Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии дисплипротеинемий

Агеева, Елена Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии дисплипротеинемий
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии дисплипротеинемий"

□□3483543

На правах рукописи

АГЕЕВА ЕЛЕНА ВИКТОРОВНА

РОЛЬ НАРУШЕНИЯ ОБМЕНА ЖИРНЫХ КИСЛОТ В РАЗВИТИИ ДИСЛИПОПРОТЕИНЕМИЙ

Специальность 03.00.04 - Биохимия

1 3 НОЯ 2С0Э

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2009

003483543

Работа выполнена в отделе биохимии Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Денисенко Александр Дорофеевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Галебская Людвига Вячеславовна доктор медицинских наук, профессор Дорофейков Владимир Владимирович

Ведущее учреждение: Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова

Защита диссертации состоится ». .....2009 г. в«. // »часов на

заседании Диссертационного совета Д 001.022.03 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук при Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН по адресу: 197376, Санкт-Петербург, Каменноостровский пр., д.69/71.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Научно-исследовательского института экспериментальной медицины СЗО РАМН по адресу: 197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, д.12.

Автореферат разослан г.

Учёный секретарь

Диссертационного совета Д 001.022.03 доктор биологических наук, профессор

ПучковаЛ.В.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Сердечно-сосудистые заболевания справедливо называют эпидемией 20 века, которая, к сожалению, продолжается и в 21 веке. В течение многих десятилетий они являются ведущей причиной смертности населения в индустриально развитых странах, в том числе и в России [Оганов Р.Г, 2003].

В Государственном докладе о состоянии здоровья Российской Федерации в 2004 (доклад опубликован в 200бг) содержатся данные о том, что показатели смертности от сердечно-сосудистых заболеваний в России в 2-4 раза выше, чем в западноевропейских странах и пока наблюдается тенденция к росту смертности. За 2004 год население России уменьшилось на 0,7 млн. человек, из них от сердечно-сосудистых заболеваний умерло 47,6%.

К группе сердечно-сосудистых заболеваний относят ишемическую болезнь сердца (ИБС), инсульт, поражения периферических артерий и ряд других заболеваний. В структуре смертности от сердечно-сосудистых заболеваний около 85-90% приходится на долю инсульта и ИБС [Оганов Р.Г., 2003]. Ведущая роль в патогенезе этих заболеваний принадлежит атеросклерозу.

Изучение механизмов патогенеза атеросклероза по-прежнему остаётся актуальной проблемой современной медицинской науки.

Многочисленные экспериментальные, клинические и эпидемиологические данные убедительно свидетельствуют о ключевой роли дислипопротеине-мий (ДЛП) в патогенезе атеросклероза и его клинических проявлений [Климов А.Н., 1980, Мамедов М.Н., 2006, Pejic R.N., Lee D.T., 2006].

Несмотря на то, что причина возникновения некоторых ДЛП хорошо изучена, тем не менее механизмы возникновения большинства ДЛП, в частности гипертриглицеридемий, а именно - несемейных форм комбинированной дисли-попротеинемии (к-ДЛП) и изолированной гипертриглицеридемии (и-ГТГ), до настоящего времени не выяснены.

Важную роль в регуляции метаболизма жирных кислот играют липопро-теинлипаза (ЛПЛ) и гормон-чувствительная липаза (ГЧЛ), увеличение активности которых приводит к повышению концентрации жирных кислот в плазме крови. Однако механизм связи между активностью липопротеидлипазы и уровнем триглицеридов вплоть до настоящего времени недостаточно изучен.

Более двадцати лет назад в плазме крови был обнаружен белок, увеличивающий поступление жирных кислот в жировые и мышечные клетки за счет стимуляции внутриклеточного синтеза триглицеридов [Teng В. et al., 1983, Cianflone К. et al., 1989]. Данный белок получил название - стимулирующий ацилирование белок (САБ). Несмотря на то, что белок был открыт более двадцати лет назад, его функции до настоящего времени недостаточно изучены. Предполагается, что от концентрации этого белка зависит содержание в крови

жирных кислот. Однако данные литературы относительно роли САБ организме весьма противоречивы.

Кроме того, известно, что важную роль в регуляции образования и транспорта НЭЖК играет инсулин [Ong J.M. et al., 1988] При инсулинорезистентно-сти происходит увеличение концентрации НЭЖК в плазме крови, что в свою очередь приводит к развитию гипертриглицеридемии [Lewis G.F. et al., 1995].

Исходя из вышеизложенного, к настоящему времени известны несколько возможных причин возникновения недостаточно изученных вариантов гипер-триглицеридемий. Вместе с тем, нужно отметить отсутствие объективного способа оценки работы всей системы образования и транспорта НЭЖК в плазме крови в целом. Это позволило бы определить роль не только ЛПЛ, но и проанализировать суммарный эффект всех факторов, участвующих в регуляции синтеза триглицеридов и их элиминации из плазмы крови.

Таким образом, изучение взаимосвязи вышеперечисленных факторов, влияющих на показатели липидного обмена, и поиск механизмов возникновения вышеперечисленных форм гипертриглицеридемий представляется весьма важным и актуальным.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось изучение роли нарушения обмена жирных кислот в возникновении и-ГТГ и к-ДЛП и выяснение механизмов их развития. В связи с этим перед нами стояли следующие практические задачи:

1. Провести сравнительную оценку нарушения системы липолиза у больных с и-ГТГ и к-ДЛП.

2. Изучить взаимосвязь активности липопротеинлипазы с уровнем жирных кислот в плазме крови у обследованных пациентов. Разработать способ оценки эффективности действия липолитической системы в целом.

3. Провести сравнительную оценку связи САБ с уровнем триглицеридов (ТГ) у пациентов с и-ГТГ и к-ДЛП натощак и при жировой нагрузке. Изучить влияние этого белка на внутриклеточный синтез триглицеридов в мышиных и человеческих фибробластах.

4. Оценить взаимосвязь всех факторов, участвующих в рефляции синтеза триглицеридов и их элиминации из плазмы крови у пациентов с изучаемыми формами ДЛП.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Активность липопротеинлипазы не отражает в полной мере эффективность липолитического действия фермента в плазме крови у пациентов с изучаемыми формами гипертриглицеридемий. Для оценки эффективности липолиза необходимо использовать коэффициент, показывающий количественное взаимоотношение между активностью ЛПЛ и гидролизованными ТГ (величина отношения количества гидролизованных частиц ТГ под действием фермента к активности липопротеинлипазы).

2. Важную роль в развитии гипертриглицеридемий у больных с и-ГТГ и к-ДЛП играет нарушение липолиза ТГ в плазме. Причем у лиц с и-ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ — несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватный

гидролиз ТГ. У пациентов с к-ДЛП активность ЛПЛ остается в пределах нормы, однако, эффективность липолиза у этих пациентов ниже, чем при и-ГТГ, по-видимому, вследствие обогащения липопротеинов очень низкой плотности (ЛОНП) холестерином.

3. Концентрация САБ не связана с концентрацией ТГ в плазме крови у пациентов с изучаемыми формами гипертриглицеридемий. Данный белок является слабым активатором синтеза триглицеридов в мышиных и человеческих фибробластах.

4. Отношение концентрации неэстерифицированных жирных кислот к уровню триглицеридов снижено у больных с гипертриглицеридемиями по сравнению с лицами с нормолипидемией, что указывает на нарушение баланса процессов липолиза триглицеридов и эстерификации жирных кислот у больных с и-ГТГ и к-ДЛП.

5. Повышение уровня ТГ в крови у больных с изучаемыми формами ДЛП отражает развитие метаболического синдрома и связано с увеличением массы тела, инсулиновой резистентностью, увеличением концентрации в крови НЭЖК.

Научная новизна работы. Впервые показано, что в основе развития ги-пертриглицеридемии при некоторых формах изолированной гипертриглицери-демии и комбинированной дислипопротеинемии лежат сходные биохимические механизмы, которые связаны с развитием метаболического синдрома.

Впервые предложено использовать величину отношения количества гид-ролизованных триглицеридов к активности липопротеинлипазы в качестве показателя эффективности действия данного фермента. Впервые установлено, что важную роль в развитии гипертриглицеридемий у больных с и-ГТГ и к-ДЛП играет нарушение липолиза ТГ в плазме. Причем у лиц с и-ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ - несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватного гидролиза ТГ. У пациентов с к-ДЛП активность ЛПЛ в пределах нормы, однако эффективность липолиза у этих лиц ниже, чем при и-ГТГ, по-видимому, вследствие обогащения ЛОНП холестерином.

Предложен показатель нарушения баланса процессов липолиза - эстерификации: отношение уровня неэстерифицированных жирных кислот к концентрации триглицеридов (НЭЖК/ТГ). Этот показатель достоверно снижен у больных с изучаемыми формами гипертриглицеридемий по сравнению с нормолипидемией. В то же время отсутствует различие этого отношения между группами с и-ГТГ и к-ДЛП.

Показано, что концентрация САБ не влияет на степень повышения ТГ в плазме крови при жировой нагрузке. Однако в экспериментах на мышиных и человеческих фибробластах выявлено, что САБ вызывает слабую стимуляцию синтеза ТГ.

Теоретическое и практическое значение работы. Результаты настоящего исследования расширяют представления о механизмах развития некоторых форм дислипопротеинемий, таких как несемейные формы комбинированной дислипопротеинемии и изолированной гипертриглицеридемии. Установлено,

что важную роль при этом играет комплекс обменных нарушений, связанных с метаболическим синдромом, что является важным для понимания роли каждого из этих показателей в развитии сердечно-сосудистых заболеваний.

Практическое значение работы состоит в том, что в качестве оценки системы липолиза - эстерификации предложено использовать величину отношения уровня неэстерифицированных жирных кислот в крови к концентрации триглицеридов, что открывает перспективу для применения данного показателя в клинике. Для использования в клинической практике также предложен показатель эффективности липопротеинлипазы - это отношение гидролизованных триглицеридов к активности данного фермента. Полученные результаты могут быть использованы для диагностики нарушений липидного обмена и определения способов коррекции этих нарушений.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК.

Материалы диссертации докладывались и обсуждались на Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2008), на международном конгрессе - 6 th Metabolic Syndrome, type II Diabetes and Atherosclerosis Congress (Берлин, Германия, 2009), на международном симпозиуме по атеросклерозу -2009 International Symposium on Atherosclerosis (Бостон, США, 2009). Результаты диссертации также были опубликованы в материалах научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2004).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований, обсуждение результатов, заключение, выводы, список цитируемой литературы. Работа изложена на 106 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками и 9 таблицами. Библиографический список использованной литературы содержит 238 источников.

Личный вклад. Соискателем самостоятельно проведено большинство экспериментов, включая работу на клиническом материале. Соискателем также самостоятельно проведена статистическая обработка результатов исследований, включая дисперсионный, корреляционный, регрессионный анализ. Соискатель самостоятельно проводил анализ данных литературы и сопоставление их с результатами собственных исследований.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Пациенты и образцы плазмы крови

В исследование было включено 114 пациентов, находившихся в клинике липидологии НИИЭМ СЗО РАМН. У 110 (95%) обследуемых была артериальная гипертензия, у 61 (54%) - и ИБС. Пациенты были разделены на 3 группы: контрольная группа (лица с нормолипидемией), группа больных с несемейной

к-ДЛП и группа больных с и-ГТГ. Фенотипирование гипертриглицеридемий производили по критериям, предложенным А.Н. Климовым и Н.Г. Никульчевой [1980]. Контрольная группа состояла из 51 практически здорового индивидуума в возрасте 52,5+13,11 лет, имеющих уровень ТГ в плазме крови <2,26 ммоль/л, общий холестерин (ОХС) < 6,46 ммоль/л, холестерин липопротеинов высокой плотности (ХС ЛВП) >0,93 ммоль/л и нормальную толерантность к глюкозе. В группу больных с несемейной к-ДЛП вошли 33 пациента с уровнем ТГ >2,26 ммоль/л, ОХС > 6,46 ммоль/л. В группу больных с и-ГТГ были включены 30 пациентов с уровнем ТГ >2,26 ммоль/л, ОХС < 6,46 ммоль/л.

Из исследования были исключены лица, имеющие хронические заболевания печени и желчевыводящих путей, почек, гипо- и гиперфункцию щитовидной железы, сахарный диабет, принимавшие гиполипидемические препараты и имеющие кровных родственников с нарушением липидного обмена.

Забор крови проводили из локтевой вены, утром после 12-часового голодания. Полученную после центрифугирования (20 мин, +4°С, 1500об/мин) плазму немедленно замораживали и хранили при -70°С. В качестве антикоагулянта использовали 0,1% ЭДТА.

У всех обследуемых измеряли рост и вес и рассчитывали величину индекса массы тела (ИМТ): ИМТ=масса тела(кг)/рост2(м2).

Автор приносит глубокую благодарность сотруднице отдела биохимии, д.м.н. Н.Г. Никульчевой за помощь при составлении групп обследуемых лиц.

Биохимические методы исследования

Содержание липидов (ОХС, ТГ, ХС ЛВП) в плазме крови определяли ферментативными методами (P.Z. CORMAY, Польша) на автоанализаторе «EOS-BRAVO» фирмы «Hospitex» (Швеция) [Bucolo G., David H., 1973, Allain C.C. et al., 1974, Lopes-Virella M.F. et al., 1977). Содержание холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛНП) в ммоль/л рассчитывали по формуле Фридвальда с модификацией [Шестов Д.Б., 1985]: ХС ЛНП=ОХС - (ТГ/2,2+ХС ЛВП) [Friedewald W. et al., 1972]. Концентрацию НЭЖК определяли ферментативным колориметрическим методом с использованием наборов фирмы «Wako Chemicals GmbH» (Германия), а содержание глюкозы - глюкозооксидазным методом с использованием наборов фирмы «Boehringer-Mahnheim GmbH» (Германия) на автоанализаторе «EOS-BRAVO» [Hosaka К. et al., 1981]. Уровень инсулина плазмы крови анализировали иммунноферментным методом с помощью набора «DSL-10-1600 ACTIVE Insulin ELISA» (США) с использованием универсального микропланшетного ридера Е1х800 фирмы «Bio-Tek Instruments Inc» (США). Содержание апопротеинов (ano) Al и В-100 в плазме крови оценивали методом количественного, «ракетного» иммуноэлектрофореза [Alaupovic P. et al., 1978] (Олейник И.А.). В качестве антител к ano Al использовали антитела фирмы «AbD Serotec» (Великобритания), антитела к ano В-100 получены сотрудниками отдела биохимии НИИЭМ СЗО РАМН.

Показатель инсулиновой резистентности - НОМА-индекс (homeostasis model assessment) рассчитывали по формуле: НОМА-индекс = (концентрация глюкозы, ммоль/л * концентрация инсулина, мкЕд/мл)/22,5 [Matthews D.R. et al., 1985].

Жировую нагрузку (2 яйца и 200 мл 20% сливок) пациентам проводили утром натощак. Кровь для определения липидных параметров и САБ брали через 3 и 5 часов после жировой нагрузки [Saleh J. et al., 1998].

Определение САБ проводили методом иммуноферментного анализа [Cianflone К. et al., 1994, Cianflone К., Maslowska М., 1995]. Выделенный из плазмы крови человека САБ был любезно предоставлен сотрудником Гос НИИ особо чистых биопрепаратов проф. Кетлинским С.А.

Опыты на человеческих и мышиных фибробластах проводились сотрудниками отдела биохимии НИИЭМ СЗО РАМН Диже Э.Б. и Виноградовым А.Г. Фибробласты инкубировали с разными концентрациями САБ при 37°С в течение 1ч. Затем к культуре клеток добавляли С14-олеиновую кислоту и продолжали инкубацию еще 2 ч. в тех же условиях. О скорости синтеза ТГ судили по включению меченой олеиновой кислоты во внутриклеточные ТГ с помощью тонкослойной хроматографии (пластины Силикагель 60, «Мегск», Германия).

Активность ЛПЛ, полученной из плазмы крови, взятой из локтевой вены спустя 15 минут после введения гепарина (гепариновая проба) в дозе 50 МЕ/кг и замороженной при -70°С, определяли по освобождению жирных кислот из триглицеридов Интралипида фирмы «Vitrum» (Швеция) [Hosaka К. et al., 1981, Bengtsson-Olivecrona G., Olivecrona Т., 1992]. Предварительно в образцы добавляли антитела к печеночной триглицеридлипазе для подавления ее липолитиче-ской активности.

Статистическая обработка результатов

Статистический анализ данных проводился с использованием пакета программ "Statistica 7.0" Результаты обрабатывались обычными методами вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента для сравнения 2 групп, однофакторного дисперсионного анализа (one-way ANOVA test) при сравнении трех групп для нормально распределенных признаков. Перед проведением однофакторного дисперсионного анализа проводился анализ равенства дисперсий исследуемого параметра с помощью теста Левена. В случае различия дисперсий (р<0,05) проводился непараметрический дисперсионный анализ ANOVA по Краскелу-Уоллису. При обнаружении различий между группами применяли апостериорные сравнения средних попарных значений групп с помощью критерия Шеффе.

При распределении признака отличного от нормального применялся U-критерий Манна-Уитни для сравнения 2 групп, либо использовался анализ ANOVA по Краскелу-Уоллису для сравнения 3 групп. В случае обнаружения различий показателей между группами при использовании ANOVA по Краскелу-Уоллису проводилось парное сравнение групп с использованием непарамет-

рического теста Манна-Уитни, применяя поправку Бонферрони при оценке значения р.

При анализе трех связанных (зависимых) групп применялся непараметрический метод Фридмена. В случае имеющегося различия медиан (р<0,05) между группами проводился непараметрический тест Вилкоксона, применяя поправку Бонферрони при оценке значения р.

Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение (M±Sd), средних значений ± ошибка средних значений (М±т).

При анализе корреляций применялись как параметрические (простой линейной корреляции Пирсона), так и непараметрические коэффициенты (метод корреляции Спирмена).

Для анализа значимых компонентов использовался метод множественного регрессионного анализа. Все данные подвергались анализу вида их распределения с помощью теста Шапиро-Уилка. Найденные в работе различия считались достоверными при уровне значимости р<0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Выяснилось, что у пациентов с и-ГТГ и к-ДЛП помимо повышенного уровня в крови ТГ наблюдалось снижение содержания ХС ЛВП (табл. I). При этом концентрация апо А-1 была достоверно уменьшенной лишь у пациентов с и-ГТГ. Это может свидетельствовать о том, что при и-ГТГ понижается концентрация обеих фракций ЛВП, тогда как при к-ДЛП уменьшается преимущественно ЛВП2.

В обеих группах пациентов с гипертриглицеридемией отмечалось небольшое увеличение содержания глюкозы по сравнению с контролем, однако достоверности это увеличение достигало только у больных с к-ДЛП. У лиц с к-ДЛП и и-ГТГ повышено содержание в крови инсулина, увеличен ИМТ. Подобные изменения являются признаками инсулинорезистентности. Помимо этого, у лиц с к-ДЛП достоверно увеличено содержание в плазме крови НЭЖК, в то время как у лиц с и-ГТГ наблюдалась лишь тенденция к повышению.

Увеличенная концентрация НЭЖК на фоне предполагаемой инсулинорезистентности может приводить к усилению продукции ТГ-богатых липопро-теинов у обследованных групп пациентов.

Важной находкой является обнаружение сниженной активности ЛПЛ у пациентов с и-ГТГ, тогда как у лиц с к-ДЛП, у которых также значительно повышен уровень ТГ в крови, изменения активности ЛПЛ не наблюдалось.

Таблица 1

Характеристика пациентов с нормолипидемией, и-ГТГ и к-ДЛП (M±Sd)

Показатель Контроль и-ГТГ к-ДЛП

(п=20) (п=12) (п=14)

ТГ (ммоль/л) 1,3+0,5 4,2+1,1* 5,8+2,2*#

ОХС (ммоль/л) 4,4+0,8 5,3+1,0 8,2+1,6*#

ХС ЛВП (ммоль/л) 1,14+0,23 0,72+0,14* 0,90+0,14*

ХС ЛНП (ммоль/л) 2,7+0,9 2,7+1,1 4,7+1,2*#

НЭЖК (ммоль/л) 0,47+0,17 0,65+0,26 0,88+0,24*#

Глюкоза (ммоль/л) 5,3+0,9 5,9+1,0 6,8+1,0*

Инсулин(мкЕд/мл) 5,0+2,3 12,2+7,4* 11,0+4,7*

Активность ЛПЛ 9,0+3,2 5,6+3,4* 9,6+3,7#

(ммоль/л/ч)

Ano В(мг/дл) 50,9+15,0 58,5+17,2 65,9+22,9

Ano А1(мг/дл) 165,6+25,6 135,9+34,8* 172,6+27,8#

ИМТ (кг/м2) 26,2+4,0 31,1±4,7* 30,0+2,0*

Примечание: * р<0,05 по сравнению с группой контроля;

# р<0,05 между группами и-ГТГ и к-ДЛП

Учитывая, что липопротеиновая частица содержит только одну молекулу аполипопротеина В, нами было рассчитано отношение ТГ к ano В как показатель степени обогащения липопротеиновых частиц триглицеридами (рис. 1).

контроль и-ГТГ к-ДЛП

Рис. 1 Отношение ТГ/апо В у пациентов с нормолипидемией, и-ГТГ и к-ДЛП Примечание: * р<0,05 по сравнению с группой контроля

При этом учитывалось, что натощак в среднем около 90% всех плазменных ТГ находится в ЛОНП, тогда как в другой фракции ano В-содержащих ли-попротеинов - ЛНП транспортируется не более 10% ТГ плазмы [Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999]. Оказалось, что у пациентов с и-ГТГ и к-ДЛП отношение ТГ/апо В было значительно увеличено, по сравнению с лицами с нормоли-пидемией. В то же время достоверных различий между группами с гипертриглицеридемиями не наблюдалось.

Далее был проведен корреляционный анализ. Оказалось, что у пациентов с нормолипидемией имеет место отрицательная взаимосвязь между отношением ТГ/апо В и активностью ЛПЛ (г = -0,56, р < 0,01). В то время как у пациентов с и-ГТГ и к-ДЛП она отсутствует. Эти данные свидетельствуют о том, что у пациентов с нормолипидемией в отличие от больных с гипертриглицеридемиями насыщенность липопротеинов триглицеридами (или размер частицы) зависит главным образом от активности ЛПЛ.

Далее, обращают на себя внимание значимые положительные корреляции между отношением ТГ/апо В и концентрациями НЭЖК (г = 0,57, р < 0,05) и глюкозы (г = 0,57, р < 0,05) у пациентов с к-ДЛП. Это свидетельствует о том, что насыщенность триглицеридами ЛП возрастает при увеличении концентрации НЭЖК и глюкозы, что обычно наблюдается при развитии инсулинорези-стентности.

У пациентов с и-ГТГ также выявлена прямая корреляция между отношением ТГ/апо В и содержанием НЭЖК (г = 0,70, р < 0,05) Кроме этого, в данной группе обнаружены отрицательные корреляции между ТТ/апо В и такими параметрами как концентрации ХС ЛВП (г = -0,59, р < 0,05), апо-А1 (г = -0,59, р < 0,05), ОХС (г = -0,60, р< 0,05) и ХС ЛНП (г = -0,85, р < 0,001).

Таким образом, как и ожидалось, в норме насыщенность липопротеинов триглицеридами связана с активностью ЛПЛ, в то время как при гипертригли-церидемиях - с концентрацией НЭЖК. Повышенная концентрация НЭЖК на фоне предполагаемой инсулинорезистентности способствует увеличению продукции печенью обогащенных триглицеридами липопротеинов у пациентов с гипертриглицеридемиями.

Нарушение удаления ТГ-богатых частиц из плазмы крови

Как известно, основную роль в удалении из крови ТГ-богатых частиц играет липопротеинлипаза - фермент, расположенный на эндотелии сосудов. Замедление гидролиза ТГ-богатых частиц данным ферментом может являться одной из основных причин нарушения катаболизма этих частиц.

Нужно отметить, что до настоящего времени остается недостаточно выясненным вопрос о характере связи активности ЛПЛ с развитием дислипопро-теинемии. С этой целью в настоящей работе была определена не только активность фермента, но и проанализирована эффективность липолиза у пациентов с различными нарушениями липидного обмена.

Как указывалось выше, было выявлено снижение средней активности ЛПЛ у лиц с и-ГТГ, тогда как у пациентов с к-ДЛП активность этого фермента не отличалась от таковой у лиц с нормолипидемией. Это позволило предположить, что у пациентов с и-ГТГ важной причиной повышения концентрации ТГ в плазме крови является нарушение липолиза ТГ в ЛОНП вследствие низкой активности ЛПЛ.

Причины снижения активности фермента у лиц с и-ГТГ остаются неясными. Ранее было показано, что мутации гена ЛПЛ, влекущие за собой изменение активности фермента, встречаются довольно редко в нашей популяции [Демидова Д.В. и др., 2001]. Как было отмечено (табл. 1), повышение концентрации НЭЖК и инсулина, которые могут подавлять активность ЛПЛ, у пациентов с к-ДЛП было как минимум не менее выраженным по сравнению с пациентами с и-ГТГ, однако не оказывало существенного влияния на активность фермента.

Помимо определения активности фермента по отношению к стандартному субстрату (Интралипиду) нами проводилась оценка эффективности липолиза плазменных ТГ in vivo. С этой целью пациентам вводили гепарин, который освобождает ЛПЛ, фиксированную на эндотелии сосудов, и способствует таким образом ее активации. Об эффективности липолиза судили по уменьшению концентрации ТГ в крови в течение 15 мин.

Было выявлено, что абсолютное снижение концентрации ТГ после введения гепарина было близким в обеих группах пациентов с гипертриглицериде-миями и более чем в 2 раза превышало таковое в контроле. И это вполне естественно, поскольку концентрации субстратов липолиза (ТГ) существенно отличались в указанных группах. Однако при этом в контрольной группе снижение уровня ТГ по отношению к исходному составило 20% , у лиц с и-ГТГ - 19%, а у пациентов с к-ДЛП - 17%.

Величина коэффициента, характеризующего эффективность липолиза (отношение абсолютного снижения ТГ к единице ферментативной активности ЛПЛ), была максимальной у пациентов с и-ГТГ, тогда как величина этого показателя у пациентов с к-ДЛП была примерно в 2 раза меньше. Эффективность липолиза наиболее низкой оказалась у лиц с нормолипидемией (табл.2).

Полученные данные позволяют сделать несколько заключений. Во-первых, в норме у человека активность ЛПЛ избыточна по отношению к концентрации ТГ в крови натощак, о чем свидетельствует низкая концентрация ТГ и высокая активность ЛПЛ при низкой эффективности липолиза. Такая ситуация позволяет быстро справляться с резким повышением концентрации ТГ в крови после приема пищи.

Во-вторых, низкой активности ЛПЛ, обнаруженной у пациентов с и-ГТГ, несмотря на очень высокую эффективность работы фермента, недостаточно для адекватного гидролиза ТГ, что и приводит накоплению последних в крови.

Таблица 2

Активность ЛПЛ и эффективность липолиза у обследованных пациентов

(М+т)

Показатели 1. Контроль (п=20) 2. и-ГТГ (п=12) 3. к-ДЛП (п=14)

ТГ1 (ммоль/л) 1,29+0,11 4,23+0,32 5,78+0,59 Р1-Р2 < 0,001 Р1-РЗ <0,001 Р2-РЗ < 0,05

ТГ2 (ммоль/л) 1,03+0,10 3,41+0,36 4,80+0,61 Р1-Р2 < 0,001 Р1-РЗ <0,001

ДТГ (ммоль/л) 0,27+0,02 0,76+0,16 0,83+0,22 Р1-Р2< 0,001 Р1-РЗ <0,001

ЛПЛ (ммоль/л/ч) 9,03+0,71 5,57+0,99 9,63+1,00 Р1-Р2 < 0,01 Р2-РЗ <0,01

Д ТГ/ЛПЛ 0,04+0,01 0,20+0,05 0,09+0,02 Р1-Р2< 0,001 Р1-Р3< 0,001

Корреляция Д ТГ и ЛПЛ: г = -0,52; р = 0,02 Д ТГ и ЛПЛ: г = 0,20; р = 0,54 ДТГ и ЛПЛ: г = 0,10; р= 0,74

Примечание-. ТГ1 - концентрация ТГ до введения гепарина, ТГ2 - концентрация ТГ через 15 мин после введения гепарина, Д ТГ = ТГ1-ТГ2

Самая интересная картина наблюдается при к-ДЛП. Несмотря на высокую активность ЛПЛ концентрация ТГ в крови повышена. Одной из причин этого может быть низкая эффективность липолиза, наблюдаемая у этих пациентов. И действительно, активность ЛПЛ у них примерно в 1,7 раз более высокая, чем у пациентов с и-ГТГ, в то время как эффективность работы фермента ЛПЛ у пациентов с к-ДЛП в 2,2 раза более низкая по сравнению с пациентами с и-ГТГ, что в итоге приводит к сравнимому повышению концентрации ТГ в крови. Можно предположить, что низкая эффективность липолиза у лиц с к-ДЛП связана с тем, что их ЛОНП обогащены холестерином и вследствие этого являются менее подходящим субстратом для ЛПЛ, чем в норме или при и-ГТГ.

Суммируя вышеизложенное, следует подчеркнуть, что эффективность липолиза зависит не только от активности ЛПЛ. Так, при и-ГТГ наблюдалось снижение активности ЛПЛ в 1,6 раз по сравнению с нормолипидемией, однако эффективность липолиза у этих пациентов была самой высокой (в 5 раз больше по сравнению с нормолипидемией). Это, на наш взгляд, свидетельствует о том, что у этих пациентов снижено количество фермента, расположенного на эндотелии сосудов, при его нормальной функциональной активности. Причины снижения количества ЛПЛ остаются невыясненными. В то же время у пациентов с к-ДЛП на фоне нормальной активности ЛПЛ наблюдалась относительно низкая эффективность липолиза. Эти данные свидетельствуют, во-первых, о

различиях в механизмах нарушения липолиза при разных типах ДЛП, а, во-вторых, о целесообразности определять эффективность липолиза наряду с определением активности ЛПЛ для оценки механизмов нарушения метаболизма ТГ в крови.

Таким образом, полученные результаты позволяют говорить о том, что нарушение гидролиза ТГ является одной из причин повышения концентрации ТГ в крови при изученных типах ДЛП. При этом, у лиц с и-ГТГ замедление катаболизма ТГ обусловлено снижением количества нормально функционирующей ЛПЛ, тогда как у пациентов с к-ДЛП причиной накопления ТГ в крови является снижение эффективности липолиза, связанное скорее всего с изменением физико-химического состояния субстрата липолиза (ЛОНП).

Стимулирующий ацилирование белок

Около 20 лет назад был открыт белок, стимулирующий включение жирных кислот в триглицериды - САБ. На основании экспериментальных и клинических данных было постулировано, что САБ вносит существенный вклад в регуляцию (стимуляцию) включения НЭЖК в ТГ (ацилирование глицерина) и как следствие регулирует захват НЭЖК жировой тканью. Предполагается, что снижение количества САБ приводит к замедлению удаления НЭЖК из крови, что, посредством подавления активности ЛПЛ, способствует нарушению гидролиза ТГ.

В опытах на мышиных и человеческих фибробластах нами было показано, что САБ в концентрации 10-30 мкг/мл повышал включение 14С-олеиновой кислоты в ТГ на 14-36% (р<0,05). Эти данные свидетельствуют о том, что САБ способен активировать синтез ТГ, хотя степень этой активации была весьма невысокой. Было показано также отсутствие видовой специфичности в действии САБ на синтез ТГ в фибробластах.

При обследовании пациентов не было обнаружено достоверных различий в среднем содержании САБ между изучаемыми группами (нормолипидемия, и-ГТГ и к-ДЛП). При проведении корреляционного анализа не было обнаружено связи между концентрацией САБ, с одной стороны, и содержанием ТГ и ИМТ, с другой стороны, во всех группах пациентов, в том числе и у лиц с нормоли-пидемией.

Ранее было показано, что концентрация САБ увеличивается после приема пищи [СтпЯопе К. й а1., 1989, СЬаг1ез\УОгЛ 1А. й а1., 1998]. Это позволило авторам высказать предположение, что увеличение концентрации САБ является физиологической реакцией организма на постпрандиальное повышение концентрации ТГ в крови, направленной на обеспечение быстрого удаления из крови НЭЖК, освобождающихся в процессе липолиза, и их депонирование в жировой ткани. Эти сведения послужили основанием для изучения изменений концентрации САБ на фоне постпрандиальной гиперлипидемии.

Оказалось, что у лиц с нормолипидемией после жировой нагрузки уровень САБ существенно не изменялся на всех сроках наблюдения, в то время как

у пациентов с гипертриглицеридемией содержание САБ в плазме крови имело тенденцию к снижению как на 3 ч. (в среднем на 25%), так и на 5ч. (на 35%) наблюдения (рис. 2).

Таким образом, полученные результаты не подтверждают необходимость повышения содержания САБ в крови для обеспечения удаления НЭЖК из крови при нормолипидемии. В то же время, парадоксальное снижение концентрации САБ в крови при постпрандиальном повышении транспорта жирных кислот в крови у пациентов с гипертриглицеридемий, возможно, свидетельствует об истощении этой системы регуляции обмена жирных кислот при ДЛП.

-*-тг

-♦-ое

-и-ТГ

Рис. 2 Изменение величин САБ и ТГ под влиянием жировой нагрузки у лиц с нормолипидемией (А) и гипертриглицеридемией (Б)

Суммируя вышеизложенное, следует отметить, что САБ является стимулятором синтеза ТГ в фибробластах. Однако изучение концентрации САБ в крови у лиц с различными типами ДЛП натощак и после жировой нагрузки не подтверждает предположение о существенной роли САБ в регуляции удаления НЭЖК и ТГ из кровотока.

Роль повышения уровня НЭЖК в развитии гипертриглицеридемии

Ранее мы отмечали (табл.1) повышение концентрации НЭЖК, глюкозы, инсулина, ИМТ у лиц с гипертриглицеридемиями по сравнению с контролем. По данным корреляционного анализа, выявлены положительные корреляции уровня в крови ТГ с концентрацией НЭЖК (г = 0,67, р < 0,05), с ИМТ (г=0,47, р<0,05), и с содержанием инсулина (г = 0,42, р < 0,05). Помимо этого уровень ТГ отрицательно коррелировал с содержанием ХС ЛВП (г = -0,58, р < 0,05) и положительно - с концентрацией общего ХС (г = 0,76, р < 0,05). Концентрация НЭЖК коррелировала с уровнями инсулина (г = 0,55, р < 0,05), ОХС (г = 0,52, р < 0,05) и ИМТ (г = 0,44, р < 0,05). Изменения уровня инсулина в крови наиболее

сильно были связаны с величиной ИМТ (г = 0,59, р < 0,05), который в свою очередь отрицательно коррелировал с содержанием ХС ЛВП (г = -0,43, р < 0,05).

Чтобы установить, какой из изучаемых показателей является независимым предиктором высокой концентрации ТГ, был проведен множественный регрессионный анализ. В качестве зависимой переменной включали уровень ТГ в плазме крови. Независимыми переменными были ИМТ и показатели липид-ного и углеводного обмена. Выяснилось, что концентрация ТГ в плазме зависит от содержания НЭЖК (Р = 0,32, р < 0,05) и от уровня ХС ЛВП (Р = -0,35, р < 0,05). В свою очередь, уровень НЭЖК определяется только концентрацией инсулина (Р = 0,32, р < 0,05). Наконец, концентрация инсулина зависит, главным образом, от ИМТ (0 = 0,43, р < 0,01) и содержания НЭЖК (Р = 0,40, р < 0,05).

Представленные данные согласуются с гипотезой, что первичным нарушением у обследованных пациентов является увеличение массы тела, которое приводит к нарастанию концентрации инсулина в крови. Последнее является свидетельством инсулинорезистентности, которая ведет к повышению уровня в крови жирных кислот. Их усиленное поступление в печень вызывает увеличение продукции ЛОНП и, соответственно, повышение концентрации 'ГГ в плазме крови. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что в основе гипертриглицеридемии у пациентов с изучаемыми вариантами ДЛП лежат биохимические механизмы, которые связаны с развитием метаболического синдрома.

На основании полученных результатов и данных литературы можно представить следующую схему, описывающую роль нарушения обмена жирных кислот в развитии гипертриглицеридемий (рис.3). Прежде всего, следует отметить влияние повышенной концентрации НЭЖК на синтез ТГ-богатых частиц печенью и активность ЛПЛ. Далее, длительное повышение концентрации НЭЖК может приводить к развитию инсулинорезистентности. При инсулинорезистентности не наблюдается ингибирования ГЧЛ, что приводит к ещё большему возрастанию уровня НЭЖК. Длительное повышение концентрации НЭЖК способствует также нарушению синтеза инсулина поджелудочной железой вследствие апоптоза р-клеток с последующим развитием сахарного диабета.

Рис. 3 Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии гипертриглицеридемий

Параметр НЭЖЮТГ как показатель адекватности системы липолиза-эстерификации

Для оценки адекватности системы липолюа ТГ и поглощения НЭЖК клетками представлялось целесообразным рассмотреть дополнительный параметр НЭЖК/ТГ как величину, которая, как мы полагаем, отражает отношение суммарного количества НЭЖК плазмы крови к уровню в крови ТГ (рис.4).

0.45 0.4 0.35 Ь 0.3 22 0.25 ^ 0.2 0.15 0.1 0.05 0

СП

-0т4-2-

0.15

контроль

и-ГТГ

0.16

к-ДЛП

Рис.4 Средние величины коэффициента НЭЖК/ТГ в различных группах Примечание: * р<0,001 по сравнению с группой контроля

При анализе данных, полученных при обследовании пациентов с гипер-триглицеридемиями, было обнаружено, что величина отношения НЭЖК/ТГ почти в 3 раза меньше у пациентов с и-ГТГ и к-ДЛП по сравнению с контролем. В то же время между группами пациентов с изучаемыми формами гипертриг-лицеридемий достоверных различий по данному параметру выявлено не было. Таким образом, в обеих группах ГТГ имеет место нарушение баланса процессов липолиза-эстерификации.

Заключение

Результаты данного исследования свидетельствуют о важной роли нарушения липолиза в повышении концентрации ТГ в крови. Причем при разных типах ДЛП нарушение гидролиза ТГ имеет разную природу: при и-ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ, а при к-ДЛП - нарушение ее нормального функционирования, т.е. эффективности липолиза.

Помимо этого, существуют и другие механизмы, способствующие развитию гипертриглицеридемии. При совокупном рассмотрении всех факторов, ко-

торые могут приводить к развитию гипертриглицеридемии, было показано, что первичным нарушением у обследованных пациентов является увеличение массы тела с последующей гиперинсулинемией и повышением концентрации в крови НЭЖК, что свидетельствует о развитии у них метаболического синдрома. Гиперхолестеринемия у больных с к-ДЛП является, по-видимому, вторичной по отношению к возрастанию уровня ТГ в плазме крови. В связи с этим, дальнейшее изучение механизмов развития гипертриглицеридемии на фоне метаболического синдрома, в частности несемейных форм изолированной гипертриглицеридемии и комбинированной дислипопротеинемии, позволит разработать новые подходы и пути лечения этих заболеваний.

4. ВЫВОДЫ

1. У больных с и-ГТГ и с к-ДЛП отмечено нарушение липолиза ТГ в плазме крови. Причем у лиц с и-ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ — несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватного гидролиза ТГ. У пациентов с к-ДЛП активность ЛПЛ остается в пределах нормы, однако эффективность липолиза у этих пациентов ниже, чем при и-ГТГ, по-видимому, из-за обогащения ЛОНП холестерином.

2. Группы больных с несемейными формами гипертриглицеридемий - изолированной гипертриглицеридемии и комбинированной дислипопротеинемии (и-ГТГ и к-ДЛП), несмотря на выявленные различия, имеют много общего в механизмах развития нарушений обмена ТГ.

3. САБ вызывает слабую стимуляцию синтеза ТГ у мышиных и человеческих фибробластов. Вместе с тем, концентрация в крови данного белка не взаимосвязана с параметрами липидного обмена.

4. Согласно регрессионному анализу, концентрации НЭЖК и ХС ЛВП являются независимыми детерминантами уровня ТГ. При этом концентрация инсулина оказывает независимое влияние на уровень НЭЖК. Концентрация НЭЖК и ИМТ являются независимыми детерминантами уровня инсулина.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Фролова Ю.В., Агеева Е.В., Виноградова Т.В, Олейник И.А., Жданова О.Ю., Зайцева Н.С., Калашникова Н.М., Денисенко А.Д. Роль активности липопро-теидлипазы, гиперинсулинемии и уровня неэстерифицированных жирных кислот в развитии дислипопротеидемий. Мед. акад. журн. - 2005. - Т5. -№4. - С.43-49.

2. Агеева Е.В., Зайцева Н.С., Жданова О.Ю., Фролова Ю.В. Характеристика метаболических изменений, наблюдающихся при комбинированной дисли-пидемии. Материалы научно-практической конференции для молодых ученых. «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». Астрахань, 2004. - С.65-67.

3. Агеева Е.В., Фролова Ю.В., Никульчева Н.Г., Денисенко А.Д. Интенсивность (эффективность) липолиза у пациентов с различными формами гипер-триглицеридемий. Кардиоваск. тер. и профилакт. - 2008. - Т.7(6). - Прилож. № 1.-С.16.

4. Агеева Е.В., Фролова Ю.В., Зайцева Н.С., Жданова О.Ю., Виноградова Т.В., Никульчева Н.Г., Денисенко А.Д. Взаимосвязь различных показателей ли-пидного и углеводного обмена в развитии гипертриглицеридемий. Кардиоваск. тер. и профилакт. -2008. -Т.7(6). -Прилож. № 1. - С.17.

5. Ageeva E.V., Frolova Yu.V., Bondar K.V., Denisenko A.D. The role of lipoprotein lipase activity, hyperinsulinemia and free fatty acids in genesis of combined hyperlipoproteinemia and hypertriglyceridemia. Abstract of Metabolic Syndrome, type II Diabetes and Atherosclerosis Congress-2009, Berlin, Germany, P.84.

6. Ageeva E.V., Frolova Yu.V., Denisenko A.D. The role of lipoprotein lipase activity, hyperinsulinemia and free fatty acids in genesis of dyslipidemias. Abstract of International Symposium on Atherosclerosis-2009, Boston, USA. Atheroscler. Suppl.- 2009. -Vol. 10(2).

ЛР№ 020365

Подписано в печать 21.10.2009 г. Заказ № 1583 Формат бумаги 60x84. Тираж 100 экз. усл. п.л. 1,0

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Типография ООО «КАРО» Санкт-Петербург, Красногвардейская пл., д. 3

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Агеева, Елена Викторовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы.

Цели и задачи исследования.

Основные положения, выносимые на защиту.

Научная новизна работы.

Теоретическое и практическое значение работы.

Апробация работы.II

Личный вклад.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Классификация дислипопротеинемий.

2.2. Механизмы формирования гипертриглицеридемий.

2.2.1. Нарушение образования ТГ— богатых ЛП печенью.

Вклад новосинтезированных печенью ЖК в образовании ЛОНП.

ЖК, поступившие в гепатоциты в составе ремнантов ЛП.

НЭЖК плазмы крови, поступающие в гепатоциты.

2.2.2. Замедление катаболизма ТГ — богатых ЛП.

ЛПЛ как основной фермент гидролиза ТГ - богатых частиц в плазме крови.

Стимулирующий ацилирование белок.

2.3. Развитие гипертриглицеридемии на фоне инсулиновой резистентности / гиперинсулинемии. Роль жирных кислот в развитии инсулиновой резистентности.

Метаболический синдром.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Пациенты и образцы плазмы крови.

3.2. Оценка биохимических параметров в плазме крови пациентов.

3.3. Статистическая обработка результатов.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.1. Сравнение биохимических показателей обследованных групп.

2.1.1. Параметр ТГ/апо В как показатель обогащенности ТГ ano В — содержащих ЛП.

4.2. Нарушение удаления ТГ - богатых частиц из плазмы крови.

4.2.1. ЛПЛ как возможный фактор развития дислипопротеинемий.

Роль активности ЛПЛ в повышении концентрации ТГ.

Оценка эффективности липолиза у групп больных с гипертриглицеридемиями.

Концентрации ano В — содержащих ЛП в зависимости от активности ЛПЛ у обследованных пациентов.

4.2.2. Влияние САБ на уровень ТГ.

Взаимосвязь уровня САБ с уровнем ТГ у различных групп больных.

Содержание САБ в плазме крови при постпрандиальной гипертриглицеридемии у различных групп больных.

Влияние САБ на синтез ТГ in vitro.

4.3. Нарушение образования ТГ - богатых ЛП.

4.3.1. Роль НЭЖК в развитии гипертриглш^еридемии при инсулиновой резистентности.

4.3.2. Параметр НЭЖК/ТГ как показатель адекватности системы липолиза — эстерификации.

4.4. Регрессионный анализ показателей.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии дисплипротеинемий"

Актуальность проблемы

Сердечно - сосудистые заболевания справедливо называют эпидемией 20 века, которая, к сожалению, продолжается и в 21 веке. В течение многих десятилетий они являются ведущей причиной смертности населения в индустриально развитых странах, в том числе и в России [Оганов Р.Г., 2003].

В Государственном докладе о состоянии здоровья Российской Федерации в 2004 (доклад опубликован в 2006г) содержатся данные о том, что показатели смертности от сердечно - сосудистых заболеваний в России в 2 - 4 раза выше, чем в западноевропейских странах и пока наблюдается тенденция к росту смертности. За 2004 год население России уменьшилось на 0,7 млн. человек, из них от сердечно - сосудистых заболеваний умерло 47,6% .

К сердечно - сосудистых заболеваниям относят ишемическую болезнь сердца (ИБС), инсульт, поражения периферических артерий и ряд других заболеваний. В структуре смертности от сердечно — сосудистых заболеваний около 85 - 90% приходится на долю инсульта и ИБС [Оганов Р.Г., 2003]. Ведущая роль в патогенезе этих заболеваний принадлежит атеросклерозу. Изучение механизмов развития атеросклероза по — прежнему остаётся актуальной проблемой современной медицинской науки.

Многочисленные экспериментальные, клинические и эпидемиологические данные убедительно свидетельствуют о ключевой роли дислипопротеинемий (ДЛП) в патогенезе атеросклероза и его клинических проявлений [Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1980, Мамедов М.Н., 2006, Pejic R.N., Lee D.T., 2006].

Несмотря на то, что причины возникновения некоторых ДЛП хорошо изучены, тем не менее механизмы происхождения большинства ДЛП, в частности гипертриглицеридемий, а именно — несемейных форм комбинированной дислипопротеинемии (к - ДЛП) и изолированной гипертриглицеридемии (и - ГТГ), до настоящего времени окончательно не выяснены.

Предполагается, что одной из главных причин развития вышеперечисленных гипертриглицеридемий является нарушение в системе образования и транспорта неэстерифицированных жирных кислот (НЭЖК) в плазме крови. Важную роль в регуляции метаболизма жирных кислот играют липопротеинлипаза (ЛТТЛ) и гормон - чувствительная липаза (ГЧЛ), увеличение активности которых приводит к повышению концентрации жирных кислот в плазме крови. Однако механизм связи между активностью липопротеидлипазы и уровнем триглицеридов вплоть до настоящего времени недостаточно изучен.

Более двадцати лет назад в плазме крови был обнаружен белок, увеличивающий поступление жирных кислот в жировые и мышечные клетки за счет стимуляции внутриклеточного синтеза триглицеридов [Teng В. et al., 1983, Cianflone К. et al., 1989b]. Этот белок получил название - стимулирующий ацилирование белок (САБ). Несмотря на то, что белок был открыт более двадцати лет назад, его функции до настоящего времени недостаточно изучены. Предполагается, что от концентрации этого белка зависит содержание в крови жирных кислот. Однако данные литературы относительно роли САБ организме весьма противоречивы.

Известно также, что важную роль в регуляции образования и транспорта НЭЖК играет инсулин [Ong J.M. et al., 1988] При инсулинорезистентности происходит увеличение концентрации НЭЖК в плазме крови, что в свою очередь приводит к развитию гипертриглицеридемии [Lewis G.F. et al., 1995].

Следовательно, к настоящему времени известны несколько возможных причин возникновения недостаточно изученных вариантов гипертриглицеридемий. Вместе с тем, следует отметить отсутствие объективного способа оценки эффективности работы всей системы образования и транспорта НЭЖК в плазме крови в целом. Это позволило бы определить роль не только ЛПЛ, но и проанализировать суммарный эффект всех факторов, участвующих в регуляции синтеза триглицеридов и их элиминации из плазмы крови.

Цели и задачи исследования

Целью настоящего исследования являлось изучение роли нарушения обмена жирных кислот в возникновении и — ГТГ и к - ДЛП и выяснение механизмов их развития. В связи с этим перед нами стояли следующие практические задачи:

1) Провести сравнительную оценку нарушения системы липолиза у больных с и - ГТГ и к - ДЛП.

2) Изучить взаимосвязь активности липопротеинлипазы с уровнем жирных кислот в плазме крови у обследованных пациентов. Разработать способ оценки эффективности действия липолитической системы в целом.

3) Провести сравнительную оценку связи САБ с уровнем триглицеридов (ТГ) у пациентов с и - ГТГ и к - ДЛП натощак и при жировой нагрузке. Изучить влияние этого белка на внутриклеточный синтез триглицеридов в мышиных и человеческих фибробластах.

4) Оценить взаимосвязь всех факторов, участвующих в регуляции синтеза триглицеридов и их элиминации из плазмы крови у пациентов с изучаемыми формами ДЛП.

Основные положения, выносимые на защиту

ЛПЛ и гидролизованными ТГ (величина отношения количества гидролизованных частиц ТГ под действием фермента к активности липопротеинлипазы).

2. Важную роль в развитии гипертриглицеридемий у больных с и - ГТГ и к - ДЛП играет нарушение липолиза ТГ в плазме. Причем у лиц с и - ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ - несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватный гидролиз ТГ. У пациентов с к - ДЛП активность ЛПЛ остается в пределах нормы, однако, эффективность липолиза у этих пациентов ниже, чем при и — ГТГ, по — видимому, вследствие обогащения липопротеинов очень низкой плотности (ЛОНП) холестерином.

4. Отношение концентрации неэстерифициро ванных жирных кислот к уровню триглицеридов снижено у больных с гипертриглицеридемиями по сравнению с лицами с нормолипидемией, что указывает на нарушение баланса процессов липолиза триглицеридов и эстерификации жирных кислот у больных с и - ГТГ и к - ДЛП.

Научная новизна работы

Впервые показано, что в основе развития гипертриглицеридемии при некоторых формах изолированной гипертриглицеридемии и комбинированной дислипопротеинемии лежат сходные биохимические механизмы, которые связаны с развитием метаболического синдрома.

Впервые предложено использовать величину отношения количества гидролизованных триглицеридов к активности липопротеинлипазы в качестве показателя эффективности действия данного фермента. Впервые установлено, что важную роль в развитии гипертриглицеридемий у больных с и — ГТГ и к — ДЛП играет нарушение липолиза ТГ в плазме. Причем у лиц с и — ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ - несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватного гидролиза ТГ. У пациентов с к - ДЛП активность ЛПЛ в пределах нормы, однако эффективность липолиза у этих лиц ниже, чем при и — ГТГ, по — видимому, вследствие обогащения ЛОНП холестерином.

Предложен показатель нарушения баланса процессов липолиза -эстерификации: отношение уровня неэстерифицированных жирных кислот к концентрации триглицеридов (НЭЖК/ТГ). Этот показатель достоверно снижен у больных с изучаемыми формами гипертриглицеридемий по сравнению с нормолипидемией. В то же время отсутствует различие этого отношения между группами с и - ГТГ и к - ДЛП.

Теоретическое и практическое значение работы

Результаты настоящего исследования расширяют представления о механизмах развития некоторых форм дислипопротеинемий, таких как несемейные формы комбинированной дислипопротеинемии и изолированной гипертриглицеридемии. Установлено, что важную роль при этом играет комплекс обменных нарушений, связанных с метаболическим синдромом, что является важным для понимания роли каждого из этих показателей в развитии сердечно — сосудистых заболеваний.

Практическое значение работы состоит в том, что в качестве оценки системы липолиза - эстерификации предложено использовать величину отношения уровня неэстерифицированных жирных кислот в крови к концентрации триглицеридов, что открывает перспективу для применения данного показателя в клинике. Для использования в клинической практике также предложен показатель эффективности липопротеинлипазы — это отношение гидролизованных триглицеридов к активности данного фермента. Полученные результаты могут быть использованы для диагностики нарушений липидного обмена и определения способов коррекции этих нарушений.

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК.

Материалы диссертации докладывались и обсуждались на Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2008), на международном конгрессе -6 th Metabolic Syndrome, type II Diabetes and Atherosclerosis Congress (Берлин, Германия, 2009), на международном симпозиуме по атеросклерозу -2009 International Symposium on Atherosclerosis (Бостон, США, 2009). Результаты диссертации также были опубликованы в материалах научно — практической конференции с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2004).

Личный вклад

Соискателем самостоятельно проведено большинство экспериментов, включая работу на клиническом материале. Соискателем также самостоятельно проведена статистическая обработка результатов исследований, включая дисперсионный, корреляционный, регрессионный анализ. Соискатель самостоятельно проводил анализ данных литературы и сопоставление их с результатами собственных исследований.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Агеева, Елена Викторовна

7. ВЫВОДЫ

1. У больных с и - ГТГ и с к — ДЛП отмечено нарушение липолиза ТГ в плазме крови. Причем у лиц с и - ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ - несмотря на высокую эффективность функционирования фермента, его дефицит не позволяет обеспечивать адекватного гидролиза ТГ. У пациентов с к — ДЛП активность ЛПЛ остается в пределах нормы, однако эффективность липолиза у этих пациентов ниже, чем при и — ГТГ, по - видимому, из - за обогащения ЛОНП холестерином.

2. Группы больных с несемейными формами гипертриглицеридемий — изолированной гипертриглицеридемии и комбинированной дислипопротеинемии (и - ГТГ и к - ДЛП), несмотря на выявленные различия, имеют много общего в механизмах развития нарушений обмена ТГ.

6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты данного исследования свидетельствуют о важной роли нарушения липолиза в повышении концентрации ТГ в крови. Причем при разных типах ДЛП нарушение гидролиза ТГ имеет разную природу: при и -ГТГ ведущее значение имеет дефицит ЛПЛ, а при к - ДЛП - нарушение ее нормального функционирования, т.е. эффективности липолиза.

Помимо этого, существуют и другие механизмы, способствующие развитию гипертриглицеридемии. При совокупном рассмотрении всех факторов, которые могут приводить к развитию гипертриглицеридемии, было показано, что первичным нарушением у обследованных пациентов является увеличение массы тела с последующей гиперинсулинемией и повышением концентрации в крови НЭЖК, что свидетельствует о развитии у них метаболического синдрома. Гиперхолестеринемия у больных с к - ДЛП является, по — видимому, вторичной по отношению к возрастанию уровня ТГ в плазме крови. В связи с этим, дальнейшее изучение механизмов развития гипертриглицеридемий на фоне метаболического синдрома, в частности несемейных форм изолированной гипертриглицеридемии и комбинированной дислипопротеинемии, позволит разработать новые подходы и пути лечения этих заболеваний.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Агеева, Елена Викторовна, Санкт-Петербург

1. Беляков H.A., Сеидова Г.Б., Чубриева С.Ю. и др. Метаболический синдром у женщин патофизиология и клиника. //СПб: Изд.дом СПбМАПО, 2005. 440с.

2. Государственный доклад о состоянии здоровья Российской Федерации в 2004. // Здравоохранение Российской Федерации. 2006. - №3 - С.З - 23; №4. - С. 3 - 32; №5. С. - 3 - 25.

3. Демидова Д.В., Ларионова В.И., Волкова М.В. и др. Анализ влияния структуры генов липопротеиновой липазы, аполипопротеинов С III и Е на развитие гиперлипидемии. // Кардиология — 2001. - №8. - С. 17 -22.

4. Денисенко А.Д. Система транспорта липидов в крови. // Актовая речь на заседании Ученого Совета НИИЭМ РАМН / СПб, 1999. 18с.

5. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Дислипопротеидемия и ишемическая болезнь сердца. / ред. Е.И.Чазов // М.:Медицина, 1980. 312с.

6. Климов А.Н., Гуревич B.C., Никифорова. A.A. и др. Антиоксидантная активность липопротеидов высокой плотности in vivo. // Бюлл.эксп.биол.мед. 1992. - №114. - С. 40 - 42.

7. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения. // СПб: Питер Ком., 1999. 512 с.

8. Мамедов М.Н. Целесообразность применения фибратов для первичной и вторичной профилактики сердечно сосудистых осложнений. / М.Н.Мамедов // Кардиология. - 2006. - №46. - С.39 — 47.

9. Оганов Р.Г. Факторы риска и профилактика сердечно сосудистых заболеваний. // Качество жизни. - 2003. - №2. — С.Ю - 15.

10. Парфенова Н.С. Метаболический синдром. // Российский кардиологический журнал. 1998. - №2. - С.42 - 48.

11. Хечинашвили Г.Г., Никульчева Н.Г. Липопротеидлипаза, печеночная триглицеридная липаза и некоторые другие липолитические ферменты животного организма. // Успехи биол.химии. 1980. — № 21.-С. 163- 184.

12. Чазова И.Е., Мычка В.Б. Метаболический синдром. // М.: Медиа Медика, 2008. 324с.

13. Шестов Д.Б. Расчет холестерина липопротеидов низкой плотности в миллимолях. // Лаб.дело. 1985. - № 6. - С. 381.

14. Aarsland A., Chinkes D., Wolfe R.R. Contributions of de novo synthesis of fatty acids to total VLDL triglyceride secretion during prolonged Ьурещ1усегтаЛ1урегт8иНпе1ша in normal man. // J.Clin.Invest. - 1996. -Vol. 98.-P. 2008-2017.

15. Adiels M., Packard C., Caslake M.J. et al. A new combined multicompartmental model for apolipoprotein В 100 and triglyceride metabolism in VLDL subtractions. // J.Lipid Res. - 2005. - Vol. 46. - P. 58. - 67.

16. Aitrnan T.J., Godsland I.F., Farren B. et al. Defects of insulin action on fatty acid and carbohydrate metabolism in familial combined hyperlipidemia. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 1997. - Vol. 17. - P. 748 - 754.

17. Alaupovic P., Curry M., McConathy W. Quantitative determination of human plasma apolipoproteins by electroimmunoassays. // International Conference on Atherosclerosis. / ed. L. Carlson. N - Y:Raven Press, 1978.-P. 109-115.

18. Allain C.C., Poon L.S., Chan C.S. et al. Enzymatic determination of total serum cholesterol. // Clin.Chem. 1974. - Vol. 20. - P. 470 - 475.

19. Amri E.Z., Teboul L., Vannier C. et al. Fatty acids regulate the expression of lipoprotein lipase gene and activity in preadipose and adipose cells. / // BiochemJ. 1996. - Vol. 314. - P. 541 - 546.

20. Ascaso J.F., Merchante A., Lorente R.I. et al. A study of insulin resistance using the minimal model in nondiabetic familial combined hyperlipidemic patients. // Metabolism 1998. - Vol. 47. - P. 508 - 513.

21. Avramoglu R.K., Cianflone K., Sniderman A.D. Role of the neutral lipid accessible pool in the regulation of secretion of apoB 100 lipoprotein particles by HepG2 cells. // J.Lipid Res. - 1995. - Vol. 36 - P. 2513 -2528.

22. Babirak S.P., Brown B.G., Brunzell J.D. Familial combined hyperlipidemia and abnormal lipoprotein lipase. // Arterioscler.Thromb. 1992. — Vol. 12. -P. 1176-1183.

23. Baldeweg S.E., Golay A., Natali A. et al. Insulin resistance, lipid and fatty acid concentrations in 867 healthy Europeans. European Group for the Study of Insulin Resistance EGIR. // Eur.J.Clin.Invest. 2000. - Vol. 30. -P. 45 - 52.

24. Baldo A., Sniderman A.D., St Luce S. et al. The adipsin - acylation stimulating protein system and regulation of intracellular triglyceride synthesis. //J.ClinJnvest. - 1993. - Vol. 92. ~ P. 1543 - 1547.

25. Barter P., McPherson Y.R., Song K. et al. Serum insulin and inflammatory markers in overweight individuals with and without dyslipidaemia. // J.Clin.Endocrinol.Metab. 2007. - Vol. 92. - P. 2041 - 2045.

26. Bauduceau B., Baigts F., Bordier L. et al. Epidemiology of the metabolic syndrome in 2045 French military personnel EPIMIL study. // Diabetes Metab. 2005. - Vol. 31. - 4 Pt. 1 - P. 353 - 359.

27. Beaumont J.L., Carlson L.A., Cooper G.R. et al. Classification of hyperlipidaemias and hyperlipoproteinaemias. // Bull. World Health Organ. 1970. - Vol. 43. -P. 891 - 915.

28. Bengtsson G., Olivecrona T. Lipoprotein lipase. Mechanism of product inhibition. // Eur.J.Biochem. 1980. - Vol. 106. - P. 557 - 562.

29. Bengtsson Olivecrona G., Olivecrona T. Assay of lipoprotein lipase and hepatic lipase. // Lipoprotein analysis: A practical approach. / ed. C. Converse, E. Skinner. - UK:Oxford University Press, 1992. - P. 169 - 185.

30. Bhattacharya S., Dey D., Roy S.S. Molecular mechanism of insulin resistance. // J.Biosci. 2007. - Vol. 32. - P. 405 - 413.

31. Bieberdorf F.A., Chernick S.S., Scow R.O. Effect of insulin and acute diabetes on plasma FFA and ketone bodies in the fasting rat // J.Clin.Invest. 1970. - Vol. 49. - P. 1685 - 1693.

32. Boden G., Chen X. Effects of fat on glucose uptake and utilization in patients with non insulin - dependent diabetes. // J.Clin.Invest. - 1995. -Vol. 96.-P. 1261- 1268.

33. Boden G., Lebed B., Schatz M. et al. Effects of acute changes of plasma free fatty acids on intramyocellular fat content and insulin resistance in healthy subjects. // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 1612 - 1617.

34. Boden G., She P., Mozzoli M. et al. Free fatty acids produce insulin resistance and activate the proinflammatory nuclear factor kB pathway in rat liver. // Diabetes. - 2005. - Vol. 54. - P. 3458 - 3465.

35. Boden G., Shulman G.I: Free fatty acids in obesity and type 2 diabetes: defining their role in the development of insulin resistance and beta cell dysfunction. // Eur.J.Clin.Invest. - 2002. - Vol. 32. - P. 14 - 23.

36. Braun J.E., Severson D.L. Regulation of the synthesis, processing and translocation of lipoprotein lipase. // Biochem.J. 1992. - Vol. 287. - P. 337-347.

37. Brouwers M.C., Bilderbeek Beckers M.A., Georgieva A.M. et al. Fatty liver is an integral feature of familial combined hyperlipidaemia: relationship with fat distribution and plasma lipids. // Clin.Sci. (Lond). -2007. - Vol. 112. - P. 123 - 130.

38. Brown A.M., Gibbons G.F. Insulin inhibits the maturation phase of VLDL assembly via a phosphoinositide 3-kinase-mediated event. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. -2001.- Vol. 21. P. 1656-1661.

39. Browning J.D., Norton J.D. Molecular mediators of hepatic steatosis and liver injury. // J.Clin.Invest. 2004. - Vol. 114. - P. 147 - 152.

40. Bucolo G., David H. Quantitative determination of serum triglycerides by the use of enzymes. // Clin.Chem. 1973. - Vol. 19. - P. 476 - 482.

41. Caballería L., Auladell M.A., Torán P. et al. Risk factors associated with non alcoholic fatty liver disease in subjects from primary care units. A case - control study. // BMC Gastroenterol. - 2008. - 8:44.

42. Cahová M., Vavrínková H., Kazdová L. Glucose — fatty acid interaction in skeletal muscle and adipose tissue in insulin resistance. // Physiol.Res. -2007.-Vol. 56.-P. 1-15.

43. Camps L., Reina M., Llobera M. et al. Lipoprotein lipase in lungs, spleen, and liver: synthesis and distribution. // J.Lipid Res. 1991. - Vol. 32. - P. 1877- 1888.

44. Carpentier A., Mittelman S.D., Lamarche B. et al. Acute enhancement of insulin secretion by FFA in humans is lost with prolonged FFA elevation. // Am.J.Physiol. 1999. -276. - P. E1055 -E1066.

45. Chait A., Albers J.J., Brunzell J.D. Very low density lipoprotein overproduction in genetic forms of hypertriglyceridaemia. // Eur.J.Clin.Invest. 1980. - Vol. 10. - P. 17 - 22.

46. Charlesworth J.A., Peake P.W., Campbell L.V. et al. The influence of oral lipid loads on acylation stimulating protein (ASP) in healthy volunteers // Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord. 1998. Vol. 22. - P. 1096 - 1102.

47. Chobanian A.V., Bakris G.L., Black H.R. et al. Seventh report of the Joint National Committee of prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure. // Flypertension. 2003. - Vol.42. - P. 1206 - 1252.

48. Cianflone K. The acylation stimulating protein pathway: clinical implications. // Clin.Biochem. 1997. - Vol. 30. - P. 301 - 312.

49. Cianflone K., Maslowska M. Differentiation induced production of ASP in human adipocytes. // Eur.J.Clin.Invest. 1995. - Vol. 25. - P. 817 - 825.

50. Cianflone K.M., Maslowska M.H., Sniderman A.D. Impaired response of fibroblasts from patients with hyperapobetalipoproteinemia to acylation -stimulating protein // J.Clin.Invest. 1990a. - Vol.85. P. 722 - 730.

51. Cianflone K., Roncari D.A., Maslowska M. et al. The adipsin acylation stimulating protein in human adipocytes: Regulation of triacylglycerol synthesis. // Biochemistry. - 1994. - Vol. 33. - P. 9489 - 9495.

52. Cianflone K., Vu H., Walsh M. et al. Metabolic response of acylation stimulating protein to an oral fat load. // J.Lipid Res. 1989a. - Vol. 30. -P. 1727-1733.

53. Cianflone K.M., Sniderman A.D., Walsh M.J. et al. Purification and characterization of acylation stimulating protein. // J.Biol.Chem. 1989b. — Vol. 264.-P. 426-430.

54. Cianflone K.M., Yasruel Z., Rodriguez M.A. et al. Regulation of apoB secretion from HepG2 cells: evidence for a critical role for cholesteryl ester synthesis in the response to a fatty acid challenge. // J.Lipid Res. 1990b. -Vol. 31. - P. 2045-2055.

55. Craig W.Y., Nutik R., Cooper A.D. Regulation of apoprotein synthesis and secretion in the human hepatoma Hep G2. The effect of exogenous lipoprotein. // J.Lipid Res. 1988. - Vol. 263. - P. 13880 - 13890.

56. Crespin S.R., Greenough W.B. 3rd, Steinberg D Stimulation of insulin secretion by infusion of free fatty acids. // J.Clin.Invest. 1969. - Vol. 48. -P. 1934- 1943.

57. Cui W., Paglialunga S., Kalant D. et al. Acylation stimulating protein/C5L2 - neutralizing antibodies alter triglyceride metabolism in vitro and in vivo. // Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab. - 2007. - Vol. 293. -P. E1482 - 1491.

58. Cui W., Simaan M., Laporte S. et al. C5a- and ASP-mediated C5L2 activation, endocytosis and recycling are lost in S323I-C5L2 mutation. // Mol Immunol. 2009. - Vol. 46. - P. 3086 - 3098.

59. Dixon J.L., Furukawa S., Ginsberg H.N. Oleate stimulates of apolipoprotein B — containing lipoproteins from Hep G2 cells by inhibiting early intracellular degradation of apolipoprotein B. // J.Biol.Chem. 1991. -Vol. 266.-P. 5080-5086.

60. Dresner A., Laurent D., Marcucci M. et al. Effecrs of fatty acids on glucose transport and IRS — 1 associated phosphatidylinositol 3 — kinase activity. // J.Clin.Invest. 1999. -Vol. 103.-P. 253 -259.

61. Ducharme N.A., Bickel P.E. Lipid droplets in lipogenesis and lipolysis. // Endocrinology. 2008. - Vol. 149. P. 942 - 949.

62. Dyck D.J., Heigenhauser G.J., Bruce C.R. The role of adipokines as regulators of skeletal muscle fatty acid metabolism and insulin sensitivity. // Acta Physiol.Oxf. 2006. - Vol. 186. - P. 5 - 16.

63. Etherton T.D. The biology of somatotropin in adipose tissue growth and nutrient partitioning. // J.Nutr. 2000. - Vol. 130. - P. 2623-2625.

64. Evans K., Burdge G.C., Wootton S.A. et al. Regulation of dietary fatty acid entrapment in subcutaneous adipose tissue and skeletal muscle. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2684 - 2690.

65. Faraj M., Cianflone K. Differential regulation of fatty acid trapping in mouse adipose tissue and muscle by ASP. // Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab. 2004. - Vol. 287. - P. El50 ~ El59.

66. Faraj M., Sniderman A.D., Cianflone K. ASP enhances in situ lipoprotein lipase activity by increasing fatty acid trapping in adipocytes. // J.Lipid Res. 2004. - Vol. 45. - P. 657 - 666.

67. Farese R.V. Jr., Yost T.J., Eckel R.H. Tissue — specific regulation of lipoprotein lipase activity by insulin/glucose in normal — weight human. // Metabolism. 1991. - Vol. 40. - P. 214 - 216.

68. Febbraio M., Abumrad N.A., Hajjar D.P. et al. A null mutation in murine CD36 reveals an important role in fatty acid and lipoprotein metabolism. // J.Biol.Chem. 1999. - Vol. 274. - P. 19055 - 19062.

69. Fisher E.A., Ginsberg H.N. Complexity in the secretory pathway: the assembly and secretion of apolipoprotein B containing lipoproteins. // J.Biol.Chem. - 2002. - Vol. 277. - P. 17377 - 17380.

70. Friedevvald W.T., Levy R.I., Fredrickson D.S. Estimation of the concentration of low density lipoprotein cholesterol in plasma, without use of preparative ultracentrifuge. // Clin.Chem. - 1972. - Vol. 18. - P. 499 -502.

71. Germinario R., Sniderman A.D., Manuel S. et al. Coordinate regulation of triacylglycerol synthesis and glucose transport by acylation stimulating protein.// Metabolism. - 1993. - Vol. 42. - P. 574 - 580.

72. Gibbons G.F. Burnham F.J. Effect of nutritional state on the utilization of fatty acids for hepatitic triacylglycerol synthesis and secretion as very — low density lipoprotein. // Biochem.J. - 1991. - Vol. 275. - P. 87 - 92.

73. Gibbons G.F., Wiggins D., Brown A.M. et al. Synthesis and function of hepatic very low - density lipoprotein. // Biochem.Soc.Trans. - 2004. -Vol. 32.-P. 59-64.

74. Gilham D., Ho S., Rasouli M. et al. Inhibitors of hepatic microsomal triacylglycerol hydrolase decrease very low density lipoprotein secretion. // FASEB J. 2003. - Vol. 17. - P. - 1685 - 1687.

75. Ginsberg H.N. Insulin resistance and cardiovascular disease. // J.Clin.Invest. 2000. - Vol. 106. - P. 453 - 458.

76. Ginsberg H.N. New perspectives on atherogenesis role of abnormal triglyceride — rich lipoprotein metabolism. // Circulation. 2002. - Vol. 106.-P. 2137-2142.

77. Girard J., Perdereau D., Foufelle F. et al. Regulation of lipogenic enzyme gene expression by nutrients and hormones. // FASEB J. 1994. - Vol. 8. -P. 36-42.

78. Goldberg I.J. Lipoprotein lipase and lipolysis: central roles in lipoprotein metabolism and atherogenesis. // J.Lipid Res. — 1996. Vol. 37. - P. 693 -707.

79. Grundy S.M., Mok H.Y., Zech L. et al. Transport of very low density lipoprotein triglycerides in varying degrees of obesity and hypertriglyceridemia. // J.Clin.Invest. 1979. - Vol. 63. - P. 1274 - 1283.

80. Haemmerle G., Lass A., Zimmermann R. et al. Defective lipolysis and altered energy metabolism in mice lacking adipose triglyceride lipase. // Science. 2006. - Vol. 312. - P. 734 - 737.

81. Haemmerle G., Zimmermann R., Hayn M. et al. Hormone — sensitive lipase deficiency in mice causes diglyceride accumulation in adipose tissue, muscle, and testis. // J.Biol.Chem. 2002. - Vol. 277. - P.4806 - 4815.

82. Hajduch E., Balendran A., Batty I.H. et al. Ceramide impairs the insulin -dependent membrane recruitment of protein kinase B leading to a loss in downstream signalling in L6 skeletal muscle cells. // Diabetologia. 2001. -Vol. 44.-P. 173- 183.

83. Hamilton J.A., Kamp F. How are free fatty acids transported in membranes? Is it by proteins or by free diffusion through the lipids? // Diabetes: 1999. - Vol. 48. - P. 2255 - 2269.

84. Hamilton R.L.,, Wong J.S., Cham C.M. et al. Chylomicron sized lipid particles are formed in the setting of apolipoprotein B deficiency. // J.Lipid Res. - 1998. - Vol. 39:-P. 1543 - 1557.

85. Han P., Zhang Y.Y., Lu Y. et al. Effects of different free fatty acids on insulin resistance in rats. // Hepatobiliary Pancreat.Dis.Int. 2008. — Vol. 7.-P. 91-96.

86. Hanley A.J., Festa A., D'Agostino R.B. Jr. et al. Metabolic and inflammation variable clusters and prediction of type 2 diabetes: factor analysis using directly measured insulin sensitivity. // Diabetes. — 2004. — Vol. 53.-P. 1773- 1781.

87. Hanley A.J., Karter A.J., Festa A. et al. Factor analysis of metabolic syndrome using directly measured insulin sensitivity. The Insulin Resistance Atherosclerosis Study. // Diabetes. 2002. - Vol. 51. - P. 2642 -2647.

88. Hellerstein M.K., Christiansen M., Kaempfer S. et al. Measurement of de novo hepatic lipogenesis in humans using stable isotopes. // J.Clin.Invest. -1991.-Vol. 87.-P. 1841 1852.

89. Henriksson J. Influence of exercise on insulin sensitivity. // J.Cardiovasc.Risk. 1995. - Vol. 2. - P. 303 - 309.

90. Hitsumoto T., Yoshinaga K., Aoyagi K. et al. Association between preheparin serum lipoprotein lipase mass and acute myocardial infarction in Japanese men. // J. Atheroscler.Thromb. 2002. - Vol. 9. - P. 163 — 169.

91. Hosaka K., Kikuchi T., Mitsuhida N. et al. A new colorimetric method for the determination of free fatty acids with acyl CoA synthetase and acyl -Co A oxidase. //J.Biochem. - 1981. - Vol. 89. - P. 1799-1803.

92. Hotamisligil G.S. Molecular mechanisms of insulin resistance and the role of the adipocyte. // Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord. 2000. - Vol. 24. -Suppl. 4 - P. S23-S27.

93. Hua X., Yokoyama C., Wu J. et al. SREBP 2, a second basic - helix-loop-helix - leucine zipper protein that stimulates transcription by binding to a sterol regulatory element. // Proc. Natl Acad. Sci. USA. - 1993. - Vol. 190.-P. 11603-11607.

94. Hulver M.W., Dohm G.L. The molecular mechanism linking muscle fat accumulation to insulin resistance. // Proc.Nutr.Soc. — 2004. Vol. 63. - P. 375-380.

95. Itani S.I., Ruderman N.B., Schmieder F. et al. Lipid induced insulin resistance in human muscle is associated with changes in diacylglycerol, protein kinase C, and IkappaB - alpha. // Diabetes. - 2002. - Vol. 51. - P. 2005-2011.

96. Jazet I.M., Pijl H., Meinders A.E. Adipose tissue as an endocrine organ: impact on insulin resistance. // Neth.J.Med. 2003. - Vol. 61. - P. 194 -212.

97. Jensen M.D. Adipose tissue and fatty acid' metabolism in humans. // J.R.Soc.Med. 2002. - Vol. 95. - P. 3 - 7.

98. Jindrichova E., Kratochvilova S., Kovar J. Glucose administration downregulates lipoprotein lipase activity in vivo: a study using repeatedintravenous fat tolerance test. // Physiol.Res. 2007. - Vol. 56. - P. 175 -181.

99. Johswich K., Martin M., Thalmann J. et al. Ligand specificity of the anaphylatoxin C5L2 receptor and its regulation on myeloid and epithelial cell lines. // J.Biol.Chem. 2006. - Vol. 281. P. 39088 - 39095.

100. Jong M.C., Dahlmans V.E., Hofker M.H. et al. Nascent very low -density lipoprotein triacylglycerol hydrolysis by lipoprotein lipase is inhibited by apolipoprotein E in a dose - dependent manner. // Biochem.J. - 1997. - Vol. 328. - P. 745 - 750.

101. Jump D.B., Botolin D., Wang Y. et al. Fatty acid regulation of hepatic gene transcription. // J.Nut. 2005. - Vol. 135. - P. 2503 - 2506.

102. Julius U. Influence of plasma free fatty acids on lipoprotein synthesis and diabetic dyslipidemia. // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 2003. - Vol. 111.-P.-246-250.

103. Kakuma T., Lee Y., Higa M. et al. Leptin, troglitazone, and the expression of sterol regulatory element binding proteins in liver and pancreatic islets. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 2000. - Vol. 97. - P. 8536-8541.

104. Kalant D., Cain S.A., Maslowska M. et al. The chemoattractant receptorlike protein C5L2 binds the C3a des-Arg77/acylation-stimulating protein. // J.Biol.Chem. 2003a. - Vol. 278. - P. 11123-11129.

105. Kalant D., Maslowska M., Scantlebury T. et al. Control of lipogenesis in adipose tissue and the role of acylation stimulating protein. // Can.J.Diabetes.-2003b.-Vol. 27.-P. 154-171.

106. Кафе F., Olivecrona Т., Olivecrona G. et al. Lipoprotein lipase transport in plasma: role of muscle and adipose tissues in regulation of plasma lipoprotein lipase concentration. // J.Lipid Res. 1998. - Vol. 39. - P. 2387 -2393.

107. Karpe F., Olivecrona Т., Walldius G. et al. Lipoprotein lipase in plasma after an oral fat load: relation to free fatty acids. // J.Lipid Res. 1992. -Vol. 33.-P. 975-984.

108. Kelley D.E., Mokan M., Simoneau J.A. et al. Interaction between glucose and free fatty acid metabolism in human skeletal muscle. // J.Clin.Invest. -1993.-Vol. 92.-P. 91-98.

109. Kersten S. Mechanisms of nutritional and hormonal regulation of lipogenesis. // EMBO. 2001. - Vol. 2. - P. 282 - 286.

110. Kim J.B., Sarraf P., Wright M. et al. Nutritional and insulin regulation of fatty acid synthetase and leptin gene expression through ADD1/SREBP1. // J.Clin.Invest. 1998.-Vol. 101.-P. 1-9.

111. Kim J.K., Fillmore J.J., Chen Y. et al. Tissue — specific overexpression of lipoprotein lipase causes tissue specific insulin resistance. // Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. - 2001. - Vol. 98. - P. 7522 - 7527.

112. Kissebah A.H., Alfarsi S., Adams P.W. et al. Role of insulin resistance in adipose tissue and liver in the pathogenesis of endogenous hypertriglyceridaemia in man. // Diabetologia. 1976. — Vol. 12. - P. 563 — 571.

113. Knight B.L., Hebbachi A., Hauton D. et al. A role for PPARalpha in the control of SREBP activity and lipid synthesis in the liver. // Biochem.J. -2005. Vol. 389. - P. 413 - 421.

114. Knutson V.P. The release of lipoproten lipase from 3T3 LI adipocytes is regulated by microvessel endothelial cells in an insulin — dependent manner. // Endocrinology. - 2000. - Vol. 141. - P. 693 - 701.

115. Koike T., Liang J., Wang X. et al. Overexpression of lipoprotein lipase in transgenic Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits improves hyperlipidemia and obesity. // J.Biol.Chem. 2004. - Vol. 279. - P. 7521 -7529.

116. Koistinen H.A., Vidal H., Karonen S.L. et al. Plasma acylation stimulating protein concentration and subcutaneous adipose tissue C3 mRNA expression in nondiabetic and type 2 diabetic men. //

117. Kraegen E.W., Cooney G.J., Ye J.M. et al. The role of lipids in the pathogenesis of muscle insulin resistance and beta cell failure in type II diabetes and obesity. // Exp.Clin.Endocrinol.Diabetes. 2001. - Vol. 109. — Suppl. 2 - P. S189-S201.

118. Lagrost L., Florentin E., Guyard Dangremont V. et al. Evidence for nonesterified fatty acids as modulators of neutral lipid transfers in normolipidemic human plasma. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. - 1995. -Vol. 15.-P. 1388- 1396.

119. Lam T.K., van de Werve G., Giacca A. Free fatty acids increase basal hepatic glucose production and induce hepatic insulin resistance at different sites. // AmJ.Physiol.Endocrinol.Metab. 2003. - Vol. 284. - P. E281 -E290.

120. Langin D., Dicker A., Tavernier G. et al. Adipocyte lipases and defect of lipolysis in human obesity. // Diabetes. 2005. - Vol. 54. - P. 3190 -3197.

121. Laws A., Reaven G.M. Evidence for an independent relationship between insulin resistance and fasting plasma HDL cholesterol, triglyceride and insulin concentrations. // J.Intern.Med. - 1992. - Vol. 231. - P. 25 - 30.

122. Levy E., Stan S., Delvin E. et al. Localization of microsomal triglyceride transfer protein in the Golgi: possible role in the assembly of chylomicrons. // J.Biol.Chem. 2002. - Vol. 277. - P. 16470 - 16477.

123. Lewis G.F. Fatty acid regulation of very low density lipoprotein production. // CuiT.Opin.Lipidol. 1997. - Vol. 8. - P. 146 - 153.

124. Lewis G.F., Carpentier A., Adeli K. et al. Disordered fat storage and mobilization in the pathogenesis of insulin resistance and type 2 diabetes. // Endocr.Rev. 2002. - Vol. 23. - P. 201 - 229.

125. Lewis G.F., Uffelman K.D., Szeto L.W. et al. Interaction between free fatty acids and insulin in the acute control of very low density lipoprotein production in humans. // J.Clin.Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 158 - 166.

126. Lookene A., Zhang L., Hultin M. et al. Rapid subunit exchange in dimeric lipoprotein lipase and properties of the inactive monomer. // J.Biol.Chem. — 2004. Vol. 279. - P. 49964 - 49972.

127. Lopes Virella M.F., Stone P., Ellis S. et al. Cholesterol determination in high - density lipoproteins separated by three different methods. // Clin.Chem. - 1977. - Vol. 23. - P. 882 - 884.

128. Lutz E.P., Merkel M., Kako Y. et al. Heparin binding defective lipoprotein lipase is unstable and causes abnormalities in lipid delivery to tissues.//J.Clin.Invest.-2001.-Vol. 107.-P. 1183- 1192.

129. Maheux P., Azhar S., Kern P.A. et al. Relationship between insulin -mediated glucose disposal and regulation of plasma and adipose tissue lipoprotein lipase. // Diabetologia. 1997. - Vol. 40. - P. 850 - 858.

130. Mahley R.W., Ji Z.S. Remnant lipoprotein metabolism: key pathways involving cell surface heparan sulfate proteoglycans and apolipoprotein E. // J.Lipid Res. - 1999. - Vol. 40. - P.l - 16.

131. Malmstróm R., Packard C.J., Watson T.D. et al. Metabolic basis of hypotriglyceridemic effects of insulin in normal men. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 1997.-Vol. 17.-P. 1454- 1464.

132. Marcil M., Vu H., Cui W. et al. Identification of a novel C5L2 variant S323I in a French Canadian family with familial combined hyperlipemia. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 2006. - Vol. 26. - P. 1619 - 1625.

133. Maslowska M., Legakis H., Assadi F. et al. Targeting the signaling pathway of acylation stimulating protein. // J.Lipid Res. 2006. - Vol. 47. -P. 643-652.

134. Maslowska M., Scantlebury T., Germinarlo R. et al. Acute in vitro production of acylation stimulating protein in differentiated human adipocytes. // J.Lipid Res. 1997. - Vol. 38 - P. 1 - 11.

135. Maslowska M., Wang H.W., Cianflone K. Novel roles for acylation stimulating protein/C3adesArg: a review of recent in vitro and in vivo evidence // Vitam.Horm. 2005. - Vol. 70 - P. 309 - 332.

136. Matthews D.R., Hosker J.P., Rudenski A.S. et al. Homeostasis model assessment: insulin resistance and beta cell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man. // Diabetologia. - 1985. - Vol. 28.-P. 412-419.

137. McArthur M.J., Atshaves B.P., Frolov A. et al. Cellular uptake and intracellular trafficking of long chain fatty acids. // J.Lipid Res. 1999. — Vol. 40.-P. 1371 - 1383.

138. Meigs J.B., D'Agostino R.B. Sr., Wilson P.W. et al. Risk variable clustering in the insulin resistance syndrome. The Framingham Offspring Study. // Diabetes. 1997. - Vol. 46. - P. 1594 - 1600.

139. Meijssen S., van Dijk H., Verseyden C. et al. Delayed and exaggerated postprandial complement component 3 response in familial combined hyperlipidemia. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 2002. —Vol. 22. - P. 811-816.

140. Merkel M., Eckel R.H., Goldberg IJ. Lipoprotein lipase: genetics, lipid uptake, and regulation. // J.Lipid Res. 2002. - Vol. 43. - P. 1997 - 2006.

141. Miller K.W., Small D.M. Structure of triglyceride rich lipoproteins an analysis of core and surface phases. // Plasma Lipoproteins / Ed. By A.M. Gotto. -N.Y.: Elsevier. - 1987. - P. 1 - 72.

142. Mitchell B.D., Haffner S.M., Hazuda H.P. et al. The relation between serum insulin levels and 8 year changes in lipid, lipoprotein, and blood pressure levels // Am.J.Epidemiol. - 1992. - Vol. 136. - P. 12 - 22.

143. Mostaza J.M., Vega G.L., Snell P. et al. Abnormal metabolism of free fatty acids in hypertriglyceridaemic men: apparent insulin resistance of adipose tissue. // J.Intern.Med. 1998. - Vol. 243. - P. 265 - 274.

144. Murray L, Havel P.J., Sniderinan A.D. et al. Reduced body weight, adipose tissue, and leptin levels despite increased energy intake in female mice lacking acylation stimulating protein. // Endocrinology. - 2000. — Vol. 141.-P. 1041- 1049.

145. Murray I., Parker R.A., Kirchgessner T.G. et al. Functional bioactive recombinant acylation stimulating protein is distinct from C3a anaphylatoxin. // J.Lipid Res. 1997. - Vol. 38. - P. 2492 - 2501.

146. Murray I., Sniderman A.D., Cianflone K. Mice lacking acylation stimulating protein ASP have delayed postprandial triglyceride clearance. // J.Lipid Res. 1999. - Vol. 40. - P. 1671 - 1676.

147. Nolan C.J., Madiraju M.S., Delghingaro Augusto V. et al. Fatty acid signaling in the B - cell and insulin secretion. // Diabetes. - 2006. - Vol. 55.-Suppl.2-P. S16-S23.

148. Oh R.C., Lanier J.B. Management of hypertriglyceridemia. // Am.Fam.Physician. 2007. - Vol. 75. - P. - 1365 - 1371.

149. Okazaki H., Igarashi M., Nishi M. et al. Identification of a novel member of the carboxylesterase family that hydrolyzes triacylglycerol. // Diabetes. -2006. Vol. 55. - P. 2091 - 2097.

150. Olivecrona T., Bengtsson Olivecrona G. Lipoprotein lipase and hepatic lipase // Curr.Opin.Lipidol. - 1993. - Vol. 4. - P. 187 - 196.

151. Olivecrona T., Chernick S.S., Bengtsson Olivecrona G. et al. Synthesis and secretion of lipoprotein lipase in 3T3 - LI adipocytes. Demonstration of inactive forms of lipase in cells. // J.Biol.Chem. - 1987. - Vol. 262. - P. 10748-10759.

152. Ong J.M., Kirchgessner T.G., Schotz M.C. et al. Insulin increases the synthetic rate and messenger RNA level of lipoprotein lipase in isolated rat adipocytes. //J.Biol.Chem. 1988. - Vol. 263. - P. 12933 - 12938.

153. Oprescu A.I., Bikopoulos G., Naassan A. et al. Free fatty acid induced reduction in glucose — stimulated insulin secretion. // Diabetes. — 2007. -Vol. 56.-P. 2927-2937.

154. Packard C.J., Demant T., Stewart J.P. et al. Apolipoprotein B metabolism and the distribution of VLDL and LDL subfractions. // J.Lipid Res. 2000. -Vol. 41.-P. 305-318.

155. Paglialunga S., Fisette A., Yan Y. et al. Acylation-stimulating protein deficiency and altered adipose tissue in alternative complement pathway knockout mice.// Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab. 2008. - Vol. 294. - P. E521 -E529.

156. Paglialunga S., Schrauwen P., Roy C. et al. Reduced adipose tissue triglyceride synthesis and increased muscle fatty acid oxidation in C5L2 knockout mice. // J.Endocrinol. 2007. - Vol. 194. - P. 293 - 304.

157. Pankow J.S., Duncan B.B., Schmidt M.I. et al. Fasting plasma free fatty acids and risk of type 2 diabetes: the atherosclerosis risk in communities study. // Diabetes Care. 2004. - Vol. 27. - P. 77 - 82.

158. Parhofer K.G., Barrett P.H. Thematic review series: patient oriented research. What we have learned about VLDL and LDL metabolism from human kinetics studies. // J.Lipid Res. - 2006. - Vol. 47. - P. 1620 - 1630.

159. Parks E.J., Hellerstein M.K. Thematic review series: patient oriented research. Recent advances in liver triacylglycerol and fatty acid metabolism using stable isotope labeling techniques. // J.Lipid Res. - 2006. - Vol. 47. -P. 1651-1660.

160. Patsch W., Tamai T., Schonfeld G. Effect of fatty acids on lipid and apoprotein secretion and association in hepatocyte cultures. // J.Clin.Invest. 1983. - Vol. 72. - P. 371 - 378.

161. Peiris A.N., Hennes M.I., Evans D.J. et al. Relationship of anthropometric measurements of body fat distribution to metabolic profile in premenopausal women. // Acta Med.Scand.Suppl. 1988. - Vol. 723. - P. 179-188.

162. Pejic R.N., Lee D.T. Hypertriglyceridemia. // J.Am.Board.Fam.Med. -2006.-Vol. 19.-P. 310-316.

163. Pennacchio L.A., Olivier M., Hubacek J.A. et al. Two independent apolipoprotein A5 haplotypes influence human plasma triglyceride levels. // Hum.Mol.Genet. 2002. - Vol. 11. P. 3031 - 3038.

164. Petersen K.F., Dufour S., Befroy D. et al. Impaired mitochondrial activity in the insulin resistant offspring of patients with type 2 diabetes. // N.Engl.J.Med. - 2004. - Vol. 350. - P. 664 - 671.

165. Peterson J., Bihain B.E., Bengtsson Olivecrona G. et al. Fatty acid control of lipoprotein lipase: A link between energy metabolism and lipid transport. // Proc .Natl .Acad. S ci. USA. - 1990. - Vol. 87. - P. 909 - 913.

166. Pickersgill L., Litherland G.J., Greenberg A.S. et al. Key role for ceramides in mediating insulin resistance in human muscle cells. // J.Biol.Chem. -2007. Vol. 282. - P. 12583 - 12589.

167. Pont F., Duvillard L., Florentin E. et al. Early kinetic abnormalities of apoB — containing lipoproteins in insulin — resistant women with abdominal obesity. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 2002. - Vol. 22. - P. 1726 -1732.

168. Postic C., Dentin R., Denechaud P.D. et al. ChREBP, a transcriptional regulator of glucose and lipid metabolism. / C. Postic et al. // Annu.Rev.Nutr. 2007. - Vol. 27. - P. 179 - 192.

169. Pouliot M.C., Després J.P., Nadeau A. et al. Associations between regional body fat distribution, fasting plasma free fatty acid levels and glucose tolerance in premenopausal women. // Int.J.Obes. 1990. — Vol. 14. - P. 293 - 302.

170. Raabe M., Véniant M.M., Sullivan M.A. et al. Analysis of the role of microsomal triglyceride transfer protein in the liver of tissue — specific knockout mice. // J.Clin.Invest. 1999. - Vol. 103. - P. 1287 - 1298.

171. Robinson D.S. The function of the plasma triglycerides in fatty acid transport. // Comprehensive Biochemistry / Ed. by M. Florkin and E. H. Stotz. Amsterdam: Elsevier. - 1970. - P. 51 - 105.

172. Ronti T., Lupattelli G., Mannarino E. The endocrine function of adipose tissue: an update. // Clin.Endocrinol. (Oxf.) 2006. - Vol. 64. - P. 355 -365.

173. Rosen E.D., Spiegelman B.M. Adipocytes as regulators of energy balance and glucose homeostasis. // Nature. 2006. - Vol. 444. - P. 847 - 853.

174. Sako Y. Grill V.E. A 48 hour lipid infusion in the rat time - dependency inhibits glucose - induced insulin secretion and B cell oxidation through a process likely coupled to fatty acid oxidation. // Endocrinology. - 1990. -Vol. 127.-P. 1580- 1589.

175. Saleh J., Summers L.K., Cianflone K. et al. Coordinated release of acylation stimulating protein ASP and triacylglycerol clearance by human adipose tissue in vivo in the postprandial period. // J.Lipid Res. — 1998. -Vol. 39.-P. 884-891.

176. Salinari S., Bertuzzi A., Manco M. et al. NEFA — glucose comodulation model of 3—cell insulin secretion in 24 h multiple — meal test. // Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab. - 2007. - Vol. 292. - P. El 890 - E1898.

177. Savage D.B., Petersen K.F., Shulman G.I. Disordered lipid metabolism and the pathogenesis of insulin resistance. // Physiol.Rev. — 2007. — Vol. 87. -P. 507-520.

178. Saxena U., Klein M.G., Goldberg I.J. Metabolism of endothelial cell -bound lipoprotein lipase. Evidence for heparan sulfate proteoglycanmediated internalization and recycling. I I J.Biol.Chem. — 1990. Vol. 265. -P. 12880- 12886.

179. Saxena U., Klein M.G., Goldberg I.J. Transport of lipoprotein lipase across endothelial cells. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1991. - Vol. 88. - P.2254 -2258.

180. Saxena U., Witte L.D., Goldberg I.J. Release of endothelial cell lipoprotein lipase by plasma lipoproteins and free fatty acids. // J.Biol.Chem. 1989. -Vol. 264.-P. 4349-4355.

181. Schonfeld G., Patterson B.W., Yablonskiy D.A. et al. Fatty liver in familial hypobetalipoproteinemia: triglyceride assembly into VLDL particles is affected by the extent of hepatic steatosis. // J.Lipid Res. 2003. - Vol. 44. -P. 470-478.

182. Schreier L., Berg G., Zago V. et al. Kinetics of in vitro lipolysis of human very low density lipoprotein by lipoprotein lipase. // Nutr.Metab.Cardiovasc.Dis. - 2002. - Vol. 12. - P. 13 - 18.

183. Schweiger M., Schreiber R., Haemmerle G. et al. Adipose triglyceride lipase and hormone sensitive lipase are the major enzymes in adipose tissue triacylglycerol catabolism. // J.Biol.Chem. - 2006. — Vol. 281. — P. 40236-40241.

184. Seda O. Comparative gene map of hypertriglyceridaemia. // Folia Biol.Praha. 2004. - Vol. 50. - P. 43 - 57.

185. Shafrir E., Raz I. Diabetes: mellitus or lipidus? // Diabetologia. 2003. -Vol. 46.-P. 433-440.

186. Shoulders C.C., Jones E.L., Naoumova R.P. Genetics of familial combined hyperlipidemia and risk of coronary heart disease. // Hum.Mol.Genet. — 2004.-Vol. 13. P. R149 — R160.

187. Smith U. Impaired 'diabetic' insulin signaling and action occur in fat cellslong before glucose intolerance--is insulin resistance initiated in theadipose tissue? // Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord. 2002. - Vol. 26. - P. 897-904.

188. Soni K.G., Lehner R, Metalnikov P. et al. Carboxylesterase 3 EC 3.1.1.1 is a major mdipocyte lipase. // J.Biol.Chem. 2004. - Vol. 279. - P. 40683 -40689.

189. Soro A., Jauhiainen M., Ehnholm C. et al. Determinants of low HDL levels in familial combined hyperlipidemia. // J.Lipid Res. 2003. - Vol. 44. - P. 1536- 1544.

190. Steinberg G.R. Inflammation in obesity is the common link between defects in fatty acid metabolism and insulin resistance. // Cell Cycle. -2007.-Vol. 6.-P. 888-894.

191. Steiner G., Lewis G.F. Hyperinsulinemia and triglyceride rich lipoproteins. // Diabetes. - 1996. - Vol. 45. - Suppl. 3 - P. S24 - S26.

192. Sumner A.E., Finley K.B., Genovese D.J. et al. Fasting triglyceride and the triglyceride HDL cholesterol ratio are not markers of insulin resistance in African Americans. // Arch.Intern.Med. - 2005. - Vol. 165. - P. 1395 -1400.

193. Teruel T., Hernandez R., Lorenzo M. Ceramide mediates insulin resistance by tumor necrosis factor — alpha in brown adipocytes by maintaining Akt in an inactive dephosphorylated state. // Diabetes. 2001. - Vol. 50. - P. 2563-2571.

194. Tirosh A., Shai 1., Bitzur R. et al. Changes in triglyceride levels over time and risk of type 2 diabetes in young men. // Diabetes Care. 2008. - Vol. 31.-P. 2032-2037.

195. Trickett J.I., Patel D.D., Knight B.L. et al. Characterization of the rodent genes for arylacetamide deacetylase, a putative microsomal lipase, and evidence for transcriptional regulation. // J.Biol.Chem. 2001. - Vol. 276. -P. 39522-39532.

196. Vessby B., Boberg J., Lithell H. Lipolytic activities in post heparin plasma in man measured with different substrate emulsions. // Clin.Sci.Mol.Med. - 1978. - Vol. 54. - P. 201 - 203.

197. Vilaró S., Llobera M., Bengtsson Olivecrona G. et al. Lipoprotein lipase uptake by the liver: localization, turnover, and metabolic role. // Am.J.Physiol. - 1988. - Vol. 254. (5 Pt 1) - P. G711 - G722.

198. Vilella E., Joven J., Fernández M. et al. Lipoprotein lipase in human plasma is mainly inactive and associated with cholesterol rich lipoproteins. // J.Lipid Res. - 1993. - Vol. 34. - P. 1555 - 1564.

199. Wang M.Y., Lee Y., Unger R.H. Novel form of lipolysis induced by leptin. //J.Biol.Chem. 1999. - Vol. 274. - P. 17541-17544.

200. Ward P.A. Functions of C5a receptors. // J.Mol.Med. 2009. - Vol. 87. -P. 375-378.

201. Wetsel R.A., Kildsgaard J., Zsigmond E. et al. Genetic deficiency of acylation stimulating protein (ASP(C3ades Arg)) does not cause hyperapobetalipoproteinemia in mice. // J.Biol.Chem. - 1999. — Vol. 274. -P. 19429-19433.

202. Wong H., Davis R.C., Thuren T. et al. Lipoprotein lipase domain function. // J.Biol.Chem. 1994. - Vol. 269. - P. 10319 - 10323.

203. Wu X., Shang A., Jiang H. et al. Low rates of apoB secretion from HepG2 cells result from reduced delivery of newly synthesized triglyceride to a "secretion coupled" pool. // J.Lipid Res. - 1996. - Vol. 37. - P. 1198 -1206.

204. Xia Z., Sniderman A.D., Cianflone K. Acylation — stimulating protein ASP deficiency induces obesity resistance and increased energy expenditure in ob/ob mice. // J.Biol.Chem. 2002. - Vol. 277. - P. 45874 - 45879.

205. Ylitalo K., Pajukanta P., Meri S. et al. Serum C3 but not plasma acylation -stimulating protein is elevated in Finnish patients with familial combined hyperlipidemia. // Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 2001. - Vol. 21. - P. 838 - 843.

206. Yoshii H., Lam T.K., Gupta N. et al. Effects of portal the free fatty acid elevation on insulin clearance and hepatic glucose flux. // Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab. 2006. - Vol. 290. - P. E1089 - E1097.

207. Yu Y.H., Ginsberg H.N. Adipocyte signaling and lipid' homeostasis: sequelae of insulin resistant adipose tissue. // Cir.Res. — 2005. — Vol. 96. -P. 1042- 1052.

208. Zhang X.J., Cianflone K., Genest J. et al. Plasma acylation stimulating protein ASP as a predictor of impaired cellular biological response to ASP in patients with hyperapoB. // Eur.J.Clin.Invest. 1998. - Vol. 28. - P. 730 -739.

209. Zimmermann R., Strauss J.G., Haemmerle G. et al. Fat mobilization in adipose tissue is promoted by adipose triglyceride lipase. // Science. -2004.-Vol. 306.-P. 1383 1386.

Информация о работе

Агеева, Елена Викторовна
кандидата медицинских наук
Санкт-Петербург, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Роль нарушения обмена жирных кислот в развитии дисплипротеинемий - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы