Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Рецепция глюкокортикоидов в тканях с различной гормончувствительностью при внешнем и внутреннем облучении организма

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Рецепция глюкокортикоидов в тканях с различной гормончувствительностью при внешнем и внутреннем облучении организма"

АКАДЕМИЯ НАУК БЕЛОРУССКОЙ ССР ИНСТИТУТ РАДИОБИОЛОГИИ

РЕЦЕГШИЯ ГЛКЖОКОРТИКОИДОВ В ТКАНЯХ С РАЗЛИЧНОЙ ГОРМОНЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬЮ ПРИ ВНЕШНЕМ И ВНУТРЕННЕМ ОБЛУЧЕНИИ ОРГАНИЗМА

03.00.04 - Биохимия 03.00.01 - Радиобиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Минск 1991

Работа выложена в Институте радиобиологии АН БССР. Научный руководитель: акадешк АН БССР, профессор Конопля Е.«.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Холодова Б Л.

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Пелевина И.И.

Ведущая организация - Институт экспериментальной ж

теоретической биофизики АН ХСР

Защита состоится стМ^-Л 1991 г. в часов

аа заседании спешализировавното совета 2 0C6.30.0I по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук в Институте радиобиологии АН БССР по адресу: 220600 г. Ыиьл, ул. Кодинская, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института

радиобиологии АН БССР.

Автореферат разослан " •лл.а1ую а. 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидят биологических наук С / Ходосовская A.M.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОШ

Актуальность тема. Дейстзие ионизирующего излучения на клетку исследовано достаточно пироко, хотя и не в деталях, в частности, изучены процессы пострадиационного синтеза, распада и репарации ДНК, биоэнергетики, образования свободных радикалов, нарушения лкпидного обмена и многих ферментативных реакций. Имеющизся па сегодня данные об изменениях состояния ядерного хроматина позволили сделать обобщающее заключение о тем, что .радиационные дефекты структуры нуклеиновых кислот являются главной причиной репродуктивной гибели облученных клеток.

При лнтерфазной гибели клеток посла воздействия радиации важными, а возможно и оиределяэдичи, являются нарушения механизмов экстраклеточной и внутриклеточной регуляции катаболизма и фушеций, осуществляющихся, как известно, через тронсмембранную и внутриклеточную передачу регуляторгах сигналов.

Согласно данным литература, существует определенное сходство квоту действием ионкзирувдего.излучения и глвкохорттсопдов на лилфэидкуэ ткань /ЕС.П.Хансон, В.Е.Кошр, 1977/ и печень /ЙЛЭ.Ма-икова и др., 1988/. Обсуждалась даже возможность стимуляции ионизирующим излучением зависимой от глюкокортикоидов инволюции лш-фоидкой ткали /А.А.Валшэшч и др., 1985/. Конкретная роль рецепторов з формировании ответа клеток на действие ионизирующего излучиста и глюкокортикоидов, по-видимому, не идентична /А.А.Валь-новдч и др., 1981/, однако полагав?, что через систему внутрикле-. точяьк рецепторов глюкокортикоидов ионизиругацое излучение моя от активировать программируемую клеточнун гибель в лимфоидной ткани /К.П.Хочсоя и др., 1385/.

Основные дашше по изучению пострадлавдошюй гибели лимфоид-шх''клеток были получены при использовании высоких доз ионизирующего излучения. Б.то же время остается неясным состояние внутриклеточной рецепции глюкокортикоидов в лимфоидной ткани и печен« после Епешнего и внутреннего облучения. Последнее особенно ватага при объяснении эффектов и расшифровке механизмов действия на организм малых доз радиации в результате сложившейся радиационное экологической обстановки после аварии на Чернобыльской АЭС.

Цель и задачи исследования. Цель данной работы - выяснить состояние системы рецепторов глюкокортикоидов в тканях с рззлич-

ной гормон- к радаочувствительноетш ыри внешнем и внутреннем облучении организма к сопоставить их о данными, полученными при изучении влияния сложившейся радиационно-экологичоскэй обстановки в' результате катастрофы на 'ДОС.

Для этого предусматривалось последовательно речшть следующие задачи:

1. Изучить характер изменения концентрации кортикостерона в сыворэтке крош» а также цктоплазматическуы к ядерную рецзпцаю глюкокортпкоидоз г тимусе и почет; крыс после внешнего .гамма-облучения в дозах 0,5 и 1,0 Гр.

2. Исследовать динамику внутриклеточного распределения рецепторов глюкокортикоидов в процессе рецошорного цикла при внешем гамка-облучогаш в дозе 1,0 Гр.

3. Определить концентрацию кортккостерона в сыворотке крова, цитоплазглатачоскую и ядерную рецзпцгао глюкокортикоидов в печеш; крыс, подвергшихся внутреннему и сочетанкому облучению.

4. Охарактеризовать связывание глюкокортикоидов лтзфошташ селезенки крыс в условиях внутреннего к сочетанного облучения.

5. Оценить влияние радиоэкологической обстановки, сложившейся в Белорусской ССР в результате катастроф! на ЧАЗС, и загрязненных радионуклидами кормов на концентрацию кортикостерона в сиворонке крови, рецепцаю глюкокортикоидов в печени и лимфоцитах селезенки крыс.

Научная новизна -работы. ВперЕыо установлено, что внутриклеточный цикл рецепторов глюкокортикоидов в печени осуществляется в течение 48 ч и для его завершения требуется синтез молекул рецептора de novo . При внешнем гамма-облучопин гшвсишх в дозе 1,0 Гр замедляется стадия восстановления цитоплаз&атического пула рецепторов глюкокортикоидов в результате снижения синтеза молекул рецептора do novo.

Новыми являются данные, характеризующие соотояние внутрикле точной рецепции глюкокортикоидов в печени и тимусе крыс при внепн нем гемма-облучении в дозах 0,6 и 1,0 Гр, согласно которым характер изменений зависит от гормон- и радиочувствительности ткани, возраста животных, поглощенной дсэы и временного интервала.

Впервые такие показано, что изменения концентрации рецепторов глюкокортикоидов в клетках печени и лимфоидной ткани сохраняются на протяжении 12 мвс после введения (2,6 МБк/кг),

Cs (1,6 ЛБк/кг), а также при комбинации этих источников облучения с внешним гамма^облучением в.дозо 0,5 Гр. Особо важным является тот факт, что сходные результата получены прз; содержании животных в золе катастрофы на ЧАЗС при уровне загрязнения территории по цешт-137 более 15 Jfo/км2, а также потреблении ими кормов, загрязненных равдоиухдадаи, среди которых преоблад&ч 137Са

Теоретическая и практическая значимость -работы.'Полученное даотыв о внутриклеточном цикле рецепторов глвкокортикоццов в печени крыс нмеют теоретическое значение, расширяя сведения о механизме действия стерсдцных горшпов в клетке. Это важно для построения общебтюлогической модели действия горюнов на уровне клетгл и должно учитываться при трактовке гормональных эффектов в тканях.

С другой стороны, охарактеризовано состояние рецепторного аппарата при трех видах радиационного воздействия в относительно малых дозах. Полученные данные эет-'л для иокнмаэдш нарушений рв-гуляторных процессов, возникакцях у гшшх организмов, находящаяся в зона катастрофы ЧАЗС.

Положения, выносимые на заттг: . I. Состояние системы внутриклеточных рецепторов глвкокортз-кепдов после облучения зависит от гормональной и радиационной ■ чувствительности ткани. В ликроидной ткшга пострадиационные нзме-пеиия более выражены, чем в печени.

2. Концентрация цитоялазкатлческих я ядерных рецепторов глю-кокортккоидов в лтфоадной л печеночной тканях. а тшап концентрация' хортикостерона в крови зависят от дозы, вцда облучения, а так- ■ не времени посла облучения. Наблюдается снижение концентрации рецепторов в разншз сро:о! после облучения, прячем наибольшее ^пижоня о отмечено для ядерных рецепторов глэкокортикоидов.

3. Изменения внутриклеточного распределения рецепторов глю-кокортикоадов связаны с зпдаддензем синтеза рецепторов de novo и возвращения их ля ядра в цстоплазму.

Публпкядш. л рдробвдия работа. Результаты исследований опубликованы в 13 научных работах, долоаенн и обсуждены на 18, 19, 20-й научных конференциях молодых ученых биологического факультета МГУ "Проблемы современной биоюгии'ЧМосква, 1937, 1988, 1989), I Всесоюзном радиобиологическом съезде (Москва, 1989), Всесоюзном симпозиуме "Биохимия рецепторных систем" (Таллинн, 1990).

Объем и структура дисоертапия. Диссертация изложена на 145 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора лите-

5

ратуры, описания методов исследования, 4 глав эксперименталыггк исследований, оосуждения результатов и заключения, выводов и списка литоратуры, включающего 60 отечественных и 138 иностранных источников. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 26 таблицами.

МАТЕРИАЛЫ И ШЭДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа вшолнена на 1500 белых крисах-оелшах, возраст которых в зависимости от задачи исследования варьировал от 1,5 до 18 мес. Животных подвергали однократному общему гамма-облученшо от кобальтового источника на установке УГУ-420 в дозах 0,5 и 1,0 Гр (мощность дозы 2,7» 10 Гр/с), а такке внутреннему облучению от 1311 (2,5 МБк/кг), 137Св (1,6 МБк/кг). Отдельные серии опытов были проведены на животных, содергшвалхся в зоне катастрофы на ЧАЗС (эагргзнение территории по цезив-137 - болеэ 15 Ки/км ), а такке потреблявших эагрдзпешшй радионуклидами корм (виращенный в зона ' отселения).

Животшх декапитировали, перфузировали и извлекали печень, тимус и селезенку, Ткани гомогенизировали на холоду. Цитоэольную фракция получали центрифугированием гсмогената тканей при 120С00е в течение I ч. Осадок использовали для получения ядерного экстракта, последовательно обрабатывая его 1,0 и 0,5% тритоном Х-100 с по следующими отмывками. Ядерные рецептора экстрагировали 0,4 М цаС1. Ядра выделяли по методу Г.Л.Романова /1976/. Лимфоциты бк-свобоядали из строш селезенки и центрифугировали в градиента плотности зерографина. Количество лин^ошп'св подсчитывали общепринятым методом в камере Горяева.

Концентрацию кортикостерона в сыворотка крови определяли радиоконкурентным методом /ТЛард, 1981/, а концентрацию рецепторов глшокортикоидов - радиоизотопным, разделяя связанный и свободный гор,юны методом твердофазной адсорбцкг на декстрашшкрытом угле к в водной двухфазной системе /н.БОйегеагс! , 1505/.

Анализ специфического связывания проводили в координатах Скатчарда /в.ЗсаЪсЬага , 194Э/. Концентрацию белка определяли но методу Лоури /о.Ьомггу , 1951/ я сиектрофотометричеоки /А.М.Фи-ленко, Ю87/, ДНК - по методу Спирина /1958/.

Статистическую обработку проводила мэтодама вариационной статистики /Ы.Ф.Рокицкий, 1977/.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние внешнего облучения в лозах O.S д 1,0 Го на внутрц-кчеточяуи рецепции глккокортккоидов в тго.ггса и печечл коне. В результате облучения крыс 1,5 мео возраста а дозах 0,5 и 1,0 Гр повышается концентрация кортикоетерока в сыворотке крош и отмечены разнонаправленные изменения концентрации цитоплазматлчесхих и ядерных рецепторов глюдокортикоадов в тимусе и печени в различные сроют поело воздействия.

Концентрация кортгасостерона в сыворотке крови в 2 раза превышала уровень контроля ка протяжении первых трех суток поело облучения животных в дозе 1,0 Гр. В последующем она снижалась, но все ге оставалась капо контроля на 25-35,1 ка протяжения 60 суток.

Облучение животных в дозах 0,5 к 1,0 Гр вызывает значительное енпзонке числа мест связывания глюкокортикоидов в цатозоле и ядрах клеток тимуса на первые сутки после воздействия. В дальнейшем при гамма-облучении в дозе 0,5 Гр внутриклеточная концентрация рецепторов в тимусе крыс оставалась ниже контроля и прогрессивно возрастала при использовании дозы 1,0 Гр {рисЛ).

Как видно из рис.2, уровень внутриклеточной рецепции глюкокортикоидов в печена, напротив, снижен па протяжении 90 суток при облучении в дозе как 0,5, так и 1,0 Гр.

Внутшалеточннй пик* рецепторов гавококотшгкоидов пта; внешнем облучении. Для изучения динамики внутриклеточного распределения рецепторов глюкокортикоидов в процессе рецепторного цикла крас брали в опыт через 10 суток после внешнего облучения в дозе 1,0 Гр. Исследовали временную зависимость транслокации рецепторов гявкокортикоздов в ядро а восстановление их исходного уровня в цитоплазме глоток печени крыс после внутркбршннного введения де-ксачетазона (1,25 мг/кг). Концентрацию рецепторов в цитозола определяли сразу не и через I, 4, 12, 24, 36, 48 ч после введения гормона. Для того, чтобы удостовериться, что исчезновение роцыт-торов нз цитоплазмы сопровождается накоплением их в ядре, определяли содержание рецепторов в ядрах. Через 4 ч после инъекции декошлетазона наблюдалось двухкратное увеличение концентраций ядерных рецепторов глзококортяковдов на фоне их исчезновения из цитозоля (рио.З). Через 48 ч после введения гормона концентрация рецепторов в ядрах снижалась, а в цитозоле восстанавливалась до

%

А

3 с 10 с 30 с 60 с.

4 4 12 ч

1

I с

с

й

/

/

5Г

1'Г

3 с 10 с 30 о 60 с

Рис.1. Кокцентрацвд рецепторов глюкокортикоидов в тимусе крыс после облучения в дозах 0,5 (А) и 1,0 (Б) Гр {% от контроля). ЕЭ - цетоплашлатическка рецепторы, ка - ядерные рецепторы, ш - общий пул рецепторов.

140

120 100

ео 60 40 20

4 ч 12 ч

«

I о

3 о 10 о 30 с 60 с 90 о

Рис.2. Концентрация рецепторов глюкскортиковдов в печени крыо после облучения в дозах 0,5 (А) и 1,0 (Б) Гр от контроля). Е2- цитоплазматические рецептор«, ЕЯ - ядерные рецепторы, ет - общий пул рецепторов.

Рнс.З. Концентрация цкто-плазадатических (§моль/мг белка, * о ) и ядерных (фйоль/мг ДНК, * а ) рецепторов глюкокортикоидов через разное ввемя после введения дексаметазона (1,25 шукг). К - уровень рецепторов в цитозоле печени контрольных (заштрихованный столбик) и облученных (светлый) крыс без введения

?ексшетазона.

, 2 - необлученные животные,

3, 4 - облученные животные

. исходного уровня. Таким образом, полный внутржготочний цикл рецепторов глюкокортикоидов в клетках печени крыс завершается в точение 48 ч. У животншс, облученных в дозе 1,0 Гр, внутриклеточный цикл рецепторов глюкокортиковдов такие занимает 48 ч, по в отличив от интакткых животных происходит задержка восстановлены! цк-топлазматического пула рецепторов, особенно в первнэ 24 ч после введения дексаметазона.

Для того, чтобы дать ответ на вопрос о том, все ли рецепторы тралслоцируются из ядра в цитоплазму или Ее происходит частичное образование рецепторов de novo, а также какова роль синтеза белка и FKK в этом процессе и где, ка каком этапа происходят изменения, отракаициеся на внутриклеточном цикле рзцеяторов глюкокортикоидов при действии гаыма-облучвшщ, животным внутрибрипшшо сводили блоках ор синтеза белка - циклогексимад и б локатор синтеза РНК - ак-тиномицан Д.

Циклогексимид вводили в дозе 2 кг/кг сразу же после введения дексаметазона (1,25 мг/кг) и с вкспоеацдеЛ 3, 6, 12 ч. Концентрацию рецепторов глюкокортикоидов всегда определяли через 48 ч после введения дексаметазона, т.о. тогда, когда завершается полный внутриклеточный цикл рецепторов глюкокортикоидов.

Как видаю из рис.4, у облученных животных, по сравнения о контрольными, замедлено восстановление уровня цитоплазматипесвих рецепторов глюкокортикоидов, которые преимущественно локализуются в ядре. Восстановление исходного уровня цитоплазматических рецеп-

флоль/мг белка ^даль/мг ДНК

$моль/мг белка

Рис.4. Концентрация вдтошгазматических (флоль/мг белка) и ядерных (фмоль/мг ДНК) рецепторов глюкокортикоядов при введении • дексаметазона (Д), циклогексимида (ЦГИ) и актиномицина Д (АКТ Д). ЦГИ и АКТ Д вводили через 0, 3, 6, 12 ч поело введения Д. Концентрацию рецепторов всегда определяли через 48 ч после введения Д. ЕЯ - необлучешше животине, сз -облученные животные.

торов по завершении рецепторного цакла требует синтеза молекул рецептора de novo.

Астинсмицшз Д вводили в дозе I иг/кг непосредственно после инъекции дексэметазона (1,25 мг/кг), а такие спустя 3, 6, 12 ч. Концентрацию рецепторов глюкоксртпкоидов определяли как и в предыдущей серии опытов.

Как видно из рис.4, актиномицин Д оказывает ингибирующай эффект ка восстановление уровня цатоплазматических рецепторов. Нежно предположить, что часть рецепторов по еаверионни их рецепторного цикла синтезируется de novo , при этом за счет образования новых РНК, их кодирующих.

Taiaaj образом, при гамма-облучении радаационно-уязвимам звеном является образование новых иолекул рецептора глюкокортиноядов.

Влияние ьиутренпзго и сочатанного облуч.';пщ на рецепцию глр-рокортикоддов в печени к лимфоцитах селезенки тане. В проведенных экспериментах для моделирования слояившейся после Чернобыльской катастрофы радиационной обстановки яивотким взодаяи I, 137Св , а такяе содержали в зоне жесткого контроля и кормили загрязненным радионуклидами кормом.

Поглощвнкая доза внутреннаго облегчения после введения крысам 13*1 в дозе 2,5 МБк/кг составила через один месяц 94,6 Гр на щитовидную келеау, а через 3-12 месяцев - 94,7 Гр. Введение крысам яе оказало существенного влияния чероз I кес на концентрация кортиносгероиа в сыворотке крови в ка внутриклеточную рецепцию глвкокортакоидов в печени» Б то же время в отдаленные сроки после введения I изменения изучаемых показателей более выражены (рис.5).

Поглощенная доза внутреннего облучения после введения крысам 137Св в дозе 1,6 МБк/кг составила 0,147; 0,249; 0,26; 0,2605 Гр через I, 3, 6, 12 ыес, соответственно. Прг£ введении цазия-137 общий пул рецепторов в метках печени был меньше контроля в течение 12 мео (рис.5). Концентрация цитоплавматаческих рецепторов черев I мео после введения цазия-137 на бО? превышала контрольное значение, еатем прогрессивно снижалась и к 12 нес составляла около 25% по отношению к контролю. Концентрация рецепторов в ядрах оставалась ниже контрольного значения на протяжении 12 мес после введения цеаия-137 и коррелировала о общим пулом рецепторов. Концентрация ко^тикоотеропа в выворотке крови в 8 раз ниже контроля

в

Рис.5. Концентрация рецепторов глюкокортикоидоз в печена и концентрация кортикостероиа в сыворотке ¡с^ови крыс через разное время после введения (А) и ^'Сз {Ъ){% от контроля). ка - цитоплазматические рецепторц, ва- ядерные рэ-цепторн, ®а- общий пул рецепторов, СЗ- кортакостерся.

Рис.6. Концентрация рецепторов глюкокортикопдов в печени и концентрация кортпкостерона в сыворотке крови крыс через разное время после введения и (А) и внешнего гам-ыа-облучения в дозе 0,5 Гр "с последующ»! введением и 137С* (Б) {% от контроля). Е2 - цатоплазматические рецепторы, 53 - ядерные рецепторы, вез - общий пул рецепторов, СП - кортикостерон.

через I год после воздействия. Следует отметить, что именно в этот период наступало максимальное снижение всех изучаемых показателей.

При совместном введении и 137С в обшй пул рецепторов глюкокортиковдов в клетках печепл также меньше контроля в течение всего срока исследования (рис.6). Отличие данных этой серии экспериментов от предыдущих состоит в том, что максимальные изменения изучаемых показателей наступали раньше - через 6 мес после воздействия.

В экспериментах с сочетанием гамма-облучения в дозе 0,5 Гр и введением I и ^Св наблюдаемая картина аналогична предыдущим (рис.5). Общий пул рецепторов глюкокортикоцдов сохранялся нкке контроля з течение 12 мес. Однако, в данном случао изменения Еыраяэнн унэ в ближайшие сроки после воздействия.

Идентичные модели была использованы при определении концентрации числа мест связкзания глюкокортикоидов в лимфоцитах селезенки крыс. Обкарукен фазный характер динамики этого явления, прячем наибольшие изменения в системе рецепторов глюкокортгасоздов лимфоцитоз вызывало сочетанное облучение яивотных: в 2 раза выше контрольного значения через I мес, в 2 раза шаге его гранка через 3 мес и превышение их в 6 раз к 12 мес после начала эксперимента.

Представляется весьма важным оценить риск радиационного воздействия на кизой организм в условиях радиоактивного загрязнения местности и хронического облучения в малых дозах. Для этого повели серии экспериментов, где животике разного возраста (2 кб ив с) длительное время потребляли загрязненный радионуклидами корм. При этом за одни сутки в организм 1фыса посыпало в среднем 20 Бк цезпя-137. Поглощенная доза внутреннего облучения после двух месяцэв потребления загрязненного радионуклидами корма составила 7,3'10""4Гр, а после шести месяцев - 2,93'1СГ"Тр.

В ближайшие сроки после кормления еиеотннх двух возрастных груш загрязненными радионуклидами продуктов повышалась концентрация рецепторов глюкокортихопцэв в цлтозоле и снижалось их содер-зкание в ядрах клеток печени, при этом изменения были более сыра-вены у молодых особей по сравнении со зрелыми. Аналогичные результата получены и после шестимесячного потребления животными загрязненных радионуклидами кормов.

Не.бладаеше эффекты внутриклеточной рецепции глвкокортикои-

дов в печени крыс после их содержания в зоне отселения (поглощек-нея доза от 7,3-nPi до 2,3*10-1Гр) сравнимы с эффектами от потребления загрязненного радионуклидами корма: козщентрация цкто-шшзттячватх рецепторов вше, a ядерных - югае исходного уровня и, очевидно, связаны о действием радиации в малых дозах,

'После шестимесячного потребления нивотннми двух возрастных групп эагрязнзнного радионуклидами корла отмечено значительное снижение концентрации рецепторов глюкокортикоидов в лимфоцитах селезенки крыс на фона 5-7 кратного увеличения сродства рецепторов к дбкеаыетазону.

Таким образом, облучение аивотнах, независимо от его характера, оказывает дестабилизирующее влияние на функционирование системы рецепторов глйкокортикоидов в тканях различной гормон- и радиочувствительности, эффект которого сохраняется длительноо время. Особо важным явля&тся тот фаг-т г что получены сходные результаты как в модельных экспериментах по введению животным радионуклидов, так и в тех окспериментах, где животнт длительное время потребляли загрязненный радионуклидами корм, а такяе находились в зоне жесткого контроля (загрязнение территории ко цезню-137 болев 15 Ки/км2). Это подтверждает основную роль радиационного фактора в формировании нарушений внутриклеточной рецепции глюкокор-тикоиддв у животных, находившихся б соне поваленного рэдиацвонно-го воздействия. Последаее представляется вахашм для оценки последствий, связанных с влиянием сложившейся радиационной об станов-га: в результате^ катастрофы на ЧЛЭО к поташная механик,ив этого воздэйсткм на гавой организм.

РЫВДШ

1. Внутриклеточный цикл рецепторов глюкокортикоидов в печени крыс продолжается 48 ч и для его завершения требуется синтез молекул рецептора de novo, s том числе и за счет образования новых РНК.

2. Внешнее общее гамма-облучение животных в доэе 1,0 Гр выбывает задержку восстановления цитоплаэматкческого пула рецепторов глюкокортикоидов в результате снижения интенсивности синтеза молекул рецептора.

3. В первые дни после тотального гамма-облучения крыс в дозе 1,0 Гр концентрация кортикостерона в сыворотке крови увеличивается в 2 раза по сравнению о исходным уровнем, затем умеренно они-*

лается, но не достигает контрольного аначання и спустя два месяца после окоачшшя радашщонного воздействия,

4. Характер и?мзноннЯ цитоилазматической и ядерной рецешин глвкокорпссоидоБ прз ¿¡нашем облучения крыс формируется в зависимости от радаочуватвптельиостп ткани, поглощенной дозы н временного интервала. Облучэшз приводит к статистически значимому сни-генк» ела мест связывания глжокортякоидов в цитозола и ядрах глоток как тпмуса, так и печени на порше сутки после воздействия. В последуящее сроке это? показатель в тимусе крас остается ниже контрольного уровня ара дозэ 0,5 Гр я прогрессивно возрастает

прч едлучзнт з дозе 1,0 Тр. Напротив, в печени при использовании обеих доз внутриклеточная рецепция глюкокортикоидов ниже ко-птроля на протяжении всего пострадиационного периода.

5. Введение гдвоташм (2,5 ?Жк/кг) провоцирует волнообразное изменение концентрации рецзяторов гхюкокортикоядов в клетках печени со олвдуздей сменой фаз: незначительная разгогца с контролем через I зо, яка его границ ~эрез 3 глее а празишенпе их к 12 мео после шгьеккш; радионуклида. В отличив о? этого внутреннее облучение от (1,6 МБк/кг) приводит к постеленному сникешш содержания рецепторов в клетках печени, продолжающемуся в течение всего года. При совместном введении к выявляется аналогичный сдвиг, олнако наиболее демонстративное педензо наблюдается спустя 6 мее. Общий пул рецепторов глвкокортикоидсв остается погашенным во все календарные сроки, если тгэот-тх подвергал* сочетанногду облучении (внеддее геьма-облучгениз - 0,5 Гр, -2,5 .МБк/кг, 137СЯ - 1,6 ШЗк/кг).

6. При содержании елвотннх в зоне жесткого контроля, равнин образом как и при потреблении амп загрязненных радионуклидами кормов, происходит умекыьзнав концентрации роцепторов глшокортв-кондов в почэнп 1фыо, нагляднее шраяенкое у молодых особей, чем у зр&лых. В обеих моделях ксЕЦОнтрашш кортякостерока в еыворст» ко крови значительно превыше? баааяышй уровень, причем у молодых животных в насколько большей степени.

?. В условиях внутреннего и сочотапного облучения гшвотша концентрация рецепторов глюкокортикоядов а лимфоцитах селезенка имеет своэобразнуэ колебательную динамику с чередованием стадий умеренного снижения, почта нормализация посла раздельного поступления каждого радионуклида н возрастания к 12 мес после их сов-

местного действия. Сочеташшй кпд радиационного воздействия индуцирует еще более заметную фазностъ изменений концентрации рецепторов глвкокортикоидов в лимфоцитах.

8. Внешнее, зпутрзннее и сочотанное облучс;ше животных-в относительно малых дозах оказывают дестабилнзирущэе влияние на состояние систегли рецепторов глвкокортшсовдов б тканях различной гормон- и радиочувствительности, последствия которого сохраняются на протяжении длительного времени после воздействия.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гаврилин U.A., Луша Г.Л. Внутриклеточная рецепция глзоко-кертикоидог в тканях белых кшс-самок при действии /-облучения// Проблемы современной биологии: Труды 19 науч. вонф. мол. учешх биол. фак. МГУ/ МГУ.- Ы., 1988.- С. 2-6.- Деп. в ВИНИТИ 24.08.88 г., tö 6712-Б38.

2. Гавршшн М.А. Рецепция глвкокортикоидов в печени крыс при гипофункции щитовидной железы и содержании животных в загрязненных радионуклидами районах // Республ. каучно-практ. конф. по радиобиологии и радиоэкология: Тез. докл.- {.{¿нск, 1988.- С. 39.

3. Конопля Е.Ф,, Лукша Г.Л., Гаврилин Ы.А. Влияние облучения на внутриклеточную рецепцию глюкокортикоидов в тканях различной радиочувствительности // Радиобиология.- 1988.- Т.28, J6 6.- С. 772-774.

4. Лукша ГЛ., Попов Е.Г., Саватеев С.К., Наумов А.Д., Мон-тик В.И., Оильченков Г.Н., Гаврилин М.А. Система рецепции стероидных гормонов"в условиях внешнего /-облучения в малых дозах // I Всес. радиобиол. съезд, Москва, 21-27 авт. 1989: Тез. докл. Т.5.- Пувдто, 1989,- С. II53-II54.

5. Гаврилин U.A., Лукша Г.Л. Внутриклеточной цикл роцоаторов глвкокортикоидов при введении дексаметазона, актиномицпаа Д и цп-клогексимида // Проблемы современной биологии: Труда 20 науч.' конф. мол. ученых биол. фак. МГУ / МГУ.- М., IS8S.- С. I77-I8I.-Деп. в ВИНИТИ 5.02.90 г., Ä 642-В90.

6. Конопля Е.Ф., Гаврилин М.А., Лукиа Г.Л. Механизмы действия глвкокортикоидов на уровне клетки // Области * юбнл. науч. конф., посвящ. 70-летию основания Харьковского НИИ эндокр. и химии горюнов: Тез. докл.- Харьков, 1989.- С. 33-35.

7. Конопля Е.8., Лукша Г.Л., Детинкин О.Н., Еиткович A.B.,

Гаврилин М.А., Монтик В.И., Фильченков Г.Н. Механизмы реализации эффекта глюкокортикоидов при старении // Физиологический журнал СССР т. И.М,Сеченова.- 1990.- Т.76, 16 9.- С. 1224-1230.

8. Лукаа Г.Л., Гаврилин М.А., Монтик В.И., Конопля Е.Ф.' Пострадиационные нарушения в системе внутриклеточной рецепции глюкокортикоидов // Доклада АН БССР.- 1990.- Т.34, № 10.- С. 950-952.

9. Лукша Г.Л., Гаврилин М.А., Коноп.та Е.Ф. Внутриклеточный цикл рецепторов глюкокортикоидов цри i -облучении, введении дек-саметазона, вктиномицина Д и щгклогексимвда // Рвдиобиологая.-1990.- Т.ЗО, JS 5.- С. 602-606.

10. Конопля Е.в., Лукша Г .Л., Гаврилин М.А., Монтик В.И., СеляЕко В.В. Внутриклеточный цикл кортикостероидных рецепторов // Биохюлпя рецепторных систем: Тез. дохл. Всесоюз. симп,- Таллин,. 1930.- С. 30-31.

11. Лукша Г.Л., Гаврилам М.А, Влдание радиоэкологической обстановки, внутреннего и сочвтшшого облучения на связываний дек-саметазоиа ле^юедтйтш селезенки крыс // Зкологач. пробл. кммун. и аляергол.: Тез. докл. I аялуяоя. съезда Белоруссии.- Кинсх, 12Э0.- С. 72-73.

12. Конопля Е.Ф., Гаврилин М.А., Лутка Г.Я., Наумов А.Д., Попов Е.Г., Сэчко Л.К. Уровень к рецепция отороедких гормонов при действии мплнх доз иокигирувдэго излучеш'л (внешэго, внутреннего л комбинированного) // Молекул-трно-клеточкиа механззьи хронического (внешего и Енутреннего) действия ионизирующих излучений па биол. системы: Тез. до гл. I Всесоюз. сна.- Яуюто, 1990,- С. 61.

13. Газрялип М.А., Луниа Г.Л. Рецепция глвконортпкоидов в печени крце в условиях внутреннего и сочетапного облучения // Росп. научно-практ. кокф. по радиобиология и рядтаэкодепш: Теэ. докл.- Минск, 1990.- С.40.