Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Репродуктивная функция потомства андрогенизированных самцов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Репродуктивная функция потомства андрогенизированных самцов"

Р г 0 00

- 0 ¡-м |С^?ЬКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

ЗОЛОТУХИНА Валентина Николаевна

РЕПРОДУКТИВНАЯ ФУНКЦИЯ ПОТСМСТВА АЦЦРОГЕНИЗИРОВАННЫХ САМЦОВ

ОЗ.ООЛЗ - Фивиология человека и животных:

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Харьков - 1993

Работа выполнена в Украинском НШ фармакотерапии эндокринных заболеваний

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор Гладкова Алла Ивановна

Официальные оппоненты - доктор медицинских наук,

Ведущая органивация - Институт проблем криобиологии и

криомедииины АН Украины

совета К 053.06.07 Харьковского государственного университета (310077, Харьков, пл.Свободы, 4, аудитория 3-15).

С диссертацией ыоашо овнакомиться в Центральной научной библиотеке Харьковского государственного университета.

Плехова Елена Игоревна

кандидат биологических наук, Нестеренко Галина Алексеевна

Ученый секретарь спеииаливированного совета

/

гССку— А.В.Некрасова

Актуальность темк. Многочисленные клинические наблюдения и спериментальные исследования свидетельствуют о неблагоприят-м влиянии нарушений гормонального гомеосгава у матери, оС^-с-влэнных эндокринными заболеваниями либо приемов гормональных ерств, на плод и постнатальное развитие потомства /Л.И.Губа-ва, М.И.Половишш8,1988; Е.С.Детюк и др.,1986,1990; Л.И.Серо-,1990,1992; Г.Т.Шишкина,1990; И.Е.Эвдреии и др.,1990; N. Neu-L4 ,1987/.

Влияние на потомство гормональных изменений в отцовском орга-ше не нашо долгого освещения. Вместе с тем этот ьопрос. чре-ычайно": актуален, поскольку мужчины репродуктивного возраста сто подвергаются гормональным воздействиям. Препараты теетоз-рона (Тс) и дигидротестостерона (ДГТ) (Тс пропионат, тестэнат, станон, медротеотронпропионат, пролотестон, станозолол и др.) роко применяются в диагностических целях, при лечений раэлич-х вндокринных и ноэвдокринных заболеваний, в терапии фуккаясильных половых расстройств и бесплодия /И.Ф.Ювда и др.,1980; Г.Старкова,1983 ; 0.Л.Тиктинский,1990; Wilson, briffin ,1980/. ряде случаев, в том числе и для повышения работоспособности, польвувтся анаболический э|)фект анцрогенов /В.А.Рогозкин,1988/. оме того, следует принять во внимание спонтанные колебания эвня эндогенных андрогенов в муясном организме /О.Н.Сачченко, 79; Л.В.Тарасенко и др.,1989; Mock et.al. ,1978; Sodersten , 35/.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось учение влияния пшерандрогении в отцовском организме для по-яатальиого развития и состояния половой функции их потомков. Для достижения^указанной цели были поставлены следующие кон-этныэ задачи:

1. Поучить влияние Тс и ДГГ на воспроизводительную способ-¡ть самцов в зависимости от сроков спаривания послэ введения 1рогенов по показателям, характеривующим функциональную ак-шость спермиев,- состояние герминативного эпителия, оплодо->ряю!цую способность, уровень эмбриональной смертности, пяо-■ятость.

2. Изучить влияние Тс и ДГТ, введенных самцам в равные >ки перед спариванием, на;

- физическое развитие их потомства;

- половое созревание и репродуктивную : фунгаДпо потомков по показателям, характеризующим гонадотропкую активность

с

гипофива, инкреторную и генеративную функцию гонад, половое поведение и ¡зертнльность.

'Научная новивна. Впервые проведено иссчедование по изучению последствий андрогедавацки самцов для постнатального развития и становления половой функции их потомков равного пола. Осуществлен сравнительный анализ аффектов Тс и ДГТ, В .сравнительной ас-

пекте оценены последствия анцрогекк8ации самцов для их потомков в зависимости с1 сроков спаривания.

Теоретическое и' практическое вначение. Результаты исследования подтверждают современные представления о действии Тс и ДГТ «а уровне пучсхих половых клеток. Покавана равличная степень влияния Тс и ДГТ на хухские газеты в вависимости от стадии их раввития. Выявлен однонаправленная аффект ивучаеыых: андрогенов на постнатальнов рвввитие потомков в случаях вачатия в- ближайшие сроки после авдрогенивацив самаов-проивводителей. Таким об-равом, покавана большая чувствительность к андрогенам врельос спермиев в сравнении с половыми клетками начальных етапов'спер-иатогенева. Полученные данные должны учитываться при определении опгимальныхсроков вачатия после приема андрогенов с целью получения адорового потомства. д

Материалы могут быть испольвованы в курсах по общей и вовра-стной фиаиолопга, сёхсопатологии, анцрогогии. ' < :.-'".

Основные положения, выносимые на ващиту; :

1. Изменение вндрогекноте статуса отцов окааьшает влияние

на постнатальнов раввитиэ и состояние половой функции их потоы-

2. Степень влияние Тс и ДГГ на мужские половые клетки и соот-вэтственно характер отклонений у потомкоз; вавизят от стадии рав-1

"вития гамет.'йуС" ^-/;.-*/-'"..'-''' *4,

3. Эквогенные Тс н ДГТ влияют на геном мужских гамет.

Апробация работы. " Материалы диссертации доложены и обсуж- г

дены на кон^яренцаи молодых ученых и специалистов Украинского, НИИ фармакотерапии аддокрикных вабодеваний (Харьков,1987,1969); Республиканской научно-практической иежшститутской конференции молодых учоныг-медиков (Харьков,1986),,! съевда ыед.генетиков -Украины ¿Львов, 1988), ХШ съезде Украинского фивиологического Г. общества им. И.П.Павлова (Харьков,1990), Всесоюзной симпозиуме "Медиаторы в . генетической регуляции поведения" - (Новосибирск , 1986), Всесоюзном сииповнуме ^сшвгуадршю г•ф^ю^'оивйыию.-

механивмы онтогенева" (Харьков,1987), Ш Всесоюаной конференщш

.....

ю не Про эндокринологии (Харьков,1988), Международном совещании НовосибирскД989), на заседании общества эндокринологов (Харь-:ов,1988) и патофизиологов (Харьков,1990) Харьковского научного [едицинского общества.

Публикации» По теме диссертации опубликовано 14 работ и олучено 1 авторское свидетельство СССР.

Структура и объем работы. Содержание диссертации изложено а 217 страницах машинописного текста и включает в себя введено, две главы обвора литературы, описание методов исследова-йя, три главы ревультатов собственных иссдедманий, заключение выводк. Текст диссертации иллюстрирова." 38 таблицами и 23 ри-унками. Библиографический указатель содержит 492 источников течественной и зарубежной литературы.

Материал и методы исследований. Работа выполнена на 620 рысах популяции Вистар. В соответствии с эадачами исследования Зследовались самцы-проивводигели, а также их потомки обоего зла. Животных содержали в стандартных условиях вивария при ео-эственноы освещении, питание ad libitum . Использовались мо-:дые половозрелые самцы, обладающие высокой сексуальной актив-зстыо. Отбор сехсуальноактивных самцов осуществлялся по pesy-,татам их полового контакта с рецептивными овариэктдаированны-I самками, у которых состояние рецептивноети вывывали последо-¡тельной обработкой встрадиолом (Eg) и прогестероном.

С целью установления стадии сперматогенеза наиболее чувстви-1Льной к действию андрогенов и определения неблагоприятного :я потомков периода еачатия после введения гормонов авдрогени-дию самцов-проивводителей осуществляли э равные сроки перед ¡ариванием. Тс или ДГГ назначали-ва 2 либо 48 суток перед спа-ванием. Аадрогены вводили внутримышечно однократно в довах о-ветственно I мг/кг 0,05$-ного и 0,2 м?/пг 0,01%-ного мас-ного раствора. Контрольные животные получали в том хе объеме при тех ке условиях растворитель андрогенов - косточковое зло. .

, В первой серии исследований научалось влияние-названных эроидов на инкреторную и генеративную функцию гонад и $ерти-4ость самцов-проивводителей.

Во второй серии иослдований научалось постнатальное равви-> и состояние головой функции у потомков первого поколения фогенивированных оаыцов.Фнеическое равзктие потомства оце->ааж по динамике и вменения массы тела крысят с ведрастоы, по

срокам развития биологических признаков: отлипание ушек, появление и генерализованный рост волосяного покрова, проревывание вубов, открытие глав. В вограите Г и 2,5 месяцев исследовали поведение потомков в "открытом поле" по методике Крушинского-Молодкиной /Д.А.Кулагин, В.К.Федоров,1969/.

_Половое совревание потомства.оценивалось на основе анализа-

аногекитального расстояния у крысят, сроков опущения яичек в мошонку у самцов и раскрытия влагалища у самок.

Половая функция потомков изучалась при достижеаш ими репродуктивного вовраста. Исследовалась инкреторная и генеративная функция гонад, фертильносгь и половое поведение.

Об еякулягорной способности самцов судили по наличия сперми-ев в половых путях самки. Оплодотворяющую способность оценивали по величине индекса беременности. Исследовались покаватели, характеризующие функциональное состояние спермы: концентрация, подвижность спермиев, количество патологических форы /И.В.Сано-цкий, В.Н.Фоменко,1979; А.И.Нстеса,1984/. Показателями фертиль-ности явились продолжительность беременности, уровень внутриутробной гибели шбрионов, рашер помета. Фертильность изучали у потомков обоего пола.

Об инкреторной функции гонад судила по содержанию Тс и Eg в периферической .крови. Уровень гормонов определяли радиоик,!урологическим методом с помощью стандартных наборов, приготовленных, институтом Биорганической химии Белорусской Академии наук. Генеративная функция оценивалась на основе анализа гистологической картины семенников и яичников.

У самок ивучалоя естральный цикл путем ежедневной цитологической оценки вагинальных мазков в течение 3-х недель. Концентрация гормонов определялась в стадии покоя (диеструс).

При ивучензш полового поведения у самцов регистрировали частоту приближений к самке, число садок, интромиссий, эякуляций ва время тестирования, фиксировали время наступления первой. садки, интромиссии (латентноеть), период от первой интромиссии до эякуляции (яатентность эякуляции), продолжительность пост-еякудяторного интервала, число интромирсий перед эякуляцией /Н.К.Попова и др.,1978; Н.А.КарпенК0,1992/.

Половое поведение у самок исследовалось по методу Grant и Mackintosh Д963/, что по8воляло судить как о процептивном, так и спаривательнда поведении «ивотных. Обеспечивался половой контакт интактных рецептивных с шок с орхидэктомированными сам-

[ши, у которых высокий уровень сексуальной активности' поддерживался гормональной симуляцией Тс-пропионатом.

Суммарную гонадотропную активность гипофиза у взрослых потомков. оценивали методом биологического тестирования / Ludwig, 950/. ••

Уровень KT у самцов-проивводителой определяли с помощью • оборон рьактивов для радиоиммунолошческого определения крайних гонадотропинов, полученных ив Национального гнпофИБарно-■о агентства США С» 2 лШ)1) ).

Статистическую обработку фиеиологичоских показателей осуще-твляли по методу Сгъюденто, испольвуя критерий t /Л.Зако , 976/.

МутагеннцП аффект ДГТ оценивали на основе цитогенатического налива препаратов красного костного шосга потомков андрогенк-ированных самцов первого поколения. Был применен метод давле-ых препаратов. Препараты окрашивали ацатолакмоидсм /С.Д.Дар-кнгтон, Л.Ф.Ла Кур,i960; Г.Макгрогор, Дк.Варли,1986/. Учет ромосомных аберраций осуществляли на стадиях ана]:аеи и тело-авц. Достоверность различий определяли по /В.С.Генес , 964/.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОВСУВДЕНЙЕ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Репродуктивная функция самцов крыс поело введения То либо ГГ. Однократное введение Тс в дово I мг/кг на 20-й минуте зело инъекции индуцировало Ю-кратное повышение содержания »того андрогена в периферической крови самцов (64,49+6,90 1/л) по сравнению с исходный уровнем 16,01+0,87 >й/л, YL 001). Такой подъом укладывался в продолы физиологических ко-гбшшЯ содержания Тс у самцов крш / моек ot. al., 1978; so_ rston ,1985/. Через 24 часа поело инъекции Тс содержание следуемого андрогена нормализовалось (6,294-0,68 Ш/л, Р> Т). • ~

Инъекция-ДГТ вывывает у скщов повившие .уровня ДГТ, конце-рация Тс при отга нэ ивменяотся /Я.Б.Сидорова,1991; Michael, ■.ed., 1987/. Череч 24 часа после инъекции ДГТ наблюдается сстановление андрогенного статуса у самцов /М.Ю.Алесит, А.Карпенко,1989; И.В.Сидорова, 1991/.

Уровень ФСГ у исследуемых самцов даяе черея 2 суток пооле дрог-нивации был понижен и составлял в группа, где применял-

,ся Тс, - 172,00 нг/ил, в группа, где испольвовался ДГТ, -159,80+14,16 нг/мл, тогда как у контрольных крыс - 242,50+

58,98 нг/мл (Р4.0,05). -

Уровень ЛГ в етот период был та'эсе снижен, косвенно об егои свидетельствовала гипофункц"я горыонпромуцируицих олементов семенников, зарегистрированная на тестихулярных гистологических препаратах свмцоч нерва 2 суток посла впадения авдрогенов. В 0то жо ирвмя в ссиенниках обнарузываласьинтенсврикация спорна-" тогвн-ва, что, наряду о зарегистрированной сшшжиоП функциональной активностью клеток ЛеЦдига, свидетельствовало о прошгкно-вении экаогенных авдрогонов в яичко. Полученные донные согласуются с современными представлениями о влияние То к ДГТ в фармакологических дозах на сперматсгеяео у едоровшс аивотных / Ludwig, ,1950; Desjardins et. al.,1973; Cunninghea, Iluckins , 1979;вапэа1, Davieз ,1986/. Некоторые покавогелн функциональной активности спермы (концентрация, подвижность) черев 2 оуток поело введения Тс или ДГТ не отлич«чшоь от соответствугщшс дойных у контрольных животных. Однако было обнаружено повыш&люа количество патологических форы среди епидвдвмалышх сперыаев (21,63+0,68$ и 21,73+ 0,9з£ соответственно,в контроле - 17,33+ 1,02^,^0,05).

Чэрея 48 суток ;.осяе введения То установлено увеличение концентрации сперииев (71,20+5,20 млн, в контроль - 53,75+5,3? илн, Р-^0,05); ДГТ не вывивал ишенений в данной показателе. Аналогичные результаты были получены И.В.СидоровоЛ/1991/ пост однократной .инъекции ДГТ у нормальных кроликов. Выявлено, уаеличо-ние количества патологических форл спермиев как посла введе.гкя Тс, так и ДГТ (22,84+1,76% и 23,13+1,68% соответственно, в контроле - 18,92+1,28%, Р<£ 0,1). Подвига ость спэрмиев было в пределах, контрольных еначоний.

Мы полагаем, что появление морфологичеоки ишонегмих сперын-ев у самцов крыс после введения аадрогенов евявано как с непосредственным в^ектои екоогонных Тс иле ДГТ иа гаы&га, так к опосредовано ивмвнениями функциональной активности тзетикуляр-!шх и впидидшальшге клеток, обеспечквыщшс .среду, в которой находятся гаметы. В качестве подтьорзденяя прямого влияния ан-дрогонов можно рассматривать наличие специфических вндрогекн:^: -рецепторов в гаметах, свидетельствуюцазс о связывании исслодуа-' -мше гормонов клетками /У.Ыейнуоринг, 1979; С.С.Райдвнв,1983} Frankel, Chapman , .1984/.

Продолжительность сперматогенеза является величиной постоянной и видоспеци^ичной /С.С.Райцина,19В5/. У крыс ыеуду первш целением определенной популяции сперматогоний и выходом их в эвде сперматоЕовдов в зпидидимис проходит 48 суток /.Clermont »t. al.,1959/. Транспорт спермиев черев придаток яичка продол-кается немного более 8 дней / Sujarit, Aolpraaool ,1985/.

Таким обравш, через 2 суток после анцрогениеации самцов в эплодотворонии принимали участиэ спермии, которые в момент гор-юнальных вовдействий находились в тале придатка семенника, по-¡кольку продвижение спермиез от тела до-проксимальной части хво-!та впидидимиса составляет 2 дня и менее i дня затрачивается на юреход спермиеи ив проксимальной части "к дисгальному отделу и оста придатка яичка / sujarit, РЬо1ргадоо1 ,1985/. Исходя ив грив еденных выше рассуждений, череа 48 суток'после введения ан-¡рогенов в оплодотворошги участвовали спэр:лга, которые в момент •орыональннх воздействий находились на начальных этапах сперма-■огенева - на стадии сперматогоний.

Несмотря на повышенное количество дегенеративных форм сперми- . iB, показатели, характеризующие фертильность и плодовитость сам-,ов, не отличались от контрольных значений.

Постнатальное раввитие и подовая функция потомства самцов, олучавших То либо ДГГ еа Z суток перед спариванием. Появление раввитие биологических признаков, характерных для крысят, у сследуемых потомков наблюдалось примерно в те же воврастные пе-иоды, что и в контроле.

Введение самцам-производителям То не повлияло w массу тела овврожденных крысят; при назначении им ДГТ масса тела новорож-энных потомков превышала контрольный уровень. В свяви с ыень-w приростом по сравнению с контролем исследуемые потомки до помесячного возраста по массе тела уступали контрольным живо-яым (равличия статистически достоверны). С 40-дневного вовра-га масса тела потомков стада приближаться к значениям коктро-

I.

Характер поведенческого онтоинева также отличался от конт->ля. Если у контрольных животных интенсивность двигательных )акций о воврастоы увеличивалась, у исоледуемых потомков -»пилась. Характер воарасмшс изменений вегетативных реакций потомков был аналогичен контролю. Следует отметить двигатель-гю гиперактивность, обнаруженную у потомков обоего пола в од-

помесячно» во8расте.

Половое раввитие происходит одновременно с соматическим и строго координировано с ним /А..Г.Резников, 1982/. У исследуемых потомков аногениталь'ное расстояние но отличалось от контроля, что свидетельствовало о нормальной шбриогенезэ половой системы. Однако, в группах, где использовались Тс или ДГТ, опущение яичек в мопонку у хрысяг наблюдалось на 27,46+0,43 к 25,87+0,39 донь соответственно (в контроле - на 24,83+0,82 дьнь, Р^.0,05), раскрытие влагалища - иа 63 45+2,13 и 74,87+2,63 день соответственно ( в контроле - на 56,08+1,59 день), Р4.О,05. Полученные данные свидетельствовали э вадерие полового совревшшя у потомков. Существует точка врэния о функциональной ¡значимости ДГТ и 3©¿-диода в нивведении яичек в мошонку / Ка1Гог ,1982/. У самцов крыс с 21-дневного возраста до 6-6 надели наблюдается повышение уровня ДГТ и ЗсС-циола /В.Г.Дегтярь,1992; ОгЮчзк! въ е1. ,1988/. Это дает основан/о полагать, чтс у исследуемых потомков причиной вацерхки опущения яичек в мошонку явилась недостаточность ДГТ и Зс^-диола в контрольный воврастноГ. период. Задержка наступления пубертата у мужского потомства могла быть такта вызвана недостаточной еролссгью гипоталамо-гипофиварно-гонадного комплекса в ранний, возможно, и средний периода полового созревания. '

У самок открытие влагалища свяеывают с местным деГ.ствиеи ес-трогенов /А.Г.Ро8ников,1982; В.Б.Ровен,1984/. Повышенный синтеа и секрецию эстрогенов в яичнике вапускают гонадотропные гор'оны /Д.Т.Байрд,х987; НПНег ,1987/. По-видимому, в контрольные сроки'раскрытия влагалища у исследуемых потомков уровень функционирования гипочаламо-гипофиварно-гонадной системы был недостаточен, чтобы выввать разрыв вагинальной мембраны. Возможно, это ■ свявано с перестройками в. иейромедиаторнсы ввена регуляции, одерживающем активацию половой системы.

В репродуктивном воврасте пля потомков обоего пола был характерен гиперандрзгенный гормональный статус. У мужского потомства в группе, где использовался Тс, уровень данного андрогена составлял 7,62+0,54 1&/л и 8,04+0,99 Ш/л в группе, где наека-чался ДГТ, тогда как в контроле - 5,70+0,39 Ш/я (равличия статистически достсаорны). Концентрация Ег> - соответственно 176,55ь 20,81 йА/л (Р>0,1).и 224,65+15,82 пМ/л (Р<0,05) против 166,7% 18,77 Ш/л в. контроле- Андроген-естрогекное сооЬюшение у потомков (38,21+2,42 и 47,76+8,89 соответстзенно) превышало коктроль-

Ш уровень (27,23+3,18) (равличия статистически достоверны), го свидетельствовало об относительном преобладании анцрогенов и: эстрогенами.

Суммарная гонадотропная активность гипофиза у исследуемых >тсыков прэвышала контрольный уровень: у инфантильных самок )ыс, получавших гипофиварные экстракта самцов, отцам которых |ред спариванием назначали Тс или ДГТ, в 70% и 60£ случаев со-■вотственно обнаруживалось раскрытие влагалища, тогда как в «троле в 25% случаев (Р>0,05).

Таким, обравом, у потомков система гипофиз-гонады "работает" i более высоком уровне. Соответственно этому в семенниках по" авнеиию с контролем выше функциональная активность гормонсек-тирующих клеток Лейдига, стимулируемых ЛГ, и интенсивность ерматогенеза, регулируемая гипофиеарным ФСГ и Тс, синтезйруе-ы интерстициальными клетками, о чем свидетельствовала гисто-гическая картина семенников.

Подвижность спермиев у потомков в пределах контрольных знаний. Концентрация половых клеток превосходит контрольный писатель (79,75+9,57 млн и 78,46+9,87 млн против 57,88+3,66 млн контроле, Р<£0,01?. Отмечается увеличение количества патоло-ческих ifojM спермиев (16,15+1,29% и 16,97+1,22$ соответствен-против 6,75+0,37? в контроле, Р<£. 0,001). Однако выявленные рфологичоскне изменения в спермиях не повлияли на фертильно-' ь и плодовитость исследуемых потомков.

В половсы поведении потемки проявляли типичные мужские, чер-, что позволяло судить о нормальной половой дифференциации зга в критический период. При "трактовке поведенческих данных исходили иа гипотезы о существовании 2 регуляторкых механизме центрального и периферического / Beach и Jordan ,1956/. •¡тральный механизм определяет мотивалионный компонент полово-повепенид (половое влечение), тогда как периферический упра-?ет со(5ственно копуляцией. Уровень функциональной активности «рального механизма определяет параметры: латентность садки, стельность гостзякуляторного интервала; об активности перифе-1еского механизма судят по величине латентности оякуляиий и ;лу интромиссий перед эякуляцией /Н.А.Карпенко,1992/. У исследуемых потомков уровень "ухагивательного"поведения эзышал контрольный показатель. Отмечалось некоторое ослабле-з мотивационного компонента полового поведения по сравнению юнтрог«. Был зарегистрирован низкий уровень когтулятивной

активности: латентный период эякуляции увеличился, чисю кнт-рсыиссий песед эякуляцией уменьшалось, уровень копулятивных реакций еа тест снижался. В серии покрытий % садок превышал контрольный уровень (34,6% и 31,8% против 19,8% ¿.контроле), соответственно количество копуляций было снижено (65,4/а и 65,2% против 80,2% в контроле) (равличия статистически достоверны). Таким обравсм, у мужского потомства ыевду центральный!! и периферическими механиеыаыи регуляции складываются иные функциональные вваимоотношения по сравнению с контролем, что и ' определило характер копулятивного поведения.

У ганского потомства в репродуктивном возрасте уровень авд-рогенов составлял 2,1&£0,0? й>1/л и 3,78+0,44 нМ/л, тогда как в контроле - 1,58+0,12 Ш/п, Р/10,05). Содержание Е2 в группе, где применялся Тс, не отличалось от контрольных (значений (223,84+21,15 пМ/л, Р>0,1), в труппе, где использовался ДГТ, - было горавдо ниже контрольного уровня (1^,72^23,04 гЫ/л против 205,49+13,74 г(А/л, Р<0,05). Андроген-эстрогенное соотношение составляло соответственно 21,74+7,25 (Р> 0,1) и 24,16+ "5,44 0,1) против 12,08+1,21 в контроле.

При иБучении овапиальных гистологических прёпаратов у потомков была обнаружена увеличенная тека, основной продуцент ан-рогенов в яичнике / ИавоГПа, ЕгАскаоп ,1981/, что свидетельствовало о повышенной ее функциональной активности,

В соответствии с гиперандрогенным гормональным статусси в обеих группах регистрировалось снижение относительной массы ыатки /Шт.-Милку,1973/. У самок, отцы которых получали Тс, наблюдалось увеличение продолжительности цикла (5,92+0,35 дней против 4,67+0,67 дней, Р£ 0,05) и отдельных его стадий•(течки н мехтечкового периода) (2,18+0,07 дней и 3,75+0,37 дней соответственно против контрольных покавателей 1,63+0,04 дней и 2,80+0,15 дней, Р4 0,05).

Половое поведение у потомков было типично женским,активность процептнвного и собственно спаривательного поведения не отличалась от контроля. Не было обнаружено отклонений при ив-учении фертильности.

Таким обравом, назначение самцам Тс или ДГТ аа 2 суток перед спариванием способствовало вовлечению еквогенных андроге-нов в процессы доеревания эпидидшаальных спершгав, участвующих в оплодотворении, и вызвало отклонения в фйеическсы, поло-

ом развитии, формировании психических и половой функций потом-ов.

Особенности постнатального развития и репродуктивной функции отомков в случае андрогенивации самцов-прои8водителей за 48 уток пгред спариванием. При рождении потомки андрогенизиро-анных самцов по массе тела не отличались от контрольных живота. либо превосходили их (последнее относится к потомству яен-*ого пола, отцы которых эа 48 суток перед спариванием получали 7Г). Прирост массы тела у потомков в исследуемые воврастные зриоды превсзходил контрольные значения,, причем у мужского по-злства равличия были более значительные. Общий биологический ровень развития потомков незначительно отличался от контроля.

Урсве-ь эмоциональности у потомства во все исследуемые пори-1ы был приближен к контрольным еначоииям, что свидатольствовало нормальном онтогенезе вегетативных реакций. Направленность зврастных изменений локомоторной и исследовательской активнос-»Й у потомков обоего пола была аналогична контролю, что соот-сгственно характеризовало поведенческий онтогенев у исследуете животных. Интенсивность двигательных реакций у потомков в )учао;лые воврастгеы периоды, в оснозном, приближалась к конт-яьным значения«!.

Полученные результаты свидетельствовали о нормальном фивичэ-гоы развитии потолков саыцов, андрсгэннвирсванних_ва ¿8.-'суток фод спариванием. ,

Аногени'тальпое расстояние у исследуемых животных соотвотст-щало полу и не отличалось от.контроля. Раскрытие влагалища у комков конского пола и опущение яичек в мошонку у самцов проходило примерно в то же возрастные периоды, что и в контроле, -исключением самцов, отцы которых перед спариванием получали , у них наблюдалась тенденция к преждевременному опущению чек (22,63+0,47 день против 23,67+0,27 день, Р<£ 0,1). В зрелом возрасте физиологический статус потомков обоего по-отличался от контроля. У мужского потомства в группе, где «менялся Тс,, содержание данного андрогена составляло 6,56+ 67 н!</л, в группе, где использовался ДГТ, 6,54+0,42 иМ/л, гда как в контроле - 7,85+0,38 Н\/л ( различия статистически

стоаорнч). , .'.-.•-'

Концентрация Е^ составляла соответственно 202,21+35,53 гЫ/л >0,1) и .71,31+9,88 гМ/л .(Р*£ 0,05), тогда как в контроле -

158,94+20,43 ith/n. Андроген-эстрогенное соотношение у потсмкос Тс-обработанных самцов свидетельствовало об относительном преобладании ветрогонов (23,76*4,68), у потомков ДГТ-получавших самцов - андрогбнов (64,68+8,23) ( контроль- 35,31+3,20) (различия статистически достоверны). „

В семенных канальцах исследуемых потомков просматривались все типы гамет, что свидетельствовало о полной цикло спермато-генэва. Вэпидидимальной суспензии потомков регистрировались" повышенные концентрации спермиев (108,33+12,86 млн и 96,00+ 11,68 млн соответственно против 52,83+8,59 млн в контроле (раз личия статистически достоверны). Подвижность врелых гамет, количество патологических форм спермиев не превышало контрольный уровень. )

Половое поведение было типично мужским, что сввдотельствова ло о нормальной половой дифференциации мовга в критический период. Исследуемые самцы отличались повышенной сексуальной воз. будимоегью, о чем свидетельствовали короткие латентные периоды садок, интромиссий, поствякуляторный интервал. Уменьшились также латентность эякуляций и "число интромиссий перед эякуляцией. Перечисленные показатели свидетельствовали о высоком уровне ■ функциональной активности центрального и периферического звеньев регуляции полового поведения. Более того, у потомков наблюдалась высокая копулятивная активность. Такой характер полового поведения вовможен был при повышенном уровне ДРГ. Известно, что ДГТ, в основном управляет периферическими регуляторными механизмами /А.И.Глздкова, H.A.Карпенко,1989; Stefanie, David, son , 1987/, но может оказывать влияние и на центральное звено регуляции /H.A.Карпенко, 1992; Баша et. al. ,1982/, а в сочетании с оказывает достаточно сильное центральное действие / Sodersten et. al; ,1986/. Полученные результаты убеждают, что в регуляции мужского полового поведения важное значение имеет соотношение'гормонов.

У женского потомства в врелоы возрасте была обнаружена абсолютная гиперэстрогения. Содержание Eg в периферической крова составляло соответственно 238,30+71,43 гЙ/л и 154,47+25,81 nfvî/л против 63,44+15,48 пМ/л в контроле (различий статиотичо-ски достоверны). Уровень Тс в группе, где использовался Тс, не отличался от контрольных значений (2,83+0,23 нМ/л против 2,5Э+ 0,18 нМ/л, Р> 0,1 ); в группе, где применялся ЬгТ, превышал ко-нтрмыгаэ вначения (3,94+0,43 нМ/л, Р< 0,001)* При аналивэ ве-

ины андроген-эстрогенного соотношения в сравнении с контро-в обоих вариантах исследования не было установлено статис-еской достоверности: соответственно 16,76+5,84 и 34,29+7,72 тив 34,16+8.61 в контроле (Р>0,1).

Результаты гормональных определений согласовывались с морфо-ическими показателями. У потомков, отцы которых получали Тс, и увеличены яичники. Иввестно, что масса яичников увеличив ая ва счет размеров фолликулов, что, в свою очередь, опреде-тся разрастанием клеток гранулевы, на пролиферативную актив-ть которых оказывают влияние эстрогены /А.Л.Падучева, Д.'£. ко,1965; Апаз^пз ,1986/.

В соответствии с выявленной эстрогенизацие'й половое поведе-у потомков было типично женским и активным. Эстрогены игра-определяющую роль в развитии рецептивносги и спаривательной ивности у самок крыс /В.Б.Розен,1984/. Гаким образом, вовлечение экзогенных авдрогенов в процессы {юренииации и.раввития сперлатогоний у самцов ивдуиировало юнения в состоянии половой функции их потомков.

Звучение мутагенного эффекта ДГТ. О мутагенном эффекте Тс «стоящее время имеется достаточно информации /И.З.Серова, .Керкис,1974; Е.п.Антипенко, О.Й.Тиичвнко,1988/. О ДГТ подо-к сведений в доступной нам литературе не обнаружено. В свя-; этим был поставлен эксперимент по изучению возможного му-" эьного действия ДГТ. Цитогенетическое;исследование клеток ;ного костного мозга проводилось у потомков самцов, получас ДГТ 8а 2 суток перед спариванием, т.к. в этой постановке 1 получены более значительные отклонения' в физиологических 1зателях потомков. У мужского потомства андрогенизированных юв, количество аберрантных клеток достоверно превышало кон-гьный уровень (1,82% против 1,02$ в контроле, Р^.0,01). По-)нные результаты в совокупности о выявленными фенотипически-лклонениями у потомков свидетельствовали о повреждающем :твии ДГТ в мужских гаметах на уровне генома.

ВЫВОДЫ

. Назначение Тс или ДГТ самцам крыс вызывает увеличение [а морфологически измененных спермиев, что обусловлено про-ювением исследуемых андрогенов в семенные канальцы и прида-яичка к непосредственны.! воздействием, на тГвметы. йкзоген-Тс и ДГТ влияют на'геном иухбких половыу клеток. -

Z, Тс и ДГТ оказывают примерно равнозначные аффекты на фу1-кшю воспроизведения самцов, в свяви с чем направленность и характер последствий воздействия названных андрогенов на гаме ты в соответствии с их стадией развития для потомства приобре тают общие черты. -

3. Чувствительность к исследуемы.» андрогенам врелых эпиди-

димальных спермиев выше по сравнению со сперматогониями.__

-—4. Этсвогенные Тс и ДГТ, влияя на процессы, связанные с до-вреванием спермиев в придатке семенника и оказывая напосредст венное вовдействие на гаметы, вызывают отклонения в фивическо развитии» половом созревании и репродуктивной функции их пото ков.'

5. Воздействие экзогенных Тс или ДГТ на эпидидимальные спе мии самыов индуцирует у юс потомков гиперандрогенный гормонал ный статус, обусловленный повышенной активностью интерстициая ных клеток семенника и текальных клеток яичника. На фоне ги-перандрогегаи у мужского потомства отмечается повышенная инте: с ив н осгь сперматогенеза, высокий уровень спермопродукшш, одн ко увеличивается количество патологических форм спермиев, снижается интенсивность копулятивных реакций; у женского потомства в случае навначения самцам-производителям Тс нарушается пр< должительность и фавоввя структура астрального цикла.

6. Вовлечение экзогенных Тс и ДГТ в процессы дифференииаци! и развития сперматогоний сашов впоследствии вывывает незначительные отклонения в фивическоы и половом развитии их потомков. Однако в репродуктивной возрасте у мужского потомства pat виваются отклонения в гормональной статусе, обусловленные снижением уровня То. На фоне указанных гормональных изменений у самцов-потомков наблюдаются повышенные концентрации спермиев, повышенная сексуальная вовбудимость в сочетании с ускоренной эякуляцией, что, вероятно, связано с достаточно высоким уровнем ДГТ, У женского потоысгвара ввивается гиперэстрогения, которая не оказывает модифицирующего влияния на их полову» функцию. . .

. - » По теые диссертации опубликованы следующие работы:

1. Гладкова А.И., Золотухина В.Н. Поведенческие реакции у потомков андрогенивированннх крыс-самцов.// ЦеЬюторы в генетической регуляции поведения: 1£атвр.Всбс.симго8..г.Новосибирск

' - 16 - ч

-14 июня 1986.-Новссибирск,198б.-С.П-12.

2. Золотухина В.Н. Последствия гормональной обработин по девской линии для фнвичаского и полового развития потомков зэго пола.// Натер. 1Д обз.няутао-практич.rouf.сексопатологов. ■■.Карьков,14 мая* 1987.-Харыюв,1987.-С.344-316.

3. Золотухина B.H« Последствия авдрогенной обработки крыс- . шов для потомства.// Генетхческйе аспекты патологии: Тев.

сл. ХУ межобластной научно-прак«Л.конф.-г.Харьков,1987.-)ьзов,а9Е7.-С.8. / - .

4. Гладкова А.И., Золотухина В Л* Последствия гормональной «дотки по отцовской линия дал фИ8ич»ского и полового равви-[ потомков мужского поя».// Молекулярные и функциональные яниемы онтогенеза: Те8.дотл.Всео.симпо8.-г .Харьков,27-29 ок-¡р: 1987.-Харьков,1987.-С.50.

5. Золотухина В.Н. Отдаленные последствия введений дагидро-тостерона самцам для потскства. /Дев.докл. I съввда мед.ге-ихов Украшш.-г.Львов, 24-26 марта 1988.-Львов,1988«-СЛ39. S. Гладкова А.И., Зологухяна В.Н. Половы» функции потомства рогениаиров'анных отцов. //Теа.докл. П Всес.конф. педиатров-окринологов.-г.Москва, 30-31 мая 1988.-ià.,1988.-C.42f

7. Золотухина В.Н. Половах дифференциация мовга и наследст-ная пгаораадрогения у саков крыз.// Тев.докл. Ш Всео.кон$. яейроэндок1Жнологии.-г.1ч1ьгов,3-5 октября i988.-JI.,i9Ö8.- - ;

33. -' Г"!-:.': ' - . "

9. Гладкова А.И.,БагриД АЛЬ (Золотухина В .Н. Наследственная здача ишвнений гормонюгьшго статуса по материнской к от-зкой шшии.// Тв8.до1и. Международного скзвещания.-г.Новоси-jr., 11-15 юоля 1988.-Новосхбирск,1988.-С.32-34. ). A.c. m 1645960 СССР Способ моделирования врожденной ги-шдрогении.// А.И.Гладкава, В.Н.Золотухина (СССР) - Заявка >77142; Заявл. 11.04.89; Звреглстр. 3.01.91. ). Золотухина В.Н. Влияние тестостерона на воспроивъодйтель-способность свмцов врыв и их потомков.// Теа.докл. ШВсео. да ввдохр,тологсв.-г.Г»даент,1&-19 мая 1989.- Ташкент: пиша,1989.^0.42-43.: . '. "А ';/

Сидорова 1.В.,Золотухина B.U.,Карпенко S.O. Про вначен-снгхдротестостарону дам peryaaniïi рвпродухтжвно1 фуюоЦД : , lia' щур».// Ро8виток ф1в1ологИ в Укра1нсь*1й PCP ва 1986-1роки: Зб.матерхалхв ХЩ в»1аду Укра1нськог$ф1в1олог.т-ва. jtpxli 17-21 вереска Х990.-К.(Наукава дуызаД990.-С.114-115.