и микобакгериозам.

4. Практические предложения

1. Для обеспечения анализа и оценки изменений обстановки в субъектах РФ рекомендуется использовать компьютерные базы данных по эпизоотологии туберкулеза и микобактериозов животных.

2. Для выделения культур микобактерий одновременно с яичными средами (Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-ЗЛ и др.) предлагается использовать питательную среду ВКГ, морских свинок и беспородных белых мышей. Посев на питательные среды и заражение морских свинок и белых мышей следует проводить отдельно материалом лимфоузлов брыжеечных, а также из области илеоцекального соединения и подвздошной кишки и материалом подчелюстных, заглоточных, бронхиальных и средостенных лимфоузлов.

3. Данные по выделению и идентификации культур микобактерий рекомендуется учитывать при характеристике эпидемических и эпизоотических очагов туберкулеза в сельской местности.

4. В ветеринарных лабораториях рекомендуется проводить не только дифференциацию культур микобактерий на группы по классификации Яапуоп (1959), а и определение их видовой принадлежности.

Схема

бактериологических исследований биоматериала животных на туберкулез и микобактериоэ«

Биоматериал |

Подчелюстные Заглоточные Бронхиальные средостенные лимфоузлы Брыжеечные лимфоузлы, лимфоузлы области илеоиенкального соеденения и подвздошной кишки

М. bovis

М. tuberculosis

=|> м.

Нетуберкулеэные микобактерии

ПЦР MAIS - диф с соответствующими праймерами

5. Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Соколова Е.Э. Бактериологическая диагностика туберкулеза животных / Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Смолянинов Ю.И., Боганец Н.С., Калмыков М.В., Таранова JI.A., Соколова Е.Э., Мельник Н.В., Коломыцев С.А., Хруленко В.Н. // Ветеринария. - 2006.-№12.-С.З-5.

2. Соколова Е.Э. Патоморфологические изменения у лабораторных животных, зараженных нетуберкулезными микобактериями / Колоскова Э.Л., Якушева О.В., Суворов B.C., Толстенко Н.Г., Соколова Е.Э. // Материалы международной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Я.Р. Коваленко. Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных. - М.,2006.- С. 252-254.

3. Соколова Е.Э. О патогенности нетуберкулезных микобактерий для морских свинок и белых мышей / Толстенко Н.Г., Колоскова Э.Л., Суворов B.C., Касьянова Е.А., Соколова Е.Э. // Материалы международной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Я.Р. Коваленко. Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных.- М.,2006.-С. 390-393.

4. Соколова Е.Э. Патологоанатомические исследования и дифференциальная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота / Найманов А.Х., Якушева О.В., Толстенко Н.Г., Овдиенко Н.П., Суворов B.C., Колоскова Э.Л., Новосельцева Н.В., Соколова Е.Э., Касьянова Е.А. // Материалы международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел.- М., 2008,- С. 195-203.

5. Соколова Е.Э. Изучение культуральных свойств микобактерий, выращенных на среде ВКГ / Соколова Е.Э., Толстенко Н.Г., Букова Н.К., Касьянова Е.А. // Материалы международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел.- М.,2008.-С. 266-271.

6. Соколова Е.Э. Совершенствование системы противотуберкулезных мероприятий в сельских очагах туберкулеза / Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Хруленко В.Н., Соколова Е.Э., Крюков C.B., Мельник Н.В., Фаизов Т.Х. // Ветеринарный врач,- 2009.- № 4.-С.37-39.

7. Соколова Е.Э. К вопросу взаимовлияния эпидемического и эпизоотического процессов туберкулеза и микобактериозов в Московской области / Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Касьянова Е.А., Хруленко В.Н., Соколова Е.Э., Аникеев М.А. // Ветеринарный врач,- 2009.-№6.-С. 17-20.

Подписано в печать 05.10.2010 г. Печать цифровая Формат 60x84/16 Бумага офсетная 80 гр/м2 Усл. п.л. 1,75 Тираж 100 Заказ №315

Отпечатано в ООО «НИПКЦ Восход-А» 111621, Москва, ул. Оренбургская, д. 15, офис 226 Тел./факс: (495)700-12-08, 700-12-17 e-mail: admin@vosxod.org www.vosxod.org

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Курандо, Екатерина Эдуардовна

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1 Восприимчивость животных к возбудителям туберкулеза и нетуберкулезным микобактериям.

2.2. Лабораторные методы диагностики туберкулеза животных.

2.2.1. Бактериоскопический метод исследования.

2.2.2. Культуральный метод исследования.

2.2.3. Биологический метод исследования.

2.2.4. Молекулярно-генетические методы исследования.

2.2.5. Патоморфологический метод.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации"

Актуальность темы. В/ХХГвеке туберкулез продолжает оставаться одной из. наиболее сложных проблем инфекционной патологии. В' системе' профилактических и-оздоровительных мероприятий основополагающее место занимает комплекс диагностических методов; включающий' клиническое, аллергическое, патологоанатомическое и бактериологическое исследования животных. Проведенные в XX веке противоэпизоотические мероприятия привели к сокращению распространенности туберкулеза на значительной территории Российской Федерации, уменьшению количества больных животных с поздними и генерализованными формами туберкулеза, но, в то же время увеличению поголовья скота с проявлением микобактериозов. Изменилась роль каждого метода исследования животных на туберкулез. В 30-40 годах подвергали убою животных, клинически больных и с открытыми формами туберкулеза легких, вымени, кишечника и матки, которые диагностировались, в основном, бактериоскопическим исследованием. С 1932г. в основу противотуберкулезных мероприятий был положен метод Банга, а в 1940г. в качестве основного метода диагностики туберкулеза было введено аллергическое исследование животных. Результаты туберкулиновой пробы являлись решающими при определении состояния по туберкулезу животных и хозяйств, где на фоне широкой распространенности болезни ошибки были редки.

На рубеже 50 - 60 годов возникла и стала широко распространяться ситуация, когда у реагировавших на туберкулин животных диагноз на туберкулез не подтверждался- бактериологическим исследованием. При этом исследовании выделяли различные виды нетуберкулезных микобактерий, роль которых была недостаточно изучена в патологии человека и животных. Появилась, проблема микобактериозов и необходимость определения эпизоотического статуса поголовья скота. С этого времени показания туберкулиновой пробы стали ориентировочными, а эпизоотический статус хозяйств определяют по результатам данным бактериологического исследования, так как от выделенных видов микобактерий зависит уровень проведения профилактических и оздоровительных мероприятий. Эффективность, выделения* возбудителя из биологического материала во многом зависит от вида- питательной среды. Несмотря на большое, разнообразие питательных сред, применяемых при культуральном-исследовании, срок выделения возбудителя туберкулеза колеблется практически в одинаковых пределах. Кроме того, не всегда удается со 100% эффективностью выявить возбудителя туберкулеза из патологического материала больных животных, тем более обнаружить микобактерии, присутствующие в исследуемом образце в небольшом количестве или с ослабленной жизнеспособностью и ферментативной активностью (В.В. Власенко, 1998).

В.В. Власенко и П.И. Багрий (2001) разработали оригинальную питательную среду ВКГ со стимулятором роста для ускоренного выделения возбудителей туберкулеза. Среда обладает свойствами, способными нивелировать недостатки традиционных питательных сред, а также позволяет выделять возбудителей туберкулеза не только из патологического материала, но и из биологических жидкостей организма животных: крови, мокроты, мочи в течение 2-4 суток. По данным В.В. Власенко и П.И. Багрий (2001), А.П. Лысенко и соавт. (2004), применение среды ВКГ и стимулятора роста позволяет раскрыть многообразие жизнеспособных форм микобактерий в виде палочек, кокков, овоидов, фильтрующихся, Ь-форм и других форм, которые не выявляются на других питательных средах. К достоинству среды ВКГ авторы относят высокую чувствительность и быстрый рост колоний. Внедрение в ветеринарную бактериологическую практику новой питательной среды, которая позволила бы ускорить выделение возбудителей туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий из биологического материала, представляется с весьма актуальным.

В последнее время в практику лабораторной диагностики туберкулеза внедряются молекулярно-генетические и иммунологические методы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью, позволяющие обнаружить микобактерии в пробах биоматериала в короткие сроки (И.Г. Шемякин и В.Н. Степаншина, 2000). Однако эти методы еще не достаточно используются в ветеринарной практике. В' современных условиях, при изменяющейся эпизоотической ситуации, актуальным является ревизионная оценка- применяемых методов исследования животных на туберкулез и усовершенствование комплекса бактериологической диагностики болезни.

Задачи исследований:

- создать компьютерный банк данных бактериологических исследований, отражающих изменения показателей распространенности туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота в субъектах Российской Федерации в 1978-2008гг.; изучить культуральные, морфологические, биохимические и биологические свойства микобактерий, выделенных из биоматериала зоопарковых животных;

- изучить чувствительность питательных сред ВКГ, Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-ЗЛ к росту референтных туберкулезных и нетуберкулезных микобактерий;

- изучить биологические свойства микобактерий, выращенных на среде ВКГ, на морских свинках и кроликах;

- усовершенствовать схему бактериологических исследований на туберкулез животных.

1.3. Научная новизна. Впервые охарактеризованы динамика и закономерности проявления эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота и птицы в Российской Федерации, проведен ретроспективный^ анализ результатов бактериологической диагностики туберкулеза животных в РФ за 1961-2008гг. Создан компьютерный банк данных бактериологических исследований, отражающих изменения показателей распространенности туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота в субъектах Российской Федерации в 1978-2008гг. Определен видовой состав микобактерий, выделяемых в различных регионах Российской Федерации.

1.4. Практическая значимость работы. Результаты исследования по определению видового спектра' микобактерий, выделенных от крупного рогатого скота и объектов внешней среды, создают основу дифференцированного проведения профилактических 'и оздоровительных мероприятий при микобактериальных инфекциях. Усовершенствованная схема исследований биоматериала от животных повышает качество бактериологических исследований и может быть использована в бактериологических и научных лабораториях.

О практической значимости результатов исследований также свидетельствуют разработанные- автором (в соавторстве) «Методические рекомендации по диагностике микобактериальных инфекций животных» и «Методические рекомендации по идентификации Mi avium subsp. paratuberculosis и других микобактерий комплекса avium-intracellulare», утвержденные директором ГНУ- «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным-М.И. 15.03.10г., и методические рекомендации «Система медико-ветеринарных мероприятий в сельских очагах туберкулеза», утвержденные директором ГНУ «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным М.И., директором ВНИТИБП, академиком РАСХН Самуйленко А.Я. и директором ФГУ «Центр ветеринарии» JI.K. Кишем в июле 2009г.

1.5. Личный вклад автора заключается в постановке цели и задач, сборе эпизоотологических данных и результатов бактериологических исследований биоматериала от животных в ветеринарных лабораториях РФ за 1961-2008гг., создании компьютерной базы данных бактериологических исследований, сборе и анализе видового состава нетуберкулезных микобактерий, выделяемых в различных регионах РФ, бактериологическом исследовании биоматериала от животных зоопарка и идентификации выделенных микобактерий, испытании новой среды ВКГ со стимулятором роста, анализе, обобщении и интерпретации полученных результатов собственных исследований и исследований, проведенных научными сотрудниками по проблеме туберкулеза и микобактериозов, в подготовке научных публикаций, участии в разработке методических рекомендаций.

1.6., Апробация работы. Материалы работы доложены на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Я.Р. Коваленко (г. Москва, 2006г.), на XV Московском Международном ветеринарном конгрессе (г. Москва, 2007г.), на Международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел» (г. Москва, 2008г.), на заседаниях ученого совета ВИЭВ (2007, 2008; 2009гг.). Основные положения, выводы и практические предложения; изложенные в диссертации, обсуждены и одобрены на межлабораторном совещании- научных сотрудников ВИЭВ (2010г.). Материалы диссертации- используются при чтении цикла лекций врачам-бактериологам ветеринарных- лабораторий субъектов РФ на курсах повышения квалификации ветеринарных врачей в ФГУ «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория».

1.7. Основные положения, выносимые на защиту. Полученные результаты исследований позволяют вынести на защиту следующие основные положения: результаты ретроспективного анализа изменений проявления эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота и птицы в Российской Федерации за 1961-2008гг.; результаты анализа бактериологических исследований биоматериала животных в ветеринарных лабораториях РФ за 1978-2008гг.;

- видовой состав микобактерий, выделяемых в различных регионах РФ;

- распространенность микобактериозов крупного рогатого скота в субъектах РФ;

- эффективность питательной среды ВКГ для ускоренного выделения микобактерий; усовершенствованная' схема бактериологических исследований биоматериала на туберкулез и микобактериозы крупного рогатого скота.

1.8. Публикация результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 7 научных статей, в том числе три — в научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ.

1.9. Благодарности. Автор выражает глубокую благодарность за содействие и участие в выполнении некоторых фрагментов диссертации сотрудникам лаборатории микобактериозов и сектора патоморфологии ВИЭВ (проф. Н.П. Овдиенко, проф. А.Х. Найманову, кандидатам ветеринарных наук Н.Г. Толстенко, О.В. Якушевой, B.C. Суворову, М.С. Калмыковой, Э.Л. Колосковой) и директору ВИЭВ академику РАСХН М.И. Гулюкину, сотрудникам ФГУ «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория» (кандидату ветеринарных наук Л.А. Тарановой, ветврачу Н.В. Новосельцевой) и директору ЦНМВЛ, кандидату биологических наук М.В. Калмыкову.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Курандо, Екатерина Эдуардовна

5. Выводы

3. Установлено, что ежегодно ветлабораториями страны проводится в среднем 17,8 тыс. бактериологических исследований на туберкулез крупного рогатого скота, из которых положительный результат не превышает 3,2-5,8%: 55,2% культур приходится на возбудителей туберкулеза и 44,8% - на нетуберкулезные микобактерии. В структуре видовой принадлежности превалируют M.bovis - 95,2%. Удельный вес M.tuberculosis и M.avium среди выделяемых культур незначителен — 2,1 и 1,4%, соответственно. Из нетуберкулезных микобактерий 59,2% относятся к IV группе, 22,3% - ко II, 14,7%) - к III и 3,9% - к I группе по классификации Ranyon (1959).

Видовой спектр микобактерий, выделяемых из биоматериала свиней (15,8%), представлен нетуберкулезными микобактериями — 40,3%, M.avium -63,2%, M.bovis - 35,7%) и M.tuberculosis - 1,1%. У животных зоопарка превалируют микобактерии комплекса M.avium-intracellulare, в единичных случаях выделяются M.bovis.

4. Установлено, что на среде ВКГ не наблюдается различий в морфологии культур микобактерий разных видов: рост культур референтных штаммов M.tuberculosis H37RV, M.bovis 8, M.avium 2282 появляется на 2-4 сутки в виде круглых полупрозрачных колоний серо-белого цвета, сливающихся к 5-6 суткам в «газон». При микроскопии мазков культур референтных штаммов микобактерий, выросших на среде ВКГ, окрашенных по Цилю-Нельсену, наблюдали полиморфизм клеток: кокки, овоиды, прямые и изогнутые палочки разной величины, шаро-, груше-, амебоподобные формы с полым центром и зернистостью - голубого, розового или красно-фиолетового цвета.

6. Биологическим исследованием подтверждена идентичность патологоанатомических изменений у морских свинок и кроликов, вызываемых" культурами, выросшими на среде ВКГ, и культурами возбудителей туберкулеза, выросшими на средах Левенштейна-Йенсена и ФАСТ-ЗЛ.

6. Практические предложения

4. В ветеринарных лабораториях рекомендуется проводить не только дифференциацию культур микобактерий на группы по классификации Ranyon (1959), а и определение их видовой принадлежности.

Практические предложения включены в «Методические рекомендации по диагностике микобактериальных инфекций животных» и «Методические рекомендации по идентификации М. avium subsp. paratuberculosis и других микобактерий комплекса avium-intracellulare», утвержденные директором ГНУ «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным М.И. 15.03.10г., и методические рекомендации «Система медико-ветеринарных мероприятий в сельских очагах туберкулеза», утвержденные директором ГНУ «ВИЭВ», академиком РАСХН Гулюкиным М.И., директором ВНИТИБП, академиком РАСХН Самуйленко А.Я. и директором ФГУ «Центр ветеринарии» Л.К. Кишем в июле 2009г.

2.2.6. Заключение

Приведенные литературные данные показывают, что несмотря на проведение профилактических и оздоровительных мероприятий, туберкулез считается фактором значительной заболеваемости и смертности людей, продолжает наносить экономический ущерб народному хозяйству. В последние десятилетия повсеместно отмечается рост заболеваний людей и животных микобак-териозами, вызванными нетуберкулезными бактериями.

Успех борьбы с туберкулезом и микобактериозами во многом зависит от своевременной и правильной диагностики. Арсенал средств и методов диагностики болезни достаточно богат и разнообразен, разработка и совершенствование которых продолжается до настоящего времени со дня открытия возбудителя. Основными методами при выяснении эпизоотического статуса стад крупного рогатого скота и других видов животных является патоморфологический и бактериологический. Вместе с тем, выделение микобактерий туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий из биологического материала вызывает определенные трудности, связанные с различными их биологическими особенностями, сроками роста на питательных средах и длительностью постановки биологической пробы на лабораторных животных. В «Наставлении по диагностике туберкулеза животных» (2002), предусмотрено проведение лабораторных исследований в срок до 6 мес.

Несмотря на успехи, достигнутые наукой и практикой в вопросах бактериологической диагностики, на современном этапе в связи с установленным фактом эволюционной изменчивости возбудителя, экологическим техногенным прессом, а также коренными преобразованиями ведения животноводства в стране, в значительной мере снизилась эффективность лабораторных исследований при микобактериальных инфекциях животных.

В связи с этим, ревизионная оценка, разработка и усовершенствование комплекса лабораторных исследований для выявления возбудителей туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий в современных условиях ведения животноводства и внедрение их в ветеринарную бактериологическую практику представляется весьма актуальным.

3. Собственные исследования 3.Г Материалы и .методы исследований

Работав выполнена* в 2005-2009 гг. в- лаборатории микобактериозов ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной» ветеринарии им. Я.Р.' Коваленко» и в отделе бактериологии- ФГУ «Центральная' научно-методическая ветеринарная лаборатория» в. соответствии с заданием-02.01.01. Российской научно-технической программы фундаментальных и приоритетных ■ прикладных исследований.

Банк статистической информации; необходимой для анализа проявлений эпизоотического процесса туберкулеза в Российской Федерации, формировали на основе данных официальной ветеринарной отчетности:

- отчеты о заразных болезнях животных (формы 1-вет. № 28-В);

- отчеты о противоэпизоотических мероприятиях (форма 1-вет.А);

- отчеты о работе ветеринарных лабораторий (форма 4-вет.);

- отчеты о ветеринарно-санитарном надзоре на мясоперерабатывающих предприятиях (форма 30-ВС и 6-вет.).

Осуществляли сбор годовых отчетных данных по туберкулезу крупного рогатого скота по всем субъектам Российской Федерации за 19922008гг. Использовали также материалы официальной статистики, отражающие масштабы неблагополучия и выявления параспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота в разных субъектах Российской Федерации, результаты бактериологических исследований на туберкулез, данные о характере эпидемиологической обстановки. При анализе проявлений эпизоотического процесса использовали методы, описанные в Рекомендациях по методике эпизоотического исследования (И.А. Бакулов с соавт., 1975), в Руководстве по общей эпизоотологии (под редакцией И. А. Бакуловат и А.Д. Третьякова, 1979), в Методических указаниях по эпизоотическому исследованию (И.А. Бакулов с соавт., 1982).

Для анализа уровня бактериологических исследований, выделения и идентификации культур микобактерий в ветеринарных лабораториях

Российской Федерации из биоматериала и объектов внешней среды, собирали данные экспертиз лабораторий, результатов исследований научно-исследовательских институтов и ветеринарных станций, опубликованные в научных и научно-производственных ветеринарных печатных изданиях.'

Поступающий биоматериал из некоторых хозяйств Российской Федерации исследовали бактериологически с постановкой бйопробы. Всего-исследовали биоматериал от 20 голов крупного рогатого скота из неблагополучных по туберкулезу хозяйств, реагировавших на туберкулин для млекопитающих и имеющих характерные для туберкулеза изменения, 5 коров из благополучных по туберкулезу хозяйств, убитых с диагностической целью; козы; 32 животных (слон, черепаха, ящерица, птица) и 14 проб помета выгульных загонов птиц, направленных для исследований из Московского зоопарка.

Культуральные, морфологические и биохимические свойства микобактерий изучали в соответствии с методическими рекомендациями «Бактериологическая и биохимическая идентификация микобактерий» (Оттен Т.Ф., 1994), с приказом Минздрава СССР №558 от 08.06.78 года «Об унификации микробиологических методов исследований при туберкулезе» и приказом Минздрава РФ № 109 от 21 марта 2003 года «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», «Наставлением по диагностике туберкулеза животных» (М., 2002). Также в работе использованы методические рекомендации «Новые методы исследования возбудителей антропозоонозов. Туберкулез» (М., 2003г.).

При бактериоскопическом исследовании биоматериала от животных готовили мазки из внутренних органов и тканей, высушивали и окрашивали по Цилю-Нельсену.

При культуральном исследовании биоматериал обрабатывали по* методу А.П. Аликаевой (1963) и высевали на среды Левенштейна-Йенсена и ФАСТ-ЗЛ. Одновременно суспензией из биоматериала заражали по 2 морские свинки. Через 2-3 дня пробки пробирок парафинировали, посевы культивировали на протяжении 3-6 месяцев при температуре 37-38°С. При появлении роста определяли характер колоний, готовили мазки и красили их по Цилю-Нельсену.

Культуральные свойства и скорость роста субкультур микобактерий изучали на среде Левенпггейна-Иенсена при 25°С, 37°С, 45°С и 52 С, а также на мясо-пептонном агаре (МПА) и мясо-пептонном бульоне (МПБ) при» 37°С, после проверки на чистоту по бактериоскопии.

Для выявления начального роста микобактерий все пробирки с посевами просматривали не реже одного раза в неделю в течение 2-3 месяцев.

У первично выделенных культур изучали сроки обнаружения первичного роста, его интенсивность и характер, вид колоний, тинкториальные свойства при окраске по Цилю-Нельсену, морфологию микобактерий, пигментообразование.

После проверки культуры на чистоту в мазках проводили видовую дифференциацию микобактерий с использованием температурного режима (рост при различных температурных режимах 25°С, 37°С, 45°С и 52°С) и биохимических тестов (рост на среде с салициловым натрием, в присутствии 5% хлорида натрия, нитроредуктазная и амилазная активность).

Определение вида возбудителя туберкулеза проводили путем заражения 2-3 морских свинок, 2-3 кроликов по общепринятой методике. За животными наблюдали в течение 3 месяцев.

Опытных животных содержали в соответствии с «Ветеринарно-санитарными правилами содержания опытных (лабораторных) животных в вивариях научно-исследовательских институтов, станций, лабораторий, учебных заведений, а также в питомниках», утвержденных Главным управлением ветеринарии МСХ СССР в 1964 году.

Если за период наблюдения животные не погибали, проводили эвтаназию морских свинок путем декапитации с помощью гильотины, кроликов — путем воздушной эмболии, согласноч<Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных» (1978). Всего в работе было использовано 48> морских свинок и 54 кролика.

Для определения эффективности-среды BKF со стимулятором роста для1 культивирования возбудителей'туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий использовали культуры микобактерий: М. tuberculosis H37RV (из коллекции ГИСК им. JI.A. Тарасевича), М. bovis 8, М. bovis BCG, М. avium 2282 (из коллекции ФГУ «ВГНКИ»), высевали из ампул (лиофилизированного состояния) на среду Левенштейна-Иенсена, затем пересевали на среду Павловского.

Культуры микобактерий разных видов со среды Павловского снимали с картофельного клина, помещали в предварительно взвешенные колбы со стеклянными шариками и взвешивали. Гомогенизированные культуры суспендировали в стимуляторе роста до концентрации 1 мг/см, далее готовили разведения до 10"6 с шагом разведения 10.

Полученные разведения культур микобактерий помещали в термостат при температуре 37-3 8°С на 48ч.

Питательную среду ВКГ готовили следующим образом: к сухой среде добавляли дистиллированную воду из расчета 9,0 г среды на 100 мл воды, размешивали и кипятили на водяной бане до полного расплавления агара, фильтровали через ватно-марлевый фильтр и разливали во флаконы.

Приготовленную среду автоклавировали при двух режимах: 1 атм (120°С) в течение 15 мин (предложенном авторами) и 0,7 атм

117°С) в течение 30 мин, обычно принятом при стерилизации питательных сред.

Горячую среду после автоклавирования (или вновь расплавленную среду после хранения в холодильнике не более 1 мес.) разливали в одноразовые чашки Петри слоем 6-8 мм.

Посев материала (после воздействия стимулятора роста) проводили не позже 20-30-минут после застывания среды по 0,5-1,5 мл в зависимости от диаметра чашки. Параллельно проводили посев этого материала на среды Левенштейна-Йенсена, МПБ и МПА, а также стимулятора - на среду ВКГ.

Чашки со средой ВКГ заклеивали скотчем и посевы на разных средах выдерживали в термостате при температуре 37-3 8°С от 10 до 45 суток, просматривая ежедневно в течение первых 5 суток и далее регулярно с приготовлением мазков и окрашиванием их по Цилю-Нельсену, Граму.

Также использовали 6 образцов патологического материала с характерными для туберкулеза изменениями от крупного рогатого скота из неблагополучных по туберкулезу хозяйств Московской* области, а также образец культуры на среде ФАСТ-ЗЛ, выделенной от больного туберкулезом крупного рогатого скота.

Образцы патматериала обрабатывали по методу А.П. Аликаевой, к определенному объему взвеси добавляли стимулятор роста в равном объеме и помещали в термостат при температуре 37-38°С на 48 ч.

Обработанный материал из ступок высевали также на среды Левенштейна-Йенсена, МПБ и МПА, готовили мазки и окрашивали по Цилю-Нельсену.

Для определения видовой принадлежности возбудителей туберкулеза, выращенных на среде ВКГ, проводили заражение возбудителями туберкулеза человеческого, бычьего и птичьего видов морских свинок и кроликов. Перед заражением проводили туберкулинизацию животных: морским свинкам вводили туберкулин (ППД) млекопитающих в стандартном растворе в дозе 25 1 "2

МЕ/0,1 см внутрикожно в середину бока, кроликам в дозе 40 МЕ/0,1 см внутрикожно в наружную поверхность уха.

Учет реакции проводили через 24 часа - ни у одного из животных не наблюдали припухлости или покраснения кожи в месте введения туберкулина.

Для последующего пересева на среду ВКГ культуры М. tuberculosis H37RV, М. bovis 8, М. avium 2282 выращивали на среде Павловского в течение 30 суток. Бакмассу микобактерий каждого вида готовили, как описано выше, со стимулятором роста и помещали в термостат при температуре 37-38°С на 48 ч.

Из каждого флакона делали высев взвеси на среды Левенштейна-Иенсена, МПА и МПБ.

Через 48 ч культуры микобактерий, обработанные стимулятором, сеяли Hav среду ВКГ в одноразовые чашки Петри по 11 чашек на вид. Культуры, обработанные стимулятором, сеяли на среды Левенштейна-Йенсена, МПА и МПБ.

Для заражения морских свинок и кроликов готовили культуры М. tuberculosis H37R.V, М. bovis 8, М. avium 2282, которые выращивали на среде ВКГ (одноименные контрольные культуры - на среде Павловского и Левенштейна-Йенсена):

1) культуры М. tuberculosis H37R.V, М. bovis 8, М. avium 2282, выращенные на среде ВКГ в течение 11 сут, смывали физраствором с 10 чашек (по 1 см на чашку);

2) культуры М. tuberculosis H37R.V, М. bovis 8 делили на две части; одну часть каждой культуры по рекомендованной методике готовили с масляным адъювантом производства фирмы «Сеппик», Франция, «Montanide ISA-206»;

3) контрольные культуры М. bovis 8, М. avium 2282 со среды Павловского переносили в колбы с бусами и суспендировали в физрастворе до концентрации 1 мг/см , контрольную культуру М. tuberculosis H37RV со среды Левенштейна-Йенсена смывали физраствором (по 1 см на пробирку).

Проводили заражение морских свинок и кроликов культурами микобактерий, выращенными на среде ВКГ и традиционных питательных средах: Левенштейна-Йенсена и Павловского:

I. Морские свинки (9 голов) - М. tuberculosis H37Rv:

1 группа - со среды ВКГ - 1 см3 подкожно в правый пах - 3 головы;

2 группа - со среды ВКГ с адъювантом — по 1 см3 подкожно в правый и левый пах - 3 головы;

3 группа - со среды Левенштейна-Йенсена - 1 см3 подкожно в'правый пах — 3 головы.

II. Морские свинки (10 голов) - М. bovis 8: .

1 группа - со среды ВКГ - 1 см3 подкожно в правый пах — 4 головы;

2 группа - со среды ВКГ с адъювантом - по 1 см3 подкожно в правый и левый пах - 3 головы;

3 группа - со среды Павловского,— 1 см3 подкожно в правый пах — 3 головы.

III. Кролики (5 голов) - М. avium 2282:

1 группа - со среды ВКГ - 1 см3 внутривенно — 3 головы;

2 группа - со среды Павловского - 1 см3 внутривенно — 2 головы. Зараженным животным вводили туберкулин (ППД) для млекопитающих в той же дозе, что и перед заражением; кроликам в наружную поверхность другого уха вводили также туберкулин (ППД) для птиц в той же дозе, что и туберкулин (ППД) для млекопитающих.

Проводили посев гомогенатов образцов (печень, селезенка, легкие) от морских свинок и кроликов на среды ВКГ, Левенштейна-Иенсена, МПА и МПБ. Материал от морских свинок исследовали в ПЦР с помощью тест-системы «МТБ-ком». Кроме того, в работе использовали ПЦР-тест-системы «Туб-Диф», «MAIS-Диф» и «Авиум».

Для изучения возможности использования крови зараженных лабораторных животных для прижизненной диагностики туберкулеза у всех животных, зараженных микобактериями разных видов, через 71 сут. после о заражения из сердца отбирали пробы крови (по 2,5 см ) в стерильные о пробирки с 0,1 см гепарина, добавляли стимулятор роста и помещали в термостат при 37-38°С на 48 ч. Пробы крови, обработанные стимулятором роста, сеяли на питательные среды: ВКГ, МПА и МПБ.

Полученные в процессе работы цифровые показатели обрабатывали методами вариационной статистики-(Ашмарин И.П., Воробьев A.A., 1962), а также при помощи программы «Statgrafics», включающих определение средней арифметической (М), ошибки средней (т), достоверности разности средних показателей (Р) с помощью критерия Стьюдента; связь между факторами определяли методом корреляционного анализа:

3;2. Результаты исследований 3.2.1. Характеристика?изменений эпизоотической обстановки по туберкулезу крупного рогатого скота в Российской Федерации.

В России туберкулез крупного рогатого скота начали официально регистрировать с 1892г. Как отмечает З.С. Газарх (1967), в начале XX столетия учитывали только животных с явной клиникой туберкулеза. По данным боенских отчетов 84 губерний, в 1904г. среди убитого крупного рогатого скота в среднем было 1,5% пораженных животных, в 1905г. - 1,4%, в 1906г.- 1,5%. В отдельных губерниях процент больных туберкулезом животных был значительно выше: в Саратовской губернии - 13,4%, в Самарской - 5,8%, в Московской - 5,6%.

Я.Р. Коваленко (1967), анализируя эпизоотическую обстановку в России до Великой Октябрьской социалистической революции, отмечал, что туберкулез крупного рогатого скота встречался почти повсеместно, причем пораженность животных в разных районах варьировала от 0,01 до 18,0 и более процентов. В 1912г. туберкулез был установлен в 56 губерниях. По данным П.П. Вишневского (1937), в животноводческих хозяйствах дореволюционной России туберкулез регистрировался в 8-30% хозяйств. Это были помещичьи хозяйства, в которых был сконцентрирован молочный и племенной скот. На базе этих хозяйств были организованы совхозы. В них отмечалось до 15-40% зараженных туберкулезом животных (И.В. Поддубский, 1967).

В 1926 году Наркомзем РСФСР принял постановление о систематической и плановой борьбе с туберкулезом в племхозах, совхозах и животноводческих кооперативах, а также в крестьянских стадах.

С 1926 по 1936 годы пораженность скота туберкулезом в большинстве совхозов и колхозов РСФСР уменьшилась в 3-6 раз. Заболеваемость скота в совхозах к 1935г. снизилась до 4,1% (П.П. Вишневский, 1937; М.К. Юсковец,

1963). В предвоенные годы заболеваемость туберкулезом крупного рогатого скота снизилась до 1-1,5% и к началу 1941 г. составляла в совхозах 2,4%, а в колхозах - 1,5% (B.C. Киселев, 1959).

В годы Великой Отечественной войны (1941-1945) было произведено вынужденное перемещение значительного поголовья крупного рогатого скота с запада на восток. В районах, временно оккупированных немецко-фашистскими войсками, борьба с туберкулезом не проводилась несколько лет. В других регионах не все поголовье крупного рогатого скота подвергалось диагностическим исследованиям из-за недостатка квалифицированных ветеринарных специалистов. Однако, на неоккупированной территории, заболеваемость скота туберкулезом к 1945г. составляла в совхозах 0,97% и в колхозах — 0,2%. В конце войны и в первые послевоенные годы в некоторые области России (Брянская, Калужская, Орловская, Московская, Смоленская и др.) поступал скот из Германии и возвращалась часть поголовья, отогнанного в восточные районы страны. Пораженность этого скота туберкулезом оказалась очень высокой. В 1947-1950 гг. в среднем за год выявляли по 13,5 тыс. неблагополучных по туберкулезу пунктов, заболеваемость скота в 1950г. была 0,52%.

Широкомасштабные мероприятия по борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота начали проводить с пятидесятых годов XX столетия. В 1956 году был принят план мероприятий по ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота.

В этот период, в основном, ликвидировали изоляторы больного скота, значительно снизилось количество выявляемых неблагополучных пунктов и практически оздоровили хозяйства целого ряда областей и автономных республик, которые были наиболее неблагополучными в 1955-1956 гг. Если в 1961-1965 гг. выявляли новых неблагополучных пунктов в среднем за год 1366, а оздоравливали в год 1099 пунктов, то в 1966-1970 гг. выявили 462 новых неблагополучных пункта, а оздоровили 887 пунктов. В это время практически оздоровлены: Марийская АССР, Тувинская АССР (1954),

Магаданская область.(1955), Сахалинская область (1968), Вологодская (1968), Кировская (1968), Читинская (1968); Владимирская? (1969); Костромская. (1969),-. Кемеровская: (1969); Приморский край; (1969);, Удмуртская, АССР (1965);. Томская; (1965)^ Хабаровский • край (1965); Архангельская (1967), Ивановская (1967), Московская (1967), Горьковс-кая (1967), Тамбовская (1967), Пермская (1967), Мурманская* (1958), Северо-Осетинская (1958);; Ленинградская (1970), Орловская (1970); Ярославская« (1963),, Кабардино-Балкарская АССР (1960), Бурятская АССР (1958), Камчатская область (1962).

В 70-х годах развитие скотоводства пошло по пути интенсификации и специализации. Проводилось строительство крупных комплексов по производству говядины, молока и специализированных хозяйств по выращиванию телок и нетелей.

Изменение условий содержания, кормления и использования, животных отразилось на всех звеньях эпизоотической цепи при туберкулезе. В таблицах 1-2 представлены данные официальной статистики по динамике неблагополучных пунктов и о заболеваемости туберкулезом крупного рогатого скота в Российской Федерации за 1961-1985 гг.

Анализ этих данных вроде бы позволяет сделать вывод о постепенном улучшении эпизоотической ситуации, продолжавшемся до 1986г. Если в 1961г. было выявлено 1319 новых неблагополучных пунктов, то в 1981г. — 275, что на 20,8% меньше. К началу 1986г. уменьшилось (на 35,0%) и число пунктов, оставшихся неблагополучными.

Однако значительно увеличился коэффициент очаговости (с 23,7 в 1961г., до 89,0 случаев в 1985г.) и увеличился процент обнаруженных случаев туберкулеза при- убое животных. Также- возросло число случаев выявления свойственных: .туберкулезу изменений- в расчете на: один неблагополучный пункт (табл.З) . •

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Курандо, Екатерина Эдуардовна, Москва

1. Авербах, М.И. Иммунология и иммунопатология туберкулеза: Монография / М.М. Авербах.-М.: Медицина, 1975.-С.335.

2. Авилов, В.М. Эпизоотическое состояние по туберкулезу в РСФСР и меры борьбы с болезнью / В.М. Авилов, В.Ф. Пылинин // Ветеринария.-1992.-№1.-С. 3-10.

3. Авилов, В.М. Больше внимания профилактике и борьбе с туберкулезом животных / В.М. Авилов, В.Ф. Пылинин, Н.П. Овдиенко // Ветеринария.-1997,- № 8.-С. 3-9.

4. Александров A.A. Применение ПЦР-анализа для видовой идентификации микобактерий /A.A. Александров, O.A. Иртуганова, Н.С. Смирнова // В кн.: Туберкулез сегодня: Материалы VII российского съезда фтизиатров.-М.: Издательство БИНОМ.-2003.-С.105.

5. Александров, H.A. Выделение кислотоустойчивых сапрофитных микроорганизмов из некоторых объектов окружающей среды / H.A. Александров // Тр. Саратовской НИВС.-1967.-Т.УП. С.90-95

6. Александров, H.A. Эпидемиологическое значение кислотоустойчивых сапрофитов, выделенных из полевых водоемов / H.A. Александров // Проблемы туберкулеза.-1973.-№10.-С.76-77

7. Алиев, А.И. Сравнительное изучение питательных сред для выделения микобактерий бовис / А.И. Алиев, Н.Г. Фадеева // Сб. научн. тр. СКЗВИ.-Новочеркасск, 1987.-С.10-18.

8. Аликаева, А.П. Типовая специфичность возбудителя туберкулеза животных и рационализация борьбы с ним // Ветеринария. 1950. №9.

9. Аликаева, А.П. Туберкулез / А.П. Аликаева // Ветеринарная лабораторная практика. М.: Сельхозиздат, 1963 .-Т.1 .-С.279-289.

10. Алыпинецкий, М.В. Диагностика туберкулеза зоопарковых животных / М.В. Алыпинецкий // Ветеринарная патология.-2004.-№ 1-2(9)-С.147-150.

11. Андроникашвили, Е.А. Улучшение бактериологической диагностики туберкулеза с помощью новых питательных сред / Е.А. Андроникашвили, Г.Д. Исмагулова, Н.К. Качанова // Пробл. туб.- 1987.-№12.-С.43-46:

12. Андросова, М.В: Идентификация туберкулеза человеческого вида с помощью моноклональных антител / М.В. Андросова // VI' Всероссийский съезд фтизиатров.- Кемерово, 1987.-С.77-78.

13. Андросова, М.В'. Иммунологический метод идентификации М1 tuberculosis и М. bovis (BCG) на основе применения, моноклональных. антител / М.В. Андросова, Г.И. Алексеева, М.А. Владимирский, В'.М. Должанский // Проблемы туберкулеза.- 1989;- №5.-С. 43-46.

14. Аникин, В.А. Новые возможности повышения высеваемости микобактерий туберкулеза / В.А. Аникин // IX Всесоюз. Съезд фтизиатров: Тез.докл.-Кишинев: «Штиинца», 1979.-С.172-173.

15. Аникин, В.А. Системный поиск комплекса физических режимов при приготовлении питательной среды для культивирования микобактерий туберкулеза / В.А. Аникин, В.В. Бирюков, Г.Н. Селехов // Лаб. дело.-1980.-№9.-С.557-560.

16. Аникин, В.А. Разработка и оптимизация средств для культуральной диагностики туберкулеза на основе препаратов микробиологического синтеза: Автореф. дис. . канд. мед. наук: 03.00.07./ В.А. Аникин; ЦНИИТ.-М., 1987.-27с.

17. Аникин, В.А. Совершенствование лабораторной диагностики туберкулеза / В.А. Аникин, А.Е. Дитятков, С.И. Белобродова и др. // Ветеринарная патология,- 2004.-№1-2(9).-С.30.

18. Артюшин, С.К. Сравнительное изучение ДНК микобактерий / С.К. Артюшин, Б.А. Фомин, В.Л. Солодовников // Бюл. ВИЭВ.- 1987.-Вып.64.-С. 52-54.

19. Ашимова, К.К. Патоморфологические изменения при экспериментальном туберкулезе у морских свинок, обработанных циклофосфаном / К.К. Ашимова // Бюлл. ВИЭВ. Вып. 64.-1987.-С.46-48.

20. Ашимова, К.К. Совершенствование биологической пробы при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дисс. . канд. вет. наук: 16.00.02/ К.К. Ашимова; ВИЭВ, М., 1991.-27с.

21. Бактериологическая и биохимическая идентификация микобактерий: Метод, реком. / сост. Оттен Т.Ф.- СПб, 1994.-20с.

22. Бакулов, И.А. Эпизоотологическое исследование, применение математических методов и ЭВМ в эпизоотологии // Тр. ВГНКИ.-1975.-Т.22.-С.268-274.

23. Бакулов, И.А. Основы эпизоотологического прогнозирования и планирования противоэпизоотических мероприятий / И.А. Бакулов // Руководство по общей эпизоотологии / под ред. И.А. Бакулова и А.Д. Третьякова.-М., 1979.-С. 279-302.

24. Бакулов, И.А. Методические указания neo эпизоотологическому исследованию / И.А. Бакулов, Г.Г. Юрков и др. // ВНИИ вет. Вирусологии и микробиологии, ВИЭВ.-М.: Колос, 1982.-17с.

25. Бакулов, И.А. Эпизоотический процесс: Теоретические аспекты проблемы / И.А. Бакулов, В.В. Макаров // Вестн.с.-х. науки. 1986. № II. С. 111-118.

26. Басыбеков, С.Д. Животные-источники микобактериоза у человека / С.Д. Басыбеков, Я.И. Благодарный, Н.Ж. Жанузаков.-Алма-Ата: Кайнар, 1985.-1 Юс.

27. Басыбеков, С.Д. Сельскохозяйственные и домашние животные как источники микобактериозов у человека: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03. / С.Д. Басыбеков; ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 1982.-24с.

28. Байтерякова, Т.И. Результаты исследований на туберкулез в разных эпизоотических ситуациях / Т.И. Байтерякова, Ю.А. Макаров // Ветеринария.-1982.-№ 10.-С.61 -62.

29. Байтерякова, Т.И. Персистирование микобактерий в организме крупного рогатого скота / Т.И. Байтерякова, И.Н. Рубцова, Ю.А. Макаров // Пробл. туберкулеза.-1982.-№ 11 .-С.59-62.

30. Байтерякова, Т.И. Формы персистирования микобактерий в организме крупного рогатого скота из хозяйств с различным состоянием: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03/ Т.И. Байтерякова; ИЭВСиДВ.-Новосибирск, 1983.-25с.

31. Безопасность работы с микроорганизмами III-IY групп патогенности и гельминтами: Санитарные правила СП 1.2.731-99.-М.,1999.-108с.

32. Белобородова, A.A. Повышение эффективности лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03. / A.A. Белобородова; ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 2008.-20с.

33. Белоусов, A.B. Люминесцентная бактериоскопия микобактерий туберкулеза / A.B. Белоусов // Лаб. дело.-1965.-№5.-С.312-313.

34. Белоусов, В .И. 5 Лабораторная диагностика туберкулеза животных в Российской Федерации / В.И. Белоусов, М.В. Калмыков, Л.А. Таранова // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2.-С.23-24.

35. Берджи, Д. Определитель Берджи / Д. Берджи.-1974.-1246с.

36. Благодарный, Я.А. Источники туберкулеза и меры профилактики.-Алма-Ата: Казахстан, 1980.-С. 245.

37. Блохина, И.Н. Первичная структура ДНК и систематика бактерий / И.Н. Блохина, Г.Ф. Леванова // В к.:Строение ДНК и положение организмов в системе.-М.: Изд. МГУ.-1972. С.91-134.

38. Боганец, Н.С. Чувствительность мышей линии BALB/c, C57BL/6 и аутбредных к культуре туберкулеза бычьего вида при различных методах заражения / Н.С. Боганец // Сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние.-Новосибирск, 1991.-С. 103-108.

39. Бойко, A.A. Туберкулез крупного рогатого скота / A.A. Бойко, Е.П.• Сапегина М., 1991 .-92с.

40. Бортюк, Я.А. Дифференциация возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота от атипичных микобактерий в реакции ДНК-ДНК гибридизации: Автореф. дис. канд. биол. наук:03.00.23 / Я.А. Бортюк; ВИЭВ,-М.-1991.-25с.

41. Брудная, Ю.Е. Новый метод определения вирулентности нетуберкулезных и слабовирулентных туберкулезных микобактерий / Ю.Е. Брудная, Н.Ф. Амфитеатрова, Н.М. Калугина // ЖМЭИ.-1987.-№11.-С.9-12.

42. Букова, Н.К. Питательная среда ВКГ для ускоренного выращивания микобактерий / Н.К. Букова, К.В. Шумилов, Н.П. Овдиенко и др. // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).-С. 107-110.

43. Бусыгин, К.Ф. Люминесцентная диагностика инфекционных болезней животных / К.Ф. Бусыгин.-М.:Колос, 1975.-26с.

44. Валиев, Р.Ш. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза / Р.Ш. Валиев, Т.Х. Фаизов, Л.И. Зайнулин, Н.Р. Валиев // Проблемы туберкулеза и болезней легких.-2005.-№3.-С.25-27.

45. Василев, В. Микобактериозы и микозы легких / В. Василев // София, 1971. Медицина и физкультура.- С. 65, 202-212 (пер. с болгарского).

46. Василенко, К.Ф. О миграции возбудителей туберкулеза птиц на крупном рогатом скоте / К.Ф. Василенко // Ветеринария.- 1964.-ЖЗ.-С.26-28.

47. Василенко, К.Ф. Опасность крупного рогатого скота, инфицированного возбудителем туберкулеза птичьего типа, для здоровья животных и кур / К.Ф. Василенко // Сб. научн. работ. СибНИИ.-1972.- Вып.20.- С. 53-56.

48. Васильева, Н.П. Сравнительная характеристика чувствительности микроскопических методов выявления микобактерий туберкулеза / Н.П. Васильева// Лаб. дело.-1973.-№1.-С.32-34.

49. Васильева, Н.П. ' Диагностические возможности методики люминесцентной микроскопии и оптимизации культурального метода диагностики туберкулеза / Н.В. Васильева, В.Н. Аникин // Тр. Московского НИИ туберкулеза.- М., 1981.-С.40-42.

50. Верховский, O.A. Использование метода ■ «сэндвич -ИФА» для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота /O.A. Верховский, А.Х. Найманов, O.A. Савицкая // Тр. ин-та/ ВНИИБТЖ.-Омск, 2001.-С.173-174.

51. Ветеринарно-санитарные правила содержания опытных (лабораторных) животных в вивариях научно-исследовательских институтов, станций, лабораторий, учебных заведений, а также в питомниках -М.:Колос, 1964, 7с.

52. Вейсфейлер, Ю.К. Биология и изменчивость микобактрий туберкулеза и атипичные микобактерии // Ю.К. Вейсфейлер Будапешт: Издательство Академии наук Венгрии, 1975.-335с.

53. Вишневский, Б.И. Сравнительная оценка различных методов определения вирулентности микобактерий туберкулеза / Б.И. Вишневский//Пробл. туб.- 1973.-№2.-С.73-77.

54. Вишневский, Б.И. Вирулентность микобактерий туберкулеза / Б.И. Вишневский, О.В. Наварская, С.Н. Васильева // Пробл. туб.-2002.-№10.-С.33-36.

55. Вишневский, П.П. Туберкулез крупного рогатого скота / П.П. Вишневский: М.,- Сельхозгиз.-1935.-106с.

56. Вишневский, П.П. Туберкулез крупного рогатого скота / П.П. Вишневский: М.,-Сельхозгиз, -1937.-173с.

57. Вишневский, П.П. Туберкулез / П.П. Вишневский // Болезни птиц.- М., «Сельхозиздат».-1951 .-С. 17-24.

58. Власенко, В.В. Туберкулез в фокусе проблем современности / В.В. Власенко//Винница: «Наука», 1998.-35с.

59. Воробьев, A.A. Идентификация микобактерий методом газожидкостной хроматографии /A.A. Воробьев, Н.М. Бадушканова, И.Р. Дорожкова, Т.Г. Сухова // Проблемы туберкулеза.-1990.-№7.-С.46-49.

60. Воронкова, Г.Н. Метод люминесцентной микроскопии в диагностике туберкулеза/Г.Н. Воронкова//Лаб. дело.- 1986.-№6.-С.106-108.

61. Вульф, С.М. Сравнительная оценка биопробы и посева на питательные среды в диагностике туберкулеза /С.М. Вульф // Лаб. дело.-1968.-№7.-С.444.

62. Гаврилова, Г.А. Лабораторный контроль при проведении противотуберкулезных мероприятий в стадах крупного рогатого скота: Автореф. дисс. . канд. вет. наук: 16.00.03/ Г.А. Гаврилова; ИЭВСиДВ.-Новосибирск, 1998.-22с.

63. Газарх, З.С. Достижения науки и практики в области борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных / З.С. Газарх // Труды института / Всесоюз. н.-и. ин-т экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко. T.XXXIV.-1967.-C.335-367.

64. Гельберг, С.И. К вопросу о выделении штаммов БК из патологического материала. Методика выделения БК / С.И. Гельберг // Борьба с туберкулезом.- 1935.-№1.-С.18-25.

65. Гильмутдинов, Р.Я. Инфекционные болезни экзотических и диких животных / Р.Я. Гильмутдинов, A.B. Иванов, А.Н. Панин.- М.: Колос, 20Ю.-664с.

66. Головацкая, С.Я. Электрофоретический метод обнаружения микобактерий туберкулеза в мокроте / С.Я. Головацкая, И.И. Макарова, С.Н. Фельдман // Лаб. дело.-1963.-№10.-С.49-52.

67. Голышевская, В.И. Бактериологические методы исследования при заболеваниях органов дыхания / В.И. Голышевская // Пробл. туб.-1997.-№5.-С.51-53.

68. Голышевская, В.И. Патоморфологические реакции, вызванные измененными микобактериями туберкулеза / В.И. Голышевская // Ветеринарная патология.- 2004.-№ 1-2(9).-С.28-30.

69. ГОСТ 27318-87. Сельскохозяйственные животные. Методы идентификации атипичных микобактерий.-М.: Из-во стандартов, 1987.-С.16. '

70. Гребенникова, Т.В. Молекулярные методы исследования в' диагностике туберкулеза / Т.В. Гребенникова, С.Л. Кальнов, А.Д. Забережный, Т.И. Алипер // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9)-С.92-93.

71. Данко, Ю.Ю. Туберкулез птичьего вида у овец. / Ю.Ю. Данко // Сб. науч. тр. ЛВИ.-Л., 1983 .-Вып.73 .-С.29-32.

72. Данко, Ю.Ю. Сравнительная оценка методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03/Ю.Ю. Данко; ЛВИ.-Л., 1983.-23с.

73. Данко, Ю.Ю. Эпизоотический надзор при туберкулезе крупного рогатого скота: Автореф. дис.д-ра вет. наук: 16.00.03/ Ю.Ю. Данко; Санкт-Петербург гос. акад. вет. медицины.- Санкт-Петербург, 2000.-46с.

74. Двойрин, М.С. Состояние и задачи противотуберкулезной помощи сельскому населению Украинской ССР / М.С. Двойрин // Пробл. Туберкулеза,- 1990.-№ 2.-С. 8-12.

75. Деринов, А.Н. Система контроля эпизоотического статуса территорий с оздоровленным от туберкулеза поголовьем крупного рогатого скота: Автореф. дис. .канд. вет. наук:16.00.03 / А.Н. Деринов; ВИЭВ.- М., 2004.-30с.

76. Донченко A.C. Люминесцентная микроскопия в диагностике туберкулеза / A.C. Донченко, В.Н. Донченко // Ветеринария.-1977.-№6.-С. 100-102.

77. Донченко A.C. Установление парааллергии на туберкулин у крупного рогатого скота в благополучных хозяйствах / A.C. Донченко // Ветеринария.-1987.-№12.-С.37-38.

78. Донченко, A.C. Теория и практика эпизоотологичекого мониторинга при зооантропонозах / A.C. Донченко, С.К. Димов, Ю.Г. Юшков и др. // Труды ВНИИВиМ. ч. 1.-Покров.-2003.-С. 51-60.

79. Донченко, A.C. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота: Монография. / A.C. Донченко, Н.П. Овдиенко, H.A. Донченко Новосибирск, 2004.-3 08с.

80. Донченко, H.A. Генетическое типирование микобактерий туберкулезного комплекса с помощью анализа ПДФР ампликонов / H.A. Донченко, A.C. Донченко, В.Н. Семенихин // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2.- С.71.

81. Дорожкова, И.Р. Микробиологическая диагностика туберкулеза и микобактериозов / И.Р. Дорожкова // Туберкулез (ред. А.Г. Хоменко).-М.: «Медицина», 1982.-С. 102-128.

82. Драбкина, P.O. Можно ли пользоваться белыми мышами для определения вирулентности туберкулезных штаммов / P.O. Драбкина, Т.С. Гинзбург // Пробл. туб.-1949.-№5.-С.55-58.

83. Драбкина, P.O. Микробиология туберкулеза / P.O. Драбкина.-М.: «Медгиз»,-1963 .-256с.

84. Драбкина, P.O. Антигенные особенности и природа атипичных кислотоупорных микобактерий, выделенных у больных туберкулезом / P.O. Драбкина, М.С. Марова// Пробл. туб.-1965.-№10.-63с.

85. Дрогун, А.Г. Патоморфологические особенности туберкулеза крупного рогатого скота / А.Г. Дрогун, ИИ. Пышко, М.М. Григорьев.-В кн.: Современные проблемы профилактики зоонозных болезней и пути их решения.- Гродно.- 1987.-С.86-87.

86. Душкин, В.А. Опыт работы по использованию метода ПЦР в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в Нижегородской области / В.А. Душкин // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2 (9).-С.99-104.

87. Дыхно, М.М. Сравнительное изучение и методы дифференциации туберкулезных микобактерий, атипичных штаммов и кислотоустойчивых сапрфитов / М.М. Дыхно: Автореф. дис. . докт. мед. наук.- 1963.-47с.

88. Дыхно, М.М. Современные направления в изучении микробиологии туберкулеза / М.М. Дыхно, З.Н. Кочемасова, Т.И. Козулицына // Актуальные вопросы теоретической и клинической фтизиатрии. M., 1980.-С.72-80.

89. Ерохин, В.В. Строение микобактерий туберкулеза по данным электронной микроскопии / В.В. Ерохин // Проблемы туберкулеза.-1982.-№ З.-С. 55-59.

90. Ерошенко, JT.A. Использование стандартных сред для выращивания микобактерий / JI.A. Ерошенко, А.Н. Шаров, Н.К. Букова //

91. Матер, всерос. научн. конф. по проблемам хронических инфекций.-Омск, 2001.-С.161-163.

92. Жданов, В.М. Эволюция возбудителей инфекционных болезней /

93. B.М. Жданов, Д.К. Львов-М.: Медицина, 1984,- 272с.

94. Животные и птица сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики туберкулеза. ГОСТ 26072-84. Гос. Комитет СССР по стандартам. -М., 1984.-10с.

95. Завгородний, А.И. Атипичные микобактерии у крупного рогатого скота в зоне Лесостепи и Степи Украинской ССР / А.И. Завгородний.: Автореф. дис. .канд. вет. наук: 16.00.03./ А.И. Завгородний; ВИЭВ,-Харьков, 1987.-9с.

96. Зыков, М.П. Потенциально патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов / М.П. Зыков, Т.Е. Ильина // М, 1978.-174с.

97. Иванова H.A. Выживаемость микобактерий туберкулеза при хранении культуры при комнатной температуре на среде Левенштейна-Йенсена//Бюл. ВИЭВ.-1981.-Вып. 43.-С.16-18.

98. Иванова, Н.М. О течении экспериментального туберкулеза у белых мышей при подкожном заражении / Н.М. Иванова, Э.З. Раскина // Пробл. туб.-1958.-№2.-С.95-104.

99. Ильина, Т.Б. О патогенности так называемых атипичных микобактерий / Т.Б. Ильина // Проблемы туберкулеза.- 1967.-№1.-С.72-73.

100. Ильина, Т.Б. Арилсульфатазная активность микобактерий / Т.Б. Ильина, В.Л. Молдавер // Проблемы туберкулеза.-1979.-№ 11.-С. 61.

101. Ильина, Т.Б. Современное состояние проблемы потенциально патогенных микобактерий /Т.Б. Ильина, М.П. Зыков // Труды IX Всесоюзного съезда фтизиатров.- Кишинев.-1979.-С. 178-179.

102. Ильина, Т.Б. Бактериологическая и биохимическая идентитфикация микобактерий / Т.Б. Ильина // Метод. Рекомендации.-Л., 1980.-21с.

103. Ильина Т.Б. Дифференциация микобактерий tuberculosis и bovis с помощью салицилового теста и редукции нитратов / Т.Б. Ильина // пробл. Туб.- 1987.-№ 1.-С. 57-61.

104. Инструкция по унифицированным методам микробиологических исследований при выявлении, диагностике и лечении туберкулеза // Приказ МЗ РФ от 21.03.2003г. № 109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации».

105. Ионина, C.B. Рост микобактерий на плотных питательных средах / C.B. Ионина // Матер, науч. конф. молодых ученых СО РАСХН «Сибирская аграрная наука III тысячелетия».- Новосибирск,2000.-С.152-153.

106. Ионина, C.B. Повышение' диагностической эффективности питательных сред для культивирования микобактерий туберкулеза: Автореф. дис. .канд. биол. наук: 16.00.03 / C.B. Ионина; ИЭВСиДВ.-Новосибирск, 2001.-26с.

107. Иртуганова, O.A. Современные возможности микробактериологической лаборатории / O.A. Иртуганова // Клиническая лабораторная диагностика M., 2006.-№ 1.-С. 21-35.

108. Ищенко, Л. А. Связи между типичными и атипичными микобактериями, выделенными от крупного рогатого скота / Л.А. Ищенко// Пробл. туб.-1987.-№10.-С.72-75.

109. Каграманов, А.И. Лабораторные исследования при туберкулезе / А.И. Каграманов // ММЭ.-1959.-Т.10.-С.739.

110. Каграманов, А.И. Об атипичных кислотоустойчивых микобактериях / А.И. Каграманов // Пробл. туб.- 1963.-№7.-С. 69-74.

111. Каграманов, А.И. Проблемы микобактериозов и атипичных микобактерий на XVI Французском конгрессе по туберкулезу и легочным заболеваниям /А.И. Каграманов // Проблемы туберкулеза.-1971.-№ 11.-С.90-92

112. Кадочкин, А.М. Изучение атипичных нефотохромогенных микобактерий комплекса авиум-интрацеллюляре и их патогенности для лабораторных животных и крупного рогатого скота: Автореф. дис. .канд. вет. наук: 16.00.03 / A.M. Кадочкин; ВИЭВ.- М., 1979.-13с.

113. Кадочкин, A.M. Методика серологической идентификации по Шефферу нефотохромогенных микобактерий / A.M. Кадочкин // Бюл. ВИЭВ.- М., 1979.- Вып.34.-С.33-35.

114. Казиахмедов, З.А. Питательная среда на основе геотермальной воды нефенольного класса для выделения и выращивания микобактерий / З.А. Казиахмедов, P.A. Нуратинов и др. // Ветеринарная патология.-2002.-№1-2.-С.170-172.

115. Казиахмедов, З.А. Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза: Автореф. дисс.канд. вет. наук. 16.00.03 / З.А. Казиахмедов; ВИЭВ.-М., 2004.-25с.

116. Калмыкова, М.С. Диагностическая ценность ПЦР-тест систем при туберкулезе животных: Автореф. дис. .канд. вет. наук. 16.00.03/ М.С. Калмыкова; ВИЭВ.- М., 2007.-27с.

117. Капков, Л.П. Туберкулез в России в XX веке / Л.П. Капков // Здравоохранение РФ.-2000.-№3.-С.20-24.

118. Капков, Л.П. Эпидемическая ситуация по туберкулезу в России и пути ее стабилизации / Л.П. Капков// Ветеринарная патология. 2004. №1-2.С.24-28.

119. Каримова, Л.М. Терморезистентность возбудителя туберкулеза и атипичных микобактерий в молоке / Л.И. Каримова, С.С. Меркулова // Тр. ин-та / ВАСХНИЛ.-Новосибирск, 1990.-С.88-101.

120. Каримова, Л.М. Характеристика микобактерий выделенных от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин в хозяйствах Западной Сибири и их идентификация: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / Л.М. Каримова; ОГАУ.-Омск, 1993.-18с.

121. Каримова, Л.М. Выживаемость отдельных видов микобактерий в опилках при различных температурных режимах / Л.М. Каримова // Тр. ин-та/ВАСХНИЛ. ВНИИБТЖ. Омск,1998.-С.122-125.

122. Карташова, В.М. Инфицированность молока туберкулезными бактериями и методы их идентификации / В.М. Карташова // Вопросы эпидемиологии, эпизоотологии дезинфекции при туберкулезе.- М., 1968.-С. 174-182.

123. Карташова, В.М. Индикация патогенных бактерий в молоке и молочных продуктах / В.М. Карташова.-М., 1973.-204с.

124. Кассич, Ю.Я. Туберкулез и меры борьбы с ним / Ю.Я. Кассич, А.Ф. Борзяк, А.Ф. Кочмарский и др.-Киев.: Урожай, 1990.-304с.

125. Кассич Ю.Я. Достижения науки и практики в изучении туберкулеза животных / Ю.Я. Кассич, В.Ф. Бабкин, А.И. Завгородний // Ветеринария.-1998.-№12.-С. 12-13.

126. Кибасов, М. Вопросы эпизоотологии, диагностики и меры борьбы с туберкулезом верблюдов: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1980.-20с.

127. Киселев, B.C. Достижения науки и практики в области борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота / B.C. Киселев // Труды ин-та / Всесоюз. н.-и. ин-т эксперимент, ветеринарии. 1959. T. XXIII. С. 276-284.

128. Кисленко, В'.Н. Экологическая валентность Mycobacterium bovis и Mycobacterium avium и ее эпизоотологическая роль: Автореф. дис. . докт. вет. наук: 16.00.03 / В.Н. Кисленко; ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1998.-34с.

129. Клебанова, A.A. Комбинация метода флотации и метода посева / A.A. Клебанова, Л.Е. Скрябина // Пробл. туб.-1962.-№1.-С.51-55.

130. Клименко, М.Т. Результативность биологического и культурального методов исследования при диагностике туберкулеза / М.Т. Клименко, Т.С. Гинсбург, C.B. Сокало // Пробл. туб.- 1987.-№8.-С.70-73.

131. Ковалев, Г.К. О дифференциации микобактерий туберкулеза / Г.К. Ковалев // Ветеринария.-1984.-№3.-С.72-73.

132. Коваленко, Я.Р. Состояние ветеринарии в России до Великой Октябрьской социалистической революции / Я.Р; Коваленко // Труды инта / Всесоюз. н.-и. ин-т эксперимент, ветеринарии им. Я.Р: Коваленко5 Т.-XXXIV.- 1967.- С.8-43.

133. Козлов, H.H. Изменения у свиней при поражении атипичными микобактериями / H.H. Козлов // Ветеринария,- 1982.-№ 6.- С.34-38.

134. Козулицина Т.И. Современное направление в изучении микобактериальной популяции / Т.И. Козулицина, В.И. Голышевская и др. // IX Всесоюз. Съезд фтизиатров: Тез. докл. Кишинев: «Штинница», 1979.-С.161-162.

135. Козулицина, Т.И. Современные методы идентификации кислотоустойчивых микобактерий / Т.И. Козулицына, Н.М. Макаревич,

136. A.M. Кадочкин //МатериалыВсесоюз. научн. конф.-Омск, 1980.-С.65-69.

137. Козулицина, Т.И. Генетические процессы у микобактерий / Т.И. Козулицина, Н.В. Козлова // Пробл. туб.-1983.-№11.-С.61-67.

138. Кокуричев, П.И. О применении туберкулиново-симультанной пробы для диагностики птичьего туберкулеза у крупного рогатого скота / П.И. Кокуричев // Сб. работ ЛВИ.-Л., 1962.-Вып.24.-С.20-28.

139. Кокуричев, П.И. Патологоанатомическая диагностика болезней крупного рогатого скота / П.И. Кокуричев, H.A. Налетов М.: Агропромиздат., 1987. С. 83-87.

140. Кокуричев, П.И. Туберкулез / П.И. Кокуричев, H.A. Налетов // Патологическая диагностика болезней крупного рогатого скота /под.ред.

141. B.П. Шишкова, A.B. Жарова и H.A. Налетова.-М., 1987.-С.79-87.

142. Колоскова, Э.Л. Патоморфологические изменения у животных, зараженными разными видами микобактерий: Автореф. дис. .канд. вет. наук: 16.00.03/ Э.Л. Колоскова; ВИЭВ.-М., 2007.-22с.

143. Колычев, Н.М. К сравнительной оценке методов обработки материала при исследовании на туберкулез / Н.М. Колычев, Л.Г. Автушенко, Н.В. Загайнова // Науч. тр. ОВИ.-Омск, 1971.-Т.28.-Вып.2.1. C.38-41.

144. Колычев, Н.М. О чувствительности люминесцентной микроскопии при исследовании на туберкулез / Н.М. Колычев, С.Г. Письменная // Тр. Омского вет. ин-та.-Омск, 1978.-Т.35.-Вып.З.-С.42-46.

145. Колычев Н.М. Микрокультивирование микобактерий туберкулеза / Н.М. Колычев // Ветеринария.-1980.-№5.-С.36-38.

146. Колычев, Н.М. Выживаемость микобактерий в почве / Н.М. Колычев, В.П. Сухотина // тр. ин-та/ Омский СХИ, 1984.-С.39-47.

147. Колычев, Н.М. Методы индикации и обезвреживания микобактерий туберкулеза на объектах внешней среды: Автореф. дис. . д-ра вет. наук. -Казань, 1984.-36с.

148. Колычев, Н.М. О сохранении вирулентности микобактерий во внешней среде / Н.М. Колычев // Ветеринария.-1987.-№5.-С.29-32.

149. Колычев, Н.М. Характеристика микобактерий, изолированных от человека, животных и с объектов внешней среды /Н.М. Колычев // Проблемы туберкулеза.-1990.-№11 .-С.59-61.

150. Колычев, Н.М. Туберкулез сельскохозяйственных животных. М.: Агропромиздат.- 1991.-253с.

151. Колычев, Н.М. Характеристика микобактерий изолированных от человека, животных и с объектов внешней среды /Н.М. Колычев, Б.Я. Хайкин, Н.С. Боганец, A.B. Лосева // Сб. науч. тр. / РАСХН. Сиб отд-ние. ИЭВСиДВ.-Новосибирск, 1991.-С. 70-75.

152. Колычев, Н.М. Индикация и обезвреживание микобактерий туберкулеза во внешней среде: Монография / Н.М. Колычев.- Омск; 1992.-302с.

153. Корнева И.Н. Конструирование ПЦР-тест-систем для обнаружения и идентификации микобактерий туберкулеза животных / И.Н. Корнева, В.В. Демкин // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).-С.95-96.

154. Коронелли, Т.В. Культивирование микобактерий и условно-патогенных микобактерий на среде с н-алканами / Т.В. Коронелли, Н.И. Фадеева // Проблемы туберкулеза.-1986.-№9.-С.44-47.

155. Косенко, В.И. Влияние обработки патологического материала (химическими веществами) на высеваемость микобактерий туберкулеза / В.И. Косенко, A.M. Кадочкин, Н.М. Тажгалиев // Ветеринария.-1984.-№5.-С.67-68.

156. Косенко, В.И. Влияние различных концентраций кислот и экспозиции на жизнеспособность микобактерий бовис и туберкулезис / В.И. Косенко, Н.М. Тажгалиев // Сб. науч. тр./ ВАСХНИЛ. Сибирское отделение ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 1985.-С. 16-17.

157. Космодамианский, В.Н. Бактериология и патогенез туберкулеза /

158. B.Н. Космодамианский.-М.: «Медгиз, 1950.-200с.

159. Костина, З.И. Эпидемиология и профилактика туберкулеза / З.И. Костина, Ю.П. Рыкушин.- Л.: Медицина, 1983.-168с.

160. Костюк, В.В. ПЦР при контроле благополучия скота по туберкулезу / В.В. Костюк // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).1. C.105-107.

161. Кочмарский, А.Ф. Эпизоотология и меры борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота в Западном Полесье Украинской ССР / А.Ф.

162. Кочмарский // Эффективность мероприятий по борьбе с туберкулезом животных / ВАСХНИЛ. Юж. отд-ние.- Киев. 1982.- С. 54-58.

163. Красников, Г.А. Изучение патогенности атипичных микобактерий по гистологическим изменениям / Г.А. Красников, A.M. Харченко, H.A. Наумова // Ветеринария.-1977.-№>6.-С.43-48.

164. Крюков, C.B. Пути и методы повышения сохранности поголовья импортируемого скота /C.B. Крюков, Н.В. Мельник, A.A. Плохова и др. // Веткорм. 2008.- №2.-С.12-13.

165. Кудяков, А.И. Атипичные быстрорастущие микобактерии и их роль в патологии крупного рогатого скота: Автореф.дис.канд.вет.наук: 16.00.03./ В.Н. Кудяков; ВИЭВ.-М., 1984.-24С.

166. Кузин, А.И. Опыт ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота / А.И. Кузин // Ветеринария.- 1981 .-№5.-С.32-34.

167. Кузин, А.И. О периодичности в динамике туберкулеза крупного рогатого скота / А.И. Кузин // Эффективность мероприятий по борьбе с туберкулезом животных.- Киев, 1982.-С. 41-42.

168. Кузин, А.И. К этиологии параллергических туберкулиновых реакций и динамике их возникновения у крупного рогатого скота / А.И. Кузин, Л.К. Семина // Науч.-практ. конф.: Тез.докл.- Вологда, 1986.-С.8-9.

169. Кузин, А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза: Монография / А.И. Кузин. М.: Россельхозиздат, 1987.-142с.

170. Кузин, А.И. Вопросы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / А.И. Кузин, Л.К. Семина // Ветеринарная патология.- 2004.- № 1-2 (9).-С.48.

171. Кузнецова, Е.Е. К вопросу о нетуберкулезных микобактериях и микобактериозе/ Е.Е. Кузнецова, В.М. Саулите // Проблемы туберкулеза.-1979.-№9.-С.58-60.

172. Кучеров, А.Л. Фтизиатрическая служба в России в современных условиях социально-экономических условиях / А.Л. Кучеров // Пробл. туб.-1995.-№ 4.-С.2-4.

173. Лаанес, С.Х. Ранние изменения в органах морских свинок при экспериментальном туберкулезе / С.Х. Лаанес, Э.Ю. Тюри // Пробл. туб.-1958.-№6.-С.94.

174. Лаанес, С.Х. Развитие экспериментального туберкулеза при заражении морских свинок в яичко / С.Х. Лаанес, Э.Ю. Тюри // Пробл. туб.-1961.-№5.-С.94-96.

175. Лабораторная диагностика туберкулеза / Под. ред. В.И. Литвинова, A.M. Мороза. М.: МНПЦБТ, 2001. - 184с.

176. Лазовская, А.Л. Таксономия микобактерий туберкулеза / А.Л. Лазовская // В кн.: Вопросы эпизоотологии, диагностики и мероприятия по ликвидации туберкулеза и бруцеллеза животных. — Новосибирск.-1987.-С. 78-84.

177. Лазовская, А. Л. Быстрорастущие микобактерии, вызывающие микобактриозы у людей и животных / А.Л. Лазовская, Л.В. Смирнова, Т.В. Гончарова//Успехи соврем. Биол.- 1989.-Т.107.-№1.-С.121-130.

178. Лазовская, А.Л. Микобактериозы у животных / А.Л. Лазовская, Л.В. Смирнова,, Т.В. Гончарова // Профилактика и лечение заболеваний крупного рогатого скота в условиях Нечерноземья.-1990.-С.31-39.

179. Лазовская, А.Л. Микобактерии, выделенные от крупного рогатого скота в Якутии / А.Л. Лазовская, H.H. Прокопьева, Л.М. Пинчук // Ветеринария.- 1994.-№12.-С.16-18.

180. Лакман, Э.Д. РСК с антигеном Сибирского НИВИ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота / Э.Д. Лакман, И.В. Шлыгин // Труды ин-та / Сибирский н.-и. вет ин-т.-Омск.-1975.- Вып. XXII. С. 58-61.

181. Лакман Э.Д. Иммунологические реакции при туберкулезе крупного рогатого скота и их значение в борьбе с этой инфекцией / Э.Д. Лакман // Матер. Всес. научн. конф. по проблемам бруцеллеза и туберкулеза животных.- Омск, 1980.-С. 26-27.

182. Лотоцкая, P.A. Бактериологическая диагностика микобактериоза и его частота в Латвии / P.A. Лотоцкая, М.Н. Воскис-Рункевич, А.К. Зебарга // Проблемы туберкулеза.-1986.-№11 .-С. 14-16.

183. Лысенко, А.П. Стимулятор роста и среда ВКГ для ускоренного выделения микобактерий, культуральные свойства изолируемых культур / А.П. Лысенко, В.В. Власенко, Т.Н. Агеева // Ветеринарная медицина.-2004.-№6.-С.24-27.

184. Маджидов, М.М. Разработка и производство новых питательных сред для микробиологической диагностики туберкулеза / М.М. Маджидов, З.У. Темирханова, Х.М. Алиева //Туберкулез сегодня/ Материалы VII Российского съезда фтизиатров.-М., «Бином».2003.-С.87.

185. Макаревич, Н.М. Атипичные микобактерии: методы идентификации, источники выделения, значение в клинике туберкулеза: Автореф. дис. . докт. мед. наук: 03.00.07/ Н.М. Макаревич; ЦДИИТ.-М.,1973.- 36с.

186. Макаревич, Н.М. Диагностика заболеваний легких, вызванных нетуберкулезными микобактериями / Н.М. Макаревич, Н.М. Рудой, P.A. Лотоцкая и др. // 10-й Всесоюз. съезд фтизиатров: Тез. докл.- Киев,1986.-С.85.

187. Макрова, Л.И. Контроль благополучия по туберкулезу поголовья крупного рогатого скота в хозяйствах республики Саха (Якутия) // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).-С.74-76.

188. Мальков, И.Г. Дифференциация культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов с помощью ДНК-зонда / И.Г. Мальков // Ветеринария.-1993 .-№2.-С.52-54.

189. Мандро, Н.М. Особенности эпизоотического процесса туберкулеза сельскохозяйственных и диких животных и совершенствование методов его контроля: Автореф. дис. . докт. вет. наук: 16.00.03 / Н.М. Мандро; ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 2001.- 40с.

190. Мартма, О.В. Характеристика и патогенность для крупного рогатого скота микобактерий, выделенных из торфа / О.В. Мартма// Ветеринария.-1967.-№6.-С.35-37.

191. Мартма, О.В. Атипичные микобактерии и их диагностическое и эпизоотическое значение при туберкулезе крупного рогатого скота: Автореф. дис. докт. вет. наук: 16.00.03 / О.В. Мартма // Тарту., 1971.-С.46.

192. Мартма, О.В. О значении подстилки в возникновении парааллергических реакций у коров на крупных фермах // Теоретические и практические вопросы ветеринарии. -Тарту, 1977.-T.I.-C.24-27.

193. Мартма, О.В. Парааллергические реакции на туберкулин и их дифференциация / О.В. Мартма, К.К. Тяхнас // Ветеринария.-1978.-№4.-С.35-38.

194. Мартма, О.В. Современное состояние проблемы атипичных микобактерий / О.В. Мартма // Ветеринария,- 1982.-№5.-С.22-24.

195. Мартма, О.В. О роли лабораторной диагностики при ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота / О.В. Мартма // Тез. докл.республ. научн.-практ. конф-ии. -Минск,1983.-С.20-22.

196. Мартма, О.В. О возбудителях и течении микобактериоза / О.В. Мартма, К.К. Тяхнас // В кн.: Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним.-Новосибирск.-1986.-0.78-82.

197. Мартма, О.В. Классификация микобактерий / О.В. Мартма, Н.П. Овдиенко, A.B. Ткачев-Кузьмин // Туберкулез сельскохозяйственныхживотных. Под ред. В.П. Шишкова и В.П. Урбана:-М., ВО «Агропромиздат»,- 1991.-С. 9-41.

198. Маянский, А.Н. Микобактерии: туберкулез и микобактериозы / А.Н. Маянский.- Нижний Новгород, Нижегородская Госмедакадемия, 2000.-74с.

199. Мельник, В.М. Клиническая оценка эффективности выявления микобактерий туберкулеза на среде ВКГ / В.М. Мельник, JI.B. Турченко, Ю.И. Фещенко//Ветеринарная патология.-2004.-№1-2.-С.110-113.

200. Мишустин, E.H. Микроорганизмы и самоочищение почвы / E.H. Мишустин, М.И. Перцовская.-М., 1954.-С.21-25.

201. Модель, JIM. Биология туберкулезных микобактерий и иммунобиология туберкулеза: Монография / JI.M. Модель 2-е изд., перераб.-М.: Медгиз, 1958.-С.316.

202. Модель, JIM. Биология и биохимия туберкулезных микобактерий.-М., Изд. АМН СССР, 1962.-248С.

203. Найманов, А.Х. Совершенствование аллергической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. канд. вет. наук: 16.00.03 / А.Х. Найманов; ВИЭВ.- М., 1981.-17с.

204. Найманов, А.Х. Аллергическая диагностика микобактериальных инфекций крупного рогатого скота: Автореф. дис. . д-ра вет. наук: 16.00.03 / А.Х. Найманов; ВИЭВ.-М., 1993.-29с.

205. Найманов, А.Х. Современные задачи в борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота / А.Х. Найманов, Н.П. Овдиенко // Ветинформ.-2002.-№4.-С.8-9.

206. Найманов, А.Х. Проблемы диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота в современных условиях // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).-С.18-23.

207. Найманов, А.Х. Диагностическое значение внутрикожной туберкулиновой пробы и у-ИФН ИФА при туберкулезе крупного рогатого скота / А.Х. Найманов // Ветеринарная патология.-2004.-№1-2(9).-С.-118-121.

208. Найманов, А.Х. Полимеразная цепная реакция (система senx3-regx3 при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота / А.Х. Найманов, Н.П. Овдиенко, Е.П. Осипова и др. // Ветеринарная патология.- 2004.-№1-2 (9).-С.96-99.

209. Налетов, H.A. Развитие патоморфологических изменений при туберкулезе крупного рогатого скота / H.A. Налетов // Тр. 1-й Межреспубл. конф. по вопр. ликвидации туберкулеза и бруцеллеза в животноводстве. -Минск.- 1959.-С.42-46.

210. Наставление по диагностике туберкулеза животных: Утв. Департаментом ветеринарии МСХ РФ 18.11.2002 // Ветеринарный консультант.-2004.-№4 (75).-С.9-25.

211. Немсадзе, М.Н. Сравнительное испытание лабораторных методов диагностики туберкулеза / Н.М. Немсадзе // Пробл. туб.-1996.-№4.-С.53.

212. Нехотяев, М.В. Патоморфология при туберкулезе кишечника у коров / М.В. Нехотяев // Ветеринария.-1972.-№7.-С.60-62.

213. Нечваль, И.Т. Микобактериозы свиней (эпизоотология, диагностика, профилактика и мероприятия по их ликвидации): Автореф. дис. докт. вет. наук: 16.00.03 /ВИЭВ.-М., 1986.-46с.

214. Новак, Д. Д. Метод бактериологического исследования патологического материала на туберкулез крупного рогатого скота / Д.Д. Новак // Ветеринария.-1968.-№3.-С. 103-104.

215. Новак, Д.Д. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в ранее благополучных пунктах и при оздоровлении эпизоотических очагов / Д.Д. Новак // Ветеринария Сибири.-2000.-№3.-С.13-17.

216. Новые методы исследования возбудителей антропозоонозов. Туберкулез: Методические рекомендации. М.: типография Россельхозакадемии.-2003.-48с.

217. Нуратинов, P.A. Взаимосвязь туберкулеза крупного рогатого скота и людей в условиях Республики Дагестан / P.A. Нуратинов, Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России.-М., 1999.-Т. 1.-С. 158-163.

218. Нуррулин, A.A. Возможность использования туберкулина (ППД) в качестве тест-антигена для иммуноферментного анализа /A.A. Нуррулин // Меры борьбы с хроническими инфекциями в животноводческих комплексах. Казань, 1986.-С.21-22.

219. Обухов, И.Л. Усовершенствование коммерческих ПЦР-тест-систем для диагностики туберкулеза животных / И.Л. Обухов, Н.К. Букова, О.В. Клименкова//Ветеринарная патология.-2004.-№ 1-2 (9).-С.94-95.

220. Овдиенко, Н.П. Дифференциация неспецифических реакций на туберкулин для млекопитающих у крупного рогатого скота // Мат. всесоюзн. научн. конф. / ВАСХНИЛ, СибНИВИ.- Омск, 1980.-С.116-119.

221. Овдиенко, Н.П. Профилактика и ликвидация туберкулеза крупного рогатого скота /Н.П. Овдиенко //Ветеринария. 1986. № 9. С. 15-20.

222. Овдиенко, Н.П. Выделение микобактерий и чувствительность крупного рогатого скота к туберкулинам / Н.П. Овдиенко // Ветеринария.-1989.-№9.-С.26-28.

223. Овдиенко, Н.П. Эпизоотология туберкулеза за рубежом / Н.П. Овдиенко //Ветеринария.-1989- № 8.- С. 65-69.

224. Овдиенко, Н.П. Сравнительная оценка методов заражения морских свинок при диагностике туберкулеза / Н.П. Овдиенко, В.И. Косенко, JI.A. Красота и др. // Ветеринария.-1990.-Т.5.-С.28-30.

225. Овдиенко, Н.П. Проблемы оздоровления животноводческих хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота / Н.П. Овдиенко, В.А. Соловьев//Ветеринария.- 1991.-№ 12.-С.З-7.

226. Овдиенко, Н.П. Эпизоотология туберкулеза / Н.П. Овдиенко // Туберкулез сельскохозяйственных животных. Под ред. В.П. Шишкова и

227. B.П. Урбана.- М.- ВО «Агропромиздат»- 1991.-С. 42-63.

228. Овдиенко Н.П. Идентификация различных видов микобактерий методом иммуноферментного анализа / Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов, М.В. Головченко и др. // Инфекционная патология животных / Сб. науч. тр.- Омск, 2001.-С. 171-172.

229. Овдиенко, Н.П. О патогенности атипичных микобактерий для лабораторных животных / Н.П. Овдиенко, В.И. Косенко, Н.Г. Толстенко и др. // Ветеринарная патология.- № 1-2 (9).- 2004.-С. 150-153.

230. Овдиенко, Н.П. Экспериментальный туберкулез коз / Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов, О.В. Якушева и др. // Материалы междунар. научн.- практ. конф. «Эпизоотология и профилактика инфекционных болезней крупного рогатого скота».- Киев, 2006. С. 64.

231. Овчарук, В.П. Лабораторная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота / В.П. Овчарук, Л.К. Сидорова // Ветеринария.-1967.-№5.1. C.50-51.

232. Околелов, К.В. Спектрометрия для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в эксперименте: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / К.В. Околелов; Барнаул, 2003.- 20с.

233. Определитель бактерий Берджи // Под редакцией Д. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, дж. Стейли, С.Уильямса / перевод с английского под редакцией Г.А. Заварзина; Т.2.-М.: Мир.-1997.-С.606.

234. Осипова, Е.П. Применение полимеразной цепной реакции для идентификации микобактерий и ее диагностическая значимость при туберкулезе крупного рогатого скота: Автореф. дисс. .канд. биол. наук; 16.00.03 / Е.П. Осипова; ВИЭВ.-М., 2004.- 21с.

235. Оттен, Т.Ф. Эффективность метода электрофоретической концентрации микобактерий / Т.Ф. Оттен, Б.Н. Вишневский, HtH.

236. Качаунова // Пробл. туб.- 1986.-Ж7.-С.54-57.

237. Оттен, Т.Ф. Характеристика нетуберкулезных микобактерий -потенциальных возбудителей заболеваний человека / Т.Ф. Оттен // Пробл. туб.-1994.-№3.-С.56-59.

238. Оттен, Т.Ф. Возможности и перспективы бактериологической диагностики микобактериоза / Т.Ф. Оттен, И.В. Мокроусов, О.В. Нарвская, Б.И. Вишневский // Проблемы туберкулеза и болезни легких.-2004.-№5.-С.32-35.

239. Оттен, Т.Ф. Проблема микобактериальных микстов микобактериоз и туберкулез / Т.Ф. Оттен, A.B. Зайцев, Н.С. Соловьева // Проблемы туберкулеза и болезни легких.-2005.- № 6.-С.58-62.

240. Оттен, Т.Ф. Микобактериоз / Т.Ф. Оттен, A.B. Васильев.-СПб.: Медицинская пресса, 2005.-218с.

241. Ощепков, В.Г. Л-трансформация микобактерий под действием химических веществ / В.Г. Ощепков, Е.Ю. Секин, Л.А. Талер // Инфекционная патология животных / Сб.научн. тр. ВНИИБТЖ.-Омск, 2001.-С.207-210.

242. Панкратова, А.Д. Метод ускоренной постановки биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных: Автореф. дисс. . канд. вет. наук: 16.00.03 / А.Д. Панкратова; ИЭВСиДВ.- Новосибирск.-2003.-18с.

243. Пинчук, Л.М. Липиды в таксономии и идентификации микобактерий / Л.М. Пинчук, А.Л. Лазовская. Горький.-1989.-126с.

244. Погуляева, Л.В. Выделение микобактерий от животных в благополучных по туберкулезу хозяйствах / Л.В. Погуляева, Т.А. Беспалова // Сб. науч. тр. /ВАСХНИЛ, ВНИИБТЖ.- Новосибирск, 1991.-С.13-18.

245. Позмогова, И.Н. Культивирование микроорганизмов, потребляющих жидкие н-алканы / И.Н. Позмогова // Известия АН СССР. Серия биология.-1966.-№6.-С.568-579.

246. Покровский, В.И. Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке / В.И. Покровский, Г.Г. Онищенко, Б.Л. Черкасский,- М.: Медицина, 2003. С. 307-318.

247. Приймак, A.A. Особенности организации противотуберкулезной помощи населению России / A.A. Приймак, Л.Л. Кучеров // Туберкулез и экология.- 1997.- №1.-С. 5-8.

248. Прокопьева Н.И. Экология микобактерий в условиях Якутии / Н.И. Прокопьева // Труды ВНИИВиМ. Покров, 2003.-С.252-257.

249. Прокопьева, Н.И. Изучение природы аллергических реакций у крупного рогатого скота благополучных по туберкулезу стад / Н.И. Прокопьева // Ветеринарная патология.- 2004.- № 1-2 (9).-С. 134-136.

250. Прокофьева, М.Т. Восприимчивость коз к искусственному заражению разными типами туберкулезных бацилл // Микробиологический журнал . 1949.- Т.2., вып. 2.- С. 17-21.

251. Рабухин, А.Е. Микобактериоз, вызванный М. fortuitum / А.Е. Рабухин, Н.М. Макаревич, Д.Я. Баканова//Пробл. Туб.-1972.-№Ю.-53с.

252. Рождественский, И.К. Повышение молочной продуктивности коров на основе совершенствования племенного дела / И.К. Рождественский // Ветеринарный врач.-2007.-спецвыпуск.-С.4-5.

253. Ротов, В.И. Туберкулез сельскохозяйственных животных / В.И. Ротов, П.И. Кокуричев, П.Е. Савченко.- Киев, 1973.-208с.

254. Ротов, В.И. Серологические реакции при исследовании коров на туберкулез / В.И. Ротов, C.B. Кныш, В.П. Дорожко, П.А. Нарожный // Сб. Ветеринария.- Киев, 1975.-Вып. 42.-С.З-6.

255. Ротов, В.И. Туберкулез сельскохозяйственных животных / В.И. Ротов, П.И. Кокуричев, Ю.А. Трач. — Киев: Урожай, 1978.-273с.

256. Рубцова, И.Н. Изменение формы микобактерий в организме животных и их значение в бактериологической диагностике туберкулеза / И.Н. Рубцова// Бюллетень ВИЭВ.-1983.-Вып.51. М.-С.32.

257. Рудой, Н.М. Туберкулез и бацилловыделение (Вопросы микробиологии и эпидемиологии).- М.: Медицина, 1975.-163с.

258. Румачик, И.И. Туберкулезоподобные изменения у свиней и их этиология: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / И.И. Румачик; БелНИИЭВ.-Мн., 1980.-22с.

259. Румачик, И.И. Особенности аллергических исследований на туберкулез крупного рогатого скота / И.И. Румачик, A.A. Солонеко // Ветеринария.-1984.-№ 9.- С. 30-31.

260. Румачик, И.И. Культуральное выделение микобактерий // Респбл. научн. практ. конф. «Современные проблемы профилактики зоонозных болезней и пути их решения» / И.И. Румачик // тез. докл.- Гродно, 1987.-С.80-81.

261. Румачик, И.И. Методические подходы при культуральном исследовании материала на туберкулез / ИИ. Румачик // Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных: Материалы международ, н.-п. конференции / ВИЭВ.-М., 2006.-С. 354361.

262. Самило, Г.К. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий на модифицированной среде Финн-2 / Г.К. Самило, E.H. Ромашева // Пробл. туб.-1988.-№12.-С.62-63.

263. Свиридов, В.Д. Роль микобактерий птичьего вида в эпизоотическом процессе / В.Д. Свиридов // Мат-лы международн. научн. конф. «Общая эпизоотология: иммунологич-е, экологич-е и методологич-е проблемы». Харьков. 1995.-С.68-70.

264. Сельцовский, П.П. Социальные аспекты эпидемиологической ситуации по туберкулезу / П.П. Сельцовский, В.И. Литвинов. М.: МНПЦ борьбы с туберкулезом.-2004.-222с.

265. Слинина, К.Н. Выделение коринобактерий из патологического материала с положительными туберкулиновыми реакциями / К.Н. Слинина, А.Л. Лазовская, З.Г. Воробьева // Сб. научн. трудов НИВИ НЗ РФ.-Н. Новгород, 2006.-С.44-47.

266. Сидорова, Л.К. Лабораторная диагностика туберкулеза у крупного рогатого скота/ Л.К. Сидорова//Ветеринария.-1969.-№12.-С.-88-89.

267. Смирнов, А.Н. Современные проблемы диагностики туберкулеза животных // Ветеринарная патология.- 2004.-№1-2 (9).-С. 10-13.

268. Смолянинов, Ю.И. Результаты изучения свойств атипичных микобактерий из объектов внешней среды / Ю.И. Смолянинов, Л.А. Кучина // научн. техн. бюл. / ВАСХНИЛ. Сиб отд-ние.- Новосибирск, 1984.-Вып. 30.-С. 28-30.

269. Смолянинов, Ю.И. Метод ускоренной постановки биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных / Ю.И. Смолянинов, Н.С. Боганец, А.Д. Панкратова // Ветеринарная патология.-1994.-№1-2(9).-С.115-118.

270. Смолянинов, Ю.И. Экономический ущерб от туберкулеза крупного рогатого скота в России / Ю.И. Смолянинов, H.A. Донченко, С.Ю. Смолянинов, В.Ф. Бордюг, H.H. Кощеев // Ветеринарная патология.-2005.- №1(12).-С.104-112.

271. Соколова, A.C. Интратестикулярный метод заражения морских свинок в биопробе при диагностике / A.C. Соколова, H.A. Иванова, Л.А. Красота // Бюл. ВИЭВ.-1987.-№64.-С.32-38.

272. Соловьев, В. А. Проблемы оздоровления' животноводческих' хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота / В.А. Соловьев, Н.П. Овдиенко // Ветеринария.-1991.-№12.-С.З-6.

273. Солодова, И.В. Современное состояние по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйств Центрального Федерального округа Российской Федерации / И.В. Солодова // Ветеринарная патология.-2004.- №1-2(9). -С.57-61. ' '

274. Солоненко, A.A. Туберкулез и туберкулезоподобные болезни свиней в Белоруссии: Автореф. дис. . докт. вет. наук: 16.00.03. /A.A. Солоненко; Казанский ветинститут. Казань, 1984.-35с.

275. Сон, И.М. Эпидемиология туберкулеза / И.М. Сон, В.И. Литвинов, В.И. Стародубов, П.П. Сельцовский.-М.:МНПЦБТ, 2003.-163с.

276. Сосницкий, А.И. Течение экспериментального туберкулеза у морских свинок на фоне иммунодепрессивного воздействия пастерелл / А.И. Сосницкий, В.П. Заболотная // Ветеринарная патология,- 2004.-№ 1-2(9).-С.161-163.

277. Сосновская, A.B. Клинико-эпидемиологическое значение потенциально патогенных микобактерий / A.B. Сосновская // X Всесоюзный съезд фтизиатров: Тез. докл. Киев.-198б.-С.86.

278. Справочник фтизиатра. Под ред. H.A. Шмелева и В.Л. Эйниса.-М., 1963.-395С.

279. Степаншина, В.И. Идентификация нетуберкулезных микобактерий с помощью молекулярно-биологических тестов / В.И. Степаншина, О.Ю. Манзенюк, И.Г. Шемякин, О.В. Коробова // ЖМЭИ, 2000,-№6.-С.61-65.

280. Струков, А.И. Морфология туберкулеза в современных условиях / А.И. Струков, И.П. Соловьева.-М.: Медицина, 1976.-С.34-38.

281. Суворов, Е.А. О некоторых вопросах эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота в Куйбышевской области / Е.А. Суворов // Сб. научн. тр. / Куйбышевская НИВС.-1968.-Вып.5.-С.156-165.

282. Суханов, И.П. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота с применением полимеразной цепной реакции: Автореф. дисс. . канд. биол. наук: 16.00.03 /И.П. Суханов.-М., 1999.-25с.

283. Тажгалиев, Н.М. Сравнительная оценка способов обработки материала на высеваемость микобактерий: Автореф. дис. . канд. вет наук: 16.00.03. /Н.М. Тажгалиев; ВИЭВ.-М., 1987.-20с.

284. Талер, Л.А. Совершенствование лабораторных методов выделения и идентификации микобактерий туберкулеза у крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук/Л.А. Талер.- Омск, 1995.-19с.

285. Татаринов, А.П. Ультрафиолетовая резонансная спектроскопия комбинационного рассеяния и ее применение для идентификации микобактрий: Автореф. дис. . канд. физико-математических наук: 03.00.02. / А.П. Татаринов; МГУ,- М., 1993.-20с.

286. Ткачев-Кузьмин, A.B. Роль некоторых видов атипичных микобакте-рий в сенсибилизации крупного рогатого скота к туберкулину:

287. Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 /A.B. Ткачев-Кузьмин; ВИЭВ.-М., 1982.-17с.

288. Товарнова, Л.Ф. Информативность люминесцентной микроскопии при определении бактериовыделения у больных туберкулезом / Л.Ф. Товарнова//Пробл. туб.- 1977.-№9.-С.68-70.

289. Толстенко, Н.Г. Патогенные свойства некоторых видов микобактерий, выделенных от животных и объектов внешней среды: Автореф. дис. . канд вет. наук: 16.00.03/ Н.Г. Толстенко; ВИЭВ.-М., 2006.-27с.

290. Трач, Ю. Щодо д1агностики туберкульозу велико! poraToi худоби / Ю. Трач, Б. Петров, В. Бондарчук // Вет. Медицина Украши.-1998.-№11/12-С.6

291. Триус, М.В. О выделении чистой культуры туберкулезной палочки по методу Левенштейна-Сумиоши / М.В. Триус, A.A. Клебанова // вопр. туберкулеза.-1927.-№11.-С.6-18.

292. Трубкин, А.И. Свойства микобактерий, выделенных от животных, реагирующих на туберкулин // Ветеринария.-2005.-№11.-С.23-25.

293. Тузова, Р.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц / Р.В. Тузова.-Минск: «Урожай», 1983.-264с.

294. Тунгусова, О.С. Молекулярная генетика микобактерий туберкулеза / О.С. Тунгусова, А.О. Марьяндышев // Проблемы туберкулеза и болезней легких.-2003.-№2.-С.43-45.

295. Турланов, K.M. Видовая принадлежность микобактерий, выделенных в условиях мясо-молочных предприятий / K.M. Турланов, Э.В. Сидоркина // Вопросы взаимосвязи туберкулеза человека и животных. Алма-Ата.-1981.-С.174-179.

296. Тырина, B.C. Сравнительное изучение различных групп кислотоустойчивых микобактерий и методов их дифференциации: Автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.096 / B.C. Тырина; ВИЭВ.- М., 1969.-20с.

297. Тырягин, М.А. Концептуальный подход к современной эпидемиологии и выявлению туберкулеза / М.А. Тырягин // Проблемы туберкулеза в Якутии: эпидемиология, организация и лечение: Сб. тр. /Якутский НИИТ.- Якутск, 2002.-С.7-12.

298. Тюри, Э.И. Патогенность различных микобактерий для морских свинок при интратестикулярном и подкожном заражении / Э.И. Тюри, М.Э. Тюри // Пробл. туб.- 1964.- №10.- С.74-76.

299. Тюри, Э.И. Вирулентность фтивазидоустойчивых и каталазоотрицательных штаммов туберкулезных микобактерий для морских свинок при интратестикулярном заражении / Э.И. Тюри, М.Э. Сильд // Пробл. туб.-1964.- №2.- С.71-73.

300. Тюри, Э.И. О чувствительности лабораторных методов диагностики туберкулеза при исследовании больных, леченных фтивазидом / Э.И. Тюри, А.Э. Барло // Уч. записки Тартуского университета. Вып. 171. Труды по медицине.-1965.-№10.-С.10-12.

301. Тюри, Э.И. Способ интратестикулярного заражения морских свинок и применение его при определении патогенности атипичных микобактерий: Автореф. дис. . канд. вет. наук/ Э.И. Тюри.-Тарту, 1966.-22с.

302. Тяхнас, К.К. Изучение парааллергических туберкулиновых реакций и вызывающих их атипичных микобактерий у молодняка крупного рогатого скота: Автореф. дисс. . докт. вет. наук /К.К. Тяхнас.-Таллин, 1975.-37с.

303. Урбан, В.П. Диагностические аспекты туберкулеза крупного рогатого скота / В.П. Урбан, М.М. Широбокова, А.П. Зубков, Н.М. Калишин // Сб. работ ЛВИ.-Л., 1970.-Вып.32.-С.103-111.

304. Урбан, В.П. Туберкулез / В.П. Урбан // Краевая эпизоотология нечерноземной зоны РСФСР / Под ред. В.П. Урбана и М.Г. Таршиса.-М.: Колос, 1980. — С.75-84.

305. Федосеев, B.C. Микобактерионосительство у животных как резервуар и источник возбудителя / B.C. Федосеев, И.Н. Рубцова, Н.Г. Кириленко и др. // Труды ИЭВСиДВ.- Новосибирск, 1986.-С.51-56.

306. Финкель, Е.А. Гидрокортизонный метод в биологических исследованиях при туберкулезе / Е.А. Финкель, Л.В. Михайлова. -Кыргызстан. Фрунзе, 1976.-57с.

307. Финкель, Е.А. Биологический метод исследования при туберкулезе /Е.А. Финкель, Л.В. Михайлова. Кыргызстан. - Фрунзе, 1976.- С.80-89.

308. Финкель, Е.А. Сухие питательные среды для диагностики туберкулеза / Е.А. Финкель, Ю.Б. Погребинская.- Фрунзе: «Кыргызстан», 1977.-13 Ос.

309. Финн, Э.Р. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий туберкулеза в современных условиях их изменчивости: Автореф. дис. . канд. мед. наук / Э.Р. Финн. Кишинев, 1973.-20с.

310. Финн, Э.Р. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий туберкулеза / Э.Р. Финн // Пробл. туб., 1974, № 12.-С.72-74.

311. Финн, Э.Р. Высеваемость микобактерий туберкулеза на различных средах и их сочетаниях / Э.Р. Финн // Лаб. дело.- 1979.-№10.-С.618-620.

312. Фоминов И.П. Научные основы и принципы профилактики и борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота в новых условияххозяйствования: Автореф. дисс. . канд. вет. наук: М.16.00.03/ И.П. Фоминов, ВИЭВ.-1996.-26с.

313. Харитонов, М.В. Разработка системы противотуберкулезных мероприятий в условиях широкого выявления неспецефических реакций на туберкулин: Автореф. дис. . д-ра вет. наук: 16.00.03/ М.В. Харитонов; КВИ.-Казань, 1998.-42с.

314. Харченко, A.M. Патоморфологические изменения у животных при подкожном и внутрикожном заражении патогенными и атипичными микобактериями: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03/ A.M. Харченко; Киев, 1986.-24с.

315. Ходун, JI.M. Лабораторные методы экспресс-диагностики туберкулеза животных / Л.М. Ходун // Тез. докл. научн.-произв. конф. 100 лет Курской биофабрике и агробиологической промышленности России. Курск, 1996.-С.335-338.

316. Чернеховская, Н.Е. Туберкулез на рубеже веков: Монография / Н.Е. Чернеховская, A.C. Свистунова, Б.Д. Свистунов. М.: Российская медицинская академия последипломного образования, 2000.-3 71с.

317. Черноградский, И.П. Безглицериновые среды для исследований при туберкулезе / И.П. Черноградский, В.Т. Захаров // Ветеринария.-1973.-№5.-С.113-114.

318. Черноусова, Л.Н. Роль ПЦР-анализа в комплексных бактериологических исследованиях во фтизиатрии / Л.Н. Черноусова, Е.Е. Ларионова, Э.В. Севастьянова//Проблемы туберкулеза.-2001.-№3.-С. 58-60.

319. Шагинян, И. А. Геномный полиморфизм в решении фундаментальных и прикладных проблем микробиологии и эпидемиологии / И.А. Шагинян // ЖМЭИ. М., 1996.-№3.-С.21-25.

320. Шагинян, И.А. Исследование геномного полиморфизма штаммов М. tuberculosis / И.А. Шагинян, Л.И. Нестеренко, Т.Д. Гришина // ЖМЭИ. М., 1996.-№3.-С.65-68.

321. Шаров, А.Н. Полимеразная цепная реакция при диагностике туберкулеза / А.Н. Шаров, И.П. Суханов, Л.А. Ерошенко// Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России.-М.-1999.-Т.1.-С.188.

322. Шаров, А.Н. ПЦР при диагностике туберкулеза / А.Н. Шаров, Л.А. Ерошенко, И.П. Суханов и др. //Ветеринария.-2000.-№ 10.-С. 19-22.

323. Шаров, А.Н. ПЦР при диагностике туберкулеза / А.Н. Шаров, Л.А. Ерошенко, И.П. Суханов, С.Л. Кальнов и др. //БИО.-2002.-№12.-С.29-30.

324. Шаров, А.Н. Проблемы ПЦР-диагностики туберкулеза / А.Н. Шаров // Ветеринарный консультант.-2003.-№21-22.-С.14-15.

325. Шебанов, Ф.В. Туберкулез /Ф.В. Шебанов.- М.-1981.-368с.

326. Шемякин, И.Г. Использование молекулярно-биологических методов для индивидуальной характеристики штаммов. М. tuberculosis / И.Г. Шемякин, В.Н. Степашина // ЖМЭИ. М., 2000.-№2.-С.6-11.

327. Шемякин, И.Г. Генетическое типирование штаммов М. tuberculosis методами сполиготипирования и геномной дактилоскопии / И.Г. Шемякин, В.Н. Степаншина // ЖМЭИ. М., 2000.-№2.-С.12-14.

328. Шемякин, И.Г. Генетические особенности современных микобактерий туберкулезного комплекса / И.Г. Шемякин, В.Н. Степаншина // Журн. Микробиол.-2006, -№6.-С. 71-76.

329. Шилова, М.В. Итоги оказания противотуберкулезной помощи населению России в 2003г. / М.В. Шилова // Проблемы туберкулеза и болезней легких.-2005.-№6.-С.З-9:

330. Шишков, В.П. Патологическая анатомия / В.П. Шишков, H.A. Налетов. М.,1980.-332с.

331. Шишков, В.П. Патогенез и патоморфология туберкулеза / В.П. Шишков, H.A. Налетов, О.В. Якушева // Туберкулез сельскохозяйственных животных / Под ред. В.П. Шишкова и В.П. Урбана.-М., 1991.-С.64-72.

332. Шмелев, H.A. Поражение легких и лимфоузлов, вызванных М. avium / H.A. Шмелев, Н.М. Макаревич, М.Я. Дюканова // Проблемы туб. 1973 .-№3.-С.19-23.

333. Шуцкая, Е.И. Бронхоаденит у ребенка, вызванный микобактериями туберкулеза птичьего вида / Е.И. Шуцкая // Проблемы туберкулеза.-1965.-№3.-С.87-88.

334. Щепилов, Н.С. К вопросу выживаемости микобактерий туберкулеза в глубокой несменяемой подстилке у птиц, больных туберкулезом / Н.С. Щепилов, B.C. Кисленко, Г.Ф. Львова // Проблемы туберкулеза.-1971.-№8.-С. 17-21.

335. Щуревский, В.Е. Диагностика и организация борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных. В кн.: Проблемы зоогигиены и ветеринарной санитарии в животноводческих фермах. М., 1970.-С. 199-205.

336. Щуревский, В.Е. Патологическая диагностика туберкулеза / В.Е. Щуревский, О.В. Якушева, Н.П. Овдиенко, В.А. Шаров // Ветеринария.-1980.-№10.-С.31-33.

337. Щуревский, В.Е. Дифференциальная диагностика нокардиоза и туберкулеза / В.Е. Щуревский, Л.А. Ищенко, В.И. Писаренко, А.Г. Головинская // Ветеринария.-1981.-№1.-С.50-51.

338. Щуревский, В.Е. Туберкулез крупного рогатого скота и его взаимосвязь с туберкулезом человека / В.Е. Щуревский // Вопросы взаимосвязи туберкулеза .человека и животных.-Алма-Ата.-1981.-С.8-13.

339. Щуревский, В.Е. Атипичные микобактерии и их патогенность для сельскохозяйственных животных / В.Е. Щуревский, Н.П. Овдиенко, А.М. Кадочкин // Ветеринария.- 1987.- №4. С.32-35.

340. Щуревский, В.Е. Использование различных химических веществ для обработки патологического материала и их влияние на высеваемость микобактерий / В.Е. Щуревский, В.И. Косенко, Н.М. Тажгалиев // Бюл. ВИЭВ/- М., 1987.-Вып. 64.-С.15-19.

341. Щуревский, В.Е. Диагностика туберкулеза / В.Е. Щуревский, А.Н. Шаров, Ю.Я. Кассич, О.В. Мартма // Туберкулез животных и меры борьбы с ним / Под ред. Ю.Я. Кассича.-Киев.: «Урожай», 1990.-С.76-148.

342. Энгишев, A.A. Диагностика туберкулеза овец: Автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / A.A. Энгишев; ВИЭВ.-М., 1992.-25с.

343. Эрлих, С.Э. Сравнительное исследование различных методов обнаружения микобактерий туберкулеза в патологическом материале / С.Э. Эрлих//Лаб. дело.-1965.-№5.-С.309.

344. Эрлих, С.Э. Влияние способа обработки патологического материала на выявление микобактерий / С.Э. Эрлих // Лаб. дело.-1969.-№12.-С.24-28.

345. Эфендиева, И.В. Типологические особенности микобактерий, полученных от больных туберкулезом людей и животных и из объектов внешней среды / И.В. Эфендиева, P.A. Нуратинов, П.Г. Умарова // Проблемы туберкулеза.-2001.-№5.-С.45-47.

346. Юдин, Г.А. Морфологические реакции у животных вызываемые кислотоустойчивыми сапрофитами / Г.А. Юдин, A.B. Акулов // Ветеринария.- 1967.-№9.- С.43-45.

347. Юдин, Г.А. Дифференциация атипичных нефотохромогенных микобактерий и М. avium / Г.А. Юдин, О.В. Якушева // Пробл. туберкулеза.- 1978,-№10.-С.59-61.

348. Юдин, Г.А. Причины, распространение, дифференциация и профилактика неспецифических реакций на туберкулин / Г.А. Юдин // Ветеринария.-1987.-№12.-С.29-32.

349. Юсковец, М.К. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц /М.К. Юсковец: Сельхозгиз, 1963.-449с.

350. Ярных, B.C. Санитарные мероприятия в системе противоэпизоотической защиты / B.C. Ярных // Ветеринария.-1985.-Ж1.-С.26-30.

351. Ярных, B.C. Больше внимания санитарно-гигиеническим мероприятиям в животноводстве / B.C. Ярных // Ветеринария.- 1987.-№8.-С.З-5.

352. Ященко, Т.Н. Руководство по лабораторным исследованиям при туберкулезе / Т.Н. Ященко, И.С. Мечева;-М.: «Медицина», 1973 .-260с.

353. Beerwerth, W. Ökologie der Milcobacterien / Beerwerth, W., Schurmann. J. // Zbl. Bact., Parasitenkunde, Jnfektionskrankh., Hug J. Abt Orig., 211. -1969.- 1.-P.58-69.

354. Beerwerth, W. Mikobacterien in Viehtrafiken und Oberflachengewasser /Beerwerth, W. //Dtsch. Tierarztl. Wschr.-1973.-80.-P.398-401.

355. Beerwerth, W. Mikobacterien in der Umwelt von Mensch und Tier / Beerwerth, W., Kessel, U. // Zbl. Bacteriol. J, Reihe A.-1976.- Vol.235, 1/3.-P.177-183.

356. Butler, Rey W. Repid identification of mycobacterial mycolic acids by high performance liquid chromatography / Butler, Rey W., Kilburn James O. // Abstr. Annu. Meet. Amer. Sos. Microbiol., Atlanta, Ga, 1-6 March, 1987. Washington, D.C. 1987.-P. 135.

357. Chapman, J.S. le role du lait et du Betail dans loepidemiologie des affections a mycobacteries atypigues / Chapman, J.S. // Rev. Tuberc. Et Pneumol.-1970.-Vol.34.-P. 17-24.

358. Chapman, J. S. The Ecology of the Atipical Mycobacteria / Chapman, J. S., Dallas M. // Arch. Environ. Health.- 1971.-22,1.-P. 41-46.

359. Cole, S. Deciphering the biology of Mycobacterium tuberculosis from the complete genom seguence / S. Cole, R. Brosh, J. Parkhill et al. // Nature.-1998.-V. 393.-P. 537-544.

360. Corner, Z. The duracion of the response of cattle to inoculation with atipical micobacteria / Z. Corner // Austral. Veter. Z.-1981.-Vol. 57, № 5.-P.216.

361. De Kantor, I. Tuberculows infection in cattle not detected by slanghterhonse inspection / I. De Kantor, A. Nader, A. Bernardelli, D.O. Giron, E. Man // J. Vet. Med.- Ser. B- 1987.-Vol.34.-Jvfo3.-P.202-205.

362. Devulder, В. Микобактериозы человека, клинические формы и лечение / В. Devulder, J. Debiyne, A. Tacquet, Ch. Gernez-Rieu // Тр. 21-й Мужденародной конф. по туберкулезу.-М., 1972.-С. 135-143.

363. Douglas, L.G. Mycobacterium gordonae: A new pathogen? / Douglas, L.G., Calder M.A. // Thorax.- 1986.- Vol.41, n.2.- P. 152-153.

364. Ellner, J. Micobacterium avium infectio and AIDS: a therapeutic dilemma in repid evolution / J. Ellner, M. Goldberger, D. Parenti // J. infect. Dis.-1991.-Vol. 163.-P. 1326-1336.

365. Godlee,F. //Br. Med. J.-1993.-Vol. 306.-№ 6886.-P.1.147-1147.

366. Good, R. From the centers for disease control isolation of nontuberculosis micobacteria in the United States 1980 / R. Good, D. Snider // J. Infect. Dis.-1982.-Vol. 146, № 6. P. 829-833.

367. Goodfellow, M. Taxonomy and of micobacteria / M. Goodfellow, L.G. Wayne // In: The biology of mycobacteria.-V.l.-Academic Press.-1982.-London New York.-P. 1131-1138.

368. Gross, W.H. Nucleic acid homology in the genus Mycobacteria / W.H. Gross, L.G. Wayne // J. Bacteriol.-1970.-Vol. 104. -P. 630-634.

369. Hohn, S. Zur Frage der Kultur des Tuberkelbazillus und ihrer Verwendung zur Diagnose der Tuberculose / Hohn, S. // Zentralblatt für Bacteriologia. l.-Abt.B. 103.-Originale.-1927.-P. 342-345.

370. Hohn, S. Zur Frage der Kultur des Tuberkelbazillus zur Diagnose der Tuberculose / Hohn, S. // Munchener Medizinisch Wochenechriff .-1965.-№15.-P. 609-611.

371. Jenkins, P.A. Diagnostic Bacteriology.- Jn: The biology of the mycobacteria / Jenkins, P.A., Pattyn, S.R., Portaeis, F. // Acad. Press.-1982.-Vol.l.-P.441-470.

372. Karlson, A.G. Micobacterium avium in tuberculous adenitis of swine / Karlson A.G., Thoen C.O. // Amer. J. vet. Res.-1971.-Vol.-32, n.8.-P. 12571261.

373. Kasik, J. E. The natura of mycobacteria penicillinase / Kasik, J.E. // Amer. Rev. resp. Dis.-1965.-Vol. 91.-P. 117-118.

374. Kasik, J. E. Beta-lactamase activity in slowgrowing nonpigmented mycobacteria and their sensitivity to certain beta-lactam antibiotics / Kasik, J.E., Mouick, M., Schwärs, B. // Tubercle.- 1980.- Vol.61.- №4.- P. 21-219.

375. Kearns, A.M. Rapid of Mycobacterium bovis BCG by the detection of the RD1 deletion using a multiplex PCR technique / A.M. Kearns, S.G. Magee, A. Gennery et al. // J. Clin. Microbiol.-1999.-P. 566-569.

376. Kunkle, G. Repidly grouing mycobacteria as a caus of cutaneus granulomas: report of five cases / G. Kunkle, M. Culbas, V. Fakok et.al. // G. Amer. Anim. Hasp. Ass.-l983.-19,4.-P.513-521.

377. Lessilie, L.W. Practical application of bovine tuberculin PPD in testing cattle in Great Britain / J.W. Lesslie, C.N. Hebert, C.N. Frerichs // Vet. Rec.-1976.-98.9. P. 170-172

378. Lucas, A. Problems actuels dans la prophylaxie de la tuberculose bovine /Lucas, A. //Bull. Acad. Veter. Er.-1972.-Vol. 45.-n.6.- P. 285-292.

379. Mejn, A. Unspezifische Tuberkulinreaktionen beim Rinde / A. Mejn // Wien Tierarzt. Mschr.-1961.-49.-9.-S.711-724.

380. Meyer, W. Untersuchungen zur Heteroallergie der Tuberkulinreaktion bein Rind / Meyer, W. // Monatscheft Veterinarmed.- 1963.- Bd. 18.- n.9.- S. 325-328.

381. Milbrand, H. Tuberkulose Katse inliziert Rinderbestand / Milbrand, H., Roemmele, O. //Dtsch. Tierarztl. Wschr.- 1960, 67.- S.17-18.

382. Mullis, K.B. Faloona F.A. // Meth. Enzymol.-1987.-Vol.l55.-P.335-350.

383. Nassal, J. Beitrag zum allergischen Verhalten des aviaz infizerten Rindes auf die sc. Injektion von albumosefreien Rindertuberculose-einhatstuberkulins. / J. Nassal // Tztl. Umschau, 1960.-15.-8-S. 239-241.

384. Onet, E. Aspecte actuale ale diagnosticului si combacterii infectulor microbacterienela animale / E. Onet, J. Jnascu // Revista Zootech. Med. Vet.-Bucuresti, 1974.-Vol. 24, № 4.-P. 47-52.

385. Pauli, A. An enviromnental atudy of the opportunist Mycobacteria / Pauli, A. // Medical Laboratori Technology.-1973, 30,1.- P. 11-19.

386. Peterson, K. Mycobacterium fortuitum as a cause of bovine mastitis tuberculin sensitivity following experimental infection / Peterson, K. // J. Amer. Vet. Med. Assoc.-1965.-147, 12.-P. 1600-1607.

387. Plum. N. On typing of tuberculosis in cattle in Denmark / N. Plum // Nord. Veter. Med., 1952, 4.5, s. 451-461.

388. Popluhar, L. K diterencialnej diagnostic tuberculose u hovadciego dobutca / L. Popluhar // Veterinarstvi.-1973.-S.459-460.

389. Popovic, M. Eksperimentalna tuberculosa svinja / Popovic, M. et. al. // Veter. Glasnik.-1975.-Vol.29, n3.-P. 173-182.

390. Portaels, F. Lo place et l'évaluation des mycobacterioses a partir d'un laborated de mycobacterium / Portaels, F. // Bull. Un. Int. Tuberc. 1988.-Vol. 63.-№4.-P. 14-17.

391. Prevorcnik, J. Opravdanostuvodenja monotesta u dijagnostiku govede tuberculose / Prevorcnik. J. //Veter. Glasnik.-1987.-Vol.41, n.3-4.-P. 177-183.

392. Ranyon, E.N. Différenciation des Mycobacteries anonimes (atypiques) et des Bacilles tuberculeux des Mameiferes / Ranyon, E.N. // Bul. Union Infern. Tuberc.-1959.-Bd.29, n. 1-2.- S.72-83.

393. Reich, J. M. Mycobacterium avium complex pulmonary disease / Reich, J.M. Johnson, P.E. // Amer. Rev. resp. Dis.-1991.- Vol. 143.- №6.- P. 13811385.

394. Retzlaff, N. Untersuchungen zyr Morphologie der durch Mycobacterien hervergerufenen Lymphkno tenveranderungen des Schweines / Retzlaff, N. // Schlacht- Veihhof-Ztg.-1971.-Bd. 71, n.9.- P.348-350.

395. Richter, E. Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis infection in a patient with HIV, gemany / E. Richter, J. Wessling, N. Lugering et al. // Emerg. Infect. Dis.-2002.-v.8.-p.729-731.

396. Rilfors, L. Lipids and protein composition of membranes of Bacillus megaterium variants in the temperature range 5 to 70° / Rilfors, L. // J. Bacteriol.- 1978.-Vol.135.-№3.-P. 1043-1052.

397. Roberts, M.C. Whole chromosomal DNA probes for rapid identification of M. tuberculosis and M. avium complex / M.C. Roberts, C. Mc Millan, M.B. Coyb, J. Clin // Microbiol.-1987.-V.25.- № 7.-P. 1237-1243.

398. Rodriqiues, P. Infection on diseminada por Mycobacterium genavense en pacientes con infection por HIV / Rodriqiues, P., Francesca, M., Monterrat, G. et. al. // Enferm. Infecc. Microbiol. Clin.-1996.-Vol. № 14, 4.-P. 220-226.

399. Romero, R.E. Identification of Mycobacterium bovis in bovine clinical somples by PCR species-specific primers / R.E. Romero, D.L. Garzon, G.A. Mejia// Can. J. Res.-1999.-P. 10-106.

400. Saito, H. In vitro succeptiblity of Mycobacterium fortuitum complex to cephem antibiotics / Saito, H., Sato, K. // Hiroshima J. med. Sei.-1985.- Vol. 34.- n.2.-P. 257-260:

401. Sancher, J. Principiales Fuentes de infection de micobacterias atipicas en unidades bovinas / Sancher, J., Rossel, R. // Rev. cub. Ciens. veter.- 1983.-Vol. 14.- n. l.-P. 29-33.

402. Saxegaard, F. Serological investigations of Mycobacterium avium and Mycobacterium avium-like bacteria isolated from domestic and wild animals / Saxegaard, F. // Acta vetr. Scand.-1981.-Vol. 22, n. 2. P.153-161.

403. Saxegaard, F. Ommicobacterier og mykobacterioser med spesielt nenblikk pa nontuberkulose (atypiske) mykobakterier nos dyr I Norge / F. Saxegaard // Nor. Veterinaer tidsskr. 1985, 97.-№ 9.-547-555.

404. Saurat, P. Reactions tuberculingues non specifignes chezler bovins, Lintradermo-tuberculiniation comperative / P. Saurat // Inform. Serv. Veter.-1975.- Vol. 49, № 50.-P.39-46.

405. Schaefer, W. B. Serologic identification and classification of the atypical mycobacteria by their agglutination / Schaefer, W. B. // Am. Rev. resp. Dis.-1965.- Vol. 92.-P. 85-93.

406. Schaefer, W. B. Pathogenicity of transparent opaque and rough variants of Mycobacterium avium in chickens and mice / Schaefer, W. B., Devis, C. L., Cohn, M. L. // Amer. Rev. resp. Dis.- 1970.- Vol. 102.- P. 499-506.

407. Schliesser, T. Zur Frage der Ausscheidung humaner Tuberklbaterien in der Milhc / Schliesser, T. // Rindertuberkulose und Brucellose.- 1958.- Vol. 7.-P. 102-108.

408. Schliesser, T. Untersuchungenuber die diagnostische. Leistungsfähigkeit verdünnter Tuberculine an kunstlich mit Mycobacterien, infizierten Kalbern / Schliesser, T. // Zbl. Veterinarmed.-1964.- Bd. 11.- № 6.-S. 487-505.

409. Schliesser, T. Uber das Vorkommen sog, atipischer Mycobacterien bein Rinde / Schliesser, T. // Wien, tierarstl. Monatschr. 1965.- Bd. 52, n.5.- S. 555-564.

410. Schliesser, T. Mycobacteriosen bei Tiern und ihre Beziehungen zun Menschen: Gerenwart und Zukunft / Schliesser, T. // Prax. Pneum.-1977.-31.- 5.-S: 294-298.

411. Schliesser, T. Infektionen mit Mycobacterium bovis. Bekämpfung und Profylake / T. Schliesser // Handbuch der bakteriellen Infektionen bei Tieren.-Jena.- 1985 .-5 .-S .246-251.

412. Schorder, K. der Nachweis von Tuberculose bacterien in Untersuchungs- material Vergkich von Kultur und Tierversuch / Schorder, K., Topfer, M. // Prax. Pneumol.-1974,- 28,- 7.-S. 361-363.

413. Schuls, W. Die Mycobacteriose des Schweines / Schuls, W. // Mh. Veter.-Med.- 1976.-Bd. 31.-№19.-S.747-752.

414. Schultze, M. Identification of a mastitis pathogen in dairy cattle as Mycobacterium stegmatis / Schultze, M., Brasso, W. // J. Dairy Sei.-1986.-P.69.

415. Seeger, I. Vorconimen und Bedeutung atypischer Mycobacterien der Grupp II nach Ranyon bei Schweinen, Huhnern und Hunder / Seeger, I. // Zbl. Bact., I Abi. Orig.- 1969.-210.-4.-S. 517-524.

416. Seeger, F. Die Bedeutung der atypischen skotochromogenen Mycobacterien fur die Gesimdheit von Neir Mensch / Seeger, F. // Berl.-Vunh.-Tierarztl. Wsohr.- 1986.-81.-20.-P. 407-409.

417. Shleeva. M. Formation and resuscitation of non — culturble cell of Rhodococcus rhodochrous and Mycobacterium tuberculosis in prolonged stationary phase / Shleeva. M. et. al. II Microbiology.-2002.-148.-№ 5.-P.1581-1591.

418. Sofrenovic, D. Tuberculoza- micobacterioza svinja / Sofrenovic, D. Matis, G. II Veter. Glasnik. 1972.- Vol.- 26.- № 7.- P. 493-497.

419. Songer, I. Environmental souses of Mycobacterium avium for infection of animals and man / Songer, I. // Proc. / Ann. Meet. United States Anim. Health Assn. Richmond, Va.-1980.-Vol. 84.- P.528-535.

420. Stinson, S.C. // Chem. Eng. News.-1999.-Vol. 77.-№ 13.-P.36.

421. Stuart, P. Bovinr mastitis resmbling tuberculosis caused by M. lactiola and other rapidly growng acid-fast bacteria / Stuart, P. et Harvey, P. // Veter. Ree.- 1951.- 63.-52.-P. 881-885.

422. Subbarao, E.K. Soft-tissue infections caused by Mycobacterium fortuitum complex following penetrating injury / Subbarao, E.K., Tarpau, M.M., Marks, M.J. // Amer. J. Dis.- Child.- 1987.- Vol. 141.- № 9.-P. 10181020.

423. Szabo, J. Swine Imiphadentis den to Mycobacterium avium and atypical Mycobacteria: J. Patalogical studies I Szabo, J., Tuboly, S., Szeky, A. // Acta vet. Hung.-1975.-№ 25.-P.-67-76.

424. Szabo, J. Pathogenese der atipischen Mycobacteriose bei Schweinen / Szabo, J. //Mh. Veter.-Med.-1977.-Bd.32.-№ 9.- S. 336-338.

425. Thorel, M.F. Les mycobacteries ches. Laminal / Thorel, M.F. // Cahiers Med. veter.- 1975.- Vol. 44.-№ 2.- P.71-80.

426. Timpe, A. The relationship of atypical acid-fast bacteria to human disease / Timpe, A., Ranyon, E.N. // J. Lab. Clin. Med.-1954.-№ 44.-P. 202209.

427. Tragati, F. An outbreak of tuberculosis in goats / F. Tragati, D. Bianca, M. Finarri // Rivista di Zootechnica et Veterinaria.-1977.-№2.-P. 170-176.

428. Tsukamura, M. Numerical classification of Rhodococcus (formerly Gordon) organisms recently isolated from sputa of patients: description of Rhodococcus Spuit Tsukamura Sp. Nov. / Tsukamura, M. // Int. Syst. Bacterid.- 1978.- 28.- № 2.-P.169-181.

429. Tsukamura, M. A. Reviem on the taxonomy of the genus Mycobacterium. I. Definition of the denus Mycobacterium. «Kekkaku». 1980.-55.- № 6.- P. 289-295.

430. Tsukamura, M. A. Reviem on the taxonomy of the genus Mycobacterium. I. Definition of the denus Mycobacterium. «Kekkaku». 1980.-55.-№7.-P. 341-347.

431. Valero-Guillen, P.L. Cromatografía de capa final y cromatografía de gases en* la identification de microbacterias de Ínteres clinico / Valero-Guillen, P.L., Martin-Luengo, E. // Enferm, infec. y. Microbiol.- clin.- 1987.- Vol. 5. №> 6.-P.361-366.

432. Vialler, I. G. Epidemiologie der infection mit atypischen Mycobacterien / Vialler, I. G., Jonbert, U.E. // Praxis der Pneumologe- 1973.-P.272.

433. Viáller, I. G. Isolement de mycobacteries atypiques partir de ganglions de porcs et de bovines presumes sains (note complementaire) / Vialler, I. G. et. al. // Bull. Soc. Sc. Veter. Med. Comp. Lyon.-1976.-Vol. 78.- № 5.- P. 273276.

434. Wayner, L. G. Agents of newly recognized or infrequently encounted mycobacterial diseases / Wayner, L. G., Sramek, H. A. // Clin. Microbiol. Rev.-1992.- Vol. № 5, 1.- P. 1 -25.

435. Weber, A. Zum Nachweis von sog, atypischen Mycobacterien in Korfund Darmlymphknoten mich tyberkulose Schlachtschwein / Weber, A., Schliesser, T. // Zbl. Vet.- Med.- 1974.- Bd. 21.- n. 10.- S. 799-806.

436. Wicher, K. Nontuberculous mycobacteria. An overview / Wicher, K., // Lotte c. Tuberc.- 1984.- Vol. 56.- n. 2/3.- P. 230-231.

437. Windsor, R. S. Avian tuberculosis in pigs: Mycobacterium intracellularae infection in a breeding herd / Windsor, R. S., Darrant, D. S., Burn, K. J. // Veter. Ree.- 1984.- v. 114.- № 20.- P. 230-231.

438. Wright, W.E. Piatsek A.M., Rainey W.E., Snoy J.W. // Dev. Genet.-1996.-№18.-P. 173-179.

439. Zorawski, C. Badenia nad wystepowaniem pratkow ptasich I atypowych u swin / Zorawski, C., Karpinski T., Skwarek, P. // Med. wet.- 1974.- Vol. 30.-n. 12.- P.711-714.

440. Zorawski, C. Mycobacterium intracellularae, serotype 8 (Davies), existing in sawdust as a cause of mass infection of pigs / Zorawski, C., Karpinski T. // Bull. Veter. Inst. In Pulawy.- 1983.- Vol. 26.-P.1-4.

Информация о работе

Курандо, Екатерина Эдуардовна
кандидата биологических наук
Москва, 2010
ВАК 06.02.02

Диссертация

Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза животных в условиях изменяющейся эпизоотической ситуации - тема автореферата по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы