Морфологические основы защитно-приспособительных реакций соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях

Федорова, Наталья Петровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфологические основы защитно-приспособительных реакций соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфологические основы защитно-приспособительных реакций соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях"

(р

На правах рукописи

Федорова Наталья Петровна

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ЗАЩИТНО-ПРИСПОСОБИТЕЛЬНЫХ РЕАКЦИЙ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ КОЖИ И ТИМУСА ПРИ ПОВРЕЖДАЮЩИХ И КОРРИГИРУЮЩИХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2009

1 8 СОН 2023

003472679

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Новгородский государственный университет имени Ярослава Мудрого»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Прошина Лидия Григорьевна

Официальные оппоненты:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАЕН,

доктор медицинских наук, профессор Швалев Вадим Николаевич

член-корреспондент РАЕН,

доктор медицинских наук, профессор Дубовая Татьяна Клеониковна Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московская медицинская академия имени И.М. Сеченова»

¡/О

Защита состоится " ИИ?ИЙ 2009 г. в часов на заседании

диссертационного совета Д 212.203.08 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.6.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Российский университет дружбы народов». Автореферат разослан "ДЗ" М&М 2009г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

Саврова О. Б.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Проблема адаптации организма к действию экстремальных факторов и сегодня остается одной из важнейших в биологии, физиологии и медицине, что объясняется увеличением воздействий на организм антропогенных и экологически неблагоприятных факторов. Обезвоживание относится к числу наиболее актуальных проблем (Роле Б. Дж., 1984; Боднар Я.Я., 1991; Правоторов Г.В., 1996), что обусловлено рядом причин: физических, физиологических и социальных. Резкая потеря влаги (дегидратация) является стрессовым фактором, который часто действует на организм человека в естественных условиях и обстановке специфического производства, к тому же, многие заболевания инфекционного характера и травмы сопровождаются резкой потерей жидкости, приводя к нарушению функционирования различных органов и систем (Виноградов В.В., 1977; Малышев В.Д., 1984; Смирнов A.B. с соавт., 2006). Функционирование организма в экстремальных условиях обезвоживания сопровождается развитием общего адаптационного синдрома (Казначеев В.П., 1980; Горизонтов П. Д. с соавт., 1983; Меерсон А.Н. с соавт., 1984; Балонов М.И., Жеско Т.В., 1989; Салей А.П., 2000; Розенфельд A.C., 2004). Нарушение водного гомеостаза, приводит к морфофункциональным изменениям ряда органов и систем, в том числе тканей внутренней среды (Куприянов В.В., 1983; Якимова Ю.А., 1993; Судаков К.В., 2000; Прошина Л.Г., 2004; Панин Л.Е., 2007; Воробьева Н.Ф., 2007, 2008)., и органов иммунной системы (Акмаев И.Г., Гриневич В.В., 2003; Капитонова М.Ю. с соавт., 2005; Самусев Р.П. с соавт., 2006; Singh N. et al., 2005). В литературе отмечается высокая зависимость морфологии иммунной системы и, в частности, тимуса от условий существования организма (Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000; Ерофеева Л.М., Сапин М.Р., 2000). Тимус - центральный орган иммуногенеза, и от его состояния, и активности во многом зависит выраженность защитных реакций всего организма (Сапин М.Р., Этинген JI.E., 1996; Cempbelle P.A., 1993). Ряд авторов отмечает, что острое стрессовое воздействие, приводит к комплексным структурно-функциональным сдвигам в иммунной и нейроэндокринных системах регуляции живого организма (Агеева В.А. с соавт., 2004.; Смирнов

A.B. с соавт., 2006; Самусев Р.П. с соавт., 2006; Persidsky Yuri, 2003).

Существование организма во внешней среде возможно благодаря

эволюционно выработанным адаптивным реакциям, в которых непосредственное участие принимают ткани внутренней среды (Виноградов,

B.В., 1992; Бахшинян М.З. с соавт., 1998; Верба О.Ю. с соавт., 2003; Волошин H.A., 2005; Арташян О.С. с соавт., 2006; Жанаева С.Я. с соавт., 2007). Ткани внутренней среды, включающие соединительные ткани и кровь наряду с другими системами организма обеспечивают гомеостаз, защитные, регулирующие функции организма (Виноградов, В.В. с соавт., 1977; Казначеев В. П., 1980; Бахшинян М.З., 2004; Новиков В.Д. с соавт., 2004; Воробьева Н.Ф., 2007; Панин Л.Е., 2007; Persidsky Yuri, 2003; Dale D. С., 2008).

Высказано мнение (Виноградов В.В., 1992; Правоторов Г.В., 1996, Прошина Л.Г., 2004; Воробьева Н.Ф., 2007) о системных реакциях соединительной ткани в адаптивных реакциях организма, а также значительной роли в них гистиоцитов соединительной ткани. Позже отмечено вовлечение в гомеостатические реакции и активация в них наряду с блуждающими и резидентных макрофагов различных компартментов при перегревании и гормональном дисбалансе (Юрина Н. А. , Радостина А.И., 1990; Воробьева Н.Ф., 2008; Wright J.K., 2004; Yancey P. G., 2007).

В настоящее время в литературе имеется ряд доказательств наличия взаимодействия между иммунной и эндокринной системами. Одним из кандидатов на роль посредников этих взаимоотношений, по мнению ряда авторов (Маянский А.Н.,1989; Громыхина Н.Ю., 1993; Jassar A. S. , 2005; Bukrinki M. et all, 2006) являются макрофаги, секретирующие такие ключевые иммунорегуляторные факторы, как интерлейкин - 1 (ИЛ-1), ИЛ-6 фактор некроза опухолей, лимфоцит активирующий фактор и др. (Cempbelle P.A., 1993; Jassar A. S., 2005; Daxyadel А., 2006; Joseph Е., 2006; Bo-Chin Chiu et al„ 2007; Nadine Lippuner, 2007).

Известно также, что макрофаги определяют резистентность организма неблагоприятным условиям, а эффективность такого сопротивления зависит от согласованных взаимодействий эффекторных клеток (моноцитов, макрофагов, лимфоцитов (Бахшинян М. 3., 2004; Bassoe С. F., 2000; Qsterud В., 2003; Brown N. J., 2004; Yancey P. G., 2007).

Современная медицина располагает значительными фактическими данными, отражающими разные стороны адаптации организма к действию экстремальных факторов (Горизонтов П. Д. и соавт., 1983; Соловьев М.О., 1993; Юшков Б .Г. и соавт., 1999; Сапин М. Р., 2000; Судаков К. В., 2000). Достаточно хорошо исследована роль нервной системы, накоплены обширные данные, касающиеся эндокринной регуляции адаптивных реакций, в последние годы широко обсуждается роль иммунной системы в этих процессах (Струков А.И., 1990, Баринов Е.Х., 1992; Фрейдлин И.С., 2000; Persidsky Yuri, et al., 2003). Однако обращает на себя внимание чрезвычайная неравномерность и недостаточность в исследованиях, касающихся, взаимодействия специфической и неспецифической защиты, корреляции реакции клеток соединительной ткани и органов иммуногенеза (Бабаева А.Г., 1995; Сапин М. Р., 1996; Юшков Б. Г., 2006, Cempbelle P.A., 1993; Persidsky Yuri, 2003; Yancey P. G., 2007).

Защитные и адаптивные реакции всего организма обусловлены в определенной степени состоянием системы мононуклеарных фагоцитов, а так же во многом зависят от состояния и активности тимуса. Известно, что тимус как центральный орган иммуногенеза, реагирует на различные экологические, стрессовые и экстремальные факторы (Аминова Г.Г., 2000; Петренко М.В., 2005; Yakeier Е., 2004; Singh N., 2005; Di Naro Е., 2006).

повысить резистентность организма к данной ситуации, воздействуя через эффекторные звенья (лимфоциты, моноциты, макрофаги), представленные в тканях внутренней среды (рыхлой соединительной ткани и крови) (Агеева В. А., 2004; Singh N.. 2000; Yakeler Е., 2004; Jassar A. S., 2005).

В работах последних лет (Балаболкин М.И., 2000; Журавлев Ю.И., 2001; Зенков Н.К., 2001; Голиков А. П., 2003; Беридзе М.З., 2005; Воробьева Е.Н., 2005; Випартене Д., 2006; Власов А.П., 2007; Long L. Н., 2001; Asmis R., 2005) подчеркивается, что стресс-обусловленные реакции сопровождаются повышением процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ). Современной и важной представляется возможность повышения сопротивляемости организма дегидратирующим факторам введением антиоксидантов, и в условиях санации тканей внутренней среды (от токсических агентов ПОЛ) усилить эффективность работы защитно-компенсаторных механизмов в их морфологическом представлении - структур рыхлой волокнистой соединительной ткани и иммунокомпетентных клеток вилочковой железы (Betteridge D. J., 2000; Medina F., 2007)

Совокупность вышеизложенных позиций определила направление работы, а также цели и задачи. .

Цель исследования Настоящее исследование предпринято с целью изучения морфологических основ защитно-приспособительных реакций рыхлой волокнистой соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях.

Задачи исследования

Основными задачами нашей работы, которые определили выделение основных ее разделов, явились следующие:

1. Провести сравнительную оценку функциональной морфологии рыхлой неоформленной соединительной ткани (кожи и подкожной соединительной ткани), периферической крови и тимуса в условиях физиологического гомеостаза и повреждающем воздействии (экспериментальном обезвоживании организма).

2. Изучить влияние антиоксидантов на функциональную морфологию рыхлой неоформленной соединительной ткани кожи, крови и тимуса, уровень продуктов ПОЛ в крови и активность антиоксидантных ферментов в ткани печени.

3. Исследовать целесообразность превентивного введения а-токоферола при стресс-обусловленных воздействиях (дегидратация организма).

4. Выяснить рациональность использования антиоксиданта а-Тф в качестве корригирующего фактора на морфофункциональные изменения рыхлой соединительной ткани кожи и тимуса в условиях кумуляции в организме токсических продуктов ПОЛ, вызванных повреждающим действием экспериментального обезвоживания.

5. Провести сравнительный анализ эффективности защитно-компенсаторной перестройки рыхлой соединительной ткани кожи и тимуса при дегидратации и в условиях использования антиоксиданта.

Научная новизна диссертации. Впервые выявлено, что обезвоживание на ранних этапах (1 - 3-х суток) вызывает адаптивно-компенсаторные, в последующем (5-7 сутки) деструктивные изменения тимуса, что соответствует стадиям дегидратационного (окислительного) стресса. Ярко-выраженные деструктивные изменения тимуса на 7 - 9 сутки приводят к дезадаптации организма. Впервые отмечено, что деструктивные изменения вилочковой железы при дегидратации на фоне введения антиоксиданта имеют менее выраженный характер, чем при обезвоживании и носят защитно-приспособительный характер.

Впервые отмечено, что введение а-токоферола при дегидратации снижает содержание токсических продуктов ПОЛ и выраженность повреждений структур рыхлой соединительной ткани кожи, структур тимуса и периферической крови, определяя возможность более эффективной работы защитно-компенсаторных механизмов и в том числе макрофагической и иммунной систем.

Использованный комплекс морфологических, биохимических и функциональных методов исследования позволил вьмвить морфогенез изменений клеток рыхлой соединительной ткани кожи (и в частности ее эффекторного звена — макрофагов) и тимуса в условиях нарушения водно-солевого гомеостаза на фоне введения а-токоферола.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные результаты исследований необходимы для разработки положений о роли системы мононуклеарных фагоцитов в защитно-компенсаторных реакциях; их взаимоотношениях с иммунокомпетентными клетками в поддержании постоянства внутренней среды организма при адаптации к неблагоприятным факторам среды.

Количественные параметры мононуклеарных фагоцитов могут быть взяты за основу в экспериментальной и теоретической гистологии, патофизиологии и биохимии в той их части, где объектом исследования является система мононуклеарных фагоцитов и соединительная ткань. Показатели окислительно-восстановительного гомеостаза (ПОЛ-АОЗ) могут быть учтены при рассмотрении вопроса окислительного стресса, как одного из патогенетических звеньев каскада морфофункциональных нарушений при обезвоживании. Результаты работы по применению препарата с антиоксидантным действием (а-токоферол) могут быть использованы для обоснования мер патогенетического лечения состояний, сопровождающихся явлениями обезвоживания в клинической практике, а также при коррекции нарушений водно-солевого гомеостаза в процессе экологических и профессиональных воздействий.

Внедрение результатов работы в практику. Материалы по функциональной морфологии тимуса необходимо учитывать при исследовании и коррекции иммунного статуса в процессе дегидратации.

Фактические данные результатов исследования и теоретическое обобщение материала могут учитываться при лечении заболеваний, сопровождающихся обезвоживанием в клинических условиях. Сведения, полученные в процессе выполнения работы, могут быть использованы в научной работе биологических, экологических, гистофизиологических и др. лабораторий, где предметом исследования является водно-солевой обмен, соединительная ткань, вилочковая железа. Теоретические аспекты, выводы, количественные параметры по гистофизиологии РСТ кожи и тимуса могут быть востребованы в педагогической работе естественно-научных и медицинских кафедр университетов (биологии, молекулярной биологии, гистологии, анатомии, патофизиологии, патологической анатомии) , что подтверждено соответствующими актами о внедрении.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 страницах машинописного теста, состоит из введения, обзора литературы, главы описания материала и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы (170 отечественных и 110 зарубежных источника). Работа иллюстрирована 74 рисунками и 14 таблицами.

Основные положения выносимые на защиту:

1.Нарушение водно-солевого гомеостаза, вызванное в эксперименте повреждающим агентом дегидратацией, обуславливает общесистемную реакцию тканей внутренней среды организма (соединительной и крови), выражающуюся в увеличении интенсивности пролиферации клеток-предшественников макрофагической системы моноцитов и последующим ростом всей популяции (численности) фагоцитов, а также значительной интенсификацией их метаболического ответа на 3 сутки исследования со снижением в последующие сроки.

2.Дегидратация организма крыс самцов линии \Vistar приводит к появлению и росту в ходе эксперимента токсических метаболитов ПОЛ, с прямой корреляцией роста численности клеток макрофагической системы и обратной — с количеством иммунокомпетентных клеток крови и тимуса. Выявленные разнонаправленные изменения в различных иерархических звеньях иммунной защиты нарушают структурные основы (лимфоциты, моноциты, макрофаги) защитно-приспособительных реакций организма.

3.Оптимизация параметров ПОЛ внутренней среды организма в условиях обезвоживания путем введения антиоксидантов рациональна и приводит к изменению динамики активации клеток макрофагической системы и повышению эффективности в работе данного исполнительного звена гомеостатических реакций.

возможности иммунокомпетентных клеток самого органа, так и РСТ кожи, и периферической крови. Введение антиоксиданта снижает степень и величину дистрофических изменений в тимусе, уменьшает процент гибели лимфоцитов путем некроза, увеличивает количество созревающих клеток, и позитивно влияет на функциональные возможности структур РСТК (макрофагов, моноцитов, лимфоцитов), обеспечивающих адаптивно-компенсаторные реакции организма.

Основные результаты диссертационного исследования докладывались и обсуждались на: XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» - Москва, 12 - 15 апреля 2006, секция фундаментальная медицина; VIII конгрессе международной ассоциации морфологов Орел, 15 - 17 сентября 2006; VII Международной научно-практической конференции "Здоровье и Образование в XXI веке". - Москва, 23-26 ноября 2006; 6-й Всероссийской научной конференции «Бабухинские чтения в Орле». - Орел, 28 - 29 марта, 2007; конференции посвященной 100-летию Л.И. Фалина. - Москва 17—18 мая, 2007; II международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения - 2007». -С.Петербург 5-7 декабря, 2007; XII научно-практической конференции сотрудников и студентов ИМО НовГУ. - В.Новгород, апрель, 2008; IX конгрессе МАМ. - г. Бухара, республика Узбекистан 14 - 17 мая, 2008; IX Международной научно-практической конференции "Здоровье и Образование в XXI веке". - Москва, 27-30 ноября 2008.

Апробация работы осуществлена на совместном заседании кафедр морфологии человека, нормальной физиологии, общей патологии, микробиологии, иммунологии и инфекционных болезней и проблемной комиссии института медицинского образования Новгородского государственного университета имени Ярослава Мудрого. По материалам диссертации опубликовано 20 научных работ, 2 из которых в журналах включенных в «Перечень ВАК РФ» 2006 года и 7 - в материалах научных конференций с международным участием. Все материалы, представленные в диссертации и опубликованные в печати, собраны, обработаны и проанализированы лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы. Опыты были выполнены на 296 взрослых самцах крыс линии Wistar с исходной массой тела 180-220 г. Условия содержания и кормления экспериментальных животных соответствовали «Санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник», утвержденным Приказом МЗ СССР № 1179 от 10.10.83 г. Экспериментальные исследования выполнялись в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS N 123) (Страсбург, 18 марта 1986 года).

Контрольную группу животных (30 особей) содержали на обычном рационе вивария при свободном доступе к воде. Дегидратацию в экспериментальной группе животных вызывали использованием корма с влажностью не более 15% и полном лишении воды в течении 3 суток (26 особей), 5 суток (25 особей), 7 суток (28 особей) и 9 суток (30 особей). Для оценки степени дегидратации при сухоядении исследовали динамику веса животных. Выделяли три степени дегидратации (Боднар Я.Я., 1991): легкая -дефицит воды 2-5% (3 суток); средняя - дефицит воды более 5-10% (7 суток); -сублетальная с потерей массы более 10% (9 суток).

С целью повышения антиоксидантного статуса был избран природный антиоксидант витамин Е (а -токоферол, "Serva" в дозе 50 мг/кг массы), Витамин Е вводили перорально, препарат растворяли в растительном масле и вводили на протяжении 3-6-9-15-20-30 суток (36 особей). Выбор дозы соответствовал литературным данным (Дорошкевич H.A., Анцулевич С.Н., 1989; Кайнова Г.М., и др., 1990; Абрамченко В.В., 2001) и собственным предварительньм исследованиям. Контрольным животным вводили равное количество растительного масла.

При постановке экспериментов с дегидратацией, с превентивным и последующим введением антиоксидантов животных переводили в режим сухоядения с седьмого дня введения препарата 3 суток + а -токоферол (30 особей), 5 суток (29 особей), 7 суток (28 особей) и 9 суток (34 особей). Эвтаназию животных проводили краниоцервикальной дислокацией, предварительно анестезируя диэтиловым эфиром.

Морфологические исследования проводились с помощью светооптических методов. Светооптические препараты изучались на микроскопе МБИ - 15, XS-90, Zeiss. Исследовали тимус, полнослойные кусочки кожи, а также пленочные препараты подкожной рыхлой соединительной ткани.

Для каждой серии экспериментов на пленочных препаратах подсчитывали не менее 10 тысяч клеток (при выборе не менее одной тысячи клеток для каждого животного). Подсчитывали относительное содержание клеток: фибробластов, макрофагов, тучных и других клеток; вычисляли макрофаг-фибробластический индекс (МФИ); объемную плотность ядра и цитоплазмы макрофагов и фибробластов (проводили с использованием тест-сетки Автандилова А.Г. 1990; вычисляли ядерно-цитоплазматическое соотношение. Гистологические срезы кожи и тимуса окрашивали гематоксилином и эозином, ван Гизону. В препаратах кожи, оценивали соотношение структурных элементов РСТ сосочкового слоя. Для стереологического исследования использовали методы, основанные на подсчете числа точек тестовой системы, попавших на профиль исследуемой структуры (Стефанов С.Б., 1974; Быков B.JL, 1979; Непомнящих JI.M., 1980; Автандилов Г.Г., 1990).

На срезах тимуса с помощью методов стереологического анализа измеряли площади коркового и мозгового вещества. Клеточный состав подсчитывался в поле зрения общей площадью 35 мкм2 раздельно для

коркового и мозгового вещества. Подсчитывались большие, средние, малые лимфоциты, ретикулоэпителиальные, делящиеся и разрушающиеся клетки при увеличении микроскопа ок. 10, об. 90. Всего в каждом структурном компоненте тимуса подсчитывалось по 10 полей зрения. При дифференцировки лимфоцитов учитывался диаметр клеток (большие - более 9 мкм, средние - 7-8 мкм, малые - 5-6 мкм), а так же особенности распределения хроматина в ядрах клеток. Данные, полученные в результате морфометрических исследований, записывали в протоколы, а средние величины и их ошибки заносили в сводные таблицы.

Для изучения динамики периферической крови, а также состояния макрофагов (моноцитов) сосудистого русла в мазках крови подсчитывали лейкоцитарную формулу. Мазок фиксировали метанолом и окрашивали азур-эозином по Романовскому-Гимзе.

Для оценки состояния защитных реакций организма в моделируемой ситуации и степени вовлечения иммунокомпетентных клеток использовали метод проточной цитометрии1, исследовали состояния тимоцитов вилочковой железы: определяли витальность клеток, уровень апоптоза и некроза, пролиферативную активность.

Для получения представления о метаболической активности клеток CT, особенно макрофагов участия их в жировом обмене использовали комплекс классических методов исследования цитохимической активности ряда окислительных и гидролитических ферментов (Пирс Э., 1962; Лилли Р., 1969; ЛойдаЗ., 1982). Активность фермента определили в фибробластах и макрофагах. В процессе исследования для оценки метаболической активности клеток была изучена активность следующих ферментов: НАД - диафоразы (НАД-д); лактатдегидрогеназы (ЛДГ); оксибутиратдегидрогеназы (ОБДГ); неспецифической эстеразы (НЭ); альфа-глицерофосфат-дегидрогеназы (а-ГФДГ); глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) и кислой фосфатазы (КФ).

Для оценки состояния ПОЛ в плазме крови и тканях животных определяли содержание диеновых конъюгатов (ДК) и ТБК-активные продукты по методу В.Г. Гаврилова и М.И. Мишкорудной (1983), в эритроцитах - по В.Н. Ушкаловой и Г.Д.Кадочниковой (1987), в гомогенатах печени - по И.Д.Стальной (1977). Исследовали активность ферментов антиоксидантной системы защиты клеток организма: супероксиддисмутазы (СОД) выявляли в печени (Beauchamp С., Fridovich I., 1971); глутатионпероксидазы (ГП) определяли по методу Paglia D. Е., Valentine W. (1967) в модификации В.З. Ланкина и С.М.Гуревича (1976); глутатион-Б-трасферазную активность (ГТ) по методу Keen J. Н., Yakoby W. В., 1978; глутатионредуктазы (ГР) выявляли по методу Pinto Е. R., Bartley W., 1969.

1 Приносим благодарность кандидату медицинских наук А.С.Александрову - заведующему централизованной цитологической лаборатории Новгородского областного клинического онкологического центра (г.В.Новгород) за предоставленною возможность выполнение фрагмента работы и профессору, д.м.н. заведующему кафедрой микробиологии, иммунологии и инфекционных болезней Г.С. Архипову за помощь при обсуждении данного материала.

Статистическая значимость различий средних показателей оценивалась с помощью t-критерия Стьюдента при 95% доверительной вероятности (р<0,05). Собранные данные были обработаны с использованием стандартного пакета программ Microsoft Excel (2007 г), Statistica 6.0. Фотографии микропрепаратов выполнены со светового биологического микроскопа XS-90 цифровой камерой OLYMPUS модель Е-510, объектив ZD-3 5 при увеличении XI.

Результаты и их обсуждение. Вмешательство внешних факторов в состояние гомеостаза приводит к адаптивной перестройке, в результате которой одна или несколько функциональных систем организма компенсируют дискоординацию для восстановления равновесия. При этом основные сдвиги в системах организма, регулирующих гомеостаз, возникают со стороны иммунных и эндокринных органов, преимущественно тимуса, гипофиза и надпочечников (Selye Н., 1960). При стрессе наблюдаются выраженные морфофункциональные изменения в различных органах: мозге, сердечной мышце надпочечниках, различных железах внутренней секреции и др. Такие генерализованные по различным органам изменения при стрессе дают основание предполагать возможное участие в этом процессе соединительной ткани, которая, как известно, будучи производной мезенхимы, широко представлена в разных органах (Судаков К.В., 2000; Розенфельд А.С., 2004).

Соединительная ткань кожи в норме характеризуется стабильным составом клеточных популяций. Содержание фибробластов подкожной рыхлой соединительной ткани белой крысы линии Wistar составляет в среднем 71,6±0,2%; макрофагов 25,7±0,3%; тучных клеток - 0,70^0,02%; на долю других клеток приходится 1,90±0,07%. Наши исследования совпадают с ранее полученными результатами (Виноградов В.В., 1989; Прошина Л.Г., 1999; Новиков В.Д., Правоторов Г.В., 2004; Воробьева Н.Ф., 2007).

Величина МФИ у интактных животных составляет « 360±5. На пленочных препаратах, окрашенных железным гематоксилином по Вейгерту в модификации Лили, границы макрофагов всегда четко очерчены (в отличие от фибробластов), что позволяет провести морфометрические измерения на уровне светового микроскопа. Ддерно-цитоплазматическое отношение макрофагов в норме составляет и 0,27±0,03.

При характеристике метаболической активности клеток СТ имеет смысл сравнить макрофаги с фибробластами, так как они находятся в тесном взаимодействии друг с другом, и обуславливают через продукцию ряда факторов работу других клеточных элементов системы соединительной ткани.

Исследование ферментов в макрофагах и фибробластах определяют цитохимическую активность и общую функциональную деятельность клеток, а также участие макрофагов в обмене липидов. Критерием функциональной активности клетки может служить её общий метаболизм, определяемый по активности ферментов, связанных с основным путем окисления. Для макрофагов и фибробластов - это гликолиз (Маянский А. Н., 1989). Активность ЛДГ характеризует обмен углеводов по пути гликолиза, о доле участия пентозного пути судили по изменению активности Г-6-ФДГ.

Цитоплазматическая активность ОБДГ и а-ГФДГ служила показателем синтеза и расщепления липидов (Пирс Э., 1962). Исследование, НАД-д, НЭ дополняют эти сведения. Для характеристики активности клеток макрофагического ряда, а также - стабильности и проницаемости мембран исследовали содержание КФ. Среди популяции клеток соединительной ткани макрофаги являются метаболически самыми активными. Цитохимическая активность ОБДГ, Г-6-ФДГ, ЛДГ, а-ГФДГ в МФ в 2 раза выше, чем в фибробластах.

При достаточно стабильном численном составе СТ и количественном соотношении в физиологических условиях метаболическая активность клеток зависит от сезонных периодов (Зенков Н.К. и соавт., 1994; Нагоев Б.С. и соавт., 2006). Если анализировать уровень гликолиза, который, как известно, является главным поставщиком энергии соединительнотканных клеток (Учитель И.Я., 1978; Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981; Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989 Сап, 1978), то в зимний период энергетические затраты существенно повышаются (в фибробластах активация ЛДГ на 81%, в макрофагах - на 39%). В клетках макрофагального ряда среди ферментов наблюдается сравнительно высокий фон активности для а-ГФДГ, НАДФ-д, низкий - для ОБДГ, НЭ, то есть заметно преобладание анаболических процессов. Напротив, летом отмечается высокий фон активности липолитических и гидролитических ферментов (повышение активности ОБДГ на 86%, НЭ - на 26%), при этом активность а-ГФДГ, меняется незначительно. В связи с вышеизложенным эксперимент проводили в осенний период в условиях стабильной комнатной температуры (20-23°).

Обезвоживание организма вызывает изменения в СТ, в частности, ее структурных элементах, чутко реагирующих на повреждающие факторы организма и включающиеся в защитно-приспособительные реакции (клетки и межклеточное вещество). Адекватно экстремальности воздействия возникают морфологические изменения в тимусе.

Функциональная полноценность липидных структур, регистрируемая процессами ПОЛ, является универсальным показателем стационарных химических превращений в клетках и организме, при воздействии разнообразных по своей природе патогенных факторов среды. В физиологических условиях в организме ПОЛ протекает в виде управляемой реакции, контролируемой АОС, т.е. системой поддержания гомеостаза (Владимирова Ю, А., 1972; Абрамченко В.В., 2001).

Антиоксидантный потенциал организма на ранних этапах (3 суток обезвоживания) достаточно высок, в эти сроки сохраняется активность ферментов ГП и ГБТ на уровне контроля. Повышается антиоксидантный потенциал и за счет притока костно-мозговых предшественников макрофагов. На 3 сутки в СТ намечается тенденция к увеличению количества макрофагов с низким ядерно-цитоплазматическим отношением, что коррелирует с выраженным моноцитозом периферической крови. Малодифференцированные макрофаги характеризуются более высокой активностью антиоксидантных ферментов, в частности пероксидазы (Маянский А. Н., Маянский Д.Н., 1989; Правоторов Г.В., Новиков В.Д., 1996).

В процессе дегидратации на 7 сутки степень экстремальности эксперимента увеличивается, что сопровождается повышенным содержанием токсичных продуктов ПОЛ (рис.1).

1100

еоо

У го

SOO 400 | 300 1 200 §• 100 'О

Рис. 1. Влияние дегидратации на динамику МДА в крови крыс линии "^гаг.

Важной составляющей среди ряда компонентов стрессорного повреждения мембранных структур, является накопление продуктов ПОЛ, возможно это, оказывается одной из причин, запускающих цепь адаптивных реакций. Одним из компонентов этих реакций является максимальная реализация функций фагоцитов СТ. Происходит значительное увеличение численности МФ (на 47,4% на 7 сутки водной депривации), МФИ возрастает почти в 2 раза (1,8 раза). При морфометрическом анализе макрофагов выявляется снижение их размеров: уменьшается площадь цитоплазмы на 33%, несколько снижается площадь ядра. Очевидно, это обусловлено увеличением в СТ числа молодых, более мелких клеток. Повышение ядерно-цитоплазматического отношения на 7 сутки водного голодания ещё раз подчеркивает наполнение СТ молодыми клеточными элементами, однако на 9 сутки водного голодания данный показатель свидетельствует о резком снижении функциональных возможностей клеточных элементов.

Водное голодание на 9 сутки определяется как тяжелая степень дегидратации с потерей влаги больше 10-15%. Анализ состава периферической крови демонстрирует снижение резистентности организма (снижение лимфоцитов на 6% и повышение нейтрофилов со сдвигом в сторону сегментноядерных на 10%). Численность макрофагов превышает уровень контрольных животных на 21%, однако резкое увеличение ядерно-цитоплазматического отношения свидетельствует о функциональном истощении. Размеры клеток уменьшаются на 33%. Клеточные элементы СТ подвергаются деструктивным изменениям. Реакция СТ на обезвоживание и повышение ПОЛ выражается в изменении структур сосочкового слоя кожи. Отмечается достоверное (на 2%) снижение процентного содержания клеток рыхлой волокнистой соединительной ткани сосочкового слоя дермы. Изучение межклеточного вещества рыхлой волокнистой соединительной ткани сосочкового слоя кожи выявило тенденцию к увеличению доли волокон и снижению основного аморфного вещества (ОАВ) в разные сроки исследования.

гттт

Значительные изменения проявляются на 7 и 9 сутки обезвоживания. В эти сроки волокнистые структуры составили 75,7±0,2% и 77,6±0,2% соответственно, что в 1,3 раза превышает контроль. Уровень содержания основного аморфного вещества снижается уже на 3 сутки обезвоживания на 7%. На 7 и 9 сутки экспериментальной дегидратации его объем падает на 14% и 16% соответственно.

При дегидратации изменяется липидный обмен. Нарушается фосфолипидный состав ряда органов, в частности легочной ткани (Журавлев Ю. И. 2001), повышается содержание эфирносвязанных жирных кислот, холестерина и фосфолипидов (Душкин М. И. 2006). Подобные изменения липидного обмена характерны для любых экстремальных ситуаций. При стрессе резко возрастает количество транспортных форм липидов, что трактуется как переключение организма с "углеводного" типа метаболизма на "липйдный" (Панин Л.Е., 1983 2007). В нашей работе, очевидно, на липидный поток откликается СТ, повышением активности липолитических и гидролитических ферментов в макрофагах: возрастает активность ОБДГ, НЭ на 3 сутки эксперимента.

На 3 сутки отмечается повышение активности практически всех исследуемых ферментов как в макрофагах, так и фибробластах. Активность ОБДГ в макрофагах возросла на 26,9%, НЭ - на 23,8%, а КФ - на 116,5%.

Известно что, фагоциты способны, вырабатывая гидролитические ферменты (например, НЭ), расщеплять межклеточное вещество СТ, а фибробласты нарабатывать новые волокна и обновлять загруженные токсическими продуктами ПОЛ (Кожевников Ю.Н., 1985; Климов А.Н., 1999; Власов А.П, 2007; Ве1*епс1§е БЛ., 2000). Увеличение активности КФ свидетельствует о возбуждении лизосомальных мембран (Покровский А.А., Тутальян В.А., 1976).

В развитии экспериментальной дегидратации, происходит падение активности практически всех исследуемых ферментов. На 3 сутки дегидратации отмечается высокая активность КФ, то на 5 и 7 сутки происходит снижение активности КФ, которая все еще превышает контрольный уровень, но стабильно снижается, на 9 сутки эксперимента активность КФ падает ниже контрольных значений. Падение активности КФ свидетельствует не только о деструкции лизосомальных мембран, но и плазматических. Известно, что продукты ПОЛ, как и сами активные радикалы усиливают проницаемость лизосомальных мембран (Абрамченко В.В., 2001).

Обращает на себя внимание четкая последовательность накопления метаболитов ПОЛ в плазме крови и ткани печени (первоначально увеличивается содержание ДК, затем МДА), которая по времени совпадала с началом снижения активности ГП и ГБТ.

9 сутки водной депривации определяются как тяжелая степень дегидратации с потерей влаги больше . 10-15%. Снижение на 7 сутки и последующее увеличение ДК на поздних сроках можно расценивать как явление дезадаптации. В ткани печени наблюдается резкое падение собственных эндогенных антиоксидантных ферментных систем: СОД -

фермента, катализирующего реакцию диспропорционирования супероксидного радикала и таким образом снижающего его концентрацию в тканях (снижается на 30%). В 2 раза уменьшается ГР; в 1,6 раза - TST и 1,7 раза - ГП.

Водное голодание является стрессовой ситуацией, характеризующаяся вовлечением в ответную реакцию всех звеньев организма, включая эндокринные и иммунные (Куприянов В.В. и соавт, 1979; Тихомиров А.Н, Соколова Е.А., 1989; Боднар Я. Я., 1990; Сапин М. Р., Никитюк Д.Б., 2000). Следует отметить, что вес тимуса - важный показатель его функциональной активности, который свидетельствует не только о функциональном состоянии органа, но и является отражением системного баланса всей лимфоидной системы (Агеева В. А., 2004). Известно, что адаптация организма сопровождается снижением массы тимуса в результате гибели дифференцированных лимфоцитов (Баринов Е. X., 1992; Бабаева А. Г., 1995; Петренко М. В., 2005). При изучении динамики относительной массы тимуса, в условиях обезвоживания, выявлено падение данного показателя в 1,3 раза на 3 сутки; в 1,9 раза - на 5сутки, и в 2,Зраза - на 9 сутки. Изучение морфологии тимуса проведенное на светооптическом уровне показало, что дегидратация вызывает выраженные деструктивные изменения в тимусе, уменьшение площади коркового вещества, а также повышение гибели клеточных элементов, причем с нарастанием некротических процессов.

Анализ структурных элементов тимуса в процессе дегидратации показал изменение клеточных характеристик тимуса. Увеличение доли малых лимфоцитов на 3 сутки обезвоживания можно расценивать, как первую стадию развития стресса и мобилизацию адаптационных возможностей организма. В эти сроки дегидратации наблюдается наибольшая метаболическая активность в макрофагах. Данный факт можно расценивать, как активацию выработки лимфоцит-активирующего фактора макрофагами, способствующего созреванию тимоцитов (Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981). Наблюдается тесная корреляционная связь между метаболической активностью макрофагов и содержанием малых лимфоцитов в вилочковой железе 1=0,95(рис.2).

Scatefpkt но н&вд WHOiftr» <& мггаболнмвя живность МИ'{Сивши МО МЮоп) метбштаскм активность № ■ 7,3331 + ,35678' ню яапл ткмотигав СотоМок Г" ,96284

Рис. 2. Линия регрессии зависимой переменной (к-во малых тимоцитов) от метаболической активности макрофагов.

Длительная дегидратация вызывает снижение и срыв адаптивных реакций МФ с истощением метаболического ответа, повышением ядерно-цитоплазматических отношений и деструктивными изменениями структур СТ кожи и тимуса.

Динамика морфофункциональных изменений СТ кожи, периферической крови и тимуса при обезвоживании на фоне введения а-

Тф. Если допустить, что интенсификация ПОЛ может провоцировать деструктивные процессы в соединительной ткани (организме) при дегидратации, то есть все основания надеяться, что своевременная стимуляция клеток СМФ и сопряженного с ней антиоксидантного потенциала может существенно повысить резистентность организма к дегидратации. В динамике обезвоживания организма происходит повышение ПОЛ с кумуляцией ДК, МДА и снижением эндогенной АОЗ. Существует два способа подавить действие свободных радикалов - снизить их образование и повысить эффективность антиоксидантной системы (Бурлакова Е.Б., 1992; Dawn J, 2002). В нашей работе предлагается увеличить мощность антиоксидантной системы путем экзогенного введения а-Токоферола.

Дегидратация на фоне поступления а-Тф протекает с небольшим увеличением первичных и вторичных метаболитов ПОЛ. Введение а-Тф при дегидратации сдвигает сроки накопления токсичных метаболитов ПОЛ (рис. 3). Максимум накопления Д К происходит на 7 и 9 сутки (а не на 3 и 9 день), а МДА на 9 сутки, а не на 7 день, как это происходило в условиях водной депривации. Дегидратация с протекторным введением а-Тф демонстрирует более высокие показатели АО энзимов в ткани печени, чем это имело место в ситуации обезвоживания без препарата. То есть имеет место стресс-протективное влияние а-Тф, выраженное в снижении скорости образования и накопления первичных и конечных метаболитов ПОЛ, а также позитивной индукцией ферментов АОЗ.

Ответная реакция соединительной ткани кожи и ее структурных элементов развертывается в более благоприятных условиях окружающей среды, что находит свое подтверждение в состоянии структур СТ кожи, тимуса, периферической крови.

Морфометрическое исследование сосочкового слоя кожи при дегидратации на фоне введения а-Тф показало снижение объема этого слоя, как и при обезвоживании организма, однако имело менее выраженную интенсивность. В межклеточном веществе сохранялась тенденция к увеличению количества волокон и снижению объема основного аморфного вещества, но она была менее выражена чем при обезвоживании. Содержание волокон на 3 сутки дегидратации на фоне введения а-Тф составило 62,5±0,4%, на 7сутки - 72,8±0,2%, и на 9 сутки - 74,7±0,2%, это достоверно на 3% меньше чем в условиях обезвоживания организма.

—♦— ДКв эр

Рис. 3. Активность КФ макрофагов СТ и содержание ДК в эритроцитах крови при обезвоживании и на фоне введения а-Тф.

Содержание макрофагов на фоне поступления препарата сопоставим на 3 сутки и опережает на 7 и 9 сутки их величины у животных в условиях обезвоживания. Реакция макрофагов, выраженная МФИ, на 3 сутки превышала на 22,7% крыс, не получавших а-Тф. 7 сутки продемонстрировали более интенсивную реакцию макрофагов на дегидратацию у животных без протектора. Сниженное содержание метаболитов ПОЛ на фоне введения антиоксидантов «смягчает» ответную реакцию фагоцитов СТ и она становится «экономичней», так как тяжелая степень обезвоживания 9 суток на фоне введения препарата вновь показывала более яркий ответ (на 6% по сравнению с группой обезвоженных крыс без препарата), В данном случае очевидно, что на фоне введения а-Тф структурные элементы СТ обеспечивающие защитно-адаптивные реакции работают более эффективно.

Поступление а-Тф на 7 сутки обезвоживания стимулирует фибробласты (на 7%), популяция которых имеет тенденцию к увеличению и на 9 сутки. Достаточно интересна динамика тучных клеток. Сухоядение на фоне протектора почти в 5 раз увеличило содержание тканевых базофилов. 7 сутки протекали сопоставимо, однако на 9 день их численность на фоне введения препарата вновь преобладала ( в 4 раза). В данном случае а-Тф оказывает индуктивное влияние практически на все элементы СТ и вовлекает их в общую системную реакцию на восстановление нарушенного гомеостаза.

Морфометрический анализ макрофагов также свидетельствует в пользу протективного влияния а-Тф. Препарат положительно корригирует ядерно-цитоплазматическое отношение (снижает) и позитивно отражается на размерах клеток. Площадь цитоплазмы макрофагов СТ животных, получавших витамин Е всегда превышает аналогичную без препарата, что свидетельствует о их более благоприятных функциональных возможностях.

Метаболическая активность макрофагов в условиях введения препарата подтверждает это предположение. Динамика активности ферментов в обеих

ситуациях совпадает, но на фоне а-Тф оказывается более интенсивной. Исключение составляет КФ, активность которой снижается на фоне препарата и подтверждает мембраностабилизирующий эффект а-Тф (рис.3.).

Необходимо особо отметить влияние а-Тф на активность ОБДГ. Дегидратация в течение 3 дней вызывала подъем этого фермента, активность которого, впрочем, как и у всех остальных падала с 7-го дня. а-токоферол стимулировал активность ОБДГ на всех сроках обезвоживания, а интенсивность реакции превышала контрольные цифры не только на 3, но и на 7 сутки. 7 сутки обезвоживания с коррекцией а-Тф повышали активность ОБДГ макрофагов СТ кожи на 62% по сравнению с обезвоженными, и на 20% по сравнению с контрольными животными. Учитывая участие ОБДГ в метаболизме липидов (окисление), можно полагать интенсификацию обмена жиров в макрофагах СТ на фоне приема а-Тф. Возможно, а-Тф повышает фагоцитоз липидов и стимулирует внутриклеточный липолиз. Вероятно, также и то, что макрофаги выступают в роли «ловушек» при избыточном потоке липидов в организме при экстремальных ситуациях, какой является обезвоживание, что совпадает с мнением ряда авторов (Правоторов Г. В., Новиков В.Д., 1996; Нагорнев В. А., и соавт., 2003). Сходная направленность наблюдается и в отношении энзима Г-6-ФДГ, данный показатель следует интерпретировать как повышение пентозо-фосфатного пути, индуцируемого препаратом в качестве компенсаторной реакции в условиях водной депривации.

Можно отметить общую позитивную направленность метаболизма энзимов в МФ кожи на повышение резистентности к обезвоживанию организма и мембранопротекторный эффект а-токоферола. Описанная динамика активности ферментов (в условиях водного голодания на фоне приема а-Тф), участвующих в жировом обмене может способствовать более щадящему использованию подкожно-жировой клетчатки, о чем свидетельствует динамика массы животного (рис.4).

Рис. 4. Динамика веса крыс линии при дегидратации (Д) на фоне

введения а-Тф (Д+ а-Тф)

Использование а-токоферола выявило положительное влияние на лейкоцитарную формулу, индукцию моноцитов, повысило содержание лимфоцитов на 3,4% по сравнению с группой животных при дегидратации. Анализ периферической крови делает правомочным заявление о повышении резистентности организма при обезвоживании на фоне приема а-Тф. Динамика структурных изменений в тимусе под влиянием обезвоживания на фоне введения а-Тф характеризуется гибелью лимфоцитов, уменьшением их относительной плотности в корковом веществе долек органа, однако эти процессы менее выражены чем при дегидратации без превентивного введения антиоксиданта. Третьи сутки введения препарата при обезвоживании привело к увеличению малых лимфоцитов на 10% по сравнению с крысами в режиме сухоядения. По данным проточной цитометрии гибель лимфоцитов путем некроза и апоптоза в процессе обезвоживания на фоне введения витамина Е снижена в 1,5 раза (по сравнению с обезвоживанием без введения препарата), причем снижался процент некротически измененных клеток. Выявленные изменения в тимусе при обезвоживании с корригирующим введением а-Тф свидетельствуют о более выраженных адаптивно-компенсаторных реакциях на 3 сутки и сниженных деструктивных изменениях структур органа в последующие сроки.

Таким образом, введение природного антиоксиданта а-Тф снижает степень экстремальности ситуации, уменьшает накопление метаболитов ПОЛ, индуцирует эндогенную АО систему организма. Степень экстремальности ситуации находится в прямой зависимости от накопления токсических продуктов ПОЛ, а-токоферол снижает их накопление и увеличивает продолжительность жизни при обезвоживании практически в два раза. Альфа-токоферол защищает от перекисного окисления липидов как путем перехвата, так и детоксикацией АФК, а-Тф усиливает АОС, стимулируя поступление прекурсоров макрофагов, так как молодые клетки (моноциты) обладают более высоким антиоксидантным потенциалом, чем резидентные макрофаги, в чем наше положение совпадает с мнением Сафронова И.Д. (1999) и Maeda Н. (2005).

Оптимизация параметров внутренней среды организма путем введения а-Тф мобилизует и интегрирует структуры соединительной ткани кожи, тимуса и крови, преимущественно их клеточные элементы (макрофаги, моноциты, лимфоциты), разобщенные и подвергшиеся деструкции процессом дегидратации. В процессе обезвоживания организма с коррекцией его состояния антиоксидантом а-Тф также прослеживаются три основные фазы стресс-реакции: первая фаза острой реакции и мобилизации (1-3 суток), сопровождающаяся повышением ДК плазмы крови, активности ферментов АОЗ, численности макрофагов CT и их метаболической активности, моноцитов периферической крови, зрелых лимфоцитов вилочковой железы; вторая - фаза компенсации (отЗ до 5 суток), в которой сохранялись повышенное содержание ДК, повышенная активность ферментов АОЗ, происходило возвращение к контрольным цифрам количества моноцитов, повышалось содержание больших и средних лимфоцитов, при падении численности малых; третья - фаза

деструктивных изменений (от 7 до 9 суток). На поздних сроках обезвоживания (7-9 сутки) происходила максимальная кумуляция продуктов ПОЛ, имели место деструктивные изменения структур соединительной ткани кожи и тимуса. Описанные явления подтверждают высказанное положение о том, что введение антиоксиданта не отменяет реакцию структур (макрофаги, моноциты, лимфоциты), активно откликающихся на изменения метаболического гомеостаза организма. Альфа-токоферол, повышая антиоксидантный статус организма и снижая содержание токсических продуктов ПОЛ уменьшает степень деструктивных изменений вилочковой железы, а также степень дезадаптивных влияний ее на эффекторные звенья гомеостаза. Защитно-приспособительные реакции СТ кожи и тимуса при коррекции повреждающих воздействий дегидратации препаратом с антиоксидантным эффектом развертываются в тесной интеграции структур, обеспечивающих резистентность организма к повреждающим факторам. На фоне введения а-Тф отмечается синергизм в повышении численной плотности макрофагов, моноцитов СТ, лимфоцитов периферической крови и тимуса, причем защитно-адаптивная реакция развертывается более эффективно, так как обеспечена большими функциональными (метаболической активностью, снижением ЯЦО), возможностями задействованных структур.

ВЫВОДЫ

1. Дегидратация крыс линии Wistar приводит к падению массы тела: через трое суток на 14%, девять суток - 40,6%. Избранный режим воздействия является экстремальным: на 7 сутки обезвоживания процент летальности составляет 34%, на 9 - 68% и на 10-12 сутки погибают практически все животные.

2. Состав популяции клеток РСТК крыс линии \\^аг в условиях нормы стабилен и составляет в среднем 71,6% фибробластов, 25,7% макрофагов, 0,7% тучных клеток, 1,9% лейкоцитов. Содержание указанных клеточных элементов имеет незначительный коэффициент вариации. Среди клеточных элементов соединительной ткани макрофаги являются функционально самыми активными: метаболически и динамически.

3. Дегидратация организма, приводит к увеличению численности макрофагов на 46%, ядерно-цитоплазматического отношения (с 0,27 до 0,92 с 3 - 9 сутки обезвоживания), и уменьшению их размеров (в 1,5 раза). Дегидратация модифицирует метаболизм клеточных элементов: на 3-й день происходит увеличение активности ферментов ОБДГ, НЭ, Г-6ФДГ, ЛДГ, а - ГФДГ, НАД-д, КФ, на 5 и 7 день - цитохимическая активность снижается, за исключением КФ, которая снижается но превышает контрольные цифры.

4. Обезвоживание приводит к изменению соотношения волокон и основного аморфного вещества межклеточного матрикса в сторону уменьшения последнего в рыхлой соединительной ткани кожи крыс линии \У1з1аг.

5. Дегидратация вызывает морфологическую перестройку тимуса с увеличением деструктивных изменений на 6 - 9 сутки, повышением гибели тимоцитов путем некроза. Динамика структурных изменений тимуса служит индикатором развивающегося стресса и дистресса, и обоснует целесообразность заместительной терапии дефицита функций вилочковой железы.

6. Обезвоживание вызывает структурную перестройку вилочковой железы, которая отражает стадии общего адаптационного синдрома. К 1 - 3-им суткам возрастает содержание зрелых лимфоцитов (стадия мобилизации), 3-5 сутки компенсаторно повышается содержание больших и средних лимфоцитов (стадия устойчивой резистентности), на 7 - 9 сутки происходит деструкция и массовая гибель лимфоцитов коркового и мозгового вещества. Возрастает процент клеток подвергшихся некрозу (стадия истощения).

7. Обезвоживание организма сопровождается нарушением в системе ПОЛ-АОЗ, накоплением токсических метаболитов и снижением активности антиоксидантных ферментов. Накопление первичных и вторичных продуктов ПОЛ характеризуется максимальным содержанием ДК на 3 сутки водной депривации, последующим снижением их и накоплением на

5 сутки МДА, новым подъемом ДК и кумуляцией их и МДА на 7 сутки.

8. Снижение ПОЛ и повышение АОЗ введением природного антиоксиданта уменьшает степень экстремальности ситуации, усиливает устойчивость организма к дегидратации, что позволяет активизировать защитно-приспособительные механизмы к повреждающим воздействиям, снизить процент летальности: на 5 сутки он составлял 14%, а на 9 - 39% (34% и 68% при обезвоживании).

9. Дегидратация с коррекцией состояния а-Тф вызывает увеличение в лейкоцитарной формуле содержание лимфоцитов на 10%, повышение моноцитов на 8% и снижение нейтрофилов на 7%, что соответствует адаптивно-компенсаторной реакции и повышению резистентности организма к обезвоживанию.

Ю.Численная плотность макрофагов РСТК их метаболическая активность при дегидратации с превентивным введением антиоксиданта свидетельствуют

06 оптимизации параметров внутренней среды и демонстрируют большую эффективность функционирования эффекторных клеток тканевого гомеостаза.

11.Введение антиоксиданта а-Тф при обезвоживании снижает степень и величину дистрофических изменений в тимусе, уменьшает процент гибели лимфоцитов путем некроза, увеличивает количество созревающих клеток, и позитивно влияет на функциональные возможности структур вилочковой железы и РСТК (макрофагов, моноцитов, лимфоцитов), обеспечивающих адаптивно-компенсаторные реакции организма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Морфометрическая и цитохимическая характеристика клеточных элементов соединительной ткани может быть использована для дальнейших разработок в экспериментальных исследованиях по соединительной ткани.

2. Результаты диссертации о позитивном влиянии а-токоферола на структурные элементы СТ кожи, тимуса, периферической крови, обеспечивающие защитно-компенсаторные реакции в условиях дегидратации, необходимо учитывать при терапии заболеваний, сопровождающихся обезвоживанием.

3. Сведения, полученные в процессе выполнения работы, могут быть использованы в научной работе ряда лабораторий, предметом исследования которых являются экологические и профессиональные факторы обезвоживания, водно-солевой гомеостаз, соединительная ткань, вилочковая железа.

4. Теоретические аспекты, выводы, количественные параметры по гистофизиологии СТ и тимуса могут быть востребованы в педагогической работе естественнонаучных и медицинских кафедр университетов.

5. Фактические данные исследования, полученные в ходе выполнения диссертации о деструктивных изменениях вилочковой железы, сопровождающих процесс обезвоживания позволяют рекомендовать препараты заместительной терапии функции тимуса в условиях дегидратации, что наряду с комплексной терапией улучшат результаты лечения.

6. Материалы по функциональной морфологии тимуса необходимо учитывать при исследовании и коррекции иммунного статуса в процессе нарушения водно-солевого равновесия.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Григорьева М.В. Морфология соединительной ткани при гормональном дисбалансе /М. В. Григорьева , Н.П. Божко, Л. Г. Прошина // Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. -Великий Новгород : Алматы, 2006. - Т. 12. - С. 185-189.

2. Григорьева М.В. Структурные и метаболические изменения клеток соединительной ткани при экспериментальных воздействиях / М. В. Григорьева, Н.П. Божко // Материалы XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов». T. IV - М.: Изд-во Моск. ун-та, 2006. - С. 495.

3. Григорьева М.В. Состояние соединительной ткани при нарушении функции поджелудочной железы / М. В. Григорьева , H,П. Божко, Л. Г. Прошина // Вестник НовГУ. Сер. Медицинские науки. - 2006. - №

35.-С. 45-47.

4. Григорьева М.В. Цитохимическая характеристика соединительной ткани при экстремальных и экспериментальных воздействиях / М. В. Григорьева, Н.П. Божко, Л. Г. Прошина // Актуальные проблемы современной медицины : респ. межвуз. науч.-практ. сб. - Великий Новгород, 2006. - Т. 8. - С. 165-168.

5. Божко Н.П. Функциональные аспекты морфологии и видовые отличия соединительной ткани беспородных крыс и линии Вистар в норме и при экспериментальной дегидратации / Н.П. Божко // Актуальные проблемы современной медицины : респ. межвуз. науч.-практ. сб. -Великий Новгород, 2006. - Т. 8. - С. 163-164.

6. Григорьева М.В. Функциональная морфология соединительной ткани при экспериментальном сахарном диабете / М. В. Григорьева, Божко Н.П., Либо Ю. М. // Морфология. - 2006. - Т. 129, № 4. - С. 40-41.

7. Функциональная морфология соединительной ткани при экспериментальных и экстремальных воздействиях / Н.П. Божко, М. В. Григорьева, Л. Г. Прошина, Ю. М. Либо // Материалы VII Международной научно-практической конференции "Здоровье и Образование в XXI веке", 23-26 ноября 2006, Москва. - М., 2006. - С. 79.

8. Божко Н.П. Морфологические и биохимические изменения подкожной рыхлой соединительной ткани у крыс линии Wistar при дегидратации / Н.П. Божко // Ученые записки института ИСХиПР НовГУ. - Великий Новгород, 2006. - Т. 14, вып. 3. - С. 63-67.

9. Божко Н.П. Реакция клеточных элементов соединительной ткани на фоне экзогенного введения инсулина и альфа-токоферола 1 Н.П. Божко, М. В. Григорьева, Л. Г. Прошина // Бабухинские чтения в Орле, 28-29 марта 2007 г. : Материалы 6-й Всероссийской научной конференции. -М., 2007. - Вып. 25. - С. 39-40.

10. Морфологические и биохимические изменения подкожной рыхлой соединительной ткани у крыс линии Wistar при экспериментальных воздействиях / Л. Г. Прошина, М.В. Григорьева, Н.П. Божко, Ю. М. Либо // Современный мир, природа и человек (Сборник научных трудов «Естествознание и гуманизм») - Томск, 2007 - Том 4, № 2. - С. 33 - 34.

11.Божко Н.П. Состояние защитных систем при дегидратации организма / Н.П. Божко // Актуальные проблемы современной медицины : респ. межвуз. науч.-практ. сб. - Великий Новгород, 2007. - Т. 9, ч. 1. - С. 307309.

12. Структурная перестройка соединительной ткани при экспериментальном аллоксановом диабете и введении витамина Е. / Л.Г. Прошина, Н.П. Божко, М.В. Григорьева, Ю.М. Либо// Морфология. - 2007. - Т. 131, № З.-С. 87.

13.Проблема адаптации соединительной ткани при экспериментальной патологии / М. В. Григорьева, Н.П. Божко, Л. Г. Прошина , Ю. М. Либо //Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. - Великий

Новгород; Алматы, 2007. - Т. 14,- С. 15-18.

М.Прошина Л. Г. Ультраструктурная организация макрофагов соединительной ткани при экспериментальных воздействиях / Л. Г.Прошина, М. В. Григорьева, Н.П. Федорова // Актуальные проблемы современной медицины - Великий Новгород, 2008. - Т.10. - С. 74-78.

15.Федорова Н.П. Цитохимия и ультраструктура макрофагов подкожной соединительной ткани при введении мексидола / Н.П. Федорова, Л.Г. Прошина, Ю.М. Либо // Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. -ВеликийНовгород; Алматы, 2008.-Т.16,- С. 25-30.

16.Федорова Н.П. Гистохимия соединительной ткани и роль макрофагов в защитно-компенсаторных реакциях организма при экспериментальных воздействиях / Н.П. Федорова, Л.Г. Прошина, М.В. Григорьева // Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. -Великий Новгород; Алматы, 2008. - Т.16. - С. 35-39.

17.Влияние а-токоферола на метаболизм клеток соединительной ткани / М.В. Григорьева, Н.П. Федорова, Л.Г. Прошина, Ю.М. Либо // Морфология - 2008 - № 2. - с. 36.

18.Федорова Н.П. Соединительная ткань при гипоинсулинемии и обезвоживании организма / Н.П. Федорова, М.В. Григорьева, Л.Г. Прошина// Научные труды IX международного конгресса Здоровье и образование в XXI веке. Влияние космической погоды на биологические системы в свете учения А.Л. Чижевского, 27-30 ноября 2008.-М., 2008. - С.168-169.

19.Морфофункциональное состояние тимуса в норме и при экспериментальных воздействиях / Л.Г. Прошина, H.H. Федорова, М.В. Григорьева, A.C. Александров* // Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. - Великий Новгород; Алматы, 2009. - Т. 17. -С.169-174.

20.Функциональная морфология соединительной ткани кожи и поджелудочной железы при экспериментальных воздействиях / Л.Г. Прошина, М.В. Григорьева, Н.П. Федорова, Ю.М. Либо // Клиническая медицина : межвуз. сб. стран СНГ. - Великий Новгород; Алматы, 2009.-Т. 17,- С.165-169.

Подписано в печать 21.05.2009 г.

Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Заказ № 1085. Тираж 100 экз.

ООО «Типография «Виконт» Великий Новгород, ул. Береговая, д. 48, корп. 2 тел. (8162) 677894, тел./факс (8162) 667406

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Федорова, Наталья Петровна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Общая характеристика рыхлой волокнистой соединительной ткани, ее роль в обеспечении гомеостаза внутренней среды организма.

1.2. Функциональная морфология соединительной ткани и тимуса при экстремальных и экспериментальных воздействиях.

1.3. Окислительно-восстановительный гомеостаз. Свободно-радикальное окисление и антиоксидантная система защиты.

1.3.1. ПОЛ и его роль в организме, цитофизиология макрофагов в реакциях ПОЛ.

1.3.2. Понятие об антиоксидантной системе защиты организма.

1.3.3. Антиоксиданты.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Гистофизиология соединительной ткани кожи, периферической крови и тимуса у крыс линии Wistar.

3.1. Функциональная морфология рыхлой соединительной ткани кожи крыс линии Wistar.

3.2. Состояние лейкоцитарной формулы крыс линии

Wistar.

3.3. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система крыс линии Wistar.

3.4. Состояние иммунной системы крыс линии Wistar.

3.4.1. Гистофизиология вилочковой железы.

Глава 4. Гистофизиология соединительной ткани кожи, периферической крови и тимуса крыс линии Wistar в условиях экспериментальной дегидратации.

4.1. Функциональная морфология рыхлой соединительной ткани кожи крыс линии Wistar в условиях экспериментальной дегидратации.

4.2.Состояние лейкоцитарной формулы крыс линии Wistar в условиях экспериментальной дегидратации.

4.3. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система крыс линии Wistar в условиях экспериментальной дегидратации.

4.4. Состояние иммунной системы крыс линии Wistar в условиях экспериментальной дегидратации.

4.4.1. Гистофизиология вилочковой железы в условиях экспериментальной дегидратации.

Глава 5. Гистофизиология соединительной ткани кожи, периферической крови и тимуса крыс линии Wistar при введении альфа-токоферола.

5.1. Функциональная морфология рыхлой соединительной ткани кожи крыс линии Wistar при введении альфа-токоферола.

5.2. Состояние лейкоцитарной формулы крыс линии Wistar при введении альфа-токоферола.

5.3. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система крыс линии Wistar при введении альфа-токоферола.

5.4. Состояние иммунной системы крыс линии "Шз1аг при введении альфа-токоферола.

5.4.1. Гистофизиология вилочковой железы при введении альфа-токоферола.

Глава 6. Гистофизиология соединительной ткани кожи, периферической крови и тимуса крыс линии при дегидратации и введении альфа-токоферола.

6.1. Функциональная морфология рыхлой соединительной ткани крыс линии Wistar при дегидратации и введении альфа-токоферола.

6.2. Состояние лейкоцитарной формулы крыс линии Wistar при дегидратации и введении альфа-токоферола.

6.3. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система крыс линии '^Л^аг при дегидратации и введении альфа-токоферола.

6.4. Состояние иммунной системы крыс линии Wistar при дегидратации и введении альфа-токоферола.

6.4.1. Гистофизиология вилочковой железы при дегидратации и введении альфа-токоферола.

Глава 7. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфологические основы защитно-приспособительных реакций соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях"

Актуальность

Проблема адаптации организма к действию экстремальных факторов и сегодня остается одной из важнейших в биологии, физиологии и медицине, что объясняется увеличением воздействий на организм антропогенных и экологически неблагоприятных факторов. Обезвоживание относится к числу наиболее актуальных проблем (Роле Б. Дж., 1984; Боднар Я. Я., 1991; Правоторов Г. В., 1996), что обусловлено рядом причин: физических, физиологических и социальных. Резкая потеря влаги (дегидратация) является стрессовым фактором, который часто действует на организм человека в естественных условиях и обстановке специфического производства, к тому же многие заболевания инфекционного характера и травмы сопровождаются резкой потерей жидкости, приводя к нарушению функционирования различных органов и систем (Виноградов В. В., 1977; Малышев В. Д., 1984; Смирнов А. В. с соавт., 2006). Функционирование организма в экстремальных условиях обезвоживания сопровождается развитием общего адаптационного синдрома (Казначеев В. П., 1980; Горизонтов П. Д. с соавт., 1983; Меерсон А. Н. с соавт., 1984; Балонов М. И., Жеско Т. В., 1989; Салей А. П., 2000; Розенфельд А. С., 2004). Нарушение водного гомеостаза приводит к морфофункциональным изменениям ряда органов и систем, в том числе тканей внутренней среды (Куприянов В. В., 1983; Якимова Ю. А., 1993; Судаков К. В., 2000; Прошина Л. Г., 2004; Панин JI. Е., 2007; Воробьева Н. Ф., 2007, 2008) и органов иммунной системы (Акмаев И. Г., Гриневич В. В., 2003; Капитонова М. Ю. с соавт., 2005; Самусев Р. П. с соавт., 2006; Singh N. et al., 2005). В литературе отмечается высокая зависимость морфологии иммунной системы и, в частности, тимуса от условий существования организма (Сапин М. Р., Никитюк Д. Б., 2000; Ерофеева Л. М., Сапин М. Р., 2000). Тимус — центральный орган иммуногенеза, и от его состояния и активности во многом зависит выраженность защитных реакций всего организма (Сапин М. Р.,

Этинген JI. Е., 1996; Cempbelle Р. А., 1993). Ряд авторов отмечает, что острое стрессовое воздействие приводит к комплексным структурно-функциональным сдвигам в иммунной и нейроэндокринных системах регуляции живого организма (Агеева В. А. с соавт., 2004.; Смирнов А. В. с соавт., 2006; Самусев Р. П. с соавт., 2006; Persidsky Yuri, 2003).

Существование организма во внешней среде возможно благодаря эволюционно выработанным адаптивным реакциям, в которых непосредственное участие принимают ткани внутренней среды (Виноградов В. В., 1992; Бахшинян М. 3. с соавт., 1998; Верба О. Ю. с соавт., 2003; Волошин Н. А., 2005; Арташян О. С. с соавт., 2006; Жанаева С. Я. с соавт.,

2007). Ткани внутренней среды, включающие соединительные ткани и кровь, наряду с другими системами организма обеспечивают гомеостаз, защитные, регулирующие функции организма (Виноградов В. В. с соавт., 1977; Казначеев В. П., 1980; Бахшинян М. 3., 2004; Новиков В. Д. с соавт., 2004; Воробьева Н. Ф., 2007; Панин Л. Е., 2007; Persidsky Yuri, 2003; Dale D. С.,

2008).

Высказано мнение (Виноградов В. В., 1992; Правоторов Г. В., 1996, Прошина Л. Г., 2004; Воробьева Н. Ф., 2007) о системных реакциях соединительной ткани в адаптивных реакциях организма, а также значительной роли в них гистиоцитов соединительной ткани. Позже отмечено вовлечение в гомеостатические реакции и активация в них наряду с блуждающими и резидентных макрофагов различных компартментов при перегревании и гормональном дисбалансе (Юрина Н. А. , Радостина А. И., 1990; Воробьева Н. Ф., 2008; Wright J. К., 2004; Yancey P. G., 2007).

В настоящее время в литературе имеется ряд доказательств наличия взаимодействия между иммунной и эндокринной системами. Одним из кандидатов на роль посредников этих взаимоотношений, по мнению ряда авторов (Маянский А.Н.,1989; Громыхина Н.Ю., 1993; Jassar A. S. , 2005; Bukrinki М. et al., 2006), являются макрофаги, секретирующие такие ключевые иммунорегуляторные факторы, как интерлейкины - (ИЛ-1, ИЛ-6) фактор некроза опухолей, лимфоцит активирующий фактор и др. (Cempbelle Р. А., 1993; Jassar A. S. , 2005; Daryadel А., 2006; Joseph Е., 2006; Bo-Chin Chiu et al., 2007; Nadine Lippuner, 2007).

Современная медицина располагает значительными фактическими данными, отражающими разные стороны адаптации организма к действию экстремальных факторов (Горизонтов П. Д. с соавт., 1983; Соловьев М. О., 1993; Юшков Б. Г. с соавт., 1999; Сапин М. Р., 2000; Судаков К. В., 2000). Достаточно хорошо исследована роль нервной системы, накоплены обширные данные, касающиеся эндокринной регуляции адаптивных реакций, в последние годы широко обсуждается роль иммунной системы в этих процессах (Струков А. И., 1990, Баринов Е. X., 1992; Фрейдлин И. С., 2000; Persidsky Yuri et al., 2003). Однако обращает на себя внимание чрезвычайная неравномерность и недостаточность в исследованиях, касающихся взаимодействия специфической и неспецифической защиты, корреляции реакции клеток соединительной ткани и органов иммуногенеза (Бабаева А. Г., 1995; Сапин М. Р., Никитюк Д.Б., 2000; Юшков Б. Г., 2006, Cempbelle Р. А., 1993; Persidsky Yuri, 2003; Yancey P. G., 2007).

Защитные и адаптивные реакции всего организма обусловлены в определенной степени состоянием системы мононуклеарных фагоцитов, а также во многом зависят от состояния и активности тимуса. Известно, что тимус как центральный орган иммуногенеза реагирует на различные экологические, стрессовые и экстремальные факторы (Аминова Г. Г., 2000; Петренко М. В., 2005; Yakeier Е., 2004; Singh N., 2005; Di Naro Е., 2006).

Актуальность поставленной проблемы определяется углубленным исследованием и формированием целостного представления о значимости структурных преобразований вилочковой железы при обезвоживании как центрального органа иммунопоэза, способного усугублять состояние либо повысить резистентность организма к данной ситуации, воздействуя через эффекторные звенья (лимфоциты, моноциты, макрофаги), представленные в тканях внутренней среды (рыхлой соединительной ткани и крови) (Агеева В. А., 2004; Singh N., 2000; Yakeler Е., 2004; Jassar A. S., 2005).

В работах последних лет (Балаболкин М. И., 2000; Журавлев Ю. И., 2001; Зенков Н. К., 2001; Голиков А. П., 2003; Беридзе М. 3., 2005; Воробьева Е. Н., 2005; Випартене Д., 2006; Власов А. П., 2007; Long L. Н., 2001; Asmis R., 2005) подчеркивается, что стресс-обусловленные реакции сопровождаются повышением процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ). Современной и важной представляется возможность повышения сопротивляемости организма дегидратирующим факторам введением антиоксидантов, и в условиях санации тканей внутренней среды (от токсических агентов ПОЛ) усилить эффективность работы защитно-компенсаторных механизмов в их морфологическом представлении -структур рыхлой волокнистой соединительной ткани и иммунокомпетентных клеток вилочковой железы (Betteridge D. J., 2000; Medina F., 2007)

Совокупность вышеизложенных позиций определила направление работы, а также цели и задачи. Цель исследования Настоящее исследование предпринято с целью изучения морфологических основ защитно-приспособительных реакций рыхлой волокнистой соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях. Задачи исследования

Основными задачами нашей работы, которые определили выделение основных ее разделов, явились следующие:

1. Провести сравнительную оценку функциональной морфологии рыхлой неоформленной соединительной ткани кожи, периферической крови и тимуса в условиях физиологического гомеостаза, и повреждающем воздействии (экспериментальном обезвоживании организма).

Научная новизна Впервые выявлено, что обезвоживание на ранних этапах (1 - 3-х суток) вызывает адаптивно-компенсаторные, в последующем (5-7 сутки) деструктивные изменения тимуса, что соответствует стадиям дегидратационного (окислительного) стресса. Ярко выраженные деструктивные изменения тимуса на 7-9 сутки приводят к дезадаптации организма. Впервые отмечено, что деструктивные изменения вилочковой железы при дегидратации на фоне введения антиоксиданта имеют менее выраженный характер, чем при обезвоживании и носят защитно-приспособительный характер.

Использованный комплекс морфологических, биохимических и функциональных методов исследования позволил выявить морфогенез изменений клеток рыхлой соединительной ткани кожи (и в частности ее эффекторного звена - макрофагов) и тимуса в условиях нарушения водно-солевого гомеостаза на фоне введения а-токоферола.

Теоретическая и практическая значимость работы Полученные результаты исследований необходимы для разработки положений о роли системы мононуклеарных фагоцитов в защитно-компенсаторных реакциях; их взаимоотношениях с иммунокомпетентными клетками в поддержании постоянства внутренней среды организма при адаптации к неблагоприятным факторам среды.

Количественные параметры мононуклеарных фагоцитов могут быть взяты за основу в экспериментальной и теоретической гистологии, патофизиологии и биохимии в той их части, где объектом исследования является система мононуклеарных фагоцитов и соединительная ткань. Показатели окислительно-восстановительного гомеостаза (ПОЛ-АОЗ) могут быть учтены при рассмотрении вопроса окислительного стресса как одного из патогенетических звеньев каскада морфофункциональных нарушений при обезвоживании. Результаты работы по применению препарата с антиоксидантным действием (а-токоферол) могут быть использованы для обоснования мер патогенетического лечения состояний, сопровождающихся явлениями обезвоживания в клинической практике, а также при коррекции нарушений водно-солевого гомеостаза в процессе экологических и профессиональных воздействий.

Внедрение результатов работы в практику

Материалы по функциональной морфологии тимуса необходимо учитывать при исследовании и коррекции иммунного статуса в процессе дегидратации.

Фактические данные результатов исследования и теоретическое обобщение материала могут учитываться при лечении заболеваний, сопровождающихся обезвоживанием в клинических условиях. Сведения, полученные в процессе выполнения работы, могут быть использованы в научной работе биологических, экологических, гистофизиологических и др. лабораторий, где предметом исследования является водно-солевой обмен, соединительная ткань, вилочковая железа. Теоретические аспекты, выводы, количественные параметры по гистофизиологии РСТ кожи и тимуса могут быть востребованы в педагогической работе естественнонаучных и медицинских кафедр университетов (биологии, молекулярной биологии, гистологии, анатомии, патофизиологии, патологической анатомии), что подтверждено соответствующими актами о внедрении.

Апробация работы

Основные результаты диссертационного исследования докладывались и обсуждались на: XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» - Москва, 12-15 апреля 2006, секция «фундаментальная медицина»; VIII конгрессе международной ассоциации морфологов - Орел, 15-17 сентября 2006; VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» - Москва, 23-26 ноября 2006; 6-й Всероссийской научной конференции «Бабухинские чтения в Орле». - Орел, 28-29 марта, 2007; конференции посвященной 100-летию JI. И. Фалина - Москва 17-18 мая, 2007; II Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения - 2007». — С.-Петербург 5-7 декабря, 2007; XII научно-практической конференции сотрудников и студентов ИМО НовГУ - В.Новгород, апрель, 2008; IX конгрессе МАМ - г. Бухара, республика Узбекистан 14—17 мая,

2008; IX Международной научно-практической конференции "Здоровье и образование в XXI веке" - Москва, 27—30 ноября 2008.

По материалам диссертации опубликовано 20 научных работ, 2 из которых в журналах, включенных в «Перечень ВАК РФ» 2006 года и 7 - в материалах научных конференций с международным участием. Все материалы, представленные в диссертации и опубликованные в печати, собраны, обработаны и проанализированы лично автором.

Основные положения, выносимые на защиту 1 .Нарушение водно-солевого гомеостаза, вызванное в эксперименте повреждающим агентом дегидратацией, обуславливает общесистемную реакцию тканей внутренней среды организма (соединительной и крови), выражающуюся в увеличении интенсивности пролиферации клеток-предшественников макрофагической системы моноцитов и последующим ростом всей популяции (численности) фагоцитов, а также значительной интенсификацией их метаболического ответа на 3 сутки исследования со снижением в последующие сроки.

2.Дегидратация организма крыс самцов линии ^^аг приводит к появлению и росту в ходе эксперимента токсических метаболитов ПОЛ, с прямой корреляцией роста численности клеток макрофагической системы и обратной - с количеством иммунокомпетентных клеток крови и тимуса. Выявленные разнонаправленные изменения в различных иерархических звеньях иммунной защиты нарушают структурные основы (лимфоциты, моноциты, макрофаги) защитно-приспособительных реакций организма.

4.Морфология вилочковой железы в процессе обезвоживания претерпевает характерную перестройку, которая на ранних этапах (1-3 сутки), очевидно, носит адаптивный характер. На 5-9 сутки происходят выраженные деструктивные изменения тимуса, оказывающие негативное влияние как на возможности иммунокомпетентных клеток самого органа, так и РСТ кожи и периферической крови. Введение антиоксиданта снижает степень и величину дистрофических изменений в тимусе, уменьшает процент гибели лимфоцитов путем некроза, увеличивает количество созревающих клеток и позитивно влияет на функциональные возможности структур РСТК (макрофагов, моноцитов, лимфоцитов), обеспечивающих адаптивно-компенсаторные реакции организма.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 161 странице машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы описания материала и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы (170 отечественного и 110 зарубежных источников). Работа иллюстрирована 74 рисунками и 14 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Федорова, Наталья Петровна

ВЫВОДЫ

2. Состав популяции клеток РСТК крыс линии Wistar в условиях нормы стабилен и составляет в среднем 71,6% фибробластов, 25,7% макрофагов, 0,7% тучных клеток, 1,9% лейкоцитов. Содержание указанных клеточных элементов имеет незначительный коэффициент вариации. Среди клеточных элементов соединительной ткани макрофаги являются функционально самыми активными: метаболически и динамически.

3. Дегидратация организма приводит к увеличению численности макрофагов на 46%, ядерно-цитоплазматического отношения (с 0,27 до 0,92 с 3 - 9 сутки обезвоживания), и уменьшению их размеров (в 1,5 раза). Дегидратация модифицирует метаболизм клеточных элементов: на 3-й день происходит увеличение активности ферментов ОБДГ, НЭ, Г-6ФДГ, ЛДГ, а-ГФДГ, НАД-д, КФ, на 5 и 7 день цитохимическая активность снижается, за исключением КФ, которая снижается но превышает контрольные цифры.

5. Дегидратация вызывает морфологическую перестройку тимуса с увеличением деструктивных изменений на 6—9 сутки, повышением гибели тимоцитов путем некроза. Динамика структурных изменений тимуса служит индикатором развивающегося стресса и дистресса, и обоснует целесообразность заместительной терапии дефицита функций вилочковой железы.

6. Обезвоживание вызывает структурную перестройку вилочковой железы, которая отражает стадии общего адаптационного синдрома. К 1-3-им суткам возрастает содержание зрелых лимфоцитов (стадия мобилизации), 3-5 сутки компенсаторно повышается содержание больших и средних лимфоцитов (стадия устойчивой резистентности), на 7—9 сутки происходит деструкция и массовая гибель лимфоцитов коркового и мозгового вещества. Возрастает процент клеток подвергшихся некрозу (стадия истощения).

Ю.Численная плотность макрофагов РСТК их метаболическая активность при дегидратации с превентивным введением антиоксиданта свидетельствуют об оптимизации параметров внутренней среды и демонстрируют большую эффективность функционирования эффекторных клеток тканевого гомеостаза.

11.Введение антиоксиданта а-Тф при обезвоживании снижает степень и величину дистрофических изменений в тимусе, уменьшает процент гибели лимфоцитов путем некроза, увеличивает количество созревающих клеток и позитивно влияет на функциональные возможности структур вилочковой железы и РСТК (макрофагов, моноцитов, лимфоцитов), обеспечивающих адаптивно-компенсаторные реакции организма.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Федорова, Наталья Петровна, Великий Новгород

1. Директива Совета 86/609/ЕЕС от 24.11.86 по согласованию законов, правил и административных распоряжений стран-участниц в отношении защиты животных, используемых для экспериментальных и других научных целей.

2. Европейская конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS N 123) (Страсбург, 18 марта 1986 года) // http://www.lawmix.ru/abro.php?id=l 1036.

3. Абрамова, Ж. И. Человек и противоокислительные вещества / Ж. И. Абрамова, Г. И. Оксигендлер. Л.: Наука, 1985. - 230 с.

4. Абрамченко, В.В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве / В.В. Абрамченко. СПб.: ДЕАН, 2001. - 400с.

5. Автандилов, Г. Г. Медицинская морфометрия / Г. Г. Автандилов М.: Медицина. - 1990. - 383 с.

6. Агеева, В. А. Влияние глиформина на показатели липидного спектра и перекисного окисления липидов у больных с ожирением / В. А. Агеева, В. И. Красильникова, И. М. Зубина и др. // Клиническая медицина. 2000. -№ 10.-С. 46-49.

7. Агеева, В. А. Влияние гиподинамии и гипокинезии на тимус и паравентрикулярное ядро гипоталамуса развивающегося организма / В. А. Агеева, А. В. Смирнов, Р. П. Самусев, В. А. Попов // Успехи современного естествознания. 2004. - № 12. - С. 30-31.

8. Акмаев, И. Г. Нейроиммуноэндокринология гипоталамуса / И. Г. Акмаев. В. В. Гриневич. -М.: Медицина, 2003. — 168 с.

9. Аминова, Г. Г. Морфологическая характеристика лимфоидной ткани у новорожденных детей // Морфология. 2000. - Т. 118, № 6. - С. 53-56.

10. Ю.Арташян, О. С. Изучение функциональной активности тучных клеток при иммобилизацонном стрессе. / О. С. Арташян, Б. Г. Юшков, Е. А. Мухлынина // Цитология. 2006. - Т. 48, № 8. - С. 665-668.

11. П.Афанасьев, Ю. И. Структура и функции макрофагов / Ю. И. Афанасьев, В. И. Ноздрин, М. 3. Бахшинян // Успехи современной биологии. — 1982. №2.-С. 421-432.

12. Бабаева, А. Г. Реактивные изменения тимуса и селезенки в ответ на оперативные вмешательства / А. Г. Бабаева, Е. И. Тиммельфарб, И. И. Калинина // Архивы патологии. 1995. - Т. 57, № 2. - С. 58-61.

13. Балаболкин, М. И. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений диабета / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова // Проблемы эндокринологии. 2000. - № 6. - С. 29-34.

14. Балдаруева, Г. В. Морфофункциональные особенности гистиоцитов подкожной соединительной ткани при экспериментальной гиперинсулинемии / Г. В. Балдаруева, Н. Ф. Воробьева, Н. Г. Сафонова // Бюллетень Сиб. отд. Акад. мед. наук СССР. 1988. - №1. - С. 86-90.

15. Балонов, М. И. Содержание воды в тканях и клетках тканей млекопитающих / М. И. Балонов, Т. В. Жеско // Физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1989. - Т. 72, № 7. - С. 47.

16. Баринов, Е. X. Исследование плотности вилочковой железы в динамике посттравматического периода / Е. X. Баринов // Актуальные вопросы судебной медицины: сб. ст. / Удмурт, отд. Всерос. об-ва судеб, медицины. -Ижевск, 1992. Вып. 2. - С. 44-46.

17. Бахшинян, М. 3. Макрофаги при стрессорных состояниях организма / М. 3. Бахшинян, Т. А. Белоусова// Морфология. -1998. Т. ИЗ, № 3. -С. 23.

18. Бахшинян, М. 3. Изменения структуры и функции макрофагов селезенки в условиях злокачественного роста / М. 3. Бахшинян, А. В. Азнаурян // Морфология. 2004. - Т. 126, № 5. - С. 45^8.

19. Березов, Т. Т. Биологическая химия. / Т. Т. Березов, П. Ф. Коровкин. — М.: Медицина, 1990.-528 с.

20. Боднар, Я. Я. Закономерности морфологических изменений миокарда в;условиях нарушений водно-солевого обмена организма : автореф. дис. . д-ра. мед. наук. / Я.Я. Боднар. М., 1991. - 38 с.

21. Борисова, И. Г. Действие антиоксидантов на физическую работоспособность и перекисное окисление липидов в организме / И. Г. Борисова, Р. Д. Сейфулла, А. И. Журавлев // Фармакология и токсикология. 1989. — № 4. - С. 89-92.

22. Бугаева, И. О. Изменения фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов под влиянием лазерного излучения / И. О. Бугаева, Н. В. Богомолова // Морфология. 2004. - Т. 126, № 4. - С. 25.

23. Бурлакова, Е. Б. Мембранные липиды как переносчики информации / Е. Б. Бурлакова, Г. В. Архипова, А. Н. Голощапов // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. — 1992. С. 74-83.

24. Быков, В. Л. Стереологический анализ щитовидной железы. Обзор методов // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1979. — Т. 76, УХХ7. — С. 98-106.

25. Верба, О. Ю. Особенности реакции соединительной ткани у больных остеохондрозом в динамике пелоидотерапии / О. Ю. Верба, Е. А. Курнявкина, В. Ю. Куликов // Бюллетень СО РАМН. 2003. - № 4 (110).-С. 89-94.

26. Виноградов, В. В. Реакция соединительной ткани на дегидратацию, голодание и водную нагрузку / В. В. Виноградов, Г. Е. Акулинин, Н. Ф. Воробьева // Механизмы адаптации и компенсации в экстремальных условиях. — Томск, 1977. — С. 51.

27. Виноградов, В. В. Системные реакции соединительной ткани/ В. В.Виноградов, Н. Ф. Воробьева // Бюлл. СО РАМИ. 1992. - № 2. - С. 96-98.

28. Випартене, Д. Показатели про- и антиоксидантной системы в крови больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой / Д. Випратене, Л. Ясювеличуте, Б. Буткене и др. // Терап-ий архив. 2006. - № 6. - С. 10-14.

29. Владимиров, Ю. А. Механизмы перекисного окисления липидов и его действие на биологические мембраны / Ю. А. Владимирова, В. И. Оленев, Т. Б. Суслова, А. И. Потапенко // Итоги науки и техники: Биофизика. М., 1975.-Т. 5.-С. 56-117.

30. Власов, А. П. О влиянии антиоксидантов на течение экспериментального панкреатита / А. П. Власов, В. А. Трофимов, И. В. Мишарин и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2007. - Т. 70, № 3. - С. 25-28.

31. Волкова, Л. В. Влияние хронических стрессовых воздействий на выделение фактора, ингибирующего миграцию клеток селезенки у мышей в ответ на аутоантигены / Л. В. Волкова // Изв. АН РМ. Серия «Биол. и хим. науки». -1994.-№5.-С. 29-32.

32. Воробьева, Е. Н. Роль свободнорадикального окисления в патогенезе болезней системы кровообращения / Е. Н. Воробьева, Р. И. Воробьев // Бюллетень СО РАМН. 2005. - № 4 (118). - С. 24-30.

33. Воробьева, Н. Ф. Реакция крови и подкожной рыхлой соединительной ткани белых крыс при общем перегревании организма и при перегревании на фоне введения природных цеолитов / Н. Ф. Воробьева // Бюллетень СО РАМН. -2007. № 1 (123). - С. 76-79.

34. Воробьева, Н. Ф Особенности гистиоцитарной реакции после1 iпредварительного приема с пищей цеолитов в процессе онтогенеза при перегревании и сухоядении / Н. Ф. Воробьева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2008. - № 2. - С. 23-25.

35. Воронина, Н. П. Макрофаги как инструмент адаптации к стрессорам: / Н. П. Воронина, Л. Н. Шишкина, А. А. Зубахин // Проблемы гистофизиологии соединительной ткани. Новосибирск. - 1989. - С. 55-57.

36. Воскресенский, О. Н. Свободно-радикальное окисление, антиоксиданты И атеросклероз // Кардиология. 1981. - № 6. - С. 118-123.

37. Воскресенский, О. Н. Биооксиданты облигатные факторы питания / О. Н. Воскресенский, В. Н. Бобырев // Вопросы медицинской химии. - 199^--№ 4. -С. 21-26.

38. Гаврилов, В. Г. Спектрофотометрическое определение содержанЛ^ гидроперекисей липидов в плазме крови / В. Г. Гаврилов, М. Мешкорудная // Лабораторное дело. 1983. - № 3. - С. 33-35.

39. Гаврилов, В.Г. Анализ методов определения перекисного окисления липидс>^ в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой / В. Г. Гаврилой* А. Р. Гаврилова, Л.М. Мажуль // Вопр. мед. химии. 1987. - Т. 33, № 1. С.118-122.

40. Гавришева, Н. А. Тучные клетки сердца в норме и при патологии, У

41. Н. А. Гавришева, С. Б. Ткаченко // Кардиология. — 2003. — Т. 43, № 6. С^t1. V 59-65. $1 \ <t

42. Гаркави, Л. X. Адаптационные реакции и резистентность организма. \Уi I

43. Л. X. Гаркави, Е. Б. Квакина, М. А. Уколова. — Ростов н/Д: Изд-вс^i

44. Ростовского ун-та, 1977. 119 с. JI

45. Герасимов, И. Г. Оценка жизнеспособности по их морфометрическш^х^параметрам на примере культивируемых фибробластов / И. Г. Герасимов--А. Г. Попандопуло // Цитология. 2007. - Т. 49, № 3. - С. 204-209.

46. Гольдберг, Е. Д. Роль тимуса в регуляции клеток стромы, ответственных 3tперенос гемопоэзидуцирующего микроокружения при стрессе ^ Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, А. Ю. Зарицкий и др. // Бюлл. экс. биол. и мед- 1989.-№12.-С. 710-712.

47. Голиков, А. П. Свободнорадикальное окисление и сердечно-сосудистая патология: коррекция антиоксидантами. / А. П. Голиков, С. А. Бойцов, В. П. Михин, В. Ю. Полумисков // Лечащий врач.- 2003- № 4. С. 70-74.

48. Горизонтов, П. Д. Стресс и система крови / П. Д. Горизонтов, О. И. Белоусова, М. И. Федотова. М.: Медицина, 1983. - 240 с.

49. Гумен, А. В. Продукция лимфоцитоактивирующих факторов макрофагами мышей при старении и действии коротких пептидов / А. В. Гумен, И. А. Козинец, С. Н. Шанин и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. - Т. 142, № 9. - С. 333-335.

50. Душкин, М. И. Макрофаги и атеросклероз: патофизиологические и терапевтические аспекты // Бюллетень СО РАМН. 2006. - № 2 (120). - С. 47-55.

51. Ермакова, И. И. Протеогликаны внеклеточного матрикса миобластов Ь6Л. Характеристика и влияние на адгезию / И. И. Ермакова, Т. А. Черткова,

52. А. Л. Мокрушин и др. // Цитология. 2008. - Т. 50, № 8. - С. 692-699.

53. Ерофеева, Л.М. Состояние тимуса мышей в различные сроки после облучения ускоренными ионами углерода / Л. М. Ерофеева, М. Р. Сапин, Д. Е. Григоренко // Морфология. 2000. - № 1. - С. 42-45

54. Ерохина, И. Л. Активация тучных клеток при экспериментальном инфаркте миокарда у 3-недельных крысят / И. Л. Ерохина, М. Г. Мартынова, О. М. Моисеева, О. И. Емильянова // Цитология. 2006. - Т. 48, № 8. - С. 661-664.

55. Елисеев, В. Г. Соединительная ткань (гистофизиологические очерки). — М.: Медгиз, 1961.-415 с.

56. Жанаева, С. Я. Роль стимуляции и депрессии макрофагов в развитии и метастазировании опухолей / С. Я. Жанаева, Т. В. Алексеенко, Т. А. Короленко // Бюллетень СО РАМН. 2007. - № 3 (125). - С. 121-126.

57. Зенков, Н. К. Окислительный стресс. Биохимический ипатофизиологический аспекты / Н. К. Зенков, В. 3. Ланкин, Е. Б. Меныцикова. М.: Наука. - 2001. -342 с.

58. Ильинская, А. Н. Компонент бактериального пептидогликана как фактор созревания макрофагов / А. Н. Ильинская, Л. В. Пичугина, Н. С. Олиферук и др.// Иммунология. 2005. - №1. - С. 12-15.

59. Казначеев, В. П. Современные аспекты адаптации // В. П. Казначеев. — ■ Новосибирск: Наука, 1980.-192 с.

60. Калачева, Н. В. Ингибирование фагоцитарной функции макрофагов in vitro димерной формой рибонуклеазы Bacillus intermedius / Н. В. Калачева, О. А. Коновалова, Д.С. Налимов и др. // Цитология. 2008. - Т. 50, № 6. - С. 487-491.

61. Капитонова, М. Ю. Количественная иммуногистохимическая оценка постстрессовых изменений в тимусе растущего организма / М.Ю.Капитонова, О. В. Федорова, 3. Ч. Морозова // Успехи современного естествознания. — 2005. — № 3. — С. 111.

62. Кожевников, Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии // Вопросы медицинской химии. 1985. — № 5. - С. 2-6.

63. Коробейникова, Э. Н. Модификация определения продуктов перекисного окисления липидов в реакции с тиобарбитуровой кислотой / Э. Н. Коробейников // Лабораторное дело. 1989, № 7. — С. 8-10.

64. Климов, А. Н. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения /

65. A. Н. Климов, Н. Г. Никульчева СПб.: ПИТЕР, 1999. - 504 с.

66. Куликов, В.Ю. Перекисное окисление липидов и холодовой фактор. /

67. B. Ю. Куликов, А. В. Семенюк, Л. И. Колесникова. Новосибирск: Наука, 1988.- 192 с.

68. Кулинский, В. И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред, защита / В. И. Кулинский // Соровский образовательный журнал. 1999. - № 1. - С. 2-7.

69. Куприянов, В. В. Микролимфология / В. В. Куприянов, Ю. И. Бородин, Я. Л. Карабанов, Ю.Е. Выренков. М.: Медицина, 1983. - 288 с.

70. Ланкин, В. 3. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ /В. 3. Ланкин. — М.: Медицина, 1981. 95 с.

71. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли. М., Мир, 1969. - 646 с.

72. Линднер, Д. П. Морфометрический анализ тучных клеток / Д. П. Линднер , И. А. Поберий , М. Я. Розкин , В. С. Ефимов // Архив патологии. 1980. -Т. 42, № 6. - С. 60-46.

73. Лойда, 3. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы / 3. Лойда, Р. Госсрау , Т. Шиблер -М.: Мир, 1982. 272 с.

74. Майборидин, И. В. Количество тучных клеток как показатель ангиогенеза в аутотрансплантированных тканях/ И. В. Майборидин, A.B. Домников,

75. К. П. Ковалевский // Морфология. 2003. - Т. 124, № 6. - С. 66-70.

76. Малышев, В. Д. Интенсивная терапия острых водно-электролитных нарушений / В. Д. Малышев. М.: Медицина, 1984. - 122 с.

77. Маринова, Ц. Ультраструктурные особенности макрофагов коры вилочковой железы мыши / Ц. Маринова, Е. Бошнакова // Экспериментальная медицина и морфология. 1980/ - №1. - С. 9-14

78. Маянский, А. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А. Н. Маянский, Д. Н. Маянский. 2-е изд., перераб. и доп. - Новосибирск: Наука, Сиб. отдие, 1989. -344 с. I

79. Меерсон, Ф. 3. Роль перекисного окисления липидов в патогенезе аритмия, антиаритмогенное действие антиоксидантов / Ф. 3. Меерсон,I

80. В. А. Салтыкова, В. В. Диденко и др. // Кардиология. — 1984. № 5. - Q. 61-68.

81. Милюкене, В. В. Определение количественных параметров фагацитозд, Escherichia coli перитонеальными макрофагами мыши / В. В. Милюкен! Г. Ю. Бизюлявичене, Л. П. Хаустова и др. // Цитология. 2007. - Т. 49, № И. -С. 853-857.

82. Музыченко, Л. М. Состояние про- и антиоксидантной системы у больны бронхиальной астмой на фоне алиментарного ожирения / Л. М. Музыченкс Д. Д. Цырендоржиев, А. Б. Зотова и др. // Бюллетень СО РАМН. 2006. Т. 119, № 1.-С. 96-100.

83. Нагорнев, В. А. Кинетика клеток сосудистой стенки и атерогенез // Архив патологии. 1998. - Т. 60, № 1. - С. 39-43.

84. Нагорнев, В. А. Эволюция взглядов на роль макрофагов в атерогенезе: от Н. Н. Аничкова до наших дней / В. А. Нагорнев, С. В. Мальцева,

85. A. Н. Васканьянц // Архив патологии. 2003. — Т. 65, № 2. - С. 8-11.

86. Нагоев, Б. С. Метаболическая активность нейтрофилов и моноцитов периферической крови при гепатите В / Б. С. Нагоев, Б. И. Отараева, Е. И Рындина, М. Р. Иванова // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 2006.-№5.-С. 41-45.

87. Нагурская, Е. В. Сравнительный анализ макрофагального ответа у мышей при ДНК-иммунизации и заражении вирусом простого герпеса 1-го типа / Е.

88. B. Нагурская, Л. Г. Зайцева, И. В. Киреева и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2005. — Т. 140, № 12. С. 670-673.

89. Никифорова, Е. Е. Особенности распределения лимфоидной ткани в стенках трахеи и главных бронхов после воздействия паров ацетальдегида / Е. Е. Никифорова // Морфология. 1998. - Т. 114, № 5. - С. 93-95.

90. Новоженов, В. Г. Антиоксиданты в лечении хронического обструктивного бронхита / В. Г. Новоженов, Т. Я. Ященко // Клиническая геронтология. -2002. -№ 10-С. 12-18.

91. Новиков, В. Д. Макрофаги и лимфоциты — клетки гематогенного происхождения в соединительной ткани / В. Д. Новиков, Г. В. Правоторов, В. А. Труфакин // Морфология. 2004. - Т. 126, № 4. - С. 92.

92. Новицкий, В.В. Активность ПОЛ и апоптоза при туберкулезе легких / В. В. Новицкий, А. К. Стрелис, С. Б. Ткаченко и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. - № 11. - С. 497-499.

93. Олиферук, Н. С. Оценка фагоцитарной и бактерицидной активностинейтрофилов, макрофагов и незрелых дендритных клеток / Н. С. Олиферук,

94. A. Н. Ильинская, Б. В. Пинегин // Иммунология. 2005. - № 1. - С. 10-12.

95. Омельяненко, Н. П. Ультраструктурная взаимосвязь коллагеновых волокнистых компонентов в соединительной ткани человека / Н. П. Омельяненко, JI. Д. Жеребцов, Л. А. Деев // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1979. - Т. 76, вып. 5. - С. 65-70.

96. Орлова, Е. Г. Регуляция лептином окислительной и фагоцитарной активности моноцитов у женщин в разные фазы менструального цикла / Е. Г. Орлова, С. В. Ширшев // Проблемы эндокринологии 2007. - № 3. - С. 26-29.

97. Панасюк, А. Ф. Хондроитинсульфаты и их роль в обмене хондроцитов и межклеточного матрикса хрящевой ткани / А. Ф. Панасюк, Е.

98. B. Ларионов // Научно-практическая ревматология. — 2000. — № 2. — С. 46-55.

99. Панин, Л. Е. Системные представления о гомеостазе // Бюллетень СО РАМН. 2007. - № 5 (127). - С. 10-16.

100. Пауков, В. С. Роль макрофагов в патогенезе органического воспаления / В. С. Пауков, С. А. Даабуль, Н. Ю. Беляева // Архив патологии. -2005.-Т. 6, №4.-С. 3-10.

101. Пекарский, М. И. Светооптическое и электронномикроскопическое исследования постнатального развития тимуса / М. И. Пекарский, Е. В. Ишин // Физиология, морфология и патология тимуса; Сб. науч. тр. ГММИ им. И. М. Сеченова. М., 1986. - С. 133-148.

102. Петренко, М. В. Состояние вилочковой железы у детей раннего возраста с внутриутробной инфекцией // Вестник РГМУ. 2005. — № 3 (42). -С. 133-134.

103. Пирс, Э. Гистохимия. Теоретическая и прикладная // Э. Пирс. М., 1962.-1963с.

104. Пичугин, А. В. Апоптоз клеток иммунной системы при туберкулезной инфекции // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. - № 12. - С. 3-7.

105. Поберезкина, Н. Б. Биологическая роль супероксиддисмутазы / Н. Б.

106. Поберезкина, JI. Ф. Осинская // Укр. 6ioxiM. журнал. —1989.—Т. 61, № 2. С. 14-22.

107. Подколзин, А. А. Влияние электроактивных растворов на ферменты антиоксидантной системы / А. А. Подколзин, В. И. Донцов, В. Е. Чернилевский и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины-2001. № 1. - С. 66-68.

108. Правоторов, Г. В. Гистофизиология органных макрофагов / Г. В. Правоторов, В. Д. Новиков. Новосибирск, 1996. - 117 с.

109. Просцевич, О. Д. Исследование функций перитонеальных макрофагов при адаптации организма к дозированному тепловому фактору / О. Д. Просцевич, А. С. Соловьев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.—2002. № 4. - С. 6-8.

110. Прошина, Л. Г. Нарушение водно-солевого обмена и его влияние на реактивность соединительной ткани при обезвоживании / Л. Г. Прошина // Третий Российский конгресс по патофизиологии. М., 2004. - С. 127.

111. Плецитый, К. Д. Активные метаболиты витамина Д как регуляторы процесса пролиферации и дифференцировки клеток моноцитарно-макро-фагального ряда (обзор) / К. Д. Плецитый // Вопросы медицинской химии. -1990.-№ 5.-С. 2-4.

112. Плехова, Н. Г. Значение клеток моноцитарно-макрофагальной системы в патогенезе флавивирусных инфекций/ Н. Г. Плехова // Бюллетень СО РАМН. 2007. - № 4 (126). - С. 71-77.

113. Радостина, А. И. Ультраструктура макрофагов развивающейся дермы и очага воспаления у крыс / А. И. Радостина // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1988. - Т. 95, № 8. - С. 61-67.

114. Розенфельд, А. С. Стресс и некоторые проблемы адаптационных перестроек при спортивных нагрузках // Теория и практика физической культуры. 2004. - № 4. - С. 39-44.

115. Роле ,Б. Дж. Жажда / Б. Дж. Роле, Э. Т. Роле. М.: Медицина, 1984. - 192 с.

116. Русских, Г. С. Роль макрофагов в поглощении и метаболической деградации белкового компонента липопротеинов высокой плотности / Г. С. Русских, Д. В. Суменкова, JI. М. Поляков, Т. В. Зуева // Бюллетень СО РАМН. 2007. - № 5 (127). - С. 45-48.

117. Салей, А. П. К механизму адаптивного натриевого аппетита// Вестник ВГУ. Серия «химия, биология». 2000. - С. 134-137.

118. Сапин, М. Р. Иммунная система человека / М. Р. Сапин, JI. Е. Этинген. -М. : Медицина, 1996. С. 38-64.

119. Сапин, М. Р. Иммунная система, стресс и иммунодефицит / М. Р. Сапин, Д. Б. Никитюк. Б. м., Джангар, 2000. - 184 с.

120. Сафронов, И. Д. Роль жирорастворимых антиоксидантов в патогенезе атеросклероза / И. Д. Сафронов, Ю. И. Рагинов, В. Ю. Куликов // Бюллетень СО РАМН. 2006. - № 2 (120). - С. 43-46.

121. Селье, Г. Очерки об адаптационном синдроме. — М.: Медицина, 1960. 325 с.

122. Серов, В. В. Соединительная ткань (функциональная морфология и общая патология / В. В. Серов, А. Б. Шехтер. М.: Медицина, 1981. - 312с.

123. Серов, В. В. Воспаление / В. В. Серов, В. С. Пауков. М.: Медицина, 1995.-640 с.

124. Скоробогатая, Е. В. Выделение и идентификация фиброцитов из периферической крови человека / Е. В. Скоробогатая, Н. В. Калмыкова, М. И. Блинова, Г. П. Пинаев" // Цитология. 2008. - Т. 50. - № 2. - С. 118-123.

125. Слуцкий, JI. И. Матрикс соединительной ткани как механохимическая конструкция // Теоретические вопросы травматологии и ортопедии. — М., 1990.-С. 3-19. !

126. Смирнов, А. В. Стереометрические и иммуногистохимические изменения в гигантоклеточных ретикулярных ядрах ствола головного мозга растущих крыс под влиянием стрессового воздействия / А. В. Смирнов,

127. B. Б. Писарев, Д. Ю. Гуров, М. Б. Потанин // III Российский Конгресс по патофизиологии : тез. докл. -М., 2004. С. 159.

128. Смирнов, А. В. Влияние антропогенных факторов окружающей среды' на структурные особенности растущего организма / А. В. Смирнов,,I

129. Р. П. Самусев, В. Б. Писарев и др. // Фундаментальные исследования. —1 2006. -№3.- С. 69-70.

130. Смирнов, С. В. Коррекция процессов перекисного окисления липидов антиоксидантом мексидолом у больных с ингаляционной травмой /

131. C. В. Смирнов, П. П. Голиков, С. Б. Матвеев, Б. В. Давыдов, JI. П. Логинов // Вестник интенсивной терапии. 2002. - № 1. - С. 23-25.

132. Соколовский, В. В. Окислительно-восстановительные процессы в биохимическом механизме неспецифической реакции организма на действиеэкстремальных факторов внешней среды/ В. В. Соколовский // Антиоксиданты и адаптация. Л., 1984. - С. 5-19.

133. Соколовский, В. В. Тиоловые антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие / В. В. Соколовский // Вопросы медицинской химии. 1988. -№ 6. - С. 2-11.

134. Соловьев, М. О. Морфологические изменения тимуса при экспериментальном остеомиелите после введения тималина / М. О. Соловьев, Т. К. Супиев, И. И. Гринцевич и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. — Т. 95. — № 6. - С. 123-124.

135. Соловьева, М. Е. Прооксидантное и цитотоксическое действие И-ацетилцистеина и глутатиона в сочетании с витамином В.2ь Н М. Е. Соловьева, В. В. Соловьев, А. А. Фасхутдинова и др.] // Цитология. — 2007. Т. 49. - № 1. - С. 70-78.

136. Спичкина, О. Г. Анализ гетерогенности кератиноцитов человека, взаимодействующих с иммобилизованным фибронектином, коллагенами I и IV типов / Цитология. 2008. - Т. 50. - № 3. - С. 210-217.

137. Ставрова, Л. А. Роль системы мононуклеарных фагоцитов в регуляции гемопоэза у мышей линии АКЕШУ в предлейкозном периоде / Л. А. Ставрова, А. М. Дыгай, В. В. Жданов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — № 1. 2001. - С. 52-54.

138. Стальная, И. Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии. -М., 1977.-С. 63-64.

139. Старикова, Э. А. Гетерогенность мононуклеарных фагоцитов: субпопуляций или проявления пластичности / Э. А. Старикова, Е. П. Киселева, И. С. Фрейдлин // Успехи современной биологии. — 2005. -Т. 125.-№5.-С. 466-477.

140. Стефанов, С. Б. Окулярная вставка для полных стереологических измерений микроскопических объектов // Цитология. Л.: Наука, 1974.

141. T. XVI, № 11.-С. 1439-1440.

142. Струков, А. И. Воспаление. Общая патология / А. И. Струков, В. С. Пауков, О. Я. Кауфман. М., 1990. - Т. 2. - С. 3-73.

143. Судаков, К. В. Соединительная ткань у крыс при эмоциональном стрессе / К. В. Судаков // Авиакосмическая и экологическая медицина. -2000. Т. 34. - № 3. - С. 27-33.

144. Тодоров, И. Н. Стресс, старение и их биохимическая коррекция / И. Н. Тодоров, Г. И. Тодоров М.: Наука, 2005. - 479 с.

145. Тихончук, В. С. Возможности использования новых интегральных показателей периферической крови человека / В. С. Тихончук, И. Б. Умаков,

146. B. Н. Карпов, В. Г. Зуев // Военно-медицинский журнал. — 1992. № 3. —1. C. 27-31.

147. Трубицина, Е. С. Применение антиоксиданта мексидола у больных ишемической болезнью сердца оперированных в условиях искусственного кровообращения : автореф. дис. . канд. мед. Наук / Е. С. Трубицина. -Новосибирск, 2006. -108 с.

148. Тутельян, А. В. Прайминг фагоцитов и его применение в системе оценки специфической активности иммунорегуляторных соединений / А. В. Тутельян, Г. И. Клебанов // Иммунология. 2004. - № 1. - С. 14-16.

149. Уразова, JI. Н. Функциональное состояние макрофагов на фоне терапии вирусными вакцинами в эксперименте / JI. Н. Уразова, Т.И. Кузнецова // Бюллетень СО РАМН. 2007. - № 6 (128). - С. 31-36.

150. Учитель, И. Я. Макрофаги в иммунитете / И. Я. Учитель. М.: Медицина. - 1978. - 121 с.

151. Хаитов, Р. М. Основные задачи клинической иммунологии поизучению функциональной активности фагоцитирующих клеток / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. 1995. - № 3. - С. 6-10.

152. Хочачка, П. Биохимическая адаптация. / П. Хочачка, Дж. Сомеро. -М.: Мир, 1988.-568 с.

153. Фрейдлин, И. С. Клетки иммунной системы / И. С. Фрейдлин, А. А. Тотолян СПб.: Наука, 2001. - 390 с. - Т. 3-5.

154. Чертков, И. JI. Клеточные основы кроветворения / И. JI. Чертков,

155. A. Я. Фриденштейн. М.: Медицина. - 1977. - 271 с.

156. Чумаченко, П. В. Моноциты, макрофаги и липидоз интимы аорты человека при атеросклерозе / П. В. Чумаченко, Н. М. Черпаченко,

157. B. С. Жданов // Архив патологии. 1995. - Т. 57, № 3. - С. 40-44.

158. Шанин, Ю. Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике / Ю. Н. Шанин., В. Ю. Шанин, Е. В. Зиновьев. СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2003. -128 с.

159. Шишкина, JI. Н. Связь повреждения мембран с процессом перекисного окисления липидов при слабых воздействиях / JI. Н. Шишкина, М. А. Смотряева // Биохимия. 2000. - Т. 45, № 5. - С.844-852.

160. Шурыгин, М. Г. Влияние фактора роста фибробластов на механоморфоз левого желудочка при экспериментальном постинфарктном кардиосклерозе / М. Г. Шурыгин, И. А. Шурыгина, Н. Н. Дремина // Бюллетень СО РАМН. 2008. - № 2 (130). - С. 73-77.

161. Щепеткин, И. А. Активация макрофагов, растительнымиполисахаридами / И. А. Щепеткина // Антибиотики и химиотерапия. 2004, Т. 49, № 1.-С. 35-40.

162. Эмануэль, Н. М. Антиоксиданты в пролонгировании жизни // Биология старения / отв. ред. В. В. Фролькис. Д.: Наука. - 1982. — С. 569-585.

163. Юрина, Н. А. Морфофункциональная гетерогенность и взаимодействие клеток соединительной ткани / Н. А. Юрина, А. И.

164. Радостина. -М.: Изд-во УДН, 1990. 322 с.

165. Юшков, Б. Г. Система крови и экстремальные воздействия на организм /

166. Б. Г. Юшков, В. Г. Климин, М. В. Северин. Екатеринбург: НИСО УрО РАН, 1999.-203 с.

167. Юшков, Б. Г. Влияние иммуномодуляторов на регенерацию печени. / Б. Г. Юшков, И. Г. Данилова, Ю. С. Храмцова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. - № 1. — С. 68

168. Якимова, Ю. А. Морфофункциональные особенности гистиоцитов ПРСТ и перитонеальных макрофагов в онтогенезе у крыс в условиях водной депривации / Ю. А. Якимова, Г. В. Правоторов // Деп. ВИНИТИ. 1993. -№6.-С. 93.

169. Asmis, R. A novel thiol oxidation-based mechanism for adriamycininduced cell injury in human macrophages / Reto Asmis, Yanmei Wang, Li Xu, Marta Kisgati, Jim G. Begley, John J. Mieyal // FASEB Journal. 2005. - Vol. 13. - P. 1-24.

170. Arnold, G. Experimented Untersuchungen zum biomechanischen Verhalten kollagener Fasern unter impulsformigen Dehnungsbeanspruchungen / G. Arnold, H. Clahsen, P. Huhn//Anat. Anz. 1982. -Bd. 151, N 1. - S. 1-13.

171. Bassoe, C. F. Concurrent measurement of antigen- and antibody-dependent oxidative burst and phagocytosis in monocytes and neutrophils. / C. F. Bassoe, I. Smith, S. Sornes, A. Holstensen, A. K. Lehmann // Methods. 2000. - Vol. 22. -P. 202-220.

172. Bancroft, G. J. Pathways of macrophage activation and innate immunity /

173. G. J. Bancroft 11 Immunol. Lett.- 1994. Vol. 43, № 1-2. - P.67-70.

174. Baudino T. A. Cardiac fibroblasts: friend or foe? / Troy A. Baudino, Wayne Carver, Wayne Giles, and Thomas K. Borg // Am J Physiol Heart Circ Physiol. Sep 2006. - Vol. 291. - P. H1015-H1026.

175. Beauchamp, C. Superoxide dismutase: improved assays and applicable to acrylamide gels / C. Beauchamp, I. Fridovich // Analyt. Biochem. — 1971. -Vol. 44, № l.-P. 267-287.

176. Benanti, J. A. Normal human fibroblasts are resistant to RAS-induced senescence / J. A. Benanti, D. A. Galloway // Mol. Cell. Biol. 2004. - Vol. 24. -P. 2842-2852.

177. Berk, J. L. Hypoxia suppresses elastin repair by rat lung fibroblasts / John L. Berk, Christine A. Hatch, Shirley M. Morris, Phillip J. Stone, and Ronald H. Goldstein // Am J Physiol Lung Cell Mol. Physiol. Dec 2005. - Vol. 289. - P. 931-936.

178. Betsuyaku, T. Role of secretory leukocyte protease inhibitor in the development of subclinical emphysema / T. Betsuyaku, K. Takeyabu, M. Tanino, M. Nishimura // Eur Respir J. 2002. - Vol. 19. - P. 1051-1057.

179. Betteridge, D. J. What Is Oxidative Stress? // Metabolism. 2000. - Vol. 49, №2.-P. 3-6.

180. Bo-Chin Chiu. Mononuclear Phagocyte-Derived Interleukin-10 Suppresses the Innate Pulmonary Granuloma Cytokine Response in Aged Mice / Bo-Chin Chiu, Valerie R. Stolberg, Christine M. Freeman, and Stephen W. Chensue // Am.

181. J. Pathol. Sep 2007. - Vol. 171.-P. 829-837.

182. Bucala, R. Circulating fibrocytes define a new leukocyte subpopulation that mediates tissue repair. / R. Bucala, L. A. Spiegel, J. Chesney, M. Hogan, A. Cerami // Mol. Med. 1994. - Vol. 1. - P. 71-81.

183. Bukrinsky, M. Human immunodeficiency virus infection and macrophage cholesterol metabolism / Michael Bukrinsky, Dmitri Sviridov // Journal of Leukocyte Biology. 2006. - Vol. 80. - P. 1044-1051.

184. Cathcart, M. K. Regulation of Superoxide Anion Production by NADPH Oxidase in Monocytes / Macrophages. Contributions to Atherosclerosis / Martha K. Cathcart // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2004. - Vol. 24. - P. 23-28.

185. Cempbelle P.A. Cell-all in the immune system / P.A. Cempbelle, L. Mucre // Discuss. Neursci. 1993. - V.9, N 3-4. - P. 19-29.

186. Chang, M. Y. Lysophosphatidylcholine Regulates Synthesis of Biglycan and the Proteoglycan Form of Macrophage Colony Stimulating Factor / Mary Y. Chang, Christina Tsoi, Thomas N. Wight, and Alan Chait // Arterioscler. Thromb.

187. Vase. Biol. May 2003. - Vol. 23. - P. 809-815.

188. Chang, M. Y. Antioxidants Inhibit the Ability of Lysophosphatidylcholine to Regulate Proteoglycan Synthesis / Mary Y. Chang, Chang-Yeop Han, Thomas N. Wight, and Alan Chait // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. Mar 2006. - Vol. 26.-P. 494-500.

189. Carr, J. Kapp, Я. Макрофаги: обзор ультраструктуры и функции / J. Carr. М.: Мир.- 1978.- 187 с.

190. Carcillo, J. Cytochrome Р450 mediateddrug metabolism is reduced in children with sepsis-induced multiple organ failure / J. Carcillo, L. Dougty // Intensive Care Med. 2003. - Vol. 29. - N 6. - P. 980-984.

191. Cline, M. J. Bactericidal activity of human macrophages: analysis of factors influencing the killing of listeria monocytogenes / M. J. Cline // Infect. Immun.- 1975. -Vol. 2.-P. 156-161

192. Cotta-Pereira, G. Distribution of elastic system fibers in hyaline and fibrous cartilages of the rat / G. Cotta-Pereira, L. M. Del-Саго, G. S. Monies // Acta anat. -1984.-Vol. 119.-P. 80-85.

193. Dale, D. C. The phagocytes: neutrophils and monocytes / David C. Dale, Laurence Boxer, and W. Conrad Liles // Blood. Aug 2008. - Vol. 112. - P. 935-945.

194. Ding, Yong. Phosphorylation of Pleckstrin Increases Proinflammatory Cytokine Secretion by Mononuclear Phagocytes in Diabetes Mellitus / Yong

195. Ding, Alpdogan Kantarci, John A. Badwey, Hatice Hasturk, Alan Malabanan, and Thomas E. Van Dyke// J. Immunol. Jul 2007. - Vol. 179. - P. 647-654.

196. Di Naro, E. Fetal thymic involution: a sonograhpic marker of the fetal inflammatory syndrome / E. Di Naro, A. Cromi, F. Ghezzi // Am. J. Obstet. and Gyn.-2006.-Vol. 194, № l.-P. 153-159.

197. Edelson B.T. Mast cell-mediated inflammatory responses require the <*23l integrin / Brian T. Edelson, Zhengzhi Li, Loretta K. Pappan, and Mary M. Zutter // Blood. Mar 2004. - Vol. 103. - P. 2214-2220.

198. Fay, M. Protective effect of LPS and poly A:U against immune oxidative injury: role of thiols released by activated macrophages / M. Fay // Free Radic. Biol. Med. 1995.-Vol.18, № 4. - P.649-654.

199. Franzblau, C. Elastin / C. Franzblau // Comprehen. Biochem. 1971. - Vol. 260.-P. 659-712.

200. Furth van, R. Development of mononuclear phagocytes. Heterogeneity of mononuclear phagocytes/ R. Furth van, // Ed. by Foster O. — Academic press: London-New York, 1980. Vol. 28.-P. 3-10.

201. Furth van, R. Ван Фурт P. Макрофаги: решённые и нерешённые проблемы. / R. Furth van // Нижегородск. мед. журн. 1991. — N 4. - С. 40-47.

202. Gargalovic, P. Caveolins and macrophage lipid metabolism / Peter Gargalovic, Ladislav Dory // J. Lipid Res. 2003. - Vol. 44. - P. 11-21.

203. Gawlik, Z. Morphological and morphochemical properties of the elasticsystem in the motor organ of man / Z. Gawlik // Folia histochem. cytochem. -1965.-Vol.3.-P. 233-251.

204. Gende, O. A. Genistein inhibits osmotic activation of na+/h+ exchange in human platelets / O. A. Gende // Archives of Physiology and Biochemistry. -2000. Vol. 108. - No. 5. - P. 429-436.

205. Glauert, A. M. The study of the three-dimensional structural relationships in connective tissues by high voltage electron microscopy / A. M. Glauert, C. R. Mayo // J. Microsc. 1973. - Vol. 97. - P. 83-94.

206. Godler, D. E. Parathyroid hormone-related peptide expression in rat collagen-induced arthritis / D. E. Godler, A. N. Stein, O. Bakharevski, M. M. L. Lindsay and P. F. J. Ryan // Rheumatology. 2005. - Vol. 44. - P. 1122-1131.

207. Greaves, D. R. Recent insights into the biology of macrophage scavenger receptors / David R. Greaves, Siamon Gordon // J. Lipid Res. 2005. - Vol. 46. -P. 11-20.

208. Haggie, P. M. Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator-independent phagosomal acidification in macrophages / Peter M. Haggie, A. S. Verkman // Journal of biological chemistry. 2007. - Vol. 282. - N 43. - P. 31422-31428.

209. Harman, D. Free radicals theory of aging: inhibition of amyloidosis in mice by antioxidants; possible mechanism / D. Harman, D. E. Eddy, J. Noffsinger // J. < Am. Geriatr. Soc. 1996. - Vol. 24. - P. 203-210. "

210. Harris, A. K. Fibroblast traction as a mechanism for collagen morphogenesis. / A. K. Harris, D. Stopak, P. Wild // Nature. 1981. - Vol. 290. -P. 249-251.

211. Hashimoto, K. Ultrastructure of freeze-cleaved dermal collagen / K. Hashimoto // Acta dermato-venerol. 1974. - Vol. 54. - P. 214-248.

212. Helmy, K.Y. CRIg: a macrophage complement receptor required for phagocytosis of circulating opatogens / K. Y. Helmy, K. J. Jr. Katschke, N. N. Gordani et al. // Cell. 2006. - Vol. 124. - P. 915-927.

213. Heinecke, J. W. Oxidants and antioxidants in the pathogenesis ofatherosclerosis: implications for the oxidized low density lipoprotein hypothesis / J. W. Heinecke I I Atherosclerosis. 1998. - Vol. 141. - P. 1-15.

214. Hutson, J. C. Physiologic Interactions Between Macrophages and Leydig Cells / James C. Hutson // Exp Biol Med. 2006. - Vol. 231. - P. 1-7.

215. Joseph, E. Quails. Suppression of experimental colitis by intestinal mononuclear phagocytes / Joseph E. Quails, Alan M. Kaplan, Nico van Rooijen, and Donald A. Cohen // J. Leukoc. Biol. Oct 2006. - Vol. 80. - P. 802-815.

216. Kallenberg, L. A. C. Calcium signalling in secretory cells / L. A. C. Kallenberg // Archives of Physiology and Biochemistry. 2000. - Vol. 108. - N 5. -P. 385-390.

217. Kato, K. Structural views of glycoprotein-fate determination in cells / Koichi Kato, Yukiko Kamiya // Glycobiology. Oct 2007. - Vol. 17. - P. 1031-1044.

218. Kriharides, L. Accumulation and metabolism of low density lipoprotein derived cholesteryl linoleate hydroperoxide and hydroxide by macrophages/ L. Kriharides //J. dipid Res. 1998, Vol. 39. - № 12. - P. 2394-2405.

219. Keen, J. H. Glutathione transferases. Catalysis of nucleophilic reactions of glutathione. / J. H. Keen, W. B. Yakoby // J. Biol. Chem. 1978.- Vol. 253, N16.-P. 5654-5657.

220. Kielian, M. Phagosome-lysosome flusion characterization of intracellular membrane fiusion in mouse macrophages / M. Kielian, F. A. Conn // J. Cell Biol. 1980. - Vol. 85. - P. 754-765.

221. Lehninger, A.L. Ленинджер, А.Л. Основы биохимии : В 3 т. ; пер. с англ. -М.: Мир, 1985.-Т. 1.-367 с.

222. Long, L. H. Oxidation and generation of hydrogen peroxide by thiol compounds in commonly used cell culture media / L. H. Long, B. Halliwell // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - Vol. 286. - P. 991-994.

223. Long, J. A. Effect of Vitamin E on Lipid Peroxidation and Fertility After Artificial Insemination with Liquid-Stored Turkey Semen / J. A. Long, and M. Kramer//Poultry Science. -2003. Vol. 82.-P. 1802-1807.

224. Maeda, H. Tocopherols Protect Synechocystis sp. Strain PCC 6803 from Lipid Peroxidation / Hiroshi Maeda, Yumiko Sakuragi, Donald A. Bryant, Dean DellaPenna//Plant Physiology.-2005.-Vol. 138.-P. 14221435.

225. Mastbergen, S. C. Proteoglycan Synthesis and Release Of Human Articular Cartilage Depend On Different Pathways / S. C. Mastbergen, J. W. J. Bijlsma, and F. P. J. G. Lafeber // Ann Rheum Dis. Jun 2006. - Vol. 65. - P. 120.

226. Meuret, G. Monozytopoese-Monocyten-Makrophagen / G. Meuret // Hyppokrates. 1976. - Vol.47. -P. 142-161.

227. Montilla, P. L. Oxidative stress in diabetic rats induced by streptozotocin: protective effect of melatonin / P. L. Montilla, J. F. Vargas, L. F. Tunez et al. // J. Pineal. Res. 1998. - Vol. 25. -№ 2. - P. 94-100.

228. Murrau, M. Cytochromes P450: decision-making tools for personalized therapeutics / M. Murrau, N. Petrovic // Curr. Opin. Mol. Ther. 2006. - Vol. 8. -№6.-P. 480-486.

229. Nau, G. Human macrophage activation programs induced by bacterial pathogens / G. Nau, J. Richmond, A. Schbesinger et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - Vol. 99. - P. 1503-1508.

230. Neuzil, J. The role of vitamin E in atherogenesis: linking the chemical, biological and clinical aspects of the disease / J. Neuzil, C. Weber, A. Kontush // Atherosclerosis. -2001. Vol. 157. - P. 257-283.

231. Neudeck, B. L. Intestinal P Glycoprotein Acts as a Natural Defense Mechanism against Listeria monocytogenes / Brien L. Neudeck, Jennifer M. Loeb, Nancy G. Faith, and Charles J. Czuprynski // Infect. Immun. — Jul 2004. -Vol. 72.-P. 3849-3854.

232. Nickols, B. Ultrastructure and cytochemistry of mononuclear phagocytes / B. Nickols, D. Bainton // Mononuclear phagocytes in immunity, infection and pathology. /Eds. Furth R. van Oxford London-Edinburgh: Blackw. Ci. Publ, 1975.-P. 17-55.

233. Nikolov, S. Zum tubulären Baumuster der Filamente der elastischen Fasern / S. Nikolov, G. Chaldakov, M. Gabrovska // Anat. Anz. 1984. - Bd. 156. - S. 57-68.

234. Pelletier, M. Characterisation of humen thymic dendritic cell in culture / M. Pelletier, C. Tuattu, D. Landry D et al. // J. Immunol. 1986. - №2. - P. 263-270.

235. Persidsky, Y. Mononuclear phagocyte immunity and the neuropathogenesis of HIV-1 infection / Yuri Persidsky, and Howard E. Gendelman // J. Leukoc. Biol. Nov 2003. - Vol. 74. - P. 691-701.

236. Pinto, E. R. The effect of age and sex on glutathione reductase and glutathione peroxidase activités and on aerobic glutathione oxidation in rat liver / E. R. Pinto, W. Bartley // Biochem. J. 1969.-Vol. 112,N1.-P. 109-115.

237. Prieto, J. Regulated expression of integrins and other adhesion molecules during differentiation of monocytes into macrophages / J. Prieto, A. Eklund, M. Patarroyom // Cellular immunology.- 1994.- Vol. 156, N 1.- P. 191.

238. Puxeddu, I. Mast cells in allergy and beyond. / I. Puxeddu, A. M. Piliponsky, I. Bachelet, F. Levi-Schaffer // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2003. -Vol. 35.-P. 1601-1607.

239. Qsterud, B. Role of Monocytes in Atherogenesis / Bjarne Qsterud, Eirik Bjqrklid // Physiol Rev. 2003. - Vol. 83. - P. 1069-1112.

240. Reed, R. Freez-etched connective tissue / R. Reed // Internat. Rev. connect. Tissue Res. 1973. - Vol. 6. - P. 267-304.

241. Regin, A. RNA-marked murine macrophages destiny / A. Regin // Nucl. Med., and Biol.-1995.-Vol. 15, N 6.-P. 817-821.

242. Robert, L. Structural glycoproteins of connective tissue: their role in morphogenetic and immunopathology / L. Robert, B. Robert // Connective tissue, biochemistry and pathophysiology. Berlin, 1974. P. 240-256.

243. Ruiz-Larrea, M. B. Antioxidant activities of estrogens against aqueous and lipophilic radicals; differences between phenol and catechol estrogens / M. B. Ruiz-Larrea, C. Martin, R. Martinez et al. // Chem. Phys. Lipids. 2000. - Vol. 105.-P. 179-188.

244. Singh, N. Restoration of thymic homeostasis in a tumor-bearing host by in vivo administration of medicinal herb Tinospora Cordifolia / N. Singh, S. M. Singh // Immunopharmacology and immunotoxicology. — 2005. № 27. — P. 585599.

245. Takafuji, S. Effects of lung fibroblasts on eosinophil degranulation / S. Takafuji, Y. Miyakuni, T. Nakagawa, S. Shoji, S. Murata, K. Yamamoto, K. Ito // Allergy.-2000.-Vol. 55.-P. 1170-1178.

246. Todorova, L. Lung Fibroblast Proteoglycan Production Induced by Serum Is Inhibited by Budesonide and Formoterol / Lizbet Todorova, Eylem Giircan,

247. Anna Miller-Larsson, and Gunilla Westergren-Thorsson // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. Jan 2006. - Vol. 34. - P. 92-100.

248. Veis, A. Structure of the collagen microfibril. A fourstrand overlap model / A. Veis, L. Yuan //Biopolymers. 1975. - Vol. 14. - P. 895-900.

249. Velleman, S. G. Role of the extracellular matrix in muscle growth and development. / S. G. Velleman // J. Anim. Sci. 2002. - Vol. 80. - P. E8-E13.

250. Vernon-Roberts, B. The macrophage / B. Vernon-Roberts. Cambridge: Univ. Press, 1972.-212 p.

251. Whitelaw, D. M. Kinetics of monocytes / D. M. Whitelaw, H.F. Batho // Mononucl. Phagocyt. Immun. Infect. Pathol. Oxford. 1975. - P. 175-188.

252. Wood, L. G. Biomarkers of lipid peroxidation, airway inflammation and asthma / L. G. Wood, P. G. Gibson, M. L. Garg // Eur Respir J. 2003. - Vol. 21. - P. 177-186.

253. Yakeler, E. Analysis of the thymus in 151 healthy infants from 0 to 2 years of age / E. Yakeler, A. Tambag, A. Tunaci et al. // J. Ultrasound Med. 2004. -Vol. 23. -N 10. - P. 1321-1326.

254. Zarini, S. Biosynthesis of 5-Oxo-6, 8, 11, 14-eicosatetraenoic Acid from 5-Hydroperoxyeicosatetraenoic Acid in the Murine Macrophage / Simona Zarini,

255. Robert C. Murphy // Journal of biological chemistry. 2003. - Vol. 278, N 13. -P. 11190-11196.1

Информация о работе

Федорова, Наталья Петровна
кандидата биологических наук
Великий Новгород, 2009
ВАК 03.00.25

Диссертация

Морфологические основы защитно-приспособительных реакций соединительной ткани кожи и тимуса при повреждающих и корригирующих воздействиях - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы