Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов

Улитко, Мария Валерьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов"

На правах рукописи

Улитко Мария Валерьевна

РОЛЬ МОНОЦИТОВ-МАКРОФАГОВ В АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЯХ КРОВЕТВОРНОЙ ТКАНИ ПРИ ДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ

03.00 13. - «Физиология»

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Екатеринбург - 2008

003172198

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных Уральского государственного университета им. А М Горького и в лаборатории иммунофизиологии института иммунологии и физиологии УрО РАН

Научный руководитель- доктор медицинских наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ Юшков Борис Германович

Официальные оппоненты доктор медицинских наук, профессор,

академик РАМН, заслуженный деятель науки РФ Захаров Юрий Михайлович

доктор биологических наук Проценко Юрий Леонидович

Ведущая организация ГУ Гематологический научный центр РАМН, г Москва

ол

Защита состоится «X » июля 2008 года в (О часов на заседании диссертационного совета Д 004 027 01 в Институте иммунологии и физиологии УрО РАН по адресу 620049, г Екатеринбург, ул Первомайская, 106

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной библиотеке УрО РАН (620219, г Екатеринбург, ул С Ковалевской / Академическая, 22/20), с авторефератом - на сайте Института иммунологии и физиологии УрО РАН -Ьйр.//\у\у\у пригапги

Автореферат разослан иСсбЫЯ 2008 года

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор Тузанкина И А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования Проблема иммунологической регуляции гемо-поэза в физиологических условиях и при экстремальных воздействиях на организм является актуальной в современной биологии и медицине Важную роль в регуляции функциональной активности гемопоэтических клеток отводят системе мононукле-арных фагоцитов [Ю M Захаров и А Г Рассохин, 2002, Y Sadahira et al, 1999, T Yokoyama et al, 2003] Моноциты-макрофаги костного мозга, являясь центральной клеткой эритробластического островка, обладают высоким аффинитетом по отношению к эритроидным клеткам [M Bessis et J Breton-Gonus, 1961, M Bessis, 1978, M Haspal, 1997, В О Fabnek, 2007], регулируют их пролиферацию и дифференцировку [YM Zakharov, M Prenant, 1982, Е Ingley et al, 2004], создают специфическое ге-мопоэтическое микроокружение [Н В Тишевская, 2003], продуцируют биологически активные гуморальные факторы [ИСФрейдлин, 1995, IN. Rich, 1988], обеспечивая адаптивные реакции кроветворной ткани при экстремальных воздейтвиях

В настоящее время установлено, что эритропоэтические свойства центральных макрофагов эритробластических островков зависят от функционального состояния системы мононуклеарных фагоцитоз [Н.М. Новиков, 1982, ЮМ Захаров, 1992], которое, в свою очередь, находится под контролем большого количества взаимосвязанных между собой факторов Существенная роль в регуляции гемопоэтической функции макрофагов отводится межклеточному взаимодействию и влиянию нейроэндокринной системы [Е Д Гольд-берг и соавт, 2000, A M Дыгай и соавт, 2004]

Вместе с тем, многие вопросы, касающиеся роли моноцитов-макрофагов костного мозга в адаптивных реакциях системы крови, еще далеки от своего решения.

Это касается, прежде всего, реакции системы мононуклеарных фагоцитов при воздействии на организм экстремальных факторов Требуют дальнейшей расшифровки конкретные регуляторные механизмы эритропоэза, протекающие с участием макрофагов Не полностью идентифицированы вырабатываемые макрофагами гуморальные факторы и механизмы регуляции функциональной активности макрофагов костного мозга

Не менее важным представляется вопрос о взаимосвязи макрофагальных механизмов регуляции эритропоэза с другими регуляторными системами организма, в частности с нейроэндокринной системой В современной литературе эта проблема освящена достаточно противоречиво [В Э Цейликман и соавт , 1991, Е Д Гольдберг и соавт, 1997, ЕГ. Скурихин и соавт, 2001, AM Дыгай и соавт, 2004, DO Adams, 1994]

Данные литературы свидетельствуют о реализации нейроэндокринных влияний на функциональную активность моноцитов-макрофагов костного мозга через локальные клеточные взаимодействия [AM Дыгай и соавт, 1989, В А Клименко и соавт, 1991, ЮМ. Захаров и FLB Тишевская, 1997] Однако исследованы далеко не все конкретные способы межклеточного взаимодействия центральных макрофагов эритробластических островков с другими компонентами гемопоэзиндуцирующего микроокружения. До конца не расшифрованы и механизмы межклеточной кооперации макрофагов и Т-лимфоцитов [В П Шахов и соавт, 1999]

Попытки изменения функциональной активности мононуклеарных фагоцитов с помощью иммуномодуляторов [Р М Хаитов и соавт, 1995,2003], ставят вопрос о поисках эффективных лекарственных препаратов, для целенаправленной модуляции гемопоэтической функции макрофагов

Таким образом, многие вопросы, касающиеся роли макрофагов в регуляции функциональной активности гемопоэтическкх клеток при воздействии на организм экстремальных факторов, расшифровка конкретных механизмов эритропоэза, протекающих с участием моноцитов-макрофагов костного мозга, а также изучение взаимосвязи макрофагальных механизмов регуляции эритропоэза с другими регуляторными системами являются актуальной научной проблемой и требуют специальных целенаправленных исследований

Цель исследования: оценить роль моноцитов-макрофагов костного мозга в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов

Задачи исследования:

1 Охарактеризовать реакцию моноцитарного ростка кроветворения при действии на организм различных экстремальных факторов кровопотери, гипоксии, фе-нилгидразиновой анемии, иммобилизационного стресса, частичной гепатэк-томии

2 Проанализировать изменения эритропоэтической активности моноцитов-макрофагов костного мозга при действии на организм экстремальных факторов

3 Оценить эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов на фоне стимуляции функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов та-меритом

4 Оценить эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов при ингибиро-вании функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов кар-рагинаном

5 Проанализировать некоторые механизмы регуляторного влияния надпочечников на эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов

6 Определить роль медиаторов вегетативной нервной системы - адреналина и ацетилхолина в макрофагальной регуляции эритропоэза

7 Исследовать влияние продуктов секреции тучных клеток - гепарина и гиста-мина на реакции моноцитов-макрофагов костного мозга

Научная новизна исследования:

Проведен сравнительный анализ реакции моноцитов-макрофагов костного мозга при действии на организм экстремальных факторов Показано, что активация моноцитопоэза является неспецифической реакцией моноцитарного ростка кроветворения на экстремальные воздействия

Доказано, что эритропоэтическая функция моноцитов-макрофагов костного мозга зависит от количества и функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов

Установлено, что гормоны надпочечников, медиаторы вегетативной нервной системы и физиологически активные вещества, секретируемые тучными клетками, могут оказывать влияние на макрофагальную регуляцию эритропоэза, регулируя скорость и продолжительность развития адаптивных реакций в эритробласткческих островках.

Показана возможность целенаправленного воздействия на эршропоэтическую функцию макрофагов с помощью иммуномодуляторов, избирательно изменяющих функциональную активность моноцитарно-макрофагального звена

Теоретическая значимость работы. Результаты исследования позволяют расширить современные представления о роли системы мононуклеарных фагоцитов в формировании адаптивных и компенсаторных реакций гемопоэтической ткани при действии на организм экстремальных факторов. Выявлено, что реакция моноцитов-макрофагов костного мозга на экстремальные воздействия носит неспецяфический характер и проявляется увеличением общего количества клеток моноцитарного ряда.

Результаты исследования позволяют раскрыть существенные моменты макро-фагальной регуляции гемопоэза. Полученные данные доказывают, что для проявления эритропоэтической функции макрофагов эритробласгаческих островков важным является функциональное состояние всей системы мононуклеарных фагоцитов Продемонстрировано, что реакция моноцитарного ростка кроветворения и эритропоэтическая функция макрофагов костного мозга контролируется нейроэн-докринной системой н гемопоэзиндуцирующим микроокружением.

Проведенное исследование создает теоретическую основу для разработки новых методов влияния на макрофагальную регуляцию гемопоэза путем воздействия на функциональное состояние системы мононуклеарных фагоцитов.

Практическая значимость работы. Теоретически обоснована возможность коррекции гемопоэтической функции макрофагов в клинической практике при гематологических заболеваниях, связанных с активацией или угнетением эритропоэза, путем целенаправленного воздействия на функциональную активность моноцитарно-макрофагального звена с помощью иммунотропных лекарственных препаратов.

Положения, выносимые на защиту:

1 Реакция мононуклеарных фагоцитов костного мозга на экстремальные воздействия проявляется неспецифическим увеличением общего количества клеток мо-ноцитарного ряда Выраженность и характер реакции активации моноцитопоэза определяется природой экстремального фактора.

2 Активация моноцитопоэза сопровождается изменением эритропоэтической функции

моноцитов-макрофагов костного мозга и развитием адаптивной реакции в эритроб-ластических островках костного мозга

3 На эритропоэтическуюя функцию моноцитов-макрофагов костного мозга оказы-

вают влияние количество и функциональное состояние клеток системы мононуклеарных фагоцитов

4 Регуляции моноцитопоэза и эритропоэтических свойств макрофагов осуществляется с участием эндокринной и нервной систем, а также гемопоэзиндуцирующе-го микроокружения

Апробация работы. Работа апробирована на заседании XI международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (г Москва, 2003 г), на I Всероссийской конференции « Физиология иммунной системы» (г Сочи, 2003 г), на III конференции иммунологов Урала (г Челябинск, 2003 г), на XIX съезде физиологического общества им И.П.Павлова (г Екатеринбург, 2004 г ), на 2-ой Всероссийской научно-практической конференции «Компенсаторно-приспособительные процессы фундаментальные, экологические и клинические аспекты» (г Новосибирск, 2004 г), на Международном симпозиуме «Молекулярные механизмы регуляции функции клетки» (г Тюмень, 2005), на I съезде физиологов СНГ (г Сочи, 2005 г), на Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Типовые патологические процессы» (г Уфа, 2005 г), на V конференции иммунологов Урала (г Оренбург, 2006 г), на III съезде физиологов Урала (г Екатеринбург, 2006 г), на Региональной научно-практической конференции «Вопросы интегративной физиологии» (г Красноярск, 2007 г ) По материалам исследования опубликовано 15 научных работ, из них в изданиях, рекомендованных ВАК -3

Внедрение. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедре физиологии человека и животных Уральского государственного университета имени А М Горького, в научных разработках Института иммунологии и физиологии Уральского отделения Российской академии наук

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, шести глав, заключения и выводов Работа изложена на 181 странице печатного текста, содержит 42 таблицы и 35 рисунков Библиографический указатель включает 212 названий (из них 162 отечественных)

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Методические вопросы исследования. В экспериментах использовали 440 белых беспородных крыс В качестве экстремальных факторов применяли кровопоте-рю, гипоксическую гипоксию, фенилгидразиновую анемию, частичную гепатэкто-мию, иммобилизационный стресс.

Постгеморрагическую анемию у крыс вызывали однократным кровопусканием из хвостовой вены Величина кровопотери составляла 2 % от массы тела животного Исследование моноцитопоэза и параметров системы эритрона проводили через 6 часов, на 1-е, 3-й, 7-е, 10-е и 14-е сутки после воздействия

Прерывистую гипоксическую гипоксию получали путем помещения животных в барокамеру с приточно-вытяжной вентиляцией с разряжением 40,98 кПа, на 6 часов ежедневно в течение 7 суток Показатели моноцитопоэза и эритропоэза оценивали после 4-го и 7-го сеансов.

Для моделирования фенилгидразиновой анемии применяли однократное внут-рибрюшинное введение фенилщдразина в дозе 15мг/кг массы тела Оценку показателей моноцитопоэза и параметров системы эритрона проводили на 1-е, 3-й и 7-е сутки после воздействия

Репаративную регенерацию печени индуцировали удалением 2/3 массы органа [G М Higgms, R М Anderson, 1931] Исследование моноцитопоэза и параметров системы эритрона проводили через 4 и 17 часов после операции Эти сроки соот-

ветствуют 2-м фазам регенерации пострезекционной печени деструктивно-реактивной и пролиферативной, каждая из которых характеризуется своими особенностями пролиферативных процессов и метаболических реакций

В качестве стрессорного фактора применяли иммобилизацию крыс (с сохраненными и удаленными надпочечниками) на операционном столике на спине в течение 6 часов однократно Активность моноцитопоэза и эритропоэза оценивали сразу после иммобилизации и через 2-е суток после воздействия

С целью изменения функционального состояния макрофагов были использованы препараты с противоположным действием стимулятор функциональной активности макрофагов тамерит в дозе 2 мг/кг и ингибитор их функциональной активности каррагинан в дозе 10 мг / кг Активность моноцитопоэза и эритропоэза оценивали через 4 часа и 17 часов после воздействия

Для исследования роли нейроэндокринной системы в регуляции моноцитопоэза и эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов использовали методику адреналэктомии, введение гормонов надпочечников и медиаторов вегетативной нервной системы - преднизолона в дозе 12 мг/кг массы тела, адреналина в дозе 0 5 мг и ацетилхолина в дозе 125 мг/кг Иммобилиацию животных проводили на 4-е сутки после двухсторонней адреналэктомии. Активность моноцитопоэза и эритропоэза оценивали сразу после иммобилизации и через 2-е суток после воздействия

Для определения роли системы тучных клеток в регуляции моноцитопоэза и эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов применяли введение гепарина в дозе 150 ед и гистамина в дозе 450 мг/кг Активность моноцитопоэза и эритропоэза оценивали на 1-е и 3-й сутки после воздействия

Активность моноцитопоэза и распределение моноцитов в кроветворной ткани определяли путем подсчета общего количества клеток моноцитарного ряда в миело-грамме, а также в мазках и срезах костного мозга Для идентификации всех элементов системы мононуклеарных фагоцитов применяли методику цитохимического выявления активности неспецифической эстеразы в клетках моноцитарного ряда в модификации GGomori Подсчет моноцитов проводили на светооптическом микроскопе «Micros 4000» с масляной иммерсией при увеличении хЮОО

Для оценки эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов исследовали показатели красной крови, количественный и качественный состав эритробластиче-ских островков (ЭО), рассчитывали функциональные показатели эритропоэза в эритробластических островках, кроме того, оценивали «внеостровковый» эритро-поэз В данной работе под «внеостровковым» эритропоэом понимается число свободных зритроидных клеток, не связанных с короной эритробластического островка Этот показатель рассчитывали как разность между общим числом зритроидных клеток, определенным по миелограмме и их количеством в эритробластических остров-жах костного мозга крыс

Периферическую кровь исследовали с помощью гематологического анализатора Micros 60 фирмы АВХ diagnostic

Выделение, количественная оценка и морфологическое исследование эритробластических островков костного мозга проводились по методике, разработанной ЮМ Захаровым, И Ю Мельниковым и А Г Рассохиным (1984) Изучение морфологии и определение классов зрелости эритробластических островков осуществляли при увеличении xlOOO с масляной иммерсией На основании полученных данных об абсолютном количестве ЭО в костном мозге животных и их распределении по классам зрелости рассчитывали функциональные показатели, дополнительно характеризующие состояние эритропоэза общее количество эритроцитарных колониеобра-зующих единиц (КОЕэ), вступивших в дифференциацию, показатель интенсивности вовлечения КОЕэ в дифференциацию, показатель длительности созревания ЭО, показатель повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз

Обработку результатов проводили на основе методов вариационной статистики, используя компьютерную программу «Microsoft Excel» и «Статистика» Вычислялась средняя арифметическая величина, стандартное отклонение, ошибка средней арифметической величины Для оценки значимости различий между группами использовали критерии Стьюдента и Манна-Уитни

Результаты исследования и их обсуждение.

Полученные данные свидетельствуют, что реакция моноцитарного ростка на различные экстремальные воздействия складывается из неспецифического и специфического компонентов. Неспецифический проявляется увеличением общего количества клеток моноцитарного ряда в костном мозге при всех исследованных видах воздействий (рисунок Г). Выраженность и характер реакции активации моноцитопо-эза можно рассматривать, как специфический компонент, определяемый природой экстремального фактора.

□ Интактные Ш Кровопотеря

■ Гипоксия 0 Фенилгидразиновая анемия

Ш Иммобилизационный стресс И Резекция печени

Рисунок 1. Динамика общего количества моноцитов-макрофагов в костном мозге бедренной кости крыс при экстремальных воздействиях

Примечание: *- достоверные отличия от группы интактных животных

При гипоксических воздействиях проявление реакции моноцитарного ростка зависит от скорости и механизма развития тканевой гипоксии. В результате быстрого удаления из циркуляции эритроцитов и гемоглобина при кровопотере, или в связи с разрушением эритроцитов при фенилшдразиновой анемии активация моноци-топоэза наиболее выражена уже в 1-е сутки после воздействия. При гипоксической гипоксии активация моноцитопоэа развивается постепенно, по мере увеличения числа сеансов и развития тканевой гипоксии. Возможно, данный эффект объясняется чувствительностью макрофагов к эритропоэтину, продукция которого при ткане-

вой гипоксии резко возрастает. Согласно литературным данным, эритропоэтин повышает фагоцитарную активность макрофагов, стимулирует лизосомальные процессы, а также, при взаимодействии с КСФ-ГМ и ИЛ-3, способствует пролиферации данных клеток [ЕД Громыхина и соавт,1997, ЮМ Захаров и соавт ,1997, В А Козлов, 2003,1N Rich, 1991]

Иммобилизация активирует моноцитарный росток кроветворения в течение 6 часов после воздействия Этот эффект может быть обусловлен действием гормонов надпочечников, которые индуцируют секреторную функцию макрофагов [Д Н Ма-янский, 1981, Е.Д Гольдберг, 1991, ЕЛ .Насонов, 1999], блокируют синтез ФНО-а, угнетающего моноцитопозз, вызывают вазоконстрикцию и снижают проницаемость сосудов, замедляя миграцию моноцитов из костного мозга в кровь [Д Н Маянский, 1985, Е Д Гольдберг и соавт, 1990]. При стрессе может иметь значение усиление миграции в костный мозг Т-лимфоцитов, которые в кооперации с элементами гемо-поэзиндуцирующего микроокружения усиливают пролиферацию и дифференциров-ку кроветворных клеток-предшественников [А М. Дыгай и соавт ,1989, В П. Шахов и соавт, 1999]

Участие глюкокортикоидных гормонов в регуляции моноцитопоэза подтверждается в экспериментах с введением синтетического глюкокортикоидного препарата - преднизолона Под влиянием преднизолона наблюдается более значительное, чем при иммобшшзационном стрессе увеличение количества клеток моноцитарного ряда в костном мозге, не сопровождающееся моноцитозом в периферической крови (рисунок 2) Полученные результаты косвенно подтверждают предположение некоторых авторов о «сдерживающем» влиянии глюкокортикоидных гормонов на миграцию клеток крови из костного мозга, предохраняющем пул стволовых клеток от «перерасхода» [Е Б Фомичева и соавт, 1981, В А Козлов и соавт, 1982]

Результаты данного исследования позволяют ожидать угнетения моноцитопоэза при удалении надпочечников Однако эксперименты с иммобилизацией адрена-лэктомированных крыс (рисунок 2), свидетельствуют об активации моноцитарного ростка после воздействия, сопровождающейся увеличением выхода зрелых моноцитов в циркуляцию

* ?77Г ш * t

т ■

п ■ ■ В Н

6 часов 2-е суток

Время после воздействия

□ И нтактн ы е

■ А дрен ал эктом и я +им мобилизация

■ Иммобилизация ЕЯ П ред низоло н

Рисунок 2. Динамика общего количества моноцитов-макрофагов в костном мозге бедренной кости адреналэктомированных крыс после иммобилизации и у крыс после введения преднизолона

Примечание: *- достоверные отличия от группы интактных животных

Характерный для стресса эффект активации моноцитопоэза у адреналэктомированных животных свидетельствует о наличии дублирующих механизмов регуляции активности системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ). В качестве такого механизма может выступать вегетативная нервная система. Введение адреналина и ацетилхолина вызывает быстрое, но кратковременное повышение общего количества моноцитов в костном мозге, а также активирует выход зрелых моноцитов в кровоток (рисунок.З). Активирующее влияние медиаторов нервной системы может реализовываться через а-адрено- и холинорецепторы, обнаруженные на мембране моноцитов [A.C. Савина и соавт., 1980, Е.Д. Гольдберг и соавт.,1997, A.N. Grabowoi, 2002].

Сходство ранней реакции моноцитарного ростка при стрессе у адреналэктомированных животных и у животных после введения адреналина и ацетилхолина, позволяет предположить, что именно вегетативная нервная система обеспечивает срочную регуляцию адаптивной реакции со стороны кроветворной ткани, на которую в реальных условиях накладывается влияние глюкокортикоидных гормонов и других факторов.

2 й § $

3000

2000 -

1000 -

N "Ъ Л

Время после введения препаратов

ЭВведение адреналина

I Введение ацетилхолина

Рисунок 3. Динамика общего количества моноцитов-макрофагов в костном мозге бедренной кости крыс после введения адреналина и ацетилхолина

Примечание: *- достоверные отличия от группы интактных животных

В регуляции моноцитопоэза участвует и гемопоэзиндуцирующее окружение, в частности тучные клетки, выделяющие широкий спектр биологически активных веществ. При введении гепарина в костном мозге происходит быстрое, но кратковременное увеличение числа моноцитов, сходное с реакцией моноцитарного ростка при иммобилизационном стрессе или введении медиаторов вегетативной нервной системы. Гистамин вызывает более позднюю и значительную гиперплазию моноцитарного ростка кроветворения (рисунок 4).

§ Н

6000 -р 4000 -2000 -0 --

Интактные I сут

Время после введения препаратов

4 сут

ШВведение гепарина

ЕЗ В ведение гистамияа

Рисунок 4. Динамика общего количества моноцитов-макрофагов в костном мозге бедренной кости крысы после введения гепарина и гистамина

Примечание: *- достоверные отличия от группы интактных животных

Реакция моноцитарного ростка на действие экстремальных факторов зависит от функционального состояния клеток СМФ. Стимуляция функциональной активно-

ста макрофагов иммуномодулятором тамеритом значительно усиливает и удлиняет время активации моноцитопоэза в ответ на кровопотерю и резекцию печени (рисунок 5).

При ингибированни функциональной активности макрофагов каррагинаном на фоне кровопотери, число моноцитов в костном мозге, начиная с 3-х суток, возрастает. Введение каррагинана при снижении количества клеток СМФ существенно не влияет на реакцию моноцитарного ростка.

Рисунок 5. Динамика общего количества моноцитов-макрофагов в костном мозге бедренной кости крысы после кровопотери и резекции печени при изменении функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов

Примечание: *- достоверные отличия от группы животных без введения препаратов

Одно из проявлений адаптивной роли макрофагов - их участие в образовании эритробластических островков и в регуляции пролиферации и созревания эритроид-ньгх клеток. Макрофаги эритробластических островков составляют лишь часть системы мононуклеарных фагоцитов костного мозга. Большая часть клеток моноцитарного ряда не участвует в формировании ЭО и составляет популяцию свободных моноцитов-макрофагов. Вместе с тем, роль макрофагов ЭО весьма существенна для адаптивной перестройки эритропоэза.

Все исследованные воздействия: кровопотеря, гштоксическая гипоксия, введение фенилгидразина, иммобилизация, изменяют эритропоэтическую функцию макрофагов (рисунок.6). Изменения эритропоэза затрагивают также «внеостровковую» часть кроветворной ткани и протекают в две стадии. Ранняя реакция кроветворной

ткани на действие экстремальных факторов является достаточно типичной и проявляется в ускорении созревания эритроидных клеток в ЭО. Полученные данные согласуются с современными представлениями о запуске стресс-эритропоэза в ранние сроки после действия экстремального фактора [Захаров Ю.М. с соавт., 2002].

а 300 9 250

ю о

200 150 100 -50

¡а£

— СП

□ Интактные ■ Кровопотеря

■ Гипоксия И Фенилгидразиновая анемия

И Иммобилизационный стресс □ Резекция печени

Рисунок 6. Содержание эритробластических островков в костном мозге крыс при экстремаьных воздействиях

Примечание: *- достоверные отличия от группы интактных животных

Последующее изменение эритропоэза характеризуется специфичными для каждого вида воздействия особенностями, касающимися скорости и механизма развития этой реакции.

Восполнение потери эритроцитов при кровопотере обеспечивается компенсаторным выходом эритроидных клеток из «внеостровковой» части костного мозга в периферическую кровь, процессами активного образования новых ЭО и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз. Фенилгидразиновая анемия также сопровождается выходом «виеостровковых» эритроидных клеток в периферическую кровь и образования новых ЭО. При гипоксии основным фактором активации эритропоэза является новообразование ЭО и происходит накопление эритроидных клеток в костном мозге.

Иммобилизационный стресс характеризуется образованием новых эритробластических островков и повторным вовлечением макрофагов в этот процесс. Актива-

ция эритропоэза сопровождается интенсивным выходом «внеостровковых» эритро-идных клеток из костного мозга.

На эритропоэтическую функцию макрофагов в ЭО влияют, как общее количество клеток системы мононуклеарных фагоцитов, так и их функциональная активность

При уменьшении в организме числа клеток СМФ, в результате частичной резекции печени, наблюдается сокращение общего количества ЭО (рисунок 6) Эри-тропоэтическая функция обеспечивается повторным вовлечением макрофагов в эри-тропоэз, тогда как включения новых моноцитов в образование ЭО и расширения плацдарма эритропоэза не происходит, что, вероятно, объясняется участием моноцитов-макрофагов в регенераторных процессах печени

Стимуляция функциональной активности макрофагов тамеритом при кровопотере приводит к более активному образованию новых ЭО и усилению повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз (таблица 1). Однако при повреждении печени тамерит не оказывает стимулирующего влияния на эритропоэтическую функцию макрофагов (таблица 2), что свидетельствует о значении функционального состоянии всей СМФ в эритропоэзе

Таблица 1

Динамика абсолютного количества эритробластических островков (ЭО) разных классов зрелости в костном мозге крыс после кровопотери при изменении функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов (* 103 / бедро)

Срок после кровопотери Абсолютное количество ЭО ЭО 1-го класса ЭО 2-го класса ЭОЗ-го класса Инволю- цирующие ЭО Реконструи рующиеся ЭО

Интакт-ные 118,89111,51 4,66±0,92 16,24±0,52 18,6111,06 55,9712,33 23,42+0,36

Тамерит

1сут 100Д&±5>36 22,74±1,63* 1432±2,04 16,4241,30* ** 35,85±2,85* 13,57*0,74* **

Зсут 205,64±11,6 72,03±5,42* ** 44ДЗ±1Д* ** 29,75±1,98* 34,41*2,63 |26,13±4,73* **

7суг 232,56±10,72 [57,34±2,31* 42^4^3,95* ** 35Д2±3,64 63,07±6,78 35Д5±2,68* **

Каиоагинан

1 сут 36,6±2,38* ** 8,04±0,13* ** 9,76±0,58* ** Г7,85±0,51* ** 4,53±0,64* ** б,95±0,75* **

3 сут 28,1±3,67* ** 15,7±0,78* ** 5,85±0,22* ** 1,28*0,18* ** 2,83±0,12* ** 2,64*0,18* **

7 сут 7,86±0,27* ** 2,87±0,18* ** 2,28±0,25* ** 1,73±0,35* ** 0,82±0,02* ** 0,74*0,04* **

Примечание *- достоверные отличия от группы интактных животных

**- достоверные отличия от группы животных без введения препаратов

Таблица 2

Динамика абсолютного количества эритробластических островков (ЭО) разных классов зрелости в костном мозге крыс после резекции печени на фоне изменения функциональной активности клеток системы мононуклеарных фагоцитов (х 1(Р/ бедро)

Срок после воздействия Интактные животные Тамерит Каррагинан

4 часа 17 часов 4 часа 17 часов

Абсолютное количество ЭО 90 ± 2,35 133,33 ±6,08* ** 61,66±6,73* 79,34±5,51 58,33+8,37*

ЭО 1-го класса 3,87 ±0,41 27,99 ±1,39* 25,9±1,55* 25,83±1,80* 6,73±0,47* **

ЭО 2-го класса 12,87±1,54 22,21 ±1,33* 12,бЗ±0,76* 21,33±1,49* 13,39+1,07

ЭО 3-го класса 10,44±0,83 06,04 ±2,16* 6,83±0,4* 15,7±1,25* ** 16,76+1,17* **

Инволюцирующие ЭО 47,61 ±2,25 35,11 ±1,75* ** 11,41+0,79*** 9,64+0,67* ** 13,39+0,97* **

Реконструирующиеся ЭО 15,39±1,37 11,70 ±0,58* 4,39+0,31* 6,08±0,43* ** 6,73±0,54*

Примечание *- достоверные отличия от группы интактных животных

** - достоверные отличия от группы животных без введения препаратов

Блокада фагоцитарной активности макрофагов каррагинаном при кровопотере вызывает резкое сокращение образования новых эритробластических островков и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз На фоне резекции печени угнетение эритропоэтической функции моноцитов костного мозга, проявляется в меньшей степени

В организме функциональная активность макрофагов, а, следовательно, и их эритропоэтические свойства регулируются тесно взаимосвязанными нервными, эндокринными и локальными механизмами

Большое значение для поддержания эритропоэза в эритробластических островках имеют гормоны надпочечников [Захаров Ю М с соавт, 2002, Дыгай А М с со-авт, 2004] Активация эритропоэза в эритробластических островках у животных после иммобилизационного стресса проявляется усилением формирования новых эритробластических островков, увеличением реконструкции уже существующих эритробластических островков, ускорением созревания эритроидных клеток и развитием ретикулоцитоза

Эти процессы являются результатом взаимодействия гормонов коркового и мозгового вещества надпочечников В результате целенаправленного воздействия на отдельные звенья надпочечниковой системы была предпринята попытка определить роль каждого компонента в регуляции эритропоэза

После введения преднизолона в костном мозге происходит немедленная активация эритропоэза в эритробластических островках повышается интенсивность вовлечения КОЕэ в дифференцировку, повторное вовлечения макрофагов в образование эритробластических островков, скорость созревания эритроидных клеток (таблица 3)В условия стресса эти изменения развиваются постепенно, ко 2-м суткам после начала воздействия Подобный эффект, вероятно, обусловлен свойством глюко-кортикоидных гормонов индуцировать секреторную функцию макрофагов, блокировать синтез цитокинов ИЛ-1, ИЛ-6, ФИО - а, угнетающих эритропоэз, и цитокино-вых рецепторов Доказано также, что глюкокортикоиды вызывают вторичную вазо-констрикцию и снижают проницаемость сосудов [Насонов Е Л, 1987]

Таблица 3

Динамика абсолютного количества эритробластических островков (ЭО) разных классов зрелости в костном мозге крыс после иммобилизационного стресса и после введения преднизолона (х 103 / бедро)

Время после воздействия Абсолютное количество ЭО ЭО 1-го класса ЭО 2-го класс са ЭО 3-го классса Инволюци-рующие ЭО Реконструирующиеся ЭО

Интактные 135.26±6,46 5,26+0,87 18,35±1,08 20.59±2Л2 63,95±5,33 26,31±1,35

Иммобилизация

6 час 76,64±10,16* 8,1 3± 1,3 * 20,80±3,61 12,8 8±2,0 8* 12,73±2,1* 1 8 , 8 8 ± 3 , 8

2 сут 268,31*17,18» 58,78±6,8* 75,02±6,8* 23,03±3,39 47,02±8,7 51,22±6,8 *

Адреналэктомия +иммобилизация

6 часов 60,55±5,4* ¡9,81±2,18* 14,44±2,8 6,02±0,82* ** 17,98±4,7* 12,22±1,88*

2 сутки 142,65±27,23** 41,99^9,04* 42,91±11,9* ** 14,09±6,2 19,26±7,3* ** 22,37±1,08**

Преднизолон

6 часов 188,65*15,83* 44,37±5,48* 49,10±13,64* 18,73±2,78 41,1 ±6,7 * 52,17±8,52*

2 сутки 157,98±7,35 64,03±3,7* 44,21±3,17* 7,4±1,05* 13,52±2,5* 28,56±1,8

Примечание *- достоверные отличия от группы интактных животных

** - достоверные отличия от группы животных без адреналэктомии

Удаление надпочечников в целом не нарушает реализацию эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов, но уменьшает выраженность адаптивной реакции эритроидной ткани на иммобилизацию Так, у адреналэктомированных крыс наблюдается меньшая, по сравнению с неоперированными животными интенсивность образования эритропоэтических островков, более медленное созревание эритроидных клеток, менее активное повторное вовлечение макрофагов в эритропоэз, замедленное восстановление внеостровковой части эритрона после компенсаторной реакции выхода ретикулоцитов в циркуляцию Уровень эритропоэтической активности у адреналэктомированных крыс практически не превышает физиологический, тогда как у здоровых животных иммобилиация приводит к напряжению эритропоэза (таблица 3) Влияние медиаторов вегетативной нервной системы и физиологически активных веществ, секретируемые тучными клетками на эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов реализуется различными способами (таблица 4) Адреналин способствует вовлечению новых макрофагов в эритропоэз, ацетилхолин и гис-тамин увеличивают интенсивность повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз Введение этих веществ приводит к ускорению созревания и выхода эритроидных клееток из зрелых эритробластических островков и «внеостровковой» части костного мозга Под воздействием гепарина снижается интенсивность вовлечения КОЕэ в дифференцировку, замедляется скорость созревания и выход в кровь эршроидных клеток

Как медиаторы вегетативной нервной системы, так и физиологически активные вещества, секретируемые тучными клетками могут оказывать модулирующее влияние на костномозговое кроветворение через моноциты, изменяя их функциональное состояние моноцитов, например, фагоцитарную или секреторную активность Показано, что гистамин, действуя через Н) - рецепторы способен усиливать активность а- нафтилацетатэстеразы в моноцитах и стимулировать секреторную активность моно-нуклеарных клеток [Клименко В А ссоавт,1991] Действие адреналина и ацетилолина может реализовываться через адрено- и холинорецепторы на мембране полипотентной стволовой клетки крови и зрелых моноцитах [Е Д Гольд-бергсоавт, 1990]

Угнетающее воздействие гепарина на эритропоэз вероятно связано с описанным в литературе отрицательным влиянием этого препарата на функциональную активность моноцитов, в частности, блокадой ряда макрофагальных ферментов [А М Дыгай с соавт ,1992]

Таблица 4

Динамика абсолютного количества эритробластических островков (ЭО) разных классов зрелости в костном мозге крыс после введения препаратов (хЮ5/ бедро)

Время после введения Абсолютное количество ЭО 1-го класса ЭО 2-го класса ЭОЗ-го класса Инволю- цирующие ЭО Рехонструи рующиеся ЭО

Интактные 118,89±1 4,6610.92 16,2410,52 1^61+1,06 55,97±2,33 23,4210,36

Адреналин

6 часов 88,14±9,69 21,02±4,72* 16,12±3,12 3,35±2,26* 23,54±3,3* 24,61±3,16

1 сутки 72,83±5,77* 19,74±2,38* 14,68±0,05* 4,21±0,45* 17,04±1,79* 22,54±0,59

3 сутки 281,78±23,31* 47,34±8,83* 46,68±4,32* 42,32±6,61* 82,55±9,57* 62,93±7,92*

7 сутки 97,61±13,39 6,32±1,09 26,91±6,42 29,01±6,42 11,48±2,1* 23,94±3,9

Ацетилхолин

6 часов 86,90±10,11 8,76±2,28* 18,19±2,81 26,59±2,89 16,19±0,84* 16,66±2,13*

1 сутки 54,26±6,54* 16,27±3,39* 11,25±2,25 13,56±2,88 5,24±1,18* 7,96±1,72*

3 сутки 98,97±23,31 12,28±2,58* 30,2±7,65* 5,82±1,32* 21,46±2,2* 23,28±4,98

7 сутки |97,61±11,48 36,26±5,28* 35,32±3,67* 18,04±3,68 16,58±5,44* 5,76±1,85*

Гепарин

1 сутки 51,32±5,01* 1,79+0,64* 2,88+1,05* 8,73+1,30* 23,3512,72* 14,5411,03*

4 сутки 29,4414,16* 2,43±0,67* 2,49±0,56* 4.39±0,70* 13,6411,9 7,7111,16* **

Гистамин

1 сутки 76,9916,13* 26,04±2,65* 24,88+1,91 8,6510,75* 10,51+1,34* 5,8811,34*

4 сутки 265,39128,49* 46,1815,13* 97,45±10,06* 39,6514,53* 27,9213,41* 56,1216,01*

Примечание '-достоверные отличия от группы икгактных животных

ВЫВОДЫ

1 Типичной реакцией моноцитарного ростка кроветворения на различные экстремальные воздействия является неспецифическая активация моноцитопоэза Скорость и продолжительность этой реакции определяются природой экстремального фактора

2 Активация моиоцитопоэза сопровождается изменением эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов костного мозга и развитием адаптивной реакции в эритробластических островках и внеостровковой части костного мозга Ранние сроки после действия экстремального фактора характеризуются ускорением созревания и выхода эритроидных клеток из эритробластических островков Дальнейшая активация эритропоэза определяется специфическими для каждого воздействия особенностями

3 При острой кровопотере адаптивная реакция эритроидного ростка кроветворения обеспечиваются компенсаторным выходом эритроидных клеток из «внеостровковой» части костного мозга в периферическую кровь, а также процессами активного образования новых эритробластических островков и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз

4 Адаптивная реакция кроветворной ткани при фенилгидразиновой анемии проявляется новообразованием эритробластических островков и выходом «внеостров-ковых» эритроидных клеток в периферическую кровь

5 При гипоксической гипоксии активация эритропоэза разворачивается главным образом в эритробластических островках костного мозга Основным фактором активации эритропоэза являются пролиферативные процессы во вновь образованных эритробластических островках, сопровождающиеся накоплением эритроидных клеток в костном мозге

6 Иммобилизационный стресс сопровождается образованием новых эритробластических островков, повторным вовлечением макрофагов в этот процесс и выходом «внеостровковых» эритроидных клеток из костного мозга

7 Эритропоэтическая функция макрофагов зависит как от количества клеток, так и от функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов На удаление части клеток системы мононуклеарных фагоцитов костный мозг отвечает уменьшением числа эритробластических островков и активацией повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз

Стимуляция функциональной активности макрофагов тамеритом приводит к усилению эритропоэтической функции макрофагов костного мозга Блокада фагоцитарной

активности макрофагов каррагинаном угнетает зритропоэтическую функцию моноцитов костного мозга

8 Эритропоэтическая функция моноцитов - макрофагов находится под контролем эндокринной системы, регулирующей интенсивность развития адаптивных реакций в эритробластических островках Введение преднизолона сопровождается немедленной активацией эритропоэза в эритробластических островках У адреналэк-томированных животных наблюдается менее интенсивная активация эритропоэза

9 Медиаторы вегетативной нервной системы адреналин и ацетилхолин активируют зритропоэтическую функцию макрофагов и выход «внеостровковых» эритро-идных клеток из костного мозга Адреналин способствует расширению плацдарма эритропоэза за счет новообразования эритробластических островков Ацетилхолин увеличивает интенсивность повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз

1 0 Регуляция эритропоэза в эритробластических островках осуществляется при взаимодействии макрофагов с тучными клетками Под воздействием гистамина увеличивается интенсивность образования новых эритробластических островков, повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз, скорость созревания и выхода эрит-роидных клеток го эритробластических островков Гепарин снижает интенсивность образования эритробластических островков, замедляет скорость созревания и выход в кровь эритроидных клеток

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Улитко М В , Юшков Б Г Особенности реакции костного мозга на гипоксию // Иммунология Урала - 2003 - № 1 (3) - С 68-69.

2 Улитко М В Особенности реакции моноцитарного ростка кроветворения на кровопотерю // Эколого-физиологические проблемы адаптации материалы XI международного симпозиума - М, 2003 - С 557-558

3 Улитко М В , Юшков Б Г Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при экстремальных воздействиях // International Journal on Immunorehabilitation -M,2003. -T5 -№2 - С 166

4 Сумин М Н, Данилова И Г, Улитко М В., Юшков Б Г Реакция системы эритрона

белых крыс на резекцию печени // Российский физиологический журнал им И М Сеченова - 2004 - Т 90, № 8 - Прил , ч 2. - С 149

5 Улитко М В , Юшков Б Г. Роль моноцитов костного мозга в адаптивных реакциях кроветворной ткани при стимуляции эритропоэза // Российский физиологический журнал им И М Сеченова - 2004 - Т 90, № 8 - Прил , ч 2 - С 242-243

6 Улитко М В, Юшков Б Г Участие моноцитов-макрофагов в компенсаторно-приспособительных реакциях кроветворной ткани // Компенсаторно-приспособительные процессы фундаментальные, экологические и клинические аспекты материалы второй Всероссийской научно-практической конференции -Новосибирск, 2004 - С 79

7 Абидов М Т, Юшков Б Г., Данилова И Г, Сумин М Н, Улитко М В , Старовой-тенко Ю Л Изменение эритропоэза в процессе регенерации печени после частичной гепатэктомии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины -2005 -Т 139 - №5 - С 507-513

8. Юшков Б Г, Абидов М Т, Данилова И Г, Сумин М Н, Улитко М В Роль отдельных звеньев иммунной системы в формировании реакций красной крови после частичной гепатэктомии // Молекулярные механизмы регуляции функции клетки международный симпозиум -Тюмень, 2005 -С 106-107

9 Улитко М.В , Юшков Б Г, Ослина Д С Влияние медиаторов вегетативной нервной системы на макрофагальную регуляцию эритропоэза // Научные труды I съезда физиологов СНГ - М, 2005 -Т 2 - С 94

10 Юшков Б Г, Данилова И Г, Улитко М В , Чиши М А, Игнатенко И Н Особенности эритропоэза в эритробластических островках костного мозга в процессе регенерации печени после частичной гепатэктомии // Здравоохранение Башкортостана -2005 -№ 7 - С 221-224

11 Улитко М В , Быкова М Ю , Юшков Б Г Роль гормонов надпочечников в макро-фагальной регуляции эритропоэза // Иммунология Урала - 2006 ~ № 1(5) -С 29-30

12 Улитко М В , Шутова С А, Юшков Б Г Влияние гепарина и гистамина на эри-тропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов костного мозга // Иммунология Урала -2006 -№ 1(5) - С 30-31

13 Юшков Б Г , Улитко М В , Быкова М Ю , Шутова С В Надпочечниковая регуля-

ция эритропоэтической функции макрофагов // Вестник Уральской медицинской академической науки - 2006 - № 2-3 (15) - С 48

14 Улитко М В , Кореняк Д А, Изменения в центральном звене эритропоэза в усло-

виях адоптивного переноса лимфоцитов // Материалы региональной научно-практической конференции - Красноярск, 2007 -С 165-167.

15 Данилова И Г, Юшков Б Г, Абидов М Т., Чиши М А , Тюменцева Н В , Гетте И Ф , Улитко М В Влияние макрофагального звена иммунной системы на восстановительный рост тканей II Сибирский консилиум медико-фармацевтический журнал -2007 -№7(62) - С33

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

КОЕэ - колониеобразующая единица эритроцитарная

ЭО - эритробластический островок

СМФ - система мононуклеарных фагоцитов

КСФ-ГМ - колониестимулирующий фактор гранулоцитарно-моноцитарный

ИЛ - интерлейкин

ФНО - фактор некроза опухоли

Улитко Мария Валерьевна

Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов

03.00.13. — «Физиология»

Автореферат

Подписано в печать 20.05 2008 г Формат 60x84/16 Усл. печ. л. 1,5 Тираж 120. Заказ № 158.

Размножено с готовых оригинал-макетов в типографии «Уральский центр академического обслуживания» 620219, г. Екатеринбург, ул С. Ковалевской, 18.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов"

Актуальность исследования. Проблема регуляции системы крови в физиологических условиях и при экстремальных воздействиях на организм является актуальной в современной биологии и медицине, что объясняется ростом числа неблагоприятных экологических факторов и широким распространением гематологических заболеваний.

Важную роль в регуляции функциональной активности гемопоэтических клеток отводят системе мононуклеарных фагоцитов. Моноциты-макрофаги костного мозга, являясь центральной клеткой эритробластического островка, обладают высоким аффинитетом по отношению к эритроидным-клеткам, регулируют их пролиферацию1 и дифференцировку, создают специфическое гемопо-этическое микроокружение, обеспечивая адаптивные реакции кроветворной ткани при экстремальных воздействиях [42,61,65,127,166,167,177,183,187,203, 210,212].

Долгое время традиционный подход к изучению физиологии макрофагов, ограничивался ¿выяснением роли мононуклеарных фагоцитовв преобразовании антигена и особенностей их взаимодействия с лимфоцитами в ходе иммунного ответа. Однако еще И.И. Мечников подчеркивал, что переработка корпускулярных чужеродных частиц в макрофаге - лишь одно из многих проявлений их метаболической« функции [100].

Появление новых методов в 30 - 40-х годах прошлого века позволило пересмотреть некоторые биохимические основы фагоцитоза и обратить внимание на то, что помимо поглощающей и переваривающей функции макрофаги выполняют еще и секреторную функцию [37,108,133,150].

Значительный успех в изучении биологических свойств моноцитов и макрофагов, был достигнут после объединения в 1972 г. циркулирующих моноцитов, органо- и тканевоспецифических макрофагов и их костномозговых предшественников в систему мононуклеарных фагоцитов [52,72,96,161].

В настоящее время достаточно подробно исследованы морфо-функциональные, цитохимические и иммунофенотипические признаки клеток системы мо-нонуклеарных фагоцитов [29,93,120,137,138,140,204,208]. Накоплены обширные данные, касающиеся структуры и свойств биологически активных веществ, секретируемых активированными макрофагами [7,28,29,71,72,74,85,96,97,100, 117,133,136,137,139,146,160,161,184,189,190].

Доказано, что благодаря высокой функциональной активности, мононук-леарные фагоциты являются полифункциональными клетками. Макрофаги играют важную роль в поддержании структурного гомеостаза биосистемы в норме и в его восстановлении при патологии [12,44,80,90,147]. От функционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов зависит устойчивость к травме, кровопотере, ожогам, интоксикации, к разным вариантам циркуляционного шока [52,70,82,100,139,141,143,144]. Стимуляция-системы мононуклеарных фагоцитов вызывает увеличение толерантности к стрессу, а депрессия фагоцитарной активности макрофагов нередко приводит к летальному исходу при экстремальных воздействиях [45,125,153,155,160,164]. Велико значение макрофагов в формировании противоопухолевой*резистентности [23,24,110,120,138].

Первые указания на возможную роль фагоцитирующих клеток в регуляции гемопоэза встречаются ранних исследованиях Я.Г.Ужанского (1932).

Существование взаимосвязи гемопоэтических клеток с макрофагами подтвердило и открытие в 1956 году М.Везз18 и .Г.ВгеШп-Оогшз особых структурно-функциональных клеточных ассоциаций, состоящих из центрального макрофага и эритроидных клеток различной степени зрелости, таких как эрит-робластические островки [65,166].

Дальнейшие многочисленные исследования ученых, проводившиеся более четырех десятков лет, подтвердили существование данного способа организации эритропоэза в костном мозге у многих видов млекопитающих, а также уточнили морфологию[18,37,53,55,59,61,62,63,64,68,108,146,149,150,167,169, 177,178,183,187,192,199,203,207,208,210].

Согласно современным представлениям, системе мононуклеарных фагоцитов отводится значительная роль в регуляции функциональной активности гемопоэтических клеток. Получено большое количество данных о создании макрофагами эритробластических островков специфического микроокружения, обеспечивающего пролиферацию и дифференцировку эритроидных клеток [14,16,19,25,37,39,52,53,91,113,138,140,171,172,179,191,200,201,202,203,206].

В1 ходе исследований, проводившихся* в последнее десятилетие, были выявлены, многочисленные факты, свидетельствующие1 о-том, что гемопоэзрегули-рующая функция макрофагов костного мозга находится под контролем большого количества взаимосвязанных между собой факторов; включающих компоненты гемопоэзиндуцирующего микроокружения и нейроэндокринной системы [41,42,85,129,165].

Вместе с тем, многие вопросы, касающиеся роли моноцитов-макрофагов костного! мозга в адаптивных реакциях системы» крови, еще далеки от своего решения.

Это касается, прежде всего, реакции системы мононуклеарных- фагоцитов^ при воздействии- на организм экстремальных факторов. Актуальность данной1 проблемы определяется-не только-теоретическими, но и практическими задачами, связанными'с увеличением числатематотропных факторов и гематологических заболеваний. Требуют дальнейшей расшифровки конкретные регулятор-ные механизмы, эритропоэза, протекающие-с участием макрофагов. Не полностью5 идентифицированы, вырабатываемые макрофагами гуморальные факторы. Данные литературы свидетельствуют о зависимости эритропоэтических свойств центральных макрофагов .эритробластических островков от функционального состояния, системьь мононуклеарных фагоцитов [46,55,107,131,141]. Не до'конца:установлены механизмы регуляции-моноцитопоэза нефункциональной активности макрофагов костного мозга.

Не менее важным представляется- вопрос о связи- макрофагальных механизмов регуляции эритропоэза с другими регуляторными системами-организма, в частности с нейроэндокринной системой. В современной литературе эта проблема освящена недостаточно и противоречиво [8,27,30,39,40,41,43,51,65,81, 99,104,122,123,130,131,135,145,154,156,157,164].

Данные литературы свидетельствуют о реализации нейроэндокринных влияний на функциональную активность моноцитов-макрофагов костного мозга через локальные механизмы регуляции [17,52,53,68,76,81,109,159,165]. Однако исследованы далеко не все конкретные способы межклеточного взаимодействия центральных макрофагов эритробластических островков с другими компонентами гемопоэзиндуцирующего микроокружения. До конца не расшифрованы и механизмы межклеточной кооперации макрофагов и Т-лимфоцитов [51,153,157].

Попытки изменения функциональной активности мононуклеарных фагоцитов с помощью иммуномодуляторов [13,65,111,142], ставят вопрос о поисках эффективных лекарственных препаратов, для целенаправленной модуляции гемопоэтической функции макрофагов. Известные на сегодняшний день имму-нокорректоры изучены с точки зрения их влияния на показатели иммунного статуса. В то же время, использование этих препаратов может открыть принципиально новые пути для регуляции гемопоэза. I

Таким образом, изучение механизмов регуляции гемопоэтической функции моноцитов-макрофагов костного мозга является актуальной, научной проблемой и требует специальных целенаправленных исследований.

Цель исследования: оценить роль моноцитов-макрофагов костного-мозга в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов.

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать реакцию моноцитарного ростка кроветворения при действии на организм различных экстремальных факторов: кровопотери, гипоксии, фенилгидразиновой анемии, иммобилизационного стресса, частичной гепатэктомии.

2. Проанализировать изменения эритропоэтической активности моноцитов-макрофагов костного мозга при действии на организм экстремальных факторов.

3. Оценить эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов на фоне стимуляции функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов тамеритом.

4. Оценить эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов при инги-бировании функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов каррагинаном.

5. Проанализировать некоторые механизмы регуляторного влияния надпочечников на эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов.

6. Определить роль медиаторов вегетативной нервной системы - адреналина и ацетилхолинав макрофагальной регуляции эритропоэза.

7. Исследовать влияние продуктов секреции тучных клеток — гепарина и гистамина на реакции моноцитов-макрофагов костного мозгам

Научная новизна исследования:

Проведен сравнительный анализ реакции моноцитов-макрофагов костного мозга-при действии на организм экстремальных факторов. Показано, что активация моноцитопоэза является неспецифической реакцией моноцитарного ростка кроветворения на экстремальные воздействия.

Доказано, что эритропоэтическая функция моноцитов-макрофагов костного мозга зависит от количествами функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов.

Установлено, что гормоны надпочечников, медиаторы вегетативной нервной -системы и физиологически активных веществ, секретируемых тучными клетками могут оказывать влияние на макрофагальную регуляцию эритропоэза, регулируя скорость и продолжительность развития адаптивных реакций-в эритробла-стических островках.

Показана возможность целенаправленного воздействия на эритропоэтиче-скую функцию макрофагов с помощью иммуномодуляторов, избирательно изменяющих функциональную активность моноцитарно-макрофагального звена.

Теоретическая значимость работы. Результаты исследования позволяют расширить современные представления о роли системы мононуклеарных фагоцитов в формировании адаптивных и компенсаторных реакций гемопоэти-ческой ткани при действии на организм экстремальных факторов. Выявлено, что реакция моноцитов-макрофагов костного мозга на экстремальные воздействия носит неспецифический характер и проявляется увеличением общего количества клеток моноцитарного ряда.

Результаты исследования позволяют раскрыть существенные моменты макрофагальной регуляции гемопоэза. Полученные данные доказывают, что* для проявления эритропоэтической функции макрофагов эритробластических островков важным является функциональное состояние всей системы мононук1 леарных фагоцитов.

Продемонстрировано, что реакция моноцитарного ростка кроветворения и эритропоэтическая функция макрофагов костного мозга контролируется ней-роэндокринной системой'и гемопоэзиндуцирующим микроокружением.

Практическая значимость работы. Теоретически обоснована возможI ность коррекции гемопоэтической функции макрофагов в клинической практике при гематологических заболеваниях, связанных с активацией или угнетением эритропоэза, путем целенаправленного воздействия на функциональную активность моноцитарно-макрофагального звена с помощью иммунотропных лекарственных препаратов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Реакция мононуклеарных фагоцитов костного мозга на экстремальные воздействия проявляется неспецифическим увеличением общего количества клеток моноцитарного ряда. Выраженность и характер реакции активации мо-ноцитопоэза определяется природой экстремального фактора.

2. Активация моноцитопоэза сопровождается изменением эритропоэтической функции моноцитов-макрофагов костного мозга и развитием адаптивной реакции в эритробластических островках костного мозга.

3. На эритропоэтическуюя функцию моноцитов-макрофагов костного мозга оказывают влияние количество и функциональное состояние клеток системы мононуклеарных фагоцитов.

4. Регуляции моноцитопоэза и эритропоэтических свойств макрофагов, осуществляется с участием эндокринной и нервной систем, а также гемопоэзин-дуцирующего микроокружения.

Апробация работы. Работа апробирована , на заседании XI международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (г. Москва,

2003 г.), на I Всероссийской конференции « Физиология иммунной системы» (г. Сочи, 2003 г.), на III конференции иммунологов Урала (г. Челябинск, 2003 г.), на XIX съезде физиологического общества им. И.П.Павлова (г. Екатеринбург,

2004 г.), на 2-ой Всероссийской научно-практической конференции «Компенсаторно-приспособительные процессы: фундаментальные, экологические и клинические аспекты» (г. Новосибирск, 2004 г.), на Международном симпозиуме «Молекулярные механизмы регуляции функции клетки» (г.Тюмень, 2005), на I съезде физиологов СНГ (г.Сочи, 2005 г.), на Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Типовые патологические процессы» (г.Уфа, 2005 г.), на V конференции иммунологов Урала (г. Оренбург, 2006 г.), на III съезде физиологов Урала (г. Екатеринбург, 2006 г.), на Региональной научно-практической конференции «Вопросы интегративной физиологии» (г. Красноярск, 2007 г.). По материалам исследования опубликовано 15 научных работ, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК - 3.

Внедрение. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедре физиологии человека и животных Уральского государственного университета имени А.М. Горького, в научных разработках Института иммунологии и физиологии Уральского отделения Российской академии наук.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Улитко, Мария Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Типичной реакцией моноцитарного ростка кроветворения на различные экстремальные воздействия является неспецифическая активация моноцитопоэза. Скорость и продолжительность этой реакции определяются природой экстремального фактора.

2. Активация моноцитопоэза сопровождается изменением эритропоэтиче-ской функции моноцитов-макрофагов костного мозга и развитием адаптивной реакции в эритробластических островках и «внеостровковой» части костного мозга. Ранние сроки после действия экстремального фактора характеризуются ускорением созревания и выхода эритроидных клеток из эритробластических островков. Дальнейшая активация эритропоэза определяется специфическими для каждого воздействия особенностями.

3. При острой кровопотере адаптивная реакция эритроидного ростка кроветворения обеспечиваются компенсаторным выходом эритроидных клеток из «внеостровковой» части костного мозга в периферическую кровь, а также процессами активного образования новых эритробластических островков и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз.

4. Адаптивная реакция кроветворной ткани при фенилгидразиновой анемии проявляется новообразованием эритробластических островков и выходом «вне-островковых» эритроидных клеток в периферическую кровь.

5. При гипоксической гипоксии активация эритропоэза разворачивается главным образом в эритробластических островках костного мозга. Основным фактором активации эритропоэза являются пролиферативные процессы во вновь образованных эритробластических островках, сопровождающиеся накоплением эритроидных клеток в костном мозге.

6. Иммобилизационный стресс сопровождается образованием новых эритробластических островков, повторным вовлечением макрофагов в этот процесс и выходом «внеостровковых» эритроидных клеток из костного мозга.

7. Эритропоэтическая функция макрофагов зависит как от количества клеток, так и от функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов. На удаление части клеток системы мононуклеарных фагоцитов костный мозг отвечает уменьшением числа эритробластических островков и активацией повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз. Стимуляция функциональной активности макрофагов тамеритом приводит к усилению эритропоэтиче-ской функции макрофагов костного мозга. Блокада фагоцитарной активности макрофагов каррагинаном угнетает эритропоэтическую функцию моноцитов костного мозга.

8. Эритропоэтическая функция моноцитов - макрофагов находится под контролем эндокринной системы, регулирующей интенсивность развития адаптивных реакций в эритробластических островках. Введение преднизолона сопровождается немедленной активацией эритропоэза в эритробластических островках. У адреналэктомированных животных наблюдается менее интенсивная активация эритропоэза.

9. Медиаторы вегетативной нервной системы адреналин и ацетилхолин активируют эритропоэтическую функцию макрофагов и выход «внеостровковых» эритроидных клеток из костного мозга. Адреналин способствует расширению плацдарма эритропоэза за счет новообразования эритробластических островков. Ацетилхолин увеличивает интенсивность повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз.

10. Регуляция эритропоэза в эритробластических островках осуществляется при взаимодействии макрофагов с тучными клетками. Под воздействием гистамина увеличивается интенсивность образования новых эритробластических островков, повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз, скорость созревания и выхода эритроидных клеток из эритробластических островков и «внеост-ровковой» части костного мозга. Гепарин снижает интенсивность образования эритробластических островков, замедляет скорость созревания и выход в кровь эритроидных клеток.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно современным представлениям, системе мононуклеарных фагоцитов отводится значительная роль в регуляции функциональной активности гемопоэтических клеток. Моноциты-макрофаги костного мозга, являясь центральной клеткой эритробластического островка, обладают высоким аффинитетом по отношению к эритроидным клеткам, продуцируя широкий спектр биологически активных веществ, регулируют их пролиферацию и дифференцировку, создают специфическое гемопоэтическое микроокружение, обеспечивая адаптивные реакции кроветворной ткани при экстремальных воздействиях [42,61,65,119,140,153,167,177,183,187,203,210]. Вместе с тем, многие вопросы, касающиеся роли моноцитов-макрофагов костного мозга в адаптивных реакциях системы крови, еще далеки от своего решения.

Важным, но практически не изученным является вопрос о реакции системы мононуклеарных фагоцитов и роли макрофагов в формировании реакций эритроидного ростка при воздействии на организм экстремальных факторов.

Требуют дальнейшей расшифровки конкретные регуляторные механизмы эритропоэза, протекающие с участием макрофагов. Данные литературы свидетельствуют о зависимости эритропоэтических свойств центральных макрофагов эритробластических островков от функционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов [46,55,107,127,141]. Попытки изменения функциональной активности мононуклеарных фагоцитов с помощью иммуномодуляторов [13,65,111,142], ставят вопрос о поисках эффективных лекарственных препаратов, для целенаправленной модуляции гемопоэтиче-ской функции макрофагов.

Остается неисследованным вопрос о взаимосвязи макрофагальных механизмов регуляции эритропоэза с другими регуляторными системами организма, в частности с нейроэндокринной системой и компонентами гемопо-эзиндуцирующего микроокружения [41,42,85,128,165].

Полученные данные свидетельствуют, что типичной реакцией моноцитарного ростка на различные экстремальные воздействия является быстрая активация моноцитопоэза, характеризующаяся увеличением общего количества клеток моноцитарного ряда, включая малодифференцированные формы.

Активация моноцитопоэза при иммобилизационном стрессе, при действии гематотропных факторов, а также после удаления части клеток системы мононуклеарных фагоцитов позволяет сделать вывод о том, что усиление пролиферативной активности моноцитов костного мозга является неспецифической реакцией на любое стрессорное воздействие. Рост общего числа клеток моноцитарного ряда, выявляемый цитохимическим методом в ранние сроки после некоторых экстремальных воздействиях (кровопотеря, резекция печени) сопровождается снижением количества зрелых моноцитарных клеток, что может свидетельствовать об их выходе из костного мозга.

Специфические особенности реакции активации моноцитопоэза определяются видом воздействия.

При гипоксических воздействиях проявление реакции моноцитарного ростка зависит от скорости и механизма развития тканевой гипоксии. В результате быстрого удаления из циркуляции эритроцитов и гемоглобина при кровопотере, или в связи с разрушением эритроцитов при фенилгидразино-вой анемии активация моноцитопоэза наиболее выражена уже в 1-е сутки после воздействия. При гипоксической гипоксии активация моноцитопоэа развивается постепенно, по мере увеличения числа сеансов и развития тканевой гипоксии. Возможно, данный эффект объясняется чувствительностью макрофагов к эритропоэтину, продукция которого при тканевой гипоксии резко возрастает. Согласно литературным данным, эритропоэтин повышает фагоцитарную активность макрофагов, стимулирует лизосомальные процессы, а также способствует пролиферации данных клеток [46,56,82,114,136, 200,201].

Иммобилизация активирует моноцитарный росток кроветворения в течение 6 часов после воздействия. Этот эффект может быть обусловлен действием гормонов надпочечников, которые индуцируют секреторную функцию макрофагов [41,100,104], тормозят миграцию вновь образовавшихся моноцитов из костного мозга в кровь, не влияя на процессы их дифференцировки, вызывают вазоконстрикцию и снижают проницаемость сосудов, блокируют синтез ТЫБ-а, угнетающего моноцитопоэз [39,40,41,53,99,104,134]. При стрессе значение может иметь и усиление миграции в костный мозг Т-лимфоцитов, которые в кооперации с элементами гемопоэзиндуцирующего микроокружения усиливают пролиферацию и дифференцировку кроветворных клеток-предшественников [53,126,153].

Участие глюкокортикоидных гормонов в регуляции моноцитопоэза подтверждается в экспериментах с введением синтетического глюкокортико-идного препарата - преднизолона. Под влиянием преднизолона, как и при иммобилизационном стрессе, наблюдается увеличение количества клеток моноцитарного ряда в костном мозге, не сопровождающееся моноцитозом в периферической крови. Полученные результаты косвенно подтверждают предположение некоторых авторов о «сдерживающем» влиянии глюкокортикоидных гормонов на миграцию клеток крови из костного мозга, предохраняющем пул стволовых клеток от «перерасхода» [81,134,156,157,164].

Результаты данного исследования позволяют ожидать угнетения моноцитопоэза при удалении надпочечников. Однако эксперименты с иммобилизацией адреналэктомированных крыс, напротив, свидетельствуют об активации моноцитарного ростка воздействия, сопровождающейся увеличением выхода зрелых моноцитов в циркуляцию.

Эффект активации моноцитопоэза у адреналэктомированных животных, характерный для стресса, свидетельствует о наличии дублирующих механизмов регуляции активности системы мононуклеарных фагоцитов. В качестве такого механизма может выступать вегетативная нервная система. Введение адреналина и ацетилхолина вызывает быстрое повышение общего количества моноцитов в костном мозге, а также активирует выход зрелых моноцитов в кровоток, что свидетельствует о влиянии адреналина и ацетилхолина на процессы пролиферации, дифференцировки и миграции клеток моноритарного ряда. Активирующее влияние медиаторов нервной системы может реализовываться через а-адрено- и холинорецепторы, обнаруженные на мембране моноцитов [40,43,100,117,122,143,176]. Сходство ранней реакции моноцитарного ростка при стрессе у адреналэктомированных животных и у животных после введения адреналина и ацетилхолина, позволяет предположить, что именно вегетативная нервная система обеспечивает срочную регуляцию адаптивной реакции со стороны кроветворной ткани, на которую в реальных условиях накладывается влияние глюкокортикоидных гормонов и других факторов.

В регуляции моноцитопоэза участвует и гемопоэзиндуцирующее окружение, в частности тучные клетки, выделяющие широкий спектр биологически активных веществ. При введении гепарина в костном мозге происходит быстрое, но кратковременное увеличение числа моноцитов, сходное с реакцией моноцитарного ростка при иммобилизационном стрессе или введении медиаторов вегетативной нервной системы. Гистамин вызывает более позднюю гиперплазию моноцитарного ростка кроветворения.

Активация моноцитопоэза наблюдается и при снижении общего количества клеток системы мононуклеарных фагоцитов, вызываемом в эксперименте частичной резекцией печени.

Реакция моноцитарного ростка на действие экстремальных факторов зависит от функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов. Стимуляция функциональной активности макрофагов иммуномоду-лятором тамеритом значительно усиливает и удлиняет активацию моноцитопоэза в ответ на кровопотерю и резекцию печени. При ингибировании функциональной активности макрофагов каррагинаном на фоне кровопотери число моноцитов в костном мозге постепенно возрастает, что можно рассматривать как компенсаторную реакцию со стороны системы мононуклеарных фагоцитов. Введение каррагинана при снижении количества клеток этой системы существенно не влияет на реакцию моноцитарного ростка.

Одно из проявлений адаптивной роли макрофагов - их участие в образовании эритробластических островков и в регуляции пролиферации и созревания эритроидных клеток.

Макрофаги эритробластических островков составляют лишь часть системы мононуклеарных фагоцитов костного мозга. Количество таких макрофагов возрастает через некоторое время после увеличения общего количества клеток моноцитарного ряда. Большая часть клеток моноцитарного ряда не участвует в формировании эритробластических островков и составляет популяцию свободных моноцитов-макрофагов.

Вместе с тем, роль макрофагов эритробластических островков весьма существенна для адаптивной перестройки эритропоэза. Все исследованные воздействия: кровопотеря, гипоксическая гипоксия, введение фенил гидразина, иммобилизация, активируют эритропоэтическую функцию макрофагов.

Активация островкового эритропоэза достигается тремя путями. Первый заключается в формировании новых эритробластических островков вокруг макрофагов костного мозга. Второй - в реконструкции эритропоэза на основе уже существующего инволюцирующего островка. Третий путь - это ускорение созревания эритроидных клеток в короне эритробластических островков, связанное с усилением функциональной активности центральных макрофагов. Однако значение каждого из перечисленных механизмов различно при разных экстремальных воздействиях.

Изменения эритропоэза затрагивают также внеостровковую часть кроветворной ткани и протекают в две стадии. Ранняя реакция кроветворной ткани на действие экстремальных факторов является достаточно типичной и проявляется в ускорении созревания эритроидных клеток в эритробластических островках. Полученные данные согласуются с современными представлениями о запуске стресс-эритропоэза в ранние сроки после действия экстремального фактора [39,45,64,65,155,164].

Последующая активация эритропоэза характеризуется специфичными для каждого вида воздействия особенностями, касающимися скорости и механизма развития этой реакции.

При действии факторов, приводящих к гипоксическому состоянию организма, быстрее всего ответная реакция со стороны эритробластических островков развивается при разрушении эритроцитов или элиминации их из периферического русла. При острой кровопотере признаки активации эритропоэза наблюдаются уже на 1-е сутки, при фенилгидразиновой анемии аналогичные изменения развиваются лишь на 3-й сутки, а при гипоксической гипоксии — через 7 сеансов воздействия.

Восполнение потери эритроцитов при кровопотере обеспечивается компенсаторным выходом эритроидных клеток, как из эритробластических островков, так и из «внеостровковой» части костного мозга в периферическую кровь, а также процессами активного образования новых эритробластических островков и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз.

Фенилгидразиновая анемия также сопровождается выходом «внеост-ровковых» эритроидных клеток в периферическую кровь, восстановление эритрона происходит за счет образования новых эритробластических островков.

При гипоксии основным фактором активации эритропоэза являются пролиферативные процессы во вновь образованных эритробластических островках, не сопровождающиеся, однако активным выходом свободных эритроидных клеток в периферическую кровь, в результате чего происходит их накопление в костном мозге.

Иммобилизационный стресс характеризуется образованием новых эритробластических островков и повторным вовлечением макрофагов в этот процесс. Активация эритропоэза сопровождается интенсивным выбросом свободных эритроидных клеток из костного мозга.

На эритропоэтическую функцию макрофагов в эритробластических островках влияют, как общее количество клеток системы мононуклеарных фагоцитов, так и их функциональная активность.

При удалении части клеток системы мононуклеарных фагоцитов, в результате частичной резекции печени, наблюдается сокращение общего количества эритробластических островков. Эритропоэтическая функция обеспечивается повторным вовлечением макрофагов в эритропоэз, тогда как включения новых моноцитов в образование эритробластических островков и расширения плацдарма эритропоэза не происходит, что, вероятно, объясняется участием моноцитов-макрофагов в регенераторных процессах печени [12,83,121,151,175].

Более значительное, чем при других воздействия накопление во вне-островковой части костного мозга свободных эритроидных клеток, позволяет предположить, что при снижении общего количества клеток системы мононуклеарных фагоцитов главным механизмом восстановления эритрона становится именно «внеостровковый» эритропоэз.

Анализ влияния функциональной активности макрофагов на их эритропоэтическую функцию свидетельствует, что стимуляция функциональной активности иммуномодулятором тамеритом приводит к ускорению активации системы мононуклеарных фагоцитов и значительной перестройке эритропоэза в костном мозге.

Во-первых, ускоряется созревание эритроидных клеток в эритробластических островках костного мозга. Во-вторых, процессы эритропоэза смещаются в сторону образования новых эритробластических островков на фоне уменьшения повторного использования макрофагов. В-третьих, под влияние тамерита со стороны «внеостровкового» эритропоэза наблюдается увеличение количества свободных эритроидных клеток.

Перераспределение процессов эритропоэза в направлении образования новых эритробластических островков обеспечивает более быстрый и адекватный ответ кроветворной ткани на кровопотерю и резекцию печени без увеличения общего количества КОЕэ, вовлекаемых в эритропоэз. По-видимому, именно повышенная функциональная активность центральных макрофагов новых эритробластических островков способствует более быстрому созреванию и выходу из эритробластических островков молодых эритроидных клеток.

Таким образом, эритропоэзрегулирующая функция центральных макрофагов эритробластических островков у крыс под влиянием тамерита проявляется более полно, что, вероятно, обусловлено действием тамерита на функционально-метаболическую и секреторную активность клеток моноци-тарно-макрофагального ряда [2]. В частности, препарат обратимо подавляет выработку макрофагами ФНО, ИЛ-1, простагландинов, оказывающих инги-бирующее действие на моноцитопоэз, эритропоэтическую функцию макрофагов и продукцию эритропоэтина в организме [74,117,136,140].

Блокада фагоцитарной активности макрофагов каррагинаном при кро-вопотере сопровождается развитием компенсаторной реакции со стороны клеток моноцитарного ряда в виде резкой активации моноцитопоэза. В то время как на фоне уменьшения числа клеток системы мононуклеарных фагоцитов, подобная компенсаторная реакция не развивается.

При снижении функциональной активности макрофагов нарушается и их способность образовывать новые эритробластические островки. Однако введение каррагинана не оказывает ингибирующего влияния на активность макрофагов в сформированных эритробластических островках, в результате чего увеличивается скорость созревания эритроидных клеток и повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз. Эти процессы обеспечивают адаптивный ответ кроветворной ткани на кровопотерю, который, хотя и сопровождается умеренным ретикулоцитозом в периферической крови, не является адекватным, так как полностью не компенсирует нарушения эритрона, вызванные кровопотерей. Торможение активности эритропоэза в костном мозге на фоне блокады фагоцитарной активности макрофагов не затрагивает «внеостровко-вую» часть эритрона, которая, напротив, характеризуется более значительным накоплением в костном мозге свободных эритроидных клеток, по отношению к группе животных с нормальной фагоцитарной активностью.

Аналогичные изменения эритропоэтической функции макрофагов наблюдаются и при уменьшении числа клеток системы мононуклеарных фагоцитов на фоне блокады фагоцитарной активности макрофагов каррагинаном. Однако в этом случае нарушения эритропоэза более выражены, особенно в пролиферативную фазу регенерации. В этот период еще более снижается интенсивность образования эритробластических островков, и замедляются процессы созревания эритроидных клеток и выхода их из костного мозга. В периферической крови не наблюдается увеличения количества ретикулоцитов, эритроцитов и гематокритного числа, выраженных у животных без блокады фагоцитарной активности макрофагов.

Таким образом, стимуляция функциональной активности макрофагов тамеритом приводит к активации моноцитарного ростка кроветворения и к усилению эритропоэтической функции макрофагов. Блокада фагоцитарной активности макрофагов в целом не влияет реакцию моноцитарного ростка кроветворения, но угнетает эритропоэтическую функцию моноцитов костного мозга, причем в большей степени при уменьшении общего числа клеток системы мононуклеарных фагоцитов.

Для изучения роли эндокринной системы были выбраны надпочечники, поскольку, по данным многих авторов, гормоны надпочечников имеют большое значение для поддержания эритропоэза в эритробластических островках [30,41,51,65,99,100,104,134,156,157,164,195]. Известно,,что наиболее полно роль гормонов надпочечников в регуляции гемопоэза проявляется условиях стресса, при воздействии на организм экстремальных факторов. Показано, что иммобилизационное воздействие приводит к развитию гиперплазии кроветворной ткани костного мозга, в основе чего лежит усиление миграции Т-лимфоцитов-регуляторов в костный мозг, где они посредством продукции цитокинов, гликозаминогликанов и межклеточных взаимодействий увеличивают пролиферацию и дифференцировку кроветворных клеток-предшественников в гемопоэтических островках [53,153]. Результаты проведенных экспериментов, свидетельствуют, что активация эритропоэза в эритробластических островках у животных после иммобилизационного стресса, развивается в 3-х направлениях: во-первых, усиливается формирование новых эритробластических островков, во-вторых, увеличивается реконструкция уже существующих эритробластических островков, в-третьих, ускоряется созревание эритроидных клеток, появляется ретикулоцитоз.

Активация эритропоэза в этом случае является результатом взаимодействия гормонов коркового и мозгового вещества. В результате целенаправленного воздействия на отдельные звенья надпочечниковой системы была предпринята попытка определить роль каждого компонента в регуляции эри

• *! тропоэза.

Так, после введения преднизолона в костном мозге наблюдаются те же процессы, что и при иммобилизационном стрессе: повышение интенсивности вовлечения КОЕэ в дифференцировку, активация повторного вовлечения макрофагов в образование эритробластических островков, ускорение созревания эритроидных клеток. Однако если в условия стресса эти изменения развиваются постепенно, ко 2-м суткам после начала воздействия, то непосредственное введение глюкокортикоидного гормона приводит к немедленной активации эритропоэза в эритробластических островках. Подобный эффект, вероятно, обусловлен свойством глюкокортикоидных гормонов индуцировать секреторную функцию макрофагов, блокировать синтез цитокинов ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-а, угнетающих эритропоэз, и цитокиновых рецепторов. Доказано также, что глкжокортикоиды вызывают вторичную вазоконстрик-цию и снижают проницаемость сосудов [53,104,164], чем, возможно и объясняется меньшее количество ретикулоцитов в периферичес-кой крови после введения преднизолона, при одинаковой интенсивности эритропоэза в костном мозге.

Удаление надпочечников в целом не нарушает реализацию эритропоэти-ческой функции моноцитов-макрофагов, но уменьшает выраженность адаптивной реакции эритроидной ткани на иммобилизацию. Так, у адреналэкто-мированных крыс наблюдается меньшая, по сравнению с неоперированными животными интенсивность вовлечения КОЕэ в дифференцировку, более медленное созревание эритроидных клеток, менее активное повторное вовлечение макрофагов в образование эритробластических островков, замедленное восстановление «внеостровковой» части эритрона после компенсаторной реакции выхода ретикулоцитов в циркуляцию. Уровень эритропоэтической активности у адреналэктомированных крыс практически не превышает физиологический, тогда как у здоровых животных иммобилизация приводит к напряжению эритропоэза. Этот факт свидетельствует в пользу того, что гормоны надпочечников играют важную роль в регуляции компенсаторного эритропоэза, при экстремальных воздействиях на организм, в то время как физиологическая регенерация эритрона регулируется другими механизмами.

Менее интенсивная активация эритропоэза после иммобилизационного стресса у адреналэктомированных животных может быть также связана с высокой концентрацией макрофагов, при которой они, по данным литературы, оказывают угнетающее влияние на эритропоэз, обусловленное выработкой ими ФНО-а и других факторов тормозящих пролиферацию и дифференцировку КОЕэ [65]. ---

Кроме эндокринной регуляции эритропоэтической функции макрофагов костного мозга, не меньшее значение имеет и другой путь реализации влияния нейрогуморальной системы на моноцитопоэз и функциональную активность макрофагов — вегетативная регуляция эритропоэза, которая, как и эндокринная, реализуется главным образом через компоненты гемопоэзин-дуцирующего микроокружения [43,48,78,122,123, 157,164,176,186].

Влияние медиаторов вегетативной нервной системы и продуктов тучных клеток на эритропоэтическую функцию моноцитов-макрофагов реализуется различными способами. Адреналин способствует вовлечению новых макрофагов в эритропоэз, ацетилхолин и гистамин увеличивают интенсивность повторного вовлечения макрофагов в эритропоэз. Введение этих веществ приводит к ускорению созревания и выхода эритроидных клеток из зрелых эритробластических островков и «внеостровковой» части костного мозга. Под воздействием гепарина снижается интенсивность вовлечения КОЕэ в дифференцировку, замедляется скорость созревания и выход в кровь эритроидных клеток.

Изменение показателей эритропоэза после введения адреналина, аце-тилхолина и гистамина, позволяет предположить, что эти вещества могут оказывать влияние на функциональное состояние моноцитов, например, повышая их фагоцитарную или секреторную активность. Как медиаторы вегетативной нервной системы, так и физиологически активные вещества, секре-тируемые тучными клетками могут оказывать модулирующее влияние на костномозговое кроветворение через моноциты посредством регуляции высвобождения цитокинов. Показано, что гистамин, действуя через Н! - рецепторы способен усиливать активность а- нафтилацетатэстеразы в моноцитах, совместно с серотонином стимулирует секреторную активность мононуклеарных клеток [52,76]. Действие адреналина и ацетилхолина может реализовы-ваться через адрено- и холинорецепторы на мембране эритроидных клеток, моноцитов и макрофагов [43,100, 117,122,123,176].

Помимо разнонаправленного влияния на функциональную активность макрофагов, нельзя исключить регуляторное воздействие применяемых в эксперименте веществ на сосудистые реакции. Эти реакции сопровождаются в одном случае массированным выходом эритроидных элементов в циркуляцию под воздействием гистамина, адреналина и ацетилхолина, что может быть связано с их способностью оказывать вазодилятаторный эффект и повышать проницаемость сосудов благодаря сократительному действию на эндотелиальные клетки [30,77,78,148]. Способность гепарина снижать сосудистую проницаемость [76] также может служить одним из механизмов регуляции гемопоэза.

Таким образом, регуляции моноцитопоэза и эритропоэтических свойств макрофагов осуществляется различными взаимосвязанными механизмами с участием эндокринной и нервной систем, а также гемопоэзиндуцирующего микроокружения. Разнонаправлено изменяя пролиферативную, миграционную и фагоцитарную или секреторную активность моноцитов, регулируя сосудистые реакции, эти механизмы в совокупности обеспечивают адаптивный ответ кроветворной ткани на экстремальные воздействия.

А' '

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Улитко, Мария Валерьевна, Екатеринбург

1. Абидов М.Т. О новых деталях патогенеза токсико-септических состояний / М.Т. Абидов, A.B. Караулов// Тамерит в эксперименте и клинике. М., 2002.-С. 22-23.

2. Абидов М.Т. Иммунотропная активность тамерита / М.Т. Абидов // Тамерит в эксперименте и клинике. М., 2002. - С. 25-31.

3. Абрамов В.В. Интеграция иммунной и нервной систем / В.В. Абрамов. — Новосибирск: Наука, 1991. 166 с.

4. Абрамов М.Г. Гематологический атлас/ М.Г. Абрамов. М.: Медицина, 1979.-344 с.

5. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 1990. -384 с.

6. Автандилов Г.Г. Основы патанатомической практики / Г.Г. Автандилов. -М. : РМАПО, 1994.-512 с.

7. Адо А.Д. Патофизиология фагоцитов / А.Д. Адо. -М.: Медгиз, 1961. -112 с.

8. Акмаев И.Г. От нейроэндокринологии к нейроиммунологии / И.Г. Акмаев, В.В. Гриневич // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - Т. 131. - № 6. - С.22-31.

9. Алехин Е.К. Иммунотропные свойства лекарственных средств / Е.К. Алехин, Д.Н. Лазарев, C.B. Сибиряк. У фа, 1993. - 208 с.

10. Ю.Арцимович Н.Г. К вопросу- исследования- иммунотропной активности химических соединений / Н.Г. Арцимович // Проблемы гематологии и переливания крови. 1981. - Т.26. - № 10. - С.28-33.

11. Атлас клеток крови и костного мозга / под ред. Г.И. Козинца и В.А. Макарова. М.: Триада-Х, 1998. - 152 с.

12. Бабаева А.Г. Иммунологические механизмы регуляции восстановительных процессов / А.Г. Бабаева- М.: Медицина, 1972. 158 с.

13. Базарный B.B. Действие некоторых иммуномодуляторов на гемопоэз / В.В. Базарный, А.П. Ястребов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. - № 1. - С. 53-55.

14. Баркова Э.Н. Пространственно-временная организация эритропоэза. Фундаментальные и прикладные аспекты / Э.Н. Баркова // Вопросы экспериментальной физиологии. Москва-Екатеринбург, 1997. - С. 73-77.

15. Беклемишев Н.Д. Иммунопатология и иммунорегуляция / Н.Д. Беклемишев. М.: Медицина, 1986. - 256 с.

16. Бельмер C.B. Аллергия / C.B. Бельмер, Т.В. Гасилина. М.: Российский фонд фундаментальных исследований, 2004. - 57 с.

17. Бельченко Д.И. Взаимодействие эритроклазических и гемопоэтических костномозговых кластеров / Д.И. Бельченко, О.В. Волкова // Гематология и трансфузиология. 2000. — № 5. - С. 26—28.

18. Бельченко Д.И. Исследование эритробластических кластеров в костном мозге больных апластической анемией / Д.И. Бельченко, Е.А. Смирнова, E.JI. Кривошеина // Педиатрия. — 2002. — № 6. — С. 11—12.

19. Бутенко З.А. Цитохимия и электронная микроскопия клеток крови и кроветворных органов / З.А. Бутенко, Д.Ф. Глузман, К.П. Зак, P.C. Филатова, В.А. Шляховенко. — Киев: Наукова думка, 1974. 248 с.

20. Бутенко З.А. Стволовые кроветворные клетки и лейкоз / З.А. Бутенко. — Киев: Наукова думка, 1978. 179 с.

21. Ван Лир Э. Гипоксия / Э. Ван Лир, К. Стикней -М.: Медицина, 1967. 368 с.

22. Вейсман И. Введение в иммунологию / И. Вейсман. М: Высшая школа, 1983.-153 с.

23. Вершигора А.Е. Общая иммунология / А.Е. Вершигора. Киев: Высшая школа, 1990. - 736 с.

24. Владимирская Е.Б. Костномозговое кроветворение / Е.Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология. — 1993. — № 4. — С. 4-6.

25. Воргова JI.B.06 изменении эритробластических островков костного мозга у животных при тепловых и мышечных нагрузках / JI.B. Воргова, Ю.М. Захаров // Физиологический журнал СССР.-1990.-Т. 76.-№2.-С. 200-206.

26. Воронина Н.П. Функциональные перестройки макрофагов после физической нагрузки / Н.П. Воронина, Д.Н. Маянский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1987. - № 8. - С.324-329.

27. Возианов А.Ф. Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства/

28. A.Ф. Возианов З.А. Бутенко, К.П. Зак, К.: Наукова думка, 1998. - 316 с.

29. Гаврилов O.K. Клетки костного мозга и периферической крови (структура, биохимия, функции) / O.K. Гаврилов, Г.И. Козинец, Н.Б. Черняк. М.: Медицина, 1985. - 288 с.

30. Гаркави JI.X. Адаптационные реакции и резистентность организма / JI.X. Гаркави, Е.Б. Квакина, М.А. Уколова. Изд-во Ростовского университета, 1977. -120 с.

31. Гацура В.В. Фармакологические аспекты в экспериментальной медицине и биологии / В.В. Гацура, A.C. Сараитиков. Томск: Изд-во Томского университета, 1977. - 154 с.

32. Гипоксия. Адаптация, патогенез, клиника. СПб: ЭЛБИ-СПб, 2000.-384 с.

33. Глузман Д.Ф. Диагностическая цитохимия гемобластозов / Д.Ф. Глузман. — Киев: Наукова думка, 1978. — 216 с.--

34. Глузман Д.Ф. Цитохимия и иммуноцитология злокачественных лимфопролиферативных заболеваний / Д.Ф. Глузман, С.П. Сидоренко,

35. B.А.Нагорная. — Киев: Наукова думка, 1982. 198 с.

36. Глузман Д.Ф. Диагностическая иммуноцитохимия опухолей / Д.Ф. Глузман, JI.M. Скляренко, В.А. Нагорная, И.А. Крячок. Киев: Морион, 2003. -156 с.

37. Глузман Д.Ф. Диагностика лейкозов. Атлас и практическое руководство / Д.Ф. Глузман, И.В. Абраменко, JI.M. Скляренко, И.А. Крячок, В.А. Нагорная. Киев: Морион, 2000. - 224 с.

38. Гольдберг Д.И. Очерки гематологии / Д.И. Гольдберг. Томск, 1952. - 213 с.

39. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм / Е.Д. Гольдберг. Томск: Изд-во Томского университета, 1989. - 468 с.

40. Гольдберг Е.Д. Роль макрофагов в развитии феномена стимуляции костномозгового кроветворения при стрессе / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, В.П.Шахов // Патологическая физиология и экспериментальная терапия . 1988. - № 5 - С. 32-34.

41. Гольдберг Е.Д. Роль опиоидных пептидов в регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай. Томск: Наука, 1990. - 136 с.

42. Гольдберг Е.Д. К вопросу о специфичности механизмов регуляции кроветворения при различных экстремальных воздействиях / Е.Д. Гольд-берг, A.M. Дыгай, М.Ю. Захаров // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1991. - № 3. - С. 7-10.

43. Гольдберг Е.Д. Механизмы локальной регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, Е.Ю. Шерстобоев. Томск, 2000. - 148 с.

44. Гольдберг Е.Д. Роль вегетативной нервной системы в регуляции гемопоэза / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, И.А. Хлустов. Томск: Изд-во Томского университета, 1997. - 218 с.- ------44.Горизонтов Л:Д. Гомеостаз / J1.Д. Горизонтов.- М.: Медицина, 1981. 576 с.

45. Горизонтов П.Д. Стресс и система крови / Л.Д. Горизонтов, О.И. Бело-усова, М.И. Федотова. М.: Медицина, 1983. - 240 с.

46. Громыхина Е.Д. Эритропоэтинзависимые механизмы действия регуля-торных факторов макрофагального происхождения на кроветворную и иммунную систему / Е.Д. Громыхина, В.А. Козлов // Иммунология. -1997. — №1. -С.27-29.

47. Гуцол A.A. Практическая морфометрия органов и тканей / A.A. Гуцол, Б.Ю. Кондратьев. Томск: Изд-во Томского университета, 1988. - 136 с.

48. Дешевой Ю.Б. Влияние ацетилхолина на миграцию эозинофилов из костного мозга в циркулирующую кровь / Ю.Б. Дешевой // Патологическая физиология и экспериментальная терапия терапия. — 1985.- №5. С.48-50.

49. Добрица В.П. Современные иммуномодуляторы для клинического применения / В.П. Добрица, Н.М. Ботерашвили, Е.В. Добрица- СПб: Политехника,'2001. 101 с.

50. Дранник Г.Н. Иммунотропные препараты / Г.Н. Дранник, Ю.А. Гриневич, Г.М. Дизик. Киев: Здоровье, 1994. - 288 с.

51. Дыгай A.M. Роль гуморальных факторов в регуляции гемопоэза при иммобйлизационном стрессе / A.M. Дыгай, В.В. Жданов, О.И. Эпштейн, Е.В. Кириенкова, Е.Д. Гольдберг // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. - т. 137. - № 3. - С.244-248.

52. Дыгай A.M. Воспаление и гемопоэз / A.M. Дыгай, H.A. Клименко -Томск: Изд-во Томского университета, 1992. 297 с.

53. Дыгай A.M. Роль межклеточных взаимодействий в регуляции гемопоэза / A.M. Дыгай, В.П. Шахов. Томск: Изд-во Томского университета, 1989. -224 с.

54. Заболотных Е.И. Эритроидные клетки мыши / Е.И. Заболотных, К.Г. Газа- рян // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1987. - № 1. - С.27-29.

55. Захаров Ю.М. Фагоцитарная активность центрального макрофагаэритробластического островка при экспериментальном торможении и стимуляции эритрпоэза / Ю.М. Захаров, Л.П. Варыпаева // Гематология и трансфузиология. 1992. - № 9-10. - С. 21-23.

56. Захаров Ю.М. Эффект эритропоэтина на фагоцитарную активность центрального макрофага эритробластического островка у крыс / Ю.М.

57. Захаров, Л.П. Варыпаева // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 1997. - № 4. - С. 86-92.

58. Захаров Ю.М. О закономерностях реконструкции эритропоэза в эритробластических островках / Ю.М. Захаров, Б.В. Медяник // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 1994. - № 3. - С. 76-82.

59. Захаров Ю.М. О пролиферативной активности эритробластов в эритро-бластическом островке костного мозга крыс / Ю.М. Захаров, Б.В. Медяник // Российский физиологический журнал им. Сеченова. — 1997. — № 7. С. 64-70.

60. Захаров Ю.М. О роли межклеточных взаимодействий в регуляции эритропоэза / Ю.М. Захаров, И.Ю. Мельников // Успехи современной биологии. 1984. - № 4. - С. 60-71.

61. Захаров Ю.М. Классификация эритробластических островков костного мозга с учетом изменения их клеточного состава / Ю.М. Захаров, И.Ю. Мельников, А.Г. Рассохин // Арх. Анатомии, гистологии и эмбриологии. * 1990.-№5.-С. 38-42.

62. Захаров Ю. М. Молекулярные и клеточно-клеточные механизмы регуляции эритропоэза / Ю.М. Захаров // Вестник РАМН. 2000. - № 2. - С.4-9.

63. Захаров Ю. М. Новые методы исследования эритропоэза у человека и животных / Ю.М. Захаров // Вестник РАМН, 2002. № 3. - С. 4-7.

64. Захаров Ю.М. Новые подходы к исследованию эритропоэза у человека и животных / Ю.М. Захаров // Известия челябинского научного центра. --вып2.-№ 11.-2001.-С. 99-103.

65. Захаров Ю.М. О роли макрофагов костного мозга в регуляции эритропоэза при различных состояниях эритрона / Ю.М. Захаров, А.Г. ■ Рассохин, О.Г. Крестьянинова, Г.П. Ефименко // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1991. -№3. - С. 36-37.

66. Захаров Ю.М. Эритробластический островок / Ю.М. Захаров, А.Г. Рассохин. М.: Медицина, 2002. - 280 с.

67. Иванов К.П. Успехи и спорные вопросы в изучении микроциркуляции / К.П. Иванов // Физиологический журнал им. И.М. Сеченова.,— 1995. -Т.81. -№ 6. С. 48-53.

68. Иммунофизиология / под. ред. Е.А. Корневой СПб.: Наука, 1993. - 684 с.

69. Исследование системы крови в клинической практике / под ред. Г.И.Козинца и В.И.Макарова. М:Триада-фарм, 1997. - 480 с.

70. Карр Ян. Макрофаги. Обзор ультраструктуры и функции / Ян. Kapp. М.: Медицина, 1978.- 198 с.

71. Кассирский И.А. Клиническая гематология / И.А. Кассирский, Г.А. Алексеев. -М.: Медицина, 1970.- 800 с.

72. Кетлинский С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995.-№3.-С. 30-35.

73. Кинетические аспекты гемопоэза / под ред. проф. Г.И. Козинца и проф. Е.Д. Гольдберга Томск: Изд-во Томского университета, 1982. — 306 с.

74. Клименко В.А. Влияние биологических веществ тучных клеток на функции различных лейкоцитов in vitro / В.А. Клименко, A.M. Дыгай, Е.А. Гольдберг // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1991.- № 9. С.305-307.

75. Козинец Г.И. Экология и кроветворение / Г.И. Козинец // Гематология и трансфузиология. 1990. - № 12. - С. 7—11.

76. Козлов В.А. Полифункциональность макрофага в процессе формирования иммунного ответа / В.А. Козлов, Н.Ю. Громыхина // Иммунология. —1983, №2.- С.16-17. '

77. Козлов В.А. Стволовая кроветворная клетка и иммунный ответ / В.А. Козлов, И.Н. Журавкин, И.Г. Цырлова. Новосибирск: Наука, 1982. - 220 с.

78. Козлов В.А. Иммуномодулирующая и другие неэритроидные функции эритропоэтина / В.А. Козлов // Иммунология. 2003. - № 1. — С.54-57.

79. Колпащикова И.Ф. Морфофункциональные изменения иммунной системы в процессе репаративной регенерации печени / И.Ф. Колпащикова, Б.П. Солопаев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1977.-№ 10-С. 480-484.

80. Колла В.Э. Фармакология и химия производных гидразина / В.Э. Колла,г И.С. Бёрдинскйй. Марийское книжное й^ 1976. — 98 с.

81. Кузник Б.И. Физиология и патология системы крови: руководство для студентов / Б.И. Кузник. Чита, 2002. - 319 с.

82. Кульберг А .Я. Регуляция иммунного ответа / А.Я. Кульберг. М.: Медицина, 1986. -223 с.

83. Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. проф. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987.- 368 с.

84. Лазарева Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. -М.: Медицина, 1985. 256 с.

85. Лесков В.П. Иммуностимуляторы / В.П. Лесков // Аллергия, астма и клиническая иммунология. — 1999. № 4. - С. 12-25.

86. Лищук В.А. Гомеостаз и регуляция физиологических систем организма /

87. B.А. Лищук, Б. Лорд, Павлович-Кентер. Новосибирск: Наука. Сибирское отд-е, 1992. - 105 с.

88. Ломакин М.С. Иммунобиологический надзор / М.С. Ломакин. М.: Медицина, 1990. - 256 с.

89. Лойда 3. Гистохимия ферментов:лабораторные методы, / 3. Лойда, Р. Госсрау, Т Шиблер. М: Мир, 1982. - 272 с.

90. Луговская С.А. Структура и функции моноцитов и макрофагов // Клиническая лабораторная диагностика / С.А. Луговская. 1997. - № 9. —1. C. 10-16.

91. Лукина Е.А.' Гистоцитозы как заболевания макрофагальной ^системы / Е.А. Лукина // Терапевтический архив. 1996. - № 7. - С. 82-88.

92. Малышев И.Ю. Стресс-ответ и апоптоз в про- и антивоспалительном фенотипе макрофагов / И.Ю. Малышев, C.B. Круглов, С.В.Бахтина Л.Ю. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. - Т. 138. - № 8. — С.162 -165.

93. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1983. - 256 с.

94. Маянский А.Н. Проблемы управления фагоцитарными механизмами иммунитета / А.Н. Маянский, A.A. Невмятуллин, Д.Н. Маянский // Микробиология, эпидемиология и иммунология. 1995. - № 3. - С. 21—26.

95. Маянский А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань: Магариф, 1993. - 192 с.

96. Маянский Д.Н. Изменение поглотительной способности макрофагов из разных органов при- введении гидрокортизона / Д.Н. Маянский, Н.П.

97. Воронина, А.Ю.Воронин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1985.- № 9. С. 324-329.

98. ЮО.Маянский Д.Н. Клетка Купфера и система мононуклеарных фагоцитов / Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1981. - 172 с.

99. Минченко А.Г. Молекулярная эндокринология: проблемы, достижения и перспективы / А.Г. Минченко // Эндокринология. — 1991. вып. 21. -С.10-15.

100. Мосягина E.H. Болезни крови у детей / E.H. Мосягина, H.A. Торубарова, Е.Б. Владимирская. -М.: Медицина, 1981. 180 с.

101. Насонов E.JI. Интерлейкин-1 и его роль в патологии человека / E.J1. Насонов // Терапевтический архив. 1987. - № 12. - С. 114-115.

102. Насонов E.JI. Общая характеристика и механизмы действия глюко-кортикостероидов / E.JI. Насонов // Русский медицинский журнал. — 1999. Т.7. - № 8. - С. 364-370.

103. Натан Д.Г. Регуляция кроветворения / Д.Г. Натан, К.А. Зифф // Гематология и трансфузиология. — 1994. № 2. - С.3-10.

104. Новиков Н.М. Механизмы участия продуктов деструкции эритроцитов в регуляции эритропоэза при воздействии на организм экстремальных факторов: диссертация на соискание учетной степени д.м.н./ Н.М. Новиков. Барнаул, 1986. - 281 с.

105. Новиков Н.М. Об изменении эритропоэзстимулирующего действия эритроцитарных факторов при блокаде клеток системы мононуклеарных фагоцитов / Н.М. Новиков // Патологическая физиология. 1982. - № 6. - С.56-58.

106. Нормальное кроветворение и его регуляция / под ред. И.А. Федорова. -М.: Медицина, 1976. 543 е.

107. Орлова А.Г. Влияние интрахеального введения гепарина на состояние тучноклеточной популяции у крыс / А.Г. Орлова, О.В. Чернова // Фармакология и токсикология. 1989. - Т.52. - № 3. - С.55-59.

108. Орловская М.А. Внутриклеточные сигнальные системы в регуляции апоптоза эритроидных клеток / М.А. Орловская, В.А. Козлов, Л.Б. Топоркова // Иммунология. 1996. - № 5. - С. 6-12. Ш.Осипенко A.B. Иммунологические механизмы регенерации тканей /

109. A.B. Осипенко, В.А. Черешнев Екатеринбург: УрО РАН, 1997. - 130 с.

110. Осняч B.C. Возможные пути лекарственной регуляции макрофагов /

111. B.C. Осняч // Фармакология и токсикология. — 1986. № 4. - С. 115-118.

112. Павлов А.Д. Регуляция эритропоэза: физиологические и клинические аспекты / А.Д. Павлов, Е.Ф. Морщакова М.: Медицина, 1987.1. C.272.

113. Пальцев М.А. Цитокины и их роль в межклеточных взаимодействиях / М.А.Пальцев // Архив патологии. 1996. - № 6 - С.3-6.

114. Петров Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, В.М. Манько, A.A. Михайлова. JL: Медицина, 1981 - 312 с.

115. Ройт А.Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. - 592 с.

116. Романова JI.K. Регуляция восстановительных процессов / JI.K. Романова. -М., Изд-во МГУ, 1984. 209 с.

117. Савина A.C. Участие холинэргических факторов в процессе кроветворения / A.C. Савина, Г.П. Москалева, В.В.Альперович // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1980. -№ 6. - С.50—52.

118. Столяров Д.И. Иммунодиагностика и иммунокоррекция в клинической практике / Д.И. Столяров. СПб: СОТИС, 1999. - 218 с.

119. Суслов А.П. Гетерогенность субпопуляции Т-лимфоцитов продуцентов фактора подавления миграции макрофагов (MIF) в системе Н-2 / А.П. Суслов, Д.Д. Харкевич // Иммунологические аспекты биологии развития. - М.: Наука, 1984. - С. 72-80.

120. Тотолян A.A. Клетки иммунной системы: учебное пособие / A.A. Тото-лян, И.С. Фрейдлин. СПб., Наука - 2000 - 231 с.

121. Третин Д.Д. Кроветворное микроокружение / Д.Д.Третин // Гематология и трансфузиология. 1982. - Т.27. - № 7. - С.52-57.

122. Труфакин В.А. Суточные колебания функциональной активности макрофагов у мышей / В.А. Труфакин, A.B. Шурлыгина, Л.Г. Крымская // Иммунология. 1991. - № 1. - С. 72-73.

123. Туманян М.А., Кирилличева Г.Б., Ермолова Е.В. Действие иммуномодуляторов на ферментативную активность макрофагов перитониального экссудата мышей / М.А. Туманян, Г.Б. Кирилличева, Е.В. Ермолова // Иммунология. — 1987. — № 6. — С.34—37.

124. Туровецкий В.Б. Влияние пептидного экстракта фетальных тканей мозга на внутриклеточный pH перитони-альных фагоцитов мышей / В.Б. Туровецкий, Н.Б. Породина, А.И. Ерин // Бюллетень эскпериментальной биологии и медицины. 1995. — № 12. - С.626-630.

125. Ужанский Я.Г. Физиологические механизмы регенерации крови / Я.Г. Ужанский. М.: Медицина, 1968. — 264 с. :

126. Учитель И.Я. Макрофаги в иммунитете / И.Я. Учитель. JVL: Медицина, 1978. - 200 с.

127. Фомичева Е.Е. Уровень глюкокортикоидов и гуморальный иммунный ответ у адреналэктомированных крыс / Е.Е. Фомичева, Г.В. Гущин // Физио-логический журнал им. И.М. Сеченова. 1981. - Т. 67. - № 12. -С. 1882- 1885.

128. Фред Дж. Шиффман. Патофизиология крови / Фред Дж. Шиффман, под. ред.-Ю.В.Наточина.-- СПб.: «Изд-во БИНОМ»-- «Невский Диалект» 2000. 448 с.

129. Фрейдлин И.С. Участие продуктов макрофагального происхождения в регуляции моноцитопоэза / И.С Фрейдлин, В.Д. Кравцов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1985. - № 10. - С.454-457.

130. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейдлин. -М.: Медицина, 1984. 272 с.

131. Фрейдлин И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуля-торной цепи / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1995. - № 3. - С. 44-47.

132. Фриденштейн А.Я. Клеточные основы кроветворного микроокружения / А.Я. Фриденштейн, Е.А. Лурия. -М.: Медицина. 1980. -216 с.

133. Хаитов P.M. Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов / P.M. Хаитов, В.М. Земсков // Микробиология, эпидемиология и иммунология, 1995. - № 3. - 27-32.

134. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. -2003. -№4. -С. 196-202.

135. Хаитов P.M. Основные задачи клинической иммунологии по изучению функциональной активности фагоцитирующих клеток / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 1995. - № 3. - С.6-9. '

136. Харин Г.М. Морфофункциональные особенности альвеолярных макрофагов при шокогенных повреждениях / Г.М. Харин, А.З. Шакирова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1996. — № 11. — С.577—581.

137. Черешнев В.А. Иммунофизиолгия: перспективы развития / В.А. Череш-нев, Б.Г. Юшков, В.Г. Климин // Вестник Уральской медицинской академической науки. 2003. - № 1. - С. 47-53.

138. Черешнев В.А. Иммунофизиология / В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков, В.Г. Климин, Е.В. Лебедева. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. - С.258.

139. Чернух A.M. Микроциркуляция / A.M. Чернух, H.H. Александров, О.В. Алексеев. М.: Медицина, 1984. - 432 с.

140. Чертков И.Л. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение / И.Л. Чертков, O.A. Гуревич. М.: Медицина. - 1984. - 240 с.

141. Чертков И.JI. Клеточные основы кроветворения / И.Л. Чертков, А.Я. Фриденштейн. М.: Медицина, 1977. - 274 с.

142. Чикотеев С.П. Современные взгляды на регенерацию печени / С.П. Чи-котеев, А.Н. Плеханов, Н.Г.Корнилов // Хирургия. 2001. - № 6. - С. 59 - 62.

143. Чуканин С.Н., Саллам С., Шершнева Н.С. Клоногенные предшественники гранулоцитов и макрофагов в костном мозге детей / С.Н. Чуканин, С. Саллам, Н.С.Шершнева// Гематол.и трансфузиол. -1987. № 2. - С.39^42.

144. Шахов В.П. Феномен трехклеточной кооперации макрофаг — Т-лимфоцит — кроветворная клетка в гемопоэтическом островке при стрессе / В.П. Шахов, Б.Ю. Гумилевский // Клеточная иммунология. 1999. -Т.З. - С.25-26.

145. Шахов В.П. К вопросу о роли гемопоэтичеких островков в развитии феномена стимуляции костномозгового кроветворения при стрессе / В.П. Шахов // Гематология и трансфузиология. 1988. - № 5. - С. 19-21.

146. Эндокринная регуляция физиологических функций: учебное пособие / В.Г. Климин, В.А.Черешнев, М.В. Черешнева, Б.Г Юшков. Екатеринбург: УрО РАН, 2001.- 104 с.

147. Юшков Б.Г. Система крови и экстемальные воздействия на организм / Б.Г Юшков, В.Г. Климин, М.В. Северин. Екатеринбург: УрО РАН, 1999. -199 с.

148. Юшков Б.Г. Гликопротеины и гемопоэз / Б.Г. Юшков, Г.К. Попов, М.В. Северин, А.Г. Ястребов. Екатеринбург.: УрГМИ, 1994. - 127 с.

149. Юшков Б.Г. Иммунная система и регуляция физиологических функций: учебное пособие / Б.Г. Юшков, В.А. Черешнев, В.Г. Климин, М.В. Че-решнева. Екатеринбург: УрО РАН, 2001. - 74 с.

150. Яворковский Л.И. Система мононуклеарны фагоцитов и ее злокачественные заболевания / Л.И. Яворковский. Рига: Рижский медицинский институт, 1987. — 257 с.

151. Ястребов А.П. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов / А.П. Ястребов, Б.Г. Юшков, В.Н. Большаков. Свердловск: УрО РАНН СССР, 1988. -152 с.

152. Adachi Н. Pathological study on experimental Heinz body anemia: intracellular changes of phagocytized red cells in macrophages of the spleen and liver / H. Adachi // Acta. Pathol. Jpn. -1999. Sep. - 27. - 5. - p. 657-675.

153. Adams D.O. Stress and physiological effects / D.O. Adams // Psychosom. Med. 1994. -№ 56. -p.316-327.

154. Berczi I. The stress concept and neuroimmunoregulation in modern.biology / I. Berczi//Ann. N.Y. Acad. Sci. 1998. - Vol.851, - p. 3-12.

155. Bessis M. L' ilot Erythroblastique et la Rhopheocytose de la Ferritine Dans Г inflammation / M. Bessis, J. Breton-Gorius // Nouv. Rev. Franc. Hemat. -1961.-Vol. l.-p. 529-533.

156. Bessis M. Erythropoiesis: comparison of in vitro amplification / M. Bessis, C. Mize, M. Prenant // Blood Cells. 1978. - Vol.4. - № 1-2. - p. 155-174.

157. Cavill I. Iron and erythropoiesis in normal subjects and in pregnancy /1. Cavill // J. Perinat. Med. 1995. - 23. - P.47-50.

158. Chambers Donald A. Mindful immunology and neuroimmunomodulation / Donald A. Chambers // Immunology today. 2000. - № 4. - Vol.21. - p. 168-169.

159. Chervenick P.A. Human blood monocytes stimulators of granulocyte and mononuclear colony formation in vitro / P.A. Chervenick, A.F. LoBuglio // Science. 1972. - Vol.178, - p. 164-166.

160. Crocker P.R. Isolation and characterization of resident macrophages and hematopoietic cell cluster from mouse bone marrow / P.R. Crocker, S.Gordon, //J. Exp. Med. 1985.-Vol.162.-№3.-p. 993-1014.

161. Ferrali M. Iron release and membrane damage in erythrocytes exposed to oxidizing agents, phenylhydrazine, divicine and isouramil / M. Ferrali // Biochem J. 1992. № 285. - p. 295-301.

162. Galimi Francesco. Hepatocyte growth factor is a regulator of monocyte -macrophage function / Francesco Galimi // J of Immunology. 2001. - № 166. -p. 1241-1250.

163. Hanspal M. Importance of cell-cell interactions in regulation of erythropoiesis / M. Hanspal // Curr Opin Hematol. 1997. - Mar. - 4 (2). - 14. - p. 2-7.

164. Hanspal M. The association of erythroblasts with macrophages promotes erythroid proliferation and maturation: a 30-kD heparin-binding protein is involved in this contact / M. Hanspal, J.S. Hanspal // Blood. -.1994. Nov. -15.-84 (10).-3.-p. 494-504.

165. Hanspal M., Smockova Y., Uong Q. Molecular Identification and Functional Characterization of a Novel Protein That Mediates the Attachment of Erythroblasts to Macrophages // Blood. 1998. - Oct. - 15. - p. 2940-2950.

166. Hornig M, et al. Neuroimmune mechanisms in health and disease // Canad. Med. Assoc. J. 1996. - № 155. - p. 867-874.

167. Higgins G.M. Experimental pathology of the liver. I. Restoration of the liver following partial surgical removal / G.M. Higgins, R.M. Anderson // Arch. Path. 1931. - Vol.272. - p. 186-202.

168. Ingley E. New insights into the regulation of erythroid cells / E. Ingley, P.A. Tilbrook, S.P. Klinken // IUBMB Life. 2004. - Apr. - 56(4). - 1. - p. 77-84.

169. John J. Rinehart. Cell-cell interaction in erythropoiesis. Role of human monocytes / John J. Rinehart, D. Esmail // The Journal of Clinical Investigation. 1978. - № 5. - p. 979-986.

170. Joon S. Immunohistochemical characterization of macrophage and dendritic cell subpopulation of the spleen, thymus, tongue and heart in cyclophosphamide — induced immunosuppressed rat / S. Joon // Anat. Histol. Embryol. 2003. - № 32. - p. 80-88.

171. Kalaidjieva V. Modulation of erythropoiesis in rat bone marrow erythroblastic islands by cyclooxygenase inhibition / V. Kalaidjieva // Gen Pharmacol. -1999. Apr. - 32 (4). - 42. - p. 3-8.

172. Kulkarni Narla Anjiali. Catecholaminergic, cholinergic and peptidergic inne-rvetion of gut — associated lymphoid tissue in porcine jejunum and ileum / Kulkarni - Narla Anjiali // J. Exp. Med. - 1998. - Vol.134. - № 2. - p. 654893.

173. Lazareva G.A. Immune and metabolic effects of carnitine and biotin in hemolytic anemia / G.A. Lazareva // Eksp Klin Farmakol. 2002. - May-Jun. -65 (3).-p. 35-39.

174. Lee G. Novel secreted isoform of adhesion molecule ICAM-4: potential regulator of membrane-associated ICAM-4 interactions / G. Lee, F.A. Spring,

175. S.F. Parsons, T.J. Mankelow, L.L. Peters, M.J. Koury, N. Mohandas, D.J. Anstee, J.A. Chasis // Blood. 2003. - Mar. - 1. - 101 (5). - p. 1790-1797.

176. Mezaros Adriana J. Macrophage induced neutrophil apoptosis / Adriana J. Mezaros // The Journal of Immunology. 2000. - № 165. - p. 435 - 441.

177. Morris L. Developmental regulation of sialoadhesin (sheep erythrocyte recaptor), a macrophage-cell interaction molecule expressed in lymphohemopoietic tissues / L. Morris, P.R. Crocker, M. Hill, S. Gordon // Dev Immunol. 1992. -2(1).-p. 7-17.

178. Malik J. An in Vitro Model of Human Erythropoiesis for the Study of Hemoglobinopathies / J. Malik // Annals of the New York Academy of Sciences. 1998. - 850 (1). - p. 382-385.

179. Michael Cho. Hydrogen peroxide stimulates macrophage vascular endothelial growth factor release / Michael Cho, Thomas K. Hunt and M. Zamirul Hus-sain. // AJP Heart and Circulatory Physiology. - 2001. - 280 (5). - p. 23-57.

180. Merrill J.E. Interleukin 2 effects in the central nervous system / J.E. Merrill // Neuropeptides and Immunopeptides: Messengers Neuroimmune Axis, 1989. -p.5.

181. Nikolas G. The gene encoding iron regulatory etide hepcidin is regulated by anemia, hypoxia and inflammation / G. Nikolas, C.J. Chauvet // Clin Invest. -2002.-Oct.-110 (7).-p. 1037-1044.

182. Ottaviani E. The neuroimmunology of stress from ivertebrates to man / E. Ottaviani // Prog. Neurobiol. 1996. - № 48. - p. 421^140.

183. Parsons S.F. Erythroid cell adhesion molecules Lutheran and LW in health and disease / S.F. Parsons, F.A. Spring, J.A. Chasis, D.J. Anstee // Haematol. -1999. Dec. - 12 (4). - 7. - p. 29-45.

184. Patenyuck A.V. Hupophysis, Immunity and Hemjstasis / A.V. Patenyuck, B.I. Kuznick, M.A. Dzhuly. Chita, 2003. - p.l 19.

185. Rassokhin A.G. Microfluorimetric research on the erythroblastic islands and macrophages of the bone marrow / A.G. Rassokhin, A.G. Pochinskii, K.V.1.annoi, G.A. Ovchinnikov // Biull Eksp Biol Med. 1992. - Oct. -114(10). -3.-p. 47-51.

186. Rich I.N. Erythropoietin production: a personal view / I.N. Rich // Exp. Haematol. 1991. - Vol.19, - p. 985-990.

187. Rich I.N. The macrophage as a production site for hematopoetic regulator molecules: sensing and responding to normal and pathophysiological signals / I.N. Rich//Anticancer Res. 1988.-№ 8.-p. 1015-1040.

188. Sasaki K. Origin and fate of the central macrophages of erythroblastic islands in the fetal and neonatal mouse liver / K. Sasaki, H. Iwatsuki // Microsc Res Tech. -1997. Dec. -1.-39 (5). - p. 398^105.

189. Tsai S. Stromal cell associated erythropoiesis / S. Tsai, C. Sieff, D. Nathan // Blood.- 1986.-Vol. 1.-67.-№5.-p. 1418-1428.

190. Tordjman R. Erythroblasts are a source of angiogenic factors / R. Tordjman, S. Delaire, J. Plouet, S. Ting, P. Gaulard, S. Fichelson, P.H. Romeo, V. Lemarchandel // Blood. 2001. - Apr. -1. - 97 (7). - 19. - p. 68-74.

191. Vannucchi A.M. Accentuated response to phenylhydrazine and erythropoietin in mice genetically impaired for their GATA 1 expression (GATA - 1 (low) mice) / A.M. Vannucchi // Blood. - 2001. - May. - 15. - 97 (10). - p. 3040-. 3050.

192. Vogt C. The role of the blood island during normal and 5-fluorouracil-perturbed hemopoiesis / C. Vogt, G. Noe, I.N. Rich // Blood Cells. 1991. -17 (1). - p. 10 5-121; discussion 121-125.

193. Weiss L.P. Functional organization of hematopoietic tissue / L.P. Weiss; In: R.H. Hoffman // Hematology: Basic Principles and Practice. New York: Churchill Livingstone, 1995. - p. 193-206.

194. Williams D.A. The stem cell model of hematopoiiesis / D.A. Williams; In: R.H. Hoffman, E. Benz, S. Shattil, B. Furie, H. Cohen, L. Silberstein // Hematology: Basic Principles and Practice. Daltimore: Williams & Wilkins, 1995. - p.180-192.

195. Yokoyama T. Migration of erythroblastic islands toward the sinusoid as erythroid maturation proceeds in rat bone marrow / T. Yokoyama, T. Etoh, H. Kitagawa, S. Tsukahara, Y. Kannan // J Vet Med Sci. 2003. - Apr. - 65 (4). -4.-p. 49-52.

196. Yokoyama T. No Apoptotic Cell Death of Erythroid Cell of Erythroblastic Islands in Bone Marrow of Healthy Rats / T. Yokoyama, H. Kitagawa, T. Takeuchi, S. Tsukahara, Y. Kannan // J Vet Med Sci. 2002. - July. - 64 (10). -p. 913-919.

197. Zakharov Y.M. Technique d'isolement et de culture des ilôts erythroblastiques separetion du macrophage central / Y.M. Zakharov, M. Prenant // Nouv. Rev. Franc. Hematol. 1982. - Vol. 24. - P. 363-367.

Информация о работе

Улитко, Мария Валерьевна
кандидата биологических наук
Екатеринбург, 2008
ВАК 03.00.13

Диссертация

Роль моноцитов-макрофагов в адаптивных реакциях кроветворной ткани при действии на организм экстремальных факторов - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы