Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Состав и свойства фракций гуминовых кислот, различных по молекулярным массам

ВАК РФ 03.00.27, Почвоведение

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ростовщикова, Ирина Николаевна

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Методы фракционирования гуминовых веществ

1.2. Современное состояние исследований состава и свойств молекулярных фракций гуминовых веществ

1.2.1. Весовое содержание различных по размеру фракций ^ д гуминовых кислот

1.2.2. Элементный состав молекулярных фракций гуминовых кислот

1.2.3. Электронные спектры поглощения

1.2.4. Инфракрасные спектры

1.2.5. Влияние молекулярных фракций гуминовых кислот на активность ферментов

1.2.6. Другие характеристики молекулярных фракций гуминовых кислот

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Схема работы

2.3. Выделение препаратов гуминовых кислот

2.4. Выделение различных по молекулярным массам фракций гуминовых кислот

2.5. Методы исследования ^

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Молекулярно-массовое распределение гуминовых кислот

3.2. Характеристика молекулярных фракций гуминовых кислот физическими и химическими методами

3.2.1. Элементный состав

3.2.2. УФ-спектры

3.2.3. Спектры в видимой области

3.2.4. Степень бензоидности

3.2.5. Инфракрасные спектры

3.2.6. Гидрофильно-гидрофобные свойства

3.3. Характеристика молекулярных фракций гуминовых кислот методами ферментативного анализа

3.3.1. Подбор условий ферментативного гидролиза в присутствии ^^ гуминовых кислот

3.3.2. Деструкция гуминовых кислот протеазами

А. Кинетика деструкции гуминовых кислот трипсином

Б. Изменение молекулярно-массового распределения гуминовых кислот после воздействия трипсина

3.3.3. Влияние гуминовых кислот и их фракций на ферментативный ^ j гидролиз белков

A. Зависимость активности трипсина от концентрации гуминовых кислот

Б. Зависимость скорости ферментативного гидролиза азоказеина трипсином от рН в присутствии гуминовых КИСЛОТ

B. Влияние молекулярных фракций гуминовых кислот на активность трипсина

3.3.4. Влияние свойств гуминовых кислот на степень ингибирования ^g ферментативного гидролиза белков

А. Молекулярные массы

Б. Гидрофильно-гидрофобные свойства

Введение Диссертация по биологии, на тему "Состав и свойства фракций гуминовых кислот, различных по молекулярным массам"

Гуминовые вещества являются одним из основных компонентов почв, обусловливающих их генезис и эволюцию. Гуминовые кислоты участвуют в накоплении в почвах необходимых для жизнедеятельности элементов, формировании геохимических потоков минеральных и органических веществ, регулировании условий протекания внутрипочвенных процессов, нейтрализации неблагоприятных факторов среды.

Многообразие функций гуминовых веществ определяет практическую важность разработки теоретических основ гумусообразования. Фундаментальная проблема установления строения, роли и функций гуминовых кислот в биосфере является актуальной. Этим вопросам посвящен ряд монографий, в том числе (Александрова, 1980; Гришина, 1986; Драгунов, 1962; Комиссаров, Логинов, 1970; Кононова, 1963; Орлов, 1990; Тюрин, 1965; Flaig, 1975; Schnitzer, 1972) и множество оригинальных публикаций. Интерес к проблеме установления природы ГК и их генезиса постоянно растет. Однако несмотря на двухсотлетнюю историю изучения, современная наука еще далека до полного понимания природы гуминовых веществ.

Существует две основные гипотезы гумификации - конденсационная гипотеза и гипотеза окислительного кислотообразования, из которых следует, что определяющим критерием в установлении направления развития гуминовых кислот являются их молекулярные массы. Нахождение взаимосвязи молекулярно-массового распределения ГК с их химическим составом и биологическими функциями, в том числе участием в ферментативных процессах, можно рассматривать как шаг на пути решения проблемы гумусообразования.

С развитием науки существенно расширяются представления в области молекулярных параметров гуминовых кислот, их молекулярно-массового распределения. Однако детальное исследование полидисперсности гуминовых кислот осложняется присущей им химической неоднородностью. В настоящее время количественные характеристики молекулярных фракций, полученные в одинаковых условиях, с применением большого числа методов исследования, в полном объеме отсутствуют. Вместе с тем, получение разносторонней информации по индивидуальным фракциям ГК могло бы продвинуть дальнейшее осмысление, обобщение и глубокий анализ накопленного экспериментального материала.

Анализ отдельных фракций представляется более информативным подходом, чем исследование исходного, нефракционированного препарата гуминовых кислот вследствие уменьшения гетерогенности состава. Переход к анализу более однородных по размеру и составу фракций обеспечивает возможность получить более определенные данные относительно природы, строения и свойств гумусовых веществ, чем существуют на сегодняшний день.

Фракционирование гумусовых кислот является важным этапом на пути к пониманию природы и свойств гуминовых веществ, расширяет наши знания об их молекулярных свойствах, позволяет лучше понять их природу и способствует адекватному применению аналитических методов. Среди методов и параметров разделения гуминовых кислот на фракции наиболее удобным для сравнительной оценки полидисперсности представляется метод гель-фильтрации. Однако отсутствие разработки оптимальных режимов гель-фильтрации затрудняет пока успешное использование этого метода, поэтому важной задачей является выбор условий для эффективного разделения гумусовых веществ.

Работа посвящена актуальной проблеме установления природы гуминовых кислот и пути их развития на основе сравнения относительно гомогенных компонентов - различных по молекулярному размеру фракций.

Целью работы является установление особенностей состава и свойств молекулярных фракций гуминовых кислот различного происхождения.

Основные задачи работы:

1. Разделение препаратов ПС из различных источников методом гель-фильтрации по молекулярным массам и накопление отдельных фракций.

2. Установление состава индивидуальных фракций гуминовых кислот: определение молекулярных масс, элементный анализ фракций, получение их спектральных характеристик в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях, оценка гидрофильно-гидрофобных свойств, определение функциональных групп.

3. Выявление роли гуминовых кислот и их фракций в ферментативных процессах разложения органического вещества.

4. Сравнительный анализ характеристик фракций ГК различной молекулярной массы. Выявление общих закономерностей и особенностей состава и свойств молекулярных фракций гуминовых кислот различного происхождения.

Автор искренне благодарит научного руководителя д.б.н., профессора Орлова Д.С. за помощь в разработке направлений исследования, обсуждении результатов, ценные советы и замечания. Автор выражает особую признательность сотруднику Института океанологии им.П.П.Ширшова РАН к.б.н. Корнеевой Г.А. за помощь в постановке экспериментов по ферментативному анализу, сотрудникам факультета почвоведения МГУ им. М.В.Ломоносова к.б.н. Розановой М.С. и к.б.н. Степанову А.А. за поддержку и помощь в работе, к.б.н. Демину В.В. за любезно предоставленные исходные препараты ГК, а также всему коллективу кафедры химии почв.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Гуминовые вещества - группа высокомолекулярных соединений, которые характеризуются очень широким для одного класса диапазоном варьирования молекулярных свойств при сходности происхождения, структуры и состава (Тюрин, 1965; Орлов, 1992; Schnitzer, 1991). Еще в 1955г. Александровой (Александрова, 1955) была показана неоднородность любого препарата гуминовых кислот и возможность его разделения на ряд фракций по определенному критерию.

Гетерогенность гумусовых веществ значительно затрудняет исследование их состава и строения, т.к. при анализе столь сложной смеси исследователь получает усредненные показатели, возможно, далеко не всегда отражающие специфические особенности того или иного компонента смеси. Для лучшего понимания происхождения, природы и свойств гуминовых кислот необходимо иметь более детальное представление об их отдельных составляющих, т.е. необходимо разделение исходного вещества, на более гомогенные фракции, или фракционирование, по какому-либо критерию, связанному с их молекулярным составом.

Гетерогенность гуминовых кислот по молекулярным массам, т.е. их полидисперсность, на сегодняшний день общепризнанна и не вызывает сомнений. Она обусловлена одновременным присутствием в составе ГК молекул различных размеров. Александрова (Александрова, 1955) высказала предположение о том, что гетерогенность гуминовых кислот по молекулярным массам должна быть тесно связана с гетерогенностью их химического состава. Изучению этой проблемы -характеристике свойств отдельных фракций ГК - посвящен ряд публикаций как отечественных, так и зарубежных ученых, и интерес к проблеме постоянно растет.

На начальных этапах использования фракционирования для изучения гумусовых веществ, некоторые авторы видели целью фракционирования выделение неких чистых идентифицируемых компонентов. Хан и Шнитцер (Khan, Schnitzer, 1971), например, пытались разделить фульвокислоты на отдельные элементарные составляющие путем последовательного фракционирования колоночной, тонкослойной и газовой хроматографией, чередовавшихся с различными химическими обработками образцов. Полученные в результате компоненты анализировали методами масс-спектрометрии и ИК-спектроскопии. Авторам действительно удалось идентифицировать отдельные компоненты, однако основная часть исходного образца ФК, подвергшись такому "фракционированию", вероятно, претерпела существенные изменения либо вообще вышла из области наблюдения.

С современных позиций понимания природы гумусовых веществ такой подход к фракционированию - разделение до неких элементарных составляющих -нельзя считать корректным. Внутри любой гуминовой кислоты, выделенной из одного источника, существует непрерывный ряд молекул, характеризующихся столь же непрерывным рядом изменения того или иного признака, поэтому ожидать разделения ГК на чистые однородные компоненты неоправданно. По этой причине, путем фракционирования гуминовых веществ можно добиться уменьшения гетерогенности системы, в той или иной степени, и принципиально невозможно выделить индивидуальные соединения.

Заключение Диссертация по теме "Почвоведение", Ростовщикова, Ирина Николаевна

выводы

1. Гуминовые кислоты из подзолистой глеевой почвы и из бурого угля разделены методом гель-проникающей хроматографии на три фракции с молекулярными массами 74 ООО, 43 ООО, 12 ООО и 53 ООО, 38 ООО, 15 ООО Да, соответственно. Для гуминовых кислот из луговой глеевой почвы, разделенных методом высаливания, установлено присутствие фракций с ММ >124 ООО и 23 ООО Да в черных гуминовых кислотах и преобладание фракции с ММ 7000 Да в бурых гуминовых кислотах.

2. Методами элементного анализа, ИК-, УФ-, видимой спектроскопии и жидкостной хроматографии гидрофобного взаимодействия установлено, что свойства молекулярных фракций из одного источника лежат в диапазоне изменения усредненных характеристик нефракционированных препаратов из разных почв. В то же время выявлено сходство совокупности свойств фракций с близкими молекулярными массами гуминовых кислот из разных источников.

3. На основании элементного состава и спектральных характеристик для молекулярных фракций препаратов из подзолистой почвы и бурого угля впервые установлено, что степень бензоидности ГК увеличивается с уменьшением молекулярной массы и составляет 10-12% для фракций с молекулярной массой >74 ООО Да и свыше 30% для фракций с молекулярной массой 12 000-15 000 Да. По данным элементного анализа и определения функциональных групп степень окисленности фракций ГК при снижении молекулярной массы увеличивается.

Методом жидкостной хроматографии гидрофобного взаимодействия доказана неоднородность гидрофильно-гидрофобных свойств молекулярных фракций ГК. В высокомолекулярных фракциях всех препаратов преобладают более гидрофобные компоненты; причем наиболее гидрофобная фракция характеризуется ММ 125 ООО Да. В то же время низкомолекулярные фракции более гидрофильны; наиболее гидрофильная фракция характеризуется ММ 7000 Да.

Показана возможность и определены условия деструкции гуминовых кислот под действием протеолитических ферментов с образованием низкомолекулярных продуктов. Деструкция гуминовых кислот протеазами протекает в широком диапазоне рН при соотношениях фермент:ГК больших, чем 1:25, и концентрациях ГК выше 0,2-0,3 мг/мл.

В условиях, исключающих деструкцию ГК, обнаружено, что степень ингибирования активности трипсина гуминовыми кислотами определяется молекулярной массой фракции и концентрацией. Основной вклад в ингибирование процесса разложения белка вносит высокомолекулярная фракция; с ростом концентрации ГК ферментативная активность снижается. Впервые установлена прямая корреляция ингибирующей способности гуминовых кислот со степенью их гидрофобности.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основании комплексного исследования совокупности параметров выявлены существенные различия в составе и свойствах различных по молекулярным массам фракций гуминовых кислот. Высокомолекулярная фракция представляет собой слабогумифицированный материал, с высокой долей алифатических фрагментов в составе молекул. В низкомолекулярной фракции, напротив, большая роль принадлежит бензоидным структурам, ядру; они же наиболее окислены. И если, по Д.С.Орлову, процесс гумификации идет в направлении отбора наиболее устойчивых продуктов, то можно предположить, что процесс гумификации идет именно в направлении уменьшения размера молекул, и наиболее зрелые ГК характеризуются относительно невысокими молекулярными массами - порядка 10 000-20 000 Да. Такое заключение согласуется с гипотезой окислительного кислотообразования ЛН.Александровой, предполагающей уменьшение молекулярных масс и постепенное окисление ГК по мере их развития.

Противоречия относительно состава и структуры различных по молекулярным размерам фракций гуминовых кислот, встречающиеся в литературных данных, в большинстве случаев, на наш взгляд, возникают по следующим причинам. Исследователи рассматривают разные диапазоны молекулярных масс, используют разные градации в отнесении фракций к тому или иному размеру. Возможно, в некоторых случаях речь идет о фракциях, представляющих собой ассоциаты мелких молекул, и потому наследующих их свойства. Кроме того, иногда термин "гуминовые кислоты" используют для обозначения гумусовых кислот или гуминовых веществ в целом. Однако с учетом специфики выделения, метода фракционирования, происхождения исследуемого материала по многим вопросам и аспектам прослеживаются единые закономерности, и выводы работы можно, вероятно, обобщить на гуминовые кислоты различного происхождения.

Следует отметить, что кажущееся противоречие сделанного вывода с существующими представлениями о том, что наиболее динамичная, наиболее реакционноспособная часть гумуса - его низкомолекулярная часть заключается в том, что речь идет о более низкомолекулярных соединениях - фульвокислотах, неспецифических соединениях, с ММ <10000 Да, где, возможно, идут совсем другие процессы и существуют свои закономерности.

Показанная в работе связь молекулярных масс со степенью гидрофобности и зарядом подтверждает правильность выбранного пути разделения ГК. Ведь именно гидрофобные и электростатические взаимодействия вещества с матрицей геля считаются основными трудностями при гель-фильтрации: выталкивание отрицательно заряженных молекул и задержка гидрофобных. Как показывают наши результаты, как раз первыми выходят с колонки молекулы с выраженными гидрофобными свойствами, а максимально долго задерживаются на колонке (при обобщении литературных и собственных данных) молекулы, характеризующиеся высоким содержанием карбоксильных групп. Это обстоятельство позволяет предполагать, что артефакты исключены и наблюдаемые характеристики обусловлены не методом разделения, а являются специфической особенностью гетерогенности и/или полидисперсности гуминовых кислот.

В целом, проведенный сравнительный анализ молекулярных фракций показал, что гуминовые кислоты из разных источников могут содержать несколько фракций с различными молекулярными массами и обладающих соответственно резко различными физическими и химическими свойствами и функциями. Поэтому характеристика препаратов гуминовых кислот по их средним показателям, без предварительного разделения на фракции, не отражает реальной роли отдельных компонентов. Более строгие суждения могут быть получены только при анализе свойств относительно гомогенных фракций.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ростовщикова, Ирина Николаевна, Москва

1. Александрова Л.Н. О природе перегноя // Зап.Ленингр.с.-х.Ин-та. 1955. Вып.9. С.88-99.

2. Александрова Л.Н. Современные представления о природе гумусовых веществ почвы и их органо-минеральных производных. // Проблемы почвоведения. М.: Из д. АН СССР. 1962. С.57-71.

3. Александрова Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. Л.: Наука. 1980. 287 с.

4. Александрова Л.Н., Назарова А.В. Гетерогенность гуминовых кислот и ее происхождение. // Проблемы почвоведения. Под ред. Глазовской М.А., Соколова И.А. М.: Наука. 1978. С.48-52.

5. Антонов В.К. Химия протеолиза. М.: Наука. 1991. 504 с.

6. Безуглова О.С. Гумусное состояние черноземно-степных и каштановых почв южной России. Автореф.дис. . д-ра биол.наук. М.:МГУ. 1994. 52 с.

7. Безуглова О.С. Гумусное состояние почв юга России. Ростов н/Д.:СКНЦ ВШ. 2001. 227 с.

8. Водяницкий Ю.Н. Методы расчета ароматичности гумусовых кислот // Почвоведение. 2001. № 3. С. 289-294.

9. Галстян А.Ш. Ферментативная активность почв Армении. Ереван: Айстан. 1974. 275 с.

10. Глебова Г.И. Гиматомелановые кислоты. М., МГУ. 1985. 74 с.

11. Гришина Л.А. Гумусообразование и гумусное состояние почв. М.: МГУ. 1986. 243 с.

12. Гулько А.Е., Хазиев Ф.Х. Фенолоксидазы почв: продуцирование, иммобилизация, активность//Почвоведение. 1992. № 11. С. 55-67.

13. Гуминовые препараты из углей для повышения урожайности сельскохозяйственных культур. Под ред. Л.Н.Екатерининой. М. 1989. 87 с.

14. Детерман Г. Гель-хроматография. М.: Мир. 1970. 252 с.

15. Добровинская Г.Р., Милановский Е.Ю. Характеристика гумусовых веществ почв катен южной тайги (на примере Центрально-лесного заповедника) // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 2000. № 4. С.40-46.

16. Драгунов С.С. Химическая природа гуминовых кислот // Гуминовыеудобрения. Теория и практика их применения. Киев.: Днепропетр. С.-х. Ин-т. 1962. Ч.П. С. 11-17.

17. Емцев В.Т. Закономерности трансформации органических веществ анаэробными бактериями, выделенными из почв различных типов // Микробиологическая деструкция органических остатков в биогеоценозе. М. 1987. С. 37-40.

18. Жидкостная колоночная хроматография. М.: Мир. 1978. 471 с.

19. Заварзина А.Г. Взаимодействие гуминовых кислот с ионами металлов и минеральными компонентами почв. Дис. . канд. биол. наук. М.:МГУ. 2000. 133 с.

20. Завгородняя Ю. А. Сравнительная характеристика гуминовых кислот и грибных меланинов. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М.:МГУ. 2000. 23с.

21. Звягинцев Д.Г. Иммобилизованные ферменты в почвах. В кн.: Микробные метаболиты. М. 1979. С.108-119.

22. Зимон А.Д., Лещенко Н.Ф. Коллоидная химия. М.:Владмо. 1999.320 с.

23. Карпухин А.И. Обоснование применения систематизированной гелевой хроматографии в почвенных исследованиях // Изв. ТСХА. 1984. Вып. 2. С. 6269.

24. Карпухин А.И. Применение гелевой хроматографии для изучения гумусовых веществ почв // Органическое вещество почв и методы его исследования. Л.:Л.с.-х.ин-т. 1990. С.81-85.

25. Карпухин А.И., Кулчаев Э.М. Сравнительное гель-хроматографическое исследование фракций гумусовых кислот//Изв. ТСХА. 1978. Вып. 4. С.94-101.

26. Каспаров С.В., Тихомиров Ф.А. Выбор элюентных систем для гель-фильтрации гумусовых кислот чернозема // Вестн. МГУ. Сер. 17, Почвоведение. 1978. № 4. С. 33-39.

27. Каспаров С.В., Тихомиров Ф.А., Флесс А.Д. Применение метода диск-электрофореза для фракционирования гуминовых кислот // Вестник МГУ. Сер. почвоведение. 1981. № 1. С.23-30.

28. Кауричев И.С., Ноздрунова Е.М., Рытикова М.Л. Качественный состав перегноя дерново-подзолистых почв временного избыточного увлажнения // Изв. ТСХА. 1960. № 5. С. 101-113.

29. Клесов А.А., Березин И.В. Ферментативный катализ. М.: МГУ. 1980. 264 с.

30. Ковалевский Д.В. Исследование структуры гумусовых кислот методами спектроскопии ЯМР 1Н и Автореф.дис. . канд.хим.наук. М.:МГУ. 1998. 26 с.

31. Колесников М.П. Молекулярно-массовое распределение гуминовых кислот по данным гельхроматографии на сефадексах // Почвоведение. 1978. № 4. С. 3241.

32. Комиссаров И.Д., Логинов Л.Ф. Молекулярная структура и реакционная способность гуминовых кислот // Гуминовые вещества в биосфере. М. 1993. С.36-45.

33. Кононова М.М. Органическое вещество почвы. М.: Наука. 1963. 315 с.

34. Кононова М.М., Бельчикова Н.П. К изучению природы гумусовых веществ почвы приемами фракционирования//Почвоведение. 1960. № 11. С. 1-9.

35. Кононова М.М., Титова Н.А. Применение электрофореза на бумаге для фракционирования гумусовых веществ почвы и изучения их комплексных соединений с железом // Почвоведение. 1961. №11. С.81-88.

36. Корнеева Г.А., Отрощенко В.А., Шведова Т.А., Романкевич Е.А К вопросу о локализации и функционировании внеклеточных ферментов // Доклады Академии Наук. 1993. Т. 332. № 5. С.646-649.

37. Корнеева Г.А., Романкевич Е.А. Активность гидролитических ферментов в морской экосистеме // Биогеохимия пограничных зон океана. М.: Наука. 1994. С. 157-178.

38. Корнеева Г.А., Харченко С.В., Романкевич Е.А. Изучение ферментативного гидролиза казеина в морской воде // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1990. № 6. с. 821-826.

39. Кухаренко Т. А. Гуминовые кислоты ископаемых углей // Химия твердого топлива. 1968. № 4. С. 13-25.

40. Ленинджер А. Биохимия. М.: Мир. 1976. 957 с.

41. Милановский Е.Ю. Применение ионного детергента в гель-хроматографии гумусовых кислот почв // Почвоведение 1984. № 8. С. 142-146.

42. Милановский Е.Ю. Амфифильные компоненты гумусовых веществ почв // Почвоведение. 2000. № 6. С.706-715.

43. Милановский Е.Ю., Шеин Е.В., Степанов А.А. Лиофильно-лиофобные свойства органического вещества и структура почвы // Почвоведение. 1993. №6. С. 122-126.

44. Орлов Д. С. Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации. М.: МГУ. 1990. 325 с.

45. Орлов Д.С. Применение инфракрасной спектрометрии в почвенных исследованиях // Методы минералогического и микроморфологического изучения почв. М. 1971. С.49-67.

46. Орлов Д.С. Кинетическая теория гумификации и схема вероятного строения гуминовых кислот // Науч.докл.высш.школы. Биол.науки. 1977. № 9. С. 5-16.

47. Орлов Д.С. Химия почв. М.:МГУ. 1992. 400 с.

48. Орлов Д.С., Барановская В.А., Околелова А.А. Степень бензоидности гуминовых кислот и способ ее определения // ДАН СССР. 1987. Т.293. № 6. С. 1479-1482.

49. Орлов Д.С., Глебова Г.И., Мироненкова Т.И. Фракционирование ГК с помощью метода дробного осаждения // Науч.докл.высш.школы. Биол.науки. 1976. № 10. С.125-130.

50. Орлов Д.С., Гришина Л. А. Практикум по химии гумуса. М.:МГУ. 1981. 272 с.

51. Орлов Д.С., Осипова Н.Н. Инфракрасные спектры почв и почвенных компонентов. М.: МГУ. 1988. 90 с.

52. Орлов Д.С., Пивоварова И.А. О необходимости стандартизации препаратов гуминовых кислот при спектроскопических и других исследованиях // Биол.науки. 1971. № 3. С. 122-126.

53. Орлов Д.С., Пивоварова И.А. Об избирательности поглощения глинистыми миенралами различных фракций гумусовых кислот // Почвоведение. 1974. № 5. С. 59-64.

54. Орлов Д.С., Милановский Е.Ю. Гель-хроматография в почвоведении -возможности и ограничения метода //В кн.: Современные физические и химические методы исследования почв. Под ред. Воронина А.Д. и Орлова Д.С. М.:МГУ. 1987. С.94-118.

55. Остерман JI.A. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М: Наука, 1985. 536 с.

56. Пономарева В.В., Плотникова Т.А. Миграционная и седиментационная способность черных и бурых гуминовых кислот и их соединений с кальцием // Проблемы почвоведения. Под ред. Глазовской М.А., Соколова И.А. М.: Наука.1978. С. 65-72.

57. Применение инфракрасной спектроскопии в почвоведении, мелиорации и сельском хозяйстве. Под ред. Орлова Д.С. Москва-Новочеркасск. 1978. 44с.

58. Радюкина Н.Л., Софьин А.В., Кудрявцева Н.Н., Карпачевский Л.О., Зубкова Т.А., Романов В.И. Современные представления о биохимических процессах в почве //Вестн.Моск.ун-та. Сер. 17, Почвоведение. 2001. № 2. С.13-19.

59. Ростовщикова И.Н. Сравнительная характеристика гуминовых кислот различного происхождения. Квалификационная работа. М.:МГУ. 1996. 80с.

60. Ростовщикова И.Н. Влияние гумусовых кислот на активность трипсина // Тезисы докладов V международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам «Ломоносов-98». Москва, 20-23 апреля 1998 г. М.:МГУ. 1998а. С.57-58.

61. Ростовщикова И.Н. Кинетика ферментативной деструкции гуминовых кислот // Тезисы докладов XVI всероссийской школы-симпозиума молодых ученых по химической кинетике. Клязьма, 1998 г. М.: МГУ. 19986. С.41.

62. Ростовщикова И.Н., Корнеева Г. А., Степанов А.А. Ферментативная деструкция веществ гумусовой природы // Вест. МГУ. Сер. 17. Почвоведение. 1998. № 4. С.22-27.

63. Ростовщикова И.Н., Корнеева Г.А. Роль веществ гумусовой природы в ферментативных процессах деструкции органического вещества // Изв. АН. Сер. биол. 1999. № з. С.359-366.

64. Ростовщикова И.Н. Участие гумусовых кислот в ферментативных процессах деструкции органического вещества // Тезисы докладов докучаевских молодежных чтений «Почвы, Экология, Общество». Санкт-Петербург, 1-4 марта 1999 г. СПб.: СП6ГУ.1999. С.78-79.

65. Ростовщикова И.Н. Сравнение гуминовых кислот на основе кинетики ферментативного гидролиза // Тезисы докладов XVII всероссийского симпозиума молодых ученых по химической кинетике. Клязьма, 1999 г. М.: МГУ. 1999. С. 19.

66. Сидоренко О.Д., Кончиц В.А., Черников В.А., Ванькова А.А. Изменение состава и свойств гуминовых кислот при воздействии автохтонной микрофлоры//Известия ТСХА. 1983, вып.4, с. 92-96.

67. Сильверстейн Р., Басслер Г., Моррил Т. Спектрометрическая идентификация органических соединений. М.:Мир. 1977. 591 с.

68. Скоупс Р. Методы очистки белков. М.: Мир. 1985. 358 с.

69. Степанов А. А. Влияние навозных стоков свинокомплекса на гумусное состояние луговой глеевой почвы и свойства гуминовых веществ. Дис. канд. биол. наук. М.:МГУ. 1995. 101 с.

70. Степанов А.А., Милановский Е.Ю. Гидрофобные свойства органического вещества некоторых почв Убсу-Нурской котловины // Советско-монгольский эксперимент "Убсу-Нур" Пущино. 1989. с. 53-54.

71. Степаненко Л.С., Максимов О.Б. Тонкослойная гель-фильтрация гуминовых кислот//Почвоведение. 1970. № 1. С. 127-133.

72. Терехова В.А., Трофимов С.Я., Семенова Т.А., Дорофеева Е.И. Структурно-функциональные особенности микробиоты в связи с динамикой органического вещества в ненарушенных почвах южной тайги // Почвоведение. 1999. № 4. С. 461-467.

73. Трофимов С .Я. Функционирование почв ненарушенных биогеоценозов южной тайги (на примере ЦЛГБЗ) Автореф. дис. . д-ра биол. наук. М.:МГУ. 1998. 48с.

74. Трубецкой О.А., Кудрявцева Л.Ю., Ширшова Л.Т. Фракционирование гумусовых веществ почв электрофорезом в полиакриламидном геле в присутствии денатурирующих агентов //Почвоведение. 1993. № 8. С. 122-126

75. Трубецкой О.А., Трубецкая О.Е., Афанасьева Г.В., Резникова О.И. Сочетание гель-хроматографии с электрофорезом для препаративной наработки фракций гуминовых кислот//Известия РАН. Сер. Биологическая. 1995. № 4. С. 481-486

76. Тюрин И.В. Органическое вещество почвы и его роль в плодородии. М. 1965. 320 с.

77. Харченко С.В., Корнеева Г.А., Ветров А.А. О биологической активности "желтого вещества" морской и речной воды // Океанология. 1987, том 27, вып. 6, с. 1023-1026.

78. Химия биологически активных природных соединений. Под ред. Н. А.Преображенского и Р.П.Евстигнеевой. М.: Химия. 1970. 512 с.

79. Черников В.А., Раскатов В.А., Кончиц В.А. Состав и свойства фульвокислот черноземов с различной молекулярной массой // Почвоведение. 1991. № 1. С. 28-38

80. Ширшова JI.T. Опыт исследования и характеристики полидисперсности гумусовых веществ почв // Известия РАН. Сер. Биологическая. 1992. № 2. С. 281-290

81. Ширшова Л.Т. Полидисперсность гумусовых веществ почв. М.: Наука. 1991. 85 с.

82. Щербакова Т. А. Ферментативная активность почв и трансформация органического вещества. Мн.: Наука и техника. 1983. 222 с.

83. Экологическая роль микробных метаболитов. Под ред. Д.Г. Звягинцева. М.: МГУ. 1986. 238 с.

84. Aguer J.-Р., О. Trubetskaya, О. Trubetskoj, С. Richard Photoinductive properties of soil humic acids and their fractions obtained by tandem size exclusion chromatography-polyacrylamide gel electrophoresis // Chemosphere. 2001. V.44. N.2. P.205-209.

85. Aiken G.R. Evaluation of ultrafiltration for determining molecular weight of fiilvic acid // Env. Sci. & Technol. 1984. V.18. N. 12. P. 978-981.

86. Almendros G., Guadalix M.E., Gonzalez-Vila F.J., Martin F. Preservation of aliphatic macromolecules in soil humins // Organic Geochemistry, 1996. V.24. N.6-7. P.651-659.

87. Almendros G., Polo A., Lobo M.C. Chemical characterization of humic acid fractions with respect to their molecular weight // An Edafol. Agrobiol. 1983. V. 42. N 7/8. P. 955-961.

88. Anderson H.A., Hepburn A. Fractionation of humic acid by gel permeation chromatography//J. Of Soil Science. 1977. V.28. P.634-639.

89. Bailly J.R. Spectroscopic infra-rouge de quelques fractions d'acides humiques obtenues sur Sephadex//Plant and Soil. 1976. V. 45. P. 95-112.

90. Baneijee S.K., Rao C.V.N. Studies on complex formation between clays and humic acid of different molecular weights // J. Indian Soc.Soil Sci. 1981. V.29. N 2. P. 190192.

91. Baneijee S.K., Sengupta M. Acidic functional groups of humic acids of different molecular complexity//Fertil. Technol. 1977. V.14. P. 279-284.

92. Blondeau R. The fractionation of humic acids on Sephadex gel: the role of salts and extractants//Agrochimica. 1986. V. XXX. N.l-2. P. 128-136.

93. Blondeau R., Kalinowski E. Fractionation of humic substances by hydrophobic interaction chromatography // Journal of Chromatography. 1986. V.351. P.585-589.

94. Burns R.G., Pukite A.H., McLaren A.D. Concerning the location and persistence of soil urease // Soil Sci. Soc. Am. Proc. 1972. V. 36. N 2. P. 308-311.

95. Butler J.H.A., Ladd J.N. Effect of extractant and molecular size on the optical properties of soil humic acids // Aust. J. Soil Res. 1969a. V. 7. N 3. P. 229-239.

96. Butler J.H.A., Ladd J.N. The effect of methylation of humic acids on their influence on proteolytic enzyme activity // Aust. J. Soil Res. 1969b. V. 7. N 3. P. 263268.

97. Butler J.H.A., Ladd J.N Importance of the molecular weight of humic and fulvic acids in determining their effects on protease activity // Soil Biol. Biochem. 1971. V. 3 N3. P. 249-257.

98. Camier R.J., Siemon S.R., Battaerd H.A.J., Stanmore B.R. The nature andpossible significance of particulate structure in alcali-treated brown coal // Coal Structure. Adv. Chem.Ser. 1981. V.192. P.311-336.

99. Chakraborty G., Gupta S.K., Baneijee S.K. Acidic functional groups of humic acids of different molecular complexity extracted from soil aggregates of varying sizes // J. Indian Soc. Soil Sci. 1982. V.30. N 3. P. 378-380.

100. Conte P., Piccolo A. High pressure exclusion chromatography of humic substances: molecular sizes, analytical parameters, and column performance // Chemosphere. 1999. V. 38. N 3. P. 517-528.

101. Cozzolino A., Conte P., Piccolo A. Conformational changes of humic substances induced by some hydroxy-, keto-, and sulfonic acids // Soil Biology & Biochemistry. 2001. V.33. No.4-5. P.563-571.

102. Curvetto N.R., Orioli G.A. Electrophoretic subfractionation of low and high molecular weight humic acids fractions // Plant and Soil. 1982. V. 66. P. 205-215.

103. Dari K., Bechet M., Blondeau R. Isolation of soil Streptomyces strains capable of degrading humic acids and analysis of their peroxidase activity // FEMS Microbiology Ecology. 1995. V. 16. P. 115-122.

104. Domke K. Fraktionierung "freier" und "gebundener" Braunhuminsauren und Grauhuminsauren mittels Gelfiltration, Elektrophorese bzw. organischer Losungsmittel// Arch. Acker- u. Bodenkd. Bd. 16. 1972. H.l S.3-11.

105. Domke K., Rawald W. Eine fur Routinebestimmungen geeignete standartisierte Humuskomplex-Analyse//Albrecht-Thaer-Arch. 1969. Bd.13. H.2. S. 163-169.

106. Duchaufour Ph., Jacquin F. Nouvelles sur 1'extraction et le fractionnement des composes humiques // Bul.de l'Ecole Nat. Super. Agronom. De Nancy. 1966. T. 8. N. l.P. 3-11.

107. Ewald W., Berger P., Visser S.A. UV-visible Absorption and Fluorescence Properties of Fulvic Acids of microbial origin as functions of their molecular weights // Geoderma. 1988. V. 43. N 1. P. 11-20.

108. Fetsch D., Havel J. Capillary zone electrophoresis for the separation and characterization of humic acids // Journal of Chromatography A. 1998. V.802. N.l. P. 189-202.

109. Fetsch D., Hradilova M., Pena Mendez E.M., Havel J. Capillary zone electrophoresis study of aggregation of humic substances // Journal of Chromatography A. 1998. V.817. P.313-323.

110. Flaig W. Chemistry of humic substances in relation to coalification // Coal Sci. Adv.Chem.Ser. 1966. V.55. P.64-65.

111. Flaig W., Beutelspacher H., Reitz E. Chemical composition and physical properties of humic substances // Soil Сотр. V.l. Organic Components. N.Y. 1975. P.112-121.

112. Fukushima Т., Ishibashi Т., Imai A. Chemical characterization of dissolved organic matter in Hiroshima Bay, Japan // Estuarine, Coastal and Shelf Science. 2001. V.53. N. 1. P.51-62.

113. Ghosal M., Chain E.S.R. An evaluation of aromatic fraction of humic substances // Soil Sci.Soc.Am.J. 1985. V. 49. N 3. P. 616-618.

114. Ghosh K., Schnitzer M. Macromolecular structures of humic substances // Soil Science. 1980. V. 129. N. 5. P. 266-276.

115. Ghosh K., Schnitzer M. UV and visible absorption spectroscopic investigations in relation to macromolecular characteristics of humic substances // Journal of Soil Science. 1979. V. 30. P. 735-745.

116. Goh K.M., Reid M.R. Molecular weight distribution of soil organic matter as effected by acid pre-treatment and fractionation into humic and fulvic acid // J. Of Soil. Sci. 1975. V.26. P.207-214.

117. Goh K.M., Williams M.R. Changes in molecular weight distribution of soil organic matter during soil development // Journal of Soil Science. 1979. Vol. 30. No. 4. P. 747-755

118. Goh K.M., Williams M.R. Distribution of carbon, nitrogen, phosphorous, sulphur, and acidity in two molecular weight fractions of organic matter in soil chronosequences // J.Soil Sci. 1982. V. 33. N 1. P. 73-87.

119. Haan H.D., Werlemark G., Boer T.D. Effect of pH on molecular weight and size of falvic acids in drainage water from peaty grassland in NW Netherlands // Plant and soil. 1983. V.75. N.l. P.63-73.

120. Hautala, J. Peuravuori, K. Pihlaja K. Estimation of origin of lignin in humic DOM by CuO-oxidation//Chemosphere. 1997. V.35. N.4. P.809-817.

121. Hem L.J., Efraimsen H. Assimilable organic carbon in molecular weight fractions of natural organic matter//Water Research, 2001. V.35. N.4. P.1106-1110.

122. Hergert H.L. Infrared spectra // In Lignins: occurence, formation, structure and reactions. Ed. By Sarkanen K.V., Ludwig C.H. N.-Y.: Willey-Interscience. 1971. P.267-297.

123. Hernandez Т., Moreno J.I., Costa F. Molecular size evaluation by gel filtration of humic acids from two sludges and from leonardite // Geodrema. 1989. V.45. P.83-91.

124. Hesse S., I.V. Perminova, D.V. Kovalevskii, F.H. Frimmel, A.V. Kudryavtsev, G. Abbt-Braun Development of a predictive model for calculation of molecular weight of humic substances//Water Research. 1998. V.32. N.3. P.872-881.

125. Inoko A., Tamai M. Studies on soil humus with special reference to its molecular weight systems//JARQ 1977. V.ll. N 1. P. 30-35.

126. Inoko A., Tamai M. Studies on soil humus with special reference to its molecular weight systems // Bull. Natl. Inst. Agric. Sci., Ser.B. 1976. N 28. P. 119-182.

127. Khairy A.H., Kress B.M. Emissionsspectroskopische Experimente mit naturlichen Huminstoffen nach Gelfiltration // Agrochimica. 1980. V. 24. N. 1. P. 1-8.

128. Khan S.U., Schnitzer M. Sephadex gel filtration of fulvic acid: the identification of major components in two low-molecular weight fractions // Soil Science. 1971. V.112. N.4.P. 231-238.

129. Kipton H., Powell J., Fenton E. Size fractionation of humic substances: Effect on protonation and metal binding properties // Analytica Chimica Acta, 1996. V.334. N.l-2. P.27-38.

130. Kopacek P., Kaniansky D., Hejzlar J. Characterization of humic substances by capillary isotachophoresis//J. of Chromatography. 1991. V.545. P.461-468.

131. Kudryavtsev A.V., Perminova I.V., Petrosyan V.S. Size-exclusion chromatographic descriptors of humic substances // Analytica Chimica Acta. 2000. V. 407. P. 193-202.

132. Kuiters А.Т., Mulder W. Gel permeation chromatography and Cu-binding ofwater-soluble organic substances from litter and humus layers of forest soil // Geoderma. 1992. V.52. P.131-139.

133. Kumada K. The chemical nature of the green fraction of P-type humic acid // Soil Sci. Plant Nutr. 1967. V.13. N.4. P.121-129.

134. Kumada K., Hurst H.M. Green humic acid and its possible origin as a fungal metabolite//Nature. 1967. V.214. N.5088. P.631-637.

135. Kumada K., Kawamura Y. Viscosimetric characteristics of humic acids // Soil Sci. Plant Nutr. 1968. V.14. P. 190-197.

136. Kumada K, Miyara E. Sephadex gel fractionation of humic acids // Soil Sci. Plant Nutr. 1973. V. 19. N4. P. 255-263.

137. Ladd J.N. The extinction coefficients of soil humic acids fractionated by 'Sephadex' gel filtration // Soil Science. 1969. V. 107. P.303-306.

138. Ladd J.N., Butler J.H.A. Inhibition and stimulation of proteolytic enzyme activities by soil humic acids // Aust. J. Soil Res. 1969a. V. 7. N 3. P. 253-261.

139. Ladd J.N., Butler J.H.A. Inhibitory effect of soil humic compounds on the proteolytic enzyme pronase // Aust. J. Soil Res. 1969b. V. 7. N 3. P. 241-251.

140. Lin C.-F., Lin T.Y., Hao O.J. Effects of humic substance characteristics on UF performance // Water Research, 2000. V.34. N. 4. P. 1097-1106.

141. Lombardi A.T., Jardim W.F. Fluorescence spectroscopy of high performance liquid chromatography fractionated marine and terrestrial organic materials // Water Research. 1999. V. 33. N. 2. P. 512-520

142. Maggioni A., Cacco G. Acetyl-naphthyl-esterase activity in humus-enzyme complexes of different molcular size // Soil Sci. 1977. V. 123. N 2. P. 122-125.

143. Mangrich A.S., Novotny E.H., Blum W.E.H., Gerzabek M.H. Soil management system effects on size fractionated humic substances // Geoderma, 1999. V.92. N.l-2. P.87-109.

144. Marzadori C., Francioso O., Ciavatta C., Gessa C. The influence of the content of heavy metals and molecular weight of humic acids fractions on the activity and stability of urease // Soil Biology & Biochemistry. 2000. V.32. N. 13. P.1893-1898.

145. Mathur S.P. Characterization of soil humus through enzymatic degradation // Soil Sci. 1971. V. 11. N3. P. 147-157.

146. Mato M.C., Olmedo M.G., Mendez J. Inhibition of indoleacetic acid-oxidase by soil humic acids fractionated on sephadex // Soil Biol. Biochem. 1972. Y.4. P. 469473.

147. Mirave J.P., Orioli G.A. Edaphic mobility of complete humic acid and fractions of high and medium molecular weight // Plant & Soil. 1987. V.4. P. 169-174.

148. Mirave J.P., Orioli G.A. Fractionation, radioiodination and mobility in soil plates of different molecular weight fractions of humic acids // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 65-66

149. Mobed J.J., Hemmingsen S.L., Autry J.L., McGown L.B. Fluorescence characterization of IHSS humic substances: total luminescence spectra and absorbance correction//Env. Sci.&Tech. 1996. V.30. P.3061-3065.

150. Nannipieri P., Ceccanti В., Cervelli S., Sequi P. Stability and kinetic properties of humus-urease complexes // Soil Biol. Biochem. 1978. V. 10. No.2. P. 143-147.

151. Nobili M.D., Fornasier F. Assessment of the effect of molecular size on the electrophoretic mobility of humic substances // European J.of Soil Science. 1996. V.47. P. 223-229.

152. Novotny E.H., Blum W.E.H., Gerzabek M.H., Mangrich A.S. Soil managment system effects on size fractionated humic substances // Geoderma. 1999. V. 92. P. 87109.

153. Olsen E.D. Modern optical methods of Analysis. McGraw-Hill, New York 1975. 629 pp.

154. Oorts К., B. Vanlauwe, О. O. Cofie, N. Sanginga, R. Merckx Charge characteristics of soil organic matter fractions in a Ferric Lixisol under some multipurpose trees // Agroforestry Systems, 2000. V.48. N.2. P.169-188.

155. Pena Mendez E.M., Fetsch D., Hradilova M., Havel J. Capillary zone electrophoresis study of aggregation of humic substances // Journal of Chromatography A. 1998. V.817. N.l-2. P.313-323.

156. Perminova I.V., Frimmel F.H., Kovalevskii D.V., Abbt-Braun G., Kudryavtsev A. V., Hesse S. Development of a predictive model for calculation of molecular weight of humic substances//Water Research. 1998. V. 32. N. 3. P. 872-881.

157. Perminova I.V., Kudryavtsev A.V., Petrosyan V.S. Size-exclusion chromatographic descriptors of humic substances I I Analytica Chimica Acta, 2000. V.407. No. 1-2. P. 193-202.

158. Peuravuori J., Pihlaja K. Molecular size distribution and spectroscopic properties of aquatic humic substances // Analytica Chimica Acta. 1997. V. 337. P. 133-149.

159. Piccolo A., Mirabella A. Molecular weight distribution of peat humic substances extracted with different inorganic and organic solutions // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 39-46.

160. Piccolo A., P. Conte High pressure size exclusion chromatography (HPSEC) of humic substances: molecular sizes, analytical parameters, and column performance // Chemosphere, 1999. V.38. N.3. P.517-528.

161. Pospisil F., Hrubkova M. The effect of humic acids and their fractions on phytase activity // Vedecka Prace Vyzkumnuch ustavu rostlinne vyroby, Praha-Ruzyne. 1974. V. 18. P. 47-54.

162. Powell H.K.J., Fenton E. Size fractionation of humic substances: Effect on protonation and metal binding properties // Analytica Chimica Acta. 1996. V. 334. P. 27-38.

163. Prasad В., Kumar M. Visible adsorption spectroscopic investigation in relation to molecular characteristics of fulvic acids extractedfrom organic wastes // J. Indian Soc. Soil. Sci. 1989. V.37. P.660-668.

164. Prasad В., Sinha M.K. Physical and Chemical Characterization of molecular homogeneous fulvic acid fractions and their metal complexes // J. Indian Soc. Soil Sci. 1983. V31.No. 2. P. 187-191.

165. Rigol A., Vidal M., Rauret G. Ultrafiltration-capillary zone electrophoresis for the determination of humic acid fractions // Journal of Chromatography A. 1998. V. 807. P. 275-284.

166. Rostovshchikova I.N., Orlov D.S. The fractionation and characterization of humic acids according to their molecular weights // Biochemical processes and cycling of elements in the environment. Wroclaw, Poland. 2001. P.377-378.

167. Rowell M.J., Ladd J.N., Paul E.A. Enzymically active complexes of proteases and humic acid analogues // Soil Biol. Biochem. 1973. V. 5. P. 699-703.

168. Ruggiero P., Radogna V.M. Tyrosinase activity on a humic-enzyme complex // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 365-366.

169. Russel J.D., Anderson H.A. Comment on 'Spectroscopic infra-rouge de quelques fractions d'acides humiques obtenues sur Sephadex' // Plant and Soil. 1977. V.48. P.547-548

170. Saleh F.Y., Chang D.Y. Retention behavior of Suwannee river fulvic acid components in RP-HPLC // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 6774.

171. Sarkar J.M., Bollag J.-M. Inhibitory effect of humic and fulvic acids on oxidoreductases as measured by the coupling of 2,4-dichlorophenol to humic substances // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 367-377.

172. Schmitt-Kopplin P., Freitag D., Perdue E.M., Garrison A.W., Kettrup A. Capillary electrophoresis in the analysis of humic substances Facts and artifacts // Journal of Chromatography A. 1998. V.807. N.l. P.101-109.

173. Schnitzer M. Humic substances, chemistry and reactions // Soil Organic matter. Amsterdam. 1978. P. 127-154.

174. Schnitzer M. Soil organic matter the next 75 years // Soil Sci. 1991. V. 151. P.41-49.

175. Schnitzer M., Khan S.U. Humic Substances in the Environment N.Y.: Marcel Dekker, 1972. 327 p.

176. Schnitzer M., Skinner S.I.M. Gel filtration of fulvic acid, a soil humic compound. In Isotope and radiation in Soil organic matter studies, Int. Atomic Energy Agency, Vienna. 1968. p.41-45.

177. Shiroya R., Kumada K. Sephadex gel fractionation of humic acids // J. Soc. Soil Manure. 1973. N.3. P.43-51.

178. Silva S., Zanetti В., Burzoni E., Dell'Agnola G., Nardi S. Caratteristiche spettrofluorimetriche e potere complessante di acidi umici a diverso peso molecolare // Agrochimica. 1981. V. XXV. N 2. P. 131-141.

179. Soil enzymes. Ed. Burns R.G. London, N.-Y., San Francisco: Academic Press. 1978. 331p.

180. Sowden F.J. Action of proteolytic enzymes on soil organic matter // Canad. J. Soil

181. Sci. 1970. V. 50. N2. P. 233-241.

182. Steelink C. Implications of elemental characteristics of humic substances // In Humic substances in soil, sediment, and water. Geochemistry, Isolation, and Characterization. Ed. By Aiken G.R. et al. N.-Y.: John Wiley & Sons. 1985. P.457-476.

183. Stevenson F.J. Humus Chemistry. N.Y. 1982. 325p.

184. Summers R.S., Cornel P.K., Roberts P.V. Molecular size distribution and spectroscopic characterization of humic substances // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 27-37.

185. Sutheimer S.H., Ferraco M.J., Cabaniss S.E. Molecular size effects on carboxyl acidity: implications for humic substances // Analytica Chimica Acta. 1995. V. 304. P. 187-194.

186. Swift R.S. Fractionation of Soil humic substances // In Humic substances in soil, sediment, and water. Geochemistry, Isolation, and Characterization. Ed. By Aiken G.R., McKnight D.M., Wershaw R.L. N.Y. 1985. P.387-408.

187. Swift R.S., Posner A.M. Gel chromatography of humic acids // J. Soil Sci. 1971. V. 22. N 2. P. 237-249.

188. Swift R.S., Thornton B.K., Posner A.M. Spectral characteristics of a humic acid fractionated with respect to molecular weight using an agar gel // Soil Science. 1970. V. 110. N. 2. P. 93-99.

189. Tan K.H. High and low molecular weight fractions of humic and fulvic acids // Plant Soil. 1977. V. 48. N 1. P. 89-101.

190. Tate K.R., Anderson H.A. Phenolic hydrolysis products from gel chromatographic fractions of soil humic acids // Journal of Soil Science. 1978. V. 29. P. 76-83.

191. Trubetskoj О., O. Trubetskaya, O. Reznikova, G. Afanas'eva Weight and optical differences between soil humic acids fractions obtained by coupling SEC-PAGE // Geoderma. 1999. V. 93. N.3-4. P.277-287.

192. Tschapek M., Wasowski C., Torrez Sanchez R.M. Humic acid as colloidal surfactant // Plant and Soil. 1981. Y.63. N.2. P.261-271.

193. Tsutsuki K., Kuwatsuka S. Molecular size distribution of humic acids as affected by the ionic strength and the degree of humification // Soil Sci. Plant Nutr. 1984. Y.30 N2. P. 151-162.

194. Vidal M., G. Rauret, A. Rigol Ultrafiltration-capillary zone electrophoresis for the determination of humic acid fractions // Journal of Chromatography A, 1998. V.807. N.2 P.275-284.

195. Visser S.A. Crystal Formation by Low Molecular Weight fufvic and humic acids // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 129-138.

196. Wershaw R.L., Aiken G.R. Molecular size and weight measurements of humic substances // In Humic substances in soil, sediment, and water. Geochemistry, Isolation, and Characterization. Ed. By Aiken G.R. et al. N.-Y.: John Wiley & Sons. 1985. P.477-492.

197. Yonebayashi K., Hattory T. Surface active properties of soil humic acids // The Science of the Total Environment. 1987. VI. 62. P. 55-64.

198. Zhang D., Lu S. An assessment of the separation and analysis of humic substances by isoelectric Focusing method // The Science of the Total Environment. 1987. V. 62. P. 89-96.

199. Zhou Q., Cabaniss S.E., Maurice P.A. Considerations in the use of high-pressure size exclusion chromatography (HPSEC) for determining molecular weights of aquatic humic substances // Water Research, 2000. V.34. N. 14. P.3505-3514.

200. Описание почвенных разрезов