Секреторная активность иммунокомпетентных клеток в условиях воздействия низкоинтенсивными электромагнитными излучениями крайне высокой частоты

Синотова, Оксана Александровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Секреторная активность иммунокомпетентных клеток в условиях воздействия низкоинтенсивными электромагнитными излучениями крайне высокой частоты
ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Автореферат диссертации по теме "Секреторная активность иммунокомпетентных клеток в условиях воздействия низкоинтенсивными электромагнитными излучениями крайне высокой частоты"

На правах рукописи

Синотова Оксана Александровна

СЕКРЕТОРНАЯ АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНЫМИ ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫМИ ИЗЛУЧЕНИЯМИ КРАЙНЕ ВЫСОКОЙ ЧАСТОТЫ

Биофизика 03.00.02

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Пушино - 2004

Работа выполнена в Путинском государственном университете на базе Института биофизики клетки РАН

Научный руководитель:

доктор биологических наук Е.Г. Новоселова

Официальные оппоненты:

доктор биологических иаук Т.Н. Пашовкнн

кандидат биологических наук М.М. Поцелуева

Ведущая организация - Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Защита диссертации состоится « в » апреля 2004 г. в ч.

на заседании Диссертационного совета Д002.038.01 в Институте биофизики клетки

РАН по адресу: 142290, г. Пущино Московская область, ул. Институтская, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной библиотеке Путинского научного центра РАН

Автореферат разослан « Ч » марта 2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета

кандидат биологических наук

ш^й гообзз

l&O GO u

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В последние годы на фоне значительного ряда работ по исследованию действия электромагнитного излучения (ЭМИ) миллиметрового (ММ) диапазона на живые организмы формируется новое направление по изучению влияния этого фактора на функциональные системы организма человека и животных. Интерес к биологическим эффектам ЭМИ низкой интенсивности определяется несколькими обстоятельствами. Во-первых, взаимодействие ЭМИ с веществом при низких интенсивностях падающего излучения имеет нетепловой характер. Во-вторых, высказан целый ряд гипотез относительно механизмов взаимодействия этого вида излучения с биологическими системами (Бецкий и др., 2002; Девятков и др., 1991). В-третьих, существует немало данных об иммуномодулирующих эффектах ЭМИ, широко применяемых в КВЧ-терапии (Аловская и Габдулхакова, 1998; Rojavin and Ziskin, 1998). И, в-четвертых, вследствие чрезвычайного многообразия сигналов ЭМИ, использующихся в различных отраслях, в том числе компьютерной технике и средствах современной электронной связи, ЭМИ приобретает значение все более существенного экологического фактора (Григорьев и др., 2001).

Несмотря на то, что исчерпывающего ответа на вопрос о механизмах первичной рецепции ЭМИ пока не существует, считается доказанным, что одной из наиболее чувствительных систем в организме млекопитающих к воздействию ЭМИ является иммунная система. Между тем, недостаточно исследовано действие ЭМИ нетепловых мощностей на секрецию метаболитов иммунокомпетентных клеток, в частности, таких регуляторных агентов, как фактор некроза опухолей (ФИО) и оксид азота. Известно, что при нормальном физиологическом состоянии организма набор цитокинов невелик, но при стрессе, воспалении, опухолеобразовании и других патологиях изменяется количественный и качественный состав цитокинового профиля (Богдашин и др., 1991; Суслов, 1990). Цитокины, являясь молекулами плейотропного действия, интенсивно изучаются в последнее время в связи с их способностью оказывать полилечебный эффект при различных патологических состояниях -от аутоиммунных расстройств до онкологических заболеваний. В связи с этим особую актуальность приобретают исследования, связанные с модулированием эндогенной продукции факторов иммунологической защиты при воздействии ЭМИ низкой интенсивности.

Цель и основные задами исследования. Цель настоящей работы состояла в исследовании иммунотропного действия низкоинтенсивных электромагнитных волн миллиметрового диапазона и зависимости эффектов ЭМИ от иммунного статуса объектов исследования. В соответствии с выбранной целью были поставлены следующие конкретные задачи:

1. Исследовать эффекты воздействия in vivo и in vitro низкоинтенсивными амплитудно-модулированными (AM; частота амплитудной модуляции 10 Гц) ЭМИ КВЧ (несущие частоты 40 и 42,2 ГГц) на секрецию цитокинов

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С. Петербург »ОбРК

(ФНО, ИЛ-2 и ИЛ-3) и оксида азота иммунокомпетентными клетками мышей.

2. Изучить иммуномодулирующее действие AM ЭМИ КВЧ (частота модуляции 10 Гц; несущая частота 42,2 ГГц) на секрецию цитокинов и оксида азота в клетках мышей с привитой карциномой Эрлиха на разных стадиях опухолевого роста.

3. Исследовать эффекты AM ЭМИ КВЧ (частота модуляции 10 Гц; несущая частота 40 ГГц) на уровень образования антител у мышей после антигенной стимуляции.

Научная новизна. Впервые обнаружен немонотонный характер зависимости доза-эффект продукции ФНО при однократном и фракционированном облучении с использованием AM ЭМИ КВЧ с частотой модуляции 10 Гц и несущими частотами 40 и 42,2 ГГц. Установлено, что длительное фракционированное облучение мышей с экспериментальными опухолями с использованием AM ЭМИ КВЧ (несущая частота 42,2 ГГц) не увеличивало противоопухолевую резистентность животных. Впервые было обнаружено угнетение уровня образования антител у облученных антигенстимулированных мышей при использовании фракционированного режима облучения AM ЭМИ КВЧ (несущая частота 40 ГГц).

Научно-практическая ценность. Представленные в настоящей работе исследования по влиянию низкоинтенсивных AM ЭМИ КВЧ (частота модуляции 10 Гц; несущие частоты 40 и 42,2 ГГц) in vitro и in vivo имеют важное значение для более глубокого понимания биофизических механизмов взаимодействия ММ волн с живой системой. Результаты этой работы представляют несомненный практический интерес, поскольку могут быть использованы для разработки стратегии терапевтического применения AM ЭМИ КВЧ.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на международных симпозиумах "Electromagnetic compatibility" (Wroclaw, Poland, 2002, 2004), международной конференции "Euro Electromagnetics-2004" (Magdeburg, Germany, 2004), международной конференции "Biology, chemistry, and therapeutic applications of nitric oxide" (Nara, Japan, 2004), международном конгрессе "Прогрессивные научные технологии для здоровья человека" (Кара-Даг, Украина, 2003), конференциях молодых ученых "Биология - наука 21-го века" (Пущино, 2002, 2003, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 3 статьи.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследования и их

обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на_

страницах машинописного текста и содержит 24 рисунка. Библиографический указатель содержит_ источников литературы.

Список сокращений. AM - амплитудная модуляция, ИЛ-2 - интерлейкин-2, ИЛ-3 - интерлейкин-3, ИФА - иммуноферментный анализ, КВЧ - крайне высокая частота, ЛПС - липополисахарид, ММ - миллиметровый, ФГА -фитогемагглютинин, ФНО - фактор некроза опухолей, ЭМИ электромагнитное излучение, IgG - иммуноглобулины класса G, N0 - оксид азота.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

В экспериментах использовали половозрелых мышей-самцов линии NMRI, весом 20-25 г. Для облучения использовали генератор Г4-141 с несущими частотами 40 и 42,2 ГГц, частотой AM 10 Гц и средней плотностью потока мощности 0,5 мкВт/см2. Облучение проводили через рупор антенны с апертурой 45 мм х 36 мм на расстоянии 40 см от объекта до основания рупора при комнатной температуре. Животные при облучении содержались в камере из оргстекла размером 25 см х 25 см х 40 см, свободно перемещаясь по камере; экспонирование суспензий клеток проводили в 24-луночных планшетах для культивирования. Контрольные группы животных и суспензий изолированных клеток подвергали процедуре имитации облучения. Для образования солидной опухоли проводили подкожную трансплантацию клеток асцитной карциномы Эрлиха в заднюю конечность мыши в количестве 2x105 клеток на каждое животное. Уровень продукции антител исследовали после иммунизации мышей аффинно-очищенной карбоангидразой эритроцитов быка (Sigma, USA), 50 мкг/мышь с полным и неполным адъювантом Фрейнда (Sigma, USA). Макрофаги выделяли из перитонеальной полости. Спленоциты выделяли после проведения гемолиза с применением NH4CI. Титр антител (IgG) и концентрацию интерлейкинов (ИЛ-2 и ИЛ-3) определяли с помощью ИФА. Концентрацию ФНО в лизатах перитонеальных макрофагов и спленоцитов измеряли по цитолитическому действию ФНО на клетки-мишени линии L929, а также используя специальные коммерческие, доступные наборы для определения ФНО. Секрецию оксида азота измеряли по концентрации нитрита, являющегося конечным продуктом метаболизма короткоживущего соединения NO (Ding et al., 1988). Статистическую обработку экспериментальных данных проводили на компьютере с использованием программы "Origin 6.0". Достоверность различий экспериментальных данных оценивали, используя t-критерий Стьюдента для малых выборок.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Определение влияния AM ЭМИ КВЧ с несущими частотами 40 и 42,2 ГГц на секрецию цитокинов (ФНО, ИЛ-2 и ИЛ-3) и оксида азота у здоровых мышей

Известно, что ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц нашло широкое применение в различных отраслях медицины. Интересным представляется сравнение результатов по исследованию иммуномодулирующих эффектов двух

близких несущих частот, 40 и 42,2 ГГц, при стандартизации условий облучения: одинаковой интенсивности излучения (0,5 мкВт/см2) и одинаковой частоте AM (10 Гц). В настоящем исследовании применяли однократное воздействие AM ЭМИ КВЧ в условиях облучения in vivo и in vitro. После облучения здоровых животных или изолированных иммунокомпетентных клеток (перитонеальные макрофаги и спленоциты) оценивали динамику изменения секреции цитокинов (ФНО, ИЛ-2 и ИЛ-3), оксида азота и изменение количества макрофагов перитонеального экссудата и спленоцитов.

1.1. Влияние облучения с несущей частотой 40 ГГц in vivo и in vitro на продукцию ФНО. На рис. 1 показана дозовая зависимость продукции ФНО перитонеальными макрофагами (а) и спленоцитами (б) после однократного непрерывного облучения мышей. Продуцирующая активность клеток при использовании ЭМИ КВЧ с частотой 40 ГТц в зависимости от длительности экспозиции мышей изменялась немонотонно. Так, при изменении времени экспозиции от 2 до 96 ч наблюдали и стимуляцию, и подавление продукции ФНО у облученных животных по сравнению с контрольной группой. Интересно, что величина максимального стимулирующего эффекта ЭМИ КВЧ оказалась практически одинаковой для макрофагов и спленоцитов. Амплитуда супрессивного эффекта AM ЭМИ КВЧ на продукцию цитокина макрофагами была не столь значительной, по сравнению с амплитудой стимулирующего эффекта этих излучений, но, тем не менее, немонотонность изменений является свидетельством слабого угнетающего действия AM ЭМИ КВЧ.

О 12 24 36 48 60 72 84 96 0 12 24 36 48 60 72 84 96

Рис. 1. Продукция ФНО перитонеальными макрофагами (а) и спленоцитами (б) после однократного облучения здоровых мышей с использованием AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГТц. 1 - контроль, 2 - облучение. По оси абсцисс - продолжительность экспозиции, часы. По оси ординат - продукция ФНО, пг/мл. **р < 0,001; *р < 0,05.

Результаты воздействия in vitro AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГТц на продукцию ФНО в экспонированных клетках представлены на рис. 2. Показано, что получасовое и полуторачасовое облучение перитонеальных макрофагов не вызывало заметных изменений продукции ФНО, а после

экспозиции клеток в течение 1 ч продукция ФНО увеличивалась на 20% (рис. 2а). Как видно, максимальная стимуляция продукции цитокина макрофагами достигалась после их облучения в течение 2 и 2,5 ч - в 1,5 и 1,4 раза, соответственно. Иная динамика изменения продукции ФНО выявлена для облученных сттлеяоцитов - клетки активировались уже после 30-ти мин облучения ЭМИ КВЧ (рис. 26). Максимальная продукция цитокина спленоцитами обнаружена при меньшей дозе облучения (1 ч), чем для макрофагов, и составляла двукратное увеличение по сравнению с контролем. Постепенное снижение стимулирующего эффекта ЭМИ КВЧ для спленоцитов наблюдали с увеличением времени экспозиции in vitro: после 2 ч экспозиции уровень продукции ФНО не отличался от контрольного, а облучение в течение 2,5 ч имело результатом достоверное угнетение продукции ФНО спленоцитами (до 70% от контроля). Таким образом, при использовании ММ волн in vitro обнаружена немонотонная зависимость изменения уровня продукции ФНО от времени экспозиции как для макрофагов, так и для спленоцитов, при этом ФНО-продуцирующая способность спленоцитов была достоверно снижена по сравнению с контролем. При сравнении эффектов ЭМИ КВЧ in vivo и in vitro обнаружено, что изменения продукции ФНО, во-первых, были несинхронными для разных клеточных популяций, во-вторых, немонотонными.

35 30 23 20

15 10 5

Рис. 2. Продукция ФНО изолированными клетками, облученными AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГГц. (а) - макрофаги, (б) - спленоциты; 1 - контроль, 2 - облучение. По оси абсцисс - продолжительность экспозиции, часы. По оси ординат - продукция ФНО, пг/мл. "р < 0,001; *р < 0,05.

1.2. Влияние облучения in vivo и in vitro с несущей частотой 42,2 ГГц на продукцию ФНО. На рис. 3 показана продукция ФНО перитонеальными макрофагами (а) и спленоцитами (б) после однократного непрерывного облучения мышей. Общий характер зависимости продукции ФНО от продолжительности облучения in vivo практически не отличался для макрофагов и спленоцитов - мы обнаружили немонотонные изменения продукции ФНО клетками после облучения животных. Так, достоверное

повышение продукции ФНО как макрофагами, так и спленоцитами наблюдали после экспозиций 2, 12, 24, 36 и 72 ч, а подавление - после 48 ч облучения животных с частотой 42,2 ГГц. Однако облучение мышей в течение 96 ч вызывало резкое угнетение продукции ФНО макрофагами, тогда как в этих условиях продукция цитокина спленоцитами не отличалась от контроля.

О 12 24 36 48 во 72 84 96 0 12 24 36 48 60 72 84 96

Рис. 3. Продукция ФНО перитонеальными макрофагами (а) и спленоцитами (б) после однократного облучения здоровых мышей с использованием АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц. 1 - контроль, 2 - облучение. По оси абсцисс - продолжительность экспозиции, часы. По оси ординат - концентрация ФНО, пг/мл. ** р < 0,001; *р < 0,05.

(а)

0,5 1,0 1,5 2,0

0,6 1,0 1,5 2,0 2,5

Рис. 4. Продукция ФНО изолированными клетками, облученными АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц. (а) - макрофаги, (б) - спленоциты; I - контроль, 2 - облучение. По оси абсцисс - продолжительность экспозиции, часы. По оси ординат - концентрация ФНО, пг/мл. ** р < 0,001; * р < 0,05.

Результаты воздействия AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц на продукцию ФИО в экспонированных in vitro клетках представлены на рис. 4. Следует отметить, что при облучении изолированных клеток дозовые кривые для макрофагов и спленоцитов различались. Если для ФНО-продуцирующей активности спленоцитов кривая имела выраженный колебательный характер, то зависимость от дозы для продукции ФИО макрофагами указывала на 1 стимулирующее влияние ЭМИ КВЧ.

1.3. Влияние AM ЭМИ КВЧ с несущими частотами 40 и 42,2 ГГц на * секрецию интерлейкинов. Мы показали, что облучение ЭМИ КВЧ с несущей

частотой 40 ГТц не приводило к достоверным изменениям уровня секреции ИЛ-3 спленоцитами независимо от способа воздействия — in vivo или in vitro. Однако было обнаружено достоверное снижение секреции другого интерлейкина - ИЛ-2, которое наблюдалось после 48 ч облучения in vivo ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГТц.

Напротив, при изучении влияния ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц на секрецию интерлейкинов нами было обнаружено достоверное увеличение секреции как ИЛ-2, так и ИЛ-3, причем после кратковременной экспозиции мышей - двух часов. При более продолжительном облучении in vivo ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГТц не обнаружено заметных изменений уровня секреции исследованных интерлейкинов спленоцитами. Следует отметать, что повышение уровня секреции интерлейкинов коррелировало с увеличением ФНО-продуцирующей способности спленоцитов в этих условиях облучения (2 ч, 42,2 1Тц, in vivo). При облучении изолированных спленоцитов с использованием ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГТц не обнаружено достоверных изменений уровней секреции исследованных интерлейкинов.

1.4. Влияние облучения AM ЭМИ КВЧ с несущими частотами 40 и 42,2 ГГц на количество иммунокомпетентных клеток. Известно, что одним из важных показателей состояния иммунного статуса животных при воздействии внешних факторов является изменение количества клеток в лимфоидных органах. Мы измеряли численность двух популяций секреторных клеток -спленоцитов и макрофагов перитонеального экссудата. Обращает на себя внимание существенное различие динамики изменения числа клеток при воздействии AM ЭМИ КВЧ с двумя исследованными несущими частотами - 40 и 42,2 ГТц. Если количество иммунокомпетентных клеток во всем исследованном интервале времени облучения (от 2 до 96 ч) с использованием ЭМИ КВЧ с частотой 40 ГТц не претерпевало заметных изменений (данные не показаны), то облучение с частотой 42,2 ГГц приводило к уменьшению количества как макрофагов, так и спленоцитов. Так, мы установили, что облучение приводило к снижению числа макрофагов после 12, 24 и 48 ч

' облучения, а спленоцитов - 5, 12 и 72 ч (рис. 5), что указывает на серьезные

изменения в морфофункциональной активности исследованных иммунокомпетентных клеток, вызванные облучением ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц. Интересно, что в этих условиях облучения снижение

количества клеток не коррелировало с изменением их ФНО-продуцирующей активности. Оказалось, что облученный организм способен отвечать на воздействие АМ ЭМИ КВЧ повышением продукции ФНО как макрофагами, так и спленоцитами даже в условиях потери 30 - 50% количества клеток.

0 12 24 3« 48 60 72 84 96 0 12 24 36 48 60 72 84 96

Рис. 5. Количество перитонеальных макрофагов (а) и спленоцитов (б) у здоровых мышей, облученных АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц. 1 - контроль, 2 - облучение. По оси абсцисс - продолжительность экспозиции, часы. По оси ординат - количество клеток (на мышь), % от контроля. За 100% принято количество клеток: макрофаги - 3,2х106, спленоциты - 120х106. **р < 0,001; *р < 0,05.

1.5. Влияние воздействия /и vivo АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на секрецию оксида азота. Оксид азота известен в качестве универсального модулятора функциональной активности клеток разных систем организма, включая иммунную систему и ЦНС. Универсальность N0 как биологического мессенджера определяется прежде всего его физико-химическими свойствами высоколабильного, короткоживущего реактивного свободного радикала (Болдырев, 1995).

Показано, что достоверное повышение секреции N0 активированными макрофагами при однократном облучении мышей наблюдалось тогда, когда продолжительность экспозиции лежала в пределах от 36 до 96 ч. При более кратковременном облучении (от 2 до 24 ч) уровень секреции N0 не отличался от контроля (рис. 6).

Интересно отметить, что после 48 ч облучения мышей с использованием АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГТц выявлено существенное различие в изменении способности макрофагов секретировать ФНО и N0: облучение вызывало повышение секреции N0, но приводило к снижению продукции ФНО. Вероятно, снижение концентрации одного из ключевых провоспалительных цитокинов (ФНО) на фоне стимуляции секреции оксида азота свидетельствует о запуске дополнительных компенсаторных механизмов, направленных на снижение токсического действия этих активных веществ на организм. Примечательно, что в этих условиях облучения обнаружена

тенденция к увеличению уровня другого провоспалительного цитокина, ИЛ-2, спленоцитами после 48 ч облучения мышей.

Рис. б. Секреция оксида азота ЛПС-стимулированными

макрофагами в зависимости от времени облучения здоровых мышей с использованием АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой

11 42,2 ГГц.

1 - контроль, 2 - облучение, "р < 0,001; *р< 0,05.

м б

О 12 24 36 48 60 72 84 96 Продолжительность экспозиции, ч

2. Влияние АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на секрецию ФИО, ИЛ-2, ИЛ-3 и N0 при фракционированном воздействии на здоровых мышей и опухоленосителей

В настоящем исследовании, помимо однократного непрерывного воздействия АМ ЭМИ КВЧ, применяли фракционированный режим облучения, который обычно используется в медицинской практике. В настоящей работе описаны результаты исследования иммуномодулирующих эффектов ЭМИ КВЧ на животных с острой патологией - мышей с экспериментальными злокачественными опухолями. Мы изучали влияние фракционированного облучения на секреторную активность клеток у четырех групп мышей: 1 -контрольные; 2 - здоровые мыши, облученные АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц; 3 - опухоленосители (мыши с привитой карциномой Эрлиха); 4 -опухоленосители, облученные АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц. Животных облучали в течение 10, 20 и 30 дней' по 1,5 ч ежедневно. Для оценки иммуномодулирующих эффектов ЭМИ КВЧ мы исследовали динамику изменения секреции интерлейкинов (ИЛ-2, ИЛ-3) и оксида азота клетками, а также изменения продукции ФИО в клетках и концентрации ФНО в плазме периферической крови. Кроме того, мы определяли динамику изменения количества иммунокомпетентных клеток при облучении и опухолевом росте, а также выживаемость и продолжительность жизни мышей-опухоленосителей.

2.1. Продукция ФНО при фракционированном облучении н росте опухолей. При выяснении чувствительности здорового организма к действию АМ ЭМИ КВЧ обнаружены признаки как стимулирующего эффекта излучения на продукцию ФНО в клетках, так и эффекта угнетения (рис. 7, кривые 2). На

220 200 180 160 140 120 100 80 во

220 200 180 160 140 120 100 80 60 40

30 дней

Рве. 7. Продукция ФНО клетками при

фракционированном облучении мышей АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц и росте опухолей, (а) - макрофаги; (б) - спленоциты;

1 - контрольные мыши;

2 ~ облученные мыши;

3 -опухоленосители;

4 - облученные опухоленосители.

По оси ординат - концентрация

ФНО, % от контроля.

По оси абсцисс - время после

трансплантации опухоли и

начала фракционированного

облучения.

**р< 0,001; *р< 0,05.

30 дней

ранней стадии опухолевого роста (10 дней) отмечено почти двукратное повышение продукции ФНО макрофагами и спленоцитами мышей (рис. 7, кривые 3). Через 20 дней после трансплантации опухоли продукция ФНО оставалась повышенной, составляя примерно 160% от контроля. Таким образом, на начальной стадии опухолевого роста была показана стимуляция продукции ФНО, что является адаптивным ответом организма, направленным на отторжение опухоли. Постепенное снижение уровня продукции ФНО по мере роста опухоли приводило к тому, что на 30-й день продукция ФНО макрофагами и спленоцитами не отличалась от контроля.

Изменения продукции ФНО в отношении облученных опухоленосителей наблюдали после 20-ти и 30-ти дней фракционированного воздействия ЭМИ КВЧ Так, фракционированное облучение вызывало достоверное снижение продукции ФНО спленоцитами на 20-й день опухолевого роста, но уровень

продукции ФНО в этих условиях оставался выше, чем в контроле (рис. 76, кривая 4). На 30-й день опухолевого роста и начала облучения достоверное угнетение продукции ФНО было показано для макрофагов (до 70% от контроля) (рис. 7а, кривая 4). Таким образом, обнаруженные изменения продукции ФНО в клетках облученных опухоленосителей, по сравнению с необлученными, указывают на иммунодепрессивное действие АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц в отношении животных с экспериментальными опухолями.

2.2. Концентрация ФНО в плазме. Мы показали, что для здоровых животных, которые подвергались фракционированному облучению в течение 30-ти дней, динамика изменения концентрации ФНО в плазме практически полностью совпадала с динамикой продукции цитокина макрофагами и носила немонотонный характер (сравнить рис. 8, кривая 2 и рис. 7а, кривая 2). Так, облучение в течение 10-ти дней вызывало увеличение концентрации ФНО в плазме (в 1,5 раза), а облучение в течение 20-ти дней не приводило к заметным изменениям концентрации цитокина в плазме, что совпадало с динамикой изменения продукции ФНО макрофагами в эти сроки облучения. Однако продолжение курса облучения (до 30-ти дней) приводило к значительному снижению количества цитокина в крови (до 45% от нормы), тогда как продукция ФНО макрофагами после 30-ти дней фракционированного воздействия ЭМИ КВЧ заметно не отличалась от контроля.

Рис. 8. Концентрация ФНО в плазме при

фракционированном облучении мышей АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц и росте опухолей. По оси абсцисс - время после трансплантации опухоли и начала фракционированного облучения. По оси ординат -концентрация ФНО, % от контроля. Обозначения см. на рис. 7. ** р< 0,001; *р< 0,05.

30 дней

Кроме того, изменения концентрации ФНО в плазме периферической крови животных с опухолями совпадали с изменениями продукции цитокина в клетках опухоленосителей (сравнить рис. 8, кривая 3 и рис. 7а, б, кривые 3). Так, отмечено значительное повышение концентрации ФНО в плазме на 10-й (почти в 3 раза) и 20-й дни, что совпадало с увеличением продукции ФНО в клетках. Однако на 30-й день опухолевого роста концентрация ФНО в плазме

оставалась повышенной, тогда как продукция ФИО в клетках опухоленосителей была снижена до контрольных значений. Таким образом, рост злокачественного новообразования стимулировал продукцию ФНО в большей степени, чем облучение, что можно видеть по уровню продукции ФНО макрофагами и накоплению этого цитокина в плазме.

Интересно, что для облученных опухоленосителей обнаруженные изменения концентрации ФНО в плазме частично совпадали с изменениями продукции цитокина макрофагами (сравнить рис. 8, кривая 3 и рис. 7а, б, кривые 3). Отличие заключалось в том, что облучение мышей с экспериментальными опухолями в течение 10-ти дней приводило к заметному снижению концентрации ФНО в плазме (рис. 8, кривая 4), тогда как продукция ФНО макрофагами не изменялась, если сравнивать с необлученными опухоленосителями. Таким образом, обнаруженные эффекта ММ волн в отношении концентрации ФНО в плазме животных-опухоленосителей подтверждают ранее сделанный вывод об иммунодепрессивном действии АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц при опухолевом росте.

2.3. Секреция интерлейкинов спленоцитамн. Изменение уровня секреции интерлейкинов обнаружены только в группе необлученных мышей с экспериментальными опухолями. Так, на 10-й день после трансплантации опухоли мы определили достоверное снижение секреции как ИЛ-2 (рис. 9а, кривая 3), так и ИЛ-3 (рис. 96, кривая 3), тогда как на 20-й и 30-й дни после трансплантации опухоли секреция интерлейкинов спленоцитамн достоверно не отличалась от контроля. Для других групп мышей (здоровые облученные и облученные опухоленосители) во все сроки наблюдения (10, 20 и 30 дней) секреция исследованных интерлейкинов достоверно не отличалась от контроля (рис. 9, кривые 2 и 4). Полагаем, что отсутствие достоверных изменений секреции ИЛ-2 и ИЛ-3 после воздействия АМ ЭМИ КВЧ свидетельствует о невовлеченности этих цитокинов в реализацию иммунотропных эффектов, связанных с фракционированным воздействием низкоинтенсивных АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц и частотой АМ 10 Гц.

2.4. Секреция оксида азота макрофагами. Примечательно, что после самого короткого периода фракционированной экспозиции здоровых животных - 10 дней - показано заметное возрастание секреции N0 макрофагами (рис. 10, кривая 2). Более длительное фракционированное облучение (20 дней) животных также вызывало повышение секреции N0, однако эффект снижался по мере увеличения длительности фракционированного воздействия, и после 30-ти дней облучения уровень секреции N0 макрофагами экспонированных здоровых животных достоверно не отличался от контроля.

Следует отметить, что в процессе опухолевого роста отмечено резкое возрастание секреции N0 макрофагами, причем наиболее значительное увеличение секреции N0 (в 6 раз) наблюдалось на 30-й день развития опухоли (рис. 10, кривая 3). Таким образом, рост опухоли вызывал нарастающее повышение секреции оксида азота активированными макрофагами,

выделенными из неопухолевой ткани, что совпадает с результатами ранее опубликованных работ (Проскуряков и др., 2000; Ohshima & Bartsch, 1994).

а) ИЛ-2

30 дней

б)ИЛ-3

Рис» 9. Секреция ИЛ-2 (а) и ИЛ-3 (б) ФГА-стимулированными спленоцитами при фракционированном облучении мышей АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц и росте опухолей. По оси абсцисс - время после трансплантации опухоли и начала фракционированного облучения. По оси ординат -концентрация ИЛ-2 и ИЛ-3, % от контроля. За 100 % приняты значения концентраций: ИЛ-2 - 60 нг/мл, ИЛ-3 - 100 нг/мл. * р < 0,05.

Обозначения см. на рис. 7.

30 дней

Стимуляцию секреции N0 активированными макрофагами можно расценивать как адаптивный ответ организма на развитие опухоли. Необходимо отметить, что максимальный уровень секреции N0 наблюдался тогда, когда в организме опухоленосителей были исчерпаны возможности для поддержания продукции ФНО на высоком уровне, и ФНО-продуцирующая активность макрофагов была заметно снижена (рис. 7а, кривая 3).

Необходимо подчеркнуть, что применение АМ ЭМИ КВЧ способно было повысить уровень неспецифического иммунного ответа в организме опухоленосителей в течение первых 10-ти дней облучения. Эффект ЭМИ КВЧ заключался в том, что уровень секреции N0 у облученных опухоленосителей повышался на 24% по сравнению с необлученными (рис. 10, кривая 4). Однако

Рис. 10. Секреция оксида азота ЛПС-стимулированными макрофагами при фракционированном облучении мышей АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц и росте опухолей. По оси абсцисс - время после трансплантации опухоли и начала фракционированного облучения. Обозначения см. на рис. 7. **р < 0,001; *р < 0,05.

более длительное экспонирование животных с опухолями (20 дней) не приводило к заметным изменениям секреции N0, если сравнивать с необлученными опухоленосителями. Анализируя состояние МО-секреторной активности макрофагов опухоленосителей, облученных в течение 30-ти дней, можно отметить, что длительное фракционированное воздействие АМ ЭМИ КВЧ приводило к значительному уменьшению пика секреции N0, вызванного ростом злокачественного новообразования. Таким образом, применение ММ излучения модифицировало те изменения секреции N0 макрофагами, которые происходили в организме при опухолевом росте. Подавление секреции N0 после 30-ти дней воздействия указывает на снижение противоопухолевой резистентности животных с экспериментальными опухолями, которые подвергались длительному фракционированному облучению с использованием АМ ЭМИ КВЧ.

2.5. Влияние облучения АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на количество спленоцитов и перитонеальных макрофагов у здоровых мышей и опухоленосителей. Если сравнивать с контрольным уровнем количество клеток у облученных здоровых мышей, то можно отметить небольшое, но статистически достоверное увеличение числа спленоцитов на

20-й (126%) и 30-й (136%) дни от начала фракционированной экспозиции (рис. 11, кривая 2). Опухолевый рост вызывал резкое увеличение числа спленоцитов: на 10-й день количество клеток в селезенке составляло 170%, а уже на 30-й день - 250% от контроля (рис. 11, кривая 3). Напротив, не обнаружено модифицирующего действия ММ волн на количество спленоцитов у опухоленосителей (рис. 11, кривая 4).

Рис. 11. Количество клеток селезенки после фракционированного облучения мышей АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц и росте опухолей. По оси абсцисс - время после трансплантации опухоли и начала фракционированного облучения. За 100 % принято 120 хЮ6 клеток (на орган). **р < 0,001 - отличие в группах 3 и 1; *р < 0,05 - отличие в 1руппах2 и 1. Обозначения см. на рис. 7.

30 дней

В отличие от обнаруженных изменений количества спленоцитов, число макрофагов перитоиеальиого экссудата не изменялось ни под влиянием опухолевого роста, ни под действием ЭМИ КВЧ, ни при совместном действии этих двух факторов (данные не показаны). Стоит особо отметить, что на фоне постепенного увеличения числа спленбцитов у мышей-опухоленосителей обнаружено снижение уровня продукции ФНО этими клетками до нормы на 30-й день от начала трансплантации опухоли. Снижение ФНО-продуцирующей способности макрофагов и резкое увеличение этими клетками секреции оксида азота на 30-й день развития опухоли происходили при сохранении числа перитонеальных клеток.

2.6. Выживаемость опухоленосителей. Мы показали, что длительное фракционированное облучение (АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГТц) мышей с экспериментальными опухолями не вызывало достоверных изменений продолжительности жизни животных. Так, значения средней продолжительности жизни опухоленосителей составили 49,6±5,8 и 47,2±5,6 дней для необлученных и облученных опухоленосителей, соответственно (рис. 12). Животные обеих групп погибали почти одновременно: облученные - на 70-

на 70-И день, а необлученные - на 75-й день. Важно подчеркнуть, что при использовании данной модели канцерогенеза гибель животных начиналась примерно на 20-й день после трансплантации клеток карциномы Эрлиха. Этот факт дает основание считать, что, по крайней мере, в течение первых 20-ти дней в организме опухоленосителей протекали процессы, направленные на отторжение опухоли. Действительно, в этот период зафиксировано значительное повышение продукции ФНО в клетках и накопление этого цитокина в плазме крови. В течение всего периода наблюдения установлено значительное увеличение секреции оксида азота. Следует обратить внимание на то, что на 30-й день роста опухоли продукция ФНО в макрофагах снижалась до контрольного уровня тогда, когда клетки активно секретировали оксид азота. Таким образом, неопухолевые макрофаги в качестве основных клеток, секретирующих аптираковые гуморальные факторы, на начальных стадиях опухолевого роста активно продуцировали ФНО, а на более поздней - активно секретировали оксид азота.

Ряс. 12. Влияние АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на выживаемость мышей с привитой карциномой Эрлиха. По оси абсцисс - время после трансплантации, дни. По оси ординат - количество живых мышей, % выживших.

1 - мыши-опухоленосители;

2 - облученные животные со злокачественными опухолями.

0 10 20 30 40 50 60 70 80

Анализ сведений, касающихся изменений функций клеток иммунной системы в процессе опухолевого роста, позволяет выделить несколько основных признаков иммунопатогенеза. Во-первых, появление продуктов, секретируемых собственно опухолевыми клетками, что вызывает подавление функций нормальных клеток в микроокружении опухоли. Очевидно, этот процесс направлен на защиту опухоли путем блокирования иммунного ответа организма, стремящегося к ее отторжению. Во-вторых, развитие новообразования провоцирует реакцию, свойственную организму в условиях антигенной стимуляции, вызванной любой чужеродной субстанцией. При этом происходит повышение иммунной реактивности организма хозяина и мобилизация всего набора средств, направленных на отторжение опухоли: цитотоксических Т лимфоцитов, естественных киллерных клеток, увеличение

синтеза цитотоксических и провоспалительных агентов, например, цитокинов и оксида азота (Kurosawa et al., 1993; Kurosawa et al., 1995; Lin et al., 1994).

3. Влияние фракционированного облучения с несущей частотой 40 ГГц на антителообразование у иммунизированных мышей

Интересно было изучить ответ организма на облучение не только в состоянии иммунодепрессии (модель опухолевого роста), но и в состоянии антигенной стимуляции (иммунизация чужеродным белком). Это особенно важно для разработки стратегии терапевтического применения ЭМИ КВЧ. Изучение эффектов воздействия AM ЭМИ КВЧ на иммунизированных животных проводили в режиме фракционированного облучения, что наиболее приближено к клиническому использованию ММ волн. Уровни антителообразования при развитии первичного и вторичного иммунных ответов измеряли на 15-й и 30-й дни после начала фракционированного облучения мышей с частотой 40 ГГц. Кроме определения содержания антител (IgG) в крови, проводился подсчет количества спленоцитов у иммунизированных мышей.

3.1. Влияние фракционированного облучения на антителообразование при первичном иммунном ответе. Показано, что при развитии первичного иммунного ответа уровни антителообразования были одинаковыми у иммунизированных необлученных и иммунизированных облученных животных

Рис. 13. Влияние фракционированного облучения AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГГц на антителообразование у мышей после первой иммунизации.

1 - иммунизированные мыши,

2 - облученные иммунизированные мыши. Каждое значение оптической плотности при проведении ИФА -среднее для 6 мышей; для каждого животного измерения проводили индивидуально в 9-ти повторах.

(рис. 13). Это указывает на то, что, по меньшей мере, при развитии первичного иммунного ответа, облучение AM ЭМИ КВЧ с частотой 40 ГГц не влияет на концентрацию иммуноглобулинов в периферической крови иммунизированных мышей.

3.2. Влияние фракционированного облучения на антителообразование при вторичном иммунном ответе. Значительный эффект ММ волн был обнаружен тогда, когда период фракционированного воздействия ЭМИ КВЧ

100 200 400 800 1600 3200 Разведение сыворотки (обратная величина)

продолжался 30 дней, а повторное введение антигена заметно повышало уровень антител. Как видно, применение ММ волн при развитии вторичного иммунного ответа снижало уровень антителообразования у иммунизированных мышей (рис. 14).

100 200 400 800 1600 3200 6400 12800 25600 Разведение сыворотки (обратная величина)

Рис. 14. Влияние фракционированного облучения АМ ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГГц на антителообразование у мышей после повторной иммунизации. Обозначения см. на рис.13.

Количество клеток в селезенке является очень важным показателем для оценки иммунного ответа, поскольку Т лимфоциты при участии В клеток регулируют и синтез иммуноглобулинов, и выброс антител в кровяное русло. В настоящей работе показано, что облучение АМ ЭМИ КВЧ не вызывало изменений количества спленоцитов у иммунизированных мышей (данные не показаны). Таким образом, использование АМ ЭМИ КВЧ приводило к угнетению антителообразования и не вызывало дополнительной мобилизации защитных ресурсов в организме животных после антигенной стимуляции.

ВЫВОДЫ

1. Показан немонотонный характер зависимости доза-эффект на продукцию ФИО макрофагами и спленоцитами после однократного воздействия in vivo и in vitro АМ ЭМИ КВЧ (частота модуляции 10 Гц; несущие частоты 40 и 42,2 ГГц). Амплитуда колебаний уровня продукции ФИО в клетках не зависела от частоты сигнала.

2. Показано увеличение секреции оксида азота макрофагами мышей при однократном воздействии in vivo АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц и временем экспозиции, превышающим 36 ч. г

3. Показано снижение секреции интерлейкина-2 спленоцитами при непрерывном облучении in vivo АМ ЭМИ КВЧ с частотой 40 ГГц в течение 48

4. а также увеличение секреции интерлейкина-2 и интерлейкина-3 при

однократном воздействии АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц на здоровых мышей в течение 2 ч.

4. При фракционированном режиме облучения (кратковременная ежедневная экспозиция в течение 30-ти дней) здоровых животных и мышей с солидными опухолями при использовании АМ ЭМИ КВЧ с частотой 42,2 ГГц получены следующие результаты:

а) фракционированное облучение вызывало немонотонные изменения продукции ФНО макрофа1 ами и спленоцитами здоровых мышей;

б) секреция оксида азота возрастала после 10-ти дней облучения, а при увеличении длительности воздействия стимулирующий эффект ЭМИ снижался;

в) облучение мышей с экспериментальными опухолями не увеличивало противоопухолевую резистентность животных (по показателю уровней продукции ФНО, секреции N0 и интерлейкинов), а также не вызывало изменений выживаемости и продолжительности жизни мышей с экспериментальными опухолями.

5. При использовании фракционированного режима облучения АМ ЭМИ КВЧ с частотой 40 ГГц на мышей после антигенной стимуляции показано значительное угнетение продукции антител у облученных иммунизированных животных.

6. Результаты работы доказывают, что, вызывая немонотонные изменения секреции цитокинов и оксида азота, низкоинтенсивные АМ ЭМИ КВЧ (частота АМ 10 Гц; несущие частоты 40 и 42,2 ГГц) оказывают слабый угнетающий эффект на чувствительную к внешним воздействиям систему клеточного иммунитета животных

Список публикаций по теме диссертации

1 О.А. Синотова, Е.Г. Новоселова, О.В. Глушкова, Е.Е. Фесенко. Сравнение эффектов электромагнитного излучения КВЧ- и СВЧ- диапазонов на продукцию фактора некроза опухолей в клетках мышей. // Биофизика. 2004. Т49, вып.З (в печати).

2. Е.Г. Новоселова, В.Б. Огай, О.А. Синотова, О.В. Сорокина, О.В. Глушкова, Е.Е. Фесенко. Влияние миллиметровых волн на иммунную систему мышей с экспериментальными опухолями. // Биофизика. 2002. Т.47, вып.5. С. 933-942.

3 E.G. Novoselova, V.B. Ogay, O.V. Sorokina, O.V. Glushkova, O.A. Sinotova, E.E. Fesenko. The production of tumor necrosis factor in cells of tumor-bearing mice after total-body microwave irradiation and antioxidant diet. // Electromagnetic in Biology and Medicine. 2004. V. 22, № 4 (in press).

4. О.А. Синотова, О.В. Глушкова, Е.Г. Новоселова. Частотная зависимость эффектов слабых электромагнитных волн на продукцию цитокинов. // Тезисы 6-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых "Биология - наука 21-го века". Пущино, 2002. T.l. С.ЗЗ.

5. О.А. Синогова, О.В. Глушкова, О.В. Сорокина. Динамика изменения продукции цитокинов (ФНО, ИЛ-2, ИЛ-3) и оксида азота мышей с экспериментальными опухолями. Эффекты действия низкоинтенсивного ЭМИ КВЧ. // Тезисы 7-ой Пущинской школы-конференции молодых

ученых "Биология - наука 21 -го века". Пущино, 2003. С.77. >

6. E.G. Novoselova, V.B. Ogay, О.А. Sinotova, O.V. Glushkova, K.P. Klenin, E.E. Fesenko. The effect of weak microwave exposure on the functional activity of mouse immune cells. // Proceedings of the 16th International Wroclaw Symposium and Exhibition on Electromagnetic Compatibility. Part I. Wroclaw, Poland, 2002. P.79-82.

7. E.G. Novoselova, O.A. Sinotova, O.V. Glushkova, V.B. Ogay, E.E. Fesenko. The prospective study on correction of immunodeficiency in mammals by extremely low-intensity electromagnetic radiation. // Proceedings of International Congress "Progressive scientific technologies for human health", Kara-dag, Feodosia (Crimea), Ukraine, 2003. P. 112-113

8 O.A. Sinotova, E.G. Novoselova, O.V. Glushkova. Differential effects of centimeter and millimeter waves on antibody production in mice. // Proceedings of the 17th International Wroclaw Symposium and Exhibition on Electromagnetic Compatibility. Wroclaw, Poland, 2004 (in press).

9. O.A. Sinotova, E.G. Novoselova, O.V. Glushkova. Cytokines and nitric oxide production in immune cells from tumor-bearing mice subjected to weak microwave exposure. // Book of EUROEM-2004 Abstracts. Magdeburg, Germany. 2004 (in press).

10 O.A. Синотова, О.В. Глушкова, Д.А. Черенков. Дозовые зависимости изменений продукции оксида азота и фактора некроза опухолей в клетках мышей под влиянием облучения ЭМИ КВЧ низкой интенсивности in vivo и in vitro. II Тезисы 8-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых "Биология - наука 21-го века". Пущино, 2004 (в печати).

11.0,A. Sinotova, E.G. Novoselova, O.V. Glushkova. Nitric oxide and TNF production in peritoneal macrophages from tumor-bearing mice subjected to weak microwave exposure. // Abstracts of the 3rd International Conference "Biology, chemistry, and therapeutic applications of nitric oxide". Nara, Japan, 2004 (in press). r

Принято к исполнению 27/02/2004 Исполнено 01/03/2004

Заказ № 61 Тираж 100 экз

ООО «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 Москва, Балаклавский пр-т, 20-2-93 (095)318-40-68 www autoreferat ru

РНБ Русский фонд

2006-4 18060

15 MAP 2004

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Синотова, Оксана Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

Список основных сокращений и обозначений.

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Биологические эффекты и возможные механизмы действия ЭМИ

КВЧ низкой интенсивности.

1.1. Основные особенности или закономерности взаимодействия

ЭМИ КВЧ с биологическими объектами.

1.1.1. Нетепловой характер взаимодействия.

1.1.2. Резонансный характер ответа на облучение.

1.1.3. Пороговый (по мощности) характер взаимодействия.

1.1.4. Амплитудно-частотные «окна».

1.1.5. Роль воды в поглощении ММ волн.

1.1.6. Конвективное движение жидкости при поглощении ММ излучения водой и водными растворами.

1.1.7. Роль ионов Са2+.

1.1.8. Поглощение излучения клетками кожи.

1.2. Исследования по влиянию ЭМИ КВЧ низкой интенсивности на различные биологические объекты.

1.2.1. Опыты по изучению эффектов взаимодействия излучения с низшими организмами и культурами клеток.

1.2.2. Эффекты облучения ЭМИ КВЧ насекомых.

1.2.3. Медико-биологические эффекты ЭМИ КВЧ.

1.2.4. Иммунотропные эффекты модулированного ЭМИ.

1.2.5. Комбинированное действие ММ волн в сочетании с другими лечебными средствами на организм.

Глава 2. Функциональная роль цитокинов и оксида азота в норме и патологии.

2.1. Фактор некроза опухолей.

2.2. Интерлейкин-2.

2.3. Интерлейкин-3.

2.4. Современная цитокинотерапия.

2.5. Оксид азота.

ЧАСТЬ II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Глава 3. Материалы и методы исследования.

3.1. Животные. 3.2. Источники и характеристики излучения. Условия облучения.

3.3. Методика измерения сверхмалой плотности потока энергии.

3.4. Формирование экспериментальной опухоли.

3.5. Условия иммунизации мышей и определение продукции антител в сыворотке крови иммунизированных животных. 3.6. Получение перитонеальных макрофагов. 3.7. Получение спленоцитов.

3.8. Приготовление образцов и определение концентрации ФНО-а.

3.9. Определение концентрации оксида азота.

3.10. Определение концентрации интерлейкинов.

3.11. Статистическая обработка данных.

ЧАСТЬ III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Глава 4. Определение влияния AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГГц на секрецию цитокинов (ФНО, ИЛ-2 и ИЛ-3) у здоровых мышей.

4.1. Влияние облучения (40 ГГц) in vivo на продукцию ФНО.

4.2. Влияние облучения (40 ГГц) in vitro на продукцию ФНО.

4.3. Влияние облучения (40 ГГц) на секрецию интерлейкинов

ИЛ-2, ИЛ-3).

4.4. Влияние облучения (40 ГГц) in vivo на количество иммунокомпетентных клеток.

4. Глава 5. Определение влияния AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на секрецию цитокинов (ФНО, ИЛ-2 и ИЛ-3) и оксида азота у здоровых мышей.

5.1. Влияние облучения (42,2 ГГц) in vivo на продукцию ФНО.

5.2. Влияние облучения (42,2 ГГц) in vitro на продукцию ФНО.

5.3. Влияние облучения (42,2 ГГц) на секрецию интерлейкинов

ИЛ-2, ИЛ-3). 5.4 Влияние облучения (42,2 ГГц) in vivo на секрецию оксида азота.

5.5. Влияние облучения (42,2 ГГц) in vivo на количество иммунокомпетентных клеток.

Глава 6. Влияние AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на секрецию ФИО, ИЛ-2, ИЛ-3 и N0 при фракционированном воздействии на здоровых мышей и опухоленосителей.

6.1 Продукция ФИО иммунокомпетентными клетками.

6.1.1 ФИО у облученных здоровых мышей.

6.1.2. ФИО у опухоленосителей.

6.1.3. ФНО у облученных опухоленосителей.

6.2. Концентрация ФНО в плазме.

6.2.1. ФНО у облученных здоровых мышей.

6.2.2. ФНО у опухоленосителей.

6.2.3. ФНО у облученных опухоленосителей.

6.3. Секреция интерлейкинов спленоцитами.

6.4. Секреция оксида азота макрофагами.

6.4.1. N0 у облученных здоровых мышей.

6.4.2. N0 у опухоленосителей.

6.4.3. N0 у облученных опухоленосителей.

6.5. Влияние облучения AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 42,2 ГГц на количество спленоцитов и перитонеальных макрофагов у здоровых мышей и опухоленосителей.

6.6. Выживаемость опухоленосителей.

Глава 7. Влияние фракционированного облучения AM ЭМИ КВЧ с несущей частотой 40 ГГц на антителообразование у иммунизированных мышей.

7.1. Влияние фракционированного облучения на антителообразование при развитии первичного иммунного ответа.

7.2. Влияние фракционированного облучения на антителообразование при развитии вторичного иммунного ответа.

7.3. Влияние фракционированного облучения на количество спленоцитов у иммунизированных мышей.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Секреторная активность иммунокомпетентных клеток в условиях воздействия низкоинтенсивными электромагнитными излучениями крайне высокой частоты"

Актуальность проблемы. Активное использование миллиметровых (ММ) волн в радиотехнике наблюдается последние 35-40 лет, и с того времени происходит изучение действия волн крайневысокочастотного (КВЧ) диапазона на биологические объекты. До настоящего времени действие электромагнитного излучения крайне высокой частоты (ЭМИ КВЧ) интенсивно изучается на различных биологических объектах - от микроорганизмов до тканей и органов человека и животных, а также на модельных системах. В последние годы на фоне значительного ряда работ по исследованию влияния ЭМИ ММ-диапазона на живые организмы формируется новое направление по изучению действия этого фактора на функциональные системы организма человека и животных.

Интерес к биологическим эффектам ЭМИ низкой интенсивности определяется несколькими обстоятельствами. Во-первых, взаимодействие ЭМИ с веществом при низких интенсивностях излучения имеет нетепловой характер. Во-вторых, высказан целый ряд гипотез относительно механизмов взаимодействия этого вида излучения с биологическими системами (Бецкий и др., 2002; Девятков и др., 1991). Среди первых работ по исследованию данной проблемы оригинальной представляется гипотеза о возможности резонансного взаимодействия, которая предполагает существование в

11 п живых системах колебаний в диапазоне 10 -10 Гц, играющих ключевую роль в процессах жизнедеятельности (Либерман и Эйдус, 1981; Arber, 1986; Frohlich, 1968). Среди недавних публикаций по проблеме взаимодействия ЭМИ с биологической материей убедительны гипотезы, предполагающие первичную роль молекул воды (Гапочка и др., 1994; Синицын и др., 1998; Fesenko et al., 1995). В-третьих, существует немало данных об иммуномодулирующих эффектах ЭМИ, широко применяемых в КВЧ-терапии (Аловская и Габдулхакова, 1998; Девятков, 1989; Девятков, 1985; Rojavin & Ziskin, 1998). Особенно высокая эффективность ЭМИ КВЧ показана при лечении заболеваний, вызывающих вторичный иммунодефицит, когда в основе действия ММ волн лежит их способность повышать неспецифическую резистентность. И, в-четвертых, вследствие чрезвычайного многообразия сигналов ЭМИ, использующихся в различных отраслях, в том числе компьютерной технике и средствах современной электронной связи, ЭМИ приобретает значение все более существенного экологического фактора (Григорьев, 2001; Григорьев и др., 2001). Как известно, повышенный фон электромагнитного загрязнения определяют ЭМИ с достаточно низкой интенсивностью, или плотностью потока мощности (ППМ), менее 100 мкВт/см2 (Григорьев, 1999), что значительно ниже тепловых уровней.

Цель и основные задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в исследовании иммунотропного действия низкоинтенсивных электромагнитных волн миллиметрового диапазона и зависимости эффектов ЭМИ от иммунного статуса объектов исследования. В соответствии с выбранной целью были поставлены следующие конкретные задачи:

Научная новизна. Впервые обнаружен немонотонный характер зависимости доза-эффект продукции ФИО при однократном и фракционированном облучении с использованием AM ЭМИ КВЧ с частотой модуляции 10 Гц и несущими частотами 40 и 42,2 ГГц. Установлено, что длительное фракционированное облучение мышей с экспериментальными опухолями с использованием AM ЭМИ КВЧ (несущая частота 42,2 ГГц) не увеличивало противоопухолевую резистентность животных. Впервые было обнаружено угнетение уровня образования антител у облученных антигенстимулированных мышей при использовании фракционированного режима облучения AM ЭМИ КВЧ (несущая частота 40 ГГц).

Список основных сокращений и обозначений

Аг - антиген Ат - антитело

AM - амплитудная модуляция, амплитудно-модулированный

АФК - активные формы кислорода

БТШ - белки теплового шока

ГКГ - главный комплекс гистосовместимости

Г-КСФ - гранулоцит-колониестимулирующий фактор

ГМ-КСФ - гранулоцит/макрофаг-колониестимулирующий фактор

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ЕКК - естественные киллерные клетки (натуральные киллеры)

ИЛ - интерлейкины

ИФ - интерфероны

ИФА - иммуноферментный анализ

КВЧ - крайне высокая частота, крайневысокочастотный

ЛПС - липополисахарид

М-КСФ - макрофаг-колониестимулирующий фактор ММ - миллиметровый

НК - натуральные киллеры (естественные киллерные клетки)

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ППМ - плотность потока мощности

ПХ - пероксидаза хрена

РНК - рибонуклеиновая кислота мРНК - матричная РНК

СВЧ - сверх высокая частота, сверхвысокочастотный

СМ - сантиметровый

СОД - супероксиддисмутаза

ФГА - фитогемагглютинин

ФНО - фактор некроза опухолей

ФРТК - фактор роста Т клеток цАМФ - циклический аденозинмонофосфат цГМФ - циклический гуанозинмонофосфат

ЦНС - центральная нервная система

ЧМ - частотная модуляция, частотно-модулированный

ЭМИ - электромагнитное излучение

ЭТС - эмбриональная телячья сыворотка

ABTS - 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (2,2' - Азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота))

CD - Cluster of differentiation (дифференцировочный антиген лейкоцитов, выявляемый группой моноклональных антител)

DMEM - Dulbecco's minimal essential medium (минимальная основная среда Дюльбекко)

ELISA - enzyme linked immunosorbent assay (иммуноферментный анализ)

HEPES - iV-(2-hydroxyethyl)piperazine-jV-(2-ethanesulfonic acid) (N-{2гидроксиэтил)пиперазин - Лг-(2этансульфоноловая кислота))

Ig - immunoglobulins (иммуноглобулины) iNOS - inducible NO-synthase (индуцибельная NO-синтаза)

LAK - lymphokineactivated killers (лимфокинактивированные киллеры)

NF-кВ - nuclear factor-kappa В (ядерный транскрипционный фактор kappa В)

NOS - nitric oxide synthase (NO-синтаза)

PBS - phosphate buffer saline (фосфатно-солевой буфер) t - температура

Ть - T-helper lymphocytes (T лимфоциты-хелперы)

TIL - tumor infiltrating lymphocyte (опухолевые инфильтрационные лимфоциты)

TNF - tumor necrosis factor (фактор некроза опухолей)

К - длина волны излучения

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Синотова, Оксана Александровна

6. Результаты работы доказывают, что, вызывая немонотонные изменения секреции цитокинов и оксида азота, низкоинтенсивные AM ЭМИ КВЧ (частота AM 10 Гц; несущие частоты 40 и 42,2 ГГц) оказывают слабый угнетающий эффект на чувствительную к внешним воздействиям систему клеточного иммунитета животных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Настоящая работа направлена на исследование секреции цитокинов и свободных форм кислорода лимфоидными клетками при воздействии сверхслабых электромагнитных волн миллиметрового диапазона. Роль этих мессенджеров в формировании иммунных ответов на внешние воздействия хорошо известна. Среди исследованных нами цитокинов особая роль принадлежит фактору некроза опухолей. Этот цитокин продуцируется многими клетками иммунной системы, однако, главные его источники - это Т лимфоциты и макрофаги. Хотя большинство из известных цитокинов отличается полифункциональностью, но в этом отношении ФНО является уникальным белком - он участвует почти во всех реакциях клеток и регулирует синтез почти всех известных цитокинов.

Синергичные ФНО иммуномодулирующие эффекты может оказывать другой провоспалительный цитокин - интерлейкин-2, являющийся ростовым фактором, который регулирует пролиферацию и дифференцировку Т- и В-лимфоцитов, рост и активацию естественных киллерных клеток, стимулирует макрофаги, активируя синтез интерферонов, способствует развитию лимфокин-активированных киллеров, стимулирует секрецию иммуноглобулинов.

Интерлейкин-3, продуцируемый активированными Т-клетками, вызывает активацию синтеза других интерлейкинов, проявляет цитотоксический эффект в отношении ряда клеток-мишеней, является медиатором роста, дифференцировки и пролиферации клеток. Очень важная функция ИЛ-2 и ИЛ-3 состоит в том, что эти цитокины вовлечены в осуществление регуляторных взаимодействий между иммунной и гемопоэтической системами организма, что обеспечивает адекватность аллергических и противовоспалительных иммунных реакций.

Молекула оксида азота, синтезируемая практически всеми клетками организма, выполняет в клетке функции регуляции внутриклеточной концентрации ионов Са2+ и активности ряда ферментов. В нормальных условиях N0 служит важным физиологическим регулятором, действующим через цГМФ-зависимый механизм. В патологических условиях образование N0 может возрастать в десятки и сотни раз, в этом случае радикалы становятся токсичными для разных типов клеток.

Исследование эффектов слабого неионизирующего излучения на секрецию ключевых продуктов гомеостаза клеток иммунной системы было проведено с учетом того, что до настоящего времени не существует достоверного объяснения механизма взаимодействия ЭМИ КВЧ с биологической системой, а эти излучения отличаются весьма незначительной проникающей способностью - не больше миллиметра от поверхности объекта. Важно отметить, что в работе были использованы излучения сверхслабой интенсивности, вследствие чего полностью исключалось присутствие тепловых эффектов. Кроме того, использовались модулированные по амплитуде излучения, причем исследовалось биологическое действие двух несущих частот (40 и 42,2 ГГц), наиболее часто применяемых в медицинской практике. Известно, что именно модуляция сигнала (частотная или амплитудная) в значительной мере повышает эффективность биотропного действия электромагнитных волн.

Мы полагали, что благодаря указанным особенностям КВЧ излучений, следует выяснить их влияние на разные уровни организации биологического объекта. По этой причине в работе были использованы различные режимы воздействия ЭМИ КВЧ: во-первых, на целый организм и на изолированные клетки; во-вторых, однократное непрерывное воздействие и, напротив, фракционированное воздействие при кратковременной ежедневной экспозиции; в-третьих, использование здоровых животных, а также моделей животных с иммуносупрессией (опухоленосители) и с активированным иммунным статусом (иммунизированные мыши).

Перечисленные подходы, использованные при выполнении данной работы, позволили выяснить ряд важных закономерностей в формировании ответов как целого организма, так и отдельных клеточных популяций. Совокупность всех экспериментальных данных позволила сделать главный вывод: использованные низкоинтенсивные излучения КВЧ-диапазона оказывают слабый повреждающий эффект на чувствительную к внешним воздействиям систему клеточного иммунитета и вызывают немонотонные изменения секреции цитокинов и оксида азота, указывающие на нестабильность функциональной активности клеток в этих условиях.

Подтверждением такого заключения служат данные экспериментов по измерению секреторной активности основных ФНО-продуцирующих клеток - макрофагов и лимфоцитов. Действительно, при однократном облучении животных ЭМИ КВЧ обнаружили колебательный характер дозовой кривой, когда активация продукции ФНО сменялась ее угнетением. Примечательно, что немонотонный характер кривых доза-эффект при использовании однократной экспозиции был обнаружен и в том случае, когда облучались изолированные клетки in vitro. При этом дозовые кривые для ФНО-продуцирующей активности спленоцитов и макрофагов не были идентичными — имелись определенные различия в динамике развития ответа клеток на воздействие слабых электромагнитных волн. Несинхронность ответов макрофагов и спленоцитов указывает на разную чувствительность отдельных популяций клеток на воздействие электромагнитных излучений.

Кроме того, показано, что однократное облучение животных вызывает достоверное снижение количества клеток в перитонеальном экссудате, а также уменьшение числа клеток селезенки. Как правило, уменьшение количества иммунокомпетентных клеток в различных органах и тканях свидетельствует о воздействии на организм неблагоприятных факторов. Это не противоречит данным по изменению ФНО-продуцирующей активности макрофагов и спленоцитов, для которых показан немонотонный характер дозовых зависимостей. Несмотря на то, что исследованные интерлейкины не были вовлечены в формирование ответов клеток на облучение в такой степени, как ФНО и оксид азота, тенденция к немонотонным изменениям продукции ИЛ-2 и ИЛ-3 была очевидна.

Использование фракционированного режима облучения мышей, когда здоровые животные в течение 30-ти дней подвергались ежедневной кратковременной экспозиции, также позволило обнаружить немонотонные зависимости доза-эффект в отношении продукции ФНО и NO. С применением режима фракционированного облучения было проведено исследование эффектов ЭМИ на организм животных, у которых был инициирован рост злокачественных новообразований (трансплантация раковых клеток), а также после антигенной стимуляции (иммунизация чужеродным белком). Проведенное исследование показало, что ЭМИ КВЧ вызывает угнетение антителообразования у иммунизированных мышей и ухудшает некоторые показатели иммунного статуса мышей с экспериментальными опухолями. Неспособность ЭМИ КВЧ вызвать мобилизацию защитных ресурсов организма была подтверждена в экспериментах по воздействию излучений на выживаемость и продолжительность жизни мышей с экспериментальными опухолями. Результаты показали, что длительное облучение опухоленосителей в режиме кратковременных ежедневных экспозиций не вызывает заметных изменений этих показателей.

Таким образом, миллиметровые волны индуцируют немонотонные изменения секреции некоторых цитокинов и оксида азота как у здоровых животных, так у животных при патологических состояниях, что можно рассматривать как признак повреждающего воздействия на организм. Считаем, что такой характер дозовых кривых отражает динамику формирования адаптивного ответа клеток на воздействие AM ЭМИ КВЧ (несущие частоты 40 и 42,2 ГГц; АМ=10 Гц; ППМ=0,5 мкВт/см2). Очевидно, что изменения функциональной активности клеток иммунной системы, вызванные применением AM ЭМИ КВЧ, принципиально отличаются от обнаруженных нами ранее иммуностимулирующего и противоопухолевого эффектов, которые были индуцированы излучениями из другого диапазона частот, а именно, ЧМ ЭМИ СВЧ.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Синотова, Оксана Александровна, Пущино

1. Адаменко В.Г., Виленская Р.П., Голант М.Б. и др. Влияние миллиметровых волн на микрофлору воздуха помещений. Электронная техника. Сер. 1: Электроника СВЧ. 1966. вып.12. С.132-136.

2. Адаскевич В.Г. Клиническая эффективность, иммунорегулирующее и нейрогуморальное действие миллиметровой и микроволновой терапии при атопическом дерматите. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1995. №6. С. 30-38.

3. Акоев И.Г., Кожокару А.Ф., Мельников В.М., Усачев А.В. Влияние длительного низкоинтенсивного воздействия радиочастотного излучения сантиметрового диапазона на подкожно привитую аденокарциному Эрлиха. // Рад. биол. радиоэкол. 1995. Т.35. №1. С.23-27.

4. Акоев И.Г., Кожокару А.Ф., Мельников В.М., Усачев А.В. Радиопротекторное действие низкоинтенсивного радиочастотного излучения сантиметрового диапазона длин волн при смертельном гамма-излучении. // Рад. биол. радиоэкол. 1994. Т.34. №4-5. С. 675-677а.

5. Акоев И.Г., Мельников В.М., Усачев А.В., Кожокару А.Ф. Модификация летального радиационного поражения мышей пострадиационным низкоинтенсивным радиочастотным излучением сантиметрового диапазона. // Рад. биол. радиоэкол. 1994. Т.34. №4-5. С. 671-674Ь.

6. Алексеев С.И., Зискин М.С., Кочеткова Н.В. Электрофизиологическое исследование влияния миллиметровых волн на нервные клетки. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1997. №9-10. С.34-38.

7. Аловская А.А. и Габдулхакова А.Г. Иммуномодулирующее действие электромагнитного излучения КВЧ и функциональное состояние клеток: международный конгресс «Медицинские технологии на рубеже веков». // Вестн. новых мед. технологий. 1998. Т. V. №1.

8. Андреев В.Е., Бецкий О.В., Казаринов К.Д. и др. Нетепловые эффекты миллиметрового излучения. / Ред. Н.Д. Девятков. М.: ИРЭ АН СССР, 1981. С. 167-176.

9. Анищенко B.C., Нейман А.Б., Мосс Ф., Шимански-Гайер Л. Стохастический резонанс как индуцированный шумом эффект увеличения степени порядка. // Усп. физ. наук. 1999. Т. 169(1). С.7-38.

10. Антипенко Е.Н. и Тимченко О.И. Обоснование необходимости и возможности изучения генетической опасности физических факторов низкоэнергетической природы. // Гигиена и санитария. 1989. №10. С.59-63.

11. Башкатова В.Г. и Раевский К.С. Оксид азота в механизмах повреждения мозга, обусловленных нейротоксическим действием глутамата. // Биохимия. 1998. Т. 63. №7. С.1020-1028.

12. Бецкий О.В. Материалы международ, симпоз. «Миллиметровые волны нетепловой интенсивности в медицине». М.: ИРЭ АН СССР, 1991. 4.3. С.521-525.

13. Бецкий О.В. Миллиметровые волны в биологии и медицине (Обзор). // Радиотехника и электроника. Т.38 (10). 1993. С.1760-1782.

14. Бецкий О.В., Девятков Н.Д., Лебедева Н.Н. Лечение электромагнитными полями. // Биомед. Радиоэлектрон. 2000. №10. С.3-13.

15. Бецкий О.В. и Девятков Н.Д. Механизмы взаимодействия электромагнитных волн с биологическими объектами. // Радиотехника. 1996. Т.41 (9). С. 4-11.

16. Бецкий О.В. и Ильина С.А. Кожа и проблема взаимодействия миллиметровых волн с биологическими объектами. // Миллиметровые волны в медицине и биологии. Ред. Н.Д. Девятков. М.: ИРЭ АН СССР, 1989. С.296-302.

17. Бецкий О.В., Лебедева Н.Н., Котровская Т.И. Стохастический резонанс и проблема воздействия слабых сигналов на биологические системы. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2002. №3(27). С.3-11.

18. Бецкий О.В. и Лебедева Н.Н. Современные представления о механизмах воздействия низкоинтенсивных миллиметровых волн на биологические объекты. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2001. №3(24). С.5-18.

19. Бецкий О.В. и Путвинский А.В. Биологические эффекты миллиметрового излучения низкой интенсивности. // Изв. ВУЗов. Радиоэлектроника. Электрон, приборы СВЧ. 1986. Т.29, №10. С.4-10.

20. Богдашин И.В., Дыгай A.M., Шерстобоев Е.Ю. и др. Роль тимуса в регуляции синтеза цитокинов клетками костного мозга при стрессе. // Иммунология. 1991. №5. С. 30-32.

21. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. М.: МГУ, 1985.208 с.

22. Брилль Г.Е., Апина Щ.Р., Белянина С.И. Панина Н.П. Влияние низкоинтенсивного КВЧ-излучения на генетическую активность политенных хромосом Chironomus plumosus. И Физич. медицина. 1993. Т.З, №1-2. С.69-71.

23. Брилль Г.Е., Панина Н.П., Невская Е.Ю. Действие электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на политенные хромосомы Chironomus plumosus. II Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. Т. 1 (17). С.3-7.

24. Брискин В.А., Букатко В.Н., Никитин А.Н. К вопросу КВЧ-терапии осложненных гастродуоденальных язв. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1996. №7. С. 26-30.

25. Брюне Б., Сандау К., фон Кнетен А. Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути. // Биохимия. 1998. Т. 63. №7. С. 966-975.

26. Василенко A.M. и Захарова JI.A. Цитокины в сочетанной регуляции боли и иммунитета. // Успехи современной биологии. 2000. Т. 120. №2. С. 174-189.

27. Гапеев А.Б., Сафронова В.Г., Чемерис Н.К., Фесенко Е.Е. Модификация активности перитонеальных нейтрофилов мыши при воздействии миллиметровых волн в ближней и дальней зонах излучателя. // Биофизика. 1996. Т.41, вып.1. С.205-219.

28. Гапеев А.Б., Якушина B.C., Чемерис Н.К., Фесенко Е.Е. Модулированное ЭМИ КВЧ низкой интенсивности активирует или ингибирует респираторный взрыв нейтрофилов в зависимости от частоты модуляции. // Биофизика. 1997. Т.42, вып.5. С.1125-1134.

29. Гапочка Л.Д., Гапочка М.Г., Королев А.Ф. и др. Воздействие электромагнитного излучения КВЧ и СВЧ диапазонов на жидкую воду. // Вестн. Моск. ун-та. Сер.З. Физика. Астрономия, 1994. Т. 35, № 4.

30. Гедымин Л.Е., Ерохин В.В., Бугрова К.М. и др. Электромагнитные волны миллиметрового диапазона в терапии саркоидоза легких и внутригрудных лимфатических узлов. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1994. №4. С.10-16.

31. Глушкова О.В. Иммуномодулирующие эффекты низкоинтенсивных электромагнитных волн СВЧ-диапазона. Дисс. на соиск. уч. степ, к.б.н. Пущино: Ин-т биофизики клетки РАН, 2002. 183 с.

32. Глушкова О.В., Новоселова Е.Г., Огай В.Б., Синотова О.А., Моренков О.С., Фесенко Е.Е. Влияние низкоинтенсивных электромагнитных волн сантиметрового диапазона на уровень антителообразования у мышей. // Биофизика. 2001. Т. 46, вып.1. С. 126-130.

33. Глушкова О.В., Новоселова Е.Г., Синотова О.А., Фесенко Е.Е. Иммунокорректирующее действие низкоинтенсивного СВЧ-излучения при канцерогенезе у мышей. // Биофизика. 2003. Т. 48, вып 2. С.281-288.

34. Голант М.Б. Влияние монохроматического электромагнитного излучения ММ диапазона малой мощности на биологические процессы. // Биофизика. 1989. Т.34, вып.6. С.1004-1014.

35. Головачева Т.В. КВЧ-терапия в комплексном лечении сердечно-сосудистых заболеваний. / Материалы X Росс, симпоз. с междунар. участ. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 24-26 апреля, 1995. С.29-31.

36. Горрен А.К.Ф. и Майер Б. Универсальная и комплексная энзимология синтазы оксида азота. // Биохимия. 1998. Т.63. №7. С. 870-880.

37. Григорьев Ю.Г. Роль модуляции в биологическом действии электромагнитного излучения. // Рад. биол. радиоэкол. 1996. Т.36 (5). С. 659-670.

38. Григорьев Ю.Г., Григорьев О.А., Степанов B.C., Меркулов А.В. Персональный компьютер: физические факторы, воздействие на пользователя. // Рад. биол. Радиоэкол. 2001. Т.41 (2). С. 195-206.

39. Григорьев Ю.Г. Сотовая связь: радиобиологические проблемы и оценка опасности. // Рад. биол. Радиоэкол. 2001. Т.41. №5. С. 500-513.

40. Григорьев Ю.Г. Электромагнитное загрязнение окружающей среды как фактор воздействия на биологические объекты // Экол. системы и приборы. 1999. №6. С.29-32.

41. Гуляев А. И., Киричук В.Ф., Лисенкова Л.А. и др. Перспективы применения спектрально-волновой диагностики в саноцентрической медицине и практике физической культуры и спорта. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1999. №2, вып. 14. С.3-19.

42. Давыдов А.С. Солитоны в биоэнергетике. Киев: Наукова Думка, 1986. 159 с.

43. Давыдов А.С. Солитоны в молекулярных системах. Киев: Наукова Думка, 1984. 288 с.

44. Девятков Н.Д. и Бецкий О.В. Особенности взаимодействия ММ-излучения низкой интенсивности с биологическими объектами. // Применение миллиметрового излучения низкой интенсивности в биологии и медицине. Ред. Н.Д. Девятков. М.: ИРЭ АН СССР, 1985. С.6-20.

45. Девятков Н.Д., Голант М.Б., Бецкий О.В. Миллиметровые волны и их роль в процессах жизнедеятельности. М.: Радио и связь, 1991. 169 с.

46. Девятков Н.Д., Голант М.Б., Бецкий О.В. Особенности медико-биологического применения миллиметровых волн. М.: ИРЭ РАН, 1994. 164 с.

47. Девятков Н.Д., ред. Миллиметровые волны в медицине и биологии. М.: ИРЭ АН СССР, 1989.307 с.

48. Девятков Н.Д., ред. Применение миллиметрового излучения низкой интенсивности в биологии и медицине. М.: ИРЭ АН СССР, 1985.277 с.

49. Диденко Н.П., Зеленцов В.Т., Ча В.А. О конформационных изменениях биомолекул при взаимодействии с электромагнитным излучением. // Эффекты нетеплового воздействия миллиметрового излучения на биологические объекты. М.: ИРЭ АН СССР, 1983. С.63-77.

50. Жукова Г.В., Гаркави Л.Х., Рубцов В.Р. и др. О влиянии низкочастотной модуляции на антистрессорные эффекты миллиметровых волн. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2002. №3(27). С.55-64.

51. Жукова Т.А., Чаяло П.П., Чайка М.В. О механизмах действия микроволновой резонансной терапии при лечении больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки. // Клин. Мед. 1994. №4. С.12-15.

52. Залюбовская Н.П. Биологические реакции как основа гигиенической оценки электромагнитных волн миллиметрового диапазона. Дисс. на соиск. уч. степ, д.б.н., Харьков, 1979. 325 с.

53. Залюбовская Н.П. Воздействия электромагнитных волн миллиметрового диапазона на клетку некоторые структурные элементы клетки. // Усп. физ. наук. 1973. Т.110. №3. С.465-468.

54. Залюбовская Н.П. и Киселев Р.И. Биологическое окисление в клетке при действии радиоволн миллиметрового диапазона. // Цитология и генетика. 1978. Т. 12 (3). С. 232-236.

55. Залюбовская Н.П., Киселев Р.И., Товстяк В.В. Воздействие микроволн на мембраны клеток культуры ткани. // Общие механизмы клеточных реакций на повреждающие воздействия. Сб. трудов. Л., Институт цитологии, 1977. с. 38-39.

56. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. // М.: МАИК «Наука / Интерпериодика». 2001.343 с.

57. Зимина И. В., Лопухин Ю. М., Арион В.Я. Кожа как иммунный орган: клеточные элементы и цитокины. // Иммунология. 1994. №1. С. 8-13.

58. Ильина С.А., Бакаушина Г.Ф., Гайдук В.И. и др. О возможной роли воды в передаче воздействия излучения миллиметрового диапазона на биологические объекты. // Биофизика. 1979. Т.24, вып.З. С.513-518.

59. Кадагидзе З.Г., Славина Е.Г., Черткова А.И. и др. Иммунологические аспекты использования цитокинов в онкологии. // Мед. иммунология. 2001. Т.З. №2. С. 269.

60. Казаринов К.Д., Шаров B.C., Путвинский А.В., Бецкий O.B.V/ Биофизика. 1984. Т. 29, вып.З. С.480-482.

61. Каменев Ю.Ф. Применение электромагнитного излучения в травматологии и ортопедии. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1999. №2(14). С.20-24.

62. Катаев А.А., Александров А.А., Тихонова Л.И., Берестовский Г.Н. Частотнозависимое влияние миллиметровых электромагнитных волн на ионные токи водоросли Nitellopsis. Нетепловые эффекты. // Биофизика. 1993. Т.38, вып.З. С.446-462.

63. Киселев Р.И. и Залюбовская Н.П. Воздействия электромагнитных волн миллиметрового диапазона на клетку и некоторые структурные элементы клетки. // Усп. физ. наук. 1973. Т.110, вып.З. С. 464-466.

64. Киричук В.Ф., Головачева Т.А., Чиж А.Г. КВЧ-терапия. Изд-во СГМУ, Саратов, 1999. 360 с.

65. Киричук В.Ф. и Махова Г.Е. Состояние сосудисто-тромбоцитарного звена системы гемостаза и его коррекция с помощью электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. №1 (17). С.8-17.

66. Ковалев А.А. и Пресняков С.В. Механизм первичного влияния на кору головного мозга человека проявлений трансформации в его организме внешнего низкоэнергетического КВЧ-излучения. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1999. №2 (14). С. 25-36.

67. Коган А.Х. Фагоцитозависимые кислородные свободнорадикальные механизмы аутоагрессии в патогенезе внутренних болезней. // Вести Росс. АМН. 1999. №2. С. 3-10.

68. Козарь А.В., Королев А.Ф., Шевелева Е.Н. и др. Формирование интерференционной картины при моделировании воздействия ММ облучения на многослойную кожную ткань. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2002. С.12-19.

69. Коломыцева М.П., Гапеев А.Б., Садовников В.Б., Чемерис Н.К. Подавление неспецифической резистентности организма при действии крайневысокочастотного электромагнитного излучения низкой интенсивности. // Биофизика. 2002. Т. 47, вып.1. С.71-77.

70. Коляда Т.В. и Никитина В.Н. Медико-биологические аспекты воздействия модулированных высокочастотных излучений. // Гигиена и санитария. 1989. №10. С.39-41.

71. Кондратьева В.Ф., Чистякова Е.Н., Иванова Н.Б., Казанская А.Д. Влияние радиоволн на микроорганизмы. // Ферменты в экспериментальной и клинической онкологии и радиобиологии. Труды ЛХФИ. Л., 1967. Вып.20. 4.1. С. 83-87.

72. Кондратьева В.Ф. и Чистякова Е.Н. // Действие радиоволн на микрофлору воздуха. // Ферменты в экспериментальной и клинической онкологии и радиобиологии. Труды ЛХФИ. Л., 1967. Вып.20. 4.1. С. 88-90.

73. Криницын В.А. Опыт использования в лечебной практике воды, обработанной КВЧ-излучением. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2003. №4 (32). С.64.

74. Лебедева А.Ю., Люсов В.А., Волов Н.А., Щелкунова И.Г. Динамика процессов перекисного окисления липидов у больных нестабильной стенокардией при проведении ММ-терапии. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1995. №5. С.18-20.

75. Левина М.З., Веселаго И.А., Белая Т.И. и др. Влияние СВЧ облучения низкой интенсивности на рост и развитие культуры простейших. // Сб.: Миллиметровые волны в медицине и биологии. / Ред. Н.Д. Девятков. М.: ИРЭ АН СССР, 1989. С.189-195.

76. Либерман Е.А. и Эйдус В.Л. Протонный генератор СВЧ. // Биофизика. 1981. Т.26, вып.6. С.1109-1111.

77. Лось И.П., Томашевская Л.А., Никитина Н.Г. Сравнительная характеристика биологического действия электромагнитных волн электромагнитного поля трехсантиметрового и восьмимиллиметрового диапазонов. // Гигиена населенных мест. Вып.20. 1981. С. 39-44.

78. Лукьянова С.Н. Реакция центральной нервной системы на низкоинтенсивное СВЧ облучение. // Электромагнитные поля и здоровье человека. Сб. ст. под ред. М. Репачоли. Москва. 1998. С.401-408.

79. Макеев В.М. Стохастический резонанс и его возможная роль в живой природе. // Биофизика. 1993. Т.38, вып. 1. С. 194-201.

80. Малышев И.Ю. и Манухина Е.Б. Стресс, адаптация и оксид азота. // Биохимия. 1998. Т.63. С. 992-1006.

81. Маринов Б.С. и Чайлахян Л.М. Регуляция активности супероксиддисмутазы сверхвысокочастотным излучением. Механизм действия СВЧ. // ДАН. 1997. Т.356, № 6. С.821-824.

82. Мартынюк B.C. и Темурьянц Н.А. Роль перекисного окисления липидов и тиол-дисульфидного обмена в механизмах антистрессорного действия электромагнитного излучения крайне высокой частоты. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1995. Т.5. С. 6-9.

83. Медуницын Н.В., Литвинов В.И, Мороз A.M. Медиаторы клеточного и межклеточного иммунитета. М.: Медицина. 1980.348 с.

84. Медуницын Н.В. Цитокины и аллергия. // Иммунология. 1999. №5. С. 5-9.

85. Меерсон Ф.З., Лапшин А.В., Мордвинцев П.И. и др. Увеличение генерации оксида азота в тканях животных при адаптации к кратковременным стрессорным воздействиям (ЭПР-исследование). // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1994. №3. С. 242-244.

86. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К., Реутов В.П. Оксид азота и NO-синтазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях. // Биохимия. 2000. Т.65. №4. С. 485-503.

87. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К., Шергин С.М. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты. Новосибирск: Изд. СО РАМН. 1994. 203 с.

88. Мирютова Н.Ф., Левицкий Е.Ф., Кожемякин A.M., Мавляутдинова И.М. КВЧ-излучение в терапии неврологических проявлений остеохондроза позвоночника. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. №4 (20). С.30-31.

89. Мочалов Ю.А., Гроздова Т.Ю., Токарева Л.В. и др. Резонансно-волновая КВЧ-терапия как монотерапия в лечении детей с хроническими гастродуоденитами. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. №4 (20). С.21-29.

90. Насонов Е.Л., Самсонов М.Ю., Беленков Ю.Н., Фукс Д. Иммунопатология застойной сердечной недостаточности: роль цитокинов. // Кардиология. 1999. №3. С.66-73.

91. Новоселова Е.Г. и Фесенко Е.Е. Стимуляция продукции ФНО макрофагами мышей в условиях действия in vivo и in vitro слабых электромагнитных волн сантиметрового диапазона. // Биофизика. 1998. Т. 43 (6). С.1132.

92. Огай В.Б. Функциональная активность иммунокомпетентных клеток животных в норме и патологии: эффекты низкоинтенсивных электромагнитных излучений. Дисс. на соиск. уч. степ, к.б.н. Пущино: Ин-т биофизики клетки РАН, 2003. 116 с.

93. Островский А.Б. и Николаева О.В. Особенности иммуномодулирующего эффекта КВЧ-терапии. Материалы X Росс, симпоз. с междунар. участ. «Миллиметр, волны в медицине и биологии». Москва, 1995. С. 66-67.

94. Петров Р.В., Павлюк А.С., Ковальчук J1.B. и др. Интерлейкинзависимые иммунодефициты человека. // Иммунология. 1987. №4. С. 20-24.

95. Подоляко В.А., Макарчик А.В., Янкелевич Ю.Д. КВЧ-модуляция in vitro реологических свойств крови. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. №4 (20). С.53-55.

96. Попов В.И., Рогачевский В.В., Гапеев А.Б., Храмов Р.Н., Чемерис Н.К., Фесенко Е.Е. Дегрануляция тучных клеток кожи под действием низкоинтенсивного электромагнитного излучения крайне высокой частоты. // Биофизика. 2001. Т.46, вып.6. С.1096-1102.

97. Пославский М.В. Физическая терапия крайне высокой частоты (КВЧ-терапия) в лечении и профилактике язвенной болезни. Междунар. симп. «Миллиметровые волны нетепловой интенсивности в медицине». М.: ИРЭ АН СССР, 1991. С. 142-146.

98. Постовит Н.В. Механизм терапевтического эффекта микроволновой терапии при язве желудка и двенадцатиперстной кишки. // Фундаментальные и прикладные аспекты применения миллиметрового электромагнитного излучения в медицине. Киев, 1989. С. 199-200.

99. Поцелуева М.М., Пустовидко А.В., Евтодиенко Ю.В., Храмов Р.Н., Чайлахян Л.М. Образование реактивных форм кислорода в водных растворах под действием электромагнитного излучения КВЧ-диапазона. // ДАН. 1998. Т. 359, вып.З. С.415-418.

100. Пресман А.С. и Левитина Н.А. Влияние нетеплового микроволнового облучения на резистентность животных к у-облучению. // Радиобиология. 1962. Т.2, вып. 1. С. 170-171.

101. Пресман А.С. Электромагнитные поля и живая природа. М.: Наука. 1968.28 с.

102. Проскуряков С.Я., Коноплянников А.Г., Иванников А.И. и др. Оксид азота и терапия злокачественных новообразований. // Росс, онколог, журн. 2000. Т. 3. С. 41-45.

103. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицын Н.С. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих. М.: Наука, 1997. 156 с.

104. Реутов В.П. Цикл окиси азота в организме млекопитающих. // Усп. биол. химии. T.XXXV. 1995. С. 198-228.

105. Родштат И.В. Биоритмологические аспекты КВЧ воздействия низкой интенсивности. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2001. №2 (26). С.52-56.

106. Родштат И.В. Стрессы, конфликты и психологические защиты в контексте миллиметровой терапии. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1994. №4. С.32-43.

107. Родштат И.В. Физиологические аспекты КВЧ-диагностики органических и функциональных заболеваний человека. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1999. №3 (15). С. 15-21.

108. Родштат И.В. Физиологические аспекты рецепции миллиметровых радиоволн биологическими объектами. // Применение миллиметрового излучения низкой интенсивности в биологии и медицине. Ред. Н.Д. Девятков. М.: ИРЭ АН СССР, 1985. С.132-146.

109. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск, 1993.328 с.

110. Рыжкова J1.B., Старик A.M., Волгарев А.П. и др. Защитный эффект низкоинтенсивного миллиметрового облучения при летальной гриппозной инфекции. // Докл. междунар симпоз. «Миллиметр, волны нетепловой интенсивности в медицине». М., 1991. 4.2. С.373-377.

111. Севастьянова Л.А. и Виленская Р.Л. Исследование влияния радиоволн сверхвысокой частоты миллиметрового диапазона на костный мозг мышей. // Усп. физ. наук. 1973. Т. 10 (3). С.456-458.

112. Севастьянова Л.А. Особенности биологического действия радиоволн ММ диапазона и возможные пути использования их в медицине. // Вестник АМН СССР. 1979. №2. С.65-68.

113. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М.: Медицина, 1960.254 с.

114. Серая И.П. и Нарциссов Я.Р. Современные представления о биологической роли оксида азота. // Усп. совр. биол. 2002. Т. 122, вып.З. С.249-258.

115. Сидоренко А.В. Влияние низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на физиологические показатели организма. // Зарубеж. радиоэлектроника. 1996. №12. С.57-61.

116. Сидоренко А.В. Динамика нейронной сети при действии микроволнового излучения. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2002. №3 (27). С.20-27.

117. Симбирцев А.С. IL-2 и рецепторный комплекс IL-2 в регуляции иммунитета. // Иммунология. 1998. №6. С. 3-8.

118. Синицын Н.И., Петросян В.И., Елкин В.А. и др. Особая роль системы "миллиметровые волны водная среда" в природе. // Биомед. Радиоэлектрон. 1998. №1. С. 5-23.

119. Слугин В.И., Котровская Т.И., Слугина М.А., Алешина Л.И. Применение КВЧ-терапии при функциональной реабилитации детей с поражением нервной системы. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2000. №4 (20). С.44-48.

120. Смолянская А.З., Виленская Р.Л., Голант М.Б. Действие электромагнитного излучения ММ диапазона на функциональную активность некоторых генетических элементов бактериальных клеток. // Усп. физ. наук. 1973. Т. 10(3). С.458 -459.

121. Соколов В.В., Кабисов Р.К., Поддубный Б.К., Барчук А.С. Новые физические методы в лечении злокачественных опухолей основных локализаций. // Росс, онколог, журн. 1996. №3. С.35-41.

122. Струсов В.В., Уткин Д.В., Дремучев В.А. Хирургические аспекты применения КВЧ-терапии. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 1995. №6.

123. Суслов А.П. Макрофаги и противоопухолевый иммунитет. // Итоги науки и техники. Сер. Онкология. М., 1990. Т. 19. С. 1-168.

124. Тамбиев А.Х. и Кирикова Н.Н. Действие КВЧ-излучения на метаболизм клеток цианобактерии Spirulina platensis и других фотосинтезирующих организмов. // Биомед. Радиоэлектрон. 1998. №3.

125. Тамбиев А.Х. и Кирикова Н.Н. Некоторые новые представления о причинах формирования стимулирующих эффектов КВЧ-излучения. // Биомед. Радиоэлектрон. 2000. №1. С. 23-34.

126. Ткаченко А.В. Влияние билирубина на активность и термокинетические характеристики NO-синтазы плазматической (синаптосомальной) мембраны клеток головного мозга. // Биол. мембраны. 1999. Т. 16(3). С.302-309.

127. Толгская М.С. и Гордон З.В. Морфофизиологические изменения при действии электромагнитных волн радиочастот. М.: Медицина, 1971. 78 с.

128. Шаров B.C., Казаринов К.Д., Андреев В.Е. и др. Ускорение перекисного окисления липидов под действием электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. // Биофизика. 1983. Т. 28(1). С.146-147.

129. Фесенко Е.Е., Новоселова Е.Г., Семилетова Н.В., Агафонова Т.А., Садовников В.Б. Стимуляция естественных киллерных клеток мышей, подвергнутых действию слабых электромагнитных волн сантиметрового диапазона. // Биофизика. 1999. Т. 44 (4). С. 737-741.

130. Фрейдлин И.С. Цитокины и межклеточные контакты в противоинфекционной защите организма. // СОЖ. 1996. №7. С. 19-25.

131. Фрейдлин И.С. и Шейкин Ю. А. Эндотелиальные клетки и цитокины. // Мед. иммунология. 2001, Т.З. №4. С.499-514.

132. Фролов Е.П., ред. Кожа: строение, функции, общая патология и терапия. М.: Медицина, 1982. 335 с.

133. Хаитов P.M., Чувиров Г.Н., Маркова Т.П. Роль макрофагов в патогенезе ВИЧ-инфекции. // Иммунология. 1995. №3. С. 10-17.

134. Холодов Ю.А. и Лебедева Н.Н. Реакции нервной системы человека на электромагнитные поля. М.: Наука, 1992.207 с.

135. Черкасов И.С., Недзвецкий В.А., Гиленко А.В. Биомедицинские эффекты миллиметровых радиоволн. // Офтальмолог, журн. 1978. №3. С. 189-190.

136. Чуян Е.Н., Темурьянц Н.А., Туманянц Е.Н. и др. Превентивное антистрессорное действие ЭМИ КВЧ. // Миллиметр, волны в биол. и мед. 2002. №2 (26). С.44-51.

137. Щепеткин И.А., Чердынцева Н.В., Васильев Н.В. Регуляция функциональной активности нейтрофилов цитокинами. // Иммунология. 1994. №1. С. 4-6.

138. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и патологии. // Иммунология. 1997. №5. С. 7-14.

139. Abbud-Filho М., Kupiec-Weglinski J.W., Araujo J.L. et al. Cyclosporine therapy of rat heart allograft recipients and release of interleukins (IL 1, IL 2, IL 3): a role for IL 3 in graft tolerance? // J. Immunol. 1984. Vol. 133 (5). P. 2582-2586.

140. Adamson G.M. & Billings R.E. Cytokine toxicity and induction of NO synthase activity in cultured mouse hepatocytes. //Toxicol. Appl. Pharmacol. 1993. Vol. 119. P. 100-107.

141. Adey R. Jim Henry's world revisited enviromental «stress» at the psychophysiological and the molecular levels. //Acta Physiol. Scand. 1997. Vol. 640. Suppl. P. 176-179.

142. Adey W.R. Introduction: Effects of electromagnetic radiation on the nervous system. // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1975. Vol. 247. P. 15-20.

143. Adey W.R. Frequency and power window in tissue interactions with weak electromagnetic fields. // Proc. IEEE, 1980. Vol. 68 (1). P. 119.

144. Adey W.R. Tissue interactions with nonionizing electromagnetic fields. // Physiol. Rev. 1981. Vol. 61 (2). P.435-514.

145. Adey W.R. Biological effects of electromagnetic fields. // J. Cell. Biochem. 1993. Vol. 51 (4). P.410-416.

146. Aggarwal B.B. & Natarajan K. TNF: Developments during the last decade. // Eur. Cytokine Netw. 1996. Vol. 7 (2). P. 93-124.

147. Aglietta M., Pasquino P., Sanavio F. et al. Granulocyte-macrophage colony stimulating factor and interleukin 3: target cells and kinetics of response in vivo. // Stem Cells. 1993. Vol. 11. Suppl.2. P. 8387.

148. Aichmann H., Nimtz G., Dennhofer L., Frucht A.-H. On the nonthermal microwave response of Drosophila melanogaster. I/ IEEE Transaction on microwave theory and tehniques. // 1984. Vol. MTT-32. №8. P. 888-891.

149. Akoev G., Adelev V., Semenikov P. Reception of low-intensity millimeter-wave electromagnetic radiation by the electroreceptors in skates. //Neurosci. 1995. Vol. 66. P.15-17.

150. Albina J.E., Cui S., Mateo R.B., Reichner J.S. Nitric oxide-mediated apoptosis in murine peritoneal macrophages. //J. Immunol. 1993. Vol. 150. P. 5080-5085.

151. Albina J.E., Caldwell M.D., Henry W.L., Mills C.D. Regulation of macrophage functions by L-arginine. // J. Exp. Med. 1989. Vol. 169 (3). P. 1021-1029.

152. Alekseev S.I., Ziskin M.C., Kochetkova N.V., Bolshakov M.A. Millimeter waves thermally alter the firing rate of the Lymnaea pacemaker neuron. // Bioelectromagnetics. 1997. Vol. 18. P.89-98.

153. Arber S.L. A model of cell electromagnetic susceptibility associated with the membrane electric fields. // Physiol. Chem. Phys. Med. NMR. 1986. Vol.18(1). P.49-51.

154. AI-Ramadi B.K., Meissler J.J.Jr., Huang D., Eisenstein Т.К. Immunosuppression induced by nitric oxide and its inhibition by interIeukin-4. // Eur. J. Immunol. 1992. Vol. 22. P. 2249-2254.

155. Amber I.J., Hibbs J.B.J., Taintor R.R., Vavrin Z. Cytokines induce an L-arginine-dependent effector system in nonmacrophage cells. Hi. Leukocyte Biol. 1988. Vol. 44. P. 58-65.

156. Amento E.P., Ehsani N., Palmer H., Libby P. Cytokines and growth factors positively and negatively regulate interstitial collagen gene expression in human vascular smooth muscle cells. // Arteriolscl. Thromb. 1991. Vol. 11 (5). P. 1223-1230.

157. Avots A., Escher C., Muller-Deubert S. et al. The interplay between lymphoid-specific and ubiquitous transcription factors controls the expression of interleukin 2 gene in T lymphocytes. // Immunobiology. 1995. Vol. 193 (2-4). P. 254-258.

158. Babak O. & Goncharova L. Microwave therapy of patients with duodenal ulcer who participated in the elimination of the effects of Chernobyl accident. // Likarska Sprava. Ukraine. 1995. V.7-8. P.51-53.

159. Bakalyuk O., Belozetskaya-Smiyan S., Shved N. et al. Primary osteoarthrosis: role of. local immunologic responses, ways of correction. // Patolog. Fiziolog. Experimental. Terapiya. 1997. Vol.1. P.24-26.

160. Bamberger Т., Masson I., Mathieu J. et al. Nitric oxide mediates the depression of lymphoproliferative responses following burn injury in rats. // Biomed. Pharmacother. 1992. Vol. 46. P. 495-500.

161. Becher В., Dodelet V., Fedorowicz V., Antel J.P. Soluble tumor necrosis factor receptor inhibits interleukin-12 production by stimulated human adult microglial cells in vitro. // J. Clin. Invest. 1996. Vol.98. P. 1539-1543.

162. Behari J. Issues in electromagnetic field biointeractions. // Indian. J. Biochem. Biophys. 1999. Vol. 36 (5). P.352-360.

163. Bell G.B., Marino A.A., Chesson A.L. Frequency-specific responses in the human brain caused by electromagnetic fields. // J. Neurol. Sci. 1994. Vol.123 (1). P. 26-32.

164. Belyaev I.Ya., Alipov Y.D., Shcheglov V.S., Lystsov V.N. Resonance effect of microwaves on the genome conformational state of E. coli cells. // Z Naturforsch С. 1992. Vol. 47 (7-8). P.621-627.

165. Bergui L., Schena M., Gaidano G. et. al. Interleukin 3 and interleukin 6 synergistically promote the proliferation and differentiation of malignant plasma cell precursors in multiple myeloma. // J. Exp. Med. 1989. Vol. 170 (2). P. 613-618.

166. Berk B.C., Abe J.I., Min W. et al. Endothelial atheroprotective and anti-inflammatory mechanisms. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2001. Vol. 947. P. 93-109.

167. Berridge M.J. The AM and FM of calcium signaling. //Nature. 1999. Vol. 386. P.759-760.

168. Beutler B. & Cerami A. Tumor necrosis, cachexia, shok, and inflammation: a common mediator. //Ann. Rev. Boichem. 1988. Vol. 57. P. 505-518.

169. Biesma В., Willemse P.H., Mulder N.H. et. al. Effects of interleukin-3 after chemotherapy for advanced ovarian cancer. // Blood. 1992. Vol. 80. P. 1141-1148.

170. Blalock J.E. A molecular basis for bidirectional communication between the immune and neuroendocrine systems. // Physiol. Rev. 1989. Vol. 69. P. 1-32.

171. Bose M. & Farnia P. Proinflammatory cytokines can significantly induce human mononuclear phagocytes to produce nitric oxide by a cell maturation-dependent process. // Immunol. Lett. 1995. Vol. 48. P. 59-64.

172. Bredt D.S. Endogenous nitric oxide synthesis: biological functions and pathophysiology. // Free Radic. Res. 1999. Vol. 31. P. 577-596.

173. Brennan F.M., Maini R.N., Feldmann M. TNF alpha a pivotal role in rheumatoid arthritis? // Br. J. Rheumatol. 1992. Vol. 31(5). P. 293-298.

174. Britch M.A. Mathematical Modelling of Intracellular Calcium Signal Transduction. // Nonlinear Phenomena in Complex Systems. 1999. Vol. 2 (4). P.89-92.

175. Brovkovych V., Dobrucki L.W., Brovkovych S. et al. Nitric oxide release from normal and dysfunctional endothelium. // J. Physiol. Pharmacol. 1999. Vol. 50 (4). P. 575-586.

176. Burgess A.W., Metcalf D., Russell S.H., Nicola N.A. Granulocyte/macrophage-, megakaryocyte-, eosinophil- and erythroid-colony-stimulating factors produced by mouse spleen cells. // Biochem. J. 1980. Vol. 185 (2). P. 301-314.

177. Carswell E.A., Old L.J., Kassel R.L. et al. An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1975. Vol. 72 (9). P. 3666-3670.

178. Chiang C.S., Powell H.C., Gold L.H. et al. Macrophage/microglial-mediated primary demyelination and motor disease induced by the central nervous system production of interleukin-3 in transgenic mice. // J. Clin. Invest. 1996. Vol. 97(6). P. 1512-1524.

179. Shibata M., Nezu Т., Kanou H. et al. Decreased production of interleukin-12 and type 2 immune responses are marked in cachectic patients with colorectal and gastric cancer. // J. Clin. Gastroenterol. 2002. Vol.34 (4). P.416-420.

180. Clark-Lewis I., Aebersold R., Ziltener H.J. et al. Automated chemical synthesis of a protein growth factor for hemopoietic cells, interleukin-3. // Science. 1986. Vol. 231 (4734). P. 134-139.

181. Clark-Lewis I., Crapper R.M, Leslie K., Schrader J.W. P-cell stimulating factor; Molecular and biological properties. // Cellular and Molecular Biology of Limphokines. Eds. C. Sorg, A. Schimpl. N. Y. Acad. Press. 1985.

182. Cohen L., David В., Cavaillon J.M. Interleukin 3 enhances cytokine production by LPS-stimulated macrophages. // Immunol. Lett. 1991. Vol. 28. P. 121-126.

183. Colombo M. & Forni G. Cytokine gene transfer in tumor inhibition and tumor therapy: where are we now?// Immunol. Today. 1994. Vol.15. P. 48-51.

184. Colotta F., Re F., Polentarutti N. et al. Modulation of granulocyte survival and programmed cell death by cytokines and bacterial products. // Blood. 1992. Vol. 80. P. 2012-2020.

185. Corbett J.A. & McDaniel M.L. Intraislet release of interleukin-1 inhibits beta cell function by inducing beta cell expression of inducible nitric oxide synthase. // J. Exp. Med. 1995. Vol. 181. P. 559568.

186. Crapper R.M. & Schrader J.W. Frequency of mast cell precursors in normal tissues determined by an in vitro assay: antigen induces parallel increases in the frequency of P cell precursors and mast cells. //J. Immunol. 1983. Vol. 131 (2). P. 923-928.

187. Curtsinger J.M. & Fan D.P. Interleukin 3 augments the murine primary cytolytic T lymphocyte response to allogeneic tumor cells. // J. Immunol. 1984. Vol. 133 (1). P. 267-272.

188. Denninger J.W. & Marietta M.A. Guanylate cyclase and the .NO/cGMP signaling pathway. // Biochim.Biophys. Acta. 1999. Vol. 1411(2-3). P. 334-350.

189. Doherty T.M., Seder R.A., Sher A. Induction and regulation of IL-15 expression in murine macrophages. Hi. Immunol. 1996. Vol. 156 (2). P. 735-741.

190. Doyama K., Fujiwara H., Fukumoto M. et al. Tumor necrosis factor is expressed in cardiac tissue of patients with heart failure. // Int. J. Cardiol. 1996. Vol. 54. P.217-225.

191. Dutcher J.P. Therapeutic strategies for cytokines. // Curr. Opin. Oncol. 1995. Vol. 7(6). P.566-571.

192. Eun J.S., Suh Y.H., Kim D.K., Jeon H. Regulation of cytokine production by exogenous nitric oxide in murine splenocyte and peritoneal macrophage.// Arch. Pharm. Res. 2000. Vol. 23. P. 531-534.

193. Fast D.J., Lynch R.C. Leu R.W. Interferon-gamma, but not interferon-alpha beta, synergizes with tumor necrosis factor-alpha and lipid A in the induction of nitric oxide production by murine L929 cells. Hi. Interferon Res. 1993. Vol.13. P. 271-278.

194. Fehsel K., Kroncke K.D., Meyer K.L. et al. Nitric oxide induces apoptosis in mouse thymocytes. // J. Immunol. 1995. Vol.155. P. 2858-2865.

195. Ferencik M. Handbook of Immunochemistry. // Alfa-Verlag. 1993. 519 p.

196. Ferrante A. Activation of neutrophils by interleukins-I and -2 and tumor necrosis factors. // Immunol. Ser. 1992. Vol.57. P.417-436.

197. Fesenko E.E., Geletyuk V.I., Kazachenko V.N., Chemeris N.K. Preliminary microwave irradiation of water solution changes their channel-modifying activity. // FEBS Lett. 1995. V. 366. P.49-52.

198. Fesenko E.E., Makar V.R., Novoselova E.G., Sadovnikov V.B. Microwaves and cellular immunity. I. Effect of whole body microwave irradiation on tumor necrosis factor production in mouse cells. // Bioelectrochem. Bioenerg. 1999. V.49. P. 29-35.

199. Fong Y., Tracey K.J., Moldawer L.L. et al. Antibodies to cachectin/tumor necrosis factor reduce interleukin 1 beta and interleukin 6 appearance during lethal bacteremia. // J. Exp. Med. 1989. Vol. 170. P. 1627-1633.

200. Frohlich H. Collective behaviour of non-linearly couple oscillating fields. With applications to biological systems. //Collective Phenomena. 1973. Vol.1. P.101-109.

201. Frohlich H. Long-range coherence and energy storage in biological systems. // Int. J. Quant. Chem. 1968. Vol.11. P.641-649.

202. Fukuo K., Hata S. et al. Nitric oxide induces upregulation of Fas and apoptosis in vascular smooth muscle. // Hypertension. 1996. Vol. P. 823-826.

203. Furlong В., Henderson A.H., Lewis M.J., Smith J.A. Endothelium-derived relaxing factor inhibits in vitro platelet aggregation. // Brit. J. Pharmacol. 1987. Vol. 90. P. 687-692.

204. Gandhi O.P. Some basic properties of biological tissues for potential applications of millimeter waves.//J. Microwave Power.1983. Vol.18. P.295-304.

205. Geissler K., Forstinger C., Kalhs P. et. al. Effect of interleukin-3 on responsiveness to granulocyte-colony-stimulating factor in severe aplastic anemia. // Ann. Intern. Med. 1992. Vol.117. P. 223-225.

206. Geletyuk V.I., Kazachenko V.N., Chemeris N.K., Fesenko E.E. Dual effects of microwaves on single Ca2+-activated K+ channels in cultured kidney cells Vero. ИFEBS Lett. 1995. Vol. 359. P.85-88.

207. Genaro A. M., Hortelano S., Alvarez A. et al. Splenic В lymphocyte programmed cell death is prevented by nitric oxide release through mechanisms involving sustained Bcl-2 levels. // J. Clin. Invest. 1995. Vol. 95 (4). P. 1884-1890.

208. Granger D.L., Hibbs J.B., Perfect J.R., Durack D.T. Metabolic fate of L-arginine in relation to microbiostatic capability of murine macrophages. // J. Clin. Invest. 1990. Vol, 85 (1). P. 264-273.

209. Green L.A., Wagner D.A., Glogowski J. et al. Analysis of nitrate, nitrite, and 15N.Nitrate in biological fluids. // Anal. Biochem. 1982. Vol.126 (1). P.131-138.

210. Grundler W. & Keilmann F. Sharp resonances in yeast grows prove nonthermal sensitivity to microwaves.//Phys. Rev. Lett. 1983. Vol.51 (13). P.1214-1216.

211. Grundler W., Jentzsch U., Keilmann F. et al. Resonant cellular effects of low intensity microwaves. // Biological coherence and response to external stimuli. Ed. H. Frohlich, Berlin, Heidelberg, N.Y.: Springer-Verlag, 1988. P.65-85.

212. Hallahan D.E., Viradachalam S., Kuchibhotla J. et al. Membrane-derived second messenger regulates x-ray mediated tumor necrosis factor a gene induction. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. Vol. 91. P. 4897-4901.

213. Hancock G.N, Kaplan G., Cohn Z.A. Keratinocyte growth regulation by the products of immune cells. //J. Exp. Med. 1988. Vol. 168 (4). P. 1395-1402.

214. Hapel A.J., Lee J.C., Farrar W.L., Ihle J.N. Establishment of continuous cultures of thyl.2+, Lytl+, 2-Tcells with purified interleukin 3. //Cell. 1981. Vol. 25 (1). P. 179-186.

215. Henney S.C., Kuribayashi K., Kern D.E., Gillis S. InterIeukin-2 augment natural killer activity. // Nature. 1981. Vol. 291. P. 335-338.

216. Hermes В., Prochazka A.-K., Haas N. et al. Upregulation of TNF-alpha and IL-3 expression in lesional and uninvolved skin in different types of urticaria. //J. Allergy Clin. Immunol. 1999. Vol. 103. №2(1). P. 307-314.

217. Heslop H.E., Price G.M., Prentice H.G. et al. In vitro analysis of the interactions of recombinant IL-2 with regenerating lymphoid and myeloid cells after allogeneic marrow transplantation // J. Immunol. 1988. Vol. 140 (10). P. 3461-3466.

218. Hevel J.M. & Marietta M.A. Macrophage nitric oxide synthase: relationship between enzyme-bound tetrahydrobiopterin and synthase activity. // Biochemistry. 1992. Vol. 31 (31). P. 7160-7165.

219. Hibbs J.B.J., Westenfelder C., Taintor R. et al. // J. Clin. Invest. 1992. Vol. 89. P. 867-877.

220. Hu R.H., Lee P.H., Lee C.J. Erythropoietin, interIeukin-3, interleukin-11, and GM-CSF in posttransplant erythrocytosis treated with enalapril. // Transplant. Proc. 1996. Vol. 28(3). P. 1545-1547.

221. Ignarro L.J., Buga G.V., Wood K.S. et al. Endothelium-derived relaxing factor produced and released from artery and vein is nitric oxide. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. Vol. 84 (24). P. 92659269.

222. Ihle J.N., Keller J., Henderson L. et al. Procedures for the purification of interleukin-3 to homogenity. //J. Immunol. 1982. Vol. 129 (6). P. 2431-2436.

223. Ischiropoulos H., Zhu L., Beckman JS. Peroxynitrite formation from macrophage-derived nitric oxide. // Arch. Biochem. Biophys. 1992. Vol. 298. P. 446-451.

224. Ishida A., Miyakawa Y., Tanosaki R. et al. Circulating endogenous thrombopoietin, interleukin-3, interleukin-6 and interleukin-11 levels in patients undergoing allogeneic bone marrow transplantation. // Int. J. Hematol. 1996. Vol. 65 (1). P. 61-69.

225. Karabakbisian R., Broude N., Shalis N., Kochlatvi S. Calcium is necessary in the cell response to EM fields. // FEBS Lett. 1994. Vol.349 (1). P. 1-6.

226. Kasai К., Hattori Y., Nakanishi N. et al. Regulation of inducible nitric oxide production by cytokines in human thyrocytes in culture. // Endocrinology. 1995. Vol. 136 (10). P. 4261-4270.

227. Khizhnyak E.P. & Ziskin M.C. Temperature Oscillations in Liquid Media Caused by Continuous (Nonmodulated) Millimeter Wavelength Electromagnetic Irradiation. // Bioelectromagnetics. 1996. Vol.17. P.223-229.

228. Kilbourn R.G. & Belloni P. Endothelial cell production of nitrogen oxides in response to interferon gamma in combination with tumor necrosis factor, interleukin-1, or endotoxin. // J. Natl. Cancer Inst. 1990. V.82. P. 772-776.

229. Kim Y.M., de Vera M.E., Watkins S.C., Billiar T.R. Nitric oxide protects cultured rat hepatocytes from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis by inducing heat shock protein 70 expression. // J. Biol. Chem. 1997. Vol. 272. P.1402-141 la.

230. Kim Y.M., Talanian R.V., Billiar T.R. Nitric oxide inhibits apoptosis by preventing increases in caspase-3-like activity via two distinct mechanisms. // J. Biol. Chem. 1997. Vol. 272. P. 31138-31148b.

231. Kintzel P.E. & Calis K.A. Recombinant interleukin-2: a biological response modifier. // Clin. Pharm. 1991. Vol. 10(2). P.l 10-128.

232. Klebanoff S.J., Vadas M.A., Harlan J.M. et al. Stimulation of neutrophils by tumor necrosis factor. Hi. Immunol. 1986. Vol. 136. P. 4220-4225.

233. Kobayashi D., Watanabe N., Yamauchi N. et al. Protein kinase С inhibitors augment tumor-necrosis-factor-induced apoptosis in normal human diploid cells. // Chemotherapy. 1997. Vol. 43 (6). P. 415-423.

234. Kolb H. & Kolb-Bachofen V. Nitric oxide: a pathogenetic factor in autoimmunity. // Immunol. Today. 1992. Vol. 13. P. 157-160.

235. Kremer F., Koschnitzke C., Santo L. et al. Coherent Excitation in Biological Systems. Eds. H. Frohlich, F. Kremer. Berlin, Heidelberg, N.Y.: Springer-Verlag, 1983. P. 10-20.

236. Kruglikov I.L. & Dertinger H. Stochastic resonance as a possible mechanism of amplification of week electric signals in living cells. // Bioelectromagnetics. 1994. Vol.15 (6). P.539-547.

237. Kurosawa S., Matsuzaki G., Harada M., et al. Early appearance and activation of natural killercells in tumor-infiltrating lymphoid cells during tumor development. // Eur. J. Immunol. 1993. Vol. 23. ' P. 1029-1032.

238. Kurosawa S., Harada M., Matsuzaki G., et al. Early-appearing tumour-infiltrating natural killer cells play a crucial role in the generation of antitumour T lymphocytes. // Immunol. 1995. Vol. 85(2). P.t 338-346.

239. Kutsenok V.A. The effect of electromagnetic radiation of millimeter range on the immune status ofpeptic ulcer patients. // Likarska Sprava. Ukraine. 1994. Vol. 9( 12). P. 139-142.

240. Lazutka J.R. Genetic toxicity of cytokines. // Mutat. Res. 1996. Vol. 361 (2-3). P. 95-105.

241. Lefer A.M. & Lefer D.J. Endothelial dysfunction in myocardial ischemia and reperfusion: role of oxygen-derived free radicals. // Basic Res. Cardiol. 1991. Vol. 86. Suppl.2. P. 109-116.

242. Lejeune P., Lagadec P., Onier N., et al. Nitric oxide involvement in tumor-inducedimmunosuppression. //J. Immunol. 1994. Vol. 152 (10). P. 5077-5083.

243. Lentz M.R. The role of therapeutic apheresis in the treatment of cancer: a review. // Ther. Apher. 1999. V. 3(1). P.40-49.

244. Lepoivre M., Raddassi K., Oswald I. et al. Antiproliferative effects of NO synthase products. // Res. Immunol. 1991. Vol. 142 (7). P. 580-583.

245. Lindemann A. & Mertelsmann R. InterIeukin-3: structure and function. // Cancer Invest. 1993.1. Vol. 11(5). P. 609-623.

246. Lin J., Seguin R., Keller K., Chadee K. The role of therapeutic apheresis in the treatment of cancer: a review. // Infect. Immunol. 1994. Vol. 62. P. 1534-1537.

247. Liu J., Marino M.W., Wong G. et al. TNF is a potent anti-inflammatory cytokine in autoimmune-mediated demyelination. // Nat. Med. 1998. Vol. 4. P.78-83.

248. Liu R.H., Baldwin В., Tennant B.C., Hotchkiss J.H. Elevated formation of nitrate and Nnitrosodimethylamine in woodchucks (Marmota monax) associated with chronic woodchuck hepatitis virus infection. // Cancer Res. 1991. Vol. 51(15). P. 3925-3929.

249. Liu R.H. & Hotchkiss J.H. Potential genotoxicity of chronically elevated nitric oxide: a review. // . Mutat. Res. 1995. Vol. 339. P.73-89.

250. Lodish H.L., Arnold B.S., Zipursky L. et al. Molecular Cell Biology (4th ed.). N.Y.: W.H. Freeman and Co. 2000.1084 p.

251. Locker C.J., Kofler J., Stoiser B. et al. Relation of pro- and anti-inflammatory cytokines and the production of nitric oxide in patients receiving high-dose immunotherapy with interleukin-2. // Eur. Cytokine Netw. 2000. Vol. 11 (3). P. 391-396.

252. Logani M.K., Anga A., Szabo I. et al. Effect of millimeter waves on cyclophosphamide induced suppression of the immune system. // Bioelectromagnetics. 2002. Vol. 23(8). P.614-621.

253. Lotem J. & Sachs L. In vivo control of differentiation of myeloid leukemic cells by recombinant granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin 3. // Blood. 1988. Vol. 71(2). P. 375382.

254. Luger T.A. & Schwarz T. Therapeutic use of cytokines in dermatology. // J. Am. Acad. Dermatol. 1991. Vol. 24. №6 (Part I). P. 915-926.

255. Mach N., Lantz C.S., Galli S.J. et al. Involvement of interleukin-3 in delayed-type hypersensitivity. // Blood. 1998. Vol. 91. '3. P. 778-783.

256. Maciejewski J.P., Selleri C., Sato T. et al. Nitric oxide suppression of human hematopoiesis in vitro. Contribution to inhibitory action of interferon-gamma and tumor necrosis factor-alpha. // J. Clin. Invest. 1995. Vol. 96 (2). P.1085-1092.

257. Makar V., Logani M., Szabo I., Ziskin M. Effect of millimeter waves on cyclophosphamide induced suppression of T cell functions. // Bioelectromagnetics. 2003. Vol. 24 (5). P. 356-365.

258. Malkovsky M., Sondel P.M., Strober W., Dalgleish A.G. The interleukins in acquires diseases. // Clin. Exp. Immunol. 1988. Vol. 74 P. 151-161.

259. Mannick J.B., Asano K., Izumi K. et al. Nitric oxide produced by human В lymphocytes inhibits apoptosis and Epstein-Barr virus reactivation. // Cell. 1994. Vol. 79 (7). P. 1137-1146.

260. Marcinkiewicz J., Radziszewski W., Chain B.M. Prostaglandin E2 (PGE2) differentially regulates the production of IL-2 and IL-3 by murine immune T-cells. // Folia Histochem. Cytobiol. 1992. Vol. 30(1). P. 1-4.

261. Marietta M.A., Yoon P.S., Iyengar R. et al. Macrophage oxidation of L-arginine to nitrite and nitrate: nitric oxide is an intermediate. // Biochemistry. 1988. Vol. 27 (24). P. 8706-8711.

262. Mauel J., Corradin S.B., Buchmuller-Rouiller Y. Nitrogen and oxygen metabolites and the killing of Leishmania by activated murine macrophages. // Res. Immunol. 1991. Vol. 142 (7). P. 577-580.

263. McCann S., Kimura M., Karanth S. et al. Role of nitric oxide in the neuroendocrine responses to cytokines. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1998. Vol. 840. P. 174-184.

264. McKelvey T.G., Hollwarth M.E., Granger D.N. et al. Mechanisms of conversion of xanthine dehydrogenase to xanthine oxidase in ischemic rat liver and kidney. // Am. J. Physiol. 1988. Vol. 254. 5 Pt.l.P. G753-G760.

265. Messmer U.K., Ankarcrona M., Nicotera P., Brune B. p53 expression in nitric oxide-induced apoptosis. // FEBS Lett. 1994. Vol. 355 (1). P. 23-26.

266. Mills C.D. Molecular basis of "suppressor" macrophages. Arginine metabolism via the nitric oxide synthetase pathway. //J. Immunol. 1991. Vol. 146 (8). P. 2719-2723.

267. Miyazawa Т., Yasuda K. Fujimoto K., Kaneda T. Presence of phosphatidylcholine hydroperoxide in human plasma. // J. Biochem. 1988. Vol. 103 (5). P. 744-746.

268. Mizel S.B. The interleukins. // FASEB J. 1989. Vol. 3(12). P. 2379-2388.

269. Moilanen E. & Vapaatalo H. Nitric oxide in inflammation and immune response. // Ann. Med. 1995. Vol.27. P.359-367.

270. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology. // Pharmacol. Revs. 1991. Vol.43 (2). P. 109-142.

271. Morgan D.A., Ruscetti F.W., Gallo R. Selective in vitro growth of T-lymphocytes from normal human bone marrow. // Science. 1976. Vol. 193. P. 1007-1008.

272. Morris C.F., Young I.G., Hapel A.J. Molecular and cellular biology of interleukin-3. // Immunol. Ser. 1990. Vol. 49. P. 177-214.

273. Mui A.L., Kay R.J., Humphries R.K., Kiystal G. Ligand-induced phosphorylation of the murine interleukin 3 receptor signals its cleavage. // Proc. Natl. Acad.Sci. USA. 1992. Vol. 89. P. 1081210816.

274. Murray J., Barbara J.A.J., Dunkley S.A. et al. Regulation of neutrophil apoptosis by tumor necrosis factor-alpha: requirement for TNFR55 and TNFR75 for induction of apoptosis in vitro. // Blood. 1997. Vol. 90. P. 2772-2783.

275. Myint Y.Y., Miyakawa K., Naito M. et al. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor and interleukin-3 correct osteopetrosis in mice with osteopetrosis mutation. // Amer. J. Pathol. 1999. V.154 (2). P. 553-566.

276. Nathan C.F. & Hibbs J.B. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity. // Curr. Opin. Immunol. 1991. Vol. 3 (1). P. 65-70.

277. Neta R. & Oppengeim J. Radioprotection with cytokine-learning from nature to cope with radiation damage. // Cancer Cells. 1991. Vol. 3. P. 391-396.

278. Nimtz G. Coherent Excitation in Biological Systems. Eds. H. Frohlich, F. Kremer. Berlin, Heidelberg, N.Y.: Springer-Verlag, 1983. P.38-46.

279. Nishinakamura R., Miyajima A., Mee P.J. et. Al. Hematopoiesis in mice lacking the entire granulocyte-macrophage colony-stimulating factor/interleukin-3/interleukin-5 functions. // Blood. 1996. Vol. 88 (7). P. 2458-2464.

280. Oemar B.S., Tschudi M.R., Godoy N. et al. Reduced endothelial nitric oxide synthase expression and production in human atherosclerosis. // Circulation. 1998. Vol. 97. P. 2494-2498.

281. O'Garra A. Interleukins and the immune system. // Lancet. 1989. Vol. 192 (2). P. 499-504.

282. Ohshima H. & Bartsch H. Chronic infections and inflammatory processes as cancer risk factors: possible role of nitric oxide in carcinogenesis. // Mut. Res. 1994. Vol.305. P.253-264.

283. Oppengeim J., Kovacs E., Matsushima K., Durum S. There is more than one interleukin 1. // Immunol. Today. 1986. Vol. 7 (2). P. 45-56.

284. Page G.G. & Ben-Eliyahu S. The immune-suppressive nature of pain. // Semin. Oncol. Nurs. 1997. Vol. 13(1). P. 10-15.

285. Pakhomov A. G., Prol H., Mathur S., Akyel Y., Campbell C.B.G. Search for frequency-specific effects of millimeter-wave radiation on isolated nerve function. // Bioelectromagnetics. 1997. Vol. 18. P.324-334a.

286. Pakhomov A.G., Prol H., Mathur S., Akyel Y. Effect of millimeter waves on polysynaptic conduction in isolated spinal cord. Second World Congress for Electricity and Magnetism in Biology and Medicine, Bologna, Italy, 1997. P. 174b.

287. Palacios M., Knowles R.G., Moncada S. Enhancers of nonspecific immunity induce nitric oxide synthase: induction does not correlate with toxicity or adjuvancy. // Eur. J. Immunol. 1992. Vol. 22 (9). P. 2303-2307.

288. Palacios R. & Garland J. Distinct mechanisms may account for the growth-promoting activity of interleukin 3 on cells of lymphoid and myeloid origin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. Vol. 81(4). P. 1208-1211.

289. Palacios R., Henson G., Steinmetz M., McKearn J.P. Interleukin-З supports growth of mouse pre-B-cell clones in vitro. //Nature. 1984. Vol. 309 (5964). P. 126-131.

290. Palluy O. & Rigaud M. Nitric oxide induces cultured cortical neuron apoptosis. // Neurosci. Lett. 1996. Vol. 208(1). P. 1-4.

291. Palmer R.M., Ferrige A.G., Moncada S. Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor. //Nature. 1987. Vol. 327 (6122). P. 524-526.

292. Patel R., Moellering D., Murphy-Ullrich J. et al. Cell signaling by reactive nitrogen and oxygen species in atherosclerosis. // Free Radic. Biol. Med. 2000. Vol. 28 (12). P. 1780-1794.

293. Pathig R. Dielectric and electronic properties of biological materials. Chichester: Jonn Wiley and Sons, 1979,297 р.

294. Pfeilschifter J., Eberhardt W., Hummel R. et al. Therapeutic strategies for the inhibition of inducible nitric oxide synthase potential for a novel class of anti-inflammatory agents. // Cell. Biol. Int. 1996. Vol. 20(1). P. 51-58.

295. Riedy M.C. & Stewart C.C. Inhibitory role of interleukin-6 in macrophage proliferation. // J. Leukoc. Biol. 1992. Vol.52. P.125-127.

296. Robb R.J. Interleukin-2: the molecule and its function. // Immunol. Today. 1984. Vol. 5. P. 203209.

297. Engl. J. Med. 1985. Vol. 113. P.1485-1492.

298. Rosenberg S., Spiess P., Lufreniere R. A new approach to the adoptive immuno-therapy of cancer with tumor infiltrating lymphocytes. // Science. 1986. Vol. 233. P. 1318-1321.

299. Rosenthal S., Birenbaum L., Kaplan I. et al. Proc. URSI/USNC Annual meeting. Boulder. 1975. P. <" 110-128.

300. Rowland R.R., Butz E.A., Plagemann P.G. Nitric oxide production by splenic macrophages is notresponsible for T cell suppression during acute infection with lactate dehydrogenase-elevating virus. // J. Immunol. 1994. Vol. 152 (12). P. 5785-5795.

301. Samelson L.E., Germain R.N., Schwartz R.H. Monoclonal antibodies against the antigen receptor on a cloned T-cell hybrid. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1983. Vol. 80 (22). P. 6972-6976.

302. Sarih M., Souvannavong V., Adam A. Nitric oxide synthase induces macrophage death by apoptosis. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. Vol. 191 (2). P. 503-508.

303. Schrader J.W. & Crapper R.M. Autogenous production of a hemopoietic growth factor, persisting* cell-stimulating factor, as a mechanism for transformation of bone-marrow-derived cells. // Proc. Natl.

304. Shibata M., Nezu Т., Kanou H. et al. Decreased production of interleukin-12 and type 2 immune responses are marked in cachectic patients with colorectal and gastric cancer. // J. Clin. Gastroenterol. 2002. Vol. 34(4). P. 416-420.

305. Shimada S. & Katz S.I. The skin as an immunologic organ. // Arch. Path. Lab. Med. 1988. Vol. 112. P. 231-234.

306. Smith C.W., Choy R.Y.S., Monro J.A. The diagnosis and therapy of electrical hypersensitivities. // Clin. Ecology. 1986. Vol.4. P.l 19-128.

307. Smith K.A. Interleukin 2: Inception, impact, and implication. // Science. 1988. Vol. 240. P. 311691176.

308. Sneddon J.M. & Vane J.R. Endothelium-derived relaxing factor reduces platelet adhesion to bovine endothelial cells. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. Vol. 85 (8). P. 2800-2804.

309. Snyder S.H. Nitric oxide: first in a new class of neurotransmitters. // Science. 1992. Vol. 257 (5069). P. 494-496.

310. Stangel M., Zettl U.K., Mix E., et al. H202 and nitric oxide-mediated oxidative stress induce apoptosis in rat skeletal muscle myoblasts. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1996. Vol. 55(1). P. 36-43.

311. Sugita Y., Zhao В., Shankar P. et al. CNS interleukin-3 (IL-3) expression and neurological syndrome in antisense-IL-3 transgenic mice. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1999. Vol. 58 (5). P.480-488.

312. Summersgill J.T., Powell L.A., Buster B.L. et al. Killing of Legionella pneumophila by nitric oxide in gamma-interferon-activated macrophages. // J. Leukoc. Biol. 1992. Vol. 52 (6). P. 625-629.

313. Szabo I., Rojavin M.A., Rogers T.J., Ziskin M.C. Reactions of keratinocytes to in vitro millimeter wave exposure. // Bioelectromagnetics. 2001. Vol. 22(5). P.358-364.

314. Tadmori W., Lee H.-K., Clark S.C., Choi Y.S. Human В cell proliferation in response to IL-4 is associated with enhanced production of В cell-derived growth factors. Hi. Immunol. 1989. Vol. 112(3). P. 826-832.

315. Takahashi G.W., Andrews D.F. 3rd, Lilly M.B. et al. Effect of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin-3 on interleukin-8 production by human neutrophils and monocytes. // Blood. 1993. Vol. 81 (2). P. 357-364.

316. Tannenbaum S.R., Fett D., Young V.R. et al. Nitrite and nitrate are formed by endogenous synthesis in the human intestine. // Science. 1978. Vol. 200 (4349). P. 1487-1489.

317. Tepper R.I., Pattengale P.K., Leder P. Murine interleukin-4 displays potent anti-tumor activity in vivo. // Cell. 1989. Vol. 57(3). P. 503-512.

318. Titheradge A.M. Nitric oxide in septic shock. // Biochem. Biophys. Acta. 1999. Vol. 1411. P. 437455.

319. Utsumi Т., Klostergaard J., Akimaru K. et al. Modulation of TNF-alpha-priming and stimulation-dependent superoxide generation in human neutrophils by protein kinase inhibitors. // Arch. Biochem. Biophys. 1992. P. 271-278.

320. Vassalli P. The pathophysiology of tumor necrosis factors. // Annu. Rev. Immunol. 1992. Vol. 10. P.411-452.

321. Veyret В., Bouthet C., Deschaux P. A. et al. Antibody responses of mice exposed to low-power microwaves under combined, pulse-and-amplitude modulation. // Bioelectromagnetics. 1991. Vol. 12(1). P.47-56.

322. Vose B.M. & Bonnard G.D. Specific cytotoxicity against autologous tumour and proliferative responses of human lymphocytes grown in interleukin 2. // Int. J. Cancer. 1982. Vol. 29 (1). P.33-39.

323. Walleczek J. Electromagnetic field effects on cells of the immune system: the role of calcium signaling. // FASEB J. 1992. Vol. 6(13). P.3177-3185.

324. Wanidworanun G. & Strober W. Predominant role of tumor necrosis factor-alpha in human monocyte IL-10 synthesis.//J. Immunol. 1993. Vol. 151 (12). P. 6853-6861.

325. Ward C., Chilvers E.R., Lawson M.F. et al. NF-kappaB activation is a critical regulator of human granulocyte apoptosis in vitro. // J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274. P. 4309-4318.

326. Webb S.J. & Dodds D.D. Inhibition of bacterial cell growth by 136 gc microwaves. // Nature. 1968. Vol. 218. P.374-375.

327. Weiss S.J. The interplay of oxidants and proteinases in neutrophils-madiated tissue damage. // J. Cell. Biochem. 1991. Suppl. 15 C. P. 210.

328. Whetton A.D. & Dexter T.M. The mode of action of interleukin 3 in promoting survival, proliferation, and differentiation of hemopoietic progenitor cells. // Lymphokines. 1988. Vol. 15. P. 355-374.

329. Yamamoto K., Yajima A., Terashima Y. et al. Phase II clinical study on the effects of recombinant human interIeukin-3 on thrombocytopenia after chemotherapy for advanced ovarian cancer. // J. Immunother. 1999. Vol. 22 (6). P. 539-545.

330. Yamashita К., Takahashi A., Kobayashi S. et al. Caspases mediate tumor necrosis factor-alpha-induced neutrophil apoptosis and downregulation of reactive oxygen production. // Blood. 1999. Vol. 93. P. 674-685.

331. Yoshikawa Т., Tanigawa M. Tantgawa T. et al. Enhancement of nitric oxide generation by low frequency electromagnetic field. // Pathophysiol. 2000. Vol. 7 (2). P. 131-135.

332. Yu M., Cao X., Lou G. The effect of IL-2 and IL-3 gene therapy in mice on immunological recovery receiving high dose chemotherapy. // Zhong. Zhong Liu Za Zhi (Chinese). 1997. Vol. 19(5). P.329-332.

333. Yuo A., Kitagawa S., Suzuki I. et al. Tumor necrosis factor as an activator of human granulocytes. Potentiation of the metabolisms triggered by the Ca2+mobilizing agonists. // J. Immunol. 1989. Vol. 142. P. 1678-1684.

334. Zhang M. & Tracey K.J. Tumor necrosis factor. In: Thompson A.W., er. The cytokine handbook, 3rd ed. New York. Academic press, 1998. P.515-548.

Информация о работе

Синотова, Оксана Александровна
кандидата биологических наук
Пущино, 2004
ВАК 03.00.02

Диссертация

Секреторная активность иммунокомпетентных клеток в условиях воздействия низкоинтенсивными электромагнитными излучениями крайне высокой частоты - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы