Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы крысы

Масалов, Игорь Сергеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы крысы
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы крысы"

МАСАЛОВ ИГОРЬ СЕРГЕЕВИЧ

СЕРОТОНИНЕРГИЧЕСКАЯ МОДУЛЯЦИЯ СИНАПТИЧЕСКОЙ ПЕРЕДАЧИ В ДОРСОЛАТЕРАЛЬНОМ ЯДРЕ АМИГДАЛЫ КРЫСЫ

03.03.01 - Физиология

АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 2011

! 4 АПР 2011

4843866

Работа выполнена в лаборатории эволюции межнейронного взаимодействия (заведующий лабораторией - доктор медицинских наук, член-корреспондент РАН Н.П.Веселкин) Института эволюционной физиологии и биохимии имени И.М. Сеченова РАН.

Научный руководитель: кандидат биологических наук,

ведущий научный сотрудник Е.А. ЦВЕТКОВ

Ведущая организация: Институт физиологии им. И.П.Павлова РАН (Санкт-Петербург)

Защита состоится «12» апреля 2011 г. в часов на заседании

кандидатского совета Д.002.127.01 Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН по адресу: 194223, г. Санкт-Петербург, пр. М. Тореза, 44.

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

Н.П. ЕРОФЕЕВ

доктор биол. наук

Н.Я. ЛУКОМСКАЯ

Автореферат разослан <<Ц» ма РТА 2011 года

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

М.Н. Маслова

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Модуляция синаптической передачи является одним из важнейших фундаментальных механизмов, обеспечивающих функционирование центральной нервной системы. В основе этого механизма лежат процессы, связанные с действием различных нейромедиаторов и нейромодуляторов: глутамата, ГАМК, допамина, норадреналина, ацетилхолина, серотонина на пре- и постсинаптическом уровне (Николлс и др., 2003). Особый интерес у современных исследователей вызывает серотонинергическая модуляция синаптической передачи. Известно, что серотонин регулирует многие системы головного мозга, в том числе лимбическую, ответственную за формирование эмоциональных состояний у человека и млекопитающих (ЬеИоих, 2000).

Одним из элементов лимбической системы является амигдала (миндалина) - подкорковая структура головного мозга. Многочисленные исследования свидетельствуют о том, что в функциональном плане амигдала отвечает за экспрессию страха, тревоги и агрессии, выработку аверсивных условно-рефлекторных реакций, а также формирование эмоциональной памяти (Атитэ е1 а1., 2005). Сенсорная информация о внешнем мире поступает в амигдалу через ее дорсолатералыюе ядро, на клетках которого происходит широкая конвергенция входов из различных зон сенсорной коры больших полушарий, ядер таламуса и многих других структур мозга (ЬеОоих, 2000; ЬеБоих е1 а1., 1990; БаЬ сЧ а1., 2003; Тяу^коу е1 а1., 2004). Одной из важнейших функций дорсолатерального ядра амигдалы является первичная обработка сенсорной информации, поступающей в амигдалу, ее фильтрация и передача в нижележащие ядра амигдалы для дальнейшей обработки (ЬеОоих, 2000; Рккапеп е1 а1., 1997). Регуляция этой функции крайне важна для нормальной работы всей амигдалы в частности и лимбической системы в целом.

В настоящий момент имеются данные о том, что в процессе регуляции первичной обработки сенсорной информации, поступающей в дорсолатеральное ядро амигдалы, серотонин может играть значительную роль (LeDoux, 2000; Radja et al., 1991; Stutzmann and LeDoux, 1999; Stutzmann et al., 1998). Свидетельством в пользу этого является тот факт, что нейрональные элементы получают обильные серотонинергические входы из дорсальных ядер шва ствола мозга (Sadikot and Parent, 1990), а на мембранах амигдалярных нейронов обнаружены серотошшовые рецепторы различных типов (Radja et al., 1991; Sadikot and Parent, 1990). Также имеются данные о том, что некоторые современные высокоэффективные антидепрессанты такие, как флуокситин (прозак), пароксетин (паксил), сертралин (золофт), флуоксамин (феварин) и др, действие которых основано на блокаде обратного захвата серотонина, модулируют эмоциональные состояния, связанные с функциями амигдалы (Fournier et al., 2010). Высокая эффективность этих фармакологических препаратов является дополнительным свидетельством того, что серотонин играет особую роль в генезе многих психопатологических состояний человека.

Таким образом, на сегодняшний день изучение роли серотонина в модуляции синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы представляется актуальным. Полученные сведения могут быть полезны для более глубокого понимания механизмов функционирования этой структуры, механизмов модуляции ее активности, а также механизмов коррекции некоторых эмоциональных расстройств, связанных с активностью амигдалы.

В связи свышеизложенным перед выполнением данной работы были поставлены следующие задачи:

• Изучить синаптическую активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы.

• Изучить влияние серотонина (5-НТ) на амплитудно-частотные

характеристики миниатюрных спонтанных постсинаптических трансмембранных токов проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы

• Изучить воздействие серотонина на амплитуду постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных стимуляцией кортикальных афферентных возбуждающих входов в амигдалу.

• Исследовать роль рецепторов серотонина различных типов в модуляции синаптических входов на проекционные нейроны дорсолатерального ядра амигдалы крысы.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЙ.

Результаты исследований, проведенных на переживающих фронтальных срезах головного мозга крысы показали, что аппликация серотонина приводит к уменьшению частоты, но не оказывает влияния на амплитуду глутамат- и ГАМКергических миниатюрных спонтанных постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах. Это свидетельствует о серотошшергической модуляции синаптической активности проекционных нейронов на пресинаптическом уровне. Впервые было показано, что серотонин уменьшает амплитуду глутаматергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных электрической стимуляцией кортико-амигдалярных афферентных волокон, входящих в амигдалу в составе наружной капсулы, а также уменьшает амплитуду ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных электрической стимуляцией тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы. Таким образом, были впервые получены данные о модулирующем действии серотонина на миниатюрные возбуждающие и тормозные постсинаптические токи, а также на постсинаптические токи на мебранах проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы,

вызванные стимуляцией кортико-амигдалярных волокон. С помощью антагонистов серотониновых рецепторов были идентифицированы типы 5-НТ рецепторов, ответственные за эффекты серотонина на синаптическую активность проекционных нейронов. Установлено, что блокада 5-НТ| 2 рецепторов малеатом метилсергида подавляет модулирующее действие серотонина на амплитуду вызванных постсинаптических токов проекционных нейронов, а блокада 5-НТ34 рецепторов не оказывает действия па эффекты серотонина на синаптическую активность проекционных нейронов.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

Серотонин оказывает модулирующее действие на возбуждающие и тормозные постсинаптические токи, регистрируемые на мембране проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

Модуляция серотонином возбуждающих и тормозных постсинаптических токов проекционных нейронов осуществляется за счет активации 5-Ш\2 рецепторов, локализованных на тормозных интернейронах и аксонах кортико-амигдалярных волокон.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ.

вклад в понимание механизмов регуляции сигнального взаимодействия нервных клеток и роли серотошша в модуляции синаптической передачи. Полученные результаты впервые характеризуют механизм серотонинергической модуляции возбуждающей и тормозной синаптической активности проекционных нейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы и имеют существенное значение для понимания нейронных механизмов функционирования амигдалы. Результаты настоящей работы могут быть использованы для дополнения и уточнения уже имеющихся данных о роли серотонина в регуляции синаптической передачи в центральной нервной системе млекопитающих.

АППРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Материалы диссертации были доложены и обсуждены на следующих научных собраниях: на Двенадцатой Всероссийской медико-биологической конференции молодых ученых (С-Петербург, 2009); на XXI съезде Физиологического общества им. И.Павлова (Калуга, 19-25 сентября 2010 г.)

ПУБЛИКАЦИИ: Основные результаты диссертации отражены в пяти публикациях, 3 в журнальных статьях и 2 в материалах конференций.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ: Диссертация состоит из введения, 4 глав, выводов и списка цитированной литературы. Изложена на 162 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 рисунками и 3 таблицами. Библиография включает 226 наименований.

МЕТОДИКА И ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ.

В качестве модельного препарата в настоящем исследовании использовались переживающие фронтальные срезы головного мозга крысы

линии Вистар. Исследование проводилось на фронтальных срезах головного мозга 20-25 дневных крыс. Для извлечения мозга, крысу декапитировали, после чего вскрывали черепную коробку и в охлажденном до 5°С растворе №1 (таблица 1) извлекали головной мозг. Далее после отсечения ствола мозга и мозжечка оставшийся фрагмент головного мозга, содержащий в себе амигдалу, крепили с помощью цианоакрилатного клея на платформе вибротома. Фронтальные срезы толщиной 250-300 мкМ изготавливались на вибротоме HM650V (Microm, США) в аэрируемом карбогеном (95% 02 и 5% С02) растворе №1 (табл. 1) при температуре 5-10°С.

Для электрофизиологических экспериментов использовали срезы, включающие дорсолатеральное ядро амигдалы. Соответствующие срезы выбирались визуально и после этого перемещались в электрофизиологическую камеру и фиксировались там скобой с нейлоновыми нитями. Объем камеры составлял 0.5 мл. В ходе экспериментов срезы находились в постоянном протоке раствора №1, аэрируемого карбогеном. В ходе тестов нормальный физиологический раствор №1 путем переключения заменяли на экспериментальный, в который добавляли различные фармакологические препараты: тетродотоксин (1 мкМ), пикротоксин (50 мкМ), CNQX (20 мкМ), D-APV (20 мкМ), малеат метилсергида (30 мкМ), SDZ202-557 (30 мкМ) а также 5-НТ (30 мкМ). В работе использовались препараты фирм Sigma и Tocris (США).

Запись вызванной и спонтанной активности проекционных нейронов производили в конфигурации целая клетка при фиксации мембранного потенциала или трансмембранного тока. В работе использовали усилители ЕРС8 (НЕКА Elektronik, Германия). Данные оцифровывались с помощью аналого-цифровых преобразователя Digidata-1200 (Axon Instruments, США) и записывались на жесткий диск

программой WinWCP 4.2.2 (University of Strathclyde, Великобритания). Анализ проводили с помощью программ CLAMPFIT 8.1, Microsoft Excel. Доверительный интервал средних величин указан как стандартная ошибка. Статистическое сравнение средних величин проводили с использованием критерия Стьюдента.

Пипетки для клампа изготавливали на кузнице Р87 (Sutter Instrument Company, США) из стеклянных трубок марки «Пирекс» с двумя внутренними микрофиламентами (фирма: Garner Glass Company, США). Внутренний и внешний диаметр заготовок составлял - 1.15 и 1.65 мм, соответственно. Диаметр кончика готовой пипетки находился в пределах 0.5-0.7 мкм. В зависимости от целей эксперимента пипетки заполнялись пипеточным раствором №2, №3 или №4 (см. табл. 1), сопротивление пипеток после заполнения составляло 3-6 МОм. В ходе эксперимента пипетки крепились в держатель, управляемый манипулятором МР225 (Sutter Instrument Company, США).

Стимуляцию кортикальных входов осуществляли через биполярный электрод локальным электрическим раздражением волокон, идущих в составе наружной капсулы. Интенсивность раздражающего стимула подбиралась таким образом, чтобы вызванный ответ в режиме фиксации потенциала на уровне -70 мВ находился в пределах 50-80 пА, что составляет ~ 20-25% от максимальной амплитуды ответов. Длительность раздражающего импульса была во всех тестах одинакова и составила - 100 мкс. Регистрацию вызванных ответов осуществляли при фиксации потенциала.

Средние значения частот и амплитуд постсинаптических токов проекционных нейронов даны со средней квадратичной ошибкой (стандартной ошибкой) и рассчитывались по методике, описанной в литературе (Лакин, 1980). Достоверность различий оценивалась по критерию Стьюдента (Лакин, 1980).

Таблица №1. Растворы, используемые в экспериментах па срезах.

Номера растворов и концентрации веществ (мМ/л)

Наружный раствор Внутрииипеточные растворы

№1 №2 №3 №4

ЫаС1 119,0 — — —

КС1 2,5 — 125,0 —

К^1исопа(е — 125,0 — —

СвМеБ — — — 125,0

СаС1,*2Н,0 2,5 — — —

МеБО, 1,0 — — —

MgCl2 — 1,0 1,0 1,0

ЫаН2Р04 1,3 — — —

ЫаНСОз 26,0 — — —

с„н|2о6 10,0 — — —

НЕРЕЭ — 10,0 10,0 10,0

ЕОТА — 0,2 0,2 0,2

Ыа-АТР — 2,0 2,0 2,0

Мй-СТР — 0,1 0,2 0,2

рН 7,4 7,2 7,2 7,2

Осмолярность 320,0 295-300 295-300 295-300

мОсм

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Характеристика активности проекционных неГфонов дорсолатералыюго ядра амигдалы.

Объектом исследования являлись проекционные нейроны дорсолатерального ядра амигдалы, их выбор осуществляли визуально по пирамидоподобной форме и размеру 10-20 мкм. Кроме того, у этих нейронов отчетливо выражена аккомодация потенциалов действия, тогда как у тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы такой особенности нет. Сопротивление мембраны проекционных нейронов находилось в пределах 60-120 МОм, что также отличало их от интернейронов, у которых этот показатель часто достигал значения 1 ГОм.

Первая часть исследования была посвящена изучению общей спонтанной синаптической активности проекционных нейронов. Известно, что общая спонтанная активность включает в себя события, обусловленные случайным появлением потенциалов действия в нейронах нервной сети амигдалы, и фракцию миниатюрных постсинаптических токов, появление которых обусловлено случайным высвобождением нейромедиатора из пресинаптических терминалей. Медиаторная природа спонтанных постсинаптических токов (сПСТ) проекционных нейронов оказалась неоднородной: часть из них реверсировала при деполяризации клетки до уровня -50 мВ. Реверсировавшие сПСТ блокировались пикротоксином, а нереверсировавшие - СЫС^Х. Это говорит о ГАМКергической природе первых из них и глутаматергической - вторых. В контрольных условиях средние значения частот сПСТ составили: 1.24±0.25 с"' (п=6) для глутаматергических и 1.18±0.17 (п=6) с"' - для ГАМКергических сПСТ. Соотношение частот глутамат- и ГАМКергических спонтанных ПСТ

составило - /глу//гамк =1.09±0.21 (п=6). Данный факт свидетельствует о значительном количестве тормозных синапсов, образуемых на проекционных нейронах амигдалы. Это может быть объяснено либо значительным представительством ГАМКергических интернейронов среди нервных клеток дорсолатералыюго ядра амигдалы (ДЛА), либо обширной зоной арборизации их аксонов. С целью выяснения, какое из предположений является верным было проведено исследование миниатюрной спонтанной постсинаптической активности проекционных нейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы, регистрируемой при блокировании спайк-обусловленных ПСТ тетродотоксином (ТТХ, 1 мкМ).

Миниатюрная синаптическая активность проекционных нейронов также оказалась неоднородной и включала в себя глутамат- и ГАМКергические события. Средняя частота первых составила 1.05±0.41 с"1 (п=3), вторых — 0.79±0.36 с"' (п=3). Анализ полученных записей не выявил достоверного смещения соотношения частот глутамат- и ГАМКергических ПСТ, следовательно относительно высокая частота спонтанных ГАМКергических ПСТ объясняется обширной арборизацией интернейрональных аксонов в дорсолатеральной амигдале. В пользу данного предположения свидетельствуют данные литературы, согласно которым относительное число интернейронов в дорсолатеральном ядре амигдалы невелико и не превышает 5% от общего числа нервных клеток в данной структуре (11атше й а1., 1991; ЗоэиНпа е1 а1., 2006).

Таким образом, исследование спонтанных постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах ДЛА, позволило нам получить важную информацию о синаптической передаче в дорсолатеральном ядре амигдалы. Однако эта информация ограничена сведениями о процессах, обусловленных случайным выделением нейромедиатора из пресинаптической терминали и случайным появлением потенциалов действия в нервной цепи. В связи с этим, следующий этап

исследования был посвящен изучению характеристик постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных электрической стимуляцией кортикальных афферентных волокон, входящих в амигдалу в составе наружной капсулы.

Регистрируемые в данных условиях постсинаптические ответы проекционных нейронов имели сложную медиаторную природу и состояли из двух фаз: входящего и выходящего тока. Фармакологический анализ показал, что первая фаза (входящий ток) является моносинаптической и вызвана активацией возбуждающих входов на проекционные нейроны, а вторая фаза (выходящий ток) представляет дисинаптический компонент, опосредованный тормозными интернейронами, получающими возбуждающие афферентные входы из коры. Такая форма ответа, показанная в нашем исследовании подтверждается данными литературы, из которых известно, что интернейроны дорсолатералыюго ядра амигдалы образуют тормозные синапсы на проекционных нейронах и наряду с последними получают возбуждающие глутаматергические входы из коры или таламуса (Mahanty and Sah, 1999; Szinyei et al., 2000). С целью более детального исследования проводился анализ изолированных компонентов этих постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах дорсолатерального ядра амигдалы в ответ на стимуляцию кортико-амигдалярных афферентных волокон наружной капсулы.

Вызванные моносинантические глутаматергические ПСТ. регистрировались при блокировании ГАМКергической синаптической передачи пикротоксином (100 мкМ). В этих условиях ответы имели короткий и постоянный латентный период, что свидетельствует об их моносинаптической природе (Huang and Kandel, 1998). Величина ответа зависела от силы стимуляции. Для проведения тестов использовали силу раздражения, которая на 5% превышала пороговое значение. Для проведения оценки вольт-амперной зависимости ВПСТ измеряли пиковую

амплитуду зарегистрированного тока (рис.6:1) и сопоставляли ее со значением мембранного потенциала. Токи регистрировались при значениях мембранного потенциала от -70 до +50 мВ с шагом в 20 мВ. Временная динамика нисходящей фазы исследуемых ответов, так же как и их амплитуда, проявляла зависимость от мембранного потенциала. При отрицательных значениях последнего нисходящая фаза ответов была значительно короче по сравнению с таковой у ответов, зарегистрированных при положительном мембранном потенциале. Полученный факт свидетельствует о том, что глутаматергический ответ, вызванный стимуляцией кортико-амигдалярных волокон, неоднороден по составу и имеет сложную природу, то есть предполагается участие в его генерации АМПА и НМДА рецепторов.

Соответствующие компоненты глутаматергического

постсинаптического тока разделялись при использовании CNQX (20 мкМ) для изоляции НМДА-опосредованного компонента и D-APV (20 мкМ) для изоляции АМПА-опосредованного компонента. Вольт-амперная характеристика АМПА-опосредованного тока хорошо аппроксимировалась линейной функцией: fmax-a*Vm+b, где а и b - коэффициенты линейной функции, 1тах - пиковая амплитуда тока и Vm - мембранный потенциал, при котором этот ток (1тах) регистрировался. Потенциал реверсии (Vm~ -b/d) составил в среднем -0.1±2.1 мВ (n=l 1). Вольт-амперная характеристика НМДА-тока имела N-образную форму и не аппроксимируется линейной функцией. Последнее связано с тем, что при отрицательных значениях мембранного потенциала ниже -40 мВ НМДА каналы заблокированы ионом магния и непроницаемы для катионов (Nowak et al., 1984). Соотношение амплитуд АМПА и НМДА компонентов, регистрируемых при потенциалах -70 и +50 мВ, составило 3.63±0.44 (п=8). Наличие НМДА и АМПА-составляющих в ВПСТ проекционных нейронов амигдалы хорошо согласуется с данными более ранних исследований (Huang and

Kandel, 1998; Mahanty and Sah, 1998; Weisskopf and LeDoux, 1999; LeDoux, 2000).

Следующий этап работы был посвящен исследованию дисинаптического ГАМКергнческого компонента сложного двухкомпонентного ответа проекционного нейрона в ответ на стимуляцию кортико-амигдалярных волокон, который регистрировали в контрольных

условиях при фиксации мембранного потенциала на уровне -50-- 30 мВ.

Следует отметить, что в данных условиях использование антагонистов глутаматных рецепторов для изоляции дисинаптического ГАМКергнческого ответа не представлялось возможным, поскольку первый из синапсов, участвующих в инициации этого ответа (синапс между аксоном кортико-амигдалярного волокна и тормозным интернейроном), является глутаматергическим и его блокада приведет к тому, что тормозный интернейрон и его ГАМКергические терминали на проекционные нейроны не будут активированы (Szinyei et al., 2000). В связи с этим дисинаптический компонент анализировали в условиях регистрации сложного двухкомпонентного постсинаптического ответа проекционного нейрона на стимуляцию кортико-амигдалярных волокон. Показано, что потенциал реверсии ГАМКергического компонента сильно расходится с расчетным теоретическим значением. Этот феномен может быть обусловлен возникновением дополнительной проводимости мембраны за счет активации АМПА и НМДА рецепторов. Для определения истинного потенциала реверсии хлорного ГАМКергического тока его вольт-амперную характеристику снимали в условиях прямой стимуляции интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы при блокаде АМПА и НМДА рецепторов с помощью CNQX и D-APV. В этом случае значение потенциала реверсии хлорного тока составило Vrev =73.4±3.0 мВ, что практически совпало с расчетным Vrev =-73 мВ.

Полученные на первом этапе исследования данные позволили

охарактеризовать сииаптическую активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы. Из результатов видно, что ГАМКергические интернейроны ДЛА играют большую роль в организации потоков сенсорной информации, проходящих через амигдалу, осуществляя постсинаптическое торможение проекционных нейронов. Помимо тормозного ГАМКергического контроля над сенсорными потоками существуют более тонкие механизмы их регуляции, а именно механизмы модуляции синаптической активности проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы. Они связаны с функционированием различных нейромодуляторных систем: холинергической, допаминергической, серотонинергической. Вышеуказанные

нейромодуляторы, высвобождаясь в дорсолатеральном ядре амигдалы, могут изменять активность как возбуждающих, так и тормозных пре- и постсинаптических рецепторов, осуществляя тем самым тонкую регуляцию синаптической активности нервных клеток. Серотонинергическая нейромедиаторная система принимает активное участие в формировании эмоциональных состояний и поведенческих реакций организма, за формирование которых ответственны лимбическая система и, в частности, амигдала (ЬсОоих, 2000). В связи с этим изучение серотонинергической модуляции синаптических процессов, протекающих в дорсолатеральном ядре амигдалы представляет собой особый интерес.

Исследование воздействия серотонина на спонтанные постсинаптические токи проекционных нейронов дорсолатеральной амигдалы.

Следующие этапы исследования были посвящены изучению роли серотонина в модуляции синаптической активности проекционных

нейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы крысы. Необходимо отметить, что во всех тестах, приведенных в данной работе, использовалась одна и таже концентрация серотонина - 30 мкМ. Такой выбор был обоснован тем, что в большинстве работ, посвященных исследованию эффектов серотонина и проводимых на срезах мозга, используют концентрации, близкие к этому значению. Кроме того для обоснования выбранной концентрации мы проводили дополнительные тесты, в которых строились кривые доза-эффект для ГАМК- и глутаматного АМПА-компонента. Действие серотонина на амплитуды этих ответов достигало своего максимального значения при концентрации 30 мкМ и далее при повышении концентрации не увеличивалось, выходя на плато.

Первая серия экспериментов посвящена изучению влияния серотонина на общую спонтанную активность. Опыты проводились при использовании пипеточного и наружного раствора №3 и №1, соотвественно; мембранный потенциал клеток фиксировали на уровне -70 мВ. В этих условиях аппликация серотонина в концентрации 30 мкМ не оказывала заметного влияния ни на амплитуду, ни на частоту, регистрируемых спонтанных постсинаптических токов. Так, на 5-ой минуте действия серотонина частота спонтанных ПСТ составила 91.7±20.9% от контрольного значения (100%), а их амплитуда составила 104.9±7.9% от контрольного значения (100%). После отмыва эти показатели составили: 116.3±2.58% для частоты и 102.3±5.3% для амплитуды.

Данный факт может быть объяснен тем, что серотошш может оказывать действие не только на процесс спонтанного выделения медиатора из пресинаптических терминалей, но и изменять возбудимость тормозных интернейронов амигдалы (Stutzmann and LeDoux, 1999). В этом случае воздействие серотонина на амплитудно-частотные характеристики спонтанной синаптической активности проекционных нейронов может

быть нивелировано эффектом серотонина на тормозные интернейроны, участвующие в организации спонтанной активности проекционных нейронов.

Для проверки данного предположения была проведена серия экспериментов, в которой исследовалось действие серотонина на фракцию миниатюрных постсинаптических токов в условиях блокирования спайк-обусловленной фракции ПСТ тетродотоксином (ТТХ, 1 мкМ). Полученные результаты показали, что серотонин (30 мкМ) статистически достоверно (р<0.05) снижал средние частоты регистрируемых миниатюрных ПСТ, но не оказал влияния на их амплитуды. На 5-й минуте действия серотонина частота глутаматергических мПСТ снижалась на 42.2±12.8% (n=5), а частота изолированных ГАМКергических мПСТ — на 37.6±8.2% (п=5). В классической работе Каца и Миледи (Katz and Miledi, 1963) было показано, что изменение частоты постсинаптических событий говорит о пресинаптической модуляции синаптической передачи, то есть о модуляции процесса выделения нейромедиатора, а изменение амплитуды свидетельствует о воздействии на постсинаптическом уровне, то есть об изменении возбудимости мембраны нейрона. Таким образом, отсутствие достоверного воздействия серотонина на амплитуду миниатюрных глутамат- и ГАМКергических ПСТ свидетельствует о том, что серотонин модулирует синаптическую активность проекционных нейронов исключительно на пресинаптическом уровне, подавляя процесс высвобождения нейромедиатора из пресинаптической терминали.

Полученные результаты позволяют объяснить различие эффектов серотонина на общую спонтанную и миниатюрную активности проекционных нейронов. Отсутствие эффекта серотонина на амплитудно-частотные характеристики общей спонтанной активности проекционных нейронов может быть объяснено тем, что увеличение частоты спонтанных разрядов интернейронов, которое обусловлено изменением возбудимости

их мембран, компенсируется за счет уменьшения вероятности высвобождения нейромедиаторов из пресинаптических терминалей на проекционные нейроны ДЛА.

В пользу этого предположения говорят данные литературы. В частности, показано, что серотонин увеличивает возбудимость мембран тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы и, соответственно, повышает частоту генерации спонтанных потенциалов действия (Коуаша et al., 2000; 2002). В работе Рэйни и соавт. (Rainnie, 1999) было показано, что аппликация серотонина в концентрации более 30 мкМ на фронтальные срезы мозга крысы приводит к уменьшению частоты тормозных постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах дорсолатерального ядра амигдалы. Кроме этого известно, что серотонин оказывает ингибирующее воздействие на тормозную синаптическую передачу за счет активации пресинаптических 5-НТ) рецепторов, локализованных на нейронах голубого пятна (Bobker and Williams, 1989) и черной субстанции головного мозга крысы (Stanford and Lacey, 1996). В исследовании, проведенном на фронтальных срезах головного мозга крысы, содержащих амигдалу, Ченг и соавт. (Cheng et al., 1998) обнаружили ингибирующее воздействие серотонина на частоту возбуждающих миниатюрных постсинаптических потенциалов, регистрируемых на нейронах базолатеральной амигдалы и гиппокампа.

Таким образом, видно, что серотонин, высвобождаясь в дорсолатеральном ядре амигдалы может увеличивать возбудимость тормозных интернейронов за счет активации возбуждающих соматических 5-НТ рецепторов и, в то же время, уменьшать вероятность спонтанного высвобождения ГАМК за счет активации тормозных 5-НТ рецепторов, локализованных на пресинаптических терминалях тормозных интернейронов амигдалы.

Воздействие серотонина на постсинаптические токи (ПСТ) проекционных нейронов, вызванные стимуляцией кортико-амигдалярных афферентных волокон и тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

Следующий этап исследования был посвящен серотонинергической модуляции постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах дорсолатерального ядра амигдалы при стимуляции возбуждающих афферентных волокон, входящих в латеральную амигдалу в составе наружной капсулы. Стимуляция этих волокон вызывала сложный постсинаптический ответ, который, как было показано ранее (Цветков et al., 2009), состоит из двух компонентов. Первый, моносинаптический компонент, является глутаматергическим и опосредуется активацией АМПА и/или при определенных условиях (Nowak et al., 1984; Цветков и др., 2009) НМДАрецепторов, второй, дисинаптический компонент, является ГАМКергическим и опосредуется активацией ГАМКд рецепторов. При использовании пипеточного раствора №2, приготовленного на основе глюконата калия, компоненты суммарного постсинаптического ответа, вызываемого стимуляцией кортико-амигдалярных волокон, были разнонаправленны. Данное обстоятельство, позволило нам исследовать действие серотонина на оба компонента вызванного постсинаптического тока проекционного нейрона одновременно.

В данных тестах серотонин (30 мкМ) не оказывал статистически достоверного воздействия на амплитуды глутамат- и ГАМК-опосредованных компонентов вызваного постсинаптического ответа. Средние значения нормированных амплитуд глутамат- и ГАМК-опосредоваиных компонентов, измеренные на 5-й минуте воздействия

серотонина, составили 92.95±7.68% (п=7; р=0.43) и 95.78±6.38% (п=7; р=0.79), соответственно, что не отличалось от значений амплитуд этих компонентов, регистрируемых в контроле. Это может быть объяснено тем, что серотонин либо не оказывает воздействия ни на один из компонентов вызванного постсинаптического ответа проекционного нейрона, либо оказывает воздействие одновременно на оба компонента ответа, и при суммации на постсинаптической мембране проекционных нейронов эти эффекты нивелируются, поскольку глутамат- и ГАМКергические компоненты разнонаправленны.

Для того, чтобы определить какое из указанных выше предположений является верным, мы изучали действие серотонина на изолированные ГАМКергические и глутаматергические вызванные постсинаптические ответы. Проведена серия экспериментов, в которой исследовали действие серотонина на ГАМКергические постсинаптические токи проекционных нейронов, вызываемые раздражением тормозных интернейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы в условиях блокирования глутаматных рецепторов. Было показано, что ГАМКергические постсинаптические токи, регистрируемые в этих условиях, проявляли чувствительность к серотонину, поскольку их амплитуда в среднем снижалась примерно на 35±8.85% (п=9; р<0.001) от контрольного значения (100%).

Регистрацию глутаматергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных стимуляцией кортико-амигдалярных волокон, проводили при блокировании ГАМК-компонента пикротоксином. НМДА-ответ регистрировали при фиксации МП на уровне +30 мВ в присутствии СЫрХ (25 мкМ). АМПА-ответ регистрировали при фиксации мебранного потенциала на уровне -70 мВ в присутствии Б-АРУ (50 мкМ). Исследование действия серотонина на изолированный НМДА-ток показало, что данный модулятор уменьшает его амплитуду. В среднем

снижение амплитуды НМДА-тока составило 56.89±1.00% (п=3) и оказалось статистически достоверным (р<0.001). Эффект был полностью обратим и «отмывался» за 20-30 минут при смене раствора с серотонином на контрольный. Исследование действия серотонина на изолированный АМПА-ток показало, что АМПА-компонент уменьшается при действии серотонина (50 мкМ) в среднем на 58.92±6.43 % (п=9; р<0.001). Полное восстановление амплитуды наблюдалось через 15-20 минут отмыва от серотонина.

Полученные результаты хорошо согласуются с данными, полученными в нашем исследовании действия серотонина на миниатюрную синаптическую активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы. Очевидно, что серотонин модулирует и возбуждающую глутаматергическую, и тормозную ГАМКергическую синаптическую передачу в латеральной амигдале, однако эти эффекты могут нивелироваться в процессе интеграции на постсинаптической мембране проекционных нейронов ДЛА.

Дальнейшее исследование было посвящено выяснению того, какие из основных групп рецепторов серотонина могут быть задействованы в обеспечении механизмов описанных выше эффектов [см. раздел 3.3]. С этой целью мы использовали два антагониста серотониновых рецепторов. Первый из них малеат метилсергида является антагонистом для рецепторов 1 и 2 типов, второй 807202-557 - блокирует рецепторы 3 и 4 типов.

Исследование роли различных типов 5-НТ рецепторов в серотонинергической модуляции синаптической передачи в синапсах образовнных афферентными кортикальными волокнами на нейронах дорсолатерального ядра амигдалы.

На данном этапе мы изучали влияние 5-НТ|/5-НТ2 рецепторов на синаптическую передачу в дорсолатералыюй амигдале. Перед началом эксперимента срезы преинкубировались в растворе №1., в который был добавлен малеат метилсергида (30 мкМ), являющийся смешанным антагонистом серотониновых рецепторов 1 и 2 типа (5-HTi,2 рецепторы). В ходе проведенных экспериментов было установлено, что этот антагонист предотвращает действие серотонина на амплитуду фармакологически изолированных глутаматергических АМПА-ответов, регистрируемых на проекционных нейронах в ответ на стимуляцию кортико-амигдалярных афферентных волокон. Нормированная амплитуда этого ПСТ не изменялась в течение 5 минут действия серотонина (30 мкМ), и на 5-ой минуте она составила 100.0±7.0% (п=5). Малеат метилсергида также предотвращал действие серотонина на амплитуду фармакологически изолированных ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов, регистрируемых в ответ на стимуляцию интернейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы.

Известно, что 5-HTi рецепторы присутствуют во многих областях лимбической системы, в том числе и в амигдале (Ito et al., 1999). Использование селективного агониста 5-НТ1Д рецептора 8-OH-DPAT позволило показать, что активация этого типа рецепторов приводит к подавлению долговременной потенциации, регистрируемой на проекционных нейронах латеральной амигдалы крысы при стимуляции возбуждающих афферентных входов (Pollandt et al., 2003). Также было установлено, что данный тип 5-НТ рецепторов ответственен за модуляцию тормозной ГАМКергической синаптической передачи в латеральной амигдале, а именно аппликация 8-OH-DPAT приводила к снижению частоты миниатюрных ТПСТ, регистрируемых на проекционных нейронах амигдалы (Koyama et al., 2002). Также широкое распространение в ЦНС (Fink and Gothert, 2007) и в частности в амигдале (Radja et al., 1991; Varnas

et al, 2004) имеют рецепторы второго типа 5-НТ2. Штуцман и Леду (Stutzmann and LeDoux, 1999) предположили, что эти рецепторы, локализованные на телах тормозных интернейронов латеральной амигдалы, способствуют повышению их возбудимости, что в конечном итоге приводит к увеличению высвобождения ГАМК в синапсах, образуемых интернейронами на проекционных нейронах амигдалы. Высвобожденная гамма-аминомасляная кислота связывается с постсинаптическими ГАМКд и ГАМКВ рецепторами и снижает возбудимость проекционных нейронов, подавляя тем самым эффективность афферентного возбуждения амигдалы (Stutzmann and LeDoux, 1999).Согласно данному предположению Леду и Штуцмана суперфузия срезов мозга раствором с серотонином должна приводить к увеличению амплитуд ГАМКергических ПСТ проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы, регистрируемых в ответ на электрическую стимуляцию интернейронов. Однако в наших экспериментальных условиях данный эффект не наблюдался. Наоборот, было отмечено, что действие серотонина приводит к снижению амплидуд вызванных ГАМКергических ответов. Полученный результат, тем не менее, не является противоречием данным Леду и Штуцмана, поскольку ранее при изучении действия серотонина на параметры спонтанной активности проекционных нейронов нами было показано, что в условиях суперфузии срезов серотонин способен не только повышать возбудимость интернейронов, что выражается в повышении частоты спайк-обусловленной спонтанной активности, но и снижать вероятность спонтанного выброса везикул медиатора в синапсе, что выражается в снижении частоты спонтанных миниатюрных ПСТ. Оба этих эффекта могут компенсировать друг друга, поскольку в конечном итоге они регулируют один и тот же процесс, но оказывают на него противоположные эффекты. Таким образом, снижение амплитуды

вызванных ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы может быть связано с тем, что в условиях суперфузии срезов эффект серотонина на механим высвобождения везикул выражен сильнее, чем на возбудимость интернейронов. Кроме того, в работах Рэйни (Rainnie, 1999) было показано, что при малых концентрациях (до 30 мкМ) серотонина проявлялось его возбуждающее действие на интернейроны, в то время как при больших концентрациях (более 30 мкМ) - наблюдался противоположный эффект - возбудимость интернейронов снижалась. В нашем случае использовалась концентрация серотонина 30 мкМ, что вероятно и определило тормозное его воздействие на ГАМКергическую передачу в амигдале.

Сходные с нашими данные были получены на других объектах при использовании агонистов/антагонистов 5-НТ|/5-НТ2 рецепторов. В частности, исследования, проведенные на срезах мозжечка крысы с использованием метиотепина (антагонист 5-HTi/5-HT2) показали, что эти рецепторы ответственны за уменьшение высвобождения глутамата из пресинаптических терминалей в мозжечке крысы (Maura et al., 1988). Снижение выделения глутамата было продемонстрировано также и на первичной культуре кортикальных нейронов крысы (Sandyk, 2006). В этой работе было показано, что активация 5-НТУ5-НТ2 рецепторов с помощью специфического агониста предотвращает глутамат-индуцированную нейротоксичность.

Следующие серии экспериментов были посвящены изучению влияния антагониста 5-НТ3/5-НТ4 рецепторов SDZ202-557 (30 мкМ) на серотонинергическую модуляцию ГАМК- и глутаматергических постсинаптических токов. В наших экспериментальных условиях данный антагонист не оказывал достоверного воздействия на эффект серготонина на синаптическую активность проекционных нейронов амигдалы. В

присутствии этого антагониста серотонин не терял способности снижать амплитуду как ГАМК- так и глутаматергических вызванных ПСТ.

Известно, что на мембране тормозных интернейронов наряду с 5-HTi рецепторами имеются возбуждающие 5-НТз рецепторы (Koyama et al., 2002). В наших условиях преинкубация срезов головного мозга крысы в растворе №1, в который был добавлен SDZ202-557 (30 мкМ), не оказывала существенного влияния на действие серотонина. Это может быть объяснено тем, что возбуждающие 5-НТз рецепторы, локализованные на мембране интернейронов дорсолатеральной амигдалы, вносят значительно меньший вклад в модуляцию тормозной синаптической передачи по сравнению с рецепторами первой группы (Коуаша et al.,2000; 2002). Что касается 5-НТ4 рецепторов, то на сегодняшний день существует мало данных об их функциях в амигдале. В исследовании, проведенном Хуангом и Кэнделом (Huang and Kandel, 2007) было выявлено, что антагонисты данного типа серотониновых рецепторов блокируют индукцию долговременной потенциации, регистрируемую на проекционных нейронах амигдалы при низкочастотной (1 Гц) стимуляции возбуждающих кортикальных афферентных входов в амигдалу. Однако этих данных явно недостаточно для того, чтобы сделать вывод о роли 5-НТ4 рецепторов в модуляции синаптических входов в латеральном ядре амигдалы.

Полученные в работе результаты свидетельствуют о том, что 5-НТ) и 5-НТ2 рецепторы играют значительную роль в серотонинергической модуляции как возбуждающей, так и тормозной синаптической передачи в латеральной амигдале. Блокирование 5-НТ3 и 5-НТ4 рецепторов не оказывало влияния на серотонинергические эффекты в амигдале. Хотя 5-НТ3 и 5-НТ4 рецепторы были обнаружены в латеральном ядре амигдалы, их вклад в модуляцию синаптической передачи может быть относительно малым и не выявляться с помощью экспериментального метода данного исследования.

Таким образом, данные, полученные в проведенном исследовании, позволяют более детально определить роль серотонина в модуляции синаптической передачи в латеральной амигдале. Установлено, что серотонин оказывает ингибирующее действие на возбуждающую и тормозную синаптическую активность проекционных нейронов дорсолатералыюго ядра амигдалы. Это свидетельствует о наличии сложных механизмов, с помощью которых серотонин осуществляет модуляцию потоков сенсорной информации, проходящих через дорсолатеральное ядро амигдалы. Следует отметить, что до сих пор отсутствовали данные о серотонинергическом влиянии на возбуждающую синаптическую передачу в дорсолатералыюм ядре амигдалы крысы. В связи с этим представляют собой большой интерес наши результаты, свидетельствующие об ингибирующем действии серотонина на возбуждающие синаптичсские входы на проекционные нейроны дорсолатералыюго ядра амигдалы. В итоге можно подчеркнуть, что изучение данных модуляторных механизмов серотонина актуально, поскольку оно способствует более детальному осознанию процессов, связанных с функционированием амигдалы и ее регуляцией.

ВЫВОДЫ

1) Общая спонтанная синаптическая активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы амигдалы подразделяется на возбуждающую глутаматергическую и тормозную ГАМКергическую фракции. При фармакологической блокаде проведения возбуждения регистрируется миниатюрная фракция, опосредованная спонтанным высвобождением медиатора из пресинаптической терминали.

2) Серотонин снижает частоту фармакологически постсинаптических токов проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы, но не оказывает воздействия на их амплитуду. Это свидетельствует о серотонинергической модуляции синаптической активности проекционных нейронов на пресинаптическом уровне.

3) Постсинаптические токи проекционных нейронов, регистрируемые при стимуляции кортикальных афферентных входов в амигдалу, состоят из моносинаптического глутаматергического и дисинаптического ГАМКергического компонентов.

4) Серотонин снижает амплитуду моносинаптических глутаматергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных стимуляцией кортико-амигдалярных волокон и моносинаптических ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных стимуляцией тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы. Данные эффекты связаны с уменьшением высвобождения глутамата и ГАМК в синапсах, образованных на проекционные нейроны дорсолатерального ядра амигдалы.

5) Отсутствие воздействия антагониста 5-НТз,4 рецепторов 807202-557 на эффект серотонина на вызванные ПСТ свидетельствует о том, что серотониновые рецепторы 3 и 4 типа не принимают участие в модуляции синаптической активности проекционных нейронов.

6) Подавление влияния серотонина на амплитуду вызванных глутаматергических и ГАМКергических постсинаптических токов избирательным антагонистом 5-НТ) 2 рецепторов малеатом метилсергида указывает на то, что модулирующее действие серотонина на синаптические входы проекционных нейронов опосредуется серотониновыми рецепторами 1 и 2 типов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1) Исследование роли тормозных интернейронов в механизмах регуляции сенсорных синапсов, образованных таламическими и кортикальными входами на пирамидальных клетках дорсолатерального ядра амигдалы // Цветков Е.А., Масалов И.С., Веселкин Н.П., Журнал эволюционной биохимии и физиологии, 2009 г., т. 45, № 4, с.403-411

2) Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатералыюм ядре амигдалы крысы // Цветков Е.А., Масалов И.С., Веселкин Н.П. Журнал эволюционной биохимии и физиологии, 2011 г., т. 47,

3) Серотонинергическая модуляция спонтанной синаптической активности проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы // Масалов И.С., Цветков Е.А., Веселкин Н.П. Журнал эволюционной биохимии и физиологии, 2011 г., т. 47,

4) Тезисы: Исследование регуляции сенсорных синапсов на пирамидальных клетках дорсолатерального ядра амигдалы крысы // Материалы XII Всероссийской медико-биологической конференции молодых ученых «Человек и его здоровье». С-Петербург 2009. с.240-241

5) Тезисы: Влияние серотонина (5-НТ) на частоту и амплитуду ГАМКд и НМДА-опосредованных ионных токов, регистрируемых на принципальных нейронах дорсолатерального ядра амигдаля крыс // XXI съезд Физиологического общества им. И.Павлова. Тезисы докладов. Калуга 2010. с.385-386

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (Россия, РФФИ, грант № 08-0400098) и программы ОБН РАН «Физиологические механизмы регуляции внутренней среды и организации поведения живых систем».

Лицензия ЛР № 020593 от 07.08.97

Подписано в печать 02.03.2011. Формат 60x84/16. Печать цифровая. Усл. печ. л. 1,0. Уч.-изд. л. 1,0. Тираж 100. Заказ 7260b.

Отпечатано с готового оригинал-макета, предоставленного автором, в Цифровом типографском центре Издательства Политехнического университета. 195251, Санкт-Петербург, Политехническая ул., 29. Тел.: (812) 550-40-14 Тел./факс: (812) 297-57-76

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Масалов, Игорь Сергеевич

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Амигдала и ее физиологическая роль.

1.1.1. Строение амигдалы.

1.1.2 Роль амигдалы в регуляции функций ЦНС.

1.1.3 Афферентные и эфферентные связи амигдалы.

1.1.4 Латеральное ядро амигдалы.

1.1.5. Клеточная структура дорсолатералыюго ядра амигдалы.

1.1.6 Нейромодуляторные системы в амигдале.

1.2 Серотонин и его физиологическая роль.

1.3 Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в головном мозге.

1.3.1 5-НТ1А рецепторы.

1.3.2 5-HTiB рецепторы.

1.3.3 5-НТш рецепторы.

1.3.4 5-HTiE рецепторы.

1.3.5 5-HTjf рецепторы.

1.3.6 5-НТ2а рецепторы.

1.3.7 5-НТ2в рецепторы.

1.3.8 5-НТ2с рецепторы.

1.3.9 5-НТ3 рецепторы.

1.3.10 5-НТ4 рецепторы.

1.4 Роль серотонина в модуляции синаптической передачи в амигдале.

ГЛАВА II МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Объект исследования.

2.2 Приготовление физиологического раствора.

2.3 Препаровка крысы и изготовление срезов.

2.4 Визуальная идентификация дорсолатерального ядра амигдалы и его нервных элементов.

2.5 Изготовление электродов для «пэтч-клампа».

2.6 Регистрация постсинаптических токов на нейронах амигдалы.

Глава III. Результаты.

3.1. Характеристика нейрональной активности проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

3.1.1. Электрические характеристики проекционных нейронов.

3.1.2. Общая спонтанная постсинаптическая активность нейронов дорсолатерального ядра амигдалы и ее анализ.

3.1.3. Вызванная активность нейронов дорсолатерального ядра амигдалы и ее анализ.

3.1.3.1 Характеристика глутаматергических моносинантических ответов проекционных нейронов, возникающих при стимуляции кортико-амигдалярных волокон

3.1.3 ^Характеристики дисинаптичсского ГАМКергического компонента постсинаптических токов проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы, вызванных стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.1.3.3 Характеристики ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных стимуляцией тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

3.2. Исследование воздействия серотонина на спонтанные постсинаптические токи проекционных нейронов дорсолатеральной амигдалы.

3.2.1. Действие серотонина на общую спонтанную активность.

3.2.2 Исследование действия серотонина на миниатюрную спонтанную активность проекционных нейронов.

3.3 Воздействие серотонина на частоту постсинаптических токов (ПСТ), вызванных стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.3.1 Исследование действия серотонина на компоненты суммарного постсинаптического тока проекционного нейрона, вызванного стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.3.2 Исследование действия серотонина на дисинаптический ГАМКергический компонент постсинаптического тока проекционного нейрона в ответ на стимуляцн. кортико-амигдалярных волокон.[

3.3.3 Исследование действия серотонина на ГАМКергические ПСТ проекционных нейронов в ответ на стимуляцию тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

3.3.4 Исследование действия серотонина на изолированные компоненты глутаматергического постсинаптического ответа, вызванного стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.3.4.1 Исследование действия серотонина на изолированный НМДА-опосредованный ток, вызванный стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.3.4.2 Исследование действия серотонина на изолированный АМПА-опосредованный ток, вызванный стимуляцией кортико-амигдалярных волокон.

3.4 Зависимость эффектов серотонина от концентрации.

3.5 Роль некоторых типов 5-НТ рецепторов в серотонинергической модуляции передачи в синапсах образованных афферентными кортикальными волокнами на проекционных нейронах дорсолатерального ядра амигдалы.

3.5.1. Влияние малеата метилсергида на серотонинергическую модуляцию вызванных АМПА опосредованных вызванных ПСТ в дорсолатеральной амигдале.

3.5.2. Влияние малеата метилсергида на серотонинергическую модуляцию вызванных ГАМКергических ПСТ в дорсолатеральной амигдале.

3.5.3 Влияние SDZ202-557 на серотонинергическую модуляцию вызванных Г1СТ в проекционных нейронах дорсолатерального ядра амигдалы.

ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1 Характеристики электрических свойств и постсинаптическая активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы.

4.2 Исследование воздействия серотонина на спонтанные и вызванные постсинаптические токи проекционных нейронов дорсолатеральной амигдалы.

4.3 Иследование роли различных типов 5-НТ рецепторов в серотонинергической модуляции синаптической передачи в синапсах образованных афферентными кортикальными волокнами на нейронах дорсолатерального ядра амигдалы.

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы крысы"

Актуальность темы исследования.

Одним из элементов лимбической системы является амигдала (миндалина) - подкорковая структура головного мозга. Многочисленные исследования свидетельствуют о том, что в функциональном плане амигдала отвечает за экспрессию страха, тревоги и агрессии, выработку аверсивных условно-рефлекторных реакций, а также формирование эмоциональной памяти (Аши^э е1 а1., 2005). Сенсорная информация о внешнем мире поступает в амигдалу через ее дорсолатеральное ядро, на клетках которого происходит широкая конвергенция входов из различных зон сенсорной коры больших полушарий, ядер таламуса и многих других структур мозга (ЬеБоих, 2000; ЬеБоих & а1., 1990; 8аЬ еХ а1., 2003; Тэуе&оу ег а1., 2004). Одной из важнейших функций дорсолатерального ядра амигдалы является первичная обработка сенсорной информации, поступающей в амигдалу, ее фильтрация и передача в нижележащие ядра амигдалы для дальнейшей обработки (LeDoux, 2000; Pitkanen et al., 1997). Регуляция этой функции крайне важна для нормальной работы всей амигдалы в частности и лимбической системы в целом.

В настоящий момент имеются данные о том, что в процессе регуляции первичной обработки сенсорной информации, поступающей в дорсолатеральное ядро амигдалы, может играть серотонин (LeDoux, 2000; Radja et al., 1991; Stutzmann and LeDoux, 1999; Stutzmann et al., 1998). Свидетельством в пользу этого является тот факт, что нейрональные элементы получают обильные серотонинергические входы из дорсальных ядер шва ствола мозга (Sadikot and Parent, 1990), а на мембранах амигдалярных нейронов обнаружены серотониновые рецепторы различных типов (Radja et al., 1991; Sadikot and Parent, 1990) Также имеются данные о том, что некоторые современные высокоэффективные антидепрессанты такие, как флуокситин (прозак), пароксетин (паксил), сертралин (золофт), флуоксамин (феварин) и др, действие которых основано на блокаде обратного захвата серотонина, модулируют эмоциональные состояния, связанные с функциями амигдалы (Fournier et al., 2010). Высокая эффективность этих фармакологических препаратов является дополнительным свидетельством того, что серотонин играет особую роль в генезе многих психопатологических состояний человека.

В связи с вышеизложенным перед выполнением данной работы были поставлены следующие задачи:

• Изучить синаптическую активность проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы.

• Изучить влияние серотонина (5-НТ) на амплитудно-частотные характеристики миниатюрных спонтанных постсинаптических трансмембранных токов проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы.

Научная новизна исследований. Результаты исследований, проведенных на переживающих фронтальных срезах головного мозга крысы показали, что аппликация серотонина приводит к уменьшению частоты, но не оказывает влияния на амплитуду глутамат- и ГАМКергических миниатюрных спонтанных постсинаптических токов, регистрируемых на проекционных нейронах. Это свидетельствует о серотонинергической модуляции синаптической активности проекционных нейронов на пресинаптическом уровне. Впервые было показано, что серотонин уменьшает амплитуду глутаматергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных электрической стимуляцией кортико-амигдалярных афферентных волокон, входящих в амигдалу в составе наружной капсулы, а также уменьшает амплитуду ГАМКергических постсинаптических токов проекционных нейронов, вызванных электрической стимуляцией тормозных интернейронов дорсолатерального ядра амигдалы. Таким образом, были впервые получены данные о модулирующем действии серотонина на миниатюрные возбуждающие и тормозные постсинаптические токи, а также на постсинаптические токи на мебранах проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы, вызванные стимуляцией кортико-амигдалярных волокон. С помощью антагонистов серотониновых рецепторов были идентифицированы типы 5-НТ рецепторов, ответственные за эффекты серотонина на синаптическую активность проекционных нейронов. Установлено, что блокада б-НТ^о рецепторов малеатом метилсергида подавляет модулирующее действие серотонина на амплитуду вызванных постсинаптических токов проекционных нейронов, а блокада 5-НТ3 4 рецепторов не оказывает действия на эффекты серотонина на синаптическую активность проекционных нейронов.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ.

Результаты проведенного исследования представляют интерес для общей нейрофизиологии, нейробиологии, физиологии нервной клетки и медицины. Полученные результаты характеризуют синаптическую активность нейронов амигдалы, лежащую в основе функционирования этого важнейшей структуры головного мозга, участвующего в выработке условно-рефлекторного страха и формировании эмоциональной памяти. Они вносят вклад в понимание механизмов регуляции сигнального взаимодействия нервных клеток и роли серотонина в модуляции синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы. Полученные результаты впервые характеризуют механизм серотонинергической модуляции возбуждающей и тормозной синаптической активности проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы и имеют существенное значение для понимания нейронных механизмов функционирования амигдалы. Результаты настоящей работы могут быть использованы для дополнения и уточнения уже имеющихся данных о роли серотонина в регуляции синаптической передачи в центральной нервной системе млекопитающих.

АППРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Масалов, Игорь Сергеевич

выводы

2) Серотонин снижает частоту фармакологически изолированных глутамат- и ГАМКергических миниатюрных постсинаптических токов проекционных нейронов дорсолатерального ядра амигдалы крысы, но не оказывает воздействия на их амплитуду. Это свидетельствует о серотонинергической модуляции синаптической активности проекционных нейронов на пресинаптическом уровне.

5) Отсутствие воздействия антагониста 5-НТзд рецепторов SDZ202-557 на эффект серотонина на вызванные ПСТ свидетельствует о том, что серотониновые рецепторы 3 и 4 типа не принимают участие в модуляции синаптической активности проекционных нейронов.

6) Подавление влияния серотонина на амплитуду вызванных глутаматергических и ГАМКергических постсинаптических токов избирательным антагонистом 5-НТ12 рецепторов малеатом метилсергида указывает на то, что модулирующее действие серотонина на синаптические входы проекционных нейронов опосредуется серотониновыми рецепторами 1 и 2 типов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Масалов, Игорь Сергеевич, Санкт-Петербург

1.Ф., 1980, Биометрия: Мосва, Высшая школа.

2. Николлс, Дж.Г., Мартин, А.Р., Валлас, Б.Дж., Фукс, П.А., 2003, От нейрона к мозгу: Москва, Едиториал УРСС.

3. Сигворс, Ф., Сакман, Б., Неер, Э., 1987, Регистрация от целой клетки в условиях плотного контакта, Регистрация одиночных каналов: Москва, Мир, С. 142-60.

4. Цветков, Е.А., Судеревская, Е.И., Веселкин., Н.П. 2011, Роль долговременной потенциации в механизме условно-рефлекторного обучения // Журнал эволюционной биохимии и физиологии, Т.47. в печати

5. Циркин, Н.А., Цапок, В.М., 2007, Нормальная физиология: Москва, Издательство "МИА".

6. Aghajanian, G.K., and Bloom, F.E., 1967, Localization of tritiated serotonin in rat brain by electron-microscopic autoradiography // J Pharmacol Exp Ther, Vol. 156. N. 1. PP.23-30.

7. Aghajanian, G.K., and Marek, G.J., 1999, Serotonin, via 5-HT2a receptors, increases EPSCs in layer V pyramidal cells of prefrontal cortex by an asynchronous mode of glutamate release // Brain Res, Vol.825. N.l-2. PP.161-71.

8. Albert, P.R., Zhou, Q.Y., Van Tol, H.H., Bunzow, J.R., and Civelli, O., 1990, Cloning, functional expression, and mRNA tissue distribution of the rat 5-hydroxytryptamine 1A receptor gene // J Biol Chem, Vol.265. N.10. PP.5825-32.

9. Alex, K.D., Yavanian, G.J., McFarlane, H.G., Pluto, C.P., and Pehek, E.A., 2005, Modulation of dopamine release by striatal 5-HT2c receptors // Synapse, Vol.55. N.4. PP.242-51.

10. Anagnostaras, S.G., Gale, G.D., and Fanselow, M.S., 2001, Hippocampus and contextual fear conditioning: Recent controversies and advances // Hippocampus, Vol.11. N.l. PP.8-17.

11. Baez, M., Kursar, J.D., Helton, L.A., Wainscott, D.B., and Nelson, D.L., 1995, Molecular biology of serotonin receptors // Obes Res, Vol.3 Suppl 4. PP.441S-447S.

12. Bai, F., Yin, T., Johnstone, E.M., Su, C., Varga, G., Little, S.P., and Nelson, D.L., 2004, Molecular cloning and pharmacological characterization of the guinea pig 5-HT1E receptor // Eur J Pharmacol, Vol.484. N.2-3. PP.127-39.

13. Bantick, R.A., De Vries, M.H., and Grasby, P.M., 2005, The effect of a 5-HT1A receptor agonist on striatal dopamine release // Synapse, Vol.57. N.2. PP.6775.

14. Barnes, N.M., and Sharp, T., 1999, A review of central 5-HT receptors and their function //Neuropharmacology, Vol.38. N.8. PP.1083-152.

15. Beaudet, A., and Descarries, L., 1976, Quantitative data on serotonin nerve terminals in adult rat neocortex // Brain Res, Vol.111. N.2. PP.301-9.

16. Benloucif, S., Keegan, M.J., and Galloway, M.P., 1993, Serotonin-facilitated dopamine release in vivo: pharmacological characterization // J Pharmacol Exp Ther, Vol.265. N.l. PP.373-7.

17. Berger, M., Gray, J.A., and Roth, B.L., 2009, The expanded biology of serotonin // Annu Rev Med, Vol.60. PP.355-66.

18. Best, A.R., and Regehr, W.G., 2008, Serotonin evokes endocannabinoid release and retrogradely suppresses excitatory synapses // J Neurosci, Vol.28. N.25. PP.6508-15.

19. Bian, X., Yanagawa, Y., Chen, W.R., and Luo, M., 2008, Cortical-like functional organization of the pheromone-processing circuits in the medial amygdala // J Neurophysiol, Vol.99. N.l. PP.77-86.

20. Bianchi, C., Rodi, D., Marino, S., Beani, L., and Siniscalchi, A., 2002, Dual effects of 5-HT4 receptor activation on GAB A release from guinea pig hippocampal slices //Neuroreport, Vol.13. N.l7. PP.2177-80.

21. Blair, R.J., 2008, The amygdala and ventromedial prefrontal cortex: functional contributions and dysfunction in psychopathy // Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci, Vol.363. N.1503. PP.2557-65.

22. Blake, J.F., Brown, M.W., and Collingridge, G.L., 1988, CNQX blocks acidic amino acid induced depolarizations and synaptic components mediated by non-NMDA receptors in rat hippocampal slices // Neurosci Lett, Vol.89. N.2. PP. 182-6.

23. Blakely, R.D., De Felice, L.J., and Hartzell, H.C., 1994, Molecular physiology of norepinephrine and serotonin transporters // J Exp Biol, Vol.196. PP.263-81.

24. Blanchard, D.C., and Blanchard, R.J., 1972, Innate and conditioned reactions to threat in rats with amygdaloid lesions // J Comp Physiol Psychol, Vol.81. N.2. PP.281-90.

25. Blondel, O., Vandecasteele, G., Gastineau, M., Leclerc, S., Dahmoune, Y., Langlois, M., and Fischmeister, R., 1997, Molecular and functional characterization of a 5-HT4 receptor cloned from human atrium // FEBS Lett, Vol.412. N.3. PP.465-74.

26. Blue, M.E., Yagaloff, K.A., Mamounas, L.A., Hartig, P.R., and Molliver, M.E., 1988, Correspondence between 5-HT2 receptors and serotonergic axons in rat neocortex // Brain Res, Vol.453. N.l-2. PP.315-28.

27. Bobker, D.H., and Williams, J.T., 1989, Serotonin agonists inhibit synaptic potentials in the rat locus ceruleus in vitro via 5-hydroxytryptaminelA and 5-hydroxytryptaminelB receptors // J Pharmacol Exp Ther, Vol.250. N.l. PP.37-43.

28. Bockaert, J., Claeysen, S., Compan, V., and Dumuis, A., 2004, 5-HT4 receptors // Curr Drug Targets CNS Neurol Disord, Vol.3. N.l. PP.39-51.

29. Bonaventure, P., Guo, H., Tian, B., Liu, X., Bittner, A., Roland, B., Salunga, R., Ma, X.J., Kamme, F., Meurers, B., Bakker, M., Jurzak, M., Leysen, J.E., and

30. Erlander, M.G., 2002, Nuclei and subnuclei gene expression profiling in mammalian brain // Brain Res, Vol.943. N.l. PP.38-47.

31. Boothman, L.J., and Sharp, T., 2005, A role for midbrain raphe gamma aminobutyric acid neurons in 5-hydroxytryptamine feedback control // Neuroreport, Vol.16. N.9. PP.891-6.

32. Bortolozzi, A., Amargos-Bosch, M., Toth, M., Artigas, F., and Adell, A., 2004, In vivo efflux of serotonin in the dorsal raphe nucleus of 5-HT.A receptor knockout mice // J Neurochem, Vol.88. N.6. PP. 1373-9.

33. Bucher, K., Myersn, R., and Southwick, C., 1970, Anterior temporal cortex and maternal behaviour in monkey //Neurology, Vol.20. PP.415.

34. Cassel, J.C., and Jeltsch, H., 1995, Serotonergic modulation of cholinergic function in the central nervous system: cognitive implications // Neuroscience, Vol.69. N.l. PP.1-41.

35. Celuch, S.M., Ramirez, A.J., and Enero, M.A., 1992, Activation of 5-HT2 receptors inhibits the evoked release of 3H.noradrenaline in the rat spinal cord // Gen Pharmacol, Vol.23. N.6. PP. 1063-5.

36. Cheng, L.L., Wang, S.J., and Gean, P.W., 1998, Serotonin depresses excitatory synaptic transmission and depolarization-evoked Ca2+ influx in rat basolateral amygdala via 5-HTiA receptors // Eur J Neurosci, Vol.10. N.6. PP.2163-72.

37. Choi, D.S., and Maroteaux, L., 1996, Immunohistochemical localisation of the serotonin 5-HT2b receptor in mouse gut, cardiovascular system, and brain // FEBS Lett, Vol.391. N. 1-2. PP.45-51.

38. Cluver, H., and Bucy, P., 1939, Preliminary analysis of function of the temporal lobe in monkeys // Archives of Neurology, Vol.42. PP.979-00.

39. Collingridge, G.L., Kehl, S.J., and McLennan, H., 1983, Excitatory amino acids in synaptic transmission in the Schaffer collateral-commissural pathway of the rat hippocampus // J Physiol, Vol.334. PP.33-46.

40. Connelly, W.M., and Baggott, M.J., 2009, Role of endocannabinoids in 5-HT2 receptor-mediated effects // J Neurophysiol, Vol.101. N.l. PP.5-7.

41. Consolo, S., Arnaboldi, S., Ramponi, S., Nannini, L., Ladinsky, H., and Baldi, G., 1996, Endogenous serotonin facilitates in vivo acetylcholine release in rat frontal cortex through 5-HT1B receptors // J Pharmacol Exp Ther, Vol.277. N.2. PP.823-30.

42. Cowen, P.J., Power, A.C., Ware, C.J., and Anderson, I.M., 1994, 5-HT,A receptor sensitivity in major depression. A neuroendocrine study with buspirone // Br J Psychiatry, Vol.164. N.3. PP.372-9.

43. Csaba, G., 1993, Presence in and effects of pineal indoleamines at very low level of phylogeny // Experientia, Vol.49. N.8. PP.627-34.

44. Dabire, H., 1991, Central 5-hydroxytryptamine (5-HT) receptors in blood pressure regulation // Therapie, Vol.46. N.6. PP.421-9.

45. Dahlstroem, A., and Fuxe, K., 1964, Evidence for the Existence of Monoamine-Containing Neurons in the Central Nervous System. I. Demonstrationof Monoamines in the Cell Bodies of Brain Stem Neurons // Acta Physiol Scand Suppl. PP.SUPPL 232:1-55.

46. Davis, M., 1994, The role of the amygdala in emotional learning // Int Rev Neurobiol, Vol.36. PP.225-66.

47. De Vry, J., 1995, 5-HTiA receptor agonists: recent developments and . controversial issues // Psychopharmacology (Berl), Vol.121. N.l. PP. 1-26.

48. Dityatev, A.E., and Bolshakov, V.Y., 2005, Amygdala, long-term potentiation, and fear conditioning //Neuroscientist, Vol.11. N.l. PP.75-88.

49. Done, C.J., and Sharp, T., 1994, Biochemical evidence for the regulation of central noradrenergic activity by 5-HTiA and 5-HT2 receptors: microdialysis studies in the awake and anaesthetized rat // Neuropharmacology, Vol.33. N.3-4. PP.411-21.

50. Ehrenberger, K., Benkoe, E., and Felix, D., 1982, Suppressive action of picrotoxin, a GABA antagonist, on labyrinthine spontaneous nystagmus and vertigo in man // Acta Otolaryngol, Vol.93. N.3-4. PP.269-73.

51. Eng, H., Lund, K., and Campenot, R.B., 1999, Synthesis of beta-tubulin, actin, and other proteins in axons of sympathetic neurons in compartmented cultures // J Neurosci, Vol.19. N.l. PP. 1-9.

52. Eser, D., Baghai, T.C., and Moller, H.J., 2010, Agomelatine: The evidence for its place in the treatment of depression // Core Evid, Vol.4. PP. 171-9.

53. Farber, L., Haus, U., Spath, M., and Drechsler, S., 2004, Physiology and pathophysiology of the 5-HT3 receptor // Scand J Rheumatol Suppl, Vol.119. PP.28.

54. Fargin, A., Raymond, J.R., Lohse, M.J., Kobilka, B.K., Caron, M.G., and Lefkowitz, R.J., 1988, The genomic clone G-21 which resembles a beta-adrenergic receptor sequence encodes the 5-HTiA receptor // Nature, Vol.335. N.6188. PP.358-60.

55. Feng, J., Cai, X., Zhao, J., and Yan, Z., 2001, Serotonin receptors modulate GABA(A) receptor channels through activation of anchored protein kinase C in prefrontal cortical neurons // J Neurosci, Vol.21. N.17. PP.6502-11.

56. Fink, K.B., and Gothert, M., 2007, 5-HT receptor regulation of neurotransmitter release // Pharmacol Rev, Vol.59. N.4. PP.360-417.

57. Fitzpatrick, P.F., 1999, Tetrahydropterin-dependent amino acid hydroxylases // Annu Rev Biochem, Vol.68. PP.355-81.

58. Fournier, J.C., DeRubeis, R.J., Hollon, S.D., Dimidjian, S., Amsterdam, J.D., Shelton, R.C., and Fawcett, J., 2010, Antidepressant drug effects anddepression severity: a patient-level meta-analysis // JAMA, Vol.303. N.l. PP.4753.

59. Fukui, M., Rodriguiz, R.M., Zhou, J., Jiang, S.X., Phillips, L.E., Caron, M.G., and Wetsel, W.C., 2007, Vmat2 heterozygous mutant mice display a depressive-like phenotype // J Neurosci, Vol.27. N.39. PP. 10520-9.

60. Geurts, F.J., De Schutter, E., and Timmermans, J.P., 2002, Localization of 5-HT2A, 5-HT3, 5-HT5A and 5-HT7 receptor-like immunoreactivity in the rat cerebellum // J ChemNeuroanat, Vol.24. N.l. PP.65-74.

61. Gloor, P., 1990, Experiential phenomena of temporal lobe epilepsy. Facts and hypotheses // Brain, Vol.113 ( Pt 6). PP. 1673-94.

62. Goddard, G., 1964, Functions of the amygdala // Psychol Bull, Vol.62. PP.89-09.

63. Gothert, M., 1990, Presynaptic serotonin receptors in the central nervous system // Ann N Y Acad Sci, Vol.604. PP. 102-12.

64. Gozlan, H., El Mestikawy, S., Pichat, L., Glowinski, J., and Hamon, M., 1983, Identification of presynaptic serotonin autoreceptors using a new ligand: 3H-PAT // Nature, Vol.305. N.5930. PP.140-2.

65. Gulyas, A.I., Acsady, L., and Freund, T.F., 1999, Structural basis of the cholinergic and serotonergic modulation of GABAergic neurons in the hippocampus //Neurochem Int, Vol.34. N.5. PP.359-72.

66. Guttman, R., and Barnhill, R., 1968, Effect of low sodium, tetrodotoxin, and temperature variation upon excitation // J Gen Physiol, Vol.51. N.5. PP.621-34.

67. Hajos, M., Hajos-Korcsok, E., and Sharp, T., 1999, Role of the medial prefrontal cortex in 5-HT1A receptor-induced inhibition of 5-HT neuronal activity in the rat // Br J Pharmacol, Vol.126. N.8. PP. 1741-50.

68. Hamblin, M.W., and Metcalf, M.A., 1991, Primary structure and functional characterization of a human 5-HT1D-type serotonin receptor // Mol Pharmacol, Vol.40. N.2. PP.143-8.

69. Hamill, O.P., Marty, A., Neher, E., Sakmann, B., and Sigworth, F.J., 1981, Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches // Pflugers Arch, Vol.391. N.2. PP.85-100.

70. Heimer, L., 2003, A new anatomical framework for neuropsychiatric disorders and drug abuse // Am J Psychiatry, Vol.160. N.10. PP.1726-39.

71. Heisler, L.K., Zhou, L., Bajwa, P., Hsu, J., and Tecott, L.H., 2007b, Serotonin 5-HT(2C) receptors regulate anxiety-like behavior // Genes Brain Behav, Vol.6. N.5. PP.491-6.

72. Hirano, H., Day, J., and Fibiger, H.C., 1995, Serotonergic regulation of acetylcholine release in rat frontal cortex // J Neurochem, Vol.65. N.3. PP.1139-45.

73. Hjorth, S., Bengtsson, H.J., Kullberg, A., Carlzon, D., Peilot, H., and Auerbach, S.B., 2000, Serotonin autoreceptor function and antidepressant drug action // J Psychopharmacol, Vol.14. N.2. PP. 177-85.

74. Hjorth, S., and Sharp, T., 1991, Effect of the 5-HT,a receptor agonist 8-OH-DPAT on the release of 5-HT in dorsal and median raphe-innervated rat brain regions as measured by in vivo microdialysis // Life Sci, Vol.48. N.18. PP. 177986.

75. Hoyer, D., Hannon, J.P., and Martin, G.R., 2002, Molecular, pharmacological and functional diversity of 5-HT receptors // Pharmacol Biochem Behav, Vol.71. N.4. PP.533-54.

76. Huang, Y.Y., and Kandel, E.R., 2007, Low-frequency stimulation induces a pathway-specific late phase of LTP in the amygdala that is mediated by PKA and dependent on protein synthesis // Learn Mem, Vol.14. N.7. PP.497-503.

77. Huang, Y.Y., and Kandel, E.R., 1998, Postsynaptic induction and PKA-dependent expression of LTP in the lateral amygdala // Neuron, Vol.21. N.l. PP. 169-78.

78. Imai, H., Steindler, D.A., and Kitai, S.T., 1986, The organization of divergent axonal projections from the midbrain raphe nuclei in the rat // J Comp Neurol, Vol.243. N.3. PP.363-80.

79. Inoue, T., Koyama, T., and Yamashita, I., 1993, Effect of conditioned fear stress on serotonin metabolism in the rat brain // Pharmacol Biochem Behav, Vol.44. N.2. PP.371-4.

80. Ito, H., Halldin, C., and Farde, L., 1999, Localization of 5-HT)A receptors in the living human brain using carbonyl-llC.WAY-100635: PET with anatomic standardization technique // J Nucl Med, Vol.40. N.l. PP. 102-9.

81. Iyer, R.N., and Bradberry, C.W., 1996, Serotonin-mediated increase in prefrontal cortex dopamine release: pharmacological characterization // J Pharmacol Exp Ther, Vol.277. N.l. PP.40-7.

82. Izumi, J., Washizuka, M., Miura, N., Hiraga, Y., and Ikeda, Y., 1994, Hippocampal serotonin 5-HT1A receptor enhances acetylcholine release in conscious rats // J Neurochem, Vol.62. N.5. PP. 1804-8.

83. Jacobs, B.L., Martin-Cora, F.J., and Fornal, C.A., 2002, Activity of medullary serotonergic neurons in freely moving animals // Brain Res Brain Res Rev, Vol.40. N.l-3. PP.45-52.

84. Jin, H., Oksenberg, D., Ashkenazi, A., Peroutka, S.J., Duncan, A.M., Rozmahel, R., Yang, Y., Mengod, G., Palacios, J.M., and O'Dowd, B.F., 1992, Characterization of the human 5-hydroxytryptaminelB receptor // J Biol Chem, Vol.267. N.9. PP.5735-8.

85. Johnson, S.W., Mercuri, N.B., and North, R.A., 1992, 5-hydroxytryptaminelB receptors block the GABAB synaptic potential in rat dopamine neurons // J Neurosci, Vol.12. N.5. PP.2000-6.

86. Katz, B, Miledi, R., 1963, A study of spontaneous miniature potentials in spinal motoneurones // J Physiol., Vol.168. PP.389-422.

87. Kawahara, H., Yoshida, M., Yokoo, H., Nishi, M., and Tanaka, M., 1993, Psychological stress increases serotonin release in the rat amygdala and prefrontal cortex assessed by in vivo microdialysis // Neurosci Lett, Vol.162. N.l-2. PP.81-4.

88. Kennett, G.A., Trail, B., and Bright, F., 1998, Anxiolytic-like actions of BW 723C86 in the rat Vogel conflict test are 5-HT2b receptor mediated // Neuropharmacology, Vol.37. N.12. PP. 1603-10.

89. Kia, PI.K., Miquel, M.C., Brisorgueil, M.J., Daval, G., Riad, M., El Mestikawy, S., Hamon, M., and Verge, D., 1996, Immunocytochemical localization of serotoninlA receptors in the rat central nervous system // J Comp Neurol, Vol.365. N.2. PP.289-305.

90. Klein, D.F., and Fink, M., 1962, Psychiatric reaction patterns to imipramine // Am J Psychiatry, Vol.119. PP.432-8.

91. Kommalage, M., and Hoglund, A.U., 2005, Involvement of spinal serotonin receptors in the regulation of intraspinal acetylcholine release // Eur J Pharmacol, Vol.509. N.2-3. PP. 127-34.

92. Koyama, S., Kubo, C., Rhee, J.S., and Akaike, N., 1999, Presynaptic serotonergic inhibition of GABAergic synaptic transmission in mechanically dissociated rat basolateral amygdala neurons // J Physiol, Vol.518 ( Pt 2). PP.52538.

93. Koyama, S., Matsumoto, N., Kubo, C., and Akaike, N., 2000, Presynaptic 5-HT3 receptor-mediated modulation of synaptic GABA release in the mechanically dissociated rat amygdala neurons // J Physiol, Vol.529 Pt 2. PP.373-83.

94. Lanfumey, L., Pardon, M.C., Laaris, N., Joubert, C., Hanoun, N., Hamon, M., and Cohen-Salmon, C., 1999, 5-HTiA autoreceptor desensitization by chronic ultramild stress in mice // Neuroreport, Vol.10. N.16. PP.3369-74.

95. Lang, P.J., Davis, M., and Ohman, A., 2000, Fear and anxiety: animal models and human cognitive psychophysiology // J Affect Disord, Vol.61. N.3. PP. 137-59.

96. LeDoux, J., 1998, The emotional brain: the mysterious underpinnings of emotional life, Simon & Schuster.

97. LeDoux, J.E., 2000, Emotion circuits in the brain // Annu.Rev.Neurosci, Vol.23. PP.155-84.

98. LeDoux, J.E., Cicchetti, P., Xagoraris, A., and Romanski, L.M., 1990, The lateral amygdaloid nucleus: sensory interface of the amygdala in fear conditioning // J Neurosci, Vol. 10. N.4. PP. 1062-9.

99. Lee, S.P., Xie, Z., Varghese, G., Nguyen, T., O'Dowd, B.F., and George, S.R., 2000, Oligomerization of dopamine and serotonin receptors // Neuropsychopharmacology, Vol.23. N.4 Suppl. PP.S32-40.

100. Leonhardt, S., Herrick-Davis, K., and Titeler, M., 1989, Detection of a novel serotonin receptor subtype (5-HTie) in human brain: interaction with a GTP-binding protein // J Neurochem, Vol.53. N.2. PP.465-71.

101. Luparini, M.R., Garrone, B., Pazzagli, M., Pinza, M., and Pepeu, G., 2004, A cortical GABA-5HT interaction in the mechanism of action of the antidepressant trazodone // Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry, Vol.28. N.7. PP.111727.

102. Luttgen, M., Ogren, S.O., and Meister, B., 2005, 5-HTiA receptor mRNA and immunoreactivity in the rat medial septum/diagonal band of Broca-relationships to GABAergic and cholinergic neurons // J Chem Neuroanat, Vol.29. N.2. PP.93-111.

103. Maeshima, T., Shutoh, F., Hamada, S., Senzaki, K., Hamaguchi-Hamada, K., Ito, R., and Okado, N., 1998, Serotonin2A receptor-like immunoreactivity in rat cerebellar Purkinje cells // Neurosci Lett, Vol.252. N.l. PP.72-4.

104. Mahanty, N.K., and Sah, P., 1998, Calcium-permeable AMPA receptors mediate long-term potentiation in interneurons in the amygdala // Nature, Vol.394. N.6694. PP.683-7.

105. Mahanty, N.K., and Sah, P., 1999, Excitatory synaptic inputs to pyramidal neurons of the lateral amygdala // Eur J Neurosci, Vol.11. N.4. PP. 1217-22.

106. Mansvelder, H.D., Mertz, M., and Role, L.W., 2009, Nicotinic modulation of synaptic transmission and plasticity in cortico-limbic circuits // Semin Cell Dev Biol, Vol.20. N.4. PP.432-40.

107. Marcinkiewicz, M., Verge, D., Gozlan, H., Pichat, L., and Hamon, M., 1984, Autoradiographic evidence for the heterogeneity of 5-HTi sites in the rat brain // Brain Res, Vol.291. N. 1. PP. 159-63.

108. Marek, G.J., and Aghajanian, G.K., 1998, The electrophysiology of prefrontal serotonin systems: therapeutic implications for mood and psychosis // Biol Psychiatry, Vol.44. N. 11. PP. 1118-27.

109. Marek, G.J., and Aghajanian, G.K., 1994, Excitation of intemeurons in piriform cortex by 5-hydroxytryptamine: blockade by MDL 100,907, a highly selective 5-HT2a receptor antagonist // Eur J Pharmacol, Vol.259. N.2. PP. 137-41.

110. Maren, S., 2001, Neurobiology of Pavlovian fear conditioning // Annu Rev Neurosci, Vol.24. PP.897-931.

111. Maren, S., and Quirk, G.J., 2004, Neuronal signalling of fear memory // Nat Rev Neurosci, Vol.5. N.l 1. PP.844-52.

112. Maricq, A.V., Peterson, A.S., Brake, A.J., Myers, R.M., and Julius, D., 1991, Primary structure and functional expression of the 5HT3 receptor, a serotonin-gated ion channel // Science, Vol.254. N.5030. PP.432-7.

113. Marrazzi, A.S., and Hart, E.R., 1955, Relationship of hallucinogens to adrenergic cerebral neurohumors // Science, Vol.121. N.3141. PP.365-7.

114. Marsden, C.A., Conti, J., Strope, E., Curzon, G., and Adams, R.N., 1979, Monitoring 5-hydroxytryptamine release in the brain of the freely moving unanaesthetized rat using in vivo voltammetry // Brain Res, Vol.171. N.l. PP.8599.

115. Mascagni, F., McDonald, A.J., and Coleman, J.R., 1993, Corticoamygdaloid and corticocortical projections of the rat temporal cortex: a Phaseolus vulgaris leucoagglutinin study // Neuroscience, Vol.57. N.3. PP.697-715.

116. Maura, G., Carbone, R., Guido, M., Pestarino, M., and Raiteri, M., 1991, 5-HT2 presynaptic receptors mediate inhibition of glutamate release from cerebellar mossy fibre terminals // Eur J Pharmacol, Vol.202. N.2. PP. 185-90.

117. Maura, G., Marcoli, M., Tortarolo, M., Andrioli, G.C., and Raiteri, M., 1998, Glutamate release in human cerebral cortex and its modulation by 5-hydroxytryptamine acting at h 5-HTiD receptors // Br J Pharmacol, Vol.123. N.l. PP.45-50.

118. Maura, G., Roccatagliata, E., Ulivi, M., and Raiteri, M., 1988, Serotonin-glutamate interaction in rat cerebellum: involvement of 5-HT, and 5-HT2 receptors // Eur J Pharmacol, Vol.145. N. 1. PP.31-8.

119. McDonald, A.J., 1998, Cortical pathways to the mammalian amygdala // Prog Neurobiol, Vol.55. N.3. PP.257-332.

120. McDonald, A.J., 1982, Neurons of the lateral and basolateral amygdaloid nuclei: a Golgi study in the rat // J Comp Neurol, Vol.212. N.3. PP.293-312.

121. McEwen, B.S., and Sapolsky, R.M., 1995, Stress and cognitive function // Curr Opin Neurobiol, Vol.5. N.2. PP.205-16.

122. Millhouse, O.E., and J., d.O., 1983, Neuronal configuration in the lateral and basolateral amygdala // Neuroscience, Vol.10. PP.1269-1300.

123. Moreno, N., and Gonzalez, A., 2007, Evolution of the amygdaloid complex in vertebrates, with special reference to the anamnio-amniotic transition // J Anat, Vol.211. N.2.PP.151-63.

124. Morikawa, H., Manzoni, O.J., Crabbe, J.C., and Williams, J.T., 2000, Regulation of central synaptic transmission by 5-HT(lB) auto- and heteroreceptors // Mol Pharmacol, Vol.58. N.6. PP. 1271-8.

125. Nair, S.G., and Gudelsky, G.A., 2005, 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA) enhances the release of acetylcholine by 5-HT4 and D. receptor mechanisms in the rat prefrontal cortex // Synapse, Vol.58. N.4. PP.229-35.

126. Nair, S.G., and Gudelsky, G.A., 2004, Activation of 5-HT2 receptors enhances the release of acetylcholine in the prefrontal cortex and hippocampus of the rat // Synapse, Vol.53. N.4. PP.202-7.

127. Nichols, D.E., 2004, Hallucinogens // Pharmacol Ther, Vol.101. N.2. PP.131-81.

128. Nitecka, L., and Ben-Ari, Y., 1987, Distribution of GABA-like immunoreactivity in the rat amygdaloid complex // J Comp Neurol, Vol.266. N.l. PP.45-55.

129. Nowak, L., Bregestovski, P., Ascher, P., Herbet, A., and Prochiantz, A., 1984, Magnesium gates glutamate-activated channels in mouse central neurones // Nature, Vol.307. N.5950. PP.462-5.

130. Ogren, S.O., Eriksson, T.M., Elvander-Tottie, E., D'Addario, C., Ekstrom, J.C., Svenningsson, P., Meister, B., Kehr, J., and Stiedl, O., 2008, The role of 5-HT(1A) receptors in learning and memory // Behav Brain Res, Vol.195. N.l. PP.54-77.

131. Ottersen, O.P., Fischer, B.O., Rinvik, E., and Storm-Mathisen, J., 1986, Putative amino acid transmitters in the amygdala // Adv Exp Med Biol, Vol.203. PP.53-66.

132. Packard, M.G., and Cahill, L., 2001, Affective modulation of multiple memory systems // Curr Opin Neurobiol, Vol.11. N.6. PP.752-6.

133. Pazos, A., and Palacios, J.M., 1985, Quantitative autoradiographic mapping of serotonin receptors in the rat brain. 1. Serotonin-1 receptors // Brain Res, Vol.346. N.2. PP.205-30.

134. Peroutka, S.J., and Howell, T.A., 1994, The molecular evolution of G protein-coupled receptors: focus on 5-hydroxytryptamine receptors // Neuropharmacology, Vol.33. N.3-4. PP.319-24.

135. Pitkanen, A., Savander, V., and LeDoux, J.E., 1997, Organization of intra-amygdaloid circuitries in the rat: an emerging framework for understanding functions of the amygdala // Trends Neurosci, Vol.20. N.l 1. PP.517-23.

136. Pollandt, S., Drephal, C., and Albrecht, D., 2003, 8-OH-DPAT suppresses the induction of LTP in brain slices of the rat lateral amygdala // Neuroreport, Vol.14. N.6. PP.895-7.

137. Prow, M.R., Martin, K.F., and Heal, D.J., 1996, 8-OH-DPAT-induced mydriasis in mice: a pharmacological characterisation // Eur J Pharmacol, Vol.317. N.l. PP.21-8.

138. Radja, F., Laporte, A.M., Daval, G., Verge, D., Gozlan, H., and Hamon, M., 1991, Autoradiography of serotonin receptor subtypes in the central nervous system //Neurochem Int, Vol.18. N.l. PP. 1-15.

139. Rainnie, D.G., 1999, Serotonergic modulation of neurotransmission in the rat basolateral amygdala// JNeurophysiol, Vol.82. N.l. PP.69-85.

140. Rainnie, D.G., Asprodini, E.K., and Shinnick-Gallagher, P., 1991, Inhibitory transmission in the basolateral amygdala // J Neurophysiol, Vol.66. N.3. PP.9991009.

141. Rainnie, D.G., Asprodini, E.K., and Shinnick-Gallagher, P., 1993, Intracellular recordings from morphologically identified neurons of the basolateral amygdala // J Neurophysiol, Vol.69. N.4. PP. 1350-62.

142. Roerig, B., Nelson, D.A., and Katz, L.C., 1997, Fast synaptic signaling by nicotinic acetylcholine and serotonin 5-HT3 receptors in developing visual cortex // J Neurosci, Vol.17. N.21. PP.8353-62.

143. Romanski, L.M., Clugnet, M.C., Bordi, F., and LeDoux, J.E., 1993, Somatosensory and auditory convergence in the lateral nucleus of the amygdala // Behav Neurosci, Vol.107. N.3. PP.444-50.

144. Rompler, H., Staubert, C., Thor, D., Schulz, A., Hofreiter, M., and Schoneberg, T., 2007, G protein-coupled time travel: evolutionary aspects of GPCR research // Mol Interv, Vol.7. N.l. PP. 17-25.

145. Sadikot, A.F., and Parent, A., 1990, The monoaminergic innervation of the amygdala in the squirrel monkey: an immunohistochemical study // Neuroscience, Vol.36. N.2.PP.431-47.

146. Sah, P., Faber, E.S., Lopez De Armentia, M., and Power, J., 2003, The amygdaloid complex: anatomy and physiology // Physiol Rev, Vol.83. N.3. PP.803-34.

147. Sakai, N., and Tanaka, C., 1993, Inhibitory modulation of long-term potentiation via the 5-HTiA receptor in slices of the rat hippocampal dentate gyrus // Brain Res, Vol.613. N.2. PP.326-30.

148. Sandyk, R., 2006, Serotonergic mechanisms in amyotrophic lateral sclerosis // Int J Neurosci, Vol.116. N.7. PP.775-826.

149. Santiago, M., Machado, A., and Cano, J., 1993, In vivo release of dopamine from rat striatum, substantia nigra and prefrontal cortex: differential modulation by baclofen // Br J Pharmacol, Vol.109. N.3. PP.814-8.

150. Saxena, P.R., 1995, Serotonin receptors: subtypes, functional responses and therapeutic relevance // Pharmacol Ther, Vol.66. N.2. PP.339-68.

151. Schmidt, C.J., and Fadayel, G.M., 1995, The selective 5-HT2A receptor antagonist, MDL 100,907, increases dopamine efflux in the prefrontal cortex of the rat // Eur J Pharmacol, Vol.273. N.3. PP.273-9.

152. Schmuck, K., Ullmer, C., Engels, P., and Lubbert, H., 1994, Cloning and functional characterization of the human 5-HT2b serotonin receptor // FEBS Lett, Vol.342. N.l. PP.85-90.

153. Shih, J.C., Chen, K., and Ridd, M.J., 1999, Monoamine oxidase: from genes to behavior // Annu Rev Neurosci, Vol.22. PP. 197-217

154. Shin, R.M., Tsvetkov, E., and Bolshakov, V.Y., 2006, Spatiotemporal asymmetry of associative synaptic plasticity in fear conditioning pathways // Neuron, Vol.52. N.5. PP.883-96.

155. Siniscalchi, A., Badini, I., Beani, L., and Bianchi, C., 1999, 5-HT4 receptor modulation of acetylcholine outflow in guinea pig brain slices // Neuroreport, Vol.10. N.3. PP.547-51.

156. Smith, Y., Pare, J.F., and Pare, D., 1998, Cat intraamygdaloid inhibitory network: ultrastructural organization of parvalbumin-immunoreactive elements // J Comp Neurol, Vol.391. N.2. PP.164-79.

157. Smith, Y., Pare, J.F., and Pare, D., 2000, Differential innervation of parvalbumin-immunoreactive interneurons of the basolateral amygdaloid complex by cortical and intrinsic inputs // J Comp Neurol, Vol.416. N.4. PP.496-508.

158. Solano-Castiella, E., Anwander, A., Lohmann, G., Weiss, M., Docherty, C., Geyer, S., Reimer, E., Friederici, A.D., and Turner, R., 2010, Diffusion tensor imaging segments the human amygdala in vivo // Neuroimage, Vol.49. N.4. PP.2958-65.

159. Sosulina, L., Meis, S., Seifert, G., Steinhauser, C., and Pape, H.C., 2006, Classification of projection neurons and interneurons in the rat lateral amygdala based upon cluster analysis // Mol Cell Neurosci, Vol.33. N.l. PP.57-67.

160. Sprouse, J.S., and Aghajanian, G.K., 1987, Electrophysiological responses of serotoninergic dorsal raphe neurons to 5-HTiA and 5-HTiB agonists // Synapse, Vol.1. N.l. PP.3-9.

161. Stanford, I.M., and Lacey, M.G., 1996, Differential actions of serotonin, mediated by 5-HT,B and 5-HT2c receptors, on GABA-mediated synaptic input to rat substantia nigra pars reticulata neurons in vitro // J Neurosci, Vol.16. N.23. PP.7566-73.

162. Steinbusch, H.W., 1981, Distribution of serotonin-immunoreactivity in the central nervous system of the rat-cell bodies and terminals // Neuroscience, Vol.6. N.4. PP.557-618.

163. Steward, L.J., Ge, J., Stowe, R.L., Brown, D.C., Bruton, R.K., Stokes, P.R., and Barnes, N.M., 1996, Ability of 5-HT4 receptor ligands to modulate rat striatal dopamine release in vitro and in vivo // Br J Pharmacol, Vol.117. N.l. PP.55-62.

164. Stutzmann, G.E., and LeDoux, J.E., 1999, GABAergic antagonists block the inhibitory effects of serotonin in the lateral amygdala: a mechanism for modulation of sensory inputs related to fear conditioning // J Neurosci, Vol.19. N.l 1. PP. 1-4.

165. Stutzmann, G.E., McEwen, B.S., and LeDoux, J.E., 1998, Serotonin modulation of sensory inputs to the lateral amygdala: dependency on corticosterone // J Neurosci, Vol.18. N.22. PP.9529-38.

166. Sugita, S., Shen, K.Z., and North, R.A., 1992, 5-hydroxytryptamine is a fast excitatory transmitter at 5-HT3 receptors in rat amygdala // Neuron, Vol.8. N.l. PP. 199-203.

167. Sutherland, R.J., and McDonald, R.J., 1990, Hippocampus, amygdala, and memory deficits in rats // Behav Brain Res, Vol.37. N.l. PP.57-79.

168. Szinyei, C., Heinbockel, T., Montagne, J., and Pape, H.C., 2000, Putative cortical and thalamic inputs elicit convergent excitation in a population of GABAergic intemeurons of the lateral amygdala // J Neurosci, Vol.20. N.23. PP.8909-15.

169. Tanaka, E., and North, R.A., 1993, Actions of 5-hydroxytryptamine on neurons of the rat cingulate cortex // J Neurophysiol, Vol.69. N.5. PP. 1749-57.

170. Tazumi, T., and Okaichi, H., 2002, Effect of lesions in the lateral nucleus of the amygdala on fear conditioning using auditory and visual conditioned stimuli in rats // Neurosci Res, Vol.43. N.2. PP. 163-70.

171. Tork, I., 1990, Anatomy of the serotonergic system // Ann N Y Acad Sci, Vol.600. PP.9-34; discussion 34-5.

172. Tsvetkov, E., Shin, R.M., and Bolshakov, V.Y., 2004, Glutamate uptake determines pathway specificity of long-term potentiation in the neural circuitry of fear conditioning // Neuron, Vol.41. N. 1. PP. 139-51.

173. Tully, K., Li, Y., Tsvetkov, E., and Bolshakov, V.Y., 2007, Norepinephrine enables the induction of associative long-term potentiation at thalamo-amygdala synapses // Proc Natl Acad Sci USA, Vol.104. N.35. PP. 14146-50.

174. Varnas, K., Hall, H., Bonaventure, P., and Sedvall, G., 2001, Autoradiographic mapping of 5-HT(lB) and 5-HT(lD) receptors in the post mortem human brain using (3)H.GR 125743 // Brain Res, Vol.915. N.l. PP.4757.

175. Varnas, K., Halldin, C., and Hall, H., 2004, Autoradiographic distribution of serotonin transporters and receptor subtypes in human brain // Hum Brain Mapp, Vol.22. N.3. PP.246-60.

176. Verge, D., and Calas, A., 2000, Serotoninergic neurons and serotonin receptors: gains from cytochemical approaches // J Chem Neuroanat, Vol.18. N.l-2. PP.41-56.

177. Vertes, R.P., 1991, A PHA-L analysis of ascending projections of the dorsal raphe nucleus in the rat // J Comp Neurol, Vol.313. N.4. PP.643-68.

178. Vertes, R.P., Fortin, W.J., and Crane, A.M., 1999, Projections of the median raphe nucleus in the rat // J Comp Neurol, Vol.407. N.4. PP.555-82. ,

179. Vianna, M.R., Coitinho, A.S., and Izquierdo, I., 2004, Role of the hippocampus and amygdala in the extinction of fear-motivated learning // Curr Neurovasc Res, Vol.1. N.l. PP.55-60.

180. Waeber, C., Dietl, M.M., Hoyer, D., Probst, A., and Palacios, J.M., 1988, Visualization of a novel serotonin recognition site (5-HT1D) in the human brain by autoradiography //Neurosci Lett, Vol.88. N.l. PP.11-6.

181. Wang, T., and Kass, I.S., 1997, Preparation of Brain Slices, Volume 72, p. 1-14.

182. Weiskranz, L., 1956, Behavioural changes associated with ablation of the amygdaloid complex in monkeys // J Comp Physiol Pharmacol, Vol.49. PP. 12958.

183. Weisskopf, M.G., and LeDoux, J.E., 1999, Distinct populations of NMD A receptors at subcortical and cortical inputs to principal cells of the lateral amygdala // J Neurophysiol, Vol.81. N.2. PP.930-4.

184. Woodson, W., Farb, C.R., and Ledoux, J.E., 2000, Afferents from the auditory thalamus synapse on inhibitory interneurons in the lateral nucleus of the amygdala// Synapse, Vol.38. N.2. PP.124-37.

185. Wright, D.E., Seroogy, K.B., Lundgren, K.H., Davis, B.M., and Jennes, L., 1995, Comparative localization of serotonin 1 A, 1C, and 2 receptor subtype mRNAs in rat brain // J Comp Neurol, Vol.351. N.3. PP.357-73.iV

186. Xiao, Y., Richter, J.A., and Hurley, J.H., 2008, Release of glutamate and CGRP from trigeminal ganglion neurons: Role of calcium channels and 5-HTi receptor signaling // Mol Pain, Vol.4. PP.12.

187. Young, B.J., and Leaton, R.N., 1996, Amygdala central nucleus lesions attenuate acoustic startle stimulus-evoked heart rate changes in rats // Behav Neurosci, Vol.110. N.2. PP.228-37.

188. Young, W.S., 3rd, and Kuhar, M.J., 1980, Serotonin receptor localization in rat brain by light microscopic autoradiography // Eur J Pharmacol, Vol.62. N.2-3. PP.237-9.

189. Zola-Morgan, S., Squire, L.R., Alvarez-Royo, P., and Clower, R.P., 1991, Independence of memory functions and emotional behavior: separate contributions of the hippocampal formation and the amygdala // Hippocampus, Vol.1. N.2. PP.207-20.

Информация о работе

Масалов, Игорь Сергеевич
кандидата биологических наук
Санкт-Петербург, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Серотонинергическая модуляция синаптической передачи в дорсолатеральном ядре амигдалы крысы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы