Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Развитие интродуцированной популяции fusarium culmorum (W. G. SM) sacc. в различных почвенных условиях

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шахназарова, Влада Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Использование прямых методов для изучения микромицетов в почве.

1.2. Развитие Fusarium в ризосфере растений.

1.3.Влияние влажности на развитие грибов рода Fusarium.

1.4. Влияние механического и минералогического состава почвы на развитие грибов рода Fusarium.

1.5. Изученность почвенной стадии жизненного цикла 26 Fusarium.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Получение сыворотки на F.culmorum

2.2. Методы, применявшиеся для слежения за F.culmorum в почве.

2.3. Постановка лабораторных, вегетационных и мелкоделяночных опытов.

2.4. Анализ почвенной микрофлоры. 46 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3. Общая характеристика развития внесенной популяции F.culmorum на мембранном фильтре в почве.

- 3

4. Сравнение развития Т.сиХшогш на фильтре, погруженном в почву, и непосредственно в почве, при разной плотности внесения гриба.

5. Развитие внесенной популяции ¥.оиХтогж в различных почвенных условиях.

5.1. Развитие ¥.сиХшогт в неризосферной почве и ризосфере различных растений.

5.2. Развитие ¥.сиХтогж в почве разной влажности.

5.3. Развитие ¥.сиХтогж в почвах, различающихся по механическому составу.

5.4. Развитие ¥.сиХтогж в ризосфере ячменя при запашке зеленой массы

6. Почвенная стадия жизненного цикла ¥.еиХтогж.

6.1. Прорастание внесенных макроконидий.

6.2. Структуры, формируемые Т. сиХтогж в почве.

6.3. Динамика развития внесенной популяции ¥.сиХтогж.

6.4. Конидиеобразование.

6.5. Лизис грибных структур.

6.6. Хламидоспоры. 114 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 120 ВЫВОДЫ 123 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Развитие интродуцированной популяции fusarium culmorum (W. G. SM) sacc. в различных почвенных условиях"

Многие грибы рода Fusarium - почвообитающие факультативные фитопатогены, вызывающие болезни ценных сельскохозяйственных культур (Райло, 1950, Билай, 1977). Фитопатогенные грибы рода Fusarium, и, в частности, возбудитель корневой гнили злаков Fusarium culmbrum, хорошо изучены в условиях роста на питательных средах (Билай, 1977), но про их развитие в естественном местообитании - почве - до сих пор известно мало. Между тем именно почва является местом сохранения и выживания патогена. Известно явление супрессивности почв к фузариозу, когда на некоторых почвах растения не болеют даже при высокой плотности возбудителя в почве (Норег, Alabouvette, 1995). Природа супрессивности до сих пор не ясна окончательно, хотя активно изучается уже в течение нескольких десятилетий. Известно, что супрессивность связана с рядом почвенных характеристик (в том числе с влажностью и механическим составом).

Отсутствие точных сведений о почвенной стадии жизненного цикла почвообитающих фитопатогенных фузариев (так же, как и подавляющего большинства почвенных микромицетов) объясняется сложностью наблюдения за конкретным грибом в почве. В настоящее время этот вопрос - детальное описание жизненных циклов отдельных микромицетов в почве - только начинает разрабатываться (Couteaudier, Steinberg, 1990; Марфенина с соавт., 1991;

- 5

Струнникова, Вишневская, 1995).

Цель работы - изучить развитие внесенной популяции Fusor íum culmorm в различных почвенных условиях, описать почвенную стадию его жизненного цикла.

Основные задачи исследования: I. Определить пригодность метода мембранных фильтров для изучения развития F. culmorm в почве.

2. Проследить на протяжении длительного срока за развитием внесенной в почву популяции F.culmorum, описать его развитие в почве.

3. Изучить влияние ризосферы, а также некоторых почвенных условий на интенсивность развития F.culmorum и биоморфологическую структуру его популяции.

Научная новизна. Доказана пригодность метода мембранных фильтров для изучения развития микромицета в почве.

Впервые прослежено развитие внесенной популяции гриба из рода Fusarium в естественной почве в течение длительного времени (до 114 суток) с учетом всех формируемых грибом структур. Изучена почвенная стадия жизненного цикла F.culmorum.

Установлено, что основная (а в некоторых случаях единственная) структура, формируемая F.culmorum в почве -мицелий.

Установлено, что почвенная влажность и близость корней растения влияют главным образом на уровень популяции F.culmorum (количество всех формируемых грибом структур), а механический состав почвы - на соотношение формируемых грибом структур (биоморфологическую структуру популяции).

Установлено, что количество формируемых конидий зависит от плотности мицелия и механического состава почвы.

Практическая значимость. Показано, что фитопатогенный гриб F.culmorvm способен к активному сапротрофному существованию в почве.

Изучено развитие F.culmorm в условиях, приводящих (согласно литературным данным) к различной заболеваемости растений, а также в ризосфере восприимчивого и невосприимчивых к фузариозу растений. Выявлены условия, влияющие на уровень F.culmorm в почве. Установлено, что развитие внесенной популяции F.culmorm не различается существенно в ризосфере растения-хозяина и непоражаемых культур.

Апробация работы. Результаты работы были доложены на International Conference "Biotechnology Sankt-Petersburg-94" (St.Petersburg, Russia, 1994), 4th International EFPP Symposium (Bonn, Germany, 1996), на II Всероссийском съезде общества почвоведов (Санкт-Петербург, 1996), на 6th. International Mycology Congress (Jerusalem, Israel, 1998), на конференции молодых микологов "Проблемы микологии на рубеже веков" (Москва, 2000).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ.

- 7

Объем и структура работы. Диссертация включает введение, 6 глав, состоящих из обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, а также заключение, выводы, список цитируемой литературы и одно приложение. Работа изложена на 146 страницах текста, иллюстрирована 31 рисунком, включает 9 таблиц. Список литературы состоит из 160 источников, из которых 106 зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Шахназарова, Влада Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что динамика формирования и лизиса всех структур ¥.сиХтогт сходна при его развитии непосредственно в почве и на погруженном в почву мембранном фильтре. Это доказывает, что использование мембранных фильтров в качестве подложки при изучении развития данного гриба в почве допустимо.

2. Проведено долговременное (до 114 суток) слежение за развитием внесенной популяции Т.еиХшогт. Установлено, что факультативный фитопатоген Т.оиХшогш, интродуцированный в почву, способен развиваться как сапротроф, формируя мицелий, макроконидии и хламидоспоры.

3. Установлено, что мицелий - основная структура, формируемая Т.сиХтогж в почве и способная длительное время обеспечивать рост и выживание гриба без участия других структур. В естественной почве мицелий составляет от 89 до ЭЭ% популяции гриба по биомассе.

4. Показано, что интенсивность конидиеобразования связана с уровнем развития мицелия. Описано одиночное и массовое конидиеобразование. Одиночно образующиеся конидии большей частью быстро прорастают, принимая участие в дальнейшем развитии ¥.ои1шогш. Конидии, формирующиеся в скоплениях, практически никогда не прорастают и быстро лизируются.

- 124

5. Установлено, что активное формирование хламидоспор чаще всего приурочено к периодам активного лизиса мицелия и конидий. Доля хламидоспор в популяции ¥.сиХтогж в естественной почве мала, а способность к выживанию в почве сравнима с таковой мицелия и конидий.

6. Показано, что развитие ¥.сиХтогж стимулируется присутствием в почве корней растения. Влияние ризосферы растения-хозяина и непоражаемых растений на развитие гриба не различается существенно.

7.Установлено, что уровень развития ¥. сиХтогж зависит от почвенной влажности: гриб активнее развивается в почве 20%, нежели 60% влажности. Постоянного влияния влажности на биоморфологическую структуру популяции ¥.си1тогж не отмечено: возрастание доли хламидоспор во влажной (60%) почве по сравнению с сухой (20%) наблюдали лишь на ранних этапах развития внесенной популяции гриба. В почве Ъ% влажности ¥. сиХтогж не развивается.

8. Показано, что механический состав почвы оказывает влияние прежде всего на биоморфологическую структуру популяции ¥.си1тогж: в более тяжелой почве гриб формирует больше конидий и меньше мицелия. Влияние механического состава на уровень развития ¥.си1тогт зависит от других почвенных условий (почвенной микробиоты, присутствия растения).

- 120 -ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Изучено развитие внесенной популяции ¥.си1тогт в естественной почве в течение длительного времени (до 114 суток) с учетом всех формируемых грибом структур. Гриб вносили в почву на поверхности мембранного фильтра, что обеспечивало его обнаружение в4 почве после сколь угодно долгого периода инкубации. Было показано, что скорость и динамика развития всех структур гриба сходны при его развитии на погруженном в почву г мембранном фильтре и непосредственно в почве, что делает данный метод пригодным для изучения динамики развития грибных структур в почве.

Использование прямого метода слежения за внесенной популяцией Т.еиХтогж показало, что данный гриб способен к активному сапротрофному развитию в почве. При этом большую часть популяции (по биомассе) составляет мицелий. Установлено также, что макроконидии могут принимать активное участие в развитии Р.сиХшогт в почве, однако в нестерильной почве их доля в биомассе гриба невелика. Описаны два процесса: одиночное и массовое конидиеобразование. Одиночно образующиеся конидии большей частью быстро прорастают, тем самым включаясь в дальнейшее развитие гриба в данной микрозоне. Однако мы не видели прорастания массово образующихся конидий. Мы предполагаем, что массово образующиеся конидии - структура сугубо раеселительная, они формируются грибом в рассчете на то,

- 121 что какая-то их часть будет унесена (почвенным раствором, почвенными животными) и положит начало заселению новой микрозоны.

Четкое чередование структур при развитии F.culmorm в почве отсутствует. Существование F.culmorm в почве может долгое время поддерживаться^ за счет одного лишь роста мицелия, возможно также чередование мицелия и макроконидий. Роль хламидоспор в существовании и выживании данного гриба в почве, согласно нашим наблюдениям, не так существенна, как принято считать. Во-первых, эта структура составляет наименьшую часть популяции F.culmorm по биомассе. Во-вторых, мы многократно наблюдали формирование хламидоспор, но практически никогда не наблюдали их прорастания (в том числе и в ризосфере). В-третьих, хламидоспоры достаточно быстро лизируются в почве. И, в-четвертых, гриб долгое время способен существовать только в форме мицелия. В целом, по нашим наблюдениям, роль мицелия в выживании в почве F.culmorm более существенна, а роль хламидоспор менее существенна, чем принято считать для грибов рода Fusor ím.

Мы понимаем, что делать какие-либо глобальные выводы на основании изучения одного штамма преждевременно. В то же время следует отметить, что методы, использовавшиеся при описании развития фузариев в почве в 1960 годы (когда и утвердилось мнение о роли хламидоспор как структуры выживания этого гриба), не давали возможность "выявить роль мицелия в йШвании и развитии гриба в почве. Исследователи видели развитие гиф и их

- 122 быстрый лизис, и считали, что выживание гриба в почве должна обеспечивать структура, не подверженная столь быстрому лизису. Внесение гриба на подложке и его последующая идентификация с помощью меченных флуорохромом антител позволили увидеть, что как рост, так и лизис грибных структур (преаде всего мицелия) идет в почве практически постоянно, а динамика развития популяции гриба в почве определяется соотношением зтих двух процессов.

Использованный нами методический подход позволяет оценить влияние условий на развитие гриба в почве как количественно (изменение общей биомассы), так и качественно (изменение биоморфологической структуры). Из всех рассмотренных почвенных и агроэкологических условий на биоморфологическую структуру популяции 1.си\шогш постоянное влияние оказывал лишь механический состав почвы. Остальные же условия влияли в основном на количество гриба в почве. Наиболее значимыми для общего уровня развития ¥.си1тогт из рассмотренных почвенных условий были почвенная влажность и присутствие почвенной микрофлоры. Присутствие же растения влияло на уровень развития популяции ¥.си1тогж не столь значительно, но позволяло грибу поддерживать этот уровень длительное время.

В целом наблюдаемая нами картина развития гриба, преобладание вегетирующей структуры - мицелия, небольшое количество покоящихся структур свидетельствует о способности ¥.си1шогж к длительному сапротрофному существованию в почве.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шахназарова, Влада Юрьевна, Санкт-Петербург

1. Беляева Н.Я. Влияние режимов питания и орошения на поражение озимой пшеницы фузариозами // Защита полевых культур от вредителей и болезней. Кишинев: ВАСХНИЛ. 1985. С. 136-146.

2. Бенкен A.A., Гришечкина С.Д., Хацкевич Л.К., Магила A.C. Формирование почвенной инфекции обыкновенной полевой гнили ячменя // Микология и фитопатология. 1990 - Т. 24. - Вып. 4. -С. 336-343.

3. Бенкен A.A., Доценко A.C. Условия прорастания микросклероциев Verttcillim (kthliae Kleb. в почве // Микология и фитопатология. 1970. - Т.4. - Вып. 4. - С. 261-264.

4. Билай В.И. Фузарии. Киев: Наукова думка. 1977. 442 с.

5. Великанов Л.Л., Сидорова И.И. Грибы почвы и подстилки в лесных биогеоценозах // Тез. докл. II Всес. науч. конф. "Изучение грибов в биоценозах". Пермь. Сент. 1988. С. 10.

6. Вишневская H.A. Динамика и структура популяции фитопатогенного гриба Vert ici II im âdhlioe К1еЪ. в почве и на корнях хлопчатника : Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Л, 1999. - 19 с.- 126

7. Возняковская Ю.М., Никонорова А.К. Биологические основы борьбы с корневой гнилью ячменя. // Доклады Россельхозакадемии. 1993. - N 2.- С. 38-42.

8. Возняковская Ю.М., Попова Ж. П., Баскакова Г.П. Факторы, обусловливающие фитотоксичность почвы на начальном зтапе разложения в ней зеленых удобрений. // Бюллютень ВНИИСХМ. -1985. N 40. - С. 3-6.

9. Возняковская Ю.М., Попова Ж. П., Петрова Л.Г. Сидеральные удобрения регуляторы почвенно-микробиологических процессов в условиях почвоутомления. // Доклады ВАСХНИИЛ. - 1988. - N 2. -С. 6-9.

10. Возняковская Ю.М., Широков О.Г. Питательные среды для изучения корневых микроорганизмов // Труды ВНИИСХМ. 1958. - Т. XV. - С. 156.

11. Гусев А.И., Цветков В.С. К технике постановки реакции микропреципитации в агаре // Лабораторное дело. 1961 - N 2. -С. 43.

12. Демкина Т.С. Грибная биомасса различных типов почв: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. М, 1986. - 24 с.

13. Демкина Т.С., Мирчинк Т.Г. Определение грибной биомассы в почвах методом мембранных фильтров // Микология и фитопатология, 1983. - Т.17. - Вып. 6. - С. 517-520.

14. Демкина Т.С., Мирчинк Т.Г. Динамика грибного мицелия и спор некоторых почв // Почвоведение. 1985. - N 3. - С. 94-99.

15. Довбан К.И. Применение зеленых удобрений в интенсивном- 127 земледелии. Минск: Ураджай. - 1981. - 206 с.

16. Егорова Л.Н. Почвенные грибы Дальнего Востока: гифомицеты.- Л: "Наука" 1986. - 192 с.

17. Звягинцев Д.Г. Проблемы экологии почвенных грибов // Тез. докл. II Всес. науч. конф. "Изучение грибов в биоценозах". Пермь. Сент. 1988. С. 16.

18. Звягинцев Д.Г., Зайцева В.Е. Кратковременные изменения биомассы грибов и бактерий в дерново-подзолистой почве // Микробиология. 1979. - Т. 48.- Вып. 6. - С. 1032-1085.

19. Иванова А.Е. Жизнеспособность фрагментов мицелия почвенных микроскопических грибов: Автореф. дисс. . канд. биол. наук.- М, 1999. 28 с.

20. Кант Г. Зеленое удобрение. М.: Колос. - 1982. - 128 с.

21. Козьяков С.Я. Выявление микромицетов рода Aspergillus на поверхности субстратов методом иммунофлюоресценции // Микология и фитопатология. 1987. - Т.21. - Вып.5. - С. 449-451.

22. Котова В.В. Корневые гнили гороха: стратегия и тактика борьбы // Защита растений 1992. - N 2. - С. 13-16.

23. Лабутова Н.М. Метод скрининга бактерий-антагонистов к почвообитающим фитопатогенным грибам (на примере Yertieillium ödhlioje Kleb.): Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Л, 1990. - 20 с.

24. Лабутова Н.М., Вишневская H.A. Влияние Agrobacterium radiobacter на популяцию фитопатогенного гриба Fusarium solani в разных агроэкологических условиях // Тезисы докладов конференции- 128

25. Микробиология почв и земледелие". С. Петербург. Апрель 1998. С. 39.

26. Лагутина Т.М. Изучение взаимоотношений бактерии Bacillus brevis и фитопатогенного гриба Yerticillium ddhliae Kleb. в почве // Доклады ВАСХНИИЛ. 1982. - N И. - С. 28-29.

27. Лагутина Т.М. Изучение экологии почвообитакицего фитопатогена Yerticillium ödhliae Kleb. методом мембранных камер : Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Л, 1985. - 17 с.

28. Лагутина Т.М., Лабутова Н.М., Зуева Т.П. О сообществе бактерий, колонизирующих фитопатогенные грибы в почве // III Всесоюзный симпозиум "Биодинамика почв", 25-27 окт., 1988 г. -Таллин 1988 - С. 96.

29. Лагутина Т.М., Муромцев Г.С. Использование комбинированных камер для изучения жизнедеятельности микрооргагизмов в почве. // Некоторые новые методы количественного учета почвенных микроорганизмов и изучения их свойств. Л. - 1982. - С 25-26.

30. Литвинов М.А. Определитель микроскопических почвенных грибов. Л: "Наука" 1967. - 303 с.

31. Лугаускас А. Микромицеты окультуренных почв Литовской ССР. Вильнюс: "Мокслас" 1988. - 263 с.

32. Марфенина O.E., Макарова H.A., Попова Л.В. Прорастание спор микроскопических грибов как показатель антропогенного воздействия на почву // Вестник МГУ. 1989. - Серия 17. - N 4. - С. 64-68.

33. Марфенина O.E., Попова Л.В., Звягинцев Д.Г. Особенности- 129 циклов развития микроскопических грибов в почвах // Почвоведение. 1991. - N 8 - С.80-86.

34. Михеева Г.А., Брикман В. И. Влияние сидератов на биологическую активность чернозема обыкновенного // Плодородие почв и его воспроизводство в земледелии Восточной Сибири.

35. Новосибирск: ВАСХНИИЛ. 1988. - С. II0-II6.

36. Муромцев Г.С., Лагутина Т.М., Черняева И. И. Метод мембранных камер для изучения в почве Yerticillim öahliae Kleb. // Микология и фитопатология.- 1977. Т.П. - Вып. 4. - С.358-365.

37. Никитина З.И., Антоненко А.М. Изучение роста культур микроорганизмов в почве методом мембранных камер. // Закономерности развития почвенных микроорганизмов. Л: Зоологический музей АН СССР, Центральный музей почвоведения им.

38. B.В.Докучаева, ВАСХНИЛ. 1975. - С.202-212.

39. Никитина З.И., Мамитко A.B. Использование мембранных камер для мшфобиологической диагностики почв. М: Наука. - 1976.1. C.183-184.

40. Никитина З.И., Мамитко A.B. Метод мембранных камер и его применение для изучения состояния в почве природных популяций // Микробиологические процессы в почвах и урожайность сельскохозяйственных культур. Вильнюс: "Мокслас". - 1978. -С. 246-248.

41. Попова Л.В. Влияние уровней плодородия на почвенные микроскопические грибы // Почвоведение.- 1992.- N 9. С. 159-163.

42. Попова Л.В., Марфенина O.E. Особенности динамики популяций микроскопических грибов при разной влажности почв // Биодинамика почв. Таллин: Б.И. - 1988. - С. 133.

43. Практикум по агрохимическому анализу почв. Ред. С.М. Аксенова. Л: Издательство ЛГУ. - 1984. - 90 с.

44. Райло А.И. Грибы из рода фузариум. М.: Гос. издательство с./х. литературы. - 1950. - 415 с.

45. Растворова О.Г. Физика почв: практическое пособие. -Л: Издательство ЛГУ. 1983. - 193 с.

46. Соколов И. И., Чигирин И. И. Применение конкурентного ферментзависимого иммуносорбентного анализа для количественного определения мицелия грибов // Методы интенсификации селекционного процесса. Одесса: ВСГИ. - 1990. - С. 83-84.

47. Стовер Р.Х. Рост и выживание в почве грибов, вызывающихболезни корней // Проблемы и достижения фитопатологии. М.: Издательство сельскохозяйственной литературы. 1962. С. 405-426.

48. Струнникова O.K. Идентификация грибов рода Verticil lim и дифференциация внутривидовых форм 7. dahlias с помощью иммунохимических методов. Автореф. дисс. канд. биол.наук. Л, 1986. - 17 с.

49. Струнникова 0.К, Вишневская H.A. Развитие фитопатогенного гриба Yerticilliwn dahliae Kleb, в почве. // Микология и фитопатология. 1995. - Т.29. - Вып.2. - С. 59-61.

50. Струнникова O.K., Вишневская H.A., Батыров A.A., Муромцев Г. С. Вероятность возникновения вертициллеза люцерны в хлопосеющих регионах СНГ. // Доклады РАСХН. 1994. - N 2. -С.14-16.

51. Струнникова O.K., Вишневская H.A., Лабутова Н.М., Муромцев Г.С. Изучение экологии lerticillim dahliae возбудителя вилта хлопчатника - с помощью иммунофлуоресценции // Тезисы докладов V Мездународного симпозиума по вертициллиуму. - Л. - 1990. - с.15.

52. Adams Р.В. A buried membrane íilter method for studying oí soil fungi // Phytopathology. 1967. - Vol. 57. - N 6. - P. 602-604.

53. Alabouvette C.f Eparvier A., Couteaudier Y., Steinberg C.

54. Baker R. Biological control: eradication of plant pathogens by adding organic amendement to soil // Handbook of pest management in agriculture. Vol 2. Boca Ration, Florida: C.R.C.Press. - 1981. - P. 317-327.

55. Beswetherick J.T., Bishop G.D. A cellophane film inoculation technique for ultrastructural studies of fungus-plant root interactions // Trans. Brit. Mycol. Soc. 1987. -Vol 89. - N 4.- H. 603- 605.

56. Bolkan H.A., Dianese J.C., Cupertino P.P. Survival and colonization potential of Fusarim moniliforme var. subgluttmms in soil // Phytopathology. 1979. - Vol. 69. - N 12. - P 1298-1301.

57. Boven J.K., Peart J., Lewis B.J., Kooper C., Matthews P. Development of monoclonal antibodies against the fungi of the Ascochita complex // Plant pathology. 1996. - Vol.45. - N 3.1. P. 393-400.

58. Brownell K.H., Schneider R.W. Roles oi matric and osmotic components oi water potential and their interaction with temperature in the growth oi Fusarium oxysporum in synthetic media and soil // Phytopathology. 1985. - Vol.75. - N 1. - P. 53-57.

59. Burke D.W. Fusarium root rot of beans and behavior oi thepathogen in different soils // Phytopathology. 1965. - Vol.55.f- N 10. P.1122-1126.

60. Chacko C.I., Lockwood J.L. A quantitative method for assaying soil fungistasis // Phytopathology. 1966. - Vol.56. -N5. - P. 576-577.

61. Chinn S.H.F. A slide technique for the study of fungi and actinomycetes in soil with special reference to Helminthosporium sativum // Can. J. Bot. 1953. - Vol.31- P.718-724.

62. Choo Y.S., Holland A.A. Direct and indirect fluorescent antibody staining of Ophiobolus graminis Sacc. in culture and in the rhisosphere of cereal plants. // Antonie van Leeuwenhoek. 1970. - Vol.36. - N 4. - P. 549-554.

63. ChuS.B., Alexander M. Resistance and susceptibility of- 134 fungal spores to lysis.// Trans.of Brit. Mycol. Soc. 1972. -Vol.58. - N 3. - P. 489-497.

64. Clarke J.H., Macnicoll A.D., Norman J.A. Immunological detection of, fungi in plants, including storedcereals // Spoilage and mycotoxins of cereals and other stored products.

65. N.Y.:C A B International. 1986. - P 123-130.

66. Colhoun J., Park D. Fusarim diseases of cereals. 1. Infection of wheat plants with particular reference to the effects of soil moisture and temperature on seedling infection // Trans.of Brit. Mycol. Soc. 1964. - N 47. - P. 559-572.

67. Cook R.J. Influence of oats on soil-borne population of Fusarim rosevm f.sp. cerealis "culmorm" // Phytopathology. -Vol 58. N 7. - P. 957-961.

68. Cook R.J. Influence of low plant and soil water potential on diseases caused by soilborne fungi // Phytopathology. 1973. Vol.63, N 4. P. 451-458.

69. Cook R.J. Fusarim foot rot of wheat and its control in the Pacific Northwest // Plant Disease. 1980. - Vol. 64. - P. 1061-1066.

70. Cook R.J., Baker K.P. The Nature and Practice of Biological Control of Plant Pathogens. St Paul, MN.: American fitopatological society. - 1983. - 539 p.

71. Cook R.J., Christen A.A. Growth of cereal root-rot fungi as affected by temperature-water potential interactions // Phytopathology. 1976. - Vol.66. - N 2. - P.193-197.- 135

72. Cook R.J., Flentje N.T. Chlamydospore gemination and germling survival oi Fusarium solani f.sp. ptst in soil as affected by soil water and pea seed exudation. // Phytopathology. 1967. - Vol.57. - P. 178-182.

73. Cook R.J., Papendick R.I. Soil water potential as a factorin the ecology of Fusarim roseum f.sp.cerealis "culmorum" //

74. Plant and soil. 1970. - Vol.32. -Ml.- P. 131-145.

75. Cook R.J., Papendick R.I. Influence of water potential of soil and plants on root disease. // Annual Review of Phytopathology. 1972. - Vol. 10. - P 349-374.

76. Cook R.J., Papendick R.I., Griffin D.M. Growth of two root-rot fungi as affected by osmotic and matric water potential // Soil science society of american proceedings. 1972. - Vol.36, - N 1. - 78-82.

77. Cook R.J., Schroth M.N. Carbon and nitrogen compounds and germination of chlamydospores of Fusarium solani f. phaseoli in soil. // Phytopathology. 1965. - Vol. 55. - P.254-256.

78. Cook R.J., Snyder W.C. Influense of host exudates of growth and survival of germlings of Fusarium solani /. sp. phaseoli in soil. // Phytopathology. 1965. - Vol.55. - N 9. - P. 1021-1025.

79. Couteaudier Y. Competition for carbon in soil and rhizosphaere, a mechanism involved in biological control of fusarium disease, in: NATO worcshop "Biological control ofplant diseases" 1991 - P. 1-7.- 136

80. Couteaudier Y., Alabouvette C. Survival and inoculum potential of conidia and chlamydospores of Fusarium oxysporum f sp.lini in soil. // Can. J. microbiol. 1990. - Vol. 36. - N 8. - P. 551-556.

81. Couteaudier Y., Daboussi M.-J., Eparvier A., Langint T., Orcival J. TheGUS gene fusion system, a useful tool studies on root colonisation by Fusarium oxysporum. // Appl. Environ. Microbiol. 1993. V.59. Pp. 1767-1773.

82. Couteaudier Y., Steinberg C. Biological and mathematical description of the growth pattern of Fusarim oxysporum in a sterilised soil. // FEMS Microbiol. Ecol. 1990. v.76. p. 253260.

83. Davis J.R., Huisman O.C., Huisman O.C., Westermann D.I.-, Hafez S.L., Everson D.O., Sorensen L.H., Schneider A.T. Effects of green manures of Yerttcillium wilt of potato // Phytopathology. 1996. - Vol. 86. - N 5. - P. 444-453.

84. Dewey F.M., Barrett D.K., Vose I.R. and Lamb C.J. Immunofluores- cence microscopy for the detection and identification of propagules of Fhaseolus schweintzii in infested soil // Phytopathology. 1984. - Vol. 74. - P.291-296.

85. Ellis M.V. Dematiaceous Hyphomycetes. Kew, Surrey: Commonwealth Mycological institute. - 1971. - 608 p.

86. Elad Y., Baker R. The role of competition for iron and carbon in suppression of Fusarium spp. by Pseudomonas spp. // Phytopathology. 1985. - Vol. 75. - N 9. - P. 1053-1059.- 137

87. Elmhost S., Kjoller A. Measurement of the lenght of fungal hyphae by the membrane filter technique as a method for comparing fungal occurence in cultivated field soils. // Soil Biol. Biochem. 1987 - Vol.19. - N 6. - P. 679-682.

88. Eren J., Pramer D. Application of iranunofluorescent staining to studies of the ecology of soil microorganisms.// Soil Sci. -1966. Vol. 101. - P. 39-45.

89. Farismokaiesh S., Gorbiere R., Lyons N.F., Spire D. Evaluation of an ensime-lincedimmunosorbent assay for detection of Mycosphaerella pinocles in pea seeds. // Annals of Applied Biology. 1995. - Vol. 127. - N 3. - P 441-455.

90. Fitzell R., Evans G.f Faby P.C. Studes on the colonization of plant roots by Yerticillivm dahliae Kleb. with use of immunofluorescent staining. // Austral. J. Botany. 1980. -Vol. 28. - P. 357-368.

91. Furuya H., Ui T. The significance of soil microorganisms on the inhibition of the macroconidial germination of Fusarivm solani /. sp. phaseoli in a soil suppressive to common bean root rot. // Ann. Phytopathol. Soc. Jpn. 1981. - Vol.47. - P. 42-49.

92. Gerik J.S., Huisman O.G. Mode of colonization of roots by Yerticillivm and Fusarivm. // Ecol. and manag. Soilborne plant pathog. St. Paul, Minn: American fitopatological society. -1985. - P. 80-83.

93. Gerlach W., Nirenberg H. The Genus Fusarivm a Pictorial- 138

94. Atlas. Berlin: Herausgegeben von der Biologischen Bundesanstalt fur Land und Forstwirtschaft. - 1982. - 406 p.

95. Grasset E. Sur l'endotoxine typhique obtenue par congelation repetee. // GRS-Biol. 1935. - Vol. 118. - P. 765.

96. Goos R.D., Summers D.F. Use of fluorescent antibody techniques on the observations of morphogenesis of fungi. // Mycologia. 1964 - Vol.56. - P. 701-707.

97. Harrison J.G., Barlser H., Lowe R.f Rees E.A. Estimation of amouunt of Fhytopthora infest arts mycelium in leaf tissues by enzyme- linked immynosorbent assay // Plant pathology. -1990. Vol.39. - N 3. - P. 274-277.

98. Hanssen J.E., Thindstad T.F., Goksovr J. Evaluation of gyphal lengths and fungal biomass in soil by a membrane filter method // Oikos. 1974 - Vol. 25. - N 1. - P. 102-107.

99. Hoper H., Alabouvette C. Importance of physical and chemical soil properties in the suppressiveness of soils to plant disease // European Journal of soil biology. 1995. -Vol. 32. - N 1. - P. 41-58.

100. Hoper H., Steinberg C., Alabouvette C. Modification of the saprophytic behavior of a Fusarim oxysporm in sterilised soil supplied with different clay types. // 6th Int. Symp. Microb. Ecol., Abstr. Barselona, 1992 - P. 231.

101. Hoper H., Steinberg G., Alabouvette C. Involvement of clay type and pH in the mechanisms of soil suppressiveness to Fusarim wilt of flax // Soil Biol, and Biochem. 1995. Vol.27. N 7. - P 955-967.

102. Hornby D. Suppressive soils // Ann. Rev. Phytopathol. -1983. Vol.21. - P. 65-85.

103. Huber D.M., Schneider R.W. The description and occurrence of suppressive soils // Suppressive soils and plant disease. -St.Paul, MN: American fitopatological society. 1984. - P. 1-7.

104. Huisman O.C. Interrelations of root growth dynamics to epidemiology of root-invading fungi.// Annu. Rev. Phytopathol. -1982 Vol. 20 - P. 303-327.

105. Illustrated genera of imperfect fungi. Ed: Barnett H.L., Hunter B.B. New York: Macmillan Publishing company; London: Collier Macmillan publishers. - 1987. - 218 p.

106. Inglis D.A., Cook R.J. Persistence of chlamydospores of Fusartum culmorvm in wheat field soils of Eastern Washington // Phytopathology. 1986. - Vol.76. - N 11. - P. 1205-1208.

107. Jorge-Silva M.L., Rodrigues M.L., Ferraz J.F.P., Ricardo C.P.P. Effect of water availability on growth of Fusarim oxysporm /. sp. melonis and on host-parasite interactions // Mycological Research. 1989. - Vol.92. - N 2. - P. 157-161.

108. Kommedahl T. Relation of exudates of pea roots to germination of spores in races of Fusarivm oxysporvm f.pisi. // Phytopathology. 1966. - Vol. 56. - N 6. - P. 721-722.

109. Kumar D., Patton R.F. Fluorescent antibody technique for detection of Poliporus tomentosis // Phytopathology.- 1964. -Vol. 54. N 5. - P. 898.- 140

110. Liljeroth E., Franzonalmgren I., Gunnarsson T. Root coconisation by Bipolaris sorokintam in different cereals and relations to lesion development and natural root cortical cell death. // J. Phytopathol. 1996 - Vol. 144. - N 6. - P. 301-307.

111. Lin Y.G^, Cook R.J. Suppression of Fusarim rosem "avenaceum" by soil microorganisms // Phytopathology. 1973 -Vol. 63. - P. 384-388.

112. Lumsden R.D. A nylon fabric technique for studing the ecology of Pythiun aphmidermtm and other fungi in soil // Phytopathology. 1981. - 71. - N 3. - 282-285.

113. Lyda. S.D. Physical and chemical properties of suppressive soils. // Suppressive soils and plant disease. St.Paul, MN: American fitopatological society. - 1984. - P. 9-22.

114. MacDonald J.D., Duniway J.M. Use of fluorescent antibodies to study the survival of Phytophthora megasperma and P. cinnamomi zoospores in soil // Phytopathology. 1979. - Vol. 69. - P. 436-441.

115. Marchant R, Smith D.G. A serological investigation of hyphal growth of Fusarim culmorm. // Arch. Microbiol. 1968 -Vol. 63. - P. 85-94.

116. McKenzie P., Taylor G.S. Fusarium population in British soils relative to different cropping practices // Trans. Brit, mycol. soc. 1983. - Vol. 80. - N 3. P. 409-413.

117. Mol K. The influence of plant roots on the germination ofmicrosclerotia of Verticillium dahliae in the soil. //

118. Phytoparasitica. 1995. - Vol. 23. - N 1. - P. 54.

119. Muromtsev G.S., Strunnikova O.K., Vishnevskaya N.A., Labutova N.M. Influence of conditions on population of phytopathogenic fungus Fusarium sambueinum // Abstr. 6th Intr. Congr. of Plant Pathol. Montreal, Quiebec, Canada, 1993. - P. 31.

120. Nash S.M., Chrustou T., Snyder W.C. Ehsistence of Fusarium solani f. phaseoli as chlamydospores in soil // Phytopathology.- 1961. Vol.51. - P. 308-312.

121. Nelson P. Life cycle and epidemiology of Fusarium oxysporum. // Fungal Wilt Disease of Plant. NY: Academic press. 1981. -P. 51-80

122. Old K.M., Schippers B. Electron microscopical studies of chlamidospores of Fusarium solani /.Cucurbitae formed in natural soil // Soil biology and biochemistry. 1973. - Vol. 5. - Pp 613-620.

123. Oritseo'afor J.J. Influence of moisture and pH on growth and survival of Fusarium oxysporum f.sp. elaeidis in soil // Trans.Br. Mycol. Soc. 1986. - Vol.87. - N 4. - P.511-517.

124. Oritsejafor J.J., Adeniji M.O. Influence of host and nonhost rhisospheres and organic amendments on survival of Fusarivm oxysporum f. sp. elaedis. // Mycol. Res. 1990. - Vol.94. - N 1.- P. 57-63.

125. Ouchterlony 0. Diffusion-in-gel methods for immunologicalanalysis // Progr. in allergy. 1958. - N 5. - P. 1.

126. Papendick R.I., Gook R.J. Plant water stress and development of Fusarivm foot rot in wheat subjected to different cultural practices. // Phytopathology. 1964. - Vol.64 - P. 358-363.

127. Parks R.L., Powelson M.L. Vertieillum vilt of potato in two soil types: effect of a sudangrass green manure of disease and pathogen soil populations // 7th Inter. Verticillium Symp.: Abstr. Athens, Hellas. Oct., 1997. - P.77.

128. Pfender W.P., King J.G., Rabe J.R. Use of dual-stain fluorescence microscopy to observe antagonism of Pyrenophora tritici-repentis by Limonmyces roseipellis in wheat straw. // Phytopathology. 1991. - Vol.71. - P. 109-112.

129. Preece T.F., Cooper D.J. The preparation and use of a fluorescent antibody reagent for Botrytis cinerea grown on glass slides. // Trans. Br. Mycol. Soc. 1969. - Vol.52. - P. 99-104.

130. Rafin C., Nodet P., Tirilly Y. Immuno-enzymatic staining procedure for Pythium species with filamentous non-inflated sporangia in soilless cultures. // Mycol. Res. 1994 - Vol. 98.- N 5. P. 535-541.

131. Ramakrishna N., Lacey J., Smith J.E. Effects of water activity and temperature on the growth of fungi interacting of barley grain. // Mycol. Res. 1993. - Vol. 97. - N 11 - P. 1393-1402.

132. Satyaprasad K., Ramarao P. Chlamydospore production and lysis of macroconidia of Fusarim solani causing root rot of Guar in amended soil. // Proc. Indian. Nat. Sci.Acad. 1982. Vol.48. - N 4. - P. 556-559.

133. Scher M., Fran M., BaKer R. Fluorescent microscopic technique for for viewing fungi in soil and its application to studdies of a Fusar tum-suppressive soil // Soil Biology and Biochemistry. 1983. - Vol.15. - N 6. - P. 715-718.

134. Schmidt E.L., Bankole R.O. Specificity of immunofluorescent staining for study of Aspergillus flams in soil // Appl. Microbiol. 1965. - Vol.13. - P. 673-679.

135. Sing J.M., Cook R.J. Effect of water potential of reproduction and spore germination by Fusarim rosem "Gramiriearm", "Culmorm" and ffAvemoem" // Phytopathology.- 1981. Vol.71. - N 5. - P. 499-504.

136. Smith S.N. Comparison of germination of pathogenic Fusarim oxysporm chlamydospores in host rhizosphere soils conducive and suppressive to wilts // Phytopathology. 1977. - Vol.67. -P. 502-510.

137. Smith S.N., Snyder W.C. Germination of Fusarim oxysporm- 144 chlamydospores in soils favorable and unfavorable to wilt establishment // Phytopathology. 1972. - Vol.62. - N 2. - P. 273-277.

138. Snech B., Dupler M., Elag Y., Bacer R. Chlamydospore germination of Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum as affected by fluorescent and lytic bacteria from Fusarium supressive soils. // Phytopathology. 1984 - Vol. 74. - N 9. - P. 11151124.

139. Srivastava A.K., Arora D.K. Evaluation of a polyclonal antibody immunoassay for detection and quantification of Macrophomim phaseolim // Plant Pathol. 1997. - Vol.46. - N 5. - P. 785-794.

140. Steinberg C., Gautheron N., Burtin G., Alabouvette C. Role of soil structure on the interaction between indigenous and introduced populations of Fusarivm // 6th Int. Symp. Microb. Ecol., Abstr. Barselona. - 1992 - P. 235.

141. Steiner G.W., Lockwood J.L. Soil Fungistasis: spores sensitivity, time and quality of germination // Phytopathology. 1969. Vol. 59. - N 8. - P. 1084-1092.

142. Stotsky G., Rem L.T. Influence of clay minerals on microorganisms. IV. Montmorillonite and caolinite on fungi // Canad. J. Microbiol. 1967. - Vol.13. - P. 1535-1550.

143. Stover R.H. The effect of soil moisture on the growth and survival of Fusarium oxysporum f. cubense in the laboratory // Phytopathology, 1953. - Vol.43. - N 9. - P. 499-504.

144. Stover R.H. Studies of Fusarivm vilt of bananas. I. The behavior of F.oxysporum f. cubense in different soils // Canad. J. Bot. 1956. - Vol. 34. - N 6. - P. 927-942.

145. Strunnikova O.K. Immunofluorescent method for studying the ecology of soil micromycetes // Abstr. XI Congr. Eur. Mycol. -Kew, England. 1992. - p.40.

146. Strunnikova 0., Vishnevskaya N., Muromtsev G. Assessmevt of population of phytopathogenic fungus Verticillium dahliae Kleb. in soil and on roots // Abstr. 4th Inter. EFPP Symp. -Bonn, Germany. 1996. - P.144.

147. Strunnikova O.K. Vishnevskaya N., Muromtsev G. Abundance of mycelium and microsclerotia as indices of the soil status of Verticillivm dahliae. // 7th Inter. Verticillium Symp.: Abstr. -Athens, Hellas. Oct., 1997. P.32.

148. Toussoun T.A. Fusartum-suppressive soils. // Biology and control of soil-borne plant pathogenes. Sant- Paul, MN.: American fitopatological society. -1975. - P. 145-151.

149. Toyota K., Kamesaka T., Kimura M. Autecology of Fusarium oxysporum f.sp. raphani in soil supressive and conductive to Fusarium vilt of radish. // FEMS microbiol. ecol. 1995 -Vol.16. - N 4. - P. 261-269.

150. Turlier M.-F., Eparvier A., Alabouvette C. Early dynamic interactions between Fusarium oxysporum f.sp.lini and the roots of Linum usitatissimum as revealed by transgenic GUS-marked hyphae. // Can. J. bot. 1994 - Vol. 72. - P. 1605-1612.

151. Unger J.-G., Schwarzenberg K.V., Wolf G. Immunologischer Nachweis von Fusarium culmorum und Gerlachia nivalis. // Mitt. Biol. Bundesanat. Land- und Forst- wirt. Berlin-Dahlem. 1986 - N 232. - P 157.

152. Van Eck W.H. Suitability of membrane-filter techniques to study the ultras true ture of Fusarium solani in soil // Can. J. Microb. 1976. - Vol. 22. - N 11. - P. 1628-1633.

153. Van Eck W.H. Lipid body content and persistence of chiamydospores of Fusarium solani in soil. // Canad. J.- 147

154. Microbiol. 1978a - Vol.24. - N 1. - P.65-69.

155. Van Eck W.H. Autolusis oi chlamydospores of Fusartvm solani f.sp. cucurbitae in chitin and laminarin amended soils. // Soil biol. biochem. 1978b. - Vol. 10. - P. 89-92.

156. Wensley R.H., Mckeen C.D. Populations of Fusarivm oxysporvm f. melonls and their relation to the wilt potential oi two soils // Canad. J. Microbiol. 1963. - Vol. 9. - P. 237-249.

157. White D.G. The preparation and use of a fluorescent antibody reagent for the detection of Fythium graminicola // Phytopathology. 1976. - Vol. 66. - N 4. - P. 523-525.

158. Zollfrank U., Sautter C., Hock B. Fluorescence immunohistochemical detection of Armtllarta and Heterobasidion in Norway spruce. // European Journal of Forest Pathology. 1987. - Vol.17. - N 4/5. - P. 230-235.