Сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток при различных режимах криовоздействия

Костоломова, Елена Геннадьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток при различных режимах криовоздействия
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток при различных режимах криовоздействия"

На правах рукописи

КОСТОЛОМОВА ЕЛЕНА ГЕННАДЬЕВНА

СОПРЯЖЕННОСТЬ ИММУНОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ МАКРООРГАНИЗМА И ИЗОЛИРОВАННЫХ ИММУНОКОМПЕТЕПТНЫХ КЛЕТОК ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ КРИОВОЗДЕЙСТВИЯ

03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тюмень - 2006

Работа выполнена в Тюменском филиале государственного учреждения «Научно-исследовательский институт клинической иммунологии» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук н Тюменском государственном университете.

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, профессор Ю.Г. Суховей

<. I

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор Александр Павлович Кузнецов

Доктор медицинских наук, профессор Муза Михайловна Коха и

Ведущая организация: Новосибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения РФ, г. Новосибирск,

Защита состоится «22 декабря» 2006 года в 09-00 часов на заседании диссертационного Совета Д.212.274.07 в Тюменском государственном университете по адресу: 625003, г. Тюмень, ул. Пирогова, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в читальном зале библиотеки Тюменского государственного университета.

Автореферат разослан «II ноября» 2006 года.

Ученый секретарь диссертационного совета уО^г

доктор биологических наук, профессор Е.А. Чнрятьев

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.

Проблема активизации защитных сил организма немедикаментозными средствами - одна из важнейших в современной медицине и физиологии (Виноградова Т. В., 1988,2002; Аржахова Л. И.,2000).

Известно, что в качестве средств, активно влияющих на иммунную систему, могут выступать факторы внешней среды, среди которых одним из наиболее значимых является холод (Слоним А, Д., 1986; Медведев В. И., 1984; Агаджанян Н. А. 1984,2001).

Сложность изучения влияния низких температур на организм человека заключается в том, что холод оказывает неоднозначное влияние (Малов Ю.С., 1999). Кроме известного отрицательного воздействия: холодовые травмы (от отморожения до «холодовой болезни») (Krüger С., 1991; Teodorczyk-Injeyan J.A., 1991, 1992; Rokita Е., 1997; Peteiro-Cartelle F.J., 1999), последствия переохлаждения в виде возникновения и нфе кционно-воспалительных заболеваний, зачастую тяжелых, принимающих хроническое течение (Арефьева, H.A., 1992; Эмирбеков с соавт., 1998; Воронцов И.М. с соавт., 1991; Ветрова Ю. В. с соавт., 2000; Аржакова Л.И., 2000,), известны и, безусловно, положительные эффекты. Так, с давних пор криовоздействие используется для повышения защитных сил организма (Ногаллер А.М. с соавт., 1984; Литасова Е.Е. с соавт., 1997; Морозов В.Н. с соавт,, 2001; Meerson F.Z., 1994), Следует отметить, что исследования, посвященные данной проблеме, довольно широко освещены в научной литературе, однако, они неоднозначны, а порой носят взаимоисключающий характер. Это объясняется тем, что криовоздействие характеризуется набором таких параметров, как интенсивность, длительность и периодичность (Барбараш H.A. 1996). Сочетания этих характеристик составляют «режим» воздействия. Именно режим, как совокупность физических характеристик определяет характер и исход влияния холода на организм человека.

Еще одним аспектом данной проблемы является то, что на различные органы и системы влияние одних и тех же криорежимов различно (Аржакова ЛИ., 2000; Козырева Т.В. с соавт., 2003; Каленова Л.Ф. с соавт., 2003, 2005, 2006; Суховей Ю.Г. с соавт., 2004). Это зависит от преморбидного фона, в первую очередь тренированности организма, наличия хронических заболеваний, клинико-анамнестических признаков иммунной недостаточности и пр. (Суховей Ю.Г. с соавт., 2004; Попов A.B. с соавт., 2003). Поэтому изучение механизмов влияния холода на организм человека невозможно без учета исходного состояния.

Особую актуальность имеет изучение иммунологических механизмов реагирования на холод. Иммунная система представляет собой уникальный, природный защитный механизм (Петров Р.В., 1992; Хаитов P.M. с соавт., 2000, 2002; Сепиашвили Р.И. 2003) и одной из первых реагирует при воздействии экстремальных факторов природной среды (Черешнев В.А. с соавт., 2001), в

числе которых не последнее место отводится Холодовым воздействиям. С одной стороны нарушения функционирования иммунной системы лежат в основе патогенеза инфекционно-воспалительных заболеваний, зачастую являющихся следствием переохлаждения, с другой стороны, воздействуя именно на иммунную систему, можно достичь эффекта стимуляции.

Поэтому на сегодняшний день представляется актуальным комплексное изучение влияния различных режимов кр повоз действия на иммунную систему с учетом исходной тренированности организма к холоду.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ.

Изучить влияние различных режимов криовоздействия на сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток.

ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Провести сравнительное исследование иммунного статуса лиц, подвергающихся периодическому холодовому воздействию и «практически здоровых», не занимающихся экстремальными видами закаливания.

2. Оценить влияние погружения в ледяную воду на изменения параметров иммунной системы лиц, адаптированных к периодическим холодовым воздействиям (группа «моржей») .в сравнении с группой неадаптированных (контрольная группа).

3. Провести сравнительное изучение влияния длительности криовоздействия на функциональную активность лимфоцитов, моноцитов, нейтрофилов группы «моржей» и контрольной группы (in vitro). -j

4. Изучить динамику функциональной активности моноцитов и нейтрофилов при циклическом холодовом воздействии группы «моржей» в сравнении с контрольной группы (in vitro).

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

Впервые проведено комплексное исследование характера влияния периодического холодового воздействия на показатели иммунного статуса любителей зимнего плаванья «моржей». Установлено, что у любителей зимнего плавания формируется иной, отличный от контрольной группы тип поддержания здоровья. Особенность заключается в перераспределении рецепторно-субпопуляционных маркеров лимфоцнтарно-клеточного звена, повышении уровня иммуноглобулинов классов М и G на фоне снижения уровня ЦИК (3,5 %) и достоверно более низкий интенсивности фагоцитоза нейтрофилов и активности кислородзависимого метаболизма моноцитов.

Впервые проведен сравнительный анализ параметров иммунной системы

«практически здоровых» и «моржей» в ответ на погружение в ледяную воду. Привычное погружение («моржи») в ледяную воду приводит к увеличению абсолютного и относительного содержания активированных лимфоцитов (Ki67+) и CD95 позитивных клеток, зрелых Т-лимфоцктов, повышению уровня сывороточного IL-4. При первом погружении (контрольная группа) увеличивается уровень CD16+, Ki67+ и CD95+ клеток, снижается число CD3+ лимфоцитов, на фоне снижения IL-4, отмечен рост уровня сывороточного INF-y.

Впервые проведено комплексное исследование влияния различных по длительности, интенсивности и периодичности температурных режимов на функциональные характеристики иммунокомпетентных клеток (ИКК) (in vitro) в зависимости от исходной тренированности макроорганизма. Установлено, что ИКК обладают различной чувствительностью циклам in vitro в зависимости от исходной тренированности макроорганизма.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

Учитывая, что ИКК по-разному отвечают на криовоздействие, в зависимости от тренированности организма к Холодовым нагрузкам, полученные результаты могут послужить основанием для разработки диагностических тестов in vitro с целью прогнозирования чувствительности макроорганизма к Холодовым нагрузкам и эффективности закаливания. -

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. У любителей зимнего плавания формируется иной тип иммунного статуса, проявляющийся перераспределением активационно-пролнферативной составляющей лимфоцитарно-кпеточного звена, повышением уровня иммуноглобулинов классов М н G на фоне уменьшения крупномолекулярных ЦИК, снижении интенсивности фагоцитоза нейтрофилов и активности кислородзависимого метаболизма моноцитов.

2. Реакция иммунной системы на эпизод холодового воздействия зависит от «тренированности» макроорганизма.

3. ИКК являются носителями памяти стереотипа реагирования макроорганизма на холодовое воздействие.

ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ.

Результаты работы внедрены в лечебно-профилактические программы ТФ ГУ НИИКИ СО РАМН, санатория-профилактория «Юность» ТюмГНГУ. Материалы исследования используются в лекционном курсе «Основы иммунологии» на кафедре анатомии и физиологии человека и животных ТюмГУ.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ И ПУБЛИКАЦИИ.

Основные положения работы доложены на Международной конференции «Криосфера земли как среда жизнеобеспечения» (Пущино, 2003); Ш-й конференции иммунологов Урала (Челябинск, 2003); V-й конференции иммунологов Урала (Уфа, 2005); совместном заседании Ученого совета ТФ ГУ НИИКИ СО РАМН и «НИИ общей и прикладной криологии» ТюмГНГУ (Тюмень, 2006); Международной конференции «Теория и практика оценки криосферы земли и прогноз ее изменений» (Тюмень, 2006). Материалы работы были включены в методические рекомендации «Криотерапия в практике врача клинициста». - Тюмень, 2005. - 26 с. По материалам диссертации опубликовано 17 печатных работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ.

Диссертационная работа изложена на 138 страницах машинописного текста, содержит 23 таблицы и 33 диаграммы. Работа состоит из введения, обзора литературы, глав с характеристикой обследуемого контингента и описанием методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения и заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 170 отечественных и 35 иностранных источника.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Контингент и методы исследования. Обследовано 67 человек, занимающихся зимним плаванием (37 мужчин и 30 женщин (клуб «Кристалл» г. Тюмень). Исследование проведено в феврале 2002 года. Средний возраст обследуемых составил 42,85:Ь15,88 года.

В контрольную группу обследованных вошли 51 «практически здоровых» человек (22 мужчины (43.1%) и 29 женщин (56.9%)) в возрасте от 19 до 47 лет, не страдающих повышенной частотой возникновения острых воспалительных процессов и не имеющих клиннко-анамнестических и лабораторных признаков иммунной недостаточности.

Группы сравнения репрезентативны по полу и возрасту.

На момент обследования лица всех исследуемых групп не имели клинических проявлений острого воспаления, либо обострения хронических ннфекционно - воспалительных заболеваний.

Полученные данные обрабатывались на ПЭВМ IBM/PC при помощи стандартного статистического пакета (SPSS 11,5 for Windows).

В настоящей работе использованы методы лабораторного иммунологического обследования, подбор которых осуществлялся с учетом основных задач исследования, при этом учитывалась необходимость изучения не только количественных параметров различных звеньев иммунной системы, но и их функциональных характеристик.

В работе использованы следующие лабораторные методы:

1. Изучение лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы проводилось методом непрямой иммунофлуоресценцин и иммуногистохимии для определения фенотипа лимфоцитов с помощью моноклональных антител (МКА) (Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И., 1995). Для фенотипирования клеток использовались МКА фирмы «Сорбент» (Москва); CD38+, CD3+, CD4+, CD8+, CD 16+, CD25+, CD71+, HLA-DR+ и «Becton Dickinson» (США) : CD95+, Ki67+.

2. Количественное определение уровня иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови определялся нммуноферменткым методом. Для постановки использовался набор реагентов ProCon Ig производства ООО «Протеиновый контур» по инструкции производителя.

3. Количественное определение ннтерлейкина-4 (IL-4) и у-ннтерферона (у-ИФН) производилось с использованием тест-системы производства ООО «Цитокин» по инструкции производителя.

4. Для количественного определения циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) использовался стандартный метод (Гриневнч Ю.А., 1974),

5. Для оценки пролиферзтнвной активности лимфоцитов использовался метод бласттрансформации (Иммунологические методы под ред. Г.Фримеля 1987).

6. Изучение фагоцитарной активности моноцитов уровня экспрессии FcyRUI (ЕА-РОК), поглотительной (ЕА-фагоцитоз) активности моноцитов проводили по методу присоединения и поглощения опсонизированных антителами эритроцитов барана (ЭБ) (Parish C.R., 1975 Knap W.( 1977).

7. Определение метаболической активности проводили с помощью НСТ-теста в спонтанном и стимулированном варианте, основанном на учете внутриклеточных отложений диформазана — нерастворимой формы восстановленного нитросинего тетрозолия (Park B.N., Fikring S.M., 1968.),

8. Фагоцитарная активность нейтрофилов оценивалась методом фагоцитоза пекарских дрожжей £Фримель Г., 1987).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Первым этапом изучения формирования механизмов иммунного ответа под влиянием низкотемпературных воздействий явилось изучение особенностей иммунного статуса лиц, подвергающихся периодическому холодовому воздействию.

Установлено, что у любителей зимнего плаванья (таблица 1) иммунный статус значительно отличается от контрольной группы.

Таблица 1

Характеристика иммунологических показателей лиц, занимающихся зимним плаванием (группа «моржи») и контрольной группы, (М+ш)

ПОКАЗАТЕЛИ КОНТРОЛЬНАЯ ГРУППА <п=51> <(МОРЖН»Кп=67)

СО 38, % 18,41±1,07 12,37*0,54**

СО 38 абс. знач. 464,38*28,63 271,43*19.61***

СО 8,% 23,05*0,74 26,81 ±0,86**

СО 8 абс. знач. 591,75^29,86 576,14*35,12

СО 4.% 34,31 ±0,76 31,48*0,78*

СО 4 абс. знач. 901,47*59,41 685,80*44,56**

Сй 3, % 55,69*0,93 59,22*0,70

СО 3 абс. знач. 1440,5ftt79,46 1315,11*99,45

СО 25,% 1,85*0,18 2,28*0,21 ***

СО 25 абс. знач. 48,86*4,17 47.78*5,14

СО 16.% 14,74*0,87 18,62*1,22*

СО 16 абс. знач. 378,66*27,86 519,76*20,83*

СО ОН,% 7,42*0,22 4.97±0,22***

СО ОН абс. знач. 189,13±9,44 169,01*12,56 *

!К А, Г/Л 2,24*0,11 2,27*0,13

11 М, г/л 1.41*0,03 1,97*0,08 ***

в, г/л 10,81 ±0,36 13,87*0,44 ***

ЦНК с ПЭГ 3,5, усл.ед. 26,52*2,07 17,67*1.71**

ЦИК с ПЭГ 7.0, усл.ед 273,45± 14,04 272.58*15,60

ФИ ч/э 30, % 78,03*1,44 79,75*1,40

ФИ ч/э 120, % 88,47*1,24 92,00*0,87 *

ФЧ ч/з 30, ед. 2.72*0.11 2,16*0,07 **

ФЧ ч/з 120, ед. 3,22*0,08 2,60*0,07 **

НСТ-тест, % спонтанный 9,33*0,33 8,42*0,43* J

НСТ-теет, % стимулированный 12,053*0,53 10,92*0,55*

ЕА-РОМ 11,0040,47 11,08*030

ЕА-фагоцнт 8,33*0.58 8,42*0,51

достоверность различия по сравнению с контролем* р< 0.05;** р< 0.01;*** р< 0.001

Выявлены отличия ряда параметров фагоцитарного звена. На фоне более высокого уровня активности фагоцитоза нейтрофилов (ФИ) (92,00±0,87 и 88,47±1Д4; р< 0.05), отмечены достоверно более низкие показатели его интенсивности (ФЧ) (2,60±0,07 и 3,22±0,08; р< 0.01), Снижен уровень кислородзависимого метаболшма моноцитов, как в спонтанном (8,42±0,43 и 9,33±0,33; р< 0.05), так и в стимулированном (10,92±0,45 и 12,53±0,51 р< 0,05) НСТ • тесте. Снижен уровень активационно — пролиферативных процессов л им фоцитарно-клеточного звена иммунной системы, что проявляется достоверно более низкими показателями маркеров СО 38 (р< 0.001), НЬА БЯ (р<0.001), это сочетается с более низким содержанием хелперно-индукторной субпопуляции -

СО 4+ (р< 0.01) и более высокими показателями СО 16+ клеток (р< 0.05), на фоне увеличения сывороточного уровня ^ М (р<0,001) н в (р<0,001).

Из приведенных данных видно, что большее число параметров, характеризующих иммунный статус лиц, подвергшихся периодическому холодовому воздействию, достоверно, причем с высокой степенью достоверности, отличается от контрольной группы. Эти отличия не однонаправлены и отличны во всех исследованных звеньях иммунной системы. Исходя из изложенного выше, и учитывая, что обследование проводилось в период отсутствия кпинико-лабораторных признаков воспалительного заболевания, становится очевидным, что у любителей зимнего плавания формируется иной, отличный от контрольной группы тип поддержания иммунного здоровья.

На следующем этапе исследования изучали особенности реагирования адаптированного и не адаптированного организма на экстремальное холодовое воздействие. С целью выявления различий в реакциях на погружение в ледяную воду были обследованы группа «моржей» и лиц, не занимающихся экстремальными видами закаливания «контрольная группа».

Диаграмма 1

Динамика иммунологических показателей группы «моржей» после погружения в ледяную воду

достоверность различия по сравнению с контролем* р< 0,05;** р< 0.01;*** р< 0.001

После погружением в ледяную воду (диаграмма 1) в группе лиц, адаптированных к холодовому воздействию, наблюдается достоверное

повышение уровня лейкоцитов в крови обследуемых (р<0,001) за счет абсолютного увеличения содержания нейтрофилов (р<0,01), лимфоцитов (р<0,05) и моноцитов (р<0,01).

В результате анализа параметров лимфоцитарно-клеточного звена (диаграмма 1) выявлено, что после холодового воздействия наблюдается достоверное увеличение абсолютного и относительного содержания маркеров Клб7 и СБ95, Т-лимфоцитов (СОЗ+клеток). Увеличение К167+ и СБ95+ клеток, связанных между собой корреляционной связью (КК=0,41; р<0,01), подтвержденной данными факторного анализа (Р=19,78 при 51§=0,0001) свидетельствует о повышении актнвационно-прол иферативных процессов лимфоцитарно-клеточного звена.

Кроме этого (диаграмма 1), установлен достоверный рост концентрации 1Ь-4 (р<0,001) в сыворотке крови группы «моржей» после погружения.

В группе лиц, не адаптированных к Холодовым воздействиям, погружение в ледяную воду приводит к достоверно отличным результатам по сравнению с группой «моржей» (диаграмма 2).

Диаграмма 2

Динамика иммунологических показателей контрольной группы после погружения в ледяную воду

*** ИЛ-4 (пг/мл *** у-ИНФ („г/мл;

лейкоциты (г/л>

юэикофилы (%)

эозинофилы (г/л)

базофилы (%) базофилы (г/л) н/ф п-я (%) н/ф п-я (г/л)

н/ф оя (%) н/ф с-я (г/л) моноциты (%) **

-до купания

- после купания

достоверность различи* по сравнению с контролем* р< 0.05;** р< 0.01;*** р< 0.001

Отличия заключаются в том, что, во-первых, у «новичков» не отмечено увеличение всего пула циркулирующих лейкоцитов, как это наблюдается у

«моржей», но имеет место увеличение количества моноцитов (р<0,01) (диаграмма 2).

Ответ лимфоцитарно - клеточного звена так же отличен: при росте количества CD16+; Ki67+ и CD95+ клеток, число CD3+ лимфоцитов непосредственно после купания не только не увеличивается (как в группе «моржей»), но и снижается. Рост уровня CD16 позитивных клеток опосредует так называемую антителозависимую клеточную цитотоксичность (АЗКЦ), или киллерную (К) клеточную активность (Тяжелова В.Г. 2003). Показатель CD1Ö+ имеет сильную отрицательную корреляционную связь с CD3+ (КК=-0,94; р<0,001), что подтверждается факторным анализом (F=8,3 при Sig=0,01).

Следует особо отметить различия в реакциях со стороны таких цитокинов, как 1L-4 и INF-y. У «новичков» уровень IL-4 не повышается, а наоборот падает, в отличие от группы «моржей», а концентрация INF-y достоверно растет.

Основными продуцентами IL-4 являются Th2 и тучные клетки. IL-4 обладает плеотропным эффектом на клетки-мишени: стимулирует поляризацию Т-хелперов в направлении Th2 (Тотолян A.A., Фрейдлин И.С., 2000; Демьянов A.B. с соавт, 2003; Hermann F., Canistra S.A., 1985). Учитывая повышенную чувствительность ThI клеток к действию факторов апоптоза (Ярилнн A.A., 1998) можно полагать, что индукция апоптоза Т-лимфоцитов в результате холодового воздействия является одним из механизмов смешения цитокинового баланса в сторону Th2 клеток и, соответственно, преобладания связанных с ними иммунорегуляторных механизмов у лиц, адаптированных к периодическим Холодовым нагрузкам.

Повышение уровня у-ИФН в контрольной группе можно рассматривать, как превалирующую ТЫ активность, поскольку, данная субпопуляция Т-клеток является основным продуцентом этого цитокина (Теплова С.Н., Алексеев Д.А., 2002; Черных Е.Р. с соавт., 2004). Помимо этого, у-ИФН регулирует адаптивный иммунный ответ, стимулируя поляризацию Т-хелперов в направлении ТЫ (Кетлинская О.С., 1995; Тотолян А. А., Фрейдлин И. С., 2000; Демьянов A.B. с соавт, 2003; Фрейдлин HC.,-2005;Nasise М.Р. etal., 1995).

Таким образом: отмечаем отчетливую дифференцированную реакцию иммунной системы на холодовое воздействие, тип реакций зависит от целого ряда причин, одной из которых является «тренированность» макроорганизма к Холодовым воздействиям.

Говоря о возможных механизмах такого рода реакций, необходимо четко представлять себе, уровень и иерархию реагирования. Одним из первых, уровней можно считать собственно ИКК. На наш взгляд причина разного реагирования системы иммунитета тренированного и не тренированного организма может быть обусловлена различным функциональным состоянием собственно ИКК. Различия, выявленные в реагировании иммунной системы макроорганизма на холодовое экстремальное воздействие, явились отправной точкой для изучения

особенностей реагирования основных ИКК на холодовое воздействие in vitro. Поскольку конечными эффекторами иммунной системы являются ИКК (Дудаева

A. А., 1991), отвечающие за различные этапы формирования иммунного ответа, то следующим этапом изучали влияние различных по длительности, интенсивности и повторяемости режимов криовоздействия, на выделенные из периферической крови ИКК in vitro. Эксперимент проводился при t +2°С, данная температура была выбрана исходя из следующего. Поскольку клинические исследования проводились на «моржах», периодически погружающихся в прорубь, где температура воды составляет около +2° С (Чусов Ю. H., 19S4; Турсунов M. М., 1987; Скрипалев В. С., 1988; Воронцова, И. М., 1990; Иванченко

B. Г., 1991.). Безусловно, при погружении в прорубь на несколько минут, ИКК не успевают охладиться до такой температуры так, как организм поддерживает постоянную температуру тела, но сигнал к клеткам может передаваться через температурные рецепторы. С другой стороны поверхностные слои кожи, где присутствуют ИКК, возможно могут охладиться до данной температуры. Для идентичности эксперимента на выделенные клетки охлаждались до температуры +2° С.

Для изучения были взяты: лимфоциты, как основные клетки, обеспечивающие формирование специфического (адаптивного) иммунного ответа, его клеточного и гуморального звеньев. Моноциты — как представители клеток, активно работающих в качестве факторов неспецифического (врожденного) иммунитета и связующих со специфическим иммунитетом в качестве антигенпрезентирующих клеток (АПК). И, наконец, нейтрофилы -основные представители клеточного компонента неспецифического иммунитета.

При изучении влияния различной экспозиции холодового воздействия на изолированные лимфоциты группы лиц, привычных к Холодовым воздействиям, и контрольной группы. Установлено: однократное охлаждение изолированных лимфоцитов в течение 5 минут при t+2°C не приводит к существенным изменениям соотношения клеточных детерминант, как в контрольной группе, так и в группе «моржей».

Однократное охлаждение изолированных лимфоцитов в течение 30 минут при t+2°C (таблица 2) в контрольной группе приводит к перераспределению клеточных детерминант в сторону достоверного снижения уровня маркеров CD38 и CD4. Это можно объяснить тем, что в данной группе после 30 минутной экспозиции количество жизнеспособных клеток в суспензии снизилось с 2,5x10е до 1,5x106, что, по-видимому, приводит к первоочередной гибели CD38+ и CD4+ лимфоцитов. Одной из возможных причин снижения уровня CD38+- и CD4+ может быть селективная чувствительность детерминант субпопуляции к холодовому воздействию. Это согласуется с мнением (Воронцов И.М. с соавт., 1991; Ветрова Ю.В. с соавт., 2000), которые указывают на первоочередную гибель популяции CD4+ при холодовом воздействии.

Таблица 2

Субпопуляцнонный состав лимфоцитов после охлаждения в течение 30 минут (t+2°C) in vitro (M±m>, (n»30)__■

маркер СД. ИЗМ контрольная группа группа «моржи»

ДО охлаждения охлаждение t+2°C. 30 минут до охлаждения охлаждение J+2°C. ' 30 минут

CD 38 % 18,41 ±0,07 16,98±0,34* 12,37±0,54 10,98±0,74 *

10"/л 0,46+0,15 0,25±0,02** 0,31 ±0,78 0,24±0,33

CDS % 23,05±0,74 36,81±0,86*** 26,81 ±0,86 39,94±0,5б**

Юй/л 0,58±0,13 0,55±0,11 0,67±0,28 0,87±0,24

CD 4 % 34,31 ±0,76 30,21 ±0,68»* 31.48±0,78 2 8,21 ±0,58 *

107л 0,88±0,26 0,45±0,13** 0,79±0,36 0,62±0,33

CD3 % 55,69±0,93 60,42±0,54 54,19*0,45 54,19±1,02

10% 1,39±0,58 0,91 ±0,41 1,35±0,18 1,19±1,29

CD 71 t- % 0 0 0 0

106/л 0 0 0 0

CD 25 % 1,85±0,18 2f43±0,25**» 2,28*0,21 3,57±0,15 *

lOVn 0,05±0,02 0,06±0,02 0,06±0,08 0,07±0,05

CD 16 % 14,74±0,87 20,12±1,25* 18,71 ±0,67 21,79±0,84 *

10"/л 0,43±0,23 0,48±0,18 0,46±0,14 0,47±0,28

HLADR % 7,42±0,22 5,87±0,54* 4,97±0,22 2f87±0,37 *

106/л 0,18±0,16 0,09±0,08 0,12±0,06 0,0б±0,01 **

Ki 67 % 0,47±0,13 5,13±0,32*** 0,63±0,)3 3,12±0,24***

10°/л 0,01±0,01 0.08±0,01*** 0,02±0,01 0,07±0,03 **

CD 95 % 3,00±0,49 5,67±0,24** 2,43±0,33 4,50±0,31**

10°/л 0,08±0,04 0,09±0,03 0,0б±0,02 0,1±0,01 **

достоверность различия no равнению с контролем* р<0,05;** р<0.01;*** р< 0.001

В группе «моржей» (таблица 2) однократное охлаждение (30 мин.) приводит к повышению уровней клеток - носителей маркеров С095, Кл 67 и достоверному снижению маркера НЬА-БЯ. Необходимо отметить, что количество жизнеспособных клеток не меняется. Это может свидетельствовать о более выраженной устойчивости изолированных лимфоцитов группы «моржей» к охлаждению.

Следующим этапом было определение пролиферативной активности лимфоцитов (РБТ) после предварительного охлаждения различной экспозиции.

После 5 минут охлаждения (таблица 3) в контрольной группе спонтанная митогенная активность увеличилась в 2 раза (р<0,01), с достоверным ростом после 30 минут охлаждения (р<0,001). В группе «моржей» спонтанная мито генная активность начинает расти лишь после 30 минутной холодовой экспозиции (р<0,001).

Таблица 3

Влияние длительности охлаждения на пролиферативный ответ в, РБТЛ в

Ед. измерения спонтанный ФГА конц.5 мкг/мл охлаждение при t-+2°C.

5 минут 30 минут

Контрольная группа % 32,3±2,8 75,0±4,8 * 72,5 ±5,1 * 98,6±5,4

«моржи» % 34,3±2,8 75,5±5,4 * 39,5± 3,1 75,2±4,8 **

достоверность различия по сравнению со спонтанным:* р«0,01;** р<0,001 достоверность различия по сравнению с кратковременным охлаждением # р<0,05

Следовательно, охлаждение изолированных лимфоцитов является отчетливым м итоге иным стимулом. Изменение пролнферативной активности изолированных лимфоцитов под влиянием холода (in vitro) зависит от длительности охлаждения и «входящей тренированности» макроорганизма к холоду.

Одной го ключевых характеристик иммунного статуса является соотношение Thl и Th2 активности. Репертуарным лимфокином Thl является у-ИНФ, a Th2 - ИЛ-4 (Козлов В.А., 2002; Симбирцев А.С., 1999; Тяжелова В.Г., 2003; Коненков В.И. с соавт., 2005).

Для дальнейшего исследования были взяты супернананты изолированных МИК сравниваемых групп после предварительной 5 н 30 минутной холодовой экспозиции при t° +2°С in vitro. Затем клетки инкубировали при температуре +37°С 72 часа, исследовали уровень у-ИНФ и ИЛ-4 в супернатзнтах.

Холодовая (5 мин.) экспозиция (диаграмма 3) приводит к значительному увеличению уровня у-ИНФ в контрольной группе (р<0,001) и снижению в группе «моржей» (р<0,001). Уровень ИЛ-4 показывает противоположную закономерность, достоверно снижается в контрольной группе (р<0,01) и увеличивается в группе «моржей» (р<0,01).

Таким образом; кратковременное охлаждение влияет на продукцию изолированными МНК репертуарных лимфокинов Thl и ТЬ2-ответа. Предварительное кратковременное кривоздействие модулирует продукцию у-ИНФ и ИЛ-4 изолированными МНК в зависимости от исходной адоптированности макроорганизма к холодовым нагрузкам.

Диаграмма 3

достоверность различия по сравнению с кратковременным охлаждением # р<0,001

Экспозиция 30 минутная приводит к снижению продукции у-ИНФ и увеличению уровня ИЛ-4 в контрольной группе, в группе «моржей» отмечен достоверный рост продукции у-ИНФ.

Таким образом: изолированные МНК в ответ на холодовую нагруз^, вне зависимости от длительности, секретнруют репертуарные лимфокины ТЫ, ТЬ2 активности в обратной закономерности. В группе «моржей» • увеличение, в контрольной • снижение.

Следующим этапом явилось выяснение динамики функциональной активности изолированных моноцитов в ответ на холодовую экспозицию «моржей» и контрольной групп.

Моноциты, полученные методом адгезии к пластику, подвергали различной холодовой экспозиции +2°С) от 5 до 60 минут с интервалом в 5 минут.

После 5 минут охлаждения (диаграмма 4) уровень функциональной активности по данным всех тестов (ЕА-РОМ, ЕА-фагоцнтоз, НСТ-тест в спонтанном и стимулированном варианте) возрастает. При более длительном охлаждении 30 минут имеет место достоверное по сравнению, как с контролем, так и пятиминутным охлаждением снижение функциональной активности.

Полученная закономерность характерна, как для опытной, так и контрольной группы.

Диаграмма 4

Динамика изменения функциональной активности моноцитов в зависимости от длительности охлаждения

* 13 10 ■

исходи ый 5 минут 10 минут 15 минут 20 минут 25 ' минут 30 минут 60 1 минут |

»— НСГ-спомтанный 7,2 14.8 10,15 м 7,1 73 5,9 0,9 |

-в— НСТ-стиму пиров анмый 8.3 16,3 12,9 9,1 8.2 8.3 6.7

-»Г- &-РОМ 13,7 гз.й 20,6 14,9 13.1 13.1 7,в 1.2 I

— ЕД-фагоцитоэ а.з 10,в 9,5 8,2 8.2 8.3 3,0 0.2 |

Таким образом, динамика функциональных проб моноцитов зависит от длительности охлаждения: однократное кратковременное охлаждение является фактором, активирующим функциональную активность моноцитов, а длительное - угнетающим.

Следующим этапом было изучение восстановления функциональной активности изолированных моноцитов после отогрева при ^ +37°С (шах 60 минут) с дискретным интервалом в 5 минут.

Диаграмма 5

ДжшЮ встают та ф)М»»Ш1ип« »поюст» ммдом • усядаихотогри! оослкртмрвмиив дкгадшяасрцщиатькгдяш

урям С 15мж*1 ГС 154Ш.»Э 7-С ЭОимЗ ГС те

(ивд № ив 5,11 «Л кда ад

13.» п,ю 7,К> »л 1ЗД шо

Димиы вкптакни ^инициальной «пвюеи ижк»та|)а|1ХИ1Л«^ва гиемАптмыюп) втаикнп в срэамвикьк груши

¡шю

достоверность различия по сравнению с предыдущим временным промежутком: р< 0,05*, р< 0,01* р< 0,001**'

На 5 минуте отогрева (диаграмма 5) приводит к понижению уровня всех функциональных проб (ЕА-РОМ, ЕА-фагоцитоз, НСТ-тест) ниже исходных параметров, затем отмечается рост показателей достигающих максимальных значений к 15 минуте отогрева, к 30 минуте отогрева показатели возвращаются к исходному уровню. Полученная закономерность характерна, как для опытной, так и контрольной группы. |

Таким образом: динамика восстановления функциональной активности изолированных моноцитов не зависит от исходной адаптированности к холоду макроорганизма.

Далее определялся предел максимально возможного количества циклов (30 минут охлаждение (10 +2°С) — 30 минут отогрев (^ +37°С)) для изолированных моноцитов группы «моржей» в сравнении с' контрольной группой.

Диаграмма б

Установлено, что при циклическом воздействии моноциты ведут себя различно (диаграмма 6), в зависимости от тренированности организма к холоду. Исходный уровень функциональной активности по данным всех тестов (ЕА-РОМ, ЕА-фагоцитоз, НСТ-тест) в изучаемой группе достоверно выше, чем в контрольной группе, что может свидетельствовать о более высокой активности, в том числе и рецепгорного аппарата моноцитов. Примечательно, что в контрольной группе снижение функциональной активности моноцитов постепенное и не регистрируется на четвертом цикле, в группе «моржей», уровень, плавно снижаясь, сохраняется до восьмого цикла, что вероятно связано с функциональными особенностями изолированных моноцитов макроорганизма адаптированного к периодическим Холодовым воздействиям.

Диаграмма 7

фтмифмргая«!« ««шипа ждан пр»р (№« иядонуммадти

-ЩРг

я» т к г ,1

*''/s\У-: .^^''^v+v+i

'-гЬ^У^

tiwn i 1 1 < J I J t им _I"»_.

$ummwh цжчнетм ими ииижи чм» я юр* ■pop м юмга мрима qymt

KTJU 14 11

-»-([«ршидиач-ири:

При угасании функциональной активности (диаграмма 7) отмечается тотальная гибель моноцитов с массовой экспрессией проапоптотического маркера CD95 и снижение уровня маркера Ki67, что может свидетельствовать о запуске механизмов программируемой гибели клеток, поскольку антиген CD95, экспрессируется на активированных моноцитах/макрофагах и является акцептором проапоптотических сигналов и трансдуктором сигнала апоптоза (Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В., 2002; Черных Е.Р. с соавт., 2004 Swain S.L., 1995; Schwartz R.H., 1996; Baryshnikov A.Yu. et al., 1997). Снижение уровня маркера Ki67 у исследуемых клеток свидетельствует о подавлении пролнферативной активности, поскольку Ki67 — ядерный антиген, активных фаз клеточного цикла Gl, G2, S, М. (Петров С.Б., Киясов А.П., 1998).

На следующем этапе эксперимента изучали особенности реагирования функциональной активности изолированных нейтрофилов в зависимости от длительности охлаждения.

Метаболическая (НСТ-тест), рецепторная (ЕА-РОН) активность и интенсивность фагоцитоза (ФИ 120 мин.) (таблица 4) изолированных нейтрофилов при кратковременном охлаждении (в течение 5 минут t° +2°С) в контрольной группе достоверно растет, В группе «моржей», в отличие от контрольной группы ФИ 120 мин снижается. Фагоцитарная активность (ФЧ 30 мин.) снижается в обеих группах. Следует отметить, что количество жизнеспособных клеток в суспензии в группе «моржей» после 5 минутного охлаждения не уменьшилось по сравнению с исходным содержанием. Б контрольной группе жизнеспособность клеток снизилась в 1,5 раза (5,0±0,2 и 3,25*0,03; р< 0,05).

Таблица 4

Изменение функциональной активности нейтроф ильных лейкоцитов при кратковременном и длительном охлаждении в группе «моржей» по сравнению с

Покамт ели ед. юм Исходный уровень охлаждение |®+2°С

Зминут 30 минут

Контрольная группа «моржи» : Контрольная группа «моржи» Контро льная группа «моржи»

НСТ сп. % 8,4*0,4 4,&кО,Ш 12,5*1,7 * 4,8*0,Ш 0 0

НСТ ст. % 39,6*1,4 23,6*|,5Й# 49,2*2,3 * 24,4*1,8 и 0 0

ЕА-РОН % 60,2*1,5 52,2*2.5 ■ 75,0*1,3 * 55.9*1,3 и 0 0

ФИ ЗОмии. % 82,0*2,3 79,8*3,3 82,6*1,7 72,1*1,5 0 0 .

ФИ 120 мин. % 72,6*2,1 92±2,1# 89,4*2,8* 76,2*1,8+ 0 0

ФЧ 30 мин. Ед. 2,1*0,19 2,16*0,09 1,1*0,09* 1,4*0,09+ 0 0

ФЧ 120 мин. Ед. ],£±ОД1 2,6*0.21# 2,2*0,21 0 0

достоверность различия по сравнению с исходным уровнем в контрольной группе: * р< 0,05 достоверность различия по сравнению с исходным уровнем в группе «моржей»: + р< 0,01 достоверность различия между группами сравнения: Ш р< 0,05, ##р< 0,01

После длительного охлаждения (30 минут при ^+2°С) функциональная активность изолированных нейтрофилов в отличие от изолированных моноцитов не определяется, как в контрольной группе, так и в группе «моржей».

Таким образом: изолированные моноциты более криоустойчивы, нежели нейгрофилы.

Следующим этапом было изучение ответа нейтрофилов на циклы (охлаждение - отогрев), по схеме 5 минут холод (1°+2"С)) 5 минут тепло (1°+37°С). В результате исследований получено следующее: в отличие от контрольной группы, где жизнеспособность клеток уменьшается уже после первого цикла (5,0±0,2 и 3,0±0,09 соответственно; р<0,05), в группе «моржей» количество жизнеспособных клеток в суспензии снижется лишь на третьем цикле (на 10-15%, после четвертого-25-30%, пятого-45-55%, шестого- 60-70%, после седьмого цикла жизнеспособность составила 0,4%).

После каждого цикла исследовалась функциональная активность нейтрофилов, В труппе «моржей» имеет место постепенное снижение уровня метаболической активности нейтрофилов в течение восьми циклов. До третьего цикла активность не меняется, а с третьего по восьмой отмечено достоверное снижение уровня показателей. В контрольной группе уровень НОТ - теста после первого цикла возрастает, в последствии снижается постепенно, и не

определяются на пятом цикле. Рецепторная активность нейтрофилов в группе «моржей» изменяется аналогично контрольной группе, единственное отличие составляет количество циклов шесть в контрольной группе и восемь в группе сравнения. Фагоцитарная активность нейтрофилов в контрольной группе после первого цикла возрастает, резко снижается ко второму циклу, затем постепенно снижается к пятому циклу. В группе «моржи» отмечается резкое снижение фагоцитарной активности ко второму циклу, затем постепенное к восьмому.

НеЙтрофилы «моржей», как и моноциты, более устойчивы охлаждению и выдерживают семь циклов при пяти в контрольной группе.

Полученные результаты могут быть свидетельством того, что ИКК могут быть носителями памяти стереотипа реагирования на не специфическое воздействие, наряду с прочими физиологическими механизмами, к таковым с уверенностью можно отнести и температурный фактор.

выводы.

1. У лиц, подвергающихся периодическим низкотемпературным воздействиям, формируется достоверно отличающийся от контрольной группы иммунный статус. Отличия заключаются в понижении уровня СО 4+ клеток и активационных клеточных детерминант СО 35 и НЬА ОК, снижении активности фагоцитоза, активации гуморального звена (повышение уровня иммуноглобулинов класса М и (3). [

2. Погружение в ледяную воду в группе лиц, адаптированных к периодическим Холодовым воздействиям, приводит к достоверному увеличению в периферической крови общего числа Т-лимфоцитов (СО 3+) и активационно -пролиферативных маркеров (Кг 67 и СО 95), со значительным увеличением сывороточной концентрации ИЛ -4. В группе неадаптированных достоверно снижается уровень СО 3+ клеток, при этом наблюдается рост уровня натуральных киллеров (СО 16+), экспрессия маркеров К1 67 и СБ 95, на фоне роста концентрации у-ИНФ.

3. Популяции изолированных ИКК по-разному реагируют на длительность холодовой экспозиции. Кратковременное охлаждение является фактором, активирующим функциональную активность моноцитов и нейтрофилов, а длительное угнетающим. Длительное охлаждение лимфоцитов в группе «моржей» приводит к перераспределению клеточных детерминант в сторону достоверного повышения уровней клеток - носителей маркеров С095, К! 67, снижению НЬА ОЯ +, в контрольной группе снижению уровня маркеров СОЗЗ и С04,

4. ИКК являются носителями памяти стереотипа реагирования макроорганизма на температурный фактор. Так в группе лиц, чей организм периодически подвергается экстремальному криовоздействию изолированные моноциты и нейгрофилы достоверно более устойчивы к «циклам» «холод» -«тепло», чем моноциты и нейгрофилы лиц, ране не подвергавшихся периодическим экстремальным холодовым нагрузкам.

5. Спонтанная митогенная активность изолированных лимфоцитов в реакции бласттрансформации зависит от исходной тренированности макроорганизма к криовоздействиям, лимфоциты группы «моржей» отвечают двукратным повышением спонтанной митогенной активности после 30 минут холодовой экспозиции в отличие от контроля, где двукратное повышение спонтанной митогенной активности отмечается после 5 минут.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1.При лабораторном обследовании лиц, подвергающихся периодическим низкотемпературным воздействиям, необходимо учитывать отличительные особенности иммунного статуса.

2. При планировании закаливающих процедур, либо лечебных мероприятий сопряженных с криовоздействием {криосауна, азототерапия), необходимо учитывать особенности иммунного статуса, как лиц привычных к периодическим Холодовым нагрузкам, так и непривычных и производить подбор режима криовоздействия с учетом этих особенностей.

3. Рекомендовать криопроцедуры с целью не медикаментозной коррекции иммунного статуса лиц, с признаками иммунной недостаточности осуществив предварительно индивидуальный подбор режима коррекции на изолированных ИКК in vitro.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Костоломова, Е. Г. Влияние холодового воздействия на морфофункциональные состояния мононуклеарных клеток (МНК) в культуре / Ю.Г. Суховей, С.А. Петров, Л.А. Береснева, И.Г. Унгер // Материалы 6-й отчетной конференции ГУ НИИКИ СО РАМН. - Новосибирск, 2003. - С. 8085 .

2. Суховей, Ю. Г. Особенности питания и иммунобиологическая реактивность организма у коренных народов Крайнего Севера / Л.А. Береснева., С.А. Петров, И.Г. Унгер, Е.Г. Костоломова // Материалы б-й отчетной конференции ГУ НИИКИ СО РАМН. - Новосибирск, 2003. - С. 211-215

3. Костоломова Б.Г. Влияние холодового воздействия на функциональное состояние моноцитов периферической крови человека / Ю.Г.СуховеЙ, С.А. Петров, Л.А. Береснева, И.Г. Унгер // Материалы международной конференции, посвященной 95-летию со дня рождения П.И. Мельникова «Криосфера земли как среда жизнеобеспечения». - Пущино, 26-28 мая 2003 г. -С. 154-155.

4. Суховей, Ю. Г. Изменение иммунного статуса при погружении в ледяную воду лиц, занимающихся «моржеванием» / A.B. Попов, Е.Г. Костоломова // Материалы международной конференции, посвященной 95-летию со дня рождения П.И. Мельникова «Криосфера земли как среда жизнеобеспечения», - Пущино, 26-28 мая 2003 г. - С. 159-160.

5. Попов, А. В. Динамика показателей иммунного статуса до н после погружения в ледяную воду у лиц, занимающихся зимним плаванием / Ю.Г Суховей, С.А. Петров, Е.Г. Костоломова // Медицинская иммунология. -2003. - том 5, № 3-4. - С. 383-384

6. Кале нова, Л. Ф. Влияние цикла «холод-тепло» на иммунную систему у мышей / Ю.Г. Суховей, A.B. Попов, Т.А. Фишер, Е.Г. Костоломова // International Journal on Immunorehabilitation. - 2003. - Т. 5, № 2. - C.160

7. Суховей, IO. Г. Соотношение уровней сывороточных концентраций ИФН-у и ИЛ-4 при экстремальном холодовом воздействий / A.B. Попов, Е.Г. Костоломова // International Journal on Immunorehabilitation. - 2003. - Т. 5, № 2.-C.161

8. Костоломова, Е. Г. Чувствительность моноцитов периферической крови человека к температурным циклам / Ю.Г. Суховей, И.Г. Унгер, С.А. Петров, A.B. Попов J1.A. Береснева // International Journal on Immunorehabilitation. -2003. — Т. 5, Ks 2. — С. 161

9. Попов, А. В, Концентрация сывороточных ИНФ-у и ИЛ-4 при реактивации туберкулезной инфекции в зависимости от частоты ОРВИ в анамнезе / Ю. Г. Суховей, Е.Г. Костоломова // International Journal on Immunorehabilitation. — 2003.-Т. 5,№2.-C. 206

10. Суховей. Ю. Г. Дифференцированная чувствительность имму некомпетентной клетки к циклам тепло-холод / Е.Г. Костоломова, С.А. Петров, A.B. Попов // Иммунология' Урала (материалы • III конференции иммунологов Урала, 16-17 октября, г. Челябинск).-2003.1(3). -С. <52

11. Суховей Ю.Г. Влияние гигготермического воздействия ледяной воды на иммунные характеристики адаптированных лиц / Попов A.B., Костоломова Е.Г. // Иммунология Урала (материалы III конференции иммунологов Урала, 16-17 октября, г. Челябинск). - 2003. - № 1(3). - С. 62-63

12. Костоломова, Е. Г. Влияние различных температурных режимов на функциональную активность моноцитов пациентов с повышенной частотой возникновения воспалительных заболеваний / Суховей Ю.Г., Унгер И.Г., Петров С.А. //Материалы международной конференции «Криосфера нефтегазоносных провинций», посвященная 60-летию Тюменской области, 22-27 мая 2004 г., г. Тюмень. - С. 27.

13. Костоломова, Е. Г. Криопротекгорные свойства полиоксидония in vitro/ Суховей ЮТ., Петров СЛ., Унгер И.Г. //Russian Journal of Immunology (тезисы докладов объединенного иммунологического форума, 31 мая - 4 июня 2004 г., г. Екатеринбург). - 2004. - Vol. 9. - Supplement 1. - С. 271

14. Орлова, Т. В. Влияние исходного базисного состояния иммунной системы на эффективность вакцинации от гриппа / Суховей Ю.Г., Костоломова Е.Г. //Russian Journal of Immunology (тезисы докладов объединенного иммунологического форума, 31 мая — 4 июня 2004 г., г. Екатеринбург). — 2004. - Vol. 9. — Supplement l.-C. 342

15. Суховей, Ю. Г. Криотерапия в практике врача клинициста (методические рекомендации). / Сахаров С.П., Орлова Т.В., Унгер И.Г., Костоломова Е.Г. -Тюмень, 2005. - 26 с.

16. Костоломова, Е. Г. Криоустойчивость нейтрофильных лейкоцитов в эксперименте при различных иммунопатологических состояниях / Унгер И .Г., Орлова Т.В., Суховей Ю.Г. //Иммунология Урала, - 2005. - № 1 (4). - С. 15-16

17. Костоломова, Е, Г. Влияние режимов криовоздействия на способность ИКК к пролиферации и продукции цитокинов (in vitro) / Унгер И.Г. // Материалы международной конференции «Теория и практика оценки криосферы земли и прогноз ее изменений».- 2006.- Т.2.- С.345.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

АОК - антител ообразующий комплекс

АПК - антигенпрезенгирующие клетки

ВИДС — вторичные иммунодефицитные состояния

ГЗТ — гиперреакция замедленного типа

ЕК, NK - натуральные киллеры j

ИДС - иммунодефицитное состояние

ИКК - иммунокомпетентные клетки

ИН - иммунная недостаточность

ИЛ, IL - интерлекин

ИФН - интерферон i

КК - коэффициент корреляции

МКА - моноклональные антитела

МНК — мононуклеарные клетки

НСТ — нитросиний тетразолий

ОРВИ - острые респираторно-вирусные инфекции

ОРЗ — острое респираторное заболевание

ПЭГ - полиэтиленгликоль 6000

Т-лф — Т-лимфоциты

ТФ ГУ «НИИКИ»* СО РАМН - Тюменский филиал государственного

учреждения «Научно-исследовательский институт клинической иммунологии»

Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

ТюмГНГУ — Тюменский государственный нефтегазовый университет

ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы

ФГА — фитогемаглютинин

ФИ - фагоцитарный индекс

ФЧ — фагоцитарное число

ЧДБ — часто и длительно болеющие

ЭБ — эритроциты барана

ЭТС — эмбриональная телячья сыворотка

F - Коэффициент значимости действия факторов

СО — кластер дифференцировки

CR - рецептор комплемента

HLA — Human Leucocyte Antigens

Ig — иммуноглобулин

P - коэффициент достоверности

Костоломова Елена Геннадьевна (03.00.13 - физиология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 09.11.2006 г. Тираж 100 экз. Печать цифровая. Заказ № 103 Отпечатано в РА ООО «МКТ Тюмень» 625013, г. Тюмень, ул. 50 лет Октября, 62А корп. 2

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Костоломова, Елена Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Особенности функционирования иммунной системы в условиях природного холода.

1.2. Закаливание - модель криовоздействия на организм человека.

1.3. Исследование температурного воздействия на иммунную систему in vivo» и «in vitro».

1.4. Клеточные факторы иммунной системы, как объект исследования.

ГЛАВА 2. КОНТИНГЕНТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Контингент обследованных.

2.2. Иммунологические методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Сравнительная характеристика иммунного статуса любителей зимнего плаванья («моржи») и контрольной группы.

3.2. Влияние погружения в ледяную воду на изменение параметров иммунной системы лиц, адаптированных и неадаптированных к периодическому воздействию холода.

3.2.1. Влияние погружения в ледяную воду на показатели иммунного статуса лиц, адаптированных к периодическому воздействию холода.

3.2.2. Влияние погружения в ледяную воду на показатели иммунного статуса лиц, впервые подвергшихся погружению в ледяную воду.

3.3. Характеристика влияния различных режимов криовоздействия на изолированные ИКК in vitro в контрольной группе.

3.3.1. Характеристика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов после охлаждения при t+2°C.

3.3.1.1. Характеристика влияния различных по длительности режимов криовоздействия на способность к пролиферации и продукции цитокинов МНК in vitro.

3.3.2. Влияние различных режимов криовоздействия на функциональную активность моноцитов

3.3.3. Влияние различных режимов криовоздействия на функциональную активность нейтрофильных лейкоцитов.

3.4. Характеристика влияния различных режимов криовоздействия на изолированные ИКК «моржей» in vitro.

3.4.1. Характеристика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов после охлаждения при t+2°C в группе «моржей».

3.4.1.1. Сравнительная характеристика влияния различных по длительности режимов криовоздействия на способность к пролиферации и продукции цитокинов МНК «моржей» in vitro

3.4.2. Сравнительная характеристика влияния различных температурных режимов на функциональную активность моноцитов «моржей» in vitro.

3.4.3. Сравнительная характеристика влияния различных температурных режимов на функциональную активность нейтрофилов в группе «моржи» in vitro.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток при различных режимах криовоздействия"

Проблема активизации защитных сил организма немедикаментозными средствами - одна из важнейших в современной медицине и физиологии (Виноградова Т. В., 1988, 2002; Лущицкиий М. А. с соавт. 1981; Аржакова Л. И.,2000).

Известно, что в качестве средств, активно влияющих на иммунную систему, могут выступать факторы внешней среды, среди которых одним из наиболее значимых является холод (Анохин П. К., 1980; Слоним А. Д., 1986; Казначеев В. П. 1980; Медведев В. И., 1984; Агаджанян Н. А. 1984; Сороко С. И., 1984; Агаджанян Н. А., 2001).

О влиянии низких температур на организм человека с целью оздоровления известно давно. Более того, существует естественная «модель» влияния периодически повторяющихся холодовых воздействий - лица, увлекающиеся зимним плаванием, - «моржи» (Бутов М. А., 1983, 1984; Воронцов И. М. с соавт., 1991; Гуцалов Ю. П., с соавт., 1978; Гаркави Л. X. с соавт., 1979; Зиньков Ю. И., Смирнов Т. В., Иванов В. Т., 1970; Лазаренко П. В., Симонова Т. Г., Якименко М. А., 1985; Марачев А. Г., 1977; Ногаллер А. М., Бутов М. А., Калыгина Т. А., 1984; Темнюк А. М., 1976). Однако, совокупность конечных эффектов холодового воздействия, не только положительных (Бутов М. А., 1984; Ногаллер А. М. с соавт., 1984; Литасова Е. Е. с соавт., 1997; Морозов В. Н., с соавт., 1999), но и отрицательных (Эмирбеков Э. 3. с соавт., 1998., Воронцов И. М. с соавт., 1991; Ветрова Ю. В. с соавт., 2000; Аржакова Л. И., 2000, 2003), в большей мере обусловлена реакцией иммунной системы (Коненков В. И., 1992; Евсеева И. В., Алексеев Л. П., 2001; Черешнев В. А. с соавт., 2001).

Безусловно, большинство эффектов экстремального закаливания обеспечиваются вовлечением практически всех систем организма (Гаркави Л. X., с соавт., 1989; Анохин П. К., 1980; Козлов В. А., 2002).

Хорошо известно, что развитие адаптивных изменений метаболизма и функций связано с повышением эффективности как химической, так и физической терморегуляции и обеспечивается перестройкой путей активации адренергической системы регуляции (Лукоянов Ю. Е., 1989; Иванов К. П., 1980; Морозов В. Н., Фризен В. Э., 1999; Ветрова Ю. В. с соавт., 2000; Козырева Т. В., 2003; Солонин Ю. Г., Кацюба Е. А. 2003). При постоянном действии холода развивается активация мозгового слоя надпочечников (Никулина Н. С. с соавт., 1991; Козырева Т. В. с соавт., 2003; Therminarias А., Chirpaz M.F., Tanche М.,1975), что, в свою очередь, приводит к активации жирового (Баженов Ю. Ш., с соавт., 1998) и углеводного обмена (Морозов В. Н., Фризен В. Э., 1999; Ветрова Ю. В. с соавт., 2000). В развитии метаболической реакции на холод значительную роль играют и тиреоидные гормоны и гипоталамо-гипофизарная система (Божко А. П., Городецкая И. В., 1991; 1994; Барашков В. А., Фомин, В. Н., 1994; Максимов А. Л., Горбачев А. Л., 2001, 2003; Madden K.S., Felten D.L., 1995). При периодическом действии холода изменяются режимы активности холодовых рецепторов, развивается их демобилизация (Данилова Н. К., 1992; Козырева Т. В., с соавт., 1979; 1987; 1992; Ефес Е. Д., 1992; Арокина Н. К., Кузьмина Н. В., 1993; Jessen R., 1981; Van Someren R. N. M., Colesh.aw S. R. E., Mincer P. J., 1982; Brenner I., 1999), снижается порог чувствительности (Бочаров М. И., Сорока С. И., 1992), возрастают васкуляризация и кровоток (Темнюк А. М., 1976; Николаева Л. Я., Глико Л. И., 1993; Ананьев В. Н. с соавт., 2001; Солонин Ю. Г., Кацюба Е. А. 2003). Однако иммунологическим механизмам уделяется не достаточно внимания (Аржакова Л. И. 2000; Морозов В. Н., Фризен В. Э., 1999; Ветрова Ю. В. с соавт., 2000).

Холодовое воздействие имеет ряд характеристик, наиболее значимыми из которых являются интенсивность (температура), длительность и периодичность (повторяемость) воздействия (Барбараш Н. А., 1996). Сочетания этих параметров определяют «режим» воздействия. Именно режим холодового воздействия в первую очередь должен определять ответную реакцию организма в целом и иммунологических механизмов в частности.

Поскольку патогенетические механизмы реагирования иммунной системы на влияние различных режимов криовоздействия не достаточно изучены, то конечные эффекты плохо предсказуемы, следовательно, могут быть использованы с лечебно - профилактической целью лишь условно.

Изучение особенностей реагирования иммунной системы в целом и отдельных ИКК в частности на различные режимы холодового воздействия (кратковременное и длительное, слабое и интенсивное, однократное и повторяющееся, in vivo и in vitro) позволит разработать не только оптимальные режимы криовоздействия для повышения общей резистентности организма, но и способы избирательного регулирования иммунного ответа для более успешного лечения заболеваний, в патогенезе которых значимую роль играют иммунные нарушения.

Это позволило сформулировать цель и задачи. ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Изучить влияние различных режимов криовоздействия на сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток. ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. Оценить влияние погружения в ледяную воду на изменения параметров иммунной системы лиц, адаптированных к периодическим Холодовым воздействиям (группа «моржей») в сравнении с группой неадаптированных (контрольная группа).

4. Изучить динамику функциональной активности моноцитов и нейтрофилов при циклическом холодовом воздействии в группе «моржей» по сравнению с контрольной группы (in vitro). НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые проведено комплексное исследование характера влияния периодического холодового воздействия на показатели иммунного статуса любителей зимнего плаванья - группа «моржей». Установлено, у любителей зимнего плавания формируется иной, отличный от контрольной группы тип поддержания здоровья. Особенность заключается в перераспределении рецепторно-субпопуляционных маркеров лимфоцитарно-клеточного звена, повышении уровня иммуноглобулинов классов М и G на фоне снижения уровня ЦИК (3,5 %) и достоверно более низких цифр интенсивности фагоцитоза нейтрофилов и активности кислородзависимого метаболизма моноцитов.

Впервые проведен сравнительный анализ параметров иммунной системы «практически здоровых» и «моржей» в ответ на погружение в ледяную воду. Привычное погружение (в группе «моржей») в ледяную воду приводит к увеличению абсолютного и относительного содержания активированных лимфоцитов (Ki67+) и CD95 позитивных клеток, зрелых Т-лимфоцитов, повышению уровня сывороточного IL-4. При первом погружении (контрольная группа) увеличивается уровень CD16+; Ki67+ и CD95+ клеток, снижается число CD3+ лимфоцитов, на фоне снижения IL-4, отмечен рост уровня сывороточного INF-y.

Впервые проведено комплексное исследование влияния различных по длительности, интенсивности и периодичности температурных режимов на функции иммунокомпетентных клеток (ИКК) (in vitro) в зависимости от исходной тренированности макроорганизма. Установлено, что ИКК обладают различной чувствительностью к количеству циклических холодовых воздействий in vitro в зависимости от исходной тренированности макроорганизма.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Различия физиологических реакций ИКК на криовоздействие (in vitro) позволяют использовать данный феномен в качестве дополнительного критерия при выявлении возможной устойчивости макроорганизма к Холодовым нагрузкам, в частности лиц, работающих вахтовым методом в районах Крайнего Севера. ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. У любителей зимнего плавания формируется иной тип иммунного статуса, проявляющийся в перераспределении активационно-пролиферативной составляющей лимфоцитарно-клеточного звена, повышении уровня иммуноглобулинов классов М и G на фоне уменьшения крупномолекулярных ЦИК, снижения интенсивности фагоцитоза нейтрофилов и активности кислородзависимого метаболизма моноцитов.

2. Реакция иммунной системы на эпизод холодового воздействия зависит от «тренированности» макроорганизма.

3. ИКК являются носителями памяти стереотипа реагирования макроорганизма на холодовое воздействие.

ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ И ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 17 печатных работ. СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Костоломова, Елена Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. У лиц, подвергающихся периодическим низкотемпературным воздействиям, формируется достоверно отличающийся от контрольной группы иммунный статус. Отличия заключаются в понижении уровня CD 4+ клеток и активационных клеточных детерминант CD 38 и HLA DR, снижении активности фагоцитоза, активации гуморального звена (в виде повышения уровня иммуноглобулинов класса М и G).

2. Погружение в ледяную воду в группе лиц, адаптированных к периодическим Холодовым воздействиям (группа «моржи»), приводит к достоверному увеличению в периферической крови общего числа Т-лимфоцитов (CD 3+) и активационно - пролиферативных маркеров (Ki 67 и CD 95), со значительным увеличением сывороточной концентрации ИЛ -4. В группе неадаптированных (контрольная группа) достоверно снижается уровень CD 3+ клеток, при этом наблюдается рост уровня натуральных киллеров (CD 16+), экспрессия маркеров Ki 67 и CD 95, на фоне роста концентрации у-ИНФ.

3. Популяции изолированных ИКК по-разному реагируют на длительность холодовой экспозиции. Кратковременное охлаждение является фактором, активирующим функциональную активность моноцитов и нейтрофилов, а длительное угнетающим. Длительное охлаждение лимфоцитов в группе «моржей» приводит к перераспределению клеточных детерминант в сторону достоверного повышения уровней клеток -носителей маркеров CD95, Ki 67, снижению HLA DR +, в контрольной группе к снижению уровня маркеров CD38 и CD4.

4. ИКК являются носителями памяти стереотипа реагирования макроорганизма на температурный фактор. В группе лиц, чей организм периодически подвергается экстремальному криовоздействию изолированные моноциты и нейтрофилы достоверно более устойчивы к «циклам» «холод» - «тепло», чем моноциты и нейтрофилы лиц, ране не подвергавшихся периодическим экстремальным Холодовым нагрузкам.

5. Спонтанная митогенная активность изолированных лимфоцитов в реакции бласттрансформации зависит от исходной тренированности макроорганизма к криовоздействиям. Лимфоциты группы «моржей» отвечают двукратным повышением спонтанной митогенной активности после 30 минут холодовой экспозиции в отличие от контроля, где двукратное повышение спонтанной митогенной активности отмечается после 5 минут.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1.При лабораторном обследовании лиц, подвергающихся периодическим низкотемпературным воздействиям, необходимо учитывать отличительные особенности их иммунного статуса.

2. При планировании закаливающих процедур, либо лечебных мероприятий, сопряженных с криовоздействием (криосауна, азототерапия), необходимо учитывать особенности иммунного статуса, как лиц привычных к периодическим Холодовым нагрузкам, так и непривычных и производить подбор режима криовоздействия с учетом этих особенностей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Костоломова, Елена Геннадьевна, Тюмень

1. Абу Али Ибн Сина. Канон врачебной науки. Избранные разделы. / Абу

2. АлиИбн Сина. -М.: Ташкент. -Ч. 1.- 1994.

3. Абрамов, В. В. Взаимодействие иммунной и нервной системы / В. В

4. Абрамов. Новосибирск. Наука. - 1988. - 166 с.

5. Авцын, А. П. Введение в географическую патологию / А. П. Авцын. М.:1. Медицина, 1972.

6. Авеличев, О. Н. Напряженность противоинфекционного иммунитета уаборигенов и приезжих жителей Чукотки : автореферат дисс. канд. мед. наук / О. Н. Авеличев. Владивосток. - 1976. - 24 с.

7. Агаджанян, Н. А. Физиологические и социальные аспекты адаптациичеловека к экстремальным условиям / Н. А. Агаджанян // Узловые вопросы физиологии.- Томск. 1984. - С. 47- 63.

8. Агаджанян, Н. А. Экологическая физиология: проблемы адаптации истратегия выживания / Н. А. Агаджанян // Материалы X международного симпозиума « Экологические проблемы адаптации» М.: Изд-во РУДН, 2001.-С. 5-12.

9. Адаскевич, В. П. Дерматозы эозинофильные и нейтрофильные / В. П.

10. Адаскевич, О. Д. Мяделец. М.: Медицинская книга. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2001.-278 с.

11. Адо, А. Д. Борьба материализма в учении о здоровье и болезни человека /

12. А. Д. Адо, Г. И. Царегородцев. М.:1970.

13. Аржакова, Л. И. Влияние адаптогенов на функциональную активность клеток иммунной и кроветворной систем при холодовом воздействии: автореф. дис. канд. биол. наук. / Л. И. Аржакова. Новосибирск, 2000. -23 с.

14. Арокина, Н. К. Влияние охлаждения с помощью льда на импульсную активность Холодовых терморецепторов кожи / Н. К. Арокина, Н. В. Кузьмина // Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1993. - Т. 76. - №12. -С. 44 -50.

15. Баженов, Ю. Ш. Влияние адаптации к холоду на липидный обмен итранспортные функции мембран скелетных мышц белых крыс / Ю. Ш. Баженов, Л. П. Горбачева, В. Б. Ритов // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 1998. - № 1 -2. - С. 96 -102.

16. Барашков, В. А. Адаптивные реакции организма на мышечные нагрузки ихолод при гипо- и гипертиреозе / В. А. Барашков, В. Н. Фомин // Физиология человека. 1994. -№20. - С. 76 - 79.

17. Барбараш, Н. А. Адаптация к холоду / Н. А. Барбараш // Успехи физиологических наук. 1996. - Т. 27. - №4. -С. 116-132.

18. Барышников, А. Ю. Иммунологические проблемы апоптоза / А. Ю. Барышников, Ю. В. Шишкин.- М.: Медицина. 2002. - 320 с.

19. Бахов, Н. И. Концепция апоптоза / Н. И. Бахов, Ю. Ф. Майчук, А. В. Корнев // Иммунология. 1997. - № 3. - С. 62 - 64.

20. Бережная, Н. М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз / Н.М. Бережная / Киев: Наук, думка, 1988. 189 с.

21. Береснева, Л. А. Влияние типов питания на иммунный статус коренных народов Ямала: автореф. дисс.кандидата мед. наук. Тюмень. - 2005. -С. 96.

22. Берстон М. Гистохимия ферментов: пер. с англ. / М. Берстон.- М., 1965.-С.247 -248.

23. Бобров, Н. И. Научные основы закаливания организма / Н. И. Бобров, О. П. Ломов, В. П. Тихомиров // Военно медицинский журнал « Красная звезда». - 1979. -№7. - С. 25 - 29.

24. Божко, А. П. Значение тиреоидного статуса организма в реализации адаптационного эффекта холода / А. П. Божко, И. В. Городецкая // Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1994. - Т. 80. - №3. - С. 28 -37.

25. Бочаров, М. И. Изменение температурной чувствительности у человека в процессе адаптации к холоду и гипоксии / М. И. Бочаров, С. И. Сорока // Физиология человека.- 1992.-Т. 18.-ЖЗ.-С. 157-162.

26. Бутов, М. А. Эритропоэз при закаливании к холоду / М. А. Бутов // Физиология человека. 1983. - Т. 9. - №3. - С. 497-499.

27. Бутов, М. А. Занятие в секции закаливания как средство восстановления функционального состояния организм, после трудового дня / М. А. Бутов // Гигиена труда и проф. Заболевания. 1984. -№1. - С. 43 - 44.

28. Васильева, Г. И. Кооперативное взаимодействие моно-полинуклеарных фагоцитов, опосредованное моно и нейтрофилокинами / Г. И. Васильева, И. А. Иванова, С. Ю. Тюкавина // Иммунология. - 2000. - №5. — С. 11-17.

29. Виноградова, Т. В. Зависимость уровней циркулирующих иммунных комплексов от функционального состояния фагоцитирующей системы: дисс.канд. мед. наук.-М., 1988.

30. Виноградова, Т. В. Функциональная клиническая иммунология -перспективное направление современной науки / Т. В. Виноградова, Д. В. Стефании, Е. А. Ружицкая, А. В. Семенов, В. С. Сухоруков // Иммунология. 2002. -№3. - С. 166.-166.

31. Воронцов, И. М. Влияние закаливания на показатели иммунитета у часто болеющих детей / И. М. Воронцов, И. С. Подосинников, А. Е. Блинов, О. П. Турина, JI. М. Сорокина // Вопросы охраны материнства и детства. -1991. -№10.-С. 3-8.

32. Воронцова И. М. Закаливание детей с применением интенсивных методов / И. М. Воронцова, JI. А. Беленький. Спб., 1990. - 27 с.

33. Гаркави, JI. X. Адаптационные реакции и резистентность организма / JI. X. Гаркави, Е. Б. Квакина, М. А. Уколова. Ростов на Дону, 1989. -241 с.

34. Гельфгат, Е. JI. Процессы активации в Т-системе иммунитета у жителей различных регионов страны / Е. JI. Гельфгат, В. И. Коненков, А. Р. Крайнов // Иммунология. 1990. - №2. - С. 57-60.

35. Герцог, О. А. Роль провоспалительных цитокинов в патогенезе ревматоидного артрита / О. А. Герцог, С. В. Сенников. Новосибирск, Наука.-2004.-С. 215-228.

36. Григорьева, В. Д. Новые методические аспекты применения криотерапии, ультразвука, магнитотерапии и лечебной гимнастики в реабилитации больных гонартрозом / В. Д. Григорьева, Н. Е. Федорова // Вопр. курортол. -1996.- № 2.- С. 26-28.

37. Гриневич, Ю. А. Кинетика образования розеток клетками крови и небных миндалин, больных хроническим тонзиллитом при взаимодействии с сенсибилизированными эритроцитами барана in vitro / Ю. А. Гриневич // ЖМЭИ. 1974. - №1. - С. 97-101.

38. Гуцалов, Ю. П. Влияние холодового стресса на некоторые показатели крови, гемодинамики и дыхания / Ю. П. Гуцалов, Т. А. Хлебутина, В. И. Кравцов, Н. И. Распонина // Здравоохранение Казахстана. -1978. №3. -С. 42-43.

39. Данилова, Н. К. Структура импульсной активности холодовыхтерморецепторов при ее различных уровнях / Н. К. Данилова // Нейрофизиология. -1992. Т. 24. -№5. - С.559-565.

40. Добродеева, JI. К. Влияние природных факторов Севера на эндокринную и иммунную системы организма / JI. К. Добродеева, А. В. Ткачев // Материалы 18-го Съезда физиологов. Казань, 2001. - С. 509-510.

41. Долгушин, И. И. Нейтрофилы и гомеостаз / И. И. Долгушин, О. В. Бухарин. -Екатеринбург: УрО Ран, 2001. 278 с.

42. Дреслер К. Иммунология: словарь / К. Дреслер. Киев, 1988. - С. 161-162.

43. Дроздова, Т. Г. Клинико-иммунологическая характеристика описторхозау детей: автореф. дис. канд. мед. наук / Т. Г. Дроздова. Новосибирск, 1987.- 19 с.

44. Евнин, Д. Н. Использование теста на Р-белки для выявления соматической патологии при обследовании производственных коллективов / Д. Н. Евнин, А. Я. Кульберг, Л. М. Бартова // Новые методы прогноза патологического процесса. М.: 1991. -40 с.

45. Евсеева, И. В. Иммуногенетическая характеристика коренных народностей Севера Европейской территории России / И. В. Евсеева, М. Н. Болдырева, Е. А. Грудакова // Иммунология . 2001. - № 5. - С. 7-9.

46. Евсеева, И. В. Генетический полиморфизм генов иммунного ответа I класса в коренных популяциях Европейского Севера России / И. В. Евсеева, С. Уэллс, С. Тонкс, Дж. Бодмер // Иммунология . 2001. - № 5. -С. 12-15.

47. Ефес, Е. Д. Механизм влияния симпатической нервной системы на рецепторы кожи / Е. Д. Ефес // Нейрофизиология. 1992. - Т. 24. - №5. -С. 552-559.51.3айдфудим, П. X. Коренные народы Севера на рубеже тысячелетий / П. X.

48. Иегер, Л. Клиническая иммунология и аллергология / Л. Иегер. М.: Медицина, 1990.

49. Казначеев, В. П. Современные вопросы адаптации / В. П. Казначеев. -Новосибирск: Наука, 1980. 192 с.

50. Каленова, Л. Ф. Влияние цикла « холод-тепло» на иммунную систему у мышей / Л. Ф. Каленова, Ю. Г. Суховей, А. В. Попов, Т. А. Фишер, Е. Г. Костоломова // International Journal on Immunorehabilitation.-2003. -Т. 5. -№2.-С. 160.

51. Кетлинская, О. С. Провоспалительные цитокины в патогенезе офтальмогерпеса : автореф. дисс. канд. мед. наук. / О. С. Кетлинская. -СПб.: 1995.-С. 22.

52. Климович, В. Б. Дискуссионные аспекты эволюционной иммунологии / В. Б. Климович // Мед. Иммунология. 2002. -Т.4. - №2. - С. 123-124.

53. Козиоров, М, С. Влияние закаливания на процессы компенсации при экспериментальном малокровии / М. С. Козиоров // Материалы конференции на проблемы адаптации, тренировок и другим способам повышения устойчивости организма. 1962. - С. 154.

54. Козлов, В. А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов / В. А. Козлов // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1. -№1. -С.5-8.

55. Козырева, Т. В. Влияние адаптации к холоду на импульсную активность кожных рецепторов / Т. В. Козырева, М. А. Якименко // Физиологический журнал, 1979. -Т.65. №11.-С. 1598-1602.

56. Козырева, Т. В. Концентрация ионов кальция в крови и температурная чувствительность в норме и при адаптации организма к холоду / Т. В. Козырева, А. Я. Тихонова, А. П. Ткаченко, И. Н. Синдаровская // Физиология человека, 1987.-Т. 13.-№1.-С.149-151.

57. Козырева, Т. В. Модуляция функциональных свойств терморецепторов кожи / Т. В. Козырева // Нейрофизиология. 1992. - Т. 24. - №5. -С. 542551.

58. Колпаков, А. Р. Механизмы адаптации человека и животных к холоду / А.

59. Р. Колпаков, П. Е. Влощинский, Н. Т. Колосова // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. 1993. -№8. -С. 29-31.

60. Коненков, В. И. Иммуногенетический анализ последствий лучевых поражений / В. И. Коненков, Т. В. Михеенко, И. В. Кашаба // Тезисы докладов I съезда иммунологов России. Новосибирск -1992.- С. 233234.

61. Кривошапкин, В. Г. Питание основа формирования здоровья человека на Севере / В. Г. Кривошапкин, В. П. Алексеев, В. Л. Осаковский, Г. А. Тимофеев // Мир Севера. - 2002. - № 1.- С. 5-8.

62. Кривцова, Л. А. Иммуногенетика и клинические варианты хронического описторхоза у детей: дис.док. мед. наук/Л. А. Кривцова. 1993. -357с.

63. Криоиммунология / Под ред. Цуцаевой А. А. Институт проблем криобиологии и медицины. АН Украины. Киев: Наукова Думка. -1991.-176с.

64. Крылов, А. А. О влиянии географической широты местности на показатели крови / А. А. Крылов // Военно медицинский журнал. -1967.-№6.-С. 33-35.

65. Куликов, В. Ю. Кислородный режим при адаптации человека на крайнем Севере / В. Ю. Куликов, Л. Б. Куликов. Новосибирск. - 1987. - 159 с.

66. Лазаренко, П. В. Терморегуляторные реакции у любителей зимнего плавания / П. В. Лазаренко, Т. Г. Симонова, М. А. Якименко // Физиология человека. 1985. -Т.П. - №6. -С. 1030 - 1032.

67. Лебедев, К. А. Иммунная недостаточность (выявление и лечение) / К. А. Лебедев, И. Д. Понякин.- М.: Медицинская книга; Н-Новгород: НГМА. -2003. 243с.

68. Литасова, Е. Е. Клиническая физиология искусственной гипотермии / Е. Е. Литасова, Ю. А. Власов, Г. Н. Окунева, А. М. Караськов, В. Н. Ломиворотов. Новосибирск, Наука. Сиб. Предприятие РАН, 1997. -565с.

69. Лукоянов, Ю. Е. Практика рационального закаливания: определение холодовой биодозы с помощью дистантной термографии / Ю. Е. Лукоянов // Педиатрия. -1989. №12. - С. 82-83.

70. Майстрах, Е. В. Патологическая физиология охлаждения человека / Е. В. Майстрах.- Ленинград: Медицина, 1975. -216 с.

71. Майстрах, Е. В. Физиология терморегуляции / Е. В. Майстрах. -Л.: Наука, 1984. -222 с.

72. Максимов, А. Л. Физиолого-морфологические особенности формирования тиреоидного статуса у аборигенного и приезжего населения

73. Магаданской области / A. J1. Максимов, А. Л. Горбачев // Физиология человека. 2001. - Т. 27. - №4. - С. 85.

74. Макрушин, А. В. Эволюционные предшественники онкогенеза и старческой инволюции / А. В. Макрушин // Успехи геронтологии . -2004.-Т. 13.-С. 32-43.

75. Малов, Ю. С. Параметры гомеостаза показатели здоровья / Ю. С. Малов // Клиническая медицина. - 1999. - №3.- С.56-60.

76. Матаев, С. И. Характеристика структуры питания тундровых ненцев Крайнего Севера в зависимости от состояния иммунной системы / С. И. Матаев, Ю. Г. Суховей, С. А. Петров, И. Г. Унгер, Г. А. Аргунова // Вопросы питания. 1997. №4. - С. 7-12.

77. Матюшов, В. Б. Элекрофоретическая подвижность эритроцитов крови крыс при адаптации организма к воздействию низкой температуры / В. Б. Матюшов, В. Г. Шамратова, А. Р. Ахунова // Цитология . 1996. -Т.38. -№11.-С. 1171-1173.

78. Марачев, А. Г. Эритропоэз и его регуляция у жителей севера / А. Г. Марачев // Физиология человека. 1977. - Т. 3. - №6. -С. 1036.

79. Медведев, В. И. О проблеме адаптации / В. И. Медведев // Компонентыадаптационного процесса. -JL: Наука, 1984. С. 3-16.

80. Меерсон, Ф. 3. Адаптационная медицина: концепция долговременной адаптации / Ф. 3. Меерсон. М.: Дело, 1993. - 301 с.

81. Мигдалович, М. Г. Клиническое значение иммунорегулирующей функции нейтрофилов крови больных описторхозом до и в динамике после лечения бильтрицидом: автореф. дис. канд. мед. наук / М. Г. Мигдалович. -Челябинск, 1995. 27 с.

82. Морозов, В. Н. Адаптационные способности организма человека к длительному воздействию холодового раздражителя / В. Н. Морозов, В. Э. Фризен // Вестник новых медицинских технологий. -1999. -Т. VI. -№1.-С. 84-87.

83. Морозов, В. Н. Диагностика адаптивных процессов у лиц, подверженных длительному холодовому воздействию / В. Н. Морозов, А, А, Хадарцев, Ю. В. Карасева, В. И. Морозова, А. В. Хапкина // Клиническая лабораторная диагностика. -2001. №11. -С. 22- 23.

84. Мурузкж, Н. Н. Физиологические параметры иммунного статуса пришлого населения трудоспособного возраста г. Надыма Ямало-Ненецкого автономного округа: автореф. дис.канд. биол. Наук / Н. Н. Мурузюк.- Тюмень, 2005. 26с.

85. Насонова, В. А. Справочник по ревматологии: 2-е изд. / В. А. Насонова. -Л.: Медицина, 1983. 25 с.

86. Николаева, Л. Я. Состояние сердечно-сосудистой и иммунной систем у моряков в период плавания / Л. Я. Николаева, Л. И. Глико // Военно-медицинский журнал, 1993. №2.

87. Никулина, Н. С. влияние охлаждающей водной среды на гормональный статус организма человека / Н. С. Никулина, К. М. Карлышев, А. Ф. бобров, М. А. Верхонин, В, П. Лапшин // Физиология человека. -1991. -Т. 17.-№2. С. 99-105.

88. Новиков, В. С. Состояние резистентности организма у участников полярных экспедиций / В. С. Новиков, С. И. Сороко, В. X. Хавинсон, С. Б. Шевченко // Физиология человека. -1991. -Т. 17.-№2. С. 106-111.

89. Новиков, В. С. Иммунофизиология экстремальных состояний / В. С. Новиков, В. С. Смирнов // СПБ.: Наука, 1995. 198 с.

90. Новиков, В. С. Острая гипотермия: физиологические и судебно-медицинские аспекты / B.C. Новиков. СПб.: Наука, 1997. - 152 с.

91. Ногаллер, А. М. Иммунологическая резистентность и адаптационные реакции при закаливании холодом / А. М. Ногаллер, М. А. Бутов, Т. А. Калыгина // Советская медицина. 1984. - № 1. -С. 92-94.

92. Норкин, М. Н., Лепнина, О. Ю., Тихонова, М. А. // Мед. Иммунология. -2000.-Т. .-С. 35-42.

93. Озернюк, Н. Д. Механизмы адаптации / Н. Д. Озернюк. -М.: Наука, 1992. -272 с.

94. Орлов, Г. А. Хроническое поражение холодом / Г. А. Орлов. Л.: Медицина, 1978. - 168 с.

95. Осипов, С. Г., Еремеев, В. В.// Лаб. Дело. -1983. №11. - С. 3-7.

96. Пауков, В. С. Взаимоотношения «местного» и «общего» в воспалении / В. С. Пауков, О. Я. Кауфман // Арх. Патологии. 1998. - №7. - С.7-16.

97. Петричук, С. В. Динамика интегральной оптической плотности MX лимфоцитов при выявлении активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) у детей на фоне лечения // С. В. Петричук, В. М. Шищенко // Педиатрия, 2003.-Т.7. -№2.

98. Петров, С. Б. Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека (руководство для врачей морфологов / С. Б. Петров, А. П. Киясов. -Казань: Дом печати, 1998. -166с.

99. Покровский, В. И. Иммунология инфекционного процесса / В. И. Покровский, С. П. Гордиенко, В. И. Литвинова.- М.: 1994. -494с.

100. Пол, У. Иммунология, (пер. с англ.) / У. Пол. М.: Мир.-1987.-С.375-413.

101. Поплетеева, С. Закаливание / С. Поплетеева // Диабетический образ жизни. 2000. - № 3-4 - С. 89 - 95.

102. Попов, А. В. Динамика показателей иммунного статуса до и после погружения в ледяную воду у лиц, занимающихся зимним плаванием / А. В. Попов, Ю. Г. Суховей, С. А. Петров, Е. Г. Костоломова // Медицинская иммунология. 2003. - Т. 5.- № 3-4. - С. 383-384.

103. Попов, В. А. О физиологических сдвигах в организме здоровых лиц в Арктике / В. А. Попов // Клин. мед. 1965. - № 1. - С. 43-44.

104. Практическая криомедицина / Под ред. В. И. Грищенко, Б. П. Сандомировского. Киев, 1987.

105. Программное обеспечение. Интегрированный пакет «SPSS 7,5» for Windows.

106. Просцевич, О, Д. Исследование функций перетониальных макрофагов при адаптации организма к дозированному тепловому фактору / О. Д. Просцевич, Л. С. Соловьев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2002. - №4. - С.5-8.

107. Ройт, А. Иммунология: пер. с анг. / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. -Изд-во « Мир».- 2000. 592 с.

108. Самолетов, Н. С. Комплексная оценка иммунного статуса здорового человека в динамике проживания в Заполярье / Н. С. Самолетов, А. П. Колесников, Н. В. Цурган, О. А. Колобова. Норильск, 1976.

109. Сапин, М. Р. Иммунная система человека / М. Р. Сапин, JI. Е. Этинген. -М.: Медицина, 1996.

110. Сахно, JI. В., Леплина, О. 10., Норкин, М. Н. //Бюллетень экспериментальной биологии.-2000. Т. 130. - С. 402-406.

111. Сенников, С. В. альтернативный сплайсинг в формировании полиморфной структуры системы цитокинов / С. В. Сенников, А. Н. Силков, В. А. Козлов. Новосибирск: Наука, 2004. - 23с.

112. Сепиашвили, Р. И. Основы физиологии иммунной системы / Р. И. Сепиашвили. М.: Медицина, 2003. - 240 с.

113. Ш.Симбирцев, А. С. механизмы иммуностимулирующего действия интерлейкина 1/ А. С. Симбирцев // Мед. иммунология. 1999. - Т.1. -№3-4.-С. 133-134.

114. Смольникова, М. В. Коненков, В. И. // Мед. иммунология. 2001. -Т.З. -№3.-С. 379-389.

115. Слоним, А. Д. Эволюция терморегуляции / А. Д. Слоним. Л.: 1986. -76с.

116. Солонин, Ю. Г. Терморегуляция и кровообращение у лиц зрелого возраста при кратковременных экстремальных температурных воздействиях / Ю. Г. Солонин, Е. А. Кацюба // Физиология человека. -2003. Т.29. - №2. - С. 67-74.

117. Сороко, С. И. нейрофизиологические механизмы индивидуальной адаптации человека в Антарктиде / С. И. Сороко.- J1.: 1984. 152с.

118. Степанова, Т. Ф. Системный клинико-эпидемиологический подход к организации крупномасштабных оздоровительных мероприятий при описторхозе: дисс.докт. мед. наук/Т. Ф. Степанова. 1998.-254с.

119. Суховей, Ю. Г. Функциональное состояние иммунной системы при воспалительных заболеваниях часто и длительно болеющих лиц : дис.док. мед. наук / Ю. Г. Суховей .- 1998.-222 с.

120. Суховей, Ю. Г. К вопросу о температурной регуляции энантиостаза иммунной системы / Ю. Г. Суховей // Материалы международной конференции « Теория и практика оценки криосферы Земли и прогноз ее изменений». Т.2. - Тюмень, ТюмГНГУ, 2006. - С.368-369.

121. Темнюк, А. М. Гемокардионамика малого круга кровообращения у занимающихся зимним плаванием / А. М. Темнюк // Врачебное дело. -1976. №1. -С.46-49.

122. Теплова, С. Н. Секреторный иммунитет / С. Н.Теплова, Д. А. Алексеев // Челябинск.-2002.- 200с.

123. Ткачев, А.В. Особенности здоровья человека на Севере / А.В. Ткачев, J1.K. Добродеева, Ф.А. Бичкаева // В сборнике: Север как объект комплексных региональных исследований. Сыктывкар.- 2005. - С. 151176.

124. Тотолян, А. А. Клетки иммунной системы / А. А. Тотолян, И. С. Фрейдлин. СПб.: Наука, 2000. - 231 с.

125. Трунова, Г. В. Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии // Г. В. Трунова, В. В. Краснова, О. В. Макарова, М. Н. Пожарицкая. М.,2003.

126. Трунова, Г. В. Морфофункциональная характеристика популяций тучных клеток у мышей BALB/C и C57BI/6 при холодовом воздействии / Трунова, Г. В. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,2004. Т. 138.-№8.-С. 188-190.

127. Турсунов, М. М. Патогенетические основы врачебной тактики при частых ОРЗ у детей: автореферат / М. М. Турсунов. М.: 1987. - С. 18.

128. Тяжелова, В. Г. Механизмы активации лимфоцитов периферической крови / В. Г. Тяжелова. М.: Наука, 2003. - 192с.

129. Унгер, И. Г. Патогенетически значимые иммунобиохимические критерии вероятности рецидивирования острых воспалительных заболеваний в стадии ремиссии: автореф. дис. канд. мед. наук. / И. Г. Унгер. Тюмень, 2001. - 21 с.

130. Фрейдлин, И. С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функция / И. С. Фрейдлин // Мед. иммунол. 2005. - Т.7. -№4. - С.347-354.

131. Фримель, Г. // Иммунологические методы исследования. М.: Медицина.-1987.

132. Хаитов, Р. М. Экологическая иммунология / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, X. И. Истамов. М.: ВНИРО, 1995. - 218 с.

133. Хаитов, Р. М. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. 2000. -№5. -С. 4-7.

134. Хаитов, Р. М. Оценка иммунного статуса в норме и при патологии / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология, 2001. № 4. - С. 61 -64.

135. Хаитов, Р. М. Система генов HLA и регуляция иммунного ответа / Р. М. Хаитов, JI. П. Алексеев //Аллергия, астма и клиническая иммунология.2002.-№8.- С.7-16.

136. Черешнев, В. А. Физиология иммунной системы и экология / В. А. Черешнев, Н. Н. Кеворков, Б. А. Бахметьев // Иммунология. 2001.- № З.-С. 12-16.

137. Черных, Е. Р., Норкин, М. Н. Леплина, О. Ю. // Мед. иммунология. -1999.-Т.1.-С. 45-51.

138. Черных, Е. Р., Леплина, О. Ю., Тихонова, М. А. // Мед. иммунология.2003. -Т.5. С. 529-538.

139. Черных, Е. Р. Система цитокинов. Теоретические и клинические аспекты / Е. Р. Черных, О. Ю. Леплина, М. А. Тихонова и др. // Под ред. акад. РАМН Козлова В. А., проф. Сенникова С. В. Новосибирск.: «Наука»,2004. 325с.

140. Чернышев, И. С. Криотерапия приходит в наш дом / И. С. Чернышев // Мед. газета. -1997. -№101.

141. Чиркин, В. В. Вторичные иммунодефициты / В. В. Чиркин, В. Ф.

142. Семенков, В. И. Карандашов.- М.: Медицина, 1999. 246 с. 164. Шубик, В. М. Иммунная система человека в экстремальных климатоэкологических условиях / В. М. Шубик, С. В. Петленко, В. С.

143. Смирнов // Иммунодефицитные состояния. Под ред. Смирнов B.C., Фрейдлин И.С. СПб: «Фолиант», 2000. - 568 с.

144. Щеголева, JI. С. корреляционные иммунно- гормональные взаимосвязи у человека на Севере / JI. С. Щеголева, Л. К. Добродеева // Иммунология Урала.-2001 .-№1 (1).-С.100-101.

145. Щеголева, Л. С. Результаты исследования иммунного статуса у человека в условиях Севера / Л. С. Щеголева, Л. К. Добродеева // Иммунология. -2003.-№3.-С. 177-180.

146. Эмирбеков, Э. 3. Влияние многократного холодового перекисного окисления липидов на антиоксидантную систему тканей / Э. 3. Эмирбеков. 1998.

147. Ярилин, А. А. Молекулярные основы межклеточной кооперации при иммунном ответе / А. А. Ярилин // 2-й Национальный конгресс РААКИ. Сб. трудов 21-24 сентября 1998 года Москва С. 59-80.

148. Ярилин, А. А. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3 / А. А. Ярилин, А. Д. Донецкова // Иммунология. 2006. - №3. - С. 176.

149. Baryshnikov, A. Yu. Fas(APO-l/CD95) antigen.new activation marker for evalution of the immune status. / A. Yu. Baiyshnikov, E. R. Polosukhina, T. N. Zabotina. et al.// Russian J. Immunol. 1997. - N2. - P. 115-120.

150. Brenner, К. M., Castellani J.W., Gabaree C., Young A. J., Zamecnik J., Shephard R. J., Shek P.N. Immune changes in humans during cold exposure: effects of prior heating and exercise. -1999. №87 (2).- P.699-710.

151. Divekar, H. M. New experimental model for the evaluation of aadaptogenic products / H. M. Divekar, S. K. Graver, K.K Srivastava. 1990. -№29. -P.-275-281.

152. Elhasid, R., Etzioni, A. // Major histocombility complex class 11 deficiency: adinical review. Blood Rev. 1996. - Dec; 10(4): 242-8.

153. Geerstma, M. F. Role of pulmonary surfactant in the antibacterial functions of human monocytes. Leiden. 1993.

154. Hanson, D. F. Fever, Temperature and the immune response // Ann. N. Y. Acad. Sci. Thermoregulation. Ed. С. M. Blatteis. 1997. - N.813. - P.453-464.

155. Herrmann, F., Cannistra, S. A. Levine, H. Expression of interleukin-2 receptors and binding of interleukin-2 by gamma interleukin-inducedhuman leukemic and normal monocytic cells // J. exp. Med. 1985. - V. 162. -N.-3. P. 1111-1116.

156. Hoch S., Schur P.H. // Arthr. And Rheum. 1981.- Vol. 24, N 10.- P. 12681277.).

157. Jessen, R. Independent clamps of peripheral and central temperatures and their effects on heat production in the goat // J. Phisiol. (Gr. (Brit.), 1981.-Vol.311.- P. 11-12.

158. Kabelitz, D. Allreactivity and apoptosis in graft rejection and transplantation tolerance / D. Kabelitz, N. Zavazava // Biol, 2000. P. 167-174.

159. Kaufman S., Citron B.A., , Milstien S., Naylor E.W., Greene C.L., Davis M.D. Mutation in the 4a-carbinolamine dehyd- ratase gene leads to mild hyperphenylalaninemia with defective cofactor metabolism. // Am. J. Hum. Genet., 1993.-V.53.-P. 768-774.

160. Kruger, C. Serum CD 14 levels in polytraumatized and severely burned patients / C. Kruger, C. Schott, U. Obertacke, T. Joka // Clin. Exp. Immunol. 1991. - V. 85. - N. 2. -P. 297-301.

161. Leb L., Crusberg Th., Forter N., Snyder L.M. III. immunol. Meth.- 1983.-Vol. 58, N 3- H. 309-321.

162. Lenardo, M. J., Boehme, S., Chen, L. et al. // Int. Rev. Immunol. 1995. -Vol.-13.-P. 115-134.

163. Madden, К. S. Experimental basis for neural-immune interactions / K. S. Madden, D. L. Felten //Physiol. Rev. 1995. - N.75. - P.77-106.

164. Merglay, D., De Neve M. Lumbale hypermobiliteit: waar zwemmen hydrotherapie wordt // Acta Belg. Med. Phisica. 1990. - V. 13.- N.4. -P.201-208.

165. Munker, R., Lubbert, M., Yonehara S et al. Expression of the Fas antigen on primary human leukaemia ctlls. // Ann. Hematol. 6 - 1995. - Vol. 70. -P.15-17.

166. Nasise, M. P., English R.V., Tompcins M.B. et al. Immunological, ahistological and Viriligical Features of Herptvirus-Induced Stromal Keratitis in cats. //Amer. J. vet.res., 1995. Vol 56. - Oss 1, P. 51-55.

167. Park B.N., Fikring S.M., Smithwick E.M. Infektion and nitroblue tetrasolium reduction by neutrophils a diagnostic aid // lancet. 1968. Vol. 2, N.-7567. P. 532-534.

168. Peteiro-Cartelle F.J., Alvarez-Jorge A. Dynamic profiles of interleukin-6 and the soluble form of CD25 in burned patients // Burns. 1999. V. 25. - P. 487491.

169. Reiner, N. Altered cell signaling and mononuclear phagocyte deactivationduring intracellular infection //Immunol. Today. 1994. - Vol. 15.-P. 374-380.

170. Rokita, E., Menzel,E. J. Characteristics of CD 14 shedding from human monocytes. Evidence for the competition of soluble CD 14 (s CD 14) with CD 14 receptors for lipopolysaccharide(LPS) binding. //ARMIS.-1997. Vol. 105. - N 7. - P. 510-588.

171. Russell, J. H. // Curr. Opin. Immunol. 1995. - Vol.7. - P. 382-388.

172. Schleter, В., Konig W., Koller M. at al. Differential regulation of T- and B-lymphocyte activation in severely burned patients //J. Trauma. 1991. - Vol. 31.-N2.- P. 239-246.

173. Schwartz R. H. //j. exp. Med.-1996. Vol. 184. - P. 1-8.

174. Sheehab Eldin S.A., Aref S.S., Salama O.S. Assessment of certain neutrophil receptors, opsonophagocytosis and soluble intercellular adgesion molecule (1СAM-1) following thermal injury.// Burns. 1999. - V 25. - N 5. - P. 395401.

175. Swain S. L. // Immunologist. 1995. - Vol. - 3. - P. 209-211.

176. Teodorczyk-Injeyan J. A., Sparkes B.G., Mills G.B., Peters W.J.Immunosuppression follows systemic T lymphocyte activation in the burn patient. // Clin. Exp. Immunol.-1991.- V.85.-N.3.-P.515-518.

177. Teodorczyk-Injeyan J.A., Sparkes B.G., Lalani S. IL-2 regulation of soluble IL-2 receptor levels following thermal injury // Clin. Exp. Immunol.-1992.-V.90.-N.1.-P.36-42.

178. Therminarias A. Calorigenic effect of epinephrine in the dog. // In: Depressed metabolism and cold thermogensis / A. Therminarias, M. F. Chirpaz, M. Tanche // Ed. L. Janksy. Prague, 1975. P. 55-58.

179. Van Someren R. N. M. Restoration of thermoregulatory response to body cooling by cooling hands and feet /R. N. M. Van Someren, S. R. E. Colesh. Aw, P. J. Mincer//J. AppL Physiol., 1982. Vol.53-. -P. 1228-1233.

180. Watanabe, I., Ichihashi H., Tanabe Sh., Amano M., Miyazaki N., Petrov E.A., Tatsukawa R. Trace element accumulation in Baikal seal ( Phoca sibirica) from the Lake Baikal // Environ. Pollut, 1996. N.-866.-Vol.94.

181. Wahle M., Greulich Т., Baerwald C. G. et al. // Immunobiology. 2005. -Vol. 210. - N. 1. - P.43-52.

182. Wender, H.J., Paker C. W. Lymphocyte activation // Prog. Allergy. 1976.-V.20.-P.-195-300.

183. Whiteside T. L. Gooding immune gene therapy trials: potential application to leukemia and lymphoma // Blood Cells Mol. Dis. 2003. - Vol. 31. - N. - 1. -P. 63-71.

Информация о работе

Костоломова, Елена Геннадьевна
кандидата биологических наук
Тюмень, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Сопряженность иммунофизиологических реакций макроорганизма и изолированных иммунокомпетентных клеток при различных режимах криовоздействия - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы