Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Комплексная сравнительная оценка эпизоотической ситуации туберкулеза животных и методов его диагностики в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Комплексная сравнительная оценка эпизоотической ситуации туберкулеза животных и методов его диагностики в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах"

0046

3114

На правах рукописи

Тупота Сергей Григорьевич

КОМПЛЕКСНАЯ СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЖИВОТНЫХ И МЕТОДОВ ЕГО ДИАГНОСТИКИ В СЕЛЬХОЗПРЕДПРИЯТИЯХ И ЛИЧНЫХ ПОДСОБНЫХ

ХОЗЯЙСТВАХ

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

1 3 нпя -)Щ

НОВОСИБИРСК-2010

004613114

Работа выполнена в ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии

Научный руководитель: Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Донченко Николай Александрович

доктор ветеринарных наук, профессор Димов Сергей Константинович,

доктор ветеринарных наук, профессор Смолянинов Юрий Иванович

ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных»

Защита состоится «17» ноября 2010 г. в 14-00 ч на заседании диссертационного совета Д.006.045.01 при Государственном научном учреждении Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии по адресу: 630501, Новосибирская обл., Новосибирский район, п. Краснообск, Россельхозака-демия, ИЭВСиДВ а/я 8, тел/факс (383) 348-44-62.

С диссертацией можно ознакомиться в Сибирской научной сельскохозяйственной библиотеке Россельхозакадемии

Автореферат разослан «■/^ » октября 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Стеблева Г.М.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Туберкулез остается одной из главных инфекционных проблем медицины и ветеринарии в мире (В.М.Авилов, 1994; A.C. Донченко, 2004; A.C. Жумаш и соавт., 2005; M.S. Zanini, 2005; A.L.Michel, 2007; В. Müller, 2008; О. Aurtenetxe, 2008; N. Sahraoui, 2009).

На сегодняшний день в РФ выделяют три основных категории производителей сельскохозяйственной продукции: сельхозтоваропроизводители (СТП) - крупные хозяйства различных организационно правовых форм; крестьянско-фермерские хозяйства (КФХ) -как правило, мелкие сельхозтоваропроизводители, осуществляющие свою деятельность за счет производства и реализации сельскохозяйственной продукции; личные подсобные хозяйства (ЛПХ) или хозяйства населения, производимая продукция которых в основном потребляется самими производителями, реализуются лишь излишки (Ю.А. Юрченко и соавт., 2007).

По данным официальной статистики, личными подсобными хозяйствами (ЛПХ) в России занимается 16 млн. семей. ЛПХ производят 56 % мяса, 51,8% молока, 25,2% яиц от общего объема этих видов сельскохозяйственной продукции (A.C. Донченко и соавт., 2006).

Несмотря на большое количество специальной литературы по проблеме туберкулеза, имеются лишь единичные публикации и методические рекомендации, посвященные вопросам эпизоотологии этой болезни в личных подсобных хозяйствах (A.C. Жумаш и соавт, 2005; Н.П. Помыканов, 2005).

Особенностью, затрудняющей диагностику туберкулеза в личных подсобных хозяйствах, являются совместное содержание и тесный контакт разных видов животных и птиц, способствующие заражению различными видами микобактерий (A.C. Жумаш и соавт, 2005; Н.П. Помыканов, 2005).

В связи с указанными особенностями, в последние годы увеличивается количество жалоб владельцев животных на необоснованный убой животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, инициируются судебные дела между владельцами животных и ветеринарными специалистами (A.C. Жумаш, 2005, 2007; Н.П. Помыканов, 2005).

Указанные выше проблемы приводят к убеждению, что для полного раскрытия эпизоотической ситуации по туберкулезу необходимо ее углубленное и всестороннее изучение не только в крупных сель-

хозпредприятиях, но и в личных подсобных хозяйствах, что позволит выявить максимальное число эпизоотологических и эпидемиологических факторов, способствующих распространению этой болезни, и в этой связи быстро и точно ставить диагноз и организовывать конкретные профилактические противотуберкулезные мероприятия.

Цель исследования - осуществить комплексную сравнительную оценку эпизоотической ситуации по туберкулезу животных и методов его диагностики в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах.

С учетом цели, сформулированы следующие задачи:

1. Осуществить сравнительную комплексную диагностику туберкулеза крупного рогатого скота в общественных и личных подсобных хозяйствах с использованием эпизоотологического, аллергического, клинического, патологоанатомического, бактериологического и молекулярно-генетического методов и оптимизировать ее схему.

2. Провести генотипирование культур М. avium, выделенных от животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих.

3. Провести диагностику туберкулеза у мелкого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах.

Научная новизна. Установлено, что количество реагирующего крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих значительно ниже в личных подсобных хозяйствах в сравнении с животными в сельхозпредприятиях, что можно объяснить низкой возможностью реализации горизонтального и вертикального путей распространения микобактерий туберкулеза в данных хозяйствах.

Подтверждено, что снижение дозы ППД туберкулина для млекопитающих до 5000 ME при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах позволяет в 2,4 раза снизить количество неспецифических реакций, по сравнению со стандартной дозой 10 ООО ME.

Установлен широкий ареал распространения М. avium на территории Новосибирской области.

Изучено генетическое разнообразие М. avium, циркулирующих на территории Новосибирской области и получены данные по нук-леотидным последовательностям mig-гена М. avium и спейсерной последовательности 16S-23S rRNA Mycobacterium spp., свидетельствующие об их эпизоотическом и эпидемическом потенциале.

Определена целесообразность применения пальпебральной туберкулиновой пробы для диагностики туберкулеза у мелкого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах.

Данные о нуклеотидных последовательностях М. avium subsp. paratuberculosis sir. К10 использованы для разработки олигонуклео-тидных праймеров и подбора режима амплификации (подана заявка на патент «Олигонуклеотидные праймеры и способ выделения ДНК Mycobacterium paratuberculosis - возбудителя паратуберкулёза крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)» с приоритетом № 2010123200 от 9.06.2010).

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований раскрывают особенности эпизоотического процесса туберкулеза в личных подсобных хозяйствах и при внедрении в ветеринарную практику позволяют повысить эффективность осуществляемых в них противотуберкулезных мероприятий.

Апробация работы. Результаты работы опубликованы в материалах II Международной научно-практической конференции молодых ученых (пос. Краснообск Новосибирской обл., 2006); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы сельского хозяйства горных территорий» (Омск, 2009); II Международной научно-практической конференции (г. Горно-Алтайск, 2009), II Сибирского ветеринарного конгресса (Новосибирск, 2010).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 4 статьи в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ («Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Ветеринария»).

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 145 страницах и включает разделы; введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Работа иллюстрирована 16 таблицами, 24 рисунками. Список литературы включает 249 источников, в т.ч. 79 зарубежных авторов.

Внедрение результатов исследований. Материалы диссертации использованы при составлении методических рекомендаций «Диагностика и профилактика туберкулеза сельскохозяйственных животных в личных подсобных хозяйствах» (прот. № 2 от 9 сентября 2009) и «Взаимосвязь между реагирующими на ППД туберкулин для млекопитающих животных и циркуляцией микобактерий в окружающей среде» (прот. №3 от 19 мая 2010), утвержденных подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхоза-кадемии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты сравнительной комплексной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в общественных и личных подсобных хозяйствах с использованием аллергического, эпизоотологиче-ского, клинического, патологоанатомического, бактериологического и молекулярно-генетичсского методов.

2. Результаты геиотипирования изолятов М. avium, выделенных от животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих.

3. Результаты диагностики на туберкулез мелкого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы

Работа выполнена в лаборатории по разработке мер борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россель-хозакадемии, в 2005-2009 гг. в соответствии с планом НИР 08.01.02. «Разработать оптимальную комплексную систему диагностики, профилактики и оздоровления хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота».

Изучение эпизоотической ситуации по туберкулезу проводили по данным ветеринарной отчетности Управления ветеринарии Новосибирской области (2005-2009 гг.) с учетом собственных аллергических и бактериологических исследований крупного рогатого скота, мелкого рогатого скота, свиней, собак, а также результатов бактериологических исследований районных ветеринарных лабораторий. За период работ исследовано 4417 гол. крупного рогатого скота, 2394 гол. мелкого рогатого скота, 33 гол. свиней, 21 гол. собак личных подсобных хозяйств.

Комплексная диагностика туберкулеза животных проводилась лично автором в модельных хозяйствах Доволенского, Краснозер-ского и Ордынского районов, входящих в разные природно-климатические зоны.

В работе использовали ППД туберкулин для млекопитающих, производства ФГУП «Курской биофабрики - фирма БИОК» физиологический раствор, инсулиновые шприцы, кутиметр, цифровой ветеринарный кутиметр НПФ «КОСТА», питательные среды Финн-2, ИЭВСиДВ оборудование для постановки ПЦР, секвенатор «Beckman CEQ2000XL DNA Analysis System».

Аллергические исследования проводили согласно «Наставлению по диагностике туберкулеза животных», утв. (18.11.2002.). Для уменьшения дозы туберкулина стандартный раствор туберкулина разводили физиологическим раствором с соблюдением правил асептики в соотношении 1:1. Для исследования крупного и мелкого рогатого скота применяли внутрикожную и пальпебральную туберкулиновые пробы (в дозе 10000 МБ и 5000 МБ в 0,2 мл объема).

Обработку биоматериала от реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих животных проводили по методу А.П. Аликае-вой и седиментации (А.С. Донченко, В.Н. Донченко, 1994).

Изучение свойств выделенных культур микобактерий проводили согласно методическим рекомендациям «Лабораторная диагностика туберкулеза», 1988 г., используя различные питательные среды и различные режимы инкубации. Мазки, готовили по методу Циль-Нильсена.

Для проведения биологической пробы использовали морских свинок, (456 гол.), беспородных белых мышей (564 гол.), кроликов (228 гол.) и кур (20 гол.). Биологическую пробу проводили на животных, не реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, заражая их культурой микобактерий по общепринятой методике. За зараженными лабораторными животными вели наблюдения в течение 3-х месяцев. Если за этот период животные не погибали, их подвергали убою.

Выделение суммарной ДНК микобактерий из образцов биоматериала проводили с использованием набора ДНК-сорб (ЦНИИЭ Роспотребнадзора). В работе применяли последовательности прай-меров, заимствованные из источников литературы (M.L. Beggs et al., 2000; Т. Adckambi et al., 2006; L. Xiong et al., 2006) и направленные на обнаружение mig-гена - фактор вирулентности M.avium, области senX3 - regX3, характерной для M.tuberculosis complex, 16S-23S rRNA - спейсерной последовательности для индикации большинства типичных и атипичных микобактерий. Постановку ПЦР осуществляли согласно общепринятой методике, используя набор лиофили-зированных реагентов для ПЦР Gen Pack PCR Universal. Анализ полученных в ПЦР данных, проводили методом электрофореза в агарозном и полиакриламидном гелях, учитывая результаты в УФ-свете на трансиллюминаторе с длиной волны 254 нм. В качестве маркера использовали pUC19/Kzo91 и pBluescript/Msp.

Секвенирование генов, построение дендрограмм и филогенетический анализ микобактерий в сравнении со штаммами, циркулирующими на различных территориях, проводили на базе ГНЦ ВБ

«Вектор» Роспотребнадзора в НИИ молекулярной биологии совместно с В.А. Терновым и H.JI. Тупота,

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Анализ эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в Новосибирской области за 2001-2009 годы

Территорию Новосибирской области делят на три различные природно-климатические зоны: Центрально-Восточная, Барабин-ская, Кулундинская, которые имеют отличия и в эпизоотической обстановке по туберкулезу крупного рогатого скота.

В Барабинской и Кулундинской зонах, наиболее сложное положение было в Доволенском и Кочковском районах, заболеваемость туберкулезом в которых составила: в 2005 г. - 4,37 и 2,4%, в 2006 -2,52 и 2,42, в 2007 - 2,31 и 0,27% соответственно. Коэффициент напряженности эпизоотической ситуации в данных районах за этот период составил 0,18 - 0,06 и 0,08 - 0,06 соответственно.

Анализируя интенсивность проявления эпизоотического процесса за исследованный период в природно-климатических зонах, индекс неблагополучия по Центрально-Восточной зоне составил - 0,2; по Барабинской зоне - 3,2; по Кулундинской зоне - 6, что характеризует эпизоотическую ситуацию в данной зоне, как наиболее сложную.

Анализ эпизоотической ситуации в Новосибирской области показал, что за период с 2001 по 2009 г. в целом наблюдалось улучшение эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота: количество неблагополучных пунктов, имеющихся на 01.01.2001 г., сократилось в 4,25 раза по состоянию на 01.01.2009.

2.2.1.1 Результаты бактериологических исследований биологического материала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих в различных природно-климатических зонах

В процессе анализа результатов изучения культур микобакте-рий, изолированных из биоматериала крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, следует отметить, что в различных зонах видовая структура микобактерий неодинакова и соответствует уровню напряженности эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в этих зонах.

В различных зонах Новосибирской области Центрально-Восточной, Кулундинской и Барабинской из биоматериала животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, изолировали и идентифицировали, в основном, атипичные микобакте-рии-75,9, 62,1 и 66,4% соответственно. Культуры М. avium, изолированные от крупного рогатого скота этих зон составляли 18,5, 18,4 и 19,8% соответственно. Патогенные культуры М. bovis и М. tuberculosis из данных зон - 5,6, 14,6 и 13,8% соответственно. Количество культур, выделенных от животных из различных хозяйств в исследуемых зонах, указывает на неоднородное развитие напряженности эпизоотической ситуации и уровня проводимых профилактических оздоровительных мероприятий.

2.2.2 Сравнительная оценка результатов аллергических исследований крупного рогатого скота в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах в Доволенском, Краснозерском и Ордынском районах Новосибирской области

Для анализа проявления туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в общественных и личных подсобных хозяйствах нами собраны и проанализированы данные по трем районам Новосибирской области: Доволенскому, Краснозерскому и Ордынскому, как типичным представителям Барабинской, Кулундинской и Центрально-Восточной природно-климатических зон соответственно.

При анализе установлено, что за 5 лет средний процент реагирования крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих в крупных сельхозпредприятиях был неодинаков в различных районах: в Доволенском - 4%, в Краснозерском-1,7, в Ордынском районе - 1,4%.

Процент реагирования крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах на ППД туберкулин для млекопитающих оказался практически одинаковый во всех районах и составил 0,7-0,8%. При этом установили, что количество реагирующих на туберкулин животных в Доволенском районе составило 0,8%, в Краснозерском - 0,7, в Ордынском - 0,8%. Таким образом, оказалось, что в личных подсобных хозяйствах процент реагирующих на туберкулин животных меньше, чем в сельхозпредприятиях - в 5,2,4 и 1,8 раза соответственно.

Резкое различие показателей реагирования крупного рогатого скота отмечено в Доволенском районе, где в период исследований наблюдалось максимальное количество неблагополучных по туберкулезу пунктов.

2.2.2.1 Сравнительная оценка результатов аллергических исследований крутого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах и в сельхозпредприятиях на примере модельных хозяйств

Доволенском район. На момент проведения исследований (2005-2008 гг.) в населенных пунктах, входящих в Суздальский сельсовет, на территории которого расположено сельхозпредприятие № 1 (в дальнейшем хозяйство № 1) не было зарегистрировано лиц, находящихся на лечении или состоящих на учете у фтизиатра. В состав хозяйства № 1 входят 6 отделений, расположенных в четырех населенных пунктах. Данное хозяйство неблагополучно по туберкулезу крупного рогатого скота с 2004 г.

В 2005 г. количество реагирующих на ППД туберкулин животных в личных подсобных хозяйствах было значительно меньше (в 8,6 раз), чем в фермах хозяйства № 1 (табл. 1).

Таблица 1 - Результаты аллергического исследования крупного рогатого скота хозяйства № 1 и личных подсобных хозяйств Суздальского сельсовета

Годы Хозяйство № 1 ЛПХ Суздальского сельсовета

2005 исследовано 1696 936

реагировало 291 (17,2%) 19 (2%)

2006 исследовано 3818 1704

реагировало 298 (7,8%) 58 (3,4%)

2007 исследовано 3797 933

реагировало 67 (1,8%) 17(1,8%)

2008 исследовано 3499 567

реагировало 122 (3,4%) 9 (1,6%)

2009 за 1-2 кв. исследовано 869 279

реагировало 5 (0,6%) -

Всего исследовано 13679 4419

реагировало 783 (5,7%) 103 (2,3%)

Примечание: «-» нет реагирующих.

При проведении аллергических исследований крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах Суздальского сельсовета весной 2006 г. часть животных (335 гол. - первая группа) исследовали внутрикожной туберкулиновой пробой ППД туберкулином для млекопитающих в дозе 10000 МЕ, а вторую часть (1365 гол.- вторая группа) в дозе 5000 МЕ. В первой группе реагировало 48 гол. (14,3%), во второй 52 гол. (3,8%). Реагирующих животных из обеих групп дополнительно исследовали через 30 дней внутрикожной ту-

беркулиновой пробой в дозе 5000 МЕ и одновременно пальпебраль-ной туберкулиновой пробой. Из первой группы животных при повторном исследовании реагировало 19 гол. (39,6%), а из второй группы - 39 (75%). Пальпебральная проба совпала с результатами внутрикожной туберкулиновой пробы в 100% случаев. При анализе результатов повторного исследования установлено, что в первой группе (10000 МЕ) выпало 60,4% аллергических реакций, а во второй группе (5000 МЕ) - 25%, что в 2,4 раза меньше.

В 2007 г., совместно с ветеринарной службой Доволенского района, проведены 2 плановые туберкулинизации крупного рогатого скота личных подсобных хозяйств ППД туберкулином в дозе 5000 МЕ. Всего исследовано 933 гол. крупного рогатого скота, из которых реагировало на ППД туберкулин для млекопитающих 17 гол. (1,8%). Реагирующих на туберкулин животных повторно исследовали через 30 дней внутрикожно в дозе 5000 МЕ и одновременно пальпебральной пробой. При повторном исследовании на внутрикожную туберкулиновую пробу реагировали все 17 коров. Пальпебральная проба совпала с внутрикожной туберкулиновой пробой в 88,2% случаев.

В личных подсобных хозяйствах, входящих в Суздальский сельсовет в 2008 г. были проведены 2 плановые туберкулинизации. Всего исследовано 567 гол., из которых реагировало на ППД туберкулин для млекопитающих 9 гол. (1,6 %). При анализе полученных аллергических исследований установлено, что в личных подсобных хозяйствах животные реагируют в 2,1 раза меньше, чем в хозяйстве № 1.

При сравнении процента реагирующих животных в личных подсобных хозяйствах и в хозяйстве № 1 в целом за период с 2005 по 2009 гг. данный показатель в среднем был меньше в 2,5 раза.

При клиническом осмотре в 2005-2007 гг. 94 гол. крупного рогатого скота из личных подсобных хозяйств, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, отмечали хороший аппетит и упитанность, блестящую шерсть, отсутствие каких-либо клинических признаков или симптомокомплексов, свойственных острым или хроническим заболеваниям, в том числе туберкулезу.

Краснозерский район. На момент проведения исследований (2005-2008 гг.) в Краснозерском районе, в населенном пункте Коневского сельсовета, на территории которого расположено сельхозпредприятие № 2 (в дальнейшем хозяйство № 2), не было зарегистрировано лиц, находящихся на лечении или состоящих на учете у фтизиатра. Данное хозяйство неблагополучно по туберкулезу с

2005 г. От животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, выделен возбудитель М, tuberculosis.

В 2005 г. в Коневском сельсовете было исследовано туберкулиновой пробой 342 гол. крупного рогатого скота личных подсобных хозяйств, выявлено 3 гол. реагирующих, что составило 0,9% от исследованного поголовья (табл. 2). В 2006 г. было проведено 2 плановые туберкулинизации крупного рогатого скота личных подсобных хозяйств, исследовано 302 гол., из них реагировала одна, что составило 0,3% от исследованных животных. В 2007 г. проведено 2 плановые туберкулинизации крупного рогатого скота, исследовано 277 гол., из них реагировало 7 гол. или 2,5%. При повторном исследовании этих животных, через 30 дней внутрикожной туберкулиновой пробой и пальпебральной пробой в дозе 5000 МЕ реагирующих не выявили. В 2008 и 2009 гг. в Коневском сельсовете проведено по 2 плановые туберкулинизации крупного рогатого скота, исследовано 211 и 170 гол., реагирующих животных не выявили.

Таблица 2 - Результаты аллергического исследования крупного рогатого скота хозяйства № 2 и личных подсобных хозяйств Коневского сельсовета

Годы Хозяйство № 2 ЛПХ Коневского сельсовета

2005 исследовано 3892 342

реагировало 365 (9,3%) 3 (0,9%)

2006 исследовано 3892 302

реагировало 282 (7,3%) 1 (0,3%)

2007 исследовано 3729 277

реагировало 161 (4,3%) -

2008 исследовано 3783 211

реагировало 158 (4,2%) -

2009 за 1-2 кв. исследовано 2483 170

реагировало 45 (1,8%) -

Всего исследовано 17779 1302

реагировало 1011 (5,7%) 4 (0,3%)

Р <0,01

Примечание:«-» нет реагирующих.

При сравнении процента реагирующих животных в личных подсобных хозяйствах и в хозяйстве № 2 за период с 2005 по 2009 гг. данный показатель был меньше в 19 раз.

Ордынский район. На момент проведения исследований (20052008 гг.) Ордынский район был благополучен по туберкулезу крупного рогатого скота более 10 лет.

Анализ результатов аллергических исследований по данному хозяйству показал, что не установлено существенного увеличения или снижения количества реагирующего крупного рогатого скота за 2005-2009 гг. и средний процент реагирования составил 1,4% от общего количества исследованных. Наибольший процент реагирующих животных отмечен в 2007 г. - 2,5%.

При сравнении процента реагирующих животных в личных подсобных хозяйствах и в хозяйстве № 3 за период с 2005 по 2009 гг. данный показатель в среднем был меньше в 2 раза.

Сравнение процента реагирующего крупного рогатого скота в вышеперечисленных личных подсобных хозяйствах и у животных, находящихся в сельхозпредприятиях показало, что животные реагируют меньше в личных подсобных хозяйствах, чем в крупных сельхозпредприятиях - в 2,5, 19 и 2 раза соответственно.

2.2.2.2 Бактериологическое исследование биоматериала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, сельхозпредприятий и личных подсобных хозяйств

Всего за период с 2005 по 2009 г. в хозяйстве № 1 исследовано 53 пробы биологического материала крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих. Из них выделено 39 культур микобактерий: 1 - М. bovis (2,6%), 8 - М. avium (20,5), 2 -атипичные микобакгерии II группы по Раньону (5,1) и 28(71,8%) -атипичных микобактерий IV группы по Раньону (табл. 3).

Таблица 3 - Результаты бактериологических исследований биологического материала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, в хозяйстве № 1 и личных подсобных хозяйствах Суздальского сельсовета (2005-2009 гг.)

Выделенные культуры от крупного рог атого скота

хозяйство № 1 личные подсобные хозяйства

Годы М bovis М. viurn II группы по Раньону IV группы по Раньону М. tuberculosis и. avium IV группы по Раньону

2005 1 - - 2 - 1 1

2006 2 1 12 - 10 14

2007 - 4 1 10 2 6 6

2008 - 2 - 3 - - -

2009 - - - 1 - - -

Всего 1(2,6%) 8(20,5%) 2(5,1%) 28(71,8%) 2(5%) 17(42,5%) 21(52,5%)

Примечание: «-» - культура ис выделена.

За период с 2005 по 2008 г. исследовано 94 пробы от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин личных подсобных хозяйств. Биологический материал обрабатывался методом А.П. Али-каевой и модифицированным методом седиментации (A.C. Дончен-ко и соавт., 1994). Суспензию, полученную в результате обработки материала, сеяли на 6-8 пробирок со средами Финн-2 и ИЭВСиДВ. Оставшуюся часть суспензии титровали по стандарту мутности 10 МБ и проводили биологическую пробу с использованием 2-х морских свинок и 6-ти беспородных белых мышей. От лабораторных животных отбирали внутренние органы (легкие, печень, селезенку, почки), обрабатывали их методом седиментации и вносили на 68 пробирок со средами Финн-2 и ИЭВСиДВ. В результате исследований было изолировано 38 культур микобактерий, с которыми поставили биологическую пробу, используя для этих целей кроликов, морских свинок и кур по общепринятой методике. Дополнительно для дифференциации полученных культур производили следующие тесты: инкубирование при различных температурах и освещении, посевы на среды с салицилатом натрия.

Необходимо отметить, что данные бактериологических исследований во всех указанных случаях были подтверждены результатами ПЦР.

Сравнивая результаты бактериологических исследований 94 проб биологического материала, следует отметить, что наименьшее количество выделенных культур микобактерий получено при обработке проб методом А.П. Аликаевой - 3 (3,2%). Модифицированным методом с использованием принципа седиментации было выделено 18 (19,1) культур, а при дополнительном заражении белых мышей - 40 (42,6%) культур.

В процессе анализа культур микобактерий, изолированных от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин, следует отметить, что в хозяйстве № 1 и личных подсобных хозяйствах Суздальского сельсовета отмечены различия в микобактериальном составе. Так, в хозяйстве № 1 за исследуемый период выделены 1 культура М. bovis (2,6%) и 2 культуры атипичных микобактерий II группы по Раньону (5,1%). При этом данные культуры выделялись только от животных хозяйства № 1. М. avium в хозяйстве № 1 имеет более широкое распространение: количество их составило 20,5% от выделенных культур микобактерий. Наибольшую группу культур составили атипичные микобактерии IV группы по Раньону, на их долю пришлось 71,8% от общего количества изолированных культур.

В свою очередь из биологического материала от крупного рогатого скота личных подсобных хозяйств Суздальского сельсовета изолированы 2 культуры М. tuberculosis, что связано с тесным контактом с больными туберкулезом владельцами животных. Количество культур М. avium, изолированных из биологического материала от животных, реагирующих на туберкулин в личных подсобных хозяйствах Суздальского сельсовета, составило 17 (42,5%), что в 2,1 раза больше, чем в хозяйстве № 1. Количество культур, отнесенных к типичным микобактериям, составило 21 (52,5%).

За период с 2005 по 2008 г. проведены бактериологические исследования 52 проб биологического материала от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин, хозяйства № 2 (табл. 4).

Таблица 4- Результаты бактериологических исследований биологического материала крупного рогатого скота, реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, в хозяйстве № 2

Выделенные культуры от крупного рогатого скота

Годы Хозяйства № 2

М. tuberculosis М, avium II группы по Раньону IV группы по Раньону М. paratuberculosis

2005 2 - - 3 -

2007 - б 1 - 1

2008 - - - 3 -

Всего 2(12,5%) 6(37,5%) 1(6,3%) 6(37.5%) 1(6,3%)

Примечание: «-» - культура не выделена.

Изолировано 16 культур микобактерий, что составило 30,8% от количества исследованных проб.

Из выделенных культур микобактерий идентифицированы: U. tuberculosis - 2 культуры (12,5%), М. avium - 6 (37,5), атипичных микобактерий II гр. по Раньону - 1 (6,3), атипичных микобактерий IV гр. по Раньону - 6 (37,5) и М. paratuberculosis - 1 культура (6,3%).

2.2.2.3 Исследование объектов внешней среды

За период с 2006 по 2007 г. исследовано 38 проб из объектов внешней среды, включающих 20 проб почвы пастбищ и 18 проб воды с естественных водоемов, использующихся для выпаса и поения животных личных подсобных хозяйств. При исследовании 20 проб почвы, взятых на выпасах, выделено 8 культур микобактерий (40%). Из них 2 культуры (14,3%) были отнесены к атипичным микобакте-

риям III гр. по Раньону и 7 (50%) - к атипичным микобактериям IV гр. по Раньону. Из 18 проб воды выделено 5 (27,8%) культур ми-кобактерий, 2 (14,3) из которых отнесены к IV гр. по Раньону и 3 (21,4%) - к III гр. по Раньону.

2.2.2.4 Генотипирование выделенных изолятов М. avium

Генотипирование 27 культур микобактерий, полученных от крупного рогатого скота в Новосибирской области, показало, что 24 из них относится к М. avium, 14 из которых по фрагменту mig-гена гомологичны М. avium str. 104, выделенным на территории США и образуют с ним I кластер.

Уровень генетических отличий между ними невысок и степень гомологии нуклеотидной последовательности сибирских и североамериканских вариантов по фрагменту mig-гена с достаточно высокой статистической поддержкой составляет около 89%. Аналогичные варианты микобактерий уже были обнаружены в 2001-2008 гг. на территории Ордынского, Доволенского, Чулымского, Кочковско-го и Карасукского районов. Они также имели минимальные отличия от североамериканских изолятов, заключающиеся в наличии нук-леотидных замен, как правило, не приводящих к замене аминокислот. В культуре М. avium, полученной в 2003 г. в Новосибирском районе, обнаружена специфическая нуклеотидная замена в позиции 142 н. (А—>С) (нумерация приведена относительно последовательности фрагмента mig-гена штамма 104). Две культуры, выделенные в 2003 и 2006 гг. на территории Ордынского и Карасукского районов области, имеют уникальные аминокислотные замены, находящиеся в одинаковых позициях: DSE-+DYE, PRL->PGL, DES—>DKS и на филогенетическом дереве образуют общую с М. avium str. 104, обособленную от других изолятов ветвь. Это может свидетельствовать о формировании адаптации к меняющимся условиям существования микробного агента.

Кластер II образовали 4 культуры, выделенные из Новосибирского, Ордынского и Карасукского районов области. При этом наибольший процент гомологии (83%) наблюдался со штаммами М. avium subsp. pararuberculosis str. К10 v.M. avium str. MAU 43598, распространенными на территории США и в странах Европы.

Шесть культур М. avium принадлежащих к М. avium subsp. avium, который является типичным возбудителем туберкулеза птиц, выделены на территории Доволенского (3 изолята), Краснозерского

(2 изолята) и Карасукского районов (1 изолят) области. При этом 2 изолята Доволенского района были выделены от крупного рогатого скота, содержащегося в личных подсобных хозяйствах и имеющего тесный контакт с домашней птицей.

Анализируя полученные результаты, необходимо отметить, что популяция М. avium, циркулирующая на территории Новосибирской области, генетически неоднородна и типированные культуры мико-бактерий принадлежат к эпидемически и эпизоотически значимым субтипам М. avium str. 104, M. avium subsp. pararuberculosis str. К10 и M. avium subsp. avium, распространенным на территории США и Западной Европы. Выделенные культуры микобактерий распределяются в три генетических кластера, которые не коррелируют с географической локализацией изолятов.

2.2.4.1 Генотипирование атипичных микобактерий

В 2006 г. в хозяйстве №1 Доволенского района от крупного рогатого скота личного подсобного хозяйства была выделена культура M. smegmatis. При популяционном анализе данной культуры нуклеотидные последовательности сформировали 2 генетические группы с двумя подгруппами каждая. Выравнивание нуклеотидных последовательностей позволило определить замены, характерные для М. smegmatis и приводящие к замене аминокислот. Была обнаружена уникальная аминокислотная замена, характерная для западносибирской культуры M. smegmatis. Построение консен-сусного ML-дерева, включающего все культуры, изученные методом секвенирования, подтвердило принадлежность культуры к M. smegmatis. Культура образовала один клад с M. smegmatis str. MC 2 155, являющимся мутантным вариантом дикого типа штамма М. smegmatis АТСС 607.

Две культуры, полученные из проб с пастбищ Краснозерского района и из лимфатических узлов крупного рогатого скота Доволенского района на основании изучения межгенной последовательности 16S-23S rRNA отнесены к аналогичным непатогенным штаммам M. vaccae.

2.5 Результаты исследований мелкого рогатого скота на туберкулез в личных подсобных хозяйствах

Мелкий рогатый скот широко распространен в личных подсобных хозяйствах. Такие животные, по данным A.C. Донченко (1990), A.C. Донченко и соавт. (1994), могут являться источником возбуди-

теля туберкулеза или быть причиной сенсибилизации крупного рогатого скота на Г1ПД туберкулин для млекопитающих.

Нами проведено аллергическое исследование 2394 гол. мелкого рогатого скота на туберкулез в Суздальском сельсовете Доволенского района пальпебральной пробой, которая, по данным исследований Н.П. Овдиенко и соавт. (2000), оказалась наиболее технологичной и информативной при исследовании овец на туберкулез. На туберкулин реагировало 10 животных (0,4%). Реагирующих животных убили, провели ветеринарно-санитарную экспертизу туш и органов. Изменения, характерные для туберкулеза, обнаружены в печени у двух животных старше 6 лет.

Полученный биоматериал подвергли лабораторному исследованию методом седиментации. В результате бактериологических исследований 10 проб биоматериала были изолированы и идентифицированы 5 культур М. avium.

Проведенные исследования позволяют нам заключить, что причиной реагирования на ППД туберкулин для млекопитающих мелкого рогатого скота может служить их инфицирование М. avium. У таких животных отмечены характерные для туберкулеза изменения во внутренних органах, что согласуется с данными A.C. Донченко (1990), A.C. Донченко и соавт. (1994).

3. ВЫВОДЫ

1. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в хозяйствах Новосибирской области (по данным 2001— 2009 гг.) различается по зонам (индекс неблагополучия в Центрально-Восточной зоне составил - 0,2; в Барабинской - 3,2; в Кулундин-ской - 6) и имеет тенденцию к улучшению, количество неблагополучных пунктов - за 9 лет уменьшилось в 4,25 раза.

2. При исследовании биологического материала крупного рогатого скота в различных зонах Новосибирской области (Центрально-Восточной, Кулундинской и Барабинской), реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, изолировали и идентифицировали атипичные микобактерии в 75,9; 62,1 и 66,4%, М. avium в 18,5; 18,4 и 19,8%, патогенные М. bovis и М. tuberculosis - в 3,7; 14,6 и 13,7% соответственно.

3. Количество реагирующего крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих в личных подсобных хозяйствах значительно ниже, чем в сельхозпредприятиях, расположенных в преде-

лах одних и тех же населенных пунктов: в Ордынском районе (Центрально-Восточная зона) - в 1,8, в Доволенском районе (Бара-бинская зона) - в 5 и Краснозерском районе (Кулундинская зона) - в 2,4 раза.

4. Применение ППД туберкулина для млекопитающих в дозе 5000 ME в объеме 0,2 мл при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах позволяет в 2,4 раза снизить количество неспецифических реакций по сравнению с дозой 10000 ME.

5. Установлено, что в природно-климатических зонах Новосибирской области количество культур М. avium, выделенных от животных сельхозпредприятий, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, практически одинаково и составляет в Центрально-Восточной зоне -18,5%, в Барабинской - 19,8% и Кулундинской -18,4% от числа выделенных культур. В личных подсобных хозяйствах культур М. avium выявляли в 2,1 раза больше по сравнению с животными в сельхозпредприятиях.

6. М. avium, циркулирующие на территории Новосибирской области, генетически неоднородны и распределяются в три генетических кластера, которые по субтипу не коррелируют с географической локализацией.

7. У мелкого рогатого скота личных подсобных хозяйств с помощью пальпебральной туберкулиновой пробы выявлена сенсибилизация М. avium. Установлено, что в 20% случаев М. avium вызывает у мелкого рогатого скота изменения, характерные для туберкулеза.

4. Практические предложения

По материалам диссертации разработаны:

1. Методические рекомендации «Диагностика и профилактика туберкулеза сельскохозяйственных животных в личных подсобных хозяйствах», утвержденные подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, (протокол № 2 от 9 сентября 2009).

2. Методические рекомендации «Взаимосвязь между реагирующими на ППД туберкулин для млекопитающих животных и циркуляцией микобактерий в окружающей среде», утвержденные подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и

Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхоз-академии (протокол № 3 от 19 мая 2010).

5. Список работ опубликованных по теме диссертации.

1. Колосов, А. А. Совершенствование системы эпизоотического мониторинга туберкулеза крупного рогатого скота с использованием информационных технологий / А.А. Колосов, М.В. Качкин, С.Г. Тупота,

A.Л. Дудкии, М.Ф. Агапова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2006. - № 4. - С. 52-57.

2. Тупота, С.Г. Использование белых мышей для повышения изоляции культур микобактерий из биологического материала крупного рогатого скота / С,Г. Тупота, А.А. Белобородова, H.JI. Першикова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2009. - № 6. -С. 65-70.

3. Тупота, С.Г. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах / С.Г. Тупота, С.В. Макаров, H.JI. Першикова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. -2009.9-С. 73-77.

4. Тупота, H.JI. Диагностическая значимость различных методов выявления микобактерий / H.JI. Тупота, С.В. Ионина, Н.А. Донченко, С.Г. Тупота, В.Н. Донченко // Ветеринария. - 2010. - № 3. - С. 56-58.

5. Першикова, Н.Л. Изоляция Mycobacterium arupense на территории Новосибирской области / Н.Л. Першикова, С.В. Ионина, С.Г. Тупота,

B.А. Терновой // Современные проблемы диагностики и профилактики хронических зооантропонозных инфекций: материалы Всерос. науч.-практ. конф. - Омск, 2009. - С. 150-153.

6. Тупота, С.Г. Исследование на туберкулез животных личных подсобных хозяйствах / С.Г. Тупота, С.В. Макаров // Актуальные проблемы сельского хозяйства горных территорий: материалы Н-й Междунар. науч.-практ. конф. - Горно-Алтайск, 2009. - С, 159-166.

7. Тупота, Н.Л. Генетическое типирование Mycobacterium avium I Н.Л. Тупота, С.Г. Тупота // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: материалы II Сибирского ветеринарного конгресса (февраль, 2010). - Новосибирск, 2010.-С. 374-375.

Подписано в печать 06.10.2010 г. Формат 60*84 7|6. Объем 1 усл. п. л. Заказ № 112 Тираж 100 экз.

Отпечатано в ИИЦ ГНУ СибНСХБ Россельхозакадемии 630501, Новосибирская обл., пос. Краснообск

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Тупота, Сергей Григорьевич

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Эпизоотология туберкулеза.

1.1.1 Характеристика микобактерий.

1.2 Диагностика туберкулеза сельскохозяйственных животных.

1.2.1 Клинико-эпизоотологическое обследование.

1.2.2 Аллергическая диагностика.

1.2.3 Патологоанатомический метод.

1.2.4 Бактериологическое и биологическое исследование.

1.2.5 Молекулярно-генетическое исследование.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Комплексная сравнительная оценка эпизоотической ситуации туберкулеза животных и методов его диагностики в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах"

Актуальность темы. Туберкулез остается одной из главных инфекционных проблем медицины и ветеринарии в мире (В.М. Авилов, 1994). Болезнь регистрируется практически во всех странах мира (А.С. Донченко, 2004; А.С. Жумаш и соавт., 2005, А.С. Жумаш 2007; H.L. David , 1978; RJ. Chiodini, 1989; H.L. Rieder, 1989; D.D. Anh, 2000; M.D. Iseman, 2000; N. Rastogi, 2001; P.J. Bifani, 2002; A.C. Lemos, 2004; R.M. Warren, 2004; L. Cobos-Marín, 2005; M.S. Zanini, 2005; A.L. Michel, 2007; B. Müller, 2008; O. Aurtenetxe, 2008; N. Sahraoui, 2009).

Однако в последние годы успешная борьба с туберкулезом крупного рогатого скота привела к резкому снижению заболеваемости и числа неблагополучных пунктов (Н.А. Донченко, 2008).

На сегодняшний день в РФ выделяют три основных категории производителей сельскохозяйственной продукции: сельхозпредприятия (СП) -крупные хозяйства различных организационно-правовых форм; крестьянско-фермерские хозяйства (КФХ) - как правило, мелкие сельхоз товаропроизводители, осуществляющие свою деятельность за счет производства и реализации сельскохозяйственной продукции и личные подсобные хозяйства (ЛПХ) или хозяйства населения, производимая продукция которых в основном потребляется самими производителями, реализуются лишь излишки (Ю.А. Юрченко и соавт. 2007).

В последние годы в России и государствах СНГ увеличилась заболеваемость людей туберкулезом, резко сократилось поголовье животных.в общественном секторе и возросло поголовье крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах. Поэтому в настоящее время остро стоит вопрос диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах. При этом владельцы не всегда предоставляют животных для проведения профилактических и противоэпизоотических мероприятий, в том числе туберкулинизации (В.В. Селиверстов и соавт., 2000; А.Х. Найманов, 2002; А.С. Жумаш и соавт., 2005; Н.П. Помыканов, 2005; А.С. Жумаш, 2007).

По данным официальной статистики, личными подсобными хозяйствами в России занимается 16 млн. семей, в них производят 56% мяса, 51,8% молока и 25,2% яиц от общего объема этих видов сельскохозяйственной продукции (A.C. Донченко и соавт., 2006).

Несмотря на обилие научной литературы по туберкулезу, как зоонозному заболеванию, имеются лишь единичные публикации, посвященные вопросам эпизоотологии этой инфекции в личных подсобных хозяйствах, а также незначительное количество рекомендаций и нормативных документов (A.C. Жумаш и соавт, 2005; Н.П. Помыканов, 2005).

Известно, что диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в общественном секторе имеет свою специфику. Главной ее особенностью является тот факт, что в общественном секторе диагноз на туберкулез ставится по группе животных, т.е. по стаду (Н.П. Помыканов, 2005.)

Это усугубляет эпидемическую ситуацию и в целом имеет важную социальную значимость болезни, так как возбудитель туберкулеза может инфицировать обслуживающий персонал и вызывать заболевание широкого круга таких людей, а в дальнейшем, наоборот, животные могут заразиться от больных туберкулезом людей (Ю.Ю. Данко, 2004; Е. Ю. Поливодина, 2005; Г.П. Протодьяконова, 2005; J.J. Ellner, 1991; Е. Bollo, 2000; RJ. Wallace, 1994; M.D. Iseman, 1995; J.M. Grange , 2001; D. Van Soolingen, 2001; D.N. Wedlock, 2002; F. Biet, 2005; N.P. Shah, 2006).

Следует заметить, что для личных подсобных хозяйств характерны бесконтрольные перемещения-- животных, тесный и постоянный контакт владельцев с животными, бесконтрольные перевозки' кормов и животноводческой продукции, торговля продуктами животноводства (особенно мясом и молоком), и все эти указанные факторы усложняют проведение комплекса профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе (A.C. Жумаш и соавт., 2005).

Другой, немаловажной особенностью, затрудняющей диагностику туберкулеза в личных подсобных хозяйствах, является совместное содержание и тесный контакт разных видов животных с крупным и мелким рогатым скотом и птицей, собаками и кошками, которые могут, в свою очередь, заразить крупный рогатый скот или сенсибилизировать его организм атипичными микобактериями.

В связи с указанными особенностями, в последние годы увеличивается количество жалоб владельцев животных на необоснованный убой реагирующих животных, заводятся судебные дела между владельцами животных и ветеринарными специалистами (A.C. Жумаш, 2005, 2007; Н.П. Помыканов, 2005).

При этом в директивных документах по диагностике туберкулеза недостаточно четко прописана система диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах, особенно контроля таких хозяйств с неспецифическим фоном сенсибилизации животных. Поэтому, в практических условиях, диагностические мероприятия по профилактике и оздоровлению от туберкулеза в личных подворьях граждан проводятся, как и в общественном секторе (Н.П. Помыканов, 2005).

Меняющиеся условия производственной сферы в животноводстве, нарушение экологического и экономического баланса, изменение условий жизни и быта людей — все это порождает новые виды и формы взаимодействия болезней человека и животных, в том числе птиц и требует новых подходов к изучению этих проблем.

Приведенные выше проблемы приводят к убеждению, что для раскрытия полной эпизоотической ситуации по туберкулезу необходимо углубленное и всестороннее изучение эпизоотической ситуации по туберкулезу не только в крупных сельхозпредприятиях, но и в личных подсобных хозяйствах, что позволит наиболее полно раскрыть вопросы эпизоотологии и эпидемиологии туберкулеза, а также факторов, способствующих распространению этой болезни, провести точный и быстрый диагноз и организовать конкретные профилактические противотуберкулезные мероприятия.

Цель исследования - осуществить комплексную сравнительную оценку эпизоотической ситуации по туберкулезу животных и методов его диагностики в сельхозпредприятиях и личных подсобных хозяйствах.

С учетом цели, сформулированы следующие задачи:

1. Осуществить сравнительную комплексную диагностику туберкулеза крупного рогатого скота в общественных и личных подсобных хозяйствах с использованием эпизоотологического, аллергического, клинического, патологоанатомического, бактериологического и молекулярно-генетического методов и оптимизировать ее схему.

2. Провести генотипирование культур М. avium, выделенных от животных, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих.

3. Провести диагностику туберкулеза у мелкого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах.

Научная новизна. Установлено, что количество реагирующего крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих значительно ниже в личных подсобных хозяйствах в сравнении с таковыми животными в сельхозпредприятиях, что можно объяснить низкой возможностью реализации горизонтального и вертикального путей распространения микобактерий туберкулеза в данных хозяйствах.

Подтверждено, что снижение дозы ППД туберкулина для млекопитающих 5000 ME при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах позволяет в 2,4 раза снизить количество неспецифических реакций, по сравнению с дозой 10 000 МЕ.

Установлен широкий ареал распространения М. avium на территории Новосибирской области.

Изучено генетическое разнообразие М. avium, циркулирующих на территории Новосибирской области и получены данные по нуклеотидным последовательностям mig-гена М. avium и спейсерной последовательности 16S-23 S rRNA Mycobacterium spp., свидетельствующие об их эпизоотическом и эпидемическом потенциале.

Определена целесообразность применения пальпебральной туберкулиновой пробы для диагностики туберкулеза у мелкого рогатого скота в личных подсобных хозяйствах.

Данные о нуклеотидных последовательностях М. avium subsp. paratuberculosis str. К 10 использованы для разработки олигонуклеотидных праймеров и подбора режима амплификации, (подана заявка на патент «Олигонуклеотидные праймеры и способ выделения ДНК Mycobacterium paratuberculosis - возбудителя паратуберкулёза крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)», с приоритетом заявки * №2010123200 от 9.06.2010).

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований раскрывают особенности эпизоотического процесса туберкулеза в личных подсобных хозяйствах и позволяют повысить эффективность профилактических противотуберкулезных мероприятий. Внедрение результатов исследований в практику позволит в значительной степени повысить эффективность противотуберкулезных мероприятий в личных подсобных хозяйствах.

Апробация работы. Результаты работы опубликованы в материалах науч.-практ. конф на II Международной науч.-практ. конф. молодых ученых (20 - 21 апреля 2006., пос. Краснообск), Всероссийской науч.-практ. конф. (Омск, 2009) «Актуальные проблемы сельского хозяйства горных территорий», II Международной науч.-практ. конф. (3 - 6 июня 2009., г. Горно-Алтайск), II Сибирского ветеринарногожонгресса (февраль 2010, — Новосибирск).

По материалам диссертационной: работы; опубликовано 7 печатных, работ, в том числе 4 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации; Работа изложена на 145 страницах и включает разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы и практические предложения, список литературы, включающий 249 источников, из них 79 - на иностранном

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Тупота, Сергей Григорьевич

4. ВЫВОДЫ

1. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в хозяйствах Новосибирской области (по данным 2001-2009 гг.) различается по зонам (индекс неблагополучия в Центрально-Восточной зоне составил - 0,2; в Барабинской - 3,2; в Кулундинской - 6) и имеет тенденцию к улучшению, количество неблагополучных пунктов - за 9 лет уменьшилось в 4,25 раза.

2. При исследовании биологического материала крупного рогатого скота в различных зонах Новосибирской области (Центрально-Восточной, Кулундинской и Барабинской), реагирующего на ППД туберкулин для млекопитающих, изолировали и идентифицировали атипичные микобактерии в 75,9; 62,1 и 66,4%, М. avium в 18,5; 18,4 и 19,8%, патогенные М. bovis и М. tuberculosis - в 3,7; 14,6 и 13,7% соответственно

3. Количество реагирующего крупного рогатого скота на ППД туберкулин для млекопитающих в личных подсобных хозяйствах значительно ниже, чем в сельхозпредприятиях, расположенных в пределах одних и тех же населенных пунктов: в Ордынском районе (Центрально-Восточная зона) - в 1,8; в Доволенском районе (Барабинская зона) - в 5 и Краснозерском районе (Кулундинская зона) - в 2,4 раза.

4. Применение ППД туберкулина для млекопитающих в дозе 5000 ME в объеме 0,2 мл при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах позволяет в 2,4 раза снизить количество неспецифических реакций по сравнению с дозой 10000 ME.

5. Установлено,1 что в. природно-климатических зонах Новосибирской; области количество культур М. avium, выделенных от животных сельхозпредприятий, реагирующих на ППД туберкулин для млекопитающих, практически одинаково и составляет в Центрально-Восточной зоне -18,5%, в Барабинской - 19,8% и Кулундинской - 18,4% от числа выделенных культур. В личных подсобных хозяйствах культур М. avium выявляли в 2,1 раза больше по сравнению с животными в сельхозпредприятиях.

6. M. avium, циркулирующие на территории Новосибирской области, генетически неоднородны и распределяются в три генетических кластера, которые по субтипу не коррелируют с географической локализацией.

7. У мелкого рогатого скота личных подсобных хозяйств с помощью пальпебральной туберкулиновой пробы выявлена сенсибилизация М. avium. Установлено, что в 20% случаев М. avium вызывает у мелкого рогатого скота изменения, характерные для туберкулеза.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

По материалам диссертации разработаны:

1. Методические рекомендации «Диагностика и профилактика туберкулеза сельскохозяйственных животных в личных подсобных хозяйствах» (Утв. подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, протокол № 2, от 9 сентября 2009).

2. Методические рекомендации «Взаимосвязь между реагирующими на ППД туберкулин для млекопитающих и циркуляцией микобактерий в окружающей среде.» (Утв. подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, протокол № 3, от 19 мая 2010).

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Тупота, Сергей Григорьевич, Новосибирск

1. Авилов, В.М. Организация государственного ветеринарного надзора в агропромышленном комплексе / В.М. Авилов. М.: 1994. - 32 с.

2. Авилов, В.М. Больше*внимания профилактике и борьбе с туберкулезом животных / В.М. Авилов и др. / Ветеринария. 1997. - №8. - С.З - 9.

3. Александров, H.A. Обоснование и опыт искоренения туберкулеза крупного рогатого скота методом замены / H.A. Александров. Саратов: изд. Саратовского университета, 1975. - 56 с.

4. Алехин, P.M. Руководство по общей эпизоотологии / P.M. Алехин и др.: под ред. И.А. Бакулова А.Д. Третьякова М.: 1979. - 427 с.

5. Аллахвердиев, И.И. Влияние замораживания и оттаивания в природных условиях на жизнеспособность микобактерий туберкулеза птичьего вида // Тр. Дагестанского СХИ. Махачкала, 1968. - Т. 18. - С. 258 - 263.

6. Байгазанов, А.И. Бактериологический надзор при организации противотуберкулезных мероприятий в личных подсобных хозяйствах: автореф. дис.канд. вет. Наук / А.И. Байгазанов. Новосибирск, 1987. - 23с.

7. Баратов, М.О. Эпизоотические особенности туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Дагестана / М.О. Баратов // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. - № 1. - С. 26 - 29.

8. Бараускене; Л.П. Биологические и биохимические свойства патогенных для человека микобактерий как основа комплекса методов ускоренной идентификации и классификации: Автореф. дис. . докт. биологич. наук / Л.П. Бараускене. -М.: 1977. -19 с.

9. Баскаков, Н.И. Профилактика туберкулеза и бруцеллеза животных в Калужской области / Н.И: Баскаков, А.Н. Деринов, В.А. Бархударян // Ветеринария. 2006. - №4. - С.З - 8.

10. Басыбеков, С.Д. Эпизоотологическое значение больного туберкулезом человека для домашних животных в некоторых районах Казахстана / С.Д. Басыбеков // Вопросы взаимосвязи человека и животных: Сб. науч. тр. -Алма-ата. -1969. С. 105 - 111.

11. Басыбеков С.Д Сельскохозяйственные и домашние животные как источники микобактериозов у человека: автореф. дис. . канд. вет. наук / Басыбеков С.Д. Новосибирск, 1982. - 24с.

12. Белобородова, A.A. Повышение эффективности лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: автореф. дис. . канд. вет. наук / A.A. Белобородова // Новосибирск. - 2008. - 20 с.

13. Благодарный, Я.А. Источники туберкулеза и меры профилактики / Я.А. Благодарный. Алма-Ата: Казахстан, 1980. 245 с.

14. Бойко, A.A. Закономерности сохранения в природе микобактерий туберкулеза / A.A. Бойко, А.Я. Самуйленко // Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных: Сб. науч. тр. / ВНИИБТЖ. Омск. - 2000. - С. 59 - 61.

15. Бордюг, В.Ф. Использование компьютерных технологий в эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота / В.Ф. Бордюг и др. / Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2003. -№3. - С. 16 - 17.

16. Бравве Ю.И. Инфекционные болезни и предиктивная геномная медицина / Бравве Ю.И. и др. // Генодиагностика инфекционных болезней: Материалы российской научно-практической конференции. Новосибирск, 2005.-С. 18-21.

17. Бусол, В. А. Применение различных доз туберкулина при исследовании крупного рогатого скота на туберкулез / В. А. Бусол А.Ф. Кочмарский, A.A. Ткаченко // Ветеринария.- 1991. № 11. - С. 21 - 23.

18. Василев, В.Н. Микобактериозы и микозы легких / В.Н. Василев. -София, Медицина и физкультура, 1971. С. 168.

19. Васильева, С.Н. Оценка вирулентности микобактерий по объему поражения в легких в эксперименте на мышах / C.B. Васильева и др. // Туберкулез сегодня: материалы VII Российского съезда фтизиатров. «Бином», 2003.- С. 82.

20. Васильченко, Г.А. О возможности внутриутробного заражения при туберкулезе крупного рогатого скота / Г.А. Васильченко // Эпизоотология и иммунопрофилактика болезней сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1983. - С. 28 - 30.

21. Васильченко, Г.А. Оздоровление неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота пунктов в регионе Дальнего Востока / Г.А. Васильченко и др. // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки1. -2003. №3. - G.20 - 23.

22. Вейсфейлер, Ю.К. Биология и изменчивость микобактерий туберкулеза и атипичные микобактерий / Ю.К. Вейсфейлер. Будапешт, Академия наук Венгрии. - 1975- С. 15-19.

23. Галатова, JI.B. Видовой состав патогенных и L-форм микобактерий, выделенных с объектов внешней среды Приуралья / JI.B. Галатова,

24. В.П. Дидковский, В.Г. Ощепков // Проблемы сельского хозяйства Сибири: сб. науч. раб. аспирантов и молодых ученых ОмГаУ. Омск. -1996. - Вып.2. - С. 44 - 47.

25. Галатова, JI.B. Изоляция L-форм патогенных и атипичных микобактерий из молока коров, реагирующих на туберкулин / JI.B. Галатова и др. // Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных: Сб. науч. тр. ВНИИБТЖ. Омск, 2000. - С. 77 - 80.

26. Данко, Ю.Ю. Взаимосвязь туберкулеза животных и человека / Ю.Ю. Данко // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: СПбГАВМ, СПб. 2004.- № 136. — С.38 - 40.

27. Джупина, С.И. Методы эпизоотического исследования и теория эпизоотического процесса / С.И. Джупина. Новосибирск, Наука, 1991. - 142 с.

28. Донченко, A.C. Туберкулез мелкого рогатого скота: метод, рекомендации / A.C. Донченко; Гос. науч. учреждение Ин-т эксперимент, ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1990. - 60 с.

29. Донченко, A.C. Туберкулез крупного рогатого скота, верблюдов, яков, овец и пантовых оленей / A.C. Донченко, В.Н. Донченко; Рос. акад. с.-х. наук, Сиб. отд-ние, Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дал. Востока.- Новосибирск: СО РАСХН, 1994. 354 с.

30. Донченко, A.C. Система контроля благополучных стад крупного рогатого скота по туберкулезу с неспецифическим фоном сенсибилизации // A.C. Донченко, Ю.И. Смолянинов, H.A. Донченко // материалы междунар. конф. Барнаул, 1995. - С. 106 - 107.

31. Донченко, A.C. Стратегия и тактика оптимизации контроля эпизоотического процесса туберкулеза / A.C. Донченко и др.. // Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных: сб. науч. тр. / Омск: ВНИИБТЖ, 2000: С.15-28.

32. Донченко, A.C. Основные принципы эпизоотического мониторинга при туберкулезе, бруцеллезе и лейкозе крупного рогатого скота / A.C. Донченко и др. // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. -2003. -№3. С.27 - 31.

33. Донченко А.С. Система ведения крестьянских (фермерских) и личных подсобных хозяйств Сибири: метод, рекомендации / А.С. Донченко и др.; Гос.науч.учреждение Ин-т эксперимент ветеринарии Сибири и Дальнего Востока [и др.]. Новосибирск, 2006. - 160 с.

34. Донченко, Н.А. Усовершенствование средств и методов диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: дис. . докт. вет. наук. -Новосибирск, 2008.- 303с.

35. Драбкина, P.O. Микробиология туберкулеза / Р.О.Драбкина. М.: Медицина, 1963.- 255 с.

36. Дубилей, С.А. Молекулярно-генетические методы идентификации лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis / С.А. Дубилей, А.Н. Игнатова, И.Г. Шемякин // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2005. - №12. - С. 3-7.

37. Дяченко, Г. Проблема д1агностики туберкульозу сшьскогосиодарсь-ких тварин у сучастних умовах / Г. Дяченко, Н. Кравченко, В. Романенко // Ветеринарна медицина Укра'ши. 2000. - №1. - С. 5-7.

38. Жумаш, А.С. Пути оздоровления хозяйств от туберкулеза / А.С. Жумаш, К.А. Тургенбаев. Алматы, 2005. - 226 с.

39. Жумаш, А.С. Экологические проблемы и туберкулез животных / А.С. Жумаш, Р.Г. Абдрахманов // Совершенствование средств и способовборьбы с инфекционными и инвазионными болезнями сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. Алматы, 2007. - С. 184 - 195.

40. Завгородний, А.И. Виды микобактерий, распространенные в хозяйствах Украины и их эпизоотическое значение: дис. д-ра вет наук: 16.00.03./ Завгородний А. И., Харьков, 1997. 298 с.

41. Звозчик, В.Г. Изучение теплоустойчивости микобактерий при вакуум-пастеризации молока : автореф. дис. . канд. вет. наук16.00.03/ В.Г. Звозчик. — Харьков, 1967.- 19с.

42. Зыков, М. П. Потенциально патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов / М. П. Зыков, Т. Б. Ильина. М.: Медицина, 1978.-176 е.

43. Идрисов, Г.З. Дифференциальная диагностика туберкулеза / Г.З. Идрисов и др.»// Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. -№2.-С. 18-20.

44. Кадочкин, A.M. Дифференциация и идентификация микобактерий / A.M. Кадочкин // Ветеринария. 1984. - №¡9. - С. 62-63.

45. Кассич, Ю.Я. Изучение иммуногенных свойств атипичных микобактерий, выделенных от крупного рогатого скота специализированных ферм / Ю.Я. Кассич, В.А. Кочмарский, Г.А. Квасников // Ветеринария. Киев. -1978.-№47.-С. 5-13.

46. Кассич, Ю.Я. Туберкулез животных и меры борьбы с ним / Ю.Я. Кассич, А.Т. Борзяк, А.Ф. Кочмарский. Киев: Урожай, 1990. - 304 с.

47. Кассич, Ю.Я. Достижение науки и практики в изучении туберкулеза животных / Ю.Я. Кассич, А.И. Завгородний, В.Ю.Кассич // Ветеринария. — 1998. №12. - С.9 -11.

48. Каграманов, А.И. Легочной микобактериоз / А.И. Каграманов // Руководство по микробиологической клинике и эпидемиологии инфекционных болезней. Т. IV. М.: Медицина, 1964. - С. 611 - 614.

49. Каримова, Л.М: Действие изониазида на рост и ультраструктуру клеток атипичных микобактерий / Л:М. Каримова, Б.И. Коган // Туберкулез сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. Омск. - 1989. - С.58 — 71.

50. Квасников, Е.И. Нуклеиновый состав ДНК быстрорастущих микобактерий и родственных организмов / Е.И. Квасников, Л.П. Панченко, O.A. Нестеренко // Микробиология. 1978. - Т. 47. - № 2. - С. 246-249.

51. Качкин, М.В. Комплексная эпизоотическая оценка проявления туберкулиновых реакций у животных на территориальном и популяционномуровне с использованием информационных технологий: автореф. дис. . канд. вет. наук / М.В. Качкин Новосибирск. - 2007.- 22с.

52. Киселев B.C. Выращивание здоровых телят, родившихся от реагирующих на туберкулин коров. / В.С.Киселев // Ветеринария. 1953. - №3. - С,18-20.

53. Кисленко, В. Н. Экологическая валентность Mycobacterium bovis и Mycobacterium avium и ее эпизоотологическая роль: автореф. дис. . д-ра ветеринар, наук / В.Н. Кисленко. Новосибирск, 1998. - 34 с.

54. Кисленко, В.Н. Эколого-географические аспекты туберкулеза крупного рогатого скота / В.Н. Кисленко, С.А. Королев. Новосибирск. - 2001. - 96 с.

55. Кислицина, И.С. Возможность применения стандартной иммуноферментной тест-системы для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / И.С. Кислицина, Е.Ю. Поливодина, Е.В. Сидорин // Ветеринарная патология. 2003. - № 1. - С. 115- 117.

56. Клебанова, A.A. Комбинация методов флотации и метода посева / АА Клебанова, JLE. Скрябина // Проблемы туберкулеза. -1951. № 1. - С.51 - 53.

57. Клименко, М.Т. Результативность биологического и культурального методов исследования при диагностике туберкулеза / Т.М. Клименко, Т.С. Гинсбург, C.B. Сокало // Проблемы туберкулеза. 1987. - С. 70 - 73.

58. Козлов, В.Е. Оценка активности и специфичности коммерческих серий туберкулина (ИНД) для млекопитающих отечественного и зарубежного производства / В.Е. Козлов, Н.К. Букова, А.Х. Найманов // Ветеринарная патология. М.: - 2004. - № 1-2 (9). - С. 82 - 85.

59. Козлов, В.Е. Стандартизация туберкулинов / В.Е. Козлов // Ветеринария. 2004. - № 10. - С. 6 - 8.

60. Козлов, В.Е. Гармонизация методов контроля туберкулиновых препаратов / В.Е. Козлов // Ветеринария. 2007. - № 3. - С. 20 - 22.

61. Козлов, В.Е. Стандартизация аллергенов для дифференциальной диагностики туберкулеза / В.Е. Козлов // Ветеринария. 2007. - № 5. - С. 6 - 8.

62. Колычев, Н.М. Выживаемость микобактерий туберкулеза в объектах внешней среды и методы их обезвреживания: монография / Н.М. Колычев, В.Н. Кисленко, Н.И. Шведова; Ом. гос. аграр. ун-т, Ин-т ветеринар, медицины. Омск: Изд-во ИВМ ОмГАУ, 2004. - 440с.

63. Колычев, Н.М. Индикация и обезвреживание микобактерий туберкулеза во внешней среде: монография / Н.М. Колычев. Омск: Ом.обл.тип., 1992. - 302 с.

64. Колычев, Н.М. Зоопатогенные бактерии и меры борьбы с ними: монография / Н.М. Колычев, В.Г. Ощепков. Омск: Изд-во ОмГАУ, 2001. - 632 с.

65. Коляков, Я.Е. Ветеринарная иммунология / Я.Е. Коляков. М.: Агропромиздат, 1986. -272 с.

66. Конопаткин, А. А. Эпизоотология и инфекционные болезни сельскохозяйственных животных / A.A. Конопаткин, И.А. Бакулов, Я.В. Нуйкин М.: Колос, 1984. - 544 с.

67. Корнева, И.Н. Конструирование ПЦР-тест-систем для обнаружения и идентификации микобактерий туберкулеза у животных / И.Н. Корнева, В.В. Демкин // Ветеринарная патология: 2004:,- № 1. - С. 95 - 96.

68. Краснова, М. А. Применение молекулярно-генетических- методов для определения вида микобактерий MAIS и M.tuberculosis complex / М.А. Краснова и др. //Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. - №11. - С. 29.

69. Кузин, А.И. Опыт ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота / А. И. Кузин // Ветеринария. 1981. - №5. - С. 32 - 34.

70. Кузин, А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза / А.И. Кузин. -М.: Россельхозиздат, 1987. 141 с.

71. Лабораторная диагностика туберкулеза: Метод. Рекомендации / Сост. Б.Я. Хайкин и др. Омск, 1988. - 64 с.

72. Лазовская, А.Л. Генетическое типирование штаммов М. bovis / А.Л. Лазовская, З.Г. Воробьева, К.Н. Слинина, Е.А. Ильина // Ветеринария. — 2004. № 7. - С. 26 - 28.

73. Лысенко, А.П. Распространение микобактерий в благополучных по туберкулезу хозяйствах / А.П. Лысенко, А.Э. Высоцкий, И.И. Румачик // Ветеринария. 2003. - №5. - С. 19 - 21.

74. Макаров, Ю.А. L-формы микобактерий / Ю.А. Макаров // ДальЗНИВИ. Благовещенск, 1997. - 146 с.

75. Мандро, Н.М. Сенсибилизирующие свойства кислотоустойчивых микобактерий / HiM. Мандро В.Н. Донченко, A.C. Донченко // Науч.-техн. бюл. ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. Новосибирск, 1985; - Вып. 30. - С. 34 - 35.

76. Мартма, О.4 В. Парааллергические реакции, на .туберкулин- и их дифференциация / 0:В. Мартма; К.К. Тяхнас // Ветеринария.- 1987. № 4. -С.35-38.

77. Маянский, H.A. Микобактерии: туберкулез и микобактериозы / H.A. Маянский. Н. Новгород: НГМА - 2000. - 74 с.

78. Медуницин, Н.В. Повышенная чувствительность замедленного типа / Н.В. Медуницин. -М.: Медицина, 1983. 160 с.

79. Меньшиков, Д.Д. Ультраструктура микобактерий туберкулеза, препаратам чувствительных и устойчивых к антибактериальным /Д.Д.Меньшиков и др.. //Пробл. туберкулеза. 1971. №5. 64-69.

80. Молев, А.И. Эпизоотическое проявление и патоморфогенез туберкулеза крупного рогатого скота / А.И. Молев // Ветеринария сельскохозяйственных животных. -2007. № 2. - С. 9 - 12.

81. Мордовской, Г.Г. Методы оценки ростовых свойств различных питательных сред для выращивания микобактерий туберкулеза / Г.Г. Мордовской // Тр. Московского НИИ туберкулеза. 1988. - № 112. - С.31-35.

82. Найманов, А.Х. Оздоровление неблагополучных по туберкулезу хозяйств со смешенной инфекцией / А.Х. Найманов, В.В. Пеньков, В.П. Чуян, A.B. Гладышев // Ветеринария. 2002. - № 2. - С. 9 - 11.

83. Найманов, А.Х. Дифференциация аллергических реакций на туберкулин / А.Х. Найманов // Ветеринария. 2002. - № 3. - С. 10-13.

84. Найманов, А.Х. Определение у- интерферона для диагностики туберкулеза / А.Х. Найманов и др. // Ветеринария. 2004. - № 6. - С. 19 - 22.

85. Найманов, А.Х. Проблемы диагностики, туберкулеза / А.Х. Найманов, Н.П. Овдиенко // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. - № 1. - С. 16 - 18.

86. Найманов, А.Х. Комплексная туберкулиновая проба / А.Х. Найманов, Н.П. Овдиенко, Н. Канев // Животноводство России. 2007. -№8.-С.41 -42.

87. Найманов, А.Х. Сравнительная оценка прижизненных методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / А.Х. Найманов // Ветеринария. 2009. - № 2. - С. 7 - 12.

88. Наставление по диагностике туберкулеза животных: офиц. текст. -М.: 2002 г.-69 с.

89. Новак Д. Д. Туберкулез сельскохозяйственных животных. / Д.Д. Новак // Алма-Ата, Кайнар. 1977. 143с.

90. Нуриитов, P.A. Вопросы экологии микобактерий и родственных им микроорганизмов / P.A. Нуриитов // Ветеринария. 1999. - № 9. - С. 27 - 30.

91. Нуриитов, P.A. Изучение сенсибилизирующих к туберкулину свойств нокардий и родококков / P.A. Нуриитов, М.О. Баратов, И.В. Эфендиева // Ветеринария. 2001. - № 11. - С. 23 - 27.

92. Нуриитов, P.A. Питательные среды для индикации и культивирования микобактерий / P.A. Нуриитов // Ветеринария. 2004. - №3. -С. 24 -26.

93. Овдиенко, Н.П. Пальпебральная туберкулиновая проба при туберкулезе крупного рогатого скота- / Н.П. Овдиенко, P.A. Нуратинов, А.Х.Найманов, П.Э. Кочаров // Ветеринария. 1987. - №5. - С.32 - 33.

94. Овдиенко, Н.П. Аллергическая диагностика туберкулеза овец / Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов, O.A. Энгишев //Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных: сб. науч. тр. / ВНИИБТЖ. Омск. - 2000. -С. 47-57.

95. Овдиенко, Н.П. Методические основы оценки эпизоотической ситуации по туберкулезу животных / Н.П. Овдиенко, И.В. Соколова // Ветеринарная патология. 2004. - №1/2. -С.43-44.

96. Овдиенко, Н.П. Бактериологическая диагностика туберкулеза животных // Н.П. Овдиенко и др. // Ветеринария. 2006. - №12. - С.З - 5.

97. Околелов, К.В. Спектрофотомерия для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в эксперименте: автореф. дис.канд. вет. наук. / К.В. Околелов. Барнаул, 2003- 19 с.

98. Околелов, В.И. Эпизоотическая ситуация по микобактериозам свиней Омской области / В.И. Околелов, Т.А. Пакусина // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. - №1. -19. - 22 с.

99. Оттен, Т.Ф. Возможности и перспективы бактериологической диагностики микобактериоза / Т.Ф. Оттен, И.В. Мокроусов, О.В. Нарвская // Проблемы туберкулеза и болезней легких: 2004. - №5. - С. 32-35.

100. Оттен, Т.Ф. Бактериологическая диагностика туберкулеза и микобактериозов / Т.Ф. Оттен, Н.М. Макаревич, P.A. Лотоцкая // сб. науч.тр. ЦНИИ туберкулеза. 1987. - Т.45. - С. 82-88.

101. Павлова, И.Б. Выживаемость и размножение М. avium на объектах окружающей среды / И.Б. Павлова, Н.Д. Архипова // Ветеринария. 2006. -№12.-С. 50-52.

102. Падалица, A.M. Факторы неспецифической реактивности крупного рогатого скота к туберкулину, способы их выявления и устранения: Автореф. дис.канд. вет. наук / A.M. Падалица, Новосибирск, 1998 - 19 с.

103. Поливодина, Е.Ю. Некоторые вопросы латентного микробизма микобактерий человеческого вида у животных / Е. Ю. Поливодина // сб. науч. тр., посвященных 70-летию ДальЗНИВИ. Благовещенск, 2005. -40 - 44 с.

104. Помыканов, Н.П. Совершенствование диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в индивидуальных и общественных хозяйствах: автореф. дис. .канд. вет. наук. / Н.П. Помыканов Москва, 2005 - 25 с.

105. Прозоровский, C.B. L- формы микобактерий / С.В.Прозоровский, Л.Н. Кац, Г.Я. Каган. -М.: Медицина, 1981.- С. 166 178.

106. Прокопьева, Н.И. Сезонность проявления аллергических реакций на туберкулин / Н.И. Прокопьева // Ветеринария сельскохозяйственных животных. -2007. 1.-С. 36-37.

107. Прокопьева, Н.И. Молоко как фактор передачи возбудителей микобактериозов / Н.И. Прокопьева // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. - №-2. - С. 21 - 22.

108. Протодьяконова, Г.П. Эпизоотическое значение микобактерий туберкулеза человеческого вида в Якутии / Г.П. Протодьяконова, Н.Г. Павлов //

109. Актуальные вопросы ветеринарной медицины: материалы Сиб. Междунар. конгр.- Новосибирск. 2005. - С. 153.

110. Протодьяконова, Г.П. Микобактерии туберкулеза человеческого вида в Якутии / Г.П. Протодьяконова // Аграрная наука. 2005. - №4. - С.29.

111. Пузанов, В. А. Бактериемия при туберкулезе и других микобактериальных инфекциях / В.А. Пузанов, М.В. Косарева // Проблемы туберкулеза. 1999. - №1. - С.54-59.

112. Романенко, В.Ф. Характеристика адаптированных к организму птицы М. tuberculosis и М. bovis / В.Ф. Романенко и др. // Ветеринария. 2002. — №8. — С.24 - 26.

113. Свиридов A.A. Туберкулез сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ним. / A.A. Свиридов // Новосибирск.- 1951 54 с.

114. Секин, Е.Ю. L-трансформация микобактерий, свойства и способы культивированияL-форм: Дис. . кандидата вет. наук. Омск, 2006. - 126 е.

115. Селиверстов, В.В. Профилактика и борьба с туберкулезом / В.В. Селиверстов и др. // Ветеринария. 2000. - №12. - С.З - 5.

116. Селпцева, Н. Динамша. сшзоотолопчного процесу при мшобак-тepiaльниx шфекщях великоЬ'рогатоГ худоби'в господарствах Причорномор'я / П. Селпцева та íh.,// Вет. Мед. Укра1ни. 2006. - №12. -12-14с.

117. Сидоров, М.А. Определитель зоопагогенных микроорганизмов / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов. М.: Колос, 1995. - с. 144 - 157.

118. Сидорчук, A.A. Общая эпизоотология / A.A. Сидорчук, Е.С. Воронин, A.A. Глушков // М.: КолосС, 2004. 176 с.

119. Смолянинов Ю.И. Аллергическая реактивность крупного рогатого скота на различные дозы ППД-туберкулина для млекопитающих /

120. Смолянинов Ю.И., Донченко A.C., Падалица A.M.// Материалы науч. -практ. конф. /ИркутскаяНИВС-Новосибирск 1997 107-108.

121. Тимаков, В.Д. Биология L- форм бактерий / В.Д. Тимаков, Г.Я. Каган // М.: Медицина, 1961. 232 с.

122. Туберкулез мелкого рогатого скота: Метод, рекомендации СО ВАСХНИЛ: Сост. A.C. Донченко. Новосибирск. - 1990. - 60 с.

123. Туткышбай, И.А. Перспективы использования разных туберкулинов для совершенствования аллергической диагностики туберкулеза животных / И.А. Туткышбай // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. Алматы, 2005. - №6. -53-54 с.

124. Удальцов Е.В. Историко-эволюционные аспекты оптимизации контроля эпизоотического процесса-туберкулеза: дис. . кандидата вет. наук. — Новосибирск, 2001. 154 с.

125. Урбан, В.П. Туберкулез как антропозооноз / В.П. Урбан, М.М. Широбокова, Ю.Ю. Данко // Соврем, пробл. профилактики зооноз. болезней и пути их решения.- Минск, 1987.- С.74-75.

126. Усович, Т.А. Применение математической статистики при обработке экспериментальных данных в ветеринарии. / Т.А. Усович, П.Т. Лебедев // Омск, 1970. -44'с.

127. Федосеев, B.C. L-трансформация микобактерий / B.C. Федосеев и др. // Ветеринария. 1985. - №12. -30-32 с.

128. Фещенко, Ю. И. Современная химиотерапия туберкулеза легких / Ю.И, Фещенко /АШкування та д1агностика.~ 1996.- № 2.- С. 14 -24.

129. Филиппов, Н.В. Неспецифические реакции при аллергическом исследовании на туберкулез крупного рогатого скота / Н.В. Филиппов, М.И. Искандаров, А.П. Войнов // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2007. - № 2. - С. 17 - 18.

130. Шахбанов, A.A. Ульраструктура туберкулезных микобактерий / A.A. Шахбанов, В.М. Кушнарев // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 1972.-№ 10.- С. 17-19.

131. Шаров, А.Н. Эффективность методов прижизненной диагностики туберкулеза / А.Н. Шаров, Л.А. Ярошенко, И.П. Суханов // Ветеринария. -2000. №2. — С. 15 - 18.

132. Шаров, А.Н. ПЦР при диагностике туберкулеза / А.Н. Шаров и др. // Ветеринария. 2000. - №10. - С.19 - 22.

133. Шаров, А.Н. Проблемы ПЦР-диагностики туберкулеза / А.Н. Шаров // Ветеринарный консультант. 2003. - №21-22. - С. 14-15.

134. Шимолина, Н.О. Особенности дифференциальной диагностики туберкулиновых реакций в хозяйствах Красноярского края / Н.О. Шимолина // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: материалы Сиб. Междунар. конгр.-Новосибирск.-2005. -С. 170-172.

135. Шишков, В.П. Туберкулез сельскохозяйственных животных / В.П. Шишков, В.П. Урбан, М.: Агропромиздат. 1991. - 255 с.

136. Шкиль, H.A. Эпизоотический процесс туберкулеза крупного рогатого скота и оптимизация системы его контороля: дис. дис. . докт. вет. наук. Новосибирск, 1995. - 365 с.

137. Шкиль, H.A. Особенности эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота в Новосибирской области / H.A. Шкиль, В.Н. Кисленко, В.В. Мартынова // Актуал. вопр. Ветеринарии: сб.науч.тр. -Новосибирск, 1997.-С.55-57.

138. Шуляк, Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак / Б.Ф. Шуляк, М.: 2003, Т.1. - с.201.

139. Черноусова Л.Н. Роль ПЦР-анализа в комплексных бактериологических анализах во фтизиатрии / Л.Н. Черноусова, Е.Е. Ларионова, Э.В. Севастьянова и др. // Проблемы туберкулеза 2001. - № 3. -58 - 60 с.

140. Юрченко Ю.А. Новосибирской области 70 лет: юбилейный статистический сборник / Ю.А. Юрченко и др. Новосибирск, 2007. 448 с.

141. Adekambi, T. Description of Mycobacterium conceptionense sp. Nov., a Mycobacterium fortuitum Group Organism Isolated from a Posttraumatic Osteitis Inflammation / T. Adekambi et al. / J. Glin. Microbiol. 2006. - Vol. 44. -P. 1268-1273.

142. Anh, D.D. Mycobacterium tuberculosis Beijing genotype emerging in Vietnam / D.D. Anh, M.W. Borgdorff, L.N. Van // Emerg. Infect. Dis. 2000. - V. 6. -P. 302-305.

143. Aranaz, A. A. Assessment of diagnostic tools for eradication of bovine tuberculosis in cattle co-infected with Mycobacterium bovis and M. avium subsp. paratuberculosis / A. Aranaz et al.// Vet Res. 2006. - V.37 - №4. - P. 593-606.

144. Aurtenetxe, O. Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay for antibodies against Mycobacterium bovis in European wild boar/ O. Aurtenetxe, M. Banal, J. Vicente // BMC Vet Res. 2008. - V. 1 - №4. -P.43.

145. Beggs, M. Specific Identification of Mycobacterium avium Complex Isolates by a Variety of Molecular Technigues / M. Beggs, R. Stevanova, K.D. Eisenach // J. Clin. Microbiol. 2000. - V. 38 - № 2. - P.508 - 512.

146. Beltan, E. Secretion of cytokines by human macrophages upon infection by pathogenic and non-pathogenic mycobacteria / E. Beltan, L. Horgen, N.Rastogi // Microb. Pathog. 2000. -V. 28. P. 313-318.

147. Bergey, D: Manual of Determinative Bacteriology / D. Bergey / 8 ed. -Baltimore: Williams and Wilkins Co.-1980. - 1246 P.

148. Biet, F. Zoonotic aspects of Mycobacterium bovis and Mycobacterium avium-intracellulare complex (MAC)?/ F. Biet etal.// Vet Res. 2005. - V. 36. -P. 411-436.

149. Bifani, P.J. Global dissemination of the Mycobacterium tuberculosis W-Beijing family strains / P J. Bifani et al.// Trends Microbiol. 2002. - V. 10. - P. 45-52.

150. Bollo, E. Detection of Mycobacterium tuberculosis complex in lymphnodes of wild boar (Sus scrofa) by a target-amplified test system / E. Bollo et al. // J. Vet. Med B Infect Dis Vet Public Healt. 2000. - V.47 - №5. - P.337-342.

151. Chamoiseau, G. Etiology of farcy in African bovines: nomenclature of the causal organism Mycobacterium farcinogenes and Mycobacterium senegaiense comb.nov. / G. Chamoiseau // Int.J.Syst. Bacteriol. 1979. - V. 29. - №4. -P.407-410.

152. Chiodini, RJ. Crohn's disease and the mycobacterioses: a review and comparison of two disease entities / RJ. Chiodini // Clin. Microbiol. Rev. 1989. -V.2. -P.90-117.

153. Cobos-Marín, L. Spoligotype analysis of Mycobacterium bovis isolates from Northern México / L. Cobos-Marín et al. // Can J Microbiol. 2005. - V.51. -№11.-P.996- 1000.

154. Collins, C.H. Laboratory-acguired tuberculosis / C.H. Collins // Tubercule. -1982.-V.63. P. 151 -155.

155. Cook, V.J. Conventional methods versus 16S ribosomal DNA sequencing foridentifícation of nontuberculosous Mycobacteria: cost analysis / V.J. Cook et al. // J. Clin. Microbiol. 2003. - V.41. -P.1010-1015.

156. Corner, L. A. Post mortem diagnosis of Mycobacterium bovis infection in cattle / L. A. Corner // Vet Microbiol. 1999. - V. 40. - №(1-2). - P. 53-63.

157. Cloud, J.L. Mycobacterium arupense sp. nov., a non-chromogenic bacterium, isolated from clinical specimens / J.L. Cloud et al.// Int. J. Syst. Evol. Microbiol. -2006. Vol.56. - P.! 1413 - 1418.

158. Cross, T. Taxonovy and classification of the actinomycetes / T. Cross, M. Goodfellow. // Actinomicetales: charfcteristics and practical importance. London etc.: Acad, press, 1976. P. 337- 371.

159. David, H.L. Numerical taxonomy analysis of Mycobacterium africanum / H.L. David et al. // Int. J. Syst. Bacteriol. 1978. - V. 28. - P. 467-4721

160. Dellange, D. laboratore des mycobacteries et des mycoplasmes /

161. D. Dellange // Arch. Inst. Pasteur Tunis. 1994.-V. 71. - № 1-2.-P. 165-173.

162. Ellner, J.J. Mycobacterium avium infection and AIDS: a therapeutic dilemma in rapid evolution / J.J. Ellner, M.J, Goldberger, D.M. Parenti // J. Infect. Dis- 1991. -V. 163. P. 1326-1335.

163. Etiennel, G. The cell envelope structure and properties of Mycobacterium smegmatis mc2155: is there a clue for the unique transformability of the strain? / G. Etiennel, F. Lavall, Ch. Villeneuvel // Microbiology. 2005. - V. 151. -P. 2075-2086.

164. Felsenstein, J. Confidence limits on phylogenies: an approach using the bootstrap / J.Felsenstein // Evolution.- 1985. Vol. 39. - P. 787-791.

165. Florido, M. Granuloma necrosis during Mycobacterium avium infection does not require tumor necrosis factor / M. Florido, R. Appelberg // Infect Immun. -2004. V.72. - №10. - P.6139-6141.

166. Frothingham, R. Molecular phylogeny of the Mycobacterium avium complex demonstrates clinically meaningful divisions / R. Frothingham, K.H. Wilson // J Infect Dis. 1994. - Vol. 169. - №2. - P. 305 - 312.

167. Gamier, T. The complet genome sequnce of Mycobacterium bovis / T. Gamier et al. // PNAS. 2003. - V.100. - №13. - P. 7877-7882.

168. Grange, J.M. Mycobacterium bovis infection in human beings / J.M. Grange // Tuberculosis. 2001. - V. 81. - P. 71-77.

169. Green E.P. Sequence and characteristics of IS900, an insertion element identified,nr a human. Crohn's disease isolate of Mycobacterium paratuberculosis /

170. E.P. Green et al. // Nucleic Acids Res. 1989: - Vol. 17. - P: 9063 - 9073.

171. Guerra, H. Mycobacterium ulcerans disease, Peru / H. Guerra et al. // Emerg. Infect.Dis. 2008. - Vol. 14. - №3.- P. 373 - 377.

172. Horan, K.L. Isolation of the genome sequence strain Mycobacterium avium 104 from multiple patients over a 17-year period / K.L. Horan, R. Freeman, K. Weigel // J. Clin. Microbiol. 2006. - Vol. 44. - №3. - P. 783 - 789.

173. Horsburgh, C.R. Jr. Epidemiology of Mycobacterium avium Complex Disease / C.R. Horsburgh // American Journal of Medicine. 1997. - Vol. 102. - №5. -P.11-15.

174. Ingram, C.W. Disseminated infection with rapidly growing mycobacteria / C.W. Ingram et al. // Clin. Infect. Dis. 1993. - Vol. 16. - P. 463 - 471.

175. Iseman, M.D. M. avium complex: an emerging respiratory pathogen / M.D. Iseman// J. Respir. Dis. 1995. - V.16. -P. 950-962.

176. Iseman, M.D. Tuberculosis still the killer in infectious diseases / M.D. Iseman // Int. J. Clin. Pract. - 2000. - V.155. - P. 78.

177. Johanson, W.G. Pulmonary disease due to Mycobacterium kansasii: an analysis of some factors affecting prognosis / W.G. Johanson, Jr. and D.P. Nicholson // Am. Rev. Respir. Dis. 1969. - Vol. 99. - P. 73 - 85.

178. Kim, T.C. Atypical mycobactererial infections: a clinical study of 92 patients / T.C. Kim et al. // South. Med. J. 1981. - Vol. 74. - P. 1304 - 1308.

179. Knippel, A. Dissemination Mycobacterium avium-intracellulare infection in a Persian cat / A. Knippel, U: Hetzel, W. Baumgärtner // J Vet Med B Infect. Dis. Vet. Public Health. 2004. - V.51. - №10. - P.464-466.

180. Koh, W.-J. Nontuberculous mycobacterial pulmonary diseases in immunocompetent patients / W.-J. Koh, O.J. Kwon, K.S. Lee // Korean J. Radiol. -2002. -№ 3. P. 145-157

181. IT. Kumar, S. MEGA2: molecular evolutionary genetics analysis software / S.Kumar etal.//Bioinformatics.-2001.-Vol. 17.-P. 1244-1245.

182. Lemos, A.C. Risk of tuberculosis among household contacts in Salvador, Bahia / A.C. Lemos, E.D. Matos, D.B. Pedral-Sampaio // Braz J Infect Dis.-2004. -V.8. №6. -P: 424-430.

183. Li, L. The complete genome sequence of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis /L. Li et al. // Proc Natl Acad Sei USA. 2005. -Vol. 30.-P. 12344- 12349.

184. Lisle, G.W. Isolation of Mycobacterium bovis and other mycobacterial species from ferrets and stoats / G.W. Lisle et al.// Vet. Microbiol. 2008. - V.132 (3-4).-P. 402-407.

185. Luo, Y. Co-expression of interleukin-2 and green fluorescent protein reporter in mycobacteria: in vivo application for monitoring antimycobacterial immunity / Y. Luo et al. // Mol. Immunol. 2000. - V. 37. - P.527-536.

186. McFadden J.J. Use of DNA probes to distinguish between mycobacterial species: Crohn's disease-isolated mycobacteria are identical to Mycobacterium paratuberculosis/ J.J. McFadden et al. // J. Clin. Microbiol. 1987. - Vol. 25 -P. 796-801.

187. Michel, A.L. Bovine tuberculosis in African buffaloes: observations regarding Mycobacterium bovis shedding into water and exposure to environmental mycobacteria / A.L. Michel et al. // BMC Vet Res. 2007. - V. 27. - №3 - P.23.

188. Müller, B. Molecular characterisation of Mycobacterium bovis isolated from cattle slaughtered at the Bamako abattoir in Mali / B. Müller et al. // BMC Vet Res. 2008. - V.17. - №4. - P.26.

189. O'Reilly, L.M. The epidemiology of Mycobacterium bovis infections in animals and man: a review / L.M. O'Reilly, C. J. Daborn // Tuberc Lung Dis. -1995.-V.l.-P. 1-46.

190. Prammananan, T. Distribution of hsp65 PCR-Restriction Enzyme Analysis Patterns among Mycobacterium avium Complex Isolates in Thailand / T. Prammananan et al. // J. Clin. Microbiol. 2006. - Vol. 44. - P. 3819- 3821.

191. Rastogi, N. The mycobacteria: an introduction to nomenclature and, pathogenesis / N.Rastogi, E.Legrand, C.Sola // Rev. Sei. Tech. Off. Int. Epiz. -2001. -V. 20. №1. -P. 21-54.

192. Rieder, H.L. Tuberculosis in the United States / H.L. Rieder et al.// J. Am. Med. Assoc. 1989. - V. 263. - P. 385-389.

193. Ruf, B. Mycobacteremia in AIDS patients / B. Ruf et al. // Klin. Wochenschr. 1989. - Vol. 67. - P. 717 - 722.

194. Sahraoui, N. Molecular characterization of Mycobacterium bovis strains isolated from cattle slaughtered at two abattoirs in Algeria / N. Sahraoui, B. Müller, D. Guetarni // BMC Vet Res. 2009. - V. 27. - №5. - P.4.

195. Shah, N.P. Occurrence of Overlooked Zoonotic Tuberculosis: Detection of Mycobacterium bovis in Human Cerebrospinal Fluid / N.P. Shah et al.// J. Clin. Microbiol. 2006. - V. 44.- № 4. - P.1352 - 1358.

196. Shimizu, T. Lymphadenitis due to Mycobacterium terrae in an Immunocompetent Patient / T.Shimizu et al. // Dermatology. 1999. - V.198. -P.97-98.

197. Schütt-Gerowitt, H. On the development of Mycobacterial infections / H. Schütt-Gerowitt // Zbl. Bakt. 1995. - Bd. 283. - S.5-13

198. Sechi, L.A. Detection and isolation of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis from intestinal mucosal biopsies of patients with and without Crohn's disease in Sardinia / L.A. Sechi et al. // Am. J. Gastroenterol. 2005. -V. 100.-P. 1529-1536

199. Springer, B. Mycobacterium interiectum, a new species isolated from a patient with chronic lymphadenitis / B. Springer et al.// J. Clin. Microbiol. 1993. -Vol.37. - P. 3083-3091.

200. Thorel, M. F. Isolation of Mycobacterium bovis from baboons, leopards and a sea-leon / M.F. Thorel et al. // Vet Res. 1998. - V.29. - №2. - P. 207 - 212.

201. Tsukamura, M. Epidemiologic studies of lung disease due to mycobacteria other than mycobacterium tuberculosis in Japan / M. Tsukamura et al. // Rev. Infect. Dis. 1981. - Vol. 3. - P. 997 - 1007.

202. Tsukamura, M. Studies of the epidemiology of nontuberculous mycobacteriosis in Japan / M. Tsukamura et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1988. -Vol. 137.-P. 1280-1284.

203. Van Soolingen, D. Molecular epidemiology of tuberculosis and other mycobacterial infections: main methodologies and achievements / D. Van Soolingen // J.Intern Med. 2001. - V. 249. - P. 1-26.

204. Via, L. E. Effects of cytokines on mycobacterial phagosome maturation / L. E. Via et al.// J. Cell Sei. 1998. -V.111. - P. 897-905.

205. Vonmoos, S. Infection pleuropneumonaire a Mycobacterium smegmatis / S. Vonmoos et al.// Schweiz: Med. Wochenschr. 1986. - V. 116. - P. 1852 - 1856.

206. Wallace R.J. Human disease due to Mycobacterium smegmatis / R.J. Wallace et al.// J. Infect Dis. 1988. - Vol. 158. - P. 52 - 59.

207. Wallace, R.J. CCClinical and laboratory features of Mycobacterium porcinum / RJ. Wallace et al.// J. Clin. Microbiol. 2004. - V. 42. - P.5689-5697.

208. Warren, R.M: Patients with active tuberculosis often have different strains in the same sputum specimen / R.M. Warren et al.// Am J; Respir. Crit. Care Med. 2004. - V. 169. - P. 610-614.

209. Wallace, R.J. Mycobacterium avium complex lung disease in woman: now an equal opportunity disease / R.J. Wallace // Chest. 1994. - V. 105. - P. 6-7.

210. Whipple, D.L. Distribution of lesions in cattle infected, with Mycobacterium bovis / D.L. Whipple, C.A. Bolin, G.M. Miller. // J Vet Diagn Invest. 1996. - V.8. - №3. - P. 351-354.

211. Wilson, P. Mycobacterium bovis infection in primates in Dublin Zoo: epidemioligical aspects and implications for management / P. Wilson et al. // Lab Anim. 1984. - V.18. - №4. - P. 383-387.

212. Wolinsky, E. Nontuberculous mycobacteria and associated diseases / E. Wolinsky // Am. Rev. Respir. Dis. 1979. - Vol.l 19. -P. 107 - 159.

213. Zanini, M.S. Molecular typing of Mycobacterium bovis isolates from south-east Brazil by spoligotyping and RFLP / M.S. Zanini, E.C. Moreira, C.E. Salas // J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health. 2005. - V. 52. - №3. -P. 129-133.