Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных

Волосовцова, Галина Ивановна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных"

На правах рукописи

Волосовцова Галина Ивановна

СТИ-

РОЛЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В ФОРМИРОВАНИИ УСТОЙЧИВОСТИ К ОКИСЛИТЕЛЬНОМУ СТРЕССУ У ПОТОМКОВ ПРЕДАДАПТИРОВАННЫХ ЖИВОТНЫХ

03.00.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону 2009

003474272

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте биологи Федерального государственного образовательного учреждения высшег профессионального образования «Южный федеральный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Шкурат Татьяна Павловна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Эмирбеков Эмирбек Зиядович доктор медицинских наук Шестопалов Александр Вячеславович

Ведущая организация: Государственный научный центр - Институт медико-биологических проблем Российской академии наук, г. Москва.

Зашща диссертации состоится «Л »£¿¿£¡£¡$1009 г. в/2йасов на заседании диссертационного совета Д 212208.07 по биологическим наукам в ФГОУ ВПО «Южный федеральный университет» по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Б. Садовая, 105/42, ауд. 203.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Южного федерального университета по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148.

Автореферат разослан « 30 » 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Т. С. Колмакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Свободные радикалы кислорода и его активные метаболиты играют ключевую роль во многих биохимических и генетических процессах, протекающих в клетке (Владимиров и др., 1973; Кричевская и др., 1980; Лукаш и др., 1981; Ames, 1983, Halliwell, 1985; Gutteriadge, 1995; Allen, 2000; Kohen et al., 2002; Singh, 2004, Benz et al., 2008 ). С одной стороны, клетка использует активные метаболиты кислорода для регуляции энергетических систем, с другой - их уровень увеличивается при стрессе различной этиологии, злокачественном росте, атеросклерозе, диабете, бронхиальной астме и др. (Boros et al., 1989; Kasai et al., 1991; Halliwell, 1998; Sahnoun et al., 1998; Лукаш и др., 1999; Шустанова и др., 2001; Yonei et al., 2002; Wu et al.; 2003; Cooke et al., 2003; Reddy, 2008). Свободные радикалы кислорода могут индуцировать деструкцию мембран, снижать активность ферментов и гормонов, вызвать повреждения ДНК, нарушение клеточного цикла и, в конечном итоге, инициировать гибель клетки (Внуков и др., 1983; Chiu et al., 1989, Гуськов и др., 1985; Kang et al., 1999; Jackson et al., 2001; Шустанова и др, 2001; Klein et al., 2003; Djordjevic et al., 2004; Fang et al., 2004; Valco et al, 2005; Милютина и др., 2005). В связи с этим, проблема повышения устойчивости организма к окислительному стрессу является достаточно актуальной.

Ранее было показано, что токсическое действие на организм разнообразных физических, химических и биологических факторов может быть снижено предварительным воздействием малых доз токсического агента. Это явление получило название предварительной адаптации или предадаптации (Ригер и Михаэлис, 1978). Феномен повышения устойчивости организма в результате предадаптации получил название адаптивного ответа (Samson, 1977). Показана неспецифичность феномена адаптивного ответа для различных факторов, условий воздействия (in vivo и in vitro) и объектов (микроорганизмы, растения и животные) (Спитковский, 1992; Joiner et al., 1999; Опритов и др., 1999; Моргун и др., 2002; Васильева, 2004; Busija et al., 2008).

качественно новое соотношение про- и антиоксидантных систем, которое сохраняс, и у взрослых животных. Предадаптированные крысы приобретают повышенну устойчивость к токсическим режимам ГБО (Азарова, 2005).

Целью настоящей работы явилось изучение свободнорадикальных процессов предадаптированных к окислительному стрессу животных и их потомков в условн; нормально функционирующего организма и после развития окислительного стресс индуцируемого ГБО.

Задачи исследования:

1. Определить интенсивность свободнорадикальных процессов в различных ткан; потомства предадаптированных в новорожденный период крыс к окислительно? стрессу.

2. Определить интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по уровп содержания молекулярных продуктов и антиоксидантный статус в различных тканях потомков предадаптированных животных после развития окислительного стресс индуцированного ГБО.

3. Провести сравнительный анализ изменения активности антиоксидантных ферменте и интенсивности перекисного окисления липидов в мозге, печени и легких в ответ I воздействие токсического режима ГБО у потомков, полученных < предадаптированных родителей.

4. Оценить цитогенетические последствия окислительного стресса, индуцируемого ГБО (0,5 МПа-1ч) в пролиферирующих тканях предадаптированных животных и их потомков.

Научная новизна. Впервые показано, что однократное воздействие повышенно! давления кислорода (0,2 МПа-1ч) на новорожденных крыс изменяет внутриклеточны метаболизм, в частности систем, ответственных за перекисное окисление липидов, формирует качественно новое соотношение про- и антиоксидантных систем организме, которое сохраняется длительное время и наблюдается у потомков первот поколения. Показана возможность передачи устойчивости к окислительному стресс от животных, однократно обработанных в новорожденный период низким режимом ГБО. Показано, что ответ на действие токсического режима ГБО у потомкоп предадаптированных животных зависит от пола предадаптированного родителя. Экспериментально показано снижение стресс-индуцированного ГБО накопления продуктов перекисного окисления липидов во всех исследованных тканях у потомков предадаптированных самок. Представлены доказательства повышенной устойчивости

генома к окислительному стрессу у потомков самок, предадаптированных в новорожденный период.

Основные положения, выносимые на защиту:

1) Однократная обработка животных низкой дозой ГБО 0,2МПа в течение 1 часа в новорожденном возрасте изменяет внутриклеточный метаболизм тканей, в частности, систем, ответственных за перекисное окисление липидов.

2) Сформировавшееся качественно новое соотношение про- и антиоксидантных систем в организме предадаптированных животных сохраняется у потомков первого поколения.

3) Первое поколение предадаптированных к окислительному стрессу животных обладает повышенной емкостью антиоксидантных систем, которые обеспечивают устойчивость к токсическому режиму ГБО у потомков предадаптированных самок.

4) Однократная обработка животных низкой дозой ГБО в новорожденный период приводит к стабилизации кластогенного эффекта в ответ на действие токсических режимов ГБО. Эффект кластогенной предадаптации сохраняется у потомков первого поколения предадаптированных самок и не выявлен у потомства предадаптированных самцов.

Теоретическое и практическое значение работы: В общетеоретическом плане, выполненная работа расширяет существующие представления о возможностях предадаптации млекопитающих к окислительному стрессу в ряду поколений. Результаты исследования, представленные в работе, позволяют количественно и качественно оценить влияние предадаптации новорожденных животных на устойчивость к повреждающему воздействию на ткани организма ГБО -индуцированного стресса у потомков предадаптированных животных. Выявлена возможность предадаптировать однократной обработкой ГБО в новорожденный период организм взрослых животных и их потомков к окислительному стрессу. Установлен эффект наследования устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных самок. Полученные в работе данные представляют существенный интерес для раскрытия механизмов приспособления организма к постоянно меняющимся условиям окружающей среды, а также для разработки различных методов повышения резистентности организма к экстремальным условиям среды. Полученные результаты расширяют представления о свободнорадикальных и мутационных процессах в организме при окислительном стрессе, открывают новые перспективы их практического применения в адаптационной, космической и

подводной медицине. Полученные в работе новые экспериментальные данн. используются при чтении лекций в спецкурсах «Свободные радикалы в живь системах», «Мутагены окружающей среды», «Химический мутагенез «Экологическая генетика», «Основы патобиохимии», «Генетика окислительно! стресса».

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на научных сессиях биолого-почвенного факультета РГУ (2003, 2005, 2006); на международной конференции «Гипербарическая медицина» (Москва, 2003); на Всероссийском съезде ВОГиС (Москва, 2004); на заседании Ростовского отделения общества ВОГиС (2005, 2006); International Workshops and Scientific Discussion Club «New Thechnology in Integrative Medicine and Biology» (Bangkok-Pattaya, 2006); на XIV международной конференции «New Information Technologies in medicine, biology, pharmacology and ecology» (Гурзуф, 2006); на международной научно-практической конференции «Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)» (Ростов-на-Дону, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК РФ - 2 статьи. Личный вклад 62,5 %,- 1,41 п.л. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 159 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов методов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, спиет использованной литературы, включающего 189 отечественных и 204 зарубежны источника. Работа содержит 17 таблиц, иллюстрирована 28 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на белых беспородных крысах Rattus norvegicus обоего пола массой 200-250 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Окислительный стресс моделировали воздействием на животных разными режимами гипербарической оксигенации.

Для предадаптации (ПА) животных к окислительному стрессу на 3-й день после рождения 1/3 часть новорожденных животных была однократно подвержена гипербарической оксигенации в режиме 0,2 МПа в течение 1 часа, поскольку в предыдущих исследованиях, выполненных на базе НИИ биологии РГУ, был показан предадаптирующий эффект именно этого режима (Брень, 1997; Тимофеева, 1997;

Гуськов и др., 1999). После достижения половозрелости предадаптированных животных (3 месяца) были проведены следующие скрещивания:

интактная самка х интактный самец ($К х с?К) интактная самка х 0,2 МПа-1ч самец ($К х с?ПА) 0,2 МПа-1ч самка х интактный самец ($ПАх ¿К) 0,2 МПа-1ч самка х 0,2 МПа-1ч самец ($ПА х оПЛ). Половозрелое потомство первого поколения, полученное в результате данных скрещиваний, было подвергнуто обработке ГБО в режиме 0,5МПа в течение 1 часа. Изучение воздействия такого режима представляет особый интерес, поскольку не вызывает гибели животных, что позволяет изучать в динамике изменение основных показателей адаптации крыс к окислительному стрессу.

Новорожденные

Интактные (К)

0,2МПа-1ч (ПА)

После достижения половозрелости (Змесяца)

Р] $Кхб,К $Кхс?ПА ?ПАхс?К ^ПАхб'ПА

1 группа (п=36) 2 группа (п=48) 3 группа (п=52) 4 группа (п=49)

через 3 месяца - воздействие ГБО 0,5МПа-1ч

в каждом варианте скрещивания ^_ _>

(контроль) до ГБО | 24ч после окончания ГБО

сразу после окончания воздействия ГБО

Рис. 1. Схема эксперимента.

В каждом варианте потомков исследовали животных, обработанных ГБО (0,5МПа-1ч) сразу и через 24 часа после окончания воздействия. Исследования проводились согласно общепринятым нормам биоэтики и в соответствии со статьей 11-й Хельсинской декларации Второй медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003г).

В соответствии с задачами исследования были изучены биохимические, биофизические показатели плазмы крови, эритроцитов, ткани мозга, печени, легких и генетические показатели эпителиоцитов роговицы глаз. Интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по содержанию молекулярных продуктов -диеновых конъюгатов (ДК) (Стальная, 1977), малонового диальдегида (МДА), шиффовых оснований (ШО) (Bidlack, Tappel, 1973). Активность СОД определяли методом Fried (1975), каталазы - методом Королюка и др., (1988). Определение оксидазной активности церулоплазмина (ЦП) проводили методом Ревина в модификации Колба, Камышникова (1982), суммарной пероксидазной активности по методу Лукаша и др., (1996). Содержание белка в гомогенатах тканей, в плазме и в суспензии эритроцитов определяли методом Лоури (1951). Количество гемоглобина определяли гемоглобинцианидным методом (Каракашов, Вичев, 1973). Определение активности антиоксидантных ферментов проводили в лизате эритроцитов и супернатанте гомогенатов тканей и пересчитывали с учетом содержания в биологическом материале белка или гемоглобина. Определение интенсивности хемилюминесценции (ХЛ) плазмы крови в системе Н2О2 - люминол проводили по методу Шестакова и др. (1979). Регистрировали высоту быстрой вспышки (h) и светосумму (Sm) хемилюминесценции в течение 100 секунд.

Для цитогенетических исследований готовили временные давленные препараты роговицы глаз по стандартной методике (Дарлингтон, 1980). Учет аберраций хромосом проводили анафазно-телофазным методом. Пролиферативную активность клеток учитывали с помощью митотического индекса (МИ). В каждом варианте анализировали не менее 1500 анафаз.

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы Statistica v. 6.0. Достоверность полученных различий оценивали по t -критерию Стьюдента (Владимирский, 1983).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Интенсивность свободно-радикальных процессов и активность аптиоксидантных ферментов у предадаптированных животных и их потомков

Результаты проведенных исследований позволили установить, что обработка новорожденных крыс повышенным давлением кислорода 0,2 МПа -1ч приводит к длительным метаболическим изменениям, которые сохраняются у взрослых животных и их потомков первого поколения. У взрослых животных, подвергавшихся воздействию низкого режима ГБО в трехдневном возрасте, отмечалось повышение интенсивности свободнорадикальных процессов, проявляемое в возрастании параметров Н202-люминол хемилюминесценции в плазме крови. Высота быстрой вспышки, характеризующая разложение предшествующих гидродиоксидов липидов стала больше на 21%, а величина светосуммы - 38% больше, по сравнению с интактными животными (рис.2).

Исследуемые нами параметры хемилюминесценции плазмы крови крыс, полученных в результате реципрокных скрещиваний предадаптированных особей, различались. Так, у потомков предадаптированных самок и интактных самцов интенсивность высоты быстрой вспышки и светосуммы достоверно выше, чем у потомков контрольной группы родителей, на 115% и 49%, соответственно. Менее выраженная интенсивность свободнорадикальных процессов, регистрируемая ХЛ, отмечалась у потомков предадаптированных самцов - высота быстрой вспышки превышала контроль на 49%. У потомков обоих предадаптированных животных величина светосуммы, отражающая степень окисляемости тканевых липидов стала в 2 раза ниже, чем у потомков предадаптированных самок (ЗПАхбК), но выше чем у контрольной группы на 30% (рис.2).

Рис.2. Интенсивность Н202-люминол хемилюминесценции в плазме крови у предадаптированных животных и их потомков

Примечание: на рис.2-4. *- обозначает статистически достоверные различия, по сравнению с К, **-$Кхс?К.

Следовательно, повышенный уровень свободнорадикальных процессов у предадаптированных к окислительному стрессу животных передается по наследству первому поколению потомков. Уровень индукции Н202-люминол хемилюминесценции плазмы крови животных зависит от варианта реципрокных скрещиваний. Наиболее повышена интенсивность ХЛ в плазме крови потомков предадаптированных самок.

Изучение процессов ПОЛ показало, что предадаптация к ГБО приводит к повышению содержания в эритроцитах продуктов ПОЛ у животных и их потомков, по сравнению с контролем. В потомстве предадаптированных самок (?ПАхс?К) уровень первичных (ДК) и вторичных продуктов ПОЛ выше контрольных значений на 33% и 36% (р<0,05), соответственно. У потомков предадаптированных самцов ($Кхг5'ПА) содержание ДК и ШО было выше контроля на 22% и 26% (р<0,05), а у потомков обоих предадаптированных животных уровень ДК на 114% и МДА на 33% превышал значение таковых у потомков $Кхс?К.

Рис.3. Уровень продуктов ПОЛ у предадаптированных животных и их потомков отношению к контролю: А) -эритроциты крови; Б) - мозг; В) - печень; Г) - легкие. Примечание: обозначения на рис.2.

В головном мозге потомков предадаптированных крыс, как и у самих предадаптированных животных, отмечался повышенный уровень содержания продуктов ПОЛ относительно контроля. У животных, полученных от скрещивания

предадаптированных самок увеличение содержания первичных продуктов ПОЛ - ДК составляет 184%. В обратном скрещивании, у потомков предадаптированных самцов ($Кхс?ПА) отмечалось превышение абсолютных значений конечного продукта - ШО на 205%, у потомков обоих предадаптированных животных содержание ДК и ШО выше контроля на 141% и 140%, соответственно.

В печени у потомков предадаптированных животных также регистрировалось повышенное содержание продуктов ПОЛ, по отношению к интактным животным, но в значительно меньшей степени, чем у родителей. У потомков, полученных от скрещивания предадаптированных самок и интактных самцов, уровень МДА был выше контроля на 48%. У потомков предадаптированных самцов и интактных самок отмечено уменьшение содержания ДК на 28% (р<0,05), тогда как уровень МДА стал выше контроля на 37%. У потомков обоих предадаптированных животных в ткани печени было увеличение содержания первичного продукта ПОЛ - ДК на 34% (р<0,05).

В легочной ткани у потомков предадаптированных самок ($ПАхс?К) было отмечено увеличение содержания изучаемых продуктов ПОЛ: уровень ДК превышал контроль на 73% и МДА - 29% (р<0,05) (рис. 3), тогда как у потомков предадаптированных самцов содержание продуктов ПОЛ в легочной ткани достоверно не отличалось от контроля. У животных, полученных от скрещивания предадаптированных самок и самцов ($ПАхс?ПА) зарегистрировано увеличение уровня МДА на 50%, по отношению к контролю.

Таким образом, результаты наших исследований показали, что у предадаптированных к окислительному стрессу животных и их потомков, интенсивность процессов ПОЛ в соматических тканях выше, чем у контрольных животных. Степень накопления продуктов ПОЛ в тканях различна, в зависимости от варианта проведенных скрещиваний.

Токсическое действие свободных радикалов на жизнедеятельность клетки привело к повышению емкости антиоксидантной защиты (Лю, 2002, 2004). Ферментные АО являются первым функционально сопряженным звеном защиты от активных кислородных соединений, в связи с этим следующий раздел работы посвящен рассмотрению влияния предадаптации на активность АО ферментов в крови животных и их потомков.

I Еа сод

Рис.4. Активность СОД в эритроцитах у предадаптированных животных и их потомков

Примечание: обозначения на рис.2.

Предадаптированные крысы отличались повышенной активностью антиоксидантных ферментов в эритроцитах. Активность СОД в эритроцитах была более чем в 3 раза выше, по сравнению с интактными животными. У потомков, полученных от скрещивания предадаптированных самок ($ПА х ¿'К и 2ПА х о ПА), повышение активности СОД составило 115% и 104% , соответственно. У потомков предадаптированных самцов ($КхбПА) активность СОД в эритроцитах повышена на 39% (р<0,05).

В отличие от повышенной интенсивности ПОЛ активность антиоксидантных ферментов в соматических тканях потомков предадаптированных животных значительно ниже контроля. Следует отметить, что у потомков предадаптированных самок активность СОД в головном мозге не имела достоверных отличий, по сравнению с потомками контрольных животных, тогда как у потомков предадаптированных самцов в мозге, печени и легких регистрировали угнетение ее активности. Более того, у потомков предадаптированных самцов в печени и легких зарегистрировано угнетение активности как СОД, так и каталазы.

Таким образом, нами установлено, что потомки предадаптированных к ГБО животных наследуют «изменный окислительный метаболизм», сформировавшийся в организме родителей после однократного воздействия повышенного давления кислорода. Новое соотношение про- и антиоксидантных систем, по-видимому, находилось в равновесии. В пользу этого свидетельствует тот факт, что потомки предадаптированных животных были подвижны, носовых кровотечений и диареи не отмечалось, шерсть была густой, белой, блестящей, крысы не теряли в весе. При вскрытии также не было обнаружено какой-либо патологии внутренних органов. В связи с этим представляло интерес изучить, каким образом предадаптация родителей

влияет на устойчивость к ГБО - воздействию их потомков при различных вариантах скрещивания. Поскольку метаболический след предадаптации к окислительному стрессу у потомства имеет разнонаправленный характер, в зависимости от пола предадаптированного родителя, в каждой группе потомков контролем служили животные, не подвергавшиеся воздействию ГБО.

Влияние ГБО па интенсивность свободно-радикальных процессов в различных тканях потомков предадаптированпых животных

В эксперименте сеанс ГБО вызывал развитие окислительного стресса, который проявлялся в возрастании параметров Н202-люминол ХЛ у потомков контрольных животных (9Кхб К), тогда как у потомков предадаптированных самок наблюдалось четкое снижение интенсивности хемилюминесценции, которое можно

Рис. 5. Влияние ГБО 0,5МПа-1ч на интенсивность Н202 - люминол хемилюминесценции у потомков предадаптированных животных: А) сразу после окончания действия ГБО; Б) через 24 час после действия ГБО

Примечание: на рис. 5-10 обозначены статистически достоверные различия, по сравнению с контролем * при уровне различий 0,05; ** - 0,01; *** - 0,001.

рассматривать как показатель устойчивости к ГБО воздействию. У потомков предадаптированных самцов ГБО-индуцированный окислительный стресс вызвал повышение показателей Нг02-люминол ХЛ (как сразу после окончания действия стрессирующего агента, так и в последействии), что можно рассматривать как снижение резистентности к воздействию ГБО (рис.5).

Полученные данные были подтверждены результатами исследования активности антиоксидантных ферментов и содержания продуктов ПОЛ в крови. Так, у потомков предадаптированных самок действие ГБО стимулировало активность СОД и каталазы сразу после окончания действия ГБО на 21% и 41%, соответственно. Очевидно, усиление антиоксидантной защиты было достаточным, чтобы ингибировать ПОЛ на стадии зарождения процесса, на что указывает отсутствие

изменений в содержании ДК и МДА в крови животных. Снижение уровня ШО сразу после воздействия ГБО может служить тому подтверждением.

а ю

□ ГБО В ГБО+24

СОД Каталаза ДК ВДА ШО

-Ш ГБО ^ ■ ГБО+24

СОД Каталаза

Рис.6. Изменения активности АО ферментов и уровня продуктов ПОЛ в крови у потомков при ГБО-индуцированном стрессе: А)$ПАхс?К; Б) $Кхс?ПА Примечание: обозначения на рис.5.

В обратном варианте скрещивания, действие ГБО угнетает антиоксидантную защиту и способствует накоплению продуктов ПОЛ в крови крыс (как сразу после действия, так и через 24 часа).

Следующим этапом нашего исследования явилось изучение СПА в плазме крови как одного из показателей дестабилизации мембран эритроцитов при действии токсического режима ГБО. У потомков предадаптированных самок (9ПАх?К) отсутствие изменений СПА можно расценивать как показатель резистентности мембран к повреждающему действию ГБО. У потомков предадаптированных самцов следствием усиления ПОЛ в крови, обнаруженном нами при окислительном стрессе, явилась дестабилизация эритроцитарных мембран, зарегистрированная в значительном повышении уровня СПА как в условиях ГБО, так и в постгипероксический период.

Рис.7. Динамика (А) СПА (усл.ед./мл) и (Б) ЦП в плазме крови потомков предадаптированных животных после ГБО - 0,5 МПа-1час Примечание: обозначения на рис.2.

Действие ГБО в режиме 0,5МПа-1ч приводит к резкому повышению оксидазной активности ЦП в плазме крови потомков предадаптированных самцов,

составляющей 68% (рис.7), по сравнению с контрольным значением (до ГБО воздействия).

Интенсивность свободнорадикальных процессов, состояние антиоксидантной системы, в первую очередь, зависят от характера метаболических процессов в различных тканях. Большое значение имеют не только абсолютные величины активности про- и антиоксидантных систем, но и их соотношение между собой, буферная емкость антиоксидантной защиты.

Как видно из представленных данных, воздействие токсического режима ГБО у потомков предадаптированных самок снизило уровень первичных и конечных продуктов ПОЛ в мозге (рис.8). Уровень содержания МДА, ДК и ШО не изменился

Рис.8. Изменения активности СОД и уровня продуктов ПОЛ в мозге у потомков: А) ?ПАхс?К, Б) $Кхс?ПА после ГБО (0,5МПа-1ч) Примечание: обозначения на рис.2.

и остался таким через 24 часа после окончания действия стрессирующего агента. Активность СОД увеличилась на 44%, что, возможно, оказалось достаточным для снижения уровня продуктов ПОЛ - ДК и ШО.

У потомков, полученных в результате скрещивания предадаптированных самцов и интактных самок (9Кхс?ПА), пребывание в условиях токсического режима ГБО (0,5 МПа-1ч) вызвало ингибирование активности СОД в мозге на 68%. В постгипероксический период отмечалось значительное накопление изучаемых молекулярных продуктов ПОЛ и активность СОД (рис.8). Избыточная выработка перекиси водорода в результате реакции дисмутации ведет к увеличению образования гидроксильных радикалов, взаимодействие которых с ненасыщенными жирнокислотными цепями в молекулах липидов относится к первому типу реакций и может рассматриваться как одна из основных реакций инициирования перекисного окисления липидов в биологических мембранах. Следовательно, можно предположить, что через 24 часа после окончания воздействия ГБО (0,5МПа-1ч) в

мозге у потомков предадаптированных самцов происходит инициация свободнорадикальных процессов.

Следующим этапом нашей работы было исследование влияния действия ГБО (0,5МПа-1ч) на интенсивность свободнорадикальных процессов в печени потомков предадаптированных к окислительному стрессу животных. Печень участвует в регуляции практически всех видов обмена веществ и обеспечивает необходимые условия жизнедеятельности для других органов и тканей. Стрессорное действие ГБО характеризуется развитием ПОЛ, занимающего ключевое место в повреждении гепатоцитов.

Рис. 9. Изменения активности СОД, каталазы и уровня продуктов ПОЛ в печени у потомков группе животных: А) $ПАхс?К, Б) $Кхс5ПА после ГБО (0,5МПа-1ч)

Примечание: обозначения на рис.2.

Сразу после окончания действия повышенного давления кислорода у животных, полученных в результате скрещивания предадаптированных самок и интактных самцов, в печени снизилось содержание молекулярных продуктов ПОЛ: МДА - 40%, ШО - 22% при увеличении активности каталазы на 12% (р<0,05) и осталось без изменений через 24 часа (рис.9).

В условиях токсического режима ГБО у потомков предадаптированных самцов ингибировалась активность антиоксидантной защиты. Сразу после окончания воздействия ГБО (0,5 МПа-1ч) активность каталазы в ткани печени уменьшилась на 45% в сравнении с контролем, что сопровождалось накоплением молекулярных продуктов ПОЛ в постгипероксическом периоде. Уровень МДА, ШО превосходили контроль на 167% и 115%. При этом активность ферментов антиоксидантной защиты (СОД и каталазы) также значительно возрастала (рис. 9).

При контакте с гипероксической средой напряжение кислорода последовательно возрастает в легочной ткани, затем в крови и далее в других органах и тканях. Ткань легких в силу своей специфической функции газообмена и в связи с

общепринятым способом оксигенациии подвергается действию относительно более высокого парциального давления кислорода.

Воздействие токсического режима ГБО у потомков предадаптированных самок и интактных самцов (уПАхбК) приводило к снижению уровня ПОЛ в легких, о чем свидетельствует снижение содержания ДК, ШО и активности СОД (рис.10). Через сутки после воздействия ГБО активности СОД стала еще ниже (на 70%), по сравнению с контролем, а активность каталазы повысилась. Восстановление функционального равновесия процессов пероксидации и антиоксидантной защиты проявилось снижением уровня продуктов перекисного окисления липидов (рис.10).

Рис. 10. Изменения активности СОД и уровня продуктов ПОЛ в легких у потомков группе животных: А) $ПА х ¿К, Б) $Кх б'ПА после ГБО (0,5МПа-1ч) Примечание: обозначения на рис.2.

У потомков предадаптированных самцов ($Кх<^ПА) сразу после окончания воздействия ГБО (0,5 МПа-1ч) в ткани легких достоверных изменений изучаемых показателей не наблюдалось. Однако через 24 часа отмечали резкое смещение равновесия про- и антиоксидантной активности в сторону усиления процесса перекисного окисления липидов, о чем свидетельствует значительное накопление молекулярных продуктов ПОЛ на фоне чрезмерного напряжения антиоксидантной системы защиты клетки - повышение активности антиоксидантных ферментов. Уровень ДК, МДА и ШО превышал контрольные значения на 154%, 437% и 210%, соответственно, а активность СОД и каталазы - на 217% и 120%, соответственно.

Таким образом, ответ на действие токсического режима ГБО у потомков предадаптированных животных зависит от пола предадаптированного родителя. Полученные результаты свидетельствуют, что мозг, кровь и периферические ткани потомков предадаптированных самок более устойчивы к развитию окислительного стресса, индуцированного ГБО, по сравнению с потомками предадаптированных самцов.

Аберрации хромосом и пролиферативная активность эпителиоцитовроговицы глаз у потомков предадаптировапных животных

Степень кластогенного действия какого-либо фактора может отражать направленность и выраженность протекающих в организме процессов свободнорадикального окисления, поскольку основной причиной нарушения целостности ДНК при различных стрессорных воздействиях является прямое и опосредованное действие активных метаболитов кислорода. Снижение уровня аберраций хромосом после воздействия токсической дозы агента у любых организмов составляет суть кластогенной адаптации и неотьемлимую часть реакции адаптивного ответа (Ид§ег е1 а1., 1990). Во всех вариантах эксперимента у животных, полученных от реципрокных скрещиваний, уровень аберраций хромосом находился в пределах спонтанного (1,7-2,6%). После действия токсического режима ГБО (0,5МПа-1ч) уровень аберраций хромосом в эпителиоцитах роговицы глаз вырос в 3 раза и через сутки оставался на высоком уровне (табл.1, 2).

Таблица 1.

Уровень аберраций хромосом в эпителиоцитах роговицы глаза у потомков предадаптированных животных

ВАРИАНТ До ГБО ГБО Через 24ч после ГБО

Р, 9Кхс?к 1,7 ±0,16 6,7 ±0,31* 5,4 ± 0,29*

$ПАхс?К 2,5 ± 0,27 2,3 ± 0,27 2,4 ± 0,34

$Кхс?ПА 2,6 ± 0,47 1,9 ±0,17 4,3 ± 0,27*

Примечание: достоверность * при Р<0,05

У животных первого поколения, полученных в результате различных вариантов

скрещиваний адаптированных и неадаптированных к окислительному стрессу

родителей, ответ на действие повышенного давления кислорода различен. Так у

потомков предадаптированных самок ($ПАхс?К) при воздействии токсического

режима ГБО уровень аберраций хромосом остается неизменным. Пролиферирующая

активность клеток не нарушена. Одинаковый уровень хромосом (как до воздействия,

так и после) можно рассматривать как свидетельство кластогенной адаптации к

повреждающему агенту.

Таблица 2.

Уровень пролиферативной активности эпителиоцитов роговицы глаза у потомков

ВАРИАНТ До ГБО ГБО Через 24ч после ГБО

?Кхс?К 1,6±0,14 1,6±0,13 1,6±0,11

$ПА х с?К 2,5±0,24 2,1±0,18 0,7±0,11

$Кх(ЗПА 1,6±0,15 0,8±0,09* 1,0±0,09

Примечание: достоверность * при Р<0,05

Совершенно иную реакцию на окислительный стресс, индуцируемый действием ГБО в режиме 0,5МПА-1час, зарегистрировали при обратном скрещивании. В результате действия повышенного давления кислорода у потомков предадаптированых самцов и интактных самок практически в 2 раза вырос уровень аберраций хромосом, при этом пролиферативность эпителиальных клеток роговицы глаза животных снизилась. Следовательно, у потомков предадаптированных самцов отмечались отрицательные последствия действия окислительного стресса на геном.

Динамика некоторых биохимических показателей может дать существенную информацию о процессах, определяющих возможности адаптации животных к экстремальным воздействиям ГБО. Показатели стрессорного состояния организма и цитогенетический анализ процента аберраций хромосом в эпителиоцитах глаз позволяют комплексно оценивать реактивность организма к повреждающему агенту. Анализируя данные реципроктных скрещиваний (предадаптированная самка и интактный самец, интактная самка и предадаптированный самец), можно говорить о материнском эффекте в наследовании адаптивной реакции практически по всем исследуемым показателям.

Согласно концепции протекторного катаболизма (Гуськов и др., 1989), механизм, обеспечивающий адаптацию на молекулярном уровне, заключается в следующем. При действии стрессорных факторов на организм наименее стабильные продукты биополимеров клетки подвергаются деструкции, продукты которой увеличивают резистентность организма, т.е., обеспечивают адаптацию. При длительном и многократном воздействии экстремального фактора возможности цитоплазматического протекторного катаболизма исчерпываются и необратимому повреждению подвергаются ядерные структуры части соматических клеток. ЕрЬп^ (1959) описал «эпигенетическую изменчивость» у многоклеточных организмов и показал, что константное вегетативное наследование приобретенных признаков связано не с изменением генотипа, а с изменением детерминант цитоплазмы. Ранее была показана роль митохондрий в повышенной устойчивости к окислительному стрессу у новорожденных животных, по сравнению с более взрослыми животными. Так при изучении активности митохондриальной аконитазы и 8-ОНсЮ как индикаторов уровня митохондриального супероксида и окислительных повреждений ДНК, соответственно, было выявлено, что при окислительном стрессе у взрослых животных активность фермента и содержание 8-ОН<Ю увеличивались, в отличие от незрелых крыс. При этом активность МпБОБ и Си2п80Б не изменялась ни у

взрослых, ни у незрелых животных. Эти результаты позволили предположить, что митохондриальный окислительный стресс может быть ключевым фактором, который обеспечивает устойчивость развивающегося организма к АФК индуцированному повреждению (Patel et al., 2003).

Известно, что в митохондриях находится примерно 90% клеточного кислорода, из них 2% конвертируется в супероксидные радикалы. В условиях гипероксин нарушение функционирования электрон транспортной цепи митохондрий может приводить к повышению уровня свободных радикалов. Металлосодержащие белки дыхательной цепи митохондрий - один из основных источников эндогенных активных форм кислорода в клетке (Melovs et al., 1998). Частота спонтанных митохондриальных мутаций в 5-10 раз выше, по сравнению с ядерными (Brown et al., 1982), и при этом в условиях окислительного стресса наиболее часто регистрируются трансверсии. Более того, показана способность повреждений в митохондриальной ДНК персистировать, т. е., сохраняться в ряду клеточных поколений, в то время как повреждения ядерного генома эффективно репарируются. Вероятность возникновения новых изоформ белковых молекул после действия ГБО достаточно велика. Особое значение при этом будут иметь те белки, которые участвуют в контроле уровня АФК.

Возможно, в наших экспериментах материнский эффект устойчивости к окислительному стрессу может быть обусловлен появлением новых изоформ митохондриальных цитохромоксидаз.

На основании результатов проведенных исследований и данных литературы по исследуемой проблеме, мы предполагаем следующие возможные механизмы наследуемой адаптации новорожденных животных к окислительному стрессу: геномный импринтинг материнских хромосом как следствие метилирования ДНК после окислительного стресса; изменения экпрессии генов адаптивных признаков; неспецифическая активация генов, контролирующих интенсивность свободнорадикальных процессов в ядрах ооцитов; формирование новых изоформ митохондриальных цитохромоксидаз; селекция митохондрий в гетероплазматичсских клетках овариальных животных.

Выводы:

1. Однократное воздействие гипербарической оксигенации в режиме 0,2 МПа-1ч на новорожденных крыс вызывает изменения в окислительном метаболизме взрослых животных, характеризующиеся качественно новым соотношением про- и антиокисдантных систем организма. Эти изменения наследуются потомками первого поколения.

2. Уровень повышенной индукции Н202-люминол хемилюминесценции плазмы и молекулярных продуктов ПОЛ в крови животных первого поколения зависит от пола предадаптированного родителя. Наиболее существенно повышен уровень ХЛ в плазме крови потомков предадаптированных самок и интактных самцов.

3. Характер скрещивания влияет на систему антиоксидантной защиты крови, что проявляется в более высокой активности СОД у потомков предадаптированных самок, по сравнению с потомками предадаптированных самцов.

4. Воздействие ГБО 0,5 МПа-1ч снижает уровень молекулярных продуктов ПОЛ в мозге и печени у потомков предадаптированных самок (Р, ЗПЛхбК) и увеличивает - у потомков предадаптированных самцов (Б, ?Кхс?ПА).

5. Во всех вариантах эксперимента у потомков, полученных от реципрокных скрещиваний предадаптированных животных, уровень аберраций хромосом в соматических тканях находится в пределах адаптивной нормы. Воздействие токсического режима ГБО (0,5МПа-1) не изменяет уровня аберраций хромосом в эпителиоцитах роговицы глаза у потомков предадаптированных самок и увеличивает у потомков предадаптированных самцов.

Список работ, опубликованных работ по теме диссертации в издании, рекомендованных ВАК РФ:

1. Шкурат Т.П., Волосовцова Г.И., Прокофьев В.Н. Влияние предварительной обработки животных окислительным стрессом на состояние антиоксидантных систем у потомков первого поколения.//Валеология. 2009. - №1. - С. 76-82. - 0,29 п.л.,- личный вклад 90%.

2. Гуськов Е.П., Машкина Е.В., Беличенко Н.И., Вардуни Т.В., Волосовцова Г.И., Гуськов Г.Е., Шкурат Т.П. Мутационные процессы у животных, предадаптированных к окислительному стрессу. //Экологическая генетика. 2009. -Т.УП.-№1. -С. 40-47. - п.л., - 0,36 личный вклад 45%.

Список работ, опубликованных работ по теме диссертации

1. Guskov Е.Р., Shkurat Т.Р., Milutina N.P., Mashkina E.V., Prokofiev V.N., Pokudina I.O., Timofeeva I.V., Belichenko N.I., Volosovceva G.I. Resistance to oxidative stress maternal effect //VIII International meeting on high pressure biologi.-Moscow, 2-6 june, 2003., P. 24-25,- 0,08 п.л.,- личный вклад 45%.

2. Гуськов Е.П., Шкурат Т.П., Милютина Н.П., Прокофьев В.Н., Машкина Е.В., Беличенко Н.И., Волосовцова Г.И., Азарова А.Э. Устойчивость к окислительному стрессу: материнский эффект.//Ш Съезда ВОГиС «Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития». М., 6-12 июня 2004 г., С. 429,0,04 п.л.,- личный вклад 35%.

3. Волосовцова Г.И., Азарова А.Э., Машкина Е.В., Беличенко Н.И., Гутникова Л. В., Шкурат Т.П., Гуськов Е.П. Цитогенетическая адаптация к окислительному стрессу.//Ш Съезд ВОГиС "Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития». М., 6-12 июня 2004., С. 449. - 0,04 п.л., - личный вклад 80%.

4. Азарова А.Э., Машкина Е.В., Беличенко Н.И., Волосовцова Г.И., Шкурат Т.П., Гуськов Е.П. Кластогенная адаптация к ГБО - индуцированному стрессу//. В сб. «Актуальные проблемы биологии и медицины», Томск, 2004 - С.16-19.-0Д7 п.л.,-личный вклад 35%.

5. Азарова А. Э., Волосовцова Г.И., Прокофьев В.Н., Милютина Н.П., Шкурат Т.П.. Свободнорадикальные процессы в тканях животных, предадаптированных к окислительному стрессу.//"Известия Высших учебных заведений СевероКавказский регион", Естественные науки, приложение №3 (27). Ростов-на-Дону. 2005г.- С. 63-67 - 0,22 п.л.,- личный вклад 40%.

6. Shkurat Т.Р., Mashkina E.V., Volosovcova G.I., Milutina N. P., Guskov E.P. Mutation and free-radical processes in animals, pre-adapted to oxidative stress.//International Workshops and Scientific Disscussion Club « New Technology in Integrative Medicine and Biology» «Stress and extreme conditions» //Bangkok-Pattaya, Thailand, 1-13 march, 2006,- P. 84.-0,04 п.л.,- личный вклад 65%.

7. Гуськов Е.П., Волосовцова Г.И., Прокофьев В.H., Шкурат Т.П. Устойчивость к окислительному стрессу у предадаптированных животных и их потомков. «Открытое образование» Международная конференция и дискуссионный научный клуб: Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии, IT + М&Е' 2006» Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, июнь 2006. -С. 427-429.0,17 п.л.,- личный вклад 90%.

Волосовцова Г.И. Антиоксидантный статус потомков крыс предадаптированных к окислительному стрессу. Тез. докл. Научно-практической конференции «Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)». Ростов-иа-Дону, 2006.-С. 167.-0,04 п. л.,- личный вклад 100%.

11ЕРЕЧЕНБ ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

АО - антиоксиданты

АФК - активные формы кислорода

АХр - аберрации хромосом

ГБО - гипербарическая оксигенация

ДК - диеновые конъюгаты

К - контрольные животные

МДА - малоновый диальдегид

МПа - мегапаскаль (в международной системе единиц давления принят паскаль (Па); I Па= 1,02x10"5 ат =2,02x105 ати; I ат (атмосфера техническая )-0,98х 105; I ати( атмосфера избыточная) = 1,98х105) МЭ - мембраны эритроцитов ПА - предадаптированные животные

I ЮЛ - перекисное окисление липидов СОД - супероксид дисмутаза

СПА - суммарная пероксидазная активность СРП - свободно радикальные процессы ХЛ -хемилюминесценция ЦП - церулоплазмин ШО - шиффовые основания

II - высота быстрой вспышки ХЛ 8т - светосумма ХЛ

Сдано в набор 26.05.2009 г. Подписано в печать 26.05.2009 г. Формат 60x841/те. Бумага офсетная. Гарнитура «Тайме». Оперативная печать. Усл. печ. л. 1,0. Уч-изд..л. 1,0.

Тираж 100 экз. Заказ № 446. Типография Южного федерального университета 344090, г. Ростоз-на-Дану, пр. Стачки, 200/1, тел (863) 247-80-51.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Волосовцова, Галина Ивановна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Кислород и активные кислородные метаболиты

1.1.1. Окислительное повреждение ДНК.

1.1.2. Перекисное окисление липидов и окислительный стресс.

1.1.3. Окислительная модификация белков.

1.2. Механизмы защиты от токсического действия кислорода и его активных форм.

1.3. Регуляторная роль АКМ.

1.4 .Биохимические последствия повышенного давления кислорода в живых системах.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 .Постановка эксперимента.

2.2. Получение биологического материала.

2.2.1. Получение плазмы крови.

2.2.2. Приготовление суспензии эритроцитов и гемолизатов.

2.2.3. Приготовление гомогенатов тканей.

2.3. Биохимические и биофизические методы исследования

2.3.1. Хемилюминесцентный (ХЛ) анализ.

2.3.2. Определение содержания диеновых коньюгатов.

2.3.3. Определение содержания шиффовых оснований.

2.3.4. Определение содержания малонового диальдегида.

2.3.5. Определение содержания белка.

2.3.6. Определение активности супероксиддисмутазы.

2.3.7. Определение активности каталазы.

2.3.8. Определение концентрации гемоглобина.

2.3.9. Определение оксидазной активности церулоплазмина.

2.3.10. Определение суммарной пероксидазной активности.

2.4. Генетические методы исследования.

2.4.1. Приготовление препаратов для подсчета анафаз и митотического индекса в эпителиоцитах роговицы глаза крыс.

2.5. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Интенсивность свободнорадикальных процессов и активность антиоксидантных ферментов у потомков предадаптированных животных и-их родителей.

3.1.1. Интенсивность Н202-люминол ХЛ в плазме крови предадаптированных животных и их потомков.56*

3.1.2. Интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантных ферментов в крови предадаптированных животных и их потомков:.

3.1.3.Интенсивность перекисного окисления липидов в соматических тканях потомков предадаптированных животных.

3.2. Влияние ГБО на интенсивность свободнорадикальных процессов в различных тканях потомков предадаптированных к окислительному стрессу» животных.

3.2.1. Интенсивность Н202-люминол ХЛ в плазме крови потомков предадаптированных животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе.

3.2.2. Влияние ГБО на интенсивность перекисного окисления липидов и активность антиоксидантной системы в крови у потомков? предадаптированных животных.81^

3.2.3. Оксидазная активность церулоплазмина в плазме крови потомков предадаптированных животных при ГБО - индуцированном стрессе 0,5 МПа-1ч.

3.2.4. Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге у потомков предадаптированных животных после ГБО-индуцированного окислительного' стресса.

3.2.5. Влияние ГБО (0,5МПа-1ч) на интенсивность свободнорадикальных процессов в печени потомков предадаптированных к окислительному стрессу животных.

3.2.6. Влияние ГБО (0,5МПа-1ч) на интенсивность свободнорадикальных процессов в легких у потомков педадаптированных к окислительному стрессу животных.

3.3. Аберрации хромосом и пролиферативная активность эпителиоцитов роговицы у потомков предадаптированных животных.

3.3.1. Цитогенетические последствия ГБО в соматических клетках потомков предадаптированных животных.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных"

Актуальность проблемы. Свободные радикалы кислорода и его активные метаболиты играют ключевую роль во многих биохимических и генетических процессах, протекающих в клетке (Владимиров и др., 1973; Кричевская и др., 1980; Лукаш и др., 1981; Ames, 1983, Halliwell, 1985; Gutteriadge, 1995; Allen, 2000; Kohen et al., 2002; Singh, 2004, Benz et al., 2008). С одной стороны, клетка использует активные метаболиты кислорода для регуляции энергетических систем, с другой - их уровень увеличивается при стрессе различной этиологии, злокачественном росте, атеросклерозе, диабете, бронхиальной астме и др. (Boros et al., 1989; Kasai et al., 1991; Halliwell, 1998; Sahnoun et al., 1998; Лукаш и др., 1999; Шустанова и др., 2001; Yonei et al., 2002; Wu et al.; 2003; Cooke et al., 2003; Reddy, 2008). Свободные радикалы кислорода могут индуцировать деструкцию мембран, снижать активность ферментов и гормонов, вызвать повреждения ДНК, нарушение клеточного цикла и, в конечном итоге, инициировать гибель клетки (Внуков и др., 1983; Chiu et al., 1989, Гуськов и др., 1985; Kang et al., 1999; Jackson et al., 2001; Шустанова и др, 2001; Klein et al., 2003; Djordjevic et al., 2004; Fang et al., 2004; Valco et al., 2005; Милютина и др., 2005). В связи, с этим, проблема повышения устойчивости организма к окислительному стрессу является достаточно актуальной.

1999; Опритов и др., 1999; Моргун и др., 2002; Васильева, 2004; Вшу а е1 а1., 2008).

Особой формой адаптивных реакций животных является реакция незрелого организма на окислительный стресс. Презумпивные клетки адаптивнее воспринимают новый режим функционирования, чем клетки взрослого организма. Так, у шпорцевых лягушек этот эффект способен сохраняться и после достижения животными половозрелого состояния (Тимофеева, 1997; Гуськов и др., 1999). У новорожденных крыс после воздействия малых доз гипербарической оксигенации (ГБО) формируется качественно новое соотношение про- и антиоксидантных систем, которое сохраняется и у взрослых животных. Предадаптированные крысы приобретают повышенную устойчивость к токсическим режимам ГБО (Азарова, 2005).

Целью настоящей работы явилось изучение свободнорадикальных процессов у предадаптированных к окислительному стрессу животных и их потомков в условиях нормально функционирующего организма и после развития окислительного стресса, индуцируемого ГБО.

Задачи исследования:

1. Определить интенсивность свободнорадикальных процессов в различных тканях потомства предадаптированных в новорожденный период крыс к окислительному стрессу.

2. Определить интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по уровню содержания молекулярных продуктов и антиоксидантный статус в различных тканях у потомков предадаптированных животных после развития окислительного стресса, индуцированного ГБО.

3. Провести сравнительный анализ изменения активности антиоксидантных ферментов и интенсивности перекисного окисления липидов в мозге, печени и легких в ответ на воздействие токсического режима ГБО у потомков, полученных от предадаптированных родителей.

Научная новизна. Впервые показано, что однократное воздействие повышенного давления кислорода (0,2 МПа-1ч) на новорожденных крыс изменяет внутриклеточный метаболизм, в частности систем, ответственных за перекисное окисление липидов, и формирует качественно новое соотношение про- и антиоксидантных систем в организме, которое сохраняется длительное время и наблюдается у потомков первого поколения. Показана возможность передачи устойчивости к окислительному стрессу от животных, однократно обработанных в новорожденный период низким режимом ГБО. Показано, что ответ на действие токсического режима ГБО у потомков предадаптированных животных зависит от пола предадаптированного родителя. Экспериментально показано снижение стресс-индуцированного ГБО накопления продуктов перекисного окисления липидов во всех исследованных тканях у потомков предадаптированных самок. Представлены доказательства повышенной устойчивости генома к окислительному стрессу у потомков самок, предадаптированных в новорожденный период.

Основные положения, выносимые на защиту:

Теоретическое и практическое значение работы: В общетеоретическом плане, выполненная работа расширяет существующие представления о возможностях предадаптации млекопитающих к окислительному стрессу в ряду поколений. Результаты исследования; представленные в работе, позволяют количественно и качественно оценить влияние предадаптации' новорожденных животных на устойчивость к повреждающему воздействию на ткани организма ГБО — индуцированного стресса у потомков предадаптированных животных. Выявлена возможность предадаптировать однократной обработкой ГБО в новорожденный период организм взрослых животных и их потомков к окислительному стрессу. Установлен эффект наследования устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных самок. Полученные в работе данные представляют существенный интерес для раскрытия механизмов приспособления организма к постоянно меняющимся условиям окружающей среды, а также для разработки различных методов повышения резистентности организма к экстремальным условиям среды. Полученные результаты расширяют представления о свободнорадикальных и мутационных процессах в организме при окислительном хтрессе, открывают новые перспективы их практического применения в адаптационной, космической и подводной медицине. Полученные в работе новые экспериментальные данные используются при чтении лекций в спецкурсах. «Свободные радикалы в живых системах», «Мутагены окружающей среды», «Химический мутагенез», «Экологическая генетика», «Основы патобиохимии», «Генетика окислительного стресса».

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на научных сессиях биолого-почвенного факультета РГУ (2003, 2005, 2006); на международной конференции «Гипербарическая медицина» (Москва, 2003); на Всероссийском съезде ВОГиС (Москва, 2004); на заседании Ростовского отделения общества ВОГиС (2005, 2006); International Workshops and Scientific Discussion Club «New Thechnology in Integrative Medicine and Biology» (Bangkok-Pattaya, 2006); на-XTV международной конференции «New Information^ Technologies in medicine, biology, pharmacology and ecology» (Гурзуф, 2006); на международной научно-практической, конференции «Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)» (Ростов-на-Дону, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ, том числе в изданиях, рекомендованных ВАК РФ - 2 статьи. Личный вклад 62,5 %, - 1,58 п.л.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на4 159 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, списка использованной литературы, включающего 189 отечественных и 204 зарубежных источника. Работа содержит 17 таблиц, иллюстрирована 28 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Волосовцова, Галина Ивановна

Выводы:

4. Воздействие ГБО 0,5 МПа-1ч снижает уровень молекулярных продуктов ПОЛ в мозге и печени у потомков предадаптированных самок (Р^ПАхс^К) и увеличивает - у потомков предадаптированных самцов (р! ^Кх^ПА).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Волосовцова, Галина Ивановна, Ростов-на-Дону

1. Азарова А.Э. Свободнорадикальные и мутационные процессы у животныхпредадаптированных к окислительному стрессу. Дисс. к.б.н. Ростов-на-Дону, 2005.-147с.

2. Азизова O.A., Осипов А.Н., Савов В.М., Яхъяев A.B., Зубарев В.Е., Каган В.Е., Владимиров Ю.А. Инициирование неферментативного перекисного окисления липидов в системе Fe- аскорбат-линолеат// Биофизика. 1985. -Т.30.-№1.-С.36-39.

3. Андреев А.Ю.ДСушнарева Ю.Е., Старков A.A. Метаболизм активных форм кислорода в митохондриях.//Биохимия.-2005.- Т.70. Вып.2. -С.246-264.

4. Анохин К.В. Молекулярные механизмы развития мозга и обучения: на пути к синтезу // Вестник РАМН. 2001. - № 4. с. 30-35.

5. Барабой В.А Механизмы стресса и перекисное окисление липидов // Успехи современной биологии. — 1991. Т. III, №. 6. - С.923 — 931.

6. Барабой В.А. Биологические функции, метаболизм и механизмы действия селена /ГУсп. Совр.биол. 2004. - Т. 124. - 2.- С. 157-168.

7. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов М., Медицина, 1989. 368 с.

8. Болдырев A.A. Двойственная рольсвободнорадикальных форм кислорода в ишемическом мозге (обзор)//Нейрохимия. 1995. -Т.12.-№3.-С.3-13

9. Ю.Болдырев A.A. Карнозин и защита тканей от окислительного стресса.// М.:Изд.МГУ "Диалог", 1999.

10. П.Болдырев A.A. Матриксная функция биологических мембран.//Соросовский образовательный журнал.-Т.7.- №7.-2001.-С.2-8.

11. Болдырев A.A. Парадоксы окислительного метаболизма мозга.//Биохимия. 1995 .-Т.60. -С. 1536-1542.

12. Болдырев A.A. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона.//Успехи физиологических наук. 2003. -Т. 34.- №3.-С.21-34

13. М.Бондаренко Т.И. Метаболизм гомокарнозина в мозгу животных разного возраста и в экстермальных условиях среды: Дис. . д-ра биол. Наук.1. М.,1990.-391с.

14. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Михалева И.И., Носкова Г.В. Молекулярные механизмы действия антиоксидантов природных олигопептидов // В мат. Межд. Симпоз. "Биоантиоксидант", Тюмень. 1997.-С.17.

15. Бондарчук И.А. Гипотеза о механизме индукции адаптивного ответа при облучении клеток млекопитающих в малых дозах./ТРадиационная биология. Радиоэкология. 2002.-Т.42.-№1 .-С.36-43

16. Бочков Н.П., Кулешов Н.П., Журков B.C. Анализ спонтанных аберраций в культуре лейкоцитов человека // Цитология. 1972. - Т. 14, № 10. - С. 12671273.

17. Брень А.Б. Генетико-биохимические особенности преадаптациимлекопитающих к окислительному стрессу Дисс.к.б.н. Ростов-на-Дону,1997.-141с.

18. Быкова Л.П., Жукова Т.П. Действие этанола и лимонтара в антенатальном периоде развития на перекисное окисление липидов и ферментов антиоксидантной защты в ткани мозга и печени потомства крыс.// Бюл. экспер. биол. и мед. 1994. -№1. - С.41-44.

19. Васильева С. В., Махова Е. В., Мошковская Е. Ю. Взаимосвязь экспрессии гена soxS с развитием адаптивной резистентости к индукаторам SoxRS-регулона в клетках Е. coli // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. -Т. 44.-N1.-C. 18-22.

20. Виноградов А.Д. Свбоднорадикальные процессы и продукты азотистого катаболизма при гипоксии и гипероксии. Автореф. дисс. .к.б.н. Ростов-на-Дону, 1994. -22с.

21. Владимиров Ю.А. Свечение сопровождающее химические реакции // Соросовский образовательный журнал. — 2000. № 6. — С. 25-32.

22. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран // Биофизика. 1987. — Т. 32,№5.-С. 830-843.

23. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы с живых системах.//СОЖ. 2000.-Т.6.-№12.-С. 13-19.

24. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., ДеевА.И. и др. Свободные радикалы в живых системах//Итоги науки и техники.Сер. Биофизикам. -1991. -Т. 29.1. С. 1-249.

25. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., Наука. 1972. - 250 с.

26. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П. Хемилюминесценция клеток животных // Итоги науки и техники. Биофизика. — 1989. — Т. 24.-176с.

27. Внуков В. В., Ананян А. А., Кириллов Г. Г., Кулешов В. И., Лыкова Е. В., Шевченко В. С. Прогноз индивидуальной устойчивости человека к гипероксии // Функции организма в условиях повыш. давл. Л., 1989. — С. 19.

28. Внуков В. В., Синичкин А. А., Прокофьев В. Н., Лепехин В. А., Шерстнев К. Б. Проницаемость клеточных мембран и гематоэнцефалических барьеров при кислородной интоксикации // YII междун. конгресс по гипербарической медицине. — М., 1981. — С. 188.

29. Внуков В.В. Железосодержащие белки и протеолитическая активнсоть в сыворотке крови при гипероксии и защитном действии мочевины: Дисс. .канд. биол. наук. Харьков. - 1979.- 90 с.

30. Внуков В.В., Кваша П.П., Ананян A.B., Милютина Н.П. Перекисное окисление липидов и сруктурно-функциональные свойства эритроцитов крыс при гипоксии.//Ростов-на-Дону.-1995.- 16с.

31. Газиев А.И., Шайхаев Г.О. Повреждение митохондриального генома и пути его сохранения//Генетика. 2008.-Т.44.-№4.-С.437-455.

32. Герасимов A.M., Денелян Н.В. Пространственный фактор в регуляции свободнорадикальных процессов.Мат.междунар.симп. "Кислород и свободные радикалы". Гродно. 1996. с.40-41

33. Горошинская И.А. Роль моноаминооксидазы в реакции организма на экстремальные воздействия.Дис. . д-ра биол. наук. М. 1988. С.411.

34. Гуляева H.A., Кузнецова Е.А., Газиев А.И. Белки, ассоциированные с митохондриальной ДНК, защищают ее от воздействия рентгеновского излучения и перекиси водорода//Биофизика. 2006. -Т.51.-№4.-С.692-697.

35. Гуляева Н.В. Ингибирование свободнорадикального окисления липидов в механизмах срочной и долговременной адаптации к стрессу//Биол. Науки.1989.-№4.-С.5-14.

36. Гуляр С.А. Респираторные и гекмодинамические механизмы регуляции кислородных режимов организма человека при гипербарии//Автореф. д-ра мед наук.- Киев.- 1983. 47с.

37. Гуляр С.А.Транспорт респираторных газов при адаптации человека к гипербарии//Киев. Наукова думка.- 1988. 292с.

38. Гуревич B.C., Конторщикова К.Н., Шатилина JI.B. Сравнительный анализ двух методов определения активности супероксиддисмутазы //Лаб.дело.1990.-№4.-С.95-100.

39. Гуськов Е. П., Шкурат Т. П. Нестабильность генома соматических клетокчеловека как адаптивная норма // Успехи соврем, биологии. 1989. - Т. 108.- № 5. - С.163—172.

40. Гуськов Е. П., Шкурат Т. П. Цитологические последствия гипербарической оксигенации в ряду клеточных циклов лимфоцитов периферической крови человека//Генетика. 1985. - Т.21.- № 8.-С. 1361-1367.

41. Гуськов Е.П. Генетические эффекты гипербарической оксигенации. Дис. .д.б.н. Ростов-на-Дону, 1989.-303 с.

42. Гуськов Е.П., Лукаш А.И. Избыточность фенотипа, оксигенный мутагенез и концепция буферного метаболизма. // М.,1987. 20с. — Деп. в ВИНИТИ № 95143.

43. Гуськов Е.П., Тимофеева И.В., Милютина Н.П., Шкурат Т.П. Влияние гипербарической окисгенации на антиоксидантный статус Xenopus laevis после предварительной адаптации к кислороду // Онтогенез. 1999. - Т. 30.-№2.-С. 91-96.

44. Гуськов Е.П., Тимофеева И.В., Милютина Н.П., Штельмах С.Л., Шкурат Т.П. Влияние гипербарической окисгенации на развитие Xenopus laevis // Онтогенез. 1997. - Т. 28, № 5. - С.352-358.

45. Гуськов Е.П., Шкурат Т.П., Милютина Н.П. и др. Влияние аллантоина на активность ферментов регулирующих ROS-зависимый статус организма//Докл.РАН. 2001. -Т.379.-№3.-С.398-401.

46. Гюлиханданова Н.Е., Цымбаленко Н.В., Платонова H.A., Бабич B.C., Пучкова Л.В. Изучение регуляции активности гена церулоплазмина у млекопитающих.//Бюл.экспер. биол. и мед.2004. Т.137. - №.5. -С.553-558.

47. Добротина H.A., Рутницкий А.Ю., Гладышева М.В. и др. Полифункциональность церулоплазмина, обоснование применения // Успехи совр. Биол. 1999. - Т. 119, № 4. - С. 375-379.

48. Доманский A.B., Лапшина Е.А., Заводник И.Б. Окислительные процессы, индуцируемые органической перекисью в эритроцитах человека: хемилюминесцентные исследования. Биохимия . 2005,- Т. 70.- с.922-932.

49. Дремина Е.С., Шаров B.C., Владимиров Ю.А. Определениеантиоксидантной активности биологических и лекарственных препаратов: методологические аспекты //Пульмонология. 1995. -№1.-С.73-75.

50. Дубинина Е. Е. Некоторые особенности функционирования ферментативной антиоксидантной защиты плазмы крови человека // Биохимия. 1993. - Т. 58., вып. 2. - С. 268 - 273.

51. Дубинина Е. Е. Характеристика внеклеточной супероксиддисмутазы // Вопр. мед. химии. 1995. - Т. 41.-В. 6 - С. 8-12.

52. Дубинина Е.Е., Морозова М.Г., Леонова Н.В., Гампер Н.Л. и др. Окислительная модификация белков плазмы крови больных психическими расстройствами (депрессия, деперсонализация) //Вопросы мед.хим. 2000.-Т.46. №4.-С.398-409.

53. Дубинина Е.Е., Шугалей В.В.Окилительная модификация белков.//Успехи1 соврем, биологии. 1993.-Т. 113.- №1.- С.71-83.

54. Дудкин С.И. Металлосодержащие белки плазмы крови при гипероксии. Дис. .канд. биол.наук, 1984.-180с.

55. Дурнев А.Д., Середин С.Б., Мутагены. Скрининг и формакологическая профилактика воздействий М., Медицина, 1998. 328 с.

56. Ерин А.Н. Гуляева Н.В. Никушкин Е.В. Свободнорадикальные механизмы в церебральных патологиях.//Бюл.эксп.биол.и мед. 1994.-№10. - С.343-348.

57. Жиронкин А.Г. Кислород. Физиологическое и токсическое действие. Обзор проблемы. Л.: Наука, 1972. -170с.

58. Журавлев А.И. Развитие идеи Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982. С. 3-36.

59. Каган В.Е., Орлов О.Н., Прилипко Л.Л. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов// Итоги науки и техники. Серия Биофизика. -М.1986. -Т.18. -133с.

60. Кваша П.Н. Свобонорадикальные процессы в крови и структрно-функциональные свойства эритроцитов при гипероксии, сердечнососудистых патологиях и их коррекция методом ГБО-терапии: Дисс. . .к.б.н. -Ростов-на-Дону, 1995.-150с.

61. Кения М. В. Динамика свободнорадикальных процессов и продуктов азотистого катаболизма в тканях системы крови при гипероксии: Дис. . канд. биол. наук. Ростов на - Дону, 1991. - 118 с.

62. Кения М.В., Лукаш А.И., Гуськов Е.П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов прпи окислительном стрессе.// Успехи соврем.биологии. 1993.-Т.113.- Вып.4.-С456-470.

63. Кения М.В., Шкурат Т.П., Лукаш А.И., Гуськов Е.П. Измененияе уровня мочевой кислоты в тканях крыс как системная реакция на гипероксию//Авиакосмическая и экологическая медицинаю -1993. -Т.27. -№3. -С.37-43.

64. Колб В.Г., Камышников B.C., Справочник по клин.химии. Минск, Беларусь, 1982.-С. 328

65. Корниенко И.В. Состояние процессов свободнорадикального окисления липидов при экспериментальной сальмонеллезной инфекции. Дис. . канд.биол.наук, 1997.-179с.

66. Корниенко И.В., Брень А.Б., Войнова Н.В., Гуськов Е.П. Стректурная организация митохондриальной ДНК позвоночных животных. //Успехи современной биологии. 2004. -Т. 124. № 1. - С. 17-27.

67. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб.дело. 1988. - № 1. - С. 16-19.

68. Кричевская A.A., Лукаш А.И., Броновицкая З.Г. Биохимические механизмы кислородной интоксикации. // Ростов-на-Дону, РГУ. 1980. 120 с.

69. Кричевская A.A., Лукаш А.И., Шугалей B.C., Бондаренко Т.И. Аминокислоты, их производные и регуляция метаболизма. Ростов-на-Дону, РГУ, 1983.-112 с.

70. Кричевская A.A., Шерстнев К.Б., Милютина Н.П., ХерувимоваВ.А.//Гипербарическая оксигенация в хирургии и реаниматологии: Тез. докл.Ш Симп. по ГБО. М. -1985. - С.173-174.

71. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита // СОЖ. 1999.- No 1.- С. 2 -7.

72. Кухта В.К., Морозкина Т.С. Ферментативная системаинициации и защиты от перекисногоокисления липидов впечени и крови крыс пр гипокинезии.

73. Вопр. Мед. Химии.-1988.-№1 .-С. 19-22.

74. Кучеренков Г.И., Яхонтов Б.И., Сыровегин A.B. Действие гипербарической среды на организм человека и животных/УПробл.косм. биол. — 1981.- №39. — С.118-124.

75. Ланкин В.З., Тихадзе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях (Пособие для врачей). Издание 2Fe, исправленное и дополненное//М:РКНПК МЗ РФ. 2001.- С.78

76. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы1в норме и патологических состояниях. Пособие для врачей. М., 2001. 78 с.

77. Ларский Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов // Итоги науки и техники. Серия Биологическая химия, М., 1990.-Т. 41.- 197 с.

78. Левин A.M. Металлосодержащие соединения и свободнорадикальные процессы в сыворотке крови при изменениях кислородного режима организма.Автореф. дисс. к.б.н.-Ростов-на-Дону.-1988.- 20 стр.

79. Леонов А.Н. Гипероксия. Адаптационно-метаболическая концепция саногенеза//Бюл. гипербарич, биол. и мед. 1994.-№1. -С. 51-75

80. Леонов А.Н., Барсуков В.А. Изменение тканевого дыхания, содержания сульфгидрильных групп и свободных радикалов в головном мозгу животных при анемизации и гипербарической оксигенации// Патол. физиол. и экспер. терапия.-1970. Т. 14. -№1. -С.40-43.

81. Лукаш А.И. Роль взаимодействия мочевины с белками мозга в механизмах ее защитного эффекта при гипероксии: Автореф. Дис. . д.б.н. -Ростов-на Дону, 1974. -31с.

82. Лукаш А.И., Ананян A.A., Менджерицкая Л.Г., Внуков В.В. Железосодержащие белки в плазме и сыворотке крови больных при гипербарооксигенотерапии // Анестезиология и реаниматология. 1991. - № 2. - С. 27-29.

83. Лукаш А.И., Внуков В.В. Внеэритроцитарный гемоглобин и железосодержащие продукты деструкции гемоглобина-система усилениятоксического эффекта гипероксии.//Вопр. мед.химии.- 1981.-Т.27.- №5.-С.616-619.

84. Лукаш А.И., Внуков В.В., Ананян A.A. и др. Металлосодержащие соединения плазмы крови при гипербарической оксигенации. Ростов-на-Дону. 1996.-108 с.

85. Лукаш А.И., Внуков В.В., Ананян А.А.Свободнорадикальные процессы и железосодержащие белки плазмы крови в механизмах действия гипероксии.// Бюллетень гипербарической биологии и медицины. 1998,-Т.6.- №3-4.-С.64-72.

86. Лукаш А.И., Заика В.Г., Кучеренко А.О., Милютина Н.П. Свободно радикальные процессы и антиоксидантные системы при депрессии и эффективность терапии.//Журнал невролиогии и психиатрии. 2002. -№9. С.41-44.

87. Лукаш А.И., Карташев И.П., Антипина Т.В. Торможение мочевиной перекисного окисления липидов в тканях // Известия СКНЦ ВШ. Естеств.науки. 1980. - № 1. - С. 102-105.

88. Лукаш А.И., Чернышов А.И., Внуков В.В. и др. Способ определения индивидуальной чувствительности к гипербарической оксигенации. Пат.РФ №2146050//Бюл. Изобрет.-2000.- №5.

89. Лукаш А.И.Свободнорадикальные процессы и железосодержащие белкиплазмы крови в механизмах действия гипероксии.// Бюл.гипербарической биологии медицины.- 1998. Т.6. - №3-4.- С. 64-73.

90. Лущак В.И. Свободнорадикальное окисление белков и его связь с функциональным состоянием организма./ТБиохимия. 2007.- Т.27.-№8. -С.935-1017.

91. Лю Б.Н., Ефимов М.Л. Антиокисдантная система клетки и канцерогенез // Успехи соврем, биологии. 1976.-Т.82.-№2.-С.236-251.

92. Лю Б.Н., Лю М.Б., Исмаилов Б.И. Роль митохондрий в развитии и регуляции уровня окислительного стресса в норме, при клеточных патологиях и реверсии опухолевых клеток.//Успехи современ. Биологии. 2006.-Т.126.№4.С.388-398.

93. Лю М.Б., Подобед И.С., Едыгенова А.К., Лю Б.Н. Активные формы кислорода и пероксигенация в инвазии и метастазировании неоплазм. // Успехи современной биологии. — 2004. — Т. 124, № 4 — С. 329-341.

94. Ляхович В.В., Вавилин В.А., Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Активная защита при окислительном стрессе. Антиоксидант-респонсивный элемент.//Биохимия. 2006. - Т.71. - Вып. 9. - С. 1183-1197.

95. Маслова М.Н. Молекулярные механизмы стресса.//Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова 2005. № 11.-С. 1320-1327

96. Мауэр Г. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в полиакриламидном геле. Перевод с немец. М., Мир, 1971. 190 с.

97. Мацынин В.В. Гипероксия и химическая резистентность эритроцитарных мембран//Физиол. Журн. СССР. 1975. - Вып.21. - №1. -С.110-114.

98. Мацынин В.В .Биоэнергетические механизмы развития гипероксии. Автореф. дисс.к.б.н. -Киев. 1982. -53с.

99. Меерсон Ф. 3., Архипенко Ю. В., И. И. Рожицкая, Диденко В. В. Противоположное влияние адаптаций к непрерывной и периодической гипоксии на антиоксидантные системы.//Бюл. эксперим. биологии.-1992.-№7.-С. 14-15.

100. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.:Наука.-1981.- 278 с.

101. Меерсон Ф.З.Концепция долговременной адаптации. М. Дело. 1993.138 с.

102. Меерсон Ф.З., Малышев И.Ю. Феномен адаптационной стабилизацииструктур и защита сердца. М.: Наука. 1993.-159с.

103. Менщикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных прцессов.//Успехи современной биологиию 1993. Т. 113.-В.4.-С.442-455.

104. Меныцикова Е. Б., Ланкин В. 3., Зенков Н. К., Бондарь И. А., Круговых Н. Ф., Труфакин В. А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. -М.:Фирма «Слово», 2006. 556 с.

105. Микаэлян Э.М., Карагезян К. Г., Овакимян С.С. Динамика количественных изменений суммарных и индивидуальных фосфолипидов мембран эритроцитов белых крыс в различные стадии стрессорной реакции организма//Вопр. Мед. Химии.-1988.-Т.34.- №2.-С.64-68.

106. Милютина Н. П., Ананян А. А. Свободнорадикальное окисление и механизмы адаптации к измененным условиям газовой среды обитания// Известия вузов. Северо-Кавказский регион. Естественные науки. Спецвыпуск. 2005. - С. 45 - 47.

107. Милютина Н.П. Характеристика некоторых белковых фракций больших полушарий и среднего мозга кроликов и морских свинок разного возраста в норме и при гипербарооксигенации: Автореф.дисс. .к.б.н. -Харьков, 1983.-142с.

108. Могильницкая Л.В., Фан Ан, Баранова Н.Ю., Шугалей B.C. Влияние аргинина на свойства эритроцитарных мембран в условиях гипоксии// Бюл.эксп.биол. и мед. 1992. - № 5. - С. 497-498.

109. Монцевичуте-Эрингене Е.В. Упрощенные математическо-статистические методы в медицинской исследовательской работе// Пат.физиол. и эксп.терапия. 1964. - № 4. - С. 71-78

110. Моргулис Г.Л., Свободнорадикальные прцессы в крови и ткани легких и состояние мембран эритроцитов при гипероксии и в постгипероксический период: //Автореф. дис.канд. биол. наук. Ростов-на-Дону. 1992. - 23 с.

111. Никушкин Е.В. Перекисное окисление липидов в норме и при патологии.//Нейрохимия.-1989. Т.8, №1. - С.124-145.

112. Октябрьский О.Н., Смирнова Г.В. Редокс-регуляция клеточных функций.//Биохимия. 2007.-Т.72.- №2.-С.158-174

113. Оленов Ю.М. Гены и эпигеномная изменчивость//Цитология. 1965.-№ 7.- С.285-302.

114. Осипов А.Н., Азизова O.A., Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и их роль в организме //Успехи соврем.биологии. 1990. - Т.31. -С. 180-208.

115. Пескин A.B. Взаимодействие активного кислорода с ДНК// Биохимия. 1997.-Т.62. -С. 1571 -1578.

116. Петровский Б.В. и др. Гипербарическая оксигенация и сердечнососудистая система. М., 1987.-387с.

117. Петровский Б.В., Ефуни С.Н.Основы гипербарической оксигенации.//М. "Медицина" - 1976. - 344с.

118. Пономарева М.Д. Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе. Дис. .канд. биол. наук, 2005.-191с.

119. Прокофьев В.Н., Могильницкая Л.В., Лукаш А.И. Динамика люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови крыс при различных кислородных режимах//Вопросы мед. химиии. 1995.-№5.-С.39-42.

120. Реутов В.П., Лжипа А.И., Каюшин Л.П. Кислород как ингибитор нитритредуктазной активности емоглобина// Известия: АН СССР.' Серия Биология. -1983. -№3.-С.408-418;

121. Садекова С.И. Влияние гипоксии, гипербарической оксигенации и последовательного действия на микросомальное окисление. Дисс. .к.б.н. Ростов-на-Дону, 1991.-140с.

122. Сазонтова^.Т.Г., Архипенко Ю.В. Роль свободнорадикальных процессов и редокс-сигнализации в адаптации организма к изменению уровня кислорода.//Российский физиологический журнал \ им И.М.Сеченова.91.№6.2005.с.636-655

123. Самецкий Е.А. Пластичность нейрональных структур при действии пирацетама и дельта-сон индуцирующегопептида в условиях гипероксии. Дис. . канд. биол. Наук, 1996. 151с.

124. Санина О.Л., Бердянских Н.К., Биологическая роль церулоплазмина и возможности его клинического применения.//Вопр. мед.химии. 1986. -№5. - С.7-14.

125. Сапожников В.М. Перекисное окисление липидов и состояние мембран эритроцитов и микросом при многократном действии факторов гипербарической гелиоксикислородной среды. Дйс. . канд.биол.наук, 1992.- 160 с V

126. Светлов П.Г., Корсакова Г.Ф. Зависимость фенотипа микрофтальмической: мутации мышей от внешних воздействий; на женские гаметы двух предшествующих поколений. // Генетика. 1966. - № 5. - С. 66 -81.

127. Серебренникова Э.Г., Мамаев А.Т., Ахмедов И.Г. Особенности процессов перекисного окисления и антиоксидантной активности липидов белых крыс при глубоком многократном переохлаждении.//Вопр. мед.химии. -1992.- №3. С.28-30.

128. Скулачев В.П. В своем межмембранном пространстве митохондрия таит «белок самоубийства», который, выйдя в цитозоль, вызывает апоптоз// Биохимия, 1996.-Т.61.- Вып.11.-С.2060-2063.

129. Скулачев В.П. Активные формы кислорода и эволюция: биохимические аспекты проблемы //5 Междун. Конференция «Биоантиоксидант», Москва, 1998.-С.4-5.

130. Скулачев В.П. Возможная роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций //Биохимия. 1998. - Т.63, № 12. - С. 1691-1694.

131. Скулачев В.П. Н202-сенсоры легкихи кровеносных сосудов и их рольв антиоксидантной защите организма.//Биохимия.-2001 .-Т.66.-№10.-С. 14251429.

132. Скулачев В.П. Старение как атавистическая программа, которую можно отменить.//Вестн. РАН. 2005.-Т.75.-№9.-С.831-843.

133. Скулачев В.П. Старение организма-особая биологическая функция, а не1 результат поломки сложной живой системы:биохимическое обоснование гипотезы Вейсмана.//Биохимия. 1997. -Т. 62. В.11. -С.1394-1399.

134. Скулачев В.П. Явление запрограммированной смерти. Митохондрии, клетки и органы: роль активных форм кислорода.//Соросовский образовательный журн. 2001.- Т.7.- №6.- С.4-11

135. Спитковский Д.М. Биологическое действие малых доз ионизирующей радиации //Радиобиология. 1992. - Т. 32.- № 3. - С. 382-400.

136. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты //Современные методы в биохимии. М.: Медицина. 1977. С. 66-68.

137. Тарусов Б. Н., Поливода А.И., Журавлев А.И. Изучение сверхслабой спонтанной хемилюминесценции животных клеток. // Биофизика. 1961. -Т. 6,- №. 4.- С. 490 - 492.

138. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода//

139. Вопр.мед.химии. 1997. - Т. 43.- № 2. - С. 87-93.

140. Тимофеева И.В. Генетико-биохимические особенности реакции Xenopus laevis на окислительный стресс Дисс.к.б.н. Ростов-на-Дону, 1997.-146с.

141. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов.//Биохимия. 2002. -Т.67.- Вып.З. - С.339-352.

142. Фридович И. Радикалы кислорода, пероксид кислорода и токсичность кислорода: Пер. с англ. //Свободные радикалы в биологии / Под ред. У. Прайора. М.: Мир, 1979. - С. 272 - 314

143. Хогаард Н. Токсическое действие кислорода на клеточный обмен.// Лечение повышенным давлением кислорода. -М. -1968. С.24-30.

144. Ходосовский М.Н. , Зинчук В.В. Участие L -аргинин- NO системы в развитии реперфузионных повреждений печени // Экспер. и клин, фармакол.- 2003.- Т.вв.- №3.- С.39-43.

145. Хочачка П. Биохимическая адаптация. М., Мир. 1988. 568с.

146. Чистяков В.А. Неспецифические иеханизмы защиты от деструктивного действия активных форм кислорода.//Успехи современной биологии. 2008.- Т. 128. №3. - С.300-306.

147. Шемарова И.В. Роль протеиназных каскадов в передаче стрессорных сигналов в клетках низших эукариот.//Цитология. 2006. -Т.48. -№2. -С.95-113.

148. Шепотиновский В.И. Обменные процессы в эритроцитах при стрессе и экстремальных воздействиях //Пат.физиол. и эксп.терапия. 1984. - № 2. -С. 70-74.

149. Шерстнев К.Б. Характеристика водорастворимых белков мозга в норме и при гипероксии: Автореф. дисс. .к.б.н. Ростов-на-Дону, 1975.- 33с.

150. Шерстнева И.Я. Активность АТФ-аз мембран мозга и эритроцитов крыс при гипероксии: Автореф. дисс. . к.б.н. Киев, 1981. 24с.

151. Шестаков В.А., Бойчевская Н.О., Шерстнев М.П. Хемилюминесценция плазмы крови в присутствие перекиси водорода //Вопр.мед.химии. — 1979.1. Т.25.- № 2. С. 132-137.

152. Шкурат Т.П, Тимофеева И.В.,. Федоренко Г.М., Гуськов Е.П. Реакция костного мозга крыс на окислительный стресс //Цитология.-1991.-ТЗЗ.-№5.-С.143.

153. Шкурат Т.П. Генетические последствия действия кислорода и газовых смесей под давлением на животных и человека. Автореф. дисс. .дбн. -2000.-47 с.

154. Шугалей B.C., Ананян A.A., Козьмин В.В. Система микросомального окисления печени при гипоксии и гипероксии.//Вопр. мед.химии. 1988. -№3. -С.62-64.

155. Шугалей B.C., Ананян A.A., Садекова С.И., Милютина Н.П. Влияние гипоксии и последующей бароксигенации на состояние системы микросомального окисления в печени крыс //Биологические науки. 1992. -№4.-С. 51-54.

156. Шустанова Т.А., Бондаренко Т.И., Милютина Н.П. Свободнорадикальный механизм развития холодового стресса у крыс.//Росссийский физиологический журнал им.И.М, Сеченова 2004. -Т.90. -№1. -С.73-82.

157. Шустанова Т.А., Мартыненко H.A. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида на резистентность мембран эритроцитов крыс при остром панкреатите//Известия высш. учебн. заведений Сев-Кавк. регион. Естест.науки. 1997.- Т. 99.-№3 - С.79-83.

158. Эйдус J1.X. Неспецифичность феномена адаптивного ответа// Радиобиол. и рад. экол. 1994. - Т. 34, № .6. - С. 748-758.

159. Adam-Vizi V., Chinopoulos С. Bioenergetics and the formation of mitochondrial reactive oxygen species.// Trends Pharmacol Sei. 2006.-V.12.-P. 639-645.

160. Allen R.G., Tresini M. Oxidative stress and gene regulation.// Free Radical Biol. Med.-2000.-Vol.28.-p.463-499.

161. Ames B.N. Dietary carcinogens and anticarcinogens, oxygen radicals and degenerative diseases.//Science. 1983. -V. 221. -P. 1256-1264.

162. Ames B.N. Delaying the mitochondrial decay of aging // Acad Sei. 2004. -V.1019-P. 406-411.

163. Ames B.N. Endogenous DNA damage as related to cancer and aging. //Mutat. Res. 1989.-V.214.-P. 41-46.

164. Ames B.N., Cathcart R., Schwiers E., Hochstein P. Uric acid provides an antioxidant defense in humans against oxidant and radical-caused aging and cancer: A hypothesis // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 1981. - V. 78, № 11. - P. 6858-6862.

165. Ames B.N., Shigenaga M.K., Hagen T.M. Mitochondrial decay in aging.//Biochim Biophys Acta. 1995.- V.1271.-N1.- P.l65-170.

166. Ames BN. Dietary carcinogens and anticarcinogens. Oxygen radicals and degenerative diseases. //Science. 1983.-V.221.-№4617.-P.1256-1264.

167. Arrigo A.P. Gene expression and the thiol redox state.// Free Rad. Biol. Med. 1999.-V.27.-P.936-944.

168. Babich V., Aksenov N., Alexeenko V., Oei S.L., Buchlow G., Tomilin N. Association of some potential hormone response elements in human genes with the Alu family repeats.// Gene. 1999.-V.239.-N.2.-P.341-349.

169. Balaban R.S., Nemoto S., Finkel T. Mitochondria, oxidants, and aging.// Cell. 2005.-V.120.-N.4.-P.483-495. ;

170. Barja G. Free radicals and aging // Trends Neurosci. 2004. - V.27.-N10.- P 595-600.

171. Barja G., Herrero A. Oxidative damage to mitochondrial DNA is inversely related to maximum life spain in the heart brain of mammals //FASEB J. 2000.-V.14. P.312-318.

172. Barnett Y.A. and King C.M. An investigation of antioxidant status, DNA repair capacity and mutations as a function of age in humans.// Mutat. Res. 1995. -V.338.-P. 115-128.

173. Barondeau D.P., Kassmann C.J., Bruns C.K., J.A. Tainer J.A., Getzoff E.D. Nickel superoxide dismutase structure and mechanism. // Biochemistry. 2004. — V. 43. —P.8038-8047.

174. Basaga H.S. Biochemical aspects of free radicals // Biochem Cell Biol. -1990. V. 68.- N 7-8. - P. 989-998.

175. Beckman K.B, Ames B.N. Oxidative decay of DNA//J.Biol.Chem.-1997. -Vol.272.-H. 19633-19636.

176. Beckman K.B., Ames B.N. Endogenous oxidative damage of mtDNA // Mutat Res. 1999. - V.424. - N1-2. - P. 51-58.

177. Beckman K.B., Ames B.N. Oxidative decay of DNA //J. Biol. Chem. 1997.-V.272.-P. 19633-19636.

178. Behrend L., Henderson G., Zwacka R.M. Reactive oxygen species in oncogenic transformation.// Biochem. Soc. Trans. 2003. V.31.- P.1441-1444.

179. Benzie I.F. Evolution of antioxidant defence mechanisms // Eur J Nutr. -2000. V. 39.- № 2. - P. 53-61.

180. Bert P. La perssion barometrique: recherches de physiologie experimentale. Paris. 1878.

181. Bidlack W. R., Tappel A. L. Fluorescent products of phospholipids during lipid peroxidation // Lipids. 1973. - V. 8.- № 4. - P. 203 - 209.

182. Bidlack W.R., Dyel A.L. Damage of microsomal membrane by lipid-peroxidation//Lipids. 1959.-V.8. -N.4. -P. 177-182.

183. Birch-Machin. The role of mitochondria in ageing and carcinogenesis // Clinical and experimtntal dermatology. -2006.-V. 31.- P.548-552

184. Bling E.G, Dyer W.J. A rapid method of total lipid extraction and purification.// Can J Biochem Physiol. 1959.-V.37. №8. -P.911-917.

185. Boonsta J., Post J.A. Molecular events associated with reactive oxygene species and cell cycle progression in mammalian cells// Gene. -2004-.-V.337.-P.l-13.

186. Boonsta J., Post J.A. Molecular events associated with reactive oxygene species and cell cycle progression in mammalian cells// Gene. -2004-.-V.33 7.-P.l-13.

187. Boros M., Kaszaki J., Nagy S. Oxygen free radical-induced histamine release during intestinal ischemia and reperfusion // Eur. Surg. Res. 1989. - V. 21.- N 6. - P. 297-304.

188. Borutaite V., Brown G.C. Nitric oxide induces apoptosis via hydrogen peroxide, but necrosis via energy and depletion //Free Radic. Biol.Med. -2003. -V.35.-P. 1457-1468.

189. Boveris A, Oshino N, Chance B. The cellular production of hydrogen peroxide // Biochem J. 1972. - V.128, № 3. - P. 617-630.

190. Brookes P.S., Yoon Y., Robotham J.L. et al. Calcium, ATP, and ROS: a mitochondrial love-hate triangle // Am. J. Physiol.Cell Physiol. -2004.-V.287.-P.817-833

191. Burton G.W., Ingold K.U. Vitamin E as an in vitro and in vivo antioxidant.// Ann. NY Acad. Sei. 1989. V.570. - P. 7-22.

192. Busija D.W, Gaspar T., Domoki F., Katakam P.V., Bari F. Mitochondrial-mediated suppression of ROS production upon exposure of neurons to lethal stress: mitochondrial targeted preconditioning. //Adv Drug Deliv Rev. 2008.-V.60.-P. 1471-1477.

193. Cadenas E., Boveris A., Nakase Y., Sies H. Biochemistry of oxygen toxicity //Annual. Rev. Biochem. 1989.- V.58.-P.79-110.

194. Cadenas E., Davies K.J.A. Vitochondrial free radical generation, oxidative stress, and aging //Free Rad. Biol. Med. 2000. V.29.-P.222-230

195. Cantoni O., Sestili P., Cattabeni F., Bellomo G., Pou S., Cohen M., Cerutti P. Calcium chelator Quin 2 prevents hydrogen-peroxide-induced DNA breakage and cytotoxicity //Eur. J. Biochem. 1989. - V. 182 - P 209-212.

196. Carmichael P.L., Nishe M., Phillips D.H. Detection and characterization by 32P-postlabelling of DNA adducts induced by a Fenton-type oxygen radical-generating system //Carcinogenesis. 1992. — V. 13. — P 1127-1135.

197. Carr A., Frei B. Vitamin C act as a pro-oxidant under physiological conditions? //FASEB J. 1999. V.13. -P.1007- 1024.

198. Chiu DTY, Kuypers FA., Lubin B. Lipid peroxidation in human red cells. // Semin Hematol. 1989. - V. 26. - P. 257-276.

199. Clark M.R. Senescence of red blood cells: progress and problems./ZPhysiol Rev. 1988.- V.68.-№ 2.- P. 503-554.

200. Collins A.R., Duthie S.J., Fillion L., Gedik C.M., VaughanN. and Wood S.G. Oxidative DNA damage in human cells: the influence of antioxidants and DNA repair. //Biochem. Soc. Trans. 1997. -V. 25. P. 326-331.

201. Collins A.R., Brown J., Bogdanov M., Cadet J., Cooke M. et. AI. Comparison of different methods of measuring 8-oxoguanine as a marker of oxidative DNA damage //Free Rad. Res. 2000.-V.32.- P.333-341

202. Conner E.M., Grisham M.B. Inflammation, free radicals, and antioxidants .//Nutrition.- 1996. -V. 12.- P. 274-277.

203. Cooke M.S., Evans M.D., Dizdaroglu M., Lunec J. Oxidative DNA damage:mechanisms, mutation, and disease. //FASEB J. 2003. — V. 17.- № 10. — P 1195-1214.

204. Davies K.J.A. Protein damage and degradation by oxygen radicals. Part 1-4. General-aspects//J. Biol. Chem.1987.-V. 262.- P. 9895-9920.

205. Dennog C., Hartmann A., Frey G., Speit G. Detection of DNA damage after hyperbaric oxygen (HBO) therapy //Mutagenesis. 1996. - V. 11.- N 6. - P.605-609.

206. Desideri A., Falconi M. Prokaryotic Cu, Zn superoxidies dismutases.//Biochem. Soc.Trans. 2003.- Vol.31.- P.1322-1325.

207. Dizdarouglu M. Chemical determination of free radical-induced damage to DNA. //Free Radic. Biol. Med. 1991. - V. 10. - P. 225-242.

208. Dizdarouglu M.Jaruga MP., Birincioglu M., Rodrigues H. Free radical-induced damage to DNA: mechanisms and measurement //Free Rad. Biol. Med. 2002.-V.32.-P1102-1115.

209. Djordjevic V.B. Free radicals in cell biology. Hint Rev Cytol. 2004. - V. 237.-P 57-89.

210. Dröge W. Free radicals in the physiological control of cell function./ZPhysiol Rev. 2002.-V.82.-N. 1 .-P.47-95.

211. Duthie S.J., Ma A., Ross M.A. and Collins A.R. Antioxidant supplementation decreases oxidative DNA damage in human lymphocytes.// Cancer Res. 1996.-V. 56.-P. 1291-1295.

212. Emerit I. Active oxygen species at the origin of sister chromatid exchanges.//Basic Life Sei. 1984.- V.29. -P. 127-140.

213. En Li, Beard C., Jaenisch R. Role for DNA methylation in genomic imprinting// Nature. 1993. - V. 366. - P. 362-365.

214. Epe B. Genotoxicity of singlet oxygen //Chemico-biological interaction. -1991. V. 80., N 3. - P. 239-260.

215. Ephrussi B. The Cytoplasm and somatic cell variation// Journ. Of Cellul and Comparat. Physiology. 1959. - V. 52, Supl. 1. - P. 35-53.

216. Esposito F., Ammendola R., Faraonio R. et al. Redox control of signal transduction, gene expression and cellular senescence //Neurochem.Res.-2004.-V.29.-P.617-628.

217. Esterbauer H. Cytotoxcity and genotoxcity of lipid-oxidation product //Am.J.Clin.Nut.-1993.-V.57.-P779-786

218. Esterbauer H., Schaur R.J., Zollner H., Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and aldehydes //Free Rad.Biol. Med. 1991. -V.ll. -P.81-128.

219. Evans M.D, Dizdaroglu M, Cooke M.S. Oxidative DNA damage and disease: induction, repair and significance/ZMutat. Res.-Rev.Mutat.Res. 2004. -V.567. -P. 1-61.

220. Fang Y.Z., Yang S., Wu G. Free radical homeostasis // Sheng Li Ke Xue Jin Zhan. 2004. -V. 35.- № 3 - P. 199-204.

221. Filomeni G., Rotilio G., Ciriolo M.R. Cell signalling and the glutathione-redox system.//Biochem. Pharmacol. 2002. -V. 64. -P. 1057-1064.

222. Flohe L., Drigelius-Flohe R., Salion C., Trabe N.G., Packer L. Redox regulation of NF-kappa Bactivation.//Free RAD.Biol.Med. 1997. -V.22. -P.l 115-1126.

223. Forman H.J., Fukuto J.M., Torres M. Redox signaling: thiol chemistry defines whichreactive oxygen and as second messengers. //Am.J. Physiol. Cell Physiol. 2004. -V.287. -N.2.-P.246-256.

224. Franco R., Schoneveld O., Georgakilas A.G., Panayiotidis M.I. Oxidative stress, DNA methylation and carcinogenesis//Cancer Lett. 2008.-V.266. N1.-P.6-11.

225. Fridovich I. Overview: biological sources of 02- //Meth. Enzymol. 1984.-V. 105.- P.59-61.

226. Fridovich I. Oxygen radicals, hydrogen peroxide, and oxygen toxicity // Free radicals in biology. New York: Acad. Press, 1976.-V. 1.-P.239-277.

227. Fridovich I.Fundamental aspects of reactive oxygen species, or what's the metter with oxygen.//Ann NY Acad. Sci. 1999.-V.893.P.13-18

228. Fried R. Enzymatic and nonenzymatic assay of superoxide dismutase //Biochemistry. 1975. - V. 57.- N. 4. - P. 657-660

229. Fuchs D.A, Albers C. Effect of adrenaline and blood gas conditions on red cell volume and intra-erythrocytic electrolytes in the carp, Cyprinus carpió // J. Exp. Biol. 1988. - V. 137. - P. 457-476.

230. Garcia-Chavez E., Santamaría A., Diaz-Barriga F., Mandeville P., Jimenez-Capdevill M.E., Juarez B.I. Arsenite-induced formation of hydroxyl radical in striatum of awake rats//Drain Res.- 2003. -Vol. 976. -P.82-89.

231. Gutteridge J.M.C. Lipid peroxidation and antioxidants as biomarkers of tissue damage. //Clin. Chem. 1995. -V. 41. -P. 1819-1828.

232. Hallak M., Vazana L., Shpilberg O., Levy I., Mazar J., Nathan I. A molecular mechanism for mimosine-induced apoptosis involving oxidative stress and mitochondrial activation.//Apoptosis. 2008.-V. 13. N.l.-P. 147-155.

233. Halliwell B, Gutteridge JM. The importance of free radicals and catalytic metal ions in human diseases.//Mol Aspects Med. 1985 .-V.8.-№2.-P. 189-193.

234. Halliwell. B; Antioxidants in human and disease//Ann. Rev.Nutr. 1996. -VI6. P.33-50.

235. Halliwell B. Can oxidative DNA damage be used as a biomarker of cancer risk in humans? Problems, resolutions and preliminary results from nutritional; supplementation Studies//Free radical research. 1998. - V. 29r- N 6; - P. 469486. ^ '

236. Halliwell B., Cutteridge J.M.G. Free radicals in biology and medicine. // Oxford: Clarendon press. 1999. 369 p.

237. Hanukoglu I. Antioxidant protective mechanisms against reactive oxygen species (ROS) generated by mitochondrial P450 systems in steroidogenic cells.// Drug Metab Rev. 2006.-V.38.-N.1-2.-P.171-196.

238. Harabin A.L., Braisted J.C. and Flynn E.T. Response of antioxidant enzymes to intermittent and continuos hyperbaric oxygen.//J. Appl. Physiol. 1990. —V. 69: -P. 328-335.

239. Hariharan P.V., Cerutti P.A. Formation of products of the 5,6-dihydroxydihydrothymine type by ultraviolet light in HeLa cells //Biochemistry -1977.-V. 16.-P 2791-2795.

240. Hellman N.E., Gitlin J.D. Ceruloplasmin metabolism; and function.//Annuf Rev Nutr. 2002.-V.58.-P.439-58.

241. Hildeman D.A. Regulation of T-cell apoptosis by reactive oxygen species //Free Radic. Biol. Med.-2004.-V.36: -P. 1496-1504.

242. Ionue M., Sato E.F., Nishikawa M., Park A.M., e.a. Mitochondrial generation of reactive oxygen species and its role in aerobic life //Cur.Med.Chem.2003;1. V.10.-P.2495-2505.

243. Jackson AL., Loeb LA. The contribution of endogenous sources of DNA damage to the multiple mutations in cancer. //Mutat Res. 2001. — V. 477.- № 2 -P. 7-21.

244. Jamieson D., Chance B., Cadenas E. and Boveris A. The relation of free radical production to hyperoxia.//Ann. Rev. Physiol. 1986.-V. 48. -P. 703-719.

245. Jiang Y.F. Complex roles of tissue inhibitors of metallopro-teinases in cancer .//Oncogene. 2002. -V. 21.- P. 2245-2252.

246. Joenje H. Genetic toxicology of oxygen/ZMutation Research. 1989. -V.219. -P. 193-208.

247. Joiner M.C., Lambin P., Marples B. Adaptive response and induced resistance.//C R Acad Sei III. 1999.-V.322.- P.167-175.

248. Jones D.P., Carlson J.L., Mody V.C., Cai J.Y., Lynn M.J., Sternberg P. Redox state of glutathione in human plasma.//Free Rad. Biol. Med. 2000. — V.28.- P.625-635.

249. Jotterand-Bellomo M. Des sites fragiles autosomiques. //J.Genet. Hum. 1984,-V.32.-N3.-P. 155-166.

250. Kadiiska M.B. et al. Biomarkers of oxidative stress study II: are oxidation products of lipids, proteins, and DNA markers of CC14 poisoning?//Free Radic Biol Med.- 2005.-V.38.-№6.- P.698-710.

251. Kagan V.E., Tyurina Yu.Yu., Witt E. Role of coenzyme Q and superoxide in vitamin E cycling // Subcellular Biochemistry. 1998.- V.30. P.491-508

252. Kang C., Kristal B., Yu B. Age-related mitochondrial DNA deletions effect of dietary restriction //Free radical biology and medicine. - 1999. - V. 21 - N 4. -P. 148-154.

253. Kanki K., Jhgaki M., Gaspari C.M. et .al. Architectural role of mitochondrial transcription .factjr A in maintenance ofhuman mitochondrial DNA //Mol. Cel.Biol. 2004. V.24. - P.9823-9834.

254. Kasasi H. Chemistry-basesd studies on oxidative DNA damage: formation. Repair, and mutagenesis //Free Rad. Biol. Med. 2002. -V.33. -P.450-456

255. Kasparova S., Brezova V., Valko M., Horecky J., Mlynarik V., Liptaj T. Study of the oxidative stress in a rat model of chronic brain hypoperfusion.// Neurochem. Int.- 2005. V.46.- P.601-611.

256. Kasprzak K.S. Oxidative DNA and protein damage in metal-induced toxicity and carcinogenesis//Free Rad.Biol. Med.-2002. Vol.32. - P.958-967.

257. Kitsyi M.P., Gouliaeva N.A., Kuznetsova E.A., Gaziev A.I. DNA-binding protains of mammalian mitochondria // Mitochondrion. 2005. V.5. - P.35-44.

258. Klauning J.E., Kamendulis L.M. The role oxidative stress in carcinogenesis //Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2004.-V.44.-P.239-267.

259. Klein M.B., Chan P.H., Chang J. Protective effects of superoxide dismutase against ischemia-reperfusion' injury: development and application of a transgenic animal model // Plast Reconstr Surg. 2003. - V. 111.- N 1. - P. 251-255.

260. Knuutila S. Role of free radicals in genetic damage (mutation).//Med Biol. 1984.-V.62.-P.110-114.

261. Kohen R., Nyska A. Oxidation of biological systems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification. // Toxicol. Pathology. 2002. - V. 30, № 6. - P. 620-650.

262. Kojo S. Vitamin C: basic metabolism and its function as an index of oxidative stress.//Curr. Med. Chem. 2004. -V. 11. P. 1041-1064.

263. Kojo S. Vitamin C: basic metabolism and its function as an index of oxidative stress.//Curr. Med. Chem. 2004. -V. 11. -P.1041-1064.

264. Lambertsen C.J. Prediction of physiological limits to human undersea activity and externsion of tolerance to high pressure//Advance in physiological sciences. Environmental Physiology.- Budapest. -Pergamon press.- 1981. -Vol.18. -P. 143146.

265. Landar A., Darley-Usman V/M/ Nitric oxide and signaling; modulation of redox tone and protein modification //Amino Fcids.-2003. -V.25.-P.313-321

266. Lander H.M. An essential role for free radicals and derived species in signal transduction./ZFASEB J. 1997. -V. 11N1. P. 118-124.

267. Lankin, V.Z. Free Radicals, Nitric Oxide, and Information: Molecular,

268. Biochemical, and Clinical ASPECYS,V.344, IOS Press,NATO Science Series, Amsterdam etc. 2003.- P.8-23.

269. Lee P.J., Alam J., Wiegand G.W. and Choi A.M.K. Overexpression of heme oxygenase-1 in human pulmonary epithelial cells results in cell growth arrest and increased resistance to hyperoxia. //Proc. Natl Acad. Sci. USA.- 1996.- V.93. — P.10939-19398.

270. Legros F., Malka F., Frachon P. et al. Organization and dynamics of human mitochondrial DNA //J.Cell Sci. 2004.-V.117.-P2653-2662.

271. Leonard S.S, Harris G.K, Shi X.L. Metal-induced oxidative stress and signal transduction//Free Rad.Biol.Med.-2004. Vol.37 P.1921-1942.

272. Levine R.L., Stadtman E.R. Oxidative modification of proteins during aging // Exp. Gerontol. 2001.- V. 36.-P.1495-1502.

273. Li X., Zhah A.M. Endotelian cell superoxide generation: regulation and relevance for cardiovascular pathophysiology //Am. J. Physiol .Regul. Integr.Comp.Physiol. -2004.-V.287.-P.R1014-R1030

274. Lowry O.H., Rosenbrough N.I., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V.193.- №1. - P! 265-275

275. Lucke-Huhle C., Pech M., Herrlich P. Selective gene amplification in-mammalian cells after exposure to 60Co gamma rays, 241 Am alpha particles, or uv light // Radiat Res. 1986. - V. 106, N 3. - P. 345-355.

276. Mambo Т., Gao X., Cohen Y. et. Al. Electrophile and oxidant damage to mitochondrial DNA leading to rapid evolution of homoplasmic mutations // Proc. Natl. Acad.Sci. USA. 2003.-V.100.-P. 1838-1843

277. Marnett L. J. Lipid peroxidation-DNA damage by malondialdeghyde //Mut. Res.-Fund Mol. Mech Mutagen. 1999.- V.424.-P.83-95

278. Maulik N., Goswami S., Galang N., Das D.K. Differatialregulation of Bcl-2, AP-1 and NF-kB on cardiomyocyte apoptosis during myocardial ischemic stress adaptation.//FEBS Lett. 1999.- V. 443. -P.331-336.

279. Menzies R., Crossen P., Fitzgerald P., Gunz F. Cytogenetic and cytochemical studies in marrow cell in B12 andfolate deficiency.//Blood.l966. V/28. -N4. -P.581-594.

280. Miller E.R., Pastor-Barriuso R., Dalai D., Riemersma R.A., Appel L.J., Guallar E. Meta-analysis: high-dosage Vitamin E supplementation may increase all-cause mortality.// Ann. Intern. Med. 2005. -V.142.- P. 37-46.

281. Mukhopadhyay C.K., Muzumber B., Fox P.L.//J.Biol.Chem. 2000. -Vol.275.- P.21 048-21 054.

282. Murphy M. P. and Smith R. A. Targeting antioxidants to mitochondria by conjugation to lipophilic cations.// Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2007.-V. 47. -P. 629-656

283. Nanji A.A., Gruniuviene B., Yacoub L.K., et al., heat-shck gene expression in alcoholic liver disease in the rat is related to the severity of liver injury and lipid peroxiation. Proc. Soc.Exp. Biol. Med. 1995. -V.210.-N.1.P.12-19.

284. Nanney D. Epygenetic factors effecting mating-type expression in certain Ciliates // Cold Spring Harbor Symposium on Quantitative Biology. 1958. - V. 23. - P. 327-335

285. Narkowicz C. H., Vial J. H. and McCartney P. Hyperbaric oxygen therapyincreases free radical levels in the blood of humans.//Free Rad. Res. Coramun.1993.-V. 19.-P. 71-80.

286. Nemoto s., Takeda K., Lu Z.X., Ferrans V.J. A role for mitochondrial oxidants as regulators of cellular metabolism.//Mol.Cell. Biol. 2000.-V.20. P.7311-7318.

287. Nyska A., Kohen R. Oxidation of biological sistems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quanitification //Toxicol. Pathol. 2002. V.30. -P.620-650

288. Oberley L.W. Role of antioxidant enzymes in cell immortalization and transformation.//Mol. Cell. Biochem. 1998.- V. 84. -P.147-153

289. Okamoto T., Tetsuko T.Role of thioredoxine in the redox regulation of gene expression in inflammatory diseases //Eds. Winyard P.G.,Blake D.R., Evans C.h. free Radicals and inflammation.Basel: Boston:Berlin:Birkhauser. 1998.- P. 11132.

290. Ostrowski R.P., Colohan A.R., Zhang J.H. Mechanisms of hyperbaric oxygen-induced neuroprotection in a rat model of subarachnoid hemorrhage.// J

291. Cereb Blood Flow Metab. 2005.-V.25.- N5. P.554-571

292. Packer L.Freeradical scavengers and antioxidants in prophylaxy and trteament of brain diseases//Freeradicals in the Brain.Aging, Neurological and Mental Disorders /Eds. Parker L., Prilipko L. andChristen Y. 1995. P. 1-20

293. Papa S. Mitochondrial oxidative phosphrylation changes in life span. Molecular aspects and physiopathological implications //Biochim. Biophys.Acta. 1996.- V.1276.-P.87-105

294. Pastore A., Federici G., Bertini , Piemonte F. Analysis of glutathione: implicationinredox and detoxification.// Clin. Chim. Acta. 2003. -V.333. -P. 1939.

295. Patel B.N., Van Vactor D.L. Axon guidance: the cytoplasmic tail.//Curr Opin Cell Biol. 2002.-V.14. -№2. -P.221-229

296. Patel M.N. Oxidative stress, mitochondrial dysfunction, and epilepsy.//Free Radic Res. 2002.- V.36.-№11.- P. 1139-1146.

297. Penta J.S., Johnson F.M., Wachsman J.T., Copeland W.C. Mitochndrial DNA in human malignancy //Mutat. Res.-Rev. MutatRes. 20001.- V.488. -P.l 19-133.

298. Phillips B., James T., Anderson D. Genetic damage to CHO cells exposed to enzymically generated active oxygen species // Mutation Res. 1984. - V. 126. -P. 265-271. *

299. Pinchuk I., Schnitzer E., Lichtenberg D. Kinetic analysis of copper-induced' peroxidation of LDL //Biochim. Biophys. Acta-Lipids Lipid Metab 1998.-V.1389. -P.155-172

300. Poli G., Leonarduzzi G., Biasi F., Chiarpotto E. Oxidative stress andcell signalling //Curr. Med.Chem. 2004.-V.11.-P.l 163-1182.

301. Qian ZM. Nitric oxide and changes of iron metabolism in exercise.//Biol Rev Camb Philos Soc. 2002.-V.77.-№4.-P.529-536.

302. Quinlan T., Spivack S. and Mossman B.T. Regulation of antioxidant enzymes in lung after oxidant injury.// Environ. Health Perspect. 1994. -V.102. -N. 2. -P.79-87.

303. Reddy S.P. The antioxidant response element and oxidative stress modifiers in airway diseases.// Curr Mol Med. 2008.-V. 5.-P. 376-83.

304. Richter C. and Frei B. Ca2+ release from mitochondria induced by prooxidants // Free Radical Biol. Med. 1988. - № 4. - P. 365-375.

305. Rieger R., Michaelis A., Takenisa S. // Low temperature betweenconditioning and challenge treatment prevents the adaptive response of Vicia faba root tip meristem cells. // Mutation Res. 1992. - V.282.- № 2. - P. 69-72.

306. Rothfuss A., Dennog C. and Speit G. Adaptive protection against the induction of oxidative DNA damage after hyperbaric oxygen treatment // Carcinogenesis. 1998. -V. 19. -N.ll. -P. 1913-1917.

307. Rothfuss A., Speit G. Investigations on the mechanism of hyperbaric oxygen (HBO)-induced adaptive protection against oxidative stress. // Mutat Res. -2002.-V. 508.- №2. -P. 157-165.

308. Rothfuss A., Stahl W, Radermacher P, Speit G. Evaluation of mutagenic effects of hyperbaric oxygen (HBO) in vitro // Environ Mol Mutagen. 1999. -V. 34.- N 4. - P. 291-296.

309. Rubanyi C.M. Vascular effects of oxygen-derived free radicals //Pree Radic.Biol. Med. -1988. -V.4.-P. 107-121.

310. Ryter S.W., Tyrrell R. The heme synthesis and degradation pathways: role in oxidant sensitivity. Free Rad. Biol. Med. 2000.-V.28.-N.2.-P. 298-309.

311. Sah V.P., Seasholtz T.M. , Sagi S.A. , Brown J.H. The role of Rho in G protein-coupled receptor signal transduction //Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2000.- V.40.-P. 459-489.

312. Sahnoun Z., Jamoussi K., Zeghal KM. Free radicals: fundamental notions and methods of exploration . Part 2. // Therapie. 1998. - V.53.- N 4. - P. 315-339.

313. Salmeen A., Barford D. Functions and mechanisms of redox regulation of cysteine-based phosphatases // Antioxidants Redox Signal. 2005.- V.7 .- P. 560577.

314. Samson L.,Cairns J. A new pathway for DNA repair in Escherichia coli // Nature. 1977. - V. 267.- N 5608. - P. 281-283.

315. Sancho-Tello M., Romero F. J., Abrahamson M., van Veen T. Low glutathione peroxidase in rdl mouse retina increases oxidative stress and proteases.//Neuroreport. 2007.- V.18.-N.8.- P.797- 801.

316. Santos J.H., Mandavilli B.S., Van Houten B. Measuring oxidative mtDNA damage and using quntitative PCR//Methods Mol. Biol.2002.-V.197.-P.159-176.

317. Schafer F. Q., and Buettner G. R. Redox environment of the cell as viewed through the redox state of the glutathione disulfide/glutathione couple.//Free Radical Biol. Med. 2001.- V.30. P:1191-1212.

318. Schroeder T., Kurth R. Spontaneous chromosomal breakage and high incidence of leukemia in disease.// Blood. 1971.- V.37. -Nl- P.96-112.

319. Semenza G. L. 02-regulated gene expression: transcriptional control of cardiorespiratory physiology by HIF-1. //J. Appl. Physiol. 2004. V.96.-P.1173-1177.

320. Semenza G.L. Perspectives on oxygen sensing. //Cell. 1999. -V.98.- P.281-284.

321. Sen C.K., Parker L. Antioxidant and redox regulation of gene transcription« //FASEB J. 1996. V.10. - P.709-720.

322. Sevanian, Hochstein P. Mechanisms and consequences of lipid peroxidation in biological systems // Annu Rev Nutr.,- 1985. N 5. - P. 365-390:

323. Shigenaga M., Ames B. Assays for- 8-hydroxy-2-deoxyguanosine: A biomarker of in vivo oxidative DNA damage // Free Radic. Biol. Med. 1991. -N10:-P. 211-216.i

324. Shigenaga M.K, Gimeno C.J., Ames B:N. Urinary 8-hydroxy-2-deoxyguanosine as a biological marker of in vivo oxidative DNA damage.//Proc Natl Acad Sci U S A.- 1989.-V.24.-P:9697-9701.

325. Sies, H'.Oxidative Stress. Oxidant and Antioxidats. //Academic Press, London.-1999. -P. 15-22.

326. Simon H.-U. Neutrophil apoptosis pathways and their modification in inflammation // Immunol. Rev. -2003. V. 193.- P. 101-110.

327. Singh K.K. Mitochondria damage checkpoint in apoptosis and genome stability. // FEMS Yeast Res. 2004. - V.5.- № 2. - P 127-132.

328. Smalls S., Patterson r. Reduction of benzo(a)pyrene induced chromosomal aberrations by DL-alfa-tocoferol.//Europ.Journ. Of Cell Biology. 1982. -V.28. -P.92-97.

329. Speit G., Dennog C. and Lampl L. Biological significance of DNA damage induced by hyperbaric oxygen. //Mutagenesis. 1998. V.13. - P: 85-87.

330. Stadtman E.R: Protein oxidation and aging //Science.-1992.-V. 257.-P. 12201224.

331. Stadtman E.R. Role of oxidant species in aging// Curr.Med.Chem. 2004.1. V.11.-P.1105- 1112.

332. Starkov AA. The role of mitochondria in reactive oxygen species metabolism and signaling.// Ann N Y Acad Sci. 2008.-.V.1147.-P.37-52.

333. Storz P. Reactive oxygen species in tumor progression // Front. Biosci.2005.-V. 10.-P. 1881-1896.

334. Stubb J. Controlling radical reactions // Monthly Nature.- 1994.- V. 2.- № 3.-P. 33.

335. Surani M.A. Silence of the genes // Monthly Nature. 1993. - V. 1, N. 11. - P. 40-41.

336. Suzuki N., Ogawa K., Yoda B. et al. Chemiluminescent detection of active oxygen species, singlet molecular oxygen and superoxide, using Cypridina luciferin analogues // Bull. Jap. Soc. Sci. Fish. 1991. - V. 57. - P. 1711 - 1765.

337. Suzuki Y.J.,Forman H.J., Selvanian A. Oxidants asstimulators of signal transduction.//Free Rad.Biol.Med.-1997. -V. 2.-N.1-2. P.269-282.

338. Thannickal V.J., Fanburg B.L. Activation of an H202-generating NADH oxidase in human lung fibroblasts by transforming growth factor beta 1.// J Biol Chem. 1995.-V.270.-№51 .-P.30334-3038

339. Thannickal V.J., Fanburg D.L. Reactive oxygen species in cell signaling // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2000. -V.279.- L1005-L1028.

340. Therond P. Oxidative stress and damages to biomolecules (lipids, proteins, DNA) // Ann Pharm Fr. 2006. -V.64. -N.6. -P.383-389.

341. Turrens J. F. Mitochondrial formation of reactive oxygen species.// J. Physiol. 2003.-P. 552:335

342. Valco M, Rhodes C. J., Moncol J., Izakovic M., Mazur M. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer.// Chemico-Biological Interaxtions. 2006. -V 160. -P. 1-40.

343. Valco M., Morris H.,Cronin M.T. Metals, toxicity and oxidative Stress.//Curr.Med.Chem. 2005. Vol.12. - P.l 161-1208.

344. Valko M, Izakovic M, Mazur M, Rhodes CJ, Telser J. Role of oxygen radicals in DNA damage and cancer incidence. // Mol Cell Biochem. 2004. - V.266.- № 2.-P. 37-56.

345. VanPoppel G., VandenBerg H.Vitamins and cancer.// Cancer Letters. 1997. -V.114. -Nl. -P. 195-202.

346. Voss P, Siems W. Clinical oxidation parameters of aging.// Free Radic Res.2006.-V.40.-N.12.-P.339-349

347. Wallace D.C. A mitochondrial paradigm of metabolic and degenerative diseases, aging, and cancena dawn for evolutionary medicine //Annu. Rev. Genet. 2005.-V.39.-P.359-407.

348. Wang M.Y., Dhingra K., Hittelman W.N., et. al. Lipidperoxidation-induced puvative malondialdehyde- DNA adducts in human breast tissues //Cancer Epidemiol.Biomark. 1996. -V.5.-P.705-701.

349. Welch K.D., Eden M.E., Aust S.D. Modification of fer-ritin during iron loading // Free Rad. Biol. Med. 2001.-V. 31.-P. 999-1006.

350. Wendel A. Enzymes: tools and targets. // Basel: Karger. 1988. - P. 161.

351. Wiener C.M., Booth G., Semenza G.L. In vivo expression of mRNAs tncoding hypoxia-inducible factor 1. //Biochem. Biophys. Res. Commun. -1996.-V. 225.- P. 485 488.

352. Willcox JK, Ash SL, Catignani GL.Antioxidants and prevention of chronic disease. // Crit Rev Food Sei Nutr. 2004. - V. 44.- № 4. - P. 275- 295.

353. Winkler G., Kempler P. The pathogenesis of diabetic and hepatic neuropathies. //Orv Hetil. 2001.-V. 142. -N.45. -P.2459-2467.

354. Wolin M.S., Burke-Wolin T.M., and Mohazzab-H K.M. Roles of NAD(P)H oxidases and reactive oxygen species in vascular oxygen sensing mechanisms. //Respir Physiol. 1999.-V. 115.-P. 229-238.

355. Wu D, Cederbaum AI Alcohol, oxidative stress, and free radical damage//Alcohol Res Health. 2003.- V.27.-N4.-P.277-284.

356. Yakes, Houten. Mitochondrial DNA damage is more extensive and persists longer than nuclear DNA damage in human cells following oxidative stress // Proc Natl Acad Sei USA,- 1997. V. 94, N 2. - P. 514-519.

357. Yonei S, Zhang QM. Biological effects of low dose radiation and adaptive responses in mammalian cell // Nippon Hoshasen Gijutsu Gakkai Zasshi. 2002.-V. 58.-№ 10.-P. 1328-1334.6/

Информация о работе

Волосовцова, Галина Ивановна
кандидата биологических наук
Ростов-на-Дону, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Роль свободнорадикальных процессов в формировании устойчивости к окислительному стрессу у потомков предадаптированных животных - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы