Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка биотехнологии очистки воды и почвы от некоторых хлорорганических соединений и углеводородов нефти

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "Разработка биотехнологии очистки воды и почвы от некоторых хлорорганических соединений и углеводородов нефти"

? Г Б ОД

(-ге Санкт-Петэрбургский ; гооударотвенвый гахнолопачаскиИ янотятут

(техничеокий увиверсогет)

На правах рукопиоа

ЯГАФАРОВА ГУЗЕЛЬ ГАДЦШОВНА

разработка биотехнологии очистки воды и почвы от некоторых хлорорга н и чэ с ки х ооэдинений. и

УГЛЗЕОДОрОДОЕ НвфТИ

Специальность 03.00.23 - Биотехнология

АВТОРЕФЕРА'

диосвртацЕи на соиокаьие учэной отвпвня доктора технических наук

Санкт-Петербург - 1994

Работа выполнена в Уфимоком государственном нефтяном техническом университете

Официальные оппоненты:

доктор технических яаук, прсфеооор

СУД.РЕЕИЧ Валентина Ивановна

докгор биологических наук, академик АН Башкортостана

ВАЖТОВ Венер Абсатарович

доктор биологических наук, профессор

АРЖПЧЭДСО Ирана Александровна

Ведущая организация - инотитут проблем прикладной экологии и природопользования Башкортоотва, г. Уфа

Защита соотоитоя "24 " июня 1994 г. в ТО чаоов на заседании специализированного оовета Д (D63.25.09 в Санкт-Патербургоком технолога чаоком институте.

С взооертацаей можно ознакомиться в библиотеке инотитута.

Отзывы на автореферат в одном экземпляре, заверенные гербовой печатью, просим направлять по адреоу: 198013, Санкт-Петербург, Московский проспект, 26, Технологический инотитут, Учевнй Совет. лЛ

Автореферат разослан " ^ " мая 1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат технических наук

Т.Б.Лисицкая

овтя УАРАКТЩ'!С 1ИКЛ. РАБОТЫ

Акиздьаоадь,.дйм»., Бистрса развитие хамичвокоЯ,: вэфтохимлчэской прокыилашюстп приводит к значительному загрязнена» окруяаюцей а роди цродуктамя, трудно поддащи-м'т-.я биодаградацаи. Особого ешм/вняя заалуаанавт хлорорга-

ВИЧООКНО ОО0ДЯН9ШЯ, МВОИе ИЗ КОТОРЫХ ОИВТвЗИруЮТСЯ ц0лз-

ваправленно человеком в вносятся а почву для да таскевпя сорных растений, насекомых - это различные пеотяцпднг гор-бяцидн и ивооетицяды. В силу авоэа устЛчавоата шш в продукты ах частичвойнЕансформацаи находятся (циркудярувг) л среда (некоторые да 25-30 лог), о:сзнЕая г?блтальпсз дейотЕие ва флору в фауну. Проблема оолсехвяотся еще а там, что обработка . пестицидами проводится квотощззтво в^олздо-ватэльно^ скорость вх накопления в природа паевого превышает их скорость биоразлозеизя. 1ак,крупяеЙщо хв?.3чзо1ио комплексы городоз Стезяатакзка н Уфы выбрасывают большое колячестео хлороргзваческих ооедвпэний, а производной на ПО "Хеыпроа" гербицид 2,4-Д из-за варушзппЗ тзхпологпи . ( его применения стал одним аз задазнатолей окрукавдей о роди и продуктов пктавия во только в роодубяпл Баикортсстал, во и далеко за со цредоламэ. Так вак названный-гзрбацид обладает опао: яма токов чеокиш п гвяюввчзокш характеристиками (эмбраотокеин, .'мутагзв, твраюгзв » т.д„), ираЗ-но ванно т допустите попадания этого вещества а ряда друга к галоздеодэряащих веществ яз пс-чвы а води в продукты пятавяя.

Одккм яз распространенных загрязпптэлаЯ оярзгяаидой орэдц являйте я вефть и нефтепродукты. 'Ежегодные потеря вефти и нефтепродуктов в шрэ врп транспортировке, пара- -.: работке составлшот ве менее 50 млн. т.

Нередко загрязнителями почв а водоемов отдельно иди одновременно о нзфтьь являются рззлпчвыа глякола, 1Л9еныы образом ДЗГ (диэтилеиглнколь) и полиэтиленглаколв. Концев~ трацая токсичного ДЗГ л сточных водах газового комплекса в ряде случаев достигает 80 г/л.

По-прежнему остается актуальной и проблема очистка почвы в воды от нефтявнх загрязнепий, особенно в щзаоутот-

ей и ......различных: классов хлороргенв чески х соединений, даатвлвнгликоля я друлах нефтехимических продуктов. Важной про^чэыой остается уотаноЕланне особенностей региональных и климатачаоках условий, очиотки почвы и вода от химичеонвх в нефтяных загрязнений.

Данная работа посвящена разработке биотехнологии очистки воды а почвы от некоторых индивидуальных хлорорга-ва ческах и других химических сое даваний, нефти, в такке пра одновременном их првоутогвии; поиску а выделению микроорганизмов - активных деструкторов этих ооеданешй; оптимизации условий культивирования в ведения процеооа в целом в условиях Урало-Повол&ья.

Цель работу, разработка биотехнологий очиотка воды и почвы от некоторых хлорорганичеоких ооеданений в углеводородов нефти при вх содержании в природных акоовс темах как раздельно, так ив совокупности; разработка опоеоба подавления роста вефтиохяоляицвх оул^твос^анав-дГващих _ ^ктерий;в нефтяных плаотах, ухудшаюцях экологическую оботановкз

Для доатигеная поста влэвной цела в работе решалась следующие задачи:

- ооуществвзгь ковок в Евдзлашш кавдоорганазмон -активных дссжрукторов указанных органа чвоках ооедавений;

- проваота воовздовавая по штвшзецвв уоловий жизнедеятельности выделанных культур о целью повышения их активности, как деструкторов хлорорхввачаокйх ооеданешй, нефти

и нефтепродуктов;

- о вопользованаам шоокоактвваих ' культур ыакроорга-низыов - деструкторов (вооидуемых яефтаЁ а до. химических загрязнителей) создать йсгарзгорзты, удовлетворяющие условиям их практического праганемя;

- провзота в ущзуовеваых масштабах испытания разработанных способов, биопрепаратов и отдельных культур-деструкторов в процеооах очаотки сточных вод и почв от оиеои оргеническах зачгязнатвлэй нефтедобывапцих и химичеоких предприятий в различных регионах страны;

- изучение возшшшх иаханиамов деотрукщш некоторых хлорорганичеоких соединений выделанными культурами микроорганизмов;

- у Еысокоактввнкх деструкторов нефтепродуктов и хлор-

органа чеоких соединений последовать в определять наличие плазмид, обуславливающих опоообнооть выделанных культур трансформировать токоичние органические загрязнители;

- разработать опоооб подавления кизведеятельноота иефтеокиоляздих микроорганазков в прззабоЗяых зонах заводняемых нефтяных пластовТ

Научная новяана",Ъабоу^. Выделаны в идентифицированы пз природных образцов почв активные итакмн-двотрукторы хлорор-тавачеоких соединений г хлорфенолов, тряхлорпропана, трихлорэтилева, етхлоргидрина, гербицида. 2,4-Д я др.. Фенола, нефтв/ нефтепродуктов и ДЗГ. Выделенные шташы депонированы во Всесоюзной коллекции микроорганизмов в защищены авторскжз свидетельства®! (А.о. 1597384, А.о. 174422Э6 п. А.о. 1805097). :

Отличительной особенностью втих штампов является способность расти в виотреыалышх условиях: при поешэяной концентрации хлороргаяическвх соэданевай (до 10 г/л 2,4-Д), нефти в нефтепродуктов (30 г/л), а широком диапазоне темпэ-гатур-от 10 до 40 °С, рН 4-8 в оодерзанви хлористого натрия до 3-3,5 % мзсс .'■■•'

В выделзвпых штйогах 'Шюйососсиа егуЬЬгороИз АС-1339Д, В.зиЫШп ВКМ В-1742Д установлено наличие плаз-шд, обуславлигавздих выделенные культурыТрансформировать нефть, нефтепродукта и некоторые хлорорганичеокае соединений»

Разработана биотехнология очистки воды- и почвы от некоторых хлорорганических ооединевий, нефти и ДЗГ при их содержании в природных окосиотемах как раздельно, тая ив омеси. Определены услозия, обеспечивающие еыоокую степень очистка почвы и воды от указанных загрязнителей: хлорфево-' лов, трихлорпршана, трихлорэтплеяа, впихлоргадрина, гербицида 2,4-Л, нефти и дат.

разработан способ приготовления биопрепарата для практического использования в полевых условиях о использованием в качестве твердого носителя для микроорганизмов ^антонито-вой глины, минеральных добавок - длашофооа (0,3 %") и факторов роста - дрожжевого автолизата (0,01 %).

Изучен начальный этап деструкции 2,4-Д, орте,- и пара-хлорфенолов, 2,4- и 2,5-дихлорфенолов, 2,4,5-и 2,4,6-тря-х-юрфенолов. Де градация хлорфеиолов выделенной культурой

Bacillus subtiiis ШМ 1742Д зависит не только от количества ззмещевшх в них атомов хлора,но и от места замещения. Наибольшей степени деструкции подвергаются о-хлор-фенол (44,8 %), 2,5-дихлорфевол (46,3 %) и г меньшей -2,4,5-трихлорфенол (24,3 %).

Показав, что применение ассоциации, состоящей из 2-х культур ( iiyoobeotariua smagastis ВКМ 1205 И Bacillus subtiiis ШМ 1742Д) в соотношении 1:1 повышает десекцию хлерфенолоэ, особенно 2,4,5- и г^б-трвхяорфенолов^ ореднеы на 30 %. -

Рзочетн теоретических и практических значений выгодов биошосн шкрооргашзуов-деструкторов 2,4-Д и'ДЗГ показала высокую отепевь деструкции етих веществ.

Впервые испытаны и рекомендованы к внедрению в промысловых условиях выаокоэ^ктивкые биоцида; производные пиперидина, 8-гидроксихинолина, лтиолааа, хдорбензилгексаме-тилентетрааммония и др. Д-"Л подавления роста нефтеокисляо-щих и сульфатвооотаналливающих бактерий в нефтяных пластах, которяв х'нзываиг нарушение вкологачески" чистой те га о лога и добычи нефти» .-.■'■'

Предлоканвке биоциды защищены авторскими свидетельствами (А.о. 1210508, А .о. 1019С7Я, A.c., I4226I2, A.C. I46542J, A.c. 1535770, A.c. I5599I0, A.c. 1500667, A.c. 1692477, A.c. 1630265, A.c. 1645562, А ¡.с. ,1666683, A.c. I7I2359, A.c. 1785244).

Практическая, увечимое-ть. разработав биопрепарат, оодер-еащий ШЧвт küodococcus erythropolis АС-1339Д, Обладаний высокой способностью очищать воду и почву от содержащихся в них в значительных количествах нефти, вефтепродук'хов и Д2Г, разлагая их до вколот ческа безвредных веществ. Разработала методика определения содержания ДЗГ в грунте и воде.

Биопрепарат попытан при очистке почвы от нефтяных загрязнений в клиштических условиях Урало-Поволжья на территории скважины 2IB Зуятсксй площади Кунгурокото УШ Пермской области и на месторождения "Кара-Ариз" Северного Казахстана, а таете для обезвреживания почвы от смеси нефти в ДЭГ в поо. Пан годы и Ш-2 "Надшгазпром". За один вегетационный период степень очистка нефти, и ДЭГ составила 60-68 Разработана временная инструкция по применению

би rape пара та для ликвидации нефтяных загрязнений s потаэ в

полэеых усл0езях. • .

Проведены опытно-промышленные испытания микробиологического способа очистки о использованиемBocillua aubti-lis ВКМ В-1742Д сточных вод производства глацврава и гор- . бяцпдэ трпаллэта ПО "Кауотик, г. Стерли тяшж. (реопуйяака Башкортостан).

Достигнута на 68-76 % рчвотиа води от да-, три- в татрахлорпропана, татрахяорпршена (щ*1 Д=0,1 час""1). Выдано тохничзокоз задание на строительство промьгешзнпоЗ ло- • калызой установки очистка аточякх вод проазворотва глзцапз-на в триаллата.

Полу чаны полакителышз результаты шднтаря баоарапз-рата, оодерзащего Bacillua aubtilis ВШ В-1742Д, адз очисткэ загрязнопиой почвы о терзятораи П0 ;пХе?швои" я теплицы г. Уфы. Применение úionpo парата позволяло в течавпа года снизать содэрдашт 2,4- в 2,6-дохлорф9н0лов* 2,4,6-ípn-хлорфэвола-на 80 $, -гербицида 2,4-Д-ка 94 %, 2,6-дшюр$а~ нола а 2,4,3-трзхлорфовола-на ICO %,

Разработан опоооб обработка прязабойной зоны нагвата-тальной сюзааяиы биоцадаги для подавлзввя роста нефгсокао-лявдах я сульйэтвосс^апзвливащях: бактерий на ICO %.

Дппобатая работа. Ооновныа разультатн дяооодтзцаонпой работы докладывались на республиканских ваучко-тзхвзчао1их конференциях молодых ученых а специалистов <? Уфа, 1977,1979, 1981) ; на республиканской конференции "®зпко-хпкя-чеокая механика дооагероных скотам иматериалов" (Харьков, 1980); на У республиканской конференции по фпзяко-химэв, технология и применению промывочных жидкостей, дисперсных систем и ташонажных растворов" (Kv-ев, 1981); на Всесоюзной конференции "Органаческие реагенты и тоЕзра йнтоеоЗ химии на OCHOB6 нефтехшличгского оырья" (Уфа, IS34); на 'тэспубля-канской конференция "Проблемы химни п технологии хи^чеекпх реагентов" (Уфа, 1984); ва первом Всесоюзна.! совещания по химическим реактивам (1984); У11 Сьездз Всессазиого микробиологического общества (Алма-Ата, 1985); научно-практачео-кой конференции "Применение достикосий бистехнологаи в народно« хозяйства" (Уфа, 1987); Всесоюзном совещании "Перопек-тивы расширения ассортимента химических раактивов для

обеспечения потребности отрасдэй народного хозяйства 0 научных исследований® (Ярославль, 1987); научно-техническом совещании по хемичэскиы реактивам (Уфа, 1988); ва Ш £'сеоо»а~ ной конференций "Микробиологачасто метода защиты o^pysasj-щей среды" (Пущино, 1988); Воесовзном совещании по рлаетц-гам (Ашхабад, 1989); ва рэодублзкавсксй конференции "Современные проблемы оинтеза биологи чаока активных веществ в биотехнологий" (Уфа, 1990); Третьем регаонадаом соващешв peony блик Средней Азии в Казахстана по хЕШчеоким реактивам (Ташкент, 1990); 1У Воеооазиои совещании по химаческщ реактивам (Баку, 1991).

Основные результаты вооладовакай и их практической реализации изложены в 61 публикации, вклвтая 15 авторских свидетельств.

Структура и обш.1 диоорртадир. Диссертация ооотозт из ввидешя, четырех глав, выводов, списка использована оЗ литературы и прилояошЁ, оокерЕащих датериалы, подтверждающие практическую значимость полученных результатов.

Работа йзлояена па 261 странице машанопионого текота, оодаркит 63 таблицы, ЗХ риоузок. Спвоок латературы включает 211 нашеновавай.

СОДЕРШМЕ РАБОШ

1У?аваЛ. АналатическаП обзор литературы по баодаррздацзи гсяороргапичоокнх ооедзненай в нефти л почье и воде

В обзоре приведена характеристика хлороргаявчасквх соединений, нефти в нефтепродуктов, как загрязнителей почв н вода. Рассмотрены оовоавыа цута метаболивма некоторых хлорорганичеоках соединенна (ХОС), вефтв в нефтепродуктов микроорганйзшш-даотруктораш этих оозданзвяй. Изучены оообенвоств баоочвотЕа воды 2 почвы от хлорорганичеоках соединений в нефтяных загрязнений пйорздотвом активного ала, чистых культур в биопрепаратов. Рассмотрены вопросы практического использования чистых культур-даотрукторов хлорорганичеоках ооедивевий, нефти в нефтепродуктов для очаотка водоемов, стоков хвмзчеокях производств в почвы от вышеназванных загрязнений.

В биотехнологии очистки почвы в воды от хлороргаыичео-кях а седине няй, нефти в нефтепродуктов остается актуальным поиск активных деструкторов вышеназванных соединений, установление особенностей региональных и климатических уоловий очиотки почвы и воды от «ефтяных загрязнений и ксенобиотиков.

На основании критического анализа литературных данных сформулированы основные цели и задачи иооледований (отр.4,5).

Глава 2. Разработка биотехнолощи очиотки воды и почвы от некоторых хлороргавячеоких соединений, нефти, нефтепродуктов в ' . даэтилеигликоля

2.1. Поиск микроорганизмов, разлагающих фенолы и хлорорганичеокие соединения

Осуществлен поиск активных 'штаммов-микроорганизмов, раз-сагащих фенолы и хлорорганичеокие соединения при их оодераа-нии в воде и почве как раздольно, так и в смеси. Работа про-водилаоь с коллекционными культурами, а такае штаммами, выделенными наг,от из активного ила бвологачоскнх- очистных соору-кений (БОС) производства фенолов. Определена толзрантнооть микроорганизмов в средах, оодераащих васокотоксичные хлор-органические соединения ряда Ст-С3 (1,2,3-трвхлорпршан, тетрахлорэтав, эпихлортадрян, трахлорэтилэн, 1,2-дихлорэтан, твтрахлорэтилен (перхлорэтилен), хлороформ, четыреххлориотый угдэрод) орто- и парахлорфанол, 2,4- я 2,5-дихлорфеяол, 2,4, &- и 2,4-,6-трихлорфенол. Оценена их жизнеспособность в средах, содержащих фенол, гидрохинон, пирокатехин и резорцин при 100 мг/л. Выявлено, что наиболее уотойчявыш к феяляьвш и хлорфеяольяш ооедаяениям; являются пггашы МуооЪао-ЬэгХит ввееша^э ВКМ 1205, МусоЪаеЪег±иа ЛасЫсоХа 860 И выделенный вами штамм из активного ила БОС, который по морфолого-кулыуральнш, физполого-бвохимическим признакам был идентифицировав как Вас111из еиЬйНз ВКМ 1742Д (штата! 16), депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов и защищен авторским свидетельством. Отличительные особенности штамма: способность расти в широком диапазоне температуры от 20 до 60 °С, в области рН от 4 до 9, высокая'толерантность в средах, содержащих токсичные хлорорганичеокие соединения. Штаьы не патогенен дли человека и животных.

Дальнейшие исследования биоразложения ХОС псов одр гас ь в основном со штаммами в.subtilia iß.M.suegmatia 1205. Подученные резул>Тч.?ы по изучению биоразложения ХОС ряда С2-С3 на минеральной ораде свидетельствую: о нначительнсм умевыдеваи (80-90 %) их содержания в приоутотгив активных штамйов-мококультур B.eaegmatia ила Myeobacteriua saegmatia I2C5 уm на 3-а сутки. В результате изучения баодеградацаи хлороргаватескйх ооедашенвй ряда С2-С3 (вех. конц. 100 ыг/л) на шверальной ореде с шепользованаем Bacillus subtilis 16 на стендовой установке о окситевкш в овстеыой циркуля-ада воздуха,нсклвчаЕдей улетучкванве веследуешх соединений, выявлена следующая закономерноси; баораспад хлорорганачео-К2Х соединений ряда C2-G3 зависит от вх цриродл и состава в уменьшатся в ряду: трихлорзтилен, тетра1хлорэтилен, впихлор-идрин, трахлорпропав, тетрахлорэтав.

Одаюуиародные хлороргашческие созввнен!2я(0С;14,СНС1з) исолед/ешми бактериям, из Р^да Bacillus,Mycobacterium не разлагаются. '

2.2. Локальная биохимяческая очистка реальвкх водных стоков промншлвявях предприятий от хлорорганических соединений

Для очистки сточных вод, содержащих хлороргашческие соединения (производство глицерина, гербицида триаллат и др.), вами разработан проект опытно ■лрештлевной уотавоЕка. На основе этого проекта на ПО "Каустик", г. Стерлитамак (Башкортостан) создана опнтво-прешшлаввая установка локаль- ' вей очаетки сточных вод от ХОС.

Технологачеокая схема процеоса локальвой очистки сточных вод включает оледуюцие стадии: ;

- внращввзнае культуры даглорярущик шкроорганйзмов;

- подготовка питательных раотворов и сточных вод; — Ш£фобиоло1ическая очистка сточнк вод;

- отделение биомаооц микроорганизмов от очищевчой сточной воды.

Схеш опытно-прошаганной установки очистки стоков хлороргавичеоквх производств представлена на рис. I. Она состоят вз узла накопления биомассы дехлорируацих микроорганизмов (I), подготовка питательных растворов и сточных вод

с* Ё16

гь

ТТ

° • /1 О | 9 ! 2 р ,« 1 »»® 1« « в

1 » » 3

* 81 1

0 1 1 • ® °

9 | « о | 1 4 « « 1 * ' * » в 1 С „ » А

т

I

V V

к

• Г!

V/

I - штата л "аз оолз;

П - каалород ;

Ш - охочная вода для

620x013чзодса очистка; / 17 - очвщейяая всдэ.

Схека опытво-пршыпленной установки для локальной очистка сточных вод, аодергааях хлороргэпические соединения

1 - аппарат для предварительного выращивания микроорганизмов;

2 - окаитанк; 3 - отстойник; 4 - емкость для подготовка сточных вод к баохшачэоксЗ очистке;' 5- баллон о кислородом; б - фильтр

(4), узла очиоткя - окоитевка (2), ова&ювной оиотемой тер-ыоотатирования » подачи кислорода (6), уела отстаивания (3) 0 отделения биомаооы микроорганизмов от очищенной воды. Установка работает как в проточном, так в впериоди'чеодш решамэхгв завиоииооти от постав ленной задачи.

Общие в рабочие ©бьеьш аппаратов. Ивокулятор: общий обьем - 63 л, рабочий - 30 л Окситевк : общий объем - 108,8 л, рабочий -88,8 л Отстойник: общий обьем - 449,8 л, рабочий - 422 л Общий объем уотавовки - 370,6 л, рабочий (о трубопроводами) -- 522 л.

Биоочистка стоков цроавводатва глицерина проводвлаоь в проточном режима цра Д=0,1 : час В качестве баодаструк-тора вопользовалй В. аиЪ-ЫНв 16,

Из результатов,приведению: в табл. I,одедует, что при микробиолога чаокоЙ очвотка происходит оникзше всех цриоутотвуицих ХСС в средней не 64 %, црй етоы в отеках полностью отсутствует впахлоридран, а оодераавие хлористого Чллила снижается иа 91,5 ■%*"■_..'■

Микробиологаческая трансформация ХОС связана оо слое-' ними превращениям втах оозданевий, дальнейшее изучение которых позволит подойтв е пониманию последовательности биохимических процэооов, проасходтцах под дайотЕяем образуемых шкрооргавиз^ама ферыэатов.' ,

, Таблица I

Изменение состава ХОС под действием в.аиъъша 16 (время культиввроваввя 24 ч, разбавление отока 1:4)

Название Ш I Содержание ХОС, мг/л

! ноходн." | 'юбйёчн".

Г 1 2 ! Я

2- хлорпргаев 6,5 0,87

2-хлорпропан 1.6 О.йЗ

Хлористый еллвл 13,9 1,16

Перхлорэтвлэв 9,2 2,76

1,2-днхлорпршаи 5,6 2,21

I,З-циодахлорпропеа 1,7 1,28

1,2,З-трихлорпропав 10 1,75

Эшхлоркдрвн 2,1 нет

Примечание: содержание 20С определяет хроматографа чеоки вэ приборе "Цвот-100" о и они эаци онно-пламеи-яш детектором.

Для неученая оообеиноатей биоочистки вода от ХОС на локальной уотановкз в пери ерш чеокои режиме в присутствии активного штамма в.аиЬИ.11в1бйспользовалаоь о точная вода производства гербицида триаляата.

В производственных условиях химический ооотов оточных вод лроизводотва триаллата ввпоотоявен, поэтому подаваемый на биоочиотку о ток необходимо разбавлять о таким расчетом, чтобы суммарное оодерхэвив ХОС не превышало 300-350. мг/л. Очищаевдюводу подавала в аппарат периодически оо окороотью 10 л/ч в течепва 9-10 ч в оутка, а остальное время оточные 'воды циркулировали в овотаме в отоутот-вии «подачи вода.

Результаты, проведанные в табл. 2, свидетельствуют о онижения ХОС во время дробной подачи стоков.

Таблица 2

Результаты, полученные пря биохимической очиотке сточных вод производства трааллатй

ХОС, — мг/л | х

Зремя, оутки -г-;—

2 1-2-1 7

!10 1 15

г„ . !,;■-.

!Сред-1Сте- , -!нее !гонь !значе|очиот-!ние 1ки, %

_1_

I ?, I 3 ? ,4 I В } 6 Г 71 8 |

Количество биомассы, . 0,6 г/л

Содержание )1К с п

хлорпрош- гг> п нов ^^

трихлорпро- 45,0

пенов --

10,0

72.0

11,0

35.1

11,3

тетрахлор-пропаиов

тетрахлор-пропенов

0,7 0,85 0,95 1,0 0,85

73,4/ П8.0 170,0 101,0 203,0 155,0 70,4

28,0 40,0 55,7 35,0 57,0 45,8

14,0 ' ^^6 23£7 £3 21/7 23^ е8>6

6,0 7,1 9,0 4,3 7,3 7,3

20,0 29^0 17£ 1^9 1^8 28^2 73 0

6,0 8,9 10,0 3,5 6,2 7,6

27,-3 10^ 46/7 22Я 6^3 3* 4 74 0

7,7 4,0 11,4 6,5 12,1 8,8

Продолжение таблицы 2

I 1213 1415 16? 71 8 1 9

неидевтифи- 93,3 30,7 39,0 66,9 31,8 53,3 52,5

соединений 20,3 8,5 16,9 11,0 7,7 9,2 12,3 Примечание. В чяояамда'приведено оодерааяне хлороршшчес-квх оos лишний в очищаемой воде, в знаменатеде-- в воде вз ототойяикз после очи о тки. Степень очнотка сточных вод от индивидуальных XDC (дахлорпропенов, три- в тедахлорпропанов, тетрахлорпропе-нов) составляет в ореддаи 68-76 %. Следует отметить, что nps биохимической очистке стоков производства триаллата ШК вода енвааетоя незначительно- в среднем на 25-40 %, что свидетельствует о от, что прсцеооы дехлорирования XDG ош-реаавт процеооы окасланяя органических веществ, а концентрация хлор \ .-вонов возрастает пригэрно на 50 %.

Обобцая полученные давныа;моЕНо оделать олодуюцьэ вывода и рекомендаций:

- оточеыо воды рроизводотша глицерина в триаллата содержат ХОС ряда Cj-Cg, устойчивые к биоде градация;

- для бяоочветка стоков этих производств необходимы ооору-кеная локально! очистка о системой накопления и усреднителя

- для биоочяотка стоков, содержащих X0U, рексиэндуотоя но-

• пользовать олацифачнао мзкрооргаяиеьщ, обладающие фермен-. тативной системой дехлорирования. Длязтой цела предо тавля ( интерес етш&ш aycobacterivuii eraagaatis 1205 u B.subt,

- для более полной очаотки сточных вод от ХСС необходимо предусыотреть вторую отупевь очистки, а для уменьшения вшываемоотя бактерий необходимо ix иммобилизовать на твердом носителе.

Наиболее типичными загряэвитг-ляш вод большинства химических предприятий являются феволыше соединения и хлор-фенолы, поетода сладувций этап исследований поовящев биоочистке вода в почвы от этих соединений.

Результаты лабораторных исследований биоразловения д исков бензолов » концентрации 100 мг/л монокультурой в.виЪ-tilis (16) au.smegmatis 1205 на минеральной среде свиде-

тольствуют о тсгл, что посла 3-х суток культивирования в тедь моотатирОЕзнноЯ качалкь при 30 0 происходят практически П0ЛВ09 разложение гидрохинона в ппрокатахина. Резорцин относится к болео "яватким" г биологическом отноезвив дзокоп-беязолзм (отошнь биораспэдв поола 3-х суток ооотавлязт 70 %)* Сущэствашшх стлачий в кивзтяко басдах^здация иоодэ-дуетх даовоибонзояов в среда с B.subtilis БКМ Г742Д (16) п M.smeenatis КШ 1205 вз наблздсогоя. Содорнавиа дшокси-бензолов определяли спактрофотсглэтрячооки па приборе

"Batean" длина волны 270-285 ___■

Аналохвчные опыты ставилиоь с хлорфеГнола'лз: орто- и па-ра-хлорфзнолсм, 2,4- я 2,5-дихлорфанолоя, 2,4,5- и 2,4,6-трп-хлорфенолом. В качестве биодеатруктороа использовали в.пиыД-lla I205rB.6ubtllia 1742Д (16), а известный в липрзтурэ штамм Paeucloaonas putida 1301 попользовала как контрольный.

В табл. 3 привадены результаты исследований даградацяа хлорфэяолой (100 кг/л) бэктьряямз а отагзчзо.'ах условиях (без интенсивной аэрации) в течение 9 оуток культивирования. Подученные результаты свидетельствует о том, деградация глорфеволов зависит на только от количества замененных в них атомов хлора' г но и от иеота замещения.

Таблица 3

Кинетика биодеструкцяа хлорфепольных создинаний в статичоскпх условиях

Название хлор$«полоЕ, культур микроорганизмов

! Концентрация хлорфено- í

Степэнь-деатрук-

! иох. ! 5 сут. ! 9 оут.!"Ий, %

JL

1. Орто-хлорфонол l.'.omegmatia 1205 B.subtilis

Рз »putida 1301

2. Пара-хлорфенпл M.3aegraatis 1205 B.subtilis 174 2D Pa.puftida 13СП

100 76 45 55

100 69 55,2 44,8

100 70,6 58,13 41,87

100 72 70,5 29,5

100 73,3 71,9 28.1

100 69,1 65,5 34,5

Продолжение таблицы 3

л_а

я ..г.;_й_I 5

3. 2,4-ДИХЛ0рф8«0Л

М.бтеета-Ыа 1205 '100 79,5 64,6 35,4

В. БЛ1Ы;1НВ 17420 100 71Д 66,7 33,3

Ра.ри-Ыаа 1301 100 80,7 70,1 30,9

4. 2,5-дахлорфевол Ч

М^шевтв-М-а 1205 100 82,7 64,2 35,8

В.зиМйЦв 17^20 130 61,9 53,76 46,25

Ра.риЪ1(1о 1301 100 73,8 63,6 Э604

5. 2,4,5-трихлорфанол

1!. вше бта£1б 1205 100 93,2 87,45 12.55-

В.виИШа 179-21) 100 78,3 75,7 24,3

Ра.ри-Ыйв 1301 100 89,2 84,2 15,8

6. 2,4,6-трихлорфанол

Ы.втеетаЫв 1205 100 87,5 65,9 34,1

В„виЪт10 174-20 .100 71,2 28,8

Ре„ри«Ла 1301 100 87,3 82,7 17,3

Сопоатаввтальвый опала с данных, представленных в табл. 3, показал, что наибольшая атвпеиь дзщадации изучаемых хлорфенолов, ваблвдалась при использовании м.ыаеэаа^в 1205 0 ЪшвйЬЪШл 1742Д.

Из пасладуемых хлорфе волов орто-хларфевол разлагается в течение 9 суток ввтевоиввее, чем да- в ^хлорзамещаввне. В среда о орто-хлорфеволоа прирост количества хлор-ионов составлял 15,11 «лг/л (54,75 % от максимально возможного -27,6 ит/й). Во воех експарзыевтах (за иоклачевием Рв.ри-ы-йа о 2,4,5- и 2,4,6-ТЙ) паблаздалоя прирост биомаосы, что возмонко благодаря использованию микроорганизмами исследуемых хдорфзналов в качаотва источника углерода.

........Теши образом, баоразлокевие хдорфенолов зависит не

только от баодеотруктора и от количества вносимых хлорфе-волов, во и от маота расположения атомое хлора в ароматическом кольце; наибольшей степени -биорэзложешя подвергается о-ялорфенол, 2,5-дахлорфевол. К наиболее отойким относится 2,4,6-трихлорфенол.

Для изучения влияния ассоциации бактерий на интенсивность деструкции хлорфенолов была поставлена серия опытов.

В полную минеральную ороду Макклангз в качестве едивствев-•ного источника углерода и эдерлш добавляла какое-либо хлорфэвольное соединение из раочзта 100 мг/л (табл. 4).

В начеотве вослздуемых культур вопользовалп ассоциации активных дехлорирующих бактерий;И»suegraatis 1205 u B.subtilia 1742В. Суспензию бактерий в ораду добавляли в равных объемах по 2 мл на 100 мл ерэди о первоначальным титром 1°Ю9 кл/ил. в качэстве контроля одужила среда о монокультурой y emegmatis , Культивирование проводила в колбах на качалка цра 28-30 0 в течение 9 оутоя.О биорэзлояении хлор-фенолов судила спектрофотометрачоаки (табл. 4) на приборе "ВеЬзааа DT-8" цря длзна волна 270-285 Им.

Таблица 4

. Результаты дэ градации хлорфеполов ассоциацией бактерий а условиях внтеновЕНоЗ аэрации

Хлорфвнолн

I Содержание ! мг/л

? i

Деградация ХФ,

Нуов

1. Одто-хлорфенол

2. Пара-хлорфенол

3. 2,4-дихлорфевол

4. 2,5-дихлорфвиОЛ

5. 2,4,5-тряхлорфавол 6¿ 2,4,6-трахлорфеиол

Ассоциация

1. Орто-хлорфевол

2. Дара-хлорфенол

3. 2,4-дихлорфевол

4. 2,5-дахлорфенол

5. 2,4,5-TIÍ1 хлорке вол

6. 204,6-трйхлой9нол

saogaatla 1205— 28,7 29,4 26,4 25,0 70,6 71,4

71.3 70,6 73,6 75,0

29.4 28,6'

(H.smegBatle 1205, B.subtilis 1742D)

20 80

20,1 79,8

20,5 79

20,4 78,8

49,1 50^9

55,1 44,9

Эксперименты показали, что примавенае аосоциацви, состоящей йз двух культур (H.smegmatia 1205, B.subtille 1?42D), в условиях аэрация приводит к увеличению степени деструкции хлорфеполон, особенно 2,4,5- 2,4,6-тряхлор$енолов - в 1*4 в 1,2 раза,соответственно (табл.4).

Дальнейшие исследования проводили на исгсусстванннх системах,

иоде лиру вдих промышленные стоки по содержанию февояьннх соединений. С этой целью использовался сток, содержащий в своем ооставе оугаарно не более 100 ыт/л гидрохинона, пвро-. катехина, резорцина, 4-хлорфенола, фенола в 2,5-днхлорфевола, добаввэвные в равных количествах, и митральные добавки. Опыт проводили на лабораторной установке, В качестве шкроорганизмов-деструкторов использовала Uyoobacteritun sasgoatis 1205 и Bacillus subtilie 1742Д.

В результате исследований выявлено, что применение шташа ii.Dnegaatic 1205 опособотвуат деструкции сложной ска с а дяоизибзнзолов и хлорфенадов. Через 9 суток культивирования стешвь очистка от этих рап^звателзй составляла 72 %, Дальнейшее культавировзвве бактерий в среда к существенным изменениям степени дзструкщш диоксабензолов и хлор-фенолов не цравехо (табл. 5).

Id блица 5

Результаты бяоочисгаг модального стока

Время баоочаотка, }_Фавошии соединения

_ oyg°_I ст/д ! бводеструкцая, %

О 100 О

2 71 29

5 49 51

9 28 72 .

В проблема баодвотрукциа всех ксенобиотиков, в том числе ЮС, ваввш остается вопроо о продуктах деструкции. Однако вцделанве и идентификация продуктов иатаболззма представляет калзгкую задачу, позтоуу в вастсищзй работе вти пссладовавая проводилась только иа гербициде 2,4-Д.

На рас. 2 представлена киветиг' биодездадацза 2,4-Д в минеральной ops да штагиоа B.eubtillo 1742D в извеотвыш в литературе Еламмащ - Arthrobscter variabilis БНМ 671 и PseudoBonas patida 1301, Установлено, что стешвь био~ даотрукцяи 2,4-Д в среде о B.subtllis 1742Д на 15-е сутки составляет 68-70 $,Ar.variabilis 671 - 48-50 Рз. putlda 1301 - 20 %?

■ * - в экспериментах принимала участие с.н.с. института биологии АН ресщодака Башкортостан Т.В.Маркушэва.

Методами газо-нздкоотной хроматографии и хромато-масс-спектромеграи установлено, что первичным продуктам метаболизма гарбацада 2,4-Д s присутствии в.cubtliu. (is) являвтея 2,4-Диклорфэвол, который впооадотвиа дэхлорзруот-оя. Других промажуточнык хлорзодарг,:'щак соэдалегшй па сб-иаруаано?пг.

Вас. 2. Кивота''3 бнодоградащш 2,4-Д I _ В. sub tilia '16; 2 -Ар. vorioMUa 6?1j

3 - tfg.putidcu

Расчеты теоретических в практических значений заходов биомассы штак!.:о.м B.3ubtilis Х742Д псслз. 15 суток подтвердили высокую степень баодзструкцяп 2,4-Д.(S3 %)«

Дзи биоочистки почву от 2,4-Д аапользсшлзя о'яитрогшрат{Ш) па оовоЕЗ твердого носителя:-бентонитовой гдши и бзкгорпй B,subtiii3 16. Выбор иооптеля - бввтоита обусловлен те», что он .-(Обивается в значительном количестве в Cí!T и на является дефицитным окрьем, имеет im куп стоимость, не трзбует дополнительной обработка» характеризуется значительной удзль-вой поверхностью, что позволяет "пооаввть" на него большое колвчест^о мг'фобных клзтон.

»я - хроматографаческяе анализы выполнены а аналзтаческсм центре ШШГ.

. ' 2о

В цроотарйдааоваяиуо глину вносили оуопевзво бактарвй . B.aubtiiia 1742Д о такиы ваочавш, чтоба в I г ffl ордэрЕа-лооь 0,5-1 ылрд, клаток.КультурупрвДЕэритально выващивала на ШБ ила минеральной ородо одобавлениаыфакторовроота в течение 2-х суток» Затеыбаомаооуотдалялйот культураль-ной Еидеоста цавтрафугарованяаи в смешивала о ишьЛ. Крош того, в Ш добаЕляетояманеральзоэудобрэш- - даешофос в количестве 0,3 % шоо в драиаеваа автолиза? (0,01 %), Ш может долгоа врзия - до1года- хранатьаяпри 10-40 ° с ве терять свою актввноогь.

Воздействие :Ш в качаатвз рэкультввата от 2,4-Д изучалось яа выцэлочвда чэрнсзеггз в оаро-яаоной почва. В фарфоровые чашиз объемом 0,2 л согдзщала по 100 г почвы. В езрво чашк внооцла гшквуп соль 2,4-Д сз раочэте 100 с 300 «лт иа 100 г почва в оуспэязяа Ш в колачзотвэ 3 ал. Суспензии получила путем раояворавая I V Ш в 100 ш даоталларовашкй , ' стерильной воды, .

Влажность почвы довишда до €0 % полной влагозмкооти . С целью выявления елляввд гербицида 2,4-Д вШва вохозасть овшш в педготовлзгшдоебразци былапос^яно osa о борная в колзчеатвэ 0,1 г т чзису. Оант-проводилзя в таилацэ о круглосуточным саЕЗщзияаи а орадазй ишзратуроЗ около 25 0 в те чзизо 65 суток. Ш> шрэ нзобходаиоота почву полива-^ даотилляравашой водой» Чарзэ 65 оутсисцанаЕалз рос; хотений (контроль приня? са 100 %). Еолзчззгеэнпый учат бактерий проводили ш?олся Коха юа ША а СА, Анализ содэрзаиая 2,4-Д проводилв иэтодса гз50-Еадаоз5в«й хроматографап.

Внеоешо 2,4-Д в лзбув ез почв приводи? к сниЕвшш чиолоивоати изкрооргашзков, багггарий в эднбоз и на етсм уровне в ноблцззе^ый изрпод она оо таз гол веЕзшнной. с внесением Щ числа ввоз ть бокгорзй хюзраотаэт в 2 раза, остоет-оя ва зтш уровне ва 40-о "сутки, дала а из 65-е су ты нзбло-даетая 4-х кратзез увзлзчзтза кслачаотвз бактерий по отношению к коитролз. Тской прароот бактарпй, по-еидамалу, mosho обшзвзть 'уизяьшзкпем токсического дэйотеея 2,4-Д из-за ее баотрансфоршцзи.

В иоолздуемых образцах почвы о HI на 65 сутки выявлена также некоторая интенсификация роста грибов (рио. 3).

4

О

г)

■2

а <Г Í г

2

ТГГ-ТТ

4

Pao. 3. Изменение чзолэЕЕоотй микроорганизмов в червоземэ (I) и oopci дэовой (2) почве шдодэщиэи 2,4-Д в ВД

о - бакмхди (Ш) псолэ обвабмка 2,4-Д; tí - бактерии (Ш); поолэ обработка 2,4-Д в Ш; в - грибы пооле обработка 2,4-Д i г - грибы поолэ обработка 2,4-Д и Ш. I, 2, 3 - осответотвевво I-Э, 40-t, 65-¿ день

Авализ содержания 2,4-Д в почвах через 65 оугок показал, что в присутствии Шцзоиоходат ониаевие концентрации гербицида ва 42-47 % при иоходноЗ концентрации 100иг/100 г почвы и на 15-23 % при исходном содержании 300 мгЛОО г в соответствии о типом почв: серая леовая и чернозем. На положительное влияние Ш указывают а результаты, получеввыв на растениях. /

В связи о тем, что почвы территорий некоторых химических предприятий загрязнены одновременно гербицидом 2,4-Д и другими хлороргаяичеокими соединениями, возникает вопроо о возможности их одновременной детоксикации микробиолога чес-ким способом. С этой целью была поставлена серия опытов о реальными образцами почв с территории ПО "Химпром" и тептл-цы й I г. Уфц.

поолз обработка 2,4-Д в Ш.

Хроматографа чвакав анализы свидетельствуют о сильном зсгрязненаи почвы на.территории ПО "З&мпром": обнаруаены такие токоачеовие вещеотва^как: 2,4- в 2,6-дахлорфэвокои-укоусные кислоты (1,6 в 0,75 мг/кг соответственно); 2,4.6-трзхлорфеноксиукауоная к:олота (1,9 мг/кг); ^,4-двхлорфенол (0,66); 2,6-дихлорфевол (0,32); 2,4,6-трвхлорфенол (0,07).

В качеств деструкторов попользовали монокультуру В,еаЬШ1в 1742Д и ассоциацию из 3-х культурВ.еиМШв 1742Д, Рвви<1стогшз ри-МЛа 1301 0 Ыюйососсиа егуШгороНе А0-1339Д в соотношении 1:1:1.

В результате обработки такой почвы мовокультурой в. сиЪ^Шя 1742Д в ассоциацией чышеназваняах культур ноняз 135 суток их культивирования в опытных образцах происходит деградация вышеперечисленных хлорфенольных и хлорфонокси--укоуоных кислот. Степень деотрукции хлорфеноксиуксуоных кл о лот в орэдэ о монокультурой составляет: 2,4-Д -25%, 2,6-Д - 40 %'а 2,4,6- - 27 %. Улорфенолы по сравнению с хлорфеиоковукоусншли кяолотими подвергаются биоразлиюнию рнтоноввнее. Применение ассоциации в целом интенсифицирует баодострукцш хлорфенолоа в хлорфенокоиукоусных киолот (табл. 6).

Таблица 6

Содержание хлорфенолов и хлорфенокоиуксуоннх киолот в исследуемой почве

!Хлорфенокоиуксусдые! Хлорфенолы,

1кволоты, мг/кг ! иг/кг

ВагаытеЫ ! из хлоп ! дахлорфенол! трихло>-

шы*а , да хлор {Хлор 1 ¡фенол

12,4-Д 12,6-Д 12,4,612,4- 12.6- 12.4,6-

• г 1 • г..-$ 1дЬ 1дЬ 1тЬ

I ,VI-.3 .1 3 ! 4 ! 5 1 I 7

1. В.виЫйШв

1742Д (Гб) 1,2 0,3 1,4 0,34 0,04 0,02

2. Асооцвацвя В.еитПв 1?420

. Рз.р1гМЛа 1301 КЬ.егуЬЬгороИо

АО-13391) 0,9 0,25 1,2 0,32 0,032 0,0023

Проделавви9 таблицы б

__Е_1 3 , 1 .3 ! 4 Я, [ , й_!,„ ?.. ,

3. Контроль, почва без внесения бактерий 1,6 0,75 1,9 0,66 0,32 0,07

Примечание. Анализы получены пооле 135 оуток культивирования.

Особенно сущеотвэяво влияние ассоциации из 3-х культур в очиот.ча тепла чд ой почвы от хлорорганачеоких соединений, если в почео о монокультурой количоотво 2,4-Д уменьшается после 60'оуток яё 42 %, 2,6-Д - на 19 %, а в варианте с ассоциацией: 2,4-Д - во 50 £ ч 2,6-Д - на 48 %.

Результаты анализа,полученные после I года (опытные почвы обрабатывались дополнительно оуопевзней этих яе микроорганизмов я дпвшофосон), овядетельотлует о более полной деградации ХОС, оообенно 2,6-Д, 2,4,6-Т а 2,6-ДХф, которые ■ не обиарулены; 2,4-Д деградирует вз 94 % с использованием. В»8иЫ;111в и на 99 % о использованием ассоциаций.

Таблица 7

Результаты анализа образцов почвы вз теплицы на оодерзавяе Х00

Варианты

|::лорфвнокопукоуоная I Хлорфенол, ! киолота, мг/кг I мг/кг

опыта !2,4-Д !2,6-Д 12,4,6-12,4- 12,6- 12,4,6___ ! 1 ! Т 1 I ДХФ \ ТХФ

1. Контроль, П0'"ч- п од 0 ос 0 т ' _ _ ва без внесе- и'оа и--1

"ая бактерий 0,8 0,79 0,1 ОД 0,8 , 0,1

2. В^виМШа - 0,52 0,69. - - -1742Д (16) 0,05 не обн. не обв. 0,05 0,025 0,005

3. Аоооциация . 0,45 0,50 - -В.зиЫгШа

1742Д (16) 0,012 не обн. не обн.0,08 не обн. 0,001

рз' ри«<1а1301

ЮьегуШгоро-

113 А0-1339К ■■••-■..

Примечание. Числитель - опыты сняты пооле 60 суток, знаменатель - пооле I года.

Таким образом, почвы о территории промышленных пред- • цриятий ПО "Хитром" в тешгацы загрязнены омесью разнообразных ХОС, в том числе хлор^евовоиуксусвдаи кислотами и хлор-фенолами.

Обработка почва о этих территорий бз опрэпарат®^; ■ — суспензией монокультуры в.шл*Ша .(16) ала еоооцвацией вз 3-х культур (В), Ре.рииаа 1301 а нь.

егуй!горо1хо АС-1339Д позволяет снизить оодергавие ХОС после 60-135 суток культввзроваввя в ородвем в 2 разе, о посла ! года-пракгяческв полностью. Ассоциация -бактерий ' Енганоифицирует очистку почвы от ХОС»

Нередко заадаэвателйвд погзв в водоемов отдельно или в присутствии вефгв п нефтепродуктов являются туинодш, да-аталзнгликоли или полизгЕлзнгллсолз. Нпзкомолакулярныа а лимфатически о глзколз, в частности ДЭГ, шроко используется в газовой цркадлэнноотв в качао-ш ввгабаторов гедратообра-' Волания йдяя лЛнчв илв откачке его из

яодземвнх хравилвщ, Концентрация токоичзогоДЭГ в сточных вещая газового ^комплекса в ряда случаев достигает наоколь-1шг десятков эдадгов в I л, в опоообы барочвотки еще не разработаны. Метод определения ©Г в8 хроматографах олскев, на применим для контроля в практике. В о вязи с отиы наш в бала предварительно разработсна методика определания содержания даотвявдшколя в эдяте, ,

Для бзоочаоукв ДЭГ.в почве в воде наш предложена монокультура ЕЬойоооссш вгуЫнороИз АС-1339Д в еасодаацвя ЯЗ урзх кульжур; Бе©111ця шМШе 1742Д, ЕЬойососсиа огубЬгрроИе АС-133ЭД в Рзвийоиопаа риЪ1(1а ВКМ 15. Выявлено» тао биопрепарат, приготовленный на оонове аоооциаций вишовазваввых мгйммов, способствует более интенсивной биодеГрадация ДЭГ в почве; степень баоразлоаения ДЭГ а походной концентрацией I # поолэ 65 оуток достигает 70 %.

2.5. Способы биоочвотки почвы от нефти

2.5.1-2.5.4. Поясе микроорганизмов, рзэлагввдвх нефть и нефтецродукты

Поиоа микроорганизмов, деотруктирувдих нефть, ведется довво в широко. К,гак показали результаты отих исследований, для кааугого конвввтного географического региона с определен-

нили климатачеошш уоловшши для очяотка природных орэд цзлзоообразно попользовать мзврооргашзмы, выдзлшвнэ в зтазс eQ регионам.

Исходя вз этого, попок мякрооргзвпзмоа-даотруктороз софта в нефтепродуктов еэля пз чгола изгва'щт деструкторов в выдоязввнх из почвы культур, общео чполо которых составляло более 100 стеков. Нсзболэо тпппчаыэ прадатаЕЗТО--::! ЕЗфтаокаодяющах гагдооргагаамов прэгатякэва в табл. 8.

■Таблада-О' -

Результвты подбора Езфгеокзолшаах кзкроорхашзмов

—)■—i ■ и1 ir 111ЧТТ ..........Л Ma^w—Ujui и «t—ji ni riamnMp^awpx—i « nwM миммииянв» тле*

I Оргапачзошзэ соэдзпзвая

Шкрооргавпзш ' 1 ' "II .« .пчу, .11""..'»-'■;■ '.. . а

? дастся-! i-siíoa-í увввзр-' ___________ ; [лздо {ДЗг&П I 0Ш1

1» Arthrobacter g^>i£ornia

BEI 1109 ■ - ♦ -

2. Artteo oryataUopoeteo 1^0} * «• ~

3« Artbrobaotor oitrcufj COI * * -4-» R&odoooccus rutoropartiai-»

cus 1016 . * • » + « 5o Rhodoeooaua rhodochrous

AO 850 ♦ -'..-.+■ -6o Hbodococcus erythropalis

ви1 ac-1339 d +++ ++ +-h- *

PaeudoEODas putlda 1301 « •- ■#• -

в. Pseudomonas putida 15 - - + —

9. Trichsporon pullulou3 819 - - + ~

10o Plobia aedia 2086 + + ++

11. Pichla заЬэ ' ♦+ ■ * +

12. Candida utill3 4, - « Примечание: "+++" - интенсивный рост; "++" - умеренный рост;

- слабый рсот; - отоутстЕйэ роста? универсан состоят из масляной фрзкцзи и гудрона.

Для дальнейших исследований использовали наиболее активный из исследуемых микроорганизмов nhodococcua erythropo» 11з AC-1339 Д, который выделен нами из природных образцов вефтесодержащих почв Крайнего Севере в рэйоне г. Надыма.

Отличительная особенность штамма: опоообнооть расти в широком диапазона температур-! от 10 до 40 сохраняет жизнеспособность при различных условиях рН,от 4 до 9, растет в присутствии 5 % ИаС1, не требует в среде присутствия факторов роота. Культура не патогенна для человека в животных.

Выделенный штамм обладает выоокой вефтсокисляющей опо-ообноатью. Наибольшая степень биоразлозсеняя нефти в синтзти-чоской ареде достигается на 2-3 о утки и оставляет 80-87 % цра оодеркании нефти I %.

Штамм обладает свойствами деотруктировать не только легкие фракции нефти, такие,как гекоадекан, но в дизельное

топливо и более тягедца фракции,......

Новый штамм обладает способностью биоразлагать не только нефть, но и ДЭГ, а такка смесь нефти а ДЭГ, 'Споообев био-раз"чгать нефть в присутствии выоокой концентрации гербицида 2,4-Д (I г/л).

Штамм защищен А.о. 1805097.

Из литературных данных слэдует, что ассоциация микроорганизмов более интенсивно и полно окаоляет нефть в нефтепродукты^«.1: монокультура. Проведешшэ нами сравнительные исследования о использованием монокультуры яьойоооосиз егу^ьгороНе АС-Г339Д й аасоцлацзи из трек культур вьайо-оосоаз егуЬЬгороНе АС-1339Д, Рааийозэпаз риЬхда

1301 и ВаоШиа аиъъша 1742Д показала, что аоооциавдя микроорганизмов нзоколысо внгвноЕфацзрует баоразлогенае нефти: максимальный прароо?. бвсшооы набладаотоя в средз с ассоциацией ив трзх культур ,(Д=1,Ю). В олучеа монокультуры наибольший цра рсхат ¿ас.изоси отазчен увь.охуььгороНо АС-2339Д (Д=0,85) (ршз. 4)о А степень баоразлокзпгя вефтв (B0X.il %) поолэ двух суток дульизвврованвя составляла 89 % (ассоциация из трех культур) В 02 % егзгЬЬгороИсз АО-ЧЗЗЭС)»

2.5.5. Исследовано влияние на рост штамма вь. егуЬЬго-ро11а хлористого наград, температуры и количества нефти методом математического полнсфакторного планирования шзпера-мента. В качестве базового уровня были выбраны оледуюцве значения входных параметров; г

концентрация хлористого натрия X]- = I в Ъ'% содерЕвние нефти. X, _ 100 и 500 мг/л;

©

2,0

15

to

0.5

/ fi г

щ 3-—i

1 - Eh.orythropolisi

ía.putidai B.üubtillei

2 - Bb.erythropolisj

Pa<,putida|

3 - Rh.erytbropollaj

B.oubtUls;

4 - Rh.erythropolisi

5 - p3.putidaj

6 - B.subtiliai

t,cym.

Pao. 4. Влияние гакрооргапязмов на прирост биомассы в среда о нефтью

тешература культивирования... Xg = 20 в 40 °С.

В результата расчета получено аледувдее уравнение регрессии :

У = 1,335 - 0,255Xj + 4'Ю~5^- 7,7*I0*"3j¡3 - I-IO"6*^ -- 1,7.Ю"7^Хз - 2-10"^ Xj + б-Ю"7!^^

Установлено, что наибольшее встяняо на образование биомасса оказывает етнерализацзя среда, о температура а содержание нефти существенного влияния на рост бактерий в заданных пптервалах не оказывают.

2,5.6. В активных пташах-деструкторах хлорорганячеоких соединений и нефти В, subtilio (B),Hhiorythropolio А.С-1339Д п Pe.putida 1301' обнаружены и выделаны шгазютдшга ДНК размеров 20 п.н, которые предположительно контролируют свойстео культур деструктировать ХОС. Выделанные плэзмиды после более глубокого изучения предполагается яспо^ьзолать в ■■ иейша* геветичзевях исследованиях о целью получения супзрбзк-теркй-деструкторсв токсичных органических соединений.

2.5.7. Исоледовалоадлиявие биопрепарата, содержащего -Sh.erythropolia ; на деградацию нефти (1,5 и ЮЙ на почвах двух типов: черноземе в серой лесной. Полученные давньа после 65 оуток культивирования свидетельствуй? о значительном уменьшении нефти ■ А_ .. .... в опытных образцах почвы:

в черноземе-вя 25 и 30 %, в оерой лесной почве - на 15 в 2С %4 соответотвевво. К концу I года влвявае биопрепарата наиболее существенно: в опитвых образцах нефть (I в 5 %) практически полностью разложилась. Степень баоразлсшвия нефти в черноземе для этих ковцентраций составляет 8&--93 %„ а в серой лесной - 80-90 %. В опытных образцах с биопрепзратш выявлено повышение агрохимических свойств почвы и всхожести семян ежи сборной.

2.5.8. Изучение биодеотрукцвв нефти в смеси

о друпши загрязнениями

Сточные воды и по"ва на территории болышвотва нефте-, химических предприятий Башкортостана обычно загрязвены смесь» различных загрязнителей, например, нефтью и хлор-оргаввчесшли сое^а^яя® вл$! ДЭГ.

В связи о O'i'Eü оиоразлоаевге нефти в сложных средах: нефть (вех. 0,5 г/л) в ДЭГ (I г/л) и вефть (исх. 0,5 г/л) в гэрбацид 2,4-Д (О,I и 1,1 г/л) с использованием монокультур: Eh.orythropoliQ АС-1339Д, D.suttilis 16 И Го. putida 130Г и их ассоциаций из 2-х в 3-х культур.

Уставовлево, что диэтвленгликоль и 2,4-Д в указаввых концентрациях ва. биоразлодевие вефтв отрицательного влия-вая ве оказывает. Степень биоразложешя нефтв в среде о монокультурой после 7 суток культивировавия составляла 82 %, дат - 50 %, 2,4-Д - 10 %. Ассоциация бактерий несколько усиливают баотравсформацик. этих соединений.

Глава 3. Разработка способа подавления . микрофлоры в нефтяных пластах

Развитие микрофлоры в заводняемых нефтяных пластах приводит не. только к ухудшений качества добываемой нефти в высокой скорости коррозии вефтедромыслового оборудования вследствие насыцания нефтяного флюида биогенным сероводородом, но в отравлению окруяавдей среды сероводородом и

другаш соединениями. Иоточвиком такого оероводорода являются аназробвые су..^фзтЕОостававлзЕащв9 бзктераи (СВБ), которые развигаютоя в ,призабойной зона нагнетательной окваяины в ассоциация о аэробными нефтеокиоляпциии бак-тарзяьа, напришр, аз рода Роеоаоаог'ш и АгЬЬгоЬаоСег.

С цель® подавления роота СВБ з шфтоокполящцах бактерий и, следовательно, для прздотвращзивя образования бзо-гзнного сероводорода в заводвязшх нефтяных, пластах был ооудаствлзв поиок новых высокоэффективных^ - доступных и дашавых биоцидов по известной методика»

Из бодав ота исследованных рэагэнтов» большинство из которых синтезировано на кщйдро нзфтэхиши и хшличеокой технологии Уфимского государственного нефтлззого технического униЕероитата, заиболее активные прзйзтавлэии в та 1л. 9.

С целью выявлэняя активных биоцядоз была поставлена серая опытов на типичных представителях заводпяошх нефтяных пластов на грашолояитальпых:^^ А^ЬгоЪаз^г тгаг1аЪ1Но ВШ.1 850, Реяи1^о"71Ьг1о йваи1Гиг1оаиз ВКМ 1388 п ХЗЗЗМ-отрицатольпих: Рз.ри-ыаз БШ 1331 бактериях.

Т. блаца 9

Степень подавления СВВ

Рэатевты • .{доза, |мг/л !Стапепь ¡подавления, %

..... Л,.......... ! Я 1 ■ 3 , ,

I. ХлорбанзалгаЕпаматйлонтатраащюнЕЯ! 80 90

2. Хлорид 4-хлорбзвзигэксамзтилэнтетра-аммовяя

3. Гидрохлорад 8-гадроксихинолинового эфира 8-гидроксвхинолин 7-карбоновой киологы

4. З-метил-2-окоибензоат 8-оксяхинолилэ

5. Хлорид К- (8-гядрокаихпнолин-7-мэти-лен)гексаметилеятетрааммония

6. Натриевая моль Н-(4-гидрокси-4-мэтил-тетратадропирзнил-З) метионина

7. 4-бевзоксиметил-1,3-диокоолав

8. 2-этилти0-1,3-ДЗТИ0лан

80 95

100 100

80 95

100 100

80 92

100 100

80 100

100 100

80 91

80 90

100 100

Продолжение таблицы 9

9. 0-(о-толил)-5-этвлтиокарбоната 80 90

100 100

10. '2-феяил-1,3-окоатиолан 80 90

100 -100

11. 4-ацвтилнм0НО-2,2,6,6-тетрадатилшще- 80 100

ридан

12. Полиашвы в гетероциклические соедаяевия, хлористый натрий (отхода проаз- 2500 90 водатва вгилендиашива) 3000 100

В результата исследований выявлено, что исследуемые реагенты проявляют высокую бактерицидную актаЕНОсть. Бэ«тарное татя чес кос действие проявляется при дозе реагентов 80 ыг/л, а бактерицидное - цри 100 «г/л. Наиболее активным вз представланвых реагентов является 4-ацетиламино-2,2,6,6-тетрамэтилпиперадав, для полного подавления' чистой и накопительной культуры его доза составляет 80 иг/л.

Бактерностатичэскае свойства исследуемых реагентов проявляются не одинаково. Причем прослаивается зависимость бактериоотагичеоких овойогв не только от кдаооа органических соединений, во и от их гомологов. Например, из производных банзилгексашгалэнтетраашонвя более аффективным бактораоотатом являетоя хлорид 4-хлорбзпзилгакс8ыетилавтетраалйЮнияс он еф-фективнее "хлор бензвлгексамотплевтетраамшния.

Таким образом, исследуемые реагенты: хлорбзвзилгекаамета-лентетрааммония, хлорид 4-хлорбзнзплгекссштилзвтетраашояия, тедрохлорид 8-око0хлнолинового вфира 8-гадрокси хин олив 7-кар-боновой кислоты, З-метил-2-оковбензоат 8-оксихицолина, хлорид н -(8-гпдрокснхинол0и-?-мет0лен} гекоачетвлзягетраашовия, натриевая соль К - (4-ги дроке и -4-мз ти лте тра ги дропира ни л-3) матаонвна, 4-бензалоко1шзтилан-1,3-даоксолаи, 2-этвлтио-1,3-датиолан, о-(о-т0лал)-5-этилтиокарбоната, 2-февил-1,3-оксатиолап, 4-вцетиЛ8Мино-2,2,6,6-тетраметилпиперидин, полиашвы и гетероциклические ооединения, хлористый натрий (отходы проазЕодотва этилендиамина) проявили высокие биоцидные свойства: подавляют рост не только грамполохи тельных бактерий СВБ и Ar.varlaMlie, но и грамотрицательных Pa.putida.

.Глаза 4. Опытво-промышленные испытания

биопрепарата для ликвидации нефтяных п других загрязнений в почве

Проведены иапытавяя "я опра парата, оодернащего нефтэ-окиолящий шташ ЕЬойоооссиа огуЬЬгороИв АС-1339Д в нес-Йольких регионах отрази о различными климатическими условиями в агрохимическими овойотеэки почвы: на Крзйнем Севере на территории Щ-2 (газоперекачивающая уотавовка) и нефтеба-• эы поо. Пангоды, ПО "Надымгазпром", г. Надым, Западном Казахстане, нефтяном меотороздеввя "Кара^Ариа" и в уоловпях Урала в Поволжья, в Пермской облаоти на Ку 11x710ком УЕР (управление буровых работ) п? территории оквакнны 218.

Применение биопрепарата ониэило содержание нефти и ДЭГ ■ в потае в течение вегетационного периода ва 65 в 90 соответственно.

ЗШШОДЕ

В настоящее время для очяотки оточвых вод большинства промышленных предприятий применяются биологические-очиотные сооружения. Одвако, при высокой концентрации заг-рязнителзй, либо при наличии в стоках вноокотокоичных соединений учаотялиоь олучаи инактивации, а иногда отравления и гибели активного ила. Известны олучаи, когда нэ одном из химических объединений очистные сооружения ва протяжения веоколышх месяцев "работала" вхолоотув. Промышленный сток на входе в аэротенки и на выходе пз них имел идентичные показатели Н1К п ШК. Адаптация ила происходила очень медленно.

Результаты наших исследований и литературные данные ОЕидательствуют о том, что частые культуры некоторых видов микроорганизмов, выделенные и? активного ила или почеы и селекционированные методом отупенчатого улучшающего отбора, значительно превосходят активный вл по деструктивной биохимической активности, следовательно, для очпоткя промышленных сточных вод более целесообразно е ряде олучаев использовать чистые культуры деструкторов. Они могут быть применены в биологической очистке для обогащения ими активного яла в азротенках либо на локальной установке, конструкция которой разработано ва кафедра С;ю-хдаяя и технологии маедоб?олотаческкх производств

УШУ и ПО "Кауотик", г. Сгерлиташк. ,

Шкробиологвчзский катод о чистки промышлаввых оточвых вод посредством чистых культур бактерий уже не будет биологической очисткой в обычном представлении, это будет шадобиожшзчеакий метод с изменением отдельных этапов технологического процесса. В части ооти, микробиологачеокая очистка требует изменения технологии отделения вода от гшфобвой масоы.

Выдвигая вопрос о микробиологачеокой очистке прошпшенных отоков, автор диссертации, разумеется, о читает вполне целесообразным то-преанему шрсте применять обычную биолога чеокую очистку сточных вод а цромнилэнности. Применение микробиологического метода и его разработку нужно рекомендовать первоначально только для отдельных хвшчеокях производств, 1де стоки содержат весьма токсичные соединения. 'Примером монет слугить произвольно глицерина и гербицида тривллата, где стоки оодераат высокотокзичнке совдаьения-трихлорпропан, тетрахлорэтилен, дихлорэтан, эпихлоргидрин и др. '

Крале чистых монокультур,при микробиологическом метода очистки прошяюшнвнх оточннх вод мокна применять и комплексы (асоощацЕИ) чвож культур, состоящие из нескольких таашов одного в того же вида яла из нескольких культур различных видов п даае родов.

В эаклочавие приводам таблица оо списками Еыделенных вами бактерий-деструкторов, способных разрушать или трансформировать различные органичеокие вещеотва, встречающиеся в промышленных оточвых водах вла почве - хлорорганические соединения, диокои бензолы, нефть, нефтепродукты и ДЭГ.

Мвкрооргавизмы, разрушахщав хлорортаничеокие соединения и диокоибензслы

Микрооркшивма \ НазЕав^даненийаНИЧ9СКЙХ

БасШиа сиИШз ВНМ 1,2-дихлорпропан, 1,2-дихлор-

пропев,

Продолжение таблицы

В-1742Д (штамм К) ИусоЪас-ЬегЗлш апецта-Ыа ВШ 1205

МусоЪас»;ег1ит 1ао"Ыоо1а ВКЫ 860

Доооцяация (1:1) ВаоШиа аиЪ«.11а

В-1742Д,Рв еийотопаа ри1;1йа ЕЮ,5 1301

1,2,З-тетрзхлорпропав,

1,2,3-те трэ хлорпропе н, пентахлор-пропан,

трихлорэтилен, апахлоргадрзн: хлорфа ноли: оото-, парэ-хлорфз -вол, 2,4- я 2,5-дпхлопфенолы, 2,4,5- в 2,4,6-трихлоргТшолы; гербицид 2,4-Д;

дв оке и бензолы: гидрохинон, пирокатехин, резорцин;

ошоь: хлорфевоксиукоуопые кяоло-ты, ди- и трихлорфенолы

Ывкрооргавизми, разрушающие нефть, нефтепродукты и даэтилэвглвьоль .

Микроорганизмы

! Название оозданеваГ.

ЕЬойоооооиа вгуЬЬгоро-11а АС-13390

нефть, парафин, дазтоплаво, увв-Евроин, даэтилевгликоль, ошоь: нефть + дшэтвленглаколв;

нефть, емзоь: нефть + даэтилевгликоль;

Аоооцвация (1;1)

НЬойососсиа егуШгоро-11а АС-1339В Рзеийошопаз ри-Ь1йа ВВП! 1301 *

Аоеоциа'ция (1:1) омеоь: нефть + 2,4-Д

НЬодососсиа егуЬЬгоро-11о АС-1339Д п ВаоШиз оиЬйШз Ш 1742Д (пташ 16)

Списки микробных тйсоовов в приведенных таблицах о указанием причастности к деструкция конкретных химических соединений могут пс;«очь микробиологам, работающим в области микробиологачэокой очистки промышленных отрчн-х вод ' П П0ЧВ11,

ВЫВОДЫ

I. Выделаны и идентифицирована новые итакмы БасШва гщЪЪШа ВКМ В-1742Д И Ь5усоЪа<^ег1ит ошв£шай1с В1Ш т205, осущостЕДявщие деградации диоксибензолов: гадрохв-

нона,пирокатехина, резорцина, хлорфенолов, дихлорфенолов, ... трихлорфенолов, да- в тряхлорфенокаиукоусной кпслоты, и такне хлорорганичеокие соединения ряда С2-С3: дихлорэтан, трихлорпропан, ырхлорвтилэв, тетрахлорпропан и др.'при концентрации 100 ыг/л и выше. Предложенные штаммы епоо.обны би©трансформировать смеси вышеназванвых хлорорганв чеокях соединений (А.о. 1742226, 1597384).

2. Выделан и идевтифзцирован новый.нефтеокислящий шташ КЬоаоооосиа ег^кгороИа АС-Х339Д (А.о. 18050Э7), опоообный очищать воду о нефтгчым загрязнением до 30 г/л и почву до ю % шоо, обладающий широким опектрмл окаолитель-ной активкаотй : деструктпровать лэише в тяаелые углеводороды, аофальто-смолиатые фракции нзфтв п ДЗГ.

3. Проведены исследования по оптимизации условий гшзне-деятельнооти выделенных культур о цалью повышения их актив-нос-и даструктировать хлорорганичеокие соединения, нефть

в нефтепродукты.

4. Определено наличие плазмид у высокоактивных деструкторов хлороргавичеоквх соединений, нефти и нефтепродуктов 5

ВаоШив виШНа ВШ-1742Д» йЬойооосоио огуЙиеороНа АС-1339Д, обуолавливащах опособноотьтрансформировать ахи вещеотва.

5. Разработан гакреби олоп; чеокяй способ очаотиз о г очных вод хикичеакак производств глзцерана в трааялата, содержащих трудноутилззируоша юлорортаначеские соединения. Степень . очасткз вода ог хдорорганпчаодах ооединзшй на локальной установка ПО "Каустик", г. "Стерлигамак,'"

~~ дозтагазт 6В-76 $(Д=0,1 ,чао~?). Выдано техническое задание на строительство промышленной уотанов1ш очасткз отечных аошаашаиа.;кзшэрира я трдаллата.

6. разработан биопрепарат для очистка йочвы в водн от хлорорганическах веществ а нефти , в котором в качестве' воовтеля микроорганизмов-деструкторов использована бентонитовая глава.

7. Показано, что применение биопрепарата, содержащего ВасШиа виЪЪЩе ВКЫ В-1742Д,для очвотки загрязненной _ почеы территории ПО "Хампром" в теплицы Н1 г. Уфы опекает в течение года содерЕанче 2,4- в 2,6-дпхлорфеполов , 2,4,в-

трихлорфенола на 80 %, гербицида 2,4-Д на 94 %, 2,6-дь¿лор* фенола и 2,4,5-трихлорфвнола - на 100 %.

8. Применение биопрепарата, содеряащего Bbodococoue erythropolls АС-1339Д, для очистки почвы от смеои нефти и ДЭГ через 90 суток в условиях Крайнего Севера, Северного •Казахстана и Урало-Поволаья приводит к свизевию содержания ДЭГ на глубине 10 см более чем на SO %, нефти - в ор&днем на 65 %.

9. Разработана методика для определения содержания ДЭГ в грунте и воде и временная инструкция по обезвреживанию нефтяных загрязнений в почве и воде в полевых условиях.

10. Выявлено, что-для подавления нефтеокислявдпх и оуль-фатвооотававливавацих бактерий в заводняемых пластах, ухуд- • шаицих экологачеокую обстановку, наиболее активвыми биоцидами является производные пиперидина, хлорбевзилгексаметилен-тетрааммовия, 8-йдроксихинолива и др. (новые биоциды защищены 12 авторскими свидетельствами). '

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ШУШКОМНШХ ПО та®

диссертации

1. А.о. 1019073 СССР, ГШ3 Е 2ШЗ/20. Способ обработки приза бойной зоны вагнетательвой оквакиви // Р.Г.Ягафаров, М.Р.Мэвлютов, А.И.Сшвак, Г.Г.Ягафарова, Т.Е.Галлямов (СССР)//Открытия. Изобретения.-1983.-Ш.-С. 88.

2. А.о. I2I0508 СССР, ГЖЙ4.Е 2IB43/22. Способ.подавления роста оульфатвосотэнавлиЕанцих бактериЧ /Л.ХЛсфандия-ров, М.Р.Мавжтов, Г.Г.Ягафарова, Р.Н.Хлесткэн и др. ..• (СССР) //Открытия. Изобретения. -I983.-JS2I.-C.78.

3. А.о. 1465423 СССР, МГИ4 с 02 // 1/50 // В 2IB 43/22. Способ подавления роста оульфатвосстанзвливакщих бактерий //Г.ГЛгафарова, БД.Нирилюк, Е.А.Кантор и др. (СССР) //Открытия. Изобретения.-К 3.-Л20.-С.П2.

4. А.о. 1536770 СССР, МКИ% 07Д487/18. Хлорид оевзилгекоа-метйлевтетраашония, обладавший бактерицидной активностью в отношении сульфатвосотанавливающих бактерий и культур Pseudomonas /В.З.Рагулин, Г.Г.Ягафарова, Л.Г. ШакироЕ и др. (СССР) //Открытия, Изобретения. - "989. -

Ii 20. - С. 112.

5. A.c. I4S3S48 СССР, 'Ш С 09К 7/02 . Промывочная жидкость /З.Ф.Старкова, Б.З.Султанов, Н.7>.Галиков, Г.Г. Ягафарова (СССР) //Открытия. Изобретения.-19Б9.--!«26

С.112 •

6. А.о. 1500667 СССР, МКИ4 CI2 л' 1/20, С02 Р 1/50. Бактерицид для подавления развития оульфатвосотававлиЕаацих бактерий и поавдо-иовад в нефтяных пластах // Г.Г.Ягафарова, З.Ф.Сшякова, P.C. Сарманзев и др. (СССР) // Открытия. Изобретения - 1989. -JS30. - С.112.

7. A.c. 1592477 СССР, МКИ5 Б 2!Ш 43/22. Бактерицид // Г.Г.Ягафа-рога, В.Г.Сафарова, Е.А .Кантор и др. (СССР) // Открытия. Изобретения, - 1990. - К 34. - С. 139.

8. А.с. 1597384 СССР, МКИ5 CI2 К' 1/20, С02р 3/34. Способ очистки сточных вод от фенольных соединений // Г.Г.Ягафарова, Р.Н.Хлест-кик, Т.А.Ряблнина и др. (СССР)// Открытия. Изобретения. - 1°90.-- № 37. - С. 53.

9. A.c. 1630265 СССР, ГШ5 С07Д 487/18. Хлорид 4-хлорбензилгекса-мзтвлентетраамшнвя, обладаиций бактерицидной активностью в отношении сульфатвосстававлаЕакщвх бактерий в к.,льтур Pseudoao-nss /В,В.Рагулин, Г.Г.Ягафаройа, Л.Г.Шакиров, Р.Н.Хлесткии и др. (СССР) // Открытия. Изобретения. - 1930. - Л 30. - С. 88.

10. A.c. 1645562 СССР, Ш5 Е 21Р 5/05. Профилактический соотав для борьбы с пылеобразОЕанибм и эрозией нгрунтОЕ // АЛЬЗиновье* Г.Г.ЯгафарОЕа, В.В.Рагулзн, Л.Г.Шакиров (СССР) //Открытия. Изобретения. -1991. - К 16. - С. 124.

11. A.c. 1666683 СССР, МЕСИ5 Е 2IB 43/22. Бактерицид / Г.ГЛгафаро-еы, В.Г/Сгфарова/ С,¡^Калашников и др. (СССР) //Изобретения. -1991.- И 28. - С. 88.

12. A.c. 1712359 СССР, Ш5 С 07Д 215/16, С 02F 1/50. Гидрохлорид В-гидрохинолйнолянового эфира 8-мдрокоихинолив-7-карбовоЕой кислоты в.качестве бактерицида для подавления сульфатвосстанав-лиезкщих бактерий в культур Psoudoaonas и Arthrobaoter

/ В.В.Рагулав, Г.Г^гафарова, Л.Г.Шавдов в др. (СССР) //Изобретения. - 1991. - К 6. - С. 103.

13. A.c. 1742226 СССР, №5 С 02 3/34, С 12 //1/20. 'Штамм бактерий Bacillus subtilis, осуществляйте деградацию 2,4-Дкхлорфеяокси-уксусной кислоты / Т.В.Маркушева, И.Н.СкворцОЕа, Г.ГЛгафарова и Др. (СССР( // Изобретения. - 1992. - К 23. - С. 112.

14. A.c. 1785244СССР, Ш15 С 07Д 40/02. Хлорид Н-(8-гидроксихи-нолин-7-метилен) гекоаметалентетрааымония, облалакзций бактерицидной активностью в отношении сульфатЕОостанаЕЛиЕащях бактерий И Культур Pseudomonas и Arthrobacter ./ В.В.РагуЛ1Н, Г.Г.Ягафарова, Л.Г.Шакиров и др. (СССР) // Изобретения. - 1992.-- Я 30. - С. 98.

15. A.c. 1805097 СССР, ?ЖИ5 С 02р 3/34 Е 028 15/0-1. Штаглл бактерий Ehodococous erythropolia, вспольэуемый для очистки воды и почва от нефти и нефтепродуктов / Г.Г.Ягофаровэ, И.Н.Скворцога , А.П.зин0£ь0б, И.Р.Ягофаров (СССР) //-Изобретения. - 1993. -№12. - С„ 52.

16. ЯгафарОЕа Г.Г., Гатауллян Ф.С.,-Бакяево- <5.3. Микробиологическое обследование систем оборотного водоснабжения нефтеперерабатывающих заводов // Тез. докл. науч.-произЕ. конф., поовяпи проблемам нефтеперераб. и пефтеха:я;т, 8 севт. 1973. - Уфа, 1973, - С. 95-96.

17. Ягафарова Г.Г. О развитии аульфатвосогапавливаицйх и'актерай в растворах .-.вахтах ПАВ // Тез. докл. пореой республ. ноучяо-техн. конф. молодых учевых я спецзалпстоЕ, 8 свит. 1977. - Уфа, 1977. - С. 31-32.

18. Каримов М.Ф., Ягафарова Г.Г., Голиакбаров' М,<5. Моделирование пластового баоразложевия-ПАВ, применяемых'для ввтвксяфикгмези процессов подземного х^чвзпия газа // -Зкапдеса-ивформасзя, сер, геология, буренао и разработка'газов. месгор. - 1977. - 11 14. -С. 10-14.

19. Ягафарова Г.Г., Фаткудлина Л.Г. Оценка влияния ПАВ на активность клеток сульфатЕОсстанавливающих бактерий // Проблема нефти и газа Тюмени, науч.-техн. сб. - Темонь. - 1979. -C.44-4S.

20. Ягафарова Г.Г. К гопрооу кольматацив приззбойных зон нагнетательных оквааин и распространение оульфатворотававливающих бактерий // Теэ. докл. науч.-техняч. конф.,. посвящ. 'комплексным проблемам нефтег. пром., 21 эпр. 1979 г.- Уфа, 1979, - С. 44.

21. Исследование биорззлокеная неионогеягшх ПАВ микрофлорой нефтяных месторокдениЕ методой УФ-спекгроокопии / Г.Г.Ягафарова, М.^Галиакбзров, Б.З.Клшленок, Л.Г.Фаткуллина // Проблема нефти и газа Тюмени, науч.-техн. сб. -'Тюмень, 1980, вып. 45. -

С. 41-46.

22. Структурво-мехзвическве свойства ш характер яоздгляцяоввах контактов механических примесей роды заводнения / Г.Г.Ягафарова, Б.В.Клименок, А.Г.Бикчентаева и др. // ¿изако-хешчеекзя механика .^сперлных систем в материалов: Тез. докл. респ. конф. 22-24 июня 1980 г. - Харьков, 19И0, - С. 40-44.

23. ЯгафарОЕа Г.Г. Подавление биогенного сероводорода физико-химической обработкой, закачиваемой в пласт воды // Биоповрожденна: тез. докл. 2 Зсес. конф., 27 июня 198I г. - Горький, 1981. -

С. 117.

24. Ягафарова Г7Г., БикчоитаеЕа'АТГ., Ягафаров р7г. TeWoiio~rai" no^" давления биогенной сульфатредукщш и увеличения приемистости нагнетатальвых о кг чкив при закачке в продуктивный пла^т раотво-роЕ неиовогениых ПАВ // Физико-химия, технология получения и применения" промывочных кидкостой, дисперсных сйотём в тампо-нажных растворов: Тез. докл. 5 респ. конф., 12 сент. 1981. -Киев, X98I г.- ч. 2. - С. 50-51.

25. Ягафарова Г.Г,, Бвкчевтаева А.Г., ЯгафарОЕ Р.Г. Влияние активного ила в приэвбойной зоне на биогенную сульфатредукцню // Нефт. хозяйство. - 2982. - В ¿. - С, 24-2В.

26. Ягафарова Г.Г., Вшчентаева А,Г., Ягафаров Р.Г. Возможности подавления сульфатредукцни физико-химической обработкой закачиваемой воды £ пласт // Рациональная технология и техника бурения скважин и нефтеотдача г Меявуз. сб. науч.тр. КПТИ т. В.В.Куйбышева. - Куйбышев, 1982. - С. 25-28.

27. Ягафарова Г.Г. , Штатуллина А «Г. Оценка степени гадрофальнооти глин.//Технология бурения нефтяных г. газовых сква&ин: Mes-вуз. сб. науч. тр. Кй. - Уфа, 1983» - С» 55-59.

28. Спектрофотшетическпй метод определения парафиновых углеводородов в дрожжевой суспензии / Г. Г.Ягвфарова, Ф.А.Фаткуллнва, Т.Ф.Ахунов // Органические рэменты и товары бытовой химии

на основе нефтехимического сырья: Тез. докл. Воес. ковф., 4 окт. 1984 г. - Уфа, 1984. - С. 78.

29. Промысловые исследования гидродинамического давления при бурении глубокоЁ скважаны / Ц.Р.МаЕлютов, ЕЛ .Ситков, Г.Г.Ягафа-рова и др. // Технология бурения нефтяных и газовых скважин: Меавр. сб. науч. Тр. Ш, -Уфа, 1984. -'С. 16-22.

30. Ягафарова Г.Г. Подавление сульфатрздукции в скЕааинах // 7 съезд Всео. макробиол. ойцества: Тез. докл. - Алма-Ата, 1985.Т. 2. - С. 24.

31. Ягафарова Г.Г., Мавлотов P.M., ВшчентаеЕа А.Г. 0 влиянии алектроактйвврованвой воды на освоение сквааян // Физвко-хшля-ческая технология получения п применения промыЕочных жидкостей дисперсных систем и тампонаяных растворов: Тез. докл. респ. конф., 30 мая 1985 г. - Кйев, 1985. - С. 44.

32. Ягафарова Г.Г., Вжчентаева А.Г. Ускорение освоения скЕа^ин // Технология бурения нефтяных и газовых скважин: Межгуз. сб. науч. тр. УШ. - Уфа, 1985. - С. 44.

33. Исследование возможности утилизации хлорорТанических ооедине--ний пооредотвсм дехлорарупцих микроорганизмов / Г.Г.Ягафаро-ва, Т.ф.ЛаоыяоЕа, Т.А.Рябивина и др. // РЖ 0410. - 1985. -1110. 235.__

34. Ягафарова Г.Г., Бвкчзнтаева А.Г. Уокорение освоения окважин // Науч.-техв. инф. об., серия вефтегазовая геология, геофизика и бурение. - 1985, вып. 5. - С. 42-44.

35. Применение реактивов в качестве смазочных присадок в буровом раотворс / З.Ф.Сюнякова, Б.З.Султавов, Г.Г.Ягафарова и др. // Перопективы расширения ассортимента химических реактивов для обеспечения потребности ведущих отраслей народного хозяйства и научных исследований: Тез. докл. Воео. оовещ., 15 мая 1986 г. - Ярославль, 19Ь6. - С. 20.

36. Ягафарова Г.Г., Лсмакива Л.Н., Халимова Л.Х. Оценка относительной биологической токсичвооти некоторых хлороргавичеоких соединений на отдельные виды покарциоподобвых микроорганизмов // Тез. докл. науч. 37 конф. молодых ученых Башкирии, 15 мая 1985 Г. - Уфа, 1986. - С. 40.

37. Биоочистка стоков триаллата /. Г.ГЛгафарова, Т.Р.Ибрагимова, Л.Х.Халшова и др. // Тез. докл. науч. 37 конф. молодых ученых Башкирии, 15 мая 1986 г. - Уфа, 1986. - С. 42.

38. Локальная биохимическая очиотка сточных вод промышленных предприятий от хлорорганичеоких соединений / р.Н.Хлесткив, Г.Г. Ягафарова, Л.М.Султанова и др. // Хим. пром-ть, - 1986. -

К 6. - С. 340-344. .

39. Изучение бяоразлоневия профилактического средства нефтяного происхождения в почев / Г.ГЛгэфарова, АЛ.Зкновьев, Э.А.Ки-рееЕЭ. С.Т.Юябердина // Охрана окружащеК среды и охотничье хозяйство. - 1989. - № 9. - С. 7-13.

40. Ягафарова Г.Г., Зиновьев А.П. Микробная деструкция нефтяного структурообразователя в почве // Современные проблемы синтеза биологически активных веществ и биотехнологии: Тез. докл. респ. конф., 5 окт. 1990 г. - Уфа, 1990. - С. 18.

41.-Ягафарова Г.Г., Зиновьев А.П. Микробиологическая ликвидация нефтяных загрязнений в почве и воде // Современные проблемы синтеза колотачески активвых геществ и биотехнологии: Тез. локл. сюсп. конф., 5 окт. 1990 г.- Уфа, 1990. - С. 24.

42. Лгафаро»а г.г., Сюнлко?а З.Ф.. Султавов Б.З. Смазочные срой-ства промывочных; .жидкостей на основе отходов прсиаводстра по» лкмердрстал-'-дтов // Технология бурения, ве^явих в газовых

оквазив: Меявуз. об. науч. тр. УШ. - Уфа, 1990. - С. 112-116.

43. Нейтрализация оероролорода реагентом ПО / З.Ф.Сшяковв, Б.З. Султанов. Г.Г.Ягафарова , Ж.В.Каналаев // Неорганачоские в биохимвчеокие реактивы // Тез. докл. 3 регион, оовев. респ. Ср. Азии и КАзахстава по хим. реактигам, 16-19 окт. 1990 г.Ташкент, 1990, - С. 22.

44. Биохимическая очистка стоков триаллата на опытной установке / Р.Н.Хлестюш, Г.ГЛгафарова, И.Х.Бикбулатов и др. // Хим. пром. - 1991. - В 2. - С. 54-56.

46 Ягафарова Г.Г., Зинбвьев~А Л. К;жро'биологачёскал ликвидация

■ нефтяных загрязнений е почве в воде // Основные направления биотехнолотаи в решевии народнохозяйственных задач: сб. статей НЗЦ УРО АН СССР. - Уфа, 199Г. - С. И4-П7.

47. .Ягафарова Г.Г., Рагулин В.В» Присадка для вефтявых структуро-- | образователен // Основные направления биотехнологии в решевии

народнохозяйственных задач: сб. отатей ВНЦ АН СССР. - Уфа, 1991. - С. 133-137.

48. Ягафарова Г.Г., Сювякоео З.ф. Метод защиты от биогенной корро-1 зии нефтепромыслового оборудования // Современные проблемы

буровой в нефтепромысловой механики: Межвуз, об. науч. тр. ЭТИ. - Уфа, 1992. - С, 42-45. 49 Ягафарова Г.Г., Хлаотлив Р.Н. Ликвидация токсических соедгнеяи2 . в почве и воде // Нефтедобыча, нефтепереработка, нефтехимия и

■ катализ: Материалы I съезда химиков, нефтехимиков, нефтепереработчиков и работвиков промышленности стройматериалов республики Башкортостан. - Уфа, 1992. - С. 131-138.

50. Каримов М.ф,, Датщова А.Г., Ягафарова Г.Г. О биологическом разложении ьеиовогещшх поверхностно-активных веществ в термохимических условиях подавших хранилищ гага // Прикл. бпохям. и микробиол, > 1992. - Т. 28. - Вып. 3.— С. 371-374. 51.. Ягафарова Г.Г., Зиновьев А.П., Рагулин В.В, Методика определения содержания ДЭГ в грунте и воде и поиск микроорганизмов его разлагающих // Деп. ШНЩ. - 10.01,93. - К 89. - ЭД-93.

52. Ягафарова г,Г. Поиск мвкрооргавизмов для обезвреживания почвы ; и еоды от токсичных соединений//Деп. ШШТИ. - 6.04.93. -

# 10 _ Л1-93.

53. Ягафврова Г.Г., Зиновьев А.П. Микробиолога чес кий способ ликвидации нефтяных загрязнений в почве и воде // Информационна листок, Пермский центр науч.-техн. информ. 1993. - м 305-93.

С0:1скатс-ль . ■ Г.Г.ЖА'Ж'ОЗЛ