Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биохимические изменения в сперме человека под влиянием электромагнитного излучения миллиметрового диапазона

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические изменения в сперме человека под влиянием электромагнитного излучения миллиметрового диапазона"

На правах рукописи

СУХОВА Инна Витальевна

БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В СПЕРМЕ ЧЕЛОВЕКА ПОД ВЛИЯНИЕМ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ МИЛЛИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва - 2005

Работа выполнена на кафедре общей и биоорганической химии Астраханской государственной медицинской академии

Научный руководитель:

д.м.н., профессор А. А.Николаев

Официальные оппоненты:

д.м.н., профессор А.А.Терентьев д.м.н., профессор В.Б.Хватов

Ведущая организация:

НИИ ФХМ МЗ РФ, по адресу 119992, Москва, ул.Малая Пироговская, д. 1а

Защита состоится «_»_2005 г. на заседании

Диссертационного Совета Д 20807201 при ГОУВПО РГМУ Минздрава России по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке РГМУ. Автореферат разослан «_»_2005 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета,

д.м.н., профессор П.Х.Джанашия

<f

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы.

Факторы окружающей среды способны оказывать разнообразное влияние на состояние здоровья человека.

И в первую очередь это относится к факторам воздействия физической природы, таким как электромагнитное излучение, которые способны воздействовать на все живое на Земле, включая человека, приводя к тем или иным биологическим эффектам [Девят-ков Н. Д. и др., 1999, Кузьмичев В. Е. и др., 2001, Бецкий О. В., 2003].

Весьма перспективными в этом отношении оказались исследования биологических эффектов электромагнитного излучения миллиметрового диапазона.

При воздействии на биологический объект электромагнитного излучения высокой мощности или значительной продолжительности на первый план выходит неспецифическое тепловое воздействие, но значительно больший интерес вызывает низкоинтенсивное электромагнитное излучение способное вызывать целый ряд специфических биологических феноменов [Лебедева Н. Н. и др., 2000, Бецкий О. В. и др., 2001, Петросян В. И. и др., 2003; Grundler W. etal., 2000].

Первая научная публикация, посвященная необычным эффектам воздействия низкоинтенсивных (менее 10 мВт/см2) электромагнитных волн миллиметрового диапазона на биологические объекты, была сделана в 1966 г.

С того времени стало известно о влияние миллиметровых волн на микроорганизмы и клеточные культуры (изменение плаз-мидной и хромосомной антибиотикорезистентности, изменении пролиферативной активности и др.), на функциональное состояние организма в целом [Гельвич Э. А. и др., 1999, Гапеев А. Б. и др., 2000, Тамбиев А. X. и др., 2001, Голант М. Б. и др., 2002, Смолян-ская А. 3. и др., 2004].

В настоящее время низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона широко используется в различных областях практической медицины (для улучшения реологического состояния крови, стимуляции репаративных процессов, в комплексной противовоспалительной терапии и т. д.) [Пославский М. В. и др., 1998, Моисеев В. Н. и др., 1999, Семенова С В 2000

Пуляева Е. Л. и др., 2002, Тарасова О. В., 2003].

РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С. Петербург

авв^рк

Однако данных о влиянии низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на репродуктивную систему человека, и, в частности, на сперму, крайне мало. Имеющиеся данные носят противоречивый характер и в ряде случаев вызывают сомнения из-за отсутствия адекватных контрольных серий при проведении экспериментальных исследований [Субботина Т. И. и др., 2002].

Цель исследования: Изучить влияние низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на сперму человека в норме и при нарушениях фертильности.

Основные задачи исследования:

1. Разработать критерии оценки действия электромагнитного излучения на сперму человека.

2. Провести детальное исследование влияния низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на морфофункциональное состояние сперматозоидов.

3. Изучить действие электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на ферментативную активность акрозина.

4. Исследовать функционирование системы полиаминов спер-моплазмы после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона.

5. Выявить эффекты воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на сперму при различных нарушениях фертильности.

Научная новизна исследования:

Впервые дана характеристика биологических эффектов воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на сперму человека. Впервые исследована динамика ферментативной активности акрозина после воздействия микроволнового излучения. Впервые показано изменение уровня полиаминов спермоплазмы после воздействия микроволнового излучения. Впервые исследована динамика биохимических показателей эякулята после микроволнового воздействия у мужчин с нарушением фертильности.

Научно-практическая значимость работы:

Дана характеристика биологических эффектов низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона и показаны основные механизмы реализации этих эффектов. Описано протекторное и мембраностабилизирующее действие микроволнового излучения, показана роль полиаминов в реализации биоло-' гических эффектов микроволн. Выявлены различия в биологических реакциях на микроволновое излучение при нормоспермии (здоровые) и патоспермии (мужчины с нарушением фертильности).

■

Апробация работы:

Материалы диссертации представлены и доложены на:

- V и VI Международных конференциях «Эколого-биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия» (Астрахань, 2002 г., 2003 г.);

- Итоговых научных конференциях Астраханской государственной медицинской академии (Астрахань, 2002 г., 2003 г.);

- Международной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Москва, 2003);

- VIII International Scientific Conference (India, Goa, 2004).

Публикации: По теме диссертации опубликованы 6 научных работ.

Объем и структура диссертации:

Диссертация изложена на 122 страницах, содержит 25 таблиц и 14 рисунков. Она состоит из введения; четырех глав, включающих обзор литературы, описание методов исследования, изложения фактического материала и обсуждения полученных резуль-; татов; выводов; указателя использованной литературы. Библио-

графический указатель содержит 162 источника, из них 22 на иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объектом нашего исследования были сперматозоиды 20 фертильных мужчин - доноров и эякуляты 38 мужчин с нарушением репродуктивной функции (астенозооспермией).

Определение времени разжижения, объема, вязкости и pH спермы, а также активно подвижных, слабо подвижных, неподвижных сперматозоидов, скорости сперматозоидов, концентрации и общего количества сперматозоидов проводили по общепринятым методикам, рекомендованным экспертами ВОЗ.

Для определения жизнеспособности сперматозоидов был выбран метод Молнара в модификации А. А. Николаева. <

Определение резистентности сперматозоидов к хлориду натрия проводили по методу Милованова. ]

Определение дыхательной функции сперматозоидов проводили методу по методу Шергиной.

Активность свободного акрозина (ЕС 3.4.21.10) определяли по расщеплению ВАЕЕ по методу W. В. Schill. Общую активность акрозина определяли после быстрого оттаивания (при температуре 23°С в течение 30 минут) спермы, предварительно замороженной до -196°С (в жидком азоте). Проферментную активность рассчитывали по формуле: ПА = ОА - CA, где ПА - проферментная активность акрозина, ОА - общая активность акрозина, CA - свободная активность акрозина.

Активность акрозина выражали в международных единицах на 1 миллион сперматозоидов (мкМЕ/10в сл.).

Содержание полиаминов (спермин, спермидин, путресцин) в спермоплазме мы определяли по методу А. А. Николаева и соавт. (Патент на изобретение № 2002105459/15 (005605) приоритет от 28.02.02 г.). Количественное определение индивидуальных фракций полиаминов проводили после прямого сканирования электро-фореграмм на сканере, путем конвертации полученного материала в цифровой формат на ПЭВМ с последующей математической обработкой данных по методу А. А. Николаева, используя разработанную А. А. Николаевым и соавт. специализированную программу «ПН 5108» (Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ №2003612170 от 17.09.03 г.). Предел обнаружения для полиаминов спермоплазмы составил 0,013 мг/мл.

В эксперименте образцы спермы после полного разжижения подвергались воздействию низкоинтенсивного электромагнитного поля миллиметрового диапазона.

Для создания электромагнитного поля был использован генератор монохроматических электромагнитных волн «Явь-1-7,1».

Электромагнитное поле генерируемое «Явь-1-7,1» имело следующие характеристики: длина волны X = 7,1 мм, частота f = 42,194 ГГц, плотность мощности Р = 0,1 мВт-см-2, была выбрана как

рекомендованная для клинического и экспериментального использования. Указанная плотность мощности, как известно, не обладает тепловым эффектом, а, следовательно, возможное биологическое действие при плотности мощности 0,1 мВт см"2 является специфическим.

В целом экспериментальная работа проводилась по схеме приведенной на рисунке 1.

Рисунок 1. Общая схема проведения экспериментальных исследований.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Характеристика спермы фертильных мужчин после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона

Нами был проведен расширенный морфологический анализ состояния сперматозоидов фертильных мужчин до и после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона.

При указанных выше параметрах электромагнитного поля для достижения биологического эффекта рекомендуют время экс-

позиции 20-30 мин [Девятков Н. Д. и др., 2000, Бецкий О. В. и др., 2002]. Нами для определения наличия биологического эффекта были выбраны значения времени экспозиции несколько больше (40 мин) и несколько меньше (10 мин) рекомендованных.

Достоверного отличия при анализе общего количества патологических форм между контрольной (без воздействия КВЧ-поля) и опытной группами (экспозиция 10 мин и 40 мин) выявлено не было.

Отсутствие динамики морфологических показателей, как по общему количеству патологических форм, так и по конкретным нарушениям головки, шейки и хвоста сперматозоидов после воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона является ожидаемым результатом, так как маловероятно, что кратковременное воздействие способно вызвать видимые морфологические изменения сперматозоидов.

Двигательные характеристики сперматозоидов являются более лабильными, поэтому можно было ожидать их изменения после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. Тем более, что известно регулирующее действие КВЧ-полей на функциональное состояние клеток [Бецкий О. В. и др.,1996, Бриль Г. Е. и др., 1998-2000, Голант М. Б. и др., 2002]. Однако, как показали наши исследования, у здоровых мужчин с нормозооспермией воздействие на сперму низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона не приводит к достоверному изменению ни скорости, ни характера подвижности сперматозоидов.

Для углубленного изучения влияния низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона, нами был использован ряд тестов функционального состояния сперматозоидов. Оценка резистентности сперматозоидов к гипертоническому раствору хлорида натрия была проведена по Милованову.

По полученным нами данным (таблица 1), воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона приводило к увеличению резистентности мембран в среднем на 800 УЕ.

Необходимо отметить, что десятиминутная экспозиция была недостаточной для полной реализации биологического эффекта (повышения резистентности мембран). Однако, после двадцатиминутной экспозиции дальнейшее увеличение продолжительности воздействия к увеличению выраженности биологического эффекта уже не приводило.

В тоже время тест на дыхательную функцию сперматозоидов по Шергиной не выявил достоверных различий до и после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона при различных вариантах экспозиции (таблица 1). Учитывая предыдущий опыт в дальнейшем при воздействии электромагнитного излучения миллиметрового диапазона было ' выбрано постоянное время экспозиции - 20 минут, как оптимальное

для реализации возможных биологических эффектов.

После воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона в тесте на резистентность сперматозоидов к уксусной кислоте (по методу Джоела) было отмечено существенное повышение резистентности.

Если до 10 минут инкубации различия и в контроле и в опыте были не значительные, то уже после 20-30 минут инкубации различия становились статистически значимыми.

Таблица 1.

Функциональные показатели сперматозоидов до и после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона_

Функциональные показатели спематозоидов Контроль (до воздействия) Опыт

после 10 мин экспозиции после 20 мин экспозиции после 30 мин экспозиции после 40 мин экспозиции

Резистентность к хлориду натрия по Милованову, УЕ 4500,0 ±900,0 4800,0 ±980,0 5300,0 ±910,0 5300,0 ±930,0 5200,0 ±950,0

Дыхательная функция сперматозоидов по Шергиной, УЕ 10,0 ±0,6 10,2 ±0,8 10,1 ±0,7 10,0 ±0,8 10,0 ±0,9

Примечание: в таблице значение р<0,01

Подвижность сперматозоидов в образцах, подвергавшихся воздействию низкоинтенсивного электромагнитного поля миллиметрового диапазона, сохранялась в среднем на 10 минут дольше, чем в контрольных образцах. На сороковой минуте инкубации в опыте все еще сохранялись подвижные сперматозоиды, тогда как в контроле двигательной активности сперматозоидов отмечено не было (таблица 2).

Таблица 2.

Резистентность сперматозоидов фертильных мужчин к уксусной кислоте (по методу Джоела) после воздействия электромагнитного

Время инкубации, минут Подвижные сперматозоиды, %

Контроль (до воздействия) Опыт (после 20 минут экспозиции)

0 58,0±4,8 58,0±4,8

10 42,0±3,5 47,5±4,2

20 23,6±3,1 29,0±2,8

30 7,4±1,1 13,1±1,4

40 0 4,3±0,9

50 0 0

Примечание в таблице значение р<0,01

Тесты, характеризующие функциональное состояние мембран сперматозоидов, можно условно разделить на две группы:

1) тесты, оценивающие резистентность мембран к действию возрастающего по силе внешнего фактора (например, изменение ионной силы раствора, осмотического давления и так далее);

2) тесты, оценивающие резистентность мембран к действию постоянного по силе внешнего фактора, действующего продолжительное время.

В работе нами были использованы тесты как первого типа (тест Милованова), так и второго типа (тест Джоела).

У.Е.

контроль 10 ммн 20 мт 30 мин В резистентность по Милованову

40 ктн Время

экспозиции

Рисунок 2. Резистентность мембран сперматозоидов в тесте по Милованову после воздействия КВЧ-поля.

Подвижные сперматозоиды, %

□ контрогь ■ ольгу-

РисуНОК 3. Резистентность мембран сперматозоидов в тесте по Джоелу после воздействия КВЧ-поля.

В обоих тестах было продемонстрировано повышение резистентности мембран сперматозоидов здоровых мужчин, после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного поля миллиметрового диапазона (рисунок 2 и 3).

Под влиянием низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона происходит повышение устойчивости мембран сперматозоидов. Стабилизирующее действие КВЧ-полей на клеточные мембраны согласуется с теорией поддержания в мембране клеток акустоэлектрических колебаний (колебаний Фрёлиха) [Беляков Е. В. и др., 1998, Бецкий О. В., 1999, Петросян В. И. и др., 2003], которая, на наш взгляд, и, по мнению ряда авторов, является одной из основных теорий объясняющих биологические эффекты миллиметровых волн.

Сериновая протеиназа ЕС 3.4.21.10 - акрозин, является одним из ключевых акросомальных ферментов и играет важную роль в процессе оплодотворения яйцеклетки.

В ряде работ предлагается определение ферментативной активности акрозина в качестве диагностического теста при ферти-лизации сперматозоидов in vitro [Menkveld R. et al., 1996].

Однако данных о функционировании системы акрозина при воздействии низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона в доступной нам литературе отсутствуют

Определение активности акрозина проводили по описанному выше методу. В контрольной группе активность свободного ак-

розина составила в среднем 1,34±0,07 мкМЕ/106 сп., общая активность акрозина составила в среднем 5,16±0,15 мкМЕ/106 сл., а проферментная активность акрозина была равна в среднем 3,82±0,12 мкМЕ/106 сп. (таблица 3).

Исследование образцов эякулятов после двадцатиминутного воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона дало интересные результаты.

Таблица 3.

Ферментативная активность акрозина до воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона

Ферментативная активность акрозина, мкМЕ/10всп Контроль (до воздействия) Опыт (после 20 минут экспозиции)

Свободного 1,34±0,07 1,17±0,05

Общая 5,16±0,15 5,15±0,13

Проферментная 3,82±0,12 3,98±0,12

Примечание в таблице значение р<0,01

Проферментная активность акрозина в образцах эякулятов после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона по сравнению с контролем в среднем увеличивалась не значительно - на 4 % (таблица 3).

Активность свободного акрозина была достоверно ниже и составляла в среднем 87 % по сравнению с контрольной группой. Общая активность акрозина по сравнению с контролем достоверно не изменялась.

В тоже время, рассчет коэффициента «проакро-зин/свободный акрозин» показал, что после 10 минут воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона значение коэффициента по сравнению с контролем не изменяется, после 20 минут значение коэффициента возрастает в среднем на 20 %, а при дальнейшем увеличении времени экспозиции - практически не меняется (таблица 4).

Другими словами происходит предотвращение преждевременной активации акрозина, что является благоприятным фактором, способствующим эффективной реализации оплодотворяющей способности сперматозоидов.

Таблица 4.

Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона различной продолжительности _

Характеристика функционального статуса системы акрозина Контроль (до воздействия) Опыт

после 10 мин экспозиции после 20 мин экспозиции после 30 мин экспозиции после 40 мин экспозиции

Коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» 2,85 +0,11 2,88 ±0,15 3,40 ±0,12 3,42 ±0,16 3,41 ±0,15

Примечание в таблице значение р<0,05

Вероятно, рост проферментной активности акрозина за счет снижения активности свободного акрозина происходит благодаря стабилизации акросомальной мембраны сперматозоидов под влиянием низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. Однако, исключить прямое влияние КВЧ-поля на активность акрозина за счет изменения конформации молекулы, посредством модификации её сольватной оболочки, как это описано для некоторых других ферментов, мы не можем. Вероятно, в большей или меньшей степени будут иметь места оба рассмотренных механизма.

При изучении динамики полиаминов спермоплазмы после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона было важно исключить прямое разрушающее действие КВЧ-поля на полиамины. Для этого экспериментальное исследование было проведено в виде контроля и двух опытов (таблица 5).

В опыте А воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона было направлено на нативный эякулят, то есть облучению подвергалась как спермо-плазма, так и клеточные элементы спермы (сперматозоиды, клетки сперматогенеза и т. д.). После этого проводилось отделение спермоплазмы от клеточных элементов путем центрифугирования и определение уровня полиаминов в полученной спермоплазме.

В опыте Б, напротив, сначала проводилось центрифугирование (для разделения спермоплазмы и клеточных элементов), а затем облучение только спермоплазмы. В контроле условия и время проведения исследования полностью соответствовали как опыту А, так и опыту Б, но исключалось воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона.

Таблица 5.

Схема исследования уровня полиаминов спермоплазмы после воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона

Этапы иссле- Экспериментальная группа Контроль

ОпытА Опыт Б

ния I Нативная сперма человека после полного разжижения Нативная сперма человека после полного разжижения Нативная слерма человека после полного разжижения

И Воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на нативную сперму человека (20 мин.) Центрифугирование с целью разделения натив-ной спермы на спермо-плазму и клеточные элементы (20 мин.) Центрифугирование с целью разделения натив-ной спермы на спермо-плазму и клеточные элементы (20 мин.)

III Центрифугирование с целью разделения облученной спермы на спер-моплазму и клеточные элементы (20 мин.) Воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на спермоплаз-му (20 мин.) Экспозиция при тех же условиях, что в Опыте Б, но без воздействия микроволн (20 мин.)

IV Определение уровня полиаминов по методу Николаева и соавт Определение уровня полиаминов по методу Николаева и соавт Определение уровня полиаминов по методу Николаева и соавт.

1 - электрофореграм-ма и денситограмма полиаминов спермоплазмы нативного эякулята (контроль),

2 - электрофореграм-ма и денситограмма полиаминов спермоплазмы после воздействия на эякулят низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона (опыт А)

Рисунок 4. Пример электрофореграммы и денситограммы полиаминов спермоплазмы.

Концентрация полиаминов в спермоплазме в контроле составила для спермидина 188,0+23,8 мкг/мл, а для спермина 242,0±34,5 мкг/мл.

В группе А по сравнению с контролем наблюдалось снижение уровня как спермина, так и спермидина, причем спермидин в среднем снижался более выражено, чем спермин (рисунок 4, таблица 6). В опыте Б достоверных отличий с контролем выявлено не было.

Таблица 6.

Изменение уровня полиаминов спермоплазмы после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона_

Исследуемые показатели Контроль Опыт А Опыт Б

Спермин, мкг/мл 242±23,5 199±20,3 241 ±25,6

Спермидин, мкг/мл 188±19,4 117±16,2 186±21,0

Коэффициент «спермин/спермидин» 1,29±0,03 1,7±0,03 1,29±0,02

Примечание, в таблице значение р<0,05

Соответственно происходило изменение коэффициента «спермин/спермидин» (таблица 6).

Снижение уровня полиаминов спермоплазмы и изменения коэффициента «спермин/спермидин» (рисунок 5), которое наблюдалось в опыте А объясняется, на наш взгляд, их сорбцией на мембраны сперматозоидов. Опережающее снижение уровня спермидина по сравнению со спермином происходит за счет его большего сродства к мембранам.

Возможно, стабилизирующее действие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на мембраны сперматозоидов реализуется, в том числе, и благодаря регуляции текучести мембран под действием спермидина.

КЬтрагь ОпыгА ОпыгБ

Рисунок. 5. Изменение коэффициента «спермин/спермидин» после воздействия КВЧ-поля при нормозооспермии.

с коэффициент

2. Характеристика спермы субфертильных мужчин после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона

Представляло интерес сравнить биологический ответ на низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона спермы здоровых мужчин и мужчин с нарушением фер- *

тильности.

Из большого разнообразия форм патоспермии для изучения нами было выбрано состояние астенозооспермии, как наибо- * лее распространенное нарушение, снижающее оплодотворяющую способность сперматозоидов.

При астенозооспермии реакция сперматозоидов на воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона отличалась от реакции при нормозооспермии.

В частности увеличивалось количество активно подвижных сперматозоидов, преимущественно за счет пула слабоподвижных сперматозоидов (таблица 7 и 8).

Таблица 7.

Подвижность сперматозоидов до воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона при астенозооспермии_

Характеристики подвижности сперматозоидов Контроль (до воздействия КВЧ-поля)

Активно подвижных, % 16,5±1,2

Слабо подвижных, % 24,3+1,4

Неподвижных, % 59,2±2,3

Скорость, мм/мин 1,2+0,2

Примечание в таблице значение р<0,01

Хотя изменения были и не большими, но статистически достоверными. Так, после воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона содержание активно подвижных форм сперматозоидов в эякуляте возрастало в среднем на 6,7 % (с 16,5 % до воздействия до 23,2 % после воздействия).

В то же время после воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона снижалось количество слабоподвижных сперматозоидов в среднем на 5,9 % (с 24,3 % до воздействия до 18,4 % после воздействия).

Содержание неподвижных форм достоверно не менялось.

Таблица 8.

Подвижность сперматозоидов после воздействия электромагнитного излучения миллиметрового диапазона при астенозооспермии

Характеристики подвижности сперматозоидов Опыт

после 10 мин экспозиции после 20 мин экспозиции после 30 мин экспозиции после 40 мин экспозиции

Активно подвижных, % 16,6±1,3 23,2±1,5 23,5±1,7 22,9±1,6

Слабо подвижных, % 24,2±1,5 18,4+1,1 18,1+1,3 18,7±1,4

Неподвижных, % 59,2+2,3 58,4±2,5 58,4±3,1 58,4±2,9

Скорость, мм/мин 1,2±0,2 1,3±0,3 1,2±0,4 1,3±0,3

Примечание в таблице значение р<0,01

Вероятно, при нормоспермии ответа на воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона не наблюдается, поскольку двигательный потенциал сперматозоидов уже реализуется максимально возможным образом.

Другое дело при астенозооспермии: подвижность сперматозоидов нарушена, их двигательная активность далека от оптимальной. В этих условиях проявляется в какой-то мере регулирующее действие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона, причем увеличение количества активно подвижных сперматозоидов происходит за счет пула слабо подвижных, в то время как активации неподвижных сперматозоидов (имеющих, вероятно более глубокие нарушения) практически не происходит.

Исследование динамики полиаминов спермоплазмы при астенозооспермии позволило выявить два типа реакции.

При первом типе достоверного изменения уровня полиаминов не наблюдалось, имелась лишь некоторая тенденция к повышению уровня спермидина. При втором типе - как спермин, так и спермидин достоверно снижались, что напоминало ответ при нор-мозооспермии (таблица 9).

Таблица 9.

Изменение уровня полиаминов спермоплазмы при патоспермии

Концентрация полиаминов в спер-моплазме Контроль (до воздействия КВЧ-поля) Опыт (после 20 мин воздействия КВЧ-поля)

Ответ I типа Ответ II типа

Спермин, мкг/мл 140,5±5,8 138,8±8,8 133,1 ±4,9

Спермидин, мкг/мл 38,4±2,1 44,2+3,5 24,6+1,9

Примечание: в таблице значение р<0,01

Соответственно коэффициент «спермин/спермидин» в группе с ответом первого типа несколько снижался, в то время как в группе с ответом второго типа достоверно возрастал (таблица 10).

Таблица 10.

Оцениваемый показатель Контроль (до воздействия КВЧ-поля) Опыт (после 20 мин воздействия КВЧ-поля)

Ответ I типа Ответ II типа

Коэффициент «спермин/спермидин» 3,6±0,1 3,1±0,1 5,4±0,3

Примечание в таблице значение р<0,01

Интересно отметить, что по данным, полученным при анализе историй болезней, эффективность терапии патоспермии у пациентов с ответом второго типа была на 30-40 % выше, чем у пациентов с ответом первого типа.

В тоже время при патоспермии, а именно при астенозоос-пермии, воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона приводит к небольшим, но статистически значимым улучшениям показателей подвижности - увеличению количества активно подвижных сперматозоидов (рисунок 6).

Рисунок 6. Динамика изменения относительного количества активнопо-движных сперматозоидов после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона различной продолжительности при нор-мозооспермии и па-тозооспермии.

10 мм

20 мин

ЭО мин

40 мин

I Нормсвооспермия О Паггоспермт

Эксперимент по исследованию влияния низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на систему полиаминов спермоплазмы был построен таким образом, чтобы сразу исключить или выявить прямое разрушающее влияние низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на полиамины спермоплазмы.

Результаты опыта Б позволяют нам исключить прямое разрушающее действие миллиметровых волн на полиамины.

Ответ системы полиаминов на воздействие миллиметрового излучения при патоспермии (астенозооспермия) отличался от ответа при нормоспермии. Нам удалось выявить два типа реакции.

При первом типе достоверного изменения уровня полиаминов не наблюдалось, имелась лишь некоторая тенденция к повышению уровня спермидина. При втором типе - как спермин, так и спермидин достоверно снижались, что напоминало ответ при нор-мозооспермии (рисунок 7).

до воздействия

ответ I типа

ответ II типа

□ спермин в спермидин

Рисунок 7. Влияние КВЧ-поля на уровень полиаминов в спермоплазме при астенозооспермии.

Соответственно, коэффициент «спермин/спермидин» в группе с ответом первого типа несколько снижался, в то время как в группе с ответов второго типа достоверно возрастал.

Интересно отметить, что по данным, полученным при анализе историй болезней, эффективность терапии патоспермии (ас-тенозооспермии) у пациентов с ответом второго типа была на 30-40 % выше, чем у пациентов с ответом первого типа.

Вероятно, при первом типе патологические изменения мембран выражены более сильно, что не позволяет им реагировать как в норме. Более глубокими изменениями в первой группе по сравнению со второй объясняется, на наш взгляд, и более плохая кура-бельность таких пациентов.

ВЫВОДЫ

1. Оптимальная характеристика электромагнитного излучения для исследования воздействия на сперму человека, вызывающая специфические биологические эффекты без побочного теплового воздействия при частоте f = 42,194 ГГц и длине волны X = 7,1 мм, должна характеризоваться плотностью излучения не менее 0,05 мВт/см2 при минимальной экспозиции не менее 20 минут.

2. Низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона не вызывает изменения строения и практически не влияет на подвижность сперматозоидов здоровых мужчин.

3. Под влиянием низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона повышается стабильность мембран сперматозоидов здоровых мужчин, что подтверждается тестами Милованова и Джоела.

4. Воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона предотвращает преждевременную активацию акрозина у здоровых мужчин, увеличивая коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» в среднем на 20 %.

5. В результате воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона у здоровых мужчин происходит снижение уровня полиаминов спермоплазмы в среднем на 27 %, причем снижение уровня спермидина более выражено, что приводит к росту коэффициента «спермин/спермидин» до 1,7 (контроль 1,3).

6. При патоспермии у мужчин с нарушением фертильности отмечены два типа реакции на воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона При первом типе реакции отмечено отсутствие динамики кинетических и биохимических параметров спермы (характер подвижности сперматозоидов, уровень полиаминов спермоплазмы). При вто-

ром типе тенденция изменения биохимических параметров была близка к реакции у здоровых мужчин.

Практические рекомендации

Результаты исследования используются в научных исследованиях и практической работе: кафедры общей и биоорганической химии и кафедры фармацевтической химии Астраханской государственной медицинской академии; Центра планирования семьи и репродукции человека г. Астрахани. Результаты диссертационной работы используются в качестве учебного материала для студентов, интернов и ординаторов Астраханской государственной медицинской академии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Николаев A.A., Сухова И.В. Активность акрозина сперматозоидов человека при воздействии электромагнитного излучения миллиметрового диапазона// Сборник печатных трудов АГМА T.28(LII), Астрахань, 2003, 256-258.

2. Влияние радиочастотных электромагнитных полей на репродуктивную функцию мужчин / Николаев А. А., Махмудова А. М., Луц-кий Д. Л., Сухова И.В.) // Мат. VI междунар. конф. «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря». - Астрахань, 2003. -С.99-100.

3. Николаев А. А., Луцкий Д. Л., Сухова И.В. Эффекты КВЧ-облучения спермы человека // Успехи современного естествознания. - 2004. - №3. - С.22-23.

4. Николаев A.A., Сухова И.В. Реакция спермы инфертильных мужчин на электромагнитное излучение миллиметрового диапазона // Фундаментальные исследования. - 2004. - №5. - С.145-146.

5. Николаев A.A., Луцкий Д.Л., Сухова И.В. Влияние миллиметрового электромагнитного излучения низкой интенсивности на резистентность мембран сперматозоидов // Успехи современного естествознания. - 2004. - №8. - С.56-58.

6. Николаев A.A., Луцкий Д.Л., Сухова И.В. Протеомика скаферри-на при воздействии электромагнитного излучения миллиметрового диапазона // Materials of VIII International Scientific Conference. - India, Goa, 2004. - P.214-215.

РНБ Русский фонд

2005-4 45442

i

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Сухова, Инна Витальевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ И МЕДИЦИНСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫХ ВОЛН МИЛЛИМЕТРОВОГО

ДИАПАЗОНА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.2.1. Методы определения времени разжижения, объема, вязкости и рН спермы

2.2.2. Методы определения активно подвижных, слабо подвижных, неподвижных сперматозоидов, скорости сперматозоидов, концентрации и общего количества сперматозоидов

2.2.3 Методы исследования жизнеспособности, резистентности и дыхательной активности сперматозоидов

2.2.4 Определение ферментативной активности акрозина

2.2.5 Определение полиаминов

2.2.6 Экспериментальные исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СПЕРМОГРАММ

3.2. ХАРАКТЕРИСТИКА СПЕРМЫ ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ МИЛЛИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

3.2.1. Морфологические показатели сперматозоидов .:.:.:;.:.:.:.:.:.:.:.;.:.~.77.:7Г

3.2.2. Двигательные характеристики сперматозоидов

3.2.3. Функциональные показатели сперматозоидов

3.3. ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ АКРОЗИНА ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ МИЛЛИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

3.4. ДИНАМИКА ПОЛИАМИНОВ СПЕРМОПЛАЗМЫ ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ МИЛЛИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

3.5. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ МИЛЛИМЕТРОВОГО ДИАПАЗОНА

НА ЭЯКУЛЯТ ПРИ ПАТОСПЕРМИИ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимические изменения в сперме человека под влиянием электромагнитного излучения миллиметрового диапазона"

Актуальность исследования

Факторы окружающей среды способны оказывать разнообразное влияние на состояние здоровья человека.

И в первую очередь это относится к факторам воздействия физической природы, таким как электромагнитное излучение, которые способны воздействовать на все живое на Земле, включая человека, приводя к тем или иным биологическим эффектам.

Весьма перспективными в этом отношении оказались исследования биологических эффектов электромагнитного излучения миллиметрового диапазона.

При воздействии на биологический объект электромагнитного излучения высокой мощности или значительной продолжительности на первый план выходит неспецифическое тепловое воздействие, но значительно больший интерес вызывает низкоинтенсивное электромагнитное излучение способное вызывать целый ряд специфических биологических феноменов.

Первая научная публикация, посвященная необычным эффектам воздействия низкоинтенсивных (менее 10 мВт/см2) электромагнитных волн миллиметрового диапазона на биологические объекты, была сделана в 1966 г.

С того времени стало известно о влияние миллиметровых волн на микроорганизмы и клеточные культуры (изменение плазмидной и хромосомной антибиотикорезистентно-сти, изменении пролиферативной активности и др.), на функциональное состояние организма в целом.

В настоящее время низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона широко используется в различных областях практической медицины (для улучшения реологического состояния крови, стимуляции репара-тивных процессов, в комплексной противовоспалительной терапии и т. д.).

Однако данных о влиянии низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона на репродуктивную систему человека, а в частности на сперму, крайне мало. Имеющиеся данные носят противоречивый характер и в ряде случаев вызывают сомнения из-за отсутствия адекватных контрольных серий при проведении экспериментальных исследований.

Цель исследования

Изучить влияние низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на сперму человека в норме и при нарушениях фертильности.

Основные задачи исследования

1.Разработать критерии оценки действия электромагнитного излучения на сперму человека.

2.Провести детальное исследование влияния низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на морфофункциональное состояние сперматозоидов .

3.Изучить действие электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на ферментативную активность акрозина.

4.Исследовать функционирование системы полиаминов спермоплазмы после воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона .

5.Выявить эффекты воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на I сперму при различных нарушениях фертильности.

Научная новизна

Впервые дана характеристика биологических эффектов воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на сперму человека. Впервые исследована динамика ферментативной активности ак-розина после воздействия микроволнового излучения. Впервые показано изменение уровня полиаминов спермоплазмы после воздействия микроволнового излучения. Впервые исследована динамика биохимических показателей эякулята после,- микроволнового воздействия у., .мужчин. с нарушением фертильности.

Практическое значение работы

Дана характеристика биологических эффектов низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона и показаны- основные механизмы реализации этих эффектов. Описано протекторное и мембраностабилизирую-щее действие микроволнового излучения, показана роль полиаминов в реализации биологических эффектов микроволн. Выявлены различия в биологических реакциях на микроволновое излучение при нормоспермии (здоровые) и патоспермии (мужчины с нарушением фертильности).

Внедрение результатов работы в практику

Полученные результаты используются в практической работе Центра планирования семьи и репродукции человека г. Астрахани при лабораторной диагностике мужской репродуктивной функции, при комплексной оценке эффективности лечения бесплодия и при дифференциальной диагностике различныхформ патоспермии.

Результаты диссертационной работы используются в качестве учебного материала для студентов, интернов и ординаторов Астраханской государственной медицинской академии.

Основные положения, выносимые на защиту

1.Электромагнитное излучение при частоте f = 42,194 ГГц и длине волны А, = 7,1 мм направленное на сперму человека способно вызвать биологические эффекты при плотности излучения не менее 0, 05 мВт/см2 и экспозиции не менее 2 0 минут.

2. Низкоинтенсивное электромагнитное излучение миллиметрового диапазона не вызывает изменения морфологии и практически не влияет на подвижность сперматозоидов здоровых мужчин.

3. Под влиянием низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона повышается стабильность мембран сперматозоидов здоровых мужчин.

4.Воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона предотвращает преждевременную активацию акрозина у здоровых мужчин, увеличивая коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» в среднем на 2 0 %.

5.В результате воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона у здоровых мужчин происходит снижение уровня полиаминов спермоплазмы, причем снижение уровня спермидина более выражено, что приводит к росту коэффициента «спермин/спермидин».

6. При патоспермии у мужчин с нарушением фертильности отмечены два типа реакции на воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. При первом типе реакции отмечено отсутствие динамики кинетических и биохимических параметров спермы (характер подвижности сперматозоидов, уровень полиаминов спермоплазмы). При втором типе тенденция изменения биохимических параметров была близка к реакции у здоровых мужчин.

Апробация результатов

Результаты работы представлены и доложены на:

- V и VI Международных конференциях «Эколого-биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия» (Астрахань, 2002 г., 2003 г.);

- Итоговых научных конференциях АГМА (Астрахань, 2002 г., 2003 г.);

- VIII International Scientific Conference (India, Goa, 2004) .

- Международной конференции «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Москва, 2003) .

Автор приносит благодарность за большую консульта тивную и методическую помощь зав. клинико диагностической лаборатории Астраханского Центра плани рования семьи и репродукции человека Л. В. Ложкиной зав. кафедрой фармацевтической химии Астраханской госу дарственной медицинской академии канд. мед. наук доцен ту Д. Л. Луцкому, канд. биол. наук доценту Л. X. Гай нуллиной, а также всем сотрудникам кафедры общей и био органической химии Астраханской государственной меди цинской академии.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Сухова, Инна Витальевна

ВЫВОДЫ

1.Оптимальная характеристика электромагнитного излучения для исследования воздействия на сперму человека, вызывающая специфические биологические эффекты без побочного теплового воздействия при частоте 1 = 42,194 ГГц и длине волны X - 1,1 мм, должна характеризоваться плотностью излучения не менее 0,05 мВт/см2 при минимальной экспозиции не менее 20 минут .

2.Низкоинтенсивное' электромагнитное излучение миллиметрового диапазона не вызывает изменения строения и практически не влияет на подвижность сперматозоидов здоровых мужчин.

3. Под влиянием низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона повышается стабильность мембран сперматозоидов здоровых мужчин, что подтверждается тестами Милованова и Джоела.

4.Воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона предотвращает преждевременную активацию акрозина у здоровых мужчин, увеличивая коэффициент «проакрозин/свободный акрозин» в среднем на 2 0 %.

5. В результате воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона у здоровых мужчин происходит снижение уровня полиаминов спермоплазмы в среднем на 27 %, причем снижение уровня спермидина более выражено, что приводит к росту коэффициента «спермин/спермидин» до 1,7 (контроль 1,3).

6. При патоспермии у мужчин с нарушением фертильности отмечены два типа реакции на воздействие низкоинтенсивного электромагнитного излучения миллиметрового диапазона. При первом типе реакции отмечено отсутствие динамики кинетических и биохимических параметров спермы (характер подвижности сперматозоидов, уровень полиаминов спермоплазмы). При втором типе тенденция изменения биохимических параметров была близка к реакции у здоровых мужчин. I

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Можно сделать следующий главный вывод: физиологический (биофизический) механизм воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения в миллиметровом диапазоне длин волн на биологические объекты носит многофакторный (комплексный) характер.

Основные физиологические механизмы воздействия низкоинтенсивных миллиметровых волн сводятся к следующим феноменам:

- возбуждение акустоэлектрических колебаний в плазматических мембранах клетки (колебания Фрёлиха);

- капиллярный эффект (капилляр в прямоугольном волноводе) ;

- механизм гидратации белка под действием миллиметрового излучения;

- механизм формирования «памяти воды»;

- механизм появления «прозрачности воды» на резонансных частотах водных кластеров;

- «геометрические» резонансы;

- микротепловой «массаж» кожи при облучении прямоугольным рупором.

Однако хотелось бы сделать акцент на ключевой идее (хотя и не лишенной дискуссионности) : основным (универсальным) является механизм поддержания в мембране клеток акустоэлектрических колебаний (колебаний Фрёлиха). Эти колебания возникли в процессе эволюции живой клетки и являются одним из главных механизмов поддержания процессов жизнедеятельности. Клетка с клеткой «разговаривает» на языке колебаний в миллиметровом диапазоне длин волн .

Нарушению процессов жизнедеятельности сопутствует уменьшение амплитуды колебаний. Воздействие на клетку полями в этом диапазоне частот приводит к коррекции, восстановлению собственных колебаний (по механизму синхронизации или регенеративного усиления).

Все другие механизмы являются дополнительными, они «автоматически» сопровождают основной механизм, помогая восстанавливать жизнедеятельность на уровне целого организма .

ГЛАВА 2 . МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом нашего исследования были сперматозоиды 2 0 фертильных мужчин - доноров. Характеристика представленной группы приведена в таблице 2.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Сухова, Инна Витальевна, Москва

1. Адаскевич В. П. Эффективность применения электромагнитного излучения миллиметрового диапазона в комплексном лечении больных атопическим дерматитом // Миллиметровые волны в биологии и медицине. -1994. №3. - С.78-81.

2. Адаскевич В. П. Клиническая эффективность, иммуно-регулирующие и нейрогуморальное действие миллиметровой и микроволновой терапии при атопическом дерматите // Миллиметровые волны в биологии и медицине . 1995. - №6. - С.30-38.

3. Адаскевич В. П. Применение электромагнитных волн миллиметрового диапазона в комплексной терапии больных атопическим дерматитом // Российский симпозиум с международным участием «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2 001.1. С.53-54.

4. Алексеенко A.A., Манкевич Л.Б., Голант М.Б. Применение КВЧ терапии в комбинированном лечении ортопедических больных // Миллиметровые волны в медицине. Сборник статей. Под ред. акад. Н.Д. Девятко-ва и проф. О.В. Бецкого. Т.1. - М. , 1991. С.120-124.

5. Алисов А. П., Алисова О. В., Григорина-Рябова Т.

6. B. и др. Миллиметровые волны в лечении гастродуо-денальных язв // Миллиметровые волны в медицине: Сборник статей. / Под ред. акад. Н. Д. Девяткова и проф. О. В. Бецкого. Т.1. - М., 1991.- С.5-15.

7. Анищенко В. С., Нейман А. Б., Мосс Ф., Шиманский-Гайер Л. Стохастический резонанс как индуцированный шумом эффект увеличения степени порядка // УФН. 1999. - Т.169, №1. - С.7-47.

8. Анохин Л. В., Коновалов О. Е. О распространенности бесплодных браков. // Здравоохр. РФ. 1992. №10. - С.19-21.

9. Анохин Л. В., Коновалов О. Е. Медико-социальные последствия бесплодия. // Здравоохр. РФ. 1994. -№1. - С.21-23.

10. Артифексов С. Б. Андрологические аспекты бесплодного брака. // Акуш. и гинек. 1996. - №2.- С.46-48.

11. Бабичев В. Н. Нейроэндокринология репродуктивной системы. // Пробл. эндокринол. 19 98. - №1.1. C.3-12.

12. Базарнова М. А., Евсеев А. П., Пекус Е. Н. и др. Исследование эякулята. // Лаб. дело. 198 6. - №5.- С.267-270.

13. Базарнова М. А., Евсеев А. П., Пекус Е. Н. и др. Биологические методы исследования спермы. // Лаб. дело. 1986. — №5. - С.270-273.

14. Базарнова М. А., Пекус Е. Н., Борисенко Ю. А. Цитохимические методы исследования спермы. // Лаб. дело. 1987. - №8. - С.604-606.

15. Беляков Е. В. Высокодобротный резонанс в волноводе с сильно поглощающим диэлектриком // Электронная техника Сер.1. «Электроника СВЧ». - 1987. Вып.7(401). - С.51-53.

16. Бенюмович М. С. Определение числа клеток в счетной камере с учетом свойств распределения Пуассона. // Клинич. лаб. диагностика. 1997. - №6. - С.11-11.

17. Бесплодие в супружестве. / Под ред. И. Ф. Юнды. .Киев, 19 90.

18. Бедкий О. В., Путвинский А. В. Биологические эффекты ММ-излучения низкой интенсивности // Известия ВУЗов. Радиоэлектроника. Электронные приборы СВЧ. 1986. - Т.29, №10. - С.4-10.

19. Бецкий О. В. ММВ в биологии и медицине // Радиотехника и электроника. 1993. - Т.38, Вып.10. -С.1760-1782 .

20. Бецкий О. В. Механизм первичной рецепции низкоинтенсивных миллиметровых волн у человека // Мат. междунар. симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 1995. - С.135-137.

21. Бецкий О. В. Вода и электромагнитные волны // Биомедицинская радиоэлектроника. 1998. - №2. - С.З-6.

22. Бецкий О. В., Лебедева Н. Н. Современные представления о механизмах воздействия низкоинтенсивных миллиметровых волн на биологические объекты // Мат. междунар. симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 1999. - С.130-133.

23. Бецкий О. В., Лебедева Н. Н., Котровская Т. И. Стохастический резонанс и проблема воздействия слабых сигналов-на- биологические -объекты //--Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2002. -№3. - С.3-11.

24. Бецкий О. В., Лебедева Н. Н., Котровская Т. И. Необычные свойства воды в слабых электромагнитных полях // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника . 2003. - №1. - С.37-44.

25. Боголюбов В. М., Пономаренко Г. Н. Общая физиотерапия. Москва, 1997. - 480 с.

26. Бриль Г. Е., Апина Щ. Р., Белянина С. И., Панина Н. П. Влияние низкоинтенсивного КВЧ-излучения на генетическую активность политенных хромосом Chi.ronomus plumosus // Физическая медицина. 1993. -Т. 3, №1-2. - С.69-71.

27. Бриль Г. Е., Панина Н. П., Невская Е. Ю. Действие электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на политенные хромосомы Chironomus plumosus / / Миллиметровые волны в биологии и медицине. -2000 . №1. - С.3-7.

28. Виленская Р. П., Севастьянова JI. А., Фалеев А. С. Исследование поглощения ММ-волн в коже экспериментальных животных // Электроника СВЧ. 1971. - №7. - С.97-103.

29. Виленская Р. П., Смолянская А. 3., Адаменко В. Г. Индукция синтеза колицина с помощью миллиметрового излучения // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1972. -№4. - С.52-54 .

30. Гапеев А. Б., Сафронова В. Г., Чемерис Н. К., Фе-сенко Е. Е. Модификация активности перитонеальных нейтрофилов~ при воздействии миллиметровых- волн в ближней и дальней зонах излучателя // Биофизика. -1996. - Т.41, №1. - С.205-219.

31. Гапеев А. Б. Особенности действия модулированного излучения крайне высоких частот на клетки животных: Автореф. дис. . канд. физ. -мат. . наук. Пу-щино: ИБК РАН, 19 97.

32. Тапочка Л. Д., Тапочка М. Г., Королёв А. Ф. и др. Воздействие электромагнитного излучения КВЧ- и СВЧ-диапазона на жидкую воду // Вестник МГУ сер. Физика, Астрономия. 1994. - Т.35, №4. - С.17-22.

33. Тапочка Л. Д., Тапочка М. Г., Королёв А. Ф. и др. Механизмы функционирования водных биосенсоров электромагнитного излучения / / Биомедицинская радиоэлектроника. 2000. - Т.41, №3. - С.48-55.

34. Голант^М. Б., Кузнецов -А. П., Божанова-Т. П. .О. механизме синхронизации культуры дрожжевых клеток КВЧ-излучением // Биофизика. 1994. - Т.39, №3. -С.490-495.

35. Горпинченко И. И., Петрунь Н. М. Ферментный спектр эякулята в норме и при различных формах мужского бесплодия. // Врачебное дело. 1983. - №8.1. С.62-64.

36. Горюнов В. Г., Евсеев Л. П., Корнилов В. Г. Бесплодный мужчина. // Мед. консультация. 1993. - №1. - С.39-40.

37. Горюнов В. Г., Кузьмин Г. Е., Евдокимов В. В. и др. Контроль за функциональной активностью предстательной железы. // Урол. и нефрол. 1994. - №2. - С.31-32.

38. Грубник Б. П., Ситько С. П., Шалимов А. А. Опыт применения технологии «Ситько-МРТ» для реабилитации онкологических больных III-IV стадии // Physics of the Alive. 1998. - V.6, №1. - P. 97102 .

39. Девятков H. Д. Влияние электромагнитного излучения ММ-диапазона длин волн на биологические объекты // УФН. 1973. - Т.10, Вып.З. - С.453-454.

40. Девятков Н. Д., Голант М. Б., Бецкий О. В. Миллиметровые волны и их роль в процессах жизнедеятельности. М., 1991. - 169 с.

41. Девятков Н. Д., Голант М. Б., Бецкий О. В. Особенности медико-биологического применения миллиметровых волн. М., 1994. - 164 с.

42. Джарбусынов А. Б. Мужское бесплодие. Алма-Ата, 1991 .

43. Доготарь В. Б., Ткач С. М., Передерий В. Г., Ку-зенко Ю. Г. Применение ЭМИ ММД для лечения язвенной болезни // Врачебное дело. 1990. - №5. -С.6-9.

44. Евдокимов В. В., Раков С. С., Липатова Н. А. и др. Комплексное лабораторное исследование эякулятов при заболеваниях мужской репродуктивной системы. // Клинич. лаб. диагностика. 19 95. - №6. -С.114-116.

45. Жукова Т. А., Чаяло П. П., Чайка М. В. О механизмах действия микроволновой резонансной терапии при лечении больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки // Клиническая медицина. 1994. - №4 . -С. 12-15.

46. Зайцева С. Ю. , Донецкая С. В. Применение КВЧ-терапии в клинике кожных болезней под контролем иммунограммы // 10 Российский симпозиум с международным участием «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2000. - С.51-52.

47. Запорожан В. Н., Реброва Т. Б., Хаит О. В. и др. Медико-биологические аспекты миллиметрового излучения: Сборник. М. : ИРЭ АН СССР, 1987. - С. 2134 .

48. Ильина С. А., Бакаушина Г. Ф., Гайдук В. И. и др. О возможной роли воды в передаче воздействия излучения ММ-диапазона на биообъекты // Биофизика. -1979. Т.24, Вып.З. - С.513-518.

49. Имшинецкая Л. П., Горпинченко И. И., Романенко А. М., Горбов В. Г. Диагностические критерии аспер-мии. // Врачебное дело. 1990. - №8. - С.61-63.

50. Исраилов С. Р. О факторах риска развития бесплодия у мужчин. // Врачебное дело. 1990. - №6. - С. 7980.

51. Казакова JI. Г., Субботина Т. И., Яшин А. А. и др. Анализ клеточного состава крови у крыс при низкоинтенсивном крайне высокочастотном электромагнитном облучении // Physics of the Alive. 1999. - Vol.7, №1. - P.114-117.

52. Киричук В. Ф.,- Головачева Т. В., Семенова С. В. Динамика показателей гемостаза у больных инфарктом миокарда, получавших КВЧ-терапию // Мат. Междунар. симп. «Миллиметровые волны нетепловой интенсивности в медицине». Москва, 1991. - С.71-74.

53. Киричук В. Ф., Паршина С. С., Головачева Т. В. ЭМИ ММД в лечении стенокардии: отдаленные результаты // Мат. 11 Российского симпозиума с международным участием «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 1997. - С.20-22.

54. Киричук В. Ф., Махова Г. Е. Состояние сосудисто-тромбоцитарного звена системы гемостаза и его коррекция с помощью электромагнитного излучения миллиметрового диапазона // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2000. - №1. - С.8-17.

55. Ковалев А. А., Пресняков С. В., Якунин В. В. Взаимодействие различных КВЧ-волн нетепловой интенсивности в организме человека // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2000. - №3. - С.12-23.

56. Ковалев А. А. Медико-биологические аспекты биофизических эффектов электромагнитных излучений КВЧ иоптического диапазонов // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2 002. - №1. - С.4-19.

57. Ковалев А. А. Параметрические эффекты КВЧ-излучений. Морфофункциональный генез и биофизическое содержание БАТ в норме и патологии // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2003. -№2. - С.3-4 9.

58. Комарова JI. К., Егорова Г. И., Байкина Л. А. Применение миллиметровых волн низкой интенсивности при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки // Вопросы курортологии. -t1993. №5. - С.28-30.

59. Коновалов О. Е. Методические подходы к изучению бесплодных браков. // Здравоохр. РФ. 1985. - №7. - С.18-20.

60. Коренева JI. Г., Гайдук В. И. О принципиальной возможности резонансного воздействия сверхвысокочастотных колебаний на гемоглобин // Доклады АН СССР.-- 1970. --Т.193, №2. С.463-468.----------------

61. Котровская Т. И. Сенсорные реакции человека при действии слабого электромагнитного стимула // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1994. -№3. - С.32-38.

62. Котровская Т. И. Восприятие человеком электромагнитных полей в зависимости от его индивидуальных особенностей: Автореф. дис. . канд. биол. наук. -Москва: ИВНД и НФ РАН, 1996.

63. Кузнецов А. П., Липатова Н. А. Лабораторные критерии фертильности эякулята // Клинич. лаб. диагностика. 1998. - №5. - С.11-15.

64. Кузьменко А. П., Соловьев И. Е., Тофан А. В. Микроволновая резонансная терапия в профилактике и лечении парезов желудочно-кишечного тракта после операций на толстой кишке // Physics of the Alive. 2000. - V.8, №1. - P.104-108.

65. Кузьменко В. M. Изучение пероксидазной активности крови у больных церебральным атеросклерозом в процессе микроволновой резонансной терапии // Physics of the Alive. 2000. - V.8, №1. - P.116-119.

66. Кузьмичев В. E., Чернова Г. В. Общие черты взаимодействия электромагнитных излучений с биологическими системами // Мат. междунар. конф. «БИО-ЭМИ-2000». 2000. - С.111-113.

67. Курило Л. Ф., Дубинская В. П., Остроумова Т. В. и др. Анализ патологии сперматогенеза различной этиологии по эякуляту. // Пробл. репрод. 1995. -№3. - С.33-38.

68. Лебедева Н. Н. Реакции центральной нервной системы человека на электромагнитные поля с различными биотропными параметрами: Автореф. дис. . д-ра биол. наук. Москва: ИВНД и НФ РАН, 1992.

69. Лебедева Н. Н. Сенсорные и субсенсорные реакции здорового человека на периферическое воздействиенизкоинтенсивных ММ-волн // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1993. - №2. - С.5-24.

70. Лебедева Н. Н., Котровская Т. И. Электромагнитная рецепция и индивидуальные особенности человека // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1996.- №7. С.14-20.

71. Лебедева Н. Н., Котровская Т. И. Экспериментально-клинические исследования в области биологических эффектов миллиметровых волн // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2003. - №1. - С.20-43.

72. Липатова Н. А. Лабораторные критерии фертильности эякулята. // Клинич. лаб. диагностика. 1998. №5. - С.11-15.

73. Микроскопическая техника / Под ред. Д. С. Саркисова, Ю. Л. Перова. М., 1996.

74. Неймарк А. И., Фидиркин А. В., Алиев Р. Т. Изменение уровня энзимов спермы при бесплодии. // Урол. и нефрол. 1998. - №2. - С.44-45.

75. Николаев А. А., Аншакова Н. И., Алтухов С. А. Образование интерполимерных комплексов белками семенной плазмы. // Вопр. мед. химии. -- 19 90. №4.- С.98-101.

76. Николаев А. А. Биохимическое и иммунохимическое изучение белков семенной плазмы человека: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. Астрахань, 1994.

77. Николаев В. В., Строев В. А., Астраханцев А. Ф. Биохимические исследования спермоплазмы при мужском бесплодии. // Урол. и нефрол. 19 93. №3. - С.33-36.

78. Овсянникова Т. В., Корнеева И. Е. Бесплодный брак. // Акуш. и гинек. 1998. - №1. - С.32-36.

79. Памфамиров Ю. К., Кичекханов С. Ш., Памфамирова Г. Л. Структура бесплодного брака. // Вопр. охр. матер, и дет. 1991. - №6. - С.32-36.

80. Петров И. Ю. Морозова Э. В, Моисеева Т. В. Стимуляция процессов' жизнедеятельности в растениях микроволновым излучением // Межд. симп. «Миллиметровые волны нетепловой интенсивности .в медицине». Сб. докл. М., 1991. - С.97-98.

81. Петросян В. И., Гуляев Ю. В., Житенева Э. А. и др. Взаимодействие физических и биологических объектов с " электромагнитным излучением КВЧ-диапазона -// Радиотехника и электроника. 1995. - Т.40, Вып.1. -С.127-134.

82. Петросян В. И., Гуляев Ю. В., Житенева Э. А. и др. Физика взаимодействия ММ-волн с биологическими объектами // Мат. 10 Росс. симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». М., 2000. - С. 14 0143 .

83. Плетнев С. Д. Применение электромагнитных волн мм-диапазона в клинической медицине // Мат. 10 Росс, симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2000.-- С.9-10.

84. Пославский М. В. КВЧ-терапия при различных вариантах течения язвенной болезни желудка // Мат. 10 Росс, симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 1995. - С.63-64.

85. Пресман А. С. Электромагнитные поля и живая природа. М.: Наука, 1968. - 28 с.

86. Пшеничникова Т. Я. Бесплодие в браке. М., 1991.

87. Пшеничникова Т. Я., Сухих Г. Т. Бесплодный брак. // Акуш. и гинек. 1994. - №4. - С.57-60.

88. Пуляева Е. Л., Ветохина С. В. КВЧ-терапия при лечении генитального герписа // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1997. - №9-10. - С.55-56.

89. Руденко Т. Л. Физиотерапия. Ростов-на-Дону, 2000. - 352 с.

90. Руководство по андрологии / Под ред. О. JI. Тиктинского. JI., 1990.

91. Севастьянова JI. А., Виленская Р. Л. Исследование влияния радиоволн сверхвысокой частоты миллиметрового диапазона на костный мозг мышей // УФН. -1973. Т.10, Вып.З. - С.456-458.

92. Семенова С. В. Влияние электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на функциональное состояние системы гемостаза у больных инфарктом миокарда. Автореф. дис. . канд. мед. наук. - Саратов,1994 .

93. Сивочалова О. В. Репродуктивное здоровье семьи как проблема медицины труда. // Мед. труда и пром. экология. 1995. - №9. - С.1-4.

94. Синицын Н. И., Петросян В. И., Елкин В. А. и др. Особая роль системы «миллиметровые волны водная среда» в природе // Биомедицинская радиоэлектроника. - 1999. - №1. - С.3-21.

95. Ситько С. П., Мкртчян JI. Н. Введение в квантовую медицину. Киев: Паттерн, 1994. - 145 с.

96. Скопюк М. И., Соловьева А. А. Эффективность и безопасность микроволновой и резонансной терапии в лечении детского церебрального паралича: двойное слепое перекрестное исследование // Physics of the Alive. 1994. - V.2, №1. - P.91-101.

97. Скурихина JI. А. Лечебное применение электромагнитных миллиметровых -волн нетепловой интенсивности -миллиметровая терапия // Вопросы курортологии. -1988. №5. - С.65-72.

98. Славин М. Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях. М., 198 9.

99. Смаглий Н. Ю. Биохимические свойства спермиев человека в норме и при патологии. // Актуальные вопросы физиологии и патологии репродуктивной функции женщины. Харьков, 1989. - С.67-68.

100. Смолянская А. 3., Виленская Р. Л., Голант М. Б. Действие электромагнитного излучения ММ диапазона на функциональную активность некоторых генетических элементов бактериальных клеток // УФН. -1973. Т.10, Вып.З. - С.458-459.

101. Смолянская А. 3., Гельвич Э. А., Голант М. В., Махов А. М. Резонансные явления при действии электромагнитных волн миллиметрового диапазона на биологические объекты // Успехи современной биологии. 1979. - Т.87, №3. - С.381-392.

102. Субботина Т. И., Ткаченко В. Н., Яшин А. А. Влияние высокочастотных электромагнитных излучений на репродуктивную функцию / / Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2002. -Т.1, №4. - С.391-394.

103. Суворов А. П., Петросян В. И., Житенева Э. А. и др. Спектрально-волновая диагностика и резонансно-волновая терапия хронических уретропростатитов // Мат. 10 Росс, симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2000. - С.45-46.

104. Суворов И. М., Сущенцова Т. И., -Посохин В. В. и др. Клинические наблюдения за состоянием здоровья в зонах воздействия электромагнитных полей радиочастотного диапазона / / Медицина труда и промышленная экология. 2001. - №10. - С.43-46.

105. Тамбиев А. X., Кирикова Н. Н., Лапшин О. М. и др. Стимулирующее действие электромагнитного излучения миллиметрового диапазона низкой интенсивности на рост микроводорослей // Вестн. Моск. ун-та. -1990. Сер.16. Биология, № 1. - С.15-19.

106. Тамбиев А. X., Кирикова Н. Н. Перспективы применения электромагнитного излучения миллиметрового диапазона в фотобиотехнологии // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1992. - № 1.1. С.35-39.

107. Черкасов И. С., Недзвецкий- В. ~А. , -Гиленко А. В. Биомедицинские эффекты миллиметровых волн // Офтальмологический журнал. - 1978. - №3. - С.187-190 .

108. Устинкина Т. И., Ткачук В. Н., Потин В. В. Клинико-лабораторная оценка нарушений генеративной функции мужчины при бесплодном браке. / / Вестник АМН СССР. 1987. - №1. - С.77-84.

109. Ухов Ю. И., Астраханцев А. Ф. Морфометрические методы в оценке функционального состояния семенников. // Арх. анат., гистол. и эмбриол. 1983. №3. - С.66-73.

110. Шайдюк О. В., Гордеев И. Г., Лебедева А. Ю. КВЧ-терапия в лечении стенокардии напряжения с эпизодами безболевой ишемии миокарда // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2002. - №1 - С. 2439.

111. Шуб Г. М., Лунева И. О., Денисова С. Г., Островский Н. В. Действие миллиметровых волн на бактерии в экспериментах in vitro и in vivo // Мат. 10 Росс. симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2000. - С.96-97.

112. Щелкунова И. Г. Влияние миллиметровой терапии на гемостаз и реологические свойства крови у больных нестабильной стенокардией. Автореф. дис. . канд. мед. наук. - Саратов, 1996.

113. Цуцаева А. А., Макаренко Б. И., Безносенко Б. И. и др. Эффективность противовирусного действия микроволнового излучения // Мат. 10 Росс, симп. «Миллиметровые волны в медицине и биологии». Москва, 2000. - С.98-99.

114. Элбакидзе И. JI., Ордынский В. Ф., Судакова Е. В. и др. КВЧ-терапия в лечении воспалительных заболеваний, передаваемых половым путем // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 19 99. - №1. - С. 3 941.

115. Юнда И. Ф. Болезни мужских половых органов. -Киев, 1989.

116. Яшин А. А. Модели энергетических процессов в клетках организма при КВЧ облучении, использующие эффект стохастического резонанса / / Вестник новых медицинских технологий. 1999. - №2. - С.18-24.

117. Abey W. R. Frecuency and power window in tissue interaction^ with weak electromagnetic fields // Proc. IEEE. 1980. - Vol.68, №1. - P.119.

118. Adamopoulos D. A., Pappa A., Nicopoulou S. et al. Seminal volume and total sperm number trends in men attending subfertility clinics in the greater Athens area during the period 1977-1993. // Hum. Reprod. 1996. - №9. - P.1936-1941.

119. Chavarria M. E., Reyes A., Rosado A. El factor masculino. II. El espermatozoide. Estructura у funcionamiento. // Ginecol. Obstet. Мех. 1997. -№65. - P.413-421.

120. Chavarria M. E., Reyes A., Acosta A. A., Rosado A. El factor masculino. III. Importancia, diagnostico y perspectivas. // Ginecol. Obstet. Méx. 1997. -№65. - P.422-429.

121. Dadoune J. P. Ultrastructural abnormalities of human spermatozoa. // Hum. Reprod. 1988. - №3. -P.311-318.

122. Edvinsson A., Heyden G., Steen Y., Nilsson S. Enzyme histochemical studies of human spermatozoa correlated with the spermiogram // Int. J. Androl.- 1981. №3. - P.297-303.

123. Fesenko E. E., Geletyuk V. I., Kasachenko V. N., Chemeris N. K. Preliminary microwave irradiation of water solution changes their channel-modifying activity // FEBS Letters. 1995. - Vol.366. -P.49-52.

124. Francavilla S., Bruno B., Poccia G. et al. Fluorescence microscopic -detection of .acrosin in different morphologic types of human spermatozoa // Andrologia. 1998. - №4. - P.344-350.

125. Fröhlich H. Bose condensation of strongly excited longitudinal electric modes // Phys. Lett. 1968.- №2 6A. P.4 02.

126. Garcia-Diez L. C., Esteban-Ruiz P. F., Villar E. et al. Enzyme and hormonal markers in the differential diagnosis of human azoospermia // Arch. Androl. 1992. - №3. - P.181-194.

127. Gorban E. N., Tronko N. D., Pasteur I. P. el al. The influence of electromagnetic ultrahighfrequency radiation on absorption of iodine by -the organic culture of thyroid gland // Physics of the Alive. 1996. - V. 4, №1. - P.133-136.

128. Grundler W., Keilmann F. Sharp resonances in yeast grows prove nonthermal sensitivity to microwaves // Physical Review Lett. 1983. - Vol.51, №13. -P.1214-1216.

129. Guerin J. F., Menezo Y., Czyba J. C. Enzyme comparative study of spermatozoa and seminal plasma in normal and subfertile man // Arch. Androl. 1979. №3. - P.251-257.

130. Harrison S., Hull G., Pillai S. Sperm acrosome status and sperm antibodies in infertility see comments. // J. Urol. 1998. - №5. - P.1554-1558.

131. Khurgin Yu. I., Kudryashova V. A., Zavizion V. A., Betskii 0. V. Millimeter Absorption Spectroscopy of Agues Systems // Relaxation Phenomena in Condensed Matter / Ed. W. Coffey. Toronto, 1994. -P. 483-543.

132. Kim E. D., Lipshultz L. I. Male subfertility: diagnostic and therapeutic advances // Br. J. Urol. 1997. - №4. - P.633-641.

133. Novak's textbook of gynecology / Ed. H. W. Jones III, A. C. Wentz, L. S. Burnett. 11-th ed. -Baltimore, 1988.

134. Vogt P. H. Molecular basis of male (in) fertility // Int. J. Androl. 1997. - Suppl.3. - P.2-10.