Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Резистентность хищных клещей-фитосейид (Acarina, Phytoseiidae) к пестицидам: исследование и использование в интегрированной борьбе

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Резистентность хищных клещей-фитосейид (Acarina, Phytoseiidae) к пестицидам: исследование и использование в интегрированной борьбе"

РГО од

/ Я * ■ А '1 1ппя

' 'Рбейияскйя академия сельскохозяйственных наук

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ

На правах рукописи Петрушов Андрей Захарович

РЕЗИСТЕОТНОСТЬ ХИЩНЫХ КЛЕЩЕЙ-ФИТОСЕЙИД (асакшл, РНУТОЭЕ1 1ШК) К ПЕСТИЦИДАМ: ИССЛЕДОВАНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ИНТЕРНИРОВАННОЙ БОРЬБЕ

06.0J.II - защита растений от вредителей и болезней

Автореферат диссертации на соискание ученой степени поктора биологических наук

Санкт-Петербург - 1993

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте Фитопатологии

Официальные оппоненты: Доктор биологических наук, профессор Н.В.Бонпаренко Доктор биологических наук В.Н.Белозеров Доктор биологических наук К.Е.Воронин

Ведущее учреждение: Всероссийски!! научно-исследовательский институт карантина растений.

Защита состоится 27 мая 1993 года в 10 часов на заседании специализированного совета , uuiíp Д 020.01,при Всероссийском научно-исслеповттельском институте защиты растений по адресу: 189620, Санкт-Петербург, П.ушкин-6, шоссе Подбельского, 3, ВИЗР.

С диссертацией мойшо ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института защиты растений.

Автореферат разослан "___"___________199__г.

Ученый секретарь специализированного совета Г.А'.Наседкина

0Б1ДЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В конце сороковых - начале пятидесятых годов достижения в синтезе, производстве и применении пестицидов были в значительной степени нивелированы с одной стороны образованием и распространением рас вредных членистоногих, резистентных к пестицидам и с другой - уничтожением их хищников и паразитов, что привело во многих случаях к негативным последствиям. И если в настоящее время постоянное расширение и совершенствование ассортимента химических средств позволяет в определенной степени решать проблему борьбы с резистентными популяциями вредителей, то применение полезных членистоногих на фоне химических обработок - проблема, как правило, трудноразрешимая.

Перспективным решением этой проблемы представляется получение и использование резистентных к политоксичным пестицидам рас полезных членистоногих. Попытки реализации этой идеи имели место сдё в пятидесятые годы. В это же время-(пятидесятые-шестилесятые годы) стали известны случаи выживания некоторых видов хи'цных клещей в интенсивно обрабатываемых пестицидами сапах. В 1970 г. был впервые определен уровень их устойчивости. С середины семидесятых голов начинает интенсивно развиваться новое направление в интегрированной защите растений - поиск, селекция и использование резистентных к пестицидам рас хищных клещей и полезных насекомых.

В настоящее время использование резистентных популяций хищных клещей стало важным элементом интегрированной защиты плодовых и ягодных культур, винограла, цитрусовых; огурца и томата в закрытом грунте. Достаточно отметить, что широкое использование резистентных рас хищных клещей на плодовых культурах в Голландии, ФРГ, Франции, Италии, Англии, США, Канале и в других странах позволило резко сократить применение якярици.дов, что дало экономию 75-100 долларов с га и снизило загрязнение окружающей среды.

В результате выявления новых перспективных, но чувствитель- . иых хищников с ояной стороны и постоянного расширения и смены ассортимента пестицидов - с другой, возникает необходимость получения рас хищников, резистентных к уже применяемым или новым препаратам и испытания их эффективности на фоне химических обработок. Однако к началу наших исследований (1974 г.) возможности получе-

ния и использования резистентных рас фитосейид не изучались и методические подходы, обеспечивающие решение этой задачи, не были разработаны.

Цель и задачи исследования. Основное содержание настоящей работы заключается в обосновании и .разработке нового направления в интегрированной защите отдельных культур, позволяющего на фоне неизбежного применения пестицидов биологизировать борьбу с практически важной группой вредителей - тетраниховыми клещами, обеспечивать их-эффективный контроль, снизить расход пестицидов и создать'предпосылки к внедрению новых экологически безопасных, селективных средств защиты растений. Для достижения этой пели экспериментально решались следующие задачи:

- изучение возможности получения устойчивых к пестицидам рас фитосейид путем искусственной селекции, поиска в агроценозах, интродукции и акклиматизации;

- исследование природы резистентности хищных клещей (гене-тико-биохш/ические механизмы, реверсия, плейотропное влияние мутаций резистентности на биологические показатели, диапазон перекрестной устойчивости);

- разработка методов применения и изучения эффективности резистентных рас хищных клещей в интегрированной защите растений.

В теоретическом плане представлялось целесообразным на основе полученных экспериментальных данных и анализа мировой литературы всесторонне рассмотреть проблему резистентности полезных насекомых и хищных клещей к пестицидам, определить методологические подходы и перспективы исследований в этой области:

Научная новизна. Проведенные исследования положили начало развитию нового направления в интегрированной защите растений -получения и использованию резистентных к пестицидам рас полезных членистоногих. Разработаны во многом оригинальные методы токсикологических, селекционно-генетических и биоэкологических исследований резистентности хищных клещей - фитосейид. Экспериментально показана возможность получения высокорезистентных рас хищных клещей - фитосейид методом искусственной селекции. В агроценозах обнаружены устойчивые популяции местных видов фитосейид. Проведены исследования природы резистентности хищных клещей -

Фитосейия: биохимических и генетических факторов устойчивости, плеГютропии, реверсии, диапазона перекрестной устойчивости резистентных рас, повеленческой и репеллентной устойчивости. 06-сухдены теоретические аспекты проблемы резистентности полезных вилоз к пестицидам.

Практическая ценность и реализация результатов исследования. В результате проведенных исследований обоснованы теоретические и методические подходы к получению резистентных рас хищных кле'цей - фитосейид, как важный элемент современной биотехнологии. Получены высокорезистентные к ФОС и пиретроидам расы хищных клещей - фитосейуласа, метасейулюса и амблисейуса. Впервые п отечественной практике разработаны метолики оценки проективности и использования резистентных рас хищных клещей в интегрированной защите растений. Предложены рекомендации по массовому разведению, хранению и применению метасейулюса. Разработка основных элементов интегрированной борьбы с паутинным кленом на винограде (пороги вредоносности, система мониторинга, сочетание выпусков с химическими обработками и др.) позволила обосновать тактику применения метасейулюса и провести широкое внедрение (на площади более 20 тыс.га) этого нового средства биологической защиты растений. Применение метасейулюса только в хозяйствах Таманского полуострова позволило, по данным Темрюкской станции защиты растений, сократить применение хлорэтанола, акрекса и омайта с 61 тонны в 1989 году до 8,5 тонн в 1992 году.

Разработаны и утверждены технологическая карта, технические условия и технологический регламент на производство метасейулюса. По результатам исследований резистентности паутинных и хищных клещей опубликованы пеелть методических указаний и рекомендаций.

Апробация работы. Результаты исследований и отдельные поло-кения работы докладывались на съездах ВЭО (Ленинград, 1974; Киев, 1984), М{ЗР (Москва, 1975), на Всесоюзных совещаниях по резистентности (Ленинград,-1972, 1975, 1900; Гига, 1960; Уйм,1992), на Всесоюзных совещаниях по теоретической и прикладной акарологии (Ташкент, 1976; Фрунзе, 19Ь5; Ашхабад, 1990), на совещании специалистов стран-членов СЭВ (Ленинград, 1977), на Всесоюзном совещании по биологической защите овощных культур от вредных организмов (Кишинев, 1977), на семинаре по экономическим порогам врело-

носности (Ташкент, 1979), на Всесоюзном совещании по повьгше&га эффективности химических средств защиты растений (Воронек, 1979), на Закавказском координационном совете по защите растений (Тбилиси, 1980), на Всесоюзном совещании по научно-техническому прогрессу в виноградарстве и виноделии (Кишинев, 1980), на Всесоюзном совещании по химизации сельскохозяйственного производства (Кишинев, 1983), на Всесоюзном совещании по проблемам зоокуль-туры (Москва, 1986), на Всесоюзной научно-практической конференции по проблемным вопросам защиты винограда от вредных организ- • мов (Ялта, 1989), на восьмом Международном акарологическом конгрессе (Ческе Бупейовицы, 1990), на Международной конференции по защите растений в теплицах (Нарамовицы, 1991), на советско-американском совещании по интегрированной защите растения (Кишинев, 1990), а также на ряде других Всесоюзных и региональных научных и научно-производственных совещаний.

Методические указания по применению метасейулюса рассмотрены и одобрены на научно-техническом совете Госагропрома РСФСР 14 февраля 1990 года, протокол 1' б.

Публикации. По теме диссертации опубликовано восемьдесят две работы. Сданы в Агропромиздат две монографии (в соавторстве с И.З.Лившицем и В.И. Митрофановым) - "Сельскохозяйственная акарология" 25 п.л.) и справочник "Клещи - вредители сельскохозяйственных культур" (15 п.л.).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 310 страницах, в том числе 43 таблицы, 31 рисунок и 46 страниц списка литературы. Работа состоит из введения, четырех глав, включающих 33 раздела, основных выводов и списка цитированной литературы, которые содержат 358 источников, в том числе 192 иностранных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. ИНТЕГН4Р0ВАШАЯ БОРЬБА С РАСТИТЕЛЬНОЯДНЫМИ КЛЕЩАМИ: ОСНОВНЫЕ ЭШЕНТЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В СИСТЕМАХ ЗАЩ1ТЫ РАСТЕНИЯ

В диссертации вслед за кратким введением приведен обзор литературы, в котором содержится шесть разделов, освещающих осноз-

нне направления развития интегрированной борьбы с растительноядными клецами: хозяйственное значение и пороги врелоносности, химический метоп, биологический метол, агротехнические мероприятия, бкоценотические связи в агроценоэах и влияние пестицидов на ака-рифагоз. 3 последнем разделе приведены примеры разработки и использования систем интегрированной борьбы с клещами на разных культурах.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3 семи разделах данной главы описаны методы, использованные в исследованиях по содеркани» и разведению кле:цей в лаборатории, оценке токсичности пестицидов, селекции хищных клещей на устойчивость к пестицидам и определению уровня резистентности, генетическому анализу резистентности, определению демографических показателей, наблюдениям за динамикой численности популяций и определенно эффективности хищных клецей, изучению врелоносности сапового паутинного клаца.

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ

ШЩ1ЫХ ЮЗЕЩЕЙ-ФИТОСЕЙИД К ПЕСТИЦИДАМ

3.1. Получение резистентных популяций фитосейид

Поиск устойчивых популяций в агроценозах. Нами были проведены обследования агроценЬзов многолетних культур и биоценозов дикорастущих и заброшенных садов в Закарпатье, Молдове, ¡{невской и Московской областях, Армении, Грузии, Крыму, Кабардино-Балкарии, Краснодарском и Ставропольском краях. Результаты обследований около 300 ценозов позволили сделать следующие заключения:

1. В естественных биоценозах, заброшенных салгхх и на личных участках в обследованных зонах фитосейиды повсеместно присутствуют, а вредные клеци либо отсутствуют, либо их численность находится на очень низком уровне.

2. В большинстве обрабатываемых пестицидами агроценозоз фитосейиды практически полностью отсутствуют. Особенно это наглядно в крупных аграрно-проыышленных зонах с большими площадями монокультуры (Ставропольский край, Молдова, Закарпатье, степная

- О -

часть Крыма, Краснодарский край). В таких агроценоэах часто наблюдается массовое размножение и высокая вредоносность тетранихо-вых клешей.

В некоторых агроценоэах отмечено выживание и размножение хищных клещей - фитосейид.

Все агроценозы, где встречались фитосе^иды, находились вблизи естественных биоценозов (сады и виноградники Грузии) или заброшенных садов (совхоз "Совки" на Украине, предгорные хозяйстза Крыма). Можно предположить, что отбор устойчивых фитосейид в данных агроценоэах обусловлен постоянным притоком и селекцией особей природных популяций, тогда как в условиях монокультуры этот процесс не происходит. С другой стороны, фитосейиды в конце ^ета (период проведения обследований) могли оказаться в этих ценозах п результате случайного заноса и сохранения после окончания химических обработок. В этом случае их чувствительность к пестицидам должна быть на уровне природной.

Для сравнения чувствительности к пестицидам фитосейид из обрабатываемых и необрабатываемых ценозов были поставлены токсикологические опыты, результаты которых представлены в табл.1.

Из представленных данных видно, что карбофос примерно одинаково токсичен в отношении всех фитосейид, собранных в естественных биоценозах или заброшенных садах: СК^д варьирует от 0,00016$ до 0,00054!». В отношении ке фитосейид, собранных в агроценоэах, различия в токсичности для них карбофоса более заметны (СК^ от 0,006 до 0,05/5), что может быть обусловлено различной степенью развития устойчивости у популяций этих видов.

По отношению к Би-58 различия в чувствительности фитосейид менее существенны (вследствие слабой контактной токсичности этого системного препарата),но повышенная устойчивость Ме1азе3.и1из Хоп^роДиз и АаЫузез-из ГаНасаэ Саппап

очевидна.

Таким образом, нами была обнаружена и установлена повышенная УСТОЙЧИВОСТЬ ПЯТИ ВИДОВ фитосейид: Мегазед.и1иэ 101^1рИиз НеаЪгМ, Зе1и1из гаНагшп Оий«» РЬуЬозез.иЗ.'из регз1пШз А.Н., АаЪ1узе1из Г1п1£исЦсиз ОиЛ., Ап-йюзез.из ЬаИпае \Vainst. еХ Ко1ос10

Учитывая огромные площади плодово-ягодных культур и зональное разнообразие экологических условий, необходимо отметить, что настоящей работой положено лишь начало новому в нашей стране

Сравнительная чувствительность к пестицидам Литосейнд, собранных в естественных стациях и в агроценозах

Вид ; Происхождение СК50' карбофос % п.в.

: популяции Т'ьй-ЁУ

а) Естественные стации заброшенные сапы

.1« ГЗ.пХатИс'из с-з "Совки", Киевская обл. __ 0,0037

А. :Г1п1апсЦсиз Крым, Сурб-Хач 0,00035

К. аЬЬегапз Крым, Орехово 0,00037 -

. р1итГег Крым, Орехово 0,0002В -

Нг . р1илиХег Армения, Цицерна--каберт 0,00016

А. *а11ас1д США, Мичиган 0,00022 0,001

РН . регз1гг1Нз Чили, Вальпараисо 0,00035 0,0002

А. саи(И£1апа Московская обл., Рублево _ 0,0035

А. апс1егзоп1 Молдова, Гратиешты - 0,0055

А. гедисШз Московская обл., ■Усово 0,00026 0,0063

А. 31131113 Армения, Чайзами 0,00054 0,0004

К, осс1йепга11з Крым, Бахчисарай б) Агроцспозн 0,0001

К. 1ог^1р11из Киев, Совки - 0,024

3. 1И1агит Крым, Перевальный 0,05 0,0055

М. осс1йег^аИз США, Мичиган 0,05 0,009

А. 5аХ1ас1з США, Мичиган 0,01 0,012

П-и регз!в1 Из Франция, Антиб 0,006 0,003

А. ГЗ.п1ап<Нсиз Крым, Перевальный 0,0083 0,0055

Ап. ЬаНпав Ставропольский край, Бештау 0,01 _

- в -

направленна прикладной акарологии - поиску и диагностике устойчивых к пестицидам популяций хищных клпщей. ;1лльне!'шпо развитие этих исследований должно быть сосредоточено не только на поиске, но и на изучении регулярной роли устойчивых популяций, возможности их расселения на основе массового разведения либо просто срезанными частями растений, на которых они обитают.

Искусственная селекция на устойчивость. В диссертации анализируются имеющиеся в литературе результаты опытоз по селекции семи видов полезных насекомых и пяти видов хищных клещей настойчивость к пестицидам. Отмечено, что селекция была успешной только в тех случаях, когда в качестве исходного материала использовались полевые гетерогенные популяции полезных членистоногих.

Опыты по селекции на устойчивость были проведены нами с тремя видами хищных клещей.

I. Йгугозе1и1из регэ1т.:из А.Н. Первая попытка получить устойчивую популяцию йитосейулюса была предпринята в нашей лаборатории в 1969-1970 гг. Однако опыт показал, что исходная популяция фитосейулюса оказалась недостаточно гетерогенна.

В 1974 г. на юге Франции - в окрестностях г.Антиб - была собрана и дополнительно интродуцирована популяция фитосейулюса, которая явилась предметом нашего изучения. Уке в перзых опытах обнаружилось, что хищник обладает повышенным уровнем резистентности к фосфорорганическим препаратам (табл.1).

На протяжении развития 50 поколений хищника провели 19 обработок этионом, повысив его позу от 0,01% в первой обработке (гибель 70,65) до 0,1% в последних четырех. Несмотря на повышение концентрации, гибель заметно снизилась и в последней обработке была 24,СЙ. Отбор привел к заметному повышению устойчивости: уке после 9 обработок СК^ препарата для селектируемых клещей увеличилась по сравнению с первым определением в пять раз (от 0,0135 до 0,079^). Затем увеличение устойчивости происходило несколько медленнее, и к концу селекции показатель резистентности (ПР) был равен 8,8 , а в сравнении с чувствительной популяцией -209,5.

С появлением в арсенале химических средств синтетических пи-ретроидов, высокотоксичных для хищных клещей и стимулирующих раз-

множение тетранихид, нам бши поставлены опыты по селекции i-ито-сейулюса на устойчивость к соединениям этого класса. Селекцию на устойчивость к пмбушу вели на протяжении 175 поколений, lia отот период было проведено 47 селектирующих обработок. Тем не менее значительного увеличения устойчивости не произошло: если CK^g чувствительной популяции 0,00005?,, а СКд^ - 0,0006"', то СК50 селектируемой популяции 0,0009, С1Сд5 - 0,00вМ (IIP по СК50 = IU.0).

Нами была предпринята попытка индуцирования мутации резистентности к амбушу методам! радиационного и химического мутагенеза. После облучения, обработки нитрозометилмочевиной и нитрозоэтилмо-чевиной,каждая выжившая самка служила основательницей отдельной линии. Линию содержали до получения 30-50 взрослых потомков. При этом мы рассчитывали на гомозиготацию искомой мутации и увеличение числа особей, её несущих. Затем всех особей линии помещали в садок к обрабатывали дискриминирующей дозой (т.е. дозой, гарантированно убивающей всех особей с нормальной природной чувствительностью) амбуша - 0,01% л.в. Однако достигнутый в этих опытах уровень устойчивости практически не отличался от уровня, полученного путем обычной селекции.

2. Hetaseiulua occidentalia Nesbitt. В эксперименте ПО селекции метасейулюса на устойчивость к амбушу мы использовали для отбора одновременно не менее 10 тысяч особей метасейулюса. Селекцию вели методом выпуска клещей на предварительно обработанные пестицидом растения, срезая и перекладывая необработанные растения с метасейулюсом на обработанные.

Результаты отбора представлены на табл.2. Селекция велась на протяжении 137 поколений. Было проведено 30 обработок. На протяжении первых трех обработок аибушем в концентрации 0,0001# п.в. гибель акарифага составляла 83-G9J. Однако после четвертой обработки смертность метасейулюса снизилась по 29?'. Это позволило увеличить селектирующую концентрацию амбуша в пять раз (до 0,000сй), что привело к смертности популяции на 94%. Однако уже в шестой обработке смертность снизилась по 47,53, что вновь позволило увеличить селек-тируто'цу» концентрацию при седьмой обработке. Таким образом мы увеличивали концентрацию амбуша после каждого снижения смертности в предыдущей обработке. Все обработки вели после восстановления численности популяций до исходной. К 24-му поколению селектирующая концентрация была увеличена в 10 раз, к СЗ-му - в 100 раз, к 84-му -

Селекция хищного кле'да метасейулюса на устойчивость к амбушу

I. Хо,п селекции

: Число Концентрация,

обра- | поколений % л.в.

боток

I Р 0,0001

2 6 0,0001

3 10 0,0001

4 13 0,0001

5 16 0,0005

6 21 0,0005

7 24 0,001

8 40 0 001

9 44 0,001

10 48 0,002

11' 50 0,002

12 55 0,003

13 60 0,004

14 63 0,01

15 66 0,01

16 69 0,01

17 72 0,01

18 76 0,015

19 80 0,015

20 84 0,02

21 89 0,02

22 94 0 02

23 99 0,03

24 104 0 03

25 107 0,03

26 114 0,03

27 121 0,03

28 126 0,04

29 132 0,03

30 137 0,03

Число . обработок

О 28

29

30

31

Эффективность обработок {% гибели)

83.0 оо,В

89.1 29,0 94,0 47,5 71,0 €6,0 59,7 Ь0,0 37,7

67.2

60.5 93,0 57,7

65.0

53.1 77,4

45.7

89.8

79.3

71.0

90.4

79.1

82.9 85,0 59,0

60.2

70.6

63.5

2. Развитие резистентности метасейулюса к амбушу

Поколение

СК,

50

СК95

ПР (показатель резистентности)

Р

114 121

126 132

0,000019

0,0035

0,0031

0,0057

0,007

0,0002 0,026 0,041 0,055 0,046

1,64 1,ЙЗ 1,48 1,72 2,04

203.0

163.1 300,0 368,4

в 200 раз, а к 99-ку - в 300 раз.

В 1989 г. в Крыму (Бахчисарайский район) на клене сотрупни-ком Вх 111Н "Магарач" И.Л.Гапонвком была собрана популяция метасей-улюса, которая была передана нам для испытаний. Токсикологический опыт показан, что популяция чувствительна к ФОС: СК^ карбофоса 0,0001; - 0,0027. Низкий показатель наклона пробит-ли-нии (1,2) позволил предположить, что в природных условиях произошла реверсия устойчивости хищника, но популяция гетерогенна и содержит примесь устойчивых особей. Это предположение подтвердилось в опыте по селекции метасейулюса на устойчивость к карбофосу (табл.3): после девяти обработок на протяжении 18 поколений устой-вость возросла более чем в 1000 раз, и препарат потерял токсичность для хищника при дозе значительно более высокой, чем используется в производстве.

Таблица 3

Селекция метасе"улоса на устойчивость к карбофосу

I. Ход селекции

обработок

Числ о поколений

Концентрация препарата, 'л п.в.

Эффективность 'обработок гибели)

1

2 3 а

5

6 7

2 5 9

II

13

14

15 18

0,00025

0,0005

0,001

0,005

0,01

0,05

0,1

0 5

0,5

42,5

28.4

22.5 52,2 20,1

10.5 23,1 46,7

32.6

2. Устойчивость метасейулюса к карбофосу

Число ; Число обработок: поколений

СК

•50

:СК,

■95

0 Р 0,0001 0,0027

9 19 При 0,5 не достигается

ПР

1,2

Более 1000

3. АтЫуаехиз тскепаге! ЗсЬ. ех Рг. Нами была проведена селекция энтоыо-акарифага на устойчивость к карбофосу. Карбофос срепнетоксичен для амблисейуса (СКзд 0,0021), и поэтому мы начали селекшю с довольно высокой концентрации препарата - 0,03£ п.в. Довольно быстро (4 обработки на протяжении 20 поколений) эффективность обработок снизилась с 92,1% до 27,ЭЙ. Увеличение селектирующей концентрации по 0,1?! повысило смертность популяции до 95,ЕЙ, однако в последующих обработках выживало ло 70^ особей в популяции. Несмотря на то, что селектирующая концентрация была увеличена только в пва раза, устойчивость возросла почти в десять раз и препарат перешел в разряд среднетоксичных в отношении А. пскепг1е1 (СКэд 0,019£, СКо& 0,23).

Следующим этапом нашей работы было получение резистентной к пиретроидам расы амблисейуса. Предпринято несколько попыток селекции рипкордом, сумици.дином, амбушем, но все они окончились безрезультатно. Мы пришли к выводу о том, что возможной причиной неудачи были высокие селектирующие позы препаратов, подобранные с расчетом вызвать гибель 90-59$. Если мутация устойчивости содержится в исходной популяции в гетерозиготном состоянии, то столь высокая смертность может привести к снижению гетерогенности популяции и скорее к потере нужной мутации, чем к её отбору. Поэтому в одном из опытов мы начали отбор рипкордом в концентрации, обуславливающей гибель около 5($ (табл.4).

Таблица 4

Селекция А. тскепг1е1 на устойчивость к рипкорйу

I. Ход селекции

№ обработок

Число поколений

2

Концентрация препарата,

"Т

Эффективность 'обработок,

1

2

3

4

5

6

Р 8 13 24 27 32

0,0005

0,0015

0,0015

0,002

0,005

0,005

11,0 56,1

52.4

20.5 57,8 45,8

1

Продолжение таблицы 4

7 : Р : 3 _ _: __ <1

0-1 0,005 24,5

в 4Ь 0,01 39,0

о 53 0,05 23,3

10 СО 0,1 2.5,0

II 61 0,2 31,9

12 69 0,5 61,8

13 69 0,5 73,5

14 93 0,5 £8,8

15 117 0,5 20,4

16 130 0,5 20,6

2. Уровень устойчивости

Число обработок Число поколений : ск50 : СК95 : ПР

0 Р 0,00013 0,0005 2,6 -

10 40 0,0095 0,068 1,9 73,0

15 И7 0,073 0,245 3,2 561,5

Из представленных данных видно, что, несмотря на постепенное повышение селектирующей концентрации (более, чем в 300 раз), эффективность обработок снижалась и через 117 поколений, на протяжении которых было провепено 15 обработок, устойчивость возросла более чем в 500 раз по СК^д. Таким образом нами была получена резистентная к пиретроипам раса амблисеГСуса.

3.2. Исследование природы резистентности

тности. Известно несколько механизмов устойчивости насекомых и клещей к ялам, которые можно условно разделить на механизмы детоксикации, механизмы, позволяющие избежать адсорбции летальной дозы яда (поведенческая резистентность), а также её абсорбции (пониженная проницаемость кутикулы) и механизмы, обеспечивающие нечувствительность мишени - мутантная холин-зстераза, пониженная проницаемость ионных каналов мембран и чупст-

вителыюсть нераной ткани. Мы исследовали механизмы устойчивости, используя различные ингибиторы детоксицирующих ферментов.

Результаты опытов представлены на табл.5. В опытах с пиперо-нилбутоксидом (ППБ) мы определяли наименьшую дозу ингибитора, вызывающую максимальный синергитический эффект. Как видно из представленных данных, ППБ в концентрации 0,0001/5 снижает резистентность только в 2,9 раза, а в концентрации 0,01$ - в 36,9 раза. Дальнейшее увеличение дозы ингибитора (до 0,02£Ю не повлияло на синергитический эффект. Впоследствии в опытах с ППБ и другими ингибиторами, мы установили, что высокие дозы ингибиторов обладают определенной токсичностью для тест-объекта. Поэтому в опытах с трибутилтритиофосфатом (ТВТФ) и лиэтилмалеатом (ДЭМ) мы использовали их максимальные сублетальные концентрации, что значительно упрощало постановку опыта, не искажая результатов.

Показатель КСД (коэффициент синергитического действия) вычисляли с поправкой на контроль (т.е. КСД для чувствительной популяции). В этом случае .

ксд = а /ск50(И)/ск50(с + и)7 /s /ск50(и)/ск50(с + И)7,

к - устойчивая популяция; 3- чувствительная популяция; СКзд(И) _ СК50 инсектицида; CK^q(C + И) - CK^q инсектицида после воздействия синергиста.

Установлено, что в метаболизме амбуша у резистентной популяции метасейулюса основную роль играют микросомальные монооксигена-зы (при воздействии ППБ КСД = 26,4). Отмечена повышенная активность неспецифических эстераз (при воздействии ТБТФ КСД = 2,5) и глутати-он- трансферазы (при воздействии ДЭМ КСД = 3,4). Известно, что неспецифические эстеразы осуществляют гидролиз не только пиретрои-дов, но и Ф0С. Глутатион-трансфераза также играет важную роль е детоксикации Ф0С, обеспечивая коньюгацию молекул инсектицида с эндогенным глутатионом. Поэтому вполне объяснима повышенная перекрестная устойчивость к Ф0С резистентной к амбушу популяции метасейулюса. (табл.8) . Известно, что глутатион-трансфераза специфична в отношении метильной группы S0C. В наших опытах показано, что если показатель резистентности к карбофосу (препарату.с метоксиль-ной группой) составил 11,7, то к этафосу (препарату с этсксильной группой) - 1,9.

Результаты ингибиторного анализа механизмов резистентности мстпсейулвса к амбушу

Голубкин Я

Ингибитотэ

г!аимено- .понпентра-шшие |ция, %

: «зо

;амоуша, п.в.

кед

кед

с поправкой на к он то оль

5 - - 0,00003 - -

R - - 0,0048 - -

R ППБ 0,0001 . 0,00165 2,9 2,1

Н ППБ 0,001 0,00041 И,7 0,4

R ППБ 0,01 0,00013 36,9 26,4

R ППБ 0,025 0,00014 34,3 24,5

S ППБ 0,01 0,000021 1И -

S лэм 0,01 0,00003 1,0 -

R дэм 0,01 0,0014 3,4 3,4

S ТБТФ 0,025 0,000016 1,9 -

н ТБТФ 0,025 0,001 4,0 2,5

Генетика и реверсия устойчивости. Характер наследования резистентности фитосейулюса определяли по отношению к карбофосу. Устойчивость самок не отличалась от реэистентшх родительских форм, то есть наследовалась как полностью доминантный признак (табл.6; рис.1). Не отмечено и разницы в реципрокных скрещиваниях, что говорит об отсутствии цитоплазматического влияния материнского организма. Следующим этапом работы было определение числа генов, участвующих в контролировании признака резистентности, для чего провели возвратные скрещивания гибридных самок ^ с родительскими формами.

При скрещивании гибридных самок с доминантной родительской формой (резистентным самцом)1^ак и следовало ожидать, было единообразным и повторяло устойчивость резистентных самок исход-но1 популяиии (состав потомства: половина гетерозигот, половина гомозигот по устойчивости). В потомстве от анализирующего скрещивания с рецессивной родительской формой (чувствительным самцом) одна часть особей погибла при воздействии малых доз препарата, другая - оставалась живой и при воздействии пысоких. Кривая смертности образовывала "плато" на уровне 5($ гибели, то есть диагностируемые классы особей составляли .равные поли в потомстве.

Наследование устойчивости к карбофосу у равных поколений Йг.рпг£;:].га111з.

Скрещивание

Р (эхе) Р (ИХН)

Р-1 (БХЛ) Р^НХБ)

^/^(аСЮХЗ/

Показатели токсичности карбофоса, Я п.в. : ПР

С1%0 СКо5 1 по СК-д

0,00039 а, 0017 1,0

0,047 0,252 120,5

0,047 0,230 120,5

0,053 0,281 135,8

0,038 0,290 97,4

0,00178- 0,210 -6,0170 4,3-43,5 *

Результаты эксперимента явно указывали на расщепление по одному главному гену (50% гомозигот по чувствительности + 5СК фенотипически устойчивых гетерозигот). Поскольку величина гибели каждого из предполагаемых классов известна из токсикологических определений устойчивости родительских форм и гибридов по отдельности, ожидаемая гибель была вычислена как сумма гибели классов, составляющих рг , помноженной на волю каждого из классов н общем числе потомков (в случае расщепления по одному гену - 0,5). По точкам гибели, ожидаемой от каждой из использованных з опыте концентраций карбофоса, построена и нанесена на рисунке теоретическая кривая смертности р2. Статистическая проверка гипотезы метолом % показала, что разница между теоретически ожидаемой и наблюдаемой гибелью клещей недостоверна (%~<3,8; Р>0,05), то есть гипотеза о расщеплении по одному гену, контролирующее резистентность, подтверждена.

Аналогичным образом была исследована генетика устолчизссти метасейулюса к амбушу. Из данных, приведенных в табл. 7 и рис.2, видно, что устойчивость к амбушу наследуется как неполностью доминантный признак. При этом направление скрещивания имеет некоторое значение, так как потомство от резистентных самок с чувствительными самцами устойчивее, чем потомство от чувствительных самок и резистентных самцов.

Рис. I. Наследование резистентности к карбогосу у

1вдгозеги1из р^гзапхНз А.Н.

I - чувствительная популяция ( 5 ); 2 - устойчивая ( Е); 3 - у^ка) ; 4 _ Р1 (юса) ; 5 - ; 6 - ?2(?,:;=) ;

пунктир - теоретическая кривая расщепления ?2(г1:сз) по одному гену устойчивости.

Устойчивость гибридов второго поколения после скрещивания гибридных самок с резистентным самцом была промежуточной между резистентными родителями (СК^0,0048)и гибрипаг/и первого поколения (СК50 0,0012-0,0018).

Гибриды от анализирующего скрещивания образовали пологую кривую смертности, которая показала, что произошло расщепление по одному главному гену. Статистическая проверка подтвердила, что разница между теоретически ожидаемой и наблюдаемой гибелью клещей недостоверна, то есть гипотеза о расцеплении по одному гену, контролирующему резистентность, подтверждена.

Известно, что у й-итосейип происходит оплодотворение всех яиц, но в части яиц отцовские хромосомы резорбируют, и они остаются гаплоидными. Поскольку вместе с отцовским набором хромосом гены резистентности попадают и в "самцовые" яйца, мы проверили их возможное влияние на фенотип сыновей. Из представленных данных видно, что как и у тетраниховых клещей, сами несут лишь геном матери, т.е. отцы не передают своих признаков сыновьям в первом поколении.

Таблица 7

Наследование устойчивости к амбушу у разных поколений М.осс1аепга11з.

Скрещивание

Показатель токсичности

ПР

! СК50, % д.в. : СК95, % а.в.

Самки

Р (ь-хэ) 0,000023

Р (НХК) 0,0048

Р^хн) 0,00125

Р^ихэ) 0,0018

р2А1(зхе)ХЙ/ 0,002

?2Д1(5ХЕ)ХЗ/ 0,00017

0,00018 0,0335 0,006 0,0114 0,02 0,024

1,0

208,7 54,3 78,3 66,9 7,4

Самц ы

Р (БХЭ) Р' (НЖ) Г^БХИ)

0,000033

0,0018

0,000055

0,00062

0,098

0,00042

1,0

54,5 1,6

CCOOOt Q0Q01 0001 0,01

' ' концентрация °/„ по д. в. амбуша

Рис. Генетический анализ резистентности метасейу-тсса к акбусу.

I - 'О, 2-Ii, 3-F-, ÍSX21) t '1-F1 (iL'ÍS), S-Fgíf!™). S-?;, (К, X'j ) ' 7 - теоретическая кривая расцепления по одному гену устойчивости в У-A P,XS).

Нами исследовались влияние мутаций устойчивости на биологические показатели и скорость .реверсии резистентности хищных клещей.

Устойчивость фитосейулюса к фосфорорганическим соединениям следует отнести к типу стабильной резистентности, не требующей поддерживающего отбора.

Изучение репродуктивного потенциала чувствительных и устойчивых клещей подтвердило их одинаковую конкурентоспособность.

Сравнение биологических и демографических показателей устойчивого и чувствительного к амбуиу метасейулюса такке не выявило плейотропного влияния мутации устойчивости на биотический потенциал резистентных клещей. Это обеспечивает значительную стабильность устойчивости. Тем не менее некоторая реверсия устойчивости к амбушу в отсутствие отбора все же наблюдается.

Медленную реверсию наблюдали и к £ОС: за 150 поколений устойчивость метасейулюса снизилась в 4-6 раз, тогда как у Anblysei-us fallacis за этот же период времени реверсии устойчивости к <ЮС не было, но устойчивость к севину снизилась в три раза.

Следует отметить, что при использовании резистентных рас хищных клещей в агроценозах мы не только не наблюдали снижения уровня устойчивости, но и обнаружили его увеличение по отношению к фоновым инсектоакарици.дам, использующимся в системе химических обработок.

Диапазон перекрестной устойчивости резистентных рас. В данном разделе обобщены собственные и литературные данные по перекрестной устойчивости хищных клещей, резистентных к ФОС, ка$ба-матам и пиретроидам.

Устойчивость хищных клещег< к какому-либо фосфорорганическому препарату, как правило, распространяется и на другие препараты этой группы. Однако уровень и спектр перекрестной групповой устойчивости зависят от химического строения эфирных групп препа-рата-селектанта: клещи, устойчивые к 50С с этоксильной группой, чувствительны к ФОС с метоксильной группой и наоборот. Однако популяция фитосейулюса устойчивая к карбофосу и подвергнутая дополнительной селекции этионом, была устойчива практически ко всем ФОС (табл.8).

Устойчивые к ФОС хищники остаются чувствительными к пиретроидам, по отношению же к карбаматам некоторые виды (a.fallacis,

Перекрестная устойчивость фитосемил к пестицидам разных химических групп

Вис, препарат-селектант : Пестициды ; Химическая ; группа : ск : s 50 : R ПР

Нх. persiiailis Актеллик Ф0См) 0,000024 0,0016 66

Эти он Гардона tl 0,00022 0,043 195

Карбофос 1« 0,00035 0,044 126

Би-58 0,00015 0,02 133

Валексон сосэ) 0,000019 0,0098 200

Фозалон 1» 0,00025 0,022 86

Эти он и 0,0003 0,426 1420

Севнн кпрбамат 0,019 Не пости- 100

гается

Элокрон 0,00062 0,051 83

Лмбуш Нирст- 0,000042 0,000046 I

роил

К. occidentalie Актеллик фос ■ 0,027 0,14 5

Амбуш Карбофос И 0,0022 0,022 10

Би-58 и 0,0033 0,02 6

Лмбуш Пирет- 0,000019 0,0057 300

роид

Децис м 0,0000021 0,0000023 I

Ровикурт 0,00000085 0,00115 1412

Фастак 11 0,0000003 0,0000013 4

Циперметрин tt 0,00001 0,00004 4

А. nckenaiel Амбуш Пирет- 0,0013 0,13 100,0

Сумицидин роид 0,000016 0,09 5225,0

Рипкорд Каратэ tl 0,0000011 0,006 5454,5

Рипкорл н 0,00013 0,0095 73,0

Карбофос <К)С 0,0027 0,0031 1Д

Ьи-58 к 0,027 0,2 7,4

Этафос и 0,0007 0,0096 13,7

ЮС с метоксильноп группой

_)

•ЮС с этоксильной группой

- -

М. оссл.с1е^а11з) не облапают, другие ( Й1. регзхпаИэ, Т. ругЛ обладают перекрестной устойчивостью.

Высокоустойчивая к амбушу популяция метасейулюса показала перекрестную устойчивость к другому препарату перметрина - ро-викурту, но оказалась чувствительна к другим пиретроидам. Наоборот, резистентный к рипкорду А, тскепгхе! проявил перекрестную устойчивость ко всем пиретроидам и некоторым фосфорор-ганическим препаратам (Би-58, этафос).

Различный спектр перекрестной устойчивости рас фитосейид, резистентных к определенному препарату, безусловно, говорит о том, что в процессе отбора были отселектированы разные гены и механизмы устойчивости у разных видов.

Поведенческая и оепеллентная .устойчивость. В данном разделе описаны методика и результаты опытов по определению поведенческой (способность избегать адсорбции летальной дозы пестицида) и репеллентной (к отпугивающему действию пестицида) устойчивости фитосейид.

3.3. Теоретические аспекты проблемы резистентности полезных видов к пестицидам (обсуждение)

Анализ и оценка имеющихся в литературе случаев образования устойчивых к пестицидам популяций полезных членистоногих представляют определенные трудности из-за слабой, во многих случаях, выраженности признака. Трех-пятикратное повышение среднего уровня устойчивости не обязательно сопровождается отбором особей, обладающих специфическими по отношению к данному препарату факторами устойчивости. Отбор в пределах нормы фенотипического выражения признака, определяемой величиной наклона пробит-линии, является чаще всего неспецифической устойчивостью или толерантностью. В этом случае отбор кокет происходить на выносливость к неблагоприятным факторам вообще, а получаемая неспецифическая устойчивость по-лигенна и слабо выражена. С другой стороны, фенотипическая дисперсия может быть обусловлена и генетическими различиями между особями. Поэтому в некоторых случаях отбор в пределах нормы реакции признака может привести к практически важному результату. Это относится, в первую очередь, к селекции на устойчивость к среднетоксич-ным препаратам, дающим небольшой показатель наклона пробит-линии.

При отборе высокотоксичным пестицидом селекционный сдвиг в продолах нормы реакции не может иметь практического значении. Поэтому селекция проводится только в расчете на выявление мутантов с устойчивостью на два-три порядка более высокой, чем у особей исходной популяции. Известно, что такие мутации возникают с частотой одна на сто тысяч или миллион особей. Поэтому попытки получения устойчивых рас из небольших по численности лабораторных популяций априори обречены на неудачу. Успех некоторых опытов по лабораторной селекции обусловлен тем, что во всех случаях для селекции использозались популяции с повышенной частотой устойчивых мутантов. То есть отбор шел с целью концентрации уже имеющихся факторов резистентности, что является относительно несложной задачей. Образование же резистентных популяций полезных членистоногих из исходно чувствительных наиболее часто происходит в агроценозах, где отбору благоприятствует высокая численность и гетерогенность природных популяций. При этом отмечена прямая зависимость между длительностью и интенсивностью применения пестицида и уровнем устойчивости, приобретенной к нему популяцией хищника.

Вместе с тем, из-за притока иммигрантов и некачественной селекции, образование гомогенных по устойчивости популяций в природе не происходит. Поэтому проведение лабораторной селекции наиболее целесообразно с целью гомозиготации генов устойчивости полевой популяции или получения популяции, устойчивой к среднетоксичному пестициду. Селекция на устойчивость к высокотоксичному пестициду монет проводиться только при наличии достаточно большой гетерогенной популяции. Целесообразность такой селекции показана фактами образования резистентных популяций (Ьитосейулюса в производственных биолабораториях.

Поскольку генетически близкие ролы и'виды характеризуются сходной наследственной изменчивостью, мы, имея примеры образования резистентных рас отдельных видов хищных клещей, могли бы рассчитывать на более широкое распространение этого явления хотя бы среди фитосейид. Однако процесс образования устойчивых популяций полезных видов происходит очень медленно. Если число видов вредителей, проявивших резистентность, возрастало с конца сороковых голов по экспоненте, и в настоящее премя известно 420 пилоп, устойчивых к тем или иным пестицидам, то устойчивость хищных и пара-

зитических членистоногих известна только в отношении 17 видое , включая и те виды, которые проявили невысокий уровень резистентности. Столь существенные различия во встречаемости устойчивых популяций между вредителями и их энтомофагами и акарифагами могут быть обусловлены разными причинами: недостаточным мониторингом резистентности полезных видов, их нецелевым статусом с точки зрения химической борьбы, низкой плотностью популяпий. Кроме того, если выжившие после обработки особи вредителя имели свободный доступ к пище и благоприятные возможности для размножения (вследствие снижения внутривидовой конкуренции), то выжившие особи эн-томо-или акарифага могут погибнуть из-за отсутствия или недостатка пищи. И все же основная причина - различия в природной чувствительности к пестицидам и активности детоксицируощих Ферментов. В настоящее время общепринято тете, что каталитические функции ферментов, детоксицирующих пестициды, появились у растительноядных насекомых в процессе длительной эволюции вследствие необходимости детоксицировать ядовитые продукты вторичного метаболизма растений. Американскими исследователями (Крофт, Стриклер, Морзе и др.) установлено, что активность алдрин-элоксидазы, выраженная в пкМ окисленного алдрина в минуту на мг белка, у восьми видов личинок чешуекрылых монофагов - 20,4, 15 видов олигофагов - 90,0, 12 видов полифагов - 297,4.

Усреднив токсикологические параметры для 25 видов фитофагов, 7 видов хищников и 8 видов паразитов, они установили, что ЛД^ севина для фитофагов 415,6, хищников - 70,3, паразитов - 25 мкг/г. В то же время пиперонилбутоксид повыиал токсичность пестицидов для фитофагов в 17 раз, для хищников - в 10 раз и для паразитов -в 8 раз. Поскольку синергизм пиперонилбутоксила основан на инги-бировании оксидаз со смешанными функциями, то природная толерантность фитофагов сэязывается именно с их активностью.

Мы полагаем, что универсальность отобранного механизма устойчивости также может быть косвенным показателем эволюционных потенций вила. Различный спектр перекрестной устойчивости резистентных к определенному препарату рас фитосейид говорит о том, что в процессе отбора были отселектированы разные механизмы устойчивости, и, следовательно, они достаточно разнообразны. Однако высокая в ряде случаев специфичность резистентности Фитоссйип по отношению к ире-парату-селектанту говорит о том, что ото разнообразие вынужденное,

обусловленное относительно бедной системой защитных реакций в сравнении с фитофагами, у которых спектр перекрестной устойчивости всегда шире. Показательны в этом отношении опыты по селекции и опрспелениуэ спектра перекрестной устойчивости у метасейул'эса, ггитосейулпса и амблисейуса. Фитосейулюс - монофаг (паутинные клещи) и практически значимых мутаций устойчивости этого хищника к пиретроиппм отселектировпть не удалось. Круг питания метасей.ул'оса несколько шире (паутинные клещи, эриофииды, типеиды, медвяная роса), но высокая степень устойчивости к амбушу не распространялась на другие пиретроиды. Амблисейус - полифаг (трипсы, паутинные и мучные клещи) и обладает ярко выраженной групповой перекрестной устойчивостью к пиретроилам.

3.4. Перспективы селекции и методические подходы

Получение резистентных рас полезных видов к вновь вводимым и используемым в практике пестицидам должно стать элементом биотехнологии в ближайшем будущем. Основные надежды, при этом, связаны с поиском перспективных видов и их искусственной селекцией, позволяющей преодолеть многие препятствия, возникающие в агроце-нозе: представляется возможность проводить обработки с заданной эффективностью при высокой численности и плотности популяции, постоянно следить за уровнем устойчивости, своевременно снабжать пищей хищников, выживших после обработки. При проведении селекции первостепенное внимание должно быть уделено её методике, направленной на выявление всех возможных генетических ресурсов вида. В главе рассмотрены и обсуждены методические, подходы при выборе препарата-селектанта, вила и популяции, ведении селекции (методика обработок, массовость отбора, эффективность и продолжительность селекции).

4. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕЗИСТЕНТНЫХ РАС ХШЦПИХ КЛЕЩЕ!! В ИНТЕГРИРОВАННОЙ БОРЬБЕ

4.1. Испытание эффективности резистентного к 'ЮС фитосеПулюеп ОфК'ктишюсть применении резистентной популяции фитосойулюса на фоне производственных обработок карбофосом против тли и трипсов

проверяли в теплицах московских совхозов "Белая пача" и им.Горького.

Данные проведенных опытов представлены н таблице 9.

Таблица 9

Эффективность устойчивой и чувствительной популяции фитосейулюса на листьях огурца

Варианты

выпуска

фитосейулюса

Численность паутинного клеща (шт./лист)

.•Эсгйек'РиБН. фитосейулюса,

устойчивого 1чувствительно-фитосейулюса^го Фитосемулю-в дни учета :са в дни учета в контроль-;на контроль ном вариан-: те (без ака-т рифага) в ; пни учета

1-й 5-й : 1-й 5-й 1-й 5-й :устой-:чувст-:чивая :Еительн :попу- :попу-гляпия :ляшя

Выпуск на необработанные растения ЮЗ,2 3,8 183,8 8,0 59,8 285,0 99,6 99,1

Выпуск после обработки

карбофосом 275,6 25,0 101,5 279,1 103,4 305,6 95,4 9,1

Выпуск до обр'аб. карбофосом 294,1 154,7 81,6 246,6 151,9 442,4 77,4 8,2

Фитосейулюса выпускали в соотношении 1:15-1:20, а эффективность определяли по формуле:

Кт • 0? Э = I---1-----

к2 • ог

100

где Э - эффективность фитосейулюса;

Кт и Кр - численность паутинного клеща в контрольном очаге в 1-й и 5-й дни учета;

и ^2 ~ ™сленйость паутинного клеща в опытном очаге

1-й и 5-й дни учета.

Из представленных данных видно, что если на необработанных растениях обе расы одинаково эффективны, то на обработанных - очевидно преимущество резистентного фитосейулюса.

4.2. Интегрированная борьба с садовым паутинным клещом на винограде

Интродукция, акклиматизация и испытание эффективности метасейулюса против садового паутинного клеща на винограде. Автором были проведены интродукция метасейулюса и шюголетние наблюдения за приживанием хищника, динамикой его численности и фенологией на виноградниках Крыма, Грузии, Молдовы, Одесской области и Краснодарского края.

На рис.3, в обобщенном виде показаны основные периоды или (Тазы в динамике численности метасейулюса и сапового паутинного клеща, которые мы наблюдали после выпуска хищника. При исходно высокой численности :зс11.ргип1 происходит интенсивное размножение метасейулюса и в этом случае он может некоторое нремя превалировать по численности нал жертвой. В этот период происходит стремительное снижение численности садового паутинного клеща, а затем и метасейулюса. Впоследствии (или при исходно низкой численности БсЬ.ргип! ) мы наблюдаем "сосуществование" разреженных популяций хищника и жертвы.

Скорость расселения, нормы и схемы выпуска метасе.йулпса. Как показали наблюдения, расселение метасейулюса носит случайный характер и зависит от схемы посадки винограда (на широкорядных виноградниках метасейулгас расселялся медленнее), плотности популяции вредителя, скорости ветра, антропогенных и других факторов, практически не поддающихся учету. Мы наблюдали расселение метасейулюса в течение одного сезона с одного ряда на целую карту (5 га) и, вместе с тем, - лишь в пределах 50 метров от места выпуска.

Установлено, что норма выпуска может варьировать от 2-3 до 10 тысяч особей на гектар, а расстояние между рядами выпуска - от 50 до 100 метров.

Массовое разведение, сбор, хранение и транспортировка мета-сейулюса. Отработана технология производства метасейулюса, позволяющая получать 40-50 тыс.особей с м^, методика сбора, транспортировки и выпуска. При необходимости метасейулюса можно хранить в бытовом холодильнике в течение 15-20 дней.

Влияние пестицидов на метасейулюса. Метасейулюс обладает природной толерантностью к акарицидам, афицидам и фунгицидам, и присб-

-ве-

ретенной устойчивостью к фосфорорганическкм и некоторым- пиретроид-ньтм инсектоакариципам. Приводится классификация испытанных препаратов по степени токсичности нля хищника и методика оценки их избирательного действия.

Вредоносность садового паутинного клеща на винограде и .экономическая эсМчективность применения метасойулюпа. Проведено исследование, целью которого являлось установление зависимости между численностью паутинного клеща, содержанием хлорофилла в листьях и (^отосинтетической продуктивностью винограда. Установлено, что при численности сапового паутинного клеща во второй половине сезона -15 особей на дм** йотосинтетическая продуктивность не снижается. Однако при плотности вредителя в 20-30 особей на дм** содержание хлорофилла сникается на 40?? и урожая - на 10^, а при 30-40 особях на дм^ - на СОЙ и 20%, соответственно. Порог вредоносности сэдоео-го паутинного клеща (5$ потеря урожая - 18-19 особей на дм^, т.е. приблизительно 15 клещей на лист).

В полевых опытах на вариантах контроля, где садовый паутинный клещ достигал численности, значительно (иногда в несколько раз) превышающей порог вредоносности (10-15 особей на лист), потери урожая составили 20-40/£, а потери сахара 10-1ЕЙ (в абсолютном выражении 2-3/,). Применение же метасейулюса позволяло на опытных вариантах не только сдерживать размножение вредителя, но и предотвращать потери урожая.

Пространственное распределение и мониторинг садового паутинного клеща на виноградниках. Нами были исследованы закономерности распределения паутинного клеща в кроне виноградной лозы, на лозах отдельно взятого ряда и на винограднике в целом.

I. Распределение садового паутинного клеща в кроне виноградной лозы. Сопоставление Фактической и теоретически ожидаемой численности паутинного клеща и его средней численности на всех и только заселенных листьях позволило определить закономерности заселения вредителем виноградной лозы и оптимизировать методику взятия проб. В течение вегетационного периода происходит перераспределение паутинного клеща от нижних листьев к верхним, от старых к более молодым. Для определения плотности популяции вредителя в весенний и осенний периоды следует брать листья из нижней и верхней частей побега, а в летний период - листья из средней части побега. При этом следует учесть, что численность клеща на учетных

Рис. 3. Периоды а динамике численности сапового паутинного клеща (сплошная линия) и метасейулюса (пунктир) на винограде.

ол• В сезон выпуска происходит размножение и расселение метасе^ул'юса, и снижение численности садового паутинного клеща. При исходно высоком численности сапового паутинного клеща (10 и более особей на лист) метасе"<улюс быстро накапливается и через некоторое время зачастую превалирует по численности над жертвой.

Втором период. В последующие после выпуска метасегулюса годы

наблюдается "сосуществование" разреженных популя-иий хищника и жертвы в соотношении 1:10,1:20." При исходно низкой численности жертвы такая динамика наблюдается уже в первый сезон.

Третп^пешсл. Недостаточное количество пищи, неблагоприятные условия перезимовки, применение токсичного иести-пипа могут привести к частично* или полной элиминации ме'тасе^улюса и размножению сапового паутинного клеща.

- 3.0 -

листьях при рекомендуемой методике взятия проб, как правило, на 20-25Й вше, чем в среднем на всех листьях побега. Различия в росте популяции вредителя на побег и на лист в весенне-летний период обусловлены интенсивным приростом зеленой массы побегов. С окончанием роста побегов в конце июля начинается быстрое увеличение средней численности сапового паутинного клеща на лист. Таким образом, рост побегов с мая по июль как бы скрадывает постоянное увеличение численности вредителя и в некоторой степени нивелирует его вредоносность.

2. Распределение садового паутинного клеща на кустах олного ряда и экспресс-метод определения его численности.

В результате статистического анализа обширных данных по учету плотности паутинного клеща в пробах листьев, взятых с отдельных рядов разных виноградников, установлена зависимость между средним числом клещей на лист и процентом заселенных вредителем листьев и получено уравнение, отражающее эту зависимость. Для оперативного контроля за численностью паутинного клеща на винограде предложена номограмма, по которой, зная процент заселенных листьев, легко определить численность клеща.

3. Распределение садового паутинного клеща на виноградниках. Для получения информации о фактическом распределении садового паутинного клеща было проведено 15 сплошных учетов его численности

на пятигектарных участках. Отдельный учет включал сбор листьев на 20 рядах (т.е. каждый пятый из 100-120рядов1. Приняв, что такая оценка плотности популяции предельно лучшая, по специальному алгоритму определили абсолютное значение относительной ошибки выборок разного размера. Оказалось, что размер выборки для участка можно ограничить 3-5 равноудаленными друг от друга рядами. Для практических целей важно знать, превышает или не превышает численность вредителя пороговые значения. Определить это можно с помощью предлагаемого графика, на котором регистрируются результаты учетов по трем рядам.

4.3. Опыты по применению метасейулюса в плодовых садах

Опыты по определению биологических и демографических показателей метасейулюса при питании на разных видах жертв показали,

что хищник одинаково эффективно уничтожает обыкновенного паутинного, садового и боярышникопого клещей.Однако при питании красным плодовым клещом (основным вредным пипом на плодовых в нашей стране) прожорливость, плодовитость и биотический потенциал мета-сейулпса оказались в 2-3 раза ниже, чем при питании, например, обыкновенным паутинным клещом. Тем не менее мы полагали, что интродукция метассйулюса может обогатить фауну садового агроценоза и обеспечить некоторую регуляцию численности плодовых клещей.

Многолетние наблюдения в яблоневых садах Крыма, Закарпатья, Краснодарского края и Молдовы показали, что метасейулюс приживается, размножается, расселяется и в большинстве случаев становится постоянным компонентом агроценоза яблоневого сада, достаточно эффективно контролируя численность красного плодового клеща. В диссертации это положение кироко иллюстрируется данными по динамике численности клещей. Отмечено, что большую роль в сохранении и эффективности метасейулвса в саду играют дополнительные источники питания: типеидьг, эриоФииды, тарзонемилы и др.

В совхозе "Перевальный" (Крым) для определния влияния хищника на зимующий запас красного плодового клеща был поставлен опыт с химическим исключением хищника. В сентябре ветки пяти деревьев яблони опрыснули эмульсией амбуша (0,1% по д.в.). Затем на обработанные и необработанные ветки установили ловчие пояса (куски ткани размером 4x30 см). В марте следующего гола, перед выходом клещей после зимовки, пояса сняли и просмотрели. Выяснено, что численность метасейулюса на ветках без химической обработки колебалась от 25 до Ь0 самок на I попе. Зимующих яиц красного плодового клеща не обнаружили. В поясах же на ветках, обработанных инсектицидом, метясегулюса не было, а число зимующих яиц вредителя составляло 70-116 кт. на I пояс. Следовательно, наличие мета-ссйулюса приводит к снижению зимующего запаса красного плодового клеща.

4.4. Использование резистентных рас хищных клещей в интегрированной борьбе (обсуждение и практические рекомендации)

При использовании резистентных хищников разработка интегрированной борьбы помимо обычных элементов (приемы агротехники, определение порогов вредоносности, методов мониторинга и т.д.)

- 32 -Варианты

Рис. 4. Тактика интегрированной борьбы с садовым

паутинным клещом на винограде после выпуска метасейулюса на основе сигналов о численности вредителя.

Б® Р5 в и а. н т_. Если численность садового паутинного кле'ца не

превышает .уровня эффективности" (или контоолироэа-ния) акаригага - 5 особей на лист (или 60?, заселенных листьев) защитные мероприятия не проводятся.

Второя_вариант. Если численность садового паутинного клеща превышает уровень эффективности акаоисгага и достигает 6-10 особей на лист (или 60-65% заселённых листьев) необходимо провести выпуск метасейулюса.

ТВ§ти2_ваоиант. Если численность сапового паутинного клеща достигает или превышает порог вредоносности - 15 особей на лист или 85-10СК'заселенных листьев, необходимо применить акарипид и повторно выпустить метасейулюса.

включает: оценку эффективности акарифага против вредных клещей тнного агроценоза, прпгчттольную оценку устойчипопти хищника и жертвы к пестицидам, определенно способа применения хищника. Кап-работка и суммарная оценка этих элементов позволила нам определить и изложить в панной главе тактику и практические рекомендации по применению метасейулюса на виноградниках (рис.4) и в плодовых садах, наметить дальнейшие перспективы исследований.

основж выводы

1. Классически^ пример разрушения человеком природных экосистем вследствие применения политоксичных пестицидов - вспышки размножения тетраниховых нлещег' и возрастание их практического значения. Проведенными исследованиями установлено, что восстановить естественную регуляция в условиях интенсивных технологий можно на основе получения (путем поиска, селекции или интродукции) и использования резистентных к пестицидам рас хищных клеще-"-фитосемид.

2. В крупных агропромышленных зонах, на больших площадях многолетних монокультур (Ставропольский и Краснодарский края, Молдавия, степная часть Крыма) фитосейиды практически отсутствуют. 3 агроценозах соседствующих с естественными биоценозами (сады и виноградники Грузин, Армении, предгорной части Крыма и др.) обнаружены популяции нескольких видов фитосейид ( МДог^рНиз, Б.И-Иагип, ЙиреггптШз, Л • Г йп1ипс11 сие , Л1\.Ьа11пао И Др.) С повышенной устойчивостью к фоефорорганическим препаратам. Таким образом, отбор устойчивых популяций хищных клещей наиболее вероятен в условиях их постоянного притока ип природных резерваций.

3. С тремя интролупированшми пиппми хищных клещей ( 1Ъ.риги1-тНз, К.осс1ёепгаИз, Л.пскспг1е1 ) проведены опыты по

их селекции на устойчивость к фоефорорганическим, карбаматным и ли-ретроидным инсектицидам. Установлено, что увеличение устойчивости к средкетоксичнмм инсектоакарицидам на порядок вполне достижимо и может иметь практическое значение; получение внсокореэистентных (в 100 и более раз) к сильнотоксичным пестицидам рас - задача значительно более сложная, решение которой требует специальных подходов и может быть не всегда успешным.

4. Редкие случаи образования и внявления резистентных рас хищных клещей могут быть обусловлены их нецелевым статусом, недостаточным мониторингом резистентности, разреженностью популяций, неадекватны?-« возможностями размножения после химических обработок вредителей и хищников, их различиями в природной чувствительности к пестицидам, а главное - различиями в наборе и активности детоксицирующих ферментов. С учетом этих причин и на основании имеющегося опыта разработаны методические подходы при селекции полезных видов на устойчивость к пестицидам и получены высокорезистентные к <ЮС и пиретроидам расы хищных клещей - мета-сейулюса, фитосейулюса и амблисейуса.

5. Исследована генетическая природа устойчивости фитосейулюса к фосфорорганическим препаратам и метасейулюса к амбушу. В обоих случаях установлены доминантное выражение и моногенетический контроль резистентности. Ингибиторный анализ биохимических механизмов резистентности показал, что в метаболизме амбуиа у резистентной популяции метасейулюса основную роль играют микросо-мальные моноксигеназы. Отмечена повышенная активность неспецифических эстераз и глутатион-трансферазы.

6. Установлена нейтральность плейотропии мутаций устойчивости хищных клещей в отношении биологических и демографических показателей, что обуславливает .незначительную скорость реверсии устойчивости. В агроценозах стабильность резистентности обеспечиваем ся в течение многих лет проводимыми химическими обработками; при содержании хищных клещей в лаборатории "поддерживающий отбор" достаточно проводить каждые 10-15 поколений. Особенности наследования (доминантность или рецессивность) также играют важную роль в стабильности резистентности.

7. Резистентность хищных клещей высокоспецифична и проявляется, как правило, в отношении химически родственных селектанту препаратов. Так, спектр устойчивости фитосейулюса к ФОС зависит от строения эфирных групп лрепарата-селектанта. Резистентность мета-сейулюса к амбушу распространяется только на другие препараты пер-метрина, тогда как у амблисейуса установлена ярко выраженная перекрестная устойчивость ко всем пиретроидам. По-видимому, как потенциал резистентности, так и диапазон перекрестной устойчивости находятся в прямой зависимости от степени полифагии хищников.

В. Разработаны метопы количественной оценки поведенческой (т.е. способности избегать адсорбции летальной дозы пестицида) и репеллентной.(к отпугивающему действию препарата) устойчизостей паутинных и хищгагх клещей. Установлено, что репеллентная устойчивость резистентных популяций хищных клещей интенсивно возрастает и играет важную роль в проявлении их эффективности.

9. Проведены испытания пффективностк резистентной к ФОС популяции фитосейулэса и разработаны рекомендации по её использованию на огурце в защищенном грунте. Установлено, что использование резистентной популяции Дштоссй.улпса позволяет интегрировать биологический метол борьбы с паутинным клещом с химическими обработками против тлей, трипеов и бслокрнлки, сократить расход акарицидов и биоматериала.

10. Интропуциропан и акклиматизирован новый для (фауны Евразии вид хищного клеща - метасейулмс западный. Изучены его биотический потенциал при питании на разных видах жертв, устойчивость к пестицидам, биозкологические особенности (скорость расселения, перезимовка, регуляторная роль и т.д.). Разработаны методы массового разведения акарифага, хранения, транспортировки, оценки токсичности пестицидов, проведения выпусков и наблюдений.

11. Изучены вредоносность и пространственное распределение популяций паутинного нлеща на винограде. Установлена зависимость между численностью паутинного клеща, содержанием хлорофилла в листьях и Фотосинтетической продуктивностью винограда, и экспериментально определеш пороги вредоносности. На основании пыявленных закономерностей распределения паутинного клеща в кроне виноградной лозы и на виноградниках предложена методика взятия проб и экспресс-метод определения численности вредителя.'Обоснована тактика борьбы с паутинным клещом на ниногралниках и зависимости от уровней численности вредителя.

12. Разработан, испытан и внедрен в садах и на виноградниках биологический метод борьбы с тетраниховыми клещами на основе использования резистентной к пестицидам популяции хищного клеща мета-сейулюса западного. Интродукция и долговременное обоснование мета-сейулюса в агроценозах, обеспечивает регуляцию численности паутинных клещей на уровне ниже порога экономической вредоносности, позволяет сократить обработки акарицилами и перейти к системе экологически безопасной (на основе применения биологических и гормональ-

ных препаратов против плодсповрежпапщих насекомых) борьбы с вредителями. На новое средство биологической борьбы разработаны и утверж дены технологическая карта, техническ::о условия и технологически;! регламент.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Г.А.Бегляров, И.В.Зильберминц, А.З.Петрушов, Обнаружение устойчивой к фосфорорганическим пестицидам популяции хищного клеща ^'пугозе1и1из рсгз1п1Из А.Н.Материалы УП съезда ВЭО, 1974,11,2324.

2. И.В.Зильберминц, А.З.Петрушов. Онтогенетические изменения реакции на воздействие пестицидов в чувствительной и устойчивой расах паутинного клеща ( Те^апусЬиз игисас КооИ. ).Онтогенез,197с т.б, № 6, с.602-С07.

3. А.З,Петрушос, Е.В.Зеленкова. Методы биологической и токсико логической работы с фитосейулюсом. Защита растений, 1976, ,N8,19-20.

4. И.З.Зильбермини, А.З.Петрушов, Л.М.Куравлева, Ю.Н Сапеев. Методические указания по рациональному использованию современных акариципов в борьбе с резистентными популяциями паутинного клеща. М."Колос", 1977, 32 с.

5. А.З.Петрушов, М.Н.Климачев, И.В.Зильберминп.Испытание эфёеи тивности резистентной популяции фитосейулюса на фоне химических обработок в защищенном грунте. Тез. докл. Вс. совещ."Биол. защита овощных культур от вредных организмов", Кишинев, 1977, с.33-35.

, 6. А.З.Петрушов, И.В.Зильберминц, М.Н.Климачев.Образование устойчивых к пестицидам популяций фитосейулюса в производственных биолабораториях. Тез. докл. Всесо-кз. сов. :1Биол.защита. овощных культур от вредных организмов", Кишинев, 1977, с.70-71.

7. Г.А.Бегляров, И.В.Зильберминц, А.З.Петрушов, М.П.Климачеп. Методические указания по испытанию оМязктипности ('итосейулюса, устойчивого к фосфорорганическим пестицидам. М."Колос", 1977, 14 с.

•8. Г.А.Бегляров, М.В.Зильбарминп, А.З.Потругаов. '.Резистентная к инсектоакарицилам раса фитосейулюса и пути её применения в системе интегрированной борьбы с вредителями закрытого грунта. В кн. "Биологический метод борьбы с вредителями и болезнями растений в закрытом грунте". М."Колос", 1978, с.51-63.

9. Н.Н.Кузнецов, А.З.Петрушов. Применение устойчивой к ядохимикатам расы хищного клеща метасейулюса в биологической борьбе с клещами. В сб."Вредит, и болезн. растений", Алма-Ата , 1978, 67-69.

10. И.В.Зильберминц, Н.¡1.Кузнецов, А.З.Петрушов. Опыпы по выпуску резистентного к' '^осфорорганическим препаратам хищного клеща Г.е1;;;сеаи1из осс1<Зепга:1.ас И. в агроценозы Крыма .Докл .ВАСХНКЛ , 1573, с.14-16.

П. А.З.Петрушов, И.В.Зильберминц. Генетика устойчивости фи-тосейулюса к фосфорорганическим препаратам. В кн."Биол.основы рацион. использсз.?кивотн. и растит, мира.", Рига, Зинатне,1976, 274275.

12. А'.З.Петрушов, Н.Н.Кузнецов. Биологическая характеристика хищного клеща метасейулюса при питании на разных винах жертв". В кн."Биол. основы рацион, использов. животн. и растит, мира", Рига, Зинатне, с.276-278.

13. Н.Н.Кузнецов, А.З.Петрушов, И.В.Зильберминц, П.3.Липшиц. Методические указания по биологическому метолу борьбы с растительно ялными клещами в плодовых садах и на виноградниках. 51лта,197Н, 24с.

14. А.З.Петрушов. Интегрированная борьба с растительноядными клещами. М.ВАСХ1ШЯ, ВШИТЗИСХ, 1979 , 48 с.

15. Н.Н.Кузнецов, А.З.Петрушов.Биологическая борьба с клещами в садах и на виноградниках с помощью хищного клеща метасейулюса,устойчивого к пестицидам. Семинар по экономич. порогам вредит, хлопч. и перспективы биол. метода борьбы.Ташкент,1979, с.48-57.

16. И.В.Зильберминц, А.З.Петрушов. Доминантность устойчивости акарифага РЬ^озеаи1из рсгзатШз л.Н. к фосфорорганическим соединениям и её практическое использование. Сх.биология, 1960, т.ХУ, к 6, с.882-887. •

17. Н.Н-Кузнецов, А.З.Петрушов. Эффективный способ биологичес кой борьбы с растительноядньки клещами. Эффективность защиты инт-род. культур от вредных организмов. Киев,"Наукова думка", 1981,5С-60.

18. А.З.Петрушов, М.Н.Климпчсв. Опыт применения резистентного к фо„сфорорганическим соединениям фитосейулюса в теплицах на фоне химических обработок. Эффентивн. защиты интрод. культур от вред-гага организмов. Киев,"Наукова думка", 1931, с.51-53.

19. Ц.И.Чубинишвшш.Ю.В.Коблианипэе, А.З.Петрушов, И.В.Зильберминц. Интродукция резистентного метасейулюса.Защита растений, 1982, Я, с.30-31.

20. И.З.Зильберминц, А.З.Петрушов. Методические указания по массовому разведению и испытанию эффективности резистентной популяции хищного клеща метасейулюса западного в борьбе с.паутинными клещами на винграде. М."Колос", 1983', 16 с.

21. А.З.Петрушов, М.К.Баришвили, Д.Т.Касрадзе. Опыт массового размножения метасейулюса. Защита растений, 1983, У- 9, 23 с.

22. А.З.Петрушов. Методика определения устойчивости хищных клещей к пестицидам. Методические указания по определению устойчивости вредителей и возбудителей болезней с.-х. культур

и энтомофагов к пестицидам. М.,1984, с.42-47.

23. А.З.Петрушов, И.В.Зильберминц. Биотически"» потенциал резистентных к <ЮС рас хищных клещей. В сб."Генетические последствия использов. х.с.з.р. и пути преод. резист. вр.орг. с учетом задач охраны окр. среды",Рига, 1984, с. 98-100.

24. А.З.Петрушов, Б.И.Гуревич. Экспресс-метод определения численности паутинного клеща Schizotetranybus pruni Oud .Доклады ВАСХНИЛ, 1985, I, с. 28-30.

'25. А.З.Петрушов, ¡1.11.Кузнецов, Г.Ш.ГолорЪпишпили. Обнаружение рас клещей-фитосейид, устойчивых к пестицидам. Пятое Бсссо-акарологическое совещание. Тез. докл., Фрунзе, 1985, с.172-173.

26.А.З.Петруков, А.В.Беляева. Закономерности распределения паутинного клеща. Защита растений, 1966, № 8, с.48.

27. А.З.Петрушов. Результаты интродукции в СССР резистентной к пестицидам популяции хищного клеща Ifctaseiulus occidentalis

Nesbiï (Acariña,Phytoseiiaae3°0JI- кИ?нал, 1987, 66, 5, с.674-660.

28. И.З.Лившиц, В.И.Митрофанов, А.З.Петрушов, Л.А.Рохас. Методические рекомендации по изучению растительноядных клещей. Ялта, ВАСХНИЛ, ГНБС, 1986, 48 с.

29. А.З.Петрушов, А.В.Беляева. Пороги численности паутинного клеща Sohizotetranychus ( pruni) vitícola Oui. на винограде и интегрированная борьба с ним. Докл. ВАСХНИЛ, 1987, 12, I8-2Í

30. А.З.Петрушов, А.Р.Васильев, Н.Н.Кузнецов. Акклиматизация метас.ейулюса в плодовых садах Крыма. Защита растений, 19Ш, 7, с.34-36. . ■ '

31. А.З.Петрушов. Резистентность хищных клещей-фитосейид и полезных насекомых к пестицидам. Информационный бюллетень ВПС МОББ, 1969, 26, с. 54-60.

32. А.З.Петрушов, А.Р.Васильев. Интродукция хищного клеща метасейулюса в плодовые сады Краснодарского края и Ростозской области. 6-е Вс.сов. по проблемам теоретической и прикладной акарологии, Ашхабад, 1990, с.25-26.

33. А.З.Петрушов, Е.В.Горшкова.Генетика устойчивости хищного клеща метасейулюса к амбушу. 6-е Вс. сов. по проблемам теорс

тической и прикладной акарологии. Ашхабад, 1990, с.96-97.

34. А^З.Петрушов. Метасейулюс против паутинного клеща. Защита растений. 1990, )? 6, с.17-18.

35. А .Z.Petrushov. Genetic and Biochemical of Ambush iiesi;;-

tance in 1'etaSeiulus occidentalis (Acariña, Phytosoeidae).Y 1 :1 Intern. Cong, of Acarology-, Czechoslovakia, 1990, 103-109.

36. В.А.Мацюк, Т.К.Верещагина, А.З.Петруаов. Интродукция хищного клеща i,-etaseiulu3 occidentalis N. з яблоневые сапы Молдавии. В кн. Интродукция и применение полезных членистоногих в защите растений. Ленинград, 1989, с.117-120.

37.А.З.Петрушов, Е.В.Горшкова. Развитие резистентности ме-тасейулюса западного к акбушу. Защита растений, 1990, ?"• 9, 24-25.

38. А.З.Петрушов. Хищные клещи. Определенно резистентности вредителей сельскохозяйственных культур и зоофагов к пестицидам. .Метод, указания, M., 1990, с. 64-67.

39. А.З.Петрушов, Б.И.Гуревич, А.А.Калуцкпй. Определение численности паутинного клеща на виноградниках для обоснования биологических мер борьбы с ним. В кн."Проблемные вопросы защиты винограда от вредных организмов", Ялта, с. 146-152.

40. A.Z.Petrushov. Selection de lacarien predateur Anblyseius

barceri pour la resistance au liipcord. Joint KPPO-IOBC/EFS Conf. on Plant Protect in Glasshouses. Iiaranowice (PL). 1991-06-04/07 , 62-6341. А.З.Петрушов. Методика определения поведенческой и репел-лентной устойчивости клещей. Современное положение с резистентностью вредителей, возбудителей болезной растений н сорнякоп к пестицидам. Тез. докл. 8 совещания, У.Ьа, 1992, с. 70-72.

42. А.З.Петрушов. Методические указания по массовому разведению, применению резистентной к пестицидам популяции хищного клеща метасейулюса на виноградниках и испытание эффективности в плодовых сапах и на других культурах в борьбе с паутинными клещами. МСХ, РФ, Центр, науч.-технич.инф. пропаганды и рекламы, М., 1992, 34 с.

43. А.З.Петрушов, А.П.Твердюков и лр. Метасейулюс западный. Технические условия. ТУ.10.01.38-91. ЕПНО "Согазссльхозхимия", 1991, Юс.'

44. А.З.Петрушов, А.Г1 .Тверлюков и лр. Технологический рег-

4 ламент на производство метпсеПулюсп западного. ВИНО "Союзсельхоз--химия", 1991, с.10.

45. А.З.Петрушов. Резистентность хищного клеща амблисейуса к пцретроидам. Современное положение с резистентностью вредителей, , возбудителей болезней растений и сорняков к пестицидам. Тез. докл. 8-го совещания, УФа, 1992, 65-67.

46. И.З.Лившиц, В.И.Митрофанов, А.З.Петрушов. Методические рекомендации по интродукцни в плодовые насаждения хищного клеща мэтасейулюса западного для борьбы с паутинными клещами. Ялта, 1992, 43 с.

47. А. Ъ.Petrushov. Selection and mechanisms of ambush resistance in Ketaseiulus occidentalis H. (Acarina. PhiJtoseiidae). Moderr Acarology, Prague and SP3, Academic Pubiciiing bv, The Hague, 1991,

vol. 2, pp. 741-748.

48. A.Z.Petrushov. Pyrethroid resistance in the predaciou3 mite Aablyseius barkcri. Bulletin OEPP/EPPO, 1992, 22, 471-473.